KR20150015492A - 생성 셀라인 인핸서 - Google Patents

생성 셀라인 인핸서 Download PDF

Info

Publication number
KR20150015492A
KR20150015492A KR1020147033930A KR20147033930A KR20150015492A KR 20150015492 A KR20150015492 A KR 20150015492A KR 1020147033930 A KR1020147033930 A KR 1020147033930A KR 20147033930 A KR20147033930 A KR 20147033930A KR 20150015492 A KR20150015492 A KR 20150015492A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
seq
polynucleotide
leu
ser
acid sequence
Prior art date
Application number
KR1020147033930A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102126210B1 (ko
Inventor
강 첸
데이리야 뷰라코프
디팔리 데쉬판드
Original Assignee
리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 filed Critical 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드
Priority to KR1020207017417A priority Critical patent/KR102346867B1/ko
Publication of KR20150015492A publication Critical patent/KR20150015492A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102126210B1 publication Critical patent/KR102126210B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
    • C07K14/4705—Regulators; Modulating activity stimulating, promoting or activating activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2477—Hemicellulases not provided in a preceding group
    • C12N9/2488—Mannanases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • C12N2015/8518—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic expressing industrially exogenous proteins, e.g. for pharmaceutical use, human insulin, blood factors, immunoglobulins, pseudoparticles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Cell Biology (AREA)

Abstract

본 발명은 유용한 다중-하위유닛 단백질의 수율을 향상시키기 위한 생성 세포에서의 EDEM2의 이소성 발현의 발견에 관한 것이다. 그러므로, 본 발명은 생성 셀라인, 예컨대 EDEM2를 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 함유하고 있는, 기본적인 포유류 생물약제학적 생성 세포-CHO 세포를 제공한다. 또한 본 발명에는 EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드뿐 아니라 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드를 모두 함유하는 생성 세포도 개시된다. 이들 셀라인에 의해 생성된 항체의 향상된 역가가 개시되며, 이들 세포에 의해 배양 중에 획득된 향상된 세포 밀도 또한 개시된다.

Description

생성 셀라인 인핸서{PRODUCTION CELL LINE ENHANCERS}
관련 출원과의 교차-참조
본 출원은 2012년 5월 29일에 출원된 미국 임시 특허 출원 번호 61/652,549의 35 U.S.C. §119(e)의 규정 하의 유익을 주장하며, 상기 출원은 본원에 그것의 전체 내용이 참조로 구체적으로 포함된다.
기술분야
본 발명은 다중-하위유닛 단백질의 향상된 생성을 위한 재조합 스트레스-반응 렉틴을 발현하는 세포 또는 세포들에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 EDEM2를 코드화하는 유전자를 함유하고 고역가로 항체를 생산하는 포유류 세포 및 그것으로부터 유도된 셀라인을 제공한다.
치료적으로 활성인 단백질의 제조는 분비 전에 적절한 접힘 및 프로세싱을 필요로 한다. 적절한 접힘은 특히 분비 전에 적절하게 조립되어야 하는 다수의 하위유닛으로 구성되는 단백질, 예컨대 항체와 관련된다. 진핵 세포는 단백질의 적절한 접힘과 분비 경로로부터 잘못 접혀진 단백질의 제거를 보장하는 시스템에 적응되어 왔다. 이 시스템은 풀린 단백질 반응(UPR) 경로로 불리며, 소포체(endoplasmic reticulum, ER)에서 잘못 접혀진 단백질의 축적에 의해 촉발된다.
UPR의 초기 사건은 전사 인자 Xbp1의 활성화인데, 그것은 계속해서 소포체 관련된 분해(ERAD) 경로의 한 구성원인 소포체 분해-증강 알파-만노시다제-유사 단백질 2(EDEM2)의 전사를 활성화시킨다. EDEM2는 잘못 접혀진 단백질의 제거를 촉진한다. ERAD 경로는 다음의 5 단계를 포함한다: (1) 기형 단백질의 샤프롱-중재된 인지; (2) EDEM2를 포함하는 역전위 기계 또는 E3-리가제로의 기형 단백질의 표적화; (3) 역전위의 개시; (4) 유비퀴틴화 및 추가의 역전위; 및 (5) 프로테오솜 표적화 및 분해.
항체는 두 개의 중쇄와 두 개의 경쇄를 포함하는 다중-하위유닛 단백질로, 그것은 적절하게 접혀지고 결합되어 기능적 이종사량체를 형성해야 한다. 기능성 항체 이종사량체의 수율 또는 역가를 향상시키기 위하여 중쇄 및 경쇄의 효과적이고 정확한 프로세싱이 어떻게든 향상되는 것이 요구된다.
본 출원인은 놀랍게도 단백질-제조 셀라인에서 EDEM2의 이소성(ectopic) 발현이 세포당 단백질의 평균 산출량을 증가시키고, 배지로 분비된 단백질의 역가를 증가시키며, 제조 셀라인의 통합된 세포 밀도를 증가시킨다는 것을 발견하였다.
그러므로 한 측면으로, 본 발명은 (a) 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드 및 (b) 다중-하위유닛 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 세포를 제공한다. 어떤 구체예에서, 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴은 EDEM2 단백질이고, 그것의 비-제한적인 실례는 아래의 표 1에 제시되며, 다중-하위유닛 단배질은 항체이다. 다른 구체예에서, 세포는 또한 XBP1의 활성 스플라이싱 형태를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유하고, 그것의 비-제한적인 실례는 아래의 표 2에 제시된다. 한 구체예에서, 세포는 포유류 세포, 예를 들면 생명제약의 제조에 사용된 CHO 세포이다.
다른 측면으로, 본 발명은 전술한 측면에서 기술된 세포로부터 유도된 셀라인을 제공한다. "...로부터 유도된"은 개별적인 세포로부터 클론적으로 유래되고 어떤 선택 품질, 예컨대 주어진 역가에서 활성 단백질을 생성하는 능력 또는 특정 밀도로 증식시키는 능력을 가지는 집단을 의미한다. 어떤 구체예에서, 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드 및 다중-하위유닛 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 은닉하는 세포로부터 유도된 셀라인은 배지의 리터당 적어도 3그람(g/L), 적어도 5g/L 또는 적어도 8g/L의 역가로 다중-하위유닛 단백질을 생성할 수 있다. 어떤 구체예에서, 셀라인은 본질적으로는 동일한 세포지만 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드가 없는 세포로부터 유도된 셀라인에 의해 얻어질 수 있는 통합된 세포 밀도보다 적어도 30% 더 큰, 적어도 50% 더 큰, 적어도 60% 더 큰 또는 적어도 90% 더 큰 통합된 세포 밀도(ICD)를 얻을 수 있다.
또 다른 측면으로, 본 발명은 구성성이고 어디에서나 발현되는 포유류 프로모터, 예컨대 유비퀴틴 C 프로모터에 작동가능하게 연결된(시스) EDEM2 단백질을 코드화하는 핵산 서열을 포함하는 분리된 또는 재조합 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 어떤 구체예에서, EDEM2 단백질은 SEQ ID NO:8의 아미노산 또는 SEQ ID NO:1 내지 7 중 어느 하나에 적어도 92% 동일한 아미노산 서열을 가진다. 어떤 구체예에서, 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함한다. 한 특정 구체예에서, 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:14의 핵산 서열로 구성되며; 다른 특정 구체예에서는 SEQ ID NP:15의 핵산 서열로 구성된다.
또 다른 측면으로, 본 발명은 구성성이고 어디에서나 발현되는 포유류 프로모터, 예컨대 유비퀴틴 C 프로모터에 작동가능하게 연결된(시스로) XBP1 단백질을 코드화하는 핵산 서열을 포함하는 분리된 또는 재조합 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 어떤 구체예에서, XBP1 단백질은 SEQ ID NO:13의 아미노산 또는 SEQ ID NO:9 내지 12 중 어느 하나에 적어도 86% 동일한 아미노산 서열을 가진다. 어떤 구체예에서, 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:18의 핵산 서열을 포함한다. 한 특정 구체예에서, 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:17의 핵산 서열로 구성된다.
또 다른 측면으로, 본 발명은 앞의 측면에서 기술된 것과 같은 EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드와, 다중-하위유닛 단백질, 예컨대 항체를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 세포를 제공한다. 어떤 구체예에서, 세포는 또한 전술한 측면에서 기술된 것과 같은, XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 한 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질은 항체이고, 그 항체의 중쇄는 SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하며, 항체의 경쇄는 SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함한다. 이 구체예 및 여러 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질의 각각의 폴리펩티드 하위유닛은 별도의 폴리뉴클레오티드에 의해 코드화된다. 그러므로, 예를 들어 항체를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드와 경쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드, 따라서 두 개의 하위유닛을 포함할 수 있다. 어떤 구체예에서, 세포는 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포이다.
한 구체예에서, 코드화된 다중-하위유닛 단백질은 SEQ ID NO:20의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 및 SEQ ID NO:22의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 가지는 항-GDF8 항체이다. 한 구체예에서, 항-GDF8 항체는 SEQ ID NO:19의 아미노산 서열을 가지는 중쇄 및 SEQ ID NO:21의 아미노산 서열을 가지는 경쇄를 포함한다. 한 구체예에서, 항-GDF8 항체의 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:23의 핵산 서열을 포함하고; 항-GDF8 항체의 경쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:25의 핵산 서열을 포함한다. 한 구체예에서, 항-GDF8 항체의 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:24의 핵산 서열로 구성되고; 항-GDF8 항체의 경쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:26의 핵산 서열로 구성된다.
다른 구체예에서, 코드화된 다중-하위유닛 단백질은 SEQ ID NO:28의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 및 SEQ ID NO:30의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 가지는 항-ANG2 항체이다. 한 구체예에서, 항-ANG2 항체는 SEQ ID NO:27의 아미노산 서열을 가지는 중쇄 및 SEQ ID NO:29의 아미노산 서열을 가지는 경쇄를 포함한다. 한 구체예에서, 항-ANG2 항체의 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:31의 핵산 서열을 포함하고; 항-ANG2 항체의 경쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:33의 핵산 서열을 포함한다. 한 구체예에서, 항-ANG2 항체의 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:32의 핵산 서열로 구성되고; 항-ANG2 항체의 경쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:34의 핵산 서열로 구성된다.
또 다른 구체예에서, 코드화된 다중-하위유닛 단백질은 SEQ ID NO:36의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열 및 SEQ ID NO:38의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 가지는 항-ANGPTL4 항체이다. 한 구체예에서, 항-ANGPTL4 항체는 SEQ ID NO:35의 아미노산 서열을 가지는 중쇄 및 SEQ ID NO:37의 아미노산 서열을 가지는 경쇄를 포함한다. 한 구체예에서, 항-ANGPTL4 항체의 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:39의 핵산 서열을 포함하고; 항-ANGPTL4 항체의 경쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:41의 핵산 서열을 포함한다. 한 구체예에서, 항-ANGPTL4 항체의 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:40의 핵산 서열로 구성되고; 항-ANGPTL4 항체의 경쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:42의 핵산 서열로 구성된다.
또 다른 측면으로, 본 발명은 배지에서 앞의 측면의 세포를 배양함으로써 다중-하위유닛 단백질을 제조하는 방법을 제공하는데, 이때 다중-하위유닛 단백질은 세포에서 합성되고 계속해서 배지로 분비된다. 어떤 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질은 항체, 예컨대 항-GDF8, 항-ANG2, 항-ANGPTL4 또는 SEQ ID NO:43 및 44의 중쇄 서열과 SEQ ID NO:45 및 46의 경쇄 서열을 가지는 항체이다. 어떤 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질은 적어도 3g/L, 적어도 5g/L, 적어도 6g/L 또는 적어도 8g/L의 역가를 얻는다. 어떤 구체예에서, 세포는 배지에서 증식하고, 약 ≥5×107 세포-일/mL, 약 ≥1×108 세포-일/mL 또는 약 ≥1.5×108 세포-일/mL의 통합된 세포 밀도를 수립한다.
또 다른 측면으로, 본 발명은 전술한 측면에서 기술된 방법에 따라 제조된 다중-하위유닛 단백질을 제공한다. 한 구체예에서, 제조된 단백질은 항체이다. 어떤 구체예에서, 항체는 SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄로 구성된다. 한 특정 구체예에서, 제조된 다중-하위유닛 단백질은 SEQ ID NO:20의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 SEQ ID NO:22의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 가지는 항-GDF8 항체이다. 다른 특정 구체예에서, 제조된 다중-하위유닛 단백질은 SEQ ID NO:28의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 SEQ ID NO:30의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 가지는 항-ANG2 항체이다. 또 다른 특정 구체예에서, 제조된 다중-하위유닛 단백질은 SEQ ID NO:36의 중쇄 가변 영역 아미노산 서열과 SEQ ID NO:38의 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 가지는 항-ANGPTL4 항체이다.
본 발명을 설명하기 전에, 본 발명은 기술되는 특정 방법 및 실험 조건에 제한되지 않으며, 그런 방법과 조건들은 달라질 수 있음이 인정되어야 한다. 또한 본원에서 사용된 용어는 단지 특별한 구체예를 설명할 목적에 대한 것이고, 본 발명의 범주는 첨부되는 청구범위에 의해서만 제한될 것이기 때문에 제한적인 것으로 의도되지 않아야 한다는 것이 인정되어야 한다.
다르게 규정되지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술적이고 과학적인 용어들은 본 발명이 속하는 해당 기술분야의 숙련자가 통상적으로 이해하는 것과 같은 의미를 가진다. 본원에서 사용되는 것과 같은 용어 "약"은 특별히 인용된 수치 또는 값의 범위와 관련하여 사용될 때, 그 값이 인용된 값으로부터 단지 1% 정도 달라질 수 있음을 의미한다. 예를 들어 본원에서 사용되는 것과 같은 표현 "약 100"은 99와 101 및 그 사이의 모든 값(예컨대 99.1, 99.2, 99.3, 99.4 등)을 포함한다.
비록 본원에 기술된 것과 유사하거나 동등한 어떠한 방법 및 재료든지 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 바람직한 방법 및 재료를 이제 기술하기로 한다. 본원에서 언급되는 모든 공개물은 그것의 전체 내용이 참조로 본원에 포함된다.
본원에서 사용되는 것과 같은 용어 "재조합 폴리뉴클레오티드"는 "분리된 폴리뉴클레오티드"와 상호교환적으로 사용되고, 유전자 공학 조작에 의해 유래된, 단일 가닥이거나 이중 가닥의 리보핵산 또는 데옥시리보핵산과 같은 핵산 중합체를 의미한다. 재조합 폴리뉴클레오티드는 원형 플라스미드이거나 시험관 내에서 또는 세포 내에서 에피솜으로서 존재하는 선형 구성물일 수 있다. 재조합 폴리뉴클레오티드는 더 큰 폴리뉴클레오티드 분자 또는 슈퍼분자 구조, 예컨대 선형 또는 원형 염색체 안에 통합된 구성물일 수 있다. 더 큰 폴리뉴클레오티드 분자 또는 슈퍼분자 구조는 세포 내에 있거나 세포의 핵 내에 있을 수 있다. 그러므로 재조합 폴리뉴클레오티드는 세포의 염색체 내에 통합될 수 있다.
본원에서 사용되는 것과 같은 용어 "스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴"은 만노스, 만노스의 유도체, 예컨대 만노스-6-포스페이트 또는 만노스 또는 만노스 유도체를 그것의 당질층에 발현하는 당단백질에 결합하거나 결합할 수 있고, 그것의 활성이 스트레스 동안 상향조절되는 단백질을 의미한다. 세포의 스트레스는 그 중에서도 굶주림, DNA 손상, 저산소증, 중독, 전단 스트레스 및 다른 기계적 스트레스, 종양 스트레스 및 소포체에서 잘못 접혀진 단백질의 축적을 포함한다. 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴의 예를 들면 EDEM 단백질 EDEM1, EDEM2 및 EDEM3, Yos 9, OS9 및 XTP3-B를 들 수 있다(Vembar and Brodsky, Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 9(12): 944-957, 2008, 및 거기에 인용된 참고문헌들 참조).
본원에서 사용되는 것과 같은 용어 "EDEM2"는 소포체 분해-증강 알파-만노시다제-유사 단백질의 어떠한 이종상동체, 상동체 또는 보존적으로 치환된 변이체를 의미한다. EDEM2 단백질은 일반적으로 해당 기술분야에서 소포체-관련 분해(ERAD)에 관련되고, Xbp-1에 의해 상향-조절되며 제거를 위해 칼넥신 주기로부터 잘못 접혀진 당단백질의 추출을 촉진하는 것으로 알려져 있다(Mast et al., Glycobiology 15(4):421-436, 2004; Olivari and Molinari, FEBS Lett. 581:3658-3664, 2007; Olivari et al., J. Biol. Chem. 280(4):2424-2428, 2005; 및 Vembar and Brodsky 2008 참조). 예시적인 EDEM2 서열을 아래의 표 1에 서열 목록과 교차 참조하여 나타낸다.
동물 SEQ ID NO: %동일성 사람 %동일성 마우스 %동일성 햄스터
마우스 1 93 100 96
쥐 2 94 98 96
햄스터 3 93 96 100
사람 4 100 93 93
침팬지 5 99 94 93
오랑우탄 6 97 92 92
제브라피시 7 69 70 69
공통 8 100 100 100
본원에서 사용되는 것과 같이, XBP1 또는 X-박스 결합 단백질 1로도 알려져 있는 용어 "Xbp1"은 Xbp1의 어떠한 이종상동체, 상동체 또는 보존적으로 치환된 변이체를 의미한다. Xbp1은 UPR의 전사 인자 및 기능적 요소이다. ER 스트레스는 (1) 계속해서 Xbp1 mRNA의 전사를 상향조절하는 전사 인자 ATF6과 (2) 전구체 Xbp1 mRNA의 스플라이싱을 중재하여 활성 Xbp1을 생성하는 ER 막 단백질 IRE1을 둘 다 활성화시킨다. 상기에서 언급된 것과 같이, 활성화된 Xbp1은 계속해서 EDEM2의 활성을 상향조절한다(Yoshida et al., Cell Structure and Function 31(2): 117-125, 2006; 및 Olivari, 2005 참조). 예시적인 Xbp1 아미노산 서열은 서열 목록과 교차-참조하여 표 2에 나타낸다.
동물 SEQ ID NO %동일성 사람 %동일성 마우스 %동일성 햄스터
마우스 9 86 100 92
햄스터 10 86 92 100
사람 11 100 86 86
제브라피시 12 47 47 48
공통 13 100 100 100
본원에서 사용되는 것과 같이, 용어 "항체"는 일반적으로, 4개의 폴리펩티드 사슬, 즉 이황화 결합에 의해 상호연결된 2개의 중쇄(H) 및 2개의 경쇄(L)를 포함하는 면역글로불린 분자뿐 아니라 그것의 다량체(예컨대 IgM)를 언급하는 것으로 의도되지만; 단지 중쇄만으로 구성된 면역글로불린 분자(즉 경쇄가 없음)도 또한 용어 "항체"의 정의 내에 포함된다. 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서는 HCVR 또는 VH로 약칭됨)과 중쇄 불변 영역을 포함한다. 중쇄 불변 영역은 세 개의 도메인, CH1, CH2 및 CH3를 포함한다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역(본원에서는 LCVR 및 VL로 약칭됨)과 경쇄 불변 영역을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인(CL1)을 포함한다. VH와 VL 영역은 나아가 프레임워크 영역(FR)으로 명명된 보다 보존된 영역이 사이에 끼어 있는 초가변성 영역, 이름하여 상보성 결정 영역(CDR)으로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 세 개의 CDR과 네 개의 FR로 구성되며, 아미노-말단으로부터 카복시-말단쪽으로 다음 순서로 배열된다:FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. "분리된 항체" 또는 "정제된 항체"는 실질적으로 다른 세포 물질 또는 화학물질이 없을 것이다.
용어 "특이적으로 결합하는" 등은 항체 또는 그것의 항원-결합 단편이 생리적 조건 하에서 상대적으로 안정한 항원과 복합체를 형성하는 것을 의미한다. 특이적 결합은 적어도 약 1×10-6M 또는 그 이상의 해리 상수를 특징으로 한다. 두 개의 분자가 특이적으로 결합하는 지를 측정하기 위한 방법은 해당 기술분야에 잘 알려져 있고, 예를 들면 평형 투석, 표면 플라스몬 공명 등을 포함한다. 그러나 (예를 들어) 사람 GDF8에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 다른 항원, 예컨대 다른 종으로부터의 F8 분자(이종상동체)에 대해 교차-반응성을 가질 수 있다.
다양한 항체가 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 은닉하는 세포에 의해 분비된 다중-하위유닛 단백질의 실례로서 사용된다. 그런 실례로는 항-GDF8, 항-ANG2 및 항-ANGPTL4 항체를 포함한다. 이들 및 유사한 항체는 각각 미국 특허 출원 번호 20110293630, 20110027286 및 20110159015에 기술되어 있다.
본원에서 사용되는 것과 같은 용어 "세포"는 DNA를 복제하고, RNA를 전사하며, 폴리펩티드를 번역하고 단백질을 분비할 수 있는 원핵 또는 진핵 세포를 말한다. 세포는 생물학적 제품의 상업적 제조에 사용된 동물 세포, 예컨대 곤충 세포(예컨대 Schneider 세포, Sf9 세포, Sf21 세포, Tn-368 세포, BTI-TN-5B1-4 세포; Jarvis, Methods Enzymol. 463:191-222, 2009; 및 Potter et al., Int. Rev. Immunol. 10(2-3):103-112, 1993) 및 포유류 세포(예컨대 CHO 또는 CHO-K1 세포, COS 또는 COS-7세포, HEK293 세포, PC12 세포, HeLa 세포, 하이브리도마 세포; Trill et al., Curr. Opin. Biotechnol. 6(5):553-560, 1995; Kipriyanov and Little, Mo. Biotechnol. 12(2):173-201, 1999)를 포함한다. 한 구체예에서, 세포는 기술된 UPR 경로 폴리뉴클레오티드를 함유하는 CHO-K1 세포이다. CHO-K1 세포의 설명에 대해서는 Kao et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 60:1275-1281, 1968을 참조한다.
본원에서 사용된 것과 같이, 용어 "프로모터"는 일반적으로 시스로(in cis) 단백질 코딩 서열의 위쪽에 위치하고, 단백질 코딩 서열의 전사를 촉진하는 유전자 서열을 의미한다. 프로모터는 조절되거나(발생 단계에서, 조직 특이적으로 또는 유도성(화학적, 온도)임) 또는 구성적으로 활성일 수 있다. 특정 구체예에서, 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 구성성 프로모터에 작동가능하게 연결된다. "작동가능하게 연결된"이란 단백질-코드화 폴리뉴클레오티드가 프로모터의 3-프라임(하향) 및 cis로 위치하고, 프로모터의 제어 하에 있는 것을 의미한다. 특정 구체예에서, 프로모터는 구성성 포유류 프로모터, 예컨대 유비퀴틴 C 프로모터(Schorpp et al., Nucl. Acids Res. 24(9):1787-1788, 1996); Byun et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 332(2):518-523, 2005 참조), CMV-IE 프로모터(Addison et al., J. Gen. Virol. 78(7):1653-1661, 1997; Hunninghake et al., J. Virol. 63(7):3026-3033, 1989 참조) 또는 hCMV-IE 프로모터(사람 사이토메갈로바이러스 즉시 초기 유전자 프로모터)(Stinski & Roehr, J. Virol. 55(2):431-441, 1985; Hunninghake et al., J. Virol. 63(7):3026-3033, 1989 참조)이다.
본원에서 사용되는 것과 같이, 구절 "통합된 세포 밀도" 또는 "ICD"는 일정 시간에 걸쳐서 적분(integral)으로서 얻어지고 mL당 세포-일로 표시되는 배양 배지 중의 세포의 밀도를 의미한다. 어떤 구체예에서, ICD는 세포가 배양된지 12일째 정도에 측정된다.
본원에서 사용되는 것과 같이, 용어 "배양"은 세포가 활발하게 분할되거나 그렇지 못하거나에 관계없이, (1) 세포, 배지 및 분비된 다중-하위유닛 단백질을 포함하는 조성물 및 (2) 세포를 배지에서 배양하는 작업 둘 다를 의미한다. 세포는 25mL 또는 그것보다 작은 플라스크 정도의 작은 용기에서, 및 10,000리터 또는 그 이상의 상업적 생물반응기처럼 크게 배양될 수 있다. "배지"는 배양 배지를 말하는 것으로, 그 중에서도 세포의 성장, 증식 또는 유지, 및 세포에 의한 다중-하위유닛 단백질의 생성을 가능하게 하는 영양분, 지질, 아미노산, 핵산, 완충제 및 미량 요소를 포함한다. 세포 배양 배지는 혈청(예컨대 소 태아 혈청(FBS)) 또는 단백질 가수분해물이 첨가된 배지뿐 아니라 혈청-유리 및 가수분해물-유리 규정 배지를 포함한다. 상업적으로 얻을 수 있는 배지의 비-제한적인 실례로는 RPMI 배지 1640, 둘베코 변형 이글 배지(DMEM), DMEM/F12 혼합물, F10 영양 혼합물, Ham F12 영양 혼합물 및 최소 필수 배지(MEM)가 있다.
본원에서 사용된 것과 같이, 폴리펩티드에 적용되는 것으로서 구절 "보존적으로 치환된 변이체"는 보다 더 보존성인 아미노산 치환 중 하나를 포함한 아미노산 서열을 가지는 폴리펩티드를 의미한다. "보존성 아미노산 치환"은 아미노산 잔기가 유사한 화학적 특성(예컨대 전하 또는 소수성)을 가지는 측쇄(R 기)를 가지는 다른 아미노산 잔기에 의해 치환되는 것이다. 일반적으로, 보존성 아미노산 치환은 실질적으로 단백질의 기능적 특성을 바꾸지 않을 것이다. 둘 또는 그 이상의 아미노산 서열이 상호간에 보존성 치환에 의해 상이한 경우에, 유사성의 % 또는 정도는 치환의 보존적 성질에 대해 수정하기 위해 상향 조정될 수 있다. 이런 조정을 만들기 위한 수단은 해당 기술분야의 숙련자들에게 잘 알려져 있다(예컨대 Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24:307-331 참조). 유사한 화학적 특성을 가지는 측쇄를 가지는 아미노산의 그룹의 실례는 다음을 포함한다: 1) 지방족 측쇄: 글리신, 알라닌, 발린, 로이신 및 아이소로이신; 2) 지방족-하이드록실 측쇄: 세린 및 쓰레오닌; 3) 아마이드-함유 측쇄: 아스파라긴 및 글루타민; 4) 방향족 측쇄: 페닐알라닌, 타이로신 및 트립토판; 5) 염기성 측쇄: 라이신, 아르기닌 및 히스티딘; 6) 산성 측쇄: 아스파테이트 및 글루타메이트, 및 7) 황-함유 측쇄: 시스테인 및 메티오닌. 바람직한 보존성 아미노산 치환 기는 다음과 같다: 발린-로이신-아이소로이신, 페닐알라닌-타이로신, 라이신-아르기닌, 알라닌-발린, 글루타메이트-아스파테이트 및 아스파라긴-글루타민. 또는 다르게는, 보존성 대체는 문헌에서 개시된 PAM250 로그-가능성 매트릭스에서 양의 값을 가지는 어떠한 변화이다(Gonnet et al. (1992) Science 256: 1443-45). "적당한 보존성" 대체는 PAM250 로그-가능성 매트릭스에서 음이 아닌 값을 가지는 어떠한 변화이다.
구체예 - 세포
한 측면으로, 본 발명은 치료적 또는 연구 활용성을 가지는 단백질의 제조에 유용한 세포를 제공한다. 어떤 구체예에서, 단백질은 다중 하위유닛으로 구성되고, 그것은 적절하게 접혀지고 조립되어 충분한 양의 활성 단백질이 생성되어야 한다. 항체는 치료적 또는 연구 유용성을 가지는 다중-하위유닛 단백질의 실례이다. 어떤 구체예에서, 세포는 다중-하위유닛 단백질의 하나 또는 그 이상의 개별적인 하위유닛을 코드화하는 재조합 유전자 구성물(즉 폴리뉴클레오티드)을 은닉한다. 다른 구체예에서, 개별적인 폴리펩티드 하위유닛을 코드화하는 유전자 구성물은 자연 발생적인 것으로, 예를 들면 B 세포에서 항체의 하위유닛을 코드화하는 핵산 서열이다.
다중-하위유닛 단백질의 적절한 조립 및 분비를 촉진하기 위하여, 세포는 어떤 구체예에서, 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴은 ERAD의 성분인 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 어떤 구체예에서, 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴은 소포체 분해-증강 알파-만노시다제-유사 단백질 2(EDEM2)이다. 어떠한 코드화된 EDEM2 또는 보존적으로 치환된 변이체든지 본 발명에 성공적으로 사용될 수 있는 것으로 예상된다. 표 1은 척추동물 EDEM2 단백질의 일부 실례를 열거한다. Thompson 등의 Clustal W 프로그램(Thompson et al., Nucl. Acids Rev. 22(22):4673-80, 1994, 또한 Yuan et al., Bioinformatics 15(10):862-3, 1999 참조)을 사용하여 수행된 그 단백질 서열들의 다수의 쌍 비교 결과, 개시된 EDEM2 폴리뉴클레오티드 서열은 각각 상호간에 다른 EDEM2 서열에 대해 적어도 69% 동일한 것으로 나타났다. 개시된 포유류 EDEM2 서열의 Clustal W 비교는 각 서열이 다른 것에 대해 적어도 92% 동일한 것을 나타냈다. 그러므로 어떤 구체예에서, 세포는 포유류 EDEM2의 어느 하나에 적어도 92% 동일한 서열을 가지는 EDEM2 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 공통 EDEM2 아미노산 서열은 마우스, 쥐, 햄스터, 침팬지 및 사람 EDEM2 폴리펩티드 아미노산 서열을 일렬 배열함으로써 구성되었다. 그 공통 서열은 SEQ ID NO:8로서 표시된다. 그러므로 어떤 구체예에서, 세포는 SEQ ID NO:8의 아미노산 서열을 가지는 EDEM2 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다.
다양한 구체예에서, 세포는 마우스 EDEM2(mEDEM2) 아미노산 서열에 적어도 92% 동일한 아미노산 서열을 가지는 EDEM2 폴리펩티드를 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 함유하고; 특별한 구체예에서, 폴리펩티드는 mEDEM2 또는 그것의 보존적으로 치환된 변이체이다.
어떤 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질은 항체이고, 세포는 SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 어떠한 하나 또는 그 이상의 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. SEQ ID NO:43 및 44는 각각 특정 항체 중쇄의 대략 N-말단 및 C-말단 부분의 공통 서열을 나타낸다. 그러므로, 한 구체예에서 단백질 하위유닛을 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:43과 SEQ ID NO:44 둘 다를 포함하는 폴리펩티드를 코드화한다. SEQ ID NO:45 및 46은 각각 특정 항체 경쇄의 대략 N-말단 및 C-말단 부분의 공통 서열을 나타낸다. 그러므로, 한 구체예에서 단백질 하위유닛을 코드화하는 폴리뉴클레오티드는 SEQ ID NO:45와 SEQ ID NO:46 둘 다를 포함하는 폴리펩티드를 코드화한다. 어떤 구체예에서, EDEM2 단백질을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드 외에 세포는 적어도 두 개의 폴리뉴클레오티드를 함유하는데, 그것들은 각각 다중-하위유닛 단백질의 특정 하위유닛을 코드화한다. 예를 들어, 그리고 하기에서 예시되는 것과 같이, 세포는 SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드와, SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄를 코드화하는 다른 폴리뉴클레오티드를 함유한다.
어떤 구체예에서, 세포는 상기에서 기술된 것과 같이 스트레스-반응 폴리뉴클레오티드 및 폴리펩티드 하위유닛을 코드화하는 하나 또는 그 이상의 폴리뉴클레오티드를 함유하는 것 외에, 또한 EDEM2의 상류에서 작동하는 접혀지지 않은 단백질 반응 전사 인자를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 상류 전사 인자는 어떤 경우에는 XBP1의 스플라이싱 형태이다. 어떠한 코드화된 XBP1이든지 본 발명에서 성공적으로 사용될 수 있다고 예상된다. 표 2는 척추동물 XBP1 스플라이싱 형태 폴리펩티드의 서열의 일부 실례를 열거한다. Clustal W(Thompson 1994; Yuan 1999)를 사용하여 수행된 그런 폴리펩티드 서열들의 다수의 쌍 비교 결과, 개시된 스플라이싱된 XBP1 폴리뉴클레오티드 서열들은 각각 상호간에 다른 XBP1 서열에 대해 적어도 48% 동일한 것으로 나타났다. 개시된 포유류 XBP1 서열의 Clustal W 비교는 각 서열이 다른 것에 대해 적어도 86% 동일한 것을 나타냈다. 그러므로 어떤 구체예에서, 세포는 포유류의 스플라이싱된 XBP1의 어느 하나에 적어도 86% 동일한 서열을 가지는 XBP1 폴리펩티드의 스플라이싱된 형태를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 공통 XBP1 아미노산 서열은 마우스, 햄스터 및 사람 XBP1 아미노산 서열을 일렬 배열함으로써 구성되었다. 그 공통 서열은 SEQ ID NO:13으로서 표시된다. 그러므로 어떤 구체예에서, 세포는 SEQ ID NO:13의 아미노산 서열을 가지는 XBP1 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다.
다양한 구체예에서, 세포는 마우스 XBP1(mXBP1) 아미노산 서열(SEQ ID NO:9)에 적어도 86% 동일한 아미노산 서열을 가지는 XBP1 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유하고; 특별한 구체예에서, 폴리펩티드는 mXBP1 또는 그것의 보존적으로 치환된 변이체이다.
본 발명은 어떠한 세포든지 적절하게 접혀지고 활성인 다중-하위유닛 단백질의 제조를 위한 렉틴-코드화 폴리펩티드를 은닉하기 위해 사용될 수 있다고 예상한다. 그러한 세포로는 잘 알려져 있는 단백질 생성 세포, 예컨대 박테리아 대장균 및 유사한 원핵 세포, 효모 피치아 파스토리스 및 다른 피치아 및 비-피치아 효모, 식물 세포 절편, 예컨대 니코티아나의 절편, 곤충 세포, 예컨대 쉬나이더 2 세포, Sf9 및 Sf21, 및 트라이코플러시아 니-유도된 하이파이브 세포 및 생물생성에 전형적으로 사용된 포유류 세포, 예를 들면 CHO, CHO-K1 COS, HeLa, HEK93, Jurkat 및 PC12 세포를 포함한다. 어떤 구체예에서, 세포는 CHO-K1 또는 변형된 CHO-K1 세포, 예컨대 미국 특허 번호 7,435,553, 7,514,545 및 7,771,997 및 미국 공개 특허 출원 번호 US 2010-0304436 A1에서 교시된 것과 같은 세포이다.
어떤 특정 구체예에서, 본 발명은 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:43 및 44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:45 및 46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 생체 외 CHO-K1 세포를 제공한다.
한 특정 구체예에서, 본 발명은 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:23의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:25의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 생체 외 CHO-K1 세포를 제공한다.
다른 특정 구체예에서, 본 발명은 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:31의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:33의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 생체 외 CHO-K1 세포를 제공한다.
또 다른 특정 구체예에서, 본 발명은 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:39의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:41의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 생체 외 CHO-K1 세포를 제공한다.
셀라인
다른 측면으로, 본 발명은 상기에서 설명된 세포로부터 클론 팽창에 의해 유래된 다수의 세포를 포함하는 셀라인을 제공한다. 셀라인을 구성하는 세포의 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 약 100%는 어떤 구체예에서는 ERAD의 성분인 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 어떤 구체예에서, 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴은 소포체 분해-증강 알파-만노시다제-유사 단백질 2(EDEM2)이다. 어떠한 코드화된 EDEM2 또는 그것의 보존적으로 치환된 변이체든지 본 발명에서 성공적으로 사용될 수 있는 것으로 예상된다. 이전 단원에서 논의된 것과 같이 표 1은 척추동물 EDEM2 단백질의 일부 실례를 열거한다. 어떤 구체예에서, 구성 세포는 어떠한 포유류 EDEM2에 적어도 92% 동일한 서열을 가지는 EDEM2 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 어떤 구체예에서, 구성 세포는 SEQ ID NO:8의 포유류 공통 아미노산 서열을 가지는 EDEM2 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 어떤 구체예에서, 구성 세포는 SEQ ID NO:1의 재조합 폴리뉴클레오티드 또는 그것의 보존적으로 치환된 변이체를 함유한다.
어떤 구체예에서, 셀라인에 의해 생성된 다중-하위유닛 단백질은 항체이고, 셀라인의 구성 세포는 SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44(각각 특정 항체 중쇄의 N-말단 및 C-말단 부분의 공통 서열을 나타낸다), 및 SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46(각각 특정 항체 경쇄의 N-말단 및 C-말단 부분의 공통 서열을 나타낸다)의 아미노산 서열을 포함하는 어떠한 하나 또는 그 이상의 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 어떤 구체예에서, EDEM2 단백질을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드 외에, 셀라인의 구성 세포는 적어도 두 개의 폴리뉴클레오티드를 함유하고, 그것들은 각각 다중-하위유닛 단백질의 특정 하위유닛을 코드화한다. 예를 들어 구성 세포는 SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 항체 중쇄를 코드화하는 폴리뉴클레오티드와, SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 항체 경쇄를 코드화하는 다른 폴리뉴클레오티드를 함유한다.
어떤 구체예에서, 구성 세포는 상기에서 기술된 것과 같이 스트레스-반응 폴리뉴클레오티드 및 폴리펩티드 하위유닛을 코드화하는 하나 또는 그 이상의 폴리뉴클레오티드 외에, 또한 EDEM2의 상류에서 작동하는 접혀지지 않은 단백질 반응 전사 인자, 예컨대 XBP1의 스플라이싱 형태를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 어떠한 코드화된 XBP1이든지 본 발명에서 성공적으로 사용될 수 있는 것으로 예상된다. 전술한 단원에서 논의된 것과 같이, 표 2는 척추동물 XBP1 스플라이싱 형태 폴리펩티드의 서열의 일부 실례를 열거한다. 그 서열들의 Clustal W 분석은 개시된 스플라이싱된 XBP1 폴리뉴클레오티드 서열이 각각 상호간에 XBP1 서열에 대해 적어도 48% 동일하고; 포유류 XBP1 서열들의 비교 결과 각 서열은 상호간에 적어도 86% 동일한 것으로 나타났다. 그러므로 어떤 구체예에서, 셀라인의 구성 세포는 포유류의 어떠한 하나의 스플라이싱된 XBP1에 대해 적어도 86% 동일한 서열을 가지는 XBP1 폴리펩티드의 스플라이싱 형태를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 어떤 구체예에서, 구성 세포는 SEQ ID NO:13의 공통 아미노산 서열을 가지는 XBP1 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다.
다양한 구체예에서, 세포는 마우스 XBP1(mXBP1) 아미노산 서열(SEQ ID NO:9)에 대해 적어도 86% 동일한 아미노산 서열을 가지는 XBP1 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유하고; 특정 구체예에서, 폴리펩티드는 SEQ ID NO:9의 mXBP1 또는 그것의 보존적으로 치환된 변이체이다.
본 발명은 셀라인이 그것의 원래 세포가 잘 알려져 있는 단백질 생성 세포, 예를 들면 박테리아 대장균 및 유사한 원핵 세포, 효모 피치아 파스토리스 및 다른 피치아 및 비-피치아 효모, 식물 세포 절편, 예컨대 니코티아나의 절편, 곤충 세포, 예컨대 쉬나이더 2 세포, Sf9 및 Sf21, 및 트라이코플러시아 니-유도된 하이파이브 세포 및 생물생성에 전형적으로 사용된 포유류 세포, 예를 들면 CHO, CHO-K1 COS, HeLa, HEK93, Jurkat 및 PC12 세포의 목록으로부터 선택된 구성 세포를 포함한다. 어떤 구체예에서, 세포는 CHO-K1 또는 변형된 CHO-K1 세포, 예컨대 미국 특허 번호 7,435,553, 7,514,545 및 7,771,997 및 미국 공개 특허 출원 번호 US 2010-0304436 A1에서 교시된 것과 같은 세포이다.
어떤 구체예에서, 배지에서 배양된 셀라인은 다중-하위유닛 단백질을 생성하고, 적절하게 조립된 다중-하위유닛 단백질을 배지로 적어도 3g/L, 적어도 5g/L 또는 적어도 8g/L의 역가로 분비할 수 있다.
나아가, 셀라인의 구성 세포는 배양 중에 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 함유하지 않는 셀라인의 통합된 세포 밀도보다 약 30% 더 큰 통합된 세포 밀도를 획득할 수 있을 정도로 증식할 수 있다. 어떤 경우에, 셀라인은 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 함유하지 않는 셀라인의 통합된 세포 밀도보다 적어도 약 50% 더 큰, 적어도 60% 더 큰, 또는 적어도 90% 더 큰 통합된 세포 밀도를 획득할 수 있다. 어떤 구체예에서, 셀라인의 통합된 세포 밀도는 배양후 약 12일 후에 평가된다.
어떤 특정 구체예에서, 본 발명은 클론-유도된 구성 세포를 포함하는 셀라인을 제공하는데, 이때 구성 세포는 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:43 및 44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:45 및 46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 CHO-K1 세포이다.
한 특정 구체예에서, 본 발명은 클론-유도된 구성 세포를 포함하는 셀라인을 제공하는데, 이때 구성 세포는 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:23의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:25의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 CHO-K1 세포이다.
다른 특정 구체예에서, 본 발명은 클론-유도된 구성 세포를 포함하는 셀라인을 제공하는데, 이때 구성 세포는 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:31의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:33의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 CHO-K1 세포이다.
또 다른 특정 구체예에서, 본 발명은 클론-유도된 구성 세포를 포함하는 셀라인을 제공하는데, 이때 구성 세포는 (1) SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 mEDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드, (2) SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드, (3) SEQ ID NO:39의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 중쇄-코드화 폴리뉴클레오티드 및 (4) SEQ ID NO:41의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 항체 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유하는 CHO-K1 세포이다.
EDEM2 폴리뉴클레오티드
또 다른 측면으로, 본 발명은 EDEM2 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드는 재조합체이고, 시험관에서, 또는 시험관 내 번역 시스템에서와 같이, 시험관 내 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있고, 또는 생체 내에서, 예컨대 세포 배양에서와 같이 생체 외에 있을 수 있는 세포에서, 또는 유기체에서와 같은 생체 내에서 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있다. 어떤 구체예에서, EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드는 유전자 내에 있는데, 이것은 그것이 프로모터의 제어하에 있으면서 그 아래 쪽에 있고, 폴리아데닐화 부위의 위쪽에 있음을 의미한다. EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드 또는 유전자는 플라스미드 또는 다른 원형 또는 선형 벡터 내에 있을 수 있다. EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드 또는 유전자는 세포 내에 에피솜으로서 존재하거나 세포 게놈 안으로 통합되는 원형 또는 선형 DNA 구성물 내에 있을 수 있다.
상기에서 기술된 것과 같이, EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드는 표 1의 어떠한 이종상동체, 상동체 또는 보존적으로 치환된 EDEM2 폴리펩티드, 또는 SEQ ID NO:8의 포유류 공통 서열을 포함하여 SEQ ID NO:1 내지 5 및 8 중 어느 하나에 적어도 92% 동일한 아미노산 서열을 가지는 EDEM2 폴리펩티드를 코드화한다.
어떤 경우에, 재조합 또는 분리된 EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드는 포유류 프로모터에 작동가능하게 연결된다. 프로모터는 어떠한 프로모터든지 가능하지만, 어떤 경우에는 예를 들면 유비퀴틴 C 프로모터와 같은 포유류 프로모터이다.
특정 구체예에서, EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드는 본질적으로 5'으로부터 3'쪽으로 프로모터, 예컨대 유비퀴틴 C 프로모터, 이어서 임의의 인트론, 예컨대 베타 글로빈 인트론, 이어서 EDEM2 코딩 서열, 이어서 폴리아데닐화 서열, 예컨대 SV40pA 서열로 구성된다. 그런 EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드의 특정 구체예이기도 한 구체적인 실례는 SEQ ID NO:16에 의해 표시된다. 그 서열의 보존된 변이체는 또한 본 발명의 구체예일 것으로 예상된다.
어떤 경우에, 재조합 EDEM2-코드화 폴리뉴클레오티드는 선형, 원형, 에피솜성, 통합된, 고정된 DNA 구성물, 또는 EDEM2 유전자를 전달하거나 EDEM2 단백질을 발현하기 위한 벡터일 수 있는 플라스미드의 부분이다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 (1) 유비퀴틴 C 프로모터의 제어하에 있고 SV40 폴리아데닐화 신호로 종결되는 EDEM2 유전자 및 (2) 선택가능한 마커, 예컨대 폴리아데닐화 서열, 예컨대 PGK pA 서열로 종결되고, SV40 프로모터와 같은 프로모터의 제어 하에 제오신에 대한 내성을 부여하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 또는 네오마이신에 대한 내성을 부여하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 5'에서 3' 방향으로 계속되는 원형 형식으로, 유비퀴틴 C 프로모터, 베타 글로빈 인트론, EDEM2 코딩 서열, SV40 pA 서열, SV40 프로모터, 네오마이신-내성 코딩 서열 및 PGK pA 서열을 포함한다. 이 구체예의 특정 실례는 SEQ ID NO:14의 서열을 가지는 플라스미드에 의해 예시된다. 또 다른 특정 구체예에서, 플라스미드는 5'에서 3' 방향으로 계속되는 원형 형식으로, 유비퀴틴 C 프로모터, 베타 글로빈 인트론, EDEM2 코딩 서열, SV40 pA 서열, SV40 프로모터, 제오신-내성 코딩 서열 및 PGK pA 서열을 포함한다. 이 구체예의 특정 실례는 SEQ ID NO:15의 서열을 가지는 플라스미드에 의해 예시된다.
XBP1 폴리뉴클레오티드
또 다른 측면으로, 본 발명은 XBP1 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드는 재조합체이고, 시험관에서, 또는 시험관 내 번역 시스템에서와 같이, 시험관 내 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있고, 또는 생체 내에서, 예컨대 세포 배양에서와 같이 생체 외에 있을 수 있는 세포에서, 또는 유기체에서와 같은 생체 내에서 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있다. 어떤 구체예에서, XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드는 유전자 내에 있는데, 이것은 그것이 프로모터의 제어하에 있으면서 그 아래 쪽에 있고, 폴리아데닐화 부위의 위쪽에 있음을 의미한다. XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드는 플라스미드 또는 다른 원형 또는 선형 벡터 내에 있을 수 있다. XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드 또는 유전자는 세포 내에 에피솜으로서 존재하거나 세포 게놈 안으로 통합되는 원형 또는 선형 DNA 구성물 내에 있을 수 있다.
상기에서 기술된 것과 같이, XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드는 표 2의 어떠한 이종상동체, 상동체 또는 보존적으로 치환된 XBP1 폴리펩티드, 또는 SEQ ID NO:13의 포유류 공통 서열을 포함하여 SEQ ID NO:9, 10 및 11 중 어느 하나에 적어도 86% 동일한 아미노산 서열을 가지는 XBP1 폴리펩티드를 코드화한다.
어떤 경우에, 재조합 또는 분리된 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드는 포유류 프로모터에 작동가능하게 연결된다. 프로모터는 어떠한 프로모터든지 가능하지만, 어떤 경우에는 예를 들면 유비퀴틴 C 프로모터와 같은 포유류 프로모터이다.
특정 구체예에서, XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드는 본질적으로 5'으로부터 3'쪽으로 프로모터, 예컨대 유비퀴틴 C 프로모터, 이어서 임의의 인트론, 예컨대 베타 글로빈 인트론, 이어서 XBP1 코딩 서열, 이어서 폴리아데닐화 서열, 예컨대 SV40pA 서열로 구성된다. SEQ ID NO:18은 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드의 실례를 나타낸다. 그 서열의 보존된 변이체는 또한 본 발명의 구체예일 것으로 예상된다.
어떤 경우에, 재조합 XBP1-코드화 폴리뉴클레오티드는 선형, 원형, 에피솜성, 통합된, 고정된 DNA 구성물, 또는 XBP1 유전자를 전달하거나 스플라이싱되고 활성인 XBP1 단백질을 발현하기 위한 벡터일 수 있는 플라스미드의 부분이다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 (1) 유비퀴틴 C 프로모터의 제어하에 있고 SV40 폴리아데닐화 신호로 종결되는 XBP1 유전자 및 (2) 선택가능한 마커, 예컨대 폴리아데닐화 서열, 예컨대 PGK pA 서열로 종결되고, SV40 프로모터와 같은 프로모터의 제어 하에 제오신에 대한 내성을 부여하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 또는 네오마이신에 대한 내성을 부여하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 5'에서 3' 방향으로 계속되는 원형 형식으로, 유비퀴틴 C 프로모터, 베타 글로빈 인트론, XBP1 코딩 서열, SV40 pA 서열, SV40 프로모터, 제오신-내성 코딩 서열 및 PGK pA 서열을 포함한다. 이 구체예의 특정 실례는 SEQ ID NO:17의 서열을 가지는 원형 플라스미드로 예시된다.
항체 중쇄 및 경쇄-코드화 폴리뉴클레오티드
또 다른 측면으로, 본 발명은 항체 중쇄 폴리펩티드(HC)를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. HC-코드화 폴리뉴클레오티드는 재조합체이고, 시험관에서, 또는 시험관 내 번역 시스템에서와 같이, 시험관 내 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있고, 또는 생체 내에서, 예컨대 세포 배양에서와 같이 생체 외에 있을 수 있는 세포에서, 또는 유기체에서와 같은 생체 내에서 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있다. 어떤 구체예에서, HC-코드화 폴리뉴클레오티드는 유전자 내에 있는데, 이것은 그것이 프로모터의 제어하에 있으면서 그 아래 쪽에 있고, 폴리아데닐화 부위의 위쪽에 있음을 의미한다. HC-코드화 폴리뉴클레오티드는 플라스미드 또는 다른 원형 또는 선형 벡터 내에 있을 수 있다. HC-코드화 폴리뉴클레오티드 또는 유전자는 세포 내에 에피솜으로서 존재하거나 세포 게놈 안으로 통합되는 원형 또는 선형 DNA 구성물 내에 있을 수 있다.
어떤 경우에, 재조합 또는 분리된 HC-코드화 폴리뉴클레오티드는 포유류 프로모터에 작동가능하게 연결된다. 프로모터는 어떠한 프로모터든지 가능하지만, 어떤 경우에는 예를 들면 유비퀴틴 C 프로모터 또는 hCMV-IE 프로모터와 같은 포유류 프로모터이다.
특정 구체예에서, HC-코드화 폴리뉴클레오티드는 본질적으로 5'으로부터 3'쪽으로 프로모터, 예컨대 hCMV-IE 프로모터, 이어서 임의의 인트론, 예컨대 베타 글로빈 인트론, 이어서 중쇄 코딩 서열, 예컨대 SEQ ID NO:43 및 44, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:27 또는 SEQ ID NO:35의 아미노산 서열을 코드화하는 서열, 이어서 폴리아데닐화 서열, 예컨대 SV40pA 서열을 포함하는 HC 유전자이다. HC 유전자의 특정 실례는 SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:31 또는 SEQ ID NO:39로 표시된다. 이들 서열 중 어느 하나의 보존된 변이체는 또한 본 발명의 구체예일 것으로 예상된다.
어떤 경우에, 재조합 HC-코드화 폴리뉴클레오티드는 선형, 원형, 에피솜성, 통합된, 고정된 DNA 구성물, 또는 중쇄 유전자를 전달하거나 중쇄 하위유닛을 발현하기 위한 벡터일 수 있는 플라스미드의 부분이다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 (1) hCMV-IE 프로모터의 제어하에 있고 SV40 폴리아데닐화 신호로 종결되는 HC 유전자 및 (2) 선택가능한 마커, 예컨대 SV40 프로모터와 같은 프로모터의 제어 하에 하이그로마이신에 대한 내성을 부여하고, 폴리아데닐화 서열, 예컨대 PGK pA 서열로 종결되는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 5'에서 3' 방향으로 계속되는 원형 형식으로, hCMV-IE 프로모터, 베타 글로빈 인트론, 항체 중쇄 코딩 서열(SEQ ID NO:43 및 44, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:27 또는 SEQ ID NO:35의 아미노산을 가지는 HC를 코드화한다), SV40 pA 서열, SV40 프로모터, 하이그로마이신-내성 코딩 서열 및 PGK pA 서열을 포함한다. HC 유전자를 함유하는 그런 플라스미드의 특정 실례 및 특별한 구체예는 SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:32 또는 SEQ ID NO:40에 의해 예시된다. 이들 서열 중 어느 하나의 보존된 변이체는 본 발명의 구체예일 것으로 예상된다.
또 다른 측면으로, 본 발명은 항체 경쇄 폴리펩티드(LC)를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. LC-코드화 폴리뉴클레오티드는 재조합체이고, 시험관에서, 또는 시험관 내 번역 시스템에서와 같이, 시험관 내 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있고, 또는 생체 내에서, 예컨대 세포 배양에서와 같이 생체 외에 있을 수 있는 세포에서, 또는 유기체에서와 같은 생체 내에서 제조, 보관, 사용 또는 발현될 수 있다. 어떤 구체예에서, LC-코드화 폴리뉴클레오티드는 유전자 내에 있는데, 이것은 그것이 프로모터의 제어하에 있으면서 그 아래 쪽에 있고, 폴리아데닐화 부위의 위쪽에 있음을 의미한다. LC-코드화 폴리뉴클레오티드 또는 유전자는 플라스미드 또는 다른 원형 또는 선형 벡터 내에 있을 수 있다. LC-코드화 폴리뉴클레오티드 또는 유전자는 세포 내에 에피솜으로서 존재하거나 세포 게놈 안으로 통합되는 원형 또는 선형 DNA 구성물 내에 있을 수 있다.
어떤 경우에, 재조합 또는 분리된 LC-코드화 폴리뉴클레오티드는 포유류 프로모터에 작동가능하게 연결된다. 프로모터는 어떠한 프로모터든지 가능하지만, 어떤 경우에는 예를 들면 유비퀴틴 C 프로모터 또는 hCMV-IE 프로모터와 같은 포유류 프로모터이다.
특정 구체예에서, LC-코드화 폴리뉴클레오티드는 본질적으로 5'으로부터 3'쪽으로 프로모터, 예컨대 hCMV-IE 프로모터, 이어서 임의의 인트론, 예컨대 베타 글로빈 인트론, 이어서 경쇄 코딩 서열, 예컨대 SEQ ID NO:45 및 46, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:29 또는 SEQ ID NO:37의 아미노산 서열을 코드화하는 서열, 이어서 폴리아데닐화 서열, 예컨대 SV40pA 서열을 포함하는 LC 유전자이다. 그런 LC 유전자의 구체적인 실례 및 특정 구체예는 SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:33 또는 SEQ ID NO:41로 표시된다. 이들 서열 중 어느 하나의 보존된 변이체는 또한 본 발명의 구체예일 것으로 예상된다.
어떤 경우에, 재조합 LC-코드화 폴리뉴클레오티드는 선형, 원형, 에피솜성, 통합된, 고정된 DNA 구성물, 또는 경쇄 유전자를 전달하거나 경쇄 하위유닛을 발현하기 위한 벡터일 수 있는 플라스미드의 부분이다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 (1) hCMV-IE 프로모터의 제어하에 있고 SV40 폴리아데닐화 신호로 종결되는 LC 유전자 및 (2) 선택가능한 마커, 예컨대 SV40 프로모터와 같은 프로모터의 제어 하에 하이그로마이신에 대한 내성을 부여하고, 폴리아데닐화 서열, 예컨대 PGK pA 서열로 종결되는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유한다. 한 특정 구체예에서, 플라스미드는 5'에서 3' 방향으로 계속되는 원형 형식으로, hCMV-IE 프로모터, 베타 글로빈 인트론, 항체 경쇄 코딩 서열(SEQ ID NO:45 및 46, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:29 또는 SEQ ID NO:37의 아미노산을 가지는 LC를 코드화한다), SV40 pA 서열, SV40 프로모터, 하이그로마이신-내성 코딩 서열 및 PGK pA 서열을 포함한다. LC 유전자를 함유하는 그런 플라스미드의 구체적인 실례 및 특별한 구체예는 SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:34 또는 SEQ ID NO:42에 의해 예시된다. 이들 서열 중 어느 하나의 보존된 변이체는 본 발명의 구체예일 것으로 예상된다.
다중-하위유닛 단백질의 제조 방법
또 다른 측면으로, 본 발명은 상대적으로 다량의 적절하게 조립된 다중-하위유닛 단백질을 생성하고 분비할 수 있는 세포, 또는 셀라인의 구성 세포를 배지에서 배양함으로써 다중-하위유닛 단백질을 제조하는 방법을 제공하는데, 이때 다중-하위유닛 성분은 상대적으로 높은 역가로 배지로 분비된다. 이 제조 과정에서 활용된 세포는 전술한 측면에서 기술된 세포이고, 그것은 본원에 기술된 ERAD 렉틴-코드화 폴리뉴클레오티드를 함유한다.
유용한 재조합 단백질을 제조할 목적을 위해, 세포 및 특히 포유류 세포를 배양하는 방법은 해당 기술분야에 잘 알려져 있다(예컨대 De Jesus & Wurm, Eur. J. Pharm. Biopharm. 78:184-188, 2011 참조). 간단히 설명하면, 기술된 폴리뉴클레오티드를 함유하는 세포는 혈청 또는 가수분해물을 함유할 수 있거나, 또는 화학적으로 규정되고 단백질 생성을 위해 최적화될 수 있는 배지에서 배양된다. 배양은 물질 환경 조절 장치에서처럼 공급-배치식 배양이거나 연속식 배양일 수 있다. 세포는 실험실 벤치 크기 플라스크(~ 25mL), 제조 스케일-업 생물반응기(1 내지 5L) 또는 산업 규모 생물반응기(5,000 내지 25,000L)에서 배양될 수 있다. 제조 작동은 여러 주에서 1개월까지 지속될 수 있고, 그 시간 동안 다중-하위유닛 단백질이 배지 안으로 분비된다.
대상 세포는 적절하게 조립된 다중-하위유닛 단백질을 생성하고 분비하는 증강된 능력을 가진다. 어떤 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질, 예컨대 항체는 적어도 94pg/세포/일, 적어도 37pg/세포/일 또는 적어도 39pg/세포/일의 속도로 배지 안으로 분비된다. 어떤 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질은 배양 후 약 12일 후에 적어도 3g/L, 적어도 5g/L, 적어도 6g/L 또는 적어도 8g/L의 역가를 획득한다.
나아가, 대상 세포는 증식하고 상대적으로 높은 세포 밀도, 나아가 최적의 생산성을 획득할 수 있는 증강된 능력을 가진다. 어떤 구체예에서, 세포 또는 셀라인 시드 트레인은 배양중에 적어도 5×107 세포-일/mL, 적어도 1×108 세포-일/mL 또는 적어도 1.5×108 세포-일/mL의 통합된 세포 밀도를 획득한다.
임의로, 분비된 다중-하위유닛 단백질은 계속해서 그것이 분비된 배지로부터 정제된다. 단백질 정제 방법은 해당 기술분야에 잘 알려져 있다(예컨대 Kelley, mAbs 1(5):443-452 참조). 어떤 구체예에서, 단백질은 액체 배지 상층액으로부터 세포를 제거하기 위한 원심분리와, 이어서 다양한 크로마토그래피 단계 및 그 중에서도 바이러스 및 다른 오염물 또는 불순물을 제거하기 위한 여과 단계에 의해 수득된다. 어떤 구체예에서, 크로마토그래피 단계는 이온 교환 단계, 예컨대 양이온-교환 또는 음이온-교환을 포함한다. 다양한 친화성 크로마토그래피 배지, 예컨대 항체의 정제를 위한 단백질 A 크로마토그래피가 또한 사용될 수 있다.
임의로, 제조 방법은 세포를 생성하는 선행 단계들을 포함한다. 그러므로 어떤 구체예에서, 다중-하위유닛 단백질의 제조 방법은 세포를 상술된 것과 같은 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 벡터로 형질전환하는 단계와, 이어서 그것의 안정한 통합체를 선택하는 단계를 포함한다. 벡터의 비-제한적인 실례는 SEQ ID NO:1 내지 8 중 어느 하나의 아미노산 서열, SEQ ID NO:1 내지 8 중 어느 하나에 적어도 92% 동일한 아미노산 서열 또는 SEQ ID NO:1 내지 8의 어느 하나의 보존적으로 치환된 변이체를 가지는 EDEM2를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 그런 유전자 구성물들을 포함한다. 유용한 벡터로는, 예를 들면 SEQ ID NO:16의 유전자를 은닉하는 플라스미드, SEQ ID NO:15의 플라스미드 및 SEQ ID NO:14의 플라스미드를 포함한다. 당업자는 플라스미드 서열(예컨대 SEQ ID NO:14, 15, 17, 24, 26, 32, 34, 40 및 42)이 서열 목록에서 선형 방식으로 기술된 원형 서열임을 유념해야 한다. 그러므로 그런 경우에, 기록된 서열의 3-프라임의 대부분의 뉴클레오티드는 기록된 것과 같은 서열의 5-프라임의 대부분의 뉴클레오티드의 5-프라임쪽 바로 옆에 있을 것으로 간주될 것이다. SEQ ID NO:14의 플라스미드의 실례에서, 형질전환체는 네오마이신에 대한 내성을 통해 선택되고; SEQ ID NO:15의 경우, 선택은 ZEOCIN 내성을 통해서 이루어진다.
폴리뉴클레오티드 및 그것을 포함하는 벡터를 구성하기 위한 상세한 방법은 미국 특허 번호 7,435,553 및 7,771,997, 및 예컨대 Zwarthoff et al., J. Gen. Virol. 66(4):685-91, 1985; Mory et al., DNA. 5(3):181-93, 1986; 및 Pichler et al., Biotechnol. Bioeng. 108(2):386-94, 2011에 설명되어 있다.
그 안에 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 벡터가 놓이게 되는 출발 세포는 이미 다중-하위유닛 단백질, 또는 XBP1을 활용하는 그런 구체예의 경우에는 XBP1을 코드화하거나 또는 발현을 조절하는 구성물 또는 유전자 요소를 함유할 수 있다. 또는 다르게는, 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 벡터는 먼저 세포 내부에, 그 다음에 다른 구성물 내부에 놓일 수 있다.
방법에 의해 제조된 다중-하위유닛 단백질
또 다른 측면으로, 본 발명은 본원에 개시된 방법에 따라 만들어진 다중-하위유닛 단백질을 제공한다. 다중-하위유닛 단백질, 예컨대 항체의 적절한 접힘, 조립 및 번역-후 변형을 촉진하는 하나 또는 그 이상의 요소가 포함된다면, 해당 기술분야의 숙련자라면 그런 단백질이 뚜렷한 구조적 및 기능적 품질을 가지는 것으로 타당하게 예상할 수 있을 것이다. 예를 들어 개시된 방법에 의해 제조된 항체는 특별한 글리코실화 패턴 및 비-응집된 이종사량체의 정량적으로 더 큰 부분을 가지는 것으로 타당하게 여겨진다.
실시예
다음의 실시예는 해당 기술분야의 숙련된 사람들에게 본 발명의 방법 및 조성물을 제조하고 사용하는 방법을 완전하게 개시하고 설명하기 위해 제공되는 것으로, 본 발명자들이 자신들의 발명으로 간주하는 범주를 제한하려는 의도는 아니다. 사용된 숫자(예컨대 양, 온도 등)와 관련하여 정확성을 보장하기 위한 노력이 기울여졌지만, 약간의 실험적 오류나 편차는 설명되어야 한다. 다르게 표시되지 않는 한, 부는 몰에 의한 부이고, 분자량은 평균 분자량이며, 퍼센트 농도(%)는 밀리리터의 용액의 부피로 나눈 그램의 용매의 질량 곱하기 100%를 의미하고(예컨대 10% 물질 X는 용액 밀리리터당 물질 X의 0.1그램을 의미한다), 온도는 섭씨 온도이며, 압력은 대기압이거나 대기압 근처이다.
실시예 1: 셀라인
CHO-K1 유도된 숙주 셀라인을 사람 항체의 중쇄 및 경쇄를 코드화하는 두 개의 플라스미드로 형질전환하였다. 두 개의 플라스미드는 모두 하이그로마이신 B에 대한 내성을 부여하는 hph 유전자를 함유한다(Asselbergs and Pronk, 1992, Mol. Biol. Rep., 17(1):61-70). 세포를 LIPOPECTAMIN 시약(Invitrogen cat.#18324020)을 사용하여 형질전환하였다. 간단하게 설명하면, 형질전환 하루 전에 3.5×106 세포를 10cm 플레이트 상에서 10%의 소태아 혈청(FBS)(Invitrogen cat.#10100)을 함유하고 있는 완전 F12(Invitrogen cat.#11765)에 플레이팅하였다. 형질전환 후 1일에 세포를 1회 세척하고, 배지를 OPTIMEM으로 교체하였다(Invitrogen cat.#31985로부터). DNA/리포펙타민 복합체를 OPTIMEM 배지에서 제조한 후 세포에 첨가하였다. 배지를 다시 한 번 6시간 후에 10%의 FBS를 포함하고 있는 완전 F12로 교환하였다. 플라스미드의 안정한 통합을 하이그로마이신 B 선택을 사용하여 400㎍/ml에서 선택하였다. 클론성 항체를 발현하는 셀라인을 FASTR 기술(미국 특허 번호 6,919,183에 설명되어 있음)을 사용하여 분리하였다.
그런 다음 항체를 발현하는 라인을 EDEM2 코드화 플라스미드로 재-형질전환시켰다. EDEM2 플라스미드는 네오마이신 포스포트란스페라제("p3"로 표시된 플라스미드 구성물) 또는 sh ble(플라스미드 "p7") 유전자 중 하나를 함유하여 G418 또는 제오신에 대한 내성을 부여하였다. 동일한 형질전환 방법을 사용하였다. 선택가능한 마커에 따라 세포를 각각 G418 또는 제오신을 사용하여 400㎍/ml 또는 250㎍/ml에서 선택하였다. 그런 다음 클론성 셀라인을 FASTR 기술을 사용하여 분리하였다.
명칭 인핸서 구성물 단백질
C1 EDEM2 + XBP1 HC/LC = p1/p2
EDEM2 = p3
XBP1 = p4		 aAng2
C2 XBP1
C3 EDEM2 + XBP1 HC/LC = p5/p6
EDEM2 = p7
XBP1 = p4		 aGDF8
C4 XBP1
C5 EDEM2
C6 EDEM2 + XBP1 HC/LC = p8/p9
EDEM2 = p3
XBP1 = p4		 aAngPtl4
C7 XBP1
실시예 2:
항체 생성을 진동 플라스크를 사용하여 스케일-다운된 12일 공급 배치 공정으로 평가하였다. 이 방법으로 세포를 진동 플라스크에 생성 배지(고아미노산을 포함한 규정 배지)의 mL당 0.8×106 세포의 밀도로 시딩하였다. 배양을 약 12일 동안 유지하고, 글루코스뿐 아니라 3회의 공급물을 보충하였다. 생존 세포 밀도 및 항체 역가를 배치를 통털어 모니터하였다.
증강된 단백질 생성에 미치는 mEDEM2의 효과를 측정하기 위하여, mEDEM2 및 mXBP1을 함유하고 있는 CHO 셀라인에 의한 단백질의 생성을 mEDEM2가 아닌 mXBP1을 함유한 대조 세포에 의한 생성과 비교하였다. 단백질 역가는 mEDEM2를 발현하지 않은 셀라인에 비해 mEDEM2를 발현하는 그런 셀라인에서 더 높았다.
역가
셀라인 인핸서 생성률(pg/세포/일) 역가 g/L (% 증가)
C1 EDEM2 + XBP1 39 8.1 (93)
C2 XBP1 39 4.2
C3 EDEM2 + XBP1 37 5.9 (55)
C8 XBP1 32 3.8
C6 EDEM2 + XBP1 94 5.3 (152)
C7 XBP1 52 2.1
C5 EDEM2 29 3.1 (343)
C9 --- 9 0.7
실시예 3: 통합된 세포 일
통합된 세포 일("ICD")은 공급 배치 과정을 통털어 배양의 성장을 설명하기 위해 사용된 구절이다. 12-일 생성 분석의 과정에서, 본 발명자들은 0, 3, 5, 7, 10 및 12일에 생존 세포 밀도를 모니터하였다. 그런 다음 이 데이터를 시간에 대해 도표화하였다. ICD는 세포 밀도 곡선 아래의 면적으로서 계산된 생존 세포 밀도의 적분이다. EDEM2 형질전환된 라인은 12-일 공급 배치 과정에서 더 높은 ICD를 나타낸다(표 5 참조).
통합된 세포 밀도
셀라인 인핸서 ICD 106 세포-일/mL (% 증가)
C1 EDEM2 + XBP1 205 (93)
C2 XBP1 106
C3 EDEM2 + XBP1 157 (34)
C4 XBP1 117
C6 EDEM2 + XBP1 56 (51)
C7 XBP1 37
C5 EDEM2 116 (59)
C9 --- 73
실시예 4: 항-GDF8 항체 생성
EDEM2, XBP1 또는 두 가지 모두의 이소성 발현이 SEQ ID NO:19의 중쇄 서열 및 SEQ ID NO:21의 경쇄 서열을 가지는 항-GDF8 항체의 생성에 미치는 효과를 조사하였다. 개별적인 셀라인을 역가 및 통합된 세포 밀도에 대하여 조사하고, "bins" 또는 값의 범위에 놓았다. EDEM2의 이소성 발현은 5 내지 6g/L의 역가 범위로 항체를 발현하는 셀라인의 수를 상당히 증가시켰다. XBP1과 EDEM2의 조합은 고역가 셀라인의 증가를 향한 첨가 효과 이상을 나타냈다. 항체를 분비하는 세포에서 EDEM2의 발현은 또한 높은 ICD를 획득하는 셀라인의 수를 상당히 증가시켰다(표 6 참조).
역가 Bins (g/L) ICD Bins (106 세포-일/mL)
구성물 <1 1-3 3-5 5-6 30-50 50-100 100-200
E+X 0% 33.3% 44.4% 22.2% 11.1% 50% 38.9%
X 0% 37.5% 54% 8.3% 14.3% 85.7% 0%
E 0% 33% 60% 7% 0% 27% 73%
- 82% 18% 0% 0% 13% 67% 21%
SEQUENCE LISTING <110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc. <120> Production Cell Line Enhancers <130> 8150A <150> US 61/652,549 <151> 2012-05-29 <160> 46 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 577 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 1 Met Pro Phe Arg Leu Leu Ile Pro Leu Gly Leu Val Cys Val Leu Leu 1 5 10 15 Pro Leu His His Gly Ala Pro Gly Pro Asp Gly Thr Ala Pro Asp Pro 20 25 30 Ala His Tyr Arg Glu Arg Val Lys Ala Met Phe Tyr His Ala Tyr Asp 35 40 45 Ser Tyr Leu Glu Asn Ala Phe Pro Tyr Asp Glu Leu Arg Pro Leu Thr 50 55 60 Cys Asp Gly His Asp Thr Trp Gly Ser Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp 65 70 75 80 Ala Leu Asp Thr Leu Leu Ile Leu Gly Asn Thr Ser Glu Phe Gln Arg 85 90 95 Val Val Glu Val Leu Gln Asp Asn Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn 100 105 110 Ala Ser Val Phe Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser 115 120 125 Ala His Leu Leu Ser Lys Lys Ala Gly Val Glu Val Glu Ala Gly Trp 130 135 140 Pro Cys Ser Gly Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Glu Ala Ala Arg Lys 145 150 155 160 Leu Leu Pro Ala Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val 165 170 175 Asn Leu Leu His Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr 180 185 190 Ala Gly Ile Gly Thr Phe Ile Val Glu Phe Ala Thr Leu Ser Ser Leu 195 200 205 Thr Gly Asp Pro Val Phe Glu Asp Val Ala Arg Val Ala Leu Met Arg 210 215 220 Leu Trp Glu Ser Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp 225 230 235 240 Val Leu Thr Gly Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly 245 250 255 Val Asp Ser Tyr Phe Glu Tyr Leu Val Lys Gly Ala Ile Leu Leu Gln 260 265 270 Asp Lys Lys Leu Met Ala Met Phe Leu Glu Tyr Asn Lys Ala Ile Arg 275 280 285 Asn Tyr Thr His Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met Tyr Lys 290 295 300 Gly Thr Val Ser Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Tyr Trp Pro 305 310 315 320 Gly Leu Gln Ser Leu Ile Gly Asp Ile Asp Asn Ala Met Arg Thr Phe 325 330 335 Leu Asn Tyr Tyr Thr Val Trp Lys Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe 340 345 350 Tyr Asn Ile Pro Gln Gly Tyr Thr Val Glu Lys Arg Glu Gly Tyr Pro 355 360 365 Leu Arg Pro Glu Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Arg Ala Thr 370 375 380 Gly Asp Pro Thr Leu Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile 385 390 395 400 Glu Lys Ile Ser Lys Val Glu Cys Gly Phe Ala Thr Ile Lys Asp Leu 405 410 415 Arg Asp His Lys Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu 420 425 430 Thr Val Lys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe His Pro Asn Asn Phe Ile His 435 440 445 Asn Asn Gly Ser Thr Phe Asp Ser Val Met Thr Pro His Gly Glu Cys 450 455 460 Ile Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Ile 465 470 475 480 Asp Pro Ala Ala Leu His Cys Cys Arg Arg Leu Lys Glu Glu Gln Trp 485 490 495 Glu Val Glu Asp Leu Ile Lys Glu Phe Tyr Ser Leu Lys Gln Ser Arg 500 505 510 Pro Lys Arg Ala Gln Arg Lys Thr Val Arg Ser Gly Pro Trp Glu Pro 515 520 525 Gln Ser Gly Pro Ala Thr Leu Ser Ser Pro Ala Asn Gln Pro Arg Glu 530 535 540 Lys Gln Pro Ala Gln Gln Arg Thr Pro Leu Leu Ser Cys Pro Ser Gln 545 550 555 560 Pro Phe Thr Ser Lys Leu Ala Leu Leu Gly Gln Val Phe Leu Asp Ser 565 570 575 Ser <210> 2 <211> 576 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 2 Met Pro Phe Arg Leu Leu Ile Pro Leu Gly Leu Val Cys Val Leu Leu 1 5 10 15 Pro Leu His His Gly Ala Pro Gly Pro Glu Gly Thr Ala Pro Asp Pro 20 25 30 Ala His Tyr Arg Glu Arg Val Lys Ala Met Phe Tyr His Ala Tyr Asp 35 40 45 Ser Tyr Leu Glu Asn Ala Phe Pro Tyr Asp Glu Leu Arg Pro Leu Thr 50 55 60 Cys Asp Gly His Asp Thr Trp Gly Ser Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp 65 70 75 80 Ala Leu Asp Thr Leu Leu Ile Leu Gly Asn Thr Ser Glu Phe Gln Arg 85 90 95 Val Val Glu Val Leu Gln Asp Asn Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn 100 105 110 Ala Ser Val Phe Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser 115 120 125 Ala His Leu Leu Ser Lys Lys Ala Gly Val Glu Val Glu Ala Gly Trp 130 135 140 Pro Cys Ser Gly Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Glu Ala Ala Arg Lys 145 150 155 160 Leu Leu Pro Ala Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val 165 170 175 Asn Leu Leu His Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr 180 185 190 Ala Gly Ile Gly Thr Phe Ile Val Glu Phe Ala Thr Leu Ser Ser Leu 195 200 205 Thr Gly Asp Pro Val Phe Glu Asp Val Ala Arg Val Ala Leu Met Arg 210 215 220 Leu Trp Glu Ser Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp 225 230 235 240 Val Leu Thr Gly Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly 245 250 255 Val Asp Ser Tyr Phe Glu Tyr Leu Val Lys Gly Ala Ile Leu Leu Gln 260 265 270 Asp Lys Lys Leu Met Ala Met Phe Leu Glu Tyr Asn Lys Ala Ile Arg 275 280 285 Asn Tyr Thr His Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met Tyr Lys 290 295 300 Gly Thr Val Ser Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Tyr Trp Pro 305 310 315 320 Gly Leu Gln Ser Leu Ile Gly Asp Ile Asp Asn Ala Met Arg Thr Phe 325 330 335 Leu Asn Tyr Tyr Thr Val Trp Lys Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe 340 345 350 Tyr Asn Ile Pro Gln Gly Tyr Thr Val Glu Lys Arg Glu Gly Tyr Pro 355 360 365 Leu Arg Pro Glu Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Arg Ala Thr 370 375 380 Gly Asp Pro Thr Leu Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile 385 390 395 400 Glu Lys Ile Ser Lys Val Glu Cys Gly Phe Ala Thr Ile Lys Asp Leu 405 410 415 Arg Asp His Lys Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu 420 425 430 Thr Val Lys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe His Pro Asn Asn Phe Ile His 435 440 445 Asn Asn Gly Ser Thr Phe Asp Ser Val Met Thr Pro His Gly Glu Cys 450 455 460 Ile Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Ile 465 470 475 480 Asp Pro Ala Ala Leu His Cys Cys Arg Arg Leu Lys Glu Glu Gln Trp 485 490 495 Glu Val Glu Asp Leu Ile Lys Glu Phe Tyr Ser Leu Arg Gln Ser Arg 500 505 510 Ser Arg Ala Gln Arg Lys Thr Val Ser Ser Gly Pro Trp Glu Pro Pro 515 520 525 Ala Gly Pro Gly Thr Leu Ser Ser Pro Glu Asn Gln Pro Arg Glu Lys 530 535 540 Gln Pro Ala Arg Gln Arg Ala Pro Leu Leu Ser Cys Pro Ser Gln Pro 545 550 555 560 Phe Thr Ser Lys Leu Ala Leu Leu Gly Gln Val Phe Leu Asp Ser Ser 565 570 575 <210> 3 <211> 578 <212> PRT <213> Cricetulus griseus <400> 3 Met Pro Phe Arg Leu Leu Ile Pro Leu Gly Leu Val Cys Val Phe Leu 1 5 10 15 Pro Leu His His Gly Ala Pro Gly Pro Asp Gly Thr Ala Pro Asp Pro 20 25 30 Ala His Tyr Arg Glu Arg Val Lys Ala Met Phe Tyr His Ala Tyr Asp 35 40 45 Ser Tyr Leu Glu Asn Ala Phe Pro Tyr Asp Glu Leu Arg Pro Leu Thr 50 55 60 Cys Asp Gly His Asp Thr Trp Gly Ser Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp 65 70 75 80 Ala Leu Asp Thr Leu Leu Ile Leu Gly Asn Thr Ser Glu Phe Gln Arg 85 90 95 Val Val Glu Val Leu Gln Asp Asn Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn 100 105 110 Ala Ser Val Phe Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser 115 120 125 Ala His Leu Leu Ser Lys Lys Ala Gly Val Glu Val Glu Ala Gly Trp 130 135 140 Pro Cys Ser Gly Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Glu Ala Ala Arg Lys 145 150 155 160 Leu Leu Pro Ala Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val 165 170 175 Asn Leu Leu His Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr 180 185 190 Ala Gly Ile Gly Thr Phe Ile Val Glu Phe Ala Thr Leu Ser Ser Leu 195 200 205 Thr Gly Asp Pro Val Phe Glu Asp Val Ala Arg Leu Ala Leu Met Arg 210 215 220 Leu Trp Glu Ser Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp 225 230 235 240 Val Leu Thr Gly Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly 245 250 255 Val Asp Ser Tyr Phe Glu Tyr Leu Val Lys Gly Ala Ile Leu Leu Gln 260 265 270 Asp Lys Lys Leu Met Ala Met Phe Leu Glu Tyr Asn Arg Ala Ile Arg 275 280 285 Asn Tyr Thr His Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met Tyr Lys 290 295 300 Gly Thr Val Ser Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Tyr Trp Pro 305 310 315 320 Gly Leu Gln Ser Leu Ile Gly Asp Ile Asp Asn Ala Met Arg Thr Phe 325 330 335 Leu Asn Tyr Tyr Thr Val Trp Lys Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe 340 345 350 Tyr Asn Ile Ala Gln Gly Tyr Thr Val Glu Lys Arg Glu Gly Tyr Pro 355 360 365 Leu Arg Pro Glu Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Arg Ala Thr 370 375 380 Gly Asp Pro Thr Leu Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile 385 390 395 400 Glu Lys Ile Ser Lys Val Glu Cys Gly Phe Ala Thr Ile Lys Asp Leu 405 410 415 Arg Asp His Lys Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu 420 425 430 Thr Val Lys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe His Pro Asn Asn Phe Ile His 435 440 445 Asn Asn Gly Ser Thr Phe Asp Ser Val Met Thr Pro His Gly Glu Cys 450 455 460 Ile Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Ile 465 470 475 480 Asp Pro Ala Ala Leu His Cys Cys Arg Arg Leu Lys Glu Glu Gln Trp 485 490 495 Glu Val Glu Asp Leu Met Arg Glu Leu His Ser Leu Lys Gln Ser Arg 500 505 510 Ser Arg Ala Gln Arg Lys Thr Thr Ser Ser Gly Pro Trp Glu Pro Pro 515 520 525 Ala Gly Pro Gly Ser Pro Ser Ala Pro Gly Lys Gln Asp Gln Pro Arg 530 535 540 Glu Lys Gln Pro Ala Lys Gln Arg Thr Pro Leu Leu Ser Cys Pro Ser 545 550 555 560 Gln Pro Phe Thr Ser Lys Leu Ala Leu Leu Gly Gln Val Phe Leu Asp 565 570 575 Ser Ser <210> 4 <211> 578 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Met Pro Phe Arg Leu Leu Ile Pro Leu Gly Leu Leu Cys Ala Leu Leu 1 5 10 15 Pro Gln His His Gly Ala Pro Gly Pro Asp Gly Ser Ala Pro Asp Pro 20 25 30 Ala His Tyr Arg Glu Arg Val Lys Ala Met Phe Tyr His Ala Tyr Asp 35 40 45 Ser Tyr Leu Glu Asn Ala Phe Pro Phe Asp Glu Leu Arg Pro Leu Thr 50 55 60 Cys Asp Gly His Asp Thr Trp Gly Ser Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp 65 70 75 80 Ala Leu Asp Thr Leu Leu Ile Leu Gly Asn Val Ser Glu Phe Gln Arg 85 90 95 Val Val Glu Val Leu Gln Asp Ser Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn 100 105 110 Ala Ser Val Phe Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser 115 120 125 Ala His Leu Leu Ser Lys Lys Ala Gly Val Glu Val Glu Ala Gly Trp 130 135 140 Pro Cys Ser Gly Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Glu Ala Ala Arg Lys 145 150 155 160 Leu Leu Pro Ala Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val 165 170 175 Asn Leu Leu His Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr 180 185 190 Ala Gly Ile Gly Thr Phe Ile Val Glu Phe Ala Thr Leu Ser Ser Leu 195 200 205 Thr Gly Asp Pro Val Phe Glu Asp Val Ala Arg Val Ala Leu Met Arg 210 215 220 Leu Trp Glu Ser Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp 225 230 235 240 Val Leu Thr Gly Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly 245 250 255 Val Asp Ser Tyr Phe Glu Tyr Leu Val Lys Gly Ala Ile Leu Leu Gln 260 265 270 Asp Lys Lys Leu Met Ala Met Phe Leu Glu Tyr Asn Lys Ala Ile Arg 275 280 285 Asn Tyr Thr Arg Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met Tyr Lys 290 295 300 Gly Thr Val Ser Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Tyr Trp Pro 305 310 315 320 Gly Leu Gln Ser Leu Ile Gly Asp Ile Asp Asn Ala Met Arg Thr Phe 325 330 335 Leu Asn Tyr Tyr Thr Val Trp Lys Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe 340 345 350 Tyr Asn Ile Pro Gln Gly Tyr Thr Val Glu Lys Arg Glu Gly Tyr Pro 355 360 365 Leu Arg Pro Glu Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Arg Ala Thr 370 375 380 Gly Asp Pro Thr Leu Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile 385 390 395 400 Glu Lys Ile Ser Lys Val Glu Cys Gly Phe Ala Thr Ile Lys Asp Leu 405 410 415 Arg Asp His Lys Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu 420 425 430 Thr Val Lys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe Asp Pro Thr Asn Phe Ile His 435 440 445 Asn Asn Gly Ser Thr Phe Asp Thr Val Ile Thr Pro Tyr Gly Glu Cys 450 455 460 Ile Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Ile 465 470 475 480 Asp Pro Ala Ala Leu His Cys Cys Gln Arg Leu Lys Glu Glu Gln Trp 485 490 495 Glu Val Glu Asp Leu Met Arg Glu Phe Tyr Ser Leu Lys Arg Ser Arg 500 505 510 Ser Lys Phe Gln Lys Asn Thr Val Ser Ser Gly Pro Trp Glu Pro Pro 515 520 525 Ala Arg Pro Gly Thr Leu Phe Ser Pro Glu Asn His Asp Gln Ala Arg 530 535 540 Glu Arg Lys Pro Ala Lys Gln Lys Val Pro Leu Leu Ser Cys Pro Ser 545 550 555 560 Gln Pro Phe Thr Ser Lys Leu Ala Leu Leu Gly Gln Val Phe Leu Asp 565 570 575 Ser Ser <210> 5 <211> 578 <212> PRT <213> Pan troglodytes <400> 5 Met Pro Phe Arg Leu Leu Ile Pro Leu Gly Leu Leu Cys Ala Leu Leu 1 5 10 15 Pro Leu His His Gly Ala Pro Gly Pro Asp Gly Ser Ala Pro Asp Pro 20 25 30 Ala His Tyr Arg Glu Arg Val Lys Ala Met Phe Tyr His Ala Tyr Asp 35 40 45 Ser Tyr Leu Glu Asn Ala Phe Pro Phe Asp Glu Leu Arg Pro Leu Thr 50 55 60 Cys Asp Gly His Asp Thr Trp Gly Ser Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp 65 70 75 80 Ala Leu Asp Thr Leu Leu Ile Leu Gly Asn Val Ser Glu Phe Gln Arg 85 90 95 Val Val Glu Val Leu Gln Asp Ser Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn 100 105 110 Ala Ser Val Phe Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser 115 120 125 Ala His Leu Leu Ser Lys Lys Ala Gly Val Glu Val Glu Ala Gly Trp 130 135 140 Pro Cys Ser Gly Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Glu Ala Ala Arg Lys 145 150 155 160 Leu Leu Pro Ala Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val 165 170 175 Asn Leu Leu His Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr 180 185 190 Ala Gly Ile Gly Thr Phe Ile Val Glu Phe Ala Thr Leu Ser Ser Leu 195 200 205 Thr Gly Asp Pro Val Phe Glu Asp Val Ala Arg Val Ala Leu Met Arg 210 215 220 Leu Trp Glu Ser Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp 225 230 235 240 Val Leu Thr Gly Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly 245 250 255 Val Asp Ser Tyr Phe Glu Tyr Leu Val Lys Gly Ala Ile Leu Leu Gln 260 265 270 Asp Lys Lys Leu Met Ala Met Phe Leu Glu Tyr Asn Lys Ala Ile Arg 275 280 285 Asn Tyr Thr Arg Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met Tyr Lys 290 295 300 Gly Thr Val Ser Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Tyr Trp Pro 305 310 315 320 Gly Leu Gln Ser Leu Ile Gly Asp Ile Asp Asn Ala Met Arg Thr Phe 325 330 335 Leu Asn Tyr Tyr Thr Val Trp Lys Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe 340 345 350 Tyr Asn Ile Pro Gln Gly Tyr Thr Val Glu Lys Arg Glu Gly Tyr Pro 355 360 365 Leu Arg Pro Glu Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Arg Ala Thr 370 375 380 Gly Asp Pro Thr Leu Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile 385 390 395 400 Glu Lys Ile Ser Lys Val Glu Cys Gly Phe Ala Thr Ile Lys Asp Leu 405 410 415 Arg Asp His Lys Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu 420 425 430 Thr Val Lys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe Asp Pro Thr Asn Phe Ile His 435 440 445 Asn Asn Gly Ser Thr Phe Asp Ala Val Ile Thr Pro Tyr Gly Glu Cys 450 455 460 Ile Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Ile 465 470 475 480 Asp Pro Ala Ala Leu His Cys Cys Gln Arg Leu Lys Glu Glu Gln Trp 485 490 495 Glu Val Glu Asp Leu Met Arg Glu Phe Tyr Ser Leu Lys Arg Ser Arg 500 505 510 Ser Lys Phe Gln Lys Lys Thr Val Ser Ser Gly Pro Trp Glu Pro Pro 515 520 525 Ala Arg Pro Gly Thr Leu Phe Ser Pro Glu Asn His Asp Gln Ala Arg 530 535 540 Glu Arg Lys Pro Ala Lys Gln Lys Val Pro Leu Leu Ser Cys Pro Ser 545 550 555 560 Gln Pro Phe Thr Ser Lys Leu Ala Leu Leu Gly Gln Val Phe Leu Asp 565 570 575 Ser Ser <210> 6 <211> 513 <212> PRT <213> Pongo pygmaeus <400> 6 Met Asn Thr Leu Ser Cys Ser Leu Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp Ala 1 5 10 15 Leu Asp Thr Leu Leu Ile Leu Gly Asn Val Ser Glu Phe Gln Arg Val 20 25 30 Val Glu Val Leu Gln Asp Asn Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn Ala 35 40 45 Ser Val Phe Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser Ala 50 55 60 His Leu Leu Ser Lys Lys Ala Gly Val Glu Val Glu Ala Gly Trp Pro 65 70 75 80 Cys Ser Gly Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Glu Ala Ala Arg Lys Leu 85 90 95 Leu Pro Ala Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val Asn 100 105 110 Leu Leu His Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr Ala 115 120 125 Gly Ile Gly Thr Phe Ile Val Glu Phe Ala Thr Leu Ser Ser Leu Thr 130 135 140 Gly Asp Pro Val Phe Glu Asp Val Ala Arg Val Ala Leu Met Arg Leu 145 150 155 160 Trp Glu Ser Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp Val 165 170 175 Leu Thr Gly Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly Val 180 185 190 Asp Ser Tyr Phe Glu Tyr Leu Val Lys Gly Ala Ile Leu Leu Gln Asp 195 200 205 Lys Lys Leu Met Ala Met Phe Leu Glu Tyr Asn Lys Ala Ile Arg Asn 210 215 220 Tyr Thr Arg Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met Tyr Lys Gly 225 230 235 240 Thr Val Ser Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Tyr Trp Pro Gly 245 250 255 Leu Gln Ser Leu Ile Gly Asp Ile Asp Asn Ala Met Arg Thr Phe Leu 260 265 270 Asn Tyr Tyr Thr Val Trp Lys Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe Tyr 275 280 285 Asn Ile Pro Gln Gly Tyr Thr Val Glu Lys Arg Glu Gly Tyr Pro Leu 290 295 300 Arg Pro Glu Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Arg Ala Thr Gly 305 310 315 320 Asp Pro Thr Leu Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Ile Ser Lys Val Glu Cys Gly Phe Ala Thr Ile Lys Asp Leu Arg 340 345 350 Asp His Lys Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu Thr 355 360 365 Val Lys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe Asp Pro Thr Asn Phe Ile His Asn 370 375 380 Asn Gly Ser Thr Phe Asp Ala Val Ile Thr Pro Tyr Gly Glu Cys Ile 385 390 395 400 Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Ile Asp 405 410 415 Pro Ala Ala Leu His Cys Cys Gln Arg Leu Lys Glu Glu Gln Trp Glu 420 425 430 Val Glu Asp Leu Met Arg Glu Phe Tyr Ser Leu Lys Arg Asn Arg Ser 435 440 445 Lys Phe Gln Lys Lys Thr Val Ser Ser Gly Pro Trp Glu Pro Pro Ala 450 455 460 Arg Pro Gly Thr Leu Phe Ser Pro Glu Asn His Asp Gln Ala Arg Gly 465 470 475 480 Arg Lys Pro Ala Lys Gln Lys Val Pro Leu Leu Ser Cys Pro Ser Gln 485 490 495 Pro Phe Thr Ser Lys Leu Ala Leu Leu Gly Gln Val Phe Leu Asp Ser 500 505 510 Ser <210> 7 <211> 572 <212> PRT <213> Danio rerio <400> 7 Leu Tyr Tyr Leu Pro Leu Phe Thr Ser Arg Tyr Phe Met Leu Thr Phe 1 5 10 15 Leu Phe Ser Ala Ile Phe Cys Ala Ala Tyr Leu Ser Pro Ile Ile Ser 20 25 30 His Val Lys Gly Arg Asp Phe Thr Glu Gln Glu Met Ser His Tyr Arg 35 40 45 Asp Arg Val Lys Ser Met Phe Tyr His Ala Tyr Asn Ser Tyr Leu Asp 50 55 60 Asn Ala Tyr Pro Tyr Asp Glu Leu Arg Pro Leu Thr Cys Asp Gly Gln 65 70 75 80 Asp Thr Trp Gly Ser Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp Ala Leu Asp Thr 85 90 95 Leu Leu Ile Leu Gly Asn His Thr Glu Phe Gln Arg Val Ala Thr Leu 100 105 110 Leu Gln Asp Thr Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn Ala Ser Val Phe 115 120 125 Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser Ala His Leu Leu 130 135 140 Ser Lys Arg Ala Gly Met Lys Val Glu Glu Gly Trp Pro Cys Ser Gly 145 150 155 160 Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Asp Ala Ala Arg Lys Leu Leu Pro Ala 165 170 175 Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val Asn Leu Leu Arg 180 185 190 Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr Ala Gly Val Gly 195 200 205 Thr Phe Ile Leu Glu Phe Ser Thr Leu Ser Arg Leu Thr Gly Asp Pro 210 215 220 Val Phe Glu Asn Val Ala Arg Lys Ala Leu Arg Ala Leu Trp Arg Thr 225 230 235 240 Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp Val Ile Thr Ser 245 250 255 Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly Val Asp Ser Tyr 260 265 270 Phe Glu Tyr Leu Val Arg Gly Ala Ile Met Leu Gln Asp Glu Glu Leu 275 280 285 Leu Thr Met Phe Tyr Glu Phe Asp Lys Ser Ile Lys Asn Tyr Thr Lys 290 295 300 Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met His Lys Gly Thr Val Ser 305 310 315 320 Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Phe Trp Pro Gly Met Gln Ser 325 330 335 Leu Ile Gly Asp Ile Ser Ser Ala Thr Lys Ser Phe His Asn Tyr Tyr 340 345 350 Ser Val Trp Arg Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe Tyr Ser Ile Pro 355 360 365 Gln Gly Tyr Thr Val Asp Lys Arg Glu Gly Tyr Pro Leu Arg Pro Glu 370 375 380 Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Lys Ala Thr Gly Asp Pro Ser 385 390 395 400 Phe Ile Gln Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile Asp Arg Ile Ser 405 410 415 Arg Val Asn Cys Gly Phe Ala Thr Val Lys Asp Val Arg Asp His Lys 420 425 430 Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu Thr Ile Lys Tyr 435 440 445 Leu Tyr Leu Leu Phe Asp Pro Asp Asn Phe Leu His Asn Thr Gly Thr 450 455 460 Glu Phe Glu Leu Gly Gly Leu Arg Gly Asp Cys Ile Leu Ser Ala Gly 465 470 475 480 Gly Tyr Val Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Leu Asp Pro Ala Ala Leu 485 490 495 His Cys Cys Ser Arg Glu Gln Gln Asp Arg Arg Glu Ile Gln Asp Ile 500 505 510 Leu Leu Ser Phe Ser Gln Pro His Thr Glu Glu Pro Ser Arg Asp Gln 515 520 525 Ser Ala Gly Gly Ser Pro Glu Ser Ile Ala Leu Lys Pro Gly Glu Gln 530 535 540 Arg Lys Ala Pro Val Leu Ser Cys Pro Thr Gln Pro Phe Ser Ala Lys 545 550 555 560 Leu Ala Val Met Gly Gln Val Phe Ser Asp Asn Ser 565 570 <210> 8 <211> 577 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> Consensus sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (12)..(12) <223> V or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (14)..(14) <223> V or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (15)..(15) <223> L or F <220> <221> MISC_FEATURE <222> (26)..(26) <223> D or E <220> <221> MISC_FEATURE <222> (28)..(28) <223> T or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (57)..(57) <223> Y or F <220> <221> MISC_FEATURE <222> (91)..(91) <223> T or V <220> <221> MISC_FEATURE <222> (104)..(104) <223> N or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (220)..(220) <223> V or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (285)..(285) <223> K or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (292)..(292) <223> H or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (356)..(356) <223> P or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (442)..(442) <223> H or D <220> <221> MISC_FEATURE <222> (444)..(444) <223> N or T <220> <221> MISC_FEATURE <222> (456)..(456) <223> S, T, or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (458)..(458) <223> M or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (461)..(461) <223> H or Y <220> <221> MISC_FEATURE <222> (489)..(489) <223> R or Q <220> <221> MISC_FEATURE <222> (502)..(502) <223> I or M <220> <221> MISC_FEATURE <222> (503)..(503) <223> K or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (505)..(505) <223> F or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (506)..(506) <223> Y or H <220> <221> MISC_FEATURE <222> (509)..(509) <223> K or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (510)..(510) <223> Q or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (513)..(513) <223> P or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (514)..(516) <223> KRA, RA, or KF <220> <221> MISC_FEATURE <222> (518)..(518) <223> R or K <220> <221> MISC_FEATURE <222> (519)..(519) <223> K or N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (522)..(522) <223> R or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (529)..(529) <223> Q or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (530)..(530) <223> S or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (531)..(531) <223> G or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (533)..(533) <223> A or G <220> <221> MISC_FEATURE <222> (534)..(534) <223> T or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (535)..(535) <223> L or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (536)..(536) <223> S or F <220> <221> MISC_FEATURE <222> (537)..(537) <223> S or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (539)..(540) <223> AN, EN, GKQD, or ENHD <220> <221> MISC_FEATURE <222> (542)..(542) <223> P or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (545)..(545) <223> K or R <220> <221> MISC_FEATURE <222> (546)..(546) <223> Q or K <220> <221> MISC_FEATURE <222> (549)..(549) <223> Q, R, or K <220> <221> MISC_FEATURE <222> (551)..(551) <223> R or K <220> <221> MISC_FEATURE <222> (552)..(552) <223> T, A, or V <400> 8 Met Pro Phe Arg Leu Leu Ile Pro Leu Gly Leu Xaa Cys Xaa Xaa Leu 1 5 10 15 Pro Leu His His Gly Ala Pro Gly Pro Xaa Gly Xaa Ala Pro Asp Pro 20 25 30 Ala His Tyr Arg Glu Arg Val Lys Ala Met Phe Tyr His Ala Tyr Asp 35 40 45 Ser Tyr Leu Glu Asn Ala Phe Pro Xaa Asp Glu Leu Arg Pro Leu Thr 50 55 60 Cys Asp Gly His Asp Thr Trp Gly Ser Phe Ser Leu Thr Leu Ile Asp 65 70 75 80 Ala Leu Asp Thr Leu Leu Ile Leu Gly Asn Xaa Ser Glu Phe Gln Arg 85 90 95 Val Val Glu Val Leu Gln Asp Xaa Val Asp Phe Asp Ile Asp Val Asn 100 105 110 Ala Ser Val Phe Glu Thr Asn Ile Arg Val Val Gly Gly Leu Leu Ser 115 120 125 Ala His Leu Leu Ser Lys Lys Ala Gly Val Glu Val Glu Ala Gly Trp 130 135 140 Pro Cys Ser Gly Pro Leu Leu Arg Met Ala Glu Glu Ala Ala Arg Lys 145 150 155 160 Leu Leu Pro Ala Phe Gln Thr Pro Thr Gly Met Pro Tyr Gly Thr Val 165 170 175 Asn Leu Leu His Gly Val Asn Pro Gly Glu Thr Pro Val Thr Cys Thr 180 185 190 Ala Gly Ile Gly Thr Phe Ile Val Glu Phe Ala Thr Leu Ser Ser Leu 195 200 205 Thr Gly Asp Pro Val Phe Glu Asp Val Ala Arg Xaa Ala Leu Met Arg 210 215 220 Leu Trp Glu Ser Arg Ser Asp Ile Gly Leu Val Gly Asn His Ile Asp 225 230 235 240 Val Leu Thr Gly Lys Trp Val Ala Gln Asp Ala Gly Ile Gly Ala Gly 245 250 255 Val Asp Ser Tyr Phe Glu Tyr Leu Val Lys Gly Ala Ile Leu Leu Gln 260 265 270 Asp Lys Lys Leu Met Ala Met Phe Leu Glu Tyr Asn Xaa Ala Ile Arg 275 280 285 Asn Tyr Thr Xaa Phe Asp Asp Trp Tyr Leu Trp Val Gln Met Tyr Lys 290 295 300 Gly Thr Val Ser Met Pro Val Phe Gln Ser Leu Glu Ala Tyr Trp Pro 305 310 315 320 Gly Leu Gln Ser Leu Ile Gly Asp Ile Asp Asn Ala Met Arg Thr Phe 325 330 335 Leu Asn Tyr Tyr Thr Val Trp Lys Gln Phe Gly Gly Leu Pro Glu Phe 340 345 350 Tyr Asn Ile Xaa Gln Gly Tyr Thr Val Glu Lys Arg Glu Gly Tyr Pro 355 360 365 Leu Arg Pro Glu Leu Ile Glu Ser Ala Met Tyr Leu Tyr Arg Ala Thr 370 375 380 Gly Asp Pro Thr Leu Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Val Glu Ser Ile 385 390 395 400 Glu Lys Ile Ser Lys Val Glu Cys Gly Phe Ala Thr Ile Lys Asp Leu 405 410 415 Arg Asp His Lys Leu Asp Asn Arg Met Glu Ser Phe Phe Leu Ala Glu 420 425 430 Thr Val Lys Tyr Leu Tyr Leu Leu Phe Xaa Pro Xaa Asn Phe Ile His 435 440 445 Asn Asn Gly Ser Thr Phe Asp Xaa Val Xaa Thr Pro Xaa Gly Glu Cys 450 455 460 Ile Leu Gly Ala Gly Gly Tyr Ile Phe Asn Thr Glu Ala His Pro Ile 465 470 475 480 Asp Pro Ala Ala Leu His Cys Cys Xaa Arg Leu Lys Glu Glu Gln Trp 485 490 495 Glu Val Glu Asp Leu Xaa Xaa Glu Xaa Xaa Ser Leu Xaa Xaa Ser Arg 500 505 510 Xaa Xaa Xaa Xaa Gln Xaa Xaa Thr Val Xaa Ser Gly Pro Trp Glu Pro 515 520 525 Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Xaa Gln Xaa Arg Glu 530 535 540 Xaa Xaa Pro Ala Xaa Gln Xaa Xaa Pro Leu Leu Ser Cys Pro Ser Gln 545 550 555 560 Pro Phe Thr Ser Lys Leu Ala Leu Leu Gly Gln Val Phe Leu Asp Ser 565 570 575 Ser <210> 9 <211> 371 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 9 Met Val Val Val Ala Ala Ala Pro Ser Ala Ala Thr Ala Ala Pro Lys 1 5 10 15 Val Leu Leu Leu Ser Gly Gln Pro Ala Ser Gly Gly Arg Ala Leu Pro 20 25 30 Leu Met Val Pro Gly Pro Arg Ala Ala Gly Ser Glu Ala Ser Gly Thr 35 40 45 Pro Gln Ala Arg Lys Arg Gln Arg Leu Thr His Leu Ser Pro Glu Glu 50 55 60 Lys Ala Leu Arg Arg Lys Leu Lys Asn Arg Val Ala Ala Gln Thr Ala 65 70 75 80 Arg Asp Arg Lys Lys Ala Arg Met Ser Glu Leu Glu Gln Gln Val Val 85 90 95 Asp Leu Glu Glu Glu Asn His Lys Leu Gln Leu Glu Asn Gln Leu Leu 100 105 110 Arg Glu Lys Thr His Gly Leu Val Val Glu Asn Gln Glu Leu Arg Thr 115 120 125 Arg Leu Gly Met Asp Thr Leu Asp Pro Asp Glu Val Pro Glu Val Glu 130 135 140 Ala Lys Gly Ser Gly Val Arg Leu Val Ala Gly Ser Ala Glu Ser Ala 145 150 155 160 Ala Gly Ala Gly Pro Val Val Thr Ser Pro Glu His Leu Pro Met Asp 165 170 175 Ser Asp Thr Val Ala Ser Ser Asp Ser Glu Ser Asp Ile Leu Leu Gly 180 185 190 Ile Leu Asp Lys Leu Asp Pro Val Met Phe Phe Lys Cys Pro Ser Pro 195 200 205 Glu Ser Ala Ser Leu Glu Glu Leu Pro Glu Val Tyr Pro Glu Gly Pro 210 215 220 Ser Ser Leu Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Val Gly Thr Ser Ser Ala 225 230 235 240 Lys Leu Glu Ala Ile Asn Glu Leu Ile Arg Phe Asp His Val Tyr Thr 245 250 255 Lys Pro Leu Val Leu Glu Ile Pro Ser Glu Thr Glu Ser Gln Thr Asn 260 265 270 Val Val Val Lys Ile Glu Glu Ala Pro Leu Ser Ser Ser Glu Glu Asp 275 280 285 His Pro Glu Phe Ile Val Ser Val Lys Lys Glu Pro Leu Glu Asp Asp 290 295 300 Phe Ile Pro Glu Leu Gly Ile Ser Asn Leu Leu Ser Ser Ser His Cys 305 310 315 320 Leu Arg Pro Pro Ser Cys Leu Leu Asp Ala His Ser Asp Cys Gly Tyr 325 330 335 Glu Gly Ser Pro Ser Pro Phe Ser Asp Met Ser Ser Pro Leu Gly Thr 340 345 350 Asp His Ser Trp Glu Asp Thr Phe Ala Asn Glu Leu Phe Pro Gln Leu 355 360 365 Ile Ser Val 370 <210> 10 <211> 369 <212> PRT <213> Cricetulus griseus <400> 10 Met Val Val Val Ala Ala Ser Pro Ser Ala Ala Thr Ala Ala Pro Lys 1 5 10 15 Val Leu Leu Leu Ser Gly Gln Pro Ala Ala Asp Gly Arg Ala Leu Pro 20 25 30 Leu Met Val Pro Gly Ser Arg Ala Ala Gly Ser Glu Ala Asn Gly Ala 35 40 45 Pro Gln Ala Arg Lys Arg Gln Arg Leu Thr His Leu Ser Pro Glu Glu 50 55 60 Lys Ala Leu Arg Arg Lys Leu Lys Asn Arg Val Ala Ala Gln Thr Ala 65 70 75 80 Arg Asp Arg Lys Lys Ala Arg Met Ser Glu Leu Glu Gln Gln Val Val 85 90 95 Asp Leu Glu Glu Glu Asn Gln Lys Leu Leu Leu Glu Asn Gln Leu Leu 100 105 110 Arg Glu Lys Thr His Gly Leu Val Ile Glu Asn Gln Glu Leu Arg Thr 115 120 125 Arg Leu Gly Met Asp Val Leu Thr Thr Glu Glu Ala Pro Glu Thr Glu 130 135 140 Ser Lys Gly Asn Gly Val Arg Pro Val Ala Gly Ser Ala Glu Ser Ala 145 150 155 160 Ala Gly Ala Gly Pro Val Val Thr Ser Pro Glu His Leu Pro Met Asp 165 170 175 Ser Asp Thr Val Asp Ser Ser Asp Ser Glu Ser Asp Ile Leu Leu Gly 180 185 190 Ile Leu Asp Lys Leu Asp Pro Val Met Phe Phe Lys Cys Pro Ser Pro 195 200 205 Glu Ser Ala Asn Leu Glu Glu Leu Pro Glu Val Tyr Pro Gly Pro Ser 210 215 220 Ser Leu Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Val Gly Thr Ser Ser Ala Lys 225 230 235 240 Leu Glu Ala Ile Asn Glu Leu Ile Arg Phe Asp His Val Tyr Thr Lys 245 250 255 Pro Leu Val Leu Glu Ile Pro Ser Glu Thr Glu Ser Gln Thr Asn Val 260 265 270 Val Val Lys Ile Glu Glu Ala Pro Leu Ser Ser Ser Glu Glu Asp His 275 280 285 Pro Glu Phe Ile Val Ser Val Lys Lys Glu Pro Glu Glu Asp Phe Ile 290 295 300 Pro Glu Pro Gly Ile Ser Asn Leu Leu Ser Ser Ser His Cys Leu Lys 305 310 315 320 Pro Ser Ser Cys Leu Leu Asp Ala Tyr Ser Asp Cys Gly Tyr Glu Gly 325 330 335 Ser Pro Ser Pro Phe Ser Asp Met Ser Ser Pro Leu Gly Ile Asp His 340 345 350 Ser Trp Glu Asp Thr Phe Ala Asn Glu Leu Phe Pro Gln Leu Ile Ser 355 360 365 Val <210> 11 <211> 376 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Met Val Val Val Ala Ala Ala Pro Asn Pro Ala Asp Gly Thr Pro Lys 1 5 10 15 Val Leu Leu Leu Ser Gly Gln Pro Ala Ser Ala Ala Gly Ala Pro Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Leu Pro Leu Met Val Pro Ala Gln Arg Gly Ala Ser Pro 35 40 45 Glu Ala Ala Ser Gly Gly Leu Pro Gln Ala Arg Lys Arg Gln Arg Leu 50 55 60 Thr His Leu Ser Pro Glu Glu Lys Ala Leu Arg Arg Lys Leu Lys Asn 65 70 75 80 Arg Val Ala Ala Gln Thr Ala Arg Asp Arg Lys Lys Ala Arg Met Ser 85 90 95 Glu Leu Glu Gln Gln Val Val Asp Leu Glu Glu Glu Asn Gln Lys Leu 100 105 110 Leu Leu Glu Asn Gln Leu Leu Arg Glu Lys Thr His Gly Leu Val Val 115 120 125 Glu Asn Gln Glu Leu Arg Gln Arg Leu Gly Met Asp Ala Leu Val Ala 130 135 140 Glu Glu Glu Ala Glu Ala Lys Gly Asn Glu Val Arg Pro Val Ala Gly 145 150 155 160 Ser Ala Glu Ser Ala Ala Gly Ala Gly Pro Val Val Thr Pro Pro Glu 165 170 175 His Leu Pro Met Asp Ser Gly Gly Ile Asp Ser Ser Asp Ser Glu Ser 180 185 190 Asp Ile Leu Leu Gly Ile Leu Asp Asn Leu Asp Pro Val Met Phe Phe 195 200 205 Lys Cys Pro Ser Pro Glu Pro Ala Ser Leu Glu Glu Leu Pro Glu Val 210 215 220 Tyr Pro Glu Gly Pro Ser Ser Leu Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Val 225 230 235 240 Gly Thr Ser Ser Ala Lys Leu Glu Ala Ile Asn Glu Leu Ile Arg Phe 245 250 255 Asp His Ile Tyr Thr Lys Pro Leu Val Leu Glu Ile Pro Ser Glu Thr 260 265 270 Glu Ser Gln Ala Asn Val Val Val Lys Ile Glu Glu Ala Pro Leu Ser 275 280 285 Pro Ser Glu Asn Asp His Pro Glu Phe Ile Val Ser Val Lys Glu Glu 290 295 300 Pro Val Glu Asp Asp Leu Val Pro Glu Leu Gly Ile Ser Asn Leu Leu 305 310 315 320 Ser Ser Ser His Cys Pro Lys Pro Ser Ser Cys Leu Leu Asp Ala Tyr 325 330 335 Ser Asp Cys Gly Tyr Gly Gly Ser Leu Ser Pro Phe Ser Asp Met Ser 340 345 350 Ser Leu Leu Gly Val Asn His Ser Trp Glu Asp Thr Phe Ala Asn Glu 355 360 365 Leu Phe Pro Gln Leu Ile Ser Val 370 375 <210> 12 <211> 383 <212> PRT <213> Danio rerio <400> 12 Met Val Val Val Thr Ala Gly Thr Gly Gly Ala His Lys Val Leu Leu 1 5 10 15 Ile Ser Gly Lys Gln Ser Ala Ser Thr Gly Ala Thr Gln Gly Gly Tyr 20 25 30 Ser Arg Ser Ile Ser Val Met Ile Pro Asn Gln Ala Ser Ser Asp Ser 35 40 45 Asp Ser Thr Thr Ser Gly Pro Pro Leu Arg Lys Arg Gln Arg Leu Thr 50 55 60 His Leu Ser Pro Glu Glu Lys Ala Leu Arg Arg Lys Leu Lys Asn Arg 65 70 75 80 Val Ala Ala Gln Thr Ala Arg Asp Arg Lys Lys Ala Lys Met Gly Glu 85 90 95 Leu Glu Gln Gln Val Leu Glu Leu Glu Leu Glu Asn Gln Lys Leu His 100 105 110 Val Glu Asn Arg Leu Leu Arg Asp Lys Thr Ser Asp Leu Leu Ser Glu 115 120 125 Asn Glu Glu Leu Arg Gln Arg Leu Gly Leu Asp Thr Leu Glu Thr Lys 130 135 140 Glu Gln Val Gln Val Leu Glu Ser Ala Val Ser Asp Leu Gly Leu Val 145 150 155 160 Thr Gly Ser Ser Glu Ser Ala Ala Gly Ala Gly Pro Ala Val Pro Lys 165 170 175 Ser Glu Asp Phe Thr Met Asp Thr His Ser Pro Gly Pro Ala Asp Ser 180 185 190 Glu Ser Asp Leu Leu Leu Gly Ile Leu Asp Ile Leu Asp Pro Glu Leu 195 200 205 Phe Leu Lys Thr Asp Leu Pro Glu Ala Gln Glu Pro Gln Gln Glu Leu 210 215 220 Val Leu Val Gly Gly Ala Gly Glu Gln Val Pro Ser Ser Ala Pro Ala 225 230 235 240 Ala Leu Gly Pro Ala Pro Val Lys Leu Glu Ala Leu Asn Glu Leu Ile 245 250 255 His Phe Asp His Ile Tyr Thr Lys Pro Ala Glu Val Leu Val Ser Glu 260 265 270 Glu Ser Ile Cys Glu Val Lys Ala Glu Asp Ser Val Ala Phe Ser Glu 275 280 285 Thr Glu Glu Glu Ile Gln Val Glu Asp Gln Thr Val Ser Val Lys Asp 290 295 300 Glu Pro Glu Glu Val Val Ile Pro Ala Glu Asn Gln Asn Pro Asp Ala 305 310 315 320 Ala Asp Asp Phe Leu Ser Asp Thr Ser Phe Gly Gly Tyr Glu Lys Ala 325 330 335 Ser Tyr Leu Thr Asp Ala Tyr Ser Asp Ser Gly Tyr Glu Arg Ser Pro 340 345 350 Ser Pro Phe Ser Asn Ile Ser Ser Pro Leu Cys Ser Glu Gly Ser Trp 355 360 365 Asp Asp Met Phe Ala Ser Glu Leu Phe Pro Gln Leu Ile Ser Val 370 375 380 <210> 13 <211> 371 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> consensus sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> A or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> S or N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> A or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (12)..(12) <223> T or D <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(13) <223> A or G <220> <221> MISC_FEATURE <222> (14)..(14) <223> A or T <220> <221> MISC_FEATURE <222> (26)..(26) <223> S or A <220> <221> misc_feature <222> (27)..(27) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (29)..(29) <223> R or Q <220> <221> MISC_FEATURE <222> (37)..(37) <223> G or A <220> <221> misc_feature <222> (38)..(38) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (40)..(40) <223> A or G <220> <221> MISC_FEATURE <222> (46)..(46) <223> S or N, or ASG <220> <221> MISC_FEATURE <222> (48)..(48) <223> T, A, or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (103)..(103) <223> H or Q <220> <221> MISC_FEATURE <222> (106)..(106) <223> Q or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (121)..(121) <223> V or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (128)..(128) <223> T or Q <220> <221> MISC_FEATURE <222> (134)..(134) <223> T, V, or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (136)..(136) <223> D, T, or V <220> <221> MISC_FEATURE <222> (137)..(137) <223> P, T, or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (138)..(138) <223> D or E <220> <221> MISC_FEATURE <222> (140)..(140) <223> V, A, or none <220> <221> MISC_FEATURE <222> (141)..(141) <223> P or none <220> <221> MISC_FEATURE <222> (143)..(143) <223> V, T, or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (145)..(145) <223> A or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (148)..(148) <223> S or N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (149)..(149) <223> G or E <220> <221> MISC_FEATURE <222> (152)..(152) <223> L or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (169)..(169) <223> S or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (178)..(178) <223> D or G <220> <221> MISC_FEATURE <222> (179)..(179) <223> T or G <220> <221> MISC_FEATURE <222> (180)..(180) <223> V or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (181)..(181) <223> A or D <220> <221> MISC_FEATURE <222> (196)..(196) <223> K or N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (210)..(210) <223> S or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (212)..(212) <223> S or N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (222)..(222) <223> E or none <220> <221> MISC_FEATURE <222> (254)..(254) <223> V or I <220> <221> MISC_FEATURE <222> (271)..(271) <223> T or A <220> <221> MISC_FEATURE <222> (284)..(284) <223> S or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (287)..(287) <223> E or N <220> <221> MISC_FEATURE <222> (298)..(298) <223> K or E <220> <221> MISC_FEATURE <222> (301)..(301) <223> L, V, or none <220> <221> MISC_FEATURE <222> (303)..(303) <223> D or E <220> <221> MISC_FEATURE <222> (305)..(305) <223> F or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (306)..(306) <223> I or V <220> <221> MISC_FEATURE <222> (309)..(309) <223> L or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (321)..(321) <223> L or P <220> <221> MISC_FEATURE <222> (322)..(322) <223> R or K <220> <221> MISC_FEATURE <222> (324)..(324) <223> P or S <220> <221> MISC_FEATURE <222> (331)..(331) <223> H or Y <220> <221> MISC_FEATURE <222> (337)..(337) <223> E or G <220> <221> MISC_FEATURE <222> (340)..(340) <223> P or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (349)..(349) <223> P or L <220> <221> MISC_FEATURE <222> (352)..(352) <223> T, I, or V <220> <221> MISC_FEATURE <222> (353)..(353) <223> D or N <400> 13 Met Val Val Val Ala Ala Xaa Pro Xaa Xaa Ala Xaa Xaa Xaa Pro Lys 1 5 10 15 Val Leu Leu Leu Ser Gly Gln Pro Ala Xaa Xaa Gly Arg Ala Leu Pro 20 25 30 Leu Met Val Pro Xaa Xaa Arg Xaa Ala Gly Ser Glu Ala Xaa Gly Xaa 35 40 45 Pro Gln Ala Arg Lys Arg Gln Arg Leu Thr His Leu Ser Pro Glu Glu 50 55 60 Lys Ala Leu Arg Arg Lys Leu Lys Asn Arg Val Ala Ala Gln Thr Ala 65 70 75 80 Arg Asp Arg Lys Lys Ala Arg Met Ser Glu Leu Glu Gln Gln Val Val 85 90 95 Asp Leu Glu Glu Glu Asn Xaa Lys Leu Xaa Leu Glu Asn Gln Leu Leu 100 105 110 Arg Glu Lys Thr His Gly Leu Val Xaa Glu Asn Gln Glu Leu Arg Xaa 115 120 125 Arg Leu Gly Met Asp Xaa Leu Asp Xaa Xaa Glu Xaa Xaa Glu Xaa Glu 130 135 140 Xaa Lys Gly Xaa Xaa Val Arg Xaa Val Ala Gly Ser Ala Glu Ser Ala 145 150 155 160 Ala Gly Ala Gly Pro Val Val Thr Xaa Pro Glu His Leu Pro Met Asp 165 170 175 Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Ser Asp Ser Glu Ser Asp Ile Leu Leu Gly 180 185 190 Ile Leu Asp Xaa Leu Asp Pro Val Met Phe Phe Lys Cys Pro Ser Pro 195 200 205 Glu Xaa Ala Xaa Leu Glu Glu Leu Pro Glu Val Tyr Pro Xaa Gly Pro 210 215 220 Ser Ser Leu Pro Ala Ser Leu Ser Leu Ser Val Gly Thr Ser Ser Ala 225 230 235 240 Lys Leu Glu Ala Ile Asn Glu Leu Ile Arg Phe Asp His Xaa Tyr Thr 245 250 255 Lys Pro Leu Val Leu Glu Ile Pro Ser Glu Thr Glu Ser Gln Xaa Asn 260 265 270 Val Val Val Lys Ile Glu Glu Ala Pro Leu Ser Xaa Ser Glu Xaa Asp 275 280 285 His Pro Glu Phe Ile Val Ser Val Lys Xaa Glu Pro Xaa Glu Xaa Asp 290 295 300 Xaa Xaa Pro Glu Xaa Gly Ile Ser Asn Leu Leu Ser Ser Ser His Cys 305 310 315 320 Xaa Xaa Pro Xaa Ser Cys Leu Leu Asp Ala Xaa Ser Asp Cys Gly Tyr 325 330 335 Xaa Gly Ser Xaa Ser Pro Phe Ser Asp Met Ser Ser Xaa Leu Gly Xaa 340 345 350 Xaa His Ser Trp Glu Asp Thr Phe Ala Asn Glu Leu Phe Pro Gln Leu 355 360 365 Ile Ser Val 370 <210> 14 <211> 7686 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 14 aagcttatac tcgagctcta gattgggaac ccgggtctct cgaattcgat gccttttaga 60 ctcctgatac cattgggtct tgtttgcgtt ctcctccctc tccatcacgg cgccccaggt 120 ccagacggta ccgcacctga tcctgcccat taccgcgaac gcgttaaagc catgttctac 180 cacgcctatg actcctatct ggaaaatgca ttcccctatg atgagctccg accccttacc 240 tgcgatggtc atgatacttg gggctctttt tcccttaccc ttattgacgc tctggacaca 300 ctccttatcc tcggaaacac cagcgaattt caaagagtag ttgaagtact tcaggacaat 360 gtcgactttg acatcgatgt gaacgcatca gttttcgaaa caaatataag agtcgttgga 420 ggtctgctct ccgcccacct tctctctaaa aaagccggag tagaagttga agctggctgg 480 ccctgctccg gacccctcct tcgtatggct gaagaagctg cccgcaaact ccttcccgct 540 tttcagaccc caaccggtat gccctatggt actgttaacc tcctgcacgg agtaaatccc 600 ggcgaaaccc ccgtcacatg tacagccgga attggaacct ttattgtgga atttgcaacc 660 cttagcagcc tgaccggaga tcctgtattc gaagacgtgg ctcgggttgc cctgatgcga 720 ctgtgggaat ccaggtctga tatcggtctg gtcggtaacc atatagacgt actcactggt 780 aaatgggttg cacaagacgc tggaattggg gcaggcgtgg attcttattt tgaatatctc 840 gtaaaagggg ccatactctt gcaggacaaa aaacttatgg ctatgttcct ggaatataac 900 aaagctatta ggaactacac acacttcgat gattggtatt tgtgggtcca aatgtataaa 960 ggaaccgttt ctatgcctgt ctttcagtca ctggaggctt attggcctgg tctgcaatcc 1020 ctgatcggag acattgacaa tgcaatgagg acattcctta attattacac tgtttggaag 1080 cagttcggcg gattgcccga attttacaac attcctcaag gctatacagt tgaaaaaaga 1140 gaaggatatc ccctgcgccc cgagcttatt gaaagcgcta tgtatctgta tcgtgcaaca 1200 ggtgatccaa ccctgcttga actgggacga gacgccgtcg aatcaatcga gaaaatttca 1260 aaagtggaat gcggctttgc aacaattaaa gatcttagag accacaaact ggataatcgc 1320 atggagtcat tctttttggc tgagaccgtc aagtatctgt atctgctttt tcatcccaac 1380 aacttcatcc ataataacgg gtccaccttc gattcagtca tgacccctca cggtgaatgc 1440 atactcggag ctggaggcta tatttttaac actgaagctc acccaattga cccagctgcc 1500 cttcattgtt gtcgacgtct gaaagaagaa caatgggagg ttgaagattt gