MX2008012076A

MX2008012076A - Ejemplo y metodos que comprenden especies de canela.

Info

Publication number: MX2008012076A
Application number: MX2008012076A
Authority: MX
Inventors: Robert T Gow; George W Sypert; Dan Li; Randall S Alberte
Original assignee: Herbalscience Singapore Pte Ltd
Priority date: 2006-03-23
Filing date: 2007-03-23
Publication date: 2008-10-07
Also published as: AU2007227386A1; US20070292540A1; KR20090010964A; JP2009531331A; CA2642972A1; IL193431A0; WO2007109804A2; BRPI0708826A2; EP2015645A2; WO2007109804A3

Abstract

La presente invención se relaciona con extractos de material vegetal de especies de canela preparados por métodos de extracción CO2 supercríticos.

Description

EJEMPLO Y MÉTODOS QUE COMPRENDEN ESPECIES DE CANELA CAMPO DE LA INVENCIÓN La descripción se relaciona en parte a extracciones derivadas de especies de canela, que tienen una cantidad de aceite esencial elevada, una cantidad de ácido fenólico elevada, una cantidad de proantocianidina elevada, y/o una cantidad de polisacárido elevada, métodos para preparar tales extracciones, y métodos para uso de tales extracciones.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Canela {Cinnamomum zeylanicu o verum, C. aromaticu , y C. cassia) es un pequeño árbol de hoja perene de 10-15 metros de alto que es nativo del sur de la India tropical y Sri Lanka y crece al nivel del mar a elevaciones de novecientos metros. Tiene corteza escabrosa gruesa y ramas fuertes. Los brotes jóvenes son anaranjados verdosos jaspeados. Las hojas tienen forma de pecíolo y son correosas cuando maduran, con un lado superior verde brillante y la parte interna más ligera. Las hojas huelen muy condimentadas y tienen un sabor picante . El fruto es una baya oval, tan grande como una zarzamora; como una bellota en su receptáculo. La fruta se vuelve azul cuando madura con manchas blancas en ella, con una sabor como enebro un olor terebine. Cuando hierve, da una sustancia oleosa, que se llama sebo de canela. La corteza de raíz huele como a canela y sabe como alcanfor, el cual puede aislarse por destilación. La parte medicinal de las especies de canela, consiste de la corteza seca, separada del alcornoque y la parénquima subyacente, de ramas y brotes jóvenes de especies de canela. Las especies de canela se introducen a través de las islas del Océano índico y Asia del Sureste y ahora se cultivan en gran medida en Sri Lanka y las regiones costeras de la India. Sri Lanka es el país de producción principal, a través del producto de canela sustancial que llega de la India, Malasia, Madagascar y las islas Seychelles. La corteza de canela se ha utilizado en medicinas del Este y Occidente durante varios miles de años. De acuerdo a la teoría de energéticos en la medicina China tradicional (TCM) , la canela actúa como suplemento de cuerpo cansado, para calentar y tonificar el vaso y el riñon; de este modo es efectivo para el dolor de pecho y abdominal, diarrea debido a astenia, e hipofunción del riñon. Las preparaciones galénicas de la canela se utilizan como componente carminativo, digestivo, o estomacal de compuestos en TCM, medicinas Greco-Europeas tradicionales, y medicina tradicional de la India, Ayurvérica y Unani . La Comisión Alemana E aprueba el uso interno de canela para la pérdida de apetito y quejas dispépticas tales como espasmos leves del tracto gastrointestinal, distensión abdominal y flatulencia. En los Estados Unidos y Alemania, la canela se utiliza como un componente carminativo y estomacal de compuestos de hierva en formas de dosis que incluyen infusión acuosa o decocción, extracto de fluido alcohólico o tintura, y aceite esencial. También aparece como un componente para fórmulas de tos, resfriado, y fiebre de hiervas múltiples. Más recientemente, la evidencia especifica ha soportado el uso de canela para la diabetes tipo 2 (diabetes mellitus no dependiente de insulina NIDDM) , actividad anti-oxidante , actividad adhesiva antiplaqueta, actividad anti-inflamatoria , actividad antibacterial y fúngica, y mejora de la función del cerebro. Véase Khan A et al. Diabetes Care 26:3215-3218, 2003; Anderson RA et al. J Agrie Food Chem 52:65-70, 2004; Jarville-Taylor et al. J Am Coll Nutrí 20:327-336, 2001; Qin R et al. Horm Metab Res 36:119-123, 2004; Vespohl EJ et al. Phytother Res 19:203-206, 2005; Lee SH et al Biochem Pharmacol 69:791-9,2005; Chericoni S et al. J Agrie Food Chem 53:4762-4765, 2005; Lin CC et al. Phytother Res 17:7260730, 2003; Jayaprakasha GK et al. J Agrie Food Chem 51:4344-4348, 2003; Huss U et al. J Nat Prod 65:1517-21, 2002; Nagai H et al. Jpn J Pharmacol 32:813-822, 1982; Su MJ et al. J Biomed Sci 6:376-386, 1999; Shimada Y et al.

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Tabla 1. Constituyentes Químicos Principales de la Corteza de Canela % de peso Constituyentes químicos seco Aceites esenciales 1-4% Aceites Volátiles Trans-cinamaldehído (60-80%) Benzaldehído 2' -hidroxicinamaldehído 2-metoxicinamaldehído 2' -benzoxicinamaldehído Eugenol (hasta 10%) Trans-ácido cinámico (5-10%: Acetato de cinamilo Alcohol de cinamilo Linalol 1 , 8-cineol Monoterpenos y Sesquiterpenos (1-3%) Alfa-Pineno Beta-pineno Borneol Polifenoles Glicósido de flavonoles Kaempferitrina Kaempferol 3-O-Beta-D-glucopiranosil- (1?4) -alfa-L- ramnopiranósido Kaempferol 3-0-beta-D-apiofuranosil- (1?2) -alfa-L- ramnopiranósido Kaempferol 3-0-beta-D-apiofuranosil- (1?4) -alfa-L- ramnopiranosido Flavonoides Metilhidroxicalcona catequina epicatequina antocianidina 5-10% Catequina/Epioligómeros de catequina Ácido 3- (2-hidroxifenil) -propanoico 3- ( 2-hidroxifenil ) -O-glicósido Proantocianidinas Taninos Condensados Oxalato de calcio-monterpeno Goma Mucílago Resina Carbohidratos Almidón Polisacáridos Ceniza SUMARIO DE LA INVENCIÓN En un aspecto, la presente invención se relaciona con especies de extracto de canela que comprenden una fracción que tiene un cromatograma de espectrometría de masa de Análisis Directo en Tiempo Real (DART) de cualquiera de las Figuras 6 a 85. En una modalidad adicional, la fracción comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste de cinamaldehído, benzaldehído, alcohol cinámico, trans-ácido cinámico, acetato de cinamilo, un aceite esencial, un polifenol, un polisacárido, y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, la fracción comprende cinamaldehído en una cantidad mayor que aproximadamente 2% por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende cinamaldehído en una cantidad mayor que aproximadamente 5, , 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, o 95% por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende cinamaldehido en una cantidad de aproximadamente 65% a aproximadamente 95% por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende un aceite esencial seleccionado del grupo que consiste de eugenol, 2 ' -hidroxicinamaldehido , 2-metoxicinamaldehido, 2 ' -benzoxicinamaldehído, linalol, 1,8-cineol, alfa-pineno, beta-pineno, y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, la fracción comprende aceite esencial en una cantidad de aproximadamente 1% a aproximadamente 5% por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende una cantidad combinada de cinamaldehido y aceite esencial de aproximadamente 5% a aproximadamente 40% por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende un polifenol seleccionado del grupo que consiste de flavonoide, glicósido de flavonol, y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, el flavonoide se selecciona del grupo que consiste de ácido 3- (2-hidroxifenil ) -propanoico, 3- (2-hidroxifenil) -O-glicósido, antocianidina, epicatequina, catequina, metilhidroxicalcona, oligómeros de catequina, epioligómeros de catequina, proantocianidinas oligoméricas , proantocianidinas poliméricas, y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, el glicósido de flavonol se selecciona del grupo que consiste de kaempferitrina , kaempferol 3-0-Beta-D-glucopiranosil-( ?4 ) -alfa-L-ramnopiranósido, kaempferol 3-0-beta-D-apiofuranosil- ( 1?2 ) -alfa-L-ramnopiranósido, kaempferol 3-O-beta-D-apiofuranosil- ( 1?4 ) -alfa-L- ramnopiranósido, y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, la fracción comprende un polifenol en una cantidad de aproximadamente 20% a aproximadamente 70% por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende cinamaldehido a aproximadamente 6% por peso y un polifenol a aproximadamente 70 % por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende cinamaldehido a aproximadamente 40% por peso y un polifenol a aproximadamente 20% por peso. En una modalidad adicional, la fracción comprende un polisacárido seleccionado del grupo que consiste de glucosa, arabinosa, galactosa, ramnosa, ácido urónico xilosa y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, la fracción comprende un polisacárido a aproximadamente 30% por peso. En otro aspecto, la presente invención se relaciona con un alimento o medicamento que comprende las especies de extracto de canela de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método para hacer un extracto de canela que comprende secuencialmente extraer un material vegetal de especies de canela para dar una fracción de aceite esencial, una fracción polifenólica sin tanino y una fracción de polisacárido al a) extraer material vegetal de especies de canela por la extracción supercritica con dióxido de carbono para dar la fracción de aceite esencial y un primer residuo; b) extraer material vegetal de especies de canela de extracción o el primer residuo de la etapa a) con agua caliente para dar la fracción de polisacárido y un segundo residuo; y c) extraer material vegetal de especies de canela, el primer residuo de la etapa a) y/o el segundo residuo de la etapa b) con una solución hidro-alcohólica y purificar la extracción utilizando procesos adsorbentes de afinidad para dar la fracción polifenólica sin tanino. En una modalidad adicional, la etapa a) comprende 1) cargar en un material vegetal de especies de canela molida en un recipiente de extracción; 2) agregar dióxido de carbono bajo condiciones supercriticas ; 3) poner en contacto la corteza de canela molida y el dióxido de carbono durante un momento; y 4) colectar una fracción de aceite esencial en un recipiente de colección. En una modalidad adicional, las condiciones supercriticas comprenden 6 megapascales a 80 megapascales (60 bares a 800 bares) de presión de 35°C a 90°C. En una modalidad adicional, las condiciones supercriticas comprende 6 MPa a 50 Mpa (60 bares a 500 bares) de presión de 40°C a 80°C. En una modalidad adicional, el tiempo es 30 minutos a 2.5 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 1 hora. En una modalidad adicional, un sistema de separación fraccional de dióxido de carbono supercritico se utiliza 5 para el fraccionamiento, purificación, y descripción de la fracción de aceite esencial. En una modalidad adicional, la etapa b) comprende 1) poner en contacto el material vegetal de especies de canela molida o el primer residuo de la etapa a) con una 0 solución de agua durante un tiempo suficiente para extraer el constituyente químico de polisacárido; y 2) separar y purificar los polisacáridos sólidos de la solución mediante precipitación de alcohol. En una modalidad adicional, la solución de agua es de 80°C a 100°C. En una modalidad 5 adicional, la solución de agua es de 80°C a 90°C. En una modalidad adicional, el tiempo es 1-5 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 2-4 horas. En una i ' modalidad adicional, el tiempo es 2 horas. En una modalidad adicional, el alcohol es etanol. 0 En una modalidad adicional, la etapa c) que comprende: 1) poner en contacto material vegetal de especies de canela, el primer residuo de la etapa a) y/o el segundo residuo de la etapa b) con solución hidroalcohólica durante un tiempo suficiente para extraer constituyentes 5 químicos polifenólicos ; 2) pasar una solución de alcohol concentrado de constituyentes químicos polifenólicos extraídos de la mezcla de solvente hidroalcohólico a través de una columna de resina adsorbente de afinidad donde los ácidos polifenólicos se adsorben; y 3) eluir las olas fracciones constituyentes químicas polifenólicas sin tanino purificado de la resina adsorbente de afinidad dejando los polifenólicos de tanino adsorbidos en la resina adsorbente de afinidad. En una modalidad adicional, la solución hidroalcohólica comprende etanol y agua donde la concentración de etanol es 10-95% por peso. En una modalidad adicional, la solución hidroalcohólica comprende etanol y agua donde la concentración de etanol es 25% por peso. En una modalidad adicional, la etapa 1) se lleva a cabo de 30°C a 100°C. En una modalidad adicional, la etapa 1) se lleva a cabo de 60°C a 100°C. En una modalidad adicional, el tiempo es 1-10 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 1-5 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 2 horas. En otro aspecto la presente invención, se relaciona a unas especies de extracto de canela preparado por los métodos de la presente invención. En otro aspecto la presente invención, se relaciona a unas especies de extracto de canela que comprende cinamaldehído, ácido cinámico de 1 a 5% en peso del cinamaldehido, ácido metil cinámico de 5 a 15% en peso del cinamaldehido, alcohol cinámico de 1 a 5% en peso del cinamaldehido, ( P-gualenen/cis-y-bisababoleno de 20 a 30% en peso del cinamaldehido, y pirogalol de 1 a 5% en peso del cinamaldehido. En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende pirogalol, ácido cinámico de 80 a 90% en peso del pirogalol, ácido metil cinámico de 85 a 95% en peso del pirogalol, ácido cumárico de 20 a 30% en peso del pirogalol, ácido homovanilico de 15 a 25% en peso del pirogalol, cinamaldehido de 85 a 95% en peso del pirogalol, y benzoato de bencilo de 10 a 15% en peso del pirogalol. En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende catequina, ácido cinámico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido metil cinámico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido cumárico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido ferúlico de 1 a 10% en peso de catequina, 2-metoxifenol de 1 a 5% en peso de catequina, ácido homovanilico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido vanílico de 20 a 30% en peso de catequina, benzaldehído de 1 a 5% en peso de catequina, cinamaldehido de 35 a 45% en peso de catequina, pirogalol de 85 a 95% en peso de catequina, y ácido cafeíco de a 15% en peso de catequina. En otro aspecto la presente invención se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende ( -gualenen/cis-y-bisababoleno y cinamaldehido de 5 a 15% en peso del (p-gualenen/cis-y-bisababoleno . En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende cinamaldehido y p-gualenen/cis-y-bisababoleno de 10 a 20% en peso de cinamaldehido. En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende cinamaldehido, pirogalol de 30 a 40% en peso del cinamaldehido, y catequina/epicatequina de 1 a 10% en peso de cinamaldehido. En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende cinamaldehido, ácido cinámico de 1 a 5% en peso del cinamaldehido, metoxi cinamaldehido de 0.5 a 5% en peso del cinamaldehido, eugenol de 0.1 a 5% en peso del cinamaldehido, p-cimeno de 1 a 5% en peso del cinamaldehido, alcanfor de 0.1 a 5% en peso del cinamaldehido, carvacrol de 0.5 a 5% en peso del cinamaldehido, cariofileno/humuleno de 25 a 35% en peso del cinamaldehido, pirogalol de 0.1 a 5% del cinamaldehido, y cinamato de cinamilo de 40 a 50% en peso del cinamaldehido.

En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende cinamato de cinamilo, metoxi cinamaldehído de 0.5 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, alcohol cinámico de 0.1 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, p-cimeno de 1 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, linalol de 0.1 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, alcanfor de 0.1 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, carvacrol de 0.5 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, cinamaldehído de 70 a 80% en peso del cinamato de cinamilo, cariofileno/humuleno de 45 a 55% en peso del cinamato de cinamilo, y pirogalol de 0.1 a 5% del cinamato de cinamilo. En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende pirogalol, ácido cinámico de 5 a 10% en peso del pirogalol, ácido cumárico de 60 a 70% en peso del pirogalol, ácido ferúlico de 1 a 10% del pirogalol, 2-metoxifenol de 5 a 15% del pirogalol, ácido vanílico de 1 a 10% en peso del pirogalol, catequina/epicatequina de 30 a 40% en peso del pirogalol, benzaldehído de 1 a 5% en peso del pirogalol, afzelequina/epiafzelequina de 5 a 15% en peso del pirogalol, resveratrol de 1 a 10% en peso del pirogalol, y vanillina de 1 a 5% en peso del pirogalol. En otro aspecto la presente invención, se relaciona con unas especies de extracto de canela que comprende pirogalol, ácido cinámico de 0.5 a 5% en peso del pirogalol, ácido cumárico de 10 a 20% en peso del pirogalol, ácido ferúlico de 0.5 a 5% del pirogalol, 2-metoxifenol de 1 a 5% del pirogalol, homo/isoácido vanílico de 0.5 a 5% en peso del pirogalol, ácido vanílico de 1 a 10% en peso del pirogalol, catequina/epicatequina de 25 a 35% en peso del pirogalol, benzaldehído de 1 a 5% en peso del pirogalol, cinamaldehído de 1 a 5% del pirogalol, afzelequina/epiafzelequina de 0.1 a 5% en peso del pirogalol, y vanillina de 65 a 75% en peso del pirogalol. Las extracciones de la descripción son útiles al promover efectos fisiológicos y médicos que incluyen, pero no se limitan a, actividad anti-oxidante , depuradores radicales libres de oxígeno, inhibición de nitrosación, actividad anti-mutagénica (prevención de cáncer) , actividad anti-cancerigena (terapia de cáncer) , protección de la piel, anti-edad, enfermedad anti-cardiovascular , enfermedad anti-ataque y terapia, protección cerebral, anti-hiperlipidemia, enfermedad anti-periodontal , anti-osteoporosis , mejora inmunológica, anti-viral, actividad anti-VIH y anti-bacterial , actividad anti-fúngica, actividad anti-viral, control de peso y termogénesis , antidiabetes, y reducción de ansiedad, mejora del humor y mejora cognitiva. Estas modalidades de la descripción, otras modalidades, y sus rasgos y características, serán aparentes de la descripción, dibujos y reivindicaciones que siguen .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 representa un diagrama esquemático ejemplar del proceso de extracción de canela. La Figura 2 representa un método ejemplar para la preparación de fracciones de aceite esencial. La Figura 3 representa un método ejemplar para la preparación de fracciones de polisacárido . La Figura 4 representa un método ejemplar para extracción por lixiviación de solvente. La Figura 5 representa un método ejemplar para la preparación de fracciones polifenólicas purificadas. La Figura 6 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para polisacárido de canela (modo ión positivo) . La Figura 7 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para polisacárido de canela (modo ión negativo) . La Figura 8 representa Espectro de Masas AccuTOF- DART para corteza de canela (modo ión positivo) . La Figura 9 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto sin purificar de corteza de canela separada por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión positivo) .

