KR20170029106A - 유산균 발효 허브 추출물을 함유하는 치약 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 발효 허브 추출물을 함유하는 치약 조성물에 관한 것으로 유산균으로 발효시킨 발효 허브 추출물의 구강 병원성세균에 대한 항균활성 및 치태형성억제 기능성을 확인함으로써 이를 성분으로 함유하여 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선기능성을 갖는 치약조성물을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.

Description

유산균 발효 허브 추출물을 함유하는 치약 조성물{Dentifrice composition comprising extracts of fermented herb}

본 발명은 유산균 발효 허브 추출물을 함유하는 치약 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 허브를 유산균으로 발효시켜 추출한 발효 허브 추출물을 함유하는 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선기능성 치약조성물을 제공하는데 있다.

구강에서 발생하는 통상적인 질환으로는 치아에서 발생하는 충치, 치주질환과 구취가 있다. 충치는 입안에 서식하는 세균 기타 미생물이 당분을 분해하면서 생성하는 산(acid)에 의해 치아의 표면의 범랑질을 손상시키는 질환이다. 또 치주질환은 음식물 중 당질에 달라붙어 치아에 이끼처럼 연하게 단단히 부착된 세균과 그 세균의 대사산물인 독성물질로 이우어진 치태와 치면의 세균막이 석회화된 물질인 치석으로 인해 잇몸 및 치주에 염증이 생기는 질환으로 잇몸에 염증이 생기는 치은염과 치주에 염증이 생기는 치주염으로 나뉜다. 상기 충치와 치주질환은 자각증상 없이 진행되며 가끔 잇몸에서 피가 나거나 구취가 나는 것 이외에는 치통 등을 일으키지 않아 치주염 및 충치가 진행되고 있어도 이를 알지 못하는 경우가 일반적이며 환자가 불편을 느낄때 쯤이면 이미 치료하기 곤란한 정도로 치주조직 및 치아가 손상되어 자연적으로 원상복구가 불가능한 경우가 일반적이다. 또 구취란 입을 통하여 나오는 호기의 냄새로서 일반적으로 주위의 사람이 불쾌하게 느끼는 정도의 냄새를 말한다. 이러한 구취는 여러가지 요인이 있으나 일반적으로 타액중의 단백질, 음식물 찌꺼기 등이 구강 내에서 세균 기타 미생물에 의해 분해되고 이때 생성된 아미노산이 아미노 효소등에 의해 분해되어 악취를 유발하는 물질을 생성하게 된다.

상기 충치, 치주질환 및 구취를 발생시키는 병원성 미생물로 여러 종들이 알려져 있으나 그 중 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)와 포피로모나스 진지바리스(Porphyromonas gingivalis)가 대표적인 것으로 알려져있다(Liliemark W.F., Crit. Rev. Oral Bio. Med., 7:180∼198,1996). 상기 미생물들은 균체 외 또는 표면으로부터 글루코실 트랜스퍼라아제(Glucosyltransferase, GTase)라는 효소를 분비함으로써 음식물 내 수쿠로즈(sucrose)를 기질로 하여 글루코즈(glucose)와 프락토즈(fructose)를 생성하고, 동시에 글루코즈의 중합체인 불용성 글루칸(insoluble glucan)을 치면에 형성하게 된다. 형성된 글루칸에 다른 미생물들이 치면에 부착하므로써 치면 세균막 즉, 치태(dental plaque)를 형성하게 된다. 이 치태 내에서 젖산균이 증식하여 프락토즈를 탄소원으로 젖산을 생성하고, 부착성 글루칸에 젖산이 포집 농축되고, 이렇게 농축된 고농도의 산은 치아의 구성성분인 인산칼슘 중 Ca₂+를 녹아내리게 하여 치아의 외막인 법랑질(enamel)을 용해시킴으로써 충치를 유발하게 된다(Sigmund, S.S., 등, J.Periodontol., 63:322-331, 1992). 또 구강 내 병원성 미생물은 치아 표면에 세균성 피막인 프라그를 형성하고, 프라그내에서 증식하는 젖산균으로부터 생성된 젖산이 고농도롤 축적됨으로써 치아의 칼슘 이온(Ca₂+)이소실된다. 이로 인해, 치아 외막 법랑질의 용해와 함께 충치가 유발되고 프라그로부터 유발된 독성 물질이치아와 잇몸 사이의 틈새(crevice)로 스며들어 세포내 염증 반응을 일으킴으로써 치은염, 치주염 등의 치주질환이 나타난다.

