KR950007231B1 - 간질환의 예방 및 치료용 의약조성물 - Google Patents

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내용 없음.

Description

간질환의 예방 및 치료용 의약조성물

본 발명은 간질환의 예방 및 치료에 유용한 신규 간질환 예방 및 치료용 의약조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 의한 의약조성물의 적용 가능한 예는 간기능손상, 간독물 투여시 간세포보호, 급만성 지속성간염, 간경화증, 담즙분비 부진으로 오는 간질환, 만성간질환의 간기능 개선, 각종 원인에 의한 지방간 등에 치료 및 예방의 목적을 위하여 이용할 수 있다.

간질환 치료목적으로 사용되고 있는 약물은 대개 간보호제, 소화제, 제산제, 비타민류, 항경련 및 항콜린제 등이 사용되고 있으나, 간질환의 병인학적인 접근에 의한 근원적 치료개념을 갖는 약물이 없은 실정이므로 간질환 환자치유에 대해서는 고단백, 고칼리의 식사요법 및 안정요법에 약물요법을 병용하고 있는 실정이다.

영양보급의 보조수단으로서 사용되고 있는 간질환 치료용 약물은 대개 간세포의 재생을 촉진시키거나 간기능을 보조해주는 약물들이며, 여기에는 우루소데옥시콜린산, 실리마린, 에스-아데노실-엘-메치오닌, 글루타치온, 글리시리진, 간수화물, 종합비타민제가 대표적인 약물로 사용되고 있다. 사용되어지는 대부분의 간질환치료용 약물은 다음과 같은 치료기전을 갖고 있다.

(1)간에 생긴 노폐물을 담도를 통해 배출시킴으로써 간세포의 신진대사를 회복해 주는 약물.

(2)간세포의 단백질합성을 촉진시킴으로써 간세포의 재생을 촉진해 주는 약물.

(3)간세포를 파괴시키는 인자 혹은 보체를 제거시키는 약물.

(4)간내 지방 축적을 억제시키거나 지연시키는 약물.

(5)간세포의 신진대사를 활성화시키기 위한 비타민제 및 아미노산제제.

현재 간질환 치료목적으로 널리 쓰고 있는 약물 중 실리마린 및 에스-아데노실-엘-메치오닌은 간세포 재생효과, 항지간작용, 간의 신진대사를 촉진시키는 간기능 개선 약물로 알려져 왔다. 그러나 실리마린은 간세포의 수복을 촉진시키며 과산화지질을 억제하는 작용이 밝혀져 있지만, 생체의 흡수율이 매우 낮기 때문에 만족스런 치료 효과를 얻기 위해서는 고용량을 투여하거나 상당기간 투여를 해야 하며, 또한 메치오닌의 활성형인 에스-아데노실-엘-메치오닌은 만성알콜성 환자에 대해서 항지간작용인 널리 알려져 있지만, 담도개선작용이 미약하지 때문에 빠른 치유효과를 나타내지 못하는 약리학적 약점이 있다. (Biochemical Pharmacology, Vol.28, PP.3567-3571)

이에 본 발명자들은 상기와 같은 약물들의 단점을 보완하기 간질환예방 및 치료에 유용한 신규의 의약조성물을 만들기 위해 각 약물의 작용기전이 상이하기 때문에 상이한 약리기전을 갖는 약물간의 합리적 배합은 약물상호간의 상승작용을 유도하여 간질환의 치료에 유용하리라 판단하였다.

