KR20230133331A - 면역조절 항체-약물 컨쥬게이트 - Google Patents

면역조절 항체-약물 컨쥬게이트 Download PDF

Info

Publication number
KR20230133331A
KR20230133331A KR1020237027635A KR20237027635A KR20230133331A KR 20230133331 A KR20230133331 A KR 20230133331A KR 1020237027635 A KR1020237027635 A KR 1020237027635A KR 20237027635 A KR20237027635 A KR 20237027635A KR 20230133331 A KR20230133331 A KR 20230133331A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
alkyl
subscript
hydrogen
adc
Prior art date
Application number
KR1020237027635A
Other languages
English (en)
Inventor
아담 지 힐
엘리자베스 이 그레이
엘리자베스 제이 커민스
패트릭 제이 버크
샤이라 제이 가다이
Original Assignee
씨젠 인크.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 씨젠 인크. filed Critical 씨젠 인크.
Publication of KR20230133331A publication Critical patent/KR20230133331A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/22—Cyclohexane rings, substituted by nitrogen atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

본 개시내용은 STING 작용제로서 역할을 하고 다양한 질환, 예컨대, 암을 치료하는 데 유용한 벤즈이미다졸 유도체 및 이의 항체-약물 컨쥬게이트를 제공한다.

Description

면역조절 항체-약물 컨쥬게이트
관련 출원에 대한 교차-참조
본 출원은 둘 모두 "면역조절 항체-약물 컨쥬게이트"라는 제목의 2021 년 1 월 15 일자로 출원된 미국 가출원 번호 63/138,360 및 2021 년 12 월 22 일자로 출원된 미국 가출원 번호 63/292,779의 이익을 주장하며, 이들 둘 모두는 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.
발명의 분야
본 발명은 화학 및 의학 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 항체-약물 컨쥬게이트, 조성물, 이의 제조 및 치료제로서의 이의 용도에 관한 것이다.
관련 기술의 설명
cGAS-STING 경로는 세포내 DNA를 인식하고 항-바이러스 및 항종양 면역 둘 모두에 중요한 유형 I 인터페론 및 염증성 사이토카인 반응을 촉발하는 선천적 면역 경로이다. DNA 결합시, cGMP-AMP 신타제 (cGAS)는 STING의 내인성 리간드인 cGAMP를 생산한다. 예컨대, Villanueva, Nat. Rev. Drug Disc. 2019: 18; 15 참고. 분자 수준에서, cGAMP에 의한 활성화시, 막관통 STING 이합체는 소포체로부터 골지체로 전위되어, 궁극적으로 TANK-결합 키나제 1 (TBK1) 및 전사 인자 인터페론 조절 인자 3 (IRF3)을 동원하여, 유형 I 인터페론 (IFN) 및 염증 반응의 유도를 야기한다. Konno, 등, Cell 2013: 155; 688-698 참고. 이 선천적 면역 경로는 과도한 cGAS-STING 활성이 다양한 자가면역 및 염증 장애와 관련되어 있으므로 엄격하게 규제되어야 한다. Barber, Nat. Rev. Immunol. 2015: 15; 760-770 참고; 또한, Liu, 등, N. Engl. J. Med. 2014: 371; 507-518 참고.
외인성 STING 작용제는 종양에 대한 면역 반응을 활성화하여 종양 퇴행을 초래함으로써 면역억압성 종양 미세환경을 극복하는 데 도움을 줄 수 있다. Sun, 등, Science 2013: 6121; 786-791 참고; 또한, Corrales and Gajewski, Clinc. Cancer Res. 2015: 21; 4774-4779 참고. 예는 내인성 리간드와 마찬가지로 사이클릭 디-뉴클레오티드인 뉴클레오티드-기반 STING 작용제를 포함한다. 이러한 화합물은 전형적으로 하전되고 친수성이며, 효소 분해에 취약하고, 불량한 생체이용률 및 약동학을 갖는다. 따라서, 전신 사이토카인 유도를 피하는 개선된 약리학적 특성을 갖는 STING 작용제에 대한 필요성이 남아 있다.
요약
본원에 기재된 일부 실시양태는 표적 세포에 대한 국소화된 면역 반응을 이끌어낼 수 있고 따라서 전신 투여된 면역자극 화합물에서 관찰되는 것과 같은 감소된 오프-표적 독성을 나타낼 수 있는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)에 관한 것이다.
일부 실시양태는 다음을 포함하는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다:
항체;
본원에 기술된 바와 같은 링커; 및
본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물;
여기서 화학식 (I)의 화합물은 링커에 컨쥬게이션되고;
여기서 각각의 링커는 항체의 시스테인 잔기의 황 원자에 공유 연결된 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드를 통해 항체에 컨쥬게이션됨.
일부 실시양태는 하기 화학식을 갖는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다:
Ab-(S*-M 1 -(D)) p
여기서:
Ab는 항체이고;
각각의 S*는 항체의 시스테인 잔기로부터의 황 원자이고;
M1은 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드이고;
아래첨자 p는 2 내지 8의 정수이고;
각각의 (D)는 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 약물 유닛임.
일부 실시양태에서, 화학식 (I)은 하기 구조를 갖는다:
일부 실시양태는 하기 화학식 (II)의 화합물을 제공한다:
일부 실시양태는 하기 화학식을 갖는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다:
Ab-(S*-(D')) p
여기서:
Ab는 항체이고;
각각의 S*는 항체의 시스테인 잔기로부터의 황 원자이고;
D'은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (IV)의 화합물의 라디칼인 약물 유닛이고;
아래첨자 p는 2 내지 8의 정수임.
일부 실시양태에서, 화학식 (IV)는 하기 구조를 갖는다:
일부 실시양태는 하기 화학식 (III)의 화합물을 제공한다:
일부 실시양태는 하기 화학식 (V)의 구조를 갖는 화합물을 제공한다:
일부 실시양태는 본원에 기재된 바와 같은 ADC의 분포를 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC를 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 항종양 면역 반응의 유도를 필요로 하는 대상체에서 항종양 면역 반응을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC를 투여하는 단계를 포함하는, 항종양 면역 반응의 유도를 필요로 하는 대상체에서 항종양 면역 반응을 유도하는 방법을 제공한다.
도 1은 다양한 소분자 STING 작용제에 대한 THP1-DualTM 세포 (THP1 이중 리 터 세포로서 또한 지칭됨)의 반응을 예시한다.
도 2는 다양한 소분자 STING 작용제에 대한 야생형 (WT) 및 STING-결핍 뮤린 골수-유래된 대식세포의 반응을 예시한다.
도 3은 화합물 11 (화합물 1과의 절단가능한 링커), 화합물 12 (화합물 12a와의 절단 불가능한 링커), 또는 화합물 13 또는 14 (화합물 12a와의 절단가능한 링커)에 컨쥬게이션된 비-표적화된 또는 표적화된 항체를 포함하는 ADC에 대한 THP1 이중 리포터 세포의 반응을 예시한다.
도 4는 화합물 12 (화합물 12a와의 절단 불가능한 링커) 및 화합물 16 (화합물 12의 시스테인 부가물 및 화합물 12를 함유하는 ADC로부터 방출된 유리 약물)에 대한 THP1 이중 리포터 세포의 반응을 예시한다.
도 5는 48 시간 동안 항온처리 후 유리 약물로서 또는 비-결합 또는 표적화된 항체 (화합물 12 및 15의 ADC)에 컨쥬게이션된 화합물 12a 및 15b에 대한 THP1 이중 리포터 세포의 반응을 예시한다.
도 6a 및 6b는 화합물 11 (화합물 1과의 절단가능한 링커)에 컨쥬게이션된 비-표적화된, 항원 C-표적화된 또는 PD-L1-표적화된 항체를 포함하는 ADC에 대한 SU-DHL-1 림프종 세포의 반응을 예시한다. 사이토카인 생산 (MIP-1α)(도 6a) 및 생존력 (도 6b) 둘 모두를 플롯팅한다.
도 7은 화합물 12, 13 또는 14에 컨쥬게이션된 hIgG1 LALAPG 백본을 갖는 항원 C-표적화된 mAb를 포함하는 ADC에 대한 표적 항원 C를 발현하도록 조작된 HEK 293T 세포와 함께 단독 배양되거나 공동-배양된 THP1 이중 리포터 세포의 반응을 예시한다.
도 8은 Renca 암 세포 및 THP1 이중 리포터 세포를 사용하여 화합물 12에 컨쥬게이션된 mIgG2a WT 또는 LALAPG 백본을 갖는 EphA2-표적화된 mAb 또는 비-결합 mAb를 포함하는 ADC의 방관자 활성을 예시한다.
도 9a 및 9b는 화합물 11 (복강내 투약됨), 또는 화합물 1 또는 (E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(3-모르폴리노프로폭시)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 트리스(2,2,2-트리플루오로아세테이트)(참조 화합물인 화합물 A, 정맥내 투약됨)에 컨쥬게이션된 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC를 평가하기 위한 Renca 종양 마우스 모델에서 q7dx3 ADC 투약 (매주 3 회 용량)에 대한 반응을 예시한다. 도 9a: 종양 성장; 도 9b: % 중량 변화.
도 10a 및 10b는 화합물 11 또는 12 (복강내 투약됨)에 컨쥬게이션된 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC를 평가하기 위한 Renca 종양 마우스 모델에서 q7dx3 ADC 투약 (매주 3 회 용량)에 대한 반응을 예시한다. 도 10a: 종양 성장; 도 10b: % 중량 변화.
도 11a 및 11b는 화합물 12 또는 15에 컨쥬게이션된 mIgG2a 야생형 (WT) 또는 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC 또는 컨쥬게이션되지 않은 화합물 12a를 평가하기 위한, 인간 단백질을 발현하도록 조작된 Renca 종양 마우스 모델에서 q7dx3 ADC 투약 (매주 3 회 용량)에 대한 반응을 예시한다. 도 11a: 종양 성장; 도 11b: % 중량 변화.
도 12는 화합물 12에 컨쥬게이션된 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 ADC를 평가하기 위한 Renca 종양 마우스 모델에서 q7dx3 투약 (매주 3 회 용량, 복강내)에 대한 반응을 예시한다.
도 13은 PD-L1-표적화된 mAb, 및 화합물 11에 컨쥬게이션된 비-결합, PD-L1-표적화된 또는 항원 C-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC를 평가하기 위한 Renca 종양 모델에서 다양한 화합물의 q7dx3 투약 (매주 3 회 용량)에 대한 반응을 예시한다.
도 14는 컨쥬게이션되지 않은 화합물 1, PD-L1-표적화된 mAb, 및 화합물 11에 컨쥬게이션된 비-결합, 항원 C, PD-L1 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC를 평가하기 위한 CT26 종양 모델에서 다양한 화합물의 q7dx3 투약 (매주 3 회 용량)에 대한 반응을 예시한다.
도 15a-d는 화합물 12에 컨쥬게이션된 mIgG2a LALAPG 백본과 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC를 평가하기 위한 MC38 종양 모델에서 표시된 바와 같이 q7dx3 (매주 3 회 용량) 또는 단일 용량의 ADC에 대한 반응을 예시한다. ADC 치료에 대한 반응으로 완전한 종양 퇴행을 달성한 마우스를 MC38 종양 세포로 재챌린지하고, 종양 성장을 모니터링하였다. 도 15a: 종양 성장 (WT 마우스); 도 15b: 체중 손실 (WT 마우스); 도 15c: 종양 성장 (STING-결핍 Tmem173 gt 마우스); 도 15d: MC38 종양 재챌린지 후 종양 성장.
도 16a 및 16b는 화합물 12에 컨쥬게이션된 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC를 평가하기 위한 4T1 종양 모델에서 q7dx3 mAb 또는 ADC 투약 (화살표 머리로 표시된 매주 3 회 용량)에 대한 반응을 예시한다. 도 16a: 종양 성장; 도 16b: % 중량 변화.
도 17은 수컷 C57BL/6 마우스에 대한 투여 후 화합물 12에 컨쥬게이션된 [탈글리코실화된] 비-결합 mAb를 포함하는 ADC의 약동학적 프로파일을 예시한다.
본원은 표적 세포에 대한 국소화된 면역 반응, 따라서, 예를 들어, 면역자극 화합물, 예컨대, STING 작용제의 전신 투여에서 종종 관찰되는 독성과 비교하여 감소된 오프-표적 독성을 이끌어 낼 수 있는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다. 이러한 화합물의 생체내 독성은 종종 전신 사이토카인 활성화와 관련되어, 온-표적 및 오프-표적 면역 반응 둘 모두를 초래한다. 본원에 기재된 ADC는 사이토카인의 국소화된 선택적 유도를 제공하기 위한 약물 페이로드로서 STING 작용제를 포함한다. 예컨대, Milling, 등, Adv. Drug Deliv. Rev. 2017: 114; 79-101 참고; 또한, Hu, 등, EBioMedicine 2019: 41; 497-508 참고. 이 접근법은 특이적 STING 활성화뿐만 아니라 국소화된 면역 세포 동원을 제공하는 동시에, 전신 사이토카인 방출 및 그에 수반되는 유해 효과를 감소시킬 수 있다.
정의
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 개시내용이 속하는 기술 분야의 당업자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 방법 및 물질은 본 출원에서 사용하기 위해 본원에 기재되어 있으며; 본 개시내용의 일부 양태에서 당업계에 알려진 다른 적합한 방법 및 물질이 또한 사용된다. 물질, 방법 및 예는 예시일 뿐이며 제한하려는 의도가 아니다. 본원에 언급된 모든 공개물, 특허 출원, 특허, 서열, 데이터베이스 항목 및 기타 참고문헌은 그 전체가 참조로 포함된다. 상충하는 경우, 정의를 포함한 본 명세서가 우선한다. 본원에서 상표명이 사용되는 경우, 문맥상 달리 표시되지 않는 한, 상표명은 제품 제형, 제네릭 약물 및 상표명 제품의 활성 약학 성분(들)을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "(단수형)"은 하나의 구성원을 포함하는 양태를 포함할 뿐만 아니라 하나 초과의 구성원을 포함하는 양태도 포함한다. 예를 들어, 단수형 "(단수형)"은 문맥에서 달리 명백하게 표시하지 않는 한, 복수의 지시대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "링커"에 대한 언급은 하나 이상의 이러한 링커에 대한 언급을 포함하고, "세포"에 대한 언급은 복수의 이러한 세포에 대한 언급을 포함한다.
숫자 또는 수치 범위를 지칭할 때 용어 "약"은 지칭된 숫자 또는 수치 범위가 예를 들어, 실험적 가변성 및/또는 통계적 실험 오류 내에서 근사치임을 의미하며, 따라서 숫자 또는 수치 범위는 명시된 숫자 또는 수치 범위의 최대 ±10%까지 달라질 수 있다. 본원에 기재된 바와 같은 ADC의 분포를 포함하는 ADC 조성물과 관련하여, 특히 항체가 부분적으로 로딩될 때 조성물 내의 항체에 대한 컨쥬게이션된 STING 작용제 화합물의 평균 갯수는 정수 또는 정수가 아닐 수 있다. 따라서, 평균 약물 로딩 값 이전에 언급된 용어 "약"은 ADC 조성물 내의 약물 로딩의 예상되는 변동을 포착하기 위한 것이다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "항체"는 온전한 항체 및 항원 결합 항체 단편을 포함하는 온전한 단클론 항체, 다클론 항체, 단일특이적 항체, 다중특이적 항체 (예컨대, 이중특이적 항체), 및 원하는 생물학적 활성을 나타내고 항원 결합 항체 단편이 본원에 기재된 바와 같은 링커 (L)와 같은 원하는 수의 부착된 기에 대해 필요한 수의 부착 부위를 갖는 한, 쇄간 디설파이드 결합 중 하나 이상이 파괴되는 이의 환원된 형태를 포함한다. 일부 양태에서, 링커는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드를 통해 환원된 쇄간 디설파이드 결합의 시스테인 잔기의 황 원자 및/또는 유전 조작에 의해 도입된 시스테인 잔기에 부착된다. 항체의 천연 형태는 사합체이고, 면역글로불린 쇄의 2 개의 동일한 쌍으로 이루어지며, 각각의 쌍은 하나의 경쇄 및 하나의 중쇄를 갖는다. 각각의 쌍에서, 경쇄 및 중쇄 가변 도메인 (VL 및 VH)은 함께 주로 항원에 대한 결합을 담당한다. 경쇄 및 중쇄 가변 도메인은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"이라고도 하는 3 개의 초가변 영역에 의해 끊어진 프레임워크 영역으로 이루어진다. 경쇄 및 중쇄는 또한 면역계에 의해 인식되고 이와 상호작용할 수 있는 불변 영역을 함유한다. (예컨대, Janeway 등, 2001, Immuno. Biology, 5th Ed., Garland Publishing, New York 참고). 항체는 임의의 아이소타입 (예컨대, IgG, IgE, IgM, IgD 및 IgA) 또는 이의 서브클래스 (예컨대, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2)를 포함한다. 항체는 임의의 적합한 종으로부터 유래할 수 있다. 일부 양태에서, 항체는 인간 또는 뮤린 기원이고, 일부 양태에서 항체는 인간, 인간화된 또는 키메라 항체이다. 항체는 다양한 정도로 푸코실화되거나, 탈푸코실화될 수 있다.
"온전한 항체"는 항원-결합 가변 영역뿐만 아니라 경쇄 불변 도메인 (CL) 및 중쇄 불변 도메인, CH1, CH2, CH3 및 CH4를 항체 클래스에 적합하게 포함하는 것이다. 불변 도메인은 천연 서열 불변 도메인 (예컨대, 인간 천연 서열 불변 도메인) 또는 이의 아미노산 서열 변이체이다.
"항체 단편"은 항원-결합 또는 이의 가변 영역을 포함하는 온전한 항체의 일부를 포함한다. 본 개시내용의 항체 단편은 링커 및/또는 링커-약물 화합물의 부착 부위를 제공하는 하나 이상의 (자연 또는 조작된) 시스테인 잔기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체 단편은 Fab, Fab' 또는 F(ab')2를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "조작된 시스테인 잔기" 또는 "eCys 잔기"는 항체 내로 혼입된 시스테인 아미노산 또는 이의 유도체를 지칭한다. 이러한 양태에서 하나 이상의 eCys 잔기는 항체 내로 혼입될 수 있으며, 전형적으로, eCys 잔기는 항체의 중쇄 또는 경쇄 내로 혼입된다. 일반적으로, 항체로의 eCys 잔기의 혼입은 모 항체의 핵산 서열을 돌연변이화시켜, 시스테인 또는 이의 유도체로 하나 이상의 아미노산 잔기를 코딩함으로써 수행된다. 적합한 돌연변이는 항체의 경쇄 또는 중쇄에서 원하는 잔기의 시스테인 또는 이의 유도체로의 교체, 추가적인 시스테인 또는 이의 유도체의 항체의 경쇄 또는 중쇄 내의 원하는 위치에서의 혼입뿐만 아니라 아미노산의 원하는 중쇄 또는 경쇄의 N- 및/또는 C-말단에 추가적인 시스테인 또는 이의 유도체를 첨가하는 것을 포함한다. 추가 정보는 미국 특허 번호 9,000,130에서 찾아볼 수 있을 것이며, 이의 내용은 그 전체가 본원에 포함된다. 시스테인 (Cys)의 유도체는 베타-2-Cys, 베타-3-Cys, 호모시스테인 및 N-메틸 시스테인을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항체는 하나 이상의 조작된 시스테인 (eCys) 잔기를 갖는 것들을 포함한다. 일부 실시양태에서, 시스테인 (Cys)의 유도체는 베타-2-Cys, 베타-3-Cys, 호모시스테인 및 N-메틸 시스테인을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
"항원"은 항체가 특이적으로 결합하는 엔티티이다.
용어 "특이적 결합" 및 "특이적으로 결합한다"는 항체 또는 이의 항체 단편이 다수의 다른 항원이 아닌 그의 상응하는 표적 항원과 선택적 방식으로 결합할 것임을 의미한다. 전형적으로, 항체 또는 항체 단편은 약 1x10-7 M 이상, 예를 들어, 10-8 M 내지 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M, 또는 10-12 M의 친화도로 결합하고, 미리결정된 항원 또는 밀접하게 관련된 항원 이외의 비-특이적 항원 (예컨대, BSA, 카제인)에 대한 결합 친화도보다 2-배 이상 더 큰 친화도를 갖는 미리결정된 항원에 결합한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "아미노산"은 자연 및 비-자연, 및 단백질생성 아미노산을 지칭한다. 예시적인 아미노산은 알라닌, 아르기닌, 아스파르트산, 아스파라긴, 히스티딘, 글리신, 글루탐산, 글루타민, 페닐알라닌, 리신, 류신, 세린, 티로신, 트레오닌, 이소류신, 프롤린, 트립토판, 발린, 시스테인, 메티오닌, 오르니틴, β-알라닌, 시트룰린, 세린 메틸 에테르, 아스파르테이트 메틸 에스테르, 글루타메이트 메틸 에스테르, 호모세린 메틸 에테르 및 N,N-디메틸 리신을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, "당 모이어티"는 단당류의 1가 라디칼, 예를 들어, 피라노스 또는 푸라노스를 지칭한다. 당 모이어티는 헤미아세탈 또는 카복실산 (펜던트 -CH2OH 기의 산화로부터)을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 당 모이어티는 β-D 입체형태이다. 일부 실시양태에서, 당 모이어티는 글루코스, 글루쿠론산, 또는 만노스 기이다.
용어 "억제하다" 또는 "이의 억제"는 측정가능한 양만큼 감소시키거나 완전히 방지하는 것 (예컨대, 100% 억제)을 의미한다.
용어 "치료적 유효량"은 포유류에서 질환 또는 장애를 치료하는 데 효과적인 본원에 기재된 바와 같은 ADC의 양을 지칭한다. 암의 경우, ADC의 치료적 유효량은 다음의 생물학적 효과 중 하나 이상을 제공한다: 암 세포의 갯수의 감소; 종양 크기의 감소; 말초 기관으로의 암 세포 침윤의 억제; 종양 전이의 억제; 종양 성장의 어느 정도의 억제; 및/또는 암과 연관된 증상 중 하나 이상의 어느 정도의 완화. 암 요법의 경우, 일부 양태에서, 효험은 질환 진행까지의 시간 (TTP)을 평가하고/하거나, 반응률 (RR)을 결정함으로써 측정된다.
문맥상 달리 표시되거나 암시되지 않는 한, 용어 "실질적인" 또는 "실질적으로"는 다수, 즉, 집단, 혼합물 또는 샘플의 >50%, 전형적으로 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 초과를 지칭한다.
용어 "세포내 절단된" 및 "세포내 절단"은 세포 기구가 ADC 또는 이의 단편에 작용하여, ADC로부터 유리 약물 또는 이의 기타 분해 산물을 세포내로 방출하는 세포 내부에서 발생하는 대사 과정 또는 반응을 지칭한다. 따라서, 해당 대사 과정 또는 반응으로 생성된 모이어티는 세포내 대사산물이다.
용어 "암" 및 "암성"은 전형적으로 조절되지 않는 세포 성장을 특징으로 하는 포유류의 생리학적 병태 또는 장애를 지칭하거나 설명한다. "종양"은 다중 암성 세포를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, "대상체"는 ADC가 투여되는 개체를 지칭한다. "대상체"의 예는 포유류, 예컨대, 인간, 랫트, 마우스, 기니피그, 비-인간 영장류, 돼지, 염소, 소, 말, 개, 고양이, 새 및 가금류를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 전형적으로, 대상체는 랫트, 마우스, 개, 비-인간 영장류 또는 인간이다. 일부 양태에서, 대상체는 인간이다.
용어 "치료하다" 또는 "치료"는 문맥상 달리 표시되거나 암시되지 않는 한, 재발을 예방하기 위한 치료적 치료 및 예방적 조치를 지칭하며, 여기서 목적은 예를 들어, 암의 발달 또는 확산과 같은 원하지 않은 생리학적 변화 또는 장애를 억제하는 것이다. 본 개시내용의 목적을 위해, 유익한 또는 원하는 임상 결과는 증상의 경감, 질환의 정도의 저하, 질환의 안정화된 (즉, 악화되지 않는) 상태, 질환 진행의 지연 또는 둔화, 질환 상태의 호전 또는 경감, 및 검출가능하든 검출가능하지 않든 간에 관계없이 관해 (부분적이든 전체적이든)를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 일부 양태에서 "치료"는 또한 치료를 받지 않는 경우 예상되는 생존과 비교하여 생존을 연장하는 것을 의미한다.
암의 맥락에서, 용어 "치료하는"은 다음 중 임의의 것 또는 모두를 포함한다: 암 세포 또는 종양의 성장을 억제하는 것; 암 세포의 복제를 억제하는 것, 전체 종양 부담을 줄이는 것 또는 암 세포의 수를 감소시키는 것, 및 질환과 연관된 하나 이상의 증상을 호전시키는 것.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "염"은 약물 유닛 (D), 본원에 기재된 것들과 같은 링커 또는 ADC와 같은 화합물의 유기 또는 무기 염을 지칭한다. 일부 양태에서, 화합물은 하나 이상의 아미노 기를 함유하고, 따라서 산 부가염은 아미노 기와 함께 형성될 수 있다. 예시적인 염은 설페이트, 트리플루오로아세테이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산성 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산성 시트레이트, 타르트레이트, 올레에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 바이타르트레이트, 아스코르베이트, 석시네이트, 말레에이트, 젠티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 파모에이트 (즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3-나프토에이트)) 염을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 염은 아세테이트 이온, 석시네이트 이온 또는 다른 반대이온과 같은 다른 분자의 포함을 수반할 수 있다. 반대이온은 모 화합물의 전하를 안정화시키는 임의의 유기 또는 무기 모이어티일 수 있다. 게다가, 염은 그 구조에 하나 또는 하나 초과의 하전된 원자를 가지고 있다. 염의 일부로서 다중 하전된 원자가 있는 경우, 다중 반대이온이 존재할 수 있다. 따라서, 염은 하나 이상의 하전된 원자 및/또는 하나 이상의 반대이온을 가질 수 있다. "약학적으로 허용가능한 염"은 본원에 기재된 바와 같이 대상체에 투여하기에 적합한 것이며, 일부 양태에서 이에 대한 목록이 그 전체가 참조로 구체적으로 포함되는, P. H. Stahl and C. G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Weinheim/Z
Figure pct00006
rich:Wiley-VCH/VHCA, 2002에 기재된 바와 같은 염을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이 용어 "호변이성질체"는 그의 구조가 원자의 배열에서 현저하게 상이하지만 쉽고 빠른 평형 상태로 존재하는 화합물을 지칭하며, 본원에 제공된 화합물은 상이한 호변이성질체로서 묘사될 수 있으며, 화합물이 호변이성질체 형태를 갖는 경우, 모든 호변이성질체 형태는 본 개시내용의 범주 내에 있는 것으로 의도되며, 화합물의 명명은 임의의 호변이성질체를 배제하지 않음을 이해해야 한다.
용어 "할로" 또는 "할로겐"은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 아이오도를 지칭한다.
용어 "알킬"은 표시된 갯수의 탄소 원자를 갖는 비치환된 직쇄 또는 분지형 포화 탄화수소를 지칭하며 (예컨대, "C1-C4 알킬," "C1-C6 알킬," "C1-C8 알킬," 또는 "C1-C10" 알킬은 각각 1 내지 4, 내지 6, 1 내지 8, 또는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 가짐), 모 알칸으로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로써 유래된다. 대표적인 직쇄 "C1-C8 알킬" 기는 메틸, 에틸, n-프로필, n-부틸, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸 및 n-옥틸을 포함하나, 이에 제한되지 않으며; 분지형 C1-C8 알킬은 이소프로필, sec-부틸, 이소부틸, tert-부틸, 이소펜틸 및 2-메틸부틸을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "알킬렌"은 명시된 갯수의 탄소 원자의 2가 비치환된 포화 분지형 또는 직쇄 탄화수소를 지칭하며 (예컨대, C1-C6 알킬렌은 1 내지 6 개의 탄소 원자를 가짐), 모 알칸의 동일한 또는 2 개의 상이한 탄소 원자로부터 2 개의 수소 원자를 제거함으로써 유래된 2 개의 1가 라디칼 중심을 갖는다. 알킬렌 기는 예를 들어, 탄소 백본 (-CHF- 또는 -CF2-와 같음) 또는 직쇄 또는 분지형 알킬렌 (예컨대, -CHF2 또는 -CF3)의 말단 탄소에서 1-6 개의 플루오로 기로 치환될 수 있다. 알킬렌 라디칼은 다음을 포함하나, 이에 제한되지 않는다: 메틸렌 (-CH2-), 에틸렌 (-CH2CH2-), n-프로필렌 (-CH2CH2CH2-), n-프로필렌 (-CH2CH2CH2-), n-부틸렌 (-CH2CH2CH2CH2-), 디플루오로메틸렌 (-CF2-), 및 테트라플루오로에틸렌 (-CF2CF2-) 등.
용어 "알케닐"은 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합 및 표시된 갯수의 탄소 원자를 갖는 비치환된 직쇄 또는 분지형 탄화수소를 지칭한다 (예컨대, "C2-C8 알케닐" 또는 "C2-C10" 알케닐은 각각 2 내지 8, 또는 2 내지 10 개의 탄소 원자를 가짐). 탄소 원자의 갯수가 표시되지 않은 경우, 알케닐 기는 2 내지 6 개의 탄소 원자를 갖는다.
용어 "알키닐"은 하나 이상의 탄소-탄소 삼중 결합 및 표시된 갯수의 탄소 원자를 갖는 비치환된 직쇄 또는 분지형 탄화수소를 지칭한다 (예컨대, "C2-C8 알키닐" 또는 "C2-C10" 알키닐은 각각 2 내지 8, 또는 2 내지 10 개의 탄소 원자를 가짐). 탄소 원자의 갯수가 표시되지 않은 경우, 알키닐 기는 2 내지 6 개의 탄소 원자를 갖는다.
용어 "헤테로알킬"은 명시된 갯수의 총 원자 및 O, N, Si 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상 (예컨대, 1 내지 15 개)의 헤테로원자를 갖는 안정한 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소를 지칭한다. 헤테로알킬 기의 탄소 및 헤테로원자는 (예컨대, 케톤, N-옥사이드 및 설폰 등을 형성하기 위해) 산화될 수 있고, 질소 원자는 4차화될 수 있다. 헤테로원자(들)는 헤테로알킬 기의 임의의 내부 위치 및/또는 헤테로알킬 기가 분자의 나머지 부분에 부착되는 위치에 배치될 수 있다. 헤테로알킬 기는 예를 들어, 탄소 백본 (-CHF- 또는 -CF2-와 같음) 또는 직쇄 또는 분지형 헤테로알킬 (예컨대, -CHF2 또는 -CF3)의 말단 탄소에서 1-6 개의 플루오로 기로 치환될 수 있다. 헤테로알킬 기의 예는 -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)2, -C(=O)-NH-CH2-CH2-NH-CH3, -C(=O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)2, -C(=O)-NH-CH2-CH2-NH-C(=O)-CH2-CH3, -C(=O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)-C(=O)-CH2-CH3, -O-CH2-CH2-CH2-NH(CH3), -O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)2, -O-CH2-CH2-CH2-NH-C(=O)-CH2-CH3, -O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(=O)-CH2-CH3, -CH2-CH2-CH2-NH(CH3), -O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)2, -CH2-CH2-CH2-NH-C(=O)-CH2-CH3, -CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(=O)-CH2-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)-CH3, -NH-CH2-CH2-NH-C(=O)-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH2-CH2-O-CF3 및 -Si(CH3)3를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, -CH2-NH-OCH3 및 -CH2-O-Si(CH3)3와 같이 최대 2 개의 헤테로원자가 연속적일 수 있다. 말단 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티는 헤테로알킬 기의 일 유형이다.
용어 "헤테로알킬렌"은 헤테로알킬 (본원에 정의된 바와 같음)로부터 유래된 2가 비치환된 직쇄형 또는 분지형 기를 지칭한다. 헤테로알킬렌 기의 예는 -CH2-CH2-O-CH2-, -CH2-CH2-O-CF2-, -CH2-CH2-NH-CH2-, -C(=O)-NH-CH2-CH2-NH-CH2- -C(=O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-, -C(=O)-NH-CH2-CH2-NH-C(=O)-CH2-CH2-, -C(=O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)-C(=O)-CH2-CH2-, -O-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-, -O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-, -O-CH2-CH2-CH2-NH-C(=O)-CH2-CH2-, -O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(=O)-CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-NH-CH2-, -CH2-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-CH2-NH-C(=O)-CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(=O)-CH2-CH2-, -CH2-CH2-NH-C(=O)-, -CH2-CH2-N(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-N+(CH3)2-, -NH-CH2-CH2(NH2)-CH2- 및 -NH-CH2-CH2(NHCH3)-CH2-를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 2가 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 모이어티는 헤테로알킬렌 기의 일 유형이다.
용어 "알콕시"는 산소 원자를 통해 분자에 부착되는, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭한다. 예를 들어, 알콕시 기는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소-프로폭시, n-부톡시, sec-부톡시, tert-부톡시, n-펜톡시 및 n-헥속시를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "알킬티오"는 황 원자를 통해 분자에 부착되는, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭한다. 예를 들어, 알키티오(alkythio) 기는 티오메틸, 티오에틸, 티오-n-프로필 및 티오-이소-프로필 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "할로알킬"은 표시된 갯수의 탄소 원자를 갖는 비치환된 직쇄 또는 분지형 포화 탄화수소를 지칭하며 (예컨대, "C1-C4 알킬," "C1-C6 알킬," "C1-C8 알킬," 또는 "C1-C10" 알킬은 각각 1 내지 4, 내지 6, 1 내지 8, 또는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 가짐), 여기서 알킬 기의 하나 이상의 수소 원자는 할로겐 (예컨대, 플루오로, 클로로, 브로모 또는 아이오도)으로 대체된다. 탄소 원자의 갯수가 표시되지 않은 경우, 할로알킬 기는 1 내지 6 개의 탄소 원자를 갖는다. 대표적인 C1-6 할로알킬 기는 트리플루오로메틸, 2,2,2-트리플루오로에틸 및 1-클로로이소프로필을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "할로알콕시"는 산소 원자를 통해 분자에 부착되는, 본원에 정의된 바와 같은 할로알킬 기를 지칭한다. 예를 들어, 할로알콕시 기는 트리플루오로메톡시, 2,2,2-트리플루오로에톡시 및 1,1,1-트리플루오로2-메틸프로폭시를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "사이클로알킬"은 표시된 갯수의 탄소 원자를 갖는 사이클릭, 포화 또는 부분 불포화 탄화수소를 지칭한다 (예컨대, "C3-8 사이클로알킬" 또는 "C3-6" 사이클로알킬은 각각 3 내지 8, 또는 3 내지 6 개의 탄소 원자를 가짐). 탄소 원자의 갯수가 표시되지 않은 경우, 사이클로알킬 기는 3 내지 6 개의 탄소 원자를 갖는다. 사이클로알킬 기는 가교된, 융합된 및 스피로 고리 시스템, 및 하나의 고리가 방향족이고 다른 하나가 불포화된 가교된 바이사이클릭 시스템을 포함한다. 대표적인 "C3-6 사이클로알킬" 기는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 및 사이클로헥실을 포함한다.
용어 "아릴"은 모 방향족 고리 시스템의 단일 탄소 원자로부터 하나의 수소 원자를 제거함으로써 유래된 6-10 개의 탄소 원자의 비치환된 1가 카보사이클릭 방향족 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 아릴 기는 페닐, 나프틸, 안트라세닐 및 바이페닐 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "헤테로사이클"은 가교된, 융합된 및 스피로 고리 시스템을 포함하는 포화 또는 부분 불포화 고리 또는 다중 축합 고리 시스템을 지칭한다. 헤테로사이클은 고리 시스템 내의 총 원자의 갯수로 설명될 수 있으며, 예를 들어, 3-10 원 헤테로사이클은 3 내지 10 개의 총 고리 원자를 갖는다. 용어는 약 1 내지 6 개의 탄소 원자 및 고리 내의 산소, 질소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택된 약 1 내지 3 개의 헤테로원자의 단일 포화 또는 부분 불포화 고리 (예컨대, 3, 4, 5, 6 또는 7-원 고리)를 포함한다. 고리는 하나 이상 (예컨대, 1, 2 또는 3 개)의 옥소 기로 치환될 수 있으며, 황 및 질소 원자는 또한 산화된 형태로 존재할 수 있다. 이러한 고리는 아제티디닐, 테트라하이드로푸라닐 및 피페리디닐을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 용어 "헤테로사이클"은 또한 단일 헤테로사이클 고리 (위에 정의된 바와 같음)가 하나 이상의 헤테로사이클 (예컨대, 데카하이드로나프티리디닐), 카보사이클 (예컨대, 데카하이드로퀴놀릴) 또는 아릴로 축합될 수 있는 다중 축합 고리 시스템 (예컨대, 2, 3 또는 4 개의 고리를 포함하는 고리 시스템)을 포함한다. 다중 축합 고리 시스템의 고리는 원자가 요건에 의해 허용되는 경우 융합된, 스피로 및 가교된 결합을 통해 서로 연결될 수 있다. (헤테로사이클에 대해 위에 정의된 바와 같은) 다중 축합 고리 시스템의 부착의 지점은 고리의 헤테로사이클, 아릴 및 카보사이클 부분을 포함하는 다중 축합 고리 시스템의 임의의 위치에 있을 수 있음을 이해해야 한다. 또한 헤테로사이클 또는 헤테로사이클 다중 축합 고리 시스템에 대한 부착의 지점은 탄소 원자 및 헤테로원자 (예컨대, 질소)를 포함하는 헤테로사이클 또는 헤테로사이클 다중 축합 고리 시스템의 임의의 적합한 원자에 있을 수 있음을 이해해야 한다. 예시적인 헤테로사이클은 아지리디닐, 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 피페라지닐, 테트라하이드로푸라닐, 디하이드로옥사졸릴, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로티오피라닐, 1,2,3,4-테트라하이드로퀴놀릴, 벤족사지닐, 디하이드로옥사졸릴, 크로마닐, 1,2-디하이드로피리디닐, 2,3-디하이드로벤조푸라닐, 1,3-벤조디옥솔릴 및 1,4-벤조디옥사닐을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "헤테로아릴"은 O, N 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된, 단일 고리 또는 융합된 고리 시스템 내의 하나 이상의 헤테로원자를 갖는 방향족 탄화수소 고리 시스템을 지칭한다. 고리 또는 고리 시스템은 컨쥬게이션된 π 시스템에 기여하는 모든 원자가 동일한 평면에 있는 컨쥬게이션된 π 시스템에서 4n +2 개의 전자를 갖는다. 일부 실시양태에서, 헤테로아릴 기는 5-10 개의 총 고리 원자 및 1, 2 또는 3 개의 헤테로원자를 갖는다 ("5-10 원 헤테로아릴"로서 지칭됨). 헤테로아릴 기는 이미다졸, 트리아졸, 티오펜, 푸란, 피롤, 벤즈이미다졸, 피라졸, 피라진, 피리딘, 피리미딘 및 인돌을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "하이드록실"은 -OH 라디칼을 지칭한다.
용어 "시아노"는 -CN 라디칼을 지칭한다.
용어 "카복시"는 -C(=O)OH 라디칼을 지칭한다.
용어 "옥소"는 =O 라디칼을 지칭한다.
항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)의 일부로서 사용된 바와 같은 용어 "석신이미드"는 다음을 지칭한다:
항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)의 일부로서 사용된 바와 같은 용어 "가수분해된 석신이미드"는 다음을 지칭한다:
키랄 중심을 갖는 본 개시내용의 화합물이 광학 활성 및 라세미 형태로 존재하고 단리될 수 있음을 당업자는 인식할 것이다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "유리 약물"은 항체에 공유 부착되지 않은 생물학적 활성 종을 지칭한다. 따라서, 유리 약물은 ADC로부터 절단되는 즉시 존재하는 화합물을 포함하는 임의의 컨쥬게이션되지 않은 화합물을 지칭한다. 방출 메커니즘은 ADC 내의 절단가능한 링커를 통해, 또는 ADC의 세포내 전환 또는 대사를 통해 이루어질 수 있다. 일부 양태에서, 유리 약물은 양성자화될 것이고/될 것이거나, 하전된 모이어티로서 존재할 수 있다. 유리 약물은 원하는 생물학적 효과를 발휘할 수 있는 약리학적 활성 종이다. 일부 실시양태에서, 약리학적 활성 종은 모 약물 단독이다. 일부 실시양태에서, 약리학적 활성 종은 ADC의 구성요소 또는 흔적부 (예컨대, 링커의 구성요소, 석신이미드, 가수분해된 석신이미드, 및/또는 후속 세포내 대사를 겪지 않은 항체)에 결합된 모 약물이다. 일부 실시양태에서, 유리 약물은 예를 들어, XB, Y, W, A 및 M1 중 하나 이상이 부재하는 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 유리 약물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (II)의 화합물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 유리 약물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (II-A)의 화합물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 유리 약물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (III)의 화합물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 유리 약물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (IV)의 화합물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 유리 약물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (V)의 화합물을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "약물 유닛"은 본원에 기재된 바와 같은 ADC에서 항체에 컨쥬게이션된 유리 약물을 지칭한다.
항체-약물 컨쥬게이트 (ADC) 화합물
일부 실시양태는 다음을 포함하는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다:
항체;
본원에 기술된 바와 같은 링커; 및
본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물;
여기서 화학식 (I)의 화합물은 링커에 컨쥬게이션되고;
여기서 각각의 링커는 시스테인 잔기의 황 원자에 공유 연결된 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드를 통해 항체에 컨쥬게이션됨.
일부 실시양태는 하기 화학식을 갖는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다:
Ab-(S*-M 1 -(D)) p
여기서:
Ab는 항체이고;
각각의 S*는 항체의 시스테인 잔기로부터의 황 원자이고;
M1은 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드이고;
아래첨자 p는 2 내지 8의 정수이고;
각각의 (D)는 하기 화학식 (I)의 약물 유닛이며:
여기서:
은 M1에 대한 L의 공유 부착을 나타내고;
R1은 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
각각의 R2 및 R3는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고;
각각의 RA, RB, RC, RD, RE 및 RF는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
각각의 아래첨자 m은 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 q는 0 내지 6의 정수이고;
XA는 -CH2-, -O-, -S-, -NH- 또는 -N(CH3)-이고;
XB는 부재하거나, 2-16 원 헤테로알킬렌이고;
XB, M1 및 L은 각각 독립적으로 PEG1 내지 PEG72의 PEG 유닛으로 임의로 치환되고;
L은 본원에 기재된 바와 같은 임의적 링커임. 존재하는 경우, L은 공유 결합을 통해 XB에 연결되거나, 화학식 (I)에 묘사된 바와 같이 XB가 부재하는 경우, XA에 연결된다. L이 부재하는 경우, M1은 공유 결합을 통해 XB에 연결되거나, 화학식 (I)에 묘사된 바와 같이, XB가 부재하는 경우, XA에 연결된다.
일부 실시양태에서, M1은 석신이미드이다. 일부 실시양태에서, M1은 가수분해된 석신이미드이다. 가수분해된 석신이미드는 2 개의 위치이성질체 형태(들)로 존재할 수 있음을 이해할 것이다. 이러한 형태는 *S-Ab에 결합된 M1의 가수분해에 대해 아래에 예시되며, 여기서 해당 가수분해로부터 위치이성질체를 나타내는 구조는 화학식 M1a 및 M1b이고; 여기서 결합에 인접한 물결선은 화학식 (I)에 대한 공유 부착을 나타낸다.
M 또는 M1 기는 존재하는 경우, 항체를 존재하는 경우 A 기 (또는 아래첨자 a 및/또는 아래첨자 w 및/또는 아래첨자 y가 0인 경우, W, Y 또는 XB 기)에 연결할 수 있다. 이와 관련하여, 항체는 M 또는 M1의 기능기와의 결합을 형성할 수 있는 기능기를 갖는다. 자연적으로 또는 화학적 조작을 통해 항체 상에 존재할 수 있는 유용한 기능기는 설프하이드릴 (-SH), 아미노, 하이드록실, 카복시 및 탄수화물의 아노머 하이드록실 기를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 일 양태에서, 항체 기능기는 설프하이드릴 및 아미노이다. 설프하이드릴 기는 항체의 분자내 디설파이드 결합의 환원에 의해 생성될 수 있다. 대안적으로, 설프하이드릴 기는 2-이미노티올란 (트라우트 시약) 또는 다른 설프하이드릴 생성 시약을 사용하여 항체의 리신 모이어티의 아미노 기의 반응에 의해 생성될 수 있다. 일부 실시양태에서, M 또는 M1은 항체의 황 원자와의 결합을 형성한다. 황 원자는 항체의 설프하이드릴 기로부터 유래될 수 있다.
일부 실시양태에서, L은 화학식 -(A)a-(W)w-(Y)y-를 가지며, 여기서:
A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌; 또는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이고;
각각의 Ra1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rb1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rd1 및 Re1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
W는 1-12 개의 아미노산이거나, 하기 구조를 가지며:
여기서 Su는 당 모이어티이고;
-OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
W1은 부재하거나, -O-C(=O)-이고;
은 A 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내고;
*는 화학식 (I)에서 Y, XA 또는 XB에 대한 공유 부착을 나타내고;
Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티 또는 절단 불가능한 모이어티이고;
아래첨자 a는 0 또는 1이고;
아래첨자 y는 0 또는 1이고;
아래첨자 w는 0 또는 1이다.
일부 실시양태에서, R1은 수소이다. 일부 실시양태에서, R1은 하이드록실이다. 일부 실시양태에서, R1은 C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이다. 일부 실시양태에서, R1은 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시에틸이다. 일부 실시양태에서, R1은 PEG2 내지 PEG4이다.
일부 실시양태에서, R1은 -(CH2)n-NRARB이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB는 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB 중 하나는 수소이고, RA 및 RB 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 3, 4, 5 또는 6이다.
일부 실시양태에서, 각각의 R2 및 R3은 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2 및 R3은 동일하다. 일부 실시양태에서, 각각의 R2 및 R3은 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2 및 R3는 상이하다.
일부 실시양태에서, R2는 -(C=O)m-NRCRD이다. 일부 실시양태에서, R3은 -(C=O)m-NRCRD이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD 중 하나는 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 m은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 m은 1이다.
일부 실시양태에서, R2는 -(CH2)q-NRERF이다. 일부 실시양태에서, R3은 -(CH2)q-NRERF이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF 중 하나는 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 1 내지 6의 정수이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 3, 4, 5 또는 6이다.
일부 실시양태에서, R3은 -CO2H이다. 일부 실시양태에서, R2는 -CO2H이다.
일부 실시양태에서, XA는 -CH2-이다. 일부 실시양태에서, XA는 -O-이다. 일부 실시양태에서, XA는 -S-이다. 일부 실시양태에서, XA는 -NH-이다. 일부 실시양태에서, XA는 -N(CH3)-이다.
일부 실시양태에서, XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, XB는 2-12 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, XB는 2-10 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, XB는 2-8 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, XB는 4-8 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, 헤테로알킬렌은 직쇄이다. 일부 실시양태에서, 헤테로알킬렌은 분지형이다. 일부 실시양태에서, 헤테로알킬렌은 1-4 개의 메틸 기를 갖는 분지형이다. 일부 실시양태에서, 헤테로알킬렌은 1 또는 2 개의 메틸 기를 갖는 분지형이다. 일부 실시양태에서, 헤테로알킬렌은 1-3 개의 플루오로 기로 치환된다. 일부 실시양태에서, XB는 1 또는 2 개의 질소 원자를 포함한다. 일부 실시양태에서, XB는 1 또는 2 개의 옥소 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, XB는 하나의 질소 원자 및 하나의 옥소 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, XB는 2 개의 질소 원자 및 2 개의 옥소 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, XB는 카바메이트를 포함한다.
일부 실시양태에서, Y 및 XB의 공유 부착은 아미드를 포함한다. 일부 실시양태에서, Y 및 XB의 공유 부착은 카바메이트를 포함한다. 일부 실시양태에서, Y 및 XB의 공유 부착은 에테르를 포함한다.
일부 실시양태에서, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다.
일부 실시양태에서, XB는 아래의 구조로 이루어진 군으로부터 선택되며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다.
일부 실시양태에서, XB 및 L 중 하나는 본원에 기재된 바와 같이 PEG1 내지 PEG72의 PEG 유닛으로 치환된다. 일부 실시양태에서, XB 및 L은 본원에 기재된 바와 같이 PEG2 내지 PEG72의 독립적으로 선택된 PEG 유닛으로 각각 치환된다. 일부 실시양태에서, PEG 1 내지 PEG72의 각각의 PEG 유닛은 PEG8 내지 PEG12, PEG12 내지 PEG24, 또는 PEG36 내지 PEG72의 범위일 수 있다. 일부 실시양태에서, PEG 1 내지 PEG72의 각각의 PEG 유닛은 PEG8 내지 PEG24이다.
일부 실시양태에서, XB 및 L은 비치환된다.
일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이다.
일부 실시양태에서, L은 부재하고, XA-XB-M1은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
여기서 은 화학식 (I)의 나머지 부분에 대한 공유 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, XA-XB-L은 다음으로부터 선택된다:
여기서 은 화학식 (I)의 나머지 부분에 대한 공유 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고, R2 및 R3은 둘 모두 -C(=O)NH2이다. 일부 실시양태에서, XA는 -O-이고, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이고; XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이고; XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 L에 대한 공유 부착을 나타내고; 아래첨자 a 및 아래첨자 y는 둘 모두 0이다.
일부 실시양태에서, XB는 부재하다.
일부 실시양태에서, 아래첨자 p는 2 내지 8, 2 내지 6, 2 내지 4, 4 내지 8, 또는 6 내지 8의 정수이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p는 2, 4, 6 또는 8이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p는 2이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p는 4이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p는 6이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 p는 8이다.
일부 실시양태에서, XB는 부재하고, L은 XA에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, XB는 부재하고, Y는 XA에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, XB는 부재하고, Y는 부재하며, W는 XA에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, XB는 부재하고, Y는 부재하고, W는 부재하며, A는 XA에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서, XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, L은 XB에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, Y는 XB에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, Y는 부재하며, W는 XB에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, Y는 부재하고, W는 부재하며, A는 XB에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서, W1은 -OC(=O)-이고, 아래첨자 y는 1이다. 일부 실시양태에서, XA는 -O-이고, XB 및 W1은 부재하다. 일부 실시양태에서, XA는 NH 또는 -O-이고, XB는 부재하며, W1은 -OC(=O)이다. 일부 실시양태에서, XA는 -N(CH3)-이고, XB는 부재하며, W1은 -OC(=O)이다. 일부 실시양태에서, XA는 -S-이고, XB는 부재하며, W1은 -OC(=O)이다. 일부 실시양태에서, W1은 -OC(=O)-이고, XB는 -O- 또는 -NH-를 통해 W에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서, A는 M1에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 a가 0인 경우, W는 M1에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 a가 0이고, 아래첨자 w가 0인 경우, Y는 M1에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 a, y 및 w가 각각 0인 경우, XB는 M1에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
또는
여기서:
Ab는 항체이고;
R1, R2, R3, XA, XB 및 L은 화학식 (I)과 관련하여 위에 정의된 바와 같고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
일부 양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
여기서:
Ab는 항체이고;
R1, R2, R3, XA, XB 및 L은 화학식 (I)과 관련하여 위에 정의된 바와 같고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
일부 양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
여기서:
Ab는 항체이고;
R1, R2, R3, XA, XB, Y, W 및 A는 화학식 (I)과 관련하여 위에 정의된 바와 같고;
각각의 아래첨자 y는 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 w는 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 a는 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
일부 실시양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
또는
여기서:
Ab는 항체이고;
R1, R2, R3, LA, RN, Y, W 및 LB는 화학식 (II-A)와 관련하여 아래에 정의된 바와 같고;
각각의 아래첨자 y는 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 w는 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
일부 양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
여기서:
Ab는 항체이고;
R1, R2, R3, LA, RN, Y, W 및 LB는 화학식 (II-A)와 관련하여 아래에 정의된 바와 같고;
각각의 아래첨자 y는 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 w는 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
일부 실시양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
또는
여기서:
Ab는 항체이고;
R1, R2, R3, LA, RN 및 LB는 화학식 (II-B)와 관련하여 아래에 정의된 바와 같고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
일부 양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
여기서:
Ab는 항체이고;
R1, R2, R3, LA, RN 및 LB는 화학식 (II-B)와 관련하여 아래에 정의된 바와 같고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
일부 실시양태는 하기 화학식을 갖는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다:
Ab-(S*-(D')) p
여기서:
Ab는 항체이고;
각각의 S*는 항체의 시스테인 잔기로부터의 황 원자이고;
D'은 아래 기재된 바와 같이 화학식 (IV)의 화합물의 라디칼인 약물 유닛이고;
아래첨자 p는 2 내지 8의 정수임.
일부 실시양태에서, 화학식 (IV)의 화합물의 라디칼은 화학식 (IV) 내의 치환기 M에서의 라디칼을 포함한다. 일부 실시양태에서, 약물 유닛 D'은 하기 구조를 갖는다:
여기서 ***는 S*에 대한 부착을 나타내고, 나머지 변수는 화학식 (IV)과 관련하여 아래에 정의된 바와 같음.
일부 양태에서, 약물 유닛 D'은 하기 구조를 갖는다:
여기서 ***는 S*에 대한 부착을 나타내고, 나머지 변수는 화학식 (IV)과 관련하여 아래에 정의된 바와 같음.
일부 실시양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
또는
여기서:
Ab는 항체이고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수이고;
나머지 변수는 화학식 (IV)과 관련하여 아래에 정의된 바와 같음.
일부 양태에서, ADC는 하기 화학식을 갖는다:
여기서:
Ab는 항체이고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수이고;
나머지 변수는 화학식 (IV)과 관련하여 아래에 정의된 바와 같음.
일부 실시양태는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC)를 제공한다:
및 이의 약학적으로 허용가능한 염,
여기서:
Ab는 항체이고;
각각의 아래첨자 p는 독립적으로 2 내지 8의 정수임.
항체
일부 실시양태에서, 항체는 다클론 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 단클론 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 키메라이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간화된다. 일부 실시양태에서, 항체는 완전한 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 항원 결합 단편이다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "단클론 항체"는 실질적으로 동종인 항체의 집단으로부터 수득된 항체를 지칭하며, 즉, 집단을 포함하는 개별 항체는 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하다. 단클론 항체는 고도로 특이적이며, 단일 항원 부위에 대해 지시된다. 수식어 "단클론"은 실질적으로 동종의 항체의 집단으로부터 수득될 것인 항체의 특성을 나타내며, 임의의 특정 방법에 의한 항체의 생산을 필요로 하는 것으로서 해석되어서는 안 된다.
유용한 다클론 항체는 면역화된 동물의 혈청으로부터 유래된 항체 분자의 이종 집단이다. 유용한 단클론 항체는 특정 항원 결정자 (예컨대, 암 세포 항원, 단백질, 펩티드, 탄수화물, 화학물질, 핵산 또는 이의 단편)에 대한 항체의 동종 집단이다. 관심 항원에 대한 단클론 항체 (mAb)는 배양 중인 연속 세포주에 의한 항체 분자의 생산을 제공하는 당업계에 알려진 임의의 기술을 사용하여 제조될 수 있다.
유용한 단클론 항체는 인간 단클론 항체, 인간화된 단클론 항체 또는 키메라 인간-마우스 (또는 다른 종) 단클론 항체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 항체는 전장 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 인간 단클론 항체는 당업계에 알려진 수많은 기술 (예컨대, Teng 등, 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 80:7308-7312; Kozbor 등, 1983, Immunology Today 4:72-79; 및 Olsson 등, 1982, Meth. Enzymol. 92:3-16) 중 임의의 것에 의해 제조될 수 있다.
일부 실시양태에서, 항체는 표적 세포 (예컨대, 암 세포 항원) 또는 암 세포 또는 기질에 결합된 다른 항체에 특이적으로 결합하는 항체의 기능적으로 활성인 단편, 유도체 또는 유사체를 포함한다. 이와 관련하여, "기능적으로 활성인"은 단편, 유도체 또는 유사체가 표적 세포에 특이적으로 결합할 수 있음을 의미한다. 어떤 CDR 서열이 항원에 결합하는지 결정하기 위해, CDR 서열을 함유하는 합성 펩티드가 전형적으로 당업계에 알려진 임의의 결합 검정 방법 (예컨대, Biacore 검정)에 의한 항원과의 결합 검정에 사용된다 (예컨대, Kabat 등, 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md; Kabat E 등, 1980, J. Immunology 125(3):961-969 참고).
추가적으로, 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 전형적으로 수득되는, 인간 및 비-인간 부분 둘 모두를 포함하는 키메라 및 인간화된 단클론 항체와 같은 재조합 항체가 유용한 항체이다. 키메라 항체는 예를 들어, 뮤린 단클론으로부터 유래된 가변 영역 및 인간 면역글로불린으로부터 유래된 불변 영역을 갖는 것과 같이 상이한 부분이 상이한 동물 종으로부터 유래된 분자이다. 예컨대, 그 전체가 본원에 참조로 포함하는, U.S. Patent No. 4,816,567; 및 U.S. Patent No. 4,816,397 참고. 인간화된 항체는 비-인간 종으로부터의 하나 이상의 CDR 및 인간 면역글로불린 분자로부터의 프레임워크 영역을 갖는 비-인간 종으로부터의 항체 분자이다. 예컨대, 그 전체가 본원에 참조로 포함하는, 미국 특허 번호 5,585,089 참고. 이러한 키메라 및 인간화된 단클론 항체는 예를 들어, 국제 공개공보 번호 WO 87/02671; 유럽 특허 공개공보 번호 0 184 187; 유럽 특허 공개공보 번호 0 171 496; 유럽 특허 공개공보 번호 0 173 494; 국제 공개공보 번호 WO 86/01533; 미국 특허 번호 4,816,567; 유럽 특허 공개공보 번호 012 023; Berter 등, 1988, Science 240:1041-1043; Liu 등, 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:3439-3443; Liu 등, 1987, J. Immunol. 139:3521-3526; Sun 등, 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:214-218; Nishimura 등, 1987, Cancer. Res. 47:999-1005; Wood 등, 1985, Nature 314:446-449; 및 Shaw 등, 1988, J. Natl. Cancer Inst. 80:1553-1559; Morrison, 1985, Science 229:1202-1207; Oi 등, 1986, BioTechniques 4:214; U.S. Patent No. 5,225,539; Jones 등, 1986, Nature 321: 522-525; Verhoeyan 등, 1988, Science 239:1534; 및 Beidler 등, 1988, J. Immunol. 141:4053-4060에 기재된 방법을 사용하여 당업계에 알려진 재조합 DNA 기술에 의해 생산될 수 있으며; 이들 각각은 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.
일부 실시양태에서, 항체는 완전 인간 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 내인성 면역글로불린 중쇄 및 경쇄 유전자는 발현할 수 없지만 인간 중쇄 및 경쇄 유전자는 발현할 수 있는 트랜스제닉 마우스를 사용하여 생산된다.
일부 실시양태에서, 항체는 온전한 또는 완전히-환원된 항체이다. 용어 '완전히-환원된'은 링커 (L)에 부착될 수 있는 8 개의 티올을 제공하기 위해 4 개의 쇄-간 디설파이드 연결 모두가 환원된 항체를 지칭하는 것을 의미한다.
항체에 대한 부착은 천연 및/또는 조작된 시스테인 잔기로부터, 또는 상응하는 링커 중간체와의 고리첨가 반응 (예컨대, 클릭 반응)에 참여하도록 조작된 아미노산 잔기로부터의 티오에테르 연결을 통해 이루어질 수 있다. 예컨대, Maerle, 등, PLOS One 2019: 14(1); e0209860 참고. 일부 실시양태에서, 항체는 온전한 또는 완전히-환원된 항체이거나, 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 ADC의 다른 구성요소의 부착을 위한 클릭 화학 또는 기타 고리화첨가 반응 (예컨대, 딜스-알더 반응 또는 기타 [3+2] 또는 [4+2] 고리화첨가)에 참여할 수 있는 기능기로 변형되는 조작된 시스테인 기를 보유하는 항체이다.
암 세포 항원에 특이적으로 결합하는 항체는 상업적으로 이용가능하거나 예컨대, 화학적 합성 또는 재조합 발현 기술과 같은 당업자에게 알려진 임의의 방법에 의해 생산된다. 암 세포 항원에 특이적으로 결합하는 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 예컨대, GenBank 데이터베이스 또는 유사한 데이터베이스, 문헌 공개물로부터 또는 일상적인 클로닝 및 시퀀싱에 의해 수득가능하다.
일부 실시양태에서, 항체 (예컨대, FDA 및/또는 EMA에 의해 승인된 항체)는 암의 치료에 사용될 수 있다. 암 세포 항원에 특이적으로 결합하는 항체는 상업적으로 이용가능하거나, 예컨대, 재조합 발현 기술과 같은 당업자에게 알려진 임의의 방법에 의해 생산된다. 암 세포 항원에 특이적으로 결합하는 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 예컨대, GenBank 데이터베이스 또는 유사한 데이터베이스, 문헌 공개물로부터 또는 일상적인 클로닝 및 시퀀싱에 의해 수득가능하다.
일부 실시양태에서, 항체는 림프구 상에 발현되는 수용체 또는 수용체 복합체에 특이적으로 결합할 수 있다. 수용체 또는 수용체 복합체는 면역글로불린 유전자 슈퍼패밀리 구성원, TNF 수용체 슈퍼패밀리 구성원, 인테그린, 사이토카인 수용체, 케모카인 수용체, 주요 조직적합성 단백질, 렉틴 또는 보체 제어 단백질을 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, 항체는 암 세포 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 본원에 기재된 ADC 구조에서의 "Ab"가 항체의 구조를 포함하도록 ADC에서의 항체 구성요소가 잔기 형태의 항체임을 이해할 것이다.
암의 치료에 사용될 수 있는 항체 및 종양 회합된 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 비-제한적인 예는 이들 각각이 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 Franke, A. E., Sievers, E. L., and Scheinberg, D. A., "Cell surface receptor-targeted therapy of acute myeloid leukemia: a review" Cancer Biother Radiopharm. 2000,15, 459-76; Murray, J. L., "Monoclonal antibody treatment of solid tumors: a coming of age" Semin Oncol. 2000, 27, 64-70; Breitling, F., and Dubel, S., Recombinant Antibodies, John Wiley, and Sons, New York, 1998에 개시되어 있다.
암 세포 항원 및 면역 세포 항원 중 하나 이상에 결합하는 항체의 실시양태가 아래에 제공된다.
