KR20200122312A - 플루오라이드 및 트리메틸아민 함량이 낮은 해양 단백질 가수분해물 - Google Patents

플루오라이드 및 트리메틸아민 함량이 낮은 해양 단백질 가수분해물 Download PDF

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카트린 뷔드 엘레갈드
크리스티안 로렌츠 배거
핀 마이렌
에릭 디그맨 위크런드
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에이커 바이오마린 앤탁틱 에이에스
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Abstract

본 발명은 제약, 뉴트라슈티컬, 기능성 식품, 식품, 음료 및 동물 사료에 사용하기 위한 단백질 가수분해물, 뿐만 아니라 해양 단백질 가수분해물을 만드는 방법을 제공한다.

Description

플루오라이드 및 트리메틸아민 함량이 낮은 해양 단백질 가수분해물
발명의 분야
본 발명은 제약, 뉴트라슈티컬(nutraceuticals), 기능성 식품, 식품, 음료 및 동물 사료에 사용하기 위한 단백질 가수 분해물, 뿐만 아니라 해양 가수 분해물을 제조하는 방법을 제공한다.
발명의 배경
해양 이차 산물로부터 유래된 생물활성 펩티드는 이들이 기능성 식품에 혼입될 수 있는 상당한 잠재력 및 의료용 잠재력이 크기 때문에, 이에 대한 관심이 높아지고 있다. 해양 공급원으로부터의 생물활성 펩티드는 특히 항산화, 항고혈압, 항균, 면역조절, 항암 및 유형 2 당뇨병 효과를 포함하는 광범위한 생리학적 기능을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 대부분의 연구는 건강 및 기능성 식품을 상업적으로 사용하기 위한 가수분해물의 준비 및 특성 분석에 중점을 두었다.
해양 사료 및 인간 보충제로 사용하기 위한 크릴(krill) 가수 분해물이 설명되었다. 가령, WO2010030193; WO2013102792; Kolkovski 외, J. World Aqua. Soc., Volume 31, Issue 1 (2000) pp. 81-88 참고. 이들 크릴 가수분해물은 다량의 지질을 함유하는 공급원으로부터 일반적으로 만들어진다.
본 발명의 요약
본 발명은 제약, 뉴트라슈티컬, 기능성 식품, 식품, 음료 및 동물 사료에 사용하기 위한 단백질 가수분해물 뿐만 아니라, 해양 단백질 가수분해물을 만드는 방법을 제공한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 본 발명은 건조 중량 기준으로 85% 이상 함량의 단백질과, 건조 중량 기준으로 5% 미만 함량의 지방을 가지며, 다음 특성 중 하나 이상을 갖는 것을 특징으로 하는 단백질 가수 분해물을 제공한다:
a. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg/가수분해물 kg인 플루오라이드;
b. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TMAO (트리메틸아민 N-옥시드);
c. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TMA (트리메틸아민);
d. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TVN(전체 휘발성 질소);
e. 건조 중량 기준으로 함량이 0.01 내지 4.0g/가수분해물 100g인 나트륨;
f. 건조 중량 기준으로 함량이 100 내지 25,000mg/가수분해물 kg인 칼슘;
g. 함량이 6.30 내지 10.30g 리신/전체 아미노산 100g인 리신;
h. 함량이 3.04 내지 7.04g 트레오닌/전체 아미노산 100g인 트레오닌;
i. 함량이 3.39 내지 7.39g 이소류신/전체 아미노산 100g인 이소류신;
j. 함량이 6.27 내지 10.27g 류신/전체 아미노산 100g인 류신;
k. 함량이 0.94 내지 3.94g 히스티딘/전체 아미노산 100g인 히스티딘;
l. 함량이 2.76 내지 6.76g 페닐알라닌/전체 아미노산 100g인 페닐알라닌;
m. 함량이 2.39 내지 6.39g 티로신/전체 아미노산 100g인 티로신;
n. 함량이 3.69 내지 7.69g 발린/전체 아미노산 100g인 발린;
o. 함량이 3.76 내지 7.76g 알라닌/전체 아미노산 100g인 알라닌;
p. 함량이 3.90 내지 7.90g 아르기닌/전체 아미노산 100g인 아르기닌;
q. 함량이 9.68 내지 13.68g 아스파트르산 및 아스파라긴/전체 아미노산 100g인 아스파트르산/아스파라긴;
r. 함량이 11.54 내지 17.54g 글루타민산 및 글루타민/전체 아미노산 100g인 글루타민산/글루타민;
s. 함량이 2.50 내지 6.50g 글리신/전체 아미노산 100g인 글리신;
t. 함량이 1.84 내지 5.84g 프롤린/전체 아미노산 100g인 프롤린;
u. 함량이 2.35 내지 6.35g 세린/전체 아미노산 100g인 세린;
v. 함량이 1.22 내지 5.22g 메티오닌/전체 아미노산 100g인 메티오닌;
w. 함량이 0.24 내지 1.04g 시스테인 및 시스틴/전체 아미노산 100g인 시스테인 및 시스틴;
x. 함량이 0.76 내지 1.76g 트립토판/전체 아미노산 100g인 트립토판.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg/kg의 플루오라이드를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 10mg N/가수분해물 100g인 TMAO를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg N/가수분해물 100g인 TMA를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 60mg N/가수분해물 100g인 TVN을 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 두 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 세 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 네 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 다섯 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 성질 g, h, i, j, k, l, m, n, o, p, q, r, s, t, u, v, w 및 x의 모든 성질을 더 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물의 필수 아미노산 함량은 39.36 내지 49.36g 필수 아미노산/전체 아미노산 100g이다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물의 분지 쇄 아미노산의 함량은 16.35 내지 22.35g 분지 쇄 아미노산/전체 아미노산 100g이다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물의 황-함유 아미노산의 함량은 2.86 내지 4.86g 황-함유 아미노산/전체 아미노산 100g이다.
일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x중에서 하나 또는 그 이상의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a 및 b, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b 및 c, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d 그리고 성질 i, j 및 n의 성질중 하나 또는 그 이상의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a 및 b, 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b 및 c, 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d 그리고 성질 v 및 w의 성질중 하나 또는 그 이상의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a 및 b, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b 및 c, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94% 또는 95% 이상 함량의 단백질과, 건조 중량 기준으로 2% 미만 함량의 지질을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 3% 미만의 수분 함량을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 비린 생선 맛이 없는(non-fishy taste), 중성적(neutral)인 것으로 추가 특징화된다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 물 또는 기타 수성 매질에 추가될 때, 투명한 용액으로 분산되는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 물 100g 안에 상기 단백질 가수분해물 4.5 g(건조 중량)의 용액 OD590은 0.4 미만이다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 물 100g 안에 건조 중량 기준으로 4.5 g의 단백질 가수분해물을 용해시켜 검정하였을 때, 물에서 80% 이상의 용해성이 있다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 물 100g 안에 건조 중량 기준으로 4.5 g의 단백질 가수분해물을 용해시키고, 5분간 85℃로 가열하여 검정하였을 때, 물에서 60% 이상의 용해성이 있다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 해양 단백질 가수분해물이다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 크릴 단백질 가수분해물이다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물은 50 ppm 미만 함량의 아스타크산틴(astaxanthin)을 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 본 발명은 단백질 가수분해물, 그리고 특별히 바람직한 구체예들에서 상기에서 기술된 단백질 가수분해물을 만들기 위하여 다음을 포함하는 공정을 제공한다: 해양 밀(meal)를 제공하고; 상기 해양 밀(meal)을 제분하고(milling); 이렇게 제분된 밀(meal)을 물 및/또는 수성 시트르산으로 세척하여 세척된 밀(meal)을 제공하고; 세척된 밀(meal)을 프로테아제(protease)로 처리하여 단백질 가수분해물을 제공하고; 그리고 0.1 내지 10 μm의 공극 크기를 갖는 필터로 단백질 가수분해물을 미세여과(microfiltration)하거나 및/또는 1 내지 10 nm의 공극 크기를 갖는 필터로 나노여과(nanofiltration)함으로써 상기 가수분해물을 여과하여 단백질 가수분해물과 투과액(permeate)이 제공된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 밀(meal)는 용매-추출된 밀(meal)이다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 여과 전, 당해 프로테아제를 비활성화시키는 단계를 더 포함한다. 일부 바람직한 구체예들에서 상기 공정은 단백질 가수분해물을 제공하기 위하여 상기 단백질 가수분해물을 건조시키는 단계를 더 포함한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 밀(meal)는 크릴 밀(meal)이다. 상기 크릴 밀(meal)는 바람직하게는 지방이 제거되지 않은(full fat) 크릴 밀(meal) 또는 탈지된(delipidated) 크릴 밀(meal)일 수 있다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 프로테아제는 당해 출발 해양 밀(meal)과 비교하였을 때, 고유한 것이 아니다(non-native) (가령, 상기 프로테아제는 상기 밀(meal)을 만드는데 이용된 해양 유기체에서 자연발생적인 것이 아님).
다른 바람직한 구체예들에서, 본 발명은 건조 중량 기준으로 85% 이상 함량의 단백질, 건조 중량 기준으로 2% 미만 함량의 지방, 그리고 4% 미만의 수분을 갖는 것을 특징으로 하는 크릴 단백질 가수분해물 농축물(concentrate)을 포함하는 조성물을 제공한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 건조 중량 기준으로 89% 이상 함량의 크릴 단백질 가수분해물 단백질, 건조 중량 기준으로 1% 미만의 지방, 그리고 3% 미만의 수분을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 5 내지 7% (AA g/단백질 100g) 함량의 아르기닌을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 8 내지 10% (AA g/단백질 100g) 함량의 류신을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 17 내지 19.5% (AA g/단백질 100g) 함량의 복합된 분지 쇄 아미노산 (가령, 류신, 이소류신 및 발린)을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 2 내지 4% (AA g/단백질 100g) 함량의 복합된 메티오닌과 시스테인을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 w/w 기초로 2개 내지 20개 아미노산의 50% 내지 80% 펩티드 (2-20개 길이의 아미노산의 펩티드/자유 아미노산 펩티드과 폴리펩티드의 전체 분자량)를 포함하는 것으로 추가 특징화된다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 60 ppm 미만의 트리메틸아민 옥시드를 포함하는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 50 ppm 미만의 플루오라이드를 포함하는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 1% 미만의 염을 포함하는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 비린 생선 맛이 없는, 중성적인 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 물 또는 기타 수성 매질에 추가될 때, 투명한 용액으로 분산되는 것으로 추가 특징화된다.