즉, 담도세척기능이 우수한 우루소데옥시콜린산, 결합형우루소데옥시콜린산인 타우로-우루소데옥시콜린산, 글리신-우루소데옥시콜린산(Glycine-Ursodeoxycholic acid)등과 같은 이담제를 병용투여시킴으로써 실리마린의 경우에는 생체이용율의 개선 및 담도세척작용이 활성화됨으로써 간 치유효과가 빨리 나타나게 되어 치료기간의 단축 및 치료효과를 극대화 할수 있는 상승작용을 나타나게 한다고 판단되어지며, 에스-아데노실-엘-메치오닌의 경우에는 약물 자체의 미세담도의 세척기능을 이담제를 통하여 상승작용을 발휘토록 함으로써, 항지간작용을 충분한 나타낼 수 있도록 미세담도를 통한 노폐물 배설작용을 촉진시켜 주는 것으로 고려되어 지는 바, 이에 대한 효과를 알아보기 위하여 연구를 거듭한 결과 간질환의 예방 및 치료에 유용한 신규 의약조성물을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명에 따른 의약조성물은 1종의 이담제와 1종 또는 2종의 간기능 개선 약물을 함유하는 것을 특징으로하며 약물상호간의 상승작용을 고려할때 이담제로는 우루소데옥시콜린산, 타우로-우루소데옥시콜린산, 글리신-우루소데옥시콜리산이 바람직하며 특히 우루소데옥시콜린산이 바람직하다. 간세포 재생효과, 항지간효과, 간의 신진대사를 촉진하는 간기능개선 약물로는 실리마린 또는 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트가 바람직하다.

본 발명의 의약조성물의 바람직한 배합조성은 우루소데옥시콜린산 : 실리마린인 경우 1∼3중량부 : 1∼5중량부, 우루소데옥시콜린산 : 에스-아데노실-엘 -메치오닌 -설페이트-파라-톨루엔설포네이트인 경우 1∼3중량부 : 1 ∼4중량부, 우루소데옥시콜린산 : 실리마린 : 에스-아데노실-엘 -메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트인 경우 1∼3중량부 : 1∼5중량부 : 1∼4중량부를 함유하는 것이며, 바람직하기로는 우루소데옥시콜린산 : 실리마린인 경우는 1 : 2.8, 우루소데옥시콜린산 : 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-툴루엔 설포네이트인 경우는 1 : 1.92, 우루소데옥시콜린산 : 실리마린 : 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트인 경우는 1 : 1.4 : 1.92이다. 또한 본 발명의 의약조성물은 상기와 같은 구성비로 조성하되 우루소데옥시콜린산 50∼100mg, 실리마린 70∼140mg, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-피-톨루엔설포네이트 96∼288mg를 함유하는 것이 바람직하다.

본 발명의 의약조성물은 약제학적으로 허용되는 담체 예를 들어 유당, 스테라인산 마그네슘등을 첨가하여 정제, 캅셀제, 연질캅셀제 등으로 만들 수 있으며 제형크기를 감안하여 각제형 투여 1단위당 우루소데옥시콜린산 : 실리마린 = 50mg : 140mg, 우루소데옥시콜린산 : 에스-아데노실-엘 -메치오닌-설페이트-파라-톨루엔-설포네이트=50mg : 96mg, 또는 우루소데옥시콜린산 : 실리마린 : 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔 설포네이트=50mg : 70mg : 96mg를 함유하는 것이 바람직하며 1일 1∼3회, 1회 1정씩 식후 복용하는 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 의약조성물의 간질환치료효과를 확인하고 가장 효과적인 조성비를 결정하기위하여 본 발명의 의약조성물의 조성비를 변화시키며(표 1. 참조) 간장질환예방 및 치료효과를 여러가지 동물실험 모델을 통해 실험한 결과, 우루소데옥시콜린산 실리마린, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트 단독투여군에 비해 이들의 병용투여군들이 AST, ALT치등 각종 간질환 치료효과를 나타내는 임상 수치가 유의성 있게 나타남으로써 (표 2, 3, 4) 본 의약조성물의 간질환 치료효과가 유의성 있게 우수하게 나타났다.

또한, 간질환 치료에 있어서 중용한 약리작용을 갖는 실리마린의 지표물질인 실리빈은 우루소데옥시콜린산을 병용투여함으로써 생체 흡수율이 현저히 높게 나타냈다.(표 5 참조)

따라서 본 발명의 의약조성물은 약물상호간 상승작용이 명백하게 나타났고 안정성(표 6-1, 6-2, 6-3) 및 급성독성(표 7) 시험결과 약물로서 사용하기에 적합하게 나타남으로써 간질환 예방 및 치료를 위해 장기 복용이 가능한 약물임을 확인할 수 있었다.

본 발명에 사용되는 우루소데옥시콜린산은 대웅제약(한국)제품을, 실리마린은 Clariana社(스페인) 제품을, 에스-아데노실-엘-메치오인-설페이트-파라-톨루엔설포네이트는 Bioresearch社(이태리) 제품을 사용 하였다.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 구체적으로 설명하고자하며 본 발명이 다음 실시예에 한정되는 것은 아니다.

