KR20220058650A - 백 파지용 클립, 용기 및 교반 방법 - Google Patents
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Abstract
백 파지용 클립은, 제1 필름과 제1 필름과 대향하는 제2 필름의 사이에 수용 공간을 형성하는 백을 파지한 경우에, 제1 필름과 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 압압력을 백에 가하고, 수용 공간을, 연통부를 통하여 서로 연통한 복수의 공간으로 분할하는 격벽을 형성한다.
Description
개시된 기술은, 백 파지용 클립, 용기 및 교반 방법에 관한 것이다.
세포 배양 백에 관한 기술로서, 이하의 기술이 알려져 있다. 예를 들면, 일본 공개특허공보 2011-239734호에는, 배양 용기를 구획 부재에 의하여 배양부와 확대 가능부의 2실로 나누고, 세포수의 증가에 맞추어 구획 부재의 위치를 이동시켜, 배양부의 용적을 확대하는 것이 기재되어 있다.
세포를 배지 내에 부유시킨 상태에서 배양하는 부유 배양에 있어서는, 세포 증식에 필요한 영양분 및 기체를 모든 세포에 공급시킬 필요가 있다. 이 때문에, 세포는, 배지 내에 균일하게 분산되어 있는 것이 바람직하다.
세포를 배지 내에 균일하게 분산시키는 방법으로서, 교반 날개를 이용하여 세포 현탁액을 교반하는 방법이 알려져 있다. 그러나, 세포는 취약하여, 교반 날개에 의한 물리적 스트레스에 의하여 대미지를 받아, 세포의 생존률이 저하할 우려가 있다.
세포를 배지 내에 균일하게 분산시키는 다른 방법으로서, 세포를 배지와 함께 수용한 백을 요동시키는 요동 교반이 알려져 있다. 요동 교반에 의한 교반 방식은, 교반 날개를 이용한 교반에 비하여 세포 현탁액의 유동 상태의 변화가 심하여, 조작 조건의 확립이 곤란하다.
또, 세포를 배지 내에 균일하게 분산시키는 다른 방법으로서, 백 내에 수용된 세포 현탁액에 압력을 인가함으로써, 백 내의 세포 현탁액을 유동시켜 교반하는 방법도 생각할 수 있다. 그러나, 이 경우, 백 내에 있어서 압력차를 형성하는 것을 가능하게 하는 격벽 등의 구조물을 백 내에 마련할 필요가 있다. 백 내에 구조물을 마련하면, 세포를 백의 외부로 배출할 때에, 구조물이 배출의 방해가 되고, 세포가 백 내에 잔류하여, 세포 회수율이 저하할 우려가 있다.
본 발명의 하나의 실시형태는, 세포 현탁액의 교반 처리에 있어서, 세포 회수율의 저하를 억제한다.
개시된 기술에 관한 백 파지용 클립은, 제1 필름과 제1 필름과 대향하는 제2 필름의 사이에 수용 공간을 형성하는 백을 파지한 경우에, 제1 필름과 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 압압력을 백에 가하고, 수용 공간을, 연통부를 통하여 서로 연통한 복수의 공간으로 분할하는 격벽을 형성한다.
격벽은, 백의 제1 변과, 제1 변과 대향하는 제2 변의 사이에, 제1 변 및 제2 변과 교차하는 방향으로 뻗어 있어도 되며, 연통부가, 격벽이 뻗는 경로 상에 마련되어 있어도 된다.
연통부가, 격벽과 제1 변의 사이 또는 격벽과 제2 변의 사이에 마련되어 있어도 된다.
개시된 기술에 관한 백 파지용 클립은, 백에 대하여 착탈 가능한 것이 바람직하다.
격벽은, 수용 공간을, 제1 공간과, 제1 공간의 연직 방향 하측에 배치된 제2 공간으로 분할하는 것이어도 된다.
격벽은, 제1 공간의 바닥부에 내리막 방향의 경사를 형성하고, 바닥부의 최하 위치에 일단이 접속되며, 제2 공간의 내부로 뻗는 연통부를 형성하는 것이어도 된다.
개시된 기술에 관한 백 파지용 클립은, 백에 맞닿는, 탄성체를 포함하는 맞닿음부를 구비하고 있어도 되며, 맞닿음부를 지지하는 지지 부재를 더 구비하고 있어도 된다.
제1 필름과 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 압압력은, 자력에 의하여 부여되어도 된다.
개시된 기술에 관한 백 파지용 클립은, 제1 필름에 맞닿는 제1 맞닿음부와, 제1 필름의, 제1 맞닿음부가 맞닿는 부분과는 다른 부분에 맞닿는 제2 맞닿음부와, 제2 필름에 맞닿고, 제1 맞닿음부와의 사이에 백을 끼움으로써, 제1 공간과 제2 공간을 가르는 격벽의 일부 및 연통부를 형성하는 격벽의 일부를 형성하는 제3 맞닿음부와, 제2 필름에 맞닿고, 제2 맞닿음부와의 사이에 백을 끼움으로써, 제1 공간과 제2 공간을 가르는 격벽의 다른 일부 및 연통부를 형성하는 격벽의 다른 일부를 형성하는 제4 맞닿음부를 포함하고 있어도 된다.
개시된 기술에 관한 백 파지용 클립은, 제1 맞닿음부와 제2 맞닿음부와의 상대적인 위치를 고정하는 제1 고정부와, 제3 맞닿음부와 제4 맞닿음부와의 상대적인 위치를 고정하는 제2 고정부를 더 포함하고 있어도 된다.
개시된 기술에 관한 백 파지용 클립은, 제1 맞닿음부와 제2 맞닿음부 중 적어도 한쪽을 슬라이드시킴으로써 제1 맞닿음부와 제2 맞닿음부와의 상대적인 위치를 변화시키는 제1 슬라이드 기구와, 제3 맞닿음부와 제4 맞닿음부 중 적어도 한쪽을 슬라이드시킴으로써 제3 맞닿음부와 제4 맞닿음부와의 상대적인 위치를 변화시키는 제2 슬라이드 기구를 더 포함하고 있어도 된다.
개시된 기술에 관한 용기는, 상기의 백 파지용 클립과, 백 파지용 클립에 의하여 파지된 백을 포함한다.
개시된 기술에 관한 용기는, 복수의 공간 각각에 접속된 통기 포트를 더 포함하고 있어도 된다.
