KR20200055767A - 백봉채 총 플라보노이드 추출물 및 그의 제조 방법과 비알코올성 지방간을 치료하기 위한 용도 - Google Patents
백봉채 총 플라보노이드 추출물 및 그의 제조 방법과 비알코올성 지방간을 치료하기 위한 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20200055767A KR20200055767A KR1020207011230A KR20207011230A KR20200055767A KR 20200055767 A KR20200055767 A KR 20200055767A KR 1020207011230 A KR1020207011230 A KR 1020207011230A KR 20207011230 A KR20207011230 A KR 20207011230A KR 20200055767 A KR20200055767 A KR 20200055767A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- baekbongchae
- total flavonoid
- extract
- flavonoid extract
- total
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 117
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 title claims abstract description 100
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 title claims abstract description 100
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 title claims abstract description 93
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 26
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 26
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 claims abstract description 16
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 13
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 claims abstract description 11
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 33
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 30
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 19
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 18
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 15
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 11
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 9
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 9
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 claims description 9
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 9
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 9
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 claims description 9
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 9
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 8
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 claims description 3
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 claims description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 3
- 241001558015 Gynura formosana Species 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 33
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 7
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 7
- -1 flavonoid compounds Chemical class 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 210000001596 intra-abdominal fat Anatomy 0.000 description 7
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 6
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 5
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 4
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LTEOHQLUJPPHMP-UHFFFAOYSA-N C(C)O.[P] Chemical compound C(C)O.[P] LTEOHQLUJPPHMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 3
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 3
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 3
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 3
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 208000022309 Alcoholic Liver disease Diseases 0.000 description 2
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 2
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920002785 Croscarmellose sodium Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- MPDGHEJMBKOTSU-UHFFFAOYSA-N Glycyrrhetinsaeure Natural products C12C(=O)C=C3C4CC(C)(C(O)=O)CCC4(C)CCC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC(O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000000501 Lipidoses Diseases 0.000 description 1
- 206010024585 Lipidosis Diseases 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 239000008118 PEG 6000 Substances 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 1
- 229920002584 Polyethylene Glycol 6000 Polymers 0.000 description 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 229960002233 benzalkonium bromide Drugs 0.000 description 1
- KHSLHYAUZSPBIU-UHFFFAOYSA-M benzododecinium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 KHSLHYAUZSPBIU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical class 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 229960002152 chlorhexidine acetate Drugs 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 229960001681 croscarmellose sodium Drugs 0.000 description 1
- 235000010947 crosslinked sodium carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940109275 cyclamate Drugs 0.000 description 1
- HCAJEUSONLESMK-UHFFFAOYSA-N cyclohexylsulfamic acid Chemical compound OS(=O)(=O)NC1CCCCC1 HCAJEUSONLESMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000018927 edible plant Nutrition 0.000 description 1
- 229960003720 enoxolone Drugs 0.000 description 1
- 210000000918 epididymis Anatomy 0.000 description 1
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940044949 eucalyptus oil Drugs 0.000 description 1
- 239000010642 eucalyptus oil Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000556 factor analysis Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 229940031703 low substituted hydroxypropyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 229940072033 potash Drugs 0.000 description 1
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Substances [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- MCSINKKTEDDPNK-UHFFFAOYSA-N propyl propionate Chemical compound CCCOC(=O)CC MCSINKKTEDDPNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000011425 standardization method Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
- A61K36/287—Chrysanthemum, e.g. daisy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/02—Suppositories; Bougies; Bases therefor; Ovules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/12—Aerosols; Foams
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/4808—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate characterised by the form of the capsule or the structure of the filling; Capsules containing small tablets; Capsules with outer layer for immediate drug release
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
백봉채 총 플라보노이드 추출물로서, 80-85%의 루틴을 함유한다. 제조 방법에서 특정 조성 및 특성 비율의 효소로 구성된 복합 효소를 선택하여 효소성 분해를 진행하고, 거대 다공성 수지를 통해 분리추출 및 농축하고, 거대 다공성 수지를 통해 분리 및 정제한다. 이 추출물은 비알코올성 지방간에 대해 치료 효과가 있다.
Description
본 발명은 약품 또는 건강기능식품 분야에 속하며, 구체적으로 백봉채 총 플라보노이드 추출물 및 그의 제조 방법과 비알코올성 지방간을 치료하기 위한 용도에 관한 것이다.
비알코올성 지방간(NAFLD)은 과량의 음주력 없이, 다양한 원인에 의해 야기되는 간 세포 지방증 및 지질 침적을 특징으로 하는 임상 병리학적 증후군이며, 주로 단순 지방간 및 지방 간염을 포함하고, 후자는 간 섬유화 및 간경화로 진전될 수 있다. 현재, 전 세계 일반 인구에서 비알코올성 지방간 질환의 유병률은 20%~30%에 달할 정도로 높으며, 전 세계 범위 내 인구의 절반 이상이 비알코올성 지방간 질환이 발생할 위험이 있고, B형 간염, C형 간염 및 알코올성 간 질환의 발병률을 뚜렷이 초과하여, 이미 가장 흔한 간 질환이 되었다. 역학조사에 따르면 NAFLD는 이미 중국에서 흔한 만성 간 질환 중 하나가 되었고, 상해, 광저우 및 홍콩 등 발달된 지역에서 성인 유병률이 10%~25%에 달하며, 점차 연령이 낮아지는 추세이다. 지방간은 단기간 내에 돌이킬 수 없는 간 손상으로 발전할 수 있고, 그 섬유화의 발생률은 25%에 달할 정도로 높으며, 약 10%의 환자가 간경화로 발전할 수 있어, 사람들의 건강을 심각하게 위협한다. 현재 NAFLD에 대한 치료는 임상적으로 치료 효과가 확실한 특효약이 아직 부족하다. 따라서, 비알코올성 지방간을 치료하는 약물을 연구 개발하는 것은 이미 연구의 핫스팟이 되었다.
백봉채(Gynura formosana Kitam.)는 국화과 기누라속 다년생 초본 식물이고, 백배천규, 편자황초라고도 하며, 이는 풍부한 비타민, 알칼로이드류 및 플라보노이드류 물질을 함유하고, 일종의 약용 및 식용 식물이다. 연구에 따르면, 백봉채는 주로 폐렴, 폐암, 간염, 간경화, 고혈압 등 질병의 치료에 사용되며, 이는 해열 해독의 기능도 있다. 종래 기술 중, 일부 문헌은 백봉채 알코올 추출물이 비알코올성 지방간 래트에 대해 치료 효과를 갖는 것으로 보고했다.
