KR20230074183A - 유산균과 지방산을 포함하는 사료 및 조성물 - Google Patents

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요시타카 히로세
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Abstract

본 발명의 과제는 (1) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 사료, (2) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 IL-12 생산 증강용 조성물, (3) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 면역부활용 조성물, 및 (4) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 정균용 조성물로부터 선택된 하나 이상을 제공하는 것이다. 상기 사료 또는 조성물에 의해, 상기 과제를 해결한다.

Description

유산균과 지방산을 포함하는 사료 및 조성물
본 발명은 특정 유산균 또는 이의 처리물과 지방산 또는 이의 염의 조합을 포함하는 사료 및 조성물에 관한 것이다.
인터루킨 12(IL-12: Interleukin-12)는 활성화된 탐식세포(phagocytes) 및 수지상 세포에 의해 분비되는 사이토카인의 일종이며, 다양한 면역 관련 질환의 병인에 있어서 중요한 역할을 한다. 특정 유산균은 면역부활작용이나 IL-12 생산작용을 갖는 것으로 알려져 있다(특허 문헌 1).
특허문헌 1: 일본특허공개 제2010-6801호 공보
유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 조합함으로써, IL-12 생산 및/또는 면역부활작용이 증강되는 것이나 정균작용이 얻어지는 것은 알려져 있지 않다. 또한, 이 조합을 사료에 사용하는 것도 지금까지 알려져 있지 않다.
본 발명의 목적은 (1) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 사료, (2) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 IL-12 생산 증강용 조성물, (3) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 면역부활용 조성물, 및 (4) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 정균용 조성물로부터 선택된 하나 이상을 제공하는 것이다.
본 발명자들은, 유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 조합함으로써, IL-12 생산이 증강되는 것이나 면역부활 작용이 증강되는 것, 나아가 정균 작용이 얻어지는 것, 또한 이 조합이 사료나 조성물에 적합하다는 것을 발견하였으며, 더욱이 지방산 또는 이의 염 및 유산균의 조합 중에서도 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주가 우수하다는 것도 발견하여, 더욱 검토를 거듭하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
즉, 본 발명은 다음과 같다.
[1] 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 사료.
[2] 지방산이 단쇄 지방산, 중쇄 지방산 및 장쇄 지방산으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종의 지방산 또는 이들의 혼합물인 [1]에 기재된 사료.
[3] 단쇄 지방산이 포름산, 아세트산, 프로피온산, 부티르산, 이소부티르산, 길초산, 이소길초산, 락트산, 피루브산, 카프로산, 및 숙신산으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종인 [2]에 기재된 사료.
[4] 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주가 사균체인 [1] 내지 [3] 중 어느 하나에 기재된 사료.
[5] 사료 전체에 대한 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물의 함유 비율이 0.0001 질량% ∼ 0.1 질량%인 [1] 내지 [4] 중 어느 하나에 기재된 사료.
[6] 사료 중의 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염의 질량비가 1 : 0.5∼50000인 [1] 내지 [5] 중 어느 하나에 기재된 사료.
[7] 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 IL-12 생산 증강용 조성물.
[8] 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 면역부활용 조성물.
[9] 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 정균용 조성물.
[10] 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 조성물.
[11] 유산균 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 면역부활용 조성물.
[12] 조성물이 의약, 동물약, 의약부외품, 사료, 음식품, 또는 음식품 첨가물인 [11]에 기재된 조성물.
본 개시에 있어서, 바람직하게는 (1) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 사료, (2) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 IL-12 생산 증강용 조성물, (3) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 면역부활용 조성물, 및 (4) 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 정균용 조성물로부터 선택된 하나 이상을 제공할 수 있다.
도 1은 면역세포주에 본 발명의 유산균 및 지방산(단쇄 지방산) 또는 이의 염 중 어느 하나 또는 이들을 동시에 첨가한 경우의 IL-12의 생산을 나타낸다. 도면 중의 *는 유산균 L-137 단독 첨가와 유산균 L-137 및 지방산의 동시 첨가를 비교한 T 검정에서의 p값이 「0.01≤p＜0.05」의 범위에 있음을 나타낸다.
도 2는 면역세포주에 본 발명의 유산균 및 지방산(중쇄 지방산 또는 장쇄 지방산) 중 어느 하나 또는 이들을 동시에 첨가한 경우의 IL-12의 생산을 나타낸다. 도면 중의 *는 유산균 L-137 단독 첨가와 유산균 L-137 및 지방산의 동시 첨가를 비교한 T 검정에서의 p값이 「0.01≤p＜0.05」의 범위에 있음을 나타낸다.
도 3은 식육용 브로일러에 본 발명의 유산균 및 지방산 또는 이의 염 중 어느 하나 또는 이들을 동시에 혼합한 사료를 투여한 경우의 IL-12의 유전자 발현 강도를 나타낸다. 도면 중 **는 T1구 및 T3구를 비교한 T 검정에서의 p값이 「p＜0.01」인 것을 나타낸다.
[유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주]
본 발명에서 사용되는 유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137)는 독립행정법인 산업기술종합연구소 특허생물기탁센터(현재 독립행정법인 제품평가기술기반기구 특허생물기탁센터; 주소：일본국 치바켄 키사라즈시 카즈사카마타리 2-5-8 120호실(우편번호 292-0818))에, 수탁 번호 FERM BP-08607호(평성7년(1995년) 11월 30일에 기탁된 FERM P-15317호로부터 이관)로 기탁되어 있다. 또한, 락토바실러스 플란타룸 L-137의 변이주이어도, 락토바실러스 플란타룸 L-137의 특징을 구비하는 것은 락토바실러스 플란타룸 L-137의 범주이다.
또한, 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 대신 또는 함께 다른 유산균, 특히 면역부활 작용을 갖는 유산균이 본 발명에 도입되어도 된다.
상기 유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주는 천연 배지, 합성 배지 및 반합성 배지 등의 배지에서 배양한 것 중 어느 것이어도 된다. 본 발명에 있어서, 유산균의 배양은 공지 방법, 자체 공지의 방법 또는 이들에 준하는 방법에 따라 수행되어도 된다.