개시된 기술에 관한 교반 방법은, 제1 필름과 제1 필름과 대향하는 제2 필름의 사이에 수용 공간을 형성하는 백을 파지한 경우에, 제1 필름과 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 압압력을 백에 가하고, 수용 공간을, 연통부를 통하여 서로 연통한 제1 공간과 제2 공간으로 분할하는 격벽을 형성하는 백 파지용 클립과, 백 파지용 클립에 의하여 파지된 백을 포함하는 용기를 이용하여 세포 현탁액을 교반하는 교반 방법으로서, 백 파지용 클립으로 백을 파지하는 제1 단계와, 제1 단계 후에, 제2 공간에 세포 현탁액을 수용하는 제2 단계와, 제1 공간과 제2 공간의 사이에 기압차를 형성하여, 제2 공간에 수용된 세포 현탁액을, 연통부를 경유하여 제1 공간으로 이송하는 제3 단계를 포함한다.
개시된 기술에 관한 교반 방법은, 제3 단계 후에, 제1 공간에 수용된 세포 현탁액을, 연통부를 경유하여 제2 공간으로 이송하는 제4 단계를 더 포함하고 있어도 된다. 또, 제3 단계 및 제4 단계를 교대로 반복하여 실시해도 된다.
개시된 기술에 관한 교반 방법은, 백의 내부에 세포 현탁액을 수용한 상태에서, 백 파지용 클립을 백으로부터 분리하는 제5 단계와, 제5 단계 후에, 백의 내부에 수용된 세포 현탁액을 백의 외부로 배출하는 제6 단계를 더 포함하고 있어도 된다.
개시된 기술에 관한 용기는, 서로 대향하는 제1 필름과 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 개폐 가능한 집(zip) 기구를 내부에 갖는 용기로서, 집 기구를 폐쇄 상태로 함으로써, 용기의 내부의 수용 공간을, 연통부를 통하여 서로 연통한 복수의 공간으로 분할하는 격벽이 형성된다.
본 발명의 하나의 실시형태에 의하면, 세포 현탁액의 교반 처리에 있어서, 세포 회수율의 저하를 억제할 수 있다.
도 1은 개시된 기술의 실시형태에 관한 백 파지용 클립의 구성의 일례를 개략적으로 나타내는 사시도이다.
도 2는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 정면도이다.
도 3은 도 2에 있어서의 3-3선을 따른 단면도이다.
도 4는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다.
도 5a는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5b는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5c는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5d는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5e는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5f는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 6a는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 6b는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 7은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 8은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다.
도 9a는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9b는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9c는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9d는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9e는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9f는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 10은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다.
도 11a은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 정면도이다.
도 11b는 도 11a에 있어서의 11B-11B선을 따른 단면도이다.
도 12는 개시된 기술의 실시형태에 관한 집 기구의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 2는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 정면도이다.
도 3은 도 2에 있어서의 3-3선을 따른 단면도이다.
도 4는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다.
도 5a는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5b는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5c는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5d는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5e는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 5f는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 6a는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 6b는 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 7은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 8은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다.
도 9a는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9b는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9c는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9d는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9e는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 9f는 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 방법의 일례를 나타내는 도이다.
도 10은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다.
도 11a은 개시된 기술의 다른 실시형태에 관한 교반 용기의 구성의 일례를 나타내는 정면도이다.
도 11b는 도 11a에 있어서의 11B-11B선을 따른 단면도이다.
도 12는 개시된 기술의 실시형태에 관한 집 기구의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
이하, 개시된 기술의 실시형태에 대하여 도면을 참조하면서 설명한다. 또한, 각 도면에 있어서, 실질적으로 동일하거나 또는 등가인 구성 요소 또는 부분에는 동일한 참조 부호를 붙이고 있다.
[제1 실시형태]
도 1은, 개시된 기술의 실시형태에 관한 백 파지용 클립(1)의 구성의 일례를 개략적으로 나타내는 사시도이다. 도 2는, 백 파지용 클립(1)과, 백 파지용 클립(1)에 의하여 파지된 백(2)을 포함하여 구성되는, 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 용기(3)의 구성의 일례를 나타내는 정면도이다. 도 3은, 도 2에 있어서의 3-3선을 따른 단면도이다.
백(2)은, 예를 들면 세포 배양의 용도로 이용할 수 있으며, 각각 가요성 및 가스 투과성을 갖는 제1 필름(F1) 및 제2 필름(F2)을, 히트 시일(열압착) 등의 수법에 의하여 첩합함으로써 구성된다. 또한, 백(2)은, 1매의 필름을 되접어 구성되는 것이어도 되며, 이 경우에 있어서도, 필름의 서로 대향하는 부분을, 각각 제1 필름(F1) 및 제2 필름(F2)이라 한다.
제1 필름(F1) 및 제2 필름(F2)을 구성하는 재료로서, 예를 들면 폴리에틸렌이나 폴리프로필렌 등의 플라스틱을 적합하게 이용할 수 있다. 백(2)은, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)의 사이에 세포를 배지와 함께 수용하기 위한 수용 공간을 형성한다.
백 파지용 클립(1)은, 제1 필름(F1) 측에 배치되는 제1 부분(10A)과, 제2 필름(F2) 측에 배치되는 제2 부분(10B)을 포함하여 구성되어 있고, 제1 부분(10A)과 제2 부분(10B)의 사이에, 백(2)을 끼움으로써 백(2)을 파지한다. 즉, 백 파지용 클립(1)은, 백(2)의 제1 필름(F1) 측 및 제2 필름(F2) 측으로부터 각각 타방 측으로 압압력을 가함으로써 백(2)을 파지한다. 백 파지용 클립(1)은, 백(2)에 대하여 착탈 가능하다.
백 파지용 클립(1)의 제1 부분(10A)은, 제1 필름(F1)에 맞닿는 선상(線狀)의 제1 맞닿음부(11A)와, 제1 필름(F1)의 제1 맞닿음부(11A)가 맞닿는 부분과는 다른 부분에 맞닿는 선상의 제2 맞닿음부(12A)와, 제1 맞닿음부(11A) 및 제2 맞닿음부(12A)를 지지하는 지지 부재를 구성하는 지지판(13A)을 갖는다. 제1 맞닿음부(11A) 및 제2 맞닿음부(12A)는, 지지판(13A)의, 백(2)이 배치되는 측의 면인 파지면(Sa)(도 3 참조)에 장착되어 있다.
마찬가지로, 백 파지용 클립(1)의 제2 부분(10B)은, 제2 필름(F2)에 맞닿는 선상의 제3 맞닿음부(11B)와, 제2 필름(F2)의 제3 맞닿음부(11B)가 맞닿는 부분과는 다른 부분에 맞닿는 제4 맞닿음부(12B)와, 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B)를 지지하는 지지 부재를 구성하는 지지판(13B)을 갖는다. 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B)는, 지지판(13B)의, 백(2)이 배치되는 측의 면인 파지면(Sb)(도 3 참조)에 장착되어 있다.