그런데, 현재, 종래 기술 중 백봉채 물 추출물이 비알코올성 지방간을 치료할 수 있다는 관련 보고는 아직 없다.
이러한 이유로, 본 발명은 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 제공하며, 더 나아가 그의 제조 방법과 용도를 제공한다.
상기 기술적 문제를 해결하기 위해, 본 발명은 하기 기술 방안을 통해 달성된다:
본 발명은 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 제공하며, 중량 퍼센트 함량으로 80~85%의 루틴(rutin)을 함유한다.
본 발명은 또한 하기 단계를 포함하는 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법을 제공한다:
(1) 추출: 백봉채를 취하여 추출 용매를 첨가하여 추출을 진행하고, 추출액의 pH 값을 4-8로 조절하여 반응액을 얻는 단계;
(2) 효소성 분해: 이어서 반응액에 복합 효소를 첨가하여 효소성 분해를 진행하고, 30-50℃ 강제 순환 반응을 1-4시간 동안 하고, 감압여과(또는 진공여과)하고, 여과액을 수집하는 단계;
(3) 분리추출 및 농축: 여과액을 거대 다공성 수지 A를 사용하여 분리추출을 진행하고, 분리추출액을 합하고, 분리추출액을 농축시켜 농축액을 얻는 단계;
(4) 분리 및 정제: 농축액을 원심 분리하고, 상청액을 취하여 거대 다공성 수지 B를 사용하여 분리 정제하고, 510 nm 파장에서 흡광도를 측정하고, 용리액을 수집하고, 농축 및 건조하여 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 얻는 단계.
바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 효소성 분해 단계에서, 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제로 구성된 복합 효소를 채용하여 효소성 분해를 진행한다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 복합 효소와 상기 백봉채의 중량비는 1 : 5 ~ 1 : 3이다.
더욱 바람직하게는, 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 복합 효소에서, 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제 이들 세 가지의 중량비는 (0.5-1.5) : (2-5) : (1-3)이고;
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 복합 효소에서, 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제 이들 세 가지의 중량비는 1 : 3 : 2이다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서,
상기 거대 다공성 수지 A는 AB-8, DM-130, HZ841, ZH-00, ZH-01, ZH-02, ZH-03, CAD-40, CAD-45 및 BS-30 중 적어도 1종으로부터 선택되고;
상기 거대 다공성 수지 B는 D-101, D-140, D-141, XAD-3, XAD-4, HP-20, HP-21, LD-605 및 LSA-10 중 적어도 1종으로부터 선택된다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 추출 단계에서, 추출 용매는 물이고, 상기 백봉채와 상기 물의 중량비는 1 : (20-60)이다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 분리 및 정제 단계에서, 용리 용매는 부피 농도가 70-80%인 에탄올 수용액이고, 용리 속도는 3-15m/h이다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 분리 및 정제 단계에서, 용리 용매는 부피 농도가 75%인 에탄올 수용액이고, 용리 속도는 5m/h이다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 농축액에서, 백봉채 총 플라보노이드의 농도는 0.5mg/mL이다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 분리추출 및 농축 단계에서, 여과액을 거대 다공성 수지 A가 담긴 추출 탱크에 첨가하고, 30℃, 80-150rpm에서 6-24시간 동안 교반하고, 여과하고, 거대 다공성 수지 A의 중량을 기준으로, 흡착된 거대 다공성 수지 A를 취하여 10-30배 중량의 부피 농도가 70-95%인 에탄올 용액을 첨가하고, 이어서 30℃, 80-150rpm에서 6-24시간 동안 교반하고, 여과하여, 분리추출액을 얻는다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 추출 단계에서, 염산 또는 수산화 나트륨을 채용하여 추출액의 pH 값을 4-8로 조절한다.
더욱 바람직하게는, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법에서, 상기 건조는 동결 건조이다.
본 발명은 상기 제조 방법에 의해 제조하여 얻은 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 더 제공한다.
본 발명은 약물 제제를 더 제공하며, 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물, 또는 상기 제조 방법에 의해 제조하여 얻은 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 활성 성분으로 하여, 통상적인 방법에 따라, 통상적인 보조 물질을 첨가하여 제조된 임상적으로 허용 가능한 정제, 캡슐제, 가루제, 합제, 환제, 과립제, 시럽제, 접착패치, 좌제, 에어로졸, 연고제 또는 주사제이다.
상기 통상적인 보조 물질은 충전제, 붕해제, 윤활제, 현탁화제, 결합제, 감미제, 향미제, 방부제, 기질 등이다. 충전제는 전분, 전호화 전분, 유당, 만니톨, 키틴, 미세결정질 셀룰로오스, 자당 등을 포함하고; 붕해제는 전분, 전호화 전분, 미세결정질 셀룰로오스, 카르복시메틸 전분 나트륨, 가교 폴리비닐피롤리돈, 저치환 하이드록시프로필 셀룰로오스, 크로스카르멜로스 나트륨 등을 포함하고; 윤활제는 스테아르산 마그네슘, 라우릴 황산나트륨, 활석분, 이산화규소 등을 포함하고; 현탁화제는 폴리비닐피롤리돈, 미세결정질 셀룰로오스, 자당, 한천, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스 등을 포함하고; 결합제는 전분 시럽, 폴리비닐피롤리돈, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스 등을 포함하고; 감미제는 사카린 나트륨, 아스파탐, 자당, 시클라메이트, 글리시레틴산 등을 포함하고; 향미제는 감미제 및 각종 향미료를 포함하고; 방부제는 파라벤, 벤조산, 벤조산 나트륨, 소르빈산 및 그의 염, 벤즈알코늄 브로마이드, 클로르헥시딘 아세테이트, 유칼리 유 등을 포함하고; 기질은 PEG6000, PEG4000, 곤충 왁스 등을 포함한다.
