LT4305B - Sterolių kompozicijos iš pulpos muilo - Google Patents

Sterolių kompozicijos iš pulpos muilo Download PDF

Info

Publication number
LT4305B
LT4305B LT97-074A LT97074A LT4305B LT 4305 B LT4305 B LT 4305B LT 97074 A LT97074 A LT 97074A LT 4305 B LT4305 B LT 4305B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
cholesterol
composition
phytosterols
forbes
stigmastanol
Prior art date
Application number
LT97-074A
Other languages
English (en)
Other versions
LT97074A (en
Inventor
Egon Novak
James P. Kutney
Peter J. Jones
Original Assignee
The University Of British Columbia
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23222178&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=LT4305(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by The University Of British Columbia filed Critical The University Of British Columbia
Publication of LT97074A publication Critical patent/LT97074A/xx
Publication of LT4305B publication Critical patent/LT4305B/lt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A23L33/11—Plant sterols or derivatives thereof, e.g. phytosterols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/15—Vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Crushing And Pulverization Processes (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

Išradimo sritis
Šis išradimas yra susijęs su sterolių kompozicijų iš pulpos muilo gavimu ir išgryninimu, su pačiomis kompozicijomis ir su šių kompozicijų bei jų darinių, kaip agentų, skirtų pirminės arba antrinės dislipidemijos profilaktikai bei gydymui, panaudojimu.
Išradimo kilmė
Tiesioginė širdies priepuolio ir anginos priežastis yra degeneracinis procesas, žinomas kaip aterosklerozė. Aterosklerozė atsiranda dėl daugelio susisumavusių paveldėti} (genetinių) ir aplinkos faktorių. Šių faktorių, iš kurių, kaip pasirodo, mūsų civilizacijoje svarbiausias yra maistas, sąveika sukelia aterosklerozės atsiradimą. Cholesteroliu užpildyti} aterosklerotinių plokštelių augimas pagaliau sulaiko kraujo padavimą širdies raumeniui arba, kitu atveju, smegenims arba kojoms, priklausomai nuo plokštelių padėties arterijų tinkle.
Vienas iš pagrindinių aterosklerozės rizikos faktorių, kurį potencialiai galima keisti, yra cholesterolio kiekis kraujyje. Daugybė gerai dokumentuotų tyrimų parodė, kad cholesterolio kiekis kraujyje iš tiesų yra svarbus širdies priepuolio, o taip pat ir paralyžiaus rizikos prognozuotojų. Ryšys tarp cholesterolio koncentracijos kraujyje ir šių sutrikimų rizikos yra tolygiai (apima visus cholesterolio kiekius) einantis (kuo didesnis kiekis, tuo didesnė susirgimo rizika) ir neturi aiškaus slenksčio (mažinant net ir taip vadinamus mažus kiekius, galima toliau mažinti susirgimo riziką). Pavyzdžiui, 40 metų amžiaus žmonėms 7,0 mmol/1 cholesterolio koncentracija kraujyje rodo 3-4 kartus didesnę koronarinių arterijų ligos riziką, nei mažesnė už 5,0 mmol/1 cholesterolio koncentracija. Toks ryšys tampa ypatingai staigus, kai kiekiai yra didesni už 5,2 mmol/1. Pavyzdžiui, mirtingumas tarp vyrų su 8,0 mmol/1 cholesterolio kiekiais yra beveik šešis kartus didesnis, nei tarp vyrų su 4,0 mmol/1 kiekiais. Šie vėlyvesnieji duomenys sutampa su ankstesniaisiais tyrimais.
Kiti platūs klinikiniai tyrimai aiškiai parodė, kad mažinant cholesterolio kiekius, galima sumažinti fatalinio ir nefatalinio miokardo infarkto riziką, anginą, pokyčius elektrokardiogramose ir koronarinėje arterijoje, apeinant chirurgiją. Geriausiai žinomas ir pirmasis iš šių bandymų buvo atliktas Lipids Research klinikoje, kurioje koronarinės pirminės profilaktikos bandymai (Coronary Primary Prevention Trials) parodė, kad sumažinus bendrą cholesterolio kiekį kraujyje 1 %, koronarinių arterijų ligos rizika sumažėja 2 %.
Kad ilgalaikė profilaktinė hipercholesterolemijos terapija būtų vaisinga, reikia ją pradėti palyginus ankstyvame amžiuje ir tęsti neapibrėžtą laiką. Nors mažai riebalų turintis maistas yra kertinis tokios ilgalaikės terapijos akmuo, po 6 mėnesių net iki 60 % pacientų nesutinka su tokia terapija. Šis nesutikimas pastebėtas daugelyje Vakarų šalių, kuriose įprastas maistas yra turtingas riebalais. Daugumos pacientų blogą cholesterolio vaizdą dar paaštrina papildomų širdies-kraujagyslių ligų rizikos faktorių įsigalėjimas, tokių kaip aukštas kraujo spaudimas, diabetas, nutukimas ir rūkymas.
Maisto keitimas, kaip aterosklerozės ir kitų širdies-kraujagyslių ligų terapija, labai ištobulėjo per pastaruosius 10-15 meti}. Konkrečiau, tyrinėtojai pripažino, kad augalų steroliai (fitosteroliai) efektyviai mažina cholesterolio kiekį plazmoje: Lees et ak, Atherosclerosis, 28 (1977) 325-338; Kudehodkar et ak, Atherosclerosis, 23 (1976) 239; Day,Artery, 18(3): 125-132 (1991).
Fitosteroliai yra panašūs į sterolius junginiai, sintezuojami augaluose, ir žmonėms neturi maistinės vertės. Augaluose jie reikalingi ląstelių funkcionavimui, panašiai kaip cholesterolio reikia žmonėms. Vidutinėje Western’o dietoje yra iki 360 mg fitosterolių per dieną. Dabartiniu metu šie augalų steroliai susilaukė didelio dėmesio dėl jų priešvėžinių savybių ir jų sugebėjimo sumažinti cholesterolio kiekį, jeigu jais maitinamos įvairios žinduolių rūšys, įskaitant žmones.
Pagal cheminę struktūrą fitosteroliai yra labai panašūs į cholesterolį. Pagrindiniai fitosteroliai yra beta-sitosterolis, kampesterolis ir stigmasterolis. Iš kitų paminėtini stigmastanolis (beta-sitostanolis), sitostanolis, desmosterolis, chalinasterolis, poriferasterolis, klionasterolis ir brasikasterolis. Beta-sitosterolio, kampesterolio ir stigmasterolio cheminės formulės yra:
stigmasterolis
Mechanizmas, pagal kurį fitosteroliai mažina cholesterolio kiekį gyvūnų plazmoje, yra nežinomas, bet atrodo, kad į ji įeina cholesterolio absorbavimo iš proksimalios tuščiosios žarnos inhibicija, konkuruojant fitosteroliams su cholesteroliu specifinėse įsisavinimo vietose. Tyrimo duomenys taip pat leidžia manyti, kad kai kurie fitosteroliai iš viso nėra absorbuojami proksimaliojoje tuščiojoje žarnoje (sitostanolis), o tuo atveju, kai vyksta absorbavimas (betasitosterolis), absorbuojami labai riboti kiekiai.
Remiantis šiais tyrimų duomenimis, fitosterolių, kaip dietos priedo, panaudojimas cholesterolio absorbavimui sumažinti buvo plačiai tyrinėtas. Lees et ak, supra; Pollak, Pharmac, Ther., 31 (1985) 177-208; Raicht et ak, Biochimica et Btophysica Actą, 388 (1975) 374-384.
Lees et ak, supra palygino iš dviejų šaltinių gautų siterosterolio preparatų poveikius j cholesterolio kiekį: sojos sterolius ir talo alyvos sterolius. Buvo rasta, kad augalų sterolio preparatai yra efektyvūs, gydant pacientus, sergančius hipercholesterolemija. Pollak, supra, yra apžvalginis straipsnis apie fitosterolius ir jų poveikį į serumo lipidus. Raicht, supra, be to, aprašo beta-sitosterolio poveikį į sterolių pusiausvyrą ir sterolių metabolizmo greitį ribojančius fermentus.
Yra bendrai priimta, kad fitosteroliai duoda unikalią ilgalaikio nekenksmingumo, efektyvumo ir visapusiškumo kombinaciją žmonių gydyme. Tebesančios pretenzijos fitosteroliams yra jų išskyrimas iš augalinių šaltinių ir nustatymas papildomų šaltinių, kurie yra nebrangūs, prieinami dideliu mastu ir kurie turi hipocholestereminius efektus, ir jų išvalymas.
Tradiciškai fitosteroliai buvo išskiriami iš šaltinių, tokių kaip kukurūzų aliejus, kviečių daigų aliejus, sojos pupelių pikis ir kukurūzų aliejaus pikis. Panašiu būdu, talo alyvos pikis, kuri gaunama popieriaus gamybos iš medžio, ypatingai iš pušų, procese, buvo naudojama kaip fitosterolių šaltinis. Paprastai šiame procese medžio drožlės yra skaldomos kaustikine soda, susidarant pulpai arba “muilui”. Po to muilas distiliuojamas, norint pašalinti lakias medžiagas, ir, kaip liekana, lieka “pikis”. Būtent iš šio pikio mokslininkai ir išskyrė fitosterolius.
Šie tradiciniai fitosterolių šaltiniai turi daug trūkumų. Talo alyvos pikis yra ypatingai sudėtinga medžiaga, kurioje yra dervų, riebalų rūgščių, oksidacijos produktų, esterintų medžiagų ir fitosterolių. Nors šis pikis yra nebrangus, nes jis yra įvairių gamybos procesų atliekos, labai sunku išgauti iš jo didelės molekulinės masės sterolius geromis išeigomis ir didelio švarumo, kurio reikia farmaciniam jų panaudojimui.
US patente Nr.3840570 (Jullian) duodamas fitosterolių gavimo būdas iš talo alyvos pikio, ekstrahuojant vandens-alkoholio-angliavandenilio mišiniu, po to muilinant ir valant. Pradinė medžiaga šiame gavimo būde yra talo alyvos pikis, iš kurio išekstrahuojami fitosteroliai ir įvairios priemaišos. Pripažinta, kad bet kuriame talo alyvos pikio valymo procese yra ypatingai sunku atskirti ilgos grandinės alkoholių ir rūgščių priemaišas nuo sterolių (kurie patys yra didelės molekulinės masės alkoholiai).