상기 배지로서는 특별히 한정되지 않고, 예를 들면 질소원 및/또는 탄소원을 함유하는 것이 바람직하게 사용된다. 상기 질소원으로서는, 특별히 한정되지 않고, 예를 들면, 고기 엑기스, 펩톤, 글루텐, 카제인, 효모 엑기스, 또는 아미노산 등을 들 수 있다. 상기 탄소원으로서는, 특별히 한정되지 않고, 예를 들면, 글루코오스, 자일로오스, 프럭토오스, 이노시톨, 말토오스, 물엿, 코지즙(koji juice), 전분, 버개스(bagasse), 기울(bran), 당밀, 또는 글리세린 등을 들 수 있다. 이들은 1종으로 또는 2종 이상을 조합하여 사용해도 된다.
상기 배지는 상기 질소원 및/또는 탄소원에 추가하여, 추가로 무기질을 첨가해도 된다. 상기 무기질로서는, 특별히 한정되지 않고, 예를 들면, 황산암모늄, 인산칼륨, 염화마그네슘, 식염, 철, 망간, 몰리브덴 또는 각종 비타민류 등을 들 수 있고, 이들을 1종으로 또는 2종 이상을 조합하여 사용해도 된다.
유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주의 배양 온도 및 배양 시간은 배양이 효율적으로 실시될 수 있으면 특별히 한정되지 않지만, 본 발명의 일 태양에 있어서, 배양 온도는 예를 들면 통상 약 25∼40℃, 바람직하게는 약 27∼35℃로 해도 되고, 배양 시간은 예를 들면 약 12∼48시간으로 해도 된다. 또한, 본 발명의 일 태양에 있어서, 유산균의 배양은 통기 진탕에 의해 실시해도 된다. 또한, 배지의 pH는 특별히 한정되지 않지만, 본 발명의 일 태양에 있어서 통상 약 pH 3∼6, 바람직하게는 약 pH 4∼6으로 해도 된다.
[유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주의 처리물]
유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주의 「처리물」이란, 바람직하게는, 당해 유산균을 가공한 것 또는 당해 유산균의 배양물이지만, 이들에 한정되지 않는다. 또한, 균은 생균이어도 되고 사균체이어도 되지만, 안정성 및 취급의 용이성 등의 관점에서 사균체를 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서는, 이러한 처리물을 그대로 사용해도 되고, 동결 건조, 저온 건조, 분무 건조, 또는 L-건조 등이나 이들을 조합하여 분말상으로 하여 사용해도 된다. 또한, 이들의 처리물(배양물)은 적절한 용매(물, 알코올, 유기 용제 등)로 희석하여 사용해도 되고, 적절한 첨가제를 첨가하여, 겔이나 고형제로 하여 사용해도 된다.
유산균의 사균체를 조제하는 방법에 대하여 구체적으로 설명한다.
본 발명에 있어서, 상기 사균체의 조제 방법은 본 발명의 효과를 잃지 않는 한 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면, (I) 배양 종료 후에 유산균의 생균체를 배양액으로부터 분리한 후, 상기 생균체를 살균 처리하여 사균체의 상태로 하는 방법, (II) 배양액 중에서 유산균의 생균체를 살균 처리하여 사균체의 상태로 하고, 그 후에 상기 사균체를 배양액으로부터 분리하는 방법 등의 어느 방법에 의해 조제해도 된다.
배양액으로부터 균체를 분리하는 방법으로서는 이 분야에서 통상 사용되는 다양한 방법을 채용해도 되고, 특별히 한정되지 않는다. 본 발명의 일 태양에 있어서, 구체적으로는, 예를 들면, 배양액에 증류수를 첨가한 후에 원심분리 등의 수단에 의해 상청을 제거함으로써, 배양액과 균체를 분리하는 방법 등을 채용해도 된다. 또한, 이 양태에 있어서는, 배양액에 증류수를 첨가하여 원심분리를 행한 후에 상청을 제거한 후, 필요에 따라 상청을 제거한 잔류물에 추가로 증류수를 첨가하여 원심분리를 행하는 조작을 여러 번 반복해도 된다. 본 발명의 일 태양에 있어서, 분리 조작으로서 여과 공정을 포함해도 된다.
이어서, 유산균의 생균체의 살균 처리 방법에 대하여 구체적으로 설명한다. 상기 살균 처리 방법으로서는 특별히 한정되지 않고, 예를 들면 가열, 자외선 조사, 포르말린 처리 등을 들 수 있다. 또한, 상기 살균 처리는 채취된 생균체에 대해서 행해도 되고, 생균체를 포함한 배양액에 대해서 행해도 된다.
상기 가열 처리를 행하는 경우, 가열 온도는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면, 통상 약 60∼100℃, 바람직하게는 약 70∼90℃로 해도 된다. 가열 수단으로서는 공지의 방법을 사용할 수 있고 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면 히터 등의 수단이어도 된다. 가열 시간은 살균 처리가 충분히 완료될 수 있으면 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면, 가열 시간은 원하는 온도에 도달한 후, 통상 약 5∼40분, 바람직하게는 약 10∼30분으로 해도 된다.
상기와 같이 하여 얻어진 상기 사균체는 추가로 마쇄, 파쇄 또는 동결 건조 처리 등을 행하여, 사균체 처리물로 해도 된다. 본 발명에 있어서는, 상기 사균체 처리물도 사균체로서 적합하게 사용할 수 있다.
또한, 본 발명에서는, 유산균의 균체 대신에 또는 균체와 함께, 유산균 균체의 추출물을 사용해도 된다. 상기 추출물의 추출 방법은 특별히 한정되지 않고, 공지 방법, 자체 공지 방법 또는 이들에 준하는 방법에 따라 행해도 된다. 구체적으로는, 예를 들면, 유산균의 생균체 또는 사균체를, (i) 상압 또는 가압 하에서, 실온 또는 가온한 추출 용매 중에 첨가하여 침지 또는 교반하면서 추출하는 방법, (ii) 추출 용매 중에서 환류하면서 추출하는 방법 등을 들 수 있다. 추출 온도, 추출 시간, 사용하는 추출 용매의 종류는 추출 조건에 따라 적절히 선택해도 된다.
