MX2008015904A - Inhibidores de akt (proteina cinasa b). - Google Patents

Abstract

4-[5-(2-amino-etansulfonil)-isoquinolin-7-il]-fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, como inhibidores de AKt, que son agentes antineoplásticos y/o antivirales, así como también a composiciones que comprende estos compuestos y a métodos para usar estos compuestos.

Description

INHIBIDORES DE AKT (PROTEÍNA CINASA B) La presente invención proporciona compuestos que son inhibidores de Akt, composiciones que comprenden estos compuestos, y métodos para usar estos compuestos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las proteínas cinasas están involucradas en las trayectorias de transduccion de señal que enlazan factores de crecimiento, hormonas y otras moléculas de regulación celular al crecimiento celular, supervivencia y metabolismo bajo condiciones tanto patológicas como normales. Una de tales proteínas cinasas, la proteína cinasa B (también conocida como Akt), es una serina/treonina cinasa que juega un papel central en la promoción de proliferación y supervivencia de un amplio intervalo de tipos celulares, con ello, protegiendo las células de apoptosis (muerte celular programada) . Un número de proteínas cinasas y fosfatasas regulan la actividad de Akt. Por ejemplo, la activación de Akt es mediada por 3-cinasa fosfatidilinositol (PI3-K), la cual inicia el enlace de segundos fosfolípidos mensajeros al dominio de enlace de homología de pleckstrinas (PH) de Akt. El enlace ancla Akt a la membrana plasmática y resulta en la fosforilación y activación de la enzima. Las amplificaciones de la subunidad catalítica de la PI3-K, pllO , o mutaciones en la subunidad regulatoria PI3-K, p85a, conducen a la activación de Akt en varios tipos de cáncer humanos. Estudios recientes también han demostrado la función de la trayectoria de PI3-K/AKT en el ciclo de vida de numerosos virus. El documento WO 01/91754, pertenece a inhibidores de proteina cinasa. El documento WO 2005/011697, involucra inhibidores de proteina cinasa A y B. El documento WO 2005/054202, pertenece a inhibidores de AKT. Debido a su función fundamental en la regulación de la supervivencia celular, la Akt proporciona un nuevo objetivo terapéutico para el tratamiento efectivo de varios trastornos, particularmente cáncer e infecciones virales. Sin embargo, tal tratamiento requiere el desarrollo de inhibidores potentes, selectivos, biodisponibles , de Akt. Existe una necesidad de inhibidores de Akt alternativos. De este modo, la presente invención proporciona nuevos inhibidores de Akt que exhiben potencia, selectividad y/o biodisponibilidad incrementada, composiciones que comprenden estos compuestos, y métodos para usar estos compuestos. Adicionalmente, las composiciones farmacéuticas que contienen nuevos inhibidores de Akt cuando se diluyen o están en solución, necesariamente deben estar libres de precipitación para ser suministradas a un paciente. La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden nuevos inhibidores de Akt a intervalos de pH particulares que carecen de tal precipitación.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, o un hidrato del compuesto o la sal del mismo. La presente invención también proporciona diclorhidrato de 4- [5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il]-fenol. La presente invención además, proporciona semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol . La presente invención también proporciona 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [ 5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol, para uso como un medicamento. Adicionalmente, la presente invención proporciona el uso de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye, diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol, para la manufactura de un medicamento para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma, neuroblastoma, melanoma o neoplasmas de la próstata, mama, ovarios, estómago primario, tipo intestinal, endometrio, tiroides, páncreas, pulmón o vej iga . La presente invención también proporciona el uso de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4-[5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol , para la manufactura de un medicamento para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma o neoplasmas de la próstata, mama u ovarios. La presente invención adicionalmente proporciona el uso de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol , para la manufactura de un medicamento para tratar cáncer de pulmón de células no pequeñas o glioblastoma. La presente invención además proporciona el uso de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4-[5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol, para la manufactura de un medicamento para tratar hepatitis C, rubéola, virus de inmunodeficiencia humana (VIH) , hepatitis B, o citomegalovirus humano (HCMV) . Adicionalmente, la presente invención proporciona 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol, para el tratamiento de mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma, neuroblastoma, melanoma o neoplasmas de la próstata, mama, ovarios, estómago primario, tipo intestinal, endometrio, tiroides, páncreas, pulmón o vejiga. La presente invención también proporciona 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-5 il] -fenol, para el tratamiento de mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma o neoplasmas de la próstata, mama u ovarios. La presente invención adicionalmente proporciona 4-[5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4-[5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol, para el tratamiento de cáncer de pulmón de células no pequeñas o glioblastoma. La presente invención además proporciona 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol, para el tratamiento de hepatitis C, rubéola, virus de inmunodeficiencia humana (VIH) , hepatitis B, o citomegalovirus humano (HCMV) . La presente invención adicionalmente proporciona un método para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma, neuroblastoma, melanoma o neoplasmas de la próstata, mama, ovarios, estómago primario, tipo intestinal, endometrio, tiroides, páncreas, pulmón o vejiga, en un paciente en necesidad del mismo, que comprende administrar una cantidad efectiva de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-10 etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol . La presente invención también proporciona un método para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma o neoplasmas de la próstata, mama u ovarios, en un paciente en necesidad del mismo, que comprende administrar una cantidad efectiva de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol . La presente invención adicionalmente proporciona un método para tratar cáncer de pulmón de células no pequeñas o glioblastoma, en un paciente en necesidad del mismo, que comprende administrar una cantidad efectiva de 4- [ 5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-ii] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol . La presente invención además proporciona un método para tratar hepatitis C, rubéola, virus de inmunodeficiencia humana (VIH) , hepatitis B o citomegalovirus humano (HCMV) , en un paciente en necesidad del mismo, que comprende administrar una cantidad efectiva de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol . La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende 4- [ 5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol, y un portador diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. La presente invención adicionalmente proporciona una composición farmacéutica liofilizada que comprende 4- [5-(2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, en donde el pH de dicha composición cuando se diluye con diluyente acuoso, es menos de 4.2 y mayor de 2.0, menos de 3.2 y mayor de 2.0, o menos de 2.8 y mayor de 2.0. La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo, que incluye diclorhidrato de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable en solución, en donde el pH de dicha composición es menos de 4.2 y mayor de 2.0, menos de 3.2 y mayor de 2.0, o menos de 2.8 y mayor de 2.0. La presente invención además proporciona semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol en forma cristalina, que tiene un patrón de difracción en polvo de rayos-X, con picos intensos 5 a 2T = 4.9, 14.8 y 10.2. La presente invención también proporciona 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o hidrato del mismo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los compuestos de la presente invención son inhibidores de Akt y se cree, son empleados en el tratamiento de trastornos relacionados con la actividad de Akt. De este modo, los compuestos de la presente invención son agentes antineoplásicos y/o antivirales. Los compuestos de la presente invención son empleados para el tratamiento de neoplasmas que exhiben defectos en PTEN, neoplasmas con actividad Pl3-cinasa desregulada, o neoplasmas que exhiben actividad Akt elevada. Los inhibidores de Akt se cree, son empleados en el tratamiento de mieloma múltiple (Hsu et al., Blood (2001) 98(9) 2853-2855); cáncer de pulmón de células no pequeñas (Balsara, Carcinogenesis (2004) 25(11) 2053-2059); glioblastoma (Koul, et al., Mol. Cáncer Ther. (2006) 5: 637-25 644); neuroblastoma (Li, et al., Cáncer Res. (2005) 65(6), 2070-2075); melanoma (Dai, et al., J. of Clin. Oncology (2005) 23(7), 1473-1482) y neoplasmas de la próstata (Majumder, et al., Oncogene (2005) 24, 7465-7474); mama (Tokunaga, et al., J. of Clin. Oncology ( eeting Abstracts) (2005) 23(16S), 9500); ovarios (Cheung, et al., PNAS (1992) 89, 9267-9271; Yuan et al. (2000); Hu et al. (2000)); estómago primario o tipo intestinal (Ang, et al., Cáncer Lett. (2005) 225(1), 53-59); endometrio (Jin, et al., British J. of Cáncer (2004) 91 1808-1812); tiroides (Ringel, et al., Cáncer Res. (2001) 61(16), 6105-6111; De Vita, et al., Cáncer Res. (2000) 60, 3916-3920); páncreas (Schliemen, et al., Brit. J. of Cáncer (2003) 89, 2110-2115); pulmón (Massion, et al., Am. J. Resp. Crit. Care Med. (2004) 170, 1088-1094); o vejiga (Rieger-Christ, et al., Oncogene (2004) 23(27), 4745-4753). Los inhibidores de Akt, también se cree, son empleados en el tratamiento de virus tales como hepatitis C y NS4A de la hepatitis C (Mannova, et al., J. Virol. (2005) 79(14), 8742-8749; He et al. (2002)); rubéola (Cooray, et al., Virology J. (2005) 2(1), 1-12); proteina Tat del virus de inmunodeficiencia humana (VIH) (Borgatti et al. (1997)); Proteina X de la hepatitis B (Lee et al. (2001)), o citomegalovirus humano (HCMV) (Johnson et al. (2001)). El 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol forma sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables con, por ejemplo, las sales fisiológicamente aceptables las cuales son a menudo usadas en la química farmacéutica. Tales sales también son parte de esta invención. Las sales farmacéuticamente aceptables y metodología común para prepararlas, son bien conocidas en la técnica. Véase por ejemplo, P. Stahl, et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, (VCHA/Wiley-VCH, 2002); S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66, No. 1, Enero 1977. Las sales preferibles de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol incluyen, el monoclorhidrato y el diclorhidrato. Los intermediarios descritos en este documento pueden formar sales. Además de las sales, los compuestos de la presente invención y los intermediarios descritos en este documento, pueden formar un hidrato o un hidrato de la sal farmacéuticamente aceptable. Un compuesto preferible es 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol . Aún otro compuesto preferible es el diclorhidrato de 4- [ 5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol . Un compuesto más preferible es semihidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol . Como se usa en este documento, el término "paciente", se refiere a un mamífero que es afligido con uno o más trastornos asociados con actividad Akt elevada. Se entenderá que la mayoría de los pacientes preferidos son un humano. También se entiende que esta invención se refiere específicamente a la inhibición del mamífero Akt/PKB. Los términos "tratamiento", "tratar", "tratando", y similares, son significados que incluyen efectos tales como disminución y/o inhibición del crecimiento de neoplasmas, amplificación y/o sobreexpresión de Aktl, Akt2 y/o Akt3, proliferación y supervivencia celular, y/o replicación viral.