La Figura 10 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto sin purificar de corteza de canela HS#147 utilizando un 75% de Solvente de extracción EtOH (modo ión positivo) . La Figura 11 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F3 separada por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 12 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F4 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 13 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F5 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 14 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F6 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 15 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F7 por cromatografía en •columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 16 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F8 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 17 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para corteza de canela (modo ión negativo) . La Figura 18 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto sin purificar de corteza de canela HS#147 utilizando a 75% solvente de extracción EtOH (modo ión negativo) . La Figura 19 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto sin purificar de corteza de canela separada por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 20 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F3 separada por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 21 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F4 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 22 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F5 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión negativo) .

La Figura 23 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F6 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 24 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F7 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 25 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para la fracción F8 por cromatografía en columna utilizando material de empaque Sephadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 26 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para vara de canela adquirida comercialmente de Mountain Rose Herbs (modo ión positivo) . La Figura 27 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 40°C y 10 MPa (100 bares) (modo ión positivo) . La Figura 28 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCCO2 a 40°C y 30 MPa (300 bares) (modo ión positivo) . La Figura 29 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 40°C y 50 MPa (500 bares) (modo ión positivo) . La Figura 30 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 60°C y 10 MPa (100 bares) (modo ión positivo) . La Figura 31 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 60°C y 30 MPa (300 bares) (modo ión positivo) . La Figura 32 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCCO2 a 60°C y 50 MPa (500 bares) (modo ión positivo) . La Figura 33 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCCO2 a 80°C y 10 MPa (100 bares) (modo ión positivo) . La Figura 34 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 80°C y 30 MPa (300 bares) (modo ión positivo) . La Figura 35 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para el aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 80°C y 50 MPa (500 bares) (modo ión positivo) . La Figura 36 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para 80% de Extracto de lixiviación de EtOH de canela sin purificar (modo ión positivo) . La Figura 37 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para 80% de Extracto de lixiviación de EtOH de residuo a partir de la extracción de SCCO2 de canela sin purificar (modo ión positivo) . La Figura 38 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F4 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 S CCO2 (modo ión positivo) . La Figura 39 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F5 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO2 (modo ión positivo) . La Figura 40 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F6 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO2 (modo ión positivo) . La Figura 41 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F7 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCC02 (modo ión positivo) . La Figura 42 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F8 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCC02 (modo ión positivo) . La Figura 43 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F9 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO2 (modo ión positivo) . La Figura 44 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción FIO de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO? (modo ión positivo) . La Figura 45 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción Fll de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO? (modo ión positivo) . La Figura 46 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto de canela sin purificar de HS114 (modo ión positivo) . La Figura 47 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto de canela sin purificar de HS114 (SCC02) (modo ión positivo) . La Figura 48 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F4 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) .

La Figura 49 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F5 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 50 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F6 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 51 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F7 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 52 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F8 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 53 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F9 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 54 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción FIO de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 55 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción Fll de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión positivo) . La Figura 56 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para vara de canela adquiridos comercialmente de Mountain Rose Herbs (modo ión negativo) . La Figura 57 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 40°C y 10 MPa (100 bares) (modo ión negativo) . La Figura 58 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCCO2 a 40°C y 30 MPa (300 bares) (modo ión negativo) . La Figura 59 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCCO2 a 40°C y 50 MPa (500 bares) (modo ión negativo) . La Figura 60 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 60°C y 10 MPa (100 bares) (modo ión negativo) . La Figura 61 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 60°C y 30 MPa (300 bares) (modo ión negativo) . La Figura 62 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 60°C y 50 MPa (500 bares) (modo ión negativo) . La Figura 63 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCCO2 a 80°C y 10 MPa (100 bares) (modo ión negativo) . La Figura 64 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 80°C y 30 MPa (300 bares) (modo ión negativo) . La Figura 65 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de canela extraído por métodos SCC02 a 80°C y 50 MPa (500 bares) (modo ión negativo) . La Figura 66 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para 80% extracto de lixiviación de EtOH de canela sin purificar (modo ión negativo) . La Figura 67 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para 80% extracto de lixiviación de EtOH de residuo de extracción SCC02 de canela sin purificar (modo ión negativo) . La Figura 68 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F4 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCC02 (modo ión negativo) . La Figura 69 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F5 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO2 (modo ión negativo) . La Figura 70 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F6 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO2 (modo ión negativo) . La Figura 71 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F7 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCC02 (modo ión negativo) . La Figura 72 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F8 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCC02 (modo ión negativo) . La Figura 73 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F9 de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCC02 (modo ión negativo) . La Figura 74 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción FIO de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCC02 (modo ión negativo) . La Figura 75 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción Fll de elusión de canela-etanol utilizando material de empaque Sephadex LH-20 de residuo HS114 SCCO2 (modo ión negativo) . La Figura 76 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto de canela sin purificar de HS114 (modo ión negativo) . La Figura 77 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto de canela sin purificar de HS114 (SCCO2) (modo ión negativo) . La Figura 78 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F4 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 79 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F5 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 80 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F6 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 81 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F7 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 82 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F8 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 83 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción F9 de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 84 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción FIO de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) . La Figura 85 representa Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción Fll de elusión de canela-etanol después de degradación tiolitica de Sepadex LH-20 (modo ión negativo) .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Definiciones Como se utiliza en la presente, la canela se refiere al material vegetal de corteza derivado de los botánicos de especies Cinnamomum. El término "canela" también se utiliza intercambiablemente con especies de canela y se relaciona a vegetales, clones, variantes, etc. Como se utiliza en la presente, el término "uno o más compuestos" significa que al menos un compuesto, tal como, pero no limitado a, trans-cinamaldehído (un constituyente químico de aceite esencial soluble lípido de especies de canela) , o metilhidroxicalcona (un polifenólico soluble en agua de especies de canela) o una molécula de polisacárido de especies de canela se pretende, o que se pretende más de un compuesto, por ejemplo, trans-cinamaldehído y metilhidroxicalcona. Como se utiliza en la presente, el término "fracción" significa la extracción que comprende un grupo especifico de compuestos químicos caracterizados por ciertas propiedades físicas y/o químicas. Como se utiliza en la presente, el término "fracción de aceite esencial" se refiere a una fracción que comprende lípido soluble, compuestos insolubles en agua obtenidos o derivados de canela y especies relacionadas que incluyen, pero no se limitan a, el compuesto químico clasificado como trans-cinamaldehído . Como se utiliza en la presente, el término "sub-fracción de aceite esencial" se refiere a una fracción que comprende compuestos insolubles en agua, solubles en lípido obtenidos o derivados de canela y especies relacionadas que incluyen, pero no se limitan a, el compuesto químico clasificado como trans-cinamaldehído que tiene concentraciones mejoradas de compuestos específicos encontrados en el aceite esencial de las especies de canela. Como se utiliza en la presente, el término "fracción polifenólica" se refiere a una fracción que comprende los compuestos de ácido polifenólico solubles en agua y solubles en etanol obtenidos o derivados de canela y especies relacionadas, además comprenden, pero no se limitan a, compuestos tales como metilhidroxicalcona, oligómeros de catequina y epicatequina . Como se utiliza en la presente, el término "fracción de polisacárido" se refiere a una fracción que comprende compuestos de polisacárido insolubles en etanol-soluble obtenidos o derivados de canela y especies relacionadas . Otros constituyentes químicos de canela también pueden estar presentes en estas fracciones de extracción. Como se utiliza en la presente, el término fracción "purificado" se refiere a una fracción que comprende un grupo específico de compuestos caracterizados por ciertas propiedades físicas-químicas o propiedades físicas o químicas que concentran o mayor que 20% de los constituyentes químicos de la fracción. En otras palabras, una fracción purificada comprende menos de 80% de los compuestos constituyentes químicos que no se caracterizan por ciertas propiedades físicas-químicas deseadas o propiedades físicas o químicas que definen la fracción. Como se utiliza en la presente, el término "perfil" se refiere a los índices de por ciento de peso en masa de los compuestos químicos dentro de la fracción de extracción o sub-fracción o en los índices de por ciento de peso en masa de cada uno de los tres constituyentes químicos de fracción de canela en una extracción de canela final . Como se utiliza en la presente, "materia prima" generalmente se refiere al material vegetal sin refinar, que comprende vegetales íntegros solos, o en combinación con o más partes constituyentes de un vegetal que comprende hojas, raíces, incluyendo pero no limitados a, raíces principales, raíces de cola, y raíces de fibra, tallos, corteza, hojas, semillas, y flores, en donde la planta o partes constituyentes pueden comprender el material que está sin refinar, seco, al vapor, caliente o de otra forma sujeto a procesamiento físico para facilitar el procesamiento, el cual puede además comprender material que está intacto, picado, cortado en cuadritos, o triturado, molido o de otra forma procesado para afectar la integridad del tamaño y físico del material vegetal. Ocasionalmente, el término "materia prima" puede utilizarse para caracterizar un producto de extracción que se utilizará como fuente de alimento para procesos de extracción adicionales . Como se utiliza en la presente, el término "constituyentes de canela" significa compuestos químicos encontrados en especies de canela y deben incluir todos los compuestos químicos identificados en lo anterior así como otros compuestos encontrados en las especies de canela, incluyendo pero no limitados a constituyentes químicos de aceite esencial, ácidos polifenólicos , y polisacáridos . Los constituyentes químicos de canela son de valor terapéutico extensivo. Búsqueda científica reciente y estudios clínicos han demostrado los siguientes efectos terapéuticos de varios compuestos químicos, fracciones químicas y productos de extracción integrales de canela los cuales incluyen lo siguiente: diabetes mellitus NIDDM-tipo 2 (proantocianidinas , metilhidroxicalcona, catequinas y oligómeros de epicatequina, flavonoides, extracto soluble en agua); metabolismo de colesterol mejorado que incluye lipoproteína de baja densidad reducida (ácidos fenólicos que incluyen proantocianidinas, metilhidroxicalcona, catequinas, oligómeros de epicatequina, flavonoides, extracto soluble en agua) ; radicales libres de daño anti-arterial y función mejorada de vasos sanguíneos pequeños (aceites esenciales, cinamaldehido, 2'-hidroxicinamaldehido, 2 ' -metoxicinamaldehido, ácidos fenólicos, flavonoides glicósidos, proantocianidinas , flavonoides, catequinas, oligómeros de epicatequina , extracto) ; agregación anti-trombótica y antiplaquetaria (aceite esencial, cinamaldehido) ; actividad antiinflamatoria (aceite esencial, cinamaldehido, eugenol, 1,8 cineol, alfa-pineno, beta-pineno, borneol, glicósidos de flavonol, extracto); anti-oxidante (ácidos fenólicos, glicósidos flavonoles, proantocianidinas, flavonoides, extracto soluble en agua) ; anti-alérgicos (ácidos fenólicos, glicósidos de flavonol, proantocianidinas, flavonoides, extracto soluble en agua) ; protector neurológico (extracto soluble en agua); protector cardiovascular (aceite esencial, extracto soluble en agua) ; función del cerebro mejorado (aceite esencial, particularmente aceites volátiles); carminativo, pérdida de apetito, quejas dispépticas, anti-vómito, anti-distensión abdominal & flatulencia, promoción de motilidad intestinal, facilitación de ganancia de peso, (flavonoides, ácido 3- (2-hidroxifenil ) -propanoico, 3- (2-hidroxifenil) -O-glicósido, extracto soluble en agua) ; anti-estornudo, resfriado y fiebre común (aceite esencial, acetato de cinamilo) ; actividad anti-bacterial & anti-fúngica (aceite esencial, cinamaldehido, eugenol, 1,8-cineol, beta-pineno, borneol); cicatriz de herida lipolitica & mejorada (extracto de etanol) ; anti-cáncer & anti-gota (aceite esencial, cinamaldehido, 2 ' -hidroxicinamaldehido, 2'-benzoxicinamaldehido, extracto de metanol); Véase Khan A et al. Diabetes Care 26:3215-3218, 2003; Anderson RA et al. J Agrie Food Chem 52:65-70, 2004; Jarville-Taylor et al. J Am Coll Nutri 20:327-336, 2001; Qin R et al. Horm etab Res 36:119-123, 2004; Vespohl EJ et al. Phytother Res 19:203- 206, 2005; Lee SH et al Biochem Pharmacol 69:791-9,2005; Chericoni S et al. J Agrie Food Chem 53:4762-4765, 2005; Lin CC et al. Phytother Res 17:7260730, 2003; Jayaprakasha GK et al. J Agrie Food Chem 51: 3 - 348, 2003; Huss U et al. J Nat Prod 65:1517-21, 2002; Nagai H et al. Jpn J Pharmacol 32:813-822, 1982; Su MJ et al. J Biomed Sci 6:376-386, 1999; Shimada Y et al. Phytomed 11:404-410, 2004; Taher M et al. Med J Malayia 59B: 97-98, 2004; Kamath JV et al. Phytother Res 17:970-972, 2003; kurokawa M et al. Eur J Pharmacol 348:45-51, 1998; Simic A et al. Phytother Res 18:713-717, 2004; Tabak M et al. J Ethnopharmacol 67:269-277, 1999; Kong LD et al. J Ethnopharmacol 73:199- 207, 2000; Kwon B et al. Arch Pharm Res 21:147-152, 1998; Ka H et al. Cáncer Lett 196:143-152, 2003. Las antocianinas son una clase particular de compuestos flavonoide que ocurre naturalmente, que son responsables por los colores rojo, púrpura, y azul de muchas frutas, vegetales, granos de cereales, y flores. Por ejemplo, los colores de los frutos tales como moras azules, arándanos, fresas, frambuesas, boysenberries , marionberries, arándanos rojos, bayas de saúco, etc. se deben a muchas antocianinas diferentes. Recientemente, el interés en los pigmentos de antocianina, se han identificado debido a sus beneficios saludables posibles como antioxidantes dietéticos. Por ejemplo, los pigmentos de antocianina de arándanos {Vaccinium myrtillus) se han utilizado para mejorar la agudeza visual y tratar trastornos circulatorios. Existe evidencia experimental de que ciertas antocianinas y otros flavonoides tienen propiedades anti-inflamatorias . Además, existen reportes de que las antocianinas oralmente administradas son benéficas para el tratamiento de diabetes y ulceras y pueden tener actividades antivirales y antimicrobiales . Las bases químicas para estas propiedades deseables de flavonoides se relacionan a su capacidad antioxidante. De este modo, las características antioxidantes asociadas con las bayas y otros frutos y vegetales se han atribuido a su contenido de antocianina . Las proantocianidinas , también conocidas como "proantocianidinas oligoméricas" , "OPC", o "procianidinas" , son otra clase de compuestos flavonoide que ocurren naturalmente ampliamente disponibles en fruto, vegetales, nueces semillas, semillas, flores, y cortezas. Las proantocianidinas pertenecientes a la categoría conocida como taninos condensados. Existen el tipo más común de taninos encontrados en las frutas y vegetales, y están presenten en grandes cantidades en las semillas y pieles. En naturaleza, las mezclas de proantocianidinas diferentes son comúnmente encontradas, que varían de las unidades individuales a moléculas de complejo (oligómeros o polímeros) de muchas unidades unidas. La estructura química general de una proantocianidina comprende cadenas lineales de unidades 3-ol flavonoides unidas juntas a través de los enlaces C(4)-C(6) y/o C(4)-C(8) comunes. Las proantocianidinas son mezclas de oligómeros y polímeros que contienen unidades de catequina y/o epicatequina a través de enlaces de C4-C8 y/o C4-C6. Estos flavan-3-oles también pueden enlazarse doblemente por un enlace C4-C8 y un enlace tradicional entre C7-C2. 13C RMN ha sido útil en la identificación de las estructuras de proantocianidinas poliméricas, y el reciente trabajo ha aclarado la química de proantocianidinas di-, tri, y tetraméricas . Oligómeros mayores de las unidades 3-ol flavonoides son predominantes en las plantas y se encuentran con pesos moleculares promedio de aproximadamente 2,000 Daltones y contienen 6 o más unidades de monómero. (Newman, et al., Mag. Res. Chem. , 25:118 (1987)). Búsqueda reciente considerable ha explorado las aplicaciones terapéuticas de proantocianidinas , que se conocen principalmente por su actividad antioxidante. Sin embargo, estos compuestos también se han reportado para demostrar acciones antibacteriales, antivirales, anticarcinogénicas , anti-inflamatorias , anti-alérgicas , y vasodilatoria . Además, han encontrado inhibir la peroxidación de lipido, agregación plaquetaria, permeabilidad de capilaridad y fragilidad, y afecta los sistemas de enzima que incluyen fosfolipasa A2 , ciclooxigenasa , y lipoxigenasa . Por ejemplo, monómeros de proantocianidina (es decir, antocianinas ) y dimeros que se han utilizado en el tratamiento de enfermedades asociadas con la fragilidad de capitalidad incrementada y también han demostrado tener efectos anti-inflamatorios en animales. (Beladi, I. et al., Ann. N.Y. Acad. Sci., 284:358 (1977)). Basadas en estos hallazgos reportados, las proantocianidinas oligoméricas (OPCs) pueden ser útiles componentes en el tratamiento de un número de condiciones (Fine, A. M. , Altern. ed. Rev. 5(2):144-151 (2000)). Las proantocianidinas también pueden protegerse contra virus. En estudios in vitro, las proantocianidinas de hemamelis (Hamamelis virginiana) mató el virus de Herpes simplex 1 (HSV-1) (Erdelmeier, C. A., Cinatl, J. , Plant Med. June: 62(3):241-5 (1996); DeBruyne, T., Pieters, L., J. Nat. Prod. Jul: 62(7):954-8 (1999)). Otro estudio se llevó a cabo para determinar los índices de la actividad de estructura de la actividad antiviral de varios taninos. Se encontró que la más condensada, la estructura química, la mayor del efecto anti-viral (Takechi, M., et al., Phytochemistry, 24:2245-50 (1985)). En otro estudio las proantocianidinas mostraron tener una actividad simple de anti-Herpes simplex en la cual el 50 por ciento de efectivo necesita reducir la formación de plaqueta de herpes simplex que fue dos o tres órganos de magnitud menor que 50 por ciento de las dosis de citotóxicos (Fukuchi, K. , et al., Antiviral Res., 11:285-298 (1989)). Las enzimas ciclooxigenasa (COX-1, COX-2) o endoperóxido H de prostaglandin sintasa (PGHS-1, PGHS-2) se utilizan ampliamente para medir los efectos anti-inflamatorios de los productos vegetales (Bayer, T., et al., Phytochemistry, 28:2373-2378 (1989); y Goda, Y., et al., Chem. Pharm. Bull., 40:2452-2457 (1992)). Enzimas COX son los sitios objetivo farmacológicos para fármacos antiinflamatorios no esferoidales (Humes, J. L., et al., Proc. Nati. Acad. Sci. U.S. A., 78:2053-2056 (1981); y Rome, L. H., et al., Proc. Nati. Acad. Sci. U.S. A., 72:4863-4865 (1975)). Dos isozimas de ciclooxigenasa involucradas en la síntesis de prostaglandina son ciclooxigenasa-1 (COX-1) y ciclooxigenasa-2 (COX-2) (Hemler, M., et al., J. Biol. Chem., 25:251, 5575-5579 (1976)). Se tiene la hipótesis que los inhibidores COX-2 selectivos son responsables principalmente por la actividad anti-inflamatoria (Masferrer, J. L., et al., Proc. Nati. Acad. Sci . U.S. A., 91:3228-3232 (1994)). Los flavonoides ahora están siendo investigados como sustancias anti-inflamatorias , asi como para sus características estructurales para la actividad de inhibición de ciclooxigenasa (COX) . Aunque la canela es generalmente segura y no tóxica aún en dosis elevadas, puede inducir a reacciones alérgicas en individuos quienes son sensibles a la canela o Peruvian balsa. No se recomienda durante el embarazo y lactancia. No se conocen interacciones con otros fármacos. Lo que se necesita son extractos novedosos y de canela reproducibles que combinan aceite esencial purificado, polifenólicos purificados con glicósidos flavonoles elevados y flavonoides, y fracciones constituyentes de químicos de polisacárido que pueden producirse con cantidades estandarizadas y confiables de estos constituyentes químicos de canela benéfica que actúan sinergística, fisiológica y médicamente. Williamson E . Phtomedicine 8:401-409, 2001.