암의 치료에 유용한 표적 항원 및 연관된 항체 및 암 세포 항원 (종양 항원이라고도 함)에 특이적으로 결합하는 항체의 비-제한적인 예는 B7-DC (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-20344); BCMA; B7-H3 (예컨대, 에노블리투주맙, 옴부르타맙, MGD009, MGC018, DS-7300); B7-H4 (예컨대, 카탈로그 번호 14-5949-82); B7-H6 (예컨대, 카탈로그 번호 12-6526-42); B7-H7; C5 보체 (예컨대, BCD-148; CAN106); CA-125; CA9 (예컨대, 기렌툭시맙); CCR8 (예컨대, JTX-1811); CLEC12A (예컨대, 테포디타맙); CSPG4 (예컨대, 미국 특허 번호 10,822,427); CCNB1; DDR1; de2-7 EGFR (예컨대, MAb 806); DPEP1; DR4 (예컨대, 마파투무맙); 엔도시알린 (예컨대, 온툭시주맙); ENPP1; EPCAM (예컨대, 아데카투무맙); EPHA2; ERBB2 (예컨대, 트라스투주맙); ERBB3; ERVMER34_1; FAP (예컨대, 시브로투주맙); FasL; FGFR2 (예컨대, 아프루투맙); FGFR4 (예컨대, MM-161); FLT3 (예컨대, 4G8SDIEM); FBP; FucGM1 (예컨대, BMS-986012); FZD8; G250; GAGE; GD2 (예컨대, 디누툭시맙); gpNMB (예컨대, 글렘바투무맙); GPR87; GUCY2C (예컨대, 인두사투맙); HAVCR2; IDO1; ITGB6; ITGB8; L1CAM (예컨대, JCAR023); MRC1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 12-2061-82); ML-IAP (예컨대, 88C570, ThermoFisher 카탈로그 번호 40958); NT5E (예컨대, 7G2, ThermoFisher 카탈로그 번호 41-0200); OY-TES1; p53; p53돌연변이체; PAX5; PDPN (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 14-5381-82); VSIR (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-52493); 덱틴2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-16250); PAX3 (예컨대, GT1210, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-31583); 시알릴-톰센-누보-항원 (예컨대, Eavarone 등 PLoS One, 2018; 13(7): e0201314); PDGFR-B (예컨대, 리누쿠맙); ADAM12 (예컨대, 카탈로그 번호 14139-1-AP); ADAM9 (예컨대, IMGC936); AFP (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-25959); AGR2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-34517); AKAP-4 (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-52230); 안드로겐 수용체 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-13426); ALPP (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-15652); CD44 (예컨대, RG7356); AMHR2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-13902); ANTXR1 (예컨대, 카탈로그 번호 MA1-91702); ARTN (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-47063); αVβ6; CA19-9 (예컨대, AbGn-7; MVT-5873); 암배아 항원 (예컨대, 아르키투모맙; 세르구투주맙; 아무날루킨; 라베투주맙); CD115 (예컨대, 악사틸리맙; 카비랄리주맙; 에막투주맙); CD137 (예컨대, ADG106; CTX-471); CD147 (예컨대, 가빌리모맙; 메투주맙); CD155 (예컨대, 미국 공개공보 번호 2018/0251548); CD274 (예컨대, 아데브렐리맙; 아테졸리주맙; 가리불리맙); CDCP1 (예컨대, RG7287); CDH3 (예컨대, PCA062); CDH6 (예컨대, HKT288); CEACAM1; CEACAM6; CLDN18.1 (예컨대, 졸베툭시맙); CLDN18.2 (예컨대, 졸베툭시맙); CLPTM1L; CS-1 (예컨대, 티가투주맙); GD3 (예컨대, 미투모맙); HLA-G (예컨대, TTX-080); IL1RAP (예컨대, 니다니리맙); LAG-3 (예컨대, 엔셀리맙); LY6G6D (예컨대, PA5-23303); LYPD1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-26749); MAD-CT-2; MAGEA3 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 60054-1-IG); MAGEA4 (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-26117); MAGEC2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-64010); MLANA (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-15237); MELTF (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 H00004241-M04A); MSLN (예컨대, 5B2, 카탈로그 번호 MA5-11918); MUC1 (예컨대, MH1 (CT2), ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-11202); MUC5AC (예컨대, 45M1, 카탈로그 번호 MA5-12178); MYCN (예컨대, NCM-II 100, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA1-170); NCAM1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-11563); 넥틴-4 (예컨대, 엔포르투맙); NY-BR-1 (예컨대, NY-BR-1 번호 2, 카탈로그 번호 MA5-12645); PSMA (예컨대, BAY 2315497); PSA (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA1-38514; Daniels-Wells 등 BMC Cancer, 2013; 13:195); PSCA (예컨대, AGS-1C4D4); PTK7 (예컨대, 코페투주맙); PVRIG; Ras 돌연변이체 (예컨대, Shin 등 Sci Adv. 2020; 6(3):eaay2174); RET (예컨대, WO2020210551); RGS5 (예컨대, TF-TA503075); RhoC (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 PA5-77866); ROR2 (예컨대, BA3021); ROS1 (예컨대, WO2019107671); SART3 (예컨대, TF 18025-1-AP); SLC12A2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 13884-1-AP); SLC38A1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 12039-1-AP); SLC39A6 (예컨대, 라디라투주맙); SLC44A4 (예컨대, ASG-5ME); SLC7A11 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA1-16893); SLITRK6 (예컨대, 시르트라투맙); SSX2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-24971); 서바이빈 (예컨대, PA1-16836); TACSTD2 (예컨대, PA5-47074); TAG-72 (예컨대, MA1-25956); TIGIT (예컨대, 에티길리맙); TM4SF5 (예컨대, 18239-1-AP); TMPRSS11D (예컨대, PA5-30927); TNFRSF12 (예컨대, BAY-356); TRAIL (예컨대, 카탈로그 번호 12-9927-42); Trem2 (예컨대, PY314); TRP-2 (예컨대, PA5-52736); uPAR (예컨대, ATN-658); UPK1B (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-56863); UPK2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-60318); UPK3B (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-52696); VEGF (예컨대, GNR-011); VEGFR2 (예컨대, 젠툭시맙); CD44 (예컨대, RG7356); WT1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-32215); XAGE1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-46413); CTLA4 (예컨대, 이필리무맙); 정자 단백질 17 (예컨대, BS-5754R); TLR2/4/1 (예컨대, 토마랄리맙); B7-1 (예컨대, 갈릭시맙); ANXA1 (예컨대, 카탈로그 번호 71-3400); BCR-ABL; CAMPATH-1 (예컨대, 알렘투주맙; ALLO-647; ANT1034); CD123 (예컨대, BAY-943; CSL360); CD19 (예컨대, ALLO-501); CD20 (예컨대, 디보질리맙; 이브리투모맙); CD30 (예컨대, 이라투무맙); CD33 (예컨대, 린투주맙; BI 836858; AMG 673); CD352 (예컨대, SGN-CD352A); CD37 (예컨대, 릴로토맙; GEN3009); CD40 (예컨대, 다세투주맙; 루카투무맙); CD45 (예컨대, 아파미스타맙); CD48 (예컨대, SGN-CD48A); CXCR4 (예컨대, 울로쿠플루맙); ETV6-AML (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-81865); ROR1 (예컨대, 시름투주맙); CD74 (예컨대, 밀라투주맙); SIT1 (예컨대, PA5-53825); SLAMF7 (예컨대, 엘로투주맙); Axl (예컨대, BA3011; 틸베스타맙); Siglecs 1-16 (예컨대, Angata 등 Trends Pharmacol Sci. 2015; 36(10): 645-660 참고); SIRPa (예컨대, 카탈로그 번호 17-1729-42); SIRPg (예컨대, PA5-104381); OX40 (예컨대, ABM193); PROM1 (예컨대, 카탈로그 번호 14-1331-82); TMEM132A (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-62524); TMEM40 (예컨대, PA5-60636); PD-1 (예컨대, 발스틸리맙; 부디갈리맙; 겝타놀리맙); ALK (예컨대, DLX521); CCR4 (예컨대, AT008; 모가물리주맙-kpkc); CD27 (예컨대, 바릴루맙); CD278 (예컨대, 펠라딜리맙; 보프라텔리맙); CD32 (예컨대, mAb 2B6); CD47 (예컨대, 레타플리맙; 마그롤리맙); 및 CD70 (예컨대, 쿠사투주맙)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 고형 종양 및/또는 혈액학적 암과 회합된 암 세포 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 표적 항원, 및 고형 종양과 회합된 암 세포 항원 및/또는 혈액학적 암 표적 항원에 특이적으로 결합하는 연관된 항체의 비-제한적인 예는 Axl (예컨대, BA3011; 틸베스타맙); B7-H3 (예컨대, 에노블리투주맙, 옴부르타맙, MGD009, MGC018, DS-7300); B7-H4 (예컨대, 카탈로그 번호 14-5949-82); B7-H6 (예컨대, 카탈로그 번호 12-6526-42); B7-H7; Siglecs 1-16 (예컨대, Angata 등 Trends Pharmacol Sci. 2015; 36(10): 645-660 참고); SIRPa (예컨대, 카탈로그 번호 17-1729-42); SIRPg (예컨대, PA5-104381); OX40 (예컨대, ABM193); PROM1 (예컨대, 카탈로그 번호 14-1331-82); TMEM132A (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-62524); TMEM40 (예컨대, PA5-60636); PD-1 (예컨대, 발스틸리맙; 부디갈리맙; 겝타놀리맙); ALK (예컨대, DLX521); CCR4 (예컨대, AT008; 모가물리주맙-kpkc); CD27 (예컨대, 바릴루맙); CD278 (예컨대, 펠라딜리맙; 보프라텔리맙); CD32 (예컨대, mAb 2B6); CD47 (예컨대, 레타플리맙; 마그롤리맙); 및 CD70 (예컨대, 쿠사투주맙)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 고형 종양과 회합된 암 세포 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 표적 항원, 및 고형-종양-회합된 표적 항원에 특이적으로 결합하는 연관된 항체의 비-제한적인 예는 PAX3 (예컨대, GT1210, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-31583); 시알릴-톰센-누보-항원 (예컨대, Eavarone 등 PLoS One. 2018; 13(7): e0201314); PDGFR-B (예컨대, 리누쿠맙); ADAM12 (예컨대, 카탈로그 번호 14139-1-AP); ADAM9 (예컨대, IMGC936); AFP (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-25959); AGR2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-34517); AKAP-4 (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-52230); 안드로겐 수용체 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-13426); ALPP (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-15652); CD44 (예컨대, RG7356); AMHR2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-13902); ANTXR1 (예컨대, 카탈로그 번호 MA1-91702); ARTN (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-47063); αVβ6; CA19-9 (예컨대, AbGn-7; MVT-5873); 암배아 항원 (예컨대, 아르키투모맙; 세르구투주맙; 아무날루킨; 라베투주맙); CD115 (예컨대, 악사틸리맙; 카비랄리주맙; 에막투주맙); CD137 (예컨대, ADG106; CTX-471); CD147 (예컨대, 가빌리모맙; 메투주맙); CD155 (예컨대, 미국 공개공보 번호 2018/0251548); CD274 (예컨대, 아데브렐리맙; 아테졸리주맙; 가리불리맙); CDCP1 (예컨대, RG7287); CDH3 (예컨대, PCA062); CDH6 (예컨대, HKT288); CEACAM1; CEACAM6); CLDN18.1 (예컨대, 졸베툭시맙); CLDN18.2 (예컨대, 졸베툭시맙); CLPTM1L; CS-1 (예컨대, 티가투주맙); GD3 (예컨대, 미투모맙); HLA-G (예컨대, TTX-080); IL1RAP (예컨대, 니다니리맙); LAG-3 (예컨대, 엔셀리맙); LY6G6D (예컨대, PA5-23303); LYPD1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-26749); MAD-CT-2; MAGEA3 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 60054-1-IG); MAGEA4 (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-26117); MAGEC2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-64010); MLANA (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-15237); MELTF (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 H00004241-M04A); MSLN (예컨대, 5B2, 카탈로그 번호 MA5-11918); MUC1 (예컨대, MH1 (CT2), ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-11202); MUC5AC (예컨대, 45M1, 카탈로그 번호 MA5-12178); MYCN (예컨대, NCM-II 100, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA1-170); NCAM1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-11563); 넥틴-4 (예컨대, 엔포르투맙); NY-BR-1 (예컨대, NY-BR-1 번호 2, 카탈로그 번호 MA5-12645); PSMA (예컨대, BAY 2315497); PSA (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA1-38514; Daniels-Wells 등 BMC Cancer 2013; 13:195); PSCA (예컨대, AGS-1C4D4); PTK7 (예컨대, 코페투주맙); PVRIG; Ras 돌연변이체 (예컨대, Shin 등 Sci Adv. 2020; 6(3):eaay2174); RET (예컨대, WO2020210551); RGS5 (예컨대, TF-TA503075); RhoC (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 PA5-77866); ROR2 (예컨대, BA3021); ROS1 (예컨대, WO2019107671); SART3 (예컨대, TF 18025-1-AP); SLC12A2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 13884-1-AP); SLC38A1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 12039-1-AP); SLC39A6 (예컨대, 라디라투주맙); SLC44A4 (예컨대, ASG-5ME); SLC7A11 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA1-16893); SLITRK6 (예컨대, 시르트라투맙); SSX2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-24971); 서바이빈 (예컨대, PA1-16836); TACSTD2 (예컨대, PA5-47074); TAG-72 (예컨대, MA1-25956); TIGIT (예컨대, 에티길리맙); TM4SF5 (예컨대, 18239-1-AP); TMPRSS11D (예컨대, PA5-30927); TNFRSF12 (예컨대, BAY-356); TRAIL (예컨대, 카탈로그 번호 12-9927-42); Trem2 (예컨대, PY314); TRP-2 (예컨대, PA5-52736); uPAR (예컨대, ATN-658); UPK1B (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-56863); UPK2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-60318); UPK3B (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-52696); VEGF (예컨대, GNR-011); VEGFR2 (예컨대, 젠툭시맙); CD44 (예컨대, RG7356); WT1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-32215); XAGE1 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-46413); 및 CTLA4 (예컨대, 이필리무맙)를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 혈액학적 암과 회합된 암 세포 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 표적 항원 및 혈액학적 암 세포 표적 항원에 특이적으로 결합하는 연관된 항체의 비-제한적인 예는 정자 단백질 17 (예컨대, BS-5754R); TLR2/4/1 (예컨대, 토마랄리맙); B7-1 (예컨대, 갈릭시맙); ANXA1 (예컨대, 카탈로그 번호 71-3400); BCR-ABL; CAMPATH-1 (예컨대, 알렘투주맙; ALLO-647; ANT1034); CD123 (예컨대, BAY-943; CSL360); CD19 (예컨대, ALLO-501); CD20 (예컨대, 디보질리맙; 이브리투모맙); CD30 (예컨대, 이라투무맙); CD33 (예컨대, 린투주맙; BI 836858; AMG 673); CD352 (예컨대, SGN-CD352A); CD37 (예컨대, 릴로토맙; GEN3009); CD40 (예컨대, 다세투주맙; 루카투무맙); CD45 (예컨대, 아파미스타맙); CD48 (예컨대, SGN-CD48A); CXCR4 (예컨대, 울로쿠플루맙); ETV6-AML (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-81865); ROR1 (예컨대, 시름투주맙); CD74 (예컨대, 밀라투주맙); SIT1 (예컨대, PA5-53825); 및 SLAMF7 (예컨대, 엘로투주맙)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 표적 항원 (예컨대, 질환 또는 장애와 연관된 항원)에 특이적으로 결합하는 항체가 사용될 수 있다. 표적 항원 (예컨대, 질환 또는 장애와 연관된 항원)에 특이적으로 결합하는 항체는 상업적으로 이용가능하거나, 당업자에게 알려진 임의의 방법, 예컨대, 재조합 발현 기술에 의해 생산될 수 있다. 표적 항원 (예컨대, 질환 또는 장애와 연관된 항원)에 특이적으로 결합하는 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 예컨대, GenBank 데이터베이스 또는 유사한 데이터베이스, 문헌 공개물로부터 또는 일상적인 클로닝 및 시퀀싱에 의해 수득가능하다.
표적 항원, 및 표적 항원 (예컨대, 질환 또는 장애와 회합된 항원, 또는 면역 세포와 회합된 항원)에 특이적으로 결합하는 연관된 항체의 비-제한적인 예는 CD163 (예컨대, TBI 304H); TIGIT (예컨대, 에티길리맙); DCSIGN (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO2018134389 참고); IFNAR1 (예컨대, 파랄리모맙); ASCT2 (예컨대, 아이닥타맙); ULBP1/2/3/4/5/6 (예컨대, PA5-82302); CLDN1 (예컨대, INSERM 항-클라우딘-1); CLDN2 (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO2018123949 참고); IL-21R (예컨대, PF-05230900); DCIR; DCLK1 (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO2018222675 참고); 덱틴1 (예컨대, 미국 특허 번호 9,045,542 참고); GITR (예컨대, 라기필리맙); ITGAV (예컨대, 아비투주맙); LY9 (예컨대, PA5-95601); MICA (예컨대, 1E2C8, 카탈로그 번호 66384-1-IG); MICB (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-29422); NOX1 (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-103220); CD2 (예컨대, BTI-322; 시플리주맙); CD247 (예컨대, AFM15); CD25 (예컨대, 바실릭시맙); CD28 (예컨대, REGN5668); CD3 (예컨대, 오텔릭시주맙; 비실리주맙); CD38 (예컨대, 펠자르타맙; AMG 424); CD3E (예컨대, 포랄루맙; 테플리주맙); CD5 (예컨대, MAT 304; 졸리모맙 아리톡스); ALPPL2 (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-22336); B7-2 (예컨대, 카탈로그 번호 12-0862-82); B7-H3 (예컨대, 에노블리투주맙, 옴부르타맙, MGD009, MGC018, DS-7300); B7-H4 (예컨대, 카탈로그 번호 14-5949-82); B7-H6 (예컨대, 카탈로그 번호 12-6526-42); B7-H7; BAFF-R (예컨대, 카탈로그 번호 14-9117-82); BMPR2; BORIS; CD112 (예컨대, 미국 공개공보 번호 20100008928 참고); CD24 (예컨대, 미국 특허 번호 8,614,301 참고); CD244 (예컨대, R&D AF1039); CD30L (예컨대, 미국 특허 번호 9926373 참고); CD3D; CD3G; CD79A (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO 2020252110 참고); CD83 (예컨대, CBT004); CD97; CDH17 (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO 2018115231 참고); CLDN16; CLDN19; CYP1B1; DPEP3; DPP4; DSG2 (예컨대, 미국 특허 번호 10,836,823 참고); EPHA 수용체; 표피 성장 인자; FAS; FGFR1 (예컨대, RG7992); FGFR3 (예컨대, 보파타맙); FN1; FOLR1 (예컨대, 파르레투주맙); FSHR; FZD5; GM2 (예컨대, BIW-8962); GM3 (예컨대, 라코투모맙); GPA33 (예컨대, KRN330); GPC3 (예컨대, 코드리투주맙); HAS3; HLA-E; HLA-F; HLA-DR; ICAM1; IFNAR2; IL13Ra2; IL-5R (예컨대, 벤랄리주맙); KISS1R; LAMP1; LAYN; LCK; 레구마인; LILRB2; LILRB4; LMP2; MAD-CT-1; MAGEA1 (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-11338); MerTk (예컨대, DS5MMER, 카탈로그 번호 12-5751-82); MFSD13A; hTERT; gp100; Fas-관련된 항원 1; 메탈로프로테이나제; Mincle (예컨대, OTI2A8, 카탈로그 번호 TA505101); NA17; NY-ESO-1 (예컨대, E978m, 카탈로그 번호 35-6200); 폴리시알산 (예컨대, Watzlawik 등 J Nat Sci. 2015; 1(8):e141 참고); PR1; 육종 전위 중단점; SLC10A2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-18990); SLC17A2 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-106752); SLC39A5 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 MA5-27260); SLC6A15 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-52586); SLC6A6 (예컨대, ThermoFisher 카탈로그 번호 PA5-53431); SLC7A5; 및 CALCR (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO 2015077826 참고)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 빈혈과 연관된 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 빈혈과 연관된 항원에 특이적으로 결합하는 항체의 비-제한적인 예는 CD163 (예컨대, TBI 304H)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 바이러스 감염과 연관된 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 표적 항원, 및 바이러스 감염과 연관된 항원에 특이적으로 결합하는 연관된 항체의 비-제한적인 예는 DCSIGN (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO2018134389 참고) IFNAR1 (예컨대, 파랄리모맙); ASCT2 (예컨대, 아이닥타맙); ULBP1/2/3/4/5/6 (예컨대, PA5-82302); 및 CLDN1 (예컨대, INSERM 항-클라우딘-1)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 자가면역 질환과 연관된 항원에 특이적으로 결합할 수 있다. 표적 항원, 및 자가면역 질환과 연관된 항원에 특이적으로 결합하는 연관된 항체의 비-제한적인 예는 CLDN2 (예컨대, 국제 공개공보 번호 WO 2018123949 참고); IL-21R (예컨대, PF-05230900); DCIR; DCLK1 (예컨대, WO2018222675 참고); 덱틴1 (예컨대, 미국 특허 번호 9,045,542 참고); GITR (예컨대, 라기필리맙); ITGAV (예컨대, 아비투주맙); LY9 (예컨대, PA5-95601); MICA (예컨대, 1E2C8, 카탈로그 번호 66384-1-IG); MICB (예컨대, 카탈로그 번호 MA5-29422); NOX1 (예컨대, 카탈로그 번호 PA5-103220); CD2 (예컨대, BTI-322; 시플리주맙); CD247 (예컨대, AFM15); CD25 (예컨대, 바실릭시맙); CD28 (예컨대, REGN5668); CD3 (예컨대, 오텔릭시주맙; 비실리주맙); CD38 (예컨대, 펠자타맙; AMG 424); CD3E (예컨대, 포랄루맙; 테플리주맙); 및 CD5 (예컨대, MAT 304; 졸리모맙 아리톡스)를 포함한다.
일부 실시양태에서, 항체는 비-표적화된 항체, 예를 들어, 비-결합 또는 대조군 항체이다.
일부 실시양태에서, 항원은 CD30이다. 일부 실시양태에서, 항체는 국제 특허 공개공보 번호 WO 02/43661에 기재된 바와 같은 CD30에 결합하는 항체 또는 항원-결합 단편이다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 국제 특허 공개공보 번호 WO 02/43661에 기재된 cAC10이다. cAC10은 브렌툭시맙으로서 또한 알려져 있다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 cAC10의 CDR을 포함한다. 일부 실시양태에서, CDR은 Kabat 넘버링 체계에 의해 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 Chothia 넘버링 체계에 의해 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 IMGT 넘버링 체계에 의해 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, CDR은 AbM 넘버링 체계에 의해 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 각각 서열번호 1, 2, 3, 4, 5 및 6의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 서열번호 7의 아미노산 서열과 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 동일한 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 8의 아미노산 서열과 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상, 또는 100% 동일한 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-CD30 항체는 서열번호 9 또는 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항체는 EphA2에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 각각 서열번호 12, 13, 14, 15, 16 및 17의 아미노산 서열을 포함하는 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-EphA2 항체는 서열번호 18의 아미노산 서열과 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 19의 아미노산 서열과 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상 또는 100% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-EphA2 항체는 서열번호 20 또는 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-EphA2 항체는 서열번호 23 또는 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-EphA2 항체는 서열번호 26 또는 서열번호 27의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄, 및 서열번호 28의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 h1C1 또는 1C1이다.
서열의 표
화학식 (II)의 화합물
일부 실시양태는 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
여기서:
M은 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드이고;
R1은 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
각각의 R2 및 R3는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고;
각각의 RA, RB, RC, RD, RE 및 RF는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
각각의 아래첨자 m은 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 q는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
XA는 -CH2-, -O-, -S-, -NH- 또는 -N(CH3)-이고;
XB는 부재하거나, 2-16 원 헤테로알킬렌이고;
XB, M 및 L은 각각 독립적으로 PEG1 내지 PEG 72의 PEG 유닛으로 임의로 치환되고;
L은 본원에 기재된 바와 같은 임의적 링커임.
일부 실시양태에서, 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기 구조를 갖는다:
여기서:
R1은 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
각각의 R2 및 R3는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고;
각각의 RA, RB, RC, RD, RE 및 RF는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
각각의 아래첨자 m은 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 q는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
XA는 -CH2-, -O-, -S-, -NH- 또는 -N(CH3)-이고;
XB는 부재하거나, 2-16 원 헤테로알킬렌이고;
L은 화학식 -(A)a-(W)w-(Y)y-를 갖는 링커이며, 여기서:
A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌; 또는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이고;
각각의 Ra1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rb1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rd1 및 Re1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
W는 1-12 개의 아미노산이거나, 하기 구조를 가지며:
여기서 Su는 당 모이어티이고;
-OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
W1은 부재하거나, -O-C(=O)-이고;
은 A 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내고; * 는 Y, XA 또는 XB에 대한 공유 부착을 나타냄.
Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티 또는 절단 불가능한 모이어티이고;
아래첨자 a는 0 또는 1이고;
아래첨자 y는 0 또는 1이고;
아래첨자 w는 0 또는 1이고;
M은 이고;
각각의 AA는 독립적으로 선택된 아미노산이며, 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결되고;
각각의 아래첨자 b는 독립적으로 1 내지 6의 정수이고;
XB 및 L은 각각 독립적으로 PEG2 내지 PEG 72의 PEG 유닛으로 임의로 치환된다.
본원에 사용된 바와 같이, A는 존재하는 경우, M 또는 M1에 공유 부착되고, Y는 존재하는 경우, XB 또는 XA (XB가 부재하는 경우)에 부착된다.
일부 실시양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, 각각의 AA는 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결된다. 일부 실시양태에서, 각각의 AA는 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 시스테인 잔기의 황 원자를 통해 연결된다.
일부 실시양태에서, 각각의 AA는 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 질소 원자를 통해 연결된다. 일부 실시양태에서, 각각의 AA는 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 리신 잔기의 ε-질소 원자를 통해 연결된다.
일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 1, 2 또는 3이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 3이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 3, 4, 5 또는 6이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 4이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 5이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 6이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고, R2 및 R3은 둘 모두 -C(=O)NH2이다. 일부 실시양태에서, XA는 -O-이고, XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M에 대한 공유 연결을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이고; XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M에 대한 공유 연결을 나타낸다. 이러한 일부 실시양태에서, L은 부재하다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타내고; 아래첨자 a 및 아래첨자 y는 둘 모두 0이다 (즉, XB는 W에 공유 부착됨). 일부 실시양태에서, XA는 -O-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타내고; 아래첨자 a 및 아래첨자 w는 둘 모두 0이다.
일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타내고; 아래첨자 y 및 아래첨자 w는 둘 모두 0이다.
일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -O-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타내고; 아래첨자 y는 0이다.
일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고, R2 및 R3은 둘 모두 -C(=O)NH2이다. 일부 실시양태에서, XA는 -CH2-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M에 대한 공유 연결을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -CH2-이고; XB는 이며, 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 존재하는 경우, L 또는 M에 대한 공유 연결을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -CH2-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타내고; 아래첨자 a 및 아래첨자 y는 둘 모두 0이다 (즉, XB는 W에 공유 부착됨). 일부 실시양태에서, XA는 -CH2-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타낸다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이고; R2 및 R3는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; XA는 -CH2-이고; XB는 이며 여기서 은 XA에 대한 공유 연결을 나타내고, *는 L에 대한 공유 연결을 나타내고; 아래첨자 a 및 아래첨자 w는 둘 모두 0이다 (즉, XB는 Y에 공유 결합됨).
이러한 일부 실시양태에서, L은 화학식 -(A)a-(W)w-(Y)y-를 갖는 링커이다.
일부 실시양태에서: XB는 부재하고, L은 XA에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서: XB는 부재하고, Y는 XA에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서: XB는 부재하고, Y는 부재하고, W는 XA에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서: XB는 부재하고, Y는 부재하고, W는 부재하며, A는 XA에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서: XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, L은 XB에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서: XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, Y는 XB에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서: XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, Y는 부재하고, W는 XB에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서: XB는 2-16 원 헤테로알킬렌이고, Y는 부재하고, W는 부재하며, A는 XB에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서, W1은 -OC(=O)-이고, 아래첨자 y는 1이다. 일부 실시양태에서, XA는 -O-이고, XB 및 W는 부재하다. 일부 실시양태에서, XA는 NH 또는 -O-이고, XB는 부재하며, W1은 -OC(=O)이다. 일부 실시양태에서, XA는 -N(CH3)-이고, XB는 부재하며, W1은 -OC(=O)이다. 일부 실시양태에서, XA는 -S-이고, XB는 부재하며, W1은 -OC(=O)이다. 일부 실시양태에서, W1은 -OC(=O)-이고, XB는 -O- 또는 -NH-를 통해 W에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서, A는 M에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 a가 0이고 아래첨자 w가 0인 경우, Y는 M에 공유 부착된다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 a, y 및 w가 각각 0인 경우, XB는 M에 공유 부착된다.
일부 실시양태에서, 화학식 (II)의 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
화학식 (II-A)의 화합물
일부 실시양태에서, 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식 (II-A)의 구조 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 갖는다:
여기서:
LA는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -C(O)NRH(CH2)1-6-이고;
각각의 RH는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
Y는 이고;
#는 -NRHLA에 대한 공유 부착을 나타내고;
##는 W 또는 LB에 대한 공유 부착을 나타내고;
LB는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -[NHC(O)(CH2)1-4]1-3-이고;
나머지 변수는 화학식 (II)와 관련하여 위에 정의된 바와 같음.
일부 실시양태에서, RH는 메틸이다. 일부 실시양태에서, LA는 -(CH2)2-6-이다. 일부 실시양태에서, LA는 -(CH2)3-이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 y는 0이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 y는 1이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 w는 0이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 w는 1이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 y 및 아래첨자 w는 둘 모두 1이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 y 및 아래첨자 w는 둘 모두 0이다. 아래첨자 y 및 아래첨자 w가 둘 모두 0인 경우, 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식 (II-B)의 구조 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 갖는다:
여기서:
LA는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -C(O)NRH(CH2)1-6-이고;
각각의 RH는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
LB는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -[NHC(O)(CH2)1-4]1-3-이고;
나머지 변수는 화학식 (II)와 관련하여 위에 정의된 바와 같음.
일부 실시양태에서, W는 1-6 개의 아미노산의 쇄이다. 일부 실시양태에서, W는 1-4 개의 아미노산의 쇄이다. 일부 실시양태에서, W는 1-3 개의 아미노산의 쇄이다. 일부 실시양태에서, W의 각각의 아미노산은 알라닌, 발린, 이소류신, 류신, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 글리신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, O-메틸세린, O-메틸아스파르트산, O-메틸글루탐산, N-메틸리신, O-메틸티로신, O-메틸히스티딘 및 O-메틸트레오닌으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, W는 하기와 같다:
, 여기서:
은 LB에 대한 공유 부착을 나타내고;
*는 Y 또는 NRH에 대한 공유 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, LB는 -C(O)(CH2)2-이다. 일부 실시양태에서, LB는 -[NHC(O)(CH2)2]2-이다. 일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, 화학식 (II-A)의 화합물은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
화학식 (III)의 화합물
일부 실시양태는 하기 화학식 (III)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
여기서:
R1A는 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)nn-NRAARBB 이고;
각각의 R2A 및 R3A는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)mm-NRCCRDD 또는 -(CH2)qq-NREE1RFF1이고;
각각의 아래첨자 nn은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
각각의 아래첨자 mm은 독립적으로 0 또는 1이고;
각각의 아래첨자 qq는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
Y1은 -CH2-, -O-, -S-, -NH- 또는 -N(CH3)-이고;
X1은 C2-C6 알킬렌이고;
Z1은 -NREERFF, -C(=O)NRGGRHH 또는 -CO2H이고;
각각의 RAA, RBB, RCC, RDD, REE1 및 RFF1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
각각의 REE, RFF, RGG 및 RHH는 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬임.
일부 실시양태에서, R1A는 수소이다. 일부 실시양태에서, R1A는 하이드록실이다. 일부 실시양태에서, R1A는 C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이다. 일부 실시양태에서, R1A는 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1A는 메톡시에틸이다.
일부 실시양태에서, R1은 -(CH2)nn-NRAARBB이다. 일부 실시양태에서, RAA 및 RBB는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RAA 및 RBB는 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RAA 및 RBB 중 하나는 수소이고, RAA 및 RBB 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 3이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 3, 4, 5 또는 6이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 4이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 5이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 nn은 6이다.
일부 실시양태에서, 각각의 R2A 및 R3A는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)mm-NRCCRDD 또는 -(CH2)qq-NREE1RFF1이고; R2A 및 R3A는 동일하다. 일부 실시양태에서, 각각의 R2A 및 R3A는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)mm-NRCCRDD 또는 -(CH2)qq-NREE1RFF1이고; R2A 및 R3A는 상이하다.
일부 실시양태에서, R2A는 -(C=O)mm-NRCCRDD이다. 일부 실시양태에서, R3A는 (C=O)mm-NRCCRDD이다. 일부 실시양태에서, 각각의 RCC 및 각각의 RDD는 수소이다. 일부 실시양태에서, 각각의 RCC 및 각각의 RDD는 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 RCC 및 RDD 중 하나는 수소이고, 각각의 RCC 및 RDD 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 mm은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 mm은 1이다.
일부 실시양태에서, R2A는 -(CH2)qq-NREE1RFF1이다. 일부 실시양태에서, R3A는 (CH2)qq-NREE1RFF1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 REE1 및 각각의 RFF1은 수소이다. 일부 실시양태에서, 각각의 REE1 및 각각의 RFF1은 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 REE1 및 RFF1 중 하나는 수소이고, 각각의 REE1 및 RFF1 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 1 내지 6의 정수이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 qq는 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 qq는 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 qq는 3, 4, 5 또는 6이다.
일부 실시양태에서, R3A는 -CO2H이다. 일부 실시양태에서, R2A는 -CO2H이다.
일부 실시양태에서, Y1은 -CH2-이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -O-이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -S-이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -NH-이다. 일부 실시양태에서, Y1은 N(CH3)-이다.
일부 실시양태에서, X1은 C2-C5 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, X1은 C2-C4 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, X1은 에틸렌 또는 n-프로필렌이다. 일부 실시양태에서, X1은 에틸렌이다. 일부 실시양태에서, X1은 n-프로필렌이다.
일부 실시양태에서, Z1은 -NRE1RF1이다. 일부 실시양태에서, REE 및 RFF는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, REE 및 RFF는 독립적으로 C1-6 알킬이다. 일부 실시양태에서, REE 및 RFF 중 하나는 수소이고, REE 및 RFF 중 다른 하나는 C1-6 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-6 알킬은 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다.
일부 실시양태에서, Z1은 -C(=O)NRGGRHH이다. 일부 실시양태에서, RGG 및 RHH는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RGG 및 RHH는 독립적으로 C1-6 알킬이다. 일부 실시양태에서, RGG 및 RHH 중 하나는 수소이고, RGG 및 RHH 중 다른 하나는 C1-6 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-6 알킬은 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, C1-3 알킬은 메틸이다. 일부 실시양태에서, Z1은 -CO2H이다. 일부 실시양태에서, Z1은 -NREERFF이다. 일부 실시양태에서, REE는 수소이고, RFF는 메틸이다.
일부 실시양태에서, R1A는 메톡시이고, R2A 및 R3A는 둘 모두 -C(=O)NH2이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -O-이고, X1은 C3 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -O-이고, X1은 n-프로필렌이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -O-이고, X1은 n-프로필렌이고, Z1은 -NH2이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -O-이고, X1은 n-프로필렌이고, Z1은 -NHCH3이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -O-이고, X1은 n-프로필렌이고, Z1은 -N(CH3)2이다.
일부 실시양태에서, R1A는 메톡시이고; R2A 및 R3A는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; Y1은 -O-이고; X1은 n-프로필렌이고; Z1은 -NH2이다. 일부 실시양태에서, R1A는 메톡시이고; R2A 및 R3A는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; Y1은 -O-이고; X1은 n-프로필렌이고; Z1은 -NHCH3이다. 일부 실시양태에서, R1A는 메톡시이고; R2A 및 R3A는 둘 모두 -C(=O)NH2이고; Y1은 -O-이고; X1은 n-프로필렌이고; Z1은 -N(CH3)2이다.
일부 실시양태에서, 화학식 (III)의 화합물은
이다.
화학식 (IV)의 화합물
일부 실시양태는 하기 화학식 (IV)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다:
여기서:
R1C는 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
R2C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R2C는 1, 2 또는 3으로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
R3C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R3C는 1', 2' 또는 3'으로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
각각의 RA, RB, RC, RD, RE, RF 및 RM은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
각각의 아래첨자 q는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
LE는 -(C=O)- 또는 -S(O)2-이고;
LC는 -(CRIRJ)1-3-이고
각각의 RI 및 RJ는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
아래첨자 s는 0 또는 1이고;
각각의 Cy1은 독립적으로 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴 또는 C3-6 사이클로알킬이고;
각각의 RK는 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd2Re2, -C(O)NRd2Re2, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rd2 및 Re2는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
LAA는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6-, -C(O)NRL(CH2)1-6-, -(CH2)1-6O-, -C(O)(CH2)1-6O- 또는 -C(O)NRL(CH2)1-6O-이고;
RL은 수소 또는 C1-3 알킬이고;
Cy2는 각각이 하나 이상의 RU로 임의로 치환된, C3-6 사이클로알킬, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴 또는 페닐이고;
각각의 RU는 -CO2Rj1, -(C=O)NRd3Re3, -S(O)2NRd3Re3, -(CH2)q1-NRg1Rh1, -(CH2)q1-ORj1 및 -(CH2)q1-(OCH2CH2)1-8OH로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
아래첨자 q1은 0 내지 6의 정수이고;
아래첨자 t1 및 t2는 독립적으로 0 또는 1이며, 여기서 t1 및 t2 중 하나 이상은 1이고;
LD는 -(CH2)1-6-이고;
아래첨자 u는 0 또는 1이고;
Z는 -N(RHH)- 또는 -N+(C1-6 알킬)(RHH)-이고;
RHH는 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이고;
Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티 또는 절단 불가능한 모이어티이고;
아래첨자 y는 0 또는 1이고;
W는 1-12 개의 아미노산의 쇄이거나, 하기 구조를 가지며:
여기서 Su는 당 모이어티이고;
-OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
W1은 부재하거나, -O-C(=O)-이고;
은 LBB에 대한 공유 부착을 나타내고;
*는 Y, LD, NRHH 또는 Cy2에 대한 공유 부착을 나타내고;
아래첨자 w는 0 또는 1이고;
LBB는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -[NHC(O)(CH2)1-4]1-3-이고;
M은 이고;
각각의 AA는 독립적으로 선택된 아미노산이며, 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결되고;
각각의 아래첨자 b는 독립적으로 1 내지 6의 정수임.
일부 실시양태에서, R1C는 수소이다. 일부 실시양태에서, R1C는 하이드록실이다. 일부 실시양태에서, R1C는 C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1C는 메톡시이다. 일부 실시양태에서, R1C는 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1C는 메톡시에틸이다. 일부 실시양태에서, R1C는 PEG2 내지 PEG4이다. 일부 실시양태에서, R1C는 -(CH2)n-NRARB이다.
일부 실시양태에서, RA 및 RB는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB는 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB 중 하나는 수소이고, RA 및 RB 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 3, 4, 5 또는 6이다.
일부 실시양태에서, R2C 및 R3C는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C는 동일하다. 일부 실시양태에서, R2C 및 R3C는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C는 상이하다. 일부 실시양태에서, R2C는 -(C=O)m-NRCRD이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -(C=O)m-NRCRD이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD 중 하나는 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 m은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 m은 1이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -(CH2)q-NRERF이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -(CH2)q-NRERF이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF 중 하나는 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 1 내지 6의 정수이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -CO2RM이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -CO2RM이다. 일부 실시양태에서, RM은 수소이다. 일부 실시양태에서, RM은 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -(CH2)q-ORM이다.
일부 실시양태에서, R3C는 -(CH2)q-ORM이다. 일부 실시양태에서, RM은 수소이다. 일부 실시양태에서 q는 0이다. 일부 실시양태에서 q는 1이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -O(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -O(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -NRM(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -NRM(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, RE, RF 및 RM은 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RE, RF 및 RM은 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RE, RF 및 RM 중 하나는 C1-3 알킬이고, 나머지 RE, RF 및 RM은 수소이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -S(O)2NRCRD이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -S(O)2NRCRD이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD 중 하나는 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -S(O)2RM이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -S(O)2RM이다. 일부 실시양태에서, RM은 수소이다. 일부 실시양태에서, RM은 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 위치 1에 부착된다. 일부 실시양태에서, R2C는 위치 2에 부착된다. 일부 실시양태에서, R2C는 위치 3에 부착된다. 일부 실시양태에서, R3C는 위치 1'에 부착된다. 일부 실시양태에서, R3C는 위치 2'에 부착된다. 일부 실시양태에서, R3C는 위치 3'에 부착된다.
일부 실시양태에서, LE는 -(C=O)-이다. 일부 실시양태에서, LE는 -S(O)2-이다.
일부 실시양태에서, 각각의 RI 및 RJ는 수소이다. 일부 실시양태에서, 각각의 RI 및 RJ는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RI 및 RJ 중 하나는 수소이고, RI 및 RJ 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, LC는 -(CRIRJ)-이다.
일부 실시양태에서, s는 0이다. 일부 실시양태에서, s는 1이다.
일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 독립적으로 5-6 원 헤테로아릴이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 피라졸이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 피라졸, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 독립적으로 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 C4-5 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 RK는 C1-3 알킬, C1-3 할로알킬 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 RK는 메틸, 에틸, -CF3 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 동일하다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 상이하다.
일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-6-이다. 일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-3-이다. 일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-6O-이다. 일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-3O-이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 4-6 원 헤테로사이클이다. 일부 실시양태에서, Cy2는 다음 구조를 갖는다: , 여기서 아래첨자 z1 및 z2 각각은 독립적으로 1 내지 3의 정수이고, **는 LAA에 대한 부착을 나타냄. 일부 실시양태에서, z1 및 z2는 1이다. 일부 실시양태에서, z1 및 z2는 2이다. 일부 실시양태에서, z1은 1이고, z2는 2이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음 구조를 갖는다: , 여기서
Z1은 -O-, -S-, -CRNRO- 및 -NRP-로 이루어진 군으로부터 선택되고;
RN, RO 및 RP는 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
아래첨자 z3는 1 내지 3의 정수이고;
**는 LAA에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, RN 및 RO는 수소이다. 일부 실시양태에서, RP는 수소이다. 일부 실시양태에서, RP는 메틸이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 5-6 원 헤테로아릴이다. 일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서
Z2는 =CRN- 또는 =N이고;
RN은 수소 또는 C1-6 알킬이고;
**는 LAA에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, Z2는 =CRN이고, RN은 수소이다. 일부 실시양태에서, Z2는 =N-이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서 Z3은 -O- 또는 -S-이고. **는 LAA, LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, **는 LAA에 대한 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, **는 LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타낸다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서 **는 LAA에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서
각각의 Z2는 독립적으로 =CRN- 또는 =N-이고;
각각의 RN은 수소 또는 C1-6 알킬임.
일부 실시양태에서, 하나 이상의 Z2는 =N-이다. 일부 실시양태에서, 하나의 Z2는 =N-이고, 나머지 Z2는 =CRN-이다. 일부 실시양태에서, 2 개의 Z2는 =N-이고, 나머지 Z2는 =CRN-이다.
일부 실시양태에서, RN은 수소이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
일부 실시양태에서, Cy2는 사이클로부틸이다.
일부 실시양태에서, 각각의 Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1은 독립적으로 수소 또는 -CH3이다.
일부 실시양태에서, 각각의 RU는 -CO2H, -(C=O)NH2, -S(O)2NH2, -CH2NH2 및 -CH2OH로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, t1은 0이고, t2는 1이다. 일부 실시양태에서, t1은 1이고, t2는 0이다. 일부 실시양태에서, t1은 1이고, t2는 1이다.
일부 실시양태에서, u는 1이고, LD는 -(CH2)1-3이다. 일부 실시양태에서, u는 0이다.
일부 실시양태에서, t2는 1이고, RHH는 수소이다. 일부 실시양태에서, t2는 1이고, RHH는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, t2는 1이고, RHH는 C3-4 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, t2는 1이고, RHH는 -(CH2) C3-4 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, t2는 1이고, RHH는 -(CH2) 4-5 원 헤테로사이클이다. 일부 실시양태에서, t2는 1이고, RHH는 -(CH2) 5-원 헤테로아릴이다.
일부 실시양태에서, Z는 -N(RHH)-이다. 다른 실시양태에서, Z는 -N+(C1-6 알킬)(RHH)이다.
일부 실시양태에서, Y는 이다.
일부 실시양태에서, Y는 사이클로헥산카복실, 운데카노일, 카프로일, 헥사노일, 부타노일 또는 프로피오닐 기이다. 일부 실시양태에서, Y는 PEG4 내지 PEG12이다. 일부 실시양태에서, y는 0이다. 일부 실시양태에서, y는 1이다.
일부 실시양태에서, W는 1-12 개의 아미노산의 쇄이다. 일부 실시양태에서, W는 1-6 개의 아미노산의 쇄이다. 일부 실시양태에서, W는 1-3 개의 아미노산의 쇄이다.
일부 실시양태에서, W는 알라닌, 발린, 이소류신, 류신, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 글리신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, O-메틸세린, O-메틸아스파르트산, O-메틸글루탐산, N-메틸리신, O-메틸티로신, O-메틸히스티딘 및 O-메틸트레오닌으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, W에서의 각각의 아미노산은 알라닌, 글리신, 리신, 세린, 아스파르트산, 아스파테이트 메틸 에스테르, N,N-디메틸-리신, 페닐알라닌, 시트룰린, 발린-알라닌, 발린-시트룰린, 페닐알라닌-리신 또는 호모세린 메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, W는 하기 구조를 갖는다:
일부 실시양태에서, W1은 -O-C(=O)-이다. 일부 실시양태에서, 하나의 Rg는 할로겐, -CN 또는 -NO2이고, 나머지 RG는 수소이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rg는 수소이다.
일부 실시양태에서, w는 0이다. 일부 실시양태에서, w는 1이다.
일부 실시양태에서, LBB는 -(CH2)1-3-이다. 일부 실시양태에서, LBB는 -C(O)(CH2)1-2-이다.
일부 실시양태에서, LBB는 -C(O)(CH2)2-이다. 일부 실시양태에서, LBB는 -[NHC(O)(CH2)2]1-2-이다. 일부 실시양태에서, LBB는 -[NHC(O)(CH2)2]2-이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, 각각의 AA는 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결된다. 일부 실시양태에서, 각각의 AA는 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 질소 원자를 통해 연결된다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 3, 4, 5 또는 6이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다. 일부 양태에서, M은 이다.
일부 실시양태에서, M은 이다.
화학식 (IV)의 화합물의 일부 실시양태는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물을 포함한다:
및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
화학식 (V)의 화합물
일부 실시양태는 하기 화학식 (V)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다:
여기서:
R1C는 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
R2C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R2C는 1, 2 또는 3으로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
R3C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R3C는 1', 2' 또는 3'으로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
각각의 RA, RB, RC, RD, RE, RF 및 RM은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
각각의 아래첨자 q는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
LE는 -(C=O)- 또는 -S(O)2-이고;
LC는 -(CRIRJ)1-3-이고
각각의 RI 및 RJ는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
아래첨자 s는 0 또는 1이고;
각각의 Cy1은 독립적으로 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴, 또는 C3-6 사이클로알킬이고;
각각의 RK는 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd2Re2, -C(O)NRd2Re2, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rd2 및 Re2는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
LAA는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6-, -C(O)NRL(CH2)1-6-, -(CH2)1-6O-, -C(O)(CH2)1-6O- 또는 -C(O)NRL(CH2)1-6O-이고;
RL은 수소 또는 C1-3 알킬이고;
Cy2는 각각이 하나 이상의 RU로 임의로 치환된, C3-6 사이클로알킬, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴 또는 페닐이고;
각각의 RU는 -CO2Rj1, -(C=O)NRd3Re3, -S(O)2NRd3Re3, -(CH2)q1-NRg1Rh1, -(CH2)q1-ORj1 및 -(CH2)q1-(OCH2CH2)1-8OH로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
아래첨자 q1은 0 내지 6의 정수이고;
아래첨자 t1은 0 또는 1이고;
LD는 -(CH2)1-6-이고;
아래첨자 u는 0 또는 1이고;
t1이 0인 경우, ZZ는 -NRQRR, -N+(C1-6 알킬)RQRR, -C(=O)NSRT, -C(O)O(C1-6 알킬), -CO2H 또는 아미노산이거나, t1이 1인 경우, ZZ는 수소, -NRQRR, -N+(C1-6 알킬)RQRR; -C(=O)NSRT, -C(O)O(C1-6 알킬),-CO2H 또는 아미노산이고;
RQ는 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이며, 단,
t1이 0이고 두 Cy1 모두가 인 경우, RQ는 C2-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이고,
t1이 0이고 하나 이상의 Cy1이 가 아닌 경우, ZZ는 -NRQRR, -N+(C1-6 알킬)RQRR 또는 -C(=O)NSRT이고, RQ는 C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이고;
각각의 RR, RS 및 RT는 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬임.
일부 실시양태에서, R1C는 수소이다. 일부 실시양태에서, R1C는 하이드록실이다. 일부 실시양태에서, R1C는 C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1C는 메톡시이다. 일부 실시양태에서, R1C는 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, R1C는 메톡시에틸이다. 일부 실시양태에서, R1C는 PEG2 내지 PEG4이다. 일부 실시양태에서, R1C는 -(CH2)n-NRARB이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB는 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RA 및 RB 중 하나는 수소이고, RA 및 RB 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 2이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 n은 3, 4, 5 또는 6이다.
일부 실시양태에서, R2C 및 R3C는 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C는 동일하다. 일부 실시양태에서, R2C 및 R3C는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C는 상이하다.
일부 실시양태에서, R2C는 -(C=O)m-NRCRD이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -(C=O)m-NRCRD이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD 중 하나는 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 m은 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 m은 1이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -(CH2)q-NRERF이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -(CH2)q-NRERF이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF 중 하나는 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 0이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 q는 1 내지 6의 정수이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -CO2RM이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -CO2RM이다.
일부 실시양태에서, RM은 수소이다. 일부 실시양태에서, RM은 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -(CH2)q-ORM이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -(CH2)q-ORM이다.