현재 충치, 치주질환 및 구취의 억제방법으로 스피라마이신(spiramycin), 반코마이신(vancomycin), 클로로헥시딘(chlorhexidine) 등의 항생물질을 이용하는 방법과 유기 또는 무기불소가 함유된 치약 및 구강청결제를 통하여 구강내 병원성 세균을 억제하는 방법이 있다. 그러나 항생물질을 이용하는 방법은 미생물이 내성을 갖게 되거나 설사, 구토 등의 부작용을 유발할 수 있는 단점이 있을 뿐만 아니라 이러한 항생물질의 남용으로 인해 구강 내 상재균들의 생육이 저해되는 문제점이 있다.

한편 치약은 치아의 표면을 칫솔질할 때 사용하는 의약부외품으로서 살균효과, 치간청정효과 및 미백목적으로 생활속에서 가장많이는 구강청결제품이다. 그러나 일반적으로 사용되는 치약조성물에는 연마제, 습윤제, 기포제, 감미제의 성분들과 유효성분으로 0.05~0.1중량%의 불소가 사용되고 있는데 최근 보고에 따르면 상기 불소는 충치예방에는 효과가 있을 수 있지만 장기적인 사용은 오히려 잇몸의 염증현상을 촉진시키는 부작용이 있다고 밝혀지고 있다.

따라서 화합물인 불소보다는 인체에 부작용이 적다고 알려진 천연물질을 유효성분으로 하는 충치, 치주질환 및 구취를 예방 및 개선기능성 치약조성물이 요구되고 있다.

허브식물은 꽃과 종자, 줄기, 잎, 뿌리 등이 인간에게 유용하게 사용되는 초본식물로 예로부터 진통·진정 등의 치료나 방부 및 살충을 위한 약초로서 중요한 역할을 해왔으며 오늘날에는 인체에 대한 화학물질의 독성, 환경오염에 대한 우려 및 그 뛰어난 효능으로 인하여 더더욱 많은 주목을 받고 있는 천연소재이다.

로즈마리(Rosemary)는 꿀풀과의 다년생 상록 저목으로 보통 1미터이상 자란다. 좁고 가는 바늘 모양의 잎은 가죽처럼 질긴 성질을 가지고 있으며 윤기가 나고 특유의 강한 방향이 있으며 진초록색이다. 살균 소독 작용이 있어 고기를 보존시킬때 이용했고 병원이나 전염병이 유행 할때 많이 사용했다. 로즈마리는 기억력증진에 도움을 주고, 무기력 증세를 보일때 활기를 찾아 주며 두통이나 편두통을 없애준다. 또한 비만 억제 효과가 있으며 피부를 재생시켜 늘어진 조직에 활력을 주고 부종과 비듬의 발생을 억제하며 모발성장을 촉진한다. 로즈마리는 요리, 얼굴 세안용, 저혈압일때 혈압을 높여 주는 데 사용한다.

라벤더(Lavender)는 허브 가운데 가장 알려진 품종이다. 방향유 성분이 잎과 꽃 표면이 빛나는 것처럼 보이기 때문에 관상용 허브로 인기가 높은데 개화기 때 그 화려함이 더욱 빛을 발한다. 고품질의 라벤더는 여러 용도로 쓰이는데 특히 꽃,잎, 줄기등 식물 전체에 방향이 있어 관상용은 물론이고 포푸리나 각종 미용재에 적합하다. 드라이 플라워는 오전중에 보라색을 띤 개화 전의 봉오리를 베어 통풍이 잘 되는 응달에 매달아 말린다. 관상용은 꽃이 진 뒤에 2마디 정도 남기고 베어낸다. 라벤더의 정유 성분으로 만든 화장수는 피부를 긴장, 완화시켜주며 말끔하고 촉촉하게 재생시켜 주는 세정 효과가 있기 때문에 거친 피부에 효과가 크다. 또 라벤더 향은 정신 안정의 효과가 있어 베개에 넣어 안면을 위해 이용되었다. 라벤더로 차를 끓여 마시면 진정작용에 효과가 있고 진통과 두통을 없애 주며 기분을 전환시켜 숙면에 도움을 준다.

세이지(Sage)는 그리스, 로마시대부터 만병 통치약으로 이용되어 왔다. 관상, 향료 채취, 약, 요리, 염색 등 다양하게 이용되고 강장, 진정, 소화, 살균 효과 등이 있으며 고기나 생선의 지방분을 중화시켜 냄새를 제거하므로 요리에 매우 긴요하게 쓰인다. 세이지의 용도는 다양하지만 한 번에 다량으로 사용하지 않아야 한다. 세이지 차는 기분을 맑게 하고 흥분을 진정시키며 구강염이나 잇몸의 출혈과 구취 방지에 효과가 있으나 효력이 강하므로 연속하여 마시는 것은 피한다. 또한 세이지는 소화 촉진, 해독 작용, 위약, 입욕제는 피로 회복 효과, 거담, 구풍, 이뇨, 구충, 방부 작용으로도 사용하며 냉증.갱년기장애에 큰 효과가 있다.