Kiti tyrinėtojai taip pat nagrinėjo sterolių išskyrimą iš talo alyvos pikio: US patentas Nr. 2835682 (Steiner and Fritz); US patentas Nr. 2715638 (Albrecht and Herrlinger); US patentas Nr. 2573891 (Christenson). Svarbu pažymėti, kad visuose šiuose išskyrimo būduose pradinė medžiaga buvo talo alyvos pikis, ir juose išliko aukščiau aptartos išgavimo problemos.
Šio išradimo objektas yra sumažinti aukščiau minėtus trūkumus arba jų išvengti.
Išradimo santrauka
Šiame išradime siūlomas fitosterolių kompozicijų iš pulpos muilo gavimo ir išvalymo būdas, apimantis išekstrahavimą iš pulpos muilo riebalingų nuosėdų ir šių nuosėdų išvalymą, susidarant unikaliai fitosterolių kompozicijai. Konkrečiau imant, riebalingos nuosėdos išekstrahuojamos iš pulpos muilo, naudojant ekstrakcijos tirpikliais metodiką. Po to, gauta kompozicija išskiriama iš riebalingų nuosėdų kristalinimo būdu.
Siame išradime taip pat pateikiamos unikalios kompozicijos, kurios tinka dislipidemijos profilaktikai ir gydymui, ir kuriose yra beta-sitosterolis, kampesterolis ir stigmastanolis. Čia pateikiamos fitosterolių kompozicijos labai skiriasi nuo kompozicijų, randamų augaluose, maiste ir aliejuose. Pasirodo, kad stigmastanolio įvedimas didina jų veiksmingumą. Šiose kompozicijose gali būti dar ir įvairių kartu išskiriamų junginių, kurie gali būti tiek fitosteroliai, tiek ir ne fitosteroliai. Atskiru atveju, tokie junginiai gali būti triterpenai, ilgos grandinės alkoholiai ir kiti alkoholyje tirpūs organiniai junginiai.
Šiame išradime taip pat pateikiamas čia aprašytų kompozicijų panaudojimas pirminės ir antrinės dislipidemijos ir aterosklerozės, įskaitant žmonių ir gyvulių koronarinę širdies ligą, periferinių kraujagyslių ligą ir paralyžių, profilaktikai ir gydymui.
Unikalios šio išradimo kompozicijos parodė puikius rezultatus, mažinant bendrą (TC) ir mažo tankio lipoproteinų (LDL) cholesterolį kraujyje. Be to, gana netikėtai buvo rasta, kad šio išradimo kompozicijos įvairių gyvulių atveju palaiko arba padidina didelio tankio lipoproteinų (HDL) cholesterolio koncentraciją kraujyje. Ši šio išradimo ypatybė yra labai svarbi, turint galvoje tyrinėtojų nustatytą faktą, kad nepriklausomai nuo TC kiekių, kai HDL kiekiai plazmoje sumažėja, aterosklerozės rizika padidėja. Fitosteroliai, išskirti iš talo alyvos pikio, sojos pupelių ir kitų šaltinių, kiek žinoma šio išradimo autoriams, neturi tokio unikalaus HDL efekto.
Nors yra žinoma, kaip galima pagaminti tam tikro tipo fitosterolius iš pikio, distiliuojant medžio drožlių apdirbimo muilą, fitosterolių kompozicijos iš medžio drožlių apdirbimo proceso pulpos muilo komponento iki šiol nebuvo pagamintos. Talo alyvos pikio sudėtis labai skiriasi nuo pulpos muilo sudėties. Manoma, kad šio išradimo kompozicijų stebinantis poveikis yra, bent jau iš dalies, dėl pulpos muilo, kaip pradinės medžiagos, panaudojimo ir dėl unikalaus išskyrimo būdo.
Trumpas brėžiniu aprašymas
Įvairūs išradimo aspektai bus iliustruojami toliau duodamais brėžiniais, kurie neapriboja išradimo apimties.
Fig.l yra vienos šio išradimo kompozicijos (čia ir toliau Forbes-2) dujų chromatografijos atsako vaizdas.
Fig.2 yra fig.l atsako atvaizdavimas, kai sulaikymo laikas yra nuo 35 iki 45 min.
Fig.3 yra fig.l atsako atvaizdavimas, kai sulaikymo laikas yra nuo 22 iki 27 min.
Fig.4 yra fig.l pavaizduoto dujų chromatografijos atsako rodyklė.
Fig.5 yra kitos šio išradimo kompozicijos (čia ir toliau Forbes-3) dujų chromatografijos atsako vaizdas.
Fig.6 yra fig.5 atsako atvaizdavimas, kai sulaikymo laikas yra nuo 32 iki 48 min.
Fig.7 yra fig.5 pavaizduoto dujų chromatografijos atsako rodyklė.
Fig.8 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti Forbes-1 ir Forbes-2 įtaką į TC koncentracijas žiurkėse.
Fig.9 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti Forbes-1 ir Forbes-2 įtaką į LDLcholesterolio koncentracijas žiurkėse.
Fig.10 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti Forbes-1 ir Forbes-2 įtaką į HDL-cholesterolio koncentracijas žiurkėse.
Fig. 11 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti Forbes-3 įtaką į TC koncentracijas žiurkėnų serume.
Fig. 12 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti Forbes-3 įtaką į LDLcholesterolio koncentracijas žiurkėnų serume.
Fig. 13 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti Forbes-3 įtaką į HDLcholesterolio koncentracijas žiurkėnų serume.
Fig.14 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų-patinų ir žiurkėnų-patelių cholesterolio kiekius.
Fig.15 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų-patinų cholesterolio kiekius plazmoje.
Fig. 16 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų-patelių cholesterolio kiekius plazmoje.
Fig.17 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų-patinų ir žiurkėnų-patelių trigliceridų kiekius plazmoje.
Fig.18 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus j žiurkėnų-patinų ir žiurkėnų-patelių HDL/apo-B santykius.
Fig. 19 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų bendrą cholesterolio kiekį 45 tyrimo dieną.
Fig.20 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į cholesterolio koreliaciją su sitostanoliu.
Fig.21 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų HDL kiekius po daugiau nei 45 dienų.
Fig.22 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų Non-apoA/apoA santykius po daugiau nei 45 dienų.
Fig.23 yra stulpelinė diagrama, vaizduojanti poveikio įvairiomis dietomis efektus į žiurkėnų Non-apoA sterolius po daugiau nei 45 dienų.
Tinkamiausi išradimo įgyvendinimo variantai
Šio išradimo būdas susideda iš tokių stadijų:
(A) pradinės medžiagos - augalinės kilmės pulpos muilo - gavimas;
(B) riebalingų nuosėdų išekstrahavimas iš muilo, panaudojant tinkamą tirpiklį; ir (C) fitosterolio kompozicijos išskyrimas iš riebalingų nuosėdų.
Yra daugybė galimų augalinės kilmės šaltinių pulpos muilui gauti. Bendrai imant, žinomame būde (“Krafto” būdas) muilui gauti medžio drožlės veikiamos kaustikine soda. Medžio drožlės gali būti gaunamos iš bet kokio kieto arba minkšto medžio, įskaitant (bet neapsiribojant) elgę, kedrą, pušį, melsvąją kanadinę eglę, ąžuolą, cflgą (nuokaną) ir tuopą. Geriausia drožles gauti iš bet kokių Šiaurės Vakarų Amerikos arba Europos miškų medžių.
Ekstrakcijos fazėje muilas sumaišomas su ketono ir vandens tirpalu. Sterolių ekstrakcijai vartojamas angliavandenilinis tirpiklis. Šią stadiją paprastai galima vykdyti 25-150 °C temperatūrų intervale, bet geriausia 50-100 °C temperatūrų intervale. Geriausia ekstrahuoti nuo daugiau nei 15 iki 24 valandų. Svarbu pažymėti, kad alkoholio panaudojimas nėra reikalingas ir nesiūlomas ekstrakcijos stadijoje. Ekstrakcija pagal šį išradimą vykdoma, naudojant ketono-vandens-angliavandenilio mišinį.
Ketonas yra pasirenkamas iš grupės junginių, turinčių bendrąją formulę RCOR’, kurioje R ir R’ yra alkilo grupės. Tinkamiausios alkilo grupės yra C1-C6 grupės. Visų geriausia, kai ketonas yra 2-propanonas (acetonas). Angliavandenilis gali būti pasirenkamas iš grupės, apimančios visus C5-C10 angliavandenilius. Tinkamiausias angliavandenilis yra heksanas.
Kaip pavaizduota fig.1, ekstrakcijos produktas yra riebalingos nuosėdos arba liekana, kuri valoma, norint gauti fitosterolių kompozicijas. Valymo stadiją galima atlikti kristalizacijos būdu, išskiriant chromatografijos metodu arba bet kokia kita tinkama metodika. Geriausia riebalingas nuosėdas ištirpinti alkoholyje, lėtai atšaldyti, po to nufiltruoti ir perplauti šaltu alkoholiu. Liekana išdžiovinama, ir gautas produktas yra fitosterolių kompozicija.
Tinkamiausiame variante valymo stadijoje naudojamas alkoholis yra pasirenkamas iš grupės junginių, kurių bendrosios formulės yra R-CHOH-R, RCH2OH ir R3COH, kur R yra C1-C4 alkilo grupė. Visų geriausias alkoholis yra metanolis. Atšaldymo stadiją galima vykdyti 10-0 °C temperatūrų intervale, geriausia 3-4 °C temperatūroje, 24 valandas.
Fitosterolių kompozicijos, gaunamos pagal čia aprašytą būdą, gali būti tiesiogiai pridedamos į maisto priedus, vitaminų receptūras ir į vaistus aterosklerozės ir jos pasekmių, paralyžiaus, širdies priepuolių ir periferinių kraujagyslių ligos gydymui ir profilaktikai. Be to, viename šio išradimo įgyvendinimo variante siūloma čia aprašytas fitosterolių kompozicijas gaminti vaisto forma su tinkamais stimuliatoriais arba nešikliais. Pavyzdžiui, šios kompozicijos gali būti įterpiamos arba skiriamos kartu su pasirinktais lipidų kiekį mažinančiais agentais, norint sumažinti jų dozes, o tuo pačiu ir pastarųjų agentų toksiškumą.