도 3에 나타내는 바와 같이, 백 파지용 클립(1)이, 백(2)을 파지한 상태에 있어서, 제1 맞닿음부(11A)와 제3 맞닿음부(11B)가 겹치고, 제2 맞닿음부(12A)와 제4 맞닿음부(12B)가 겹친다. 즉, 제1 맞닿음부(11A)와 제3 맞닿음부(11B)의 사이, 및 제2 맞닿음부(12A)와 제4 맞닿음부(12B)의 사이에 백(2)이 끼워진다. 제1 맞닿음부(11A)와 제3 맞닿음부(11B)의 사이에 백(2)이 끼워짐으로써, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)이, 제1 맞닿음부(11A) 및 제3 맞닿음부(11B)의 형상에 따라 부분적(선상)으로 밀착하고, 이로써, 백(2)의 내부에 선상의 격벽이 형성된다. 마찬가지로, 제2 맞닿음부(12A)와 제4 맞닿음부(12B)의 사이에 백(2)이 끼워짐으로써, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)이, 제2 맞닿음부(12A) 및 제4 맞닿음부(12B)의 형상에 따라 부분적(선상)으로 밀착하고, 이로써, 백(2)의 내부에 선상의 격벽이 형성된다. 제1 맞닿음부(11A), 제2 맞닿음부(12A), 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B)를, 각각 고무 등의 탄성체로 구성해도 된다. 이 구성에 의하여, 백 파지용 클립(1)으로 백(2)을 파지한 경우에, 각 맞닿음부가 맞닿는 부위에 있어서, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)의 밀착성을 높일 수 있어, 격벽으로서의 기능이 유효하게 발휘된다.
도 3에 나타내는 바와 같이, 제1 맞닿음부(11A) 및 제2 맞닿음부(12A)는, 각각, 스페이서(14A)를 통하여 지지판(13A)에 장착되고, 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B)는, 각각, 스페이서(14B)를 통하여 지지판(13B)에 장착되어 있다. 스페이서(14A 및 14B)를 마련함으로써, 지지판(13A)과 지지판(13B)의 사이에, 세포를 배지와 함께 수용한 상태의 백(2)을 배치하기에 충분한 스페이스를 확보하는 것이 가능해진다.
지지판(13A) 및 지지판(13B)을 관통하는 복수의 나사(15)에 의하여, 백 파지용 클립(1)의 제1 부분(10A) 및 제2 부분(10B)의 상대 위치가 고정된다. 또, 복수의 나사(15)에 의하여 백(2)의 각 맞닿음부가 맞닿는 부위에 있어서, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)을 부분적(선상)으로 밀착시키는 압압력이 부여된다. 즉, 복수의 나사(15)에 의하여 작용하는 인장 탄성력에 의하여, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)을 부분적(선상)으로 밀착시키는 압압력이 부여된다. 또한, 제1 부분(10A) 및 제2 부분(10B)의 상대 위치의 위치 결정을 행하기 위한 요철 구조가, 지지판(13A) 및 지지판(13B)의, 나사(15)의 근방에 마련되어 있어도 된다.
도 4는, 백 파지용 클립(1)으로 백(2)을 파지함으로써, 백(2)의 내부에 형성되는 격벽(30)의 형태의 일례를 나타내는 정면도이며, 교반 용기(3)의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다. 격벽(30)은, 백 파지용 클립(1)에 의하여 파지된 백(2)의 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)이 밀착하는 부분에 형성된다.
격벽(30)에 의하여, 백(2)의 내부의 수용 공간은, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)으로 분할된다. 백 파지용 클립(1)과 백(2)을 포함하여 구성되는 교반 용기(3)를 이용하여, 배지 내에 세포를 분산시킨 세포 현탁액의 교반을 행하는 경우, 제2 공간(32)은, 제1 공간(31)의 연직 방향 하방 측에 배치된다. 또, 격벽(30)에 의하여, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)을 연통시키는 연통부(33)가 형성된다. 즉, 격벽(30)은, 정면에서 보아 직사각형상인 백(2)의 단부가 되는 변(A1)과, 변(A1)과 대향하는 백(2)의 타방 측의 단부가 되는 변(A2)의 사이에, 변(A1) 및 변(A2)과 교차하는 교차 방향으로 뻗는 부분을 갖고, 연통부(33)가, 격벽(30)의 상기 교차 방향으로 뻗는 부분의 연장선 상에 마련되어 있다. 보다 구체적으로는, 격벽(30)은, 제1 공간(31)의 바닥부에 내리막 방향의 경사를 형성하며, 또한 제1 공간(31)의 경사진 바닥부의 최하 위치에 일단이 접속되어, 제2 공간(32)의 내부로 뻗은 연통부(33)를 형성하고 있다. 제1 공간(31)의 경사진 바닥부의 최하 위치는, 백(2)의 변(A1)과 변(A2)의 사이의 수평 방향 중앙에 배치되고, 따라서, 연통부(33)도, 변(A1)과 변(A2)의 사이의 수평 방향 중앙에 배치되어 있다.
백(2)은, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41) 및 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 구비하고 있다. 백(2)의 외부로부터 통기 포트(41 및 42)를 통하여 백(2)의 내부에 기체를 도입하는 것이 가능하다. 또, 제2 공간(32)의 바닥부에는, 송액 포트(43)가 마련되어 있으며, 송액 포트(43)를 통하여, 백(2)의 내부로부터 세포 현탁액을 배출하거나, 백(2)의 내부에 세포 현탁액을 주입하거나 하는 것이 가능하다. 또한, 백(2)은, 백(2)의 내부로의 세포 현탁액의 주입을 행하기 위한 주입 전용의 송액 포트와, 백(2)의 내부로부터의 세포 현탁액의 배출을 행하기 위한 배출 전용의 송액 포트를 포함하는 복수의 송액 포트를 구비하고 있어도 된다.
이하에, 교반 용기(3)를 이용하여 세포 현탁액을 교반하는, 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법에 대하여, 도 5a~5f를 참조하면서 설명한다. 또한, 도 5a~도 5e에 있어서는, 백 파지용 클립(1)으로 백(2)을 파지함으로써, 백(2)의 내부에 형성되는 격벽(30)이 나타나 있으며, 백 파지용 클립(1)의 도시가 생략되어 있다.