일부 바람직한 구체예들에서, 본 발명은 크릴 단백질 가수분해물 농축물을 생산하는 다음을 포함하는 공정을 제공한다: 용매-추출된 크릴 밀(meal)을 제공하고, 용매 추출된 크릴 밀(meal)을 물 및/또는 시트르산으로 세척하여, 세척된 용매-추출된 크릴 밀(meal)을 제공하고, 세척된 용매 추출된 크릴 밀(meal)을 프로테아제로 처리하여 크릴 단백질 가수분해물을 제공하고, 그리고 미세여과 및/또는 나노여과를 통하여 상기 가수분해물을 여과시킴으로써, w/w 기초로 2 내지 10개 아미노산으로 된 펩티드 (2-10개 아미노산 길이의 펩티드/자유 아미노산 펩티드 및 폴리펩티드의 전체 중량) 50% 내지 80%와 투과액을 포함하는 특징의 크릴 단백질 가수분해물 농축물을 제공한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 세척 전, 상기 용매-추출된 크릴 밀(meal)을 제분하는 단계를 더 포함한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 여과 전, 당해 프로테아제를 비활성화시키는 단계를 더 포함한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 상기 크릴 단백질 가수분해물 농축물을 건조시키는 단계를 더 포함하여 입상의(granular) 크릴 단백질 가수분해물 농축물을 제공한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 85% 이상 함량의 단백질, 건조 중량 기준으로 2% 미만의 지방, 그리고 4% 미만의 수분을 갖는 것을 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 건조 중량 기준으로 89% 이상 함량의 단백질, 건조 중량 기준으로 1% 미만의 지방, 그리고 3% 미만의 수분을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 5 내지 7% (AA g/단백질 100g) 함량의 아르기닌을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 8 내지 10% (AA g/단백질 100g) 함량의 류신을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 17 내지 19.5% (AA g/단백질 100g) 함량의 복합된 분지 쇄 아미노산을 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 2 내지 4% (AA g/단백질 100g) 함량의 복합된 메티오닌과 시스테인을 갖는 것으로 추가 특징화된다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 60 ppm 미만의 트리메틸아민 옥시드를 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 50 ppm 미만의 플루오라이드를 갖는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 1% 미만의 염을 포함하는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 비린 생선 맛이 없는, 중성적인 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 입상의 크릴 단백질 가수분해물 농축물은 물 또는 기타 수성 매질에 추가될 때, 맑은 용액으로 분산되는 것으로 추가 특징화된다.
일부 바람직한 구체예들에서, 본 발명은 상기 기술된 공정에 의해 만들어진 크릴 단백질 가수분해물 농축물을 제공한다.
도면의 설명
도 1은 본 발명에 따른 크릴 단백질 가수분해물의 아미노산 프로파일을 보여주는 막대 그래프다.
도 2는 본 발명에 따른 크릴 단백질 가수분해물의 펩티드 크기 분포를 보여주는 막대 그래프다.
도 3은 본 발명에 따른 공정의 순서도이다.
정의
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "가수분해물(hydrolysate)"이란 외인성 프로테아제 또는 공급원 단백질에 비-고유한 프로테아제와 같은 첨가된 효소에 의해 당해 공급원 단백질의 효소적 가수분해로 인하여 생성된 상이한 사슬 길이의 아미노산 및 펩티드의 혼합물을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "경구 운반 비히클"은 캡슐, 환제, 정제 및 시럽을 포함하지만, 이에 국한되지 않는 약제를 경구로 전달하는 임의의 수단을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "식품 산물(food product)"이란 인간, 비-반추 동물, 또는 반추 동물이 소비하는데 적합한 임의의 식품 또는 사료를 지칭한다. 상기 "식품 산물"은 제조 및 포장된 식품 (가령, 마요네즈, 샐러드 드레싱, 빵, 또는 치즈 식품) 또는 동물 사료 (가령, 압출되고, 펠렛화된 동물 사료 또는 거친 혼합 사료)일 수 있다. "제조된 식품 산물"은 인간 소비용으로 승인된 사전-포장된 임의의 식품을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "식료품(foodstuff)"란 인간 또는 동물 섭취용으로 맞춘 임의의 물질을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "기능성 식품(functional food)"이란 생물학적으로 활성 보충제가 추가된 식품 산물을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "영양 보충제(nutritional supplement)"란 식이요법의 일부분으로 이용되는 규정식(dietary) 또는 영양 보충제로 제형화된 식품 산물을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 w/w (중량/중량)이란 다른 언급이 없는 한, 중량 기초로 조성물 안에 주어진 물질의 양을 지칭하고, 이는 전체 조성물 중량의 백분율로 표시된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "크릴 밀(krill meal)"이란 크릴에서 만들어진 분말을 지칭한다. 크릴 밀(meal)의 예로는 건조된 크릴 밀(meal) (가령, 3 내지 15% 함량의 수분을 갖는 크릴 밀(meal)), 탈지된 크릴 밀(meal) (가령, 용매 추출에 의해 지방이 제거된 크릴 밀(meal)), 지방을 제거하지 않는 크릴 밀(meal) (용매 추출되지 않은 크릴 밀(meal)), 그리고 크릴 밀(meal)의 하위분획(subfractions)이 포함되나, 이에 국한되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이, 가수분해물 또는 조성물의 단백질 함량 관련되어 이용될 경우 용어 "단백질"이란 당해 가수분해물 또는 조성물에서 폴리펩티드, 펩티드 및 아미노산의 함량을 지칭한다. 달리 명시되지 않는 한, 상기 단백질 함량은 예를 들면 가수분해물의 전체 질소 함량을 측정하고, 이에 변환 계수 6.25를 곱하여 측정된다. 전체 질소 함량을 결정하는 임의의 적합한 방법이 이용될 수 있다. 예를 들면, 일부 바람직한 구체예들에서, Kjeldahl 방법이 이용된다. 가수분해물에서 아미노산 함량은 전체 단백질 100g(가령, Kjeldahl 방법에 의해 측정됨) 당 아미노산 그램(가령, 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 측정됨)으로 표시되거나, 또는 전체 아미노산 100g 당 당해 아미노산의 그램(가령, 단백질에서 발견되는 20개의 공통적인 아미노산의 HPLC에 의해 측정됨).
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "필수 아미노산"이란 인간이 합성할 수 없는, 9 가지 아미노산을 지칭하며, 이들은 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 트레오닌, 트립토판, 및 발린이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "분지 쇄(branched chain) 아미노산"이란 류신, 이소류신, 및 발린을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이 용어 "황-함유(sulfur-containing) 아미노산"이란 메티오닌과 시스테인을 지칭하며 (이들은 본원에서 보고된 값의 시스테인 및 시스틴으로 표현될 수 있다).
발명의 상세한 설명
본 발명은 제약, 뉴트라슈티컬, 기능성 식품, 식품, 음료 및 동물 사료에 사용하기 위한 단백질 가수분해물 뿐만 아니라, 단백질 가수분해물을 만드는 방법을 제공한다. 특별히 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 해양 단백질 가수분해물이다. 해양 단백질 가수분해물은 단백질을 포함하는 임의의 적합한 해양 시재료(starting material)로부터 만들어질 수 있다. 일부 바람직한 구체예들에서, 해양 단백질 가수분해물은 온전체 크릴 (가령, 싱싱한 또는 냉동 크릴), 껍질을 벗긴 크릴, 또는 크릴 밀(meal)로부터 만든다. 일부 특별히 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 건조된 크릴 밀(meal), 탈지된 크릴 밀(meal), 지방을 제거하지 않는 크릴 밀(meal) 그리고 크릴 밀(meal)의 분획물을 포함하나, 이에 국한되지 않은 크릴 밀(meal)로부터 만들어진다. 본 발명은 임의의 특정 크릴 종(species)의 사용에 국한되지 않는다. 예를 들면, 상기 크릴 종은 유파우시아 수페르바(Euphausia superba) 또는 유파우시아 파시피카(Euphausia pacifica)일 수 있다. 다른 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 적합한 해양 바이오매스, 이를 테면, 어류 (가령, 청어, 연어, 대구, 야생-포획 어류, 양식 어류), 오징어, 생선알(fish roe), 해조류, 새우, 칼라누스(calanus), 그랩(grab), 랍스터 및 연체 동물, 해양 바이오매스의 가공에 의해 발생된 부산물, 그리고 지방이 제거되지 않은 밀(meal)과 탈지된 밀(meal)을 비롯한 이들 해양 바이오매스로부터 만든 밀(meal), 칼라누스, 오징어, 청어, 청어알, 또는 조류의 용매 추출로 생성된 건조된 및/또는 용매-추출된 또는 탈지된 밀(meal)로부터 만든다.
본 발명의 개발 동안, 이를 테면 낮은 플루오라이드 함량과 독특한 아미노산 프로파일을 갖는, 그리고 수용가능한 맛과 냄새를 가진 가수분해물을 제공하기 위하여, 밀(meal), 이를 테면, 크릴 밀(meal)을 가공하는 것이 어렵다는 것을 알았다. 기존의 크릴 가수분해물은 예를 들면, WO2010/030193에 기술된다. 이 출원은 플루오라이드를 줄이는 방법을 기술하고 있는 한편 생성 산물 (Rimfrost 크릴 분말로 시판됨)은 다량의 지방과 대략적으로 겨우 55-60%의 단백질을 함유한다. 이를 테면 Zhang 외, Fisheries Sci. (2002) 68:672-679 참고자료에서 크릴 가수분해물이 기술되지만, 플루오라이드 또는 TMAO 감축에 대한 증빙은 제공되지 않는다. 상기 가수분해물의 보고된 아미노산 조성물에 의해 증빙되는 것과 같이 Zhang 외.,에 의해 만들어진 단백질의 질은 떨어지는 것으로 또한 보인다.