Extracciones Fracción de aceite esencial La corteza de canela es rica en aceite esencial proporciona varios tipos de aceites dependiendo de la parte de la planta usada. Se reportó que existe 1-2% de aceite esencial por % de peso en masa en la corteza de canela. El componente principal de aceite de corteza de canela es el aldehido-3-fenil-2 (E) -propenol aromático, también llamado cinamaldehido (aproximadamente 60% en aceite esencial por de peso en masa) . La corteza de canela se utiliza como materia prima por la búsqueda actual. La extracción supercritica con dióxido de carbono y la tecnología del fraccionamiento se ha seleccionado para la extracción debido a su beneficio bien conocido en el procesamiento de químicos solubles de lípidos. Es de utilidad para la extracción, se debe a la combinación de propiedades de transferencia de masa similares al gas y las características de solvatación similares a líquido con coeficientes de difusión mayor que aquellos de los solventes líquidos. Los constituyentes de aceite esencial extraído se someten a ensayo utilizando espectroscopia de masas-cromatografía de gases. Los 71 compuestos totales se han identificado del aceite de corteza de canela extraído por métodos C02 supercrítico . Junto a los congéneres del cinamaldehido principal, tales como benzaldehído (PI), cinamaldehido (PIO y P14), alcohol cinámico (P16), ácido trans-cinámico (P23), acetato de cinamilo (P25), otros compuestos menores que incluyen: 4 monoterpenos , 16 sesquiterpenos , 9 ácidos grasos y sus derivados, y 6 esteroides (P64 y P67—P71) también se han identificado. Los ácidos grasos y los esteroides no se han reportado previamente en el aceite de canela. Se encontró que el C02 supercritico es una herramienta excelente para purificar y describir las fracciones de aceite esenciales. El rendimiento de extracción de estas fracciones varia dependiendo de la temperatura de procesamiento, temperatura y solvente/relación de alimentación. El rendimiento de extracción más elevado fue 1.76 % por peso de masa a temperatura de 80°C y presión de 100—50 MPa (500 bares) con una relación de solvente/alimentación de 114. El aceite esencial de corteza de canela extraído sin purificar, las cuentas de cinamaldehído para 58%-69% por peso de masa de las fracciones purificadas. Se encontró que 20% de los compuestos esteroides en los extractos en las fracciones de extracto sólo pueden extraerse a temperaturas bajas de aproximadamente 40°C. La pureza elevada de los congéneros de cinamaldehído (mayor que 90%) pueden obtenerse a temperaturas elevadas de 60 — 90°C y presiones bajas de aproximadamente 100 bar. La presión y temperatura elevada son mejores para los compuestos de ácido graso de procesamiento y la pureza más elevada puede ser hasta ~ 10% en fracciones de extracto.

El aceite esencial de corteza de canela extraída sin purificar también puede fraccionarse por procesamiento de etapas múltiples incrementando la presión de procesamiento secuencialmente a temperatura fija. Los resultados se muestran en la Tabla 2. Se encontró que los compuestos principales de congéneros de cinamaldehído pueden describirse entre 67.1-93.1%. Otros compuestos menores, como sesquiterpeno pueden describirse entre 1.1-2.7%; el ácido graso puede describirse entre 0.9 -9.9 %; los esteroides pueden sólo extraerse a temperaturas de 40°C y pueden describirse entre 0.0-20.3% por % de peso en masa de la fracción (abundancia relativa) . La pureza más elevada del cinamaldehído puede ser hasta 91.13%, el cual es 76 veces mayor que aquel encontrado de ese en la materia prima de corteza de canela.

Tabla 2. Perfil de compuestos de aceite esencial de canela en extractos obtenidos en diferentes condiciones T = 40°C T = 60°C T = 80°C Etapa Etapa Etapa Etapa Etapa Etapa Etapa Etapa Etapa Etapa Compuestos 1 2 3 4 1 2 3 1 2 3 Congéneros de Cinamaldehído T7..3 88.0 83.3 67.1 93.1 86.2 74.7 90.7 88.9 74.1 Sesquiterpeno 1.4 1.5 2.1 2.1 2.7 1.7 2.0 1.1 1.1 3.5 Ácidos grasos y derivados de 0.9 2.5 6.6 9.9 0.9 5.9 8.6 1.0 4.1 7.8 esteroides 20.3 5,2 0.3 0.8 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 Fracción de ácido fenólico La actividad antioxidante de canela se relaciona con el contenido de constituyente químico de ácido fenólico. Los fitoquímicos antioxidantes específicos que se han identificado en la canela incluyen los siguientes ácidos fenólicos: epicatequina, camfeno, engenol, gamma-terpineno, fenol, ácido salicílico y tanino. Más recientemente, los científicos en el departamento Norteamericano de agricultura encontraron un tipo de flavonoide, procianidina tipo A extraída por agua que minimiza el efecto de insulina. Este compuesto potencializa la acción de insulina en adipositos aislados. Los estudios in vivo también mostraron que los extractos de agua de canela mejoran las acciones de insulina mediante el incremento del insumo de glucosa, en parte a través de mejorar la trayectoria de señalización de insulina en el músculo esquelético. El objeto de esta sección de la presente invención es purificar ácidos fenólicos removiendo ácidos taninos. Los ácidos fenólicos de interés debido a su actividad hipoglicémica son proantocianidinas . Las proantocianidinas son mezclas de oligomeros y polímeros que contienen unidades de ( + ) -catequina y/o (-) -epicatequina unidas a través de C4-C8 y/o enlaces C4-C6 (Tipo-B) . Estos flavon 3-oles también pueden ser unidos doblemente por un enlace C4-C8 y el enlace éter adicional entre el enlace C7-C2 (Tipo-A) . Debido a la falta de un estándar de referencia HPLC comercial disponible, el método de Folin-Ciocalteu se utilizó para analizar el contenido de ácido fenólico total y el método de fenólico de proteina-precipitable para análisis de contenido de ácido de tanino total. Los ácidos fenólicos individuales en los ácidos fenólicos totales se identifican en semi-cuantificados por espectrometría de masa de Análisis Directo en tiempo real (DART) . En la materia prima de corteza de canela, existe aproximadamente 4.87% de ácido fenólico, en el cual aproximadamente 2.27% es ácidos fenólicos no taninos y aproximadamente 2.61% ácidos taninos. Las condiciones de extracción de ácido fenólico total se optimizaron estudiando el efecto de solventes diferentes, temperaturas, valores de pH y proceso de fase múltiple. Se encontró que el etanol acuoso (25-75% de etanol) son solventes de extracción óptima. El rendimiento de extracción mayor se encontró aproximadamente 17.6% utilizando 25% de etanol como el solvente de extracción a una temperatura de 40°C utilizando dos etapas de procesamiento en el índice de alimentación de solvente de 10 y 15 respectivamente. Ningún cambio de valor de pH se necesitó durante el proceso. Las cuentecillas de dextrano de Sephadex LH-20 se encontraron ser un medio excelente para separar ácidos fenólicos no taninos de ácidos taninos. Los resultados se muestran en la Tabla 3. Se encontró que el ácido tanino se ha eliminado remarcablemente y el ácido fenólico no tanino se ha purificado hasta 100% (44 veces que en la materia prima) Tabla 3. Porcentaje de peso de fenólicos de canela que cambia durante el proceso sephadex LH-20 Alimentación B 1 -F3 B 1 -F4 B 1 -F5 B 1 -F6 B 1 -F7 B 1 -F8 Peso % Acidos fenólicos sin taninos 2.27 29.5 66.4 87.8 91.1 100 93.8 Ácidos taninos 2.61 0 0 0 0 0 0 Fracción de polisacáridos Se obtuvieron fracciones de polisacáridos-glicoproteinas de canela por extracción acuosa y 80% de precipitación de etanol. El rendimiento de las fracciones de los polisacáridos-glicoproteinas de canela purificadas fue aproximadamente 3.5%. La pureza del polisacárido de la canela fue 0.29-0.47 g de dextrano equivalente/g de polisacárido. (Se utilizó dextrano como referencia estándar debido a que no están disponibles los estándares de polisacáridos de canela) . El peso molecular promedio del polisacárido de canela fue ~2500 KDa . Se utilizó también una espectroscopia de masa AccuTOF-DART para caracterizar el polisacárido de canela, los resultados se muestran en las Figuras 6 y 7.

Extracciones Relativas a Especies Naturales de Canela Esta descripción comprende extracciones de fracciones aisladas y purificadas de aceites esenciales (o sub-fracciones de aceites esenciales) , ácidos polifenólicos y polisacáridos de una o más especies de canela. Estas fracciones individuales pueden combinarse en proporciones especificas (perfiles) para proporcionar combinaciones benéficas y pueden proporcionar productos de extractos confiables y reproducibles que no se encuentran en productos de extractos actualmente conocidos. Por ejemplo, una fracción o sub-fracción de aceites esenciales de especies puede combinarse con una fracción o sub-fracción de aceites esenciales de la misma o diferente especie o con una fracción de ácido polifenólico de la misma o diferente especie, y esa combinación puede o no combinarse con una fracción de polisacárido de la misma o diferente especie de canela . Las extracciones de la descripción pueden también definirse en términos de concentraciones relativas a aquellas encontradas en especies naturales de canela. Las modalidades también comprenden extracciones en donde una o más de las fracciones, incluyendo aceites esenciales, ácidos polifenólicos o polisacáridos se encuentran en una concentración que es mayor que aquella encontrada en material vegetal de especies de canela nativa. Las modalidades también comprenden extracciones en donde una o más de las fracciones, incluyendo aceites esenciales, polifenólicos o polisacáridos se encuentran en una concentración que es menor que aquella encontrada en especies nativas de canela. Cantidades conocidas de las fracciones de constituyentes químicos bio-activos de la especie de canela (Tabla 1) se encuentran como un ejemplo de la descripción. Por ejemplo, las extracciones de la descripción comprenden fracciones en donde la concentración de aceites esenciales de 0.001 a 50 veces la concentración de la especie nativa y/o las composiciones en donde la concentración de los ácidos polifenólicos deseados es de 0.001 a 50 veces la concentración de la especie de canela nativa, y/o las composiciones en donde la concentración de polisacáridos solubles en agua-insolubles en etanol es de 0.001 a 20 veces la concentración de especies nativas de canela. Las extracciones de la descripción comprenden fracciones en donde la concentración de aceites esenciales es de 0.01 a 50 veces la concentración de especies nativas de canela, y/o las composiciones en donde la concentración de ácidos fenólicos deseados es de 0.01 a 50 veces la concentración de especies nativas de canela, y/o las composiciones en donde la concentración de polisacáridos es de 0.01 a 20 veces la concentración de especies nativas de canela. Además, las extracciones de la descripción comprenden sub-fracciones de los constituyentes químicos de aceites esenciales que tienen por lo menos uno de los compuestos químicos presentes en el aceite esencial del material vegetal nativo que está en una cantidad mayor o menor que aquella encontrada en los constituyentes químicos del aceite esencial del material vegetal de canela nativa. Por ejemplo, el compuesto químico trans-cinamaldehído, puede tener su concentración incrementada en una sub-fracción de aceite esencial a 80% en % en peso de masa de la sub-fracción de su concentración del 60% en % en peso de masa de los constituyentes químicos del aceite esencial total en el material vegetal de canela nativa. En contraste, el trans-cinamaldehído puede tener su concentración reducida en una sub-fracción de aceite esencial en aproximadamente 60% en % en peso de masa de la sub-fracción de su concentración de aproximadamente 60% en % en peso de masa de los constituyentes químicos del aceite esencial total en el material vegetal nativo, una disminución de 10 veces en concentración. Las extracciones de la descripción comprenden fracciones en donde la concentración de compuestos químicos específicos en tales sub-fracciones de aceite esencial novedoso se incrementa ya sea por aproximadamente 1.1 a aproximadamente 10 veces o se disminuye por aproximadamente 0.1 a aproximadamente 10 veces esa concentración encontrada en los constituyentes químicos de aceite esencial de canela nativa. Las modalidades adicionales comprenden extracciones que comprenden perfiles alterados (distribución en proporción) de los constituyentes químicos de la especie de canela en relación con aquella encontrada en el material vegetal nativo o a productos de extractos de especies de canela actualmente disponibles. Por ejemplo, la fracción de aceite esencial puede incrementarse o disminuirse en relación con las concentraciones de ácidos polifenólicos y/o polisacáridos . Similarmente , los ácidos fenólicos o polisacáridos pueden incrementarse o disminuirse en relación con las otras fracciones de constituyentes de extractos para permitir las extracciones de perfil químico constituyente novedoso para efectos biológicos específicos. Al combinar las fracciones aisladas y purificadas de uno o más aceites esenciales, las extracciones de aceites esenciales, polifenólicos y/o polisacáridos pueden hacerse de manera que proporcionen combinaciones novedosas de aceites esenciales. Los métodos de la descripción comprenden proporcionar extracciones de canela novedosas para el tratamiento y la prevención de trastornos humanos. Por ejemplo, una extracción de una especie de canela para el tratamiento de diabetes mellitus de tipo 2 puede tener una concentración de una fracción polifenólica incrementada y concentraciones de una fracción de aceite esencial y polisacárido reducidas, en % en peso, que aquella encontrada en el material vegetal nativo de una especie de canela o productos de extracción conocidos, convencionales. Una extracción de una especie de canela novedosa para antioxidante, daño contra vasos sanguíneos y enfermedad cerebrovascular isquémica pueden tener una fracción de aceite esencial y ácido polifenólico incrementada y una fracción de polisacárido reducida, en % en peso, que aquella encontrada en el material vegetal de especie de canela nativa o productos de extracción conocidos convencionales. Otro ejemplo de una extracción de especie de canela novedosa, para el tratamiento de trastornos alérgicos comprende una fracción que tiene una concentración de una fracción polifenólica incrementada, una fracción de polisacárido incrementada, y una fracción de aceite esencial reducida que aquella encontrada en un material vegetal de especie de canela nativa o en productos de extracción convencionales conocidos.