먼저, 세포 현탁액을 수용하고 있지 않은 상태의 백(2)을 준비한다(도 5a). 다음으로, 백 파지용 클립(1)으로 백(2)을 파지한다(도 5b). 즉, 백 파지용 클립(1)의 제1 부분(10A)과 제2 부분(10B)의 사이에 백(2)을 끼우고, 나사(15)를 조인다. 이로써, 백(2)의 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)을 제1 맞닿음부(11A), 제2 맞닿음부(12A), 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B)에 의하여 부분적(선상)으로 밀착시키는 압압력이 부여된다. 백 파지용 클립(1)으로 백(2)을 파지함으로써, 백(2)의 내부에 격벽(30)이 형성되고, 격벽(30)에 의하여, 백(2)의 내부의 수용 공간은, 연통부(33)를 통하여 서로 연통한 제1 공간(31)과 제2 공간(32)으로 분할된다. 백 파지용 클립(1)으로 백(2)을 파지함으로써, 교반 용기(3)가 구성된다.
다음으로, 교반 용기(3)의 제2 공간(32)이, 제1 공간(31)의 연직 방향 하방에 위치하도록 교반 용기(3)의 방향을 고정하고, 송액 포트(43)를 통하여 백(2)의 내부에 세포 현탁액(100)을 주입한다(도 5c). 세포 현탁액(100)은, 교반 용기(3)의 제2 공간(32)에 수용된다. 또한, 제2 공간(32) 모두가 세포 현탁액(100)으로 채워지는 일이 없도록, 백(2)에 주입하는 세포 현탁액(100)의 액량은, 제2 공간(32)의 용량보다 작은 것이 바람직하다.
다음으로, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41)를 개방 상태로 하면서, 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 통하여 제2 공간(32)의 내부에 기체를 도입한다. 이로써, 제2 공간(32)의 내부의 기압이, 제1 공간(31)의 내부의 기압보다 높아진다. 그 결과, 제2 공간(32)에 수용된 세포 현탁액(100)은, 액면이 가압되고, 연통부(33)를 경유하여 제1 공간(31)으로 이송된다. 세포 현탁액(100)을 연통부(33)를 경유하여 제1 공간(31)으로 이송함으로써, 세포 현탁액(100)이 교반된다(도 5d).
또한, 백(2)의 내부에 도입하는 기체는, 세포가 오염되는 일이 없도록 무균 상태인 것이 바람직하다. 백(2)의 내부에 도입하는 기체로서, 산소 또는 공기 등의 세포에 대하여 무해한 기체를 사용하는 것이 바람직하다. 또, 상기의 설명에서는, 세포 현탁액(100)의 제2 공간(32)으로부터 제1 공간(31)으로의 이송을, 제2 공간(32)의 내부를 가압함으로써 행하는 경우를 예시했지만, 이 양태에 한정되지 않는다. 즉, 세포 현탁액(100)의 제2 공간(32)으로부터 제1 공간(31)으로의 이송을, 통기 포트(41)를 통하여 제1 공간(31)의 내부의 기체를 흡인하거나 하여, 제1 공간(31)의 내부를 감압함으로써 행해도 된다.
다음으로, 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 개방 상태로 한다. 이로써, 제1 공간(31)에 수용된 세포 현탁액(100)은, 중력에 의하여 연통부(33)를 경유하여 제2 공간(32)으로 이송된다(도 5e). 격벽(30)에 의하여, 제1 공간(31)의 바닥부에 내리막 방향의 경사를 형성하고, 경사진 바닥부의 최하 위치에 연통부(33)를 형성함으로써, 제1 공간(31)에 수용된 세포 현탁액(100)을, 중력에 의하여 연통부(33)로 유도할 수 있다. 세포 현탁액(100)을 연통부(33)를 경유하여 제2 공간(32)으로 이송함으로써, 세포 현탁액(100)이 교반된다. 또한, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41)를 통하여 제1 공간(31)의 내부에 기체를 도입함으로써, 제1 공간(31)으로부터 제2 공간(32)으로의 세포 현탁액(100)의 이송을 촉진시켜도 된다.
그 후, 필요에 따라, 제2 공간(32)으로부터 제1 공간(31)으로의 세포 현탁액(100)의 이송, 및 제1 공간(31)으로부터 제2 공간(32)으로의 세포 현탁액(100)의 이송을, 복수 회에 걸쳐 반복 실시해도 된다. 세포 현탁액(100)의 이송은, 세포가 배지에 거의 균일하게 분산될 때까지, 반복 실시하는 것이 바람직하다.
다음으로, 백 파지용 클립(1)을 백(2)으로부터 분리한다. 이로써, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)을 가르는 격벽(30)이 제거된다. 그 후, 백(2)의 내부에 수용된 세포 현탁액(100)을, 송액 포트(43)로부터 백(2)의 외부로 배출한다(도 5f). 또한, 백 파지용 클립(1)을 백(2)으로부터 분리한 후, 백(2) 내에서 세포 배양을 행해도 된다.
이상과 같이, 개시된 기술의 실시형태에 관한 백 파지용 클립(1)은, 백(2)을 파지한 경우에, 백(2)의 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)을 부분적(선상)으로 밀착시키는 압압력을 가하고, 백(2)의 수용 공간을, 연통부(33)를 통하여 서로 연통한 제1 공간(31)과 제2 공간(32)으로 분할하는 격벽(30)을 형성한다. 또, 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법은, 백 파지용 클립(1)으로 백(2)을 파지한 후에 백(2) 내에 세포 현탁액을 도입하고, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)과의 압력차 또는 중력을 이용하여, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)의 사이에서 세포 현탁액을 유동시킴으로써, 세포 현탁액의 교반을 행하는 것이다. 이와 같이, 압력차 또는 중력에 의하여 세포 현탁액을 유동시켜 교반을 행하는 방식에 의하면, 교반 날개를 이용하는 방식과 비교하여, 세포로의 대미지를 작게 할 수 있다. 또한, 세포로의 대미지의 부여를 보다 확실히 억제하기 위하여, 액면을 가압하는 압력을, 펌프 등을 이용하여 엄밀하게 제어하는 것이 바람직하다.
또, 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법에 의하면, 교반 날개를 이용하는 방식과 마찬가지로, 세포를 배지 내에 균일하게 분산시킬 수 있다. 또, 교반 처리 후는, 백 파지용 클립(1)을 백(2)으로부터 분리함으로써, 백(2)의 내부의 격벽(30)이 제거되어, 세포 현탁액을 백(2)의 외부로 배출할 때에, 배출의 방해가 되는 구조물이 없어지므로, 백(2)의 내부에 있어서의 세포의 잔류를 억제할 수 있다. 이로써, 세포 회수율의 저하를 억제할 수 있다.
본 실시형태에 관한 교반 방법은, 예를 들면 세포를 배지 내에 부유시킨 상태에서 정치(靜置)하는 정치 배양에 있어서, 배양 기간 중의 소정 타이밍으로 세포와 배지를 혼합할 목적으로 사용하는 것도 가능하다. 이로써, 배지 내에 분산되는 세포의 분산 상태가 개선되어, 영양분 및 기체가 모든 세포에 치우침없이 공급되는 바람직한 배양 환경을 형성할 수 있다.