본 발명은 상기 백봉채 총 플라보노이드 추출물, 상기 제조 방법에 의해 제조하여 얻은 백봉채 총 플라보노이드 추출물, 또는 상기 약물 제제의 비알코올성 지방간을 치료하기 위한 약품 또는 건강기능식품의 제조에서의 응용을 더 제공한다.
본 발명의 기술 방안은 하기와 같은 이점을 갖는다:
(1) 본 발명은 80~85%의 루틴을 함유하는 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 추출 분리하여 얻었으며, 약효 실험 결과에 따르면, 이 추출물은 비알코올성 지방간에 대해 비교적 우수한 치료 효과가 있으며, 비알코올성 지방간 래트의 혈액 지질 장애 및 지방증을 현저히 개선할 수 있으므로, 비알코올성 지방간을 치료하는 잠재적인 약물이 될 수 있다;
(2) 본 발명의 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법은, 추출 단계 후에, 특정 조성, 특정 비율의 효소로 구성된 복합 효소를 선택함으로써 30-50℃에서 효소성 분해를 진행하는데, 백봉채 총 플라보노이드 화합물의 구조가 고온에서 파괴되는 것을 피할 뿐만 아니라, 백봉채 총 플라보노이드 화합물이 최대 정도로 추출될 수 있도록 하며, 더 나아가 거대 다공성 수지 분리추출 및 농축과 거대 다공성 수지 분리 및 정제 단계를 통해, 백봉채 총 플라보노이드 화합물의 추출률이 1.8%-2.0%에 달할 수 있도록 하고, 이는 종래 방법 중 백봉채 총 플라보노이드 화합물의 추출률과 비교하여 증가가 30% 이상에 달할 수 있고, 제조하여 얻은 백봉채 총 플라보노이드 추출물 중 루틴의 HPLC 순도는 80~85%에 달할 수 있다.
본 발명의 내용을 보다 쉽게 명확히 이해되도록 하기 위해, 이하에서는 본 발명의 구체적인 실시예 및 첨부 도면에 의해, 본 발명에 대해 더욱 상세하게 설명하며, 여기에서:
도 1은 본 발명의 실험예 1에서 용리액의 그래프이고;
도 2는 본 발명의 실시예 1에서 제조된 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 적외선 스펙트럼이고;
도 3은 본 발명의 실시예 1에서 루틴 기준 용액의 HPLC 크로마토그램이고;
도 4는 본 발명의 실시예 1에서 제조된 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 HPLC 크로마토그램이고;
도 5는 본 발명의 실험예 1에서 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간 조직병리학에 대한 영향이다(40×, HE 염색).
도 1은 본 발명의 실험예 1에서 용리액의 그래프이고;
도 2는 본 발명의 실시예 1에서 제조된 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 적외선 스펙트럼이고;
도 3은 본 발명의 실시예 1에서 루틴 기준 용액의 HPLC 크로마토그램이고;
도 4는 본 발명의 실시예 1에서 제조된 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 HPLC 크로마토그램이고;
도 5는 본 발명의 실험예 1에서 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간 조직병리학에 대한 영향이다(40×, HE 염색).
본 발명의 하기 실시예 및 실험예에서, 백봉채는 복건성 장저우시 룽원구 등과촌에서 수집하였고, 이는 백봉채로 동정되었다.
실시예 1
본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물은 하기 방법에 따라 제조되었다:
(1) 추출: 백봉채 100g을 취하여, 30배 중량의 물을 첨가하여 추출을 진행하고, 추출액의 pH 값을 5로 조절하여 반응액을 얻었다;
(2) 효소성 분해: 이어서 반응액에 25g 복합 효소(이 복합 효소는 중량비가 1 : 3 : 2인 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제로 구성됨)를 첨가하여 효소성 분해를 진행하고, 40℃ 강제 순환 반응을 3시간 동안 하고, 감압여과하고, 여과액을 수집하였다;
(3) 분리추출 및 농축: 여과액을 AB-8 거대 다공성 수지가 담긴 추출 탱크에 첨가하고, 30℃, 100rpm에서 12시간 동안 교반하고, 여과하고, AB-8 거대 다공성 수지의 중량을 기준으로, 흡착된 AB-8 거대 다공성 수지를 취하여 20배 중량의 부피 농도가 75%인 에탄올 용액을 첨가하고, 이어서 30℃, 120rpm에서 12시간 동안 교반하고, 여과하여, 분리추출액을 얻고, 분리추출액을 합하고, 분리추출액을 백봉채 총 플라보노이드의 농도가 0.5mg/mL가 될 때까지 감압 농축하여 농축액을 얻었다;
(4) 분리 및 정제: 농축액을 10000rpm으로 고속 원심 분리를 10분 동안 하고, 상청액을 취하여 거대 다공성 수지 D-101가 채워진 크로마토그래피 컬럼 내에 첨가하여 정지 흡착을 60분 동안 하고, 부피 농도가 75%인 에탄올 수용액을 사용하여 5m/h의 속도로 용리하고, 510nm 파장에서 흡광도를 측정하고, 흡광도 값을 세로축으로 하고 용리 시간을 가로축으로 하여 용리 곡선도(이 그래프는 도 1에 나타낸 바와 같음)를 그리고, 용리 곡선 중 흡수 피크 범위 내의 용리액을 수집하고, 농축하고, 동결 건조하여 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 얻었다.
계산에 의하면, 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 화합물의 추출률은 2.0%이다.
도 1에서 알 수 있듯이, 용리액은 340분에 뚜렷한 흡수 피크가 나타나고, 피크 형태는 비교적 단일이며, 이는 용리액 중의 플라보노이드가 상대적으로 비교적 순수하다는 것을 설명한다.
A. 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물은 하기 방법에 따라 적외선 스펙트럼 감정을 진행하였다:
일정 질량의 화건 루틴 표준품을 취하고, 1:100으로 화건 브롬화 칼륨을 첨가하고, 분쇄를 거쳐 고체 정제로 제조되었고, 푸리에 적외선 분광광도계를 사용하여 스캔 범위 4000-400cm-1, 해상도 4 및 스캔 횟수 4인 조건에서 적외선 스펙트럼을 제도하고; 정제된 백배천규 추출물의 적외선 스펙트럼을 동일한 방식으로 제도하고, 대비 감정하였다. 결과는 도 2에 나타낸 바와 같다.