Šio išradimo fitosterolių kompozicijos parodė pastebimą sugebėjimą modifikuoti lipoproteinus, net ir esant mažesnėms fitosterolių koncentracijoms nei žinomose receptūrose. Tačiau stebėtina, kad šios kompozicijos gali padidinti didelio tankio lipoproteinų (HDL) kiekį plazmoje; toks efektas iki šiol nebuvo susietas su bet kokia kita fitosterolių, gautų iš talo alyvos, kompozicija. Manoma, kad šis unikalus poveikis yra dėl to, kad pradine medžiaga joms gauti yra naudojami pulpos muilai, arba dėl to, kad vienas iš šios kompozicijos elementų yra stigmastanolis.
Tinkamiausiame variante šio išradimo kompozicijos turi tokį fitosterolių santykį: beta-sitosterolis (1); kampesterolis (0,2-0,4) ir stigmastanolis (0,2-0,5). Dar geriau, kai kampesterolis ir stigmastanolis kartu sudaro bent 50 % bendros betasitosterolio koncentracijos. Visų geriausiame variante šio išradimo kompozicijose fitosterolių santykis, lyginant su iš sojos pupelių gautais fitosteroliais, yra toks:
Apytikris švarumas (%) Žinomų fitosterolių santykis
β-sitosterolis kampesterolis stigmastanolis
Sojos pupelių 1 0,640 0,005
Forbes-1 91,0 1 0,354 0,414
Forbes-2 77,0 1 0,330 0,203
Forbes-3 90,0 1 0,268 0,299
Dviejų kitų šio išradimo ekstraktų kompozicija ir švarumas yra toks:
Apytikris švarumas (%) Kompozicija (%)
β-sitosterolis kampesterolis stigmastanolis
Forbes-4 99,0 62,6 16,6 23,2
Forbes-5 98,3 64,7 16,4 17,2
Kiekvienoje čia aprašytoje kompozicijoje gali būti papildomų junginių, kurie gali būti fitosteroliai arba ne fitosteroliai. Pavyzdžiui, buvo rasta, kad gali būti palyginus nedideli kiekiai kampestanolio (kito fitosterolio). Be to, gali būti tiesios grandinės riebalų alkoholių, tokių kaip behenilo (C22) ir lignocerilo (C24) alkoholių.
Norint nustatyti šių kartu išskiriamų junginių prigimtį, buvo atlikta labiausiai tinkamų šio išradimo kompozicijų analizė dujų chromatografijos metodu.
Dujų chromatografijos vykdymo sąlygos fitosteroliams buvo tokios: pradinė temperatūra 80 °C, išlaikoma 1 min; pakeliama iki 120 °C 20°C per minutę greičiu ir išlaikoma 7 minutes; pakeliama iki 240 °C 20 °G'per minutę greičiu ir išlaikoma 15 minučių; ir pakeliama iki 269 °C 20 °C per minutę greičiu ir išlaikoma 25 minutes. Kiekvieno bandymo gale temperatūra pakeliama iki 320 °C ir išlaikoma mažiausiai 5 minutes. Įleidimo temperatūra buvo 300 °C, o detektoriaus temperatūra buvo 320 °C. Kolonėlės dujų srauto greitis buvo 1 ml per minutę, o atmetamo srauto greitisbuvo 4 ml per minutę. Išvalymo srauto greitis buvo 4,5 ml per minutę. Nešančios dujos buvo helis.
Dviejų ir labiausiai tinkamų šio išradimo kompozicijų analizės dujų chromatografijos metodu duomenys parodyti fig. 1-7.
Forbes-2 kompozicijoje žinomi steroliai figūrose 1 ir 2 pasirodo 35-45 minučių intervale. Beta-sitosterolio pikas yra 87, kampestrolio - 81 ir stigmastanolio - 84. Fig.2 parodyti 65, 66 ir 77 pikai yra kartu išskiriami junginiai, kurie gali turėti hipocholestereminius poveikius. Tačiau taip pat gali būti, kad šie kartu išskiriami junginiai gali turėti sinergetinį efektą į šios kompozicijos žinomų fitosterolių poveikį. Panašiu būdu, figūrose 5 ir 6 kampesterolio, stigmastanolio ir beta-sitosterolio pikai yra atitinkamai 6, 7 ir 8.
Kitoje tinkamoje šio išradimo kompozicijoje yra tokie komponentai:
kampesterolis 14,1 % kampestanolis 3,5 % beta-sitosterolis 62,8 % stigmastanolis 16,9 %, o bendra fitosterolių koncentracija yra 97,3 %.
PAVYZDYS - Ekstrakcija ir valymas
Trijų kg pulpos muilo partija buvo gauta iš B.C. Chemicals Ine. Pagaminamas mišinys iš 3 1 acetono ir 1,5 1 vandens, ir j jį sudedamas muilas. Mišinys nepertraukiamai ekstrahuojamas 4,5 1 heksano 50 °C temperatūroje, naudojant 18 1 garintuvą. Po to, gautas ekstrakcijos produktas džiovinamas natrio sulfatu, ir nugarinamas tirpiklis. Gaunama 460 g liekanos arba riebalingų nuosėdų.
Riebalingos nuosėdos pašildomos, maišomos magnetiniu strypo pavidalo maišikliu ir palaipsniui pridedama 460 ml metanolio. Mišinys virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu, maišant, 15 min. ir palaipsniui šaldomas 3-5 valandas. Mišinys lakomas šaldytuve 3-4 °C temperatūroje per naktį, po to filtruojamas ir plaunamas (du kartus) 150 ml šalto metanolio. Tada mišinys laikomas vakuume 2 dienas, ir gaunama 100 g 82 % (t.y. 82 g fitosterolių) grynumo mišinio.
PAVYZDYS - Fitosterolių kompozicijos poveikio įvertinimas bandymuose su žiurkėmis
Devyniasdešimt Wistar žiurkių-patinėlių buvo padalinta į 3 eksperimentines grupes: Forbes-1 komozicija, Forbes-2 kompozicija ir sojos pupelės. Trisdešimt kiekvienoje grupėje esančių žiurkių buvo vėl padalinta į 5 maisto režimų grupes, kaip parodyta 2 lentelėje. Žiurkės buvo laikomos keičiamo šviesos ciklo sąlygomis ir šeriamos baziniu pusiau išgrynintu maistu (1 lentelė), į kurį pridedami skirtingi cholesterolio ir fitosterolių kiekiai (2 lentelė). Kiekvienoje iš 5 maisto grupių 2 pelėms buvo skiriama Forbes-1 kompozicija, 2 pelėms - Forbes-2 kompozicija ir 2 pelėms - iš sojos pupelių gautas fitosterolis (Sigma).
lentelė. Eksperimentinio maisto sudėtis
Ingredientai %
Kazeinas 20
Kukurūzų krakmolas 21,5
Sacharozė 35
Surištas aliejus* 18
DL-metioninas 0,5
Mineralinių medžiagų mišinys 4,00
Vitaminų mišinys 1,00
*Dygmino ir lydytų taukų mišinys santykiu 1:3 lentelė. Maisto režimai
Grupės Steroliai pridėti prie bazinio maisto (%)
Cholesterolis Fitosterolis
1 0 0
2 1 0
3 1 0,2
4 1 0,5
5 1 1
Maitinimo laikotarpio pabaigoje žiurkėms suleidžiama į pilvą deuterio oksido (0,4 ml) ir neduodama maisto ir vandens mažiausiai 2 valandas. Tada žiurkės anestezuojamos halotanu. Iš širdies paimami kraujo mėginiai. Paimami kepenų, mažojo žarnyno ir raumenų mėginiai, pasveriami, įdedami į skystą azotą ir laikomi 80 °C temperatūroje, kol pasibaigia cholesterolio sintezė. Panaudojant prekybinį rinkinį (Biopacific Diagnostic Ine), nustatomas bendras cholesterolis, LDL ir HDL cholesterolis.
Fitosterolių kompozicijų poveikio į bendrą cholesterolį, LDL ir HDL rezultatai parodyti atitinkamai fig. 8, 9 ir 10. Forbes-1 ir Forbes-2 efektyvumas matomas iš LDL-cholesterolio kiekio sumažėjimo, parodyto fig.9, ir HDLcholesterolio kiekio padidėjimo, parodyto fig.10; ypatingai veikia Forbes-1. Fig.8 parodyta, kad pridėjus cholesterolio (2 maisto grupė) j bazinę dietą (1 grupė), stebimas cirkuliuojančio cholesterolio koncentracijų padidėjimas. Palaipsniui didinant fitosterolių kiekius (3-5 grupės), stebimas cholesterolio kiekio sunormalėjimas grupėse, gavusiose Forbes-1 ir Forbes-2, bet tokio efekto neturėjo sojos pupelių fitosteroliai, kas buvo nustatyta regresinės analizės būdu. Fig.9 parodyta, kad Forbes-2 ir Forbes-1 fitosteroliai pasižymi didesniu cholesterolio kiekio mažinimo efektyvumu, nei sojos pupelių fitosteroliai LDL atžvilgiu. Fig.10 rodo, kad tinkamiausios šio išradimo kompozicijos, ypatingai Forbes-1, turi didesnį HDL didinimo sugebėjimą, lyginant su sojos pupelių fitosteroliais.
PAVYZDYS - Fitosterolių kompozicijos poveikio įvertinimas bandymuose su žiurkėnais
Šiame eksperimente buvo tiriamas šio išradimo maistinių fitosterolio kompozicijų poveikis j maistinio cholesterolio sukeltą cholesterolio koncentracijų padidėjimą žiurkėnų serume.
Iš viso 40 žiurkėnų-patinėlių (80-100 g), apgyvendintų po vieną nerūdijančio plieno narveliuose su skylutėmis, maitinami graužikų maistu ir aklimatizuojami tris dienas kambaryje (20-20 °C, apšvietimas - 1700-0500). Po to žiurkėnai padalinami j penkias grupes po 8 gyvuliukus kiekvienoje grupėje ir šeriami 34 dienas baziniu pusiau išvalytu maistu (3 lentelė), j kurį pridėta skirtingi kiekiai cholesterolio ir vienos iš šio išradimo fitosterolių kompozicijos (Forbes-3) (4 lentelė).
lentelė. Eksperimentinio maisto sudėtis
Ingredientai % pagal svorį
Kazeinas 20
Kukurūzų krakmolas 28
Sacharozė 36,6
Kukurūzų aliejus 5,0
Celiuliozė 5,0
DL-metioninas 0,5
Mineralinių medžiagų mišinys 4,00
Vitaminų mišinys 1,00
Cholino bitartratas 0,2
Cholesterolis 0,025, 0,25
lentelė. Maisto režimai
Grupės Cholesterolis, pridėtas į kontrolinį maistą, % Fitosteroliai, pridėti į kontrolinį maistą, %
1 0,025 nėra
2 0,25 nėra
J 0,25 0,25
4 0,25 0,5
5 0,25 1,0
Maitinimo laikotarpio pabaigoje gyvuliukams suleidžiama į pilvą deuterio oksido (0,4 ml) ir neduodama maisto ir vandens mažiausiai 2 valandas. Tada žiurkėnai anestezuojamos halotanu. Iš širdies paimami kraujo mėginiai. Paimami kitų audinių, įskaitant kepenis, mažąjį žarnyną ir raumenis, mėginiai, pasveriami, įdedami į skystą azotą ir laikomi -80 °C temperatūroje, kol pasibaigia cholesterolio sintezė. Panaudojant prekybinį rinkinį, nustatomas bendras cholesterolis, LDL ir HDL cholesterolis. Rezultatai įvertinami statistiškai, panaudojant variacinės metodikos (SYSTAT) 0NEWAY analizę.