일부 실시양태에서, RM은 수소이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 q는 0이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 q는 1이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -O(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -O(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RE 및 RF 중 하나는 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -NRM(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -NRM(C=O)-NRERF이다. 일부 실시양태에서, RE, RF 및 RM은 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RE, RF 및 RM은 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RE, RF 및 RM 중 하나는 C1-3 알킬이고, 나머지 RE, RF 및 RM은 수소이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -S(O)2NRCRD이다.
일부 실시양태에서, R3C는 -S(O)2NRCRD이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 둘 모두 수소이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD는 각각 독립적으로 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RC 및 RD 중 하나는 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 -S(O)2RM이다. 일부 실시양태에서, R3C는 -S(O)2RM이다. 일부 실시양태에서, RM은 수소이다. 일부 실시양태에서, RM은 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, R2C는 위치 1에 부착된다. 일부 실시양태에서, R2C는 위치 2에 부착된다. 일부 실시양태에서, R2C는 위치 3에 부착된다. 일부 실시양태에서, R3C는 위치 1'에 부착된다. 일부 실시양태에서, R3C는 위치 2'에 부착된다. 일부 실시양태에서, R3C는 위치 3'에 부착된다.
일부 실시양태에서, LE는 -(C=O)-이다. 일부 실시양태에서 LE는 -S(O)2-이다.
일부 실시양태에서, 각각의 RI 및 RJ는 수소이다. 일부 실시양태에서, 각각의 RI 및 RJ는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, RI 및 RJ 중 하나는 수소이고, RI 및 RJ 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다.
일부 실시양태에서, LC는 -(CRIRJ)-이다.
일부 실시양태에서, 아래첨자 s는 0이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 s는 1이다.
일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 독립적으로 5-6 원 헤테로아릴이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 피라졸이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 피라졸, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 독립적으로 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 C4-5 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 RK는 C로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 RK는 메틸, 에틸, -CF3 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 동일하다. 일부 실시양태에서, 각각의 Cy1은 상이하다.
일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-6-이다. 일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-3-이다. 일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-6O-이다. 일부 실시양태에서, LAA는 -(CH2)1-3O-이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 4-6 원 헤테로사이클이다. 일부 실시양태에서, Cy2는 다음의 구조를 갖는다: 여기서 아래첨자 z1 및 z2 각각은 독립적으로 1 내지 3의 정수이고, **는 LAA에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, 아래첨자 z1 및 아래첨자 z2는 1이다. 일부 실시양태에서, 아래첨자 z1 및 아래첨자 z2는 2이다.
일부 실시양태에서, 아래첨자 z1은 1이고, 아래첨자 z2는 2이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음의 구조를 갖는다: , 여기서
Z1은 -O-, -S-, -CRNRO- 및 -NRP-로 이루어진 군으로부터 선택되고;
RN, RO 및 RP는 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
아래첨자 z3는 1 내지 3의 정수이고;
**는 LAA에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, RN 및 RO는 수소이다. 일부 실시양태에서, RP는 수소이다. 일부 실시양태에서, RP는 메틸이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 5-6 원 헤테로아릴이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서
Z2는 =CRN- 또는 =N-이고;
RN은 수소 또는 C1-6 알킬이고;
**는 LAA에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, Z2는 =CRN-이고, RN은 수소이다. 일부 실시양태에서, Z2는 =N이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서 Z3은 -O- 또는 -S-이고, **는 LAA, LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, **는 LAA에 대한 부착을 나타낸다. 일부 실시양태에서, **는 LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타낸다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서 **는 LAA에 대한 부착을 나타냄.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
, 여기서
각각의 Z2는 독립적으로 =CRN- 또는 =N-이고;
각각의 RN은 수소 또는 C1-6 알킬임.
일부 실시양태에서, 하나 이상의 Z2는 =N-이다. 일부 실시양태에서, 하나의 Z2는 =N-이고, 나머지 Z2는 =CRN-이다. 일부 실시양태에서, 2 개의 Z2는 -NRP-이고, 나머지 Z2는 =CRN-이다.
일부 실시양태에서, RN은 수소이다.
일부 실시양태에서, Cy2는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
일부 실시양태에서, Cy2는 사이클로부틸이다.
일부 실시양태에서, Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1은 독립적으로 수소 또는 -CH3이다.
일부 실시양태에서, 각각의 RU는 -CO2H, -(C=O)NH2, -S(O)2NH2, -CH2NH2 및 -CH2OH로부터 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, t1은 0이다. 일부 실시양태에서, t1은 1이다.
일부 실시양태에서, u는 1이고, LD는 -(CH2)1-3이다. 일부 실시양태에서, u는 0이다.
일부 실시양태에서, ZZ는 -NRQRR이다. 일부 실시양태에서, RQ는 C1-6 알킬이다, 일부 실시양태에서, RQ는 C3-6 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, RQ는 사이클로프로필이다. 일부 실시양태에서, RQ는 -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬이다. 일부 실시양태에서, RR은 수소이다.
일부 실시양태에서, ZZ는 -N+(C1-6 알킬)RQRR이다.
일부 실시양태에서, ZZ는 -C(=O)NSRT이다.
일부 실시양태에서, ZZ는 -C(O)O(t-부틸)이다.
일부 실시양태에서, ZZ는 -CO2H이다.
일부 실시양태에서, ZZ는 알라닌, 발린, 이소류신, 류신, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 글리신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, O-메틸세린, O-메틸아스파르트산, O-메틸글루탐산, N-메틸리신, O-메틸티로신, O-메틸히스티딘 및 O-메틸트레오닌으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이다.
화학식 (V)의 일부 실시양태는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물을 포함한다:
및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
링커
본원에 기재된 바와 같이, 화학식 (I), (II) 및 (II-A)와 관련하여 정의된 바와 같은 링커 (L)는 존재하는 경우, XA 또는 XB를 M 또는 M1과 연결하는 임의적 기이다. 예를 들어, A는 존재하는 경우, M 또는 M1에 공유 부착되고, Y는 존재하는 경우, XB 또는 XA (XB가 부재하는 경우)에 부착된다. 일부 실시양태에서, 링커 (L)는 화학식 -(A)a-(W)w-(Y)y를 가지며, 여기서:
A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌; 또는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이고;
각각의 Ra1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rb1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
각각의 Rd1 및 Re1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
a는 0 또는 1이고;
W는 1-12 개의 아미노산이거나, 하기 구조를 가지며:
여기서 Su는 당 모이어티이고;
-OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
W1은 부재하거나, -O-C(=O)-이고;
은 존재하는 경우, 화학식 (II)의 화합물에서의 A 또는 M에 대한 공유 부착, 및 ADC 및 본원에 기재된 화합물 중 A, M 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내고;
*는 화학식 (II)의 화합물에서의 Y, XA 또는 XB에 대한 그리고 본원에 기재된 ADC에서의 Y, XA 또는 XB에 대한 공유 부착을 나타내고;
w는 0 또는 1이고;
Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티 또는 절단 불가능한 모이어티이고;
y는 0 또는 1임.
일부 실시양태에서 -OA-는 글리코시드 결합을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 글리코시드 결합은 β-글루쿠로니다제 또는 β-만노시다제-절단 부위를 제공한다. 일부 실시양태에서, β-글루쿠로니다제-절단 부위는 인간 리소좀 β-글루쿠로니다제에 의해 절단가능하다. 일부 실시양태에서, β-만노시다제-절단 부위는 인간 리소좀 β-만노시다제에 의해 절단가능하다.
일부 실시양태에서, a는 0이다. 일부 실시양태에서, a는 1이다. 일부 실시양태에서, w는 0이다. 일부 실시양태에서, w는 1이다. 일부 실시양태에서, y는 0이다. 일부 실시양태에서, y는 1이다. 일부 실시양태에서, a + y + w = 1이다. 일부 실시양태에서, a + y + w = 2이다. 일부 실시양태에서, a + y + w = 3이다. 일부 실시양태에서, a + y + w = 0 이다(즉, 링커 (L)가 부재함).
일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-10 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C4-10 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Ra1으로 치환된 C2-20 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Ra1으로 치환된 C2-10 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Ra1으로 치환된 C2-10 알킬렌이다.
일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 C1-6 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 C1-6 할로알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 C1-6 할로알콕시이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 할로겐이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 -OH이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 =O이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 -NRd1Re1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 C(O)NRd1Re1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 -C(O)(C1-6 알킬)이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Ra1은 -C(O)O(C1-6 알킬)이다. 일부 실시양태에서, Ra1의 하나의 발생은 -NRd1Re1이다. 일부 실시양태에서, A는 각각이 =O인 1 또는 2 개의 Ra1으로 치환된 C2-20 알킬렌이다.
일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1 중 하나는 수소이고, Rd1 및 Re1 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 둘 모두 수소 또는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 둘 모두 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 둘 모두 메틸이다.
일부 실시양태에서, A는 C2-20 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 C2-10 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 C2-10 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 C2-6 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 C4-10 알킬렌이다.
일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 20 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 12 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 4 내지 12 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 4 내지 8 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Rb1으로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Rb1으로 치환된 2 내지 20 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Rb1으로 치환된 2 내지 12 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Rb1으로 치환된 4 내지 12 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 Rb1으로 치환된 4 내지 8 원 헤테로알킬렌이다.
일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 C1-6 알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 C1-6 할로알킬이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 C1-6 알콕시이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 C1-6 할로알콕시이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 할로겐이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 -OH이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 -NRd1Re1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 C(O)NRd1Re1이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 -C(O)(C1-6 알킬)이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rb1은 -C(O)O(C1-6 알킬)이다. 일부 실시양태에서, Rb1의 하나의 발생은 -NRd1Re1이다.
일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1 중 하나는 수소이고, Rd1 및 Re1 중 다른 하나는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 둘 모두 수소 또는 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 둘 모두 C1-3 알킬이다. 일부 실시양태에서, Rd1 및 Re1은 둘 모두 메틸이다.
일부 실시양태에서, A는 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 2 내지 20 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 2 내지 12 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 4 내지 12 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 4 내지 8 원 헤테로알킬렌이다. 일부 실시양태에서, A는 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다:
여기서 은 W 또는 Y에 대한 공유 부착을 나타내고, *는 (예컨대, 각각 화학식 (I) 또는 (II)의 화합물에서의) M1 또는 M에 대한 공유 연결을 나타냄. 일부 실시양태에서, M은 석신이미드이다. 일부 실시양태에서, M은 가수분해된 석신이미드이다. 일부 실시양태에서, M1은 석신이미드이다. 일부 실시양태에서, M1은 가수분해된 석신이미드이다. 가수분해된 석신이미드는 2 개의 위치이성질체 형태(들)로 존재할 수 있음을 이해할 것이다. 이러한 형태는 M의 가수분해에 대해 아래에 예시되며, 여기서 해당 가수분해로부터 위치이성질체를 나타내는 구조는 화학식 M' 및 M''이며; 여기서 결합에 인접한 물결선은 A에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, M'은 이다. 일부 실시양태에서, M'은 이다. 일부 실시양태에서, M"은 이다. 일부 실시양태에서, M"은 이다.
일부 실시양태에서, A는 PEG4 내지 PEG12이다. 일부 실시양태에서, A는 PEG4 내지 PEG8이다. 대표적인 A 기는 다음을 포함하나, 이에 제한되지 않는다:
일부 실시양태에서, w는 0이다. 일부 실시양태에서 w는 1이다.
일부 실시양태에서, W는 단일 아미노산이다. 일부 실시양태에서, W는 단일 자연 아미노산이다. 일부 실시양태에서, W는 2-12 개의 아미노산을 포함하는 펩티드이며, 여기서 각각의 아미노산은 독립적으로 자연 또는 비자연 아미노산이다. 일부 실시양태에서, 자연 또는 비자연 아미노산은 D 또는 L 이성질체이다. 일부 실시양태에서, 각각의 아미노산은 독립적으로 자연 아미노산이다. 일부 실시양태에서, 각각의 W는 독립적으로 자연 또는 비자연인 알파, 베타 또는 감마 아미노산이다. 일부 실시양태에서, W는 비자연 아미노산에 연결된 자연 아미노산을 포함한다. 일부 실시양태에서, W는 자연 또는 비자연 아미노산의 D-이성질체에 연결된 자연 또는 비자연 아미노산을 포함한다. 일부 실시양태에서, W는 디펩티드이다. 일부 실시양태에서, W는 트리펩티드이다. 일부 실시양태에서, W는 테트라펩티드이다. 일부 실시양태에서, W는 펜타펩티드이다. 일부 실시양태에서, W는 헥사펩티드이다. 일부 실시양태에서, W는 7, 8, 9, 10, 11 또는 12 개의 아미노산이다. 일부 실시양태에서, W의 각각의 아미노산은 발린, 알라닌, β-알라닌, 글리신, 리신, 류신, 페닐알라닌, 프롤린, 아스파르트산, 세린, 글루탐산, 호모세린 메틸 에테르, 아스파르테이트 메틸 에스테르, N,N-디메틸 리신, 아르기닌, 발린-알라닌, 발린-시트룰린, 페닐알라닌-리신 및 시트룰린으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시양태에서, W는 아스파르트산이다. 일부 실시양태에서, W는 리신이다. 일부 실시양태에서, W는 글리신이다. 일부 실시양태에서, W는 알라닌이다. 일부 실시양태에서, W는 아스파르테이트 메틸 에스테르이다. 일부 실시양태에서, W는 N,N-디메틸 리신이다. 일부 실시양태에서, W는 호모세린 메틸 에테르이다. 일부 실시양태에서, W는 세린이다. 일부 실시양태에서, W는 발린-알라닌이다.
일부 실시양태에서, w는 1이고; W는 1-12 개의 아미노산이고; W 및 XB 사이 또는 W 및 Y 사이의 결합은 종양-회합된 프로테아제에 의해 효소적으로 절단될 수 있다. 일부 실시양태에서, 종양-회합된 프로테아제는 카텝신이다. 일부 실시양태에서, 종양-회합된 프로테아제는 카텝신 B, C 또는 D이다.
일부 실시양태에서, w는 1이고; W는 하기 구조를 갖는다:
여기서 Su는 당 모이어티이고;
-OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
W1은 부재하거나, -O-C(=O)-이고;
은 화학식 (II)의 화합물에서의 A 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내고;
*는 화학식 (II)의 화합물에서의 Y, XA 또는 XB에 대한 공유 부착을 나타냄;
일부 실시양태에서, w는 1이고; W는 하기 구조를 갖는다:
여기서 Su는 당 모이어티이고;
-OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
W1은 부재하거나 -O-C(=O)-이고;
은 본원에 기재된 ADC에서의 A 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내고;
*는 본원에 기재된 ADC에서의 Y, XA 또는 XB에 대한 공유 부착을 나타냄;
일부 실시양태에서, -OA-는 글리코시드 결합을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 글리코시드 결합은 β-글루쿠로니다제 또는 β-만노시다제-절단 부위를 제공한다. 일부 실시양태에서, β-글루쿠로니다제 또는 β-만노시다제-절단 부위는 인간 리소좀 β-글루쿠로니다제 또는 인간 리소좀 β-만노시다제에 의해 절단가능하다.
일부 실시양태에서, W는 이다. 일부 실시양태에서, W는 이다. 일부 실시양태에서, W는 이다.
일부 실시양태에서, 각각의 Rg는 수소이다. 일부 실시양태에서, 하나의 Rg는 수소이고, 나머지 Rg는 독립적으로 할로, -CN 또는 -NO2이다. 일부 실시양태에서, 2 개의 Rg는 수소이고, 나머지 Rg는 할로, -CN 또는 -NO2이다.
일부 실시양태에서, 하나의 Rg는 할로겐, -CN 또는 -NO2이고, 다른 Rg는 수소이다. 일부 실시양태에서, 각각의 Rg는 수소이다.
일부 실시양태에서, OA-Su는 생리학적 pH에서 중성으로 하전된다. 일부 실시양태에서, OA-Su는 만노스이다. 일부 실시양태에서, OA-Su는 이다. 일부 실시양태에서, OA-Su는 카복실레이트 모이어티를 포함한다. 일부 실시양태에서, OA-Su는 글루쿠론산이다. 일부 실시양태에서, OA-Su는 이다.
일부 실시양태에서, W는 이다. 일부 실시양태에서, W는 이다. 일부 실시양태에서, W는 이다. 일부 실시양태에서, W는 이다.
일부 실시양태에서, a는 0이다.
일부 실시양태에서, y는 0이다. 일부 실시양태에서 y는 1이다.
일부 실시양태에서, Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티 또는 절단 불가능한 모이어티이다. 일부 실시양태에서, Y는 자기희생 모이어티 또는 비자기희생 방출가능한 모이어티이다. 일부 실시양태에서, Y는 자기희생 모이어티이다. 일부 실시양태에서, Y는 비자기희생 모이어티이다.
비자기희생 모이어티는 효소 절단을 필요로 하고, 기의 일부 또는 전부가 ADC로부터의 절단 후 약물 유닛에 결합된 상태로 유지되어, 유리 약물을 형성하는 것이다. 비자기희생 모이어티의 예는 -글리신-; 및 -글리신-글리신을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. -글리신- 또는 -글리신-글리신-인 Y를 갖는 ADC가 효소 절단 (예를 들어, 암-세포-회합된 프로테아제 또는 림프구-회합된 프로테아제를 통해)을 겪을 때, 약물 유닛은 ADC로부터 절단되고, 그에 따라 유리 약물은 Y로부터의 글리신 또는 글리신-글리신 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 독립적인 가수분해 반응이 표적 세포 내에서 또는 표적 세포 부근에서 일어나, 유리 약물로부터 글리신 또는 글리신-글리신 기를 추가로 절단한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 비자기희생 모이어티의 효소적 절단은 임의의 추가 가수분해 단계(들)를 초래하지 않는다.
자기희생 모이어티는 2 개의 이격된 화학적 모이어티를 일반적으로 안정한 3차(tripartite) 분자로 함께 공유 연결할 수 있는 이기능적 화학적 모이어티를 지칭한다. 자기희생 기는 제1 모이어티에 대한 결합이 절단되는 경우 제2 화학적 모이어티로부터 자발적으로 분리될 것이다. 예를 들어, 자기희생 모이어티는 하나 이상의 알킬, 알콕시, 할로겐, 시아노 또는 니트로 기로 임의로 치환된 p-아미노벤질 알콜 (PAB)을 포함한다. 자기희생 모이어티의 다른 예는 PAB 기, 예컨대, 2-아미노이미다졸-5-메탄올 유도체 (예컨대, Hay 등, 1999, Bioorg. Med. Chem. Lett.　9:2237 참고), 오르토 또는 파라-아미노벤질아세탈, 치환 및 비치환된 4-아미노부티르산 아미드 (예컨대, Rodrigues 등, 1995, Chemistry Biology　2:223 참고), 적절하게 치환된 바이사이클로[2.2.1] 및 바이사이클로[2.2.2] 고리 시스템 (예컨대, Storm 등, 1972, J. Amer. Chem. Soc.　94:5815 참고), 2-아미노페닐프로피온산 아미드 (예컨대, Amsberry 등, 1990, J. Org. Chem.　55:5867 참고), 및 글리신의 α-위치에서 치환되는 아민-함유 약물의 제거 (예컨대, Kingsbury 등, 1984, J. Med. Chem.　27:1447 참고)와 전자적으로 유사한 방향족 화합물을 포함하나, 이에 제한되지 않는다
일부 실시양태에서, Y는 하나 이상의 알킬, 알콕시, 할로겐, 시아노 또는 니트로 기로 임의로 치환된 PAB 기; 당 모이어티로 임의로 치환된 파라-아미노벤질옥시-카보닐 (PABC) 기; -글리신-; -글리신-글리신-; 또는 다중 약물 유닛을 혼입 (및 방출)할 수 있는 분지형 비스(하이드록시메틸)스티렌 (BHMS) 유닛이다.
일부 실시양태에서, -(A)a-(W)w-(Y)y는 ADC가 표적 세포 내로 내재화되면, 유리 약물의 방출을 제공하는 비자기희생 방출가능한 링커를 포함한다. 일부 실시양태에서, -(A)a-(W)w-(Y)y는 표적화된 세포와 함께 또는 그 부근에서 유리 약물의 방출을 제공하는 방출가능한 링커를 포함한다. 방출가능한 링커는 펩티드 절단 부위, 당 절단 부위 또는 디설파이드 절단면과 같은 인식 부위를 보유하고 있다. 일부 실시양태에서, 각각의 방출가능한 링커는 디-펩티드이다. 일부 실시양태에서, 각각의 방출가능한 링커는 디설파이드이다. 일부 실시양태에서, 각각의 방출가능한 링커는 히드라존이다. 일부 실시양태에서, 각각의 방출가능한 링커는 독립적으로 Val-Cit-, -Phe-Lys- 또는 -Val-Ala-이다. 일부 실시양태에서, 각각의 방출가능한 링커는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 결합될 때, 독립적으로 석신이미도-카프로일 (mc), 석신이미도-카프로일-발린-시트룰린 (sc-vc), 석신이미도-카프로일-발린-시트룰린-파라아미노벤질옥시카보닐 (sc-vc-PABC) 또는 SDPr-vc (여기서 "S"는 석신이미도를 지칭함)이다.
일부 실시양태에서 -(A)a-(W)w-(Y)y는 절단 불가능한 링커를 포함한다. 절단 불가능한 링커는 당업계에 알려져 있고, 본원에 "Y" 기로서 기재된 ADC와 함께 사용하기 위해 개조될 수 있다. 절단 불가능한 링커는 일반적으로 안정하고 공유적인 방식으로 약물 유닛을 항체에 연결할 수 있으며, 산-유도된 절단, 광-유도된 절단, 펩티다제- 또는 에스테라제-유도된 절단, 및 디설파이드 결합 절단에 대해 실질적으로 저항성이 있다. 유리 약물은 단백질분해적 항체 분해와 같은 대체 메커니즘을 통해 절단 불가능한 링커를 함유하는 ADC로부터 방출될 수 있다. 일부 실시양태에서, 약물 유닛은 ADC의 일부로서 생물학적 효과를 발휘할 수 있다 (즉, 여전히 링커를 통해 항체에 컨쥬게이션되면서).
절단 불가능한 링커-말레이미드 및 절단 불가능한 링커-석신이미드 화합물을 형성하는 시약은 당업계에 알려져 있고, 본원에서 사용하기 위해 개조될 수 있다. 예시적인 시약은 말레이미도 또는 할로아세틸-기반 모이어티, 예컨대, 6-말레이미도카프로산 N-하이드록시 석신이미드 에스테르 (MCC), N-석신이미딜 4-(말레이미도메틸)사이클로헥산카복실레이트 (SMCC), N-석신이미딜-4-(N-말레이미도메틸)-사이클로헥산-1-카복시-(6-아미도카프로에이트) (LC-SMCC), 말레이미도운데칸산 N-석신이미딜 에스테르 (KMUA), γ-말레이미도부티르산 N-석신이미딜 에스테르 (GMBS), c-말레이미도카프로산 N-하이드록시석신이미드 에스테르 (EMCS), m-말레이미도벤조일-N-하이드록시석신이미드 에스테르 (MBS), N-(α-말레이미도아세톡시)-석신이미드 에스테르 [AMAS], 석신이미딜-6-(β-말레이미도프로피온아미도)헥사노에이트 (SMPH), N-석신이미딜 4-(p-말레이미도페닐)-부티레이트 (SMPB), N-(p-말레이미도페닐)이소시아네이트 (PMPI), N-석신이미딜-4-(아이오도아세틸)-아미노벤조에이트 (STAB), N-석신이미딜 아이오도아세테이트 (SIA), N-석신이미딜 브로모아세테이트 (SBA) 및 N-석신이미딜 3-(브로모아세트아미도)프로피오네이트 (SBAP)를 포함한다. 본원에 기재된 ADC에서 사용하기 위한 추가적인 "A-M" 및 "A-M1" 기는 예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로 포함된, 미국 특허 번호 8,142,784에서 찾아볼 수 있다.
일부 실시양태에서, y는 1이고; Y는 이며, 여기서 은 화학식 (II)의 화합물에서의 W, A 또는 M에 대한 연결을 나타내고; *는 화학식 (II)의 화합물에서의 XA 또는 XB에 대한 연결을 나타낸다.
일부 실시양태에서, y는 1이고; Y는 이며, 여기서 은 본원에 기재된 ADC에서의 W, A, M 또는 M1에 대한 연결을 나타내고; *는 본원에 기재된 ADC에서의 XA 또는 XB에 대한 연결을 나타낸다.
일부 실시양태에서, -(A)a-(W)w-(Y)y-는 비-방출가능한 링커를 포함하며, 여기서 약물은 ADC가 표적 세포 내로 내재화되고 분해된 후에 방출되어, 약물을 해방시킨다.
일부 실시양태에서, 링커 (L)는 PEG2 내지 PEG20으로 이루어진 군으로부터 선택된 폴리에틸렌 글리콜 모이어티로 치환된다. 일부 실시양태에서, L은 PEG2, PEG4, PEG6, PEG8, PEG10, PEG12, PEG16 및 PEG20으로 이루어진 군으로부터 선택된 폴리에틸렌 글리콜 모이어티로 치환된다. 일부 실시양태에서, L은 PEG2 내지 PEG20으로 이루어진 군으로부터 선택된 폴리에틸렌 글리콜 모이어티로 치환되지 않는다.
다분산 PEG, 단분산 PEG 및 불연속 PEG는 ADC 및 이의 중간체를 제조하기 위해 사용될 수 있다. 다분산 PEG는 크기 및 분자량의 균질한 혼합물인 반면, 단분산 PEG는 전형적으로 균질한 혼합물로부터 정제되므로, 단일 쇄 길이 및 분자량을 제공한다. 불연속 PEG는 중합 공정을 통하지 않고 단계-별 방식으로 합성된다. 불연속 PEG는 정의되고 지정된 쇄 길이를 갖는 단일 분자를 제공한다. PEG 유닛의 -CH2CH2O- 서브유닛의 갯수는 예를 들어, 8 내지 24 개 또는 12 내지 24 개의 범위이며, 각각 PEG8 내지 PEG24 및 PEG12 내지 PEG24로서 지칭된다.
PEG 유닛으로서 또한 지칭되는 본원에 제공된 PEG 모이어티는 하나 또는 다중 폴리에틸렌 글리콜 쇄를 포함한다. 폴리에틸렌 글리콜 쇄는 예를 들어, 선형, 분지형 또는 성상 모양 입체배치로 함께 연결된다. 전형적으로, PEG 유닛의 폴리에틸렌 글리콜 쇄 중 하나 이상은 ADC의 구성요소 (예컨대, L) 상의 적절한 부위에 대한 공유 부착을 위해 하나의 단부에서 유도체화된다. ADC에 대한 예시적인 부착은 비-조건부 절단가능한 연결에 의한 것이거나 조건부 절단가능한 연결을 통한 것이다. 예시적인 부착은 아미드 연결, 에테르 연결, 에스테르 연결, 히드라존 연결, 옥심 연결, 디설파이드 연결, 펩티드 연결 또는 트리아졸 연결을 통한 것이다. 일부 실시양태에서, 화학식 (I) ADC에 대한 부착은 비-조건부 절단가능한 연결에 의한 것이다. 일부 실시양태에서, ADC에 대한 부착은 에스테르 연결, 히드라존 연결, 옥심 연결 또는 디설파이드 연결을 통하지 않는다. 일부 실시양태에서, ADC에 대한 부착은 히드라존 연결을 통하지 않는다.
조건부 절단가능한 연결은 혈장에서 순환하는 동안 절단에 실질적으로 민감하지 않지만 세포내 또는 종양내 환경에서 절단에 민감한 연결을 지칭한다. 비-조건부 절단가능한 연결은 ADC가 투여된 대상체에서 임의의 생물학적으로 관련된 환경에서 절단에 대해 실질적으로 민감하지 않은 것이다. WO 2007/011968 (이는 그 전체가 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은 히드라존의 화학적 가수분해, 디설파이드 결합의 환원, 및 글루쿠로나이드 유닛의 펩티드 결합 또는 글리코시드 결합의 효소적 절단은 조건부 절단가능한 연결의 예이다.
일부 실시양태에서, PEG 유닛은 L에서 ADC (또는 이의 중간체)에 직접 부착된다. 이러한 실시양태에서, PEG 유닛의 다른 말단 (또는 말단)은 자유롭고 속박되지 않고 (즉, 공유 부착되지 않음), 일부 실시양태에서는 메톡시, 카복실산, 알콜 또는 다른 적합한 기능기이다. 메톡시, 카복실산, 알콜 또는 기타 적합한 기능기는 PEG 유닛의 말단 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛에 대한 캡으로서 역할을 한다. 속박되지 않음이란, PEG 유닛이 해당 속박되지 않은 부위에서 약물 유닛, 항체 또는 약물 유닛 및/또는 항체에 대한 연결 구성요소에 공유 부착되지 않을 것임을 의미한다. 이러한 배열은 충분한 길이의 PEG 유닛이 컨쥬게이션된 형태의 약물, 즉, 약물 유닛 (D)과 관련하여 평행 배향을 취하도록 허용할 수 있다. PEG 유닛이 하나 초과의 폴리에틸렌 글리콜 쇄를 포함하는 실시양태의 경우, 다중 폴리에틸렌 글리콜 쇄는 독립적으로 선택되며, 예컨대, 동일하거나 상이한 화학적 모이어티 (예컨대, 상이한 분자량 또는 -CH2CH2O- 서브유닛의 갯수의 폴리에틸렌 글리콜 쇄)이다. 다중 폴리에틸렌 글리콜 쇄를 갖는 PEG 유닛은 단일 부착 부위에서 ADC에 부착된다. 당업자는 PEG 유닛이 반복되는 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛을 포함하는 것에 더하여 (예컨대, 서로에 대한 다중 폴리에틸렌 글리콜 쇄의 커플링을 용이하게 하거나 ADC에 대한 커플링을 용이하게 하기 위해) 비-PEG 물질을 또한 함유할 수 있음을 이해할 것이다. 비-PEG 물질은 반복되는 -CH2CH2O- 서브유닛의 일부가 아닌 PEG 유닛에서의 원자를 지칭한다. 본원에 제공된 일부 실시양태에서, PEG 유닛은 비-PEG 요소를 통해 서로 부착된 2 개의 단량체 폴리에틸렌 글리콜 쇄를 포함한다. 본원에 제공된 다른 실시양태에서, PEG 유닛은 ADC에 부착된 중심 코어에 부착된 2 개의 선형 폴리에틸렌 글리콜 쇄를 포함한다 (즉, PEG 유닛 자체가 분지형임).
당업자가 이용가능한 다수의 PEG 부착 방법이 있다: 예를 들어, Goodson, 등 (1990) Bio/Technology 8:343 (부위-지시된 돌연변이유발 후 이의 글리코실화 부위에서의 인터류킨-2의 PEG화); EP 0 401 384 (PEG를 G-CSF에 커플링함); Malik, 등, (1992) Exp. Hematol. 20:1028-1035 (트레실 클로라이드를 사용한 GM-CSF의 PEG화); ACT 공개공보 번호 WO 90/12874 (시스테인-특이적 mPEG 유도체를 사용하여 재조합적으로 도입된 시스테인 잔기를 함유하는 에리트로포이에틴의 PEG화); 미국 특허 번호 5,757,078 (EPO 펩티드의 PEG화); 미국 특허 번호 5,672,662 (프로피온산 또는 부탄산으로 단일치환된 폴리(에틸렌 글리콜) 및 관련 중합체 및 생명공학 응용을 위한 이의 기능적 유도체); 미국 특허 번호 6,077,939 (펩티드의 N-말단 α-탄소의 PEG화); Veronese 등, (1985) Appl. Biochem. Bioechnol 11:141-142 (PEG-니트로페닐카보네이트("PEG-NPC") 또는 PEG-트리클로로페닐카보네이트로 펩티드를 이용한 N-말단 α-탄소의 PEG화); 및 Veronese (2001) Biomaterials 22:405-417 (펩티드 및 단백질 PEG화에 대한 검토 기사).
예를 들어, PEG 유닛은 폴리에틸렌 글리콜-함유 화합물 및 아미노산 잔기의 반응성 기를 통해 아미노산 잔기에 공유 결합될 수 있다. 아미노산 잔기의 반응성 기는 활성화된 PEG 분자 (예컨대, 유리 아미노 또는 카복실 기)에 반응성인 기를 포함한다. 예를 들어, N-말단 아미노산 잔기 및 리신 (K) 잔기는 유리 아미노 기를 갖고; C-말단 아미노산 잔기는 유리 카복실 기를 갖는다. 티올 기 (예컨대, 시스테인 잔기에서 발견된 바와 같음)은 또한 PEG에 대한 공유 부착을 형성하기 위한 반응성 기로서 유용하다. 게다가, 폴리펩티드의 C-말단에서 특이적으로 활성화된 기 (예컨대, 히드라지드, 알데히드 및 방향족-아미노 기)를 도입하기 위한 효소-보조된 방법이 설명되었다. Schwarz, 등 (1990) Methods Enzymol. 184:160; Rose, 등 (1991) Bioconjugate Chem. 2:154; 및 Gaertner, 등 (1994) J. Biol. Chem. 269: 7224 참고.
일부 실시양태에서, 폴리에틸렌 글리콜-함유 화합물은 상이한 반응성 모이어티를 갖는 메톡실화된 PEG ("mPEG")를 사용하여 아미노 기에 대한 공유 부착을 형성한다. 이러한 반응성 모이어티의 비-제한적인 예는 석신이미딜 석시네이트 (SS), 석신이미딜 카보네이트 (SC), mPEG-이미데이트, 파라-니트로페닐카보네이트 (NPC), 석신이미딜 프로피오네이트 (SPA) 및 시아누르 클로라이드를 포함한다. 이러한 mPEG의 비-제한적인 예는 mPEG-석신이미딜 석시네이트 (mPEG-SS), mPEG2-석신이미딜 석시네이트 (mPEG2-SS); mPEG-석신이미딜 카보네이트 (mPEG-SC), mPEG2-석신이미딜 카보네이트 (mPEG2-SC); mPEG-이미데이트, mPEG-파라-니트로페닐카보네이트 (mPEG-NPC), mPEG-이미데이트; mPEG2-파라-니트로페닐카보네이트 (mPEG2-NPC); mPEG-석신이미딜 프로피오네이트 (mPEG-SPA); mPEG2-석신이미딜 프로피오네이트 (mPEG--SPA); mPEG-N-하이드록시-석신이미드 (mPEG-NHS); mPEG2-N-하이드록시-석신이미드 (mPEG2--NHS); mPEG-시아누르 클로라이드; mPEG2-시아누르 클로라이드; mPEG2-리시놀-NPC 및 mPEG2-Lys-NHS를 포함한다.
일반적으로, PEG를 구성하는 폴리에틸렌 글리콜 쇄 중 하나 이상은 기능화되어, ADC에 대한 공유 부착을 제공한다. PEG에 대한 전구체인 폴리에틸렌 글리콜-함유 화합물의 기능화는 예를 들어, 아민, 티올, NHS 에스테르, 말레이미드, 알킨, 아지드, 카보닐 또는 기타 기능기를 통한 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, PEG는 ADC에 대한 커플링을 제공하거나 폴리에틸렌 글리콜-함유 화합물을 작제하는데 있어서 비-PEG 물질 (즉, -CH2CH2O-를 포함하지 않는 물질)을 추가로 포함하거나, PEG는 2 개 이상의 폴리에틸렌 글리콜 쇄의 커플링을 용이하게 한다.
일부 실시양태에서, ADC에서 PEG 유닛의 존재는 생성된 ADC의 약동학에 2 개의 잠재적인 영향을 미칠 수 있다. 한 가지 영향은 약물 유닛의 노출된 소수성 요소에 의해 유도된 비-특이적 상호작용의 감소로 인해 발생하는 청소율의 감소 (및 그 결과 노출의 증가)이다. 두 번째 영향은 때때로 ADC의 분자량의 증가로 인해 발생하는 부피 및 분포 속도의 감소이다. 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛의 갯수를 증가시키면 컨쥬게이트의 유체역학적 반경이 증가하여, 전형적으로 감소된 확산성을 초래한다. 결과적으로, 감소된 확산성은 전형적으로 ADC가 종양에 침투하는 능력을 저하시킨다. Schmidt and Wittrup, Mol Cancer Ther 2009; 8:2861-2871 참고. 이러한 2 개의 경쟁 약동학적 효과로 인해, ADC 청소율을 감소시켜 혈장 노출을 증가시키기에 충분히 큰 PEG 유닛을 사용하는 것이 바람직할 수 있지만, ADC가 의도된 표적 세포 집단에 도달하는 능력을 방해할 정도로 이의 확산성을 크게 저하시키킬 정도로 크지는 않다. 예컨대, (예컨대, 특정 약물 유닛, 링커 및/또는 약물-링커 화합물에 대한 PEG 유닛의 최적 크기를 선택하기 위한 방법론에 대해) 본원에 참조로 포함되는, US 2016/0310612의 실시예 1, 18 및 21 참고.
실시양태의 하나의 그룹에서, PEG 유닛은 각각이 8 개의 서브유닛, 9 개 이상의 서브유닛, 10 개 이상의 서브유닛, 11 개 이상의 서브유닛, 12 개 이상의 서브유닛, 13 개 이상의 서브유닛, 14 개 이상의 서브유닛, 15 개 이상의 서브유닛, 16 개 이상의 서브유닛, 17 개 이상의 서브유닛, 18 개 이상의 서브유닛, 19 개 이상의 서브유닛, 20 개 이상의 서브유닛, 21 개 이상의 서브유닛, 22 개 이상의 서브유닛, 23 개 이상의 서브유닛, 또는 24 개 이상의 서브유닛을 갖는 하나 이상의 선형 폴리에틸렌 글리콜 쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, PEG는 조합된 총 8 개 이상의 서브유닛, 10 개 이상의 서브유닛, 또는 12 개 이상의 서브유닛을 포함한다. 이러한 일부 실시양태에서, PEG는 조합된 총 약 72 개 이하의 서브유닛을 포함한다. 이러한 일부 실시양태에서, PEG는 조합된 총 약 36 개 이하의 서브유닛을 포함한다. 일부 실시양태에서, PEG는 약 8 내지 약 24 개의 서브유닛 (PEG8 내지 PEG24로서 지칭됨)을 포함한다.
실시양태의 다른 그룹에서, PEG 유닛은 조합된 총 8 내지 72, 8 내지 60, 8 내지 48, 8 내지 36 또는 8 내지 24 개의 서브유닛, 9 내지 72, 9 내지 60, 9 내지 48, 9 내지 36 또는 9 내지 24 개의 서브유닛, 10 내지 72, 10 내지 60, 10 내지 48, 10 내지 36 또는 10 내지 24 개의 서브유닛, 11 내지 72, 11 내지 60, 11 내지 48, 11 내지 36 또는 11 내지 24 개의 서브유닛, 12 내지 72, 12 내지 60, 12 내지 48, 12 내지 36 또는 12 내지 24 개의 서브유닛, 13 내지 72, 13 내지 60, 13 내지 48, 13 내지 36 또는 13 내지 24 개의 서브유닛, 14 내지 72, 14 내지 60, 14 내지 48, 14 내지 36 또는 14 내지 24 개의 서브유닛, 15 내지 72, 15 내지 60, 15 내지 48, 15 내지 36 또는 15 내지 24 개의 서브유닛, 16 내지 72, 16 내지 60, 16 내지 48, 16 내지 36 또는 16 내지 24 개의 서브유닛, 17 내지 72, 17 내지 60, 17 내지 48, 17 내지 36 또는 17 내지 24 개의 서브유닛, 18 내지 72, 18 내지 60, 18 내지 48, 18 내지 36 또는 18 내지 24 개의 서브유닛, 19 내지 72, 19 내지 60, 19 내지 48, 19 내지 36 또는 19 내지 24 개의 서브유닛, 20 내지 72, 20 내지 60, 20 내지 48, 20 내지 36 또는 20 내지 24 개의 서브유닛, 21 내지 72, 21 내지 60, 21 내지 48, 21 내지 36 또는 21 내지 24 개의 서브유닛, 22 내지 72, 22 내지 60, 22 내지 48, 22 내지 36 또는 22 내지 24 개의 서브유닛, 23 내지 72, 23 내지 60, 23 내지 48, 23 내지 36 또는 23 내지 24 개의 서브유닛, 또는 24 내지 72, 24 내지 60, 24 내지 48, 24 내지 36 또는 24 개의 서브유닛을 포함한다.
본원에 제공된 실시양태 중 임의의 것에 사용될 수 있는 예시적인 선형 PEG는 다음과 같다:
여기서 물결선은 ADC에 대한 부착의 부위를 나타내고, 각각의 아래첨자 b는 7 내지 72, 8 내지 72, 10 내지 72, 12 내지 72, 6 내지 24, 또는 8 내지 24로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택됨. 일부 실시양태에서, 각각의 아래첨자 b는 약 8, 약 12, 또는 약 24이다.
본원에 기재된 바와 같이, PEG 유닛은 생성된 ADC의 청소율을 개선하지만 ADC가 종양 내로 침투하는 능력에 유의한 영향을 미치지 않도록 선택될 수 있다.
일부 실시양태에서, PEG는 약 300 달톤 내지 약 5 킬로달톤; 약 300 달톤 내지 약 4 킬로달톤; 약 300 달톤 내지 약 3 킬로달톤; 약 300 달톤 내지 약 2 킬로달톤; 약 300 달톤 내지 약 1 킬로달톤; 또는 그 사이의 임의의 값이다. 일부 실시양태에서, PEG는 8, 10 또는 12 개 이상의 서브유닛을 갖는다. 일부 실시양태에서, PEG 유닛은 PEG8 내지 PEG72, 예를 들어, PEG8, PEG10, PEG12, PEG16, PEG20, PEG24, PEG28, PEG32, PEG36, PEG48 또는 PEG72이다.
일부 실시양태에서, ADC의 PEG화와는 별개로, ADC에 존재하는 다른 PEG 서브유닛이 존재하지 않는다 (즉, PEG 서브유닛이 본원에 제공된 컨쥬게이트 및 링커의 다른 구성요소 중 임의의 것, 예컨대, A 및 XB의 일부로서 존재하지 않음). 일부 실시양태에서, PEG와는 별개로, ADC에 존재하는 8 개 이하, 7 개 이하, 6 개 이하, 5 개 이하, 4 개 이하, 3 개 이하, 2 개 이하 또는 1 개 이하의 다른 폴리에틸렌 글리콜 (-CH2CH2O-) 서브유닛 또는 이의 중간체가 존재한다 (즉, ADC의 다른 구성요소에서 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1 개 이하의 다른 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛 (또는 이의 중간체)가 본원에 제공됨).
PEG 유닛의 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛을 지칭할 때 그리고 문맥에 따라, 서브유닛의 갯수는 예컨대, ADC 또는 이에 대한 중간체의 집단을 지칭할 때 및/또는 다분산 PEG를 사용할 때, 평균 갯수를 나타낼 수 있음을 인식할 것이다.
사용 방법
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 컨쥬게이션된 약물을 표적 세포에 전달하기 위해 사용된다. 이론에 얽매이지 않고, 일부 실시양태에서, ADC는 표적 세포의 표면 상의 항원과 회합한다. 그런 다음, 약물 유닛은 이의 생물학적 효과 (예컨대, 면역자극 효과)를 유도하기 위해 유리 약물로서 방출될 수 있다. 약물 유닛은 또한 항체 또는 항체 및/또는 링커의 일부에 부착된 상태를 유지하고, 이의 생물학적 효과를 유도할 수 있다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 항종양 면역 반응의 유도를 필요로 하는 대상체에서 항종양 면역 반응을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태는 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 항종양 면역 반응의 유도를 필요로 하는 대상체에서 항종양 면역 반응을 유도하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태는 다른 항암 요법 (예컨대, 수술 및 방사선 요법) 및/또는 항암제 (예컨대, 면역요법, 예컨대, 니볼루맙 또는 펨브롤리주맙)와 조합하여 대상체에 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공한다. 본원에 기재된 ADC는 대상체에 항암 요법 및/또는 항암제를 투여하기 전, 동안 또는 후에 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 ADC는 방사선을 이용한 치료 후 및/또는 수술 후 대상체에 투여될 수 있다.
일부 실시양태는 항암제에 대한 후천적 저항성이 발달하거나 이를 가질 위험이 있는 환자에 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 항암제에 대한 후천적 저항성을 지연시키거나 예방하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 환자에 항암제의 용량이 투여된다 (예컨대, 본원에 기재된 바와 같은 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용량과 실질적으로 동시에 환자에 투여됨).
일부 실시양태는 치료적 유효량의 항암제의 투여 전, 동안 또는 후에, 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 대상체에 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 항암제에 저항성인 암의 발달을 지연 및/또는 예방하는 방법을 제공한다.
본원에 기재된 ADC는 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 세포의 증식을 억제하고/하거나, 암 세포에서 아폽토시스를 유발하고/하거나, 암 세포의 식세포작용을 증가시키고/시키거나, 암을 치료하는데 유용하다. 따라서, ADC는 암의 치료를 위한 다양한 환경에서 사용될 수 있다. ADC는 암 세포에 약물을 전달하기 위해 사용될 수 있다. 이론에 얽매이지 않고, 일부 실시양태에서, ADC의 항체는 암-세포-회합된 항원에 결합하거나 이와 회합한다. 항원은 암 세포에 부착될 수 있거나, 암 세포와 회합된 세포외 기질 단백질일 수 있다. 약물은 암 세포에 근접하여 방출될 수 있으므로, 면역 세포를 동원/활성화하여, 암 세포를 공격한다. 일부 실시양태에서, 약물 유닛은 암 세포 외부의 ADC로부터 절단된다. 일부 실시양태에서, 약물 유닛은 항원에 결합된 항체에 부착된 채로 남아 있다.
일부 실시양태에서, 항체는 암 세포에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 암 세포의 표면 상에 있는 암 세포 항원에 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 종양 세포 또는 암 세포와 회합된 세포외 기질 단백질인 암 세포 항원에 결합한다. 일부 실시양태에서, ADC의 항체는 암-회합된 세포 또는 암-회합된 세포 상의 항원에 결합하거나 이와 회합한다. 일부 실시양태에서, 암-회합된 세포는 종양 내의 간질 세포, 예를 들어, 암-회합된 섬유아세포 (CAF)이다.
일부 실시양태에서, ADC의 항체는 면역 세포 또는 면역-세포-회합된 항원에 결합하거나 이와 회합한다. 항원은 면역 세포에 부착될 수 있거나, 면역 세포와 회합된 세포외 기질 단백질일 수 있다. 약물은 면역 세포에 근접하여 방출될 수 있으므로, 면역 세포를 동원/활성화하여, 암 세포를 공격한다. 일부 실시양태에서, 약물 유닛은 면역 세포 외부의 ADC로부터 절단된다. 일부 실시양태에서, 약물 유닛은 항원에 결합된 항체에 부착된 채로 남아 있다. 일부 실시양태에서, 면역 세포는 림프구, 항원-제시 세포, 자연 살해 (NK) 세포, 호중구, 호산구, 호염구, 비만 세포, 선천성 림프성 세포 또는 전술한 것들 중 임의의 것의 조합이다. 일부 실시양태에서, 면역 세포는 B 세포, 형질 세포, T 세포, NKT 세포, 감마 델타 T (γδT) 세포, 단핵구, 대식세포, 수지상 세포, 자연 살해 (NK) 세포, 호중구, 호산구, 호염구, 비만 세포, 선천성 림프성 세포 및 전술한 것들 중 임의의 것의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
특정 암 세포에 대한 항체의 특이성은 가장 효과적으로 치료되는 종양 또는 암을 결정하는 데 중요할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서 혈액학적 암 세포 상에 존재하는 암 세포 항원을 표적화하는 ADC는 혈액학적 악성종양을 치료한다. 일부 실시양태에서, ADC는 이러한 고형 종양을 치료하기 위해 고형 종양의 비정상 세포 상에 존재하는 암 세포 항원을 표적화한다. 일부 실시양태에서, ADC는 예를 들어, 림프종 (호지킨 림프종 및 비-호지킨 림프종) 및 백혈병과 같은 혈액학적 암의 비정상 세포에 대해 지시된다.
비제한적으로 종양, 전이, 또는 일부 실시양태에서 제어되지 않는 세포 성장을 특징으로 하는 비정상 세포를 특징으로 하는 다른 질환 또는 장애를 포함하는 암은 ADC의 투여에 의해 치료되거나 억제된다.
일부 실시양태에서, 대상체는 이전에 암에 대해 치료를 받은 적이 있다. 일부 실시양태에서, 이전 치료는 수술, 방사선 요법, 하나 이상의 항암제의 투여, 또는 전술한 것들 중 임의의 것의 조합이다.
본원에 기재된 방법 중 임의의 것에서, 암은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다: 선암종, 부신 피질 암종, 부신 신경아세포종, 항문 편평 세포 암종, 맹장 선암종, 방광 요로상피세포 암종, 담관 선암종, 방광 암종, 방광 요로상피세포 암종, 골삭종, 만성 림프구성 골수 백혈병, 비-림프구성 급성 골수성 골수 백혈병, 골수 림프 증식성 질환, 골수 다발성 골수종, 골 육종, 뇌 성상세포종, 뇌 교모세포종, 뇌 수모세포종, 뇌 수막종, 뇌 핍지교종, 유방 선양 낭성 암종, 유방 암종, 유관 상피내암종, 유방 침윤성 관 암종, 유방 침윤성 소엽 암종, 유방 전이성 암종, 자궁경부 신경내분비 암종, 자궁경부 편평 세포 암종, 결장 선암종, 결장 카르시노이드 종양, 십이지장 선암종, 자궁내막양 종양, 식도 선암종, 식도 및 위 암종, 안구 안내 흑색종, 안구 안내 편평 세포 암종, 안구 누관 암종, 나팔관 장액성 암종, 담낭 선암종, 담낭 사구 종양, 위식도 접합부 선암종, 두경부 선양 낭성 암종, 두경부 암종, 두경부 신경아세포종, 두경부 편평 세포 암종, 콩팥 발색단 암종, 콩팥 수질 암종, 콩팥 신장 세포 암종, 콩팥 신장 유두상 암종, 콩팥 육종양 암종, 콩팥 요로상피세포 암종, 콩팥 암종, 림프구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 간 담관암종, 간세포 암종, 간 암종, 폐 선암종, 폐 선편평 암종, 폐 비정형 암종, 폐 암육종, 폐 대세포 신경내분비 암종, 폐 비-소세포 폐 암종, 폐 육종, 폐 육종양 암종, 폐 소세포 암종, 폐 소세포 미분화 암종, 폐 편평 세포 암종, 상부 호흡소화관 편평 세포 암종, 상부 호흡소화관 암종, 림프절 림프종 미만성 거대 B 세포, 림프절 림프종 여포성 림프종, 림프절 림프종 종격동 B-세포, 림프절 림프종 형질아세포 폐 선암종, 림프종 여포성 림프종, 림프종, 비-호지킨, 비인두 및 부비동 미분화 암종, 난소 암종, 난소 암육종, 난소 투명 세포 암종, 난소 상피 암종, 난소 과립막 세포 종양, 난소 장액 암종, 췌장 암종, 췌장관 선암종, 췌장 신경내분비 암종, 복막 중피종, 복막 장액 암종, 태반 융모막암종, 흉막 중피종, 전립선 선방 선암종, 전립선 암종, 직장 선암종, 직장 편평 세포 암종, 피부 부속기 암종, 피부 기저 세포 암종, 피부 흑색종, 피부 메르켈 세포 암종, 피부 편평 세포 암종, 소장 선암종, 소장 위장관 간질 종양 (GIST), 대장/결장 암종, 대장 선암종, 연조직 혈관육종, 연조직 유잉 육종, 연조직 혈관내피종, 연조직 염증성 근섬유아세포 종양, 연조직 평활근육종, 연조직 지방육종, 연조직 신경아세포종, 연조직 부신경절종, 연조직 혈관주위 상피 세포 종양, 연조직 육종, 연조직 활막 육종, 위 선암종, 확산-형 위 선암종, 장형 위 선암종, 장형 위 선암종, 위 평활근육종, 흉선 암종, 흉선 림프구성 흉선종, 갑상선 유두 암종, 미지의 원발성 선암종, 미지의 원발성 암종, 미지의 원발성 악성 신생물, 림프성 신생물, 미지의 원발성 흑색종, 미지의 원발성 육종양 암종, 미지의 원발성 편평 세포 암종, 미지의 미분화 신경내분비 암종, 미지의 원발성 미분화 소세포 암종, 자궁 암육종, 자궁 내막 선암종, 자궁내막양 자궁 내막 선암종, 유두 장액성 자궁 자궁내막 선암종 및 자궁 평활근육종.
일부 실시양태에서, 대상체에 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염과 함께 하나 이상의 추가적인 항암제를 병행하여 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염과 함께 방사선 요법을 병행하여 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여 후 하나 이상의 추가적인 항암제를 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에 본원에 기재된 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여 후 방사선 요법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 예를 들어, 하용가능하지 않은 또는 견딜 수 없는 부작용으로 인해 이전 요법을 중단하였으며, 여기서 이전 요법은 너무 독성이 있거나, 대상체는 이전 요법에 대한 저항성이 발달하였다.
일부 실시양태는 질환 또는 장애가 발달할 위험이 있는 환자에 치료적 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 및 질환 또는 장애에 대한 백신을 투여하는 단계를 포함하는, 질환 또는 장애를 지연시키거나 예방하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 본원에 기재된 바와 같은 암이다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 바이러스성 병원체이다. 일부 실시양태에서, 백신은 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 백신은 근육내로 투여된다. 일부 실시양태에서, ADC 및 백신은 동일한 경로를 통해 투여된다 (예를 들어, ADC 및 백신은 둘 모두 피하 투여됨). 일부 실시양태에서, ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 백신은 상이한 경로를 통해 투여된다. 일부 실시양태에서, 백신 및 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 단일 제형으로 제공된다. 일부 실시양태에서, 백신 및 ADC 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 별도의 제형으로 제공된다.
조성물 및 투여의 방법
일부 실시양태는 본원에 기재된 바와 같은 ADC의 분포를 포함하는 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 ADC의 분포 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 투여의 경로는 비경구이다. 비경구 투여는 피하 주사, 정맥내, 근육내, 흉골내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 비경구로 투여된다. 이러한 실시양태 중 하나에서, ADC는 정맥내로 투여된다. 투여는 전형적으로 임의의 편리한 경로, 예를 들어, 주입 또는 볼루스 주사를 통해 이루어진다.
ADC의 조성물은 대상체에 대한 조성물의 투여시, ADC가 생체이용가능하도록 제형화된다. 조성물은 하나 이상의 주사가능한 투여량 유닛의 형태일 수 있다.
조성물을 제조하는데 사용된 물질은 사용되는 양에서 무독성일 수 있다. 조성물 중 활성 성분(들)의 최적 투여량은 다양한 인자에 따라 좌우될 것이라는 것이 당업자에게 명백할 것이다. 관련 인자는 제한 없이, 동물의 유형 (예컨대, 인간), 화합물의 특정 형태, 투여의 방식 및 사용된 조성물을 포함한다.
일부 실시양태에서, ADC 조성물은 투여 전에 액체로 재구성하기에 적합한 동결건조된 분말과 같은 고체이다. 일부 실시양태에서, ADC 조성물은 용액 또는 현탁액과 같은 액체 조성물이다. 액체 조성물 또는 현탁액은 주사에 의한 전달에 유용하고, 동결건조된 고체는 주사에 적합한 희석제를 사용하여 액체 또는 현탁액으로서 재구성하기에 적합하다. 주사에 의해 투여되는 조성물에는, 계면활성제, 보존제, 습윤제, 분산제, 현탁화제, 완충액, 안정화제 및 등장화제 중 하나 이상이 전형적으로 포함된다.
일부 실시양태에서, 액체 조성물은 용액, 현탁액 또는 기타 유사한 형태이든 간에, 다음 중 하나 이상을 또한 포함할 수 있다: 멸균 희석제, 예컨대, 주사용수, 식염수, 생리식염수, 링거액, 등장성 소듐 크로라이드, 고정 오일, 예컨대, 용매 또는 현탁 매질로서 작용할 수 있는 합성 모노 또는 디글리세리드, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 사이클로덱스트린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 용매; 항박테리아제, 예컨대, 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대, 아스코르브산 또는 소듐 바이설파이트; 킬레이팅제, 예컨대, 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충액, 예컨대, 아미노산, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트; 세제, 예컨대, 비이온성 계면활성제, 폴리올; 및 장성의 조정을 위한 약제, 예컨대, 소듐 클로라이드 또는 덱스트로스. 비경구 조성물은 전형적으로 앰플, 일회용 주사기, 또는 유리, 플라스틱 또는 기타 물질로 만들어진 다중-용량 바이알에 봉입된다. 일부 실시양태에서, 멸균 희석제는 생리식염수를 포함한다. 일부 실시양태에서, 멸균 희석제는 생리식염수이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 멸균된 액체 주사용 조성물이다.
특정 장애 또는 병태의 치료에 효과적인 ADC의 양은 일반적으로 표준 임상 기술에 의해 결정되는 장애 또는 병태의 성질에 따라 좌우될 것이다. 게다가, 최적의 투여량 범위를 식별하는 데 도움이 되도록 생체외 또는 생체내 검정이 때때로 사용된다. 조성물에 사용될 정확한 용량은 또한 비경구 투여의 경로, 및 질환 또는 장애의 중증도에 따라 좌우될 것이며, 개업의의 판단 및 각각의 대상체의 상황에 따라 결정되어야 한다.
일부 실시양태에서, 조성물은 적합한 투여량이 수득되도록 유효량의 ADC를 포함한다. 전형적으로, 이 양은 조성물 중량을 기준으로 ADC의 약 0.01% 이상이다.
일부 실시양태에서, 대상체에 투여되는 ADC의 조성물 투여량은 약 0.01 mg/kg 내지 약 100 mg/kg, kg당 약 1 내지 약 100 mg, 또는 약 0.1 내지 약 25 mg/kg 대상체 체중이다. 일부 실시양태에서, 대상체에 투여되는 투여량은 약 0.01 mg/kg 내지 약 15 mg/kg 대상체 체중이다. 일부 실시양태에서, 대상체에 투여되는 투여량은 약 0.1 mg/kg 내지 약 15 mg/kg 대상체 체중이다. 일부 실시양태에서, 대상체에 투여되는 투여량은 약 0.1 mg/kg 내지 약 20 mg/kg 대상체 체중이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 투여량은 약 0.1 mg/kg 내지 약 5 mg/kg 또는 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg 대상체 체중이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 투여량은 약 1 mg/kg 내지 약 15 mg/kg 대상체 체중이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 투여량은 약 1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg 대상체 체중이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 투여량은 치료 주기에 걸쳐 약 0.1 내지 약 4 mg/kg, 약 0.1 내지 약 3.2 mg/kg, 또는 약 0.1 내지 약 2.7 mg/kg 대상체 체중이다.
용어 "담체"는 화합물과 함께 투여되는 희석제, 아쥬반트 또는 부형제를 지칭한다. 이러한 약학 담체는 액체이다. 화합물이 정맥내로 투여되는 경우 물은 예시적인 담체이다. 염수 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액은 또한 주사가능한 용액용 액체 담체로서 유용하다. 적합한 약학 담체는 또한 글리세롤, 프로필렌, 글리콜 또는 에탄올을 포함한다. 본 발명의 조성물은, 원한다면, 일부 실시양태에서 또한 소량의 습윤제 또는 유화제, 및/또는 pH 완충제를 함유할 것이다.
일부 실시양태에서, ADC는 일상적인 절차에 따라 동물, 특히 인간에 대한 정맥내 투여에 적합한 조성물로서 제형화된다. 전형적으로, 정맥내 투여용 담체 또는 비히클은 멸균 등장성 완충액이다. 일부 실시양태에서, 조성물은 주사의 부위에서 통증을 덜기 위해 국소 마취제, 예컨대, 리그노카인를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, ADC 및 제형의 나머지는 개별적으로 또는 예를 들어, 활성제의 양을 나타내는 앰플 또는 향낭과 같은 밀폐 용기 중의 건조 동결건조된 분말 또는 무수 농축액과 같은 유닛 투여량 형태로 함께 혼합되어 공급된다. ADC가 주입에 의해 투여되는 경우, 이는 때때로 예를 들어, 멸균 약학 등급의 물 또는 식염수를 함유하는 주입 병과 함께 분배된다. ADC가 주사로 투여되는 경우, 투여 전에 성분이 혼합될 수 있도록 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰플이 전형적으로 제공된다.
조성물은 일반적으로 멸균되고 실질적으로 등장성이며 미국 식품의약국의 모든 우수 제조 관행 (GMP) 규정을 완전히 준수하여 제형화된다.
실시예
일반 방법:
상업적으로 이용가능한 모든 무수 용매를 추가 정제 없이 사용하였다. 별도로 언급되지 않는 한 모든 상업적으로 이용가능한 시약을 추가 정제 없이 사용하였다. 분석적 박층 크로마토그래피 (TLC)를 실리카겔 60 F254 알루미늄 시트 또는 유리 플레이트 (EMD Chemicals, Gibbstown, NJ)에서 수행하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피를 Biotage Isolera One™ 플래시 정제 시스템 20 또는 Biotage Selekt™ 플래시 정제 시스템 (Charlotte, NC)에서 수행하였다. UPLC-MS 분석을 4 개의 시스템 중 하나에서 수행하였다. UPLC-MS 시스템 1: Waters Acquity UPLC BEH C18 2.1 x 50 mm, 1.7 μm, 역-상 컬럼이 장착된 Waters Acquity UPLC 시스템에 인터페이스된 Waters 단일 쿼드 검출기 질량 분석기. UPLC-MS 시스템 2: C8 Phenomenex Synergi 2.0 x 150 mm, 4 μm, 80 Å 역-상 컬럼과 Waters 2996 Photodiode 어레이 검출기가 장착된 Waters Acquity H-class Ultra Performance LC에 인터페이스된 Waters Xevo G2 TOF 질량 분석기. UPLC-MS 시스템 3 (C18): 다이오드 어레이 검출기 (DAD) 및 40℃에서 유지되는 Luna-C18 2.0x30 mm, 3 μm 입자 크기 역-상 컬럼 또는 40℃에서 유지되는 Kinetex-C18 2.1x30 mm, 5 μm 역-상 컬럼이 장착된 양성 ESI 질량 분석기와 인터페이스된 Shimadzu LC-20 AD & MS 2020. UPLC-MS 시스템 4 (C18): 다이오드 어레이 검출기 (DAD) 및 40℃에서 유지되는 Kinetex-C18 2.1x50 mm, 5 μm 역-상 컬럼이 장착된 Agilent 6110B 양성 ESI 사중극자 질량 분석기와 인터페이스된 Agilent 1200 시리즈 LC 시스템.
본원에 기재된 바와 같이 방법 A-E 중 하나를 사용하여 화합물을 용리하였다.
방법 A - 1.0 분에 걸쳐 물 (1 mL/분) 중 5-95% 아세토니트릴의 선형 구배에 이어서, 1.80 분 (1.0 mL/분)까지 95% 아세토니트릴의 등용매 흐름 및 2.20 분 (1.2 mL/분)까지 5% 아세토니트릴로 다시 컬럼 평형화. 물은 0.037% TFA (v/v)를 함유하고, 아세토니트릴은 0.018% TFA (v/v)를 함유하였다. 사용된 컬럼은 Phenomenex Luna C18 2.0x30 mm, 3 μm 역-상 컬럼이었다.
방법 B - 1.0 분에 걸쳐 물 (1 mL/분) 중 5-95% 아세토니트릴의 선형 구배에 이어서, 1.80 분 (1.0 mL/분)까지 95% 아세토니트릴의 등용매 흐름 및 2.20 분 (1.2 mL/분)까지 5% 아세토니트릴로 다시 컬럼 평형화. 물은 0.05% TFA (v/v)를 함유하고, 아세토니트릴은 0.05% TFA (v/v)를 함유하였다. 사용된 컬럼은 Phenomenex Kinetex C18 2.1x30 mm, 5 μm 역-상 컬럼이었다.
방법 C - 0.4 분 동안 물 중 5% 아세토니트릴의 등용매 흐름에 이어서, 3.0 분까지 물 중 5-95% 아세토니트릴의 선형 구배에 이어서, 4.0 분까지 95% 아세토니트릴의 등용매 흐름 및 4.5 분까지 5% 아세토니트릴로 다시 컬럼 평형화. 유속은 1.0 mL/분이었고, 물은 0.05% TFA (v/v)를 함유하고, 아세토니트릴은 0.05% TFA (v/v)를 함유하였다. 사용된 컬럼은 Phenomenex Kinetex C18 2.1x30 mm, 5 μm 역-상 컬럼이었다.
방법 D - 1.7 분에 걸쳐 3-60% 아세토니트릴의 선형 구배, 이어서 2.0 분까지 60-95% 아세토니트릴에 이어서, 2.5 분까지 95% 아세토니트릴의 등용매 흐름에 이어서, 3% 아세토니트릴로 다시 컬럼 평형화. 유속은 0.6 mL/분이었고, 물은 0.1% (v/v) 포름산을 함유하고, 아세토니트릴은 0.1% (v/v) 포름산을 함유하였다. 사용된 컬럼은 Waters Acquity UPLC BEH C18 2.1 x 50 mm, 1.7 μm, 역-상 컬럼 또는 C8 Phenomenex Synergi 2.0 x 150 mm, 4 μm, 역-상 컬럼이었다.
방법 E - 1.5 분에 걸친 3-95% 아세토니트릴의 선형 구배에 이어서, 2.4 분까지 95% 아세토니트릴의 등용매 용리에 이어서, 3% 아세토니트릴로 다시 평형화. 유속은 0.6 mL/분이었고, 물은 0.1% (v/v) 포름산을 함유하고, 아세토니트릴은 0.1% (v/v) 포름산을 함유하였다. 사용된 컬럼은 Waters Acquity UPLC BEH C18 2.1 x 50 mm, 1.7 μm, 역-상 컬럼 또는 C8 Phenomenex Synergi 2.0 x 150 mm, 4 μm, 역-상 컬럼이었다.
달리 명시되지 않는 한, 분취용 HPLC (PrepHPLC)를 본원에 나열된 절차를 사용하여 2 개의 기기 중 하나에서 수행하였다: (방법 F) 80 mL/분의 유속에서 0.09% (v/v) TFA를 포함하는 물/아세토니트릴 이동상을 사용하여 Phenomenex Luna C-18 250x50 mm, 10 μm를 이용하는 Shimadzu LC-8a 분취용 HPLC, 또는 3 개의 Phenomemex 분취용 HPLC 컬럼 중 하나가 장착된 Teledyne ISCO ACCQPrep HP150에서 : (i) (방법 G) 10 x 250 mm Synergi C12, 4 μm, Max-RP 80 Å LC 컬럼, (ii) (방법 H) 21.2 x 250 mm Synergi C12, 4 μm, Max-RP 80 Å LC 컬럼 또는 (iii) (방법 I) 첨가제로서 0.05% (v/v) 트리플루오로아세트산 또는 0.1% (v/v) 포름산을 함유하는 아세토니트릴/물 이동상을 사용하는 30 x 250 mm Synergi C12, 4 μm, Max-RP 80 Å LC 컬럼.
NMR 스펙트럼을 다음의 3 개의 기기 중 하나에서 기록하였다: Bruker Avance III HD (400 MHz), Varian 400-MR (400 MHz) 또는 Bruker Avance NEO (400 MHz).
실시예 1:
STING 작용제 및 링커에 대한 합성 절차
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-하이드록시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 1)의 합성
4-클로로-3-메톡시-5-니트로벤즈아미드 (화합물 2a)의 합성
화합물 1a (메틸 4-클로로-3-메톡시-5-니트로벤조에이트, 18 g, 73 mmol, 1 당량)를 NH4OH 수용액 (300 mL, H2O 중 28% NH3) 내로 25℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 16 시간 동안 교반하였고, 그 시간 동안 침전물이 형성되었다. 침전물을 여과로 수집하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜, 2a (13 그램, 56 mmols, 77% 수율)를 황색 고체로서 제공하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. UPLC-MS (방법 A, ESI+): m/z (M+H)+ 231.0 (이론치); 231.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.93 분. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ = 8.29 (br s, 1H), 8.05 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.79 (br s, 1H), 4.02 (s, 3H).
tert-부틸 (E)-(4-((4-카바모일-2-메톡시-6-니트로페닐)아미노)부트-2-엔-1-일)카바메이트 (화합물 4a)의 합성
에탄올 (EtOH, 200 mL) 중 2a (10 g, 43.4 mmol, 1 당량)의 용액에 3a (tert-부틸 (E)-(4-아미노부트-2-엔-1-일)카바메이트, 9.69 g, 52.0 mmol, 1.2 당량) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA, 16.8 g, 130 mmol, 3 당량)을 25℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 64 시간 동안 교반하고, 이 지점에 침전물을 여과로 수집하고, 에탄올로 세척하고, 고 진공 하에서 건조시켜, 4a (8 그램, 21 mmols, 48% 수율)를 적색 고체로서 제공하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. 1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ = 8.18 (s, 1H), 8.01 (br s, 1H), 7.74 (br t, J=5.6 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.31 (br s, 1H), 6.92 (br s, 1H), 5.53 (br s, 2H), 4.08 (br s, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.47 (br s, 2H), 1.35 (s, 9H).
화합물 5a의 합성
화합물 4a (8 g, 21.0 mmol, 1 당량)를 에틸 아세테이트 중 HCl (200 mL, 800 mmol HCl)의 4 M 용액 내로 25℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, EtOAc로 세척하고, 고 진공 하에서 건조시켜, 5a를 적색 고체로서의 HCl 염 (7.2 g, 정량적 수율)으로서 제공하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. 1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ = 8.21 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.02 (br s, 4H), 7.59 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.34 (br s, 1H), 5.87 (td, J=5.6, 15.6 Hz, 1H), 5.67 - 5.56 (m, 1H), 4.17 (br d, J=5.6 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.39 (br t, J=5.6 Hz, 2H).
화합물 2b의 합성
디클로로메탄 (DCM, 500 mL) 중 화합물 2a (4-클로로-3-메톡시-5-니트로벤즈아미드, 16 g, 69.4 mmol, 1 당량)의 용액에 보론 트리브로마이드 (BBr3, DCM 중 1 M, 275 mL, 4 당량)의 용액을 20℃에서 질소 하에서 적가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 16 시간 동안 교반하였고, 이때 LC-MS 분석 (방법 B)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 빙수 (2 L)에 붓고, 20 분 동안 격렬하게 교반하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 여과액을 에틸 아세테이트 (2 x 300 mL)로 추출하고, 무수 Na2SO4 위에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축하여, 조질의 생성물을 제공하였다. 조질의 생성물 (9 g)을 DMF (30 mL)에 용해시키고, Biotage Isolera One (330 gram Agela C18 컬럼 (20 - 35 μm 입자 크기)에서 역-상 플래시 크로마토그래피로 정제하고, 20 분에 걸친 20-40% 아세토니트릴에 이어 35 분에 40 - 45% 아세토니트릴의 구배로 용리하는 0.09% (v/v) TFA를 포함하는 물 / 아세토니트릴을 활용하여, 2b (6 그램, 27.7 mmols, 40% 수율)를 회백색 고체로서 제공하였다. LCMS (방법 B, ESI+): m/z [M+H]+ 217.0 (이론치); 217.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.84 분.