도 2에서 알 수 있듯이, 루틴 표준품 및 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 적외선 스펙트럼은 각각 3685.455~3018.177cm-1 정도에서 모두 넓고 강한 흡수 피크를 나타내었고, 이는 -OH의 신축 진동 피크이며, 페놀릭 하이드록실기 또는 당의 하이드록실기의 존재를 나타내고, 수가 비교적 많다; 2914.036cm-1에서 약한 흡수 피크가 나타났고, 이는 탄소-수소 결합의 신축 진동 피크이며, 포화 탄소에 수소가 비교적 적음을 설명한다; 1654.694cm-1에서 C=O의 신축 진동에서 강한 피크가 나타났고, 둘의 위치 및 피크 형태는 기본적으로 동일하여, 추출물이 플라보노이드류 물질임을 설명한다; 1371.88, 1362.89 cm-1에서 하이드록실기의 굽힘 진동 피크가 나타났다; 804.80, 810.56cm-1에서 벤젠 고리의 오르토 수소에 의한 흡수 피크가 나타났다; 1010.07~696.62cm-1에서 벤젠 고리 상에 치환기 위치에 의한 흡수 피크가 나타났으나, 피크 위치가 다른데, 이는 추출물과 루틴의 하이드록실기 치환 위치가 다르다는 것을 설명한다; 이들에 따르면, 추출물 중에 하이드록실기, 카르보닐기 및 상이한 위치에 치환된 벤젠 고리 등 관능기를 함유하고, 특징적인 흡수 피크는 기본적으로 동일함을 나타낸다. 따라서, 추출물이 플라보노이드류 화합물임을 확정할 수 있다.
B. 하기 방법에 따라 액체 크로마토그래피를 통해 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물 중의 루틴의 함량을 분석하였다:
B1. 액체 크로마토그래피 조건의 확정
액체 크로마토그래피 조건: 가드 컬럼: Eclipse XDB-C18 AnalyticalGuard Column (4.6Х12.5mm, 5μm) :
ZOR BZX Eclipse XDB-C18 (4.6Х150mm, 5μm); 유속: 0.5mL/분; 컬럼 온도: 35 ℃; 검측 파장: 368nm, 254nm, 210nm; 샘플 주입 부피: 10μL; 이동상: 0.03% 포름산 수용액(A), 아세토니트릴(B); 구배 용리 절차는 다음과 같다: 0~10분, 20% B; 10~12분, 20%~24% B; 12~20분, 24% B; 20~25분, 24%~30% B; 25~48분, 30% B.
B2. 기준 용액의 세팅
정확하게 칭량하여 루틴 0.001g을 취하고, 1mL 메탄올에 용해시키고, 1mg/mL의 단일 기준 용액을 제조하였다. 일회용 필터를 사용하여 여과하고, 나중에 사용하기 위해 작은 시험관에 넣었다.
B3. 측정
기준 용액 및 시험 용액(실시예 1에서 제조한 백봉채 총 플라보노이드 추출물을, 농도가 1μg/μL인 메탄올 용액으로 조제함)을 정밀하게 흡인하고, 액체 크로마토그래피 검측 조건에 따라 각각 검측 분석을 진행하였다.
기준 용액의 HPLC 크로마토그램은 도 3에 나타낸 바와 같고, 시험 용액의 HPLC 크로마토그램은 도 4에 나타낸 바와 같다.
도 3에서 알 수 있듯이, 루틴 기준 용액은 10분 내에 완전히 분리될 수 있고, 루틴은 본 실험의 크로마토그래피 조건에서, 크로마토그래피 기준선이 기본적으로 평평하고, 크로마토그래피 피크는 꼬리끌림현상이 없음을 나타내며, 불순물도 간섭이 없고 피크가 비교적 빨랐으며, 그 체류시간은 2.745분이다.
도 4에서, 면적 표준화 방법을 통한 계산으로부터 알 수 있듯이, 백봉채 추출물 중 루틴의 함량은 81.29%이다.
실시예 2
본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물은 하기 방법에 따라 제조되었다:
(1) 추출: 백봉채 100g을 취하여, 20배 중량의 물을 첨가하여 추출을 진행하고, 묽은 수산화 나트륨 용액을 사용하여 추출액의 pH 값을 8로 조절하여 반응액을 얻었다;
(2) 효소성 분해: 이어서 반응액에 20g 복합 효소(이 복합 효소는 중량비가 0.5 : 5 : 1인 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제로 구성됨)를 첨가하여 효소성 분해를 진행하고, 30℃ 강제 순환 반응을 4시간 동안 하고, 감압여과하고, 여과액을 수집하였다;
(3) 분리추출 및 농축: 여과액을 DM-130 거대 다공성 수지가 담긴 추출 탱크에 첨가하고, 30℃, 80rpm에서 24시간 동안 교반하고, 여과하고, DM-130 거대 다공성 수지의 중량을 기준으로, 흡착된 DM-130 거대 다공성 수지를 취하여 10배 중량의 부피 농도가 95%인 에탄올 용액을 첨가하고, 이어서 30℃, 80rpm에서 24시간 동안 교반하고, 여과하여, 분리추출액을 얻고, 분리추출액을 합하고, 분리추출액을 백봉채 총 플라보노이드의 농도가 0.5mg/mL가 될 때까지 감압 농축하여 농축액을 얻었다;
(4) 분리 및 정제: 농축액을 6000rpm으로 고속 원심 분리를 8분 동안 하고, 상청액을 취하여 거대 다공성 수지 HP-21이 채워진 크로마토그래피 컬럼 내에 첨가하여 정지 흡착을 60분 동안 하고, 부피 농도가 80%인 에탄올 수용액을 사용하여 3m/h의 속도로 용리하고, 510nm 파장에서 흡광도를 측정하고, 흡광도 값을 세로축으로 하고 용리 시간을 가로축으로 하여 용리 곡선도를 그리고, 용리 곡선 중 흡수 피크 범위 내의 용리액을 수집하고, 농축하고, 동결 건조하여 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 얻었다.
계산에 의하면, 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 화합물의 추출률은 1.82%이다.
실시예 1에서 "B 항목"에 따라 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물 중의 루틴을 측정하였다. 측정 분석을 통해 알 수 있듯이, HPLC 차트에서, 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물 중의 루틴 함량은 80%이다.