Žiurkėnai, šerti daug cholesterolio turinčiu maistu, turėjo daug didesnį bendro cholesterolio ir LDL-cholesterolio kiekį serume, negu žiurkėnai, kurie buvo šerti normalų cholesterolio kiekį (0,025 %) turinčiu maistu. Papildomi 0,5 % ir.l % fitosterolių kiekiai panaikino šį padidėjimą, kurį sukėlė didelis cholesterolio sunaudojimas (fig.l 1 ir 12). LDL-cholesterolio koncentracija 5 grupėje buvo mažesnė, lyginant su žiurkėnų, šertų normalų cholesterolio kiekį turinčiu maistu, koncentracijomis (fig. 12). Be to, buvo neigiama regresinė bendrojo cholesterolio ir LDL-cholesterolio priklausomybė nuo pridėto į maistą fitosterolių kiekio (fig.l3).
Fitosterolių priedas sukėlė nedidelį HDL padidėjimą, tačiau aiškaus skirtumo nedavė (fig. 13).
PAVYZDYS - Fitosterolių kompozicijos poveikio įvertinimas bandymuose su žiurkėnais (90 dienų bandymas)
Šešios 20 žiurkėnų (10 patinėlių, 10 patelių) grupės buvo šeriamos pusiau išgrynintu maistu, turinčiu 30 % riebalų (polinesočių/sočių riebalų santykis = 0,3) 90 dienų. 1 maistas buvo be cholesterolio. 2-6 maiste buvo 0,25 % (sv/sv) maistinio cholesterolio. 3 ir 4 maiste buvo atitinkamai 0,5 ir 1 % Forbes fitosterolių (didesnio nei 90 % švarumo). Maistas buvo ruošiamas iš pirminių ingredientų kiekvieną savaitę. Riebalų, fitosterolių ir cholesterolio kiekiai buvo nustatomi dujų chromatografijos metodu. Visi gyvuliukai galėjo laisvai prieiti prie vandens ir maisto per visą eksperimento laikotarpį. Gyvuliukai buvo sveriami kiekvieną savaitę. Maisto suvartojimas nustatomas kiekvieną dieną ir išvedamas savaitės vidurkis, pasveriant maisto indelius prieš ir po kiekvieno 24 vai. maitinimo laikotarpio. Po 90 dienų gyvuliukai buvo numarinami, naudojant halotaną, ir surenkamas kraujas lipoproteinų vaizdo analizei. Nustatomi bendro cirkuliuojančio cholesterolio, turinčio apoB dalelių ir HDL cholesterolio, bei trigliceridų kiekiai. Taip pat prieš pat numarinimą nustatoma cholesterolio absorbcijos ir sintezės greičiai, naudojant atitinkamai 14C-cholesterolio išnykimo iš žarnų ir deuterio įsiterpimo į audinių cholesterolį metodikas. Taip apt buvo tirta fitosterolių patekimas į žarnyną ir kitus audinius. Be to, žarnų ir kepenų mėginiai buvo laikomi tam, kad juos būtų galima atiduoti į Senevilio Bio-Research Laboratories (Kvebekas) histopatologiniams, karcinogeniškumo ir fermentų veiklos tyrimams. *
Rezultatai:
Rezultatai parodyti fig.14-18. Šiose figūrose grupės dažniausiai pažymėtos skaičiais, kurie atitinka skaičius, nurodytus eksperimento plane. Raidės virš stulpelių stulpelinėse diagramose rodo žymius skirtumus tarp grupių. Ten, kur duotos raidės, stulpeliai, turintys tą pačią raidę, nelabai skiriasi, o stulpeliai su skirtingomis raidėmis yra skirtingi, t.y. statistinis lygis p < 0,05.
Fig. 14-16 parodyti žiurkėnų-patinėlių ir patelių, ėdusių tiriamąjį maistą 90 dienų laikotarpyje, cirkuliuojančio cholesterolio duomenys. Gyvuliukų, ėdusių 2 maistą (bazinį maistą tik su pridėtu cholesteroliu) ir 5 maistą, turintį cholesterolio + sojos pupelių fitosterolių, atveju stebėti dideli bendro cirkuliuojančio cholesterolio kiekių skirtumai priklausomai nuo lyties. Patelės, nors jų cholesterolio kiekiai nesiskyrė nuo patinėlių bazinės dietos grupėje (1 grupė), rodė didesnį atsaką į pridėtą vieną cholesterolį, negu patinėliai. Pridėjus fitosterolių, šis skirtumas išnyko, išskyrus 5 grupę.
Cholesterolio kiekių duomenys, padalinus į grupes pagal lytį, parodyti fig. 15 ir 16. Patinėlių atveju (fig.15), į bazinį maistą pridėjus vien tik cholesterolio, stebimas didelis cirkuliuojančio cholesterolio kiekio padidėjimas. Pridėjus 0,5 % Forbes fitosterolių, stebima cholesterolio kiekio mažėjimo tendencija, tačiau pridėjus 1 % Forbes fitosterolių, išgaunamas statistiškai reikšmingas cholesterolio kiekio sumažėjimas, ir pasiekiami maždaug tokie patys kiekiai, kaip ir kontrolinėje grupėje, kurioje nebuvo pridėta cholesterolio. Kai į maistą pridedama 0,5 ir 1 % sojos pupelių fitosterolių, patinėlių atveju nebuvo aiškaus bendro cirkuliuojančio cholesterolio kiekio sumažėjimo. Kai dėl HDL, tai stebimas skirtingas Forbes efektas, lyginant su sojos pupelėmis - maistas su Forbes nepakeitė HDL kiekių grupėje, gavusioje tik cholesterolio (2 grupė), tuo tarpu sojos pupelės davė žymų HDL kiekių sumažėjimą abiem tirtais atvejais (5 ir 6 grupės). Didelių apoB turinčių cholesterolio dalelių kiekių skirtumų nepastebėta, tačiau, maitinant cholesteroliu su 1 % Forbes, stebima jų kiekių mažėjimo tendencija, lyginant su kitomis grupėmis.
Patelių tyrimo rezultatai parodyti fig.1‘6. Nagrinėjant bendrą ir HDL cholesterolį, pastebėta aiški pridėto maistinio cholesterolio įtaka. Pridėjus 1 % bet kokio tipo šaltinio fitosterolių, gaunamas aiškus ir panašus bendro ir HDL cholesterolio koncentracijų sumažėjimas. ApoB turinčių dalelių kiekiams maistas neturėjo įtakos.
Žiurkėnų, gavusių tiramąjį maistą 90 dienų laikotarpyje, cirkuliuojančių trigliceridų kiekiai parodyti fig.17. Pastebėtas patelių, gavusių bazinį maistą su cholesteroliu ir su 0,5 % Forbes, cirkuliuojančių trigliceridų kiekių padidėjimas, lyginant su vien tik baziniu maistu, tačiau kitų skirtumų tarp grupių nebuvo pastebėta abiejų lyčių grupėse. Patinėlių atveju maisto įtakos arba tendencijos į trigliceridų koncentraciją nebuvo.
Susumuotoje formoje patinėlių rezultatų išsidėstymas priklausomai nuo tirtojo maisto yra toks:
lentelė
Bendras cholesterolis LDL HDL
Forbes 0,5 % 4 2 1
Forbes 1,0 % 1 1 2
Soja 0,5 % 2 3-4 4
Soja 1,0 % 3 4-3 3
Galima aiškai pastebėti Forbes kompozicijų (tokių kaip šio išradimo) privalumą. Be to, buvo rastas ir HDL:ApoB santykio panašus išsidėstymas patinėliams (fig.18):
Forbes 0,5 % 2
Forbes 1,0 % 1
Soja 0,5 % 4
Soja 1,0 % 3
Taip pat buvo rasta, kad HDL:LDL santykis Forbes kompozicijų atveju yra beveik dvigubai didesnis, lyginant vien tik su β-sitosteroliu.
PAVYZDYS - Fitosterolių kompozicijos poveikiai bandymuose su triušiais Šiame eksperimente du triušiai buvo tiriami 43 dienas, norint nustatyti vienos iš šio išradimo kompozicijų (1 % Forbes maiste) poveikį į bendrą cholesterolio vaizdą. Rezultatai buvo tokie:
lentelė
Triušių bendro cholesterolio vaizdas (mg/dl)
Data A triušis B triušis
95.06.14 95 215
95.06.18 129 162
95.06.26 - pradedama šerti 1 % Forbes
95.07.07 75 106
95.07.09 - pradedama šerti 1 % Forbes
96.07.18 90 112
95.07.25 82 118
95.08.01 95 119
95.08.08 76 114
Abiejų triušių (A ir B) atveju matomas bendro cholesterolio sumažėjimas per dvi fitosterolio kompozicijos (1 % Forbes) vartojimo savaites. Poveikis tęsėsi net ir nutraukus 1 % Forbes vartojimą. Šio išradimo kompozicijos poveikis į bendro cholesterolio kiekio mažinimą užsitęsė, praėjus pradinio vartojimo fazei.
PAVYZDYS - Fitosterolių kompozicijos poveikiai bandymuose su apo-E trūkumą turinčiomis pelėmis
Gyvuliukai: Devyniolika 5 savaičių amžiaus apo-E trūkumą turinčių pelių buvo gauta iš Jackson Laboratory, JAV. Gyvuliukai buvo atsitiktinai padalinti į 2 grupes: 9 gyvuliukai buvo kontrolinėje grupėje ir 10 pelių - eksperimentinėje Forbes grupėje. Po 5 dienų adaptacijos laikotarpio, iš pelių uodegų buvo paimtas kraujas į kapiliarinius vamzdelius ir atskirta plazma centrifuguojant kraują. Nustatytas lipidų kiekis pelių plazmoje.
Maistas: Mažai riebalingas, mažai cholesterolio turintis pelių maistas buvo gautas iš Jamieson’s Pet Food Distributors Ltd., Vancouver, B.C. Talo alyvos fitosteroliai buvo išskirti iš taio alyvos muilo, naudojant šiame išradime aprašytą būdą. Grynumas ir kiekvieno atskiro fitosterolio procentinis kiekis mišinyje buvo įvertintas dujų-skysčio chromatografijos metodu. Galutinis produktas buvo 95 % grynumo ir turėjo 69 % sitosterolio, 15 % kampesterolio ir 16 % stigmastanolio. Pelių maistas buvo sumaltas į smulkius miltelius. Į šiuos miltelius pridėta 0,15 % (sv/sv) cholesterolio (Sigma) ir gerai sumaišyta. Šis maistas su cholesterolio priedu buvo vėl sugranuliuotas, išdžiovintas ir naudojamas eksperimentinės grupės pelėms šerti.
Biocheminiai tyrimai: Bendras cholesterolio kiekis plazmoje ir trigliceridai buvo išmatuoti, naudojant fermentų rinkinį (Boehringer Mannheim), o HDLcholesterolis buvo įvertintas pagal anksčiau literatūroje aprašytą nusodinimo metodą, naudojant polietilenglikolį 6000.
Kūno svoris ir maisto suvartojimas: Pelių kūno svoris ir maisto suvartojimas matuotas kas savaitę.
lentelė
Pelės vidutinis kūno svoris (g) (duoti tik kas mėnesį atlikti matavimai)
Data Forbes grupė Kontrolinė grupė
95.06.20 21,42 21,02