Métodos de Extracción Los siguientes métodos como se enseña pueden utilizarse individualmente o en combinación con el método o métodos descritos por aquellos expertos en la técnica. El material de partida para la extracción es material vegetal de una o más especies de canela. El material vegetal puede ser cualquier porción de la planta, aunque la corteza es el material de partida más preferido. El material vegetal de la especie de canela puede experimentar etapas de pre-extracción para suministrar el material en cualquier forma particular, y se contempla por la descripción de cualquier forma que sea útil para la extracción. Tales etapas de pre-extracción incluyen, pero no se limitan a aquella en donde el material se pica en trozos, se desmenuza, se desfibra, se muele, se pulveriza, se corta o se deshoja, y el material de partida, antes de las etapas de pre-extracción, es un material vegetal seco o fresco. Una etapa de pre-extracción comprende moler y/o pulverizar el material de corteza de la especie de canela en un polvo fino. El material de partida o el material después de las etapas de pre-extracción puede secarse o haber agregado humedad a éste. Una vez que el material vegetal de la especie de canela está en una forma para extracción, los métodos de extracción se contemplan por la descripción . Los métodos de extracción de la descripción comprenden procesos descritos en la presente. En general, los métodos de la descripción comprenden, en parte, métodos en donde el material vegetal de la especie de canela se extrae utilizando una extracción de fluido super-critico (SFE) con dióxido de carbono como el solvente (SCC02) que es seguido por una o más etapas de extracción de solvente, 5 tal como, pero sin limitarse a agua, extractos hidroalcohólicos y procesos de extracción adsorbentes de polímero por afinidad. Otros métodos adicionales contemplados para la descripción comprenden la extracción de un material vegetal de la especie de canela utilizando otros solventes orgánicos, químicos refrigerantes, gases comprimibles, sonificación, extracción líquida de presión, cromatografía de contracorriente a alta velocidad, polímeros impresos molecularmente, y otros métodos de extracción conocidos. Tales técnicas se conocen por aquellos expertos en la técnica. En un aspecto, las extracciones de la descripción pueden prepararse por un método que comprende las etapas descritas esquemáticamente en las Figuras 1-5. La descripción incluye procesos para concentrar (purificar) y perfilar el aceite esencial y otros compuestos solubles lípidos a partir del material vegetal de la canela utilizando tecnología de SCCC . La descripción "> ' incluye el fraccionamiento de los constituyentes químicos solubles lípidos de la canela en, por ejemplo, una fracción de aceite esencial de alta pureza (concentración elevada del constituyente químico de aceite esencial) . Además, la descripción incluye un proceso de SCC02 en donde los constituyentes químicos individuales dentro de una fracción de extracción pueden tener sus proporciones o perfiles del constituyente químico alterados. Por ejemplo, la separación fraccional del SCCO? de los constituyente químicos dentro de una fracción de aceite esencial permite la extracción preferencial de ciertos compuestos de aceite esencial con relación a los otros compuestos de aceite esencial de manera que una sub-fracción de extracto de aceite esencial puede producirse con una concentración de ciertos compuestos mayor que la concentración de otros compuestos. La extracción de los constituyentes químicos de aceite esencial de la especie de canela con SCC02 como se enseña en la descripción elimina el uso de solventes orgánicos tóxicos y proporciona el fraccionamiento simultáneo de los extractos. El dióxido de carbono es un producto biológico natural y seguro y un ingrediente en muchos alimentos y bebidas . Al realizar los métodos de extracción previamente descritos, se encontró que un rendimiento mayor de 80% en peso de masa de los constituyentes químicos de aceite esencial que tienen una pureza mayor de 95% de los constituyentes químicos de aceite esencial en la materia prima de corteza de canela seca original de la especie de canela puede extraerse en la fracción de extracto de SCCO2 de aceite esencial (Etapa 1A) . Utilizar los métodos como se enseña en la Etapa IB (Extracción de SCC02 y los Procesos de Fraccionamiento), se redujo el rendimiento de aceite esencial debido al fraccionamiento de los constituyentes químicos de aceite esencial en sub-fracciones de aceite esencial altamente purificado (>90%). Además, la extracción de SCCO2 y el proceso de fraccionamiento como se enseña en esta descripción permite las proporciones (perfiles) de los compuestos químicos individuales que comprenden que la fracción del constituyente químico de aceite esencial se altere de manera que los perfiles de sub-fracción de aceite esencial únicos puedan crearse para propósitos medicinales particulares. Por ejemplo, la concentración de los constituyentes químicos de aceite esencial esteroides puede incrementarse mientras se reduce al mismo tiempo la concentración de compuestos de ácido graso o viceversa. Al utilizar los métodos, como se enseña en la Etapa 2 de esta descripción, una fracción soluble en agua se logra con un rendimiento del 4.8% en peso de masa de la materia prima de la especie de canela original que tiene una concentración de 26.0% de ácidos fenólicos totales, un rendimiento de aproximadamente 10% en peso de masa de los constituyentes químicos de ácido fenólico encontrados en la materia prima de corteza de canela nativa. Sin embargo, este extracto de solvente acuoso no contiene constituyentes químicos de polisacáridos soluble en agua-insolubles en etanol . Además, esta etapa de extracción logra aproximadamente 100% de rendimiento de los polisacáridos solubles en agua, insolubles en etanol encontrados en el material vegetal de la especie de canela nativa. La concentración de polisacáridos en esta fracción de extracción soluble en agua es aproximadamente 27% en % en peso de la masa seca en esta fracción de extracto soluble en agua. Al utilizar 95% de etanol para precipitar los polisacáridos, una fracción de polisacáridos purificados puede recolectarse de este extracto de lixiviación acuosa. El rendimiento de la fracción de polisacáridos es aproximadamente 1.3% en % en peso de masa con base en la materia prima del rizoma de canela. Con base en un método analítico colorimétrico utilizando dextrano como estándares de referencia, una pureza de >95% de compuestos de polisacáridos de canela puede obtenerse. Al utilizar los métodos como se enseña en la Etapa 3 de esta descripción, se logra una fracción de lixiviación hidroalcohólica con un rendimiento de 17.6% de la materia prima de la especie de canela original que tiene una concentración del 64% de ácidos fenólicos, aproximadamente 1/3 de los ácidos fenólicos que son taninos no bioactivos. Esto además equivale aproximadamente a un rendimiento del 90% del ácido fenólico con relación a los constituyentes químicos encontrados en el material vegetal de la especie de canela nativa. Al utilizar los métodos como se enseña en la Etapa 4 de esta descripción (Procesos de Extracción Adsorbente por Afinidad o Cromatografía de Proceso) , las fracciones del ácido polifenólico con purezas mayores de 95% en % de masa seca de la fracción de extracción con menos del 0.1% de taninos en % en peso de masa puede obtenerse. Es posible extraer aproximadamente 77% de los ácidos fenólicos sin taninos de la materia prima del extracto de lixiviación hidroalcohólico . Esto equivalente a un rendimiento del 69% de los constituyentes químicos de ácido fenólico encontrados en el material vegetal de la especie de canela nativa. Con base en el grado promedio de polimerización, las fracciones polifenólicas purificadas se hacen en gran medida de los oligómeros polifenólicos bioactivos benéficos. Además, es posible perfilar los constituyentes químicos polifenólicos de las fracciones polifenólicas purificadas. Por ejemplo, las sub-fracciones polifenólicas purificadas pueden obtenerse conteniendo una concentración elevada de trímeros y tetrámeros polifenólicos . Tales sub-fracciones polifenólicas purificadas novedosas pueden tener mayor valor para condiciones médicas específicas.

Finalmente, los métodos como se enseña en la descripción permiten la purificación (concentración) de las fracciones de constituyentes químicos de aceite esencial de la especie de canela, fracciones o sub-fracciones polifenólicas novedosas, y una fracción de polisacáridos novedosa que es tan alta como 99% en peso de masa de los constituyentes químicos deseados en las fracciones de aceite esencial, tan alta como 97% en peso de masa en la fracción fenólica polifenólica , y tan alta como 98% en peso de masa en la fracción de polisacárido . Los ambientes de extracción específicos, índices de extracción, solventes y tecnología de extracción utilizada dependen del perfil de constituyente químico de partida del material básico y el nivel de purificación deseado en los productos de extracción finales. Métodos específicos como se enseña en la descripción pueden determinarse fácilmente por aquellos expertos en la técnica utilizando no más que la experimentación de rutina típica para ajusfar un proceso que tiene en cuenta variaciones de la muestra en los atributos de los materiales de partida que se procesa a un material de extracción que tiene atributos específicos. Por ejemplo, en un lote particular del material vegetal de la especie de canela, las concentraciones iniciales de los constituyente químicos del aceite esencial, los ácidos polifenólicos y los polisacáridos se determinan utilizando métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica como se enseña en la descripción. Un experto en la técnica puede determinar la cantidad de cambio desde la concentración inicial de los constituyentes químicos de aceite esencial, por ejemplo, a las cantidades predeterminadas o distribución (perfil) de los constituyentes químicos de aceite esencial para el producto de extracción final utilizando los métodos de extracción, como se describe en la presente, para alcanzar la concentración deseada y/o el perfil químico en el producto de extracción de la especie de canela final. Un diagrama esquemático de los métodos de extracción de los constituyentes químicos biológicamente activos de la canela se ilustran en las Figuras 1-5. El proceso de extracción es típicamente, pero no se limitan a 4 etapas.

Etapa 1: Extracción de Fluido Supercrítico con Dióxido de Carbono del Aceite Esencial de Canela Debido a la naturaleza hidrofóbica del aceite esencial, los solventes no polares, incluyendo, pero sin limitarse a SCC02, hexano, éter de petróleo y acetato de etilo pueden utilizarse para este proceso de extracción. Ya que algunos de los componentes del aceite esencial son volátiles, la destilación del vapor puede también utilizarse como un proceso de extracción. Una descripción generalizada de la extracción de los constituyentes químicos del aceite esencial a partir de la corteza de la especie de canela que utiliza SCCO2 se representa gráficamente en la Figura 2-Etapa 2A y 2B. La materia prima 10 es corteza de canela molida seca (aproximadamente malla 140) . El solvente 210 de extracción es dióxido de carbono puro. Puede utilizarse etanol como un co-solvente. La materia prima se carga en un recipiente 20 de extracción de SFE. Después de la prueba de purga y de filtración, el proceso comprende C02 licuado que fluye desde un recipiente de almacenamiento a través de un enfriador a una bomba de C02. El C02 está comprimido a la presión deseada y fluye a través de la materia prima en el recipiente de extracción en donde la presión y la temperatura se mantienen en el nivel deseado. Las presiones para el intervalo de extracción de aproximadamente 6 MPa a 80 MPa (60 bares a 800 bares) y los intervalos de temperatura de aproximadamente 35°C a aproximadamente 90°C. Las extracciones de SCCO2 explicadas en la presente se realizan de preferencia a presiones de por lo menos 10 MPa (100 bares) y a una temperatura de por lo menos 35°C, y más preferiblemente en una presión de aproximadamente 6 MPa a 50 Mpa (60 bares a 500 bares) y a una temperatura de aproximadamente 40°C a aproximadamente 80°C. El tiempo para extracción para una etapa sencilla del intervalo de extracción de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 2.5 horas, a aproximadamente 1 hora. El solvente en una relación de alimentación es típicamente alrededor de 60 a 1 para cada una de las extracciones de SCC02. El CC se recicla. Los constituyentes 30 químicos del aceite esencial extraído, purificado y perfilado se recolectan entonces a un recolector o separador, conservado en una botella de vidrio protegida de la luz, y se almacenan en un refrigerador oscuro a 4°C. La materia prima 10 de canela puede extraerse en un proceso de una etapa (Figura 2, Etapa 2A) en donde la fracción 30 de aceite esencial de canela extraída y purificada resultante se recolecta en un sistema 20 de recolección de SFE o SCCO? o en múltiples etapas (Figura 2, Etapa 2B) en donde las sub-fracciones 50, 60, 70, 80 de aceite esencial de canela purificadas y perfiladas extraídas se recolectan separada y secuencialmente en un sistema 20 de SFE de recolección. Alternativamente, como en el sistema SFE fraccional, la materia prima de canela extraída de SCC02 puede segregarse en recipientes recolectores (separadores) de manera que dentro de cada recolector existe un diferente porcentaje relativo de la fracción del constituyente químico del aceite esencial (perfil) en cada unas de las sub-fracciones del aceite esencial purificado recolectadas. El residuo (remanente) 40 se recolecta, se conserva y se utiliza para procesamiento adicional para obtener fracciones purificadas de los ácidos fenólico y polisacáridos de la especie de canela. Una modalidad de la descripción comprende extraer la materia prima de la especie de canela utilizando una extracción de SCCO2 de etapa múltiple en una presión de 6 Pa a 50 Mpa (60 bares a 500 bares) y a una temperatura entre 35°C y 90°C y recolectando el material de canela extraído después de cada etapa. Una segunda modalidad de la descripción comprende extraer la materia prima de la especie de canela utilizando la extracción de SCC02 en fraccionamiento a presiones de 6 MPa a 50 Mpa (60 bares a 500 bares) y a una temperatura entre 35°C y 90°C y recolectando el material de canela extraído en diferentes recipientes recolectores en condiciones predeterminadas (presión, temperatura y densidad) e intervalos predeterminados (tiempo) . Las sub-fracciones de aceite esencial purificado de canela extraída resultantes de cada uno de los extractores de etapa múltiple o en diferentes recipientes recolectores (sistema fraccional) pueden recuperarse o utilizarse independientemente o pueden combinarse para formar una o más fracciones de aceite esencial de canela que comprenden una concentración del constituyente químico de aceite esencial predeterminado que es mayor o menor que aquella encontrada en el material vegetal nativo o en los productos de extracción de canela convencionales. Típicamente, el rendimiento total de la fracción de aceite esencial de la especie de canela utilizando una extracción de SCC02 máxima de etapa sencilla es aproximadamente 0.4 a aproximadamente 1.8% (>85% de los constituyentes químicos de aceite esencial) en % en peso que tiene una pureza del constituyente químico del aceite esencial mayor del 95% en peso de masa del extracto. Los resultados de tales procesos de extracción se encuentran posteriormente y en la Tabla 4. El procedimiento puede encontrarse en el Ejemplo 1.

Tabla 4. Análisis de HPLC de la extracción del aceite esencial de canela de SFE de una sola etapa.

Estos resultados demuestran el efecto de presión en la cinética de extracción. Las presiones de extracción más altas resultan en el sistema alcanzando un equilibrio en tiempos más cortos con menos cantidad de C02 consumida. El rendimiento de extracción total se incrementa con una presión de extracción creciente debido al incremento de densidad asociado con el incremento de presión. Curiosamente, a presiones más bajas tales como 100-30 Pa (300 bares) , entre más baja la temperatura, más elevado el rendimiento de nuevo con relación a una densidad más elevada. A presiones más elevadas, tales como 300-50 MPa (500 bares), la temperatura tiene un efecto mucho menor del rendimiento de extracción. Aunque un rendimiento más alto y una eficiencia mayor de la extracción pueden lograrse con presiones mayores de 20 MPa (200 bares), 95% de pureza de los constituyentes químicos del aceite esencial puede lograrse con presiones menores de 30 MPa (300 bares) y temperaturas de aproximadamente 40-80°C. En el margen de experimento investigado, puede observarse claramente que existe un efecto de competición entre la temperatura y la densidad. Este aspecto se define y documenta bien en la literatura, en donde un incremento en la presión, a temperatura constante, conduce a un incremento en el rendimiento debido a la mejora en el poder de solvencia del fluido supercrítico y casi crítico. Un incremento en la temperatura promueve una mejora en la presión de vapor de los compuestos que favorecen la extracción. Adicionalmente, el incremento en el coeficiente de difusión y la disminución en la viscosidad del solvente ayuda también a la extracción de compuestos a partir de la matriz porosa herbácea cuando la temperatura se incrementa a un valor más alto. Por otro lado, un incremento en la temperatura, en una presión constante del sistema conduce a una disminución en la densidad del solvente. Setenta y uno compuestos se separaron e identificaron en el aceite esencial de corteza de canela utilizando análisis GC-MS . Al comparar los datos espectrales de masa de la muestra con los datos en la literatura científica, se identificaron cinamaldehído, la coumarina y el acetato de cinamilo. (Tablas 3 y 4) Además del cinamaldehído y sus congéneres tales como benzaldehído (Pl), cinamaldehído (PIO y P14), alcohol cinamílico (P16), ácido trans-cinámico (P23) y acetato de cinamilo (P25), se identificaron 4 monoterpenos (P6, P8 y P9), 16 sesquiterpenos (P20-22, P26, P29, P31-2, P35-42 y P46) y 9 ácidos grasos y derivados de ácidos grasos. Otros compuestos aromáticos y alifáticos menores se presentaron también. De los compuestos identificados, SFE fue capaz de extraer ácidos grasos y compuestos esferoides que no habían sido identificados previamente en el aceite esencial de canela. Estos compuestos constituyen aproximadamente 90% de los constituyentes químicos del aceite esencial en % en peso de masa. El cinamaldehído es el mayor constituyente químico del aceite esencial de canela en aproximadamente 70-91% en % en peso de masa. Un gran número de compuestos se identificaron de las extracciones bajo las condiciones de 40°C y 12 MPa (120 bares) con una pureza más alta de aproximadamente 100% que en las condiciones de extracción de SFE de temperaturas y presiones más altas. La pureza del cinamaldehído de más del 90% en peso de masa se logró con temperaturas de SFE de 60°C y 10 MPa (100 bares) con una pérdida de compuestos esteroides y un ácido graso inferior y una pureza de sesquiterpeno . Los compuestos esteroides pueden únicamente extraerse a una temperatura baja de 40°C. A una temperatura de SFE de 40°C y 8 MPa (80 bares), la pureza del constituyente químico del compuesto esteroide fue tan alta como 20% en peso de masa. En contraste, las temperaturas de SFE más altas (60-80°C) y las presiones (50 MPa (500 bares) favorecen la extracción de los compuestos de ácido graso. Estos datos indican que el SCCO2 tiene la capacidad para perfilar los constituyentes químicos del aceite esencial de canela.

Tabla 5. Compuestos Identificados en la Fracción de Aceite Esencial de Canela.

ID Tiempo Compuesto CAS# Fórmula Mw Estructura de pico retención (minutos) P1 7.2 Benzaldehído 100-52-7 C7H60 106 rO P2 9.9 Bencenacetaldehído 122-78-1 C8H80 120 P3 10.6 Acetofertona 98-86-2 C8H80 120 P4 10.8 Benzoilcarboxaldehído 1074-12-0 C8H602 134 P5 14.1 Bencenpropanal 104-53-0 C9H10O 134 ß 14.3 Borneol 507-70-0 C10H18O 154 P7 14.T Benzofuran, 2-metil- 4265-25-2 C9H80 132 P8 14.7 1 -Terpinen-4-ol 562-74-3 C10H18O 154 P9 15.2 a -Terpieol 10482-56-1 C10H18O 154 P10 16.1 Cinamilaldehído 104-55-2 C9H80 132 P11 16.5 Bencenpropanol 122-97-4 C9H120 136 P12 16.8 Ácido benzoilfórmico 611-73-4 C8H603 150 Benceno, 1 ,3-bis(1 ,1 - P13 17.5 dimetiletil)- 1014-60-4 C14H22 190 P14 18.4 Cinamaldehído, (E)- 14371-10-9 C9H80 132 P15 18.8 Ácido acético, 92618-89-8 C12H20O2 196 borniléster P16 19.5 Alcohol chamilico 104-54-1 C9H10O 134 P17 20.0 2,4-Decadienal 2363-88-4 C10H16O 152 P18 20.5 2,4-dimetil-1 -heptanol 18450-74-3 C9H20O 1 4 Megastigam- P19 22.0 4,6(E),8(E)-trieno 51468-86-1 C13H20 176 P20 23.6 Copaeno 3856-25-5 C15H24 204 ¿a 1 ,3,6.10- Dodecatetraeno, > P21 26.3 3,7,1 1 -trimetil-, (Z,E)- 26560-14-5 C15H24 204 A- P22 26.6 Beta-cariofileno 87-44-5 C15H24 204 P23 26.9 ácido trans-Cinámico 140-10-3 C9H802 148 P24 27.4 Coumarina 91-64-5 C9H602 146 ,»*·>,- ·· P25 28.5 acetato de Cinamilo 103-54-8 C11H1202 176 P26 34.0 CJ -Muroleno 31983-22-9 C15H24 204 l'- ( 3-(fenilmetoxi)-1 - P27 34.2 propanol 4799-68-2 C10H14O2 166 Fenol, 3,5-bis(1 ,1 - r P28 35.0 dimetiletil)- 1138-52-9 C1 H220 206 .

P29 35.7 (-)-Calameneno 483-77-2 C15H22 202 Cinamaldehído, P30 35.9 o-metoxi- 1504-74-1 C10H10O2 162 butiléster Ácido octadecanoico, ?ß? 63.8 butiléster 123-95-5 C22H4402 340 ?61 64.1 Heneicosano 629-94-7 C12H44 296 Ácido bencenpropanoico, 10-oxotriciclo[4.2.1 .1 (2,5)]deca-3,7- ?62 64.9 dieniléster 0-00-0 C19H1803 294 Ciclopentanmetanol, 2-nitro-.alfa.-(2- feniletenil)-, [1 .alfa.(S@),2. 103130-01- C14H17NO ?63 66.0 alfa.]- 4 3 247 7,22-Ergostadienol ?64 C28H460 398 ?65 67.7 desconocido Ácido 1 ,2- bencendicarboxílico, ?ßß 68.6 diisooctiléster 27554-26-3 C24H3804 390 . ;"\--'" ?67 68.7 .beta.-Sitosterol 83-46-5 C29H50O 414 Ergosta-7, 22-dien-3-ol, ?68 70.6 (3.beta.,22E)- 17608-76-3 C28H460 398 4,4,6a,6b,8a,1 1 ,1 1 , 14b-Octametil-1 ,4, 4a,5,6,6a,6b,7,8, 8a, 9,10,1 1 ,12,12a, 14,14a, 14b-octadecahidro- ?69 72.6 2H-picen-3-ona C30H48O 424 Ergosta-7,22-dien-3-ol, ?70 74.4 (3.beta.,5. alfa., 22E)- 11/4/2645 C28H460 398 ?71 76.9 Condrilastsrol 481-17-4 C29H480 412 Tabla 6. Área del pico del análisis GC-MS, porcentaje de área del pico y porcentaje de peso calculado del aceite esencial de corteza de canela extraído en diferentes condiciones .