화합물 3b의 합성
디메틸포름아미드 (DMF, 20 mL) 중 2b (4.5 g, 20.8 mmol, 1 당량)의 용액에 1-(클로로메틸)-4-메톡시벤젠 (PMBCl, 3.42 g, 21.8 mmol, 1.05 당량) 및 세슘 카보네이트 (Cs2CO3, 7.45 g, 22.9 mmol, 1.1 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 12 시간 동안 교반하였고, 이때 LC-MS 분석 (방법 B)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고, 침전물을 여과하고, 건조시켜, 3b (6.4 그램, 19.0 mmols, 91% 수율))를 담황색 고체로서 제공하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 B, ESI+): m/z [M+H]+: 337.1 (이론치); 337.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.11 분.
화합물 5의 합성
n-부탄올 (10 mL) 중 5a (762 mg, 2.16 mmol, 1.2 당량)의 용액을 바이알에 첨가한 후, DIPEA (1.11 g, 8.62 mmol, 4.8 당량) 및 소듐 바이카보네이트 (457 mg, 4.31 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고, 반응 혼합물을 20℃에서 10 분 동안 교반하였다. 이어서, 3b (600 mg, 1.78 mmol, 2.4 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 115℃에서 20 시간 동안 교반하였고, 이 때 UPLC-MS 분석 (방법 B)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 4 개의 추가적인 바이알을 위에 기재된 바와 같이 설정하였다. 5개의 모든 반응 혼합물을 반응의 종료시 조합하였다. 생성된 조합된 반응 혼합물을 20℃까지 냉각시키고, MeCN (180 mL)으로 희석하였다. 반응 혼합물 중 고체 재료를 여과하고, MeCN (80 mL)으로 헹구어, 짙은 적색 고체를 제공하였다. 그런 다음, 고체를 물로 세척하고, 고 진공 하에서 건조시켜, 5 (2.7 그램, 4.65 mmols, 52% 수율)를 벽돌색 고체로서 제공하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ = 8.17 (dd, J=1.9, 7.8 Hz, 2H), 8.08 - 7.96 (m, 2H), 7.77 - 7.63 (m, 3H), 7.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.33 (br s, 2H), 6.92 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.57 - 5.42 (m, 2H), 5.04 (s, 2H), 4.01 (q, J=5.8 Hz, 4H), 3.79 (s, 3H), 3.74 (s, 3H).
화합물 6의 합성
메탄올 및 물의 1:1 (v/v) 혼합물 (160 mL) 중 5 (2 g, 3.45 mmol, 1 당량)의 용액에 Na2CO3 (10.95 g, 103 mmol, 30 당량) 및 소듐 디티오나이트 (Na2S2O4, 8.40 g, 48.2 mmol, 14 당량)를 첨가하였다. 생성된 적색 반응 혼합물을 25℃에서 12 시간 동안 교반하고, 이 때 적색 혼합물이 옅은 황색으로 변하였고, UPLC-MS 분석 (방법 B)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 농축하고, 물로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 유기층을 농축하여, 6 (1.0 그램, 1.81 mmols, 52% 수율)을 회백색 고체로서 제공하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ = 7.61 (br s, 2H), 7.37 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.97 (br s, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.93 - 6.90 (m, 2H), 6.86 (s, 2H), 6.77 (d, J=1.8 Hz, 1H), 5.71 - 5.53 (m, 2H), 4.98 (s, 2H), 4.65 (br d, J=12.6 Hz, 4H), 3.74 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.49 (br s, 4H).
화합물 7의 합성
메탄올 (20 mL) 중 6 (1.4 g, 2.69 mmol, 1 당량)의 용액에 시아노겐 브로마이드 (BrCN, 1.71 g, 16.1 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하였고, 그 시간 동안 침전물이 관찰되었다. LC-MS 분석 (방법 C)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 에탄올 및 석유 에테르로 세척하여, 7 (1.2 g, 1.64 mmols, 61% 수율)을 담황색 고체로서 제공하였다. 이 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 C, ESI+): m/z [M+H]+ 571.2 (이론치); 571 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.634 분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ = 12.94 (br s, 2H), 8.63 (br d, J=12.8 Hz, 4H), 8.08 (br s, 2H), 7.62 - 7.52 (m, 3H), 7.47 (br s, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.24 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.84 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.81 - 5.69 (m, 1H), 5.57 (td, J=5.4, 15.5 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.80 (br t, J=6.6 Hz, 4H), 3.74 (s, 3H), 3.69 (s, 3H).
화합물 9의 합성
디메틸포름아미드 (DMF, 3 mL) 중 화합물 8 (1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복실산, 331 mg, 2.15 mmol, 2.1 당량)의 용액에 1-[비스(디메틸아미노) 메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트 (HATU, 973 mg, 2.56 mmol, 2.5 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 10 분 동안 교반하였다. 그런 다음, DMF (1 mL) 중 DIPEA (596 mg, 4.61 mmol, 4.5 당량) 및 7 (750 mg, 1.02 mmol, 1 당량)의 용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 60℃에서 2 시간 동안 교반하였고, 이 때 LC-MS 분석 (방법 B,)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고, 고체를 여과에 의해 수집하고, 건조시켜, 조질의 생성물을 제공하였다. 조질의 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS (방법 B, ESI+): m/z [M+H]+ 843.4 (이론치); 843.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.062 분.
화합물 1의 합성
화합물 9 (700 mg, 0.83 mmol)를 트리플루오로아세트산 (TFA, 3 mL)을 함유하는 유리 바이알에 첨가하고, 생성된 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하고, 이 때 LC-MS 분석은 반응이 완료되었음을 나타내었다. TFA를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 DMSO 및 아세토니트릴에 용해시키고, 분취용 HPLC (방법 F)로 정제하여, 1 (40 mg, 0.055 mmols, 2 개의 단계에 걸쳐 7% 수율)을 회백색 고체로서 제공하였다. LCMS (방법 B, ESI+): m/z [M+H]+ 723.3 (이론치); 723.1 (관측치); [M+H]+, HPLC 체류 시간:: 2.04 분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ = 13.00 - 12.51 (m, 2H), 10.41 (s, 1H), 7.96 (br s, 1H), 7.81 (br s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.37 - 7.28 (m, 2H), 7.22 (br s, 1H), 7.14 - 7.07 (m, 1H), 6.51 (br d, J=11.0 Hz, 2H), 5.97 - 5.75 (m, 2H), 4.91 (br dd, J=3.5, 16.3 Hz, 4H), 4.51 (br d, J=3.3 Hz, 4H), 3.77 (s, 3H), 2.10 (d, J=6.0 Hz, 6H), 1.25 (dt, J=3.6, 6.9 Hz, 6H).
(2S,3S,4S,5R,6S)-6-(4-((((2-((((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)카보닐)(메틸)아미노)에틸)(메틸)카바모일)옥시)메틸)-3-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산 (화합물 11)의 합성
화합물 10b의 합성
화합물 10a를 이전에 보고된 바와 같이 제조하였다 (ACS Med. Chem. Lett.　2010, 1, 6, 277-280).
오븐-건조된 4 mL 유리 바이알을 10a (150 mg, 0.20 mmol, 1 당량) 및 펜타플루오로페닐 카보네이트 (88 mg, 0.22 mmol, 1.1 당량), DMF (1 mL) 및 DIPEA (0.15 mL, 0.86 mmol, 4.3 당량)로 충전하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였고, 이 때 연분홍색 균질 용액이 관찰되었다. Tert-부틸 메틸(2-(메틸아미노)에틸)카바메이트 (50 uL, 0.27 mmol, 1.3 당량)를 용액에 첨가하였고, 이는 반응 혼합물을 담황색으로 변하게 하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, 분별 깔때기로 옮기고, EtOAc (3x50 mL)로 추출하였다. 유기층을 수집하고 조합하고, 1 M HCl로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 생성된 고체를 플래시 컬럼 크로마토그래피 (25 g SiO2 컬럼, DCM 중 0 - 25% MeOH로 용리)로 정제하여, 10b를 담황색 고체 (70.4 mg, 0.073 mmol, 36% 수율)로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+) m/z [(M-Boc)+2H]+: 863.33 (이론치); 863.14 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.54 분.
화합물 10c의 합성
화합물 10b (70.4 mg, 0.073 mmol, 1 당량)를 MeOH 중 용액으로서 자기 교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 유리 바이알에 옮겼다. MeOH를 진공 하에서 제거하고, 바이알을 아르곤으로 다시-채웠다. 바이알에, Ar 하에서, MeOH (0.5 mL)를 첨가하고, 생성된 용액을 0℃까지 냉각시키고, 소듐 메톡사이드 (MeOH 중 0.5 M 용액, 150 uL, 0.075 mmol, 1 당량)를 첨가하였다. 반응물을 LC-MS (방법 D)로 모니터링하고, 모든 3 개의 아세테이트 기의 완전한 제거시, 리튬 하이드록시드 (물 중 1 M, 0.225 mL, 0.225 mmol, 3 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. DMSO (0.5 mL) 및 빙초산 (50 uL)을 반응 혼합물에 첨가하여, 균질한 용액을 산출하였다. 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 H, 이동상 첨가제로서 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 40% MeCN)로 정제하여, 10c를 백색 고체 (16.8 mg, 0.028 mmol, 38% 수율)로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M+H]+ 601.26 (이론치); 601.15 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.09 분.
화합물 10d의 합성
화합물 10c (16.8 mg, 0.028 mmol, 1 당량)를 MeOH 중 용액으로서 자기 교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 유리 바이알에 첨가하였다. MeOH를 진공 하에서 제거하고, 바이알을 아르곤으로 채웠다. 바이알에 3-(말레이미도)프로피온산 N-하이드록시석신이미드 에스테르 (MP-OSu, 16 mg, 0.06 mmol, 2 당량)에 이어 DMF (0.5 mL) 및 DIPEA (50 uL, 0.28 mmol, 10 당량)를 첨가하였다. 15 분 후, DMSO (0.5 mL) 및 빙초산 (100 uL)을 첨가하고, 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 H, 이동상 첨가제로서 0.05% TFA를 포함하는 물 중 10 - 60% MeCN)로 정제하여, 10d를 백색 고체 (15 mg, 0.020 mmol, 71% 수율)로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 A, ESI+): m/z [M+H] +: 752.29 (이론치); 752.26 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.27 분.
화합물 10의 합성
화합물 10d (15 mg, 0.020 mmols, 1 당량)를 DCM (1 mL) 중 20% (v/v) TFA에 용해시키고, 자기 교반 막대가 장착된 4 mL 유리 바이알에 옮겼다. 바이알을 캡핑하지 않은 채로 두고, 반응 진행을 LC-MS로 모니터링하였다. 2 시간 후, 용매를 진공 하에 제거하여, 10을 백색 고체 (13 mg, 0.02 mmol, 정량적 수율)로서 제공하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M+H] +: 652.24 (이론치); 652.45 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.69 분.
화합물 11의 합성
오븐-건조된 4 mL 유리 바이알에 화합물 1 (9.5 mg, 0.010 mmol, 1 당량)에 이어, DMF (0.5 mL), p-니트로페닐 카보네이트 (9.0 mg, 0.030 mmol, 3 당량) 및 DIPEA (20 uL, 0.115 mmol, 11.5 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였고, 이 지점에서 11a로의 완전한 전환이 UPLC-MS 분석 (방법 D)에 의해 확인되었다. 화합물 10 (20 mg, 0.031 mmol, 3.1 당량)을 단일 분량으로 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 빙초산 (20 uL)을 첨가하고, 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 H, 이동상 첨가제로서 0.05% TFA를 포함하는 물 중 0 - 45% MeCN)로 정제하였다. 11을 함유하는 분획을 조합하고, 용매를 동결건조를 통해 제거하여, 11 (6.31 mg, 0.0039 mmol, 39% 수율)을 제공하였다. 화합물 1을 또한 백색 푹신한 고체로서 회수하였다 (2.81 mg, 0.0030 mmol, 30% 회수). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M+H] +: 1400.52 (이론치); 1400.25 (관측치) & [M+2H]2+ = 701.43 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.28 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H- 피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 12)의 합성
화합물 12a를 이전에 보고된 바와 같이 제조하였다 (WO2017/175147, 실시예 40, 페이지 292).
DMA (635 μL) 중 12a (28.7 mg, 0.032 mmol, 1.0 당량)의 용액에 MP-OSu (15.9 mg, 0.0596 mmol, 1.9 당량), 및 DIPEA (35 μL, 0.199 mmol, 6.2 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 실온에서 교반하였다. 완료시, 용액을 감압 하에서 농축하고, 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 G, 이동상 첨가제로서 0.1% 포름산을 포함하는 물 중 20-50-95% MeCN)로 정제하여, 12 (46% 수율, 17.8 mg, 0.0152 mmol)를 산출하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M+H]+ 945.40 (이론치); 945.72 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.79 분.
(2S,3S,4S,5R,6S)-6-(4-((((3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)카바모일)옥시)메틸)-3-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산 (화합물 13)의 합성
화합물 13a 및 13b의 합성
화합물 10a (13 mg, 0.017 mmol)를 DMA (87 μL)에 용해시켰다. 이 용액에 펜타플루오로페닐 카보네이트 (13.7 mg, 0.035 mmol), 및 DIPEA (14 μL, 0.078 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30 분 동안 실온에서 교반하였다. 중간체 13a로의 완전 전환시, 이 용액을 12a (10.6 mg, 0.012 mmol)를 함유하는 제2 바이알로 옮겼다. 반응 혼합물을 18 시간 동안 실온에서 교반하였다. 그런 다음, 반응물을 물로 희석하고, EtOAc (20 mL x 3)로 3 회 추출하였다. 그런 다음, 조합된 유기층을 1 M HCl로 세척하였다. 유기층을 조합하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축하였다. 생성물을 분취용 HPLC (방법 H, 이동상 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하는 물 중 5-50-95% MeCN)로 정제하여, 화합물 13b를 트리플루오로아세테이트 염 (10.0 mg, 0.0056 mmol, 48% 수율)으로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1568.60 (이론치); 1568.95 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.70 분.
화합물 13c의 합성
건조, 잘 퍼징된 유리 바이알에 무수 메탄올 (40 μL) 중 화합물 13b (10.0 mg, 0.0056 mmol)를 첨가하였다. 용액을 빙조에서 냉각시키고, NaOMe (MeOH 중 0.5 M, 11.13 μL)를 첨가하였다. 약 1 시간 후, 1 M LiOH (17 μL, 0.017 mmols, 3 당량) 수용액을 첨가하였다. LiOH 용액의 첨가시 유의한 백색 침전물이 형성되었다. 1 시간 후, 빙초산 (12 μL)을 첨가하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 G, 물 중 20-60-95% MeCN, 이동상 첨가제로서 0.05% TFA를 포함함)로 정제하여, 화합물 13c를 트리플루오로아세테이트 염 (4.13 mg, 0.0029 mmol, 52% 수율)으로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M+H]+ = 1206.49 (이론치); 1206.50 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.45 분.
화합물 13의 합성
화합물 13c (4.13 mg, 0.00342 mmol, 1.0 당량)를 유리 바이알 중 DMA (68 μL)에 아르곤 하에서 용해시켰다. MP-OSu (1.82 mg, 0.00685 mmol, 2 당량) 및 DIPEA (3.0 μL, 0.0171 mmol, 5 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 1 시간 동안 RT에서 교반하였다. 빙초산 (3.0 μL)을 첨가하고, 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 G, 이동상 첨가제로서 0.1% 포름산을 사용하는 물 중 10-60-95% MeCN)로 정제하여, 13을 트리플루오로아세테이트 염 (5.43 mg, 0.0034 mmol, 93% 수율)으로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M+H]+ = 1357.52 (이론치); 1357.82 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.54 분.
4-((S)-2-((S)-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-3-메틸부탄아미도)프로판아미도)벤질 (3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)카바메이트 (화합물 14)의 합성
화합물 12a (2.6 mg, 0.0033 mmol)가 충전된 건조 유리 바이알에 DMA (66 μL)에 이어, MP-Val-Ala-PAB-Opfp (14a, 3.2 mg, 0.049 mmol, 15 당량) 및 DIPEA (2.8 μL, 0.016 mmol, 4.9 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30 분 동안 RT에서 교반한 다음, 빙초산 (2.85 μL)을 첨가하고, 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 G, 0.1% 포름산을 이동상 첨가제로서 포함하는 물 중 30-60-95% MeCN)로 정제하여, 화합물 14를 트리플루오로아세테이트 염 (4.0 mg, 0.0027 mmol, 82% 수율)으로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1264.56 (이론치); 1264.85 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.75 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-하이드록시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 15)의 합성
화합물 15b의 합성
화합물 15a를 이전에 보고된 바와 같이 제조하였다 (WO2017/175147, 페이지 292)
DCM (280 μL) 중 화합물 15a (31.4 mg, 0.0280 mmol)를 함유하는 건조 유리 바이알에 보론 트리브로마이드 (BBr3, DCM 중 1 M, 168 μL, 0.168 mmol, 6 당량)를 적가하였다. 반응 혼합물을 40oC에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 RT까지 냉각시키고, 차가운 물 (170 μL)을 천천히 첨가하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에 농축하고, 분취용 HPLC (20-50-95%, 아세토니트릴 중 0.1% 포름산, 방법 G)로 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 조합하고, 용매를 동결건조를 통해 제거하여, 화합물 15b를 포르메이트 염 (17% 수율, 4.36 mg, 0.0047 mmol)으로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 780.36 (이론치); 780.38 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.33 분.
화합물 15의 합성
2,5-디옥소피롤리딘-1-일 3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노에이트 (MP-OSu, 1.7 mg, 0.0063 mmol)를 함유하는 건조 4 mL 바이알에 DMA (423 μL) 중 용액으로서 화합물 15b (3.9 mg, 0.0042 mmol)를 첨가하였다. 혼합물에 DIPEA (3.7 μL, 0.0211 mmol, 5 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30 분 동안 RT에서 교반한 후, 빙초산 (3.68 μL)을 첨가하고, 생성물을 분취용 HPLC (10-40-95%, 아세토니트릴 중 0.05% TFA, 방법 G)를 통해 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 조합하고, 동결건조를 통해 용매를 제거하여, 화합물 15를 트리플루오로아세테이트 염 (20% 수율, 1.0 mg, 0.0009 mmol)으로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 931.39 (이론치); 931.41 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.62 분.
S-(1-(3-((3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)아미노)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 16)의 합성
화합물 12 (1.5 mg, 0.0015 mmol, 1 당량)를 DMSO (50 μL)에 용해시켰다. L-시스테인 (1 M, 2.2 μL, 0.0022 mmols, 1.5 당량)을 물 중 용액으로서 첨가하였다. 반응 혼합물을 30oC에서 30 분 동안 교반하고, 후속적으로 분취용 HPLC (30-70-95%, 아세토니트릴 중 0.05% TFA, 방법 G)를 통해 직접 정제하였다. 원하는 생성물을 함유하는 분획을 조합하고, 냉동시켰다. 용매를 동결건조를 통해 제거하여, 화합물 16을 트리플루오로아세테이트 염 (49% 수율, 1.03 mg, 0.0007 mmol)으로서 산출하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1066.42 (이론치); 1066.44 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.65 분.
(S,E)-4-((3-((5-카바모일-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)아미노)-3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-4-옥소부탄산 (화합물 17)의 합성
화합물 17a의 합성
교반 막대가 장착된 오븐 건조된 4 mL 바이알을 화합물　12a (10 mg, 0.011 mmol, 1.0 당량),　Fmoc-아스파르테이트 4-tert-부틸 에스테르 (9.1 mg, 0.022 mmol, 2.0 당량)　및　HATU (8.4 mg, 0.022 mmol, 2.0 당량)에 이어,　DMF (0.5 mL) 및　DIPEA (9.6 uL, 0.055 mmol, 5.0 당량)로 충전하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였고, 아미드로의 완전한 전환이 관찰되었다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성된 조질의 오일을 DCM에 용해시키고, 원하는 생성물을 플래시 크로마토그래피 (10 g SiO2, DCM 중 0 - 40% MeOH)로 단리하여,　17a (12 mg, 0.0104 mmol, 94% 수율)를 담갈색 고체로서 제공하였다. 단리된 물질은 여전히 일부 불순물을 함유하고 있지만, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에서 사용하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1187.54 (이론치); 1187.53 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.40 분.
화합물 17b의 합성
교반 막대가 장착된 오븐 건조된 4 mL 바이알을 17a (12 mg, 0.0104 mmol, 1.0 당량) 및 DMF (1 mL) 중 20% 피페리딘으로 충전하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 prepHPLC (방법 G, 물 중 5 - 95% 아세토니트릴)로 정제하여, 17b (9.3 mg, 0.0096 mmol, 93 % 수율)를 산출하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 965.47 (이론치); 965.48 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.68 분.
화합물 17c의 합성
MP-OSu 및 DIPEA의 스톡 용액을 7.7 mg의 MP-OSu 및 10 μL의 DIPEA를 1.0 mL의 DMF에 용해시킴으로써 제조하였다.　교반 막대가 장착된 오븐 건조된 4 mL 바이알을 17b (9.3 mg, 0.0096 mmol, 1.0 당량)로 충전하고, MP-OSu (3.8 mg, 0.014 mmol, 1.5 당량) 및 DIPEA (0.029 mmol, 3 당량)를 함유하는 0.5 mL의 스톡 용액을 바이알에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 조질의 17c를 산출하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1116.50 (이론치); 1116.80 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.51 분.
화합물 17의 합성
4 mL 바이알을 DCM (1 mL) 중 20% (v/v) TFA에 용해된 화합물 17c (10.7 mg, 0.0096 mmol, 1 당량)로 충전하고, 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 후속적으로 용매를 진공 하에 제거하고, 조질의 생성물을 DMSO (0.75 mL)에 용해시키고, prepHPLC (방법 G, 물 중 5 - 50% MeCN)로 정제하여, 화합물 17 (5.4 mg, 0.0051 mmol, 53% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1060.44 (이론치); 1061.12 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.28 분.
(S,E)-7-(3-(6-아미노-2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-N-메틸헥산아미도)프로폭시)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 18)의 합성
화합물 18a의 합성
교반 막대가 장착된 오븐 건조된 4 mL 바이알을　HATU (7.8 mg, 0.021 mmol, 2.0 당량) 및　Fmoc-리신 N-엡실론-Boc (9.6 mg, 0.021 mmol, 2.0 당량)로 충전하고; 이에 DMF (0.5 mL) 중 화합물 12a (9.3 mg, 0.0103 mmol, 1.0 당량) 및 DIPEA (9 uL, 0.051 mmol, 5 당량)의 용액을 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 파라필름으로 밀봉하고, 혼합물을 RT 에서 밤새 교반하였다. 완전 전환을 UPLC-MS (방법 D)로 관찰하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 플래시 크로마토그래피 (10 g SiO2, DCM 중 0 - 40% MeOH)로 정제하여, 18a (12 mg, 0.0097 mmol, 95%)를 황갈색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1244.60 (이론치); 1244.61 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.40 분.
화합물 18b의 합성
교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 바이알을 18a (12 mg, 0.0096 mmol)로 충전하고, DMF (1 mL) 중 20% (v/v) 피페리딘을 반응물에 첨가하였다. 대략 1 시간이 걸리는 UPLC-MS (방법 D)에 의해 완전한 전환이 관찰될 때까지 반응 혼합물을 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 분취용 HPLC (방법 G, 0.1% (v/v) 포름산을 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하였다. HPLC 용매를 진공 하에 제거하여, 18b (4.2 mg, 0.0041 mmol, 36%)를 회백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1022.53 (이론치); 1022.80 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.30 분.
화합물 18c의 합성
교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 바이알을 18b　(4.2 mg, 0.0034 mmol, 1 당량)에 이어, MP-OSu (1.8 mg, 0.0068 mmol, 2.0 당량), DIPEA (5.9 L, 0.034 mmol, 10 당량) 및 DMF (0.8 mL)로 충전하였다. UPLC-MS (방법 D) 분석이 완전한 전환을 나타내는 지점에서 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여, 조질의 생성물 18c을 산출하고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1173.56 (이론치); 1173.94 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.54 분.
화합물 18의 합성
교반 막대를 함유하는 오븐-건조된 4 mL 바이알을 이전 단계로부터의 조질의 18c (0.0034 mmol,)로 충전하고, DCM (1 mL) 중 20% (v/v) TFA를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하고, 후속적으로 생성물을 분취용 HPLC (방법 G, 0.1% (v/v) 포름산을 포함하는 물 중 5 - 50% MeCN)로 정제하였다. HPLC 용매를 진공 하에 제거하여, 18c (4.2 mg, 0.0035 mmol, 2 개의 단계에 걸쳐 56% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1073.51 (이론치); 1073.73 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.15 분.
HATU 커플링, Fmoc 탈보호, 및 MP 커플링에 대한 일반 방법
HATU 커플링 (방법 1): 교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 바이알을 화합물 12a (1.0 당량), HATU (2.0 당량), DIPEA (5 당량) 및 DMF (12a 중 20 mM)로 충전하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 크로마토그래피를 통해 정제하였다.
Fmoc 탈보호 (방법 2): 교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 바이알을 위로부터의 HATU 커플링된 생성물로 충전하고, 이를 DMF (1 mL) 중 20% (v/v) 피페리딘에 용해시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 크로마토그래피를 통해 정제하였다.
MP 커플링 (방법 3): 교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 바이알을 이전 반응으로부터의 생성물로 충전하고, 이에 MP-OSu (2 당량) 및 DIPEA (10 당량) 및 DMF (Fmoc-탈보호된 아민 출발 재료 중 10 mM)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 분취용 HPLC로 정제하였다.
화합물 19a를 일반 방법 1에 따라 제조하였다 (8.0 mg, 0.0075 mol, 85% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1073.47 (이론치); 1074.03 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.76 분.
화합물 19b를 일반 방법 2에 따라 제조하였다 (6.1 mg, 0.0072 mol, 95% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 851.41 (이론치); 851.69 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.15 분.
화합물 19를 일반 방법 3에 따라 제조하였다 (4.3 mg, 0.0043 mol, 60% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1002.43 (이론치); 1002.72 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.31 분.
화합물 20a를 일반 방법 1에 따라 제조하였다 (8.7 mg, 0.0080 mol, 91% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1087.49 (이론치); 1087.90 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.75 분.
화합물 20b를 일반 방법 2에 따라 제조하였다 (5.6 mg, 0.0065 mol, 81% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 865.42 (이론치); 865.66 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.12 분.
화합물 20을 일반 방법 3에 따라 제조하였다 (3.4 mg, 0.0034 mol, 52% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1016.45 (이론치); 1017.08 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.33 분.
화합물 21a를 일반 방법 1에 따라 제조하였다 (14 mg, 0.0119, mmol). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1145.50 (이론치); 1145.42 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.74 분.
화합물 21b를 일반 방법 2에 따라 제조하였다 (7.2 mg, 0.0078 mol, 2 개의 단계에 걸쳐 76% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 923.43 (이론치); 923.67 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.13 분.
화합물 21을 일반 방법 3에 따라 제조하였다 (1.5 mg, 0.0014 mols, 22% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1074.45 (이론치); 1074.90 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.36 분.
화합물 22a를 일반 방법 1에 따라 제조하였다 (7.6 mg, 0.0065 mols, 63% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1172.58 (이론치); 1172.59 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.84 분.
화합물 22b를 일반 방법 2에 따라 제조하였다 (6.1 mg, 0.0064 mmols, 57% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 950.51 (이론치); 950.83 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.99 분.
화합물 22를 일반 방법 1에 따라 제조하였다 (2.6 mg, 0.0023 mols, 37% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1101.54 (이론치); 1101.96 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.18 분.
화합물 23a를 일반 방법 1에 따라 제조하였다 (12 mg, 0.0105 mmol). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1117.50 (이론치); 1117.77 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.75 분.
화합물 23b를 일반 방법 2에 따라 제조하였다 (7.2 mg, 0.00804 mmol, 2 개의 단계에 걸쳐 91%). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 895.43 (이론치); 895.73 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.12 분.
화합물 23을 일반 방법 3에 따라 제조하였다 (8.4 mg, 0.0047, 58% 수율). UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1046.46 (이론치); 1047.06 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.36 분.
( S,E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(2-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)-3-하이드록시-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 24)의 합성
화합물 24a의 합성
교반 막대가 장착된 오븐 건조된 4 mL 바이알을 HATU (6.7 mg, 0.018 mmol, 2.0 당량) 및　2-(9H-플루오렌-9-일메톡시카보닐아미노)-3-메톡시-프로판산 (6.0 mg, 0.018 mmol, 2.0 당량)으로 충전하고, DMF (0.5 mL) 중 화합물 12a (8 mg, 0.0088 mmols, 1.0 당량) 및 DIPEA (8 uL, 0.044 mmols, 5 당량)의 용액을 바이알에 첨가하였다. 바이알을 캡핑하고, 파라필름으로 밀봉하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였고, 이 때 완전한 전환이 UPLC-MS (방법 D)에 의해 관찰되었다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 플래시 크로마토그래피 (10 g SiO2, DCM 중 0 - 40% MeOH)로 정제하여, 24a (15 mg)를 제공하고, 이를 추가 정제 없이 다음 반응에서 사용하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1345.59 (이론치); 1346.12 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.23 분.
화합물 24b의 합성
교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 바이알을 24a (15 mg, 0.011 mmol)로 충전하고, DMF (1 mL) 중 20% (v/v) 피페리딘을 이에 첨가하였다. 대략 1 시간이 걸리는 UPLC-MS (방법 D)에 의해 완전한 전환이 관찰될 때까지 반응 혼합물을 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 조질의 생성물을 분취용 HPLC (방법 G, 0.1% (v/v) 포름산을 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하고; HPLC 용매를 진공 하에 제거하여, 24b (8.4 mg, 0.0075 mmol, 2 개의 단계에 걸쳐 94%)를 회백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1123.53 (이론치); 1123.98 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.47 분.
화합물 24c의 합성
교반 막대가 장착된 오븐-건조된 4 mL 바이알을 24b　(8.4 mg, 0.0075 mmol, 1 당량)에 이어, MP-OSu (3.0 mg, 0.011 mmol, 1.5 당량), DIPEA (3.9 L, 0.022 mmol, 3 당량) 및 DMF (0.5 mL)로 충전하였다. UPLC-MS (방법 D) 분석이 완전한 전환을 나타내는 지점에서 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성된 조질의 생성물을 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1274.55 (이론치); 1275.21 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.89 분.
화합물 24의 합성
교반 막대를 함유하는 오븐-건조된 4 mL 바이알을 조질의 24c (0.0075 mmol,)로 충전하고, DCM (1 mL) 중 20% (v/v) TFA를 바이알에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 분 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 생성된 조질의 생성물을 DMSO (0.5 mL)에 용해시키고, 분취용 HPLC (방법 G, 0.1% (v/v) 포름산을 포함하는 물 중 5 - 50% MeCN)로 정제하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 24 (4.0 mg, 0.0031 mmol, 2 개의 단계에 걸쳐 42% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1032.44 (이론치); 1033.09 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.28 분.
(E)-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 25)의 합성.
25a의 합성
교반 막대가 있는 5 mL 오븐-건조된 마이크로파 바이알을　4-클로로-3-니트로-벤젠설폰아미드 (250 mg, 1.06 mmol, 1 당량),　tert-부틸 N-[(E)-4-아미노부트-2-엔일]카바메이트 하이드로클로라이드 (353 mg, 1.6 mmol, 1.5 당량) 및　소듐 카보네이트 (336 mg, 3.2 mmol, 3 당량)로 충전하였다. 바이알에 1-부탄올 (3 mL)에 이어,　DIPEA (1.1 mL, 6.34 mmol, 6 당량) 및 추가적인 1-부탄올을 첨가하여, 반응물의 총 부피를 최대 5 mL로 만들었다. 바이알을 밀봉하고, 140℃까지 마이크로파 반응기에서　120 분 동안 가열하였다.
조질의 생성물을 염수 (100 mL)에 붓고, EtOAc (3x200 mL)로 추출하고, 유기물을 조합하고, 염수 (2x100 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 밝은 적색 오일을 제공하였다. 물질을 플래시 크로마토그래피 (셀라이트에 건조 로딩됨,　25 g Sfar, HC Duo, SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 40% MeOH)로 정제하여, 25a (295 mg, 0.763 mmol, 72% 수율)를 밝은 황색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H - Boc]+ = 287.1 (이론치); 287.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.53 분.
25b의 합성
20 mL 바이알을 25a (295 mg, 0.763 mmol, 1 당량)로 충전하고, 이를 메탄올 (7.5 mL) 및　1,4-디옥산 중 4 M HCl (40 eq, 7.5 mL, 30.0 mmol)에 용해시켰다. 용액을　40oC에서 30 분 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하여,　25b를 밝은 적색 고체로서의 2x HCl 염 (274 mg, 0.764 mmol, 정량적 수율)으로서 제공하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 287.1 (이론치); 287.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.52 분.
25c의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된　5 mL 마이크로파 바이알을　25b (135 mg, 0.376 mmol, 1 당량),　tert-부틸 N-[3-(5-카바모일-2-클로로-3-니트로-페녹시)프로필]카바메이트 (211 mg, 0.564 mmol, 1.5 당량, 아래 기재된 바와 같이 제조됨) 및　소듐 카보네이트 (119 mg, 1.13 mmol, 3 당량)로 충전하고, 이어서 n-부탄올 (3.75 mL) 및　DIPEA (0.39 mL, 2.25 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고, 140℃까지 3 시간 동안 마이크로파 반응기에서 가열하여, 밝은 적색 불균질 혼합물을 제공하였다. 이 용액을 셀라이트 위에서 여과하여, 1:1 DCM:MeOH (100 mL)로 세척하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 조질을 생성물을 셀라이트에 로딩하고, 플래시 크로마토그래피 (25 g SiO2 컬럼, DCM 중 0 - 40% MeOH)로 정제하여, 25c (245 mg, 0.384 mmol)를 생성물 및 출발 물질 (3:2)의 혼합물로서 제공하였다. 생성물 혼합물을 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 638.2 (이론치); 638.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.75 분.
25d의 합성
교반 막대가 있는 20 mL 바이알을　25c (245 mg, 0.384 mmol, 1 당량) 및　소듐 바이카보네이트 (580 mg, 6.90 mmol, 18 당량)로 충전하고,　메탄올 (4 mL)을 첨가하였다. 그런 다음, 바이알에 소듐 하이드로설파이트 (1.20 g, 6.90 mmol, 4 mL 물 중 18 당량)를 첨가하고, 바이알을 50℃까지 60 분 동안 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 셀라이트 위에서 여과하여, MeOH (50 mL) 및 DCM (50 mL)로 세척하고, 조질의 생성물을 셀라이트에 로딩하였다. 생성물을 플래시 크로마토그래피　(25 g Sfar HC Duo, SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 40% 10:1 MeOH:NH4OH)로 정제하여, 25d (89 mg, 0.154 mmol, 2 개의 단계에 걸쳐 41% 수율)를 불분리성 회전 형태이성질체의 혼합물로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 578.3 (이론치); 578.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.98 & 1.18 분.
25e의 합성
2 개의 동일한 반응물을 나란히 설정하였다.　교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL 바이알을 25d (45 mg, 0.156 mmol, 1 당량)로 충전하고, 메탄올 (1 mL)에 용해시키고,　시아노겐 브로마이드 (200 uL, 1.20 mmol, 8 당량)를 첨가하였다. 반응물을 밤새 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 2 개의 반응물을 조합하여, 25e를 담회색 고체로서의 2x HBr 염 (120 mg, 0.15 mmol, 97% 수율)으로서 제공하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 628.3 (이론치); 628.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.79 분.
25f의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL 바이알을 25e (120 mg, 0.152 mmol, 1 당량),　2-에틸-5-메틸-피라졸-3-카복실산 (94 mg, 0.61 mmol, 4.0 당량) 및　HATU (231 mg, 0.61 mmol, 4 당량)로 충전하였다. 고체를　DMF (1 mL)에 용해시키고,　DIPEA (0.22 mL, 1.2 mmol, 8 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하고, 아세트산을 첨가하고 (100 uL), 생성물을 prepHPLC (방법 I, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 25f (107 mg, 0.12 mmol, 78% 수율)를 회백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 900.4 (이론치); 900.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.69 분.
25g의 합성
화합물 25f (107 mg, 0.12 mmol, 1 당량)를 교반 막대가 있는 20 mL 바이알에 첨가하고, DCM (5 mL) 중 20% TFA에 용해시켰다. 반응물을 실온에서 20 분 동안 교반한 다음, 용매를 진공 하에 제거하여, 25g를 3x TFA 염 및 회백색 고체 (70 mg, 0.0615 mmol, 52% 수율)로서 제공하였다. 분석적 순도의 샘플을 prepHPLC 정제 (방법 G, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 수득하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 800.3 (이론치); 800.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.12 분.
25의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL바이알을 25g (12 mg, 0.011 mmol, 1 당량)로 충전하고, 이를 DMF (1 mL)에 용해시킨 다음, DIPEA (15 uL, 0.087 mmol, 8 당량) 및　MP-OSu (4.3 mg, 0.0163 mmol, 1.5 당량) 둘 모두를 반응물에 첨가하였다. 용액을 실온에서 30 분 동안 교반하고, DCM (100 uL) 중 20% TFA로 켄칭하고, prepHPLC (방법 G, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)에 의해 2x TFA 염으로서의 25 (5.7 mg, 0.0048 mmol, 45% 수율)로 정제하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 951.4 (이론치); 951.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.18 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(2-(1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)에톡시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 26)의 합성.
26a의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알을 2b (100 mg, 0.462 mmol, 1 당량) 및　포타슘 카보네이트 (191 mg, 1.39 mmol, 3 당량)로 충전한 다음, tert-부틸 3-(2-브로모에틸)아제티딘-1-카복실레이트 (152 mg, 0.577 mmol, 1.25 당량)를 첨가하였다. 출발 물질을　DMF (3 mL)에 용해시키고, 바이알을 파라필름으로 밀봉하고, 70oC에서 24 시간 동안 교반하였다. 조질의 물질을　 포화 암모늄 클로라이드 (100 mL) 및 EtOAc (100 mL 각각)를 함유하는 분별 깔대기에 붓고, 진탕하고, 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (2x100 mL)로 추출하였다. 조합된 유기 분획을 염수 (2x50 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 조질의 생성물을 담-황색 고체로서 제공하였다. 조질의 생성물을 플래시 크로마토그래피　(25g Sfar HC Duo SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 20% MeOH)로 정제하여,　26a를 황색 고체 (86 mg, 0.215 mmol, 47% 수율)로서 제공하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 400.1 (이론치); 400.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.79 분.
26b의 합성
오븐-건조된 2 mL 마이크로파 바이알을　25a (35 mg, 0.0875 mmol, 1 당량),　5a (62 mg, 0.175 mmol, 2 당량) 및　소듐 카보네이트 (28 mg, 0.263 mmol, 3 당량)로 충전하고, 이 바이알에　n-부탄올 (1 mL) 및　DIPEA (0.1 mL, 0.5 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고, 140℃까지 3 시간 동안 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 그런 다음, 반응물을 셀라이트 위에서 여과하여, 1:1 MeOH:DCM (100 mL)으로 세척하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 조질의 재료를 셀라이트에 로딩하였다. 생성물을 플래시 크로마토그래피　(25g Sfar HC Duo SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 20% MeOH)로 정제하여, 25b를 밝은 적색 고체 (38 mg, 0.0592 mmol, 68 % 수율)로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 644.3 (이론치); 644.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.72 분.
26c의 합성
오븐-건조된 4 mL 바이알을 25b (38 mg, 0.0592 mmol, 1 당량)로 충전하고, 이를 메탄올 (1 mL)에 용해시키고, 소듐 바이카보네이트 (90 mg, 1.1 mmol, 18 당량)를 첨가한 다음, 소듐 하이드로설파이트 (186 mg, 1.07 mmol, 18 당량)를 물 (1 mL) 중 용액으로서 첨가하였다. 반응물을 50℃까지 1 시간 동안 가열하고, 셀라이트 위에서 여과하여, 1:1 DCM:MeOH (50 mL)로 세척하였다. 조질의 생성물을 셀라이트에 로딩하고, 플래시 크로마토그래피　(25g Sfar HC Duo, SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 40% 10:1 MeOH:NH4OH)로 정제하여, 25c (10 mg, 0.017 mmol, 29% 수율)를 담황색 고체로서 제공하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 584.3 (이론치); 584.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.18 분.
26d의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL 바이알을　25c (10 mg, 0.017 mmol, 10 당량)로 충전하고, 이를 메탄올 (0.5 mL)에 용해시키고,　시아노겐 브로마이드 (0.050 mL, 0.150 mmol, DCM 중 3 M, 8.7 당량)를 첨가하였다. 반응물을 18 시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 담회색 고체로서 25d 및 2x HBr 염 (13 mg, 0.0165 mmol, 95% 수율)을 제공하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 사용하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 634.3 (이론치); 634.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.98 분.
26e의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL 바이알을　25d (13 mg, 0.0165 mmol, 1 당량),　HATU (25 mg, 0.066 mmol, 4 당량) 및　2-에틸-5-메틸-피라졸-3-카복실산 (10 mg, 0.066 mmol, 4 당량)로 충전하고, 이를 DMF (0.5 mL)에 용해시킨 다음,　DIPEA (0.050 mL, 0.20 mmol, 17 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 반응물을 아세트산 (100 uL)으로 켄칭하고, 생성물을 prepHPLC (방법 H, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)를 통해 정제하여,　25e를 밝은 황갈색 고체로서의 2x TFA 염 (14 mg, 0.016 mmol, 95% 수율)으로서 제공하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 906.4 (이론치); 906.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.44 분.
26f의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL 바이알을 25e (14 mg, 0.016 mmol, 1 당량)로 충전하고, 이를 DCM (1 mL) 중 20% TFA에 용해시키고, 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여, 25f를 백색 고체로서의 3x TFA 염 (15 mg, 0.013 mmol, 82 % 수율)으로서 제공하고, 생성물을 임의의 추가 정제 없이 사용하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 806.4 (이론치); 806.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.25 분.
26의 합성
[0464] 교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL 바이알을 DMSO (0.5 mL) 중 25f (5.7 mg, 0.0050 mmol, 1 당량) 및 MP-OSu (2.0 mg, 0.00750 mmol, 1.5 당량)로 충전하고,　DIPEA (5 uL, 0.030 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응을 켄칭하고, DCM (100 uL) 중 20% TFA를 첨가하고, 생성물을 prepHPLC (방법 G, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하여, 25를 백색 고체로서의 2x TFA 염 (3.8 mg, 0.00321 mmol, 64% 수율)으로서 제공하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 957.4 (이론치); 957.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.19 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-((1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)옥시)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 27)의 합성.
27a의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알을 TFA 염으로서의 2b (150 mg, 0.454 mmol, 1 당량),　tert-부틸 3-(3-브로모프로폭시)아제티딘-1-카복실레이트 (133 mg, 0.454 mmol, 1 당량) 및　포타슘 카보네이트 (141 mg, 1.02 mmol, 2.3 당량)로 충전하고, 이를 DMF (4.5 mL)에 용해시키고, 55℃까지 24 시간 동안 가열하였다. 반응물을 포화 NaHCO3 (100 mL) 및 EtOAc (100 mL)를 함유하는 분별 깔대기에 붓고, 진탕하고, 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (3x50 mL)로 추출하였다. 유기 분획을 조합하고, 포화 NaHCO3 (3x50 mL) 및 염수 (2x50 mL)로 추가로 세척하였다. 그런 다음, 이들을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 27a (194 mg, 0.353 mmol, 78% 수율)를 담황색 고체로서 출발 재료 대 생성물의 4:1비로 만들고, 추가 정제 없이 사용하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 430.1 (이론치); 430.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.82 분.
27b의 합성
오븐-건조된 5 mL 마이크로파 바이알을 소듐 카보네이트 (144 mg, 1.36 mmol, 3.00 eq), 2x HCL 염으로서의　5a (240 mg, 0.678 mmol, 1.50 eq) 및　27a (194 mg, 0.452 mmol, 1 당량)로 충전한 다음, 1-부탄올 (4 mL) 및　DIPEA (0.5 mL, 2.7 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고, 140℃까지 3 시간 동안 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 용액을 셀라이트 위에서 여과하여, 1:1 MeOH:DCM (100 mL)으로 세척하였다. 조질의 생성물을 셀라이트에 로딩하고, 플래시 크로마토그래피　(25g Sfar HC Duo, SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 20% MeOH)로 정제하여, 27b (95 mg, 0.141 mmol, 31% 수율)를 밝은 적색 고체로서 제공하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 674.3 (이론치); 674.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.73 분.
27c의 합성
20 mL 바이알을　27b (95 mg, 0.141 mmol, 1 당량) 및　소듐 바이카보네이트 (442 mg, 5.3 mmol, 37 당량)로 충전하고, 출발 재료를 메탄올 (4 mL)에 용해시켰다. 바이알에　소듐 하이드로설파이트 (442 mg, 2.54 mmol, 18 당량)를 물 (4 mL) 중 용액으로서 첨가하고, 반응물을 대기 개방 상태로,　50℃까지 1 시간 동안 가열하였다. 용액은 1 시간의 경과에 걸쳐 밝은 적색으로부터 담황색으로 변하였다. 반응물을 여과하고, 필터 케이크를 1:1 MeOH:DCM (3x50 mL)으로 세척하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 조질의 생성물을 1:1 MeOH:DCM (100 mL)에 재용해시키고, 셀라이트 위에서 여과하였다. 조질의 생성물을 셀라이트에 로딩하고, 플래시 크로마토그래피　(25g Sfar HC Duo, SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 40% 10:1 MeOH:NH4OH)로 정제하여, 27c (42 mg, 0.0689 mmol, 49% 수율)를 회백색 고체로서 제공하였다.　UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 614.3 (이론치); 614.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.78 분.
27d의 합성
오븐-건조된 4 mL 바이알을 27c (42 mg, 0.0689 mmol, 1 당량)로 충전하고, 이를 메탄올 (1.3 mL)에 용해시킨 다음, 시아노겐 브로마이드 (DCM 중 3 M, 0.14 mL, 0.414 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 바이알을 실온에서 24 시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 27d를 회백색 고체로서의 2x HBr 염 (57 mg, 0.0694 mmol, 정량적 수율)으로서 제공하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 664.3 (이론치); 664.7 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.95 분.
27e의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 4 mL 바이알을 27d (57 mg, 0.0694 mmol, 1 당량),　2-에틸-5-메틸-피라졸-3-카복실산 (43 mg, 0.278 mmol, 4 당량)　및　HATU (106 mg, 0.278 mmol, 4 당량)로 충전하고, 이를　DMF (1 mL)에 용해시킨 다음,　DIPEA (0.097 mL, 0.555 mmol, 8 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 24 시간 동안 교반하고, MeCN (200 uL) 중 20% TFA로 켄칭하고, 생성물을 prepHPLC (방법 I, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하고, 용매를 동결건조를 통해 제거하여, 27e를 황갈색 고체로서의 2x TFA 염 (35 mg, 0.0302 mmol, 43% 수율)으로서 제공하였다.　분석적 순도의 샘플을 제2 prepHPLC 정제 (방법 G, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 60% MeCN)를 통해 제조하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 936.4 (이론치); 936.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.37 분.
27f의 합성
20 mL 바이알을 27e (31 mg, 0.0266 mmol. 1 당량)로 충전하고, 이를　DCM (2 mL) 중 20% TFA에 용해시키고, 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 조질의 생성물을 prepHPLC (방법 H, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하여, 27f를 백색 고체로서의 3x TFA 염 (7.2 mg, 0.0061 mmol, 23% 수율)으로서 제공하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 836.4 (이론치); 836.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.02 분.
27의 합성
오븐-건조된 4 mL 바이알을 27f (DMSO 중 10 mM, 0.50 mL, 0.0050 mmol, 1 당량)에 이어서　MP-OSu (2.0 mg, 0.0075 mmol, 1.5 당량)로 충전하고,　DIPEA (20 uL, 0.12 mmol, 23 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 90 분 동안 교반하고, MeCN (100 uL) 중 20% TFA로 켄칭하고, 조질의 생성물을 prepHPLC (방법 G, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)에 의해 백색 고체로서의 3x TFA 염으로서 27 (3.6 mg, 0.0029 mmol, 58% 수율)로 정제하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 987.4 (이론치); 987.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.23 분.
S-(1-(3-((3-((5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-((E)-4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)아미노)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 28)의 합성.
1.7 mL 에펜도르프 튜브를 25 (DMSO 중 10 mM, 100 uL, 0.00100 mmol, 1 당량)로 충전하고,　L-시스테인 (4:1 DMSO:물 중 15 mM, 150 uL, 0.00300 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응물을 37℃까지 90 분 동안 가열한 다음, 조질의 생성물을 prepHPLC (방법 G, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하여,　28을 백색 고체로서의 2x TFA 염 (1.1 mg, 0.000861 mmol, 86% 수율)으로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1072.4 (이론치); 1072.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.98 분.
S-(1-(3-(3-(2-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)에틸)아제티딘-1-일)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 29)의 합성.
1.7 mL 에펜도르프 튜브를 26 (DMSO 중 10 mM, 100 uL, 0.00100 mmol, 1 당량)으로 충전하고,　L-시스테인 (4:1 DMSO:물 중 15 mM, 150 uL, 0.00300 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응물을 37℃까지 2 시간 동안 가열한 다음, 조질의 생성물을 prepHPLC (방법 G, 0.05% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하여, 29를 백색 고체로서의 2x TFA 염 (0.91 mg, 0.000697 mmol, 70% 수율)으로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1078.4 (이론치); 1078.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.03 분.
S-(1-(3-(3-(3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로폭시)아제티딘-1-일)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 30).
1.7 mL 에펜도르프 튜브를 27 (DMSO 중 10 mM, 100 uL, 0.00100 mmol, 1 당량) 및 L-시스테인 (DMSO 중 100 mM, 30 uL, 0.00300 mmol, 3 당량)으로 충전하고, 용액을　37oC에서　30 분 동안 항온처리하였다. 조질의 생성물을 prepHPLC (방법 G, 0.05%를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하여, 30을 백색 고체로서의 2x TFA 염 (1.2 mg, 0.000913 mmol, 61% 수율)으로서 제공하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1108.4 (이론치); 1108.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.08 분.
아미드 유사체의 라이브러리 합성. 도식 및 일반 방법. 화합물 31 - 60.
HATU 커플링 (일반 방법 4A) DMA (400 μL) 중 카복실산 (4 당량)의 용액에 HATU (6.2 mg, 0.016 mmol, 4 당량) 및 DIPEA (4.3 μL, 0.025 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반한 다음, 화합물 7 (3 mg, 0.0041 mmol, 1 당량)을 혼합물에 첨가하고, 70℃까지 18 시간 동안 가열하였다. 이 지점에서, 아세트산 (4.3 μL)을 첨가하고, 생성된 생성물을 prepHPLC (0.1% FA를 포함하는 물 중 20-50-95% MeCN)로 정제하였다. 모든 분자를 ESI+ 이온화와 함께LC-MS 방법 D를 사용하여 특성화하였다.
COMU 커플링 (일반 방법 4B) DMA (400 μL) 중 카복실산 (4 당량)의 용액에 COMU (7 mg, 0.016 mmol, 4 당량) 및 DIPEA (4.3 μL, 0.025 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반한 다음, 화합물 7 (3 mg, 0.0041 mmol, 1 당량)을 혼합물에 첨가하고, 용액을 40℃까지 18 시간 동안 가열하였다. 이 지점에서, 아세트산을 첨가하고 (4.3 μL), 생성된 생성물을 prepHPLC (0.1% FA를 포함하는 물 중 20-50-95% MeCN)로 정제하였다.
PMB 탈보호 (일반 방법 5) 이전 단계로부터의 생성된 아민을 MeCN 중 50% TFA (0.01 M)에 용해시키고, 30oC에서 30 분 동안 교반하였다. 완료시, 혼합물을 농축하고, 생성물을 prep-HPLC (20-50-95% 물/아세토니트릴 0.1% TFA)로 정제하였다.
아래의 실시예를 위에 명시된 일반 방법을 사용하여 제조하였다.
메틸 4-클로로-3-((4-메톡시벤질)옥시)-5-니트로벤조에이트 (화합물 61)의 합성.
61a의 합성
0℃에서 질소 하에서 DC (60 mL) 중 메틸 4-클로로-3-메톡시-5-니트로벤조에이트 (15 g, 61 mmol, 1 당량)의 용액에 BBr3 (DCM 중 1 M, 153 mL, 153 mmols, 2.5 당량)를 20 분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30 분 동안 교반한 다음, 25℃까지 가온시키고, 추가 12 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 메탄올로 켄칭하고, 진공 하에 농축하여, 61a (12.3 g, 56.5 mmols, 93% 수율)를 짙은 갈색 오일로서 제공하였다. LC-MS (방법 C, ESI+): m/z [M + H]+ = 218.0 (이론치); 217.9 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.21 분.