95.07.24 29,82 28,00
95.08.22 32,12 29,73
95.09.12 34,16* 30,78
*p < 0,05 8 lentelė
Pelės vidutinis maisto suvartojimas per savaitę (g) (duoti tik kas mėnesį atlikti
matavimai)
Data Forbes grupė Kontrolinė grupė
95.06.26-07.03 19,61 21,21
95.08.01-08.08 32,62* 29,20
95.08.15-08.22 29,32 27,10
95.09.05-09.12 35,56 30,25
*p < 0,05
Kiti duomenys: Naujojo maisto sukelti} pašalinių efektų nepastebėta. Visi abiejų grupių gyvuliukai atrodė normaliai, turėjo normalius įpročius, įskaitant tuštinimosi įprotį. Kontrolinėje grupėje buvo rasta viena negyva pelė 95.07.11. Kadangi pelės kūnas nebuvo laikomas, autopsija nebuvo padaryta. Forbes grupėje buvo rasta viena dehidratuota, praradusi kūno svorį pelė. Gyvuliukas buvo užmuštas, ir nustatyta, kad jo susirgimo priežastis yra malokliuzija (netaisyklinga dantų sankanda).
Statistikinė analizė: Rezultatai buvo analizuojami pagal dviejų mėginių t-testą, priimant lygius laisvės laipsnių skaičius.
Rezultatai:
Iki šio laiko atlikti rezultati susumuoti toliau duodamose lentelėse.
lentelė
Vidutinis bendro cholesterolio kiekis pelės p azmoje (mg/dl)
Data Forbes grupė Kontrolinė grupė
95.06.20 95.07.18 95.09.06 606,28 1027,96* 1168,57* 599,61 1622,56 1508,63
* p < 0,0001 10 lentelė Vidutinis trigliceridų kiekis pelės plazmoje (mg/dl)
Data Forbes grupė Kontrolinė grupė
95.06.20 95.07.18 95.09.06 110,97 210,17 224,48 120,31 143,71 152,25
11 lentelė Vidutinis HDL-cholesterolio kiekis pelės plazmoje (mg/dl)
Data Forbes grupė (9) Kontrolinė grupė (7)
95.07.08 42,00* 18,29
Kp < 0,001
Iš šių rezultatų galima matyti, kad Forbes kompozicijos grupė rodo didelį (33 %) bendro cholesterolio kiekio sumažėjimą, nedidelį trigliceridų kiekio padidėjimą ir didelį (>100 %) HDL-cholesterolio kiekio padidėjimą.
PAVYZDYS - Fitosterolių kompozicijos poveikis bandymuose su žiurkėnais (45 dienų bandymas)
Penkiasdešimt GS žiurkėnų buvo pratinami dvi savaites gyvuliukų narvų sąlygomis prieš šeriant juos pusiau išgrynintu maistu 45 dienas. Jie buvo padalinti į 5 grupes, šeriamas 0,25 % cholesterolio kartu su vienu iš keturių augalų sterolių mišinių: sojos pupelių, talo alyvos, gryno sitostanolio ir dirbtinio mišinio, vaizduojančio talo alyvos fitosterolius. Kontrolinė grupė gavo tik 0,25 % cholesterolio. Tyrimo laikotarpiu kas trys dienos buvo kontroliuojamas jų maisto suvartojimas. Gyvuliukų kūno svoris buvo matuojamas kas savaitę ir audinių paėmimo metu. Trys dienos prieš GS žiurkėnų užmušimą, jie buvo lengvai anestezuojami dietilo eteriu ir intraveniniu būdu per jungo veną įleidžiama 0,4 ml Intralipid’o, turinčio 0,18 mg 13C-cholesterolio. Tuoj po injekcijos per skrandžio zondą gyvuliukams buvo supilta 0,6 ml lipidų mišinio (kokoso riešutų, alyvmedžio ir dygmino aliejų), turinčio 0,44 mg 13C-chloesterolio. Tada GC žiurkėnai buvo laikomi jų vieliniuose narvuose 72 valandas, duodant vandens ir maisto ad libidum.
Užmušimo dieną kiekvienam žiurkėnui įleidžiama i.p. 1 ml deuteruoto vandens ir palaikoma vieną valandą prieš užmušant. Gyvuliukai anestezuojami dietilo eteriu ir širdies punkcijos būdu paimami kraujo mėginiai. Paimamos kepenys, tulžies pūslė, mažasis žarnynas, didysis žarnynas ir širdis, užšaldoma skystame azote ir laikoma šaldiklyje -80 °C temperatūroje. Skerdiena ir išmatos laikoma -20 °C temperatūroje tolimesnei bendrųjų lipidų ir sterolių analizei.
Maisto suvartojimo, kūno ir kepenų svorio matavimai
GS žiurkėnų maisto suvartojimas buvo matuojamas kas trys dienos. Statistikinė analizė rodo, kad nėra skirtumo tarp visų penkių grupių maisto suvartojimo. Vidutinis suvartojimas per dieną visose penkiose grupėse keitėsi nuo 8,84 iki 9,34 g per dieną, p-reikšmė = 0,4. Gyvuliukų kūno svoris labai padidėjo per tyrimo laikotarpį (nuo maždaug 25 iki 40 g), p-reikšmė < 0,05 (suporuotas t-testas). Galutinis jų kūno svoris buvo 112,5-154,3 g intervale. Skirtingose grupėse statistikinio reikšmingumo nepastebėta, p-reikšmė = 0,43.
Kepenų svoriai buvo labai skirtingi atskirose grupėse. Sitostanoliu šerta grupė turėjo mažiausią kepenų svorį, lyginant su kontroline ir kitomis grupėmis, šertomis atitinkamai 0,25 % cholesterolio ir įvairiais fitosteroliais. Be to, sojos pupelių fitosterolius gavusi grupė labai skyrėsi nuo sitostanolį gavusios grupės, išanalizavus duomenis pagal Newman-Keuls testą. Bendrai imant, visos augalų steroliais šertos grupės turėjo mažesnius kepenų svorius, lyginant su kontroline grupe, šerta 0,25 % cholesterolio, p-reikšmė = 0,01. Talo alyvos steroliais ir sitostanoliu šerti} GS žiurkėnų kepenų vidutinis svoris buvo atitinkamai 15 % ir 20 % mažesnis, nei kontrolinių. Natūrai talo alyva ir dirbtinai paruošta talo alyva turėjo panašius poveikius, kas leidžia manyti, kad sojos pupelių sterolių mišinyje nesantis sterolis (sitostanolis) vaidina pagrindinį vaidmenį sterolių kiekio mažinimui kepenyse.
Lipidu analizė
I. Bendras cholesterolis
Bendro cholesterolio reikšmės buvo nustatytos, naudojant prekybinį fermentinių reagentų rinkinį, VP analizatoriumi. Kraujo mėginiai buvo išmatuoti du kartus, ir šių dviejų reikšmių vidurkis buvo naudotas galutinėje statistikinėje analizėje. Įvairių lipidų analizei naudotas vienos krypties ANOVA su NewmanKeuls ir Bonferroni metodai. Sitostanolis labai mažino GS žiurkėnų bendro cholesterolio kiekį (34 %), lyginant su kontrole. Kontrolinės grupės vidutinė reikšmė buvo 226,9 mg/dl, o sitostanolio gavusios grupės - 151,2 mg/dl, p-reikšmė = 0,007. Talo alyvos fitosteroliai ir dirbtiniai talo alyvos mišiniai rodė panašų plazmos cholesterolio kiekio sumažėjimą (17,5 %), atitinkamai 118,4 mg/dl ir 186,1 mg/dl. Tačiau talo alyvos fitosteroliai (Forbes) rodė didelį bendro cholesterolio kiekio sumažėjimą (175,2 mg/dl), jei analizėje atmetama viena iš skalės išeinančio mėginio reikšmė, p-reikšmė < 0,02 talo alyvos grupėje, lyginant su kontroline grupe (tik 0,25 % cholesterolio). Koreliacija tarp sitostanolio buvimo ir mažesnių kiekių plazmoje buvo reikšminga, p-reikšmė < 0,0001, o r = 0,46.
II. HDL cholesterolis
Didelių skirtumų tarp lipoproteinų, esančių HDL cholesterolyje, apo A dalies reikšmių tarp visų penkių skirtingų grupių pastebėta nebuvo, p-reikšmė = 0,18. Pastebėtas nedidelis (15 %) vidutinės HDL reikšmės sumažėjimas sitostanoliu šertoje grupėje. Vis dėlto, šis elementas neturi įtakos į žymų bendro cholesterolio kiekio sumažėjimą, kuris buvo 34 %. Ne apoA lipoproteinų santykis su apoA (HDL) lipoproteinais nelabai keičiasi tarp grupių. Supainiojantis nežymiai mažesnių HDL reikšmių efektas sitostanolio ir talo alyvos grupėse turėjo įnašą į ne apoA/apoA (HDL) reikšmių nereikšmingo rezultato atsiradimą. Bendrai imant, skirtingų tipų fitosteroliai nekeičia HDL cholesterolio kiekių GS žiurkėnų plazmoje.
III. LDL ir/arba ne apoA steroliai
Sitostanolis efektyviai mažino ne apoA sterolių kiekį plazmoje. Buvo gautas 55 % ne apoA lipoproteinų sumažėjimas, p-reikšmė = 0,02. Panašiai kaip ir jų poveikis į bendrą cholesterolį, talo alyva ir dirbtinis talo alyvos mišinys mažino ne apoA sterolių kiekį atitinkamai 21 %, kas vėl gi rodo, kad yra aiški koreliacija tarp sitostanolio buvimo fitosteroliuose ir jų naudingo poveikio, mažinant cholesterolio kiekius GS žiurkėnų plazmoje. Tačiau šis sumažėjimas nebuvo statistiškai reikšmingas dėl trigliceridų reikšmių skirtingumų.
IV. Trigliceridas
Taikant vienos krypties ANOVA metodą TG reikšmėms, jos nepatenkina normalumo testo. GS žiurkėnai buvo užmušti ne maisto negavimo sąlygomis (svarbus būvis būsimai cholesterolio sintezės, kinetikos ir absorbcijos analizei). Dėl tokios padėties įvairios reikšmės išėjo iš skalės. Naudojant ANOVA on Ranks, TG reikšmės tarp grupių statistiškai nesiskyrė. Augalų steroliai neveikė TG kiekių GS žiurkėnų plazmoje.
lentelė
Poveikių palyginimas
Bendras cholesterolis HDL LDL TG
Kontrolė C C C C
Sojos pupelių β-sitostanolis 4 1 3-4 1-4
Talo alyva (Forbes) 2-3 2-2 2-3 1-4
Stigmastanolis 1 4 1 1-4
Dirbtinė talo alyva 3-2 3-2 4-3-2 1-4
Reziumuojant galima pasakyti, kad iš talo alyvos muilo gauta šio išradimo kompozicija turi tinkamesnį vaizdą dėl to, kad ji didina HDL cholesterolio kiekį ir mažina bendro cholesterolio kiekį. Šis HDL efektas nestebimas dirbtinės talo alyvos kompozicijos atveju. Panašiu būdu, bendras sitostanolio efektas yra nepalankus dėl didelio HDL sumažėjimo.
Nors nėra pilnai aišku, tačiau vis tik atrodo, kad augalų sterolių atveju santykinai hidrofobiniai steroliai daugiau stabdo bendro cholesterolio absorbciją, tuo tarpu kai santykinai hidrofiliniai steroliai turi didesnę įtaką į HDL kiekį. Šio išradimo fitosterolių kompozicijos yra unikalios tuo, kad išsilaiko abu šie poveikiai.