바실(Basil)은 식물전체에서 짙은 향기를 풍기며 일년생 식물로써 줄기는 둔한 사각형으로 들깨줄기와 유사하게 생겼으며 아래줄기는 목질화하며 녹색 또는 자색을 띤다. 상기 바실은 달콤하면서 강한 향기를 가진 허브식물로 향신료 및 차로 많이 사용되며 편두통, 항균작용, 구취 및 소화기능촉진에 큰 효과가 있다.

민트(Mint)는 원산지는 유럽이고, 레몬밤과 함께 밀원 식물의 대표적인 허브라고 할 수 있다. 꿀풀과의 다년초로 생육이 가장 튼튼한 허브 가운데 하나이며 잎을 스치기만 하여도 상쾌하고 청량감이 느껴지는 강한 박하향이 향기가 난다. 보관할 때는 향기가 제일 강한 6, 7월에 줄기 밑동을 베어 응달에서 말린다. 청량감이 특징인 민트류의 허브들은 특히 육류 요리의 소스를 만드는데 많이 쓰이며 산뜻한 맛과 향으로 야채나 과일 샐러드에 뿌려서 사용하는 비니거나 탄산수로 만든 음료,칵테일 등의 풍미를 내는 데 이용되고 있다. 민트류는 종류에 다라 다소 차이는 있지만 살균, 소화 촉진, 건위 작용, 구내 소취제, 치약, 위약등의 원료로 쓰인다. 피부염이나 가려움증에도 약효가 있고 화장실에 놓아 두면 악취 대신 박하향이 오랫동안 지속되며 강력한 살균작용까지 한다. 스피아민트라고 불리는 녹색 박하는 페퍼민트와 함께 요리에 많이 이용되는데 페퍼민트보다 향이 달콤하며 피부에 매우 좋다.

케모마일(Chamomile)은 수많은 허브 중에서도 약초로서 옛부터 가장 잘 알려진 허브의 하나이다. 유럽과 인도, 북아프리카가에 널리 자생하며 국화과에 속한다. 향기는 달콤새콤한 사과향이 나는데 봄이 되면 자그마한 꽃이 여기저기에서 일시에 개화하여 달콤한 향기가 가득 퍼져 나간다. 건조한 꽃은 미용 효과가 뛰어나 목욕제로 이용한다. 마사지 오일에 소량을 넣으면 운동후 피로 회복에 좋다. 유럽에서는 탕약이라고 하면 캐모마일을 연상할 정도인데 "마트리카리아"라는 속명도자궁에 효과가 있어서 생긴 것이다. 저염증, 방부, 구충약, 경련을 가라앉히는데 좋다. 또, 냉증이 있는 사람에게는 몸을 보온하는 효과가 있다. 개화한 뒤 2,3일 째가 꽃의 향기가 좋고 맛이 있다. 향은 마음이 초조하고 화가나거나 심한 정신적 긴장을 완화시킨다. 작고 흰 꽃 5, 6개를 뜨거운 물에 넣으면 달콤한 사과향의 신선한 차를 즐길 수 있다 위통이 있을 때 매일 마시면 좋다.

오레가노(Oregano)는 소엽과의 다년초로서 원산지는 유럽이다. 이탈리아, 멕시코요리에 잘 이용되며 와일드(야생) 마조람이라는 별명대로 야생적인 향기가 있다. 라틴계의 요리나 토마토와 잘 어울린다. 소화촉진, 강장효과가 있으며 차나 입욕제, 건조한 꽃으로 이용한다.

레몬밤(lemonbalm)은 내한성의 다년초로 옆병과 털이 있으며 레몬향이 강한 허브식물이다. 상기 레몬밤은 차로 마시면 소화를 돕고 레몬밤의 침출액은 발한작용이 있어 감기에 좋다고 알려져 있다.

스테비아(stevia)는 남아메리카가 원산지로 하천이나 습지대 주변에서 잘 자라며 줄기 마디에 잎이 달리며 잎겨드랑이에서 가지가 돋는것을 특징으로 하는 허브식물이다. 상기 스테비아는 예전부터 감미료로 차를 만들어 마시거나 껌 대용으로하여 이용되었으며 최근 청걍음료의 감미료로 많이 사용한다.

본 발명의 선행기술로는 구강 통증 개선과 구강항균 및 신경안정 효과를 가지는 천연향균 치약 조성물이 국내 등록특허 제 10-1194016호에 공지되어 있으나 이는 SiO₃ 를 유효성분으로 함유하여 구강 통증 개선 및 신경안정효과를 가지는 치약조성물에 관한 것이다. 또 잇몸에 좋은 한방 발효 추출물을 함유하는 구강용 조성물이 국내 공개특허 제 10-2011-0060238호에 공지되어 있으나 이는 감국, 마치현, 석창포 등의 한방원료를 효모로 발효시킨 추출물을 유효성분으로 함유하여 잇몸 질환 예방기능성이 우수한 구강용 조성물에 관한 것이다. 한편 허브추출물 함유 치약이 국내 공개특허 제 10-2009-0130892호에 공지되어 있으나 이는 허브 중 마늘과 쑥추출물을 유효성분으로 함유하는 구강세균 항균기능성 치약에 관한 것이다.