T = 40 °C, P = 300 bar T = 80 °C, P = 100 bar T = 80 eC, P = 300 bar Tiempo de % de % de % de No. de retención área del % en área del % en área del % en Pico (minutos) área del pico pico peso área del pico pico peso área del pico pico peso P1 7.201 ' 107275 0.03 0.03 3572872 0.57 0.57 161232 0.04 0.04 P2 9.866 239555 0.04 0.04 P3 10.649 94664 0.02 0.02 P4 10.822 275862 0.04 0.04 P5 14.054 29489 0.01 0.01 160992 0.04 0.04 P6 1 .282 358823 0.1 1 0.1 1 386330 0.09 0.09 P7 14.563 374620 0.12 0.12 432491 0.1 0.1 P8 14.692 400042 0.12 0.12 413562 0.1 0.1 P9 15.153 683952 0.21 0.21 200566 0.03 0.03 890990 0.21 0.21 P10 16.112 1672873 0.51 0.51 4210512 0.67 0.67 1090882 0.26 0.26 P1 1 16.528 98413 0.03 0.03 305036 0.05 0.05 264483 0.06 0.06 P12 16.848 138317 0.02 0.02 P13 17.471 314610 0.1 0.1 451375 0.07 0.07 244719 0.06 0.06 P14 18.388 228756437 70.29 70.29 560967679 89.76 89.76 358267571 86.02 86.02 P15 18.798 804095 0.25 0.25 680662 0.16 0.16 P16 19.499 1329676 0.41 0.41 3744998 0.6 0.6 3918089 0.94 0.94 P17 20.038 189718 0.06 0.06 215682 0.03 0.03 156726 0.04 0.04 P18 20.494 86462 0.03 0.03 60887 0.01 0.01 P19 21 .954 176284 0.05 0.05 165025 0.03 0.03 205784 0.05 0.05 P20 23.566 2473168 0.76 0.76 1468434 0.35 0.35 P21 26.287 137651 0.04 0.04 206073 0.05 0.05 P22 26.592 367241 0.1 1 0.1 1 802082 0.19 0.19 P23 26.908 339296 0.08 0.08 P24 27.432 15068316 4.63 4.63 23526861 3.77 3.77 25045782 6.01 6.01 P25 28.466 3071028 0.94 0,94 12812414 2.05 2.05 4063398 0.98 0.98 P26 33.953 387927 0.12 0.12 281914 0.05 0.05 55381 1 0.13 0.13 P27 34.237 281619 0.05 0.05 P28 35.035 1 1 1608 0.03 0.03 85138 0.02 0.02 P29 35.674 158637 0.05 0.05 55 592 0.09 0.09 290965 0.07 0.07 P30 35.881 1 19357 0.04 0.04 422786 0.07 0.07 486137 0.12 0.12 P31 36.356 72181 0.02 0.02 1 18059 0.03 0.03 P32 39.334 335593 0.1 0.1 1272069 0.2 0.2 460812 0.1 1 0.1 1 P33 40.650 49352 0.02 0.02 P34 41.464 83100 0.03 0.03 246325 0.06 0.06 P35 41 .750 176194 0.05 0.05 924151 0.15 0.15 3549H 0.09 0.09 P36 42.087 181715 0.06 0.06 160919 0.03 0.03 245345 0.06 0.06 P37 42.390 93210 0.03 0.03 629354 0.1 0.1 P38 42.586 31 1094 0.05 0.05 86504 0.02 0.02 P39 42.927 331623 0.05 0.05 1 17555 0.03 0.03 P40 43.140 165961 0.05 0.05 795638 0.13 0.13 469680 0.11 0.1 1 P41 43.339 279943 0.04 0.04 154116 0.04 0.04 P42 43.672 144713 0.02 0.02 85123 0.02 0.02 P43 43.789 125052 0.02 0.02 P44 78201 0.02 0.02 P45 44.739 153149 0.05 0.05 861436 0.14 0.14 205244 0.05 0.05 P46 47.604 232837 0.04 0.04 P47 48.648 86340 0.03 0.03 201 161 0.03 0.03 158427 0.04 0.04 P48 49.657 100070 0.03 0.03 104638 0.03 0.03 P49 51 .066 104471 0.03 0.03 819892 0.13 0.13 494453 0.12 0.12 P50 52.420 106293 0.02 0.02 P51 52.609 102916 0.02 0.02 P52 53.430 132985 0.04 0.04 930693 0.15 0.15 1910179 0.46 0.46 P53 55.979 460792 0.07 0.07 455416 0.1 1 0.1 1 P54 56.61 1 287130 0.05 0.05 360772 0.09 0.09 P55 57.895 1058073 0.25 0.25 P56 57.997 1451917 0.35 0.35 P57 58. 195 189737 0.06 0.06 123292 0.02 0.02 1 178268 0.28 0.28 P58 58.550 678103 0.16 0.16 P59 59.1 12 932215 0.29 0.29 850903 0.14 0.14 999986 0.24 0.24 P60 63.761 1876786 0.58 0.58 1 38157 0.35 0.35 P61 64.109 146342 0.04 0.04 P62 64.927 327089 0.08 0.08 P63 66.005 619225 0.15 0.15 P64 67.234 9979848 3.07 3.07 P65 67.746 68066 0.02 0.02 P66 68.642 152882 0.04 0.04 P67 68.651 6629886 2.04 2.04 P68 70.645 16769518 5.15 5.15 P69 72.590 10386507 3.19 3.19 P70 74.399 10804061 3.32 3.32 P71 76.879 8686165 2.67 2.67 total 325266746.0 100.0 100.0 62241 1230.0 99.6 99.6 414900 1 .0 99.6 99.6 congéneres de cinamaldehído 234937289.0 72.2 72.2 585308475.0 93.7 93.7 367840468.0 88.3 88.3 compuestos aromáticos 251223142.0 77.2 77.2 61 1370763.0 97.8 97.8 395724862.0 95.0 95.0 nomoterpeno 1442817.0 0.4 0.4 200566.0 0.0 0.0 1690882.0 0.4 0.4 sesquiterpeno 4390841.0 1.3 1.3 5364255.0 0.9 0.9 5122535.0 1.2 1.2 ácido graso y sus derivados 3489413.0 1 .1 1.1 4543347.0 0.7 0.7 10481548.0 2.5 2.5 esferoides 63255985.0 19.4 19.4 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 Nota: Se calcularon los % en peso en: % en peso = (peso de cada compuesto/peso total de extractos) x 100 en donde el peso de cada compuesto = porcentaje de área del pico x peso total de extractos.

Etapa 2. Proceso de Lixiviación Acuosa y Precipitación de Polisacáridos La fracción de extracción de polisacáridos de los constituyentes químicos de la especie de canela se ha definido en la literatura científica como la "fracción de extracción soluble en agua, insoluble en etanol". Una descripción generalizada de la extracción de la fracción de polisacáridos a partir de extractos de especies de canela utilizando lixiviación de solvente acuoso y procesos de precipitación de etanol se representa gráficamente en la Figura 3-Etapa 2. La materia prima 10 ó 40 es un material vegetal de la especie de canela molida nativa o el residuo sólido del proceso de extracción de SFE de la Etapa 1. Esta materia prima es una lixiviación extraída en dos etapas. El solvente es agua 220 destilada. En este método, la materia prima 10 ó 40 de especie de canela y el solvente 220 de extracción se cargan en un recipiente 100, 110 de extracción y se calientan y se agitan. Puede calentarse a 100°C, a aproximadamente 80°C o a aproximadamente 80-90°C. La extracción se lleva a cabo durante aproximadamente 1-5 horas, durante aproximadamente 2-4 horas, o durante aproximadamente 2 horas. Las soluciones 300+320 de extracción de dos etapas se combinan y la suspensión se filtra 120, se centrifuga 130 y el sobrenadante se recolecta y se evapora 140 para remover agua hasta un incremento de aproximadamente 8 veces en la concentración de los químicos en la solución 330. El etanol 230 anhidro se utiliza entonces para reconstituir el volumen original de la solución haciendo la concentración final de etanol a 95%. Se observa un precipitado 150 grande. La solución se centrifuga 160, se decanta 170 y el residuo 340 sobrenadante puede conservarse para procesamiento adicional. El producto 350 precipitado es la fracción de polisacárido purificada que puede analizarse para polisacáridos utilizando el método colorimétrico utilizando Dextrano de un peso molecular de 5,000-410,000 como estándares de referencia. El procedimiento actual puede encontrarse en el Ejemplo 3. La pureza de la fracción de polisacárido extraído utilizando dextrano de 3 diferentes pesos moleculares como estándares es aproximadamente 29, 35 y 47%, respectivamente, con un rendimiento total de 1.3% en % en peso de masa de la materia prima de corteza de canela nativa, original. Combinar las medidas de pureza de los 3 estándares de dextrano indica un nivel muy alto de pureza mayor del 95%. Además, la espectrometría de masa AccuTOF-DART (véase la sección de Ej emplificación) se utilizó para perfilar además los pesos moleculares de los compuestos que comprenden la fracción de polisacáridos purificados. El procedimiento actual puede encontrarse en la sección de Ej emplificación .

ETAPA 3. Proceso de Lixiviación Hidroalcohólico para la Extracción de Fracción de Ácido Polífenólico Sin Purificar En un aspecto, la descripción comprende la extracción y la concentración de los constituyentes químicos de ácido polífenólico bio-activos. Una descripción generalizada de esta etapa se representa gráficamente en la Figura 4 - ETAPA 3. Este proceso de extracción de la Etapa 2 es un proceso de lixiviación del solvente. La materia prima para esta extracción es ya sea un material 10 de corteza seca molida de la especie de canela o el residuo 40 ó 330+340 de la extracción de SCC02 de la Etapa 1 de los constituyentes químicos de aceite esencial o la extracción-precipitación de polisacáridos de la Etapa 2, respectivamente. El solvente 240 de extracción es etanol acuoso. El solvente de extracción puede ser 10-95% de alcohol acuoso, se prefiere 25% de etanol acuoso. En este método, la materia prima de canela y el solvente de extracción se cargan en un recipiente 400 de extracción que se calienta y se agita. Puede calentarse a 100°C, a aproximadamente 90 °C, a aproximadamente 80 °C, a aproximadamente 70 °C, a aproximadamente 60 °C o a aproximadamente 30-50°C. La extracción se lleva a cabo durante aproximadamente 1-10 horas, durante aproximadamente 1-5 horas, durante aproximadamente 2 horas. La solución del extracto resultante se filtra 410 y se centrifuga 420. El filtrado (sobrenadante) 500, 520, 540 se recolecta como un producto, se mide para el volumen y masa seca de contenido sólidos después de la evaporación del solvente. El material 530 residual de extracción puede retenerse y conservarse para procesamiento adicional o se desecha. La extracción puede repetirse tantas veces como sea necesario o se desee. Puede repetirse 2 o más veces, 3 o más veces, 4 o más veces, etc. Por ejemplo, la Figura 1 - ETAPA 2 muestra un proceso de tres etapas, en donde la segunda etapa y la tercera etapa utilizan los mismos métodos y condiciones. Curiosamente, se extrajo el cinamaldehído residual con este proceso de extracción de lixiviación hidroalcohólica indicando que no todos los constituyentes químicos de aceite esencial se extrajeron con extracción relativamente exhaustiva utilizando las condiciones de SFE anteriores. Además, una cantidad significativa de taninos se extrajo constituyendo más de 20% del producto de extracción. Además, se prefiere un proceso de lixiviación hidroalcohólico de dos etapas para lograr un rendimiento de extracción elevado de polifenólicos (aproximadamente 18% en peso de masa con base en la materia prima) con una concentración de ácido fenólico total de aproximadamente 64% en peso de masa y una concentración de ácido tánico de aproximadamente 20% en peso de masa. Con el fin de desarrollar una fracción polifenólica purificada que contiene una concentración elevada de polifenólicos bioactivos, una etapa de procesamiento adicional (Etapa 4) se requiere para remover los taninos de la fracción polifenólica de la Etapa 3 sin purificar.

ETAPA 4. Extracción Polifenólica Adsorbente por Afinidad y Proceso de Purificación Los ácidos polifenólicos bioactivos benéficos son proantocianidinas . Las proantocianidinas se conocen como taninos condensados. Son ubicuas y se presentan como los segundos polifenólicos de plantas naturales más abundantes después de las ligninas. Dubois M et al. Analytical Chem 28:350-356, 1956. Las proantocianidinas son mezclas de oligómeros y polímeros que consisten de unidades de (+)-catequina y/o ( - ) -epicatequina enlazadas principalmente a través de uniones C4-C8 y/o C4-C6 (tipo B) . Estos flavan-3-oles pueden enlazarse de forma doble por una unión de C4-C8 y una unión de éter adicional entre 07-C2 (tipo A) . El peso molecular de las proantocianidinas expresado como grado de polimerización (DPn) es una de las propiedades más importantes. Como se define en la literatura científica, DPI es un monómero, DP2-10 son oligómeros, y DP>10 son polímeros, respectivamente. En la literatura biomédica tocante a los polifenólicos de canela (véase anteriormente) , DP 4-5 (oligómero) exhiben la actividad biológica médicamente benéfica. Por lo tanto, en el procesamiento en la Etapa 4, la remoción de tanino y extracción y purificación de proantocianidina se ha estudiando rastreando la concentración de ácido fenólico total y DPn en cada etapa del procesamiento. Como se enseña en la presente, el extracto de la fracción del ácido fenólico purificado de la canela y de especies relacionadas puede obtenerse poniendo en contacto un extracto hidroalcohólico de materia prima de canela con una resina adsorbente de polímero de afinidad sólida de manera que adsorba los ácidos polifenólicos contenidos en el extracto hidroalcohólico sobre el adsorbente de afinidad. Los constituyentes químicos unidos se eluyen subsecuentemente por los métodos enseñados en la presente. Antes de eluir los constituyentes químicos de fracción de ácido polifenólico, el adsorbente de afinidad con los constituyentes químicos deseados adsorbidos por el mismo pueden separarse del resto del extracto en cualquier manera conveniente, de preferencia, el proceso para ponerse en contacto con el adsorbente y la separación se efectúa pasando el extracto acuoso a través de una columna o lecho de extracción del material adsorbente. Una variedad de adsorbentes de afinidad puede utilizarse para purificar los constituyentes químicos de ácido fenólico de la especie de canela, tal como, pero sin limitarse a Sephadex LH-20 (Sigma Aldrich Co . ) , "Amberlite XAD-2" (Rohm & Hass), "Doulite S-30" (Diamond Alkai Co.), "SP207" (Mitsubishi Chemical), ADS-5 (Nankai University, Tianjin, China), ADS-17 (Nankai University, Tianjin, China), Dialon HP 20 (Mitsubishi, Japón), y Amberlite XAD7 HP (Rohm & Haas) . Se utiliza de preferencia Sephadex LH020 para cromatografía de proceso debido a la alta afinidad para los constituyentes químicos de ácido polifenólico de y su capacidad para separar polifenólicos de tanino de los polifenólicos sin taninos . Los polifenólicos con taninos adsorben Sephadex LH-20 en alcohol. En contraste, los polifenólicos sin taninos pueden eluirse de las perlas de resina utilizando alcohol, mientras los taninos restantes se adsorben en las perlas. Los taninos pueden eluirse entonces después con acetona acuosa. Este método permite la separación del polifenólico con taninos de los fenólicos sin taninos deseados de la canela. De este modo, diferentes solventes de elución pueden utilizarse para la separación de los compuestos polifenólicos y la purificación de los polifenólicos de canela bioactivos, sin taninos. Al utilizar el método de Folin-Ciocalteu y el método fenólico precipitable de proteínas, las concentraciones polifenólicas con taninos y sin taninos pueden medirse en la fracción de extracción sin purificar y las fracciones de elución. Aunque varios eluyentes pueden emplearse para recuperar los constituyentes químicos de ácido fenólico sin taninos a partir del adsorbente, en un aspecto de la descripción, el eluyente comprende alcoholes de peso molecular bajo, incluyendo, pero sin limitarse a metanol, etanol o propanol. En un segundo aspecto, el eluyente comprende alcohol molecular bajo en una mezcla con agua. En otro aspecto, el eluyente comprende alcohol de peso molecular bajo, un segundo solvente orgánico, y agua. Aunque varios eluyentes pueden emplearse para recuperar los constituyentes químicos de ácido polifenólico con taninos, en un aspecto de la descripción, el eluyente comprende acetona acuosa. De preferencia, la materia prima de la especie de canela ha experimentado uno o más procesos de purificación preeliminares tales como, pero sin limitarse a los procesos descritos en la Etapa 1 y 3 antes de poner en contacto el constituyente químico del ácido fenólico acuoso que contiene un extracto con un material adsorbente por afinidad.