상기 추출 용매로서는 특별히 한정되지 않고, 예를 들면 물, 유기 용매 또는 이들의 임의의 비율로의 혼합 용매를 사용해도 된다. 상기 유기 용매로서는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면, 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올 및 n-부탄올 등), 다가 알코올(예를 들면, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 등) 등의 실온에서 액체인 알코올류; 에테르류(예를 들면, 디에틸에테르, 프로필에테르 등); 에스테르류(예를 들면, 에틸 아세테이트, 부틸 아세테이트 등); 케톤류(예를 들면, 아세톤, 에틸메틸케톤 등); 탄화수소류(예를 들어, 헥산, 크실렌, 톨루엔 등); 클로로포름 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 또는 2종 이상을 조합하여 사용해도 된다. 상기 유기 용매 중에서도, 조작성이나 환경에 대한 영향 등의 관점에서, 실온에서 액체인 알코올류, 예를 들면, 탄소원자수 1∼4의 저급 알코올을 사용하는 것이 바람직하고, 잔류 용매에 의한 안전성의 관점에서는 에탄올을 사용하는 것이 더욱 바람직하다.
본 발명에 있어서는, 상기 추출 조작에 의해 얻어진 추출액 및 잔사를 포함하는 혼합물을 원하는 대로 여과 또는 원심분리 등에 제공하고, 잔사인 고형 성분을 제거하여 얻은 추출액을 그대로 본 발명의 상기 담체의 조제에 사용해도 되고, 상기 추출액을 농축, 동결 건조 또는 스프레이 드라이 등의 방법에 의해 건조, 분말화하여 사용해도 된다.
본 발명의 사료 또는 조성물 중의 유산균 또는 이의 처리물의 함유량은 본 발명의 효과를 잃지 않는 한 특별히 한정되지 않지만, 사료 또는 조성물 100 질량% 중, 예를 들면, 약 0.0001∼0.1 질량%의 범위이어도 되고, 바람직하게는 0.001∼0.01 질량%의 범위이어도 된다. 본 발명의 사료 또는 조성물 중의, 유산균 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염의 질량비는 본 발명의 효과를 잃지 않는 한 특별히 한정되지 않지만, 1 : 0.5∼50000의 범위이어도 되고, 바람직하게는 1 : 0.5∼2000의 범위, 더욱 바람직하게는 1 : 0.5∼100이며, 1 : 0.5∼2.5의 범위가 특히 바람직하다.
[지방산]
본 발명에 있어서의 지방산으로서는, 예를 들면, 포화 또는 불포화의, 직쇄 또는 분지쇄의 지방산을 사용할 수 있다. 이러한 지방산으로서 구체적으로는 포름산(formic acid), 아세트산(acetic acid), 프로피온산(propionic acid), 부티르산(butyric acid), 길초산(valeric acid), 카프로산(caproic acid), 에난트산(enanthic acid), 카프릴산(caprylic acid), 펠라르곤산(pelargonic acid), 카프르산(capric acid), 라우르산(lauric acid), 미리스트산(myristic acid), 펜타데실산(pentadecylic acid), 팔미트산(palmitic acid), 팔미톨레산(palmitoleic acid), 마르가르산(margaric acid), 스테아르산(stearic acid), 투베르쿨로스테아르산(tuberculostearic acid), 이소스테아르산(isostearic acid), 올레산(oleic acid), 엘라이드산(elaidic acid), 박센산(vaccenic acid), 리놀레산(linoleic acid), α-리놀렌산(α-linolenic acid), γ-리놀렌산(γ-linolenic acid), 엘레오스테아르산(eleostearic acid), 스테아리돈산(stearidonic acid), 리시놀레산(ricinoleic acid), 아라키드산(arachidic acid), 아라키돈산(arachidonic acid), 디호모-γ-리놀렌산(dihomo-γ-linolenic acid), 에이코사펜타엔산(eicosapentaenoic acid), 베헨산(behenic acid), 에루크산(erucic acid), 도코사펜타엔산(docosapentaenoic acid), 도코사헥사엔산(docosahexaenoic acid), 리그노세르산(lignoceric acid), 네르본산(nervonic acid), 세로트산(cerotic acid), 몬탄산(montanoic acid), 멜리스산(melissic acid), 말론산(malonic acid), 숙신산(succinic acid), 사과산(malic acid), 시트르산(citric acid), 글루타르산(glutaric acid), 아디프산(adipic acid), 피멜산(pimelic acid), 수베르산(suberic acid), 아젤라산(azelaic acid), 세바스산(sebacic acid) 등을 들 수 있다.
바람직한 지방산으로서는, 예를 들어, 단쇄 지방산, 중쇄 지방산 및 장쇄 지방산으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종의 지방산 또는 이들의 혼합물을 들 수 있다. 보다 바람직하게는, 단쇄 지방산 또는 중쇄 지방산이며, 더욱 바람직하게는 단쇄 지방산이다.
또한, 지방산은 치환기를 갖고 있어도 된다. 치환기는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면 알킬기, 시클로알킬기, 알콕시기, 카르복실기, 케톤기, 알데히드기, 카르보닐기, 히드록실기, 니트로기, 아미노기, 시아노기, 티올기, 니트로기, 에테르 결합, 에스테르 결합, 아미드 결합, 우레탄 결합 등의 통상, 의약, 동물약, 식품, 화장품 등의 분야에서 사용되는 공지의 기 또는 결합 등을 들 수 있다.