Claims (13)

  1. IŠ RADIMO APIBRĖŽTIS
    1. Fitosterolių kompozicijos išskyrimo iš augalinės pulpos muilo būdas, besiskiriantis tuo, kad jis apima:
    pulpos muilo maišymą su bealkoholiniu-'tirpiklio mišiniu, turinčiu ketoną, bendros struktūros RCOR1, kur R ir R1 yra alkilo grupės, alifatinį angliavandenilį, tokį kaip C5-C10 ir vandenį, ir nuo 25° iki 150°C temperatūroje suformuojant riebalingas nuosėdas; ir šių riebalingų nuosėdų išvalymą, susidarant fitosterolių kompozicijai.
  2. 2. Būdas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad riebalingas nuosėdas valo perkristalinant.
  3. 3. Būdas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad pulpos muilą pagamina iš medžio drožlių, tokių kaip kedro, eglės, pušies, melsvosios kanadinės eglės, ąžuolo, cūgos (nuokana) ir tuopos.
  4. 4. Cholesterolio kiekį mažinanti kompozicija, besiskirianti tuo, kad joje yra ne daugiau kaip 70 masės % beta-sitosterolio, bent 10 masės % kampesterolio ir likęs kiekis stigmastanolio.
  5. 5. Kompozicija pagal 4 punktą, besiskirianti tuo, kad kampesterolis ir stigmastanolis kartu paimti sudaro bent 50 % beta-sitosterolio koncentracijos.
  6. 6. Kompozicija pagal 4 punktą, besiskirianti tuo, kad joje beta-sitosterolio santykis yra 1,0, kampesterolio - tarp 0,2 ir 0,4, o stigmastanolio - tarp 0,2 ir 0,5.
  7. 7. Kompozicija pagal 4 punktą, besiskirianti tuo, kad joje beta-sitosterolio santykis yra 1,0, kampesterolio - 0,354, o stigmastanolio - 0,414.
  8. 8. Kompozicija pagal 4 punktą, besiskirianti tuo, kad joje beta-sitosterolio santykis yra 1,0, kampesterolio - 0,330, o stigmastanolio - 0,203.
  9. 9. Kompozicija pagal 4 punktą, besiskirianti tuo, kad joje esančių fitosterolių santykis yra toks: 1,0 beta-sitosterolio: 0,268 kampesterolio:0,299 stigmastanolio.
  10. 10. Kompozicija, besiskirianti tuo, kad ją pagamina pagal 1 punkte apibrėžtą būdą.
  11. 11. Kompozicijos apibrėžtos 4 punkte panaudojimas vaistų, skirtų mažo tankio lipoproteino cholesterolio koncentracijai plazmoje sumažinti, gamybai.
  12. 12. Terapiškai efektyvus produktas, skirtas pirminės ir antrinės dislipidemijos ir aterosklerozės profilaktikai ir gydymui, besiskiriantis tuo, kad j jį įeina kompozicija pagal 4 punktą ir farmaciškai tinkamas nešiklis.
  13. 13. Kompozicija pagal 10 punktą, besiskirianti tuo, kad papildomai įeina kartu išskiriami junginiai.
LT97-074A 1994-09-29 1997-04-23 Sterolių kompozicijos iš pulpos muilo LT4305B (lt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US31494594A 1994-09-29 1994-09-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LT97074A LT97074A (en) 1997-10-27
LT4305B true LT4305B (lt) 1998-03-25