본 발명은 맛, 냄새 및 플루오라이드 수준과 관련된 문제를 해결하고, 가수분해 전, 밀(meal)의 세척 및/또는 제분, 그리고 나노여과를 비롯한 후속 여과 단계를 포함하는 다단계 공정을 이용함으로써, 탁월한 아미노산 조성을 갖는 산물을 제공한다. 이들 조성물 및 공정은 크릴 밀(meal)로 예시되지만, 다른 밀(meal)에도 동일하게 적용 가능하다. 실시예에서 나타낸 바와 같이, 생성된 가수분해물 산물은 맛 및 냄새 (그리고 연관된 낮은 수준의 TMAO (트리메틸아민 N-옥시드), TMA (트리메틸아민) 그리고 TVN (전체 휘발성 질소)) 및 낮은 수준의 플루오라이드를 가지면서, 한편 독특한 아미노산 프로파일을 갖는 것을 특징으로 한다. 이 아미노산 프로파일에서 본 발명의 단백질 가수분해물은 9 가지 필수 아미노산: 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 트레오닌, 트립토판, 및 발린을 충분한 수준으로 갖는 완벽한 단백질 공급원이다. 비-제한적인 예로써, 본 발명의 크릴 단백질 가수분해물의 아미노산 점수(score)는 난(egg) 단백질의 점수 121과 유장 가수분해물의 점수 115과 비교하여, 129-159 범위로 산출되었다. 완전 단백질은 이 등급에서 100 또는 그 이상의 점수를 갖는다. 상기 아미노산 점수는 WHO (2007): Protein and amino acid requirements in human nutrition(이의 전문이 본원의 참고자료에 편입됨)에 상술되어 있다. 따라서, 본 발명의 단백질 가수분해물은 우수한 필수 아미노산 공급원이며, 필수 아미노산의 완벽한 공급원으로 단독으로 이용될 수 있거나, 또는 필수 아미노산의 수준이 더 낮은 기타 단백질 공급원의 보충제로 이용될 수 있다.
1. 시재료들
상기에서 논의된 바와 같이, 본 발명은 임의의 특정 생물학적 시재료(starting material)의 사용에 국한되지 않는다. 특별히 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 크릴 밀(meal), 이를 테면, 지방을 제거하지 않는 크릴 밀(meal) 또는 출발 밀(meal), 예를 들면, 유파우시아 수페르바(Euphausia superba) 또는 유파우시아 파시픽(Euphausia pacific) 크릴 밀(meal)로부터 오일을 추출된 용매-추출된 밀(meal) (탈지된 크릴 밀(meal))에서 만들어진다. 크릴 밀(meal)은 바람직하게는 어선에서 신선한, 가장 바람직하게는 살아있는 크릴을 조리 및 건조하여, 크릴 밀(meal)로 제공된다. 이 공정에서 얻어진 예시적인 크릴 밀(meal)은 대략 70% 함량의 단백질, 대략 20% 함량의 지방과 대략 8% 미만 함량의 수분을 가질 수 있다. 다른 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 적합한 해양 바이오매스 (가령, 생선 (가령, 청어, 연어, 대구, 야생-포획 어류, 양식 어류), 오징어, 생선알, 조류, 새우, 칼라누스, 크랩, 랍스터, 또는 연체동물 바이오매스), 이들 바이오매스의 해양 부-산물로부터 만들거나, 또는 이들 바이오매스에서 만들어진 밀(meals)이다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 생물학적 시재료는 크릴 밀(meal)이다. 크릴 밀(meal)은 바람직하게는 임의의 표준 해양 밀(meal) 공정에 의해 만들어질 수 있다. 일반적으로, 상기 크릴 밀(meal)은 갓 잡은 크릴을 저온 (대략적으로 80-85℃)에서 조리하고, 수분 함량을 대략적으로 5 내지 8%로 감소시키기 위하여 건조시키고, 그 다음 제분해서(grinding) 만들어진다. 당해 산물이 인간의 소비를 목적으로 하는 구체들예에서, 항산화제를 첨가하지 않고, 질소 하에서 밀(meal)을 포장하고 저장하는 것이 바람직하다. 일부 특별히 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 밀(meal)은 용매-추출된 또는 탈지된 크릴 밀(meal)이다. 상기 용매-추출된 크릴 밀(meal)은 임의의 오일 추출 과정으로부터 유래된 잔류 밀(meal), 예를 들면, 에탄올, 메탄올, 헵탄 또는 초임계(supercritical) 용매, 이를 테면 분리용매제(entrainer)와 함께, 또는 분리용매제 없는 이산화탄소를 이용한 추출 잔류 밀(meal)일 수 있다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 용매 추출된 크릴 밀(meal)은 PCT/GB2008/001080 또는 PCT/IB2016/000208(이 둘은 모두 전문이 본원의 참고자료에 편입됨)에서 기술된 추출 공정으로부터 생성된 잔류, 탈지된 크릴 밀(meal)이다.
일부 바람직한 구체예들에서, 크릴 밀(meal)은 당해 밀(meal)로부터 지질을 추출하기 위하여 적합한 용매와 혼합된다. 종래 기술의 방법과 달리, 본 발명은 바람직하게는 초기 용매 추출물에서 증가 된 양의 오염 물질을 없앰으로써 크릴 밀(meal)로부터 최대량의 지질을 추출하는 조건을 이용한다. 바람직한 구체예들에서, 상기 용매는 유기 프로톤(protic) 용매이지만, 식용 등급 지질의 추출용 공지진 다른 용매, 예컨대 아세톤, 헥산 등이 사용될 수도 있다. 적합한 유기 프로톤 용매에는 n-부탄올, n-프로판올, 이소프로판올, 니트로메탄, 에탄올 및 메탄올이 포함 되나, 이에 제한되지는 않는다. 특별히 바람직한 구체예들에서, 상기 프로톤 용매는 에탄올이다.
바람직한 구체예들에서, 초기 용매 추출 단계에 이용되는 프로톤 용매의 농도는 최소한 90%, 또는 바람직하게는 약 94% 내지 98%, 더욱 바람직하게는 약 95% 내지 97%, 그리고 가장 바람직하게는 약 96% (가령, 96% 에탄올 또는 메탄올)이다.
일부 구체예들에서, 상기 프로톤 용매는 프로톤 용매: 생물학적 시재료의 비율이 약 1:1 내지 10:1, 바람직하게는 약 3:1 내지 6:1, 더욱 바람직하게는 약 4:1 내지 5:1, 그리고 가장 바람직하게는 약 4.4:1의 비율에서 당해 생물학적 시재료와 혼합된다.
바람직한 구체예들에서, 약 5℃ 내지 65℃, 약 20℃ 내지 약 60℃, 바람직하게는 약 30℃ 내지 50℃, 더욱 바람직하게는 약 30℃ 내지 50℃, 그리고 가장 바람직하게는 약 40℃의 온도에서 상기 생물학적 시재료는 프로톤 용매로 추출된다. 일부 구체예들에서, 추출 시간 (가령, 생물학적 시재료와 용매가 접촉하는 시간의 양)은 약 10 분 내지 약 2 시간, 바람직하게는 약 15 분 내지 60 분, 더욱 바람직하게는 약 20 분 내지 약 45 분, 그리고 가장 바람직하게는 약 30 분이다.
추출 단계 후, 상기 크릴 밀(meal)의 가용성 지질을 함유하는 미정제(crude) 크릴 지질 용액은 예를 들면, 기울여 따르기(decantation) 및 또는 여과에 의해 용매/크릴 밀(meal) 혼합물로부터 분리될 수 있다. 이어서 단백질 및 다른 유용한 물질을 포함하는 불용성 물질을 건조시켜, 에탄올을 회수한다. 그 다음, 남아있는 탈지된 크릴 밀(meal)은 본 발명에 따른 가수분해물을 만드는데 이용될 수 있다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 탈지된 크릴 밀(meal)은 15% 또는 12% wt/wt 미만의 지방, 65% 또는 70% wt/wt 이상의 미정제 단백질 및/또는 5% 또는 3% w/w 미만의 수분을 함유한다.
따라서, 본 발명의 공정은 다양한 광역의 시재료를 이용할 수 있다. 상기 공정에 대한 나머지 논의는 해양 밀(meal)의 용도, 이를 테면 용매 추출된 크릴 밀(meal)을 시재료로 사용하는 것에 일반적으로 관계한다. 그러나, 본원에 고려된 임의의 시물질은 기재된 공정에서 크릴 밀(meal)을 대체하여 사용될 수 있음을 이해할 것이다.
2. 가수분해물 공정 및 조성물
일부 바람직한 구체예들에서, 본 발명은 단백질 가수분해물를 만들기 위하여 다음을 포함하는 공정을 제공한다: 밀(meal)을 제공하고, 상기 밀(meal)을 물 및/또는 시트르산으로 세척하여 세척된 밀(meal)을 제공하고, 그리고 상기 밀(meal)을 프로테아제로 처리하여 가수분해물을 제공하고, 그리고 상기 가수분해물은 미세여과 및/또는 한외여과 및/또는 나노여과 또는 정용여과(diafiltration)에 의해 여과된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 밀(meal)은 크릴 밀(meal)이다. 일부 특별히 바람직한 구체예들에서, 상기 크릴 밀(meal)은 탈지된 크릴 밀(meal) 또는 지방이 제거되지 않은 크릴 밀(meal)이다. 다른 바람직한 구체예들에서, 상기 밀(meal)은 지방이 제거되지 않은 또는 탈지된 생선 (가령, 청어 또는 연어), 생선알 (가령, 청어알), 오징어, 칼라누스 또는 조류 밀(meal)이다. 상기 밀(meal)이 용매-추출된 크릴 밀(meal)인 일부 바람직한 구체예들에서 여과 후 획득된 가수분해물은 w/w 기초로 2개 내지 10개 아미노산의 펩티드 50% 내지 80% (2-10개 아미노산 길이/자유 아미노산 펩티드와 폴리펩티드의 전체 중량의 펩티드)와 투과액을 포함하는 것을 특징으로 한다. 본 방법에 의해 생성 된 바람직한 크릴 단백질 가수 분해물의 추가 특성은하기에 상세히 기술되어 있다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 하나 또는 그 이상의 추가 단계, 이를 테면, 도 3에 도시된 단계를 포함한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 밀(meal)은 입자 크기를 감축시키기 위하여 세척 단계 전, 제분되고, 바람직하게는 습식-제분된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 제분(milling) 단계로 당해 밀(meal)의 입자 크기는 100 μm 미만, 바람직하게는 약 50 μm로 감소된다. 그 다음 상기 밀(meal)은 물 또는 또다른 적합한 수성 매질 (가령, 산성 용액 이를 테면 시트르산 용액, 염 용액, 또는 염기성 용액)으로 세척된다. 일부 구체예들에서, 상기 세척 단계는 물 세척 단계와 산성 세척 단계의 조합을 포함한다. 예를 들면, 일부 구체예들에서, 상기 용매-추출된 밀(meal)은 몇배 용적의 물로 우선 세척되고, 이어서 시트르산 세척하고, 그 다음 하나 또는 그 이상으로 물로 헹군다.