또한, 본 발명의 지방산의 바람직한 유래로서는, 예를 들면, 대두유, 채종유, 면실유, 낙화생유, 팜유, 해바라기유, 소맥배아유, 미강유, 옥수수유, 참기름, 체리종자유, 홍화유(safflower oil), 아마인유(linseed oil), 아몬드너트유, 잉카 인치유(inca inchi oil), 들기름, 올리브유, 오렌지씨유, 호박씨유, 차조기유, 차유, 동백유, 땅콩유, 포도씨유, 마카다미아너트유, 우지(牛脂), 돈지(豚脂), 난황유, 정어리, 연어, 고등어, 꽁치, 청어, 참치 등으로부터 얻어지는 어유, 오징어, 명태 등의 간유, 가다랑어, 참치 등의 안와유, 해구유(seal oil), 크릴유 등으로부터 공지의 방법 또는 자체 공지의 방법에 의해 얻어지는 동식물성 유리 지방산 등이어도 되고, 화학 합성 등에 의해 얻어지는 시판품의 지방산 등을 사용해도 된다.
(지방산의 염)
본 명세서에 있어서, 지방산은 공지된 방법에 따라 원하는 염의 형태로 변환할 수 있다. 이러한 염의 바람직한 예로서는, 예를 들면, 나트륨, 칼륨, 리튬, 칼슘, 마그네슘 등의 무기 염기와의 염, 예를 들면, 암모니아, 디메틸아민, 트리메틸아민, 디시클로헥실아민 등의 유기염 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
(단쇄 지방산)
본 명세서에 있어서, 단쇄 지방산은 통상 탄소수 1∼6의 포화 또는 불포화의, 직쇄 또는 분지쇄의 지방산이다. 바람직한 단쇄 지방산의 예로서는, 예를 들면 포름산, 아세트산, 프로피온산, 부티르산, 이소부티르산, 이소길초산, 락트산, 피루브산, 길초산, 카프로산, 숙신산, 푸마르산, 말레산(maleic acid), 사과산, 시트르산 등을 들 수 있고, 보다 바람직하게는, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 부티르산, 이소부티르산, 이소길초산, 락트산, 피루브산, 길초산, 카프로산, 숙신산이며, 더욱 바람직하게는 아세트산, 프로피온산 및 부티르산이지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
또한, 다른 바람직한 예로서는, 단쇄 지방산은 염 형태로 사용된다. 이러한 염으로서는, 상기한 무기 염기와의 염을 들 수 있지만, 더욱 바람직하게는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘 등과의 염이다.
(중쇄 지방산)
본 명세서에 있어서, 중쇄 지방산은 통상 탄소수 7∼11의 포화 또는 불포화의, 직쇄 또는 분지쇄의 지방산이다. 바람직한 중쇄 지방산의 예로서는, 예를 들면 데칸산(카프르산), 에난트산, 카프릴산, 펠라르곤산 등을 들 수 있다. 바람직하게는, 중쇄 지방산은 직쇄 또는 포화 지방산인 것이 바람직하고, 직쇄의 포화 지방산인 것이 더욱 바람직하다.
(장쇄 지방산)
본 명세서에 있어서, 장쇄 지방산은 통상, 탄소수 12 이상의 포화 또는 불포화의, 직쇄 또는 분지쇄의 지방산이다. 바람직한 장쇄 지방산의 예로서는, 예를 들어, 라우르산, 트리데실산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 팔미톨레산, 박센산, 파울린산(paullinic acid), 리놀레산, γ-리놀렌산, α-리놀렌산, 아라키돈산, 올레산 등을 들 수 있다. 바람직하게는, 장쇄 지방산은 불포화 지방산이고, 보다 바람직하게는 오메가-3, 오메가-6, 오메가-7 또는 오메가-9 불포화 지방산이며, 더욱 바람직하게는 오메가-7 불포화 지방산이다. 또한, 「오메가-X 불포화 지방산」이란, 지방산의 메틸 말단으로부터 X번째의 결합이 불포화 결합인 것을 말한다.
[사료(사료용 조성물)]
본 발명의 사료(사료용 조성물)로서는, 예를 들면, 소, 말, 돼지 등의 가축용 사료, 닭, 메추라기, 칠면조, 집오리, 거위 등의 가금용 사료, 중방어, 대방어, 도미, 새우, 굴, 바지락 등의 어개(魚介) 등의 양식용 사료, 개, 고양이 등의 애완동물용 사료 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다. 가금용 사료로서는 바람직하게는 닭, 보다 바람직하게는 브로일러(육계), 레이샤(산란계), 지도리(地鷄) 등의 닭이지만, 특별히 한정되지 않는다. 본 발명의 사료는, 사료 중에 본 발명의 유산균 및 지방산을 첨가하는 것 이외에는, 일반적인 사료의 제조 방법에 의해 적절히 가공 및 제조할 수 있다.
[IL-12 생산 증강용 조성물 및 면역부활용 조성물]
본 발명의 조성물은 상기한 바와 같이, 바람직하게는 IL-12 생산 증강 작용 및/또는 면역 부활 작용을 갖는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 조성물은 단순히 사료에 국한되지 않으며, 다른 바람직한 예로서는 음식품용 및/또는 의약품용(동물약도 포함)이다. 또 다른 바람직한 예로서는, 본 발명의 조성물은 음식품용 첨가제로서 사용된다.
음식품용, 음식품용 첨가제용 또는 의약품용인 조성물은, 상기한 유산균 및 지방산과, 추가로 약학적으로 허용되는 담체, 첨가제 등을 적절히 배합하여 제제화 등을 할 수 있다. 이를 위한 제제화 방법이나 제제화 기술은 종래에 충분히 확립되어 있으므로, 그에 따라도 된다. 예를 들어, 의약품용의 경우, 구체적으로는, 정제, 피복정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 액제, 현탁제, 유제 등의 경구제, 주사제, 수액, 좌제, 연고, 패치제 등의 비경구제로 할 수 있다. 담체 또는 첨가제의 배합 비율에 대해서는, 음식품, 의약품 또는 수의학 분야에서 통상 채용되고 있는 범위에 기초하여 적절히 설정하면 된다. 배합할 수 있는 담체 또는 첨가제는 특별히 제한되지 않지만, 예를 들면 물, 생리식염수, 기타 수성 용매, 수성 또는 유성 기제 등의 각종 담체, 효소, pH 조정제, 보존료, 살균료, 산화방지제, 곰팡이방지제, 보존향상제, 표백제, 광택제, 향료, 감미료, 산미료, 조미료, 고미료(苦味料), 유화제, 증점제, 안정제, 겔화제, 호료, 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 착색제, 교미제, 향료 등의 각종 첨가제를 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 이들에 관한 기술은 종래에 충분히 확립되어 있으므로, 본 발명에서는 이들에 따르면 된다.