실시예 3
본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물은 하기 방법에 따라 제조되었다:
(1) 추출: 백봉채 100g을 취하여, 60배 중량의 물을 첨가하여 추출을 진행하고, 묽은 염산을 사용하여 추출액의 pH 값을 4로 조절하여 반응액을 얻었다:
(2) 효소성 분해: 이어서 반응액에 32g 복합 효소(이 복합 효소는 중량비가 1.5 : 2 : 3인 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제로 구성됨)를 첨가하여 효소성 분해를 진행하고, 50℃ 강제 순환 반응을 1시간 동안 하고, 감압여과하고, 여과액을 수집하였다;
(3) 분리추출 및 농축: 여과액을 ZH-01거대 다공성 수지가 담긴 추출 탱크에 첨가하고, 30℃, 150rpm에서 6시간 동안 교반하고, 여과하고, ZH-01거대 다공성 수지의 중량을 기준으로, 흡착된 ZH-01거대 다공성 수지를 취하여 30배 중량의 부피 농도가 70%인 에탄올 용액을 첨가하고, 이어서 30℃, 150rpm에서 6시간 동안 교반하고, 여과하여, 분리추출액을 얻고, 분리추출액을 합하고, 분리추출액을 백봉채 총 플라보노이드의 농도가 0.5mg/mL가 될 때까지 감압 농축하여 농축액을 얻었다;
(4) 분리 및 정제: 농축액을 8000rpm으로 고속 원심 분리를 5분 동안 하고, 상청액을 취하여 거대 다공성 수지 XAD-3가 채워진 크로마토그래피 컬럼 내에 첨가하여 정지 흡착을 60분 동안 하고, 부피 농도가 70%인 에탄올 수용액을 사용하여 15m/h의 속도로 용리하고, 510nm 파장에서 흡광도를 측정하고, 흡광도 값을 세로축으로 하고 용리 시간을 가로축으로 하여 용리 곡선도를 그리고, 용리 곡선 중 흡수 피크 범위 내의 용리액을 수집하고, 농축하고, 동결 건조하여 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 얻었다.
계산에 의하면, 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 화합물의 추출률은 1.91%이다.
실시예 1에서 "B 항목"에 따라 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물 중의 루틴을 측정하였다. 측정 분석을 통해 알 수 있듯이, HPLC 차트에서, 본 실시예의 백봉채 총 플라보노이드 추출물 중의 루틴 함량은 85%이다.
실험예 1 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 비알코올성 지방간 래트에 대한 치료 효과 연구
1. 실험 목적
백봉채 총 플라보노이드 추출물의 고지방 사료로 유도된 비알코올성 지방간(NAFLD) 모델 래트에 대한 치료 효과를 연구하였다.
2. 재료 및 방법
2.1 실험 동물
건강한 SPF 수컷 Spague-Dawlay (SD) 래트 62 마리, 체중 210±10g를 Shanghai SIPPR-BK laboratory animal Co., Ltd.에서 제공하였다(인증서 번호: 2007000531494, 허가증 번호: SCXK (상하이) 2007-0005).
2.2 시험 약물 및 실험 시약
실시예 1에서 제조한 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 시험 약물로 하여, 고, 중 및 저 각 그룹에 사용 직전에, 증류수를 사용하여 희석한 후 투여하고, 여기에서 3가지 용량은 각각 저 용량 6mg/10mL, 중 용량 12mg/10mL, 고 용량 24mg/10mL 이다.
총 트리글리세리드(TG), 총 콜레스테롤(TC), 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT), 아스파르테이트 트랜스퍼라제(AST) 고밀도 지질단백질(HDL-C) 및 저밀도 지질단백질(LDL-C) 시약 키트는 Nanjing Jiancheng Engineering Institute에서 구입하였고; 고지방 사료(돼지기름 10%, 콜레스테롤 2%, 돼지 담즙 염 0.7%, 기본 사료 87.3%)는 푸저우 민후 주치 동물 서비스 센터에서 제공하였고; 일반 사료는 복건 중의대학 실험 동물 센터에서 제공하였다.
2.3 실험 기구
전자 저울(Shanghai Ohaus Instrument Co., Ltd.), BX51T-PHD-J11 현미경(일본 OLYMPUS사), 저속 원심분리기(미국 Thermo사), 생물 조직 파라핀 매립기(Hubei Xiaogan Yaguang Medical Electronic Technology Co., Ltd.), 생물 조직 자동 탈수기(Yaguang Medical Electronic Technology Co., Ltd.), 전자동 파라핀 마이크로톰(독일 Leica Instruments Co., Ltd.), BS-120 전자동 생화학 분석기(Shenzhen Mindray Biomedical Electronics Co., Ltd.).
3. 실험 방법
3.1 동물 그룹화 및 모델 구축
SPF SD 수컷 래트 62마리를 선택하고, 적응 사육 1주일 후, 체중에 따라 무작위로 2개의 그룹으로 나누었으며, 각각 정상 대조 그룹(16 마리) 및 고지방 그룹(46 마리)이었다. 정상 대조 그룹은 기본 사료를 주어 사육하고, 고지방 그룹은 고지방 사료로 사육하였고, 동물은 자유롭게 먹고, 음수 하였으며, 명암을 12시간마다 전환하였고, 일주일에 1회 체중을 측정하였다.
실험 6주 후 각각 정상 대조 그룹과 고지방 식이 그룹에서 무작위로 6마리를 선택하여 희생하였고, 간을 취하여 조직병리학적 절편으로 하였다; 간 조직병리학적 관찰을 하였고, 결과에 따르면, 모델 그룹 래트의 간 지방이 심각해지고, 단위 면적 당 지방이 이미 2/3를 초과하였고, 간 조직은 미만성 수포성 중증도 지방증을 나타내었고, 간 세포의 점상 괴사와 간 조직의 경미한 섬유화가 증식하였으며, 이는 비알코올성 지방간 모델 구축이 성공하였음을 나타낸다.