61b의 합성
메탄올 (800 mL) 중 61a (26.6 g, 122 mmol, 1 당량)의 용액에, 농축된 H2SO4 (600 mg, 6.11 mmol, 0.05 당량)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 12 시간 동안 교반하였다. LCMS 분석 (방법 C)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 진공 하에 농축하였다. 조질의 잔류물을 물 (50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO3 (50 mL)를 조심스럽게 첨가하여, pH > 7을 달성하였다. 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 물 (25 mL)로 세척하고, 진공 하에서 건조시켜, 61b (25 g, 88% 수율)를 갈색 고체로서 제공하였다. LC-MS (방법 C, ESI+): m/z [M + H]+ = 232.0 (이론치); 231.9 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.92 분.
61의 합성
DMF (200 mL) 중 61b (18 g, 78 mmol, 1 당량)의 용액에 Cs2CO3 (27.9 g, 86 mmol, 1.1 당량) 및 1-(클로로메틸)-4-메톡시벤젠 (12.8 g, 82 mmol, 1.05 당량)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. LCMS 분석 (방법 C)은 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응물을 물에 붓고, 여과하고, 고 진공 하에서 건조시켜, 61 (22.3 g, 82% 수율)을 담-황색 고체로서 제공하였다. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ =8.11 (d, J=1.4 Hz, 1H), 7.97 (d, J=1.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J=8.5 Hz, 2H), 6.99 (d, J=8.5 Hz, 2H), 5.33 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.77 (s, 3H).
메틸 (E)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-하이드록시-5-(메톡시카보닐)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 62)의 합성.
62a의 합성
DMSO (150 mL) 중 tert-부틸 (E)-(4-아미노부트-2-엔-1-일)카바메이트 (12.5 g, 67.2 mmol, 1.1 당량)의 용액에 메틸 4-클로로-3-메톡시-5-니트로벤조에이트 (15 g, 61.1 mmol, 1 당량)를 첨가하고, DIPEA (39.5 g, 305 mmol, 5 당량) 혼합물을 100oC 에서 12 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 추출하고, 진공 하에 농축하여, 62a (16.4 g, 41.4 mmols, 68% 수율)를 짙은 적색 고체로서 제공하였다. LC-MS (방법 C, ESI+): m/z [M - tBu]+ = 340.1 (이론치); 340.1 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.08 분.
62b의 합성
62a (21 g, 53.1 mmol, 1 당량)를 에틸 아세테이트 중 HCl의 용액 (4 M, 350 mL, 1400 mmols, 26 당량)에 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하고, 조질의 고체를 EtOAc로 세척하여, 62b를 짙은 적색 고체로서의 HCl 염 (14.5 g, 43.7 mmols, 82% 수율)으로서 제공하였다. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ = 8.19 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.12 (br s, 1H), 8.01 (br s, 3H), 7.46 (d, J=1.6 Hz, 1H), 5.87 (td, J=5.8, 15.5 Hz, 1H), 5.71 - 5.55 (m, 1H), 4.21 (br s, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.42 - 3.35 (m, 2H).
62c의 합성
DMSO (70 mL) 중 61 (4.5 g, 12.8 mmol)의 용액에 62b (4.67 g, 14.1 mmol, HCl 염) 및 DIPEA (8.3 g, 64 mmol, 5 당량)를 첨가하고, 반응물을 80℃에서 10 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 빙수에 붓고, EtOAc로 추출하고, 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 재결정화하여 (에틸 아세테이트, 20V, 환류), 62c (6.4 g, 10.5 mmols, 82% 수율)를 짙은 적색 고체로서 제공하였다. MS (방법 C, ESI+): m/z [M + H]+ = 611.2 (이론치); 611.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.34 분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ = 8.06 (dd, J=1.5, 9.5 Hz, 2H), 7.96 (br d, J=2.9 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.36 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.94 (d, J=8.5 Hz, 2H), 5.53 - 5.29 (m, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.03 (br t, J=5.4 Hz, 4H), 3.84 (s, 6H), 3.76 (d, J=3.5 Hz, 6H).
62d의 합성
MeOH (300 mL) 중 62c (6.0 g, 9.83 mmol, 1 당량)의 용액에 NH4OH (60 mL, H2O 중 28% NH3) 및 Na2S2O4 (20.5 g, 118 mmol, 12 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 교반하였고, 이는 밝은 적색에서 담황색/거의 무색의 불균질 혼합물로 변하였다. 혼합물을 여과하고, 농축하여, MeOH를 제거하고, 나머지 수용액을 EtOAc로 추출하였다. 유기상을 조합하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공 하에 농축하여, 62d (4.0 g, 7.25 mmols, 74% 수율)를 회백색 고체로서 제공하였다. MS (방법 B, ESI+): m/z [M + H]+ = 551.25 (이론치); 551.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.29 분.
62e의 합성
MeOH (200 mL) 중 62d (4.0 g, 7.25 mmol, 1 당량)의 용액에 BrCN (4.62 g, 43.6 mmol, 6 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하였고, 이 지점에서 LC-MS 분석 (방법 C)은 완전한 전환을 나타내었다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하고, 조질의 생성물을 에탄올 및 석유 에테르로 세척하여, 62e를 회백색 고체로서의 2x HBr 염 (2.6 g, 3.53 mmols 49% 수율)으로서 제공하였다. MS (방법 C, ESI+): m/z [M + H]+ = 601.2 (이론치); 601.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.73 분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6): δ = 12.87 (br s, 1H), 8.72 (br d, J=17.0 Hz, 4H), 7.59 (s, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.26 - 7.16 (m, 3H), 6.82 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.70 (br d, J=15.7 Hz, 1H), 5.57 - 5.48 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.83 - 4.73 (m, 4H), 3.88 (s, 6H), 3.71 (s, 3H), 3.65 (s, 3H).
62f의 합성
DMF (30 mL) 중 1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복실산 (3.15 g, 20.5 mmol, 2.6 당량)의 용액에 HATU (8.38 g, 22.0 mmol, 2.8 당량)를 첨가하고, 용액을 60℃에서 10 분 동안 교반하였다. DMF 중 DIPEA (5.09 g, 39 mmol, 5 당량) 및 62e (6.0 g, 7.87 mmol, 1 당량 2x HBr 염), 30 mL)를 함유하는 제2 용액을 제조하고, 활성화된 산에 첨가하였다. 이어서, 반응물을 60℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 용액을 물에 붓고, 여과하고, 아세토니트릴로 배산하여, 62f (2.54 g, 2.91 mmols, 37% 수율)를 회백색 고체로서 제공하였다. MS (방법 C, ESI+): m/z [M + H]+ = 873.4 (이론치); 873.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 3.44 분. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ = 12.88 (br s, 2H), 7.74 (br s, 2H), 7.22 (br s, 1H), 7.16 - 6.97 (m, 3H), 6.66 (br d, J=7.9 Hz, 2H), 6.57 - 6.36 (m, 2H), 5.87 - 5.37 (m, 2H), 4.78 (br s, 6H), 4.51 (br dd, J=7.0, 17.3 Hz, 4H), 3.85 (s, 6H), 3.59 (s, 3H), 3.52 (br s, 3H), 2.10 (br d, J=11.1 Hz, 6H), 1.26 (td, J=6.8, 18.8 Hz, 6H).
62의 합성
교반 막대가 있는 오븐-건조된 4 mL 바이알을 62f (9 mg, 0.010 mmols, 1 당량)로 충전하고, 이를 1:1 MeCN:TFA (1 mL)에 용해시키고, 1 시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 고-진공에서 밤새 건조시켜, 62 (7.5 mg, 0.0099 mmols, 정량적 수율)를 황갈색 고체로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 753.3 (이론치); 753.7 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.99 분.
(E)-1-(4-(5-카복시-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-하이드록시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실산 (화합물 63)의 합성.
63a의 합성
화합물 62f (100 mg, 0.115 mmols, 1 당량)를 아세토니트릴 (1 mL)에 용해시키고, 1 M LiOH (1 mL, 1 mmol, 9 당량)를 첨가하고, 용액을 80℃까지 1 시간 동안 가열하였다. 바이알을 냉각시키고, 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 prepHPLC (방법 I, 0.1% TFA를 포함하는 물 중 5 - 95% MeCN)로 정제하여, 63a (78 mg, 0.092 mmols, 97% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 845.3 (이론치); 845.8 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.95 분.
63의 합성
화합물 63을 이전에 기재된 바와 같이 제조하였다 ("62의 합성" 참고). MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 725.3 (이론치); 725.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.83 분.
(E)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-하이드록시-5-(메톡시카보닐)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실산 (화합물 64) 및 (E)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-5-(메톡시카보닐)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-하이드록시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실산 화합물 65)의 합성.
64a 및 65a의 합성
화합물 64a 및 65a의 불분리성 1:1 혼합물을 소듐 하이드록시드를 리튬 하이드록시드로 치환하고, 반응을 50% 전환율로 켄칭한 다음, prepHPLC (0.1% FA를 이용한 방법 H)를 통해 정제하는 이전에 기재된 바와 같이 제조하였다 ("65a의 합성" 참고). MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 859.4 (이론치); 859.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.46 분.
64 및 65의 합성
화합물 64a 및 65a의 불분리성 1:1 혼합물을 이전에 기재된 바와 같이 제조하였다 ("65a의 합성" 참고). MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 739.4 (이론치); 739.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.99 및 2.04 분.
메틸 (E)-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-5-(메톡시카보닐)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 66)의 합성
66a의 합성
화합물 62 (397 mg, 0.527 mmol, 1 당량), tert-부틸 (3-브로모프로필)(메틸)카바메이트 (146 mg, 0.580 mmol, 1.1 당량) 및 포타슘 카보네이트 (218 mg, 1.58 mmol, 3 당량)를 20 mL 바이알 중 DMF (5.3 mL)에 용해시켰다. 반응물을 55oC에서 18 시간 동안 교반한 다음, 혼합물을 여과하여 메탄올로 세척하고, 여과액을 진공 하에 농축하였다. 조질의 고체에 차가운 물을 첨가하고, 침전물을 여과를 통해 단리하여, 66a (232 mg, 0.251 mmol, 48% 수율)를 제공하였다. MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 924.4 (이론치); 924.9 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.42 분.
66b의 합성
화합물 66a (232 mg, 0.251 mmol, 1 당량)를 메탄올 (2.5 mL)에 용해시키고, 디옥산 중 4 M HCl을 첨가하였다 (0.5 mL, 2.01 mmol, 8 당량). 반응물을 30oC에서 90 분 동안 교반하였다. 용매는 진공 상태에 있었고, 조질의 생성물을 prepHPLC (0.05% TFA를 이용한 방법 I)로 정제하여, 66b (206 mg, 0.24 mmol, 96% 수율)를 제공하였다. MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 824.4 (이론치); 824.9 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.56 분.
66의 합성
화합물 66 (25 mg, 0.0291 mmol, 1 당량) 및 MP-OSu (11.6 mg, 0.0436 mmol, 1.5 당량)를 DMA (0.58 mL)에 용해시키고, DIPEA (20 μL, 0.116 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 prepHPLC (0.05% TFA를 이용한 방법 H)로 직접 정제하여, 66을 백색 고체 (10.88 mg, 0.0112 mmol, 38% 수율)로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 975.4 (이론치); 975.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.24 분.
(2S,3S,4S,5R,6S)-6-(3-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)-4-((((3-((2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-((E)-4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-5-(메톡시카보닐)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-5-(메톡시카보닐)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)카바모일)옥시)메틸)페녹시)-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-카복실산 (화합물 67)의 합성
67a의 합성
화합물 13a (65 mg, 0.0868 mmol, 1.4 당량) 및 비스(펜타플루오로페닐)　카보네이트 (120 mg, 0.304 mmo, 5 당량)를 DMA (0.43 mL)에 용해시키고, DIPEA (70 μL, 0.404 mmol, 6.7 당량)를 첨가하였다. 반응물을 30 분 동안 교반한 다음, 66b (52 mg, 0.0607 mmol, 1 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 용액을 H2O로 희석하고, EtOAc (3x)로 추출하고, 조합된 유기물을 1 M HCl (3x)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공 하에 제거하여, 조질의 고체를 제공하였다. 이 물질을 DMSO에 용해시키고, prepHPLC (0.05% TFA를 이용한 방법 H)로 정제하여, 67a를 백색 고체 (33.1 mg, 0.0207 mmol, 34% 수율)로서 제공하였다. LCMS (방법 D, ESI+) m/z [M+H]+ 1598.6 (이론치), 1598.6 (관측치). LCMS 체류 시간 2.65 분.
MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1598.6 (이론치); 1598.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.65 분.
67b의 합성
화합물 67a (33.1 mg, 0.0207 mmol)를 무수 메탄올 (0.21 mL)에 용해시키고, 빙조에서 냉각시키고, MeOH 중 0.5 M NaOMe (41.5 μL, 0.0414 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 반응물을 LCMS (방법 D)로 모니터링하고, 전체 아세테이트 탈보호시, 1M LiOH (62 μL, 0.0621 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 반응물을 LCMS (방법 E)로 모니터링하면서 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 완전 전환시, 아세트산 (62 μL)을 첨가하고, 용매를 진공 하에 제거하고, 조질의 생성물을 prepHPLC (0.05% TFA를 이용한 방법 H)로 정제하여, 67b를 백색 고체 (10.1 mg, 0.0075 mmol, 36% 수율)로서 제공하였다. LCMS (방법 D, ESI+) m/z [M+H]+ 1236.5 (이론치), 1236.5 (관측치). LCMS 체류 시간 2.31 분.
MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 1236.5 (이론치); 1236.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.31 분.
67의 합성
화합물 67b (10.1 mg, 0.0075 mmol, 1 당량) 및 MP-OSu (3.0 mg, 0.0112 mmol, 1.5 당량)를 DMA (150 μL)에 용해시키고, DIPEA (4μL, 0.0224 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 30 분 동안 실온에서 교반하였고, 이 지점에서 아세트산 (4 μL)을 첨가하고, 혼합물을 prepHPLC (방법 G, 0.05% TFA를 포함)를 통해 정제하여, 67을 백색 고체 (3.3 mg, 0.0024 mmol, 32% 수율)로서 수득하였다. LCMS (방법 E, ESI+) m/z [M+H]+ 1387.5 (이론치), 1387.5 (관측치). LCMS 체류 시간 1.92 분.
MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1387.5 (이론치); 1387.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.92 분.
(E)-1-(4-(5-카복시-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실산 (화합물 68)의 합성
68a의 합성
화합물 66b (30 mg, 0.032 mmol)를 메탄올 (0.32 mL)에 용해시키고, 1M LiOH (0.256 mL, 0.256 mmols, 8 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 80oC에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하고, prepHPLC (0.05% TFA를 이용한 방법 H)를 통해 정제하여, 68a를 백색 고체 (17.4 mg, 0.0191 mmol, 60% 수율)로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 796.4 (이론치); 796.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.83 분.
68의 합성
화합물 68a (16.7 mg, 0.0183 mmol, 1 당량) 및 MP-OSu (7.3 mg, 0.0275 mmol, 1.5 당량)를 DMA (0.37 mL)에 용해시키고, DIPEA (10 μL, 0.0574 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, AcOH (10 μL)를 첨가하고, 조질의 생성물을 prepHPLC (0.05% TFA를 이용한 방법 H)를 통해 정제하여, 68을 백색 고체 (7.6 mg, 0.0080 mmol, 44% 수율)로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 974.4 (이론치); 974.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.42 분.
1-((E)-4-(5-카복시-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-((((4-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6-카복시-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-2-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)벤질)옥시)카보닐)(메틸)아미노)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실산 (화합물 69)의 합성
69a의 합성
화합물 69a를 이전에 기재된 바와 같이 제조하였다 ("67a의 합성" 참고). MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1570.6 (이론치); 1570.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.95 분.
69b의 합성
화합물 69b를 이전에 기재된 바와 같이 제조하였다 ("67b의 합성" 참고). MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1208.5 (이론치); 1208.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.48 분.
69의 합성
화합물 69를 이전에 기재된 바와 같이 제조하였다 ("67의 합성" 참고). MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1359.5 (이론치); 1359.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.68 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(3-모르폴리노프로폭시)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 70)의 합성
70 의 합성
무수 DCM (0.10 mL) 중 화합물 A (6 mg, 0.00706 mmol)의 용액에 BBr3 (0.04 mL, DCM 중 1 M)를 적가하였다. 형성된 슬러리를 밤새 30oC에서 아르곤 하에서 교반하였다. 반응물을 UPLC-MS로 모니터링하였다. 완료시, 차가운 물 (0.10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 격렬하게 교반하였다. 30 분 후, 용매를 증발시키고, 생성물을 첨가제로서 포름산을 사용하여 prepHPLC (방법 G)로 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 화합물 70 (5.14 mg, 0.00528 mmol, 75% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 836.9 (이론치), 836.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.34 분.
화합물 17-24의 시스테인 부가물을 다음의 방법을 사용하여 제조하였다.
일반 방법 6. 말레이미드의 10 mM 용액을 1 당량의 L-시스테인 (물 중 100 mM)과 37oC에서 1 시간 동안 항온처리하고, 생성물을 임의의 추가 정제 없이 사용하였다.
tert-부틸 (3-(5-카바모일-2-클로로-3-니트로페녹시)프로필)(메틸)카바메이트 (화합물 77)의 합성
교반 막대가 있는 화염-건조된 100 mL RB를 DMF (10 mL) 중　2b (1.0 g, 4.62 mmol, 1 당량)의 용액, 포타슘 카보네이트 (830 mg, 6.00 mmol, 1.3 당량) 및　DMF (5 mL) 중 tert-부틸 N-(3-브로모프로필)-N-메틸-카바메이트 (1.20 eq, 1.40 g, 5.54 mmol, 1.20 당량)의 용액으로 충전하였다. 추가적인 DMF를 첨가하여, 총 부피를 45 mL로 만들고, 반응물을 70℃까지 24 시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고, 셀라이트 위에서 여과하여, DMF (3x10 mL)로 세척하였다. 이 용액을 빙수 (900 mL)에 붓고, 90 분 동안 교반하고, 조질의 생성물을 여과를 통해 단리하였다. 마지막으로, 여과액을 차가운 물 (300 mL)로 세척하고, 진공 하에 밤새 건조시켜, 77 (1.23 g, 3.16 mmol, 68% 수율)을 제공하였다.
tert-부틸 (E)-(3-((2-아미노-5-카바모일-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)카바메이트 (화합물 78)의 합성
78a의 합성
교반 막대가 있는 500 mL 둥근 바닥 플라스크를 4a (3.0 g, 7.9 mmol, 1 당량)　및　소듐 바이카보네이트 (12.5 g, 148 mmol, 19 당량)로 충전하고, 에탄올 (105 mL)을 첨가하여, 불균질 용액을 제공하였다. 이 용액을 빙조에서 냉각시키고, 105 mL 물 중 소듐 하이드로설파이트 (25.8 g, 148 mmol, 19 당량)의 용액을 내부 온도를 10oC 미만으로 유지하는 속도로 적가하였다. 혼합물을 대기 개방 상태로　45℃까지 1 시간 동안 가열하고, 실온까지 냉각시켰다. 혼합물을 셀라이트 위에서 여과하여, EtOH (100 mL)로 세척하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조질의 재료를 1:1 DCM:MeOH (200 mL)에 재용해시키고, 셀라이트 위에서 여과하고, 용매를 진공 하에 제거하였다. 이 과정을 한 번 더 반복한 다음, 조질의 생성물을 셀라이트에 로딩하고, 플래시 크로마토그래피 (50g Sfar HC Duo, SiO2 컬럼,　DCM 중 0　-　40% 10:1 NH4OH:MeOH)로 정제하여, 78a (1.45 g, 4.13 mmol, 52% 수율)를 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 351.2 (이론치); 351.1 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.53 분.
78b의 합성
오븐-건조된 200 mL 둥근 바닥 플라스크를 78a (1.95 g, 5.58 mmol, 1 당량)로 충전하고, 이를 메탄올 (45 mL)에 용해시키고,　시아노겐 브로마이드 (DCM 중 3 M, 5.6 mL, 16.7 mmol, 3 당량)를 첨가하여, 황색 균질 용액을 제공하였다. 반응물을 실온에서 48 시간 동안 교반하고, 용매를 진공 하에 제거하여,　78b를 HBr 염 (2.48 g, 5.44 mmol, 98% 수율)으로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 376.2 (이론치); 376.1 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.71 분.
78c의 합성
교반 막대가 있는 화염 건조된 40 mL 바이알을　78b HBr (867 mg, 1.90 mmol, 1 당량),　2-에틸-5-메틸-피라졸-3-카복실산 (879 mg, 5.70 mmol, 3 당량), 및　HATU (2.17 g, 5.70 mmol, 3 당량)로 충전하였다. 고체를 DMF (15 mL)에 용해시킨 다음,　DIPEA (2.0 mL, 11.4 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 용액을 NH4OH (물 중 28% NH3, 10 mL)와 함께 빙냉수 (450 mL)에 붓고, 4oC에서 밤새 침전되도록 두었다. 백색 침전물을 여과를 통해 단리하고, 진공 하에 밤새 건조시켜,　78c (658 mg, 1.29 mmol, 68% 수율)를 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 512.3 (이론치); 512.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.35 분.
78d의 합성
교반 막대가 있는 오븐 건조된 8 mL 바이알에 78c (800 mg, 1.56 mmol, 3 당량)를 충전하고, 이를　MeOH 중 3M HCl (5.2 mL, 15.6 mmol HCl, 10 당량)에서　1 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여,　78d를 2xHCl 염 (700 mg, 1.56 mmol, 정량적 수율)으로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 412.2 (이론치); 412.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 0.73 분.
78e의 합성
오븐-건조된 20 mL 마이크로파 바이알을　78e (700 mg, 1.56 mmol, 1 당량),　77 (909 mg, 2.34 mmol, 1.5 당량) 및　소듐 카보네이트 (497 mg, 4.69 mmol, 3 당량)로 충전하고, 혼합물에　1-부탄올 (15 mL) 및　DIPEA (1.6 mL, 9.38 mmol, 6 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고, 마이크로파 반응기에서 140oC에서 3 시간 동안 가열하여, 밝은 적색 불균질 혼합물을 제공하였다. 혼합물을 DCM (100 mL)에 붓고, 셀라이트 위에서 여과하여, DCM (50 mL) 및 MeOH (50 mL)로 세척하였다. 조질의 생성물을 셀라이트에 로딩하고, 플래시 크로마토그래피　(50g Sfar HC Duo, SiO2 컬럼,　DCM 중 0 - 20% MeOH)를 통해 정제하여, 78e (569 mg, 0.746 mmol, 48% 수율)를 밝은 적색 고체로서 제공하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 763.4 (이론치); 763.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.17 분.
78f의 합성
메탄올 (8 mL) 중　78e (569 mg, 0.746 mmol, 1 당량)　및　NH4OH (2.0 mL, 물 중 28% NH3)의 혼합물에　물 (8 mL) 중 소듐 하이드로설파이트 (2.34 g, 13.4 mmol, 18 당량)의 용액을 첨가하였다. 이 용액을　50oC에서　1 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 물 (250 mL) 및 EtOAc (250 mL)를 함유하는 분별 깔대기에 부었다. 혼합물을 진탕하고, 층을 분리하고, 수성층을 추가로 EtOAc (3x100 mL)로 추출하였다. 유기물을 조합하고, 염수 (2x100 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시켜, 여과하고, 용매를 진공 하에 제거하여,　　78f (400 mg, 0.546 mmol, 73% 수율)를　황갈색 고체로서 제공하였다.　MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 733.4 (이론치); 733.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.39 분.
78의 합성
메탄올 (5.5 mL) 중　78f (1.00 eq, 400 mg, 0.546 mmol)의 용액에 시아노겐 브로마이드 (DCM 중 3 M, 0.55 mL, 1.65 mmol, 3 당량)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여, 78을 HBr 염 (456 mg, 0.544 mmol, 정량적 수율)으로서 제공하였다. MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 758.4 (이론치); 758.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.19 분.
아미드 유사체의 라이브러리 합성, 그룹 번호 2. 도식 및 일반 방법. 화합물 71 - 95.
COMU 커플링 (일반 방법　7A):　2 mL 마이크로파 바이알을 DMA (0.50 mL) 중 화합물 78 (20 mg, 0.0238 mmol, 1 당량)의 용액으로 충전하였다. 각각의 카복실산 (2 당량), COMU (20.4 mg, 0.0477 mmol, 2 당량) 및 DIPEA (20.8　μL, 0.119 mmol, 5 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고, 80℃까지 마이크로파 반응기에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다.　완료시, 아세트산 (20 μL)을 첨가하고, 생성된 생성물을 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 H)로 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 생성물을 백색 고체로서 제공하였다.
HATU 커플링 (일반 방법　7B):　2 mL 마이크로파 바이알을 DMA (0.50 mL) 중 화합물 78 (20 mg, 0.0238 mmol, 1 당량)의 용액으로 충전하였다. 각각의 카복실산 (4 당량), HATU (36.3 mg, 0.0954 mmol, 2 당량) 및 DIPEA (20.8　μL, 0.119 mmol, 5 당량)를 첨가하였다. 바이알을 밀봉하고, 80℃까지 마이크로파 반응기에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다.　완료시, 아세트산 (20 μL)을 첨가하고, 생성된 생성물을 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 H)로 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 생성물을 백색 고체로서 제공하였다.
Boc 탈보호 (일반 방법 8): 일반 방법 7A 또는 7B의 생성된 생성물을 MeOH (0.01 M)에 용해시키고, 이에 디옥산 중 4 M HCl (8 당량)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, 용액을 농축하고, DMSO에 재용해시키고, 첨가제로서 TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 G 또는 H)를 통해 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 생성물을 백색 고체로서 제공하였다.
말레이미드 커플링 (일반 방법 9): 이전 반응물로부터의 생성된 아민 (화합물 79 - 95)을 DMSO (0.01 M)에 용해시키고, 이에 MP-OSu (2 당량) 및 DIPEA (5 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 30oC에서 밤새 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)로 모니터링하였다. 완료시, 생성된 생성물을 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 G)를 통해 정제하였다.
메틸 (E)-1-(4-(5-카바모일-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 113)의 합성.
메틸 (E)-3-아미노-4-((4-((tert-부톡시카보닐)아미노)부트-2-엔-1-일)아미노)-5-메톡시벤조에이트 (화합물 113a)의 합성
화합물 62a (500 mg, 1.26 mmol, 1 당량)를 MeOH (20 mL) 및 NH4OH (6 mL)에 용해시켰다. H2O (5 mL) 중 Na2S2O4 (1.10 g, 6.32 mmol, 5 당량)를 천천히 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)로 모니터링하였다. 완료시, 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 생성된 생성물을 EtOAc에 재용해시키고, H2O로 세척하였다 (x3). 유기물을 수집하고, MgSO4로 건조시키고 -, 여과하고, 농축하여, 화합물 113a (343 mg, 0.938 mmol, 74% 수율)를 황색 고체로서 제공하였다. 생성된 생성물을 추가 정제 없이 사용하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 366.2 (이론치), 366.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.54 분.
메틸 (E)-2-아미노-1-(4-((tert-부톡시카보닐)아미노)부트-2-엔-1-일)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 하이드로브로마이드 (화합물 113b)의 합성
화합물 113a (343 mg, 0.938 mmol, 1 당량)를 MeOH (9.3 mL)에 용해시키고, 이에 CNBr (MeCN 중 3 M, 0.374 mL, 1.2 당량)을 첨가하였다. 반응물을 18 시간 동안 실온에서 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)로 모니터링하였다. 완료시, 용액을 농축하여, 화합물 113b (402 mg, 0.853 mmol, 91% 수율)를 제공하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 391.2 (이론치), 391.1 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.51 분.
메틸 (E)-1-(4-((tert-부톡시카보닐)아미노)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 113c)의 합성
화합물 113b (402 mg, 0.853 mmol, 1 당량), 1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복실산 (394 mg, 2.56 mmol, 3 당량) 및 HATU (973 mg, 2.56 mmol, 3 당량)를 5 mL 마이크로파 바이알 중 DMA (1.7 mL)에 용해시켰다. DIPEA (0.74 mL, 4.26 mmol, 5 당량)를 첨가하고, 반응물을 80℃까지 마이크로파 반응기에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, 반응 혼합물을 빙냉수 (300 mL)에 천천히 첨가하여, 화합물 113c (295 mg, 0.560 mmol, 66% 수율)를 침전시키고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 527.3 (이론치), 527.1 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.30 분.
메틸 (E)-1-(4-아미노부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 113d)의 합성
화합물 113c (319 mg, 0.606 mmol, 1 당량)를 MeOH (1 mL)에 용해시키고, 이에 디옥산 중 HCl (4 M, 1.2 mL, 4.85 mmol, 8 당량)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30 분 동안 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)로 모니터링하였다. 완료시, 용액을 농축하고, 화합물 113d (280 mg, 0.605 mmol, 정량적 수율)를 추가 정제 없이 사용하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 427.2 (이론치), 427.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.54 분.
메틸 (E)-1-(4-((2-(3-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)프로폭시)-4-카바모일-6-니트로페닐)아미노)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 113e)의 합성
화합물 113d (280 mg, 0.605 mmol, 1 당량) 및 화합물 77 (305 mg, 0.787 mmol, 1.3 당량)을 DMSO (3.0 mL)에 용해시키고, 이에 DIPEA (0.316 mL, 1.82 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 반응물을 80oC에서 18 시간 동안 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, AcOH (0.30 mL)를 첨가하고, 생성물을 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 I)로 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 화합물 113e (58.6 mg, 0.0753 mmol, 12% 수율)를 주황색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 778.3 (이론치), 778.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.88 분.
메틸 (E)-1-(4-((2-아미노-6-(3-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)프로폭시)-4-카바모일페닐)아미노)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 113f)의 합성
화합물 113e (58.6 mg, 0.0753 mmol, 1 당량)를 AcOH/DCM의 1:1 혼합물 (0.75 mL)에 용해시키고, 0℃까지 냉각시켰다. Zn (49.2 mg, 0.753 mmol, 10 당량)을 첨가하고, 혼합물을 30 분 동안 교반하면서 실온까지 가온시켰다. 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, 용액을 농축하고, DCM에 재용해시켜, 플래시 크로마토그래피 (25g SiO2 컬럼, DCM 중 0 - 40% MeOH:NH4-OH (10:1))로 정제하여, 화합물 113f (28.3 mg, 0.378 mmol, 50% 수율)를 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 748.4 (이론치), 748.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.84 분.
메틸 (E)-1-(4-(2-아미노-7-(3-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)프로폭시)-5-카바모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 113g)의 합성
화합물 113f (28.3 mg, 0.378 mmol, 1 당량)를 MeOH (0.38 mL)에 용해시키고, 이에 CNBr (MeCN 중 3 M, 15 μL, 0.0454 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 18 시간 동안 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, 용액을 농축하여, 생성물 113g (30.7 mg, 0.360 mmol, 정량적 수율)를 제공하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 773.4 (이론치), 773.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.53 분.
메틸 (E)-1-(4-(7-(3-((tert-부톡시카보닐)(메틸)아미노)프로폭시)-5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 H)의 합성
화합물 113g (30.7 mg, 0.0360 mmol, 1 당량), 1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복실산 (22.1 mg, 0.144 mmol, 4 당량), 및 HATU (54.6 mg, 0.144 mmol, 4 당량)를 2 mL 마이크로파 바이알 중 DMA (0.50 mL)에 용해시켰다. DIPEA (0.025 mL, 0.144 mmol, 4 당량)를 첨가하고, 반응물을 마이크로파 반응기에서 80oC에서 1 시간 동안 가열하였다. 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, 생성물을 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 H)로 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 화합물 113h (6.52 mg, 0.0064 mmol, 18% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 909.4 (이론치), 909.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.90 분.
메틸 (E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(3-(메틸아미노)프로폭시)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실레이트 (화합물 113i)의 합성
화합물 113h (3.02 mg, 0.0030 mmol, 1 당량)를 MeOH (0.30 mL)에 용해시키고, 이에 디옥산 중 HCl (4 M, 6.00 μL, 0.0236 mmol, 8 당량)을 첨가하였다. 반응물을 30 분 동안 실온에서 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, 생성물을 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 G)를 통해 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 화합물 113i (1.35 mg, 0.0013 mmol, 44% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 809.4 (이론치), 809.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.57 분.
화합물 113i (7.53 mg, 0.0085 mmol, 1 당량) 및 MP-OSu (4.55 mg, 0.0171 mmol, 2 당량)를 DMA (0.854 mL)에 용해시키고, DIPEA (42.7 μL, 0.0074 mmol, 5 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 18 시간 동안 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)로 모니터링하였다. 완료시, AcOH (42 μL)를 첨가하고, 생성물을 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 G)를 통해 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 화합물 113 (4.43 mg, 0.0041 mmol, 48% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 960.4 (이론치), 960.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.79 분.
링커 라이브러리 합성 (화합물 114 - 124).
아미드 커플링 (일반 방법 10): 화합물 12a (1 당량), HATU (2 당량), DIPEA (5 당량), 적절한 L-아미노산 (2 당량)의 혼합물을 DMF (12a 중 0.02 M)에서 제조하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성된 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
Fmoc 탈보호 (일반 방법 11): 생성된 Fmoc-보호된 아민을 DMF (1 mL) 중 20% 피페리딘에 용해시키고, 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 생성물을 prep HPLC (방법 H, 0.05% TFA 중 H2O 중 5 - 95%의 MeCN)를 통해 정제하였다.
약물-링커 (화합물 121 - 125)를 함유하는 말레이미드의 합성을 일반 방법 9에 따라 수행하였다.
(E)-1-(4-(5-카바모일-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실산 (화합물 126).
화합물 126a의 합성
화합물 113h (25.44 mg, 0.0249 mmol, 1 당량)를 MeOH (166 μL)에 용해시켰다. 1 M LiOH (200 μL, 8 당량)의 수용액을 첨가하고, 반응물을 80oC에서 2 시간 동안 교반하였다. 완료시, 용액을 감압 하에서 농축하고, 첨가제로서 0.05% TFA를 사용하여 prepHPLC (방법 H)로 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 화합물 126a (7.1 mg, 0.0071 mmol, 28% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 895.4 (이론치), 895.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.97 분.
화합물 126b의 합성
화합물 126b를, 화합물 113i를 제조하기 위해 사용된 동일한 절차에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 795.4 (이론치), 795.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.40 분.
화합물 126의 합성
화합물 126을 화합물 113을 제조하기 위해 사용된 동일한 절차에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 946.4 (이론치), 946.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.68 분.
tert-부틸 (E)-(3-((5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-(N-메틸설파모일)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)카바메이트 (화합물 127)의 합성.
화합물 127을 4-클로로-N-메틸-3-니트로벤젠설폰아미드를 4-클로로-3-니트로벤젠설폰아미드로 치환하는 화합물 25f와 동일한 절차에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 914.4 (이론치), 914.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.80 분.
(E)-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-(N-메틸설파모일)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 128)의 합성.
128a의 합성
화합물 128a를, 화합물 66b를 제조하기 위해 사용된 동일한 절차에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 814.4 (이론치), 814.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.53 분.
128의 합성
화합물 128을 화합물 12를 제조하기 위해 사용된 동일한 절차에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 965.4 (이론치), 965.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.60 분.
S-(1-(3-((3-((5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-((E)-4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-5-(메톡시카보닐)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)아미노)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 129)의 합성
화합물 129를 일반 방법 6에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1081.4 (이론치), 1081.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.88 분.
1-((E)-4-(7-(3-(3-(3-(((R)-2-아미노-2-카복시에틸)티오)-2,5-디옥소피롤리딘-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복실산 (화합물 130)의 합성.
화합물 130을 일반 방법 6에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1067.4 (이론치), 1067.6 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.49 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸헥산아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 131)의 합성.
화합물 131을 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노에이트를 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노에이트로 치환하는 화합물 12와 동일한 절차에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 987.5 (이론치), 987.7 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.85 분.
S-(1-(6-((3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로필)(메틸)아미노)-6-옥소헥실)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 132)의 합성.
화합물 132를 일반 방법 6에 따라 제조하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1108.5 (이론치), 1108.7 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.42 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(N-사이클로프로필-3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 133)의 합성.
133a의 합성
오븐-건조된 4 mL 바이알을 1 (10 mg, 0.0105 mmol, 1 당량), 포타슘 카보네이트 (7.3 mg, 0.0526 mmol, 5 당량), 및　tert-부틸 N-(3-브로모프로필)-N-사이클로프로필-카바메이트 (0.49 mL의 DMF 중 9 mg/mL 용액, 0.0158 mmol, 1.50 당량)로 충전하고, 출발 재료를 DMF (0.50 mL)에 용해시켰다.　 반응물을 밤새 55oC에서 교반하고, 분취용 HPLC (방법 B)로 정제한 후, 이를 냉동 및 동결건조시켜, 화합물 133a (8.8 mg, 0.0077 mmol, 73% 수율)를 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 920.45 (이론치), 920.64 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.32 분.
133b의 합성
오븐-건조된 4 mL 바이알을 133a (8.8 mg, 0.0077 mmol) 및 DCM (100 L) 중 20% TFA로 충전하였다. 반응물을 30 분 동안 실온에서 교반하고, 분취용 HPLC (방법 B)로 정제한 후, 이를 냉동 및 동결건조시켜, 화합물 133b (5.0 mg, 0.0043 mmol, 56% 수율)를 제공하였다. UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 820.40 (이론치), 820.49 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.29 분.
133의 합성
오븐-건조된 8 mL 바이알을 133b (3.3 mg, 0.0085 mmols, 1 당량)로 충전하고, 이를 DMSO (1 mL) 및 DMSO 중 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노에이트 (DMSO 중 10 mM, 0.43 mL, 0.0043 mmol, 1.5 당량)의 용액 및 DIPEA (1.5 L, 0.00851 mmol, 3 당량)에 용해시켰다. 반응물을 30℃까지 밤새 가열하고, 아세트산으로 켄칭하고, 분취용 HPLC (방법 B)로 정제한 후, 화합물을 냉동 및 동결건조시켜, 133 (1.9 mg, 0.00158 mmol, 56% 수율)을 제공하였다.
UPLC-MS (방법 D, ESI+): m/z [M + H]+ = 971.43 (이론치), 971.48 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.99 분.
3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)-N-(4-(((2S,3R,4S,5S,6S)-6-카복시-3,4,5-트리하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-2-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로판아미도)프로판아미도)벤질)-N,N-디메틸프로판-1-아미늄 2,2,2-트리플루오로아세테이트 (화합물 134)의 합성.
134a의 합성
오븐-건조된 8 mL 바이알을 (E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (20 mg, 0.0248 mmol, 1 당량, WO2017/175147, 실시예 39, 페이지 291에 이전에 기재된 바와 같이 제조됨) 및 (2S,3R,4S,5S,6S)-2-(3-(3-((((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카보닐)아미노)프로판아미도)-4-(브로모메틸)페녹시)-6-(메톡시카보닐)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (60.3 mg, 0.0743 mmol, 3 당량, Mol Cancer Ther 2016 15(5), 938-945에 이전에 기재된 바와 같이 제조됨)로 충전하고, 무수 아세토니트릴로 공비하였다(azeotroped). 바이알에 2-부타논 (2.5 mL)을 첨가하고, 용액을 100℃까지 밤새 가열하였다. 화합물을 분취용 HPLC (방법 B)로 직접 정제하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 134a (11.3 mg, 0.0070 mmol, 28% 수율)를 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ =1538.64 (이론치), 1538.83 (관측치). HPLC 체류 시간: 2.55 분
134b의 합성
오븐-건조된 4 mL 바이알을 134a (4.5 mg, 0.0094 mmol, 1 당량)로 충전하고, 무수 MeOH (0.5 mL)에 용해시켰다. 바이알을 아세토니트릴 / 드라이-아이스 배쓰에서 -40oC에서 냉각시키고, 0.5 M NaOMe (19 L, 0.0094 mmol, 1 당량)를 첨가하였다. 반응물을 1 시간 동안 교반한 후, 이를 실온까지 가온하고, LiOH (H2O 중 1 M, 31 L, 0.031 mmols, 3 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1 시간 동안 교반한 다음, 분취용 HPLC (방법 B)로 직접 정제한 다음, 냉동 및 동결건조시켜, 134b (5.8 mg, 0.0049 mmol, 48% 수율)를 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1176.52 (이론치), 1176.76 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.29 분
134의 합성
134b (5.8 mg, 0.0038 mmols, 1 당량)를 오븐-건조된 4 mL 바이알에 첨가하고, DMSO (1 mL)에 용해시킨 다음, MP-OSu (DMSO 중 10 mM, 0.57 mL, 0.0057 mL, 1.5 당량) 및 DIPEA (2 L, 0.0115 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 용액을 30 분 동안 교반하고, 아세트산으로 켄칭하고, 분취용 HPLC (방법 B)로 정제한 다음, 냉동 및 동결건조시켜, 134 (3.6 mg, 0.0023 mmol, 61% 수율)를 제공하였다. UPLC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1327.55 (이론치), 1327.77 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.38 분.
(E)-7-(2-(아제티딘-3-일)에톡시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 135)의 합성
135a의 합성
MeOH (63 mL) 및 수성 NH4OH (21 mL) 중 25a (1.61 g, 4.18 mmol, 1 당량)의 용액에 수성 Na2S2O4 (1 M, 21 mL, 21 mmol, 5 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 30oC에서 교반하고, 반응물을 UPLC-MS (방법 E, ESI+)로 모니터링하였다. 완료시, 용액을 셀라이트 위에서 여과하고, MeOH로 세척하였다. 여과액을 농축하고, 생성물을 플래시 크로마토그래피 (셀라이트에 건조 로딩됨, Sfar HC Duo SiO-2 컬럼, DCM 중 10:1 MeOH:NH4OH 구배)로 정제하여, 135a (774 mg, 2.17 mmol, 52% 수율)를 산출하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 357.2 (이론치), 357.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.44 분.
135b의 합성
MeOH (4 mL) 중 화합물 135a (774 mg, 2.17 mmol, 1 당량)의 용액에 MeCN 중 시아노겐 브로마이드 (3 M, 1.5 mL, 4.35 mmol, 2 당량)를 첨가하였다. 용액을 18 시간 동안 30oC에서 교반하고, UPLC-MS (방법 E, ESI+)를 통해 모니터링하였다. 완료시, 용매를 진공 하에 제거하여, 135b (1.0 g, 2.25 mmol, 정량적 수율)를 산출하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 382.2 (이론치), 382.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.12 분.
135c의 합성
마이크로파 바이알을 DMA (11 mL) 중 135b (1.0 g, 2.25 mmol, 1 당량)의 용액으로 충전하고, 이에 화합물 8 (1.0 g, 6.74 mmol, 3 당량), HATU (2.6 g, 6.74 mmol, 3 당량) 및 DIPEA (1.2 mL, 6.74 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 이 혼합물을 80℃까지 1 시간 동안 마이크로파 반응기에서 가열하였다. 완료시, 135c를 차가운 물을 이용한 침전에 의해 단리하였다 (1.0 g, 1.93 mmol, 86% 수율). LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 518.2 (이론치), 518.3 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.60 분.
135d의 합성
MeOH (3.3 mL) 중 135c (1.0 g, 1.93 mmol, 1 당량)의 용액에 디옥산 중 HCl (4 M, 5.3 mL, 21 mmol, 8 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 30oC에서 교반하였다. 완료시, 용매를 진공 하에 제거하고, 135d (1.2 g, 2.65 mmol, 정량적 수율)를 추가 정제 없이 사용하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 418.2 (이론치), 418.2 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.09 분.
135e의 합성
화합물 135d (200 mg, 0.408 mmol, 1 당량) 및 26a (245 mg, 0.612 mmol, 1.5 당량)를 5 mL 마이크로파 바이알 중 n-부탄올 (2.0 mL)에 용해시키고, 이에 Na2CO3 (130 mg, 1.22 mmol, 3 당량) 및 DIPEA (0.36 mL, 2.04 mmol, 5 당량)를 첨가하였다. 반응물을 마이크로파 반응기를 통해 140oC에서 3 시간 동안 가열하였다. 생성된 생성물을 여과하고, MeOH 및 DCM으로 세척하였다. 여과액을 농축하고, 플래시 크로마토그래피 (셀라이트에 건조 로딩됨, Sfar HC Duo SiO-2 컬럼, DCM 중 10:1 MeOH:NH4OH 구배)를 통해 정제하여, 135e (51 mg, 0.0651 mmol, 16% 수율)를 산출하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 781.3 (이론치), 781.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.72 분.
135f의 합성
화합물 135f (30 mg, 0.0402 mmol, 62% 수율)를 135a와 동일한 절차를 사용하여, 135e (51 mg, 0.0651 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 751.3 (이론치), 751.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.46 분.
135g의 합성
화합물 135g (34 mg, 00394 mmol, 정량적 수율)를 135b와 동일한 절차를 사용하여, 135f (30 mg, 0.0402 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 776.3 (이론치), 776.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.54 분.
135h의 합성
화합물 135h를 135c와 동일한 절차를 사용하여, 135g (17 mg, 0.0197 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. 완료시, 생성물을 분취용 HPLC (방법 H)로 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 135h (2.34 mg, 0.0021 mmol, 10% 수율)를 백색 분말로서 제공하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 912.4 (이론치), 912.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.65 분.
135의 합성
화합물 135h (2.34 mg, 0.0021 mmol, 1 당량)를 MeOH (0.21 mL)에 용해시키고, 디옥산 중 HCl (4 M, 4.1 μL, 0.0164 mmol, 8 당량)을 첨가하였다. 용액을 40℃까지 1 시간 동안 가열하였다. 그런 다음, 용매를 진공 하에 제거하고, 135 (1.86 mg, 0.0020 mmol, 정량적 수율)를 추가 정제 없이 사용하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 812.3 (이론치), 812.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.26 분.
(E)-7-(2-(아제티딘-3-일)에톡시)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 136)의 합성
136a의 합성
화합물 136a (3.15 mg, 0.0028 mmol, 14% 수율)를 135h와 동일한 절차를 사용하여, 135g (17 mg, 0.0197 mmol, 1 당량) 및 1, 3-디메틸-1H--피라졸-5-카복실산을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 898.4 (이론치), 898.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.62 분.
136의 합성
화합물 136 (2.09 mg, 0.0023 mmol, 82% 수율)을 135와 동일한 절차를 사용하여, 136a (3.15 mg, 0.0028 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 798.3 (이론치), 798.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.24 분.
(E)-7-(3-(아제티딘-3-일옥시)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 137)의 합성
137a의 합성
화합물 137a (72 mg, 0.0893 mmol, 22% 수율)를 135e와 동일한 절차를 사용하여, 135d (200 mg, 0.408 mmol, 1 당량) 및 27a (263 mg, 0.612 mmol, 1.5 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 811.3 (이론치), 811.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.72 분.
137b의 합성
화합물 137b (30 mg, 0.0386 mmol, 43% 수율)를 135a와 동일한 방법을 사용하여, 137a (72 mg, 0.0893 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 781.3 (이론치), 781.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.46 분.
137c의 합성
화합물 137c (34 mg, 0.0387 mmol, 정량적 수율)를 135b와 동일한 절차를 사용하여, 137b (30 mg, 0.03896 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 806.3 (이론치), 806.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.53 분.
137d의 합성
화합물 137d (4.21 mg, 0.0036 mmol, 19% 수율)를 135h와 동일한 절차를 사용하여, 137c (17 mg, 0.0194 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 942.4 (이론치), 942.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.65 분.
화합물 137의 합성
화합물 137 (3.35 mg, 0.0035 mmol, 정량적 수율)을 135와 동일한 절차를 사용하여, 137d (4.21 mg, 0.0036 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 842.3 (이론치), 842.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.29 분.
(E)-7-(3-(아제티딘-3-일옥시)프로폭시)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 138)의 합성
138a의 합성
화합물 138a (3.00 mg, 0.0026 mmol, 13% 수율)를 135h와 동일한 절차를 사용하여, 137c (17 mg, 0.0197 mmol, 1 당량) 및 1, 3-디메틸-1H--피라졸-5-카복실산을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 928.4 (이론치), 928.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.62 분.
138의 합성
화합물 138 (2.35 mg, 0.0025 mmol, 정량적 수율)을 135와 동일한 절차를 사용하여, 138a (3.00 mg, 0.0026 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 828.3 (이론치), 828.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.26 분.
(E)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-(메틸아미노)프로폭시)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 139)의 합성
139a의 합성
화합물 139a (125 mg, 0.162 mmol, 29% 수율)를 135e와 동일한 절차를 사용하여, 135d (250 mg, 0.551 mmol, 1 당량) 및 77 (320 mg, 0.826 mmol, 1.5 당량)을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 769.3 (이론치), 769.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.67 분.
139b의 합성
화합물 139b (51 mg, 0.0686 mmol, 42% 수율)를 135a와 동일한 절차를 사용하여, 139a (125 mg, 0.162 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 739.3 (이론치), 739.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.45 분.
139c의 합성
화합물 139c (57 mg, 0.0670 mmol, 정량적 수율)를 135b와 동일한 절차를 사용하여, 139b (51 mg, 0.0686 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 764.3 (이론치), 764.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.31 분.
139d의 합성
화합물 139d (34 mg, 0.0303 mmol, 45% 수율)를 135h와 동일한 절차에 따라 139c (57 mg, 0.0670 mmol, 1 당량) 및 1, 3-디메틸-1H--피라졸-5-카복실산을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 886.4 (이론치), 886.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.61 분.
139의 합성
화합물 139 (27 mg, 0.0291, 정량적 수율)를 135와 동일한 절차를 사용하여, 139d (34 mg, 0.0303 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 786.3 (이론치), 786.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.23 분.
(E)-7-(2-(아제티딘-3-일)에톡시)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 140)의 합성
140a의 합성
화합물 140a (380 mg, 0.490 mmol, 78% 수율)를 135e와 동일한 절차를 사용하여, 26a (250 mg, 0.625 mmol, 1 당량) 및 78d (420 mg, 0.938 mmol, 1.5 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. 생성물을 차가운 물로 침전시키고, 추가 정제 없이 사용하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 775.3 (이론치), 775.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.66 분.
140b의 합성
화합물 140b (193 mg, 0.260 mmol, 53% 수율)를 135a와 동일한 절차를 사용하여, 140a (380 mg, 0.490 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 745.4 (이론치), 745.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.44 분.
140c의 합성
화합물 140c (212 mg, 0.249 mmol, 정량적 수율)를 135b와 동일한 절차를 사용하여, 140b (193 mg, 0.260 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 770.4 (이론치), 770.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.60 분.