여기에서, 백 파지용 클립(1)을 백(2)에 장착할 때에, 연통부(33)에 있어서, 세포 현탁액이 유통하는 공간의 형성을 촉진하기 위하여, 이하의 조작을 행해도 된다. 또한, 이하의 설명에 있어서 참조하는 도 6a 및 도 6b는, 교반 용기(3)의 구성의 일례를 나타내는 단면도이며, 도 3에 나타내는 단면에 상당하는 단면이 나타나 있다.
도 6a에 나타내는 바와 같이, 백 파지용 클립(1)의 제1 부분(10A)과 제2 부분(10B)의 사이에 백(2)을 끼운 상태에서, 나사(15)를 임시체결한다. 백(2)은, 제1 맞닿음부(11A)와 제3 맞닿음부(11B)의 사이, 제2 맞닿음부(12A)와 제4 맞닿음부(12B)의 사이에 끼워진다.
다음으로, 제1 맞닿음부(11A)와 제3 맞닿음부(11B)의 사이, 제2 맞닿음부(12A)와 제4 맞닿음부(12B)의 사이에, 백(2)을 끼운 상태에서, 제1 맞닿음부(11A) 및 제2 맞닿음부(12A)를, 이들이 서로 가까워지는 방향으로 슬라이드시킴과 함께, 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B)를, 이들이 서로 가까워지는 방향으로 슬라이드시킨다.
이로써, 도 6B에 나타내는 바와 같이, 백(2)은, 제1 맞닿음부(11A)와 제3 맞닿음부(11B)의 사이에 끼워진 부분과, 제2 맞닿음부(12A)와 제4 맞닿음부(12B)의 사이에 끼워진 부분의 사이의 영역에 있어서, 제1 필름(F1) 및 제2 필름(F2)은, 각각, 백(2)의 외측으로 부풀어 오르도록 변형이 발생한다. 그 결과, 연통부(33)에 있어서 세포 현탁액이 유통하는 공간(B)이 형성된다. 또한, 제1 맞닿음부(11A) 및 제2 맞닿음부(12A) 중 어느 일방을 타방에 가까워지는 방향으로 슬라이드시키고, 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B) 중, 제1 맞닿음부(11A) 및 제2 맞닿음부(12A) 중 슬라이드시킨 쪽에 대향하는 일방을, 타방에 가까워지는 방향으로 슬라이드시켜도 된다.
연통부(33)에 공간(B)을 형성한 후, 제1 맞닿음부(11A) 및 제2 맞닿음부(12A)의 각각의 위치를 나사(16)에 의하여 고정한다. 이로써, 제1 맞닿음부(11A)와 제2 맞닿음부(12A)와의 상대적인 위치가 고정된다. 마찬가지로, 제3 맞닿음부(11B) 및 제4 맞닿음부(12B)의 각각의 위치를 나사(16)에 의하여 고정한다. 이로써, 제3 맞닿음부(11B)와 제4 맞닿음부(12B)와의 상대적인 위치가 고정된다. 그 후, 나사(15)를 본체결한다.
상기의 요령으로 연통부(33)에 공간(B)을 형성하는 경우, 백 파지용 클립(1)은, 제1 맞닿음부(11A)와 제2 맞닿음부(12A)와의 상대적인 위치를 변화시키는 제1 슬라이드 기구와, 제3 맞닿음부(11B)와 제4 맞닿음부(12B)와의 상대적인 위치를 변화시키는 제2 슬라이드 기구와, 제1 맞닿음부(11A)와 제2 맞닿음부(12A)와의 상대적인 위치를 고정하는 제1 고정부와, 제3 맞닿음부(11B)와 제4 맞닿음부(12B)와의 상대적인 위치를 고정하는 제2 고정부를 구비한다. 또한, 상기의 제1 및 제2 슬라이드 기구는, 각각, 각 맞닿음부가 접합된 스페이서(14A, 14B)를, 각 맞닿음부와 일체적으로 슬라이드시키도록 구성되어 있어도 된다. 또, 상기의 제1 및 제2 고정부는, 각 맞닿음부가 접합된 스페이서(14A, 14B)를, 각각 지지판(13A, 13B)에 고정하는 나사(16)를 포함하여 구성되어 있어도 된다.
또, 상기의 요령으로 연통부(33)에 공간(B)을 형성하는 경우, 공간(B)의 용적에 상당하는 양의 기체 또는 액체가, 백(2)의 내부에 미리 확보되어 있거나, 공간(B)의 형성 시에 백(2)의 외부로부터 도입하는 것이 필요하다. 예를 들면, 공간(B)의 형성 시에, 통기 포트(41 및 42) 중 어느 하나를 개방 상태로 해 두고, 개방 상태로 된 통기 포트를 통하여 백(2)의 내부에 외기를 도입해도 된다. 백(2)의 내부에 도입되는 기체는, 오염 방지의 관점에서 무균 상태인 것이 바람직하다. 또, 사전에 백(2)의 세정을 행하는 경우에는, 세정에 이용되는 세정액을, 백(2)의 내부에 남긴 상태로 해도 된다.
[제2 실시형태]
도 7은, 개시된 기술의 제2 실시형태에 관한 백 파지용 클립(1A)과, 백 파지용 클립(1A)에 의하여 파지된 백(2)을 포함하여 구성되는, 교반 용기(3A)의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다. 도 7에는, 도 3에 나타내는 단면에 상당하는 단면이 나타나 있다.
상기한 제1 실시형태에 관한 백 파지용 클립(1)은, 복수의 나사(15)에 의하여 작용하는 인장 탄성력에 의하여, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)을 부분적(선상)으로 밀착시키는 압압력을 부여하는 것이었다. 이에 대하여, 제2 실시형태에 관한 백 파지용 클립(1A)은, 지지판(13A)에 장착된 자석(40A)과, 지지판(13B)에 장착된 자석(40B)에 의하여 작용하는 자력에 의하여, 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)을 부분적(선상)으로 밀착시키는 압압력을 부여한다. 또한 자석(40A 및 40B)은, 영구자석이어도 되고, 전자석이어도 된다.
제2 실시형태에 관한 백 파지용 클립(1A)에 의하면, 제1 실시형태에 관한 백 파지용 클립(1)과 비교하여, 백 파지용 클립(1A)을 백(2)에 장착할 때의 작업 부담이 경감된다. 또, 자석(40A 및 40B)을 전자석으로 구성함으로써, 자력의 발생을 전기적으로 제어하는 것이 가능해진다. 예를 들면, 백 파지용 클립(1A)을 백(2)으로부터 분리할 때에, 자력의 발생을 정지시킴으로써, 백 파지용 클립(1A)의 분리가 용이해진다. 또한, 제1 맞닿음부(11A), 제2 맞닿음부(12A), 제3 맞닿음부(11B), 제4 맞닿음부(12B)를, 자석으로 구성해도 된다. 또, 스페이서(14A 및 14B)의 각각을, 자석으로 구성해도 된다.