따라서 상기 특허문헌 어디에도 허브를 유산균으로 발효시켜 얻은 발효 허브 추출물을 함유하는 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선기능성 치약조성물에 대하여는 공지된 바 없다.

따라서 본 발명의 목적은 유산균 발효 허브 추출물을 함유하는 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선 기능성이 증진된 치약조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 상기목적은 (a)허브를 건조분말화한 다음 고온살균처리하여 발효원료를 준비하는 단계와; (b)상기 단계에서 얻은 발효원료에 유산균을 접종하고 온도 35~37℃, pH7, 교반속도 100~120rpm의 발효조건에서 3~5일간 발효시켜 발효물을 얻는 단계와; (c)상기 단계에서 얻은 발효물을 원심분리하여 발효액을 얻는 단계와; (d)상기 단계에서 얻은 발효액을 추출용매로 열수추출하여 발효 추출물을 얻는 단계와; (e)상기 단계에서 얻은 발효 추출물을 여과지로 여과시켜 본 발명 발효 허브 추출물을 제조하는 단계로 이루어지고, 상기 본 발명 발효 허브 추출물의 항균활성 및 치태형성억제 기능성과 치은염 및 구취 개선기능성을 비발효 허브 추출물 및 종래의 치약조성물과 비교평가하는 단계를 통하여 달성하였다.

본 발명은 유산균으로 발효시킨 발효 허브 추출물의 구강 병원성세균에 대한 항균활성 및 치태형성억제 기능성을 확인함으로써 이를 성분으로 함유하여 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선기능성을 갖는 치약조성물을 제공하는 효과가 있다.

도 1은 본 발명 발효 허브 추출액 제조방법을 도식화한 그림이다.

본 발명 발효 허브 추출물의 제조방법은 다음과 같은 단계로 구성되는 것을 특징으로 한다(도1). 본 발명의 목적을 달성하기에 적합한 허브는 로즈마리, 라벤더, 세이지, 바실, 민트, 캐모마일, 오레가노, 레몬밤 및 스테비아로 이루어지는 그룹에서 선택되는 어느 하나 이상의 조합이다.

제1단계: 원료 준비

허브를 건조분말화 한 허브분말과 동량의 증류수를 발효조에 넣고 100℃에서 5분간 살균처리한 후 37℃까지 온도를 낮추어 발효원료를 준비한다.

제2단계: 식물성 유산균 발효

유산균 배양배지에서 액상배양한 식물성 유산균을 상기 제1단계의 발효원료에 접종하고 온도 35~37℃, pH 7, 교반속도 100~120rpm의 발효조건에서 3~5일간 발효시킨다.

제3단계: 발효 허브 추출물 제조

제2단계에서 얻은 발효물을 원심분리하여 침전물과 균체를 제거하고 발효액만 회수한다. 상기 발효액에 추출용매로 동량의 증류수를 첨가하고 이를 냉각콘덴서가 달린 추출기에서 온도 80℃로 6시간 가열하여 증류되어 나오는 증류액을 회수하여 발효추출물을 얻는다. 상기에서 얻은 발효추출물은 300메쉬 여과지로 1차 여과하고 1주일간 실온에서 방치한 후 150mm 여과지로 2차 여과시켜 본 발명 발효 허브 추출물을 제조하였다.

상기 제 1단계의 허브는 로즈마리, 라벤더, 세이지, 바실, 민트, 캐모마일, 오레가노, 레몬밤 및 스테비아 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 사용할 수 있으며 가장 바람직하게는 4종류 이상의 허브를 동량(w/w)으로 혼합하여 사용하는 것이다.

상기 제 2단계의 식물성 유산균은 락토바실러스 속이면 제한 없이 사용할 수 있으나 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028), 락토바실러스 사케이(L. sakei, KFCC 11383P), 락토바실러스 랙티스(L. lactice, KCCM 11159P)중 어느하나를 선택하는 것이 바람직하다. 상기 '식물성 유산균'이란 유산균이 분리된 원재료가 식물인 것을 특징으로 하는 유산균이다.

또한 상기 제 2단계의 유산균 배양배지는 MRS(Man Rogosa Sharpe), 락토오스, YM(Yeast and Mold), M17 또는 ART(Asparagine Enrichment Broth)배지를 사용할수 있으나 MRS배지를 사용하는 것이 가장 바람직하다.

또한 상기 제 2단계의 유산균주의 접종량은 제 1단계의 허브식물 1kg 대비 1x10⁸~5x10⁸cell을 접종한다.