Family

ID=23222178

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LT97-074A LT4305B (lt) 1994-09-29 1997-04-23 Sterolių kompozicijos iš pulpos muilo

Country Status (28)

Country Link
US (1) US5770749A (lt)
EP (3) EP1707572B1 (lt)
JP (1) JPH10506394A (lt)
CN (1) CN1057768C (lt)
AT (1) ATE216395T1 (lt)
AU (1) AU3559795A (lt)
BG (1) BG64054B1 (lt)
BR (1) BR9509119A (lt)
CA (1) CA2201328A1 (lt)
CZ (1) CZ298622B6 (lt)
DE (1) DE69526442T3 (lt)
DK (2) DK0783514T4 (lt)
EE (1) EE9700073A (lt)
ES (2) ES2173966T5 (lt)
GE (1) GEP20022657B (lt)
HU (1) HUT77522A (lt)
LT (1) LT4305B (lt)
LV (1) LV11900B (lt)
MD (1) MD1721C2 (lt)
MX (1) MX9702308A (lt)
NO (2) NO310293B1 (lt)
NZ (1) NZ293210A (lt)
PL (1) PL186441B1 (lt)
PT (1) PT783514E (lt)
RU (1) RU2165431C2 (lt)
SK (1) SK284250B6 (lt)
TJ (1) TJ302B (lt)
WO (1) WO1996010033A1 (lt)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5965449A (en) * 1996-07-03 1999-10-12 Forbes Medi-Tech, Inc. Method of assessing risk for cardiovascular disease and other disorders and phytosterol-based compositions useful in preventing and treating cardiovascular disease and other disorders
US6139872A (en) * 1996-08-14 2000-10-31 Henkel Corporation Method of producing a vitamin product
US5985936A (en) * 1997-12-18 1999-11-16 Forbes Medi-Tech, Inc. Method of preventing and delaying onset of Alzheimer's disease and composition therefor
US5952393A (en) * 1998-02-12 1999-09-14 Sorkin, Jr.; Harlan Lee Composition for reducing serum cholesterol levels
US6110502A (en) * 1998-02-19 2000-08-29 Mcneil-Ppc, Inc. Method for producing water dispersible sterol formulations
CA2334449A1 (en) * 1998-06-05 1999-12-16 Radka K. Milanova Compositions comprising phytosterol, phytostanol or mixtures of both having enhanced solubility and dispersability and incorporation thereof into foods, beverages, pharmaceuticals, nutraceuticals and the like
CA2346881A1 (en) 1998-07-20 2000-02-03 Egon Novak Compositions comprising phytosterol, phytostanol or mixtures of both and omega-3 fatty acids or derivatives thereof and use of the composition in treating or preventing cardiovascular disease and other disorders
US6242001B1 (en) 1998-11-30 2001-06-05 Mcneil-Ppc, Inc. Method for producing dispersible sterol and stanol compounds
DE19916034C1 (de) * 1999-04-09 2000-08-03 Cognis Deutschland Gmbh Verfahren zur Gewinnung von Phytosterinen
US6770767B1 (en) * 1999-04-27 2004-08-03 Sterol Techologies Ltd. Method for the extraction and isolation of neutral substances from a soap
PT1173464E (pt) * 1999-04-27 2008-08-05 Forbes Medi Tech Inc Processo para preparação de uma composição de fitoesterol
EP1190025B1 (en) * 1999-04-27 2003-03-05 Sterol Technologies Ltd. Extraction and isolation method
FI991533A (fi) * 1999-07-05 2001-01-06 Sohkar Oy Menetelmä orgaanisten aineiden käsittelemiseksi
WO2001015552A1 (en) * 1999-08-30 2001-03-08 Ocean Nutrition Canada Ltd. A nutritional supplement for lowering serum triglyceride and cholesterol levels
US6998501B1 (en) 1999-08-30 2006-02-14 Ocean Nutrition Canada Limited Nutritional supplement for lowering serum triglyceride and cholesterol levels
US6197832B1 (en) 1999-09-14 2001-03-06 Harlan Lee Sorkin, Jr. Composition for reducing serum cholesterol levels
US6355274B1 (en) 1999-12-15 2002-03-12 Mcneil-Ppc, Inc. Encapsulated long chain alcohols
NZ519268A (en) * 1999-12-15 2004-12-24 Mcneil Ppc Inc Cholesterol lowering comestibles comprising policosanol (predominately octasanol) and sterol
US7232574B1 (en) 1999-12-15 2007-06-19 Mcneil-Ppc, Inc. Long chain alcohols provided in edible oils
US7147859B2 (en) * 2000-05-15 2006-12-12 Laboratorios Biosintetica Ltda. Application of phytosterols (and their isomers), folic acid, cyanocobalamin and pyridoxin in dietetic (alimentary) fibers
BR0001794A (pt) * 2000-05-15 2001-12-26 Laboratorios Biosintetica Ltda Aplicação de fitosteróides (e seus isÈmeros), ácidofólico, cianocobalamina e piridoxina em fibrasdietéticas (alimentares)
JP4707862B2 (ja) * 2001-04-16 2011-06-22 花王株式会社 植物ステロールの製法
WO2003009854A1 (en) * 2001-07-20 2003-02-06 Lonza Ag Lipid lowering composition comprising carnitine and phytosterol
US7368138B2 (en) * 2002-03-21 2008-05-06 Archer-Daniels-Midland Company Extraction of phytosterols from corn fiber using green solvents
CA2433246A1 (en) * 2003-06-25 2004-12-25 Telum Technologies Inc. Process for recovering value-added products from pulping soap
US20070141123A1 (en) * 2005-12-20 2007-06-21 Forbes Medi-Tech Inc. Emulsions comprising non-esterified phytosterols in the aqueous phase
US8309156B2 (en) * 2005-12-20 2012-11-13 Pharmachem Laboratories, Inc. Compositions comprising one or more phytosterols and/or phytostanols, or derivatives thereof, and high HLB emulsifiers
EP2020874A4 (en) * 2006-05-01 2015-07-15 Pharmachem Lab Inc COMPOSITION COMPRISING ONE OR MORE EXTRACTED PHYTOSTEROLS AND / OR PHYTOSTANOLES IN WHICH ONE OR MORE NON-SELECTED PHYTOSTEROLS AND / OR PHYTOSTANOLES ARE SOLUBILIZED TO OBTAIN THERAPEUTIC ADVANTAGES AND FORMULATION BENEFITS
US20070254026A1 (en) * 2006-05-01 2007-11-01 Forbes Medi-Tech Inc. Softgel capsules
EP2036445A1 (en) * 2007-09-05 2009-03-18 Dietetics Pharma S.r.l. Nutraceutic preparation in powder form containing free plant sterols
US20110207952A1 (en) * 2010-02-22 2011-08-25 Rafael Avila Cholesterol extraction from algae and preparation of vegan vitamin d3
EA024619B1 (ru) * 2014-11-21 2016-10-31 Эльвин Гаджи оглы Керимли ФРАКСИНОСТЕРИН - 24β-ЭТИЛХОЛЕСТА-20-КАРБОКСИ-6(7),8(9)-ДИЕН 3β-ОЛА И ЕГО ПРОИЗВОДНОЕ
SE540791C2 (en) 2016-01-29 2018-11-13 Stora Enso Oyj Extraction of phytosterols
WO2017137908A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Stora Enso Oyj Distillation of neutral compounds from tall oil soap