[실시예 1]

시험용 신규조성물의 조제

실리마린, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트, 우루소데옥시콜린산을 아래(표 1 참조)의 중량으로 옥수수기름 4L에 교반하여 현탁시켜 시험용 신규조성물을 조제하였다.

[표 1]

[실시예 2]

사염화탄소 처치 랫트에서의 간질환 치료효과

본 발명에 의한 의약조성물의 간질환 치료에 대한 유용성을 사염화탄소를 처치된 랫트에서의 치료효과를 통해 확인하였다. 실험동물로는 건강한 체중 120g 내외의 ICR계 웅성 랫트 (10마리/1군)을 사용하였으며 대조군으로 사염화탄소 0.6ml/kg 경구투여한 랫트를, 시험군으로는 사염화탄소 0.6ml/kg 경구투여 24시간전, 동시 그리고 24시간후에 3일동안 매일 1회 본 조성물을 경구투여한 랫트를 사용하여 상기 대조군, 시험군 랫트의 AST, ALT치를 사염화탄소 투여 30시간후에 측정하였다. 시험결과를 아래 표 2.에 기재하였다.

[표 2]

[실시예 3]

알릴알콜로 처치된 랫트에서의 간질환 치료효과

비장은 혈액 혈소판 형성 및 이동에 관여하는 준 필수장기며, [Kaur et al., 1974 ; Pabst. 1988]

비정상적인 비장 기능 및 비종은 중증 알콜성 질환[Cowan and Hines, 1971 ; Girard et al., 1987] 및 기타 간질환 장애를 유발시킨다.

이에 본 실험은 비장을 제거한 랫트와 제거하지 않은 랫트에서의 알릴-알콜로 인한 선택적인 간문맥의 손상[Poulsen and Korsholm, Acta pharmac. tox.54 : 120, 1984, Rutkowski et al. Toxicology 40 : 25, 1986 ; Penttila et al. Pharmac. Toxic. 60 : 340, 1987]을 유도시켜 본 발명에 의한 조성물이 간질환에 미치는 효과를 살펴보았다.

실험동물로 건강한 체중 120g 내외의 ICR계 웅성 랫트(10마리/1군)를 사용하였으며 5군으로 분류하여 실험하였다.

A군은 비장제거 수술한 2개월된 랫트에 대하여 4주간 알릴알콜로 외상을 유도시킨 비장제거군.

B군은 비장제거 수술한 2개월된 랫트에 대하여 4주간 알릴알콜로 외상처리한 주 2주간 본 조성물에 의한 처치를 받은 비장제거군.

C군은 4주간 알릴알콜로 외상처치된 비장 비제거군.

D군은 4주간 알릴알콜로 외상처리후 2주간 본 조성물의 처치받은 비장 제거군.

E군은 정상시험군이다.

알릴알콜(Merck, Darmstadt, FRG)을 랫트에 대해 kg당 35mg으로 매일 복강주사 했으며, 실리마린은 kg당 35mg을, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트는 kg당 48mg을, 우루소데옥시콜린산을 kg당 25mg을, 실리마린 배합물은(실리마린 :우루소데옥시콜린산=2.8 : 1중량부) kg당 95kg을, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔 설포네이트 배합물은 (에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔 설포네이트 : 우루소데옥시콜린산=1.92 : 1중량부)kg당 73mg을, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트 : 실리마린 : 우루소데옥시콜린산=1.92 : 1.4 : 중량부) kg당 108mg을 매일 복강주사한 후 S-ALT(GPT)을 체크했다.

본 발명에 의한 조성물은 담도 세척 능력이 있는 우루소데옥시콜린산을 배합함으로써 알릴-알콜로 처치된 랫트에서 S-ALT(GPT)의 임상학적 수치의 유효한 개선효과를 관찰할 수 있다.

결과는 아래 표 3.에 기재하였다.

[표 3]

[실시예 4]

갈락토사민으로 처치된 랫트에서의 간질환 치료효과

본 발명에 의한 조성물의 간질환 치료효과를 확인하기 위하여 갈락토사민(GAL-N)으로 유도시킨 간손상 랫트에 대해 Pickering et al(1975)등의 방법에 따라 본 조성물의 세포 보호효과를 알아보았다.