140d의 합성
화합물 140d (38 mg, 0.0339 mmol, 27% 수율)를 135h와 동일한 절차를 사용하여, 140c (106 mg, 0.124mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 892.4 (이론치), 892.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.59 분.
140의 합성
화합물 140 (30 mg, 0.0334 mmol, 정량적 수율)을 135와 동일한 절차를 사용하여, 140d (38 mg, 0.0339 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 792.4 (이론치), 792.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.28 분.
(E)-N-(7-(2-(아제티딘-3-일)에톡시)-5-카바모일-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-4-에틸-2-메틸옥사졸-5-카복사미드 (화합물 141)의 합성
141a의 합성
화합물 141a (27 mg, 0.0237 mmol, 19% 수율)를 135h와 동일한 절차를 사용하여, 140c (106 mg, 0.124 mmol, 1 당량) 및 4-에틸-2-메틸-옥사졸-5-카복실산을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 907.4 (이론치), 907.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.57 분.
141의 합성
화합물 141 (21 mg, 0.0230 mmol, 정량적 수율)을 135와 동일한 절차를 사용하여, 141a (27 mg, 0.0237 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 807.4 (이론치), 807.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.26 분.
(E)-7-(3-(아제티딘-3-일옥시)프로폭시)-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 142)의 합성
142a의 합성
화합물 142a를 135e와 동일한 절차를 사용하여, 27a (250 mg, 0.582 mmol, 1 당량) 및 78d (391 mg, 0.872 mmol, 1.5 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. 생성물을 차가운 물로 침전시키고, 추가 정제 없이 사용하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 805.4 (이론치), 805.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.66 분.
142b의 합성
화합물 142b (193 mg, 0.250 mmol, 2 개의 단계에 걸쳐 37% 수율)를 135a와 동일한 절차를 사용하여, 142a (548 mg, 0.681 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 775.4 (이론치), 775.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.50 분.
142c의 합성
화합물 142c (164 mg, 0.186 mmol, 75% 수율)를 135b와 동일한 절차를 사용하여, 142b (193 mg, 0.260 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 800.4 (이론치), 800.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.33 분.
142d의 합성
화합물 142d (40 mg, 0.0345 mmol, 37% 수율)를 135h와 동일한 절차를 사용하여, 142c (48 mg, 0.373 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 922.4 (이론치), 922.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.58 분.
142의 합성
화합물 142 (32 mg, 0.0323 mmol, 정량적 수율)를 135와 동일한 절차를 사용하여, 142d (40 mg, 0.0345 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 822.4 (이론치), 822.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.29 분.
(E)-N-(7-(3-(아제티딘-3-일옥시)프로폭시)-5-카바모일-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-4-에틸-2-메틸옥사졸-5-카복사미드 (화합물 143)의 합성
143a의 합성
화합물 143a (31 mg, 0.0263 mmol, 28% 수율)를 135h와 동일한 절차를 사용하여, 142c (82 mg, 0.0.0931 mmol, 1 당량) 및 4-에틸-2-메틸-옥사졸-5-카복실산을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 937.4 (이론치), 937.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.56 분.
143의 합성
화합물 143 (25 mg, 0.0261 mmol, 정량적 수율)을 135와 동일한 절차를 사용하여, 141a (31 mg, 0.0263 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 837.4 (이론치), 837.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.29 분.
(E)-7-(2-(1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)에톡시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 144)의 합성
화합물 144의 x2 TFA 염(0.59 mg, 0.0005 mmol, 24% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 135 (1.86 mg, 0.0020 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 963.4 (이론치), 963.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.44 분.
(E)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(2-(1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)에톡시)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 145)의 합성
화합물 145 의 x2 TFA 염 (0.31 mg, 0.0003 mmol, 12% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 136 (2.09 mg, 0.0023 mmol, 1 당량)을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 949.3 (이론치), 949.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.40 분.
(E)-7-(3-((1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)옥시)프로폭시)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 146)의 합성
화합물 146 의 x2 TFA 염 (0.92 mg, 0.0008 mmol, 21% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 137 (3.35 mg, 0.0035 mmol, 1 당량)을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 993.4 (이론치), 993.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.43 분.
(E)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(3-((1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)옥시)프로폭시)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 147)의 합성
화합물 147 의 x2 TFA 염 (0.36 mg, 0.0003 mmol, 12% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 136 (2.83 mg, 0.0024 mmol, 1 당량)을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 979.4 (이론치), 979.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.41 분.
(E)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(3-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-N-메틸프로판아미도)프로폭시)-1-(4-(2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-5-설파모일-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 148)의 합성
화합물 148 의 x2 TFA 염 (15 mg, 0.0129 mmol, 44% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 139를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 937.3 (이론치), 937.4 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.42 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(2-(1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)에톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 149)의 합성
화합물 149 의 x2 TFA 염 (16 mg, 0.0136 mmol, 41% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 140 (30 mg, 0.0334 mmol, 1 equiv).을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 943.4 (이론치), 943.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.41 분.
(E)-N-(5-카바모일-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(2-(1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)에톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-4-에틸-2-메틸옥사졸-5-카복사미드 (화합물 150)의 합성
화합물 150 의 x2 TFA 염 (15 mg, 0.0123 mmol, 53% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 141 (21 mg, 0.0230 mmol, 1 당량)을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 943.4 (이론치), 943.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.41 분.
(E)-1-(4-(5-카바모일-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-(3-((1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)옥시)프로폭시)-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-5-카복사미드 (화합물 151)의 합성
화합물 151 의 x2 TFA 염 (22 mg, 0.0182 mmol, 56% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 142 (30 mg, 0.0323 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 973.4 (이론치), 973.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.42 분.
(E)-N-(5-카바모일-1-(4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-7-(3-((1-(3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일)아제티딘-3-일)옥시)프로폭시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-4-에틸-2-메틸옥사졸-5-카복사미드 (화합물 152)의 합성
화합물 152 의 x2 TFA 염 (20 mg, 0.0168 mmol, 43% 수율)을 일반 방법 9에 따라, 화합물 143 (37 mg, 0.0388 mmol, 1 당량)을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 988.4 (이론치), 988.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.40 분.
S-(1-(3-(3-(2-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)에틸)아제티딘-1-일)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 153)의 합성
화합물 149 (DMSO 중 10 mM, 0.42 mL, 0.0042 mmol, 1 당량)의 용액에 l-시스테인 (0.1 M H2O, 63 μL, 0.063 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 반응물을 30oC에서 1 시간 동안 교반하고, UPLC-MS로 모니터링하였다. 완료시, 반응 혼합물을 분취용 HPLC (방법 G)로 직접 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 냉동하고, 동결건조시켜, 화합물 153 (2.17 mg, 0.0015 mmol, 36% 수율)을 산출하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1079.4 (이론치), 1079.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.28 분.
S-(1-(3-(3-(2-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(4-에틸-2-메틸옥사졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)에틸)아제티딘-1-일)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 154)의 합성
화합물 150 (2.35 mg, 0.0017 mmol, 39% 수율)을 화합물 153과 동일한 절차를 사용하여, 화합물 145 (DMSO 중 10 mM, 0.43 mL, 0.0043 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1064.4 (이론치), 1064.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.29 분.
S-(1-(3-(3-(3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(1,3-디메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로폭시)아제티딘-1-일)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 155)의 합성
화합물 155 (2.34 mg, 0.0016 mmol, 39% 수율)를 화합물 153과 동일한 절차를 사용하여, 화합물 151 (DMSO 중 10 mM, 0.41 mL, 0.0041 mmol, 1 당량)을 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ = 1109.4 (이론치), 1109.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.30 분.
S-(1-(3-(3-(3-((5-카바모일-1-((E)-4-(5-카바모일-2-(1-에틸-3-메틸-1H-피라졸-5-카복사미도)-7-메톡시-1H-벤조[d]이미다졸-1-일)부트-2-엔-1-일)-2-(4-에틸-2-메틸옥사졸-5-카복사미도)-1H-벤조[d]이미다졸-7-일)옥시)프로폭시)아제티딘-1-일)-3-옥소프로필)-2,5-디옥소피롤리딘-3-일)-L-시스테인 (화합물 156)의 합성
화합물 156 (2.31 mg, 0.0016 mmol, 39% 수율)을 화합물 153과 동일한 절차를 사용하여, 화합물 152 (DMSO 중 10 mM, 0.42 mL, 0.0042 mmol, 1 당량)를 출발 물질로서 사용하여 제조하였다. LC-MS (방법 E, ESI+): m/z [M + H]+ =1094.4 (이론치), 1094.5 (관측치). HPLC 체류 시간: 1.32 분.
ADC의 제조를 위한 일반 절차:
이전에 기재된 바와 같이 ADC를 제조하였다 (Methods Enzymol. 2012, 502, 123-138). 간략하게, DAR (약물-대-항체 비) 4 컨쥬게이트를, 하위-화학량론적 양의 트리스(2-카복시에틸)포스핀 (TCEP)을 사용하여 항체 쇄-간 디설파이드 결합의 부분적 환원에 의해 제조하였다. TCEP을 포스페이트 완충된 식염수 (PBS, Gibco, PN 10010023) 및 1 M EDTA 중 미리-가온된 (37℃) 항체 스톡 용액에 항체 (TCEP:항체)에 비해 대략 2.2 몰 당량으로 첨가하였다. 환원 반응 혼합물을 37℃에서 대략 60 분 동안 항온처리하였다. 말레이미드 약물-링커와 부분적으로 환원된 항체의 컨쥬게이션을 DMSO 스톡 용액으로서 약물-링커의 6 몰 당량을 첨가함으로써 수행하였다. 컨쥬게이션 반응 동안 약물-링커가 용액에 남아 있도록 하기 위한 10% (v/v) DMSO의 최종 반응 농도를 달성하기 위해 필요에 따라 추가적인 DMSO를 첨가하였다. 컨쥬게이션 반응은 30 분 동안 실온에서 또는 모든 이용가능한 항체 시스테인 티올이 역-상 HPLC (방법 G)에 의해 지시된 바와 같이 약물-링커에 의해 알킬화될 때까지 진행되도록 하였다. 반응 혼합물을 100% 몰 과잉의 QuadraSil® MP 수지 (Millipore Sigma, PN 679526)와 함께 30 분 동안 실온에서 항온처리함으로써 과잉의 약물-링커의 제거를 달성하였다. 제형 완충액 (PBS, Gibco, PN 10010023)으로의 완충액 교환을, 제조업체의 지침에 따라 미리패킹된 PD-10 컬럼 (GE Life Sciences, PN 17043501)을 사용하는 겔 여과 크로마토그래피로 달성하였다. HPLC 분석 (방법 K)에 의해 표시되는 바와 같이 감출가능한 유리 악물-링커가 남아 있지 않을 때까지, 30 킬로달톤 분자량 컷오프 원심분리 필터 (Millipore Sigma, PN Z717185)를 사용하여 제형 완충액 중 ADC를 함유하는 반응 혼합물을 반복 투석여과 (5-10 회)하여 잔류 약물-링커의 추가 제거를 달성하였다.
ADC의 특성화를 위한 일반 절차:
ADC는 다음 방법을 사용하여 특성화되었습니다.
방법 I: 크기-배제 크로마토그래피 (SEC)를 Waters ACQUITY UPLC 시스템 및 Acquity UPLC 단백질 BEH SEC 컬럼 (200 Å, 1.7 μm, 4.6 x 150 mm, PN: 186005225)으로 수행하였다. 사용된 이동상은 92.5% 수성 (25 mM 소듐 포스페이트, 350 mM NaCl, pH 6.8), v/v 중 7.5% 이소프로판올이었다. 용리를 주변 온도에서 0.4 mL/분의 유속으로 등용매로 수행하였다.
방법 J: 역-상 크로마토그래피 (RP-HPLC)를 Waters 2695 HPLC 시스템 및 Agilent PLRP-S 컬럼 (1000 Å, 8 μm 50x2.1 mm, PN: PL1912-1802)에서 수행하였다. 분석 전에 디설파이드 결합을 환원시키기 위해 ADC를 10 mM DTT로 처리하였다. 샘플 용리를 이동상 A (물 중 0.05% (v/v) TFA) 및 이동상 B (MeCN 중 0.01% (v/v) TFA)를 사용하여 25-44% B의 구배로 12.5 분에 걸쳐 80℃에서 수행하였다. 약물-대-항체 비 (DAR)를 UV 280 nm에서 측정된 통합 피크 면적을 기준으로 계산하였다.
몰비의 계산
항체 경쇄 (MRDLC) 또는 항체 중쇄 (MRDHC)당 평균 약물 로딩을 아래 방정식을 사용하여 계산하였다:
여기서 MRDLC = 평균 약물-대-경쇄 비
LC%면적n = n번째 로딩된 경쇄 종의 % 면적
경쇄 피크만을 기준으로 한 % 면적
MRn = n번째 로딩된 종의 약물-대-항체 비
및
여기서 MRDHC = 평균 약물-대-중쇄 비
HC%면적n = n번째 로딩된 중쇄 종의 % 면적
중쇄 피크만을 기준으로 한 % 면적
MRn = n번째 로딩된 종의 약물-대-항체 비
항체당 평균 약물 로딩 (MRD)은 아래 방정식을 사용하여 계산하였다:
MRD = 2 x (MRDLC + MRDHC)
여기서 MRD = 평균 약물-대-항체 비
MRDLC = 평균 약물-대-경쇄 비
MRDHC = 평균 약물-대-중쇄 비
방법 K: ACQUITY UPLC BEH C18 컬럼 (130 Å, 1.7 μm, 2.1 mm X 50 mm, PN: 186002350)을 사용하여 Waters ACQUITY UPLC 시스템에서 잔류의 컨쥬게이션되지 않은 약물 링커를 측정하였다. ADC 샘플을 2x 부피의 빙냉 MeOH로 처리하여, 침전을 유도하고, 원심분리에 의해 펠릿화하였다. 임의의 잔류의 컨쥬게이션되지 않은 약물-링커를 함유하는 상청액을 시스템에 주사하였다. 샘플 용리를 이동상 A (물 중 0.05% (v/v) TFA) 및 이동상 B (MeCN 중 0.01% TFA (v/v))를 사용하여 1-95% B의 구배로 2 분에 걸쳐 50℃에서 수행하였다. 검출을 215 nm에서 수행하고, 잔류 약물-링커 화합물의 정량화는 상응하는 링커의 외부 표준물질을 사용하여 달성하였다.
실시예 2:
STING 작용제 및 상응하는 ADC의 생체외 효능 평가
생체외 생물학적 검정의 실험적 절차
THP1-Dual™ 세포 리포터 검정
IRF-Lucia 루시퍼라제 리포터를 함유하는 THP1-Dual™ 세포 (InvivoGen PN: thpd-nfis [THP1 이중 리포터 세포로서 또한 지칭됨])를 사용하여 화합물 및 ADC의 효능을 평가하였다. 세포를 10% 열-비활성화된 태아 소 혈청, Pen-Strep (100 U/mL-100 μg/mL, Gibco), HEPES (10 mM, Gibco)), 소듐 피루베이트 (1 mM, Gibco), MEM 비-필수 아미노산 (1x, Gibco), GlutaMAX (1x, Gibco) 및 베타-머캅토에탄올 (55 μM, Gibco)을 포함하는 RPMI-1640 (Gibco)에서 배양하였다. 세포를 표시된 농도의 화합물 또는 ADC와 함께 200 μL의 웰당 ~100,000 개의 세포로 96-웰 평평한 바닥 조직 배양물-처리된 투명한 폴리스티렌 플레이트 (Corning Costar #3596)에 플레이팅하였다. 리포터 검정을 위해 플레이팅 후 24 시간 (화합물) 또는 48 시간 (ADC)에 또는 표시된 바와 같이 상청액을 수확하였다. Lucia 리포터 신호를 측정하기 위해, 10 μL의 상청액을 96-웰 투명한 평평 바닥 조직 배양물-처리된 흑색 폴리스티렌 플레이트 (Corning Costar #3603)에서 40 μL의 QUANTI-Luc™ 발광 검정 시약 (Invivogen PN: rep-qlc1)과 조합하고, Perkin Elmer Envision 플레이트 판독기에서 판독하였다.
골수-유래된 대식세포 검정
야생형 (C57BL/6J, Jackson Laboratory #000664) 또는 STING-결핍 (C57BL/6J-Sting1 gt /J, Jackson Laboratory # 017537) 마우스로부터 배양된 마우스 골수 유래된 대식세포를 사용하여 본원에 기재된 화합물의 효능을 평가하였다. 간략하게, 마우스 골수 세포를 10% 열-비활성화된 태아 소 혈청, Pen-Strep (100 U/mL-100 μg/mL, Gibco), HEPES (10 mM, Gibco)), 소듐 피루베이트 (1 mM, Gibco), GlutaMAX (1x, Gibco), 베타-머캅토에탄올 (55 μM, Gibco) 및 20-40 ng/mL 뮤린 M-CSF (Peprotech, #315-02)을 포함하는 RPMI-1640 (Gibco)에서 7-10 일 동안 배양하였다. 세포를 표시된 농도의 화합물과 함께 200 μL의 웰당 ~100,000 개의 세포로 96-웰 평평한 바닥 조직 배양물-처리된 투명한 폴리스티렌 플레이트 (Corning Costar #3596)에 플레이팅하였다. 상청액을 24 시간에 수확하고, 사이토카인을 Milliplex MAP 마우스 사이토카인/케모카인 자기 비드 패널 검정 키트 (MCYTOMAG-70k 맞춤 11-플렉스 키트: MCP1, MIP1α, MIP1β, TNFα, IFNγ, IL-10, IL-12p70, IL-1β, IL-6, IP10, RANTES)를 사용하여 측정하고, Luminex™ MAGPIX™ 기기 시스템을 사용하여 분석하였다.
방관자 활성 검정
IRF-Lucia 루시퍼라제 리포터를 함유하는 Renca 암 세포 및 THP1-Dual™ 세포 (InvivoGen)를 사용하여 ADC의 방관자 활성을 평가하였다. 세포를 10% 열-비활성화된 태아 소 혈청, Pen-Strep (100 U/ml-100 μg/ml, Gibco), HEPES (10 mM, Gibco), 소듐 피루베이트 (1 mM, Gibco), MEM 비-필수 아미노산 (1x, Gibco), GlutaMAX (1x, Gibco) 및 베타-머캅토에탄올 (55 μM, Gibco)을 포함하는 RPMI-1640 (Gibco)에서 배양하였다. Renca 세포를 96-웰 평평한 바닥 조직 배양물-처리된 투명한 폴리스티렌 플레이트 (Corning Costar #3596)에 웰당 50,000 개의 세포로 100 μL로 플레이팅하였다. 초기 플레이팅 다음 날, 50,000 개의 THP1-Dual™ 세포를 총 부피 200 μL의 ADC의 표시된 농도로 각각의 웰에 첨가하였다. THP1-Dual™ 세포를 첨가한 후 48 시간째에 상청액을 수확하였다. Lucia 리포터 신호를 측정하기 위해, 10 μL의 상청액을 96-웰 투명한 평평 바닥 조직 배양물-처리된 흑색 폴리스티렌 플레이트 (Corning Costar PN: 3603)에서 40 μL의 QUANTI-Luc™ 발광 검정 시약 (Invivogen PN: rep-qlc1)과 조합하고, Perkin Elmer Envision 플레이트 판독기에서 판독하였다. 일부 실험에서, Renca 종양 세포 대신에 면역 세포에 의해 전형적으로 발현되는 뮤린 단백질 (표적 항원 C- 면역 세포 항원)을 발현하도록 조작된 HEK 293T 세포를 위와 같이 플레이팅하였다.
암 세포 직접 세포독성 검정
암 세포를 카운팅하고, 384-웰, 백색-벽 조직 배양물 처리된 플레이트 (Corning) 중 40 μL 완전 성장 배지에 플레이팅하였다. 세포 플레이트를 37℃ 및 5% CO2에서 밤새 항온처리하여, 세포가 평형을 이루도록 하였다. ADC 또는 유리 약물을 함유하는 스톡 용액을 RPMI-1640 + 20% 태아 소 혈청 (FBS)에 연속 희석하였다. 그런 다음, 각각의 농도의 10 μL를 각각의 세포 플레이트에 중복실험으로 첨가하였다. 그런 다음, 세포를 37℃ 및 5% CO2에서 96 시간 동안 항온처리한 후, 세포 플레이트를 항온처리기로부터 제거하고, 분석 전에 30 분 동안 실온까지 냉각시켰다. CellTiter-Glo® 발광 검정 시약 (Promega Corporation, Madison, WI)을 Promega의 프로토콜에 따라 제조하였다. 10 μL의 CellTiter-Glo®를 Formulatrix Tempest 액체 처리기 (Formulatrix)를 사용하여 검정 플레이트에 첨가하고, 플레이트를 실온에서 30 분 동안 광으로부터 보호하였다. EnVision Multimode 플레이트 판독기 (Perkin Elmer, Waltham, MA)를 사용하여 샘플의 발광을 측정하였다. 원시 데이터를 비선형, 4-매개변수 곡선 맞춤 모델 [Y=하단 + (상단-하단)/(1+10^((LogEC50-X)*HillSlope))]을 사용하여 Graphpad Prism (San Diego, CA)에서 분석하였다. 결과는 세포 생존력을 50%로 감소시키는 데 필요한 ADC 또는 유리 약물의 농도로서 정의되는 X50 값으로서 보고된다.
SU-DHL-1 검정
SU-DHL-1 림프종 세포를 사용하여 ADC의 효능을 평가하였다. 세포를 10% 열-비활성화된 태아 소 혈청, Pen-Strep (100 U/mL-100 μg/mL, Gibco), HEPES (10 mM, Gibco)), 소듐 피루베이트 (1 mM, Gibco), MEM 비-필수 아미노산 (1x, Gibco), GlutaMAX (1x, Gibco) 및 베타-머캅토에탄올 (55 μM, Gibco)을 포함하는 RPMI-1640 (Gibco)에서 배양하였다. 세포를 표시된 농도의 ADC와 함께 200 μL의 웰당 ~100,000 개의 세포로 96-웰 평평한 바닥 조직 배양물-처리된 투명한 폴리스티렌 플레이트 (Corning Costar #3596)에 플레이팅하였다. 48 시간 후, 50 μL 상청액을 수확하고, MILLIPLEX MAP 인간 사이토카인/케모카인 자기 비드 패널 (HCYTOMAG-60K 맞춤 8-플렉스 키트: IL-6, IL-8, MCP1, TNFα, GRO, IP-10, MIP1α 및 MIP1β)을 사용하여 사이토카인 생성물을 평가하였다. 세포 생존력은 100 μL CellTiter-Glo® 발광 검정 시약 (Promega Corporation, Madison, WI)을 플레이트의 나머지 150 μL의 세포에 첨가하고 혼합물을 96-웰 흑색-벽 플레이트 (Corning Costar #3603)로 옮겨서 평가하였다. 플레이트를 실온에서 30 분 동안 광으로부터 보호하고, 샘플의 발광을 EnVision Multimode 플레이트 판독기 (Perkin Elmer, Waltham, MA)를 사용하여 측정하였다.
생체외 생물학적 검정으로부터의 결과
유형 I 인터페론 (IRF) 시그널링이 분비된 루시퍼라제 리포터 단백질 (Lucia)을 통해 모니터링될 수 있는 인간 단핵구 세포주인 THP1-DualTM 리포터 세포를 활성화하는 능력에 대해 STING 작용제 화합물을 평가하였다. THP1-DualTM 세포를 24 시간 동안 증가하는 농도의 작용제로 처리한 다음, 상청액을 수확하고, Lucia 리포터 신호를 QUANTI-Luc™ 발광 검정 시약을 사용하여 정량화하였다. 화합물 A 및 화합물 1은 (2',3')-Rp,Rpc-diAMPS 디소듐 (화합물 B)보다 유의하게 더 강력했고, 각각 3 및 5 nM의 EC50 값으로 Lucia 리포터를 활성화하였다. 화합물 12a는 화합물 1 및 화합물 A보다 덜 강력하였다 (도 1, 21 nM의 EC50 값). 화합물 1 및 12a 둘 모두는 야생형 (WT)을 자극하는 데 사용되었을 때 사이토카인 생산을 유도하였지만, STING-결핍 뮤린 골수-유래된 대식세포에서는 그렇지 않았으며, 이는 이러한 화합물의 활성이 STING-의존적임을 나타낸다 (도 2).
STING 작용제 화합물을 표적화된 항체 및 비-결합 항체 둘 모두에 컨쥬게이션시키고, 생성된 ADC를 THP1-DualTM 리포터 세포를 활성화시키는 능력에 대해 평가하였다. 절단가능한 글루쿠로나이드-기반 링커 (11)를 사용하여 화합물 1을 컨쥬게이션시켰다. 화합물 12a는 절단 불가능한, 절단가능한 펩티드-기반 및 절단가능한 글루쿠로나이드-기반 링커 (각각 화합물 12, 14 및 13)를 사용하여 컨쥬게이션시켰다. THP1-DualTM 세포를 48 시간 동안 화합물에 컨쥬게이션된 비-결합 또는 표적화된 mAb로 ADC의 농도를 증가시키면서 처리한 다음, 상청액을 수확하고, Lucia 리포터 신호를 QUANTI-Luc™ 발광 검정 시약을 사용하여 정량화하였다. 화합물 12a는 유리 약물로서 화합물 1보다 덜 강력하였지만 (도 1), 화합물 12a는 절단가능한 글루쿠로나이드 링커 (13)를 통해 표적화된 mAb에 컨쥬게이션되었을 때 유사한 화합물 1 컨쥬게이트(11)보다 더 강력하였다. 게다가, 화합물 12a는 절단가능한 링커 13 또는 14보다 절단 불가능한 링커 (12)를 통해 표적화된 mAb에 컨쥬게이션될 때 더 강력하였으며 (도 3), 항체에 대한 STING 작용제 소분자의 컨쥬게이션이 그 효능을 증가시킬 수 있음을 보여준다.
엔도-리소좀에서 mAb 컨쥬게이트의 절단시 방출되는 화합물 12 및 시스테인 부가물 (화합물 16)을 THP1-DualTM 리포터 세포를 활성화하는 능력에 대해 평가하였다. THP1-DualTM 세포를 24 시간 동안 증가하는 농도의 화합물로 처리한 다음, 상청액을 수확하고, Lucia 리포터 신호를 QUANTI-Luc™ 발광 검정 시약을 사용하여 정량화하였다. 화합물 12 및 화합물 16 둘 모두는 모 유리 약물 12a (21 nM, 도 4 및 도 1)와 유사한 EC50 값 (각각 37 nM 및 34 nM)으로 활성이었다.
화합물 15b를 유리 약물로서 그리고 절단 불가능한 링커 (15)를 사용하여 표적화된 항체에 컨쥬게이션될 때 둘 모두에 대해 평가하였다. THP1-DualTM 세포를 48 시간 동안 화합물에 컨쥬게이션된 비-결합 또는 표적화된 mAb를 갖는 유리 약물 또는 ADC의 농도를 증가시키면서 처리한 다음; 상청액을 수확하고, Lucia 리포터 신호를 QUANTI-Luc™ 발광 검정 시약을 사용하여 정량화하였다. 화합물 15b는 12a보다 더 강력한 반면, 15의 ADC의 효능은 동일한 표적화된 mAb에 연결된 경우 12의 ADC의 효능과 유사하였다 (도 5).
화합물 12a를 절단 불가능한 다양한 링커 (12, 17, 19-24)를 사용하여 표적화된 항체 및 비-결합 항체 둘 모두에 컨쥬게이션시키고, 생성된 ADC를 THP1-DualTM 리포터 세포를 활성화하는 능력에 대해 평가하였다. 표적화된 mAb를 포함하는 모든 컨쥬게이트는 ~1.7-7.3 ng/mL 범위의 EC50 값으로 활성이었다 (표 1). 본 발명자들은 또한 종양 항원 A 또는 항원 B (CD30)에 결합하는 표적화된 mAb에 컨쥬게이션될 때 암 세포를 직접 살해시키는 이러한 링커의 능력을 평가하였다. 모든 컨쥬게이트는 암 세포주의 하위집합에서 활성이었으며 (표적 항원 발현에 관계없이), 이는 일부 암 세포의 표적-독립적 살해를 나타내고; 화합물 1, 12a 및 16은 또한 암 세포주의 서브세트에서 직접적인 세포독성 활성을 입증하였다 (표 2; 표적화된 mAb A 컨쥬게이트는 다양한 약물 링커 화합물에 컨쥬게이션된 종양 항원 A를 표적화하는 mAb를 포함하고; 표적화된 mAb B 컨쥬게이트는 다양한 약물 링커에 컨쥬게이션된 CD30을 표적화하는 cAC10 mAb를 포함한다).
표 1: THP1-DualTM 리포터 세포에서 표적 STING 작용제 ADC의 활성.
*>10%의 응집물을 갖는 ADC는 평가되지 않았음
**일부 화합물의 경우, EC50 값은 다중 실험으로부터의 평균값을 포함함
표 2: 인간 암 세포주에 대한 다양한 ADC 및 화합물의 직접적인 세포독성 데이터.
다중 추가적인 화합물을 합성하고, THP1-DualTM 리포터 세포를 활성화시키는 능력에 대해 평가하였다. 몇 가지 화합물은 1.3 nM (화합물 27e) 내지 6337 nM (화합물 126a, 표 3) 범위의 EC50 값으로 활성이었다. 최대 10 μM의 최소 활성을 갖는 화합물은 >10,000 nM의 EC50 값을 갖는 것으로서 표 3에 나열되어 있다. 몇 가지 화합물을 절단가능한 또는 절단 불가능한 약물 링커를 통해 표적화된 항체 (표 1) 및 비-결합 항체 (도시되지 않음)에 컨쥬게이션시키고, 생성된 ADC를 THP1-DualTM 리포터 세포를 활성화하는 능력에 대해 평가하였다. 약물 링커 25-27, 105, 108, 111-112 및 121-125를 갖는 컨쥬게이트는 1.4 내지 307 ng/mL 범위의 EC50 값으로 활성이었다 (표 1). 활성 소분자로부터 유래된 약물 링커를 갖는 컨쥬게이트를 포함하여 테스트된 다른 모든 컨쥬게이트는 이 검정에서 최대 10 μg/mL까지 활성이 아니었으므로 (표 3, 표 1), STING 경로를 표적화하는 활성 ADC 개발의 도전을 강조한다.
표 3: THP1-DualTM 리포터 세포에서 STING 작용제 소분자의 활성.
**일부 화합물의 경우, EC50 값은 다중 실험으로부터의 평균값을 포함함
절단가능한 링커 11을 사용하여 화합물 1을 비-결합 항체뿐만 아니라 항원 C 및 PD-L1-표적화된 mAb에 컨쥬게이션시키고, 생성된 ADC를 SU-DHL-1 세포에 의한 사이토카인 생산 및 직접적인 세포독성을 유도하는 능력에 대해 평가하였다. 비-결합 컨쥬게이트가 아닌 항원 C 및 PD-L1을 표적화하는 컨쥬게이트는 사이토카인 MIP-1α의 강력한 생산을 유도하고 SU-DHL-1 세포 사멸을 야기하였다 (도 6a 및 도 6b).
방관자 방식으로 THP1 이중 리포터 면역 세포를 활성화시키는 컨쥬게이트의 능력을 평가하였다. 항원 C를 표적화하는 항체와 화합물 12, 13 및 14에 컨쥬게이션된 hIgG1 LALAPG Fc 백본으로 이루어진 컨쥬게이트는 THP1 이중 세포가 항원 C를 발현하도록 조작된 HEK 293T 세포와 함께 공동-배양되었을 때 일부 방관자 활성을 나타내었다 (도 7). 화합물 12에 컨쥬게이션된 mIgG2a WT 또는 LALAPG Fc 백본을 갖는 EphA2를 표적화하는 h1C1 항체로 이루어진 컨쥬게이트 (예컨대, 이들 각각이 그 전체가 본원에 참조로 포함되는, Schlothauer 등, Protein Engineering, Design and Selection, 2016, 29(10):457-466; 및 Hezareh 등, Journal of Virology, 2001, 75(24):12161-12168 참고)는 또한 THP1 이중 세포가 뮤린 Renca 종양 세포와 공동-배양되었을 때 방관자 활성을 나타내었다. 온전한 WT Fc 백본을 갖는 컨쥬게이트에서 현저하게 향상된 방관자 활성이 관찰되었다 (도 8).
실시예 3
STING 작용제 ADC에 의해 유도된 항종양 면역 반응의 생체내 평가
생체내 연구를 위한 실험적 절차
생체내 사이토카인 검정
Milliplex MAP 마우스 사이토카인/케모카인 자기 비드 패널 검정 키트 (MCYTOMAG-70k 맞춤 11-플렉스 키트: MCP1, MIP1α, MIP1β, TNFα, IFNγ, IL-10, IL-12p70, IL-6, IL-1β, IP10, RANTES)를 사용하여 화합물 또는 ADC로 치료한 후 3, 6, 24 또는 48 시간째에 수확된 마우스 혈장에서 사이토카인을 측정하고, Luminex™ MAGPIX™ 기기 시스템을 사용하여 분석하였다. 표준 곡선 범위를 벗어난 값 (< 3.2 또는 > 10,000 pg/mL)을 평균값의 계산으로부터 제외하였다.
생체내 항종양 활성 연구
Renca 암 세포
Renca 암 세포 (ATCC)를 10% 열-비활성화된 태아 소 혈청, Pen-Strep (100 U/mL-100 μg/mL), MEM 비-필수 아미노산 (1x), 소듐 피루베이트 (1 mM) 및 L-글루타민 (2 mM)을 포함하는 RPMI-1640 (ATCC)에서 배양하였다. Renca 암 세포를 Balb/c 암컷 마우스에 피하로 이식하였다 (200 μL 25% Matrigel 중 2*106 개의 세포). 일부 실험에서, Renca 종양 세포를 표시된 뮤린 또는 인간 표적 항원을 발현하도록 조작하였다.
종양 부피가 100 mm3에 도달했을 때, 표시된 투약 일정에 따라 복강내 또는 정맥내 주사에 의해 마우스에 화합물 또는 ADC를 투약하고, 종양 부피를 매주 2 회 모니터링하였다. 화합물을 염수 중 40% PEG400에서 제형화하였다.
CT26 암 세포
CT26 암 세포 (ATCC)를 1 mM 소듐 피루베이트, 10 mM HEPES, 2.8 mL 45% 글루코스 (1.25 g)로 변형되고 10% 태아 소 혈청 및 1% Pen/Strep/글루타민이 보충된 RPMI 1640에서 배양하였다. CT26 암 세포를 Balb/c 마우스에 피하로 이식하였다 (200 uL 무-혈청 RPMI 1640 중 0.5*106 개의 세포).
MC38 암 세포
MC38 암 세포 (Kerafast)를 10% 열-비활성화된 태아 소 혈청, Pen-Strep (100 U/mL-100 μg/mL), MEM 비-필수 아미노산 (1x), 소듐 피루베이트 (1 mM) 및 L-글루타민 (2 mM)을 포함하는 DMEM에서 배양하였다. MC38 암 세포를 C57BL/6 마우스에 피하로 이식하였다 (100 uL 25% Matrigel 중 1*106 개의 세포).
일부 실험에서, ADC 처리 후 완전한 종양 퇴행을 달성한 종양-보유 마우스를 MC38 종양 세포로 "재챌린지"하였으며; MC38 암 세포를 C57BL/6 마우스의 반대쪽 옆구리에 피하로 이식하였다 (100 uL 25% Matrigel 중 1*106 개의 세포).
4T1 암 세포
4T1 암 세포 (ATCC)를 10% 열-비활성화된 태아 소 혈청을 포함하는 RPMI에서 배양하고, Balb/c 마우스에 피하로 이식하였다 (200 uL 일반 RPMI 중 0.02*106 개의 세포).
생체내 연구로부터의 결과
Renca 암 세포
생체내에서 면역 반응을 유도하고 항종양 면역 반응을 구동하는 STING 작용제 ADC의 능력을 평가하기 위해 동계 시스템을 사용하였다. Renca 시스템은 피하, 마우스 신장 선암종 모델이다. 암컷 Balb/c 마우스에 옆구리 피하로 0 일차에 2x106 개의 Renca 세포를 이식하였다. 100 mm3의 평균 종양 크기 (공식 부피 (mm3) = 0.5 * 길이 * 너비2를 사용함으로써 측정됨, 여기서 길이가 더 긴 치수임)에 도달했을 때, 마우스를 그룹당 ≥ 5 마리의 처리 그룹으로 무작위화하였다. 그런 다음, 동물을 복강내 (ADC 또는 화합물) 또는 정맥내 (화합물)로 7 일마다 표시된 치료로 총 3 회 용량으로 (또는 표시된 바와 같이) 치료하였다. 연구 전반에 걸쳐 종양의 길이 및 너비, 및 동물의 체중을 측정하고, 위의 공식을 사용하여 종양 부피를 계산하였다. 종양 부피가 ~1000 mm3에 도달할 때까지 동물을 추적한 다음; 동물을 안락사시켰다.
비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb (mIgG2a LALAPG 백본; 예컨대, 이들 각각이 그 전체가 본원에 참조로 포함되는, Schlothauer 등, Protein Engineering, Design and Selection, 2016, 29(10):457-466; 및 Hezareh 등, Journal of Virology, 2001, 75(24):12161-12168 참고)에 컨쥬게이션된 절단가능한 링커 11과 비교한 화합물 1의 항종양 활성을 평가하였으며; 본원에 기재된 모든 EphA2-표적화된 mAb 컨쥬게이트는 다양한 약물 링커 화합물에 컨쥬게이션된 h1C1 mIgG2a mAb로 이루어진다는 점에 유의한다. 동물을 화합물 1 또는 비-결합 mAb 컨쥬게이트 11로 치료하였을 때, 약간의 종양 성장 지연이 관찰되었지만; 종양 성장 지연은 11의 EphA2-표적화된 mAb 컨쥬게이트, 특히 더 높은 12 mg/kg 용량에서 유의하게 향상되었으며 (도 9a), 이는 표적화된 ADC를 사용하여 STING 작용제를 전달하는 항종양 이익을 명확하게 입증한다.
다음 생체내 연구에서, 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb (mIgG2a LALAPG 백본)에 컨쥬게이션된 절단 불가능한 링커 화합물 12의 항종양 활성을 평가하였다. 12의 EphA2-표적화된 mAb 컨쥬게이트는 강력한 항종양 활성을 나타냈고, 놀랍게도 동일한 EphA2-표적화된 mAb에 컨쥬게이션된 11의 ADC보다 더 활성적이었다 (도 10a). 다음 생체내 연구에서, 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb (mIgG2a WT 백본)에 컨쥬게이션된 절단 불가능한 링커 15의 항종양 활성을 평가하였다. 15의 EphA2-표적화된 mAb 컨쥬게이트는 12의 상응하는 ADC와 유사한 강력한 항종양 활성을 나타냈다 (도 11a). 이 연구에서, mIgG2a WT 및 LALAPG 백본을 갖는 EphA2-표적화된 항체에 컨쥬게이션된 12의 활성을 또한 평가하였고, 두 컨쥬게이트 모두는 유사한 활성을 보였다. 생체외 방관자 검정에서 온전한 WT Fc 백본이 LALAPG Fc 백본에 비해 방관자 면역 세포 활성화를 유의하게 향상시킨다는 점을 감안할 때 이것은 놀라운 발견이었다 (도 8).
mIgG2a LALAPG 백본 상의 화합물 1, 및 11 및 12의 모든 항체 컨쥬게이트는 내약성이 우수하였으며, 평균 체중 손실은 치료제의 1번째 및 2번째 용량 후 <~5%였다. STING 작용제 화합물 A는 내약성이 덜 우수하였으며, 마우스는 2번째 용량 후 평균 6.2%의 체중 손실을 나타냈다 (도 9b, 10b 및 11b). 더욱이, 3 mg/kg 용량 수준에서 mIgG2a WT 백본을 갖는 12 및 15의 EphA2-표적화된 mAb 컨쥬게이트는 LALAPG 백본을 갖는 12의 컨쥬게이트보다 내약성이 덜 우수하였으며, 표적화된 WT 백본 ADC로 치료된 마우스는 ~8% 체중 손실을 나타냈다 (도 11b).
다음 생체내 연구에서, EphA2-표적화된 mAb (mIgG2a LALAPG 백본)에 컨쥬게이션된 절단 불가능한 링커 화합물 12뿐만 아니라 컨쥬게이션되지 않은 화합물 12a의 항종양 활성을 평가하였다. 12의 EphA2-표적화된 mAb 컨쥬게이트는 1 mg/kg 및 3 mg/kg의 용량에서 강력한 항종양 활성을 나타낸 반면, 화합물 12a는 제한된 항종양 효험을 나타냈다 (도 12). 총체적으로, 이는 종양 모델에서 생체내 비활성인 STING 작용제 화합물 (예컨대, 화합물 1 및 12a)이 항체 (예컨대, 11 및 12의 표적화된 mAb 컨쥬게이트)에 대한 컨쥬게이션에 의해 활성 치료제로 전환될 수 있음을 시사한다.
유리 약물 및 컨쥬게이트에 반응하는 전신 사이토카인 생산을 전신 활성에 대한 프록시로서 측정하였다. 화합물 1 및 11, 12 및 15의 모든 항체 컨쥬게이트는 전-염증성 사이토카인 (IL-6 및 TNF) 생산을 거의 유도하지 않았다. 한편, 화합물 A 및 화합물 12a는 IL-6 및 TNF의 강력한 생산을 유도하였다 (표 4, 표 5 및 표 6). 더욱이, WT Fc 백본을 갖는 11 및 12의 EphA2-표적화된 컨쥬게이트는 LALAPG Fc 백본을 갖는 12의 컨쥬게이트보다 더 전신적인 MIP1α, MIP1β 및 MCP-1 발현을 유도하였다. 이는 도 10-12에 설명된 특이적 EphA2-표적화된 항체가 3 mg/kg q7dx3로 투약된 Renca 종양 모델에서, LALAPG Fc 백본이 항종양 효험에 영향을 미치지 않으면서 온-표적 독성 (전신 사이토카인/체중 손실)을 감소시킬 수 있음을 나타낸다. 이는 또한 STING 작용제 화합물의 컨쥬게이션 (예컨대, 화합물 12a 대 12의 표적화된 mAb 컨쥬게이트)이 효험 및 안전성 둘 모두를 개선 (전신 사이토카인 감소)시킬 수 있음을 나타낸다.
표 4: 화합물 11 또는 12, 또는 화합물 1 또는 화합물 A에 컨쥬게이션된 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC로 치료시 Renca 종양-보유 마우스의 말초 혈액 (혈장)에서의 사이토카인 생산.
표 5: 화합물 12 또는 15에 컨쥬게이션된 mIgG2a 야생형 (WT) 또는 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 다양한 ADC로 치료시 조작된 Renca 종양-보유 마우스의 말초 혈액 (혈장)에서의 사이토카인 생산.
표 6: 화합물 12 또는 화합물 12a에 컨쥬게이션된 mIgG2a LALAPG 백본을 갖는 EphA2-표적화된 mAb를 포함하는 ADC로 치료시 Renca 종양-보유 마우스의 말초 혈액 (혈장)에서의 사이토카인 생산.
비-결합 mAb, PD-L1-표적화된 mAb (종양 및/또는 면역 세포-표적화된) 또는 항원 C-표적화된 mAb (면역 세포-표적화된)에 컨쥬게이션된 절단가능한 링커 11의 항종양 활성을 Renca 종양-보유 마우스에서 또한 평가하였다. 모든 컨쥬게이트는 미처리된 종양과 비교하여 종양 성장 지연을 입증하였다. 11의 PD-L1-표적화된 mAb 컨쥬게이트는 컨쥬게이션되지 않은 PD-L1-표적화된 mAb에 비해 향상된 항종양 활성을 입증하였다. 이는 항원 C 및 PD-L1을 표적화하는 ADC를 사용하여 STING 작용제를 전달하는 항종양 이익을 입증한다 (도 13). PD-L1-표적화된 mAb에 컨쥬게이션된 절단 불가능한 링커 12의 항종양 활성을 Renca 종양-보유 마우스에서 또한 평가하였으며; 이들 컨쥬게이트는 11의 PD-L1 표적화된 mAb 컨쥬게이트보다 내약성이 덜 우수하였지만 종양 부피를 감소시키는 데 효과적이었다.
CT26 암 세포
비-결합 mAb, 항원 C-표적화된 mAb, PD-L1-표적화된 mAb 또는 EphA2-표적화된 mAb에 컨쥬게이션된 절단가능한 링커 11과 비교하여 화합물 1의 항종양 활성을 CT26 종양-보유 마우스에서 평가하였다. 동물을 화합물 1 또는 컨쥬게이션되지 않은 PD-L1-표적화된 mAb로 치료하였을 때, 최소한의 종양 성장 지연이 관찰되었다. 11의 비-결합 mAb 컨쥬게이트에서 약간의 종양 성장 지연이 관찰되었다. 대조적으로, 11의 모든 3 개의 표적화된 mAb 컨쥬게이트를 이용한 치료 후에 유의한 종양 성장 지연이 관찰되었다. 이는 면역 세포-표적화된 컨쥬게이트 (항원 C), 면역 및/또는 종양-표적화된 컨쥬게이트 (PD-L1), 및 종양-표적화된 컨쥬게이트 (EphA2)를 포함하여 다양한 항원을 표적화하는 ADC를 사용하여 STING 작용제를 전달하는 항종양 이익을 입증한다 (도 14). 말초 혈액 혈장에서의 사이토카인 생산의 결과는 표 7에 제시되어 있다.
표 7: 화합물 11에 컨쥬게이션된 mAb를 포함하는 다양한 ADC로 치료시 CT26 종양-보유 마우스의 말초 혈액 (혈장)에서의 사이토카인 생산.
MC38 암 세포
LALAPG mIgG2a Fc 백본을 갖는 비-결합 mAb 또는 EphA2-표적화된 mAb에 컨쥬게이션된 절단가능한 링커 12의 항종양 활성을 MC38-종양 보유 야생형 (WT) 또는 STING-결핍 (Tmem173 gt) 마우스에서 평가하였다. 1 mg/kg의 12의 비-결합 컨쥬게이트 또는 0.1 mg/kg의 12의 표적화된 컨쥬게이트의 매주 3 회 용량으로 치료된 동물은 WT에서 각각 보통의 및 최소한의 종양 성장 지연을 나타내었지만, STING-결핍 종양 보유 마우스에서는 그렇지 않았다. 1 mg/kg의 12의 표적화된 컨쥬게이트의 매주 3 회 용량으로 치료된 동물은 WT에서 강력한 종양 성장 지연을 나타내었지만, STING-결핍 종양 보유 마우스에서는 그렇지 않았다. 이는 MC38 종양-보유 마우스에서 항종양 활성을 위해 종양 미세환경의 비-종양 세포에서 STING 시그널링이 필요함을 입증한다 (도 15a 및 15c).
1 mg/kg의 12의 EphA2-표적화된 컨쥬게이트의 단일 용량으로 치료된 동물은 또한 WT 종양 보유 마우스에서 강력한 종양 성장 지연을 나타내었고, 이는 12의 EphA2-표적화된 컨쥬게이트의 단일 용량이 완전한 종양 퇴행을 구동하기에 충분함을 입증한다 (도 15a).
단일 용량 또는 매주 3 회 용량의 ADC에 반응하여 완전한 종양 퇴행을 달성한 마우스를 반대쪽 옆구리에 있는 MC38 종양 세포로 재챌린지하고, 종양 성장을 모니터링하였다. 모든 재챌린지된 마우스 - MC38 종양 세포로 챌린지된 모든 나이브 미처리 마우스는 아님 - 는 재챌린지로부터 보호되었으며, 이는 12의 표적화된 컨쥬게이트가 면역 기억을 이끌어냄을 시사한다 (도 15d).
4T1 암 세포
LALAPG mIgG2a Fc 백본을 갖는 비-결합 또는 EphA2-표적화된 mAb에 컨쥬게이션된 절단가능한 링커 12의 항종양 활성을 4T1 종양-보유 마우스에서 평가하였다. 화합물 12의 모든 컨쥬게이트는 테스트된 용량에서 유의한 종양 성장 지연을 야기하였으며, 화합물 12의 표적화된 mAb 컨쥬게이트는 비-결합 컨쥬게이트에 비해 향상된 종양 성장 지연을 나타내며, 최소의 체중 손실이 관찰되었다 (도 16b). 이는 화합물 12의 EphA2-표적화된 mAb 컨쥬게이트가 다중 종양 모델에서 활성임을 입증한다 (도 12-16).
랫트 내약성 연구:
WT Fc 백본을 갖는 비-결합 항체, Fc null 백본을 갖는 비-결합 항체, WT Fc 백본을 갖는 표적화된 항체 및 Fc null 백본을 갖는 표적화된 항체에 컨쥬게이션된 화합물 12의 비임상 안전성 프로파일을 비-GLP 랫트 독성학 연구에서 평가하였다. 화합물 12 약물 링커를 갖는 모든 컨쥬게이트 (비-결합 및 표적화된, WT 및 null Fc 백본 둘 모두)는 마우스 종양 모델에서 최소 효능 용량보다 높은 용량에서 랫트에서 용인되었다.
실시예 4
생체내 약동학적 연구
방법
수컷 C57BL/6 마우스에 화합물 12에 컨쥬게이션된 [탈글리코실화된] 비-결합 mAb를 포함하는 ADC의 매주 2 회 1 mg/kg 용량을 투여한 후 약동학적 프로파일을 분석하였다. 혈장을 수집하고, 면역검정으로 총 제네릭 항체 (gTAb)에 대해 분석하였다. 마우스 K2EDTA 혈장의 TAb 농도를 Gyros 관류 면역검정 플랫폼으로 결정하였다. 샘플 및 표준물질을 검정 완충액에 희석하고, 샌드위치 포맷으로 비오티닐화된 뮤린 항-인간 카파 경쇄 항체 및 형광 염소 항-인간 IgG Fcg F(ab')2 항체 단편을 함유하는 용액과 함께 항온처리하였다. 생성된 면역복합체는 컴팩트 디스크 (CD)의 친화도 컬럼에서 스트렙타비딘-코팅된 비드에 결합되었다. C57BL/6 수컷 마우스 혈장 샘플에서 테스트 항목의 농도에 정비례하는 신호를 생산하는 형광 검출 시약을 여기시키는 레이저로 CD를 판독하였다. 비-구획 분석을 Phoenix WinNonlin 8.2 (Certara, USA)를 사용하여 풀링된 동물 혈장 농도 데이터 (희소 샘플링)에 적용하였다. 정량 한계 미만 (BLQ)의 농도 값을 분석을 위해 0으로 처리하였다. 공칭 용량 및 샘플링 시간을 사용하였다.
결과
수컷 C57BL/6 마우스에 화합물 12에 컨쥬게이션된 [탈글리코실화된] 비-결합 mAb를 포함하는 ADC의 매주 2 회 1 mg/kg 용량을 투여한 후 약동학적 프로파일을 분석하였다. 제1 및 제2 용량 후 관찰된 최대 농도 (Cmax)는 각각 40500 및 52400 ng/mL였다. 시간 0 내지 7 일까지의 농도-시간 곡선하 면적 (AUC0-7d)은 85600 d*ng/mL였다. 이는 화합물 12의 비-결합 컨쥬게이트에 대한 총 항체 노출이 공개된 소분자 STING 작용제의 소분자 노출보다 더 높았음을 시사한다 (도 17)(예컨대, Ramanjulu 등, 2018, Nature 564, 439-443 참고).
본 개시내용에 인용된 참조문헌 각각의 내용은 그 전체가 참조로 본원에 포함된다.
본 개시내용의 다수의 실시양태가 설명되었다. 그럼에도 불구하고, 본 개시내용의 사상 및 범주를 벗어나지 않으면서 다양한 변형이 이루어질 수 있음을 이해할 것이다. 따라서, 다른 실시양태는 다음의 청구범위의 범주 내에 있다.
SEQUENCE LISTING <110> Seagen Inc. <120> IMMUNOMODULATORY ANTIBODY-DRUG CONJUGATES <130> SGENE.008WO <150> US 63/292,779 <151> 2021-12-21 <150> US 63/138,360 <151> 2021-01-15 <160> 28 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 CDR-H1 <400> 1 Asp Tyr Tyr Ile Thr 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 CDR-H2 <400> 2 Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 CDR-H3 <400> 3 Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr 1 5 <210> 4 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 CDR-L1 <400> 4 Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Phe Asp Gly Asp Ser Tyr Met Asn 1 5 10 15 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 CDR-L2 <400> 5 Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 CDR-L3 <400> 6 Gln Gln Ser Asn Glu Asp Pro Trp Thr 1 5 <210> 7 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 VH <400> 7 Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Thr Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Phe 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Asn Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 8 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 VL <400> 8 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Phe Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Val Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 9 <211> 447 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 HC <400> 9 Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Thr Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Phe 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Asn Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 10 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 HC v2 <400> 10 Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Ile Thr Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Phe 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Asn Tyr Gly Asn Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445 <210> 11 <211> 218 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> cAC10 LC <400> 11 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Phe Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Val Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 12 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 CDR-H1 <400> 12 His Tyr Met Met Ala 1 5 <210> 13 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 CDR-H2 <400> 13 Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 14 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 CDR-H3 <400> 14 Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala Glu Tyr 1 5 10 15 Phe Gln His <210> 15 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 CDR-L1 <400> 15 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp Leu Ala 1 5 10 <210> 16 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 CDR-L2 <400> 16 Lys Ala Ser Asn Leu His Thr 1 5 <210> 17 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 CDR-L3 <400> 17 Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Arg Thr 1 5 <210> 18 <211> 128 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 VH <400> 18 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser His Tyr 20 25 30 Met Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala 100 105 110 Glu Tyr Phe Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 <210> 19 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 VL <400> 19 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Arg 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 20 <211> 458 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 HC <400> 20 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser His Tyr 20 25 30 Met Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala 100 105 110 Glu Tyr Phe Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 130 135 140 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 145 150 155 160 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 165 170 175 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 180 185 190 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 195 200 205 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 210 215 220 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 275 280 285 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 290 295 300 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 325 330 335 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 340 345 350 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 355 360 365 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 370 375 380 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 405 410 415 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 420 425 430 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 435 440 445 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 21 <211> 457 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 HC v2 <400> 21 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser His Tyr 20 25 30 Met Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala 100 105 110 Glu Tyr Phe Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 130 135 140 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 145 150 155 160 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 165 170 175 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 180 185 190 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 195 200 205 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 210 215 220 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 275 280 285 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 290 295 300 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 325 330 335 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 340 345 350 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 355 360 365 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 370 375 380 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 405 410 415 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 420 425 430 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 435 440 445 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455 <210> 22 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 LC <400> 22 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Arg 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 23 <211> 458 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 mIgG2a HC <400> 23 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser His Tyr 20 25 30 Met Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala 100 105 110 Glu Tyr Phe Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly 130 135 140 Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr 145 150 155 160 Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu 180 185 190 Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile 195 200 205 Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys 210 215 220 Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp 275 280 285 Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg 290 295 300 Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn 325 330 335 Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly 340 345 350 Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu 355 360 365 Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met 370 375 380 Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe 405 410 415 Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn 420 425 430 Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr 435 440 445 Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys 450 455 <210> 24 <211> 457 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 mIgG2a HC v2 <400> 24 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser His Tyr 20 25 30 Met Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala 100 105 110 Glu Tyr Phe Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly 130 135 140 Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr 145 150 155 160 Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu 180 185 190 Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile 195 200 205 Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys 210 215 220 Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp 275 280 285 Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg 290 295 300 Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn 325 330 335 Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly 340 345 350 Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu 355 360 365 Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met 370 375 380 Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe 405 410 415 Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn 420 425 430 Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr 435 440 445 Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly 450 455 <210> 25 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 mIgG2a LC <400> 25 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Arg 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly 115 120 125 Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile 130 135 140 Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu 145 150 155 160 Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr 180 185 190 Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Asn Glu Cys 210 <210> 26 <211> 458 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 mIgG2a LALAPG HC <400> 26 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser His Tyr 20 25 30 Met Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala 100 105 110 Glu Tyr Phe Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly 130 135 140 Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr 145 150 155 160 Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu 180 185 190 Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile 195 200 205 Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys 210 215 220 Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp 275 280 285 Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg 290 295 300 Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn 325 330 335 Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly 340 345 350 Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu 355 360 365 Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met 370 375 380 Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe 405 410 415 Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn 420 425 430 Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr 435 440 445 Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys 450 455 <210> 27 <211> 457 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 mIgG2a LALAPG HC v2 <400> 27 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser His Tyr 20 25 30 Met Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Arg Ile Gly Pro Ser Gly Gly Pro Thr His Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Gly Tyr Asp Ser Gly Tyr Asp Tyr Val Ala Val Ala Gly Pro Ala 100 105 110 Glu Tyr Phe Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 125 Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly 130 135 140 Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr 145 150 155 160 Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu 180 185 190 Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile 195 200 205 Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys 210 215 220 Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Asn Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp 275 280 285 Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg 290 295 300 Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn 325 330 335 Lys Asp Leu Gly Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly 340 345 350 Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu 355 360 365 Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met 370 375 380 Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe 405 410 415 Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn 420 425 430 Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr 435 440 445 Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly 450 455 <210> 28 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> h1C1 mIgG2a LALAPG LC <400> 28 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Arg 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly 115 120 125 Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile 130 135 140 Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu 145 150 155 160 Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr 180 185 190 Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro Ile Val Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Asn Glu Cys 210