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2573891A (en) 1950-05-09 1951-11-06 Pittsburgh Plate Glass Co Recovery of sterols
US2715638A (en) 1953-07-28 1955-08-16 American Cyanamid Co Production of sterols from tall oil pitch
US2835682A (en) 1955-08-08 1958-05-20 Swift & Co Sterol recovery process
US3840570A (en) 1970-12-07 1974-10-08 Procter & Gamble Process for preparing sterols from tall oil pitch

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE417107B (sv) * 1973-06-29 1981-02-23 Bjarne Holmbom Forfarande for foredling av sapor
US4044031A (en) * 1976-07-02 1977-08-23 Ake Allan Johansson Process for the separation of sterols
US4208286A (en) † 1977-11-03 1980-06-17 Kauppi Pekka K Sulphate soap skimming apparatus
US4153622A (en) * 1978-05-18 1979-05-08 Medipolar Oy Process for the recovery of β-sitosterol
FI58333C (fi) * 1978-10-27 1981-01-12 Kaukas Ab Oy Foerfarande foer framstaellning av under 5 vikt-% alfa2-sitosterol innehaollande beta-sitosterolkoncentrat
FI57956C (fi) * 1978-12-12 1980-11-10 Farmos Oy Foerfarande foer isolering av beta-sitosterol med laog alfa-sitosterolhalt
FI59416C (fi) * 1979-11-19 1981-08-10 Farmos Oy Foerfarande foer utvinning av beta-sitosterol ur en sterolblandning utvunnen fraon raosaopans neutralfraktion
FI63423C (fi) * 1981-01-27 1983-06-10 Farmos Oy Foerfarande foer separering av beta-sitosterol fraon en sterolblandning utvunnen ur raosaopans neutralfraktion
JPS57206336A (en) * 1981-06-12 1982-12-17 Ajinomoto Co Inc Edible oil
FI65440C (fi) * 1981-07-21 1984-05-10 Kaukas Ab Oy Foerfarande foer separering av beta-sitosterol med en laog alfa-sitosterolhalt
FI812279L (fi) † 1981-07-21 1983-01-22 Kaukas Ab Oy Foerfarande foer rening av -sitosterol isolerad fraon neutralaemnet av sulfatcellulosaprocessens raosaopa
JPS58116415A (ja) * 1981-12-28 1983-07-11 Riyoushiyoku Kenkyukai コレステロ−ル低下剤の使用方法
JPS6479119A (en) * 1987-09-22 1989-03-24 Daiichi Seiyaku Co Drug of blended two components
FR2653974B1 (fr) * 1989-11-03 1992-12-31 Expanchimie Sarl Additif alimentaire constitue d'extraits de soja et/ou d'avocat.
CA2028759A1 (en) † 1989-11-22 1991-05-23 Jean-Marie Cassal Steroids
HU217625B (hu) * 1991-05-03 2000-03-28 Raisio Benecol Ltd. Új eljárás szérum-koleszterinszint csökkentését szolgáló béta-szitosztanin-zsírsav-észterek és észterkeverékek, valamint ezeket tartalmazó élelmiszerek előállítására
US5286845A (en) † 1992-05-20 1994-02-15 Union Camp Corporation Acidification of tall oil soap using carbon dioxide

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2573891A (en) 1950-05-09 1951-11-06 Pittsburgh Plate Glass Co Recovery of sterols
US2715638A (en) 1953-07-28 1955-08-16 American Cyanamid Co Production of sterols from tall oil pitch
US2835682A (en) 1955-08-08 1958-05-20 Swift & Co Sterol recovery process
US3840570A (en) 1970-12-07 1974-10-08 Procter & Gamble Process for preparing sterols from tall oil pitch

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
. M. LEES ET AL: "Plant sterols as cholesterol-lowering agents: Clinical trials in patients with hypercholesterolemia and studies of sterol balance", ATHEROSCLEROSIS, 1977, pages 325 - 338
AUDAX ET AL.: "Hypocholesterolemic activity of beta-sitosterol in cholesterol fed sea quail", ARTERY, 1991, pages 125 - 132
POLLAK O. J.: "Effect of plant sterols on serum lipids and atherosclerosis", PHARMACOL THER, 1985, pages 177 - 208, XP025906009, DOI: doi:10.1016/0163-7258(85)90022-1
RAICHT RF, COHEN BI, SHEFER S, MOSBACH EH: "Sterol balance studies in the rat. Effects of dietary cholesterol and beta-sitosterol on sterol balance and rate-limiting enzymes of sterol metabolism", BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA, 1975, pages 374 - 384, XP023373179, DOI: doi:10.1016/0005-2760(75)90096-X

Also Published As

Publication number Publication date
EP1148062A2 (en) 2001-10-24
LT97074A (en) 1997-10-27
LV11900B (en) 1998-05-20
PL186441B1 (pl) 2004-01-30
CZ92797A3 (cs) 1998-02-18
ATE216395T1 (de) 2002-05-15
MD970178A (ro) 1999-02-28
NO971304D0 (no) 1997-03-20
SK284250B6 (sk) 2004-12-01
EP0783514A1 (en) 1997-07-16
RU2165431C2 (ru) 2001-04-20
CA2201328A1 (en) 1996-04-04
NO322293B1 (no) 2006-09-11
CN1166174A (zh) 1997-11-26
EE9700073A (et) 1997-10-15
NO20011062D0 (no) 2001-03-01
NZ293210A (en) 2000-03-27
GEP20022657B (en) 2002-03-25
DK0783514T3 (da) 2002-08-05
PL319384A1 (en) 1997-08-04
EP1707572A3 (en) 2012-06-20
MX9702308A (es) 1998-04-30
MD1721C2 (ro) 2002-01-31
EP1707572B1 (en) 2014-04-16
NO310293B1 (no) 2001-06-18
SK41597A3 (en) 1997-11-05
EP1707572A2 (en) 2006-10-04
TJ302B (en) 2001-08-06
CN1057768C (zh) 2000-10-25
DE69526442D1 (de) 2002-05-23
EP1148062A3 (en) 2003-06-11
ES2173966T3 (es) 2002-11-01
DE69526442T2 (de) 2002-11-21
WO1996010033A1 (en) 1996-04-04
HUT77522A (hu) 1998-05-28
MD1721B2 (en) 2001-08-31
DE69526442T3 (de) 2007-10-31
EP0783514B1 (en) 2002-04-17
PT783514E (pt) 2002-09-30
JPH10506394A (ja) 1998-06-23
LV11900A (lv) 1997-12-20
BG64054B1 (bg) 2003-11-28
AU3559795A (en) 1996-04-19
BR9509119A (pt) 1997-10-28
ES2464465T3 (es) 2014-06-02
ES2173966T5 (es) 2008-01-16
NO971304L (no) 1997-05-14
DK0783514T4 (da) 2007-12-10
US5770749A (en) 1998-06-23
DK1707572T3 (da) 2014-05-12
NO11062A (no) 1997-05-14
EP0783514B2 (en) 2007-08-01
BG101354A (en) 1998-03-31
CZ298622B6 (cs) 2007-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
LT4305B (lt) Sterolių kompozicijos iš pulpos muilo
EP1004594B1 (en) Use of Phytosterol and/or phytostanol esters
JP4554915B2 (ja) スタノール組成物及びその用途
Kritchevsky Phytosterols
US5270335A (en) Method of inhibiting metabolism of cholesterol
JP2646421B2 (ja) 肥満予防剤
US20070249574A1 (en) Stanol composition and the use thereof
AU5939399A (en) Sterol compositions from pulping soap
AU2007200897B2 (en) Sterol compositions from pulping soap
RU2172629C2 (ru) Станоловая композиция и ее применение

Legal Events

Date Code Title Description
MM9A Lapsed patents

Effective date: 20020929