Como se usa en este documento, el término "cantidad efectiva", se refiere a una cantidad que inhibe Akt a una extensión que proporciona un efecto farmacológico. La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, o hidrato del mismo, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención incluyen formas antes de la dilución, tales como una forma liofilizada, y formas subsecuentes a la dilución, tales como una forma lista para administración a un paciente. El pH de estas composiciones farmacéuticas es de menos de aproximadamente 4.2 a más de aproximadamente 2.0. Más preferiblemente, el pH es de menos de aproximadamente 3.2 a más de aproximadamente 2.0. El pH más preferible es de menos de aproximadamente 2.8 a más de aproximadamente 2.0. Un "portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable", es un medio en general, aceptado en la técnica para el suministro de agentes biológicamente activos a pacientes, por ejemplo, mamíferos, preferiblemente humanos. Tales portadores, diluyentes o excipientes son en general, formulados de conformidad con un número de factores también dentro de la revisión de aquellos de habilidad ordinaria en la técnica, para determinar y considerarlos. Estos incluyen sin limitación: el tipo y naturaleza del agente activo a ser formulado; el sujeto al cual la composición que contiene el agente es administrada; la ruta propuesta de administración de la composición; y la indicación terapéutica a ser dirigida. Los portadores y excipientes farmacéuticamente aceptables incluyen, tanto medio líquido acuoso como no acuoso, así como también una variedad de formas de dosificación sólidas, y semi-sólidas . Tales portadores, diluyentes o excipientes, pueden incluir un número de diferentes ingredientes y aditivos además del agente activo, tales ingredientes adicionales están incluidos en la formulación por una variedad de razones, por ejemplo, estabilización del agente activo, bien conocido por aquellos de habilidad en la técnica. Descripciones de portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente adecuados, y factores involucrados en su selección, se encuentran en una variedad de fuentes fácilmente disponibles. Véase por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (A.

Gennaro, et al., eds . , 19a ed., Mack Publishing Co., 1995). Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados sistémicamente, tal como intravenosamente (por ejemplo, por bolo o infusión) , en formulaciones de unidad de dosificación de composiciones farmacéuticas que contienen portadores, diluyentes o excipientes no tóxicos farmacéuticamente aceptables, convencionales. Para composiciones farmacéuticas de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol, el ingrediente activo estará ordinariamente presente en una cantidad de aproximadamente 0.5 a 95% en peso, basada en el peso total de la composición. Pueden ser aplicados revestimientos apropiados para incrementar la aceptabilidad o retardar la adsorción . Las cantidades terapéuticamente efectivas de los compuestos de la invención para tratar los trastornos descritos en este documento en un paciente, se pueden determinar en una variedad de formas conocidas por aquellos de habilidad en la técnica. Se debe entender, sin embargo, que los niveles de dosis específicos para cualquier paciente particular, dependerán de una variedad de factores que incluyen, la actividad del compuesto específico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, ruta de administración y velocidad de excreción, combinación de fármaco y severidad de la enfermedad particular. La frecuencia de la dosis también se puede variar dependiendo del compuesto usado y la enfermedad particular tratada. Por ejemplo, una dosis diaria típica puede contener desde aproximadamente 1 mg hasta 1 g del ingrediente activo. Los compuestos de esta invención pueden ser preparados empleando la información proporcionada en este documento, además de otras manipulaciones estándares que se conocen en la literatura o ejemplifican en los procedimientos experimentales. Los términos y abreviaturas usadas en este documento, tienen sus significados normales a menos que se designe de otro modo. Por ejemplo, "LC", se refiere a cromatografía líquida; "dppb" se refiere a bis (difenilfosfino) butano; Pd(OAc)2 se refiere a acetato de paladio; "DMF" se refiere a N, -dimetilformamida; "DMSO" se refiere a dimetilsulfóxido; "Et20" se refiere a éster dietílico; "EtOAc" se refiere a acetato de etilo; "TFA" se refiere a ácido trifluoroacético; MeOH se refiere a metanol.

PREPARACIONES Preparación 1 Diclorhidrato de 2- [7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sulfonil] -etilamina Se trató una suspensión de éster ter-butílico del ácido {2- [7- (4-metoxi-fenil) -isoquinolin-5-sulfonil ] -etil}-carbámico (11.0 g, 24.85 mmol) en MeOH anhidro (150 mi) con HCl 4N en dioxano (350 ml) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche, después se concentró in vacuo a un volumen 1/2 y se trató con exceso de EtOAc, ocasionando que precipitara un sólido amarillo. El sólido resultante se recuperó por filtración a vacio bajo una atmósfera de N2; se lavó con EtOAc y se secó bajo vacio (bajo una atmósfera de N2) , para proporcionar el compuesto del 15 titulo (10.23 g, 99% de rendimiento) como un sólido amarillo: EM (ER) : m/z 343.0 (M++H) .

Preparación 2 Ácido 7-bromo-isoquinolin-5-sulfónico Se agregó H2S04 humeante (2,000 ml, 21.33 mol; 25-29.5% de S03 libre) , a un matraz de fondo redondo de 5-1, equipado con un agitador mecánico, condensador a reflujo, linea de N2, y termómetro. Se enfrió el H2SO4 humeante a ~10°C con un baño de hielo/acetona, después se agregó HCl de 7-25 bromoisoquinolina (500.00 g, 2.04 mol) en forma de porciones, manteniendo la temperatura de la mezcla de reacción por debajo de ~15-20°C. Después de la adición completa de HCl de 7-bromoisoquinolina, la mezcla de reacción resultante se calentó a ~100°C durante la noche. La mezcla de reacción se 5 enfrió a temperatura ambiente, después, se vertió lentamente en una solución agitada de H20 helada. Lo precipitado resultante se recuperó por filtración a vacío, lavando con H20, después Et20, y se secó bajo filtración a vacío, seguido por secado en un horno de secado bajo presión reducida a ~35°C, para proporcionar el compuesto del título (501.42 g, 85% de rendimiento), como un sólido blancuzco; TOF-EM [ER+; m/z] 287.9331/287.9330.