Claims (579)

  1. 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:

    여기서:
    R1은 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
    각각의 R2 및 R3는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고;
    각각의 RA, RB, RC, RD, RE 및 RF는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    각각의 아래첨자 m은 독립적으로 0 또는 1이고;
    각각의 아래첨자 q는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    XA는 -CH2-, -O-, -S-, -NH- 또는 -N(CH3)-이고;
    XB는 부재하거나 2-16 원 헤테로알킬렌이고;
    L은 화학식 -(A)a-(W)w-(Y)y-를 갖는 링커이며, 여기서:
    아래첨자 a는 0 또는 1이고;
    아래첨자 y는 0 또는 1이고;
    아래첨자 w는 0 또는 1이고;
    A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌; 또는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이고;
    각각의 Ra1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬), 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rb1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rd1 및 Re1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    W는 1-12 개의 아미노산이거나 하기 구조를 가지며:

    여기서 Su는 당 모이어티이고;
    -OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
    각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
    W1은 부재하거나 -O-C(=O)-이고;
    은 A 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내고;
    *는 Y, XA 또는 XB에 대한 공유 부착을 나타나며;
    Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티, 또는 절단 불가능한 모이어티이고;
    M은 이고;
    각각의 AA는 독립적으로 선택된 아미노산이며, 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결되고;
    각각의 아래첨자 b는 독립적으로 1 내지 6의 정수이며;
    XB 및 L은 각각 독립적으로 PEG1 내지 PEG 72의 PEG 유닛으로 임의로 치환됨.
  2. 제1항에 있어서, R1이 수소인, 화합물.
  3. 제1항에 있어서, R1이 하이드록실인, 화합물.
  4. 제1항에 있어서, R1이 C1-6 알콕시인, 화합물.
  5. 제1항 또는 제4항에 있어서, R1이 메톡시인, 화합물.
  6. 제1항에 있어서, R1이 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시인, 화합물.
  7. 제1항 또는 제6항에 있어서, R1이 메톡시에틸인, 화합물.
  8. 제1항에 있어서, R1이 PEG2 내지 PEG4인, 화합물.
  9. 제1항에 있어서, R1이 -(CH2)n-NRARB인, 화합물.
  10. 제1항 또는 제9항에 있어서, RA 및 RB가 둘 모두 수소인, 화합물.
  11. 제1항 또는 제9항에 있어서, RA 및 RB가 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  12. 제1항 또는 제9항에 있어서, RA 및 RB 중 하나가 수소이고, RA 및 RB 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  13. 제1항 또는 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 0인, 화합물.
  14. 제1항 또는 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 1인, 화합물.
  15. 제1항 또는 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 2인, 화합물.
  16. 제1항 또는 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 3, 4, 5 또는 6인, 화합물.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R3가 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2 및 R3가 동일한, 화합물.
  18. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R3이 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2 및 R3가 상이한, 화합물.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 -(C=O)m-NRCRD인, 화합물.
  20. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, R3가 -(C=O)m-NRCRD인, 화합물.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 둘 모두 수소인, 화합물.
  22. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  23. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD 중 하나가 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  24. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 0인, 화합물.
  25. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 1인, 화합물.
  26. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 -(CH2)q-NRERF인, 화합물
  27. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, R3가 -(CH2)q-NRERF인, 화합물.
  28. 제1항 내지 제18항, 제26항 또는 제27항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 둘 모두 수소인, 화합물.
  29. 제1항 내지 제18항, 제26항 또는 제27항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF는 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  30. 제1항 내지 제18항, 제26항 또는 제27항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF 중 하나가 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  31. 제1항 내지 제18항, 제26항 또는 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 q가 0인, 화합물.
  32. 제1항 내지 제18항, 제26항 또는 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 q가 1 내지 6의 정수인, 화합물.
  33. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, R3가 -CO2H인, 화합물.
  34. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 -CO2H인, 화합물.
  35. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -CH2-인, 화합물.
  36. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -O-인, 화합물.
  37. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -S-인, 화합물.
  38. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -NH-인, 화합물.
  39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2-16 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2-12 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2-8 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  42. 제39항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 헤테로알킬렌이 1-4 개의 메틸 기를 갖는 분지형인, 화합물.
  43. 제39항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 헤테로알킬렌이 1 또는 2 개의 메틸 기를 갖는 분지형인, 화합물.
  44. 제39항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 헤테로알킬렌이 1-3 개의 플루오로 기로 치환되는, 화합물.
  45. 제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 1 또는 2 개의 질소 원자를 포함하는, 화합물.
  46. 제1항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 1 또는 2 개의 옥소 기를 포함하는, 화합물.
  47. 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 하나의 질소 원자 및 하나의 옥소 기를 포함하는, 화합물.
  48. 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2 개의 질소 원자 및 하나의 옥소 기를 포함하는, 화합물.
  49. 제1항 내지 제41항 또는 제45항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내는, 화합물.
  50. 제1항 내지 제41항 또는 제45항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내는, 화합물.
  51. 제1항 내지 제41항 또는 제45항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내는, 화합물.
  52. 제1항 내지 제41항 또는 제45항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내는, 화합물.
  53. 제1항 내지 제43항 또는 제48항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L에 대한 공유 부착을 나타내는, 화합물.
  54. 제1항 내지 제43항 또는 제45항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L에 대한 공유 부착을 나타내는, 화합물.
  55. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 부재한, 화합물.
  56. 제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 a가 1인, 화합물.
  57. 제1항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 y가 1인, 화합물.
  58. 제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 w가 1인, 화합물.
  59. 제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 1인, 화합물.
  60. 제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 2인, 화합물.
  61. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 3인, 화합물.
  62. 제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 자기희생 모이어티인, 화합물.
  63. 제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 인, 화합물.
  64. 제1항 내지 제54항 또는 제56항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 절단 불가능한 모이어티이고, a가 0인, 화합물.
  65. 제1항 내지 제54항, 제56항 내지 제61항, 또는 제64항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 사이클로헥산카복실, 운데카노일, 카프로일, 헥사노일, 부타노일 또는 프로피오닐 기인, 화합물.
  66. 제1항 내지 제54항, 제56항 내지 제61항, 또는 제64항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 PEG4 내지 PEG12인, 화합물.
  67. 제1항 내지 제66항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-12 개의 아미노산인, 화합물.
  68. 제1항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-6 개의 아미노산인, 화합물.
  69. 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, W에서의 각각의 아미노산이 독립적으로 알라닌, 글리신, 리신, 세린, 아스파르트산, 아스파르테이트 메틸 에스테르, N,N-디메틸-리신, 페닐알라닌, 시트룰린, 발린-알라닌, 발린-시트룰린, 페닐알라닌-리신 또는 호모세린 메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물.
  70. 제1항 내지 제66항 중 어느 한 항에 있어서, W가 하기 구조를 갖는 것인, 화합물:

    여기서 Su가 당 모이어티이고;
    -OA-가 글리코시드 결합을 나타내고;
    각각의 Rg가 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
    W1이 부재하거나 -O-C(=O)-이고;
    이 A 또는 M에 대한 공유 부착을 나타내고;
    *가 Y, XA 또는 XB에 대한 공유 부착을 나타냄.
  71. 제1항 내지 제66항 또는 제70항 중 어느 한 항에 있어서, W1이 -O-C(=O)-인, 화합물.
  72. 제1항 내지 제66항 또는 제70항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 하나의 Rg가 할로겐, -CN 또는 -NO2이고, 나머지 Rg가 수소인, 화합물.
  73. 제1항 내지 제66항 또는 제70항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Rg가 수소인, 화합물.
  74. 제1항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌인, 화합물.
  75. 제1항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C4-10 알킬렌인, 화합물.
  76. 제1항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, A가 Ra1으로 치환된 C2-20 알킬렌인, 화합물.
  77. 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, A가 Ra1으로 치환된 C4-10 알킬렌인, 화합물.
  78. 제1항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, A가 C2-20 알킬렌인, 화합물.
  79. 제1항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, A가 C4-10 알킬렌인, 화합물.
  80. 제1항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  81. 제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 4 내지 12 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  82. 제1항 내지 제73항 또는 제80항 중 어느 한 항에 있어서, A가 하나의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  83. 제1항 내지 제73항 또는 제80항 중 어느 한 항에 있어서, A가 하나의 Rb1으로 임의로 치환된 4 내지 12 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  84. 제1항 내지 제73항 또는 제80항 중 어느 한 항에 있어서, A가 2 내지 40 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  85. 제1항 내지 제73항 또는 제80항 중 어느 한 항에 있어서, A가 4 내지 12 원 헤테로알킬렌인, 화합물.
  86. 제1항 내지 제73항 또는 제84항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가 이며, 여기서 이 W에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 M에 대한 공유 연결을 나타내는, 화합물.
  87. 제1항 내지 제54항 또는 제61항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 a가 0인, 화합물.
  88. 제1항 내지 제54항 또는 제67항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 y가 0인, 화합물.
  89. 제1항 내지 제54항, 제58항 내지 제66항, 또는 제79항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 w가 0인, 화합물.
  90. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 0인, 화합물.
  91. 제1항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  92. 제1항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  93. 제1항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  94. 제1항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 AA가 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b가 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결되는, 화합물.
  95. 제1항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 AA가 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b가 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 질소 원자를 통해 연결되는, 화합물.
  96. 제1항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 b가 1인, 화합물.
  97. 제1항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 b가 2인, 화합물.
  98. 제1항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 b가 3, 4, 5 또는 6인, 화합물.
  99. 제1항 내지 제91항, 제94항 또는 제96항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  100. 제1항 내지 제90항, 제92항 또는 제96항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  101. 제1항 내지 제90항, 제93항 또는 제96항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  102. 제1항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  103. 제1항 내지 제102항 중 어느 한 항에 있어서, XB 및 L 중 하나가 PEG1 내지 PEG 72의 독립적으로 선택된 PEG 유닛으로 치환되는, 화합물.
  104. 제1항 내지 제102항 중 어느 한 항에 있어서, XB 및 L이 비치환되는, 화합물.
  105. 제1항에 있어서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:


    및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  106. 제1항에 있어서,
    하기 화학식 (II-A)의 구조를 갖는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:

    여기서:
    LA가 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -C(O)NRH(CH2)1-6-이고;
    각각의 RH가 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    Y가 이고;
    #이 -NRHLA에 대한 공유 부착을 나타내고;
    ##이 W 또는 LB에 대한 공유 부착을 나타내고;
    LB가 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -[NHC(O)(CH2)1-4]1-3-임.
  107. 제106항에 있어서, RH가 메틸인, 화합물.
  108. 제106항 또는 제107항에 있어서, LA가 -(CH2)2-6-인, 화합물.
  109. 제106항 또는 제107항에 있어서, LA가 -(CH2)3-인, 화합물.
  110. 제106항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, y가 0인, 화합물.
  111. 제106항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서, y가 1인, 화합물.
  112. 제106항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-3 개의 아미노산의 쇄인, 화합물.
  113. 제112항에 있어서, W의 각각의 아미노산이 알라닌, 발린, 이소류신, 류신, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 글리신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, O-메틸세린, O-메틸아스파르트산, O-메틸글루탐산, N-메틸리신, O-메틸티로신, O-메틸히스티딘 및 O-메틸트레오닌으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  114. 제106항 내지 제111항 중 어느 한 항에 있어서, W가 하기인, 화합물:
    , 여기서:
    이 LB에 대한 공유 부착을 나타내고;
    *가 Y 또는 NRH에 대한 공유 부착을 나타냄.
  115. 제106항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, LB가 -C(O)(CH2)2-인, 화합물.
  116. 제106항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, LB가 -[NHC(O)(CH2)2]2-인, 화합물.
  117. 제106항에 있어서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:




    및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  118. 하기 화학식을 갖는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC):
    Ab-(S*-M 1 -(D)) p
    여기서:
    Ab는 항체이고;
    각각의 S*는 항체의 시스테인 잔기로부터의 황 원자이고;
    M1은 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드이고;
    아래첨자 p는 2 내지 8의 정수이며;
    각각의 (D)는 하기 화학식 (I)의 약물 유닛이고:

    여기서:
    은 M1에 대한 L의 공유 부착을 나타내고;
    R1은 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
    R2 및 R3은 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD 또는 -(CH2)q-NRERF이고;
    각각의 RA, RB, RC, RD, RE 및 RF는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    각각의 아래첨자 m은 독립적으로 0 또는 1이고;
    각각의 아래첨자 q는 0 내지 6의 정수이고;
    XA는 -CH2-, -O-, -S-, -NH- 또는 -N(CH3)-이고;
    XB는 부재하거나 2-16 원 헤테로알킬렌이고;
    L은 화학식 -(A)a-(W)w-(Y)y-를 가지며, 여기서:
    아래첨자 a는 0 또는 1이고;
    아래첨자 y는 0 또는 1이고;
    아래첨자 w는 0 또는 1이고;
    A는 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌; 또는 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌이고;
    각각의 Ra1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬), 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rb1은 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, -NRd1Re1, -C(O)NRd1Re1, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rd1 및 Re1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    W는 1-12 개의 아미노산이거나, 하기 구조를 가지며:

    여기서 Su는 당 모이어티이고;
    -OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
    각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
    W1이 부재하거나 -O-C(=O)-이고;
    은 A 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내고;
    *는 Y, XB 또는 XA에 대한 공유 부착을 나타내고;
    Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티, 또는 절단 불가능한 모이어티이고;
    XB 및 L은 각각 독립적으로 PEG1 내지 PEG 72의 PEG 유닛으로 임의로 치환됨.
  119. 제118항에 있어서, R1이 수소인, ADC.
  120. 제118항에 있어서, R1이 하이드록실인, ADC.
  121. 제118항에 있어서, R1이 C1-6 알콕시인, ADC.
  122. 제118항 또는 제121항에 있어서, R1이 메톡시인, ADC.
  123. 제118항에 있어서, R1이 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시인, ADC.
  124. 제118항 또는 제123항에 있어서, R1이 메톡시에틸인, ADC.
  125. 제118항에 있어서, R1이 PEG2 내지 PEG4인, ADC.
  126. 제118항에 있어서, R1이 -(CH2)n-NRARB인, ADC.
  127. 제118항 또는 제126항에 있어서, RA 및 RB가 둘 모두 수소인, ADC.
  128. 제118항 또는 제126항에 있어서, RA 및 RB가 독립적으로 C1-3 알킬인, ADC.
  129. 제118항 또는 제126항에 있어서, RA 및 RB 중 하나가 수소이고, RA 및 RB 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, ADC.
  130. 제118항 또는 제126항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 0인, ADC.
  131. 제118항 또는 제126항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 1인, ADC.
  132. 제118항 또는 제126항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 2인, ADC.
  133. 제118항 또는 제126항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 3, 4, 5 또는 6인, ADC.
  134. 제118항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R3이 독립적으로 -CO2H 또는 -(C=O)m-NRCRD, 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2 및 R3가 동일한, ADC.
  135. 제118항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, R2 및 R3이 독립적으로 -CO2H 또는 -(C=O)m-NRCRD, 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2 및 R3가 상이한, ADC.
  136. 제118항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 -(C=O)m-NRCRD인, ADC.
  137. 제118항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R3가 -(C=O)m-NRCRD인, ADC.
  138. 제118항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 둘 모두 수소인, ADC.
  139. 제118항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, ADC.
  140. 제118항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD 중 하나가 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, ADC.
  141. 제118항 내지 제140항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 0인, ADC.
  142. 제118항 내지 제140항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 1인, ADC.
  143. 제118항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 -(CH2)q-NRERF인, ADC.
  144. 제118항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R3가 -(CH2)q-NRERF인, ADC.
  145. 제118항 내지 제135항, 제143항 또는 제144항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 둘 모두 수소인, ADC.
  146. 제118항 내지 제135항, 제143항 또는 제144항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, ADC.
  147. 제118항 내지 제135항, 제143항 또는 제144항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF 중 하나가 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, ADC.
  148. 제118항 내지 제135항, 제143항 또는 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 q가 0인, ADC.
  149. 제118항 내지 제135항, 제143항 또는 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 q가 1 내지 6의 정수인, ADC.
  150. 제118항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R3가 -CO2H인, ADC.
  151. 제118항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 -CO2H인, ADC.
  152. 제118항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -CH2-인, ADC.
  153. 제118항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -O-인, ADC.
  154. 제118항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -S-인, ADC.
  155. 제118항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, XA가 -NH-인, ADC.
  156. 제118항 내지 제155항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2-16 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  157. 제118항 내지 제155항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2-12 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  158. 제118항 내지 제157항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2-8 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  159. 제118항 내지 제158항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 헤테로알킬렌이 1-4 개의 메틸 기를 갖는 분지형인, ADC.
  160. 제118항 내지 제159항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 헤테로알킬렌이 1 또는 2 개의 메틸 기를 갖는 분지형인, ADC.
  161. 제118항 내지 제160항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 헤테로알킬렌이 1-3 개의 플루오로 기로 치환되는, ADC.
  162. 제118항 내지 제161항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 1 또는 2 개의 질소 원자를 포함하는, ADC.
  163. 제118항 내지 제162항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 1 또는 2 개의 옥소 기를 포함하는, ADC.
  164. 제118항 내지 제163항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 하나의 질소 원자 및 하나의 옥소 기를 포함하는, ADC.
  165. 제118항 내지 제163항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 2 개의 질소 원자 및 하나의 옥소 기를 포함하는, ADC.
  166. 제118항 내지 제158항 또는 제162항 내지 제164항 중 어느 한 항에 있어서,
    XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내는, ADC.
  167. 제118항 내지 제158항 또는 제162항 내지 제164항 중 어느 한 항에 있어서,
    XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내는, ADC.
  168. 제118항 내지 제158항 또는 제162항 내지 제163항 중 어느 한 항에 있어서,
    XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내는, ADC.
  169. 제118항 내지 제158항 또는 제162항 내지 제164항 중 어느 한 항에 있어서,
    XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내는, ADC.
  170. 제118항 내지 제158항 또는 제162항 내지 제165항 중 어느 한 항에 있어서,
    XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L에 대한 공유 부착을 나타내는, ADC.
  171. 제118항 내지 제158항 또는 제162항 내지 제165항 중 어느 한 항에 있어서,
    XB가 이며, 여기서 이 XA에 대한 공유 부착을 나타내고, *가 L에 대한 공유 부착을 나타내는, ADC.
  172. 제118항 내지 제158항 중 어느 한 항에 있어서, XB가 부재하는, ADC.
  173. 제118항 내지 제171항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 a가 1인, ADC.
  174. 제118항 내지 제171항 또는 제173항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 y가 1인, ADC.
  175. 제118항 내지 제173항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 w가 1인, ADC.
  176. 제118항 내지 제171항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 1인, ADC.
  177. 제118항 내지 제171항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 2인, ADC.
  178. 제118항 내지 제171항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 3인, ADC.
  179. 제118항 내지 제178항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 자기희생 모이어티인, ADC.
  180. 제118항 내지 제178항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 인, ADC.
  181. 제118항 내지 제172항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 절단 불가능한 모이어티이고, a가 0인, ADC.
  182. 제118항 내지 제178항 또는 제181항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 MCC 또는 SMCC인, ADC.
  183. 제118항 내지 제178항 또는 제181항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 PEG4 내지 PEG12인, ADC.
  184. 제118항 내지 제183항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-12 개의 아미노산인, ADC.
  185. 제118항 내지 제184항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-6 개의 아미노산인, ADC.
  186. 제118항 내지 제185항 중 어느 한 항에 있어서, W에서의 각각의 아미노산이 알라닌, 글리신, 리신, 세린, 아스파르트산, 아스파르테이트 메틸 에스테르, N,N-디메틸-리신, 페닐알라닌, 시트룰린, 발린-알라닌, 발린-시트룰린, 페닐알라닌-리신 또는 호모세린 메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는, ADC.
  187. 제118항 내지 제183항 중 어느 한 항에 있어서,
    W가 하기 구조를 갖는, ADC:

    여기서 Su가 당 모이어티이고;
    -OA-가 글리코시드 결합을 나타내고;
    각각의 Rg가 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
    W1이 부재하거나 -O-C(=O)-이고;
    이 A 또는 M1에 대한 공유 부착을 나타내고;
    *가 Y, XB 또는 XA에 대한 공유 부착을 나타냄.
  188. 제118항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서,
    W1이 -O-C(=O)-인, ADC.
  189. 제118항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, W1이 부재하는, ADC.
  190. 제118항 내지 제188항 중 어느 한 항에 있어서, 하나의 Rg가 할로겐, -CN 또는 -NO2이고, 나머지 RG가 수소인, ADC.
  191. 제118항 내지 제188항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Rg가 수소인, ADC.
  192. 제118항 내지 제191항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C2-20 알킬렌인, ADC.
  193. 제118항 내지 제192항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Ra1으로 임의로 치환된 C4-10 알킬렌인, ADC.
  194. 제118항 내지 제191항 중 어느 한 항에 있어서, A가 Ra1으로 치환된 C2-20 알킬렌인, ADC.
  195. 제118항 내지 제192항 중 어느 한 항에 있어서, A가 Ra1으로 치환된 C4-10 알킬렌인, ADC.
  196. 제118항 내지 제191항 중 어느 한 항에 있어서, A가 C2-20 알킬렌인, ADC.
  197. 제118항 내지 제192항 중 어느 한 항에 있어서, A가 C4-10 알킬렌인, ADC.
  198. 제118항 내지 제191항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  199. 제118항 내지 제191항 중 어느 한 항에 있어서, A가 1-3 개의 Rb1으로 임의로 치환된 4 내지 12 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  200. 제118항 내지 제191항 또는 제199항 중 어느 한 항에 있어서, A가 하나의 Rb1으로 임의로 치환된 2 내지 40 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  201. 제118항 내지 제191항 또는 제199항 중 어느 한 항에 있어서, A가 하나의 Rb1으로 임의로 치환된 4 내지 12 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  202. 제118항 내지 제191항 또는 제199항 중 어느 한 항에 있어서, A가 2 내지 40 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  203. 제118항 내지 제191항 또는 제199항 중 어느 한 항에 있어서, A가 4 내지 12 원 헤테로알킬렌인, ADC.
  204. 제118항 내지 제191항 또는 제202항 내지 제203항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가 인, ADC.
  205. 제118항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 a가 0인, ADC.
  206. 제118항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자에서 y가 0인, ADC.
  207. 제118항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 아래첨자 w가 0인, ADC.
  208. 제118항 내지 제145항 또는 제205항 내지 제207항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아래첨자 a, 아래첨자 y 및 아래첨자 w의 합이 0인, ADC.
  209. 제118항 내지 제208항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커가 절단가능한 링커인, ADC.
  210. 제118항 내지 제209항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커가 카텝신 B, C 또는 D; β-글루쿠로니다제; 및 β-만노시다제 중 하나 이상에 의해 절단가능한, ADC.
  211. 제118항 내지 제208항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 링커가 절단 불가능한 링커인, ADC.
  212. 제118항 내지 제211항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간화된 항체인, ADC.
  213. 제118항 내지 제212항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 단클론 항체인, ADC.
  214. 제118항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 푸코실화되는, ADC.
  215. 제118항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 탈푸코실화되는, ADC.
  216. 하기 화학식 (IV)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:

    여기서:
    R1C는 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
    R2C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF, 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R2C는 1, 2 또는 3으로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
    R3C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF, 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R3C는 1', 2' 또는 3'으로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
    각각의 RA, RB, RC, RD, RE, RF 및 RM은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    각각의 아래첨자 q는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    LE는 -(C=O)- 또는 -S(O)2-이고;
    LC는 -(CRIRJ)1-3-이고
    각각의 RI 및 RJ는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    아래첨자 s는 0 또는 1이고;
    각각의 Cy1은 독립적으로 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴, 또는 C3-6 사이클로알킬이고;
    각각의 RK는 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd2Re2, -C(O)NRd2Re2, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rd2 및 Re2는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    LAA는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6-, -C(O)NRL(CH2)1-6-, -(CH2)1-6O-, -C(O)(CH2)1-6O- 또는 -C(O)NRL(CH2)1-6O-이고;
    RL은 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    Cy2는 각각이 하나 이상의 RU로 임의로 치환된, C3-6 사이클로알킬, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴 또는 페닐이고;
    각각의 RU는 -CO2Rj1, -(C=O)NRd3Re3, -S(O)2NRd3Re3, -(CH2)q1-NRg1Rh1, -(CH2)q1-ORj1 및 -(CH2)q1-(OCH2CH2)1-8OH로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    아래첨자 q1은 0 내지 6의 정수이고;
    아래첨자 t1 및 t2는 독립적으로 0 또는 1이며, 여기서 t1 및 t2 중 하나 이상은 1이고;
    LD는 -(CH2)1-6-이고;
    아래첨자 u는 0 또는 1이고;
    Z는 -N(RHH)- 또는 -N+(C1-6 알킬)(RHH)-이고;
    RHH는 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클, 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이고;
    Y는 자기희생 모이어티, 비자기희생 방출가능한 모이어티, 또는 절단 불가능한 모이어티이고;
    아래첨자 y는 0 또는 1이고;
    W는 1-12 개의 아미노산 쇄이거나, 하기 구조를 가지며:

    여기서 Su는 당 모이어티이고;
    -OA-는 글리코시드 결합을 나타내고;
    각각의 Rg는 독립적으로 수소, 할로겐, -CN 또는 -NO2이고;
    W1은 부재하거나 -O-C(=O)-이고;
    은 LBB에 대한 공유 부착을 나타내고;
    *는 Y, LD, NRHH 또는 Cy2에 대한 공유 부착을 나타내고;
    아래첨자 w는 0 또는 1이고;
    LBB는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6- 또는 -[NHC(O)(CH2)1-4]1-3-이고;
    M은 이고;
    각각의 AA는 독립적으로 선택된 아미노산이며, 여기서 (AA)b는 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결되고;
    각각의 아래첨자 b는 독립적으로 1 내지 6의 정수임.
  217. 제216항에 있어서, R1C가 수소인, 화합물.
  218. 제216항에 있어서, R1C가 하이드록실인, 화합물.
  219. 제216항에 있어서, R1C가 C1-6 알콕시인, 화합물.
  220. 제216항에 있어서, R1C가 메톡시인, 화합물.
  221. 제216항에 있어서, R1C가 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시인, 화합물.
  222. 제216항에 있어서, R1C가 메톡시에틸인, 화합물.
  223. 제216항에 있어서, R1C가 PEG2 내지 PEG4인, 화합물.
  224. 제216항에 있어서, R1C가 -(CH2)n-NRARB인, 화합물.
  225. 제216항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, RA 및 RB가 둘 모두 수소인, 화합물.
  226. 제216항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, RA 및 RB가 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  227. 제216항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, RA 및 RB 중 하나가 수소이고, RA 및 RB 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  228. 제216항 내지 제227항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 0인, 화합물.
  229. 제216항 내지 제227항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 1인, 화합물.
  230. 제216항 내지 제227항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 2인, 화합물.
  231. 제216항 내지 제227항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 3, 4, 5 또는 6인, 화합물.
  232. 제216항 내지 제231항 중 어느 한 항에 있어서, R2C 및 R3C가 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD, 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C가 동일한, 화합물.
  233. 제216항 내지 제231항 중 어느 한 항에 있어서, R2C 및 R3C가 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD, 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C가 상이한, 화합물.
  234. 제216항 내지 제231항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -(C=O)m-NRCRD인, 화합물.
  235. 제216항 내지 제231항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -(C=O)m-NRCRD인, 화합물.
  236. 제216항 내지 제235항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 둘 모두 수소인, 화합물.
  237. 제216항 내지 제235항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  238. 제216항 내지 제235항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD 중 하나가 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  239. 제216항 내지 제238항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 0인, 화합물.
  240. 제216항 내지 제238항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 1인, 화합물.
  241. 제216항 내지 제240항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -(CH2)q-NRERF인, 화합물.
  242. 제216항 내지 제241항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -(CH2)q-NRERF인, 화합물.
  243. 제216항 내지 제242항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 둘 모두 수소인, 화합물.
  244. 제216항 내지 제242항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  245. 제216항 내지 제242항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF 중 하나가 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  246. 제216항 내지 제245항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 q가 0인, 화합물.
  247. 제216항 내지 제245항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 q가 1 내지 6의 정수인, 화합물.
  248. 제216항 내지 제247항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -CO2RM인, 화합물.
  249. 제216항 내지 제248항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -CO2RM인, 화합물.
  250. 제248항 또는 제249항에 있어서, RM이 수소인, 화합물.
  251. 제248항 또는 제249항에 있어서, RM이 C1-3 알킬인, 화합물.
  252. 제216항 내지 제247항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -(CH2)q-ORM인, 화합물.
  253. 제216항 내지 제247항 및 제252항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -(CH2)q-ORM인, 화합물.
  254. 제252항 또는 제253항에 있어서, RM이 수소인, 화합물.
  255. 제252항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, q가 0인, 화합물.
  256. 제252항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, q가 1인, 화합물.
  257. 제216항 내지 제247항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -O(C=O)-NRERF인, 화합물.
  258. 제216항 내지 제247항 및 제257항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -O(C=O)-NRERF인, 화합물.
  259. 제216항 내지 제258항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 둘 모두 수소인, 화합물.
  260. 제216항 내지 제258항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  261. 제216항 내지 제258항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF 중 하나가 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  262. 제216항 내지 제247항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -NRM(C=O)-NRERF인, 화합물.
  263. 제216항 내지 제247항 및 제262항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -NRM(C=O)-NRERF인, 화합물.
  264. 제262항 또는 제263항에 있어서, RE, RF 및 RM이 모두 수소인, 화합물.
  265. 제262항 또는 제263항에 있어서, RE, RF 및 RM이 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  266. 제262항 또는 제263항에 있어서, RE, RF 및 RM 중 하나가 C1-3 알킬이고, 나머지 RE, RF 및 RM이 수소인, 화합물.
  267. 제216항 내지 제247항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -S(O)2NRCRD인, 화합물.
  268. 제216항 내지 제247항 및 제267항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -S(O)2NRCRD인, 화합물.
  269. 제267항 또는 제268항에 있어서, RC 및 RD가 둘 모두 수소인, 화합물.
  270. 제267항 또는 제268항에 있어서, RC 및 RD가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  271. 제267항 또는 제268항에 있어서, RC 및 RD 중 하나가 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  272. 제216항 내지 제247항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -S(O)2RM인, 화합물.
  273. 제216항 내지 제247항 및 제272항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -S(O)2RM인, 화합물.
  274. 제272항 또는 제273항에 있어서, RM이 수소인, 화합물.
  275. 제272항 또는 제273항에 있어서, RM이 C1-3 알킬인, 화합물.
  276. 제216항 내지 제275항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 위치 1에 부착되는, 화합물.
  277. 제216항 내지 제275항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 위치 2에 부착되는, 화합물.
  278. 제216항 내지 제275항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 위치 3에 부착되는, 화합물.
  279. 제216항 내지 제275항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 위치 1'에 부착되는, 화합물.
  280. 제216항 내지 제275항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 위치 2'에 부착되는, 화합물.
  281. 제216항 내지 제275항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 위치 3'에 부착되는, 화합물.
  282. 제216항 내지 제281항 중 어느 한 항에 있어서, LE가 -(C=O)-인, 화합물.
  283. 제216항 내지 제281항 중 어느 한 항에 있어서, LE가 -S(O)2-인, 화합물.
  284. 제216항 내지 제283항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RI 및 RJ가 수소인, 화합물.
  285. 제216항 내지 제283항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RI 및 RJ가 C1-3 알킬인, 화합물.
  286. 제216항 내지 제283항 중 어느 한 항에 있어서, RI 및 RJ 중 하나는 수소이고, RI 및 RJ 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  287. 제216항 내지 제286항 중 어느 한 항에 있어서, LC가 -(CRIRJ)-인, 화합물.
  288. 제216항 내지 제287항 중 어느 한 항에 있어서, s가 0인, 화합물.
  289. 제216항 내지 제287항 중 어느 한 항에 있어서, s가 1인, 화합물.
  290. 제216항 내지 제289항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 독립적으로 5-6 원 헤테로아릴인, 화합물.
  291. 제216항 내지 제289항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 피라졸인, 화합물.
  292. 제216항 내지 제289항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 피라졸, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  293. 제216항 내지 제289항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  294. 제216항 내지 제289항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 독립적으로 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 C4-5 사이클로알킬인, 화합물.
  295. 제216항 내지 제294항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RK가 C1-3 알킬, C1-3 할로알킬 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  296. 제295항에 있어서, 각각의 RK가 메틸, 에틸, -CF3 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  297. 제216항 내지 제296항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 동일한, 화합물.
  298. 제216항 내지 제296항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 상이한, 화합물.
  299. 제216항 내지 제298항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-6-인, 화합물.
  300. 제216항 내지 제298항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-3-인, 화합물.
  301. 제216항 내지 제298항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-6O-인, 화합물.
  302. 제216항 내지 제298항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-3O-인, 화합물.
  303. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 4-6 원 헤테로사이클인, 화합물.
  304. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기 구조를 갖는, 화합물:
    , 여기서 아래첨자 z1 및 z2 각각이 독립적으로 1 내지 3의 정수이고, **가 LAA에 대한 부착을 나타냄.
  305. 제304항에 있어서, z1 및 z2가 1인, 화합물.
  306. 제304항에 있어서, z1 및 z2가 2인, 화합물.
  307. 제304항에 있어서, z1이 1이고, z2가 2인, 화합물.
  308. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기 구조를 갖는, 화합물:
    , 여기서
    Z1이 -O-, -S-, -CRNRO- 및 -NRP-로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    RN, RO 및 RP가 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    아래첨자 z3가 1 내지 3의 정수이고;
    **가 LAA에 대한 부착을 나타냄.
  309. 제308항에 있어서, RN 및 RO가 수소인, 화합물.
  310. 제308항에 있어서, RP가 수소인, 화합물.
  311. 제308항에 있어서, RP가 메틸인, 화합물.
  312. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 5-6 원 헤테로아릴인, 화합물.
  313. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서
    Z2가 =CRN- 또는 =N-이고;
    RN이 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    **가 LAA에 대한 부착을 나타냄.
  314. 제313항에 있어서, Z2가 =CRN-인, 화합물.
  315. 제314항에 있어서, RN이 수소인, 화합물.
  316. 제313항에 있어서, Z2가 =N-인, 화합물.
  317. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서 Z3가 -O- 또는 -S-이고, **가 LAA, LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타냄.
  318. 제317항에 있어서, **가 LAA에 대한 부착을 나타내는, 화합물.
  319. 제317항에 있어서, **가 LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타내는, 화합물.
  320. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서 **가 LAA에 대한 부착을 나타냄.
  321. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서
    각각의 Z2가 독립적으로 =CRN- 또는 =N-이고;
    각각의 RN이 수소 또는 C1-6 알킬임.
  322. 제321항에 있어서, 적어도 하나의 Z2가 =N-인, 화합물.
  323. 제321항에 있어서, 하나의 Z2가 =N-이고, 나머지 Z2가 =CRN-인, 화합물.
  324. 제321항에 있어서, 2 개의 Z2가 -=N-이고, 나머지 Z2가 =CRN-인, 화합물.
  325. 제321항, 제323항 및 제324항 중 어느 한 항에 있어서, RN이 수소인, 화합물.
  326. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 인, 화합물.
  327. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 인, 화합물.
  328. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 인, 화합물.
  329. 제216항 내지 제302항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 사이클로부틸인, 화합물.
  330. 제216항 내지 제329항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1이 독립적으로 수소 또는 -CH3인, 화합물.
  331. 제216항 내지 제330항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RU가 -CO2H, -(C=O)NH2, -S(O)2NH2, -CH2NH2 및 -CH2OH로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  332. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t1이 0이고, t2가 1인, 화합물.
  333. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t1이 1이고, t2가 0인, 화합물.
  334. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t1이 1이고, t2가 1인, 화합물.
  335. 제216항 내지 제334항 중 어느 한 항에 있어서, u가 1이고, LD가 -(CH2)1-3-인, 화합물.
  336. 제216항 내지 제334항 중 어느 한 항에 있어서, u가 0인, 화합물.
  337. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t2가 1이고, RHH가 수소인, 화합물.
  338. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t2가 1이고, RHH가 C1-3 알킬인, 화합물.
  339. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t2가 1이고, RHH가 C3-4 사이클로알킬인, 화합물.
  340. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t2가 1이고, RHH가 -(CH2)C3-4 사이클로알킬인, 화합물.
  341. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t2가 1이고, RHH가 -(CH2)4-5 원 헤테로사이클인, 화합물.
  342. 제216항 내지 제331항 중 어느 한 항에 있어서, t2가 1이고, RHH가 -(CH2)5-원 헤테로아릴인, 화합물.
  343. 제216항 내지 제331항 및 제333항 내지 제342항 중 어느 한 항에 있어서, Z가 -N(RHH)-인, 화합물.
  344. 제216항 내지 제343항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 인, 화합물.
  345. 제216항 내지 제343항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 사이클로헥산카복실, 운데카노일, 카프로일, 헥사노일, 부타노일 또는 프로피오닐 기인, 화합물.
  346. 제216항 내지 제343항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 PEG4 내지 PEG12인, 화합물.
  347. 제216항 내지 제343항 중 어느 한 항에 있어서, y가 0인, 화합물.
  348. 제216항 내지 제346항 중 어느 한 항에 있어서, y가 1인, 화합물.
  349. 제216항 내지 제348항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-12 개의 아미노산의 쇄인, 화합물.
  350. 제216항 내지 제348항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-6 개의 아미노산의 쇄인, 화합물.
  351. 제216항 내지 제348항 중 어느 한 항에 있어서, W가 1-3 개의 아미노산의 쇄인, 화합물.
  352. 제216항 내지 제351항 중 어느 한 항에 있어서, W의 각각의 아미노산이 알라닌, 발린, 이소류신, 류신, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 글리신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, O-메틸세린, O-메틸아스파르트산, O-메틸글루탐산, N-메틸리신, O-메틸티로신, O-메틸히스티딘 및 O-메틸트레오닌으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  353. 제216항 내지 제351항 중 어느 한 항에 있어서, W에서의 각각의 아미노산이 알라닌, 글리신, 리신, 세린, 아스파르트산, 아스파르테이트 메틸 에스테르, N,N-디메틸-리신, 페닐알라닌, 시트룰린, 발린-알라닌, 발린-시트룰린, 페닐알라닌-리신 또는 호모세린 메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  354. 제216항 내지 제348항 중 어느 한 항에 있어서, W가 하기 구조를 갖는, 화합물:
    .
  355. 제354항에 있어서, W1이 -O-C(=O)-인, 화합물.
  356. 제354항 또는 제355항에 있어서, 하나의 Rg가 할로겐, -CN 또는 -NO2이고, 나머지 RG가 수소인, 화합물.
  357. 제354항 또는 제355항에 있어서, 각각의 Rg가 수소인, 화합물.
  358. 제216항 내지 제348항 중 어느 한 항에 있어서, w가 0인, 화합물.
  359. 제216항 내지 제348항 중 어느 한 항에 있어서, w가 1인, 화합물.
  360. 제216항 내지 제359항 중 어느 한 항에 있어서, LBB가 -(CH2)1-3-인, 화합물.
  361. 제216항 내지 제359항 중 어느 한 항에 있어서, LBB가 -C(O)(CH2)1-2-인, 화합물.
  362. 제361항에 있어서, LBB가 -C(O)(CH2)2-인, 화합물.
  363. 제216항 내지 제359항 중 어느 한 항에 있어서, LBB가 -[NHC(O)(CH2)2]1-2-인, 화합물.
  364. 제363항에 있어서, LBB가 -[NHC(O)(CH2)2]2-인, 화합물.
  365. 제216항 내지 제364항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  366. 제216항 내지 제364항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  367. 제216항 내지 제364항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  368. 제216항 내지 제367항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 AA가 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b가 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 황 원자를 통해 연결되는, 화합물.
  369. 제216항 내지 제367항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 AA가 독립적으로 자연 아미노산이며; 여기서 (AA)b가 석신이미드 또는 가수분해된 석신이미드에 질소 원자를 통해 연결되는, 화합물.
  370. 제216항 내지 제369항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 b가 1인, 화합물.
  371. 제216항 내지 제369항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 b가 2인, 화합물.
  372. 제216항 내지 제369항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 b가 3, 4, 5 또는 6인, 화합물.
  373. 제216항 내지 제365항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  374. 제216항 내지 제364항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  375. 제216항 내지 제364항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  376. 제216항 내지 제364항 중 어느 한 항에 있어서, M이 인, 화합물.
  377. 제216항에 있어서,
    하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:















    및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  378. 하기 화학식 (V)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:

    여기서:
    R1C는 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)n-NRARB, 또는 PEG2 내지 PEG4이고;
    R2C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF, 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R2C는 1, 2 또는 3으로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
    R3C는 -CO2RM, -(C=O)NRCRD, -S(O)2NRCRD, -S(O)2RM, -(CH2)q-NRERF, -(CH2)q-ORM, -O(C=O)-NRERF, 또는 -NRM(C=O)-NRERF이며, 여기서 R3C는 1', 2' 또는 3'로 표지된 위치 중 어느 하나에 부착되고;
    각각의 RA, RB, RC, RD, RE, RF 및 RM은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    각각의 아래첨자 n은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    각각의 아래첨자 q는 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    LE는 -(C=O)- 또는 -S(O)2-이고;
    LC는 -(CRIRJ)1-3-이고
    각각의 RI 및 RJ는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    아래첨자 s는 0 또는 1이고;
    각각의 Cy1은 독립적으로 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴, 또는 C3-6 사이클로알킬이고;
    각각의 RK는 C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C1-6 알콕시, C1-6 할로알콕시, 할로겐, -OH, =O, -NRd2Re2, -C(O)NRd2Re2, -C(O)(C1-6 알킬) 및 -C(O)O(C1-6 알킬)로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rd2 및 Re2는 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    LAA는 -(CH2)1-6-, -C(O)(CH2)1-6-, -C(O)NRL(CH2)1-6-, -(CH2)1-6O-, -C(O)(CH2)1-6O-, 또는 -C(O)NRL(CH2)1-6O-이고;
    RL은 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    Cy2는 각각이 하나 이상의 RU로 임의로 치환된, C3-6 사이클로알킬, 4-6 원 헤테로사이클, 5-6 원 헤테로아릴 또는 페닐이고;
    각각의 RU는 -CO2Rj1, -(C=O)NRd3Re3, -S(O)2NRd3Re3, -(CH2)q1-NRg1Rh1, -(CH2)q1-ORj1 및 -(CH2)q1-(OCH2CH2)1-8OH로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    각각의 Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1은 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    아래첨자 q1은 0 내지 6의 정수이고;
    아래첨자 t1은 0 또는 1이고;
    LD는 -(CH2)1-6-이고;
    아래첨자 u는 0 또는 1이고;
    t1이 0인 경우, ZZ는 -NRQRR, -N+(C1-6 알킬)RQRR, -C(=O)NSRT, -C(O)O(C1-6 알킬), -CO2H 또는 아미노산이거나, t1이 1인 경우, ZZ는 수소, -NRQRR, -N+(C1-6 알킬)RQRR; -C(=O)NSRT, -C(O)O(C1-6 알킬), -CO2H 또는 아미노산이고;
    RQ는 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클, 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이고, 단,
    t1이 0이고 두 Cy1 모두가 인 경우, RQ는 C2-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클, 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이고,
    t1이 0이고 하나 이상의 Cy1이 이 아닌 경우, ZZ는 -NRQRR, -N+(C1-6 알킬)RQRR 또는 -C(=O)NSRT이고, RQ는 C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬, -(CH2)1-3C1-3 알콕시, -(CH2)1-3 4-6 원 헤테로사이클, 또는 -(CH2)1-3 5-6 원 헤테로아릴이고;
    각각의 RR, RS 및 RT는 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬임.
  379. 제378항에 있어서, R1C가 수소인, 화합물.
  380. 제378항에 있어서, R1C가 하이드록실인, 화합물.
  381. 제378항에 있어서, R1C가 C1-6 알콕시인, 화합물.
  382. 제378항에 있어서, R1C가 메톡시인, 화합물.
  383. 제378항에 있어서, R1C가 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시인, 화합물.
  384. 제378항에 있어서, R1C가 메톡시에틸인, 화합물.
  385. 제378항에 있어서, R1C가 PEG2 내지 PEG4인, 화합물.
  386. 제378항에 있어서, R1C가 -(CH2)n-NRARB인, 화합물.
  387. 제378항 내지 제386항 중 어느 한 항에 있어서, RA 및 RB가 둘 모두 수소인, 화합물.
  388. 제378항 내지 제386항 중 어느 한 항에 있어서, RA 및 RB가 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  389. 제378항 내지 제386항 중 어느 한 항에 있어서, RA 및 RB 중 하나가 수소이고, RA 및 RB 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  390. 제378항 내지 제389항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 0인, 화합물.
  391. 제378항 내지 제389항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 1인, 화합물.
  392. 제378항 내지 제389항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 2인, 화합물.
  393. 제378항 내지 제389항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 n이 3, 4, 5 또는 6인, 화합물.
  394. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C 및 R3C가 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD, 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C가 동일한, 화합물.
  395. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C 및 R3C가 독립적으로 -CO2H, -(C=O)m-NRCRD, 또는 -(CH2)q-NRERF이고; R2C 및 R3C가 상이한, 화합물.
  396. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -(C=O)m-NRCRD인, 화합물.
  397. 제378항 내지 제396항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -(C=O)m-NRCRD인, 화합물.
  398. 제378항 내지 제397항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 둘 모두 수소인, 화합물.
  399. 제378항 내지 제397항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  400. 제378항 내지 제397항 중 어느 한 항에 있어서, RC 및 RD 중 하나가 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  401. 제396항 또는 제397항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 0인, 화합물.
  402. 제396항 또는 제397항에 있어서, 각각의 아래첨자 m이 1인, 화합물.
  403. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -(CH2)q-NRERF인, 화합물.
  404. 제378항 내지 제393항 및 제403항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -(CH2)q-NRERF인, 화합물.
  405. 제378항 내지 제404항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 둘 모두 수소인, 화합물.
  406. 제378항 내지 제404항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  407. 제378항 내지 제404항 중 어느 한 항에 있어서, RE 및 RF 중 하나가 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  408. 제378항 내지 제407항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 q가 0인, 화합물.
  409. 제378항 내지 제407항 중 어느 한 항에 있어서,각각의 아래첨자 q가 1 내지 6의 정수인, 화합물.
  410. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -CO2RM인, 화합물.
  411. 제378항 내지 제393항 및 제410항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -CO2RM인, 화합물.
  412. 제410항 또는 제411항에 있어서, RM이 수소인, 화합물.
  413. 제410항 또는 제411항에 있어서, RM이 C1-3 알킬인, 화합물.
  414. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -(CH2)q-ORM인, 화합물.
  415. 제378항 내지 제393항 및 제414항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -(CH2)q-ORM인, 화합물.
  416. 제414항 또는 제415항에 있어서, RM이 수소인, 화합물.
  417. 제414항 내지 제415항 중 어느 한 항에 있어서, q가 0인, 화합물.
  418. 제414항 내지 제415항 중 어느 한 항에 있어서, q가 1인, 화합물.
  419. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -O(C=O)-NRERF인, 화합물.
  420. 제378항 내지 제393항 및 제419항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -O(C=O)-NRERF인, 화합물.
  421. 제419항 또는 제420항에 있어서, RE 및 RF가 둘 모두 수소인, 화합물.
  422. 제419항 또는 제420항에 있어서, RE 및 RF가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  423. 제419항 또는 제420항에 있어서, RE 및 RF 중 하나가 수소이고, RE 및 RF 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  424. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -NRM(C=O)-NRERF인, 화합물.
  425. 제378항 내지 제393항 및 제424항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -NRM(C=O)-NRERF인, 화합물.
  426. 제424항 또는 제425항에 있어서, RE, RF 및 RM이 모두 수소인, 화합물.
  427. 제424항 또는 제425항에 있어서, RE, RF 및 RM이 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  428. 제424항 또는 제425항에 있어서, RE, RF 및 RM 중 하나가 C1-3 알킬이고, 나머지 RE, RF 및 RM이 수소인, 화합물.
  429. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -S(O)2NRCRD인, 화합물.
  430. 제378항 내지 제393항 및 제429항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -S(O)2NRCRD인, 화합물.
  431. 제429항 또는 제430항에 있어서, RC 및 RD가 둘 모두 수소인, 화합물.
  432. 제429항 또는 제430항에 있어서, RC 및 RD가 각각 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  433. 제429항 또는 제430항에 있어서, RC 및 RD 중 하나가 수소이고, RC 및 RD 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  434. 제378항 내지 제393항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 -S(O)2RM인, 화합물.
  435. 제378항 내지 제393항 및 제434항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 -S(O)2RM인, 화합물.
  436. 제434항 또는 제435항에 있어서, RM이 수소인, 화합물.
  437. 제434항 또는 제435항에 있어서, RM이 C1-3 알킬인, 화합물.
  438. 제378항 내지 제437항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 위치 1에 부착되는, 화합물.
  439. 제378항 내지 제437항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 위치 2에 부착되는, 화합물.
  440. 제378항 내지 제437항 중 어느 한 항에 있어서, R2C가 위치 3에 부착되는, 화합물.
  441. 제378항 내지 제437항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 위치 1'에 부착되는, 화합물.
  442. 제378항 내지 제437항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 위치 2'에 부착되는, 화합물.
  443. 제378항 내지 제437항 중 어느 한 항에 있어서, R3C가 위치 3'에 부착되는, 화합물.
  444. 제378항 내지 제443항 중 어느 한 항에 있어서, LE가 -(C=O)-인, 화합물.
  445. 제378항 내지 제443항 중 어느 한 항에 있어서, LE가 -S(O)2-인, 화합물.
  446. 제378항 내지 제445항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RI 및 RJ가 수소인, 화합물.
  447. 제378항 내지 제445항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RI 및 RJ가 C1-3 알킬인, 화합물.
  448. 제378항 내지 제445항 중 어느 한 항에 있어서, RI 및 RJ 중 하나가 수소이고, RI 및 RJ 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  449. 제378항 내지 제448항 중 어느 한 항에 있어서, LC가 -(CRIRJ)-인, 화합물.
  450. 제378항 내지 제449항 중 어느 한 항에 있어서, s가 0인, 화합물.
  451. 제378항 내지 제449항 중 어느 한 항에 있어서, s가 1인, 화합물.
  452. 제378항 내지 제451항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 독립적으로 5-6 원 헤테로아릴인, 화합물.
  453. 제378항 내지 제451항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 피라졸인, 화합물.
  454. 제378항 내지 제451항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 피라졸, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  455. 제378항 내지 제451항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 각각이 하나 이상의 RK로 임의로 치환된, 이미다졸, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 피리다진, 피리딘, 피리미딘 및 피라진으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  456. 제378항 내지 제451항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 독립적으로 하나 이상의 RK로 임의로 치환된 C4-5 사이클로알킬인, 화합물.
  457. 제378항 내지 제456항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RK가 C1-3 알킬, C1-3 할로알킬 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  458. 제457항에 있어서, 각각의 RK가 메틸, 에틸, -CF3 및 할로겐으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  459. 제378항 내지 제451항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 동일한, 화합물.
  460. 제378항 내지 제451항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Cy1이 상이한, 화합물.
  461. 제378항 내지 제460항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-6-인, 화합물.
  462. 제378항 내지 제460항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-3-인, 화합물.
  463. 제378항 내지 제460항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-6O-인, 화합물.
  464. 제378항 내지 제460항 중 어느 한 항에 있어서, LAA가 -(CH2)1-3O-인, 화합물.
  465. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 4-6 원 헤테로사이클인, 화합물.
  466. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기 구조를 갖는, 화합물:
    , 여기서 아래첨자 z1 및 z2 각각이 독립적으로 1 내지 3의 정수이고, **가 LAA에 대한 부착을 나타내는, 화합물.
  467. 제466항에 있어서, z1 및 z2가 1인, 화합물.
  468. 제466항에 있어서, z1 및 z2가 2인, 화합물.
  469. 제466항에 있어서, z1이 1이고, z2가 2인, 화합물.
  470. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기 구조를 갖는, 화합물:
    , 여기서
    Z1이 -O-, -S-, -CRNRO- 및 -NRP-로 이루어진 군으로부터 선택되고;
    RN, RO 및 RP가 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    아래첨자 z3가 1 내지 3의 정수이고;
    **가 LAA에 대한 부착을 나타냄.
  471. 제470항에 있어서, RN 및 RO가 수소인, 화합물.
  472. 제470항에 있어서, RP가 수소인, 화합물.
  473. 제470항에 있어서, RP가 메틸인, 화합물.
  474. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 5-6 원 헤테로아릴인, 화합물.
  475. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서
    Z2가 =CRN- 또는 =N-이고;
    RN이 수소 또는 C1-6 알킬이고;
    **가 LAA에 대한 부착을 나타냄.
  476. 제475항에 있어서, Z2가 =CRN-인, 화합물.
  477. 제476항에 있어서, RN이 수소인, 화합물.
  478. 제475항에 있어서, Z2가 =N-인, 화합물.
  479. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서 Z3가 -O- 또는 -S-이고, **가 LAA, LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타냄.
  480. 제479항에 있어서, **가 LAA에 대한 부착을 나타내는, 화합물.
  481. 제479항에 있어서, **가 LD, NRHH, Y, W 또는 LBB에 대한 부착을 나타내는, 화합물.
  482. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서 **가 LAA에 대한 부착을 나타냄.
  483. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    , 여기서
    각각의 Z2가 독립적으로 =CRN- 또는 =N-이고;
    각각의 RN이 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬임.
  484. 제483항에 있어서, 적어도 하나의 Z2가 =N-인, 화합물.
  485. 제483항에 있어서, 하나의 Z2가 =N-이고, 나머지 Z2가 =CRN-인, 화합물.
  486. 제483항에 있어서, 2 개의 Z2가 =N-이고, 나머지 Z2가 =CRN-인, 화합물.
  487. 제483항, 제485항 및 제486항 중 어느 한 항에 있어서, RN 및 RO가 수소인, 화합물.
  488. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 인, 화합물.
  489. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 인, 화합물.
  490. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 인, 화합물.
  491. 제378항 내지 제464항 중 어느 한 항에 있어서, Cy2가 사이클로부틸인, 화합물.
  492. 제378항 내지 제491항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Rd3, Re3, Rg1, Rh1 및 Rj1이 독립적으로 수소 또는 -CH3인, 화합물.
  493. 제378항 내지 제492항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RU가 -CO2H, -(C=O)NH2, -S(O)2NH2, -CH2NH2 및 -CH2OH로부터 독립적으로 선택되는, 화합물.
  494. 제378항 내지 제493항 중 어느 한 항에 있어서, t1이 0인, 화합물.
  495. 제378항 내지 제493항 중 어느 한 항에 있어서, t1이 1인, 화합물.
  496. 제378항 내지 제495항 중 어느 한 항에 있어서, u가 1이고, LD가 -(CH2)1-3인, 화합물.
  497. 제378항 내지 제495항 중 어느 한 항에 있어서, u가 0인, 화합물.
  498. 제378항 내지 제497항 중 어느 한 항에 있어서, ZZ가 -NRQRR인, 화합물.
  499. 제498항에 있어서, RQ가 C1-6 알킬이고,
  500. 제498항에 있어서, RQ가 C3-6 사이클로알킬인, 화합물.
  501. 제500항에 있어서, RQ가 사이클로프로필인, 화합물.
  502. 제498항에 있어서, RQ가 -(CH2)1-3C3-6 사이클로알킬인, 화합물.
  503. 제498항 내지 제501항 중 어느 한 항에 있어서, RR이 수소인, 화합물.
  504. 제378항 내지 제497항 중 어느 한 항에 있어서, ZZ가 -C(=O)NSRT인, 화합물.
  505. 제378항 내지 제497항 중 어느 한 항에 있어서, ZZ가 -C(O)O(t-부틸)인, 화합물.
  506. 제378항 내지 제497항 중 어느 한 항에 있어서, ZZ가 -CO2H인, 화합물.
  507. 제378항 내지 제497항 중 어느 한 항에 있어서, ZZ가 알라닌, 발린, 이소류신, 류신, 아스파르트산, 글루탐산, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 글리신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, O-메틸세린, O-메틸아스파르트산, O-메틸글루탐산, N-메틸리신, O-메틸티로신, O-메틸히스티딘 및 O-메틸트레오닌으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산인, 화합물.
  508. 제378항에 있어서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:






    및 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  509. 하기 화학식을 갖는 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC):
    Ab-(S*-(D')) p
    여기서:
    Ab는 항체이고;
    각각의 S*는 항체의 시스테인 잔기로부터의 황 원자이고;
    D'는 제216항 내지 제377항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (IV)의 화합물의 라디칼인 약물 유닛이고;
    아래첨자 p는 2 내지 8의 정수임.
  510. 제509항에 있어서, 상기 화학식 (IV)의 화합물의 라디칼이 치환기 M에서의 라디칼을 포함하는, ADC.
  511. 제510항에 있어서, D'이 하기 구조를 갖는, ADC:
    , 여기서 ***가 S*에 대한 부착을 나타냄.
  512. 제509항 내지 제511항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간화된 항체인, ADC.
  513. 제509항 또는 제511항에 있어서, 상기 항체가 단클론 항체인, ADC.
  514. 제509항 또는 제511항에 있어서, 상기 항체가 푸코실화되는, ADC.
  515. 제509항 또는 제511항에 있어서, 상기 항체가 탈푸코실화되는, ADC.
  516. 제118항 내지 제215항 및 제509항 내지 제515항 중 어느 한 항의 ADC의 분포를 포함하는 조성물.
  517. 제516항에 있어서, 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함하는, 조성물.
  518. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 대상체에 치료적 유효량의 제516항 또는 제517항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  519. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 대상체에 치료적 유효량의 제118항 내지 제215항 및 제509항 내지 제515항 중 어느 한 항의 ADC를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  520. 항종양 면역 반응의 유도를 필요로 하는 대상체에서 항종양 면역 반응을 유도하는 방법으로서,
    대상체에 치료적 유효량의 제516항 또는 제517항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  521. 항종양 면역 반응의 유도를 필요로 하는 대상체에서 항종양 면역 반응을 유도하는 방법으로서,
    대상체에 치료적 유효량의 제118항 내지 제215항 및 제509항 내지 제515항 중 어느 한 항의 ADC를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  522. 하기 화학식 (III)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:

    여기서:
    R1A는 수소, 하이드록실, C1-6 알콕시, -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시, -(CH2)nn-NRAARBB이고;
    R2A 및 R3A는 독립적으로 -CO2H, -(C=O)mm-NRCCRDD 또는 -(CH2)q-NREE1RFF1이고;
    각각의 아래첨자 nn은 독립적으로 0 내지 6의 정수이고;
    각각의 아래첨자 mm은 독립적으로 0 또는 1이고;
    각각의 아래첨자 qq는 0 내지 6의 정수이고;
    Y1은 -CH2-, -O-, -S-, -NH- 또는 -N(CH3)-이고;
    X1은 C2-6 알킬렌이고;
    Z1은 -NREERFF, -C(=O)NRGGRHH 또는 -CO2H이고;
    각각의 RAA, RBB, RCC 및 RDD, REE1 및 RFF1은 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬이고;
    각각의 REE, RFF, RGG 및 RHH는 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬임.
  523. 제522항에 있어서, R1A가 수소인, 화합물.
  524. 제522항에 있어서, R1A가 하이드록실인, 화합물.
  525. 제522항에 있어서, R1A가 C1-6 알콕시인, 화합물.
  526. 제522항 또는 제525항에 있어서, R1이 메톡시인, 화합물.
  527. 제522항에 있어서, R1A가 -(C1-6 알킬)C1-6 알콕시인, 화합물.
  528. 제522항 또는 제527항에 있어서, R1A가 메톡시에틸인, 화합물.
  529. 제522항에 있어서, R1이 -(CH2)nn-NRAARBB인, 화합물.
  530. 제522항 또는 제529항에 있어서, RAA 및 RBB가 둘 모두 수소인, 화합물.
  531. 제522항 또는 제529항에 있어서, RAA 및 RBB가 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  532. 제522항 또는 제529항에 있어서, RAA 및 RBB 중 하나가 수소이고, RAA 및 RBB 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  533. 제522항 또는 제529항 내지 제532항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 nn은 0인, 화합물.
  534. 제522항 또는 제529항 내지 제532항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 nn은 1인, 화합물.
  535. 제522항 또는 제529항 내지 제532항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 nn은 2인, 화합물.
  536. 제522항 또는 제529항 내지 제532항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 nn이 3, 4, 5 또는 6인, 화합물.
  537. 제522항 내지 제536항 중 어느 한 항에 있어서, R2A 및 R3A가 독립적으로 -CO2H, -(C=O)mm-NRCCRDD, 또는 -(CH2)q-NREE1RFF1이고; R2A 및 R3A가 동일한, 화합물.
  538. 제522항 내지 제536항 중 어느 한 항에 있어서, R2A 및 R3A가 독립적으로 -CO2H, -(C=O)mm-NRCCRDD, 또는 -(CH2)q-NREE1RFF1이고; R2A 및 R3A가 상이한, 화합물.
  539. 제522항 내지 제538항 중 어느 한 항에 있어서, R2A가 -(C=O)mm-NRCCRDD인, 화합물.
  540. 제522항 내지 제538항 중 어느 한 항에 있어서, R3A가 -(C=O)mm-NRCCRDD인, 화합물.
  541. 제522항 내지 제537항 또는 제539항 내지 제540항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RCC 및 각각의 RDD가 수소인, 화합물.
  542. 제522항 내지 제537항 또는 제539항 내지 제540항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RCC 및 각각의 RDD가 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  543. 제522항 내지 제536항 또는 제538항 내지 제540항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RCC 및 RDD 중 하나가 수소이고, 각각의 RCC 및 RDD 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  544. 제522항 내지 제543항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 mm이 0인, 화합물.
  545. 제522항 내지 제543항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 mm이 1인, 화합물.
  546. 제522항 내지 제538항 중 어느 한 항에 있어서, R2A가 -(CH2)q-NREE1RFF1인, 화합물.
  547. 제522항 내지 제538항 중 어느 한 항에 있어서, R3A가 -(CH2)q-NREE1RFF1인, 화합물.
  548. 제522항 내지 제538항 또는 제546항 내지 제547항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 REE1 및 각각의 RFF1이 수소인, 화합물.
  549. 제522항 내지 제538항 또는 제546항 내지 제547항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 REE1 및 각각의 RFF1이 독립적으로 C1-3 알킬인, 화합물.
  550. 제522항 내지 제538항 또는 제546항 내지 제547항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 REE1 및 각각의 RFF1 중 하나가 수소이고, 각각의 REE1 및 각각의 RFF1 중 다른 하나가 C1-3 알킬인, 화합물.
  551. 제522항 내지 제538항 또는 제546항 내지 제547항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 qq가 0인, 화합물.
  552. 제522항 내지 제538항 또는 제546항 내지 제550항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 아래첨자 qq가 1 내지 6의 정수인, 화합물.
  553. 제522항 내지 제538항 중 어느 한 항에 있어서, R3A가 -CO2H인, 화합물.
  554. 제522항 내지 제538항 중 어느 한 항에 있어서, R2A가 -CO2H인, 화합물.
  555. 제522항 내지 제554항 중 어느 한 항에 있어서, Y1이 -CH2-인, 화합물.
  556. 제522항 내지 제554항 중 어느 한 항에 있어서, Y1이 -O-인, 화합물.
  557. 제522항 내지 제554항 중 어느 한 항에 있어서, Y1이 -S-인, 화합물.
  558. 제522항 내지 제554항 중 어느 한 항에 있어서, Y1이 -NH-인, 화합물.
  559. 제522항 내지 제558항 중 어느 한 항에 있어서, X1이 C2-5 알킬렌인, 화합물.
  560. 제522항 내지 제559항 중 어느 한 항에 있어서, X1이 C2-4 알킬렌인, 화합물.
  561. 제522항 내지 제560항 중 어느 한 항에 있어서, X1이 에틸렌 또는 n-프로필렌인, 화합물.
  562. 제522항 내지 제561항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 -NRE1RF1인, 화합물.
  563. 제522항 내지 제562항 중 어느 한 항에 있어서, REE 및 RFF가 둘 모두 수소인, 화합물.
  564. 제522항 내지 제562항 중 어느 한 항에 있어서, REE 및 RFF가 독립적으로 C1-6 알킬인, 화합물.
  565. 제522항 내지 제562항 중 어느 한 항에 있어서, REE 및 RFF 중 하나가 수소이고, REE 및 RFF 중 다른 하나가 C1-6 알킬인, 화합물.
  566. 제564항 또는 제565항에 있어서, C1-6 알킬이 C1-3 알킬인, 화합물.
  567. 제566항에 있어서, C1-3 알킬이 메틸인, 화합물.
  568. 제522항 내지 제561항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 -C(=O)NRGGRHH인, 화합물.
  569. 제522항 내지 제561항 또는 제568항 중 어느 한 항에 있어서, RGG 및 RHH가 둘 모두 수소인, 화합물.
  570. 제522항 내지 제561항 또는 제568항 중 어느 한 항에 있어서, RGG 및 RHH가 독립적으로 C1-6 알킬인, 화합물.
  571. 제522항 내지 제561항 또는 제568항 중 어느 한 항에 있어서, RGG 및 RHH 중 하나가 수소이고, RGG 및 RHH 중 다른 하나가 C1-6 알킬인, 화합물.
  572. 제570항 또는 제571항에 있어서, 상기 C1-6 알킬이 C1-3 알킬인, 화합물.
  573. 제569항에 있어서, 상기 C1-3 알킬이 메틸인, 화합물.
  574. 제522항 내지 제561항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 -CO2H인, 화합물.
  575. 제522항에 있어서, R1A가 메톡시이고, R2A 및 R3A가 둘 모두 -C(=O)NH2인, 화합물.
  576. 제522항 또는 제575항에 있어서, Y1이 -O-이고, X1이 C3 알킬렌인, 화합물.
  577. 제522항 또는 제575항 내지 제576항 중 어느 한 항에 있어서, X1이 n-프로필렌인, 화합물.
  578. 제522항 또는 제575항 내지 제577항 중 어느 한 항에 있어서, Z1이 -NREERFF인, 화합물.
  579. 제522항 또는 제575항 내지 제578항 중 어느 한 항에 있어서, REE가 수소이고, RFF가 메틸인, 화합물.
KR1020237027635A 2021-01-15 2022-01-14 면역조절 항체-약물 컨쥬게이트 KR20230133331A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163138360P 2021-01-15 2021-01-15
US63/138,360 2021-01-15
US202163292779P 2021-12-22 2021-12-22
US63/292,779 2021-12-22
PCT/US2022/012599 WO2022155518A1 (en) 2021-01-15 2022-01-14 Immunomodulatory antibody-drug conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230133331A true KR20230133331A (ko) 2023-09-19

Family

ID=81125428

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237027635A KR20230133331A (ko) 2021-01-15 2022-01-14 면역조절 항체-약물 컨쥬게이트

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20240123079A1 (ko)
EP (1) EP4277904A1 (ko)
JP (1) JP2024503508A (ko)
KR (1) KR20230133331A (ko)
AU (1) AU2022208054A1 (ko)
BR (1) BR112023014128A2 (ko)
CA (1) CA3207893A1 (ko)
IL (1) IL304239A (ko)
MX (1) MX2023008327A (ko)
TW (1) TW202246242A (ko)
WO (1) WO2022155518A1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023215740A1 (en) * 2022-05-06 2023-11-09 Seagen Inc. Immunomodulatory antibody-drug conjugates

Family Cites Families (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2036891B (en) 1978-12-05 1983-05-05 Windsor Smith C Change speed gear
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
JPS61134325A (ja) 1984-12-04 1986-06-21 Teijin Ltd ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法
JPS63501765A (ja) 1985-11-01 1988-07-21 インタ−ナショナル、ジェネティック、エンジニアリング　インコ−ポレ−テッド 抗体遺伝子のモジュ−ル組立体、それにより産生された抗体及び用途
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
ATE135370T1 (de) 1988-12-22 1996-03-15 Kirin Amgen Inc Chemisch modifizierte granulocytenkolonie erregender faktor
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5166322A (en) 1989-04-21 1992-11-24 Genetics Institute Cysteine added variants of interleukin-3 and chemical modifications thereof
JP2763020B2 (ja) 1995-04-27 1998-06-11 日本電気株式会社 半導体パッケージ及び半導体装置
US5672662A (en) 1995-07-07 1997-09-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
KR20000029673A (ko) 1996-08-02 2000-05-25 오르토-맥네일 파마슈티칼, 인코퍼레이티드 단일의공유결합된ｎ-말단수용성폴리머를갖는폴리펩티드
US7090843B1 (en) 2000-11-28 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
BRPI0510883B8 (pt) 2004-06-01 2021-05-25 Genentech Inc composto conjugado de droga e anticorpo, composição farmacêutica, método de fabricação de composto conjugado de droga e anticorpo e usos de uma formulação, de um conjugado de droga e anticorpo e um agente quimioterapêutico e de uma combinação
HUE035853T2 (en) 2005-07-18 2018-05-28 Seattle Genetics Inc Beta-glucuronide-linker-drug conjugates
PE20081456A1 (es) 2006-10-06 2008-11-27 Takeda Pharmaceutical Anticuerpo monoclonal contra nectina 2
US8614301B2 (en) 2007-11-14 2013-12-24 The Medical Research, Infrastructure and Health Services Fund of the Tel Aviv Medical Center Methods of treating cancer using anti CD24 antibodies
CA3220104A1 (en) 2010-06-08 2011-12-15 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
AR088220A1 (es) 2011-08-29 2014-05-21 Baylor Res Inst Activacion de celulas dendriticas humanas por el receptor de dectina-1 o de tipo toll 2 (tlr2) en el control de la alergia y el asma
KR101932697B1 (ko) 2012-04-27 2019-03-21 노보 노르디스크 에이/에스 사람 cd30 리간드 항원 결합 단백질
US10093745B2 (en) 2013-05-29 2018-10-09 The Regents Of The University Of California Anti-CSPG4 fusions with interferon for the treatment of malignancy
MX2021008464A (es) 2013-10-15 2023-03-03 Seattle Genetics Inc Farmaco-enlazadores modificados con polietilenglicol para la farmacocinetica mejorada de conjugados de ligando-farmaco.
US10379127B2 (en) 2013-11-27 2019-08-13 Welcome Receptor Antibodies Pty Ltd Marker of cell death
US20180251548A1 (en) 2015-09-14 2018-09-06 Compass Therapeutics Llc Compositions and methods for treating cancer via antagonism of the cd155/tigit pathway and tgf-beta
IL295649A (en) 2016-04-07 2022-10-01 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Heterocyclic amides are useful as protein modulators
US10836823B2 (en) 2016-06-06 2020-11-17 Asclepiumm Taiwan Co., Ltd. Dsg2 monoclonal antibody and the applications thereof
EP3360898A1 (en) 2017-02-14 2018-08-15 Boehringer Ingelheim International GmbH Bispecific anti-tnf-related apoptosis-inducing ligand receptor 2 and anti-cadherin 17 binding molecules for the treatment of cancer
US11078271B2 (en) 2016-12-28 2021-08-03 Osaka University Anti-claudin-2 monoclonal antibody
WO2018134389A1 (en) 2017-01-23 2018-07-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treating infections
WO2018222675A1 (en) 2017-05-30 2018-12-06 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Anti-doublecortin-like kinase 1 antibodies and methods of use
US20230242670A1 (en) 2017-11-29 2023-08-03 Seoul National University R&Db Foundation Anti-ros1 antibody and use thereof
CN111499617B (zh) * 2019-01-31 2021-08-06 成都先导药物开发股份有限公司 一种免疫调节剂
WO2020194160A1 (en) * 2019-03-28 2020-10-01 Lupin Limited Macrocyclic compounds as sting agonists
US20220185900A1 (en) 2019-04-10 2022-06-16 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Human antibodies that bind ret and methods of use thereof
CN114206936A (zh) 2019-06-14 2022-03-18 2赛文缇生物公司 用于治疗癌症的组合物和方法
CA3147397A1 (en) * 2019-07-22 2021-01-28 Lupin Limited Macrocyclic compounds as sting agonists and methods and uses thereof
CN114174285B (zh) * 2019-07-25 2023-10-31 上海济煜医药科技有限公司 杂环酰胺类化合物及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CA3207893A1 (en) 2022-07-21
TW202246242A (zh) 2022-12-01
BR112023014128A2 (pt) 2023-10-31
MX2023008327A (es) 2023-08-22
AU2022208054A1 (en) 2023-07-27
WO2022155518A1 (en) 2022-07-21
IL304239A (en) 2023-09-01
JP2024503508A (ja) 2024-01-25
EP4277904A1 (en) 2023-11-22
US20240123079A1 (en) 2024-04-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102455175B1 (ko) 아마니틴 접합체
KR102647074B1 (ko) 친수성 항체-약물 컨쥬게이트
US20180258048A1 (en) Benzazepine compounds, conjugates, and uses thereof
CN106604927B (zh) 细胞毒性苯并二氮杂䓬衍生物
JP2018502839A (ja) Ｂｃｌ−ｘＬ阻害性化合物およびこれを含む抗体薬物コンジュゲート
JP2023524271A (ja) エラスターゼ－基質ペプチドリンカーイムノコンジュゲート、及びそれらの使用
US20220323596A1 (en) Antibody conjugates of toll-like receptor agonists
KR20180090290A (ko) 사차화 튜불리신 화합물들의 컨쥬게이트들
JP2019530697A (ja) ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドサルベージ経路阻害剤の標的化送達
JP2024508976A (ja) 抗体－免疫アゴニストコンジュゲート及びその使用
US20240165251A1 (en) Immunostimulatory compounds and conjugates
TW202400137A (zh) 喜樹鹼偶聯物
US20240123079A1 (en) Immunomodulatory antibody-drug conjugates
KR20230118148A (ko) 암 치료에 유용한 하나 이상의 8-het-2-아미노벤자제핀유도체에 대한 접합에 의해 연결된 항-cea 항체를 포함하는 면역접합체
JP2024501453A (ja) 抗ｃｅａイムノコンジュゲート、及びそれらの使用
TW202400246A (zh) 免疫調節抗體-藥物結合物
CN116829551A (zh) 免疫调节抗体药物结合物
RU2780334C2 (ru) Бензазепиновые соединения, конъюгаты и их применение
TW202313123A (zh) 蒽環黴素抗體結合物
WO2024030577A1 (en) Immunostimulatory anti-pd-l1-drug conjugates
TW202417053A (zh) 免疫刺激抗體－藥物結合物
WO2023154307A1 (en) Antibody-conjugated 8-sulfonyl-benzazepine compounds and their uses
EA040940B1 (ru) Гидрофильные конъюгаты антитело-лекарственное средство