모델 확정을 성공한 후, 고지방 그룹에 남아있는 40마리 래트를 무작위로 모델 대조 그룹, 백봉채 총 플라보노이드 추출물 저 용량 그룹, 백봉채 총 플라보노이드 추출물 중 용량 그룹 및 백봉채 총 플라보노이드 추출물 고 용량 그룹으로, 각 그룹당 10마리로 나누었다. 제7주부터 시작하여, 빈 대조 그룹 및 모델 그룹은 생리식염수를 강제로 먹인 것 외에, 나머지 각 그룹 래트에게는 상이한 용량의 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 주었고, (저 용량 그룹에게는 6mg/10mL의 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 주었고, 중 용량 그룹에게는 12mg/10mL의 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 주었고, 고 용량 그룹에게는 24mg/10mL의 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 주었다. 제10주 말에 밤새 12시간 동안 금식시키고, 다음날 펜토바르비탈 40mg/kg을 복강 내 마취한 후, 복부 대동맥 방법으로 혈액을 취하고, 3000r/분으로 15분 동안 원심분리하고, 혈청을 분리하고, 시험을 위해 -80℃ 냉장고에 보관하였다.
3.2 실험 데이터 관찰 및 검측
실험 과정 중, 래트 활동성, 모발 광택, 식욕 및 사망 등의 상황을 관찰하고, 매주 체중을 측정하고 기록하였다. 간 및 내장 지방패드(fat pad)를 적출하고, 각 그룹 래트의 간의 대체적인 형태를 칭량하고 촬영 관찰한 후, 간 우엽 부분을 취하여 4% 파라포름알데히드 용액을 이용하여 고정하고, 통상적인 파라핀에 매립하여, 병리학적 절편에 사용하고, 통상적인 HE 염색을 하고, 광학 현미경 관찰하고 중국 간 질환 협회의 지방간 및 알코올성 간 질환 연구팀이 제정한 NAFLD 진단 기준을 참조하여 조직 지방증, 염증 및 괴사 정도를 평가하였다. 전자동 생화학 분석기로 혈청 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT), 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제(ASL), 콜레스테롤(TC), 트리글리세리드(TG), 고밀도 지질단백질(HDL-C) 및 저밀도 지질단백질(LDL-C)의 함량을 측정하였다.
4. 실험 데이터 처리
모든 실험 데이터는 모두 SPSS18.0 소프트웨어 패키지를 사용하여 분석을 진행하였고, 결과는 평균±표준편차(
±S)를 사용하여 표시하였고, 여러 그룹 데이터 간의 비교는 단일요인변수 분석을 사용하였고, 두 그룹 데이터 간의 비교는 t 테스트를 채용하였으며; 계수 데이터는 순위합검정을 사용하였다. P<0.05는 유의한 차이를 나타낸다.
5. 실험 결과
5.1 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간의 대체적인 형태에 대한 영향
정상 대조 그룹 래트의 간 외관은 선홍색을 나타냈고, 크기가 정상이고, 형상이 규칙적이고, 질감이 부드럽고, 표면이 매끄러웠다; 모델 그룹 래트의 간 부피는 뚜렷이 확대되었고, 유백색을 나타냈고, 가장자리가 무디고 두꺼웠고, 표면에 미만성 미세과립형 융기가 있었고, 절단 표면은 기름지고, 질감은 비교적 무르고, 국부에 황백색 변성이 있었다; 백봉채 총 플라보노이드 추출물 각 용량 그룹은 간 부피가 정상보다 약간 증가하였고, 색깔은 모델 그룹보다 붉은 편이었고, 정상색에 가까웠고, 절단 표면은 뚜렷한 기름기가 없었다.
5.2 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간 조직병리학에 대한 영향
백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간 조직병리학에 대한 영향은 도 5에 나타낸 바와 같다.
도 5에서 알 수 있듯이, 정상 대조 그룹 래트의 간 소엽 구조는 완전하고, 세포 윤곽이 뚜렷하고, 중앙 정맥이 크고 벽이 얇으며, 간세포줄은 방사형 배열을 나타냈고, 간 세포 지방증과 염증 세포 침윤은 없었다; 모델 그룹 간 조직의 세포질 내에 광범위하게 미만분포된 큰 지방공포를 볼 수 있고, 간 세포 부피는 증가하고, 간세포줄 배열은 무질서하고, 간 시누소이드(liver sinusoid)는 비좁고, 세포 핵은 한쪽으로 모였으며, 병변은 중앙 정맥 주위에서 가장 뚜렷하고, 염증 세포 침윤이 있고, 간 소엽까지 연루시키고, 주로 수포성 지방증이다; 백봉채 총 플라보노이드 추출물 각 용량 그룹 래트의 간 세포 지방증 수량과 정도는 모델 그룹에 비해 뚜렷이 감경되었고, 고배율 현미경 하에서만 간 세포에 작은 공포 형태 변화가 있다는 걸 볼 수 있었다.
5.3 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간 중량과 내장 지방패드에 대한 영향
백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간 중량과 내장 지방패드에 대한 영향은 표 1에 나타낸 바와 같다.
[표 1] 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 간 중량과 내장 지방패드에 대한 영향(n=10, 
±s)
비고: 대조 그룹과 비교하여, # P＜0.05，## P＜0.01; 모델 그룹과 비교하여, * P＜0.05
표 1에서 알 수 있듯이, 모델 그룹 래트의 간 중량은 정상 대조 그룹에 비해 확연히 높았으며, 차이는 통계적으로 유의하였다(P<0.01); 백봉채 총 플라보노이드 추출물 각 용량 그룹과 모델 그룹의 차이는 모두 통계적으로 유의하였다(P<0.05); 모델 그룹 래트 내장 지방패드(신장 주위 및 부고환)는 정상 대조 그룹 중량과 비교하여 확연히 높았고, 백봉채 각 용량 그룹은 모두 간 중량을 뚜렷이 감경시킬 수 있고, 내장 지방패드 중량을 감경시키고, 차이는 통계적으로 유의하였으나(P<0.05), 내장 지방패드 중량의 측면에서 각 실험 그룹 간에 통계적으로 유의한 차이는 없었다(P>0.05).
5.4 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 혈청 생화학 지표에 대한 영향
백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 혈청 생화학 지표에 대한 영향은 표 2-4에 나타낸 바와 같다.