건강한 체중 120g 내외의 ICR계 웅성 랫트(10마리/1군)을 사용하여 대조군으로 복강내 주사를 통해 갈락토사민을 처치한 랫트를 사용하였으며 시험군으로 본 조성물을 갈락토사민 처치 4시간 전후에 위장관내 섭취로 2번 경구투여 하여 사용하였다.

간 손상의 정도는 AST, ALT를 24시간후에 측정했다.

본 발명의 조성물은 갈락토사민으로 유도된 ASAT, ALAT의 활성을 36~69%용량 의존관계를 억제시켰다.

[표 4]

[실시예 5]

우루소데옥시콜린산 복합체에서의 실리마린 생체이용률 증가효과

본 발명에 의한 조성물의 우루소데옥시콜린산이 실리마린의 생체흡수율에 미치는 영향을 다음과 같은 실험을 통해 확인하였다.

실험동물로는 건강한 120g 내외의 ICR계(10마리/1군) 웅성 랫트를 사용하였다. 대조군으로 실리마린 350mg/kg(실리빈으로 210mg)을 경구투여한후 실리마린의 지표물질인 실리빈의 혈장농도를 고속액체크로마토그래피(HPLC)로 8시간, 24시간후에 측정하였으나(감도 0.05ug/ml) 측정되지 않았다.

담즙(0~8시간)과 뇨(0~24시간)로 배설되는 농도는 각각 투여량의 0.002%, 0.040%였다.

시험군으로 A군은 복합조성물 600mg/kg[(우루소데옥시콜린산 250mg+실리마린 350mg(실리빈으로서 210mg)]과 B군은 복합조성물 950mg/kg[(우루소데옥시콜린산 250mg+실리마린 700mg(실리빈으로 420mg)]을 각각 경구 섭생시켜 실리빈의 혈장농도를 측정하였다.

이때 Cmax는 A군 8.380mg/ml, B군 15.425mg/ml이었으며 자세한 결과는 아래 표 5. 에 기재하였다. 이때의 AUC치는 용량에 비례하였으며 담즙(0∼24시간)과 뇨(0∼72)로 분비되는 농도는 투여량에 대해 A군은 4.9%, 4.4%, B군은 4.5%, 4.3%이었다.

이상과 같은 결과로 이담제로 사용되어지는 우루소데옥시콜리산과 병용투여로 인해 실리마린 생체흡수율이 현저히 증가함으로써 본 조성물이 간질환 치료에 유용하다는 사실을 확인하였다.

[표 5]

[실시예 6]

제제예

본 발명에 의한 간질환 개선제의 조성물은 다음 각각의 공정에 따라 제제화될 수 있다.

(공정 1)실리마린+우루소데옥시콜린산 복합조성물

제제예 1 : 정제

1. A과립제조

을 각각 가하고 혼합한 다음 결합액 A로 연합하고 과립을 제조한 후 건조시킨다.

2. B과립제조

결합액 B로 연합하고 과립물을 제조한후 건조시킨다.

3. 혼합 및 타정

을 혼합하고

을 가하고 혼합한후 1정당 312mg씩 통상의 정제법으로 제조한다.

제제예 2 : 캅셀제

주성분 및 부형제를 혼합한 후 1캅셀랑 222mg씩 통상의 캅셀제법으로 제조한다.

제제예 3 : 연질캅셀제

주성분 및 부형제를 혼합한후 1캅셀당 594.3mg씩 통상의 연질캅셀제 제법에 의하여 제조된다.

(공정 2) 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트+우루소데옥시콜린산 복합 조성물

제제예 4 : 정제

1. A과립제조

를 각각 가하여 과립물을 제조한 후 건조시킨다.

2. B과립제조

결합액 B로 연합하고 과립물을 제조한후 건조시킨다.

3. 혼합 및 타정

을 혼합하고

을 가하고 혼합한후 1정당 322mg씩 통상의 정제법으로 제조한다.

제제예 5 : 캅셀제

주성분 및 부형제를 1캅셀당 196mg씩 통상의 캅셀제법으로 제조한다.

제제예 6 : 연질캅셀제

주성분 및 부형제를 혼합한후 1캅셀당 601mg씩 통상의 연질캅셀제 제법에 준하여 제조한다.

(공정 3)에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트+실리미린+우루소데옥시콜린산 복합 조성물

제제예 7 : 정제

1. A과립제조

를 각각 가하여 과립물을 제조한후 건조시킨다.

2. B과립제조

결합액 B로 연합하고 과립물을 제조한후 건조시킨다.

3. 혼합 및 타정

을 혼합하고

을 가하고 혼합한후 1정당 368mg씩 통상의 정제법으로 제조한다.

제제예 8 : 캅셀제

주성분 및 부형제를 1캅셀당 481mg씩 통상의 캅셀제법으로 제조한다.

제제예 9 : 연질캅셀제

주성분 및 부형제를 혼합한후 1캅셀당 631mg씩 통상의 연질캅셀제법으로 제조한다.

[실시예 7 ]

안정성시험

1)검체 : 앞의 실시예 6에 따라 제조된 정제.캅셀제 연질캅셀제의 3개의 제형검체.

2)보존조건 : 온도, 습도에 대한 안정성 시험

·포장형태 : 갈색 유리용기에 넣고 알루미늄 뚜껑으로 기밀한 상태

· 저장온도 : 40±1℃, 75% RH(±5%)

[단, 연질캅셀은 30℃±℃, 70% RH(±5%)]

· 저장기간 : 6개월

3)시험기간 : 6개월

4) : 측정시기 : 시험개시와 매 2개월마다

5) : 시험항목 : 주성분에 대한 함량시험

6) : 시험결과 : 아래 표 6a, 6b, 6c에 기재하였다.

[표 6a]

[표 6b]

[표 6c]

이상의 결과로서, 본 발명의 배합제는 정제, 캅셀제, 연질캅셀제 모두 적어도 3년정도의 안정성은 갖고 있음을 알 수 있었다.

[실시예 8 ]

급성독성시험

1) 시험물질 : 실리마린 : 우루소데옥시콜린산은 140mg : 50mg, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트 : 우루소데옥콜린산은 96mg : 50mg, 실리마린 : 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트 : 우루소데옥시콜린산은 70mg : 96mg : 50mg으로 구성된 의약조성물.

2) 시험동물 : 6주령의 웅성랫트와 5주령의 웅성마우스(5마리/1군)

3) 시험물질의 조제방법 : 증류수에 상기 의약조성물에 대한 각각의 무게를 재어 현탁시켰다.

4)시험방법 : 시험동물을 6시간 절식시킨후 마우스, 랫트용 존대를 사용하여 시험동물의 위내에 경구투여하였다. 투여액량은 투여직전의 체중을 기준으로 20ml/kg 체중으로 투여하여 14일간 투여물질에 의한 사망여부를 관찰하였다.

5)시험결과 : 랫트 및 마우스에 대한 급성독성시험을 행한 결과 랫트 및 마우스에 대한 본 의약조성물의 LD₅₀은 4g/kg 체중 이상이다.

[표 7]

이상과 같이, 본 발명에 따른 간장질환 치료용 의약조성물은 간장질환의 예방 및 치료에 대한 우수한 약리효과는 물론, 제제학적으로 매우 안정하고 랫트 및 마우스를 이용한 급성독성 시험에서도 매우 안전한 약제임을 알 수 있어, 본 발명은 산업적으로 매우 유용한 발명임이 입증되었다.

Claims (3)

1. 우루소데옥시콜린산과 실리마린의 조성비가 1∼3중량부 : 1∼5중량부, 또는 우루소옥시콜린산과 에스아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트의 조성비가 1∼3중량부 : 1 ∼4중량부로 함유함을 특징으로 하는 간질환용 의약조성물.
2. 제1항에 있어서, 우루소데옥시콜린산 50∼100mg, 실리마린 70~140mg 함유함을 특징으로 하는 간질환용 의약조성물.
3. 제1항에 있어서 우루소데옥시콜린산 50∼100ms, 에스-아데노실-엘-메치오닌-설페이트-파라-톨루엔설포네이트 96∼288mg 함유함을 특징으로 하는 간질환.