또한, 본 발명의 IL-12 생산 증강용 조성물 또는 면역부활용 조성물이 투여되는 경우, 그 대상은 바람직하게는 인간 외에도, 상기 사료의 항목에서 설명한 가축, 가금 또는 애완동물 등의 동물이지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 조성물이 음식품용인 경우, 이러한 음식품에는 건강 식품, 기능성 표시 식품, 특정 보건용 식품, 병자용 식품이 포함된다. 음식품의 형태는 특별히 한정되지 않지만, 구체예로는, 예를 들면, 소위 영양보조식품 또는 보충제(supplement)로서의 정제, 과립제, 산제, 드링크제 등을 들 수 있다. 이들 외에는, 예를 들면 차음료, 청량음료, 탄산음료, 영양음료, 과실음료, 유산음료 등의 음료, 메밀국수(soba), 우동, 중화면, 즉석면 등의 면류, 엿, 캔디, 껌, 초콜릿, 스낵과자, 비스킷, 젤리, 잼, 크림, 구운 과자, 빵 등의 과자 및 빵류, 햄, 소시지, 한펜(hanpen), 치쿠와(chikuwa) 등의 수산·축산 가공식품, 가공유, 발효유 등의 유제품, 샐러드유, 튀김유, 마가린, 마요네즈, 쇼트닝, 휘핑 크림, 드레싱 등의 유지 및 유지 가공식품, 소스, 양념 등의 조미료, 카레, 스튜, 덮밥, 죽, 잡탕죽 등의 레토르트 파우치 식품, 아이스크림, 샤베트 등의 냉과(冷菓) 등을 들 수 있지만 이들에 한정되는 것은 아니다. 이들에 관한 기술은 종래에 충분히 확립되어 있으므로, 본 발명에서는 이들에 따르면 된다.
[정균용(靜菌用) 조성물]
본 발명의 조성물은 바람직하게는 세균의 증식을 억제하는 정균 작용을 갖는 것을 추가로 특징으로 한다. 바람직하게는, 예를 들면, 살모넬라균, 티푸스균, 파라티푸스균, O-157, O-111, O-121 등을 포함하는 장관출혈성 대장균, 장관독소원성 대장균, 장관조직침입성 대장균 등의 병원성 대장균(Escherichia coli), 콜레라균, 이질균, 캄필로박타균, 클로스트리디움균, 황색포도상구균, 웰치균(Welch bacteria), 장염 비브리오 등의 장관감염증의 원인이 되는 균이 본 발명의 조성물에 의한 정균 작용의 대상이 되는 세균으로서 열거되지만 이들에 한정되는 것은 아니다. 살모넬라균으로서는, 예를 들면, 티푸스균, 파라티푸스균, 장염균이 바람직하게 열거되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 단순히 사료에 한정되는 것은 아니며, 다른 바람직한 예로서는 음식품용 및/또는 의약품용(동물약도 포함)이다.
음식품용, 음식품용 첨가제용 또는 의약품용인 조성물은 상기한 유산균 및 지방산과, 추가로 약학적으로 허용되는 담체, 첨가제 등을 적절히 배합하여 제제화 등을 할 수 있다. 이를 위한 제제화 방법이나 제제화 기술은 종래에 충분히 확립되어 있으므로 이에 따르면 된다. 예를 들면, 의약품용의 경우, 구체적으로는, 정제, 피복정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 액제, 현탁제, 유제 등의 경구제, 주사제, 수액, 좌제, 연고, 패치제 등의 비경구제로 할 수 있다. 담체 또는 첨가제의 배합비율에 대해서는, 음식품, 의약품 또는 수의학 분야에서 통상 채용되고 있는 범위에 기초하여 적절히 설정하면 된다. 배합할 수 있는 담체 또는 첨가제는 특별히 제한되지 않지만, 예를 들면 물, 생리식염수, 기타의 수성 용매, 수성 또는 유성 기제 등의 각종 담체, 효소, pH 조정제, 보존료, 살균료, 산화방지제, 곰팡이방지제, 보존향상제, 표백제, 광택제, 향료, 감미료, 산미료, 조미료, 고미료, 유화제, 증점제, 안정제, 겔화제, 호료, 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 착색제, 교미제, 향료 등의 각종 첨가제를 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 이들에 관한 기술은 종래에 충분히 확립되어 있으므로, 본 발명에서는 이들에 따르면 된다.
또한, 본 발명의 조성물이 음식품용인 경우, 이러한 음식품에는 건강 식품, 기능성 표시 식품, 특정 보건용 식품, 병자용 식품이 포함된다. 음식품의 형태는 특별히 한정되지 않지만, 구체예로는, 예를 들면, 소위 영양보조식품 또는 보충제로서의 정제, 과립제, 산제, 드링크제 등을 들 수 있다. 이들 외에는, 예를 들면 차음료, 청량음료, 탄산음료, 영양음료, 과실음료, 유산음료 등의 음료, 메밀국수(soba), 우동, 중화면, 즉석면 등의 면류, 엿, 캔디, 껌, 초콜릿, 스낵과자, 비스킷, 젤리, 잼, 크림, 구운 과자, 빵 등의 과자 및 빵류, 햄, 소시지, 한펜(hanpen), 치쿠와(chikuwa) 등의 수산·축산 가공식품, 가공유, 발효유 등의 유제품, 샐러드유, 튀김유, 마가린, 마요네즈, 쇼트닝, 휘핑 크림, 드레싱 등의 유지 및 유지 가공식품, 소스, 양념 등의 조미료, 카레, 스튜, 덮밥, 죽, 잡탕죽 등의 레토르트 파우치 식품, 아이스크림, 샤베트 등의 냉과(冷菓) 등을 들 수 있지만 이들에 한정되는 것은 아니다. 이들에 관한 기술은 종래에 충분히 확립되어 있으므로, 본 발명에서는 이들에 따르면 된다.