본 발명은 임의의 특정 프로테아제 또는 펩티다제의 사용에 국한되지 않는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 프로테아제는 세린 프로테아제이다. 적합한 세린 프로테아제는 예를 들면, 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로부터 획득되는 서브틸리신A 및 다른 서브틸리신S를 포함한다. 적합한 시판되는 프로테아제는 Novozymes에서 판매되며, ALCALASETM 2.4 L FG, ALCALASETM 2.5 L, SAVINASETM 12 T, SAVINASETM 16 L, 및 ESPERASETM 8.0 L을 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 세척된 및/또는 제분된 용매-추출된 크릴 밀(meal)을 ALCALASETM으로 5 내지 9, 바람직하게는 7 내지 8, 그리고 가장 바람직하게는 7.5의 pH와 30 내지 70℃, 더욱 바람직하게는 50 내지 60℃, 그리고 가장 바람직하게는 약 60℃에서, 최대 24 시간 (가령, 30 분 내지 24 시간), 예를 들면 1-3 시간, 약 2 시간, 또는 약 1 시간 동안 처리하는 것을 포함한다. 다른 적합한 프로테아제에는 당분야에 공지된 바의 시스테인 프로테아제, 트레오닌 프로테아제, 아스파르트 프로테아제, 글루타민 프로테아제, 메탈로프로테아제 그리고 아스파라긴 펩티드 용해제(lysases)가 포함되나, 이에 국한되지 않는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 여과 전, 상기 프로테아제를 비활성화시키는 단계를 포함한다. 추가 바람직한 구체예들에서, 상기 공정은 상기 단백질 가수분해물을 건조시키는 단계를 포함하여 입상의 단백질 가수분해물이 제공된다. 상기 건조 단계는 분무 건조를 비롯한 당분야에 공지된 방법들에 의해 수행될 수 있다. 도 3에 나타낸 바와 같이, 이 공정은 바람직하게는 진공 농축, 저온살균(pasteurization) 및 여과의 추가 단계를 또한 포함할 수 있다. 본 발명은 임의의 특정 여과 단계의 사용에 국한되지 않는다. 바람직한 구체예들에서, 한외여과와 나노여과를 복합 이용한다. 한외여과는 일반적으로 필터, 이를 테면 대략적으로 100 kDa의 분자량 컷오프를 갖는 막 필터를 이용한다. 나노여과는 일반적으로 필터, 이를 테면 약 1 내지 10 나노미터의 공극 크기, 예를 들면, 대략적으로 300 Da의 분자량 컷 오프를 갖는 막 필터를 이용한다. 일부 구체예들에서, 정용여과 단계는 나노여과 단계에 추가로, 또는 대체로 이용될 수 있다.
본 발명의 공정으로 가공되지 않은(raw) 시물질과 비교하였을 때, 개선된 맛과 냄새 (TMA, TMAO 및 TVN 수준의 저하로 입증됨) 뿐만 아니라 낮은 플루오라오이드 수준을 포함하는 개선된 관능(organoleptic) 성질을 갖는 해양 단백질 가수분해물이 만들어진다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 85% 이상 함량의 단백질, 건조 중량 기준으로 2% 미만의 지방, 그리고 4% 미만의 수분을 갖는 것을 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 89% 이상 함량의 단백질, 건조 중량 기준으로 1% 미만의 지방, 그리고 3% 미만의 수분을 갖는 것을 추가 특징으로 한다.
일부 특별히 바람직한 구체예들에서, 크릴 가수분해물은 건조 중량 기준으로 85% 이상 함량의 단백질과, 건조 중량 기준으로 5% 미만의 지방을 가지며, 다음 특성 중 하나 이상을 갖는 것을 특징으로 한다:
a. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg/kg, 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg/kg; 더욱 바람직하게는 함량이 0.1 내지 10mg/kg; 더더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 5mg/kg; 그리고 가장 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 3mg/kg인 플루오라이드; 또는 대안으로, 건조 중량 기준으로 함량이 200, 30, 10, 3 또는 1mg/kg 미만의 F;
b. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g, 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 100mg N/가수분해물 100g; 더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg N/가수분해물 100g; 더더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 25mg N/가수분해물 100g; 그리고 가장 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 10mg N/가수분해물 100g인 TMAO;
c. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g, 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 100mg N/가수분해물 100g; 더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 50mg N/가수분해물 100g; 더더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg N/가수분해물 100g; 그리고 가장 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 10mg N/가수분해물 100g인 TMA;
d. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g, 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 100mg N/가수분해물 100g; 더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 60mg N/가수분해물 100g; 그리고 가장 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 20mg N/가수분해물 100g인 TVN;
e. 건조 중량 기준으로 함량이 0.01 내지 4.0 g/가수분해물 100g, 더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 1.0 g/가수분해물 100g; 그리고 가장 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 0.01 내지 0.2 g/가수분해물 100g인 나트륨;
f. 건조 중량 기준으로 함량이 100 내지 25,000mg/가수분해물 kg, 더욱 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 10,000 내지 25,000mg/가수분해물 kg; 그리고 가장 바람직하게는 건조 중량 기준으로 함량이 12,000 내지 16,000mg/가수분해물 kg인 칼슘;
g. 함량이 6.30 내지 10.30g 리신/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 7.30 내지 9.30g 리신/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 7.80 내지 8.80g 리신/전체 아미노산 100g 함량, 또는 대안으로 6.29 내지 10.29g 리신/단백질 100g, 바람직하게는 7.29 내지 9.29g 리신/단백질 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 7.79 내지 8.79g 리신/단백질 100g인 리신;
h. 함량이 3.04 내지 7.04 그램 트레오닌/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 4.04 내지 6.04g 트레오닌/전체 아미노산 100g 또는 더욱 바람직하게는 4.54 내지 5.54g 트레오닌/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 3.36 내지 7.36g 트레오닌/단백질 100g, 바람직하게는 4.36 내지 6.36g 트레오닌/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 4.86 내지 5.86g 트레오닌/단백질 100g인 트레오닌;
i. 함량이 3.39 내지 7.39g 이소류신/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 4.39 내지 6.39g 이소류신/전체 아미노산 100g 그리고 더욱 바람직하게는 4.89 내지 5.89g 이소류신/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 3.38 내지 7.38g 이소류신/단백질 100g, 바람직하게는 4.38 내지 6.38g 이소류신/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 4.88 내지 5.88g 이소류신/단백질 100g인 이소류신;
j. 함량이 6.27 내지 10.27g 류신/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 7.27 내지 9.27g 류신/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 7.77 내지 8.77g 류신/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 6.37 내지 10.37g 류신/단백질 100g, 바람직하게는 7.37 내지 9.37g 류신/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 7.87 내지 8.87g 류신/단백질 100g인 류신;
k. 함량이 0.94 내지 3.94g 히스티딘/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 1.44 내지 3.44g 히스티딘/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 1.94 내지 2.94g 히스티딘/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 1.09 내지 4.09g 히스티딘/단백질 100g, 바람직하게는 1.59 내지 3.69g 히스티딘/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 2.09 내지 3.09g 히스티딘/단백질 100g인 히스티딘;
l. 함량이 2.76 내지 6.76g 페닐알라닌/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 3.76 내지 5.76g 페닐알라닌/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 4.26 내지 5.26g 페닐알라닌/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 3.05 내지 7.05g 페닐알라닌/단백질 100g, 바람직하게는 4.05 내지 6.05g 페닐알라닌/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 4.55 내지 5.55g 페닐알라닌/단백질 100g인 페닐알라닌;
m. 함량이 2.39 내지 6.39g 티로신/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 3.39 내지 5.39g 티로신/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 3.89 내지 4.89g 티로신/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 2.46 내지 6.46g 티로신/단백질 100g, 바람직하게는 3.46 내지 5.46g 티로신/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 3.96 내지 4.96g 티로신/단백질 100g인 티로신;
n. 함량이 3.69 내지 7.69g 발린/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 4.69 내지 6.69g 발린/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 5.19 내지 6.19g 발린/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 3.88 내지 7.88g 발린/단백질 100g, 바람직하게는 4.88 내지 6.88g 발린/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 5.38 내지 6.38g 발린/단백질 100g인 발린;
o. 함량이 3.76 내지 7.76g 알라닌/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 4.76 내지 6.76g 알라닌/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 5.26 내지 6.26g 알라닌/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 3.80 내지 7.80g 알라닌/단백질 100g, 바람직하게는 4.80 내지 6.80g 알라닌/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 5.30 내지 6.30g 알라닌/단백질 100g인 알라닌;
p. 함량이 3.90 내지 7.90g 아르기닌/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 4.90 내지 6.90g 아르기닌/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 5.40 내지 6.40g 아르기닌/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 3.98 내지 7.98g 아르기닌/단백질 100g, 바람직하게는 4.98 내지 6.98g 아르기닌/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 5.48 내지 6.48g 아르기닌/단백질 100g인 아르기닌;
q. 함량이 9.68 내지 13.68g 아스파트르산 및 아스파라긴/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 10.68 내지 12.68g 아스파트르산 및 아스파라긴/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 11.18 내지 12.18g 아스파트르산 및 아스파라긴/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 10.37 내지 14.37g 아스파트르산 및 아스파라긴/단백질 100g, 바람직하게는 11.37 내지 13.37g 아스파트르산 및 아스파라긴/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 11.87 내지 12.87g 아스파트르산 및 아스파라긴/단백질 100g인 아스파트르산/아스파라긴;
r. 함량이 11.54 내지 17.54g 글루타민산 및 글루타민/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 12.54 내지 16.54g 글루타민산 및 글루타민/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 13.54 내지 15.54g 글루타민산 및 글루타민/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 11.66 내지 17.66g 글루타민산 및 글루타민/단백질 100g, 바람직하게는 12.66 내지 16.66g 글루타민산 및 글루타민/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 13.66 내지 15.66g 글루타민산 및 글루타민/단백질 100g인 글루타민산/글루타민;
s. 함량이 2.50 내지 6.50 글리신/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 3.50 내지 5.50g 글리신/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 4.00 내지 5.00g 글리신/전체 아미노산 100g 또는 대안으로 2.70 내지 6.70g 글리신/단백질 100g, 바람직하게는 3.70 내지 5.70g 글리신/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 4.20 내지 5.20g 글리신/단백질 100g인 글리신;
t. 함량이 1.84 내지 5.84g 프롤린/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 2.84 내지 4.84g 프롤린/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 3.34 내지 4.34g 프롤린/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 2.27 내지 6.27g 프롤린/단백질 100g, 바람직하게는 3.27 내지 5.27g 프롤린/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 3.77 내지 4.77g 프롤린/단백질 100g인 프롤린;
u. 함량이 2.35 내지 6.35g 세린/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 3.35 내지 5.35g 세린/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 3.85 내지 4.85g 세린/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 2.64 내지 6.64g 세린/단백질 100g, 바람직하게는 3.64 내지 5.64g 세린/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 4.14 내지 5.14g 세린/단백질 100g인 세린;
v. 함량이 1.22 내지 5.22g 메티오닌/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 2.22 내지 4.22g 메티오닌/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 2.72 내지 3.72g 메티오닌/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 1.69 내지 5.69g 메티오닌/단백질 100g, 바람직하게는 2.69 내지 4.69g 메티오닌/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 3.19 내지 4.19g 메티오닌/단백질 100g인 메티오닌;
w. 함량이 0.24 내지 1.04g 시스테인 및 시스틴/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 0.44 내지 0.84g 시스테인 및 시스틴/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 0.54 내지 0.74 시스테인 및 시스틴/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 0.249 내지 1.049g 시스테인 및 시스틴/단백질 100g, 바람직하게는 0.449 내지 0.849g 시스테인 및 시스틴/단백질 100g, 더욱 바람직하게는 0.549 내지 0.749g 시스테인 및 시스틴/단백질 100g인 시스테인/시스틴;
x. 함량이 0.76 내지 1.76g 트립토판/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 0.96 내지 1.56g 트립토판/전체 아미노산 100g, 또는 더욱 바람직하게는 1.06 내지 1.46g 트립토판/전체 아미노산 100g, 또는 대안으로 0.8 내지 1.8g 트립토판/단백질 100g, 바람직하게는 1.0 내지 1.6g 트립토판/단백질 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 1.1 내지 1.5g 트립토판/단백질 100g인 트립토판.