상기 제 3 단계의 추출용매는 증류수 및/또는 유기용매를 사용할 수 있으나 가장 바람직하기로는 증류수를 사용하는 것이다. 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 저금알코올, 프로필렌글리콜, 초산에틸, 부틸렌글리콜, 글리세린, 에틸아세티이트, 헥산, 메틸렌클로라이드중 어느 하나 이상을 사용할 수 있다.

또한 제 3단계의 발효액과 추출용매의 혼합비는 중량기준으로 50:50 ~ 25:75인것이 바람직하다.

상기 본 발명에 따라 제조된 발효허브추출물은 충치, 잇몸염증, 구취 예방 및 개선용 치약조성물로 이용될 수 있다.

본 발명 치약조성물은 통상적으로 사용하는 치약조성물의 제조방법으로 제조하되 조성물 전체 중량 100중량부에 대하여 본 발명 발효 허브 추출물 0.1~10중량부를 첨가하여 제조한다.

상기 치약조성물은 본 발명 발효 허브 추출물 이외에 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 계면활성제, 연마제, 안정제, 결합제, 기포제, 향료, 색소, 향균제, 산화방지제, 방부제, 습윤제, 점증제, 무기염류, 미백제, 유화제, 완충제, 감미제, 가용화제, 조직강화제, 구강세정제등의 첨가제를 더 포함할수 있다. 상기 성분은 당업계에서 통상적으로 사용되는 성분들이면 충분하겨 또한 상기 성분의 사용량은 당업자의 선택에 의하여 본 발명이 목적하는 효과를 저해하지 않는 범위 내에서 조절될 수 있다. 상기 첨가제에 있어서 더 자세하게는 제2인산칼슘, 탄산칼슘, 피로인산칼슘.황산칼슘, 메타인산나트륨, 시리카류, 알미늄실리케이트, 수산화알미늄 등의 연마제(보통 20~60% 사용), 카르복시메칠 셀룰로오즈, 하이드록시에틸 셀룰로오즈, 알긴한염, 카라기난, 아라비아껌, 폴리비닐알콜 등의 점증제(1.5~5%), 폴리에틸렌 글리콜류, 솔비톨, 글리세린, 프로필렌 글리콜 등의 점조제와 라우릴 황산나트륨, 소디움라우릴 사르코시네이트 등의 계면활성제, 멘톨 및 민트류를 비롯한 향료와 사카린, 스테비오사이드 등의 감미제와 방부제, 불화나트륨, 모노플로로인산나트륨, 불화제 1주석, 소금, 아란토인, 비타민류,사급암모늄화합물 등 치약에 통상 사용되고 있는 각종 유효성분 등을 물과 같이 혼합하여 본 발명 치약조성물로 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예와 도면에 의거 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것에 불과하며 본 발명의 권리범위를 한정하는 것으로 의도되지는 않는다.

본 발명 발효 허브 추출물의 허브는 청주 근교의 상수허브랜드 농장에서 채취한 로즈마리, 라벤더, 세이지, 바실, 페퍼민트, 캐모마일, 오레가노, 레몬밤, 스테비아를 각각 건조하고 분쇄하여 건조분말로 사용하였다. 또한 유산균은 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028)을 한국미생물보존센터에서 분양받아 사용하였으며 유산균 배양배지는 MRS배지(Difco^TM MRS)를 BD에서 구매하였다.

실시예1. 발효 로즈마리 추출물 제조

로즈마리분말 900 g과 동량의 증류수 900 g을 발효조에 넣고 100℃에서 5분간 살균처리한 후 37℃ 되도록 방치하였다. 그 다음 이와별도로 MRS 배지에서 액상배양한 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028) 200 mL(1 X 10⁸cell)을 상기 발효조에 투입하고 온도 37℃, pH 7, 교반속도 100 rpm의 발효조건으로 3일간 발효시켰다. 상기단계에서 얻은 발효물을 원심분리한 후 침전물과 균체를 제거하여 발효액을 얻었다. 상기단계에서 얻은 발효액에 증류수 900 g을 첨가하고 이를 냉각 콘덴서가 달린 추출기에 넣고 온도 80℃로 6시간 가열한 후 증류되어 나오는 증류액 800 L를 회수하였다. 상기에서 얻은 발효추출물은 300메쉬 여과지로 1차 여과하고 1주일간 실온에서 방치한 후 150mm 여과지로 2차 여과시켜 본 발명 발효 로즈마리 추출물을 제조하였다.

실시예2. 발효 라벤더 추출물 제조

로즈마리분말 대신 라벤더분말를 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 라벤더 추출물을 제조하였다.

실시예3. 발효 세이지 추출물 제조

로즈마리분말 대신 세이지분말을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 세이지 추출물을 제조하였다.

실시예4. 발효 바실 추출물 제조

로즈마리분말 대신 바실분말을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 바실 추출물을 제조하였다.