상세한 것은 불분명하지만, 본 발명에 있어서는, 본 발명의 사료 또는 조성물을 대상에게 투여함으로써 IL-12 생산이 증강된 결과 및/또는 면역이 부활된 결과, 살모넬라균 등의 증식이 억제되어 정균 작용이 발생하는 것으로 생각된다.
또한, 본 발명의 정균용 조성물이 투여되는 경우, 그 대상은, 바람직하게는, 인간 외에도, 상기 사료의 항에서 설명한 가축, 가금 또는 애완동물 등의 동물이지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
[기타 성분]
본 발명의 사료 또는 조성물에는, 본 발명의 효과를 잃지 않는 한, 예를 들면, 의학, 약학, 수의학 또는 식품 등의 분야에서 알려져 있는 임의의 성분이 함유되어 있어도 된다.
이러한 성분으로서, 예를 들면, 상기한 것 이외의 면역 부활 활성을 갖는 것으로 알려진 유산균이 사용되어도 된다. 예를 들면, 상기 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 이외의 락토바실러스속, 스트렙토코커스속, 엔테로코커스속, 락토코커스속, 또는 비피더스속 등에 속하는 유산균 등을 사용할 수 있다. 더욱 상세하게는, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 퍼멘툼(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 부흐네리(Lactobacillus buchneri), 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus), 엔테로코커스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 엔테로코커스 패시움(Enterococcus faecium), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 락토코커스 플란타룸(Lactococcus plantarum) 또는 비피도박테리움 써모필룸(Bifidobacterium thermophilum), 비피도박테리움 롱굼(Bifidobacterium longum) 또는 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve) 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
[투여량]
락토바실러스 플란타룸 L-137의 섭취량은, 경구 또는 주사 투여의 경우는, 섭취자의 연령 및 체중, 증상, 투여시간, 제형, 투여방법, 약제의 조합 등에 의존하여 결정할 수 있다. 예를 들어, 성인 1인(약 60 kg) 1일당, 락토바실러스 플란타룸 L-137을 건조 사균체로서, 바람직하게는 약 0.5∼200 mg, 더욱 바람직하게는 약 1∼100 mg, 더더욱 바람직하게는 약 2∼50 mg 섭취되도록 설정하는 것이 바람직하다. 또는 성인 1인(약 60 kg) 1일당, 락토바실러스 플란타룸 L-137을 생균 환산으로, 바람직하게는 약 5X108 내지 2X1011 cfu(Colony forming unit; 콜로니 형성 단위), 더욱 바람직하게는 약 1X109 내지 1X1011 cfu 섭취되도록 설정하는 것이 바람직하다. 섭취 횟수는 1일 1회 또는 복수회로 나누어 실시할 수 있다.
외용 도포의 경우는, 적용하는 피부 면적에 따라, 락토바실러스 플란타룸 L-137의 도포량을 적절히 선택할 수 있지만, 통상, 당해 도포량은 적용 부위의 면적 약 10 cm2에 대하여 1 일당, 바람직하게는 약 0.01∼2.5 mg, 더욱 바람직하게는 약 0.02∼1 mg이다. 상기 투여량은 1일당 1회 또는 수회로 나누어 투여 또는 적용해도 된다.
[제조방법]
본 발명은 예를 들면 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산과, 필요에 따라 다른 성분을 혼합하는 공정을 함유하는 것을 특징으로 하는, 사료 등의 본 발명 조성물의 제조방법을 포함한다. 혼합하는 공정에서는, 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 (Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염과, 기타의 성분이 사료 또는 조성물 전체에 걸쳐 균일하게 되도록, 공지의 방법 또는 자체 공지의 방법으로 혼합 또는 교반하는 것이 바람직하다. 혼합 또는 교반 방법은 당업계에 충분히 확립되어 있으므로, 그 방법에 따르면 된다.
[IL-12 생산 증강 효과, 면역 부활 효과 및 정균 효과의 확인]
본 발명의 사료 또는 조성물의 효과를 확인하는 방법으로서는, 예를 들면, 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 함유하는 본 발명의 사료 또는 기타의 조성물이 락토 바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염의 어느 것도 함유하지 않는 사료 또는 조성물에 비해 IL-12 생산, 면역 부활 활성 또는 정균 효과가 우수한 것을 확인하는 방법이 열거된다. IL-12 생산 및 면역 부활 활성의 확인 방법은 ELISA 등과 같이 해당 분야에 충분히 확립되어 있으므로, 그 방법에 따르면 된다. 정균 효과의 확인 방법은, 균의 증식의 유무를 육안 또는 현미경 등으로 확인하는 것 외에, 적절한 배지에서 배양하여 증식성을 측정하는, 세균류가 생산하는 효소량의 측정, PCR법 등과 같이, 해당 분야에 충분히 확립되어 있으므로, 그 방법에 따르면 된다.
또한, 면역 부활 활성으로서, 구체적으로는, 예를 들면, B 세포, T 세포, 마크로파지, 자연살해(NK) 세포, 수지상 세포 등의 세포의 IL-12 등의 인터루킨, 또는 IFN-β 혹은 IFN-γ 등의 인터페론 등의 사이토카인의 생산 촉진 활성 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.
이들 상기 방법의 일례로서, 후술하는 실시예를 참조할 수 있다.
본 발명의 조성물을 음식품, 동물용 사료, 의약품(동물용 의약도 포함), 또는 의약부외품의 형태로 조제한 경우, 당해 음식품, 사료, 의약품, 또는 의약부외품, 이의 첨부 설명서 또는 이의 포장 상자 등에는, 본 발명의 조성물의 작용을 감안하여, IL-12 생산 증강 작용 또는 면역 부활 활성을 갖는 유산균 또는 이의 처리물인 것을 표시할 수 있다.