확인할 수 있는 바와 같이, 전체 아미노산 함량의 범위는 HPLC에 의해 측정될 때, 전체 아미노산(단백질에서 발견되는 20개 아미노산) 100 그램당 명시된 아미노산의 그램으로 제공되거나, 또는 대안으로 전체 단백질 100 그램 당 (가령, Kjeldahl 방법에 의해 측정될 때) 아미노산의 그램(HPLC에 의해 측정됨)으로 제공된다.
일부 더더욱 바람직한 구체예들에서, 상기 기술된 가수분해물은 건조 중량 기준으로 90%, 91%, 92%, 93%, 94% 또는 95% 이상 함량의 단백질 및/또는 건조 중량 기준으로 3%, 2% 또는 1% 미만 함량의 지방을 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 플루오라이드 0.1 내지 30 ppm, 및/또는 TMAO 0.1 내지 10 ppm; 및/또는 TMA 0.1 내지 30 ppm; 및/또는 TVN 0.1 내지 60 ppm을 더 갖는다.
상기에서 기술된 가수분해물은 기술된 성질중 하나 또는 그 이상의 성질을 가질 수 있고, 임의의 성질을 복합하여 청구된 조성물을 식별해낼 수 있음을 즉시 인지할 수 있을 것이다. 예를 들면, 일부 바람직한 구체예들에서 상기 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 두 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 세 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 네 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 다섯 가지 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a 및 b를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중 하나 또는 그 이상(가령 모두)에 추가하여, 성질 g, h, i, j, k, l, m, n, o, p, q, r, s, t, u, v, w, 및 x 모두를 더 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, 그리고 성질 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 b, 그리고 성질 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 c, 그리고 성질 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 d, 그리고 성질 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, 그리고 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, c, 그리고 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, d, 그리고 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, c, 그리고 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 a, b, d, 그리고 g-x를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 성질 b, c, d, 그리고 g-x를 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x중에서 하나 또는 그 이상의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a 및 b, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b 및 c, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 g, h, i, j, k, l, n, v 및 x의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 i, j 및 n의 성질중 하나 또는 그 이상의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a 및 b, 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b 및 c, 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d 그리고 성질 i, j 및 n을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 v 및 w의 성질중 하나 또는 그 이상의 성질을 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a 및 b, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b 및 c, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다. 일부 바람직한 구체예들에서, 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c 및 d, 그리고 성질 v 및 w를 갖는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 39.36 내지 49.36 g의 필수 아미노산/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 41.36 내지 47.36 g의 필수 아미노산/전체 아미노산 100g, 더욱 바람직하게는 42.36 내지 46.36 g의 필수 아미노산/전체 아미노산 100g, 그리고 가장 바람직하게는 43.36 내지 45.36 g의 필수 아미노산/전체 아미노산 100g인 필수 아미노산을 갖는 것을 추가 특징으로 한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 함량이 16.35 내지 22.35 g의 분지 쇄 아미노산/전체 아미노산 100g, 17.35 내지 21.35 g의 분지 쇄 아미노산/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 함량이 18.35 내지 20.35 g의 분지 쇄 아미노산/전체 아미노산 100g인 분지 쇄 아미노산을 갖는 것을 추가 특징으로 한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 함량이 2.86 내지 4.86 g의 황-함유 아미노산/전체 아미노산 100g, 바람직하게는 3.16 내지 4.56 g의 황-함유 아미노산/전체 아미노산 100g, 그리고 더욱 바람직하게는 3.46 내지 4.26 g의 황-함유 아미노산/전체 아미노산 100g인 황-함유 아미노산을 갖는 것을 추가 특징으로 한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 5 내지 7% (아미노산 ("AA") g/단백질 100g) 함량의 아르기닌을 갖는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 7 내지 10% (AA g/단백질 100g) 함량의 류신을 갖는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 17 내지 19.5% (AA g/단백질 100g) 함량의 복합된 분지 쇄 아미노산을 갖는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 2 내지 4% (AA g/단백질 100g) 함량의 복합된 메티오닌과 시스테인을 갖는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 0.1% 내지 3% (AA g/단백질 100g), 더욱 바람직하게는 0.2% 내지 2% (AA g/단백질 100g) 함량의 트립토판을 갖는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 w/w 기초로 2개 내지 10개 아미노산의 펩티드 50% 내지 80% (2-10개 길이의 아미노산의 펩티드/자유 아미노산 펩티드과 폴리펩티드의 전체 분자량)를 포함하는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 w/w 기초로 2개 내지 20개 아미노산의 펩티드 50% 내지 80% (2-20개 길이의 아미노산의 펩티드/자유 아미노산 펩티드과 폴리펩티드의 전체 분자량)를 포함하는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 w/w 기초로 2개 내지 15개 아미노산의 펩티드 50% 내지 80% (2-15개 길이의 아미노산의 펩티드/자유 아미노산 펩티드과 폴리펩티드의 전체 분자량)를 포함하는 것을 추가 특징으로 한다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 단백질 가수분해물은 w/w 기초로 2개 내지 20개 아미노산의 펩티드 50% 내지 80% (2-10개 길이의 아미노산의 펩티드/자유 아미노산 펩티드과 폴리펩티드의 전체 분자량)를 포함하는 것을 추가 특징으로 한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 60 ppm 미만의 트리메틸아민 옥시드를 포함하는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 50 ppm 미만의 플루오라이드를 포함하는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 4% 미만의 그리고 가장 바람직하게는 1% 미만의 나트륨을 포함하는 것으로 추가 특징화된다. 일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 비린 생선 맛이 없는, 중성적인 것으로 추가 특징화된다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물은 물 또는 기타 수성 매질에 추가될 때, 맑은 용액으로 분산되는 것으로 추가 특징화된다. 예를 들면, 일부 구체예들에서, 건조 중량 기준으로 4.5 그램의 본 발명의 가수분해물을 pH 3-9 (가령, pH 6)에서 물 100g에 용해시킬 때, 590 nm (OD 590)에서 광학 밀도는 0.4 미만, 바람직하게는 0.3 미만이다. 일부 구체예들에서, 상기 가수분해물은 바람직하게는 0.1 내지 50 ppm, 0.1 내지 10 ppm 또는 0.1 내지 5 ppm의 아스타크산틴 그리고 더욱 바람직하게는 50 ppm 미만의, 10 ppm 또는 5ppm의 아스타크산틴을 갖는다.
일부 구체예들에서, 상기 해양 단백질 가수분해물의 용해도는 건조 중량 기준으로 4.5 그램의 가수분해물을 20 - 25℃(가령, 23℃)에서 100 그램의 물에 교반하면서 용해시키고, 이 용액을 1500 g에서 5 분 동안 원심분리하고, 그리고 원심분리 후, 용액내 물질의 건조 중량을 측정함으로써, 검정될 수 있다. 일부 바람직한 구체예들에서, 이 검정에 의해 측정된 가수분해물의 용해도는 pH 3-7 (가령, pH 3.5)에서 80%, 90%, 91%, 92%, 92%, 94% 이상, 그리고 pH 9에서 75%, 80% 또는 90% 이상이다. 일부 구체예들에서, 85℃에서 5 분 동안 열처리 후 용해도는 pH 3-9 (가령, pH 6)에서 검정으로 측정하였을 때, 60% 이상이다.
3. 가수분해물 산물
상기 본 발명의 가수분해물은 다양한 산물에 혼입될 수 있다. 따라서, 일부 바람직한 구체예들에서, 본 발명은 본 발명에 따른 가수분해물, 구체적으로 크릴 단백질 가수분해물을 포함하는 식품, 음료, 기능성 식품, 동물 사료 식량, 분말로 된 단백질 보충제, 밀(meal) 대체제, 음료 분말, 단백질 쉐이크 분말 및 이와 유사한 것들을 제공한다.
상기 본 발명의 가수분해물은 바람직하게는 경구 섭취된다. 따라서, 일부 구체예들에서, 본 발명의 가수분해물 (이를 테면 전술한 단락들에서 기술된 것들)은 경구 섭취용 수용가능한 부형제 및/또는 운반체와 함께 제형화된다. 이 운반체의 실제 형태, 그리고 이에 따른 조성물 자체의 실제 형태는 중요하지 않다. 상기 운반체 액체, 겔, 겔캡(gelcap), 캡슐, 분말, 고체 정제 (코팅 또는 비-코팅), 차 또는 이와 유사한 것일 수 있다. 경구 운반 비히클은 바람직하게는 정제 또는 캡슐이다. 적합한 부형제 및/또는 운반체에는 식물성 오일, 생선 오일, 크릴 오일, 말토덱스트린, 탄산 칼슘, 인산 이칼슘, 인산 삼칼슘, 미정질 셀룰로오스, 덱스트로스, 쌀가루, 스테아르산 마그네슘, 스테아르산, 크로스카멜로오스 나트륨, 전분 글리콜산 나트륨, 크로스포비돈, 수크로스, 식물성 검(gums), 락토스, 메틸셀룰로스, 포비돈, 카르복시메틸셀룰로스, 옥수수 전분 및 이와 유사한 것등 (그들의 혼합물 포함)이 포함된다. 바람직한 운반체는 탄산 칼슘, 스테아르산 마그네슘, 말토덱스트린 및 이들의 혼합물을 포함한다. 다양한 성분과 부형제 및/또는 운반체를 혼합하고, 통상적인 기술을 사용하여 원하는 형태로 성형한다. 본 발명의 정제 또는 캡슐은 약 6.0 내지 7.0의 pH에서 용해되는 장용 코팅으로 코팅될 수 있다. 소장에서는 용해되지만, 위장에는 용해되지 않는 적절한 장용 코팅은 셀룰로오스 아세테이트 프탈레이트이다. 제형화 및 투여를 위한 기술에 대한 추가 세부 사항은 Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, PA).에서 찾을 수 있다.