Al utilizar adsorbentes por afinidad como se enseña en la descripción resulta en constituyentes químicos ácidos de los oligómeros polifenólicos bioactivos altamente purificados (DP2-10) de la especie de canela que están remarcablemente libres de otros constituyentes químicos los cuales se presentan normalmente en el material vegetal natural o en los productos de extracción comercial disponibles. Por ejemplo, los procesos explicados en la descripción pueden resultar en extractos de ácido polifenólico purificados que contienen constituyentes químicos de ácido fenólico en exceso de 95% en peso de masa seca que contiene únicamente polifenólicos con taninos en traza . La extracción y purificación de los ácidos fenólicos bioactivos a partir de la corteza de la especie de canela que utiliza perlas de resina adsorbentes por afinidad polimérica se representa gráficamente en la Figura 1-Etapa 4. La materia prima para este proceso de extracción puede ser la solución de etanol acuoso que contiene los ácidos fenólicos de la Etapa 3 de Extracción 500 +/- 520 +/- 540 de Lixiviación hidroalcohólica . El peso apropiado de perlas de resina adsorbentes (22 mg de ácidos polifenólicos por gramo de resina adsorbente) se lava (remoja) con 4-5 BV de 95% de etanol 250 antes de empacarse en una columna 620. La solución 500+520 acuosa que contiene ácido polifenólico se concentra utilizando evaporación al 1% de su volumen original. Luego, el etanol 260 absoluto se agrega a la muestra concentrada lo suficiente para incrementar el volumen 20 veces, disolviendo los polifenólicos en una solución de etanol al 95%. Esta solución se centrifuga 640 para remover cualquier material insoluble y el sobrenadante se recolecta como la muestra 550 de carga. La muestra de carga se carga sobre la columna 650. Una vez que la columna se carga completamente, la columna se eluye 660 con 95% de etanol 270 en un caudal de flujo de 2-3 BV/hora para eluir los polifenólicos sin taninos bioactivos en una forma isocrática de la columna adsorbente por afinidad. El eluyente 700 se recolecta en fracciones de 1 BV. Las fracciones polifenólicas se prueban cada una por un espectrofotómetro de UV en 280 nm (adsorbancia de longitud de onda del ácido polifenólico) hasta que la adsorbancia no se detecta más en las muestras de fracción en cuyo momento la elución se discontinua. Generalmente 7-10 BV de 95% de etanol se requieren para eluir los polifenólicos sin taninos de la columna (aproximadamente 3-4 horas) . La columna 670 eluida se lava 680 con 3 BV de 70% de acetona 280 acuosa eluyendo los polifenólicos con taninos adsorbidos con perlas de resina en un caudal de flujo de 5 BV/h (3 horas) . El lavado 710 de polifenólicos con taninos eluidos se desecha 730. La columna 730 lavada se lava entonces con 4-5 de etanol 250 al 95% en un caudal de flujo de 5 BV/horas para remover cualesquiera químicos restantes en la columna, preparando la columna de lavado para cromatografía 740 de proceso adicional. El lavado 720 se desecha 730. Los volúmenes 700 de fracción en elución pueden recolectarse aproximadamente cada 1 BV y estas muestras son polifenólicos totales analizados (método Folin-Ciocalteu) , los polifenólicos con taninos (Método de precipitación de Proteínas, DPn (HPLC de degradación Tiolítica) y se prueban para contenido de sólidos y pureza. Los compuestos polifenólicos de proantocianidina oligoméricos y poliméricos se eluyen en una ventana de retención amplia (tiempos de retención 12-30 minutos) causando desviación de línea base y dificultad con la integración precisa de los picos cromatográficos cuando se calcula la concentración de catequina y epicatequina . El comportamiento de HPLC se ha verificado para la mayoría de las proantocianidinas en la literatura científica. Sin embargo, después de la tiólisis, los cromatogramas de HPLC muestran claramente evidencia de la mejora de la resolución cromatográfica . Con la tiólisis, las proantocianidinas se convierten en unidades monoméricas produciendo picos bien resueltos en los cromatogramas de HPLC. Los benciltioéteres resultan de la unidad de extensión de las estructuras de la proantocianidina de acuerdo con la literatura científica (véase Guyot 2001) . El DPn puede calcularse por el área total de Pl, P2, P3 y P4 y el área total de la catequina y la epicatequina . El Sephadex LH-20 ha demostrado ser un adsorbente de afinidad eficiente para la separación de tanino a partir de compuestos polifenólicos sin taninos en extractos hidroalcohólicos de canela. Al combinar las fracciones de elución F2-F8 aproximadamente 77.4% de los constituyentes químicos polifenólicos sin taninos pueden recuperarse con sólo 0.2% de los taninos que se recuperan en esta fracción de extracción combinada. El rendimiento de las fracciones F2-F8 de elución de combinación es de 21.5% en peso de masa de la solución de carga y 3.78% en peso de masa con base en la materia prima de la canela. La pureza polifenólica sin taninos es 65% en peso seco de masa la cual es 3 veces más alta que el producto de extracción polifenólico sin purificar de la Etapa 3. Además, una pureza mayor de 95% en % en peso de masa puede encontrarse combinando las fracciones F6-F8 de elución. El grado promedio de polimerización (DPn) demuestra el tamaño del oligómero polifenólico en cada fracción de elución. En el extracto sin purificar (solución de carga), el grado de polimerización fue 6.9 debido a la presencia de los polímeros polifenólicos con taninos grandes. En las fracciones de elución polifenólica , se encontraron esencialmente polifenólicos sin taninos. Por lo tanto, las fracciones de elución polifenólica purificada están constituidas en gran medida de oligómeros polifenólicos , una mezcla de dimeros-DPn = 2; trimeros-DPn = 3; tetrámeros-DPn = 4; etc.) Como se muestra en la Tabla 5, más trímeros se eluyeron en fracciones F3-F5 en elución y más tetrámeros se eluyeron en fracciones F6-F8 en elución. El rango de DPn en las fracciones en elución fue 2.7 a 4.2, confirmando que estas fracciones contienen una pureza en un nivel elevado de los constituyentes químicos polifenólicos de proantocianidina bioactiva benéfica de la canela. Además, al combinar diferentes fracciones en elución, diferentes productos de extracción tienen diferentes purezas del polifenólico sin taninos y pueden lograrse los rendimientos como se demuestra en las Tablas 7 y 8.

Tabla 7. Análisis de elusiones de etanol al 95% de fracciones polifenólicas de la cromatografía del proceso de Sephadex LH-20.

*La elución 1 no se tabuló debido a que hubo constituyentes químicos, únicamente solvente.

Tabla 8. Resultados del rendimiento y la pureza diferentes fracciones de elución polifenólica sin taninos .

*E1 ácido fenólico total no tiene ácidos tánicos medibles en estas fracciones combinadas. Muchos métodos se conocen en la técnica para la remoción de alcohol a partir de la solución. Si se desea mantener el alcohol para reciclaje, el alcohol puede removerse de las soluciones, después de la extracción, por destilación bajo presiones atmosféricas normales o reducidas. El alcohol puede reutilizarse . Además, existen también muchos métodos conocidos en la técnica para la remoción de agua a partir de soluciones, ya sea soluciones acuosas o soluciones de las cuales el alcohol se removió. Tales métodos incluyen, pero no se limitan a secar por aspersión las soluciones acuosas sobre un portador adecuado tal como, pero sin limitarse a carbonato de magnesio o maltodextrina, o alternativamente, el liquido puede tomarse para sequedad por liofilización o deshidratación por ventana refractiva.

Alimento y Medicamentos Como una. forma de alimentos de la presente invención, puede haberse formulado a cualesquiera formas opcionales, por ejemplo, un estado granulado, un estado de grano, un estado de pasta, un estado de gel, un estado sólido o un estado liquido. En estas formas, varias clases de sustancias conocidas convencionalmente por aquellos expertos en la técnica los cuales han permitido agregar a los alimentos, por ejemplo, un aglutinante, un desintegrante, un espesante, un dispersante, un agente que promueve la absorción, un agente de apreciación de sabor, un tampón, un agente tensoactivo, un auxiliar de disolución, un conservador, un emulsionante, un agente de isotonicidad, un estabilizador o un controlador de pH, etc., puede contenerse opcionalmente . Una cantidad del extracto de saúco que se agrega a los alimentos no se limita específicamente, y por ejemplo, puede ser de aproximadamente 10 mg a 5 g, de preferencia 50 mg a 2 g por día como una cantidad de incorporación por un adulto que pesa alrededor de 60 kg . En particular, cuando se utiliza como alimentos para conservación de la salud, alimentos funcionales, etc., se prefiere contener el ingrediente efectivo de la presente invención en tal cantidad que los efectos predeterminados de la presente invención se muestran suficientemente. Los medicamentos de la presente invención pueden prepararse opcionalmente de acuerdo con los métodos convencionalmente conocidos, por ejemplo, como un agente sólido tal como una tableta, un gránulo, polvo, una cápsula, etc., o como un agente líquido tal como una inyección, etc. Para estos medicamentos, pueden haberse formulado en cualesquiera materiales generalmente utilizados, por ejemplo, tal como un aglutinante, un desintegrante, un espesante, un dispersante, un agente que promueve la absorción, un agente de apreciación de sabor, un tampón, un agente tensoactivo, un auxiliar de disolución, un conservador, un emulsionante, un agente de isotonicidad, un estabilizador o un controlador de pH. Una cantidad de administración del ingrediente efectivo (extracto de canela) en los medicamentos puede variar dependiendo de una clase, una forma de agente, una edad, un peso corporal o un síntoma que se aplica a un paciente, y similares, por ejemplo, cuando se administra oralmente, se administra una o varias veces por día a un adulto que pesa alrededor de 60 kg, y se administra en una cantidad de aproximadamente 10 mg a 5 g, de preferencia aproximadamente 50 mg a 2 g por día. El ingrediente efectivo puede ser uno o varios compuestos del extracto de canela. Los métodos también comprenden administrar tales extractos más de una vez por día, más de dos veces por día, más de tres veces por día y en un intervalo de 1 a 15 veces por día. Tal administración puede ser continuamente, como en cada día durante un periodo de días, semanas, meses, o años, o puede ocurrir en tiempos específicos para tratar o evitar condiciones específicas. Por ejemplo, puede administrarse a una persona extractos de especies de canela por lo menos una vez al día por años para mejorar el enfoque mental, la cognición y la memoria, o para evitar y tratar diabetes mellitus tipo 2, para evitar apoplejía por enfermedad cardiovascular, o para tratar trastornos gastrointestinales, o para tratar trastornos inflamatorios y artritis incluyendo gota, o para tratar resfriado común, infecciones bacterianas y fúngicas.

La descripción anterior incluye el mejor modo actualmente contemplado de llevar a cabo la descripción. Esta descripción se hace para el propósito de ilustrar los principios generales de las descripciones y no debe tomarse en un sentido limitante. Esta descripción se ilustra además por los siguientes ejemplos, los cuales no van a interpretarse de ninguna forma como imponiendo limitaciones en el alcance de las mismas. Por el contrario, se entenderá claramente que se puede recurrir a otras diversas modalidades, modificaciones y equivalentes de los mismos, los cuales después de leer la descripción en la presente, pueden sugerirse por si mismas por aquellos expertos en la técnica sin apartarse del espíritu de la descripción. Todos los términos utilizados en la presente se consideran que se interpretan en su uso normalmente aceptado por aquellos expertos en la técnica. La patente y solicitudes de patente o referencias citadas en la presente se incorporan para referencia en sus totalidades.

Ejempllflcaclón Materiales Acetona (67-64-1), > 99.5%, reactivo ACS (179124); Acetonitrilo (75-05-8), para HPLC, grado de gradiente > 99.9% (GC (000687); Hexano (110-54-3), 95+%, grado espectrofotométrico (248878); Acetato de etilo (141- 78-6), 99.5*%, grado ACS (319902); Etanol, desnaturalizado con 4.8% de isopropanol (02853); Etanol (64-17-5), absoluto, (02883); etanol (67-56-1), 99.93%, ACS grado HPLC, (4391993); y Agua (7732-18-5), grado HPLC, (95304). Todos se adquirieron de Sigma-Aldrich. Ácido fórmico (64-18-6), solución al 50% (09676), Ácido acético (65-19-7), 99.7+%, reactivo ACS (320099; Ácido clorhídrico (7647-01-0), solución 1.0N del estándar volumétrico en agua (318949) ; Hidróxido de calcio (7789-78-8), polvo, CA 0-2 mm, 90-95% (213268); Cloruro férrico anhidro (7705-08-0), 97%, grado reactivo (157740); reactivo de fenol Folin-Clocalteu (2N) (47641); Fenol (108-95-2) (P3653); Ácido sulfúrico (7664-93-9); reactivo ACS, 95-97% (44719); Trietanolamina (102-71-6), base libre de trietanolamina (T1377); Dodecilsulfato de sodio (141-21-3), 98.5% mínimo GC (L4509); todos se adquirieron de Sigma-Aldrich. Carbonato de sodio (S263-1, Lote No. 037406) se adquirió de Fisher Co. Albúmina en suero (9048-46-8), cultivo celular en polvo de Fracción V de Albúmina de Bovino probado (A9418); hidrato de ( + ) -catequina (88191-48-4), pureza >98% (C1251); Ácido gálico (149-91-7), reactivo ACS, >98% (HPLC) ; Benciltiol (100-53-8); 99% (B25401); Trans-cinamaldehído (14371-10-9), 99+% de pureza; ácido tánico (1401-55-4), polvo (T0125); todos se adquirieron de Sigma-Aldrich. (-)- epicatequina 93.6% (05125-550, CAS# 490-46-0) se adquirió de Chromadex. Dextrano estándar 5000 (00269), 50,000 (00891) y 410,000 (00895) certificado de acuerdo con DIN se adquirieron de Fluka. Las estructuras de los estándares de referencia química utilizados en la descripción se muestran posteriormente : Trans-cinamaldehldo Ácido gálico (+)-catequina (-)-epicatequina Sephadex LH-20: SephadexTM LH-20 (Lote No. 308822, paquete 167600, producto No. 17-0090-01) se adquirieron de Ambersham Bioscience AB Uppsala Suecia. Se prepara por hidropropilación de sephadex G-25, un medio de dextrano formado por perlas, y se ha desarrollado específicamente para filtración de gel de productos naturales, tales como esferoides, terpenoides, lípidos y péptidos de peso molecular bajo en un solvente orgánico.

Método de HPLC Sistema cromatográfico : sistema LC-10AVP Cromatográfico Liquido de Alta Resolución Shimadzu equipado con una bomba LC10ADVP con un detector de disposición de fotodiodo SPD-M 10AVP. Los productos de extracción obtenidos se midieron en una columna Júpiter C18 de fase inversa (250x4.6 mm I.D., 5 µ, 300 Á) (Phenomenex, Parte No. 00G-4053-E0, No. de serie: 2217520-3, Lote No. 5243-17) . El volumen de inyección fue 10 µ? y el caudal de flujo de la fase móvil fue 1 ml/min. La temperatura de la columna fue 50°C. La fase móvil consistió de A (0.5% del ácido fórmico acuoso, v/v) y B (acetonitrilo) . El gradiente se programó como sigue: con los primeros 6 minutos, A se mantiene a 100%, 6-10 minutos, el solvente B se incrementó linealmente de 0% a 12% y 10-35 minutos, B linealmente de 12% a 215, luego 35-40 minutos, B linealmente de 21% a 25%, luego 40-50 minutos, B linealmente a 100%. Las soluciones madre de metanol de 3 estándares de referencia (catequina, epicatequina y Trans-cinamaldehido) se prepararon disolviendo cantidades en peso de compuestos estándares en metanol a 1 mg/ml. La solución estándar de referencia mezclada se diluyó entonces paso por paso para producir una serie de soluciones en concentraciones finales de 0.75, 0.5, 0.1, 0.05 mg/ml, respectivamente. Todas las soluciones madre y la solución de trabajo se utilizaron en un lapso de 7 días y se almacenaron en un enfriador a +4°C y se aclimataron antes del uso. Las soluciones se utilizaron para identificar y cuantificar los compuestos en la canela. Tiempos de retención de ( + ) -catequina (C) , (-) -epicatequina (EC) y trans-cinamaldehido (CAN) fueron aproximadamente 14.02, 15.22 y 34.00 minutos, respectivamente. Se encontró un ajuste lineal que varia de 0.01 a 10 µg. Las ecuaciones de regresión y coeficientes de correlación fueron como sigue: (+) -catequina: área del pico = 465303 x C (µ?)-5701.4, R2 = 0.9996 (N = 6); (-) -epicatequina ; área del pico = 124964 x C ^g) -215.88, R2 = 0.9998 (N = 6); trans-cinamaldehido; área del pico/100 = 60657 x C ( g)-1162.1, R2 = 0.9997 (N = 6) . Los resultados de HPLC se muestran en la Tabla 9. Los contenidos de los estándares de referencia en cada muestra se calcularon por interpolación de las curvas de calibración correspondiente basadas en el área del pico.

Tabla 9. Resultados del análisis de HPLC del estándar de la canela en una concentración de 1 mg/ml en metanol Se calcularon los platos teóricos por: N = 16 x (tR/w)2. tR es el tiempo de retención y w es el ancho del pico, https : //www.mn-net . com/web%5CMN-WEB-HPLCKatalog. nsf/ EbE/GRUNDLAGEN Análisis de GC-MS Se realizó el análisis de GC-MS utilizando un sistema de GCMS-QP2010 Shimadzu. El sistema incluye cromatografía de gas de alta resolución, interfaz de GC/MS acoplada directa, fuente de ión de impacto electrónico (El) con un control independiente de temperatura, filtro de masa cuádruple, et al. El sistema se controla con una solución de GCMS, software Versión 2 para adquisición de datos y análisis post-operativo . La separación se llevó a cabo en una columna capilar de sílice ahumada Agilent J&W DB-5 (30 m x 0.25 mm i.d., 0.25 µ?? de espesor de película) (catálogo: 1225032, serie No. US5285774H) utilizando el siguiente programa de temperatura. La temperatura inicial fue 60°C, se mantuvo durante 2 minutos, luego se incrementó a 120°C en una tasa de 4°C/minutos, se mantuvo durante 15 minutos, luego se incrementó a 240°C en una tasa de 4°C/minutos, se mantuvo durante 15 minutos con un tiempo de operación total de 77 minutos. La temperatura de inyección de muestra fue 250°C. 1 µ? de la muestra se inyectó por un auto-inyector en modo no fraccionado en 1 minuto. El gas portador fue helio y el caudal de flujo se controló por presión a 60 KPa . Bajo tal presión, el caudal de flujo fue 1.03 ml/minuto y la velocidad lineal fue 37.1 cm/minutos . La temperatura de la fuente de iones MS fue 230°C, y la temperatura de interfaz GC/ S fue 250°C. Se barrió el detector MS entre m/z de 50 y 500 a una velocidad de barrido de 1000 AMU/segundo. La temperatura de corte del solvente fue 3.5 minutos.

Método Folin-Ciocalteu (Markar 1993) para ácidos fenólicos totales Se ha utilizado un espectrofotómetro UV-Vis Shimazu (UV 1700 con sonda de UV: S/N: A1102421982LP) . Estándar: Se hace una solución madre de ácido gálico/agua en una concent ación de 1 mg/ml. Se toma una cantidad adecuada de solución de ácido gálico en tubos de prueba, se constituye el volumen a 0.5 mi con agua destilada, se agrega 0.25 mi del reactivo Folin Ciocalteu y luego 1.25 mi de la solución de carbonato de sodio al 20% en peso. Se agita el tubo bien (baño ultrasónico) durante 40 minutos y se registra la adsorbancia a 725 nm. Los datos se muestran en la Tabla 10.

Tabla 10. Preparaciones de la curva de calibración para el ácido gálico Tubo Solución de Acido Agua Reactivo Solución de Absorbancia ácido gálico gálico destilada Folin (mi) carbonato a 725 mm* (0.1 mg/ml) (M9) (mi) de sodio (mi) (mi) Espacio 0.00 0 0.50 0.25 1 .25 0.000 1 0.02* 0.48* 0.25 1.25 0.1 1 1 0.04 4 0.46 0.25 1.25 0.226 3 0.06 6 0.44 0.25 1.25 0.324 4 0.08 8 0.42 0.25 1.25 0.464 0.1 10 0.40 0.25 1.25 0.608 *la cantidad de solución de ácido gálico es dependiente de la información de absorción Análisis Directo en Espectrometría de Masa en Tiempo Real (DART) para Análisis de Polisacáridos .