본 발명의 사료에 있어서, 유산균 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염의 질량비(유산균 또는 이의 처리물 : 지방산 또는 이의 염)는 예를 들면 1 : 0.5∼50000인 것이 바람직하고, 1 : 0.5∼2000인 것이 더욱 바람직하고, 1 : 0.5∼100인 것이 더욱 바람직하고, 1 : 0.5∼2.5인 것이 특히 바람직하다.
본 발명의 의약품(동물용 의약도 포함), 음식품, 의약부외품 등의 조성물에 있어서의, 유산균 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염의 질량비(유산균 또는 이의 처리물 : 지방산 또는 이의 염)는 예를 들면, 1 : 0.5∼50000인 것이 바람직하고, 1 : 0.5∼2000인 것이 더욱 바람직하고, 1 : 0.5∼100인 것이 더더욱 바람직하고, 1 : 0.5∼2.5인 것이 특히 바람직하다.
실시예
이하에 실시예 및 시험예를 들어 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 면역세포주에 본 발명의 유산균과 지방산 또는 이의 염을 첨가한 경우의 IL-12 생산 증강 효과의 확인
실험방법: 락토바실러스 플란타룸 L-137 건조 사균체를 PBS로 2 mg/mL이 되도록 현탁하고, 10% FBS 함유 RPMI1640 배지를 첨가하여 40 ㎍/mL이 되도록 희석하여 검액 1로 하였다. 지방산(중쇄, 장쇄) 또는 지방산의 나트륨염(단쇄)을 Dnase free water(단쇄 지방산) 또는 EtOH(중쇄, 장쇄 지방산)로 0.5M이 되도록 용해시킨 후, 10% FBS 함유 RPMI1640 배지를 첨가하여 400 μM이 되도록 희석하여 검액 2로 하였다. 마크로파지 유사 세포주인 J774.1 세포(세포 번호 JCRB9108; 국립연구개발법인 의약기반 건강영양연구소 JCRB 세포 뱅크)는 각각 1.0X106 세포/mL이 되도록 10% FBS 함유 RPMI1640 배지에 현탁하여, 세포주 현탁액으로 하였다. 검액 1, 2를 50 μL씩 및 세포주 현탁액을 100μL씩, 96웰 배양 플레이트에 첨가하고(균체 최종 농도: 10 ㎍/mL, 지방산 최종 농도: 100 μM, 세포 최종 농도: 5.0X105/mL), 5% CO2 인큐베이터에서 37℃, 48시간 동안 배양하였다. 배양 종료 후 상청 중의 IL-12p40 농도는 ELISA법으로 측정하였다. 또한, 검출 한계 농도는 0.07 ng/mL이었다. 결과는 하기 표 1 및 도 1, 도 2와 같다.
사용한 시약 등의 제조사 및 제품명은 다음과 같다.
아세트산나트륨(S5636, 시그마알드리치), 프로피온산나트륨(P5436, 시그마알드리치), N-부티르산나트륨(B5887, 시그마알드리치), 데칸산(21409, 시그마알드리치), 팔미톨레산(P9417, 시그마알드리치), FBS(SH30071.03, Hyclone), RPMI1640 배지(23400-021, Thermo Fisher Scientific), ELISA용 1차 항체(505202, Biolegend), ELISA용 2차 항체(BAF419, R&D Systems), ELISA용 표품(577009, Biolegend)
IL-12 생산량(ng/ml) 아세트산 프로피온산 부티르산 데칸산 팔미톨레산
지방산 단독 첨가 ND ND ND ND ND
L-137 단독 첨가 0.280 0.443 0.190 0.530 0.498
L-137·지방산 동시 첨가 0.521 0.811 0.266 0.631 0.628
결과 및 고찰:
상기 표 1 및 도 1, 도 2에 나타낸 바와 같이, 지방산을 단독으로 첨가한 경우에는, 어느 지방산(단쇄 지방산, 중쇄 지방산, 장쇄 지방산) 또는 이의 염도 면역세포에 대하여 IL-12를 생산시킬 수 없었다. 그리고, 유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137 균주)는 면역세포에 대하여 일정한 IL-12 생산 효과를 가졌으나, 유산균과 지방산을 동시에 첨가한 경우 지방산 단독 첨가시 전혀 발견되지 않았던 IL-12의 생산이 유의한 차이를 가지고 증강되었다. 이러한 결과로부터, 유산균과 지방산을 조합함으로써, IL-12의 생산이 향상되는 것을 알 수 있었다. 또한, IL-12의 생산이 향상되는 것은 면역 부활 작용에도 좋은 영향이 있을 것으로 생각된다.
본 발명은 단독으로는 IL-12 생산 활성을 갖지 않는 지방산을 유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137 균주)와 조합함으로써, IL-12 생산이 유의한 차이를 가지고 증강되는 것을 발견한 최초의 예이다.
[실시예 2] 동물에 본 발명의 유산균 및 지방산 또는 이의 염을 급여한 경우의 IL-12 생산 증강 효과 및 정균 효과의 확인
또한, 실시예 2에서는 락토바실러스 플란타룸 L-137과 지방산을 함유하는 사료(시험 식품)를 동물(브로일러)에 급여하고, 그 평가를 행하였다.
실험 방법:
(1) 시험준비 및 사육방법에 대하여
실시예 2에서는 식육용 브로일러(Ross308, 수컷, Charoen Pokphand Foods PCL., Lamphun, Thailand로부터 입수)를 64마리마다 이하의 시험구(T1, T2 및 T3)로 나누어 평가를 행하였다.
락토바실러스 플란타룸 L-137 건조 사균체 분말 및 프로피온산나트륨(100% Sodium Propionate, CALTECH CORPORATION LIMITED)의 어느 것도 포함하지 않는 시험식(분말 사료)을 급여하는 구(T1),
락토바실러스 플란타룸 L-137 건조 사균체를 시험식 중 10 ppm의 농도로 혼합 급여하는 구(T2),
락토바실러스 플란타룸 L-137 건조 사균체를 시험식 중 5 ppm과 프로피온산나트륨을 시험식 중 2000 ppm의 농도로 혼합 급여하는 구(T3).
(이하의 시험에서는, T3의 유효성이 T2와 동등 이상이면, 상승효과가 얻어지고 있는 것으로 간주하는 것으로 한다.)