일부 구체예들에서, 상기 가수분해물은 풍미제 또는 감미제와 함께 경구 투여용으로 제형화된다. 유용한 향미제의 예로는 순수한 아니스(anise) 추출물, 인공(imitation) 바나나 추출물, 인공 체리 추출물, 초콜릿 추출물, 순수 레몬 추출물, 순수 오렌지 추출물, 순수 페퍼민트 추출물, 인공 파인애플 추출물, 인공 럼(rum) 추출물, 인공 딸기 추출물, 또는 순수한 바닐라 추출물; 또는 휘발성 오일, 예컨대 밤(balm) 오일, 베이(bay) 오일, 베르가못(bergamot) 오일, 삼나무 오일, 호두 오일, 체리 오일, 계피 오일, 클로브 오일 또는 페퍼민트 오일; 땅콩 버터, 초콜릿 풍미, 바닐라 쿠키 부스러기, 버터 스카치 또는 토피(toffee)를 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 하나의 구체예에서, 상기 규정식 보충제에는 코코아 또는 초코렛이 포함된다. 최종 산물의 안정성을 위해 유화제가 첨가될 수 있다. 적합한 유화제의 예는 레시틴 (예를 들어, 난(egg) 또는 대두로부터), 및/또는 모노- 및 디-글리세리드를 포함하지만, 이에 국한되지는 않는다. 다른 유화제는 당업자에게 자명하며, 적합한 유화제(들)은 제형 및 최종 생성물에 부분적으로 의존-선택된다. 상기에서 기술된 탄수화물에 추가하여, 상기 영양 보충제는 천연 또는 인공 (바람직하게는 저칼로리) 감미제, 예를 들어 사카라이드, 시클라메이트(cyclamates), 아스파르타민(aspartamine), 아스파탐(aspartame), 아세설팜(acesulfame) K 및/또는 소르비톨을 함유할 수 있다.
상기 규정식 보충제는 하나 또는 그 이상의 불활성 성분을 포함 할 수 있으며, 특히 규정식 보충제가 당해 규정식에 첨가되는 칼로리의 수를 제한하는 것이 바람직한 경우, 포함될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 규정식 보충제는 예를 들어, 허브, 비타민, 미네랄, 인핸서(enhancers), 착색제, 감미제, 풍미제, 불활성 성분 및 이와 유사한 것등을 포함하는 선택적 성분을 또한 함유할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 규정식 보충제는 다음중 하나 또는 그 이상을 포함할 수 있다: 아스코르베이트 (아스코르브산, 미네랄 아스코르베이트 염, 로즈 힙(rose hips), 아세로라 및 이와 유사한 것등), 데하이드로에피안도스테론 (DHEA), 녹차 (폴리페놀), 이노시톨, 켈프(kelp), 덜스(dulse), 플라보노이드, 말토덱스트린, 쐐기풀, 니아신, 니아신아미드, 로즈마리, 셀레늄, 실리카 (이산화 규소, 실리카겔, 속새류(horsetail), 쉐이브그래스(shavegrass) 및 이와 유사한 것등), 스피룰리나(spirulina), 아연, 및 이와 유사한 것들. 이러한 선택적 성분은 자연 발생 또는 농축 형태일 수 있다.
일부 구체예들에서, 상기 규정식 보충제는 삼염기성 인산 칼슘 또는 아세테이트; 이염기성 인산 칼륨; 황산 마그네슘 또는 산화물; 염 (염화나트륨); 염화칼륨 또는 아세테이트; 아스코르브산; 오르토 인산 제2철(ferric orthophosphate); 니아신아미드; 황산 아연 또는 산화물; 판토텐산 칼슘; 글루코네이트 구리; 리보플라빈; 베타-카로틴; 피리독신 히드로 클로라이드; 티아민 모노니트레이트; 엽산; 바이오틴; 염화 크롬 또는 피콜로네이트; 요오드화 칼륨; 셀레나에이트 나트륨; 몰리브덴산 나트륨; 필로퀴논; 비타민 D3; 시아노코발라민; 셀레나이트 나트륨; 황산구리; 비타민 A; 비타민 C; 이노시톨; 요오드화 칼륨을 비롯한 비타민 및 미네랄을 더 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 비타민 및 미네랄에 적합한 투여량은 예를 들어, 미국 RDA 지침을 참조하여 얻을 수 있다.
다른 구체예들에서, 본 발명은 본 발명의 가수분해물을 포함하는 영양 보충제 (가령, 에너지 바(bars) 또는 밀(meal) 대체제 또는 음료)을 제공한다. 이 영양 보충제는 식사 또는 간식 대체제로서 제공될 수 있고, 일반적으로 영양 칼로리를 제공한다. 바람직하게는, 이 영양 보충제는 균형 잡힌 양의 탄수화물, 단백질 및 지방를 제공한다. 이 영양 보충제는 탄수화물, 단순, 중쇄 길이 또는 다당류, 또는 이들의 조합을 추가로 포함할 수 있다. 바람직한 관능 특성을 위해 간단한 설탕을 선택할 수 있다. 조리안된 옥수수 전분은 복잡 탄수화물의 한 가지 예이다. 고-분자량 구조를 유지하는 것이 바람직한 경우, 열은 복합 탄수화물을 단순 탄수화물로 분해하기 때문에, 요리되지 않은 또는 열 처리되지 않은 식품 제형 또는 그 일부에 포함되어야 하며, 여기서 단순 탄수화물은 단당류- 또는 이당류이다. 이 영양 보충제는 하나의 구체예에서 3 가지 수준의 사슬 길이의 탄수화물 공급원의 조합 (단순, 중간 및 복합물; 예를 들어, 수크로스, 말토덱스트린 및 조리되지 않은 옥수수전분)을 함유한다.
여전히 더 구체예들에서, 본 발명은 본 발명의 가수분해물을 포함하는 식품 산물, 준비된 식품 산물, 또는 기타 식료품 (가령, 기능성 식품)을 제공한다. 바람직한 구체예들에서, 상기 식품은 상기에서 기술된 바와 같이 효과량의 성분들을 포함한다. 예를 들면, 일부 구체예들에서, 상기 가수분해물이 포함된 음료 및 고형 또는 반-고형 식품이 제공된다. 이러한 형태에는 음료 (가령, 청량 음료(soft drinks), 우유 및 기타 유제품 음료, 다이어트용 음료), 구운(baked) 제품, 유제품, 당과제품(confections), 스낵, 또는 냉동 당과제품 또는 색다른 제품(novelties) (가령, 아이스크림, 우유 쉐이크), 제조 냉동 밀(meal), 캔디, 스낵 (가령, 칩), 스프, 스프레드(spreads), 소스(sauces), 샐러드 드레싱, 제조 고기 산물, 치즈, 요거트 및 임의의 기타 지방 또는 오일 함유 식품, 그리고 식품 성분 (가령, 밀가루)가 포함될 수 있지만, 이에 국한되지 않는다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 씹을 수 있는 매트릭스 혼입된다. 바람직한 씹을 수 있는 매트릭스 젤리 캔디 및 젤라틴-기반 검질(gummi) 캔디. 예시적인 검질 캔디에는 검질 곰, 검질 벌레, 검질 개구리, 검질 햄버거, 검질 체리, 검질 소다 병, 검질 상어, 검질 아미 맨(army men), 검질 해마, 검질 랍스터, 검질 수박, 검질 낙지, 검질 사과, 검질 복숭아 및 검질 오렌지를 포함한다. 용어 "검질(gummi)" 및 "고무질(gummy)"은 본원에서 호환된다.
인지할 수 있는 것과 같이, 상기 본 발명의 가수분해물은 규정식 보충제, 영양 보충제, 또는 기능성 식품으로 전달되거나, 또는 식품 또는 음료에 혼입될 수 있다. 따라서, 일부 구체예들에서, 본 발명은 원하는 산물 (가령, 규정식 보충제, 영양 보충제, 기능성 식품, 식품 또는 음료)을 제공하기 위하여, 상기에서 기술된 단백질 가수분해물과 하나 또는 그 이상의 추가 성분들과 혼합하여 규정식 보충제, 영양 보충제, 기능성 식품, 식품 또는 음료를 제공하는 방법을 제공한다. 이들 산물을 위한 추가 성분들은 상기에서 상술된다. 더욱이, 본 발명은 규정식 보충제, 영양 보충제, 기능성 식품, 식품 또는 음료의 조제용 성분으로 본원에 기술된 단백질 가수분해물의 용도를 제공한다.