Instrumentos: JOEL AccuTOF DART LC tiempo de espectrofotómetro de masa de tiempos de vuelo (Joel USA, Inc., Peabody, Massachusetts , (USA). Esta tecnología del espectrofotómetro de masa de Tiempo de Vuelo (TOF) no requiere ninguna preparación de muestra y produce masas con exactitudes a 0.00001 unidades de masa.

Métodos: Los parámetros del instrumento utilizados para capturar y analizar las fracciones son como sigue: Para un modo catiónico, el voltaje de aguja DART es 3000 V, elemento de calentamiento a 250°C, Electrodo 1 a 100 V, Electrodo 2 a 250 V, y flujo de gas helio de 7.45 litros/minuto (L/minuto) . Para el espectrofotómetro de masa, el orificio 1 es 10 V, lente de anillo es 5 V, y el orificio 2 es 3 V. El voltaje pico se establece a 600 V con el fin de dar poder de resolución que inicia en aproximadamente 60 m/z, permitiendo aún suficiente resolución a intervalos de masa mayores. El voltaje del detector de placa de micro canal (MCP) se establece a 2450 V. Las calibraciones se realizaron cada mañana antes de la introducción de la muestra utilizando una solución de cafeína 0.5 M estándar ( Sigma-Aldrich Co., St. Louis, USA). Las tolerancias de calibración se mantienen a < 5 mmu. Las muestras se introducen en el plasma de helio DART con fórceps estériles asegurando que un área superficial máxima de la muestra se exponga al haz de plasma de helio. Para introducir la muestra en el haz, se emplea un movimiento de barrido. Este movimiento permite a la muestra exponerse repetidamente en la apoplejía de adelante hacia atrás durante aproximadamente 0.5 segundos/barrido y conservar la pirólisis de la muestra. Este movimiento se repite hasta que se observa una señal de Corriente de Ión Total (TIC) se observa en el detector, entonces la muestra se remueve, permitiendo la normalización de la línea base/antecedente. Para el modo aniónico, la DART y la AccuTOF MS se alternan a modo de ión negativo. El voltaje de aguja es 3000 V, elemento de calentamiento 250°C, Electrodo 1 a 100 V, electrodo 2 a 250V, y el flujo de gas helio a 7.45 L/minutos. Para el espectrofotómetro de masa, el orificio 1 es -20 V, la lente de anillo es -13 V y el orificio 2 es 5 V. El voltaje pico es 200 V. El voltaje MCP se establece a 2450 V. Las muestras se introducen en la misma manera exacta como el modo catiónico. Todo el análisis de datos se conduce utilizando un software MassCenter ain Suite provisto con el instrumento.

Ejemplo de la Etapa 1A: Extracción máxima de SFE de etapa sencilla y purificación del aceite esencial de canela. Se realizaron todas las extracciones de SFT 250 (Supercritical Fluid Technologies, Inc., Newark, Delaware, USA) diseñadas para presiones y temperaturas de hasta 69 Pa (690 bares) y 200°C, respectivamente. Este aparato permite extracciones simples y eficientes en condiciones supercriticas con flexibilidad para operar en cualesquiera modos dinámico o estático. Este aparato consiste principalmente de tres módulos: un horno, una bomba y un control, y un módulo de recolección. El horno tiene una columna de precalentamiento y un recipiente de extracción de 100 mi. El módulo de bomba se equipa con una bomba neumática comprimida con una capacidad de flujo constante de 300 ml/minutos. El módulo de recolección es un frasco de vidrio de 40 mi, sellado con tapas y un septo para la recuperación de productos extraídos. El equipo se proporciona con válvulas micrométricas y un medidor de flujo. La presión del recipiente de extracción y la temperatura se monitorean y controlan dentro de ± 0.3 MPa (3 bares) y ±1°C. En ejemplos experimentales típicos, 30 gramos de polvo de corteza de canela con un tamaño por arriba de 105 µp? tamizado con un cernidor de malla 140 se cargó en recipientes de extracción de 100 mi para cada experimento. La lana de vidrio se colocó en los dos extremos de la columna para evitar cualquier posible transporte sobre el material sólido. El horno se precalentó a la temperatura deseada antes que el recipiente empacado se cargara. Después, el recipiente se conectó en el horno, el sistema de extracción se probó para fuga presurizando el sistema con CO2 (~850 psig) , y se purgó. El sistema se cerró y se presurizó a una presión de extracción deseada utilizando la bomba líquida neumática. El sistema se dejó entonces para equilibrio durante ~3 minutos. Un frasco de muestra (40 mi) se pesó y se conectó al puerto de muestreo. La extracción se inició haciendo fluir C02 en una tasa de ~10 SLPM (19 g/minutos), la cual se controla por una válvula medidora. La proporción de solvente/alimentación, definida como la proporción en peso del C02 total utilizada para el peso de la materia prima cargada, se calculó. Durante el proceso de extracción, la muestra extraída se pesó cada 5 minutos. Se presume que la extracción finaliza cuando el peso de la muestra no cambió más del 5% entre dos medidas de peso. El rendimiento se definió para ser el porcentaje en peso del aceite esencial extraído con respecto al peso total inicial de la materia prima cargada en el recipiente de extracción. Un diseño de extracción factorial total se adoptó variando la temperatura de 40-80°C a 80-50 MPa (500 bares) . En este ejemplo experimental, las condiciones de extracción se establecieron en el caso en donde las temperaturas varían de 40-80°C y las presiones varían de 80-50 MPa (500 bares) . El caudal de flujo de C02 fue 19 g/min. Los resultados se muestran en la Tabla 11.

Tabla 11. Análisis de HPLC de la extracción de aceite esencial de canela de SFE de etapa sencilla Ejemplo 2 Ejemplo de la Etapa IB: Fraccionamiento de SCCO2 de Etapa múltiple del aceite esencial de canela Se realizó la extracción/fraccionamiento de SCCO2 de etapa múltiple utilizando SFT 250 ( Supercritical Fluid Technologies, Inc., Newark, Delaware, USA). En las extracciones de etapa múltiple, típicas, 30 g de corteza de canela molida, de un tamaño de partícula mayor de 105 µ??, se cargó en un recipiente de extracción con un volumen interno de 100 mi. La solución de extracción se recolectó en un recipiente recolector de 40 mi conectado a la salida del recipiente de extracción. El caudal de flujo de CC se estableció en 19 g/minutos. La primera etapa de extracción se realizó en una presión de 8 Pa (80 bares) y una temperatura de 40°C (densidad de C02 = 0.29 g/ml) . Esta etapa de extracción se llevó a cabo durante 1 hora. La segunda etapa de extracción se realizó en una presión de 10 MPa (100 bares) y una temperatura de 40°C (densidad de C02 = 0.64 g/ml) . La segunda etapa de extracción duró 1 hora. La tercera etapa de extracción se realizó en una presión de 12 MPa (120 bares) y una temperatura de 40°C durante 1 hora (densidad de CO2 = 0.72 g/ml) . Una cuarta etapa de extracción a una temperatura de 40°C y una presión de 30 MPa (300 bares) (densidad de C02 0.92 g/ml) se realizó entonces durante 1 hora. Las extracciones de etapas múltiples utilizando tres etapas a 60°C y 80°C se realizaron también. Los resultados analíticos incluidos se muestran en la Tabla 12 que puede compararse con el extracto sin purificar y los datos GC-MS de etapa múltiple bajo las mismas condiciones de SFE. Tabla 12. Rendimiento de Extracción de Etapa Múltiple del aceite esencial de canela El rendimiento total de las extracciones de etapa múltiple en 40, 60 y 80°C fue aproximadamente 1.6%, 1.3% y 1.8% en peso de masa con base en la materia prima original, respectivamente, totalizando el rendimiento de cada etapa. Estos rendimientos fueron más elevados que los rendimientos en las extracciones sin purificar de etapa sencilla debido a una proporción de solvente-alimentación más elevada que se utilizó en el procesamiento de etapa múltiple. De otra manera, los datos son consistentes. Como es aparente a partir de los datos, las concentraciones de los compuestos químicos del constituyente químico, tal como trans-cinamaldehído pueden cambiarse en estos productos de extracción de la sub-fracción confirmando la capacidad del SFE para perfilar los constituyentes químicos del aceite esencial de canela.

Tabla 13. Perfil de los compuestos de aceite esencial de canela en extractos obtenidos en diferentes condiciones T = 40°C T = 60 °C T = 80 °C Compuestos Etapa 1 Etapa 2 Etapa 3 Etapa 4 Etapa 1 Etapa 2 Etapa 3 Etapa 1 Etapa 2 Etapa 3 Congéneres de cinamaldehído 67.3 88.0 83.3 67.1 93.1 86.2 74.7 90.7 88.9 74.1 Sesquiterpenos 1.4 1.5 2.1 2.1 2.7 1.7 2.0 1.1 1.1 3.5 Ácidos grasos y derivados 0.9 2.5 6.6 9.9 0.9 5.9 8.6 1.0 4.1 7.8 Esferoides 20.3 5.2 0.3 0.8 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 Ejemplo 3 Ejemplo de la Etapa 2 Extracción de la Fracción de Polisacáridos Un ejemplo experimental típico de la extracción y precipitación de solventes de los constituyentes químicos de fracción de polisacáridos soluble en agua, insoluble en etanol de la especie de canela es como sigue: 20 g del residuo sólido de la extracción de SFE a 60°C y 30 MPa (300 bares) se extrajo utilizando 400 mi de agua destilada durante dos horas a 85°C en dos etapas. Las dos soluciones de extracción se combinaron y la suspensión se filtró utilizando papel filtro Fisherbrand P4 (tamaño de poro 4-8 µp?) y se centrifugaron a 2, 000 rpm durante 20 minutos.

El sobrenadante se recolectó. La evaporación giratoria se utilizó para concentrar la solución de extracto sobrenadante transparente de 800 mi a 80 mi. Luego, 1520 mi de etanol anhidro se agregó para constituir una concentración de etanol final de 95%. La solución se permitió agitar durante 30 minutos y se observó un precipitado. La solución de extracción se centrifugó a 2,000 rpm durante 20 minutos y el sobrenadante se decantó y se conservó para procesamiento adicional o se desechó. El equilibro de masa se realizó antes y después de la precipitación para calcular el rendimiento de polisacáridos. El precipitado se recolectó y se secó en un horno a 50°C durante 12 horas. La fracción de polisacáridos seca se pesó y se disolvió en agua para análisis de pureza de polisacáridos con el método colorimétrico , utilizando dextrano como estándares de referencia. Además, la espectrometría de masa AcuuTOF-DART se utilizó para caracterizar además la fracción de polisacáridos. Los resultados se muestran en la Figura 6 y 7 y las Tablas 14 y 15.

Tabla 14. Análisis de fracción de polisacáridos precipitado por lixiviación de agua y utilizando 95% de etanol precipitado SFE 60°C y residuo de 300 bares Materia prima (g) 20 Rendimiento de lixiviación acuosa (%) 4.8 Extractos de lixiviación antes del precipitado (g) 0.96 Extractos de lixiviación después del precipitado (g) 0.71 Precipitado (pcp) (g) 0.25 Rendimiento del precipitado (%) 1.3 Acido fenólico total antes del precipitado (g) 0.25 Acido fenólico total después del precipitado (g) 0.26 Dextrano 5K (mg/mg pcp) 0.47 Dextrano 50 K (mg/mg pcp) 0.35 Dextrano 410 K (mg/mg pcp) 0.29 Tabla 15. Polisacárido de análisis de DART a partir de canela lón positivo lón negativo ( m + H)/z Intensidad relativa (m-H)/z Intensidad relativa 84.28124 99.425442 75.01006 137.56585 86.25373 81 .720883 76.98839 5 1 28.816052 93.25277 101.372983 77.12163 1 18.072363 lón positivo lón negativo (m + H)/z Intensidad relativa (m-H)/z Intensidad relativa 98.20619 112.664144 87.01636 784.165496 101.1977 179.003571 89.02475 3689.452008 104.2004 74.965155 89.33272 106.713514 110.1915 107.457158 93.0378 98.710896 114.1919 310.219885 94.03036 801.832942 124.1697 541.492879 101.0621 81.171167 127.1837 251.473709 112.0237 132.567353 135.1607 211.982675 113.0289 256.6648 138.1605 184.608718 121.0391 779.921546 143.1455 125.176163 136.0431 1009.934451 146.1552 51.686867 139.0477 321.969773 149.1498 146.588712 151.0508 261.80355 151.1432 124.434696 155.0082 440.154667 152.1561 426.709823 157.0101 177.738929 159.1281 92.057677 165.0284 587.801494 163.1568 508.251143 171.107 197.524616 164.1678 51.884042 176.0796 211.346721 166.156 235.18718 186.0511 116.599949 168.1337 78.968582 187.0408 1166.858983 169.1348 260.595417 188.0499 158.886766 171.1442 59.12023 203.044 112.787336 173.1572 113.644235 205.13 132.109702 176.1467 108.331449 207.1191 131.606635 179.1507 137.84007 215.0732 5416.379733 1 0.1665 994.055767 215.4763 298.566964 185.1359 150.707896 216.0802 729.308918 186.1501 158.322059 217.0876 99.2311 4 190.1563 183.096859 221.1137 111.97474 195.175 86.546205 228.0888 100.697547 199.1673 227.035116 230.0733 604.711842 204.1508 71.482813 231.0731 1097.598023 205.156 282.427685 232.0814 111.295636 207.1617 187.039509 234.1212 267.144226 209.1427 76.891885 235.1485 202.94284 212.1917 121.104614 247.0839 111.958677 217.1726 778.327585 347.5377 55.470255 218.1681 219.204541 353.1065 49.397762 222.1693 68.666762 374.1498 462.267476 223.091 736.949569 381.5363 65.488965 225.161 83.791408 227.1636 179.282801 234.1969 351.374295 235.1968 221.299761 237.171 165.239214 244.1914 173.437145 253.1741 170.977467 lón positivo lón negativo (m + H)/z Intensidad relativa (m-H)/z Intensidad relativa 255.2016 151.941156 257.2369 211.908424 269.2121 633.77052 270.2101 154.111628 271.2321 1124.577818 272.2465 339.732994 273.2465 1044.173233 274.2533 215.595509 279.1588 1902.133282 280.1583 320.860255 281.2123 96.009582 283.2191 1281.201573 284.2204 240.818719 285.2101 533.098708 286.2286 253.564416 287.2236 1550.802257 288.2426 3224.93612 289.2434 3384.734363 290.2552 810.746561 291.2548 287.438135 293.2133 105.940041 295.2189 297.089805 297.2621 150.897354 298.2583 58.674498 299.2333 353.940052 300.28 277.224355 301.2168 662.198609 302.2438 316.351463 303.2279 1157.364552 304.2443 2292.402403 305.2408 3391.780079 305.5312 171.674883 306.2432 871.724411 307.2501 5097.759878 307.5592 135.272649 307.8653 67.055551 308.2576 1307.87184 309.2461 276.320258 314.2569 196.483658 315.2256 218.14155 316.2783 914.795178 317.2599 331.764991 318.2375 59.32597 319.2205 718.902252 320.2407 260.17705 321.235 2454.356967 lón positivo lón negativo (m + H)/z Intensidad relativa (m-H)/z Intensidad relativa 322.2501 822.288344 323.2512 2417.876001 324.264 599.186884 325.2689 204.666646 331 .2688 147.777759 335.2215 345.293408 336.2407 147.720225 337.2279 1077.500668 338.2533 412.261973 339.2448 1476.416047 340.2592 514.704806 344.3092 193.613385 345.227 60.106943 347.2457 2194.894335 348.2636 71 1.622206 0 349.2606 4190.740285 350.262 988.545178 351.2579 404.799383 353.2215 300.675765 354.2486 152.247089 355.2466 416.642895 356.259 552.671805 357.2717 201.754991 361.2327 90.263863 363.2422 1061.838748 364.2584 266.66125 365.2561 1352.426638 El rendimiento de polisacáridos de la canela fue 1.3% en peso de masa con base en la materia prima de la corteza de canela original. La pureza de la fracción de 0 polisacáridos fue 290-470 mg/g de dextrano estándar equivalente que indica una pureza de >95% de constituyentes químicos de polisacáridos de canela en la fracción. Al ¦¦' comparar el análisis de los ácidos fenólicos totales en solución antes y después de la precipitación, la precipitación pareció no tener efecto en los ácidos fenólicos. Con base en un gran número y variedad de procedimientos experimentales, es bastante razonable concluir que un rendimiento del 1.3% es casi 100% de los polisacáridos solubles en agua-insolubles en etanol en la materia prima de la especie de canela natural.

Ejemplo 4 Ejemplo de la Etapa 3: Extracción de Lixiviación Hidroalcohólica Un ejemplo típico de una extracción de solvente de 3 etapas de los constituyentes químicos de ácido fenólico de la especie de canela es como sigue: La materia prima fue 2 g del residuo de SFE de corteza de canela molida a partir de la extracción de la Etapa 1 de SCCO2 (40°C, 30 MPa (300 bares) del aceite esencial. El solvente fue 40 mi de 25% de etanol acuoso. En este método, la materia prima y 40 mi de etanol acuoso se cargaron por separado en un recipiente de extracción de 100 mi y se mezclaron en un baño de agua caliente a 40°C durante 4 horas. La solución de extracción se filtró utilizando papel filtro Fisherbrand P4 que tiene un tamaño de retención de partícula de 4-8 µp?, se centrifugó a 2000 rpm durante 20 minutos, y el residuo particulado se utilizó para extracción adicional. El filtrado (sobrenadante) se recolectó para cálculo de rendimiento y análisis de HPLC. El residuo de la Etapa 1 se extrajo durante 2 horas (Etapa 2) y el residuo de la Etapa 2 se extrajo durante 2 horas utilizando los métodos antes mencionados. Los sobrenadantes se recolectaron para equilibrio de masa, análisis de HPLC para cinamaldehido (CND) , catequina (C) y epicatequina (EC) en los extractos. Se utilizó el ensayo Folin-Ciocalteu para medir la concentración de ácido fenólico total (pureza) y el método de precipitación de proteínas se utilizó para medir pureza de ácido tánico. Los resultados se muestran en la Tabla 16.