[제3 실시형태]
도 8은, 백 파지용 클립(도시하지 않음)으로 백(2)을 파지함으로써, 백(2)의 내부에 형성되는 격벽(30)의 다른 형태를 나타내는 평면도이며, 개시된 기술의 제3 실시형태에 관한 교반 용기(3B)의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다. 도시를 생략한 본 실시형태에 관한 백 파지용 클립은, 도 8에 나타내는 격벽(30)이 형성되는 부분에 있어서 백(2)에 맞닿는 맞닿음부와, 상기 맞닿음부를 지지하는 지지판을 포함한다. 격벽(30)은, 백 파지용 클립에 의하여 파지된 백(2)의 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)이 밀착하는 부분에 형성된다.
격벽(30)에 의하여, 백(2)의 내부의 수용 공간은, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)으로 분할된다. 교반 용기(3B)를 이용하여 세포 현탁액의 교반을 행하는 경우, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)은, 수평 방향으로 나란히 설치된다. 또, 격벽(30)에 의하여, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)을 연통시키는 연통부(33)가 형성된다. 즉, 교반 용기(3B)에 있어서, 격벽(30)은, 정면에서 보아 직사각형상인 백(2)의 단부가 되는 변(A3)과, 변(A3)과 대향하는 백(2)의 타방 측의 단부가 되는 변(A4)의 사이에, 변(A3) 및 변(A4)과 교차하는 교차 방향으로 뻗는 부분을 갖고, 연통부(33)가, 격벽(30)의 상기 교차 방향으로 뻗는 부분의 연장선 상에 마련되어 있다. 보다 구체적으로는, 격벽(30)은, 변(A3)으로부터 변(A4)을 향하여 직선적으로 뻗는 부분과, 변(A4)으로부터 변(A3)을 향하여 직선적으로 뻗는 부분을 갖고, 양 부분의 간극이 연통부(33)를 구성하고 있다.
백(2)은, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41) 및 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 구비하고 있다. 백(2)의 외부로부터 통기 포트(41 및 42)를 통하여 백(2)의 내부에 기체를 도입하는 것이 가능하다. 또, 백(2)의 바닥부에는, 송액 포트(43)가 마련되어 있으며, 송액 포트(43)를 통하여, 백(2)의 내부로부터 세포 현탁액을 배출하거나, 백(2)의 내부에 세포 현탁액을 주입하거나 하는 것이 가능하다.
이하에, 교반 용기(3B)를 이용하여 세포 현탁액을 교반하는, 개시된 기술의 실시형태에 관한 교반 방법에 대하여, 도 9a~9f를 참조하면서 설명한다.
먼저, 세포 현탁액을 수용하고 있지 않은 상태의 백(2)을 준비한다(도 9a). 다음으로, 백 파지용 클립으로 백(2)을 파지한다(도 9b). 이로써, 백(2)의 내부에 격벽(30)이 형성되고, 격벽(30)에 의하여, 백(2)의 내부의 수용 공간은, 연통부(33)를 통하여 서로 연통한 제1 공간(31)과 제2 공간(32)으로 분할된다. 백 파지용 클립으로 백(2)을 파지함으로써, 교반 용기(3B)가 구성된다.
다음으로, 교반 용기(3B)의 제1 공간(31)과 제2 공간(32)이, 수평 방향으로 나란히 설치되도록, 교반 용기(3B)의 방향을 고정하고, 송액 포트(43)를 통하여 교반 용기(3B)의 내부에 세포 현탁액(100)을 주입한다(도 9c). 세포 현탁액(100)은, 제1 공간(31) 및 제2 공간(32)에 균등하게 분배된다.
다음으로, 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 개방 상태로 하면서, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41)를 통하여 제1 공간(31)의 내부에 기체를 도입한다. 이로써, 제1 공간(31)의 내부의 기압이 제2 공간(32)의 내부의 기압보다 높아진다. 그 결과, 제1 공간(31)에 수용된 세포 현탁액(100)은, 액면이 가압되고, 그 일부가 연통부(33)를 경유하여 제2 공간(32)으로 이송된다. 세포 현탁액(100)을 연통부(33)를 경유하여 제2 공간(32)으로 이송함으로써, 세포 현탁액(100)이 교반된다(도 9d).
다음으로, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41)을 개방 상태로 하면서, 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 통하여 제2 공간(32)의 내부에 기체를 도입한다. 이로써, 제2 공간(32)의 내부의 기압이 제1 공간(31)의 내부의 기압보다 높아진다. 그 결과, 제2 공간(32)에 수용된 세포 현탁액(100)은, 액면이 가압되고, 그 일부가 연통부(33)를 경유하여 제1 공간(31)으로 이송된다. 세포 현탁액(100)을 연통부(33)를 경유하여 제1 공간(31)으로 이송함으로써, 세포 현탁액(100)이 교반된다(도 9e).
그 후, 필요에 따라, 제1 공간(31)으로부터 제2 공간(32)으로의 세포 현탁액(100)의 이송, 및 제2 공간(32)으로부터 제1 공간(31)으로의 세포 현탁액(100)의 이송을, 복수 회에 걸쳐 반복 실시해도 된다. 세포 현탁액(100)의 이송은, 세포가 배지에 거의 균일하게 분산될 때까지, 반복 실시하는 것이 바람직하다.
다음으로, 백 파지용 클립을 백(2)으로부터 분리한다. 이로써, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)을 가르는 격벽(30)이 제거된다. 그 후, 백(2)의 내부에 수용된 세포 현탁액(100)을, 송액 포트(43)로부터 백(2)의 외부로 배출한다. 또한, 백 파지용 클립을 백(2)으로부터 분리한 후, 백(2) 내에서 세포 배양을 행해도 된다.
이상과 같이, 도 8에 나타내는 격벽(30)의 형태를 갖는 교반 용기(3B)에 있어서도, 제1 실시형태에 관한 교반 용기(3)를 이용한 교반 방법과 동일한 방법으로 세포 현탁액의 교반을 행하는 것이 가능하다. 따라서, 세포 현탁액의 교반 처리에 있어서, 세포로의 대미지를 작게 할 수 있고, 또한 세포 회수율의 저하를 억제할 수 있다.