[표 2] 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 혈청 TG 및 TC에 대한 영향(n=10, 
±s)
비고: 대조 그룹과 비교하여, #P＜0.01; 모델 그룹과 비교하여, *P＜0.05
[표 3] 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 혈청 ALT 및 AST에 대한 영향(n=10, 
±s)
비고: 대조 그룹과 비교하여, #P＜0.05; 모델 그룹과 비교하여, *P＜0.05
[표 4] 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 NAFLD 래트 HDL-C 및 LDL-C 함량에 대한 영향(n=10, 
±s)
비고: 대조 그룹과 비교하여, #P＜0.05; 모델 그룹과 비교하여, *P＜0.05
표 2-3에서 알 수 있듯이, 모델 그룹 래트의 혈청 TG, TC, ALT 및 AST 함량은 대조 그룹 보다 유의하게 높았다(P<0.05); 백봉채 총 플라보노이드 추출물 각 용량 그룹 래트의 혈청 TG, TC, ALT 및 AST 함량은 모두 모델 그룹 보다 유의하게 낮았다(P<0.05).
표 4에서 볼 수 있듯이, 대조 그룹과 비교하여, 모델 그룹 래트의 LDL-C는 유의하게 상승하였고, 반면 HDL-C는 감소가 뚜렷하였으며, 모두 통계적으로 유의했다(P<0.05); 백봉채 총 플라보노이드 추출물 각 용량 그룹의 HDL-C는 모델 그룹과 비교하여 뚜렷한 통계학적 차이가 없었고, 백봉채 총 플라보노이드 추출물 고 및 중 용량 그룹의 LDL-C는 모델 그룹과 비교하여 뚜렷하게 감소하였다(P<0.05).
6. 실험 결론
백봉채 총 플라보노이드 추출물은 비알코올성 지방간에 대해 비교적 우수한 치료 효과가 있으며, 비알코올성 지방간 래트의 혈액 지질 장애 및 지방증을 현저히 개선시킬 수 있다.
명백히, 상술한 실시예는 단지 명확히 설명하기 위해 예를 든 것일 뿐이며, 실시 방식에 대한 한정이 결코 아니다. 당업자는 상술한 설명에 기초하여 기타 상이한 형태의 변경 또는 수정을 더 할 수 있다. 여기에서는 모든 실시 방식에 대해 열거할 필요도 없고 그럴 방법도 없다. 그러나, 이로부터 도출된 자명한 변경 또는 수정은 여전히 본 발명의 보호 범위 내에 있다.
Claims (10)
- 중량 퍼센트 함량으로 80~85%의 루틴(rutin)을 함유하는 것을 특징으로 하는 백봉채(Gynura formosana Kitam.) 총 플라보노이드 추출물.
- 하기 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제1항의 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법:
(1) 추출: 백봉채를 취하여 추출 용매를 첨가하여 추출을 진행하고, 추출액의 pH 값을 4-8로 조절하여 반응액을 얻는 단계;
(2) 효소성 분해: 이어서 반응액에 복합 효소를 첨가하여 효소성 분해를 진행하고, 30-50℃ 강제 순환 반응을 1-4시간 동안 하고, 감압여과하고, 여과액을 수집하는 단계;
(3) 분리추출 및 농축: 여과액을 거대 다공성 수지 A를 사용하여 분리추출을 진행하고, 분리추출액을 합하고, 분리추출액을 농축시켜 농축액을 얻는 단계;
(4) 분리 및 정제: 농축액을 원심 분리하고, 상청액을 취하여 거대 다공성 수지 B를 사용하여 분리 정제하고, 510 nm 파장에서 흡광도를 측정하고, 용리액을 수집하고, 농축 및 건조하여 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 얻는 단계.
- 제2항에 있어서,
상기 효소성 분해 단계에서, 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제로 구성된 복합 효소를 채용하여 효소성 분해를 진행하고;
상기 복합 효소와 상기 백봉채의 중량비는 1 : 5 ~ 1 : 3인 것을 특징으로 하는, 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법.
- 제2항 또는 제3항에 있어서,
상기 복합 효소에서, 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제 이들 세 가지의 중량비는 (0.5-1.5) : (2-5) : (1-3)인 것을 특징으로 하는, 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법.
- 제4항에 있어서,
상기 복합 효소에서, 파파인, 셀룰라아제 및 펙티나아제 이들 세 가지의 중량비는 1 : 3 : 2인 것을 특징으로 하는, 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법.
- 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 거대 다공성 수지 A는 AB-8, DM-130, HZ841, ZH-00, ZH-01, ZH-02, ZH-03, CAD-40, CAD-45 및 BS-30 중 적어도 1종으로부터 선택되고;
상기 거대 다공성 수지 B는 D-101, D-140, D-141, XAD-3, XAD-4, HP-20, HP-21, LD-605 및 LSA-10 중 적어도 1종으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법.
- 제2항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 추출 단계에서, 추출 용매는 물이고, 상기 백봉채와 상기 물의 중량비는 1 : (20-60)인 것을 특징으로 하는, 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법.
- 제2항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 분리 및 정제 단계에서, 용리 용매는 부피 농도가 70-80%인 에탄올 수용액이고, 용리 속도는 3-15m/h이고;
상기 농축액에서, 백봉채 총 플라보노이드의 농도는 0.5mg/mL인 것을 특징으로 하는, 백봉채 총 플라보노이드 추출물의 제조 방법.
- 제1항의 백봉채 총 플라보노이드 추출물, 또는 제2항 내지 제8항 중 어느 한 항의 제조 방법에 의해 제조하여 얻은 백봉채 총 플라보노이드 추출물을 활성 성분으로 하여, 통상적인 방법에 따라, 통상적인 보조 물질을 첨가하여 제조된 임상적으로 허용 가능한 정제, 캡슐제, 가루제, 합제, 환제, 과립제, 시럽제, 접착패치, 좌제, 에어로졸, 연고제 또는 주사제인 것을 특징으로 하는 약물 제제.
- 제1항의 백봉채 총 플라보노이드 추출물, 제2항 내지 제8항 중 어느 한 항의 제조 방법에 의해 제조하여 얻은 백봉채 총 플라보노이드 추출물, 또는 제9항의 약물 제제의 비알코올성 지방간을 치료하기 위한 약품 또는 건강기능식품의 제조에서의 응용.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710840946.2 | 2017-09-18 | ||
| CN201710840946.2A CN107582587A (zh) | 2017-09-18 | 2017-09-18 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗非酒精性脂肪肝的用途 |
| PCT/CN2018/101167 WO2019052309A1 (zh) | 2017-09-18 | 2018-08-17 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗非酒精性脂肪肝的用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20200055767A true KR20200055767A (ko) | 2020-05-21 |
Family
ID=61048352
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020207011230A KR20200055767A (ko) | 2017-09-18 | 2018-08-17 | 백봉채 총 플라보노이드 추출물 및 그의 제조 방법과 비알코올성 지방간을 치료하기 위한 용도 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11266704B2 (ko) |
| JP (1) | JP2020537686A (ko) |
| KR (1) | KR20200055767A (ko) |
| CN (1) | CN107582587A (ko) |
| TW (1) | TWI789427B (ko) |
| WO (1) | WO2019052309A1 (ko) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107582588A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-16 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗酒精性脂肪肝的用途 |
| CN107582589A (zh) | 2017-09-18 | 2018-01-16 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗高尿酸血症的用途 |
| CN107582587A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-16 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗非酒精性脂肪肝的用途 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20000019717A (ko) * | 1998-09-15 | 2000-04-15 | 박호군 | 루틴 및 쿼세틴을 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간 질환의예방 및 치료용 조성물 |
| CN101336949B (zh) * | 2008-08-21 | 2010-12-08 | 中国食品发酵工业研究院 | 从白子菜中提取多糖和黄酮的方法 |
| CN101953866A (zh) * | 2010-08-25 | 2011-01-26 | 中国人民解放军南京军区福州总医院 | 一种白背三七总黄酮的制备方法及应用 |
| CN104151380A (zh) * | 2014-06-22 | 2014-11-19 | 北京安德益源生物科技有限公司 | 一种高纯度芦丁的制备方法 |
| CN104173458B (zh) | 2014-08-27 | 2016-04-06 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种具有防治高尿酸血症作用的中药组合物及其制备方法 |
| CN107582588A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-16 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗酒精性脂肪肝的用途 |
| CN107582589A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-16 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗高尿酸血症的用途 |
| CN107582587A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-16 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗非酒精性脂肪肝的用途 |
| CN107582590A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-16 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与治疗急性咽炎的用途 |
| CN107625800A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-01-26 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种白凤菜总黄酮提取物及其制备方法与抗炎镇痛的用途 |
-
2017
- 2017-09-18 CN CN201710840946.2A patent/CN107582587A/zh active Pending
-
2018
- 2018-08-17 KR KR1020207011230A patent/KR20200055767A/ko not_active Application Discontinuation
- 2018-08-17 WO PCT/CN2018/101167 patent/WO2019052309A1/zh active Application Filing
- 2018-08-17 JP JP2020537272A patent/JP2020537686A/ja active Pending
- 2018-09-18 TW TW107132765A patent/TWI789427B/zh active
-
2020
- 2020-03-17 US US16/821,334 patent/US11266704B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TWI789427B (zh) | 2023-01-11 |
| WO2019052309A1 (zh) | 2019-03-21 |
| CN107582587A (zh) | 2018-01-16 |
| US20200215141A1 (en) | 2020-07-09 |
| JP2020537686A (ja) | 2020-12-24 |
| US11266704B2 (en) | 2022-03-08 |
| TW201919679A (zh) | 2019-06-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11298390B2 (en) | Total flavonoids extract of Gynura formosana Kitam., preparation method therefor and use thereof for treating hyperuricemia | |
| US11266704B2 (en) | Total flavonoid extract from Gynura formosana Kitam., preparation method thereof, and use of same in treating non-alcoholic fatty liver disease | |
| AU2008323968B2 (en) | Extract of fraxinus excelsior seeds and therapeutic applications therefor | |
| CN101343225A (zh) | 高纯度二咖啡酰奎宁酸类化合物的制备方法 | |
| US11185566B2 (en) | Total flavonoid extract from Gynura formosana Kitam., preparation method thereof, and use of same in preparing drug or health product related to alcoholic fatty liver disease | |
| CN111166731A (zh) | 来源于粘委陵菜的贝壳杉烷型二萜类化合物在抑制脂肪蓄积中的应用 | |
| JP6599592B2 (ja) | α−グルコシダーゼ活性抑制剤 | |
| JP5622222B2 (ja) | 血脂降下組成物及びその使用 | |
| CN107349244B (zh) | 丙二酰基人参皂苷的提取方法 | |
| JP7303582B2 (ja) | インディアングーズベリー抽出物と大麦若葉抽出物との複合物（ｉｂ複合物）を有効成分として含む肥満及び／または糖尿を伴うメタボリックシンドロームの予防、改善治療用組成物 | |
| CN111166735B (zh) | 邻苯二甲酸-双-(2-乙基庚基)酯在抑制脂肪蓄积中的应用 | |
| CN109620857B (zh) | 花生衣活性组分及其在制备抗肥胖抗糖尿病药物中的应用 | |
| CN108164574B (zh) | 小花清风藤中的一种化合物及其制备方法与应用 | |
| CN103288889B (zh) | 蒽醌衍生物及其药物组合物与其在制药中的应用 | |
| CN107513092B (zh) | 一种丙二酰基人参皂苷Rb1的制备方法及其医用用途 | |
| CN105777686A (zh) | 酒石酸麦角胺的药物组合物及其在生物医药中的应用 | |
| CN109985206A (zh) | 用于防治酒精性肝损伤的组合物 | |
| Molla et al. | Phytochemical and pharmacological activities of pogostemon strigosus benth | |
| KR101252467B1 (ko) | 크레이스토카릭스 오페르쿠라투스로부터 얻은 피피에이알-감마 작용제 및 이를 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물 | |
| US20230218701A1 (en) | Pharmaceutical composition containing saururus chinensis fraction, and preparation method thereof | |
| CN115806490A (zh) | 具有激活ampk磷酸化的酚性杂萜化合物、药物组合物、制备方法以及应用 | |
| CN118059090A (zh) | 金不换甲醚在制备治疗银屑病药物中的应用 | |
| CN116509918A (zh) | 三种天然产物组合在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用 | |
| CN115429790A (zh) | 异黄酮类化合物在制备预防或治疗酒精性肝损伤或解酒保肝的药物中的用途 | |
| CN101450105B (zh) | 一种当药制剂及其质量控制方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E601 | Decision to refuse application |