일부 바람직한 구체예들에서, 상기 가수분해물은 동물 사료 및 식량에 혼입된다. 반려 동물, 이를 테면 고양이와 개, 뿐만 아니라 가축 및 야생동물, 가정 가금류, 돼지(hogs), 소, 양, 토끼 및 조류, 물고기, 이를 테면, 송어, 연어, 메기 및 틸라피아(tilapia), 새우 및 양식을 통해 생산되는 다른 종들을 위한 동물 사료로 제형화될 수 있다. 많은 상이한 사료 식량은 많은 상이한 사료 성분으로부터 동물을 위해 제형화될 수 있다. 식량은 일반적으로 National Research Council 표준에 따라 영양소를 제공하도록 제형화된다. 식량에 사용되는 사료 (가수 분해물에 추가)는 시장 가격과 이용가능성에 따라 선택할 수 있다. 따라서, 식량의 일부 구성요소는 시간이 지남에 따라 변경될 수 있다. 본 발명의 사료에서, 식량은 단백질 성분의 일부로서 본 발명에 따른 가수 분해물을 함유할 것이나, 다른 성분은 성분의 가격에 근거하여 시간에 따라 변할 수 있다. 사료 식량 제형, 실제 사료 및 NRC 지침에 대한 논의는 Church, Livestock Feeds and Feeding, O&B Books, Inc., Corvallis, Oreg. (1984) 그리고 Feeds and Nutrition Digest, Ensminger, Oldfield 그리고 Heineman eds., Ensminger Publishing Corporation, Clovis, Calif. (1990) (본원에 참고자료에 편입됨)
본 발명의 동물 사료 식량은 NRC 규정에 따라 특징화될 수 있다. NRC 규정은 Church, Livestock Feeds 및 feeding, O&B Books, Inc., Corvallis, Oreg. (1984), 또는 기타 영양 기준에서 찾아볼 수 있다. 동물 식량은 전통적으로 단백질 및 에너지 요구 사항을 사용하여 균형을 유지한 다음, 필요한 경우 다른 요구 사항을 충족하도록 조정된다. 본 발명의 동물 식량에는 성장 및 유지의 상이한 단계에 대한 NRC 요건을 충족시키기 위해, 사료의 균형을 맞추는 데 필요한 다른 사료 재료에 추가하여, 본 발명에 따른 가수분해물이 예를 들면, 0.5% 내지 30% wt/wt, 0.5% 내지 20% wt/wt, 0.5% 내지 10% wt/wt 또는 0.5% 내지 5% wt/wt의 양으로 포함될 것이다. 단백질과 에너지의 상대적 양은 Nutritional Standards 요건이 반영되도록 조정된다. 사료 성분의 양은 사료를 먹은 단계에 따라 상이하게 된다. 어린 동물의 경우 식량 증가는 단백질 수준이 높을 것이고, 판매용 동물의 마무리 식량은 탄수화물로 공급되는 더 높은 에너지 값을 가질 것이다. 일부 영양공급 상황에서 적절한 아미노산 뿐만 아니라 전체 단백질 함량을 제공하도록 주의를 기울여야 한다. 대부분의 동물 규정식에서, 에너지 요구량은 시리얼 곡물의 전분에 의해 충족된다. 식량에 지방을 첨가하여, 에너지 요구량을 충족시킬 수도 있다. 본 발명에서, CFAP는 에너지 요구량의 일부를 제공한다.
다른 성분들이 사료 식량에 첨가될 수 있다. 이들 성분에는 미네랄 보충제, 이를 테면 칼슘, 인, 염, 셀레니움 및 아연; 비타민 보충제, 이를 테면 비타민 A, B, D, E, 및 K; 아미노산 보충제, 이를 테면 리신; 콕시디오스태트(coccidiostats), 또는 성장 촉진제, 이를 테면 바시트라신(bacitracin) 또는 비르기나마이신(virginamycin); 및 기타 활성 약물, 이를 테면 클로르테트라사이클린(chlortetracycline), 술파티오졸(sulfathiozole) 및 페니실린을 포함하나, 이에 국한되지 않는다. 비타민, 미네랄 및 항생제 보충제 제형의 경우 Church, Livestock Feeds and Feeding, O&B Books, Inc., Corvallis, Oreg. (1984)을 참고한다.
바람직한 구체예에서, 상기 가수분해물은 가축에 제공하기 위한 펠렛화된 사료에 혼입된다. 펠렛화된 펠렛 사료는 먼저 사료 구성 요소들을 혼합한 다음, 다이(die)에서 열과 압력으로 이들 사료 구성요소들을 압착시키고, 압출시켜서 만든다. 상기 시료는 당분야에 공지된, 그리고 MacBain, Pelleting Animal Feed, American Feed Manufacturers Association, Arlington, Va. (1974)(이는 본원의 참고자료에 편입됨)에서 기술된 방법에 의해 펠렛화된다. 추가된 지방을 펠릿화된 사료에 혼입할 때, 파삭파삭한 펠렛을 만들어지지 않도록 주의해야 한다. 일반적으로, 펠릿화되는 동안, 단지 지방의 약 2%만 첨가되고, 나머지 지방은 펠렛이 냉각된 후에 첨가된다.
실시예 1
PCT/IB2016/000208에 기술된 공정에 따라 생산된 용매-추출된 크릴 밀(meal)은 핀 밀(pin mill)에서 16,000 RPM로 제분하여, 50 μm의 평균 입자 크기로 제분된다. 이렇게 제분된 단백질 조성물은 그 다음 시트르산 (65℃, 9 분, 0.19M, pH 4)으로 세척 후, 3 온수로 65℃에서 9 분 동안 세척한다. 그 다음 세척된 단백질 조성물은 2.5 시간 동안 pH 7.5 및 52.5℃에서 ALCALASE로 처리하고, 그 다음 9 분 동안 65℃에서 온수로 세척한다. 그 다음 생성된 가수분해물은 미세-여과 및 나노여과되어 (1.25 L/h/m2/바(bar), <5 바(bar) 압력) 농축물이 제공된다. 그 다음 이 농축물은 분무 건조 (집합체(agglomeration), 3 단계 건조, 유입 182℃, 유출 82.5℃)에 의해 과립화된다. 상기 가수분해물 농축물은 표 1-3에서 그리고 도 1 및 2에 열거된 성질을 갖는다.
매개변수:
경계 범위(Limits):
분석 방법:
물리적 성질
풍미/냄새
 자극적이지 않음(Bland)
 관능
외양
 회백(Off-white)색 분말
 시각적(Visual)
화학적 분석
수분
 최대 3.0 %
 건조
존재하는 그대로의 단백질
 최저 87.5 %
 Kjeldahl
단백질, 건조 기초로
 최저 90.0 %
 Kjeldahl
전체 지방
 최대 1.0 %
 Soxhlet
재(Ash)
 최대 6.0 %
 중량측정에 의해
탄수화물
 최대 5.0 %
 HPLC
나트륨 (Na)
 최대 1.0 %
 ICP-MS
미생물학
전체 플레이트 카운트(Plate Count)
 최대 1,000 CFU/g
 USP
살로넬라(Salmonella)
 음성 / 25 g
 USP
장내세균(Enterobacteriacea)
 음성 / 25 g
 USP
대장균(E. coli)
 음성 / 10 g
 USP
효모 및 곰팡이
 최대 100 CFU/g
 USP
Figure pct00001
Figure pct00002
실시예 2
크릴 가수분해물을 만드는 두 가지 공정을 비교하였다. 언급된 것을 제외하고는, 도 3의 프로세스가 사용되었다. 첫번째 공정에서, 습식 제분 및 한외여과 단계는 없었다. 가수분해 시간은 1 시간이었다. 생성된 가수분해물은 "뱃치(Batch) A"로 지칭된다. 나노여과 단계는 가수분해 후에 이용되었다. 두 번째 공정은 가수분해 전, 습식 제분을 이용하였고, 가수분해 후 한외여과 및 나노여과를 모두 이용하였다. 가수분해 시간은 14.5 시간이었다. 생성된 가수분해물은 "뱃치 B"으로 지칭된다. 뱃치 A와 뱃치 B의 선택된 값의 비교는 표 4에 제시된다. 표 5는 뱃치 B의 아미노산 조성물, 본 발명의 공정에 의해 만들어진 다수의 크릴 가수분해물 뱃치에 걸쳐 평균 아미노산 함량을 제공한다. 표 5의 세 번째 열에서, 아미노산 함량은 단백질 100 그램 당 아미노산 그램으로 표시된다. 가수분해물 100g에서 아미노산 그램은 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 측정되었다. 상기 단백질 함량은 Kjeldahl 방법에 의해 측정되었다. 표 5의 네 번째 열에서, 탈지된 및 지방이 제거되지 않은 크릴 밀(meal)을 비롯한 상이한 밀(meal)로 만들어진 복합 뱃치에 대한 아미노산 함량이 열거된다. 4 열에서는 전체 아미노산 100 그램 당 표시된 아미노산의 아미노산 함량(그램으로)이 열거된다(HPLC에 의해 측정됨). 확인할 수 있는 바와 같이, 뱃치 B 가수분해물은 플루오라이드 (F) 함량, TMAO, TMA 및 TVN 함량에 있어서 실질적으로 개선된 값을 갖는다. 후속 뱃치 ("뱃치 C")는 건조 중량 기준으로 함량이 1.09mg/kg인 F를 갖고, 뿐만 아니라 TMA, TMAO, 및 TVN는 낮은 값을 갖는다. 상기 가수분해물은 필수 아미노산과 분지 쇄 아미노산의 함량 및 조성에 있어서, 우수한 아미노산 조성물을 갖는다.
Figure pct00003
Figure pct00004

Claims (51)

  1. 건조 중량 기준으로 85% 이상의 단백질과, 건조 중량 기준으로 5% 미만의 지방을 가지며, 다음 특성 중 하나 이상을 갖는 것을 특징으로 하는 단백질 가수 분해물:
    a. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg/kg인 플루오라이드;
    b. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TMAO (트리메틸아민 N-옥시드);
    c. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TMA (트리메틸아민);
    d. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TVN(전체 휘발성 질소);
    e. 건조 중량 기준으로 함량이 0.01 내지 4.0g/가수분해물 100g인 나트륨;
    f. 건조 중량 기준으로 함량이 100 내지 25,000mg/가수분해물 kg인 칼슘;
    g. 함량이 6.30 내지 10.30g 리신/전체 아미노산 100g인 리신;
    h. 함량이 3.04 내지 7.04g 트레오닌/전체 아미노산 100g인 트레오닌;
    i. 함량이 3.39 내지 7.39g 이소류신/전체 아미노산 100g인 이소류신;
    j. 함량이 6.27 내지 10.27g 류신/전체 아미노산 100g인 류신;
    k. 함량이 0.94 내지 3.94g 히스티딘/전체 아미노산 100g인 히스티딘;
    l. 함량이 2.76 내지 6.76g 페닐알라닌/전체 아미노산 100g인 페닐알라닌;
    m. 함량이 2.39 내지 6.39g 티로신/전체 아미노산 100g인 티로신;
    n. 함량이 3.69 내지 7.69g 발린/전체 아미노산 100g인 발린;
    o. 함량이 3.76 내지 7.76g 알라닌/전체 아미노산 100g인 알라닌;
    p. 함량이 3.90 내지 7.90g 아르기닌/전체 아미노산 100g인 아르기닌;
    q. 함량이 9.68 내지 13.68g 아스파트르산 및 아스파라긴/전체 아미노산 100g인 아스파트르산 및 아스파라긴;
    r. 함량이 11.54 내지 17.54g 글루타민산 및 글루타민/전체 아미노산 100g인 글루타민산 및 글루타민;
    s. 함량이 2.50 내지 6.50g 글리신/전체 아미노산 100g인 글리신;
    t. 함량이 1.84 내지 5.84g 프롤린/전체 아미노산 100g인 프롤린;
    u. 함량이 2.35 내지 6.35g 세린/전체 아미노산 100g인 세린;
    v. 함량이 1.22 내지 5.22g 메티오닌/전체 아미노산 100g인 메티오닌;
    w. 함량이 0.24 내지 1.04g 시스테인 및 시스틴/전체 아미노산 100g인 시스테인 및 시스틴;
    x. 함량이 0.76 내지 1.76g 트립토판/전체 아미노산 100g인 트립토판.