각 구 시험식을 브로일러에게 1일령부터 21일령까지 급여하고, 통상 사료로 22일령부터 42일령까지 사육하였다. 시험식 및 통상 사료의 상세에 대해서는 하기의 표 2와 같다.
내용 1-21일령 22-42일령
옥수수 47.0 44.3
카사바(cassava)분 11.0 15.0
대두분(大豆粉) 28.0 20.0
오시다이즈 3.0 4.0
어분(漁粉)(조단백질: 55%) 4.0 5.0
미강 5.0 10.0
탄산칼슘 0.8 0.7
인산일수소칼슘(순도: 18%) 0.3 0.0
식염 0.3 0.3
프리믹스*1 0.5 0.5
곰팡이형성저해제 0.2 0.2
합계 100.0 100.0
*1: 프리믹스(식이 100 kg 당):
비타민 A: 12,000,000 IU, 비타민 D: 2,400,000 IU, 비타민 E: 30,000 IU, 비타민 K: 1.2 g, 비타민 B1: 2.0 g, 비타민 B2: 6.0 g, 비타민 B6: 3.0 g, 비타민 B12: 20 mg, 판토텐산: 10.0 g, 니코틴산: 30 g, 엽산: 0.96 g, 비오틴: 125.0 mg, 구리: 8.0 g, 망간: 61.0 g, 철: 80 g, 아연: 40.0 g, 요오드: 850 mg, 및 셀레늄: 300 mg.
(2) IL-12 생산 증강 효과의 확인
42일령시에 각 구의 브로일러 8마리로부터 맹장 편도를 채취하고, RNA 추출을 행하였다. 당해 RNA 검체로부터 cDNA를 합성하고, cDNA를 주형으로 정량적 PCR을 실시하였다. 사용한 프라이머의 서열은 하기 표 3과 같다.
Figure pct00001
채취한 맹장 편도 유전자의 발현 해석을 행하여, IL-12의 발현 강도를 T1구, T2구 및 T3구의 각각의 브로일러에서 측정 및 집계하였다. 결과는 도 3 및 하기 표 4와 같다.
IL-12 (T1=1.00 보정) 발현강도 TTEST vs. T1
T1 1.00 ± 0.67
T2 1.37 ± 0.87 0.359
T3 4.42 ± 2.11 0.002
(3) 살모넬라균(Salmonella spp.)에 대한 정균 효과의 확인
42일령시에 각 구의 브로일러 6마리로부터 맹장 내용물을 무균적으로 채취하고, 살모넬라균의 균수를 계측하였다. 결과는 표 5와 같다. 표 중의 값은 평균값이다.
Salmonella spp. (log10cfu/g)
T1 6.8
T2 7.1
T3 6.0
결과 및 고찰:
맹장 편도 유전자 발현 해석의 결과(도 3 및 표 4)로부터는, T2구와 비교하여 T3구에 있어서 유의하게 IL-12의 발현량이 높았다. 또한, 맹장 내용물을 채취하여 분석한 결과, 살모넬라균(Salmonella spp.) 수에 대해서 T2구와 비교하여 T3구에서 균수가 적었다.
즉, 락토바실러스 플란타룸 L-137 건조 사균체와 프로피온산을 모두 포함하는 사료를 투여한 브로일러에서 상승적인 IL-12 발현 작용 및 정균 작용이 확인되었다. 상세한 것은 불분명하지만, 락토바실러스 플란타룸 L-137 건조 사균체와 프로피온산나트륨의 병용에 의해, 숙주인 브로일러의 IL-12 생산이 증강된 결과, 살모넬라균의 증식이 억제되어, 정균 작용이 발생하는 것으로 생각된다.
또한, 살모넬라균의 균수(표 5)로부터는, 유산균 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137 균주) 또는 이의 처리물과 지방산 또는 이의 염을 함유하는 조성물이, in vitro 뿐만 아니라 동물(in vivo)에 있어서도 IL-12 생산 증강 작용과 면역 부활 작용에 유효한 것으로 나타났다.
본 발명의 사료 및 조성물은 IL-12 생산 증강 작용, 면역 부활 작용 또는 정균 작용을 갖기 때문에, 음식품, 사료, 의약품 또는 의약부외품, 및 화장품 등으로서 유용하다.
독립행정법인 제품평가기술기반기구 특허생물기탁센터(NITE-IPOD) FERMBP-08607 19951130
<110> HOUSE WELLNESS FOODS CORPORATION <120> FEED AND COMPOSITION CONTAINING LACTIC ACID BACTERIA AND FATTY ACID <130> PN1014IM <150> JP 2020-161335 <151> 2020-09-25 <160> 4 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 1 tgtctcacct gctatttgcc ttac 24 <210> 2 <211> 29 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 catacacatt ctctctaagt ttccactgt 29 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 cctctctggc aaagtccaag 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 4 catctgccca tttgatgttg 20

Claims (12)

  1. 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 사료.
  2. 제1항에 있어서, 지방산이 단쇄 지방산, 중쇄 지방산 및 장쇄 지방산으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종의 지방산 또는 이들의 혼합물인 사료.
  3. 제2항에 있어서, 단쇄 지방산이 포름산, 아세트산, 프로피온산, 부티르산, 이소부티르산, 길초산, 이소길초산, 락트산, 피루브산, 카프로산, 및 숙신산으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1종인 사료.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주가 사균체인 사료.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 사료 전체에 대한 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물의 함유 비율이 0.0001 질량% ∼ 0.1 질량%인 사료.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 사료 중의 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염의 질량비가 1 : 0.5∼50000인 사료.
  7. 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 IL-12 생산 증강용 조성물.
  8. 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 면역부활용 조성물.
  9. 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 포함하는 정균용 조성물.
  10. 락토바실러스 플란타룸 L-137 균주(Lactobacillus plantarum L-137) 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 유산균 또는 이의 처리물 및 지방산 또는 이의 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 면역부활용 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 조성물이 의약, 동물약, 의약부외품, 사료, 음식품, 또는 음식품 첨가물인 조성물.
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