[제4 실시형태]
도 10은, 백 파지용 클립(도시하지 않음)으로 백(2)을 파지함으로써, 백(2)의 내부에 형성되는 격벽(30)의 다른 형태를 나타내는 평면도이며, 개시된 기술의 제4 실시형태에 관한 교반 용기(3C)의 내부 구성의 일례를 나타내는 도이다. 도시를 생략한 본 실시형태에 관한 백 파지용 클립은, 도 10에 나타내는 격벽(30)이 형성되는 부분에 있어서 백(2)에 맞닿는 맞닿음부와, 상기 맞닿음부를 지지하는 지지판을 포함한다. 격벽(30)은, 백 파지용 클립(1)에 의하여 파지된 백(2)의 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)이 밀착하는 부분에 형성된다.
격벽(30)에 의하여, 백(2)의 내부의 수용 공간은, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)으로 분할된다. 교반 용기(3C)를 이용하여 세포 현탁액의 교반을 행하는 경우, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)은, 수평 방향으로 나란히 설치된다. 또, 격벽(30)에 의하여, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)을 연통시키는 연통부(33)가 형성된다. 즉, 교반 용기(3C)에 있어서, 격벽(30)은, 정면에서 보아 직사각형상인 백(2)의 단부가 되는 변(A3)과, 변(A3)과 대향하는 백(2)의 타방 측의 단부가 되는 변(A4)의 사이에, 변(A3) 및 변(A4)과 교차하는 교차 방향으로 뻗는 부분을 갖고, 연통부(33)가, 격벽(30)의 상기 교차 방향으로 뻗는 부분의 연장선 상에 마련되어 있다. 보다 구체적으로는, 격벽(30)은, 변(A3)으로부터 변(A4)을 향하여 직선적으로 뻗는 부분을 갖고, 격벽(30)과 변(A4)의 사이에 연통부(33)가 마련되어 있다. 또한, 격벽(30)은, 변(A4)으로부터 변(A3)을 향하여 직선적으로 뻗는 부분을 갖고, 격벽(30)과 변(A3)의 사이에 연통부(33)가 마련되어 있어도 된다.
백(2)은, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41) 및 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 구비하고 있다. 백(2)의 외부로부터 통기 포트(41 및 42)를 통하여 백(2)의 내부에 기체를 도입하는 것이 가능하다. 또, 백(2)의 바닥부에는, 송액 포트(43)가 마련되어 있으며, 송액 포트(43)를 통하여, 백(2)의 내부로부터 세포 현탁액을 배출하거나, 백(2)의 내부에 세포 현탁액을 주입하거나 하는 것이 가능하다.
교반 용기(3C)를 이용하여 세포 현탁액을 교반하는 방법은, 상기한 제3 실시형태에 관한 교반 용기(3B)를 이용하는 경우와 동일하므로, 설명은 생략한다.
[제5 실시형태]
도 11a는, 개시된 기술의 제5 실시형태에 관한 교반 용기(3D)의 구성의 일례를 나타내는 정면도, 도 11b는, 도 11a에 있어서의 11B-11B선을 따른 단면도, 도 12는, 도 11b에 나타내는 파선으로 둘러싼 부분의 확대도이며, 집 기구(50)의 구성의 일례를 나타내는 단면도이다.
도 11a에 나타내는 바와 같이, 교반 용기(3D)는, 제1 실시형태에 관한 교반 용기(3)(도 4 참조)와 동일한 형태의 격벽(30)을, 교반 용기(3D)의 내부에 갖는다. 제1 실시형태에 관한 교반 용기(3)에 있어서는, 격벽(30)은, 백(2)을 백 파지용 클립(1)으로 파지함으로써 형성되는 것이었다. 이에 대하여, 본 실시형태에 관한 교반 용기(3D)는, 서로 대향하는 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)을 선상으로 밀착시키는 개폐 가능한 집 기구(50)를 내부에 갖고, 집 기구(50)를 폐쇄 상태로 함으로써 격벽(30)이 형성된다. 격벽(30)에 의하여, 교반 용기(3D)의 내부의 수용 공간은, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)으로 분할된다. 또, 격벽(30)에 의하여, 제1 공간(31)과 제2 공간(32)을 연통시키는 연통부(33)가 형성된다.
도 12에 나타내는 바와 같이, 집 기구(50)는, 제1 필름(F1)의 내측면에 형성된 볼록부(51)와, 제2 필름(F2)의 내측면에 있어서 볼록부(51)에 대향하여 배치된 오목부(52)를 포함하여 구성되어 있다. 볼록부(51)를 오목부(52)에 감합시킴으로써, 집 기구(50)가 폐쇄 상태가 되고, 집 기구(50)의 형성 부위에 있어서 제1 필름(F1)과 제2 필름(F2)이 밀착하여 교반 용기(3D)의 내부에 격벽(30)이 형성된다. 또, 볼록부(51)와 오목부(52)와의 감합을 해제함으로써, 집 기구(50)가 개방 상태가 되어, 교반 용기(3D)의 내부로부터 격벽(30)이 제거된다.
교반 용기(3D)는, 제1 공간(31)에 접속된 통기 포트(41) 및 제2 공간(32)에 접속된 통기 포트(42)를 구비하고 있다. 교반 용기(3D)의 외부로부터 통기 포트(41 및 42)를 통하여 교반 용기(3D)의 내부에 기체를 도입하는 것이 가능하다. 또, 제2 공간(32)의 바닥부에는, 송액 포트(43)가 마련되어 있으며, 송액 포트(43)를 통하여, 교반 용기(3D)의 내부로부터 세포 현탁액을 배출하거나, 교반 용기(3D)의 내부에 세포 현탁액을 주입하거나 하는 것이 가능하다.
교반 용기(3D)를 이용하여 세포 현탁액을 교반하는 방법은, 상기한 제1 실시형태에 관한 교반 용기(3)를 이용하는 경우와 동일하다. 교반 용기(3D)에 의하면, 교반 처리 후는, 집 기구(50)를 개방 상태로 함으로써, 교반 용기(3D)의 내부의 격벽(30)이 제거되어, 세포 현탁액을 교반 용기(3D)의 외부로 배출할 때에, 배출의 방해가 되는 구조물이 없어지므로, 교반 용기(3D)의 내부에 있어서의 세포의 잔류를 억제할 수 있다. 이로써, 세포 회수율의 저하를 억제할 수 있다.
또한, 교반 용기(3D)에 있어서, 격벽(30)의 형태는, 도 8에 나타내는 교반 용기(3B)의 격벽(30)의 형태와 동일해도 되고, 도 10에 나타내는 교반 용기(3C)의 격벽(30)의 형태와 동일해도 된다.
본 출원은, 2017년 9월 26일 출원한 일본출원인 특원 2017-184952의 우선권을 주장하는 것이며, 이 출원의 모든 내용은 참조에 의하여 본 명세서에 도입된다. 또 본 명세서에 기재된 모든 문헌, 특허출원 및 기술 규격은, 개개의 문헌, 특허출원 및 기술 규격이 참조에 의하여 도입되는 것이 구체적으로 또한 개개로 기록된 경우와 동일한 정도로, 본 명세서 중에 참조에 의하여 도입된다.
Claims (19)
- 제1 필름과 상기 제1 필름과 대향하는 제2 필름의 사이에 수용 공간을 형성하는 백을 파지한 경우에, 상기 제1 필름과 상기 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 압압력을 상기 백에 가하고, 상기 수용 공간을, 연통부를 통하여 서로 연통한 복수의 공간으로 분할하는 격벽을 형성하는 백 파지용 클립.
- 청구항 1에 있어서,
상기 격벽은, 상기 백의 제1 변과, 상기 제1 변과 대향하는 제2 변의 사이에, 상기 제1 변 및 상기 제2 변과 교차하는 교차 방향으로 뻗는 부분을 갖고,
상기 연통부가, 상기 격벽의 상기 교차 방향으로 뻗는 부분의 연장선 상에 마련되어 있는 백 파지용 클립. - 청구항 2에 있어서,
상기 연통부가, 상기 격벽과 상기 제1 변의 사이 또는 상기 격벽과 상기 제2 변의 사이에 마련되어 있는 백 파지용 클립. - 청구항 1에 있어서,
상기 백에 대하여 착탈 가능한 백 파지용 클립. - 청구항 1에 있어서,
상기 격벽은, 상기 수용 공간을, 제1 공간과, 상기 제1 공간의 연직 방향 하측에 배치된 제2 공간으로 분할하는 백 파지용 클립. - 청구항 5에 있어서,
상기 격벽은, 상기 제1 공간의 바닥부에 내리막 방향의 경사를 형성하고, 상기 바닥부의 최하 위치에 일단이 접속되며, 상기 제2 공간의 내부로 뻗는 상기 연통부를 형성하는 백 파지용 클립. - 청구항 1에 있어서,
상기 백에 맞닿는, 탄성체를 포함하는 맞닿음부를 구비하는 백 파지용 클립. - 청구항 7에 있어서,
상기 맞닿음부를 지지하는 지지 부재를 더 구비하는 백 파지용 클립. - 청구항 1에 있어서,
상기 압압력은, 자력에 의하여 부여되는 백 파지용 클립. - 청구항 5에 있어서,
상기 제1 필름에 맞닿는 제1 맞닿음부와,
상기 제1 필름의, 상기 제1 맞닿음부가 맞닿는 부분과는 다른 부분에 맞닿는 제2 맞닿음부와,
상기 제2 필름에 맞닿고, 상기 제1 맞닿음부와의 사이에 상기 백을 끼움으로써, 상기 제1 공간과 상기 제2 공간을 가르는 격벽의 일부 및 상기 연통부를 형성하는 격벽의 일부를 형성하는 제3 맞닿음부와,
상기 제2 필름에 맞닿고, 상기 제2 맞닿음부와의 사이에 상기 백을 끼움으로써, 상기 제1 공간과 상기 제2 공간을 가르는 격벽의 다른 일부 및 상기 연통부를 형성하는 격벽의 다른 일부를 형성하는 제4 맞닿음부를 포함하는 백 파지용 클립. - 청구항 10에 있어서,
상기 제1 맞닿음부와 상기 제2 맞닿음부와의 상대적인 위치를 고정하는 제1 고정부와,
상기 제3 맞닿음부와 상기 제4 맞닿음부와의 상대적인 위치를 고정하는 제2 고정부를 더 포함하는 백 파지용 클립. - 청구항 11에 있어서,
상기 제1 맞닿음부와 상기 제2 맞닿음부 중 적어도 한쪽을 슬라이드시킴으로써 상기 제1 맞닿음부와 상기 제2 맞닿음부와의 상대적인 위치를 변화시키는 제1 슬라이드 기구와,
상기 제3 맞닿음부와 상기 제4 맞닿음부 중 적어도 한쪽을 슬라이드시킴으로써 상기 제3 맞닿음부와 상기 제4 맞닿음부와의 상대적인 위치를 변화시키는 제2 슬라이드 기구를 더 포함하는 백 파지용 클립. - 청구항 1 내지 청구항 12 중 어느 한 항에 기재된 백 파지용 클립과,
상기 백 파지용 클립에 의하여 파지된 백을 포함하는 용기. - 청구항 13에 있어서,
상기 복수의 공간의 각각에 접속된 통기 포트를 더 포함하는 용기. - 제1 필름과 상기 제1 필름과 대향하는 제2 필름의 사이에 수용 공간을 형성하는 백을 파지한 경우에, 상기 제1 필름과 상기 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 압압력을 상기 백에 가하고, 상기 수용 공간을, 연통부를 통하여 서로 연통한 제1 공간과 제2 공간으로 분할하는 격벽을 형성하는 백 파지용 클립과, 상기 백 파지용 클립에 의하여 파지된 백을 포함하는 용기를 이용하여 세포 현탁액을 교반하는 교반 방법으로서,
상기 백 파지용 클립으로 상기 백을 파지하는 제1 단계와,
상기 제1 단계 후에, 상기 제2 공간에 세포 현탁액을 수용하는 제2 단계와,
상기 제1 공간과 상기 제2 공간의 사이에 기압차를 형성하여, 상기 제2 공간에 수용된 세포 현탁액을, 상기 연통부를 경유하여 상기 제1 공간으로 이송하는 제3 단계를 포함하는 교반 방법. - 청구항 15에 있어서,
상기 제3 단계 후에, 상기 제1 공간에 수용된 세포 현탁액을, 상기 연통부를 경유하여 상기 제2 공간으로 이송하는 제4 단계를 더 포함하는 교반 방법. - 청구항 16에 있어서,
상기 제3 단계 및 상기 제4 단계를 교대로 반복하여 실시하는 교반 방법. - 청구항 15 내지 청구항 17 중 어느 한 항에 있어서,
상기 백의 내부에 세포 현탁액을 수용한 상태에서, 상기 백 파지용 클립을 상기 백으로부터 분리하는 제5 단계와,
상기 제5 단계 후에, 상기 백의 내부에 수용된 세포 현탁액을 상기 백의 외부로 배출하는 제6 단계를 더 포함하는 교반 방법. - 서로 대향하는 제1 필름과 제2 필름을 부분적으로 밀착시키는 개폐 가능한 집 기구를 내부에 갖는 용기로서,
상기 집 기구를 폐쇄 상태로 함으로써, 상기 용기의 내부의 수용 공간을, 연통부를 통하여 서로 연통한 복수의 공간으로 분할하는 격벽이 형성되는 용기.
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