  2. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg/kg인 플루오라이드를 갖는, 단백질 가수분해물.
  3. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 10mg N/가수분해물 100g인 TMAO를 갖는, 단백질 가수분해물.
  4. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이0.1 내지 30mg N/가수분해물 100g인 TMA를 갖는, 단백질 가수분해물.
  5. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이0.1 내지 60mg N/가수분해물 100g인 TVN을 갖는, 단백질 가수분해물.
  6. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 두 가지 성질을 갖는, 단백질 가수분해물.
  7. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 세 가지 성질을 갖는, 단백질 가수분해물.
  8. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 네 가지 성질을 갖는, 단백질 가수분해물.
  9. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 다섯 가지 성질을 갖는, 단백질 가수분해물.
  10. 청구항 1에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f의 성질을 갖는, 단백질 가수분해물.
  11. 청구항 6 내지 10중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 g, h, i, j, k, l, m, n, o, p, q, r, s, t, u, v, w 및 x의 모든 성질을 더 갖는, 단백질 가수분해물.
  12. 청구항 1 내지 11중 임의의 한 항에 있어서, 이때 가수분해물의 필수 아미노산의 함량이 39.36 내지 49.36 g의 필수 아미노산/전체 아미노산 100g인, 단백질 가수분해물.
  13. 청구항 1 내지 12중 임의의 한 항에 있어서, 이때 가수분해물의 분지 쇄 아미노산의 함량이 16.35 내지 22.35 g의 분지 쇄 아미노산/전체 아미노산 100g인, 단백질 가수분해물.
  14. 청구항 1 내지 13중 임의의 한 항에 있어서, 이때 가수분해물의 황-함유 아미노산의 함량이 2.86 내지 4.86 g의 황-함유 아미노산/전체 아미노산 100g인, 단백질 가수분해물.
  15. 청구항 1 내지 14중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 89% 이상 함량의 단백질과 건조 중량 기준으로 2% 미만 함량의 지방을 갖는 것을 특징으로 하는, 단백질 가수분해물.
  16. 청구항 1 내지 15중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 3% 미만의 수분 함량을 갖는, 단백질 가수분해물.
  17. 청구항 1 내지 16중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 비린 생선 맛이 없는, 중성적인 것을 특징으로 하는, 단백질 가수분해물.
  18. 청구항 1 내지 17중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 물 또는 다른 수성 매질에 첨가될 때, 투명한 용액으로 분산되는 추가 특징을 가진, 단백질 가수분해물.
  19. 청구항 18에 있어서, 이때 물 100g 안에 상기 단백질 가수분해물 4.5 g(건조 중량)의 용액 OD590은 0.4 미만인, 단백질 가수분해물.
  20. 청구항 1 내지 19중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 물 100g 안에 건조 중량 기준으로 4.5 g의 단백질 가수분해물을 용해시켜 검정하였을 때, 물에서 80% 이상의 용해성이 있는, 단백질 가수분해물.
  21. 청구항 1 내지 20중 임의의 한 항에 있어서, 이때 열-처리된 단백질 가수분해물은 4.5 g(건조 중량)의 단백질 가수분해물을 물 100g 에 용해시키고, 5분간 85℃로 가열함으로써 검정하였을 때, 물에서 60% 이상의 용해도를 가진, 단백질 가수분해물.
  22. 청구항 1 내지 21중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 해양 단백질 가수분해물인, 단백질 가수분해물.
  23. 청구항 22에 있어서, 이때 해양 단백질 가수분해물은 크릴 단백질 가수분해물인, 단백질 가수분해물.
  24. 단백질 가수분해물을 만들기 위한 다음을 포함하는 공정:
    해양 밀(meal)을 제공하고,
    상기 해양 밀(meal)을 제분하고,
    이렇게 제분된 밀(meal)을 물 및/또는 시트르산으로 세척하여 세척된 밀(meal)을 제공하고,
    세척된 밀(meal)을 프로테아제로 처리하여 단백질 가수분해물을 제공하고, 그리고
    0.1 내지 10 μm의 공극 크기를 갖는 필터로 단백질 가수분해물을 미세여과하거나 및/또는 1 내지 10 nm의 공극 크기를 갖는 필터로 나노여과함으로써 상기 가수분해물을 여과하여 단백질 가수분해물과 투과액이 제공된다.
  25. 청구항 24에 있어서, 이때 밀(meal)은 용매-추출된 밀(meal)인, 공정.
  26. 청구항 24 내지 25중 임의의 한 항에 있어서, 이때 여과 전, 당해 프로테아제를 비활성화시키는 단계를 더 포함하는, 공정.
  27. 청구항 24 내지 26중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물의 건조 단계를 더 포함하여, 건조된 단백질 가수분해물을 제공하는 공정.
  28. 청구항 27에 있어서, 이때 건조된 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 85% 이상의 단백질과, 건조 중량 기준으로 5% 미만의 지방을 가지며, 다음 특성 중 하나 이상을 갖는 것을 특징으로 하는, 공정:
    a. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg/kg인 플루오라이드;
    b. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TMAO;
    c. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TMA;
    d. 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 200mg N/가수분해물 100g인 TVN;
    e. 건조 중량 기준으로 함량이 0.05 내지 4.0g/100g인 나트륨;
    f. 건조 중량 기준으로 함량이 100 내지 25,000mg/kg인 칼슘;
    g. 함량이 6.30 내지 10.30g 리신/아미노산 100g인 리신;
    h. 함량이 3.04 내지 7.04g 트레오닌/아미노산 100g인 트레오닌;
    i. 함량이 3.39 내지 7.39g 이소류신/아미노산 100g인 이소류신;
    j. 함량이 6.27 내지 10.27g 류신/아미노산 100g인 류신;
    k. 함량이 0.94 내지 3.94g 히스티딘/아미노산 100g인 히스티딘;
    l. 함량이 2.76 내지 6.76g 페닐알라닌/아미노산 100g인 페닐알라닌;
    m. 함량이 2.39 내지 6.39g 티로신/아미노산 100g인 티로신;
    n. 함량이 3.69 내지 7.69g 발린/아미노산 100g인 발린;
    o. 함량이 3.76 내지 7.76g 알라닌/아미노산 100g인 알라닌;
    p. 함량이 3.90 내지 7.90g 아르기닌/아미노산 100g인 아르기닌;
    q. 함량이 9.68 내지 13.68g 아스파트르산/아미노산 100g인 아스파트르산;
    r. 함량이 11.54 내지 17.54g 글루타민산/아미노산 100g인 글루타민산;
    s. 함량이 2.50 내지 6.50g 글리신/아미노산 100g인 글리신;
    t. 함량이 1.84 내지 5.84g 프롤린/아미노산 100g인 프롤린;
    u. 함량이 2.35 내지 6.35g 세린/아미노산 100g인 세린;
    v. 함량이 1.22 내지 5.22g 메티오닌/아미노산 100g인 메티오닌;
    w. 함량이 0.24 내지 1.04g 시스테인 및 시스틴/아미노산 100g인 시스테인 및 시스틴;
    x. 함량이 0.76 내지 1.76g 트립토판/아미노산 100g인 트립토판.
  29. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg/kg인 플루오라이드를 갖는, 공정.
  30. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 10mg N/가수분해물 100g인 TMAO를 갖는, 공정.
  31. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 30mg N/가수분해물 100g인 TMA를 갖는, 공정.
  32. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 함량이 0.1 내지 60mg N/가수분해물 100g인 TVN을 갖는, 공정.
  33. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 두 가지 성질을 갖는, 공정.
  34. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 세 가지 성질을 갖는, 공정.
  35. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 네 가지 성질을 갖는, 공정.
  36. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f중에서 다섯 가지 성질을 갖는, 공정.
  37. 청구항 28에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 a, b, c, d, e 및 f의 성질을 갖는, 공정.
  38. 청구항 28 내지 37중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 성질 g, h, i, j, k, l, m, n, o, p, q, r, s, t, u, v, w, x, y 및 z의 모든 성질을 더 갖는, 공정.
  39. 청구항 28 내지 38중 임의의 한 항에 있어서, 이때 가수분해물의 필수 아미노산의 함량이 39.36 내지 49.36 g의 필수 아미노산/전체 아미노산 100g인, 공정.
  40. 청구항 28 내지 39중 임의의 한 항에 있어서, 이때 가수분해물의 분지 쇄 아미노산의 함량이 16.35 내지 22.35 g의 분지 쇄 아미노산/전체 아미노산 100g인, 공정.
  41. 청구항 28 내지 40중 임의의 한 항에 있어서, 이때 가수분해물의 황-함유 아미노산의 함량이 2.86 내지 4.86g 황-함유 아미노산/전체 아미노산 100g인, 공정.
  42. 청구항 28 내지 41중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 건조 중량 기준으로 89% 이상 함량의 단백질과 건조 중량 기준으로 2% 미만의 함량의 지방을 갖는 것을 특징으로 하는 공정.
  43. 청구항 28 내지 42중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 3% 미만의 수분 함량을 갖는, 공정.
  44. 청구항 28 내지 44중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 비린 생선 맛이 없는, 중성적인 것을 특징으로 하는, 공정.
  45. 청구항 28 내지 44중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 물 또는 다른 수성 매질에 첨가될 때, 투명한 용액으로 분산되는 추가 특징을 가진, 공정.
  46. 청구항 45에 있어서, 이때 물 100g 안에 상기 단백질 가수분해물 4.5 g(건조 중량)의 용액 OD590은 0.4 미만인, 공정.
  47. 청구항 28 내지 46중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 물 100g 안에 건조 중량 기준으로 4.5 g의 단백질 가수분해물을 용해시켜 검정하였을 때, 물에서 80% 이상의 용해성이 있는, 공정.
  48. 청구항 28 내지 47중 임의의 한 항에 있어서, 이때 열-처리된 단백질 가수분해물은 4.5 g(건조 중량)의 단백질 가수분해물을 물 100g에 용해시키고, 5분간 85℃로 가열함으로써 검정하였을 때, 물에서 60% 이상의 용해도를 가진, 공정.
  49. 청구항 24 내지 48중 임의의 한 항에 있어서, 이때 단백질 가수분해물은 해양 단백질 가수분해물인, 공정.
  50. 청구항 49에 있어서, 이때 해양 단백질 가수분해물은 크릴 단백질 가수분해물인, 공정.
  51. 청구항 24 내지 50중 임의의 한 항에 따른 공정에 의해 만들어진 단백질 가수분해물.
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