Tabla 16. Efecto de múltiples etapas de lixiviación hidroalcohólica en rendimiento de extracción Nota: 1. CND = trans-cinamaldehído; C = (+) -catequina ; EC=(-)-epicatequina ; TPA = ácido fenólico total; TA = ácido tánico. 2. CND, C, EC se analizaron por HPLC; TPA se analizó por el método Folin-Ciocalteu utilizando ácido gálico como estándar; TA se analizó por un método de precipitación de proteínas . Con el fin de verificar el método Folin- Ciocalteu, se probaron ácidos fenólicos conocidos, kaemferol, ácido cafeico, catequina, en una concentración de 1 mg/ml. El error experimental que mide el kaemferol y la catequina estuvo en el orden de 2-4% y en el caso del ácido cafeico fue aproximadamente 10%. Además, una referencia (Sindhu 2006) probó el ácido fenólico total en sus extractos del método y el resultado fue 289+2.2 mg de ácido gálico/g de extractos, el cual es bastante cercano a los presentes resultados.

Ejemplo 5 Ejemplo de la Etapa 4. Extracción Adsorbente por Afinidad de la Fracción del Ácido Polifenólico Purificado En experimentos típicos, la solución de trabajo fue la solución hidroalcohólica transparente del extracto de lixiviación de etanol acuoso de la especie de canela en la Etapa 3. La resina del polímero adsorbente por afinidad fue Sephadex LH-20. 6 g del adsorbente por afinidad se pre-lavó con 95% de etanol (4-5 BV) antes del empacado en una columna con una ID de 1.5 cm y un largo de 100 cm. El volumen de dOjLumna empacado fue 25 mi. 100 mi de canela, 25% de etanol de etapa I + una solución de extracción de etapa II (solución de muestra, 2.4 mg/ml) se concentró a 1 mi utilizando evaporación giratoria para remover el solvente. Luego, 19 mi de etanol absoluto se agregó a la solución concentrada para disolver los constituyentes químicos. Esta solución se centrifugó a 2000 rpm durante 10 minutos y el sobrenadante se recolectó como la solución de carga polifenólica final (11 mg/ml) . 12 mi de la solución de carga se cargó sobre la columna. La columna cargada se eluyó con 240 mi de 95% de etanol en un caudal de flujo de 2.4 BV/hora (1 ml/min) con un tiempo de elución de 100 minutos. Durante la elución, se recolectaron 8 fracciones polifenólicas sin taninos (fracción de Elución etiquetada F1-F8) en cada 30 mi de elución. Cada fracción se probó utilizando espectrofotometría de UV a 280 nm hasta que la adsorbancia no pudo detectarse más en la fracción recolectada. La columna se lavó con 70 mi de 70% de acetona acuoso para remover los fenólicos con taninos adsorbidos en el adsorbente por afinidad en un caudal de flujo de 5 BV/hora (2.1 ml/min) . La solución de lavado de taninos se desechó. Finalmente, la columna se lavó con 4-5 BV de 95% de etanol para remover cualesquiera impurezas químicas restantes con el fin de preparar la columna para procesamiento adicional. Cada fracción de elución polifenólica se recolectó y analizó y los resultados se muestran en la Tabla 17.

Tabla 17. Análisis de 95% de eluciones de etanol de las fracciones polifenólicas a partir de la cromatografía de proceso de Sephadex LH-20 * La elución 1 no se tabuló debido a que no hubieron constituyentes químicos, únicamente un solvente.

Ejemplo 6 Los siguientes ingredientes se mezclan para la formulación: Extracto de corteza de C. cassia 150.0 mg Fracción de Aceite Esencial (10 mg, 6.6% en peso seco Fracción polifenólica (100 mg, 66.7% en peso seco Polisacáridos (40 mg, 26.6% en peso seco) Esteviosida (Extracto de stevia) 12.5 mg Carboximetilcelulosa 35.5 mg Lactosa 77.0 mg Total 275.0 mg extracto novedoso de la especie de canela comprende una fracción de aceite esencial, una fracción de ácido fenólico-aceite esencial, y una fracción de polisacáridos en % en peso de masa mayor que aquella encontrada en el material de rizoma natural o los productos de extracción de rutina. Las formulaciones pueden hacerse en cualquier forma de dosis oral y administrarse diariamente o 15 veces al dia cuando sea necesario para los efectos fisiológicos y psicológicos deseados (función cerebral mejorada y analgesia) y efectos médicos (diabetes mellitus no dependiente de insulina, agregación antiplaquetaria y anti-trombosis , prevención y tratamiento de la enfermedad cardiovascular y cerebrovascular , anti-aterosclerosis , anti-hipercolesterolemia, protección cardiaca, protección del sistema nervioso, trastornos antiinflamatorios, anti-alérgicos, anti-artritis , antireumáticos, anti-gota, gastrointestinales, tos, resfriado común, fiebre, lipoliticos, cicatrización mejorada de heridas, antibacterianos, antifúngicos y anti-cáncer) .

Ejemplo 7 Los siguientes ingredientes se mezclaron para la siguiente formulación: Extracto de C. Cassia 150.0 mg Fracción de aceite esencial (60 mg, 40% de peso seco) Fracción polifenólica (30 mg, 20% de peso seco) Polisacáridos (60.0 mg, 40% de peso seco Vitamina C 15.0 mg Sacarosa 35.0 mg Polvo de Frijol Mungo 10: 1 50.0 mg Sabor Moka 40.0 mg Sabor Chocolate 10.0 mg extracto novedoso de canela chuangxiong comprende un aceite esencial, aceite esencia de ácido fenólico y fracciones constituyentes químicas de polisacárido por % de en peso en masa mayor que el que se encontró en el material de vegetal natural o productos de extracción convencionales. La formulación puede hacerse en cualquier forma de dosis oral y administrarse en forma segura hasta 15 veces por día como se necesite por los efectos fisiológicos, psicológicos y médicos deseados (véase Ejemplo 1, anterior).

REFERENCIAS: 1. Khan A et al. Diabetes Care 26:3215-3218, 2003. 2. Anderson RA et al. J Agrie Food Chem 52:65-70, 2004. 3. Jarville-Taylor et al. J Am Coll Nutri 20:327-336, 2001. 4. Qin R et al. Horm Metab Res 36:119-123, 2004. 5. Vespohl EJ et al. Phytother Res 19:203-206, 2005. 6. Lee SH et al Biochem Pharmacol 69:791-9,2005. 7. Chericoni S et al. J Agrie Food Chem 53:4762-4765, 2005. 8. Lin CC et al. Phytother Res 17:7260730, 2003. 9. Jayaprakasha GK et al. J Agrie Food Chem 51:4344-4348, 2003. 10. Huss U et al. J Nat Prod 65:1317-21, 2002. 11. Nagai H et al. Jpn J Pharmacol 32:813-822, 1982. 12. Su MJ et al. J Biomed Sci 6:376-386, 1999. 13. Shimada Y et al. Phytomed 11:404-410, 2004. 14. Taher M et al. Med J Malayia 59B:97-98, 2004. 15. Kamath JV et al. Phytother Res 17:970-972, 2003. 16. Kurokawa et al. Eur J Pharmacol 348:45-51, 1998. 17. Simic A et al. Phytother Res 18:713-717, 2004. 18. Tabak et al. J Ethnopharmacol 67:269-277, 1999. 19. Kong LD et al. J Ethnopharmacol 73:199-207, 2000. 20. Kwon BM et al. Arch Pharm Res 21:147-152, 1998. 21. Ka H et al. Cáncer Lett 196:143-152, 2003. 22. Williamson EM. Phtomedicine 8:401-409, 2001. 23. Dubois M et al. Analytical Chem 28:350-356, 1956. 24. Gu L et al. J Agrie Food Chem 51:7513-7521, 2003. 25. Guyot S et al. Mhetods in Enzymology 335:57-70, 2001. 26. Maria Jerez P et al. Food Chem 94:406-414, 2006. 27. akkar HPS et al. J Sci Food Agrie 61:161-165, 1993. 28. Makkar HPS et al. J Agrie Food Chem 36:523-525, 1988. ] 29. Shindu, M. Food Chem 94:520-528, 2006.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito la presente invención se considera como novedad y por lo tanto se reclama como propiedad lo descrito en las siguientes reivindicaciones.
REIVINDICACIONES 1. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende una fracción que tiene un cromatograma de espectrometría de masa de Análisis Directo en Tiempo Real (DART) de cualquiera de las Figuras 6 a 85. 2. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la fracción comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste de cinamaldehído, benzaldehído, alcohol cinámico, ácido trans-cinámico, acetato de cinamilo, un aceite esencial, un polifenol, un polisacárido, y combinaciones de los mismos
3. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende cinamaldehído en una cantidad mayor que aproximadamente 2% en peso.
4. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende cinamaldehído en una cantidad mayor que aproximadamente 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, ó 95% en peso.
5. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende cinamaldehido en una cantidad de aproximadamente 65% a aproximadamente 95% en peso.
6. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende un aceite esencial seleccionado del grupo que consiste de eugenol, 2 ' -hidroxicinamaldehido, 2-metoxicinamaldehido , 2' -benzoxicinamaldehido, linalol, 1,8-ceneol, alfa-pineno, beta-pineno, y combinaciones de los mismos .
7. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende aceite esencial en una cantidad de aproximadamente 1% a aproximadamente 5% en peso.
8. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende una cantidad combinada de cinamaldehido y aceite esencial de aproximadamente 5% a aproximadamente 40% en peso.
9. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende un polifenol seleccionado del grupo que consiste de flavonoide, glicósido de flavonol, y combinaciones de los mismos.
10. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende un polifenol en una cantidad de aproximadamente 20% a aproximadamente 70% en peso.
11. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende cinamaldehido a aproximadamente 6% en peso y un polifenol a aproximadamente 70% en peso.
12. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende cinamaldehido a aproximadamente 40% · en peso y un polifenol a aproximadamente 20% en peso.
13. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende un polisacárido seleccionado del grupo que consiste de glucosa, arabinosa, galactosa, ramnosa, ácido urónico-xilosa y combinaciones de los mismos .
14. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la fracción comprende un polisacárido a aproximadamente 30% en peso .
15. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque el flavonoide se selecciona del grupo que consiste de ácido 3- ( 2-hidroxifenil ) propanoico, 3- (2-hidroxifenil) -0-glicósido, antocianidina, epicatequina, catequina, metilhidroxicalcona, oligómeros de catequina, oligómeros de epicatequina, proantocianidinas oligoméricas, proantocianidinas poliméricas, y combinaciones de los mismos .
16. El extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque el glicósido de flavonol se selecciona del grupo que consiste de kaempferitrina, kaempferol 3-O-Beta-D-glucopiranosil- (1?4) -alfa-L-ramnopiranósido, kaempferol 3-O-beta-D-apiofuranosil- (1?2) -alfa-L-ramnopiranósido, kaempferol 3-O-beta-D-apiofuranosil- (1?4) -alfa-L-ramnopiranósido, y combinaciones de los mismos.
17. Alimento o medicamento caracterizado porque comprende extracto de especies de canela de conformidad con la reivindicación 1.
18. Un método para preparar un extracto de canela que comprende secuencialmente extraer un material vegetal de especies de canela para dar una fracción de aceite esencial, una fracción polifenólica sin tanino y una fracción de polisacárido mediante a) extraer material vegetal de especies de canela mediante extracción supercritica con dióxido de carbono para dar la fracción de aceite esencial y un primer residuo ; b) extraer material vegetal de especies de canela o el primer residuo de la etapa a) mediante agua aproximadamente 70 °C a aproximadamente 90 °C de extracción y precipitando el polisacárido con alcohol para dar la fracción de polisacárido y un segundo residuo; y c) extraer el material vegetal de especies de canela, el primer residuo de la etapa a) y/o el segundo residuo de la etapa b) con una solución hidroalcohólica y purificar la extracción utilizando un proceso adsorbente de afinidad para dar la fracción polifenólica sin tanino.
19. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la etapa a) comprende i) cargar en un recipiente de extracción material vegetal de especies de canela molida; ii) agregar dióxido de carbono bajo condiciones supercriticas ; iü) contactar la corteza de canela molida y el dióxido de carbono durante un tiempo; y iv) colectar una fracción de aceite esencial en un recipiente de colección.
20. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque las condiciones supercríticas comprenden 6 MPa a 80 MPa (60 bares a 800 bares) de presión de 35°C a 90°C.
21. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque las condiciones supercríticas comprenden 6 MPa a 50 Mpa (60 bares a 500 bares) de presión de 40°C a 80°C.
22. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque el tiempo es 30 minutos a 2.5 horas.
23. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque el tiempo es 1 hora .
24. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque un sistema de separación fraccional de dióxido de carbono supercrítico se utiliza para la fraccionamiento, purificación, y perfilación de la fracción de aceite esencial.
25. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la etapa b) comprende i) poner en contacto el material vegetal de especies de canela molida o el primer residuo de la etapa a) con agua durante un tiempo suficiente para extraer el constituyente químico de polisacárido; y ii) separar y purificar los polisacáridos sólidos de la solución mediante precipitación por alcohol.
26. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el agua es de aproximadamente 70 °C a 90 °C.
27. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el agua es de aproximadamente 80°C a 90°C.
28. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el tiempo es 1-5 horas.
29. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el tiempo es 2-4 horas.
30. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el tiempo es 2 horas .
31. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el alcohol es etanol .
32. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la etapa c) comprende : i) poner en contacto material vegetal de especies de canela, el primer residuo de la etapa a) y/o el segundo residuo de la etapa b) con solución hidroalcohólica durante un tiempo suficiente para extraer constituyentes químicos polifenólicos ; ii) pasar una solución de alcohol concentrado de constituyentes químicos polifenólicos extraídos de la mezcla de solvente hidroalcohólico a través de una columna de resina adsorbente de afinidad donde los ácidos polifenólicos se adsorben; y iii) eluir la o las fracciones constituyentes químicas polifenólicas sin tanino purificado de la resina adsorbente de afinidad dejando los polifenólicos de tanino adsorbidos en la resina adsorbente de afinidad.
33. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la solución hidroalcohólica comprende etanol y agua donde la concentración de etanol es 10-95% en peso.
34. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la solución hidroalcohólica comprende etanol y agua donde la concentración de etanol es 25% en peso.
35. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la etapa i) se lleva a cabo de 30°C a 100°C.
36. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la etapa i) se lleva a cabo de 60°C a 100°C.
37. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque el tiempo es 1-10 horas .
38. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque el tiempo es 1-5 horas .
39. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque el tiempo es 2 horas .
40. Un extracto de especies de canela preparado por el método de conformidad con la reivindicación 18.
41. Un extracto de especies de canela :. caracterizado porque comprende cinamaldehido, ácido cinámico de 1 a 5% en peso del cinamaldehido, ácido metil cinámico 5 a 15% en peso de cinamaldehido, alcohol cinámico de 1 a 5% en peso del cinamaldehido, ( -gualenen/cis-y- bisababoleno de 20 a 30% en peso del cinamaldehido, y pirogalol de 1 a 5% en peso del cinamaldehido.
42. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende pirogalol, ácido cinámico de 80 a 90% en peso del pirogalol, ácido metil cinámico de 85 a 95% en peso del pirogalol, ácido cumárico de 20 a 30% en .· peso del pirogalol, ácido homovanilico de 15 a 25% en peso del pirogalol, cinamaldehido de 85 a 95% en peso del pirogalol, y benzoato de bencilo de 10 a 15% en peso del pirogalol.
43. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende catequina, ácido cinámico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido metil cinámico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido cumárico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido ferúlico de 1 a 10% en peso de catequina, 2-metoxifenol de 1 a 5% en peso de catequina, ácido homovanílico de 5 a 15% en peso de catequina, ácido vanílico de 20 a 30% en peso de catequina, benzaldehído de 1 a 5% en peso de catequina, cinamaldehído de 35 a 45% en peso de catequina, pirogalol de 85 a 95% en peso de catequina, y ácido cafeíco de 15% en peso de catequina.
44. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende p-gualenen/cis-y-bisababoleno y cinamaldehído de 5 a 15% en peso de ß-gualenen/cis-y-bisababoleno .
45. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende cinamaldehído y ß-gualenen/cis-y-bisababoleno de 10 a 20% en peso de cinamaldehído.
46. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende cinamaldehído, pirogalol de 30 a 40% en peso del cinamaldehído, y catequina/epicatequina de 1 a 10% en peso de cinamaldehído.
47. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende cinamaldehido, ácido cinámico de 1 a 5% en peso del cinamaldehido, metoxi- cinamaldehido de 0.5 a 5% en peso del cinamaldehido, eugenol de 0.1 a 5% en peso del cinamaldehido, p-cimeno de 5 1 a 5% en peso del cinamaldehido, alcanfor de 0.1 a 5% en peso del cinamaldehido, carvacrol de 0.5 a 5% en peso del cinamaldehido, cariofileno/humuleno de 25 a 35% en peso del cinamaldehido, pirogalol de 0.1 a 5% del cinamaldehido, y cinamato de cinamilo de 40 a 50% en peso del cinamaldehido. 0
48. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende cinamato de cinamilo, metoxi-cinamaldehido de 0.5 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, alcoholcinamilico de 0.1 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, p-cimeno de 1 a 5% en peso del 5 cinamato de cinamilo, linalol de 0.1 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, alcanfor de 0.1 a 5% en peso del cinamato de cinamilo, carvacrol de 0.5 a 5% en peso del - '. cinamato de cinamilo, cinamaldehido de 70 a 80% en peso del cinamato de cinamilo, cariofileno/humuleno de 45 a 55% en 0 peso del cinamato de cinamilo, y pirogalol de 0.1 a 5% del cinamato de cinamilo.
49. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende pirogalol, ácido cinámico de 5 a 10% en peso del pirogalol, ácido cumárico de 60 a 70% 5 en peso del pirogalol, ácido ferúlico de 1 a 10% en peso del pirogalol, 2-metoxifenol de 5 a 15% en peso del pirogalol, ácido vanílico de 1 a 10% en peso del pirogalol, catequina/epicatequina de 30 a 40% en peso del pirogalol, benzaldehído de 1 a 5% en peso del pirogalol, afzelequina/epiafzelequina de 5 a 15% en peso del pirogalol, resveratrol de 1 a 10% en peso del pirogalol, y vanillina de 1 a 5% en peso del pirogalol.
50. Un extracto de especies de canela caracterizado porque comprende pirogalol, ácido cinámico de 0.5 a 5% en peso del pirogalol, ácido cumárico de 10 a 20% en peso del pirogalol, ácido ferúlico de 0.5 a 5% en peso del pirogalol, 2-metoxifenol de 1 a 5% en peso del pirogalol, ácido homo/isovanílico de 0.5 a 5% en peso del pirogalol, ácido vanílico de 1 a 10% en peso del pirogalol, catequina/epicatequina de 25 a 35% en peso del pirogalol, benzaldehído de 1 a 5% en peso del pirogalol, cinamaldehído de 1 a 5% en peso del pirogalol, afzelequina/epiafzelequina de 0.1 a 5% en peso del pirogalol, y vanillina de 65 a 75% en peso del pirogalol.