실시예5. 발효 민트 추출물 제조

로즈마리분말 대신 민트분말을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 민트 추출물을 제조하였다.

실시예6. 발효 캐모마일 추출물 제조

로즈마리분말 대신 캐모마일분말을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 캐모마일 추출물을 제조하였다.

실시예7. 발효 오레가노 추출물 제조

로즈마리분말 대신 오레가노분말을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 오레가노 추출물을 제조하였다.

실시예8. 발효 레몬밤 추출물 제조

로즈마리분말 대신 레몬밤분말을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 레몬반 추출물을 제조하였다.

실시예9. 발효 스테비아 추출물 제조

로즈마리분말 대신 스테비아분말을 사용하여 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 본 발명 발효 스테비아 추출물을 제조하였다.

실시예10. 혼합 발효 허브 추출물 제조

상기 실시예 1과 달리 혼합 발효 허브 추출물은 하기와 같이 제조하였다. 로즈마리분말 100 g, 라벤더분말 100 g, 세이지분말 100 g, 바실분말 100 g, 페퍼민트분말 100 g, 캐모마일분말 100 g, 오레가노분말 100 g, 레몬밤분말 100 g 및 스테비아분말 100 g을 혼합한 허브 혼합분말 900 g을 사용하여 혼합 발효 허브 추출물 800 L를 제조하였다. 구체적인 제조방법은 상기 실시예 1 같다.

비교예1. 혼합 허브 추출물의 제조

로즈마리분말 100g, 라벤더분말 100g, 세이지분말 100g, 바실분말 100g, 페퍼민트분말 100g, 캐모마일분말 100g, 오레가노분말 100g, 레몬밤분말 100g 및 스테비아분말 100g을 혼합한 허브 혼합분말 900g과 동량의 증류수 900g을 냉각 콘덴서가 달린 추출기에 넣고 온도 80℃로 6시간 가열한 후 증류되어 나오는 증류액을 회수하여 발효 허브 추출물을 얻었다.

실험예1. 항균활성 측정

본 발명 실시예1 내지 실시예10의 발효 허브 추출물의 구강 병원성 균주(표1)에 대한 항균활성을 측정하였다. 상기 구강 병원성 균주는 스트렙토코커스 뮤탄스균(Streptococcus mutans, ATCC 31383), 박테로이데스 불가투스균(Bacteroides vulgatus, ATCC 25285)을 사용하였다.

상기 실시예1 및 비교예1의 추출물 1mL을 BHI 액상배지에 일정농도 간격으로 첨가한 후 구강 병원성 균주 20uL(2x10⁵ CFU/mL)를 접종하여 1주일간 배양하여 탁도를 나타내지 않는 균 성장 최소저해농도를 측정하였다. 대조군으로 알코올계 구강세정제를 사용하였다.

구분	최소저해농도(ppm)
	스트렙토코커스 뮤탄스균	박테로이데스 불가투스균
대조군	480	365
비교예1	230	310
실시예1	60	85
실시예2	75	95
실시예3	60	80
실시예4	85	100
실시예5	85	105
실시예6	70	95
실시예7	80	90
실시예8	95	100
실시예9	95	95
실시예10	45	65

표1 과 같이, 스트렙토코커스 뮤탄스균과 박테로이데스 불가투스균의 성장 최소저해농도는 본 발명 실시예1 내지 실시예10의 발효허브추출물이 비교예1 및 대조군에 비해 월등히 낮게 나타났으며 그중 실시예 10의 추출물이 그 수치가 가장 낮았다.

이를통해 본 발명 실시예1 내지 실시예 10의 발효허브추출물이 구강병원성균주에 대해 뛰어난 항균력이 있음을 확인하였다.

실험예2. 치태형성 저해능 실험

본 발명 실시예1 내지 실시예10의 발효허브추출물의 치태형성 저해능을 알아보기 위해 스트렙토코커스 뮤탄스(S. mutans)의 치태형성 저해능시험(Y. Rukayadi and J.-K. Hwang (2006). Lett Appl Microbiol. 42(4):400-4)을 진행하였다. 대조군은 알코올계 구강세정제를 사용하였다. 먼저 96-웰 마이크로타이터 플레이트에 1% 돼지 위 뮤신(type Ⅲ; Sigma)이 포함되어있는 부착 완충액(10mmol/ℓKPO,50mmol/ℓKCL, 1mmol/ℓCaCl2, 0.1mmol/ℓMgCl2, pH 7.0)를 200㎕씩 첨가한 후 실온에서 서서히 교반하면서 4시간 배양시킨 후 첨가된 용액을 모두 제거하고 건조시켰다. 건조 후, 3%(w/v)의 자당이 포함된 BHIS 175㎕를 첨가하고 스트렙토코커스 뮤탄스 25㎕와 실시예 1 내지 실시예 10, 비교예1 치약조성물 및 대조군 50㎕를 함께 접종하였다. 이후, 37℃에서 30시간 배양시키고 각각 배양 0시간, 30시간째 각 웰에 25㎕ 1%(w/v) 크리스탈 바이올렛 용액을 첨가하고 15분 염색시킨 다음 200㎕ 증류수로 세척해준 후 건조시켰다. 염색 후, 스트렙토코커스 뮤탄스 성장으로 인한 치태 형성이 저해되었는지 확인하기 위하여 595㎚에서 흡광도를 측정하였으며 동일한 3번의 실험값의 평균 흡광도를 표2에 수치화하였다.

구 분		흡광도(595nm)
		0시간	30시간
BHIS		0.082	0.072
BHIS+S. mutans		0.084	0.538
BHIS + S. mutans + 추출물	대조군	0.081	0.378
	비교예1	0.079	0.356
	실시예1	0.087	0.107
	실시예2	0.083	0.137
	실시예3	0.081	0.124
	실시예4	0.078	0.092
	실시예5	0.083	0.134
	실시예6	0.079	0.128
	실시예7	0.086	0.134
	실시예8	0.075	0.118
	실시예9	0.086	0.126
	실시예10	0.076	0.092

표2 와 같이, 치태형성저해능을 확인할 수 있는 흡광도 수치는 스트렙토코커스 뮤탄스균 배양 30시간 후 본 발명 실시예 1 내지 실시예 10의 발효허브추출물이 비교예 1 및 대조군에 비해 월등히 낮게 나타났다. 이를통해 본 발명 실시예1 내지 실시예 10의 발효 허브 추출물이 치태형성 개선기능성이 우수함을 확인하였다.

실시예 11. 본 발명 발효 로즈마리 추출물을 함유하는 치약 조성물

통상적으로 사용되어지는 치약조성물인 불화나트륨, 침강실리카, 소르비톨액, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 삭카린나트륨, 파라옥시황산나트륨, 향료, 라우릴황산나트륨 및 정제수에 추가로 유효성분으로서 상기 실시예 1의 발효 로즈마리 추출물을 하기 표 3의 조성비로 첨가하여 본 발명 발효 로즈마리를 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

성 분	조성비(중량%)
발효 로즈마리 추출물(실시예1)	1.00
불화나트륨	0.30
침강실리카	15.00
소르비톨액	50.00
카르복시메칠셀룰로오스나트륨	1.00
삭카린나트륨	0.25
파라옥시황산나트륨	0.20
향료	1.00
라우릴황산나트륨	2.00
정제수	To 100

실시예 12. 본 발명 발효 라벤더 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 2의 발효 라벤더 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 라벤더 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 13. 본 발명 발효 세이지 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 3의 발효 세이지 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 세이지 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 14. 본 발명 발효 바실 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 4의 발효 바실 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 바실 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 15. 본 발명 발효 민트 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 5의 발효 민트 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 민트 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 16. 본 발명 발효 캐모마일 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 6의 발효 캐모마일 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 캐모마일 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 17. 본 발명 발효 오레가노 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 7의 발효 오레가노 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 오레가노 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 18. 본 발명 발효 레몬밤 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 8의 발효 레몬밤 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 레몬밤 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 19. 본 발명 발효 스테비아 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 9의 발효 스테비아 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 발효 스테비아 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

실시예 20. 본 발명 혼합 발효 허브 추출물을 함유하는 치약 조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 실시예 10의 혼합 발효 허브 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 본 발명 혼합 발효 허브 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

비교예 2. 혼합 허브 추출물을 함유하는 치약조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 비교예 1의 혼합 허브 추출물을 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 혼합 허브 추출물을 함유하는 치약 조성물을 제조하였다.

비교예 3. 일반 치약조성물

발효 로즈마리 추출물 대신 정제수를 사용하여 상기 실시예 11과 동일한 조성비로 종래에 통상적으로 사용되고 있는 치약 조성물을 제조하였다.

실험예 3. 치은염 및 구취 개선효과 확인

본 발명 실시예 11 내지 실시예 20의 발효 허브 추출물을 함유하는 치약조성물의 구강관련 질환 개선효과를 확인하기 위해서 성인남자 36명을 대상으로 치은염, 구취 지수확인 실험을 진행하였다.

치은염 지수 측정실험

치은염 지수는 하기와 같이 통상적으로 많이 사용되는 방법인 Gingival index(Leo, 1963)로 평가하였다.

0 : 염증없음

1 : 경미한 치은염 : 경미한 염증, 경미한 색조변화, 가벼운 부종, 치주탐침에 출혈 없음

2 : 중등 치은염 : 발적, 부종, 치은의 색조변화, 치주탐침에 의한 출혈이 있는 경우

3 : 고등 치은염 : 상당한 발적과 부종, 궤양, 계속적인 출혈

성인남자 36명을 초기에 치은염 지수를 평가하고 3명을 치은염 지수가 비슷하게 한조로 묶어 총 12그룹으로 나누었다. 상기 12그룹에 각각 실시예11 내지 실시예20, 비교예 2 및 비교예 3의 치약조성물로 구강을 1일 3회 헹구도록 한 후 3주, 6주 경과 한 시점에서 치음염 지수를 평가하였다. 실험기간중에는 항생제 복용과 실험에 영향을 미칠 수 있는 구강진료수취를 금하였다.

치약조성물	치은염 지수
	사용전	사용 3주 후	사용 6주 후
비교예 2	0.87	0.66	0.51
비교예 3	0.89	0.78	0.69
실시예 11	0.88	0.46	0.28
실시예 12	0.91	0.51	0.32
실시예 13	0.88	0.42	0.31
실시예 14	0.92	0.41	0.27
실시예 15	0.91	0.53	0.26
실시예 16	0.87	0.56	0.34
실시예 17	0.88	0.52	0.36
실시예 18	0.86	0.48	0.31
실시예 19	0.91	0.46	0.32
실시예 20	0.94	0.36	0.17

표 4 과 같이, 치약조성물 사용 후 치은염지수는 본 발명 실시예11 내지 실시예 20의 치약조성물이 0.17 ~ 0.36, 비교예2 및 비교예3의 치약조성물이 0.51, 0.69를 나타내었다. 이 결과로 본 발명 발효 허브 추출물을 함유하는 실시예11 내지 실시예 20의 치약조성물이 비교예 2 및 비교예3의 치약조성물보다 치은염 개선효과가 뛰어난 것을 확인하였다.

구취 실험

성인남자 36명에게 24시간동안 일체의 양치질을 중지시킨 후 할리메타(halimeter, Oral chroma, JDS CO.)로 구취점수를 측정하고 3명을 구취 평균수치가 비슷하게 한 조로 묶어 총 12그룹으로 나누었다. 상기 12그룹에 각각 실시예11 내지 실시예20, 비교예 2 및 비교예 3의 치약조성물로 구강을 1일 3회 헹구도록 한 후 5일, 10일 경과 한 시점에서 구취점수를 할리메터로 측정하였다.

치약조성물	할리메터 측정수치
	사용전	사용 5일 후	사용 10일 후
비교예 2	237	163	124
비교예 3	241	178	142
실시예 11	234	137	92
실시예 12	238	141	89
실시예 13	242	145	94
실시예 14	237	138	84
실시예 15	246	134	92
실시예 16	238	142	101
실시예 17	242	138	94
실시예 18	239	134	98
실시예 19	237	142	94
실시예 20	243	117	75

표 5 와 같이, 치약조성물 사용 후 구취 점수개선정도는 본 발명 실시예11 내지 실시예 20의 치약조성물이 비교예2 및 비교예3의 치약조성물과 비교해 구취개선효과가 월등히 높음을 나타냈다.

이상 설명한 바와같이 본 발명은 허브를 식물성유산균과 발효시켜 추출한 발효 허브 추출물을 함유하여 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선기능성을 갖는 치약조성물을 제공하는 뛰어난 효과가 있으므로 의약외품산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (5)

1. (a)허브를 건조분말화한 다음 고온살균처리하여 발효원료를 준비하는 단계와; (b)상기 단계에서 얻은 발효원료에 식물성유산균을 접종하고 발효하여 발효물을 얻는 단계와; (c)상기 단계에서 얻은 발효물을 원심분리하여 발효액을 얻는 단계와; (d)상기 단계에서 얻은 발효액을 추출용매로 추출하여 발효 추출물을 얻는 단계와; (e)상기 단계에서 얻은 발효 추출물을 여과지로 여과시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선 기능성 유산균 발효 허브 추출물 제조방법.
   
   
2. 제 1항에 있어서, 상기 (a)단계의 허브는 로즈마리, 라벤더, 세이지, 바실, 민트, 캐모마일, 오레가노, 레몬밤, 스테비아로 중에서 선택되는 어느 하나 이상임을 특징으로 하는 유산균 발효 허브 추출물 제조방법.
   
3. 제 1항에 있어서, 상기 (b)단계의 식물성유산균은 락토바실러스 플란타룸(L. plantarum, KFCC-11028), 락토바실러스 사케이(L. sakei, KFCC 11383P), 락토바실러스 랙티스(L. lactice, KCCM 11159P) 중에서 선택되는 어느 하나임을 특징으로 하는 유산균 발효 허브 추출물 제조방법.
4. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 하나의 방법으로 제조된 충치, 치주질환, 구취 예방 및 개선 기능성 유산균 발효 허브 추출물.
   
5. 제 4항의 유산균 발효 허브 추출물을 함유하는 치약조성물
   

Images