Preparación 3 Ácido 7- (4- (metoxi-fenil) -isoquinolin-5-sulfónico Se trató una solución de ácido 7-bromo-isoquinolin-5-sulfónico (150.00 g, 0.520 mol) y ácido 4-metoxifenilborónico (90.87 g, 0.598 mol) en DMF (1, 400 mi) y eOH (375 mi) con Na2CC>3 acuoso 2M (652 mi) . La suspensión resultante 3X de desoxigenó con N2, después se agregó Pd(PAc)2 (2.33 g, 0.0104 mol) y dppb (5.54 g, 0.0130 mol). La mezcla de reacción resultante se calentó a ~70°C por 3 horas, después se dejó enfriar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con H20 (4,000 mi) y el pH se ajustó a ~pH 2 con HC1 acuoso 5N. La suspensión resultante se dejó agitar a temperatura ambiente por 30 minutos, después, el sólido marrón se recuperó por filtración a vacío, se lavó con H20, y se secó bajo filtración a vacío. El sólido marrón se disolvió en DMF (1,000 mi) y Na2C03 acuoso 2M (650 mi) y la solución resultante se filtró a través de una almohadilla de Celite®, se lavó con DMF (400 ml)/H20 (400 mi). Lo filtrado se trató con HCl acuoso 5N para ajustar el pH a ~pH 2. Dejando la suspensión resultante agitar a temperatura ambiente por 30 minutos, entonces el sólido se recuperó por filtración a vacio, lavando con H20 y secando bajo filtración a vacio durante la noche. El sólido se disolvió en DMF (1,000 mi) y a2C03 acuoso 2M (1,000 mi) nuevamente, y la solución resultante se trató con Celite® para crear una suspensión. La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente por 30 minutos, después se filtró a través de una almohadilla de Celite®, se lavó con H20. Lo filtrado se trató con HCl acuoso 5N para ajustar el pH a ~pH 2. La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente por 30 minutos, después el sólido se recuperó por filtración a vacio, se lavó con H20 y se secó bajo filtración a vacio durante la noche. El sólido se trituró, después se lavó con EtOAc, se secó bajo filtración a vacio durante la noche, seguido por secado en un horno de secado bajo presión reducida a ~35°C, para proporcionar el compuesto del titulo (136.79 g, 83% de rendimiento) como un sólido amarillo: TOF-EM [ER+; m/z] 316.0624/316.0643. Anal. Caled. Para Ci6Hi3N04S: C 60.94; H 4.15; N 4.44; S 10.16. Encontrado C 60.76; H 5 4.13; N 4.50; S 9.90.

Preparación 4 Cloruro de 7- ( -metoxi-fenil) -isoquinolin-5-sulfonilo A una suspensión de ácido 7- (4-metoxi-fenil) -10 isoquinolin-5-sulfónico (12.13 g, 38.5 mmol) en 1,2-dicloroetanol (200 mi) y DMF (2.99 mi, 38.5 mmol), se agregó cloruro de oxalilo (26.8 mi, 308 mmol) por goteo. La suspensión se agitó mecánicamente bajo atmósfera de nitrógeno mientras se calentaba a 60-65°C por 4 horas. La suspensión se 15 enfrió a -10°C. Se esperó por 30 minutos, después se filtró. El sólido amarillo se lavó con éter/diclorometano al 20% y se secó bajo una atmósfera de nitrógeno, proporcionando el compuesto del titulo (14.8 g) como un polvo amarillo.

Preparación 5 Sal sódica de 7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-tiol A. Una suspensión de cloruro de 7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sulfonilo (4.0 g, 12 mmol) en dioxano (40 mi), se agregó clorhidrato de tricarboxi etil fosfina (13.73 g, 48 25 mmol) y agua (10 mi). La mezcla se calentó a 100°C y se agitó por 3 horas. La mezcla se enfrió en un baño helado y se agregó NaOH (5N, 60 mi), lentamente vía una pipeta. Se filtró y secó en aire lo precipitado amarillo pálido para proporcionar el compuesto del titulo (3.2 g, 95%). Espectro de masas (CLEM) m/z = 266.2 (M-Na+) . Alternativamente, el compuesto del titulo puede ser elaborado como sigue: B. (i) Se desoxigenó la solución de ácido 7- ( 4-metoxi-fenil) -isoquinolin-5-sulfónico (100.00 g, 0.317 mol) en tolueno anhidro (2,500 mi) 3X con N2, después se trató con Ph3P (332.58 g, 1.268 mol), l2 (80.46, 0.317 mol) y Bu3N (152.00 mi, 0.638 mol). La mezcla de reacción resultante se dejó a reflujo por 1 hora bajo N2, después se enfrió a temperatura ambiente durante la noche, mientras se soplaba aire en la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se trató con una solución acuosa de NaOH 1N (500 mi), después la mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche, mientras se soplaba aire en la mezcla de reacción. Lo precipitado bronceado resultante se recuperó por filtración a vacio. Se lavó con una solución 1/1 de THF/Et20, después se secó bajo filtración a vacío para proporcionar bis- (7- ( -metoxi-fenil ) -isoquinolin-5- ) -disulfuro (72.50 g, 86% de rendimiento) como un sólido ligeramente bronceado: H RMN (400 Hz, DMSO) d 9.39 (s, 2H) , 8.51 (d, 2H) , 8.41 (s, 2H) , 8.11 (d, 2H) , 8.00 (d, 2H) , 7.53 (d, 4H) , 6.94 (d, 4H) , 3.78 (s, 6H) . B. (ii) Una suspensión de bis- (7- (4-metoxi-fenil) -isoquinolin-5) -disulfuro, se trató en THF anhidro (850 mi) con NaBH4 (2.84 g, 75.05 mmol) . La mezcla de reacción resultante se calentó a ~35°C bajo N2 por ~1 hora, después se calentó a ~45°C bajo N2 por 1 hora.

Preparación 6 Sulfinato de 7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sódico A cloruro de 7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sulfinilo (1.48 g, 4 mmol) en agua (10 mi), se agregó Na2SC>3 (1.01 g, 8 mmol) y NaHC03 (1.01 g, 12 mmol). La mezcla se calentó a 100°C y se agitó por 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y el agua se removió bajo presión reducida. Se agregó metanol (40 mi) al residuo, se agitó por 10 minutos. El sólido blanco se filtró, lavó con metanol y lo filtrado se combinó. Se concentró para dar el compuesto del titulo (1.1 g) .

Preparación 7 (3, 5-dicloro-benciliden) - (2, 2-dietoxi-etil ) amina La 2, 2-dietoxi-etilamina (1852.5 g; 1.00 equivalentes; 13.63 moles), 3 , 5-dicloro-benzaldehído (2453 g; 1.00 equivalentes; 13.60 moles) y tolueno (12 1), se cargaron en un matraz de 22 1 equipado con una trampa Dean Stark, condensador, entrada de nitrógeno, agitador de cabeza y termopar. La reacción amarillo ligero se calentó a reflujo. El solvente comenzó a destilar a 88°C. Se colectó un total de ~650 mi de destilado (~240 mi de agua) . La temperatura se 5 incrementó a 11 °C durante la destilación. La RMN después de 2 horas a reflujo, mostró el producto. El calor se excluyó después de 2.5 horas. La solución es filtrada por gravedad en un garrafón a través de un papel filtro acanalado para remover algunos particulados (que incluyen una pequeña sección de tubo de vidrio, la cual es más probable de 3,5-dicloro-benzaldehido) . La solución filtrada es concentrada usando un matraz Buchi con el baño de agua fijo a 45°C. Una vez que el solvente se detiene de entrar, la temperatura se incrementa a 70°C con llenado a vacio y se mantiene por ~1.5 horas para remover cualquier tolueno residual. El peso de (3, 5-dicloro-bencilideno) - (2, 2-dietoxi-etil ) -amina es 4059.3 g (102.9% de teoría). Espectro de Masas (CLEM) m/z = 291.2) (M+H+) .

Preparación 8 Clorhidrato de 5, 7-dicloro-isoquinolina Se cargó ácido tríflico (2.97 1; 33.52 moles; 5.03 kg) a un matraz de 12 1 equipado con una trampa Dean Stark, agitador de cabeza, condensador, entrada de nitrógeno, embudo de adición de 3 1 (amortiguado del matraz vía un condensador) y termopar. El ácido tríflico es calentado a 120°C. Se diluyó (3, 5-dicloro-bencilideno) - (2, 2-dietoxi-etil) -amina (1350.5; 1.00 equivalentes; 4.65 moles) con diclorometano (1350 mi), y se carga al embudo de adición. Se inicia la adición con la temperatura a 119°C. La adición se completa durante 90 minutos manteniendo la temperatura a 120°C. Aproximadamente, se colectan 1500 mi del destilado durante la adición. El % de área de CLAR 45 minutos después de la adición se completa e indica 94.14% del producto y 4.86% (3, 5-dicloro-bencilideno) -10 (2, 2-dietoxi-etil) -amina . El calor se excluyó después de 1.5 horas. La reacción se enfrió a ~80°C. En este punto, el matraz es colocado en un baño de agua helada y se enfria adicionalmente . Se agregó metanol (2.7 1) con la reacción a 9°C. La adición se completó durante 60 minutos. La temperatura máxima es 27 °C. Se forma algún sólido durante la adición de metanol. La suspensión es transferida en porciones a un embudo de adición de 2 1 y se agrega a una solución de hidróxido de amonio (5.1 1; 36.67 moles; 4.59 kg) y agua (5.1 1) en un matraz de 22 1, enfriado en agua helada a <2°C. El embudo de adición tiene una extensión de tubo de Teflon® para prevenir que el material corra hacia abajo del lado del matraz, lo cual puede conducir a un sólido más aceitoso que se adhiere a la pared del matraz. El material se agrega en pequeños sedimentos para prevenir que el embudo de adición se tapa debido a los sólidos. La adición se completa durante minutos que incluyen, un enjuague de metanol (900 mi) del matraz y embudo de adición. La temperatura máxima es 26°C. Se forma un sólido marrón. La suspensión se enfria a 14°C. El sólido se filtra en una almohadilla de polipropileno. El sólido se lava con 2 x 4 1 y l x 2 1 de agua. El sólido entonces se lava con 2 1 de heptano para ayudar al secado. El sólido se seca in vacuo a 50°C a un peso de 999.0 g (108.4% de teoría). Se carga la 5, 7-dicloro-isoquinolina (997 g; 1.00 equivalentes; 5.03 moles) y metanol (14.97 1) a un matraz de 22 1 equipado con un embudo de adición, entrada de nitrógeno, agitador de cabeza y termopar. La suspensión marrón se agita a temperatura ambiente (22°C) . El cloruro de acetilo (1180 mi; 16.58 moles; 1.30 kg) se carga al embudo de adición. Esto se agrega al matraz por goteo. La suspensión marrón se oscurece. El sólido parece disolverse principalmente agregando 100-200 mi del cloruro de acetilo. No se forma una solución completa. El sólido reaparece conforme la adición continua. La adición se completa durante 45 minutos. La temperatura máxima es 43°C, la cual se alcanza aproximadamente en forma media en la adición y se mantiene con agua fría en el baño. Se remueve una muestra de la reacción después que se agregan ~3/4 de cloruro de acetilo por RMN. Puesto que la muestra parece ser la sal, el exceso de cloruro de acetilo probablemente no se necesita. La suspensión se agita y se deja enfriar. Después de 40 minutos, la temperatura es de 30°C. La suspensión se enfría a <2°C y se mantiene por 1.5 horas en un baño de agua helada. La suspensión se filtra. El sólido se lava con 2 x 1.3 1 de metanol enfriado. El peso de la pasta húmeda es 811.4 g. El sólido se seca in vacuo a 50°C. El peso seco es 648.4 g. Esto representa un rendimiento de 61.0%. Espectro de masas (CLEM) m/z = 199.05) (M+H+) .

Preparación 9 Ester ter-butilico del ácido [2- (7-cloro-isoquinolin-5-ilsulfanil) -etil] carbámico Se cargó carbonato de potasio (1952 g; 14.12 moles), con un matraz de 22 1 equipado con agitador de cabeza, embudo de adición, entrada de nitrógeno y termopar. Se agrega dimetilformamida (4 1) . Se agrega clorhidrato de 5, 7-dicloro-isoquinolina (646.1 g; 1.00 equivalentes; 2.76 moles) en porciones, y junto con DMF (330 mi) . Se disuelve Boc-Cisteamina (514 g; 1.05 equivalentes; 2.90 moles) en dimetilformamida (1520 mi) y se carga al embudo de adición. La mezcla se calienta a 60°C. Se purga nitrógeno a través del espacio de cabeza por 15 minutos mientras la mezcla se calienta. La solución de Boc-Cisteamina se agrega durante 2 horas y 15 minutos a 60°C. La CLAR 1 hora y 20 minutos después de adición, indica 28.1% de material de partida, 67.26% de producto, 4.22% de isómero y 0.25% de bis. La reacción se calienta a 75°C. Los datos de CLAR en la Tabla A se colectan a 75°C.

Tiempo a % de HC1 de % de éster % de % bis- 75°C 5, 7-dicloro- ter-butilico isómero sustituido isoquinolina del ácido [2- (7-cloro- isoquinolin- 5- ilsulfanil) - etil] - carbámico 30 2.75 90.27 5.54 1.44 minutos 1 hora 0.93 91.39 5.52 2.16 1.5 horas 0.20 91.25 5.32 3.23 Tabla A. Datos de CLAR de la reacción, para la preparación de 15 éster ter-butilico del ácido [2- (7-cloro-isoquinolin-5-ilsulfañil ) -etil ] -carbámico .

Después de 1.5 horas, el manto se reemplazó con un baño enfriante. La reacción se enfrió a 20-25°C. El sólido se filtró y se lavó con DMF (2 x 810 mi) . La solución DMF se diluyó con MTBE (5.15 1) y LiCl al 5% (5.15 1). Después de la agitación en un matraz de salida en el fondo de 50 1, las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con MTBE (2.9 1). Las capas de MTBE se combinaron y lavaron con LiCl al 5% (2 x 2.9 1). La capa de MTBE se filtró por gravedad a través de un papel acanalado y se concentró usando un matraz Buchi con el baño de agua puesto a 35°C para dar 892.7 g (95.6% del teórico, no corregido) de éster ter-butilico del ácido [2- (7-cloro-isoquinolin-5-ilsulfanil) -etil] -carbámico. Espectro de Masa (CLEM) m/z 339.85 ) (M+H+) .

Preparación 10 Éster ter-butilico del ácido [2- (7-cloro-isoquinolin-5-sulfonil) -etil] -carbámico Se disolvió el éster ter-butilico del ácido [2-(7-cloro-isoquinolin-5-ilsulfanil ) -etil] -carbámico (700 g; 1.00 equiv; 2.07 moles) en alcohol isopropilico (10.53 1) por rotación en matraz Buchi con el baño de agua puesto a 50°C. Se cargaron mequinol (12.29 g; 98.01 mmoles; 12.29 g) , tungstato dihidrato de sodio (31.4 g; 95.20 mmoles), la solución de éster ter-butilico del ácido [2-(7-cloro-isoquinolin-5-ilsulfanil ) -etil ] -carbámico, alcohol isopropilico (2.77 1), agua (3.38 1) y ácido acético (123 mi; 2.15 moles; 128.90 g) en un matraz de 22 1 equipado con un condensador, entrada de nitrógeno, agitador de cabeza, embudo de adición y termopar. La adición de agua causa que la solución marrón llegue a ser ligeramente lechosa espesa. La reacción se calentó a 50°C usando un baño de agua caliente. Se agregó peróxido de hidrógeno (607 mi; 5.94 moles; 673.77 g) durante 1 hora. Durante la adición, la temperatura se mantiene a 50-55°C para la evaluación de adición de peróxido de hidrógeno y se agrega agua fría o caliente al baño como se necesite. La reacción es aún marrón lechosa. La temperatura de reacción es 54°C al final de la adición y se mantiene a 53-57°C usando el baño de agua caliente. La CLAR 10 minutos después de la adición indicó pico de 24.69% a 2.89 minutos, 65.57% del producto, 5.03% de isómero, 4.33% de bis, y 0.18% de pico en 3.05 minutos. La CLAR 2 horas después de la adición indicó 0.06% de sulfóxido, 1.27% de pico en 3.046 10 minutos, 88.10% del producto, 4.61% de isómero y 5.79% de bis. El baño se drenó y se reemplazó con agua helada para enfriar la reacción. Cuando la temperatura de reacción alcanzó 72°C, el peróxido se apagó agregando solución de bisulfito de sodio al 9% (250 mi) . No se observó incremento en temperatura. Tiras de prueba de peróxido y papel de yoduro de almidón no indicaron restos de peróxido. Se agregó agua (5.64 1) durante 15-20 minutos. La temperatura se incrementó de 18 a 24°C durante la adición. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La suspensión se enfrió en un baño de agua fría a <5°C y mantenida. La CLAR cuantitativa del sobrenadante durante un tiempo, indicó gue la cristalización se completó después de 1.5 horas a <5°C. El sólido se filtró y se lavó con agua (2 x 2 1). El peso de la pasta húmeda fue 831 g. El sólido se secó in vacuo a 50°C. El peso del éster ter-butilico del ácido [2-(7-cloro-isoquinolin-5-sulfonil ) -etil ] -carbámico es 531 g (69.31% de teoría, no corregida). Espectro de Masa (EXCL.) m/z 371.85) (M+H+) .

Preparación 11 Éster ter-butilico del ácido [2-{7- [4- ( tetrahidro-piran-2-iloxi) -fenil] -isoquinolin-5-sulfonil } -etil ) -carbámico El reactor de 60 1 se cargó con PEPPSI™ (Estabilización e Iniciación de la Preparación de Precatalizador Mejorado con Piridina; 51.0 g; 74.9 mmoles), éster ter-butilico del ácido [2- (7-cloro-isoquinolin-5-sulfonil) -etil] -carbámico (1.383 kg; 3.729 moles), ácido fenil borónico (895 g; 4.03 moles), K2C03 (1.039 kg; 7.518 moles) y etanol (15 1) bajo una purga de nitrógeno. Inicialmente se agregaron 12 1 de etanol al reactor y los 3 1 restantes se usaron para enjuagar las otras cargas. La reacción se calentó a reflujo (78°C) . La CLAR indicó una reacción completa después de 1/2 hora. La reacción se enfrió a 59°C usando el circulador Huber®. Se agregó agua (8.7 1) a la reacción durante 18 minutos. La temperatura disminuyó de 59°C a 42°C durante la adición de agua. La reacción se enfrió usando el circulador Huber® de 42°C a 0°C durante 1 hora. La suspensión se mantuvo a 0°C por 1 hora. El sólido se filtró usando una almohadilla de polipropileno y se lavó con 1:1 etanol:agua (3.7 1, helada). El sólido se secó en el filtro durante la noche. El sólido después se secó in vacuo a 60°C por 22 horas. El peso seco del sólido es 2.171 kg. El nivel de Pd en el éster ter-butílico del ácido (2-{7-[4-(tetrahidro-piran-2-iloxi) -fenil] -isoquinolin-5-sulfonil } -5 etil) -carbámico es 2196 mcg/g y ei sólido contiene 6.9% de agua por F . Se cargó un matraz de salida en el fondo de 50 L con diclorometano (4 1) . El éster ter-butílico del ácido (2-{ 7- [4- (tetrahidro-piran-2-iloxi) -fenil] -isoquinolin-5-sulfonil } -etil ) -carbámico crudo, se cargó al matraz de 50 1 y se enjuagó en diclorometano (1 1). Se cargó Na2S0 (1.9 kg) y se enjuagó con diclorometano (0.1 1). Se cargó Darco G-60® (3.8 kg) a un matraz Büchi de 20 1 y se formó en suspensión en diclorometano (12 1). Esta suspensión es transferida al matraz de 50 1 y enjuagada con diclorometano (4.9 1). La mezcla se agitó por 2 horas a temperatura ambiental. Se ajustó un filtro de acero inoxidable de 50 cm con una tapa de polipropileno y se cargó con Hyflo Super Cel® (1.7 kg) . La almohadilla de Hyflo Super Cel® es enjuagada con diclorometano (2 1) . Los contenidos del matraz de 50 1, son filtrados sobre la almohadilla Hyflo Super Cel®. El matraz y la pasta de filtro son enjuagados con diclorometano (22 1) . Lo filtrado se carga al reactor de 60 1, a través de un filtro de cartucho de 0.45 micrones. Los contenidos del reactor son calentados y concentrados por destilación bajo ligero vacío (~640 mm de Hg) . Aproximadamente 33 1 del destilado se colectan durante 2 horas a 35-37°C. Se agrega etanol (10 1) . El vacío se ajusta lentamente descendentemente a 280 mm de Hg, mientras se continua la destilación. Una vez que se alcanza el vacio, la temperatura se incrementa para 5 mantener la destilación. Una vez que se alcanza el volumen en el reactor ~10 1, se agrega etanol (6.5 1) a tal relación, para mantener el volumen en un reactor mientras se destila el solvente. La destilación se detiene una vez que todo el etanol se agrega. El volumen final es ~10 1. La temperatura al final de la destilación es 56°C. La suspensión que se forma durante el intercambio de solvente, se enfria a 20°C y se mantiene durante la noche. La suspensión se filtra. El sólido se lava con etanol: agua 1:1 (1.8 1). El peso de la pasta húmeda es 1.878 kg. El sólido se seca in vacuo a 50°C para dar 1.2306 kg (64.36% de rendimiento) del éster ter-butilico del ácido (2- {7- [4- (tetrahidro-piran-2-iloxi) -fenil] -isoquinolina-5-sulfonil } -etil) -carbámico. Espectro de masas (CLEM) m/z = 513.62 (M+H) .

EJEMPLOS Ejemplo 1 Sal de diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol A. Ester ter-butílico del ácido { 2- [7- (4-metoxi-fenil) -isoquinolin-5-ilsulfanil] -etil } -carbámico A sal sódica de 7- (4-metoxi-fenil) -isoquinolin-5-tiol (0.29 g, 1 mmol) en acetona (10 mi), se agregó éster ter-butilico del ácido (2-bromo-etil) -carbámico (0.22 g, 1 mmol) y carbonato de potasio (0.14 g, 1 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 4 horas, después se cargó en una columna de gel de sílice y se levigó con acetato de etilo al 65% en hexanos, para proporcionar el compuesto del título (0.35 g, 86%). Espectro de masas (CLEM) m/z = 355.2 (M+H+) .

B. Éster ter-butílico del ácido { 2- [ 7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sulfonil] -etil ) -carbámico A una solución de éster ter-butílico del ácido {2- [7- (4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-ilsulfanil ] -etil } -carbámico (0.35 g, 0.85 mmol) en ácido acético (8 mi), se agregó agua (2 mi). La mezcla se enfrió a 0°C en un baño helado. Se agregó una solución de KMn04 (0.27 g, 1.7 mmol) en agua (2 mi) por goteo, durante un periodo de 5 minutos. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 30 minutos. Se agregó H202 (30% en agua) por goteo, hasta que desaparece el color marrón. La mezcla se dividió entre acetato de etilo (50 mi) y solución saturada de bicarbonato (40 mi). La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio, filtró y concentró. El residuo se cromatografió sobre una columna de 10 gel de sílice con acetato de etilo al 66% en hexanos, para proporcionar el compuesto del título (0.245 g) como un sólido blanco. Espectro de masas (CLEM) m/z = 433.2 (M+H+) .

C. Diclorhidrato de 4- [ 5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol A éster ter-butílico del ácido { 2- [ 7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sulfonil] -etil } -carbámico (0.22 g, 0.51 mmol) en diclorometano (10 mi), se agregó BBr3 (1.0 M en diclorometano, 3.0 mi) a -20°C. Después de la adición, la 20 mezcla de reacción se agitó a -20°C por 2 horas, se calentó lentamente a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente por 2 horas. Se agregó metanol (5 mi) para apagar el exceso de BBr3. El solvente se evaporó bajo presión reducida, y se purificó el residuo vía CLAR de fase inversa (0-100% de acetonitrilo: agua con TFA al 0.01%), para proporcionar 4-[5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol, como la sal de TFA (0.18 g) . Después, se convirtió 0.12 g de la sal de TFA a la sal de diclorhidrato agregando 2 mi de bicarbonato de sodio acuoso saturado a la sal de TFA y se agitó durante la noche para convertir la sal de TFA a la base libre. La base libre se filtró. La base libre se lavó, primero con agua, después con éter dietílico. El sólido se secó. Después, el sólido se suspendió en MeOH. Se agregó 0.2 mi de HC1 acuoso concentrado y se agitó por 1 hora. El solvente se concentró bajo presión reducida para proporcionar la sal de diclorhidrato (0.10 g) . Espectro de masas (CLEM) m/z = 329.0 (M+H+) .

Ejemplo 2 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol A éster ter-butilico del ácido { 2- [7- ( 4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sulfonil] -etil } -carbámico (25.00 g, 56.49 mmol) en diclorometano (1 1) a 0°C, se agregó BBr3. (1.0 M en diclorometano, 200 mi, 200 mmol) durante 40 minutos con agitación de cabeza vigorosa. El baño enfriante se removió y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se enfrió a 0°C y se agregó metanol (500 mi) por goteo durante 1 hora. La suspensión resultante se filtró, el matraz se enjuagó con diclorometano (100 mi) y los sólidos se lavaron con el enjuague. Los sólidos se lavaron con diclorometano adicional (150 mi) y se secaron bajo filtración a vacio. Los sólidos se formaron en suspensión en metanol (400 mi) con agitación, después se concentraron bajo vacio a una pasta delgada. Se agregó metanol adicional (400 mi) y además, se formaron en suspensión adicional con agitación. La suspensión se concentró bajo vacio a sequedad y los sólidos se secaron durante la noche bajo vacio. Los sólidos se pulverizaron a un polvo y formaron en suspensión en metanol (1 1). Se agregó resina Amberlyst® A-21 (75 g) y se agitó hasta que el polvo se disolvió. La resina se filtró, la resina filtrada se formó en suspensión en metanol (220 mi) y se filtró nuevamente la resina, combinando los filtrados. La resina filtrada se lavó con metanol (100 mi) y se agregó este lavado a los filtrados. Los filtrados se combinaron con etanol (200 mi) y la mezcla se concentró bajo vacio a un volumen de aproximadamente 200 mi para proporcionar una suspensión. Se agregó etanol caliente (400 mi) a la suspensión a 50°C por aproximadamente 15 minutos, después se concentró bajo vacio a un volumen de aproximadamente 200 mi. La suspensión se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y la pasta de filtro se enjuagó con etanol (2 x 15 mi), después se secó bajo vacio para proporcionar el compuesto del titulo (10.22 g, 55%) como un sólido marrón. Espectro de masas (CLEM) m/z = 329.0 (M+H+) .

Ejemplo 3 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenil Se enfrió una suspensión de diclorhidrato de 2- [7- (4-metoxi-fenil ) -isoquinolin-5-sulfonil ] -etilamina (9.5504 g, 5 22.99 mmol) en CH2C12 anhidro (400 mi) a ~5°C con un baño de hielo/H20, después la suspensión fría se trató con una adición por goteo de una solución 1.0 M de BBr3 en CH2C12 (92.00 mi, 92.00 mmol). Después de la adición completa de BBr3, el baño frío se removió y la mezcla de reacción resultante se dejó agitar bajo N2 a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción resultante se apagó con MeOH, después se concentró in vacuo para dar un residuo. El residuo resultante se disolvió en MeOH (200 mi) y se concentró in vacuo para dar un residuo. Lo anterior se repitió 3 veces, después el residuo se formó en suspensión en Et20 (300 mi) y se trató con NaHC03 acuoso saturado hasta que se alcanzó el ~pH 7. El sólido resultante se recuperó por filtración a vacio, después se disolvió en una solución 3/1 de CHCls/MeOH. Lo filtrado se saturó con NaCl, después se extrajo con una solución 3/1 de CHCl3/MeOH (2 x 400 mi cada una) . Los orgánicos combinados se secaron sobre gS04, filtraron, después concentraron in vacuo para dar un sólido/residuo. El sólido/residuo se formó en suspensión en una pequeña cantidad de MeOH (20 mi) y exceso de hexanos, después el sólido resultante se recuperó por filtración a vacio, lavando con hexanos y secando bajo filtración a vacio para dar (7.60 g) de un sólido ligeramente amarillo. El sólido ligeramente amarillo (7.60 g) se formó en suspensión en CH2CI2 anhidro (400 mi) y se enfrió a ~5°C con un baño de 5 hielo/H20, después se trató con una adición por goteo de una solución de BBr3 1.0 M en CH2C12 (70.00 mi, 70.00 mmol). Después de la adición completa de BBr3, el baño frío se removió y la mezcla de reacción resultante, se dejó agitar a temperatura ambiente bajo N2 por 4 horas. Se agregó una cantidad adicional de BBr3 1.0 M en CH2C12 (70.00 mi, 70 mmol) por goteo a la mezcla de reacción, después la mezcla de reacción resultante se dejó agitar a temperatura ambiente bajo N2 durante la noche. La reacción se calentó a ~40°C por ~1 hora, después se trató con una adición por goteo de BBr3 1.0 M adicional en CH2C12 (23.00 mi, 23.00 mmol) . La mezcla de reacción resultante se calentó a ~40°C por ~2 horas, después se apagó con MeOH y se concentró in vacuo para dar un residuo. El residuo resultante se disolvió en MeOH (200 mi) y se concentró in vacuo para dar un residuo amarillo. Lo anterior se repitió 3 veces. El residuo amarillo se trató con NaHC03 saturado para ajustar el pH a ~7, después el sólido resultante se recuperó por filtración a vacío. El sólido pre-absorbido en gel de sílice, entonces es semi-purificado por cromatografía en columna (ISCO 330 g de gel de sílice, CH2C12 puro a 5% de NH4/MeOH 2N en CH2C12 a 10% de NH4/MeOH 2N en CH2C12) para dar un sólido. El sólido pre-absorbido en gel de sílice, entonces es purificado nuevamente por cromatografía en columna (ISCO 330 g de gel de sílice, CH2C12 puro a 5% de NH4/MeOH 2N en CH2C12 a 10% de NH4/MeOH 2N en CH2C12) para dar un sólido. El sólido pre-absorbido en gel de sílice, entonces es purificado nuevamente por cromatografía en columna (ISCO 330 g de gel de sílice, CH2C12 puro a 5% de NH4/MeOH 2N en CH2C12 a 10% de NH4/MeOH 2N en CH2C12 a 15% de NH4/MeOH 2N en CH2C12) para dar un sólido. El sólido pre-absorbido en gel de sílice, entonces es purificado nuevamente por cromatografía en columna (ISCO 330 g de gel de sílice, CH2C12 puro a 5% de MeOH en CHC13 a 10% de MeOH en CHC13 a 20% de MeOH en CHC13 a 30% de MeOH en CHC13) para dar (6.85 g, 90.8% de rendimiento) del compuesto del título como un sólido amarillo. EM (ES+, m/z) : 329.0 (M+l) .

Ejemplo 4 Estado de hidrato desconocido, monoclorhidrato de 4-[5-(2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol Se colocó 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol (171.8 mg) en un vial, junto con 15 mi de EtOH al 95%. El vial se colocó en una placa caliente ajustada a 80°C, mientras la solución se agita para disolver el compuesto. Puesto que ocurre poca o ninguna disolución, se agrega un equivalente molar de HC1 (0.52 mi de HC1 1N en agua), para disolver el sólido y resultar en una solución amarillo brillosa. Menos de un minuto después de la adición de HC1, comienza la formación de sólidos y se incrementa con el tiempo. Después de ~2 horas a 80°C, la muestra se removió del calor y se dejó agitar durante la noche a TA. El sólido se colectó usando filtración a vacío a través de un papel filtro. Después del secado al aire durante la noche, se recuperaron 107.8 mg del compuesto del título (63% de rendimiento) . Difracción en polvo de rayos X: ángulo, 2T (% de intensidad): 11.8 (100.0); 16.6 (52.9); 8.2 (43.4) Ejemplo 5 Semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol A. Preparación de material de siembra. A una suspensión de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol (0.2509 g, 0.764 mmol) en etanol (5 mi), se agregó HC1 acuoso (1M, 0.765 mi, 0.765 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante la noche. Se enfrió a temperatura ambiente y se filtró la suspensión a vacio. Los sólidos se enjuagaron con etanol, y secaron bajo filtración a vacio para proporcionar 0.1842 g de un sólido amarillo.

B. Semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol A una suspensión de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol (1.75 g, 5.33 mmol) en etanol (35 5 mi), se agregó HC1 acuoso (1 M, 5.33 mi, 5.33 mmol). La mezcla se calentó a reflujo y se agregó agua (2.5 mi) para obtener una solución. La solución se enfrió a 60°C y se sembró con aproximadamente 2 mg del sólido amarillo obtenido de A anterior, para obtener una suspensión. Se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La suspensión se filtró a vacio y la pasta de filtro se enjuagó con etanol, después se secó bajo filtración a vacio para proporcionar 1.331 g (67%) del compuesto del titulo como un sólido amarillo. Espectro de masas (CLEM) m/z = 329.0 (M+H+) . arl Fischer: 3.00%. difracción en polvo de rayos-X: ángulo, 2T (% intensidad): 4.9 (47.3); 14.8 (55.8); 10.2 (45.5).

Ejemplo 6 Sal de diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol Se formó en suspensión 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol (16.57 g, 50.45 mmol) en metanol (500 mi) . Separadamente, se preparó una solución de HC1 en metanol agregando cloruro de acetilo (12.60 mi, 177.05 mmol) a 25 metanol (165 mi). La solución se agregó de HC1 en metanol por goteo a temperatura ambiente durante 30 minutos a la suspensión 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol en metanol. Se agitó por 30 minutos, después se agregó acetato de etilo (600 mi) por goteo durante 1 hora. Se agitó 5 por 30 minutos, después los sólidos se filtraron y lavaron con acetato de etilo (2 x 100 mi) . Los sólidos se secaron in vacuo a 50°C, después se secaron adicionalmente in vacuo a temperatura ambiente con administración lenta de nitrógeno, para proporcionar el compuesto del titulo (18.3 g, 901). 10 Espectro de masas (CLEM) m/z = 329.0 (M+H+) .

Ejemplo 7 Sal de diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il ] -fenol El reactor de 60 1 se cargó con etanol (24 1) y éster ter-butilico de (2-{7- [4- (tetrahidro-piran-2-iloxi) -fenil] -isoquinolin-5-sulfonil } -etil ) -carbámico (2.652 kg; 5.173 moles). El éster ter-butilico de (2-{7- [4- (tetrahidro-piran-2-iloxi) -fenil] -isoquinolin-5-sulfonil } -etil) -20 carbámico, se enjuagó con etanol (2.6 1). Se diluyó solución de ácido clorhídrico (31.9%; 1780 g; 15.6 moles) con agua (1.42 1) . Esta solución de HC1 se cargó al reactor y se enjuagó con agua (0.2 1). La reacción se calentó a 70°C. Se formó una solución amarilla aproximadamente a 30°C y una suspensión amarilla se formó nuevamente cerca de 70°C. La reacción se mantiene a 70°C por 1/2 hora y después se calienta hasta reflujo (78°C). La CLAR indica una reacción completa después de 1.5 horas a reflujo. Se agrega agua (14.5 1) a la reacción durante 13 minutos. La temperatura cae a 5 69°C. La reacción se calienta nuevamente a reflujo (80°C) y se forma una solución. La reacción se enfría a 68°C y comienza a formarse el sólido. La reacción se mantiene a 68°C por 1/2 hora y después se enfría a 2°C durante 1.5 horas. La suspensión se mantiene a 1-2°C por 1 hora. El sólido se 10 filtra y se lava con etanol (4.6 1). El peso de la pasta húmeda es 3.236 kg. El sólido se seca in vacuo a 50°C para dar 2.106 kg (101.4% de teoría) de la sal de diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol. Espectro de masas (CLEM) m/z = 402.31) (M+H) .

Ejemplo 8 Semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- ( 2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol Las soluciones de hidróxido de sodio y etanol usadas para este ejemplo, son filtradas a través de un filtro de cartucho de 0.22 micrones. El agua usada es agua purificada con control de endotoxina. Se carga etanol (8 1) y sal de diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol (841.6 g; 25 2.097 mmoles) en un matraz de 22 1, equipado con un agitador de cabeza, condensador, entrada de nitrógeno, manto de calentamiento, termopar y embudo de adición. La sal de diclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il]-fenol, se enjuaga con etanol (3.28 1). La reacción se 5 calienta a 55°C. Se agrega solución de hidróxido de sodio (1100 mi; 1.91 N; 2.10 moles) a la reacción durante 7 minutos, tiempo en el cual la temperatura se incrementa a 62°C. La reacción se calienta a reflujo (78°C) y se mantiene por 1 hora. Se agrega agua (1.96 1) a la reacción una vez. La temperatura disminuye a 68°C. La reacción se calienta nuevamente a reflujo (79°C) y se forma una solución. Se agrega Darco G-60® (438 g) a la reacción. La reacción se mantiene a reflujo por 1.25 horas. La suspensión Darco G-60® caliente, se filtra a través de papel GFF en otro matraz de 22 1. Resulta una solución ligeramente amarilla. El matraz original y la pasta de filtro Darco G-60®, son enjuagadas con etanol caliente (2.5 1). Durante el enjuague, el sólido comienza a formarse en lo filtrado. El matraz de 22 1 que contiene el filtrado y se lava, es equipado con un agitador de cabeza, entrada de nitrógeno y un termopar. La suspensión se agita y se deja enfriar a temperatura ambiente. El sólido es filtrado y lavado con etanol (2 1) . El peso de la pasta húmeda es 672 g. El sólido se seca in vacuo a 50°C para dar 540 g (68.9% de rendimiento) de semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol . Espectro de masas (CLEM) m/z = 329.3) ( +H+) . Los compuestos ejemplificados son inhibidores de la actividad de Akt. La actividad inhibidora de estos compuestos se puede demostrar por los métodos siguientes.

Ensayo de Fosforilación de Aktl El ensayo mide la fosforilación de péptido pseudo-sustrato PKC alfa por un Inmunoensayo de Polarización de Fluorescencia Competitiva (FPIA). El ensayo mide directamente la concentración de producto fosfo-péptido formado en una reacción midiendo el cambio en la intensidad de luz polarizada emitida a partir de un péptido indicador fluorescentemente etiquetado cuando se desplaza de un anticuerpo fosfo-especifico por el producto de fosfo-péptido. La calibración con una curva estándar, proporciona resultados de rendimientos cuantitativos.

Enzima y Sustrato La Aktl recombinante humana activa (de longitud completa), purificada de células de insecto Sf9, se obtiene de Upstate Biotechnology, Inc. Se adquiere el substrato peptidico (PM 1561) .

Soluciones de Ensayo Estándares Solución (A) : DMSO al 20% (dimetilsulfóxido) o Compuesto en DMSO al 20% ó EDTA 500 mM; Solución (B) : Mezcla de amortiguador de ensayo: 75 µ? de Sustrato peptidico, 38 mM de MgCl2, 70 mM de HEPES, pH 7.4, Tritón X-100® al 0.01%, y 50 µ? de ATP (trifosfato adenosina) ; Solución (C) : Mezcla de cinasa de Akt : 70 mM de HEPES, pH 7.4, DTT 1 mM (ditiotreitol) , Triton-X-100® al 0.01% y enzima Aktl.

Procedimiento para FPIA Cinco µ? de solución (A) son primero mezclados con 10 µ? de solución (B) . La reacción enzimática es iniciada agregando 10 µ? de solución (C) a la mezcla. (Concentración final o cantidad en una mezcla de reacción de 25 µ?; D SO al 4% (cavidades mínimas inhibidas) o varias concentraciones de compuesto en DMSO al 4% o EDTA 100 mM (cavidades máximas inhibidas) ; 30 µ? de sustrato peptídico; 15 mM de MgCl2; 70 mM de HEPES, pH 7.4; 20 µ? de ATP; 0.4 mM de DTT; Tritón X-100® al 0.01%). Las reacciones se realizan en placas microtituladoras de 96 cavidades de fondo plano de área media negra . Después de 60 minutos a temperatura ambiente, la reacción se termina agregando 25 µ? de Mezcla de Detección/Apagado, que contiene 260 mM de EDTA, 3.4 nM de Indicador de Fluoresceína, y 7.5 nM de anticuerpo anti-fosfoserina. Las placas son incubadas en la oscuridad a temperatura ambiente por más de 3 horas, y después se lee la polarización de fluorescencia (a Kex = 485 nm, ?ß? =530 nm) , usando un lector de placa Tecan Ultra. La concentración del producto fosforilado por placa es calculada de unidades de milipolarización (mP) usando una serie de dilución competidora de péptido preparada como una curva estándar. Los compuestos ejemplificados de la invención, inhiben la fosforilación de Aktl con un ?050 de 1 µ? o menos. El compuesto del Ejemplo 1, inhibe la fosforilación de Aktl en este ensayo con un IC5o de 45 +/- 17 nM (n= 3) .

ELISA a base de Célula (ELISAc) para la Detección de Fosfo- GSK3b (pGSK3b) : Un objetivo de Akt en Células Células U87MG que crecen exponencialmente derivadas de glioblastoma humano, son sembradas en placas de 96 cavidades y se incubaron durante la noche a 37 °C con C02 al 5%. Diez concentraciones del compuesto del Ejemplo 1, se prepararon de una solución base de 4 mM (en DMSO al 100%) por diluciones seriales 1:2 en el medio de cultivo. Se agrega un volumen igual de cada una de las diluciones seriales directamente en las células. El tratamiento se detiene 2 horas después. Al final del tratamiento, se remueve el medio de cultivo, y las células son lavadas una vez con salina amortiguada de fosfato enfriada en hielo (PBS) . Las células se fijan en PREFER de conformidad con el procedimiento del vendedor, seguida por enjuagues en PB/SDS al 0.1%/Triton X-100® al 0.1%, después se incubó durante la noche en amortiguador de bloqueo de bloque SEA. La etapa de bloque se sigue por una incubación de las células durante la noche con un anticuerpo de conejo contra pGSK3b/Ser9, seguida por un IgG anti-conejo de cabra. El pGSK3b se detecta por SuperSignal ELISA Femto, siguiendo el procedimiento del vendedor. El compuesto del Ejemplo 1 inhibe a pGSK3b en este 10 ensayo con un IC5o de 2.04 +/- 0.68 (n=8) µ??.

Estudios de Inhibición de Objetivo in vivo Inhibición de objetivo in vivo por una inyección IV única Células U87MG que crecen exponencialmente derivadas de un glioblastoma humano, son subcutáneamente implantadas en el flanco trasero de ratones desnudos. Cuando los tumores alcanzan el tamaño de 200-250 mm3, los compuestos son administrados a los animales por una inyección IV única en un estudio de respuesta de dosis o en un estudio en el curso de tiempo. Al final de cada tratamiento, los animales son asfixiados con CO2. Los tumores son colectados por escisión quirúrgica, congelados rápidamente en nitrógeno liquido, y almacenados a -80°C hasta los análisis. El suero se prepara de la sangre colectada del corazón por punción cardiaca y se almacena a -80°C hasta el análisis.

Análisis de muestra: Se extrae el inhibidor de Akt del suero con acetonitrilo/metanol y se analiza junto con un estándar interno por CL/EM/E . Los tumores son homogeneizados en 2 volúmenes de un amortiguador de lisis que contiene 25 mM de Tris (pH 7.5). Los inhibidores de proteasa completos de Roche y 1 mm de vanadato con un homogenizador Powergen 125, son entonces pasados secuencialmente a través de una aguja de calibre 18 y una aguja de calibre 23. Los extractos citoplásmicos solubles, son colectados de la fracción sobrenadante, después que los lisados son centrifugados por 30 minutos a 20,000 x g. Las concentraciones de proteínas en los extractos citoplásmicos, se determinan con un kit BCA. El Fosfo-GS 3b (pGSK3b) en los extractos solubles, es analizado con el kit de ELISA. Para determinar glioblastoma en este ensayo, el compuesto del Ejemplo 1 inhibe a pGSK3b por 76% a 1 hora usando inyección IV única de 25 mg/kg.

Estudios de Inhibición de Crecimiento de Tumor in vivo Células U87MG que crecen exponencialmente derivadas de un glioblastoma humano o células H1155 derivadas de cáncer de pulmón de células no pequeñas humanas, son subcutáneamente implantadas en el flanco trasero de ratones desnudos. Tres días después de los implantes de células tumorales, se realiza microcirugía para canular el catéter para infusión continua vía la vena yugular. El Ejemplo 1, formulado en D5W (5% de dextrosa en agua) a varias concentraciones, es entonces infundido en ratones al siguiente día a 40 µ?/hr por 5 4 días. Los tumores son medidos dos veces semanalmente hasta que se termina el estudio, usualmente a 24 días después de los implantes iniciales. La inhibición del crecimiento del tumor se calcula dividiendo el volumen de tumor promedio del grupo tratado, por aquel del grupo tratado con vehículo. Para glioblastoma, el compuesto del Ejemplo 1 inhibe el crecimiento del tumor por 50%, usando infusión continua de 27 mg/kg/dia cuando se mide al final del ensayo.

Para cáncer de pulmón de células no pequeñas, el compuesto del Ejemplo 1 inhibe el crecimiento del tumor por 63% usando infusión continua de 24 mg/kg/dia cuando se mide al final del ensayo.

Estudios de Composición Farmacéutica Una composición farmacéutica de semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol, comprende un azúcar no reductor y un agente que ajusta el pH. Los estudios de solubilidad muestran que el manitol no parece impactar la solubilidad del semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol. Sin embargo, la solubilidad del semihidrato es dependiente del pH y es >19 mg/ml a pH < 3.91. También, la relación en la cual toma lugar la precipitación, es dependiente del pH.

Tabla 1: Efecto de pH de solución inicial en la velocidad de precipitación (ppt) . Todas las soluciones son preparadas inicialmente a aproximadamente 15 mg de semihidrato monoclorhidrato de 4- [ 5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol/ml y almacenadas a temperatura ambiente.

PH Precipitación Medio ( inicial ) (ppt) HC1 0.05 Sin ppt hasta N/manitol al 3% 1.68 96 horas HC1 0.01 sin ppt hasta N/manitol al 3% 3.19 96 horas HC1 0.005 ppt después N/manitol al 3% 3.58 de 48 hr HC1 0.0025 ppt después N/manitol al 3% 3.91 de 36 hr HC1 0.001 ppt después N/manitol al 3% 4.20 de 24 hr Los análisis de CL/EM del precipitado disuelto nuevamente, indican que es una molécula "similar a dimero" (Espectro de masas (CLEM) m/z ) 640.2 (M+H)+), que forma dos moléculas de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol (Espectro de masas (CLEM) m/z = 329.1 (M+H+) , para 4-[5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il ] -fenol) , después de la pérdida de amoniaco. Adicionalmente, la precipitación no parece ser debido a un cambio en una forma de estado sólido menos soluble.

Claims (20)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto, caracterizado porque es 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable o un hidrato del compuesto o la sal del mismo.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es diclorhidrato de 4-[5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol .

3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil) -isoquinolin-7-il] -fenol .

4. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para uso como un medicamento.

5. Uso del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la manufactura de un medicamento para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma, neuroblastoma, melanoma o neoplasmas de la próstata, mama, ovarios, estómago primario, tipo intestinal, endometrio, tiroides, páncreas, pulmón o vejiga.

6. Uso del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la manufactura de un medicamento para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma, o neoplasmas de la próstata, mama u ovarios.

7. Uso del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la manufactura de un medicamento para tratar cáncer de pulmón de células no pequeñas o glioblastoma .

8. Uso del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la manufactura de un medicamento para tratar hepatitis C, rubéola, virus de inmunodeficiencia humana (VIH) , hepatitis V, o citomegalovirus humano (HCMV) .

9. Un método para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma, neuroblastoma, melanoma o neoplasmas de la próstata, mama, ovarios, estómago primario, tipo intestinal, endometrio, tiroides, páncreas, pulmón o vejiga, en un paciente en necesidad el mismo, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

10. Un método para tratar para la manufactura de un medicamento para tratar mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células no pequeñas, glioblastoma, o neoplasmas de la próstata, mama u ovarios, que comprende en un paciente en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

11. Un método para tratar cáncer de pulmón de células no pequeñas o glioblastoma en un paciente en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

12. Un método para tratar la hepatitis C, rubéola, virus de inmunodeficiencia humana (VIH) , hepatitis B, o citomegalovirus humano (HCMV) en un paciente en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva del compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

13. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende el compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

14. Una composición farmacéutica liofilizada, caracterizada porque comprende el compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, en donde el pH de dicha composición cuando se diluye con el diluyente acuoso, es menos de 4.2 y mayor de 2.0.

15. La composición farmacéutica liofilizada de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque el pH es menos de 3.2 y mayor de 2.0.

16. La composición farmacéutica liofilizada de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque el pH es menos de 2.8 y mayor de 2.0.

17. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende el compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable en solución, en donde el pH de dicha composición es menos de 4.2 y mayor de 2.0.

18. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada porque el pH de dicha composición es menos de 3.2 y mayor de 2.0.

19. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque el pH de dicha composición es menos de 2.8 y mayor de 2.0.

20. Semi-hidrato monoclorhidrato de 4- [5- (2-amino-etansulfonil ) -isoquinolin-7-il] -fenol, caracterizado porque está en la forma cristalina que tiene un patrón de difracción en polvo de rayos X con picos intensos a 2T = 4.9, 14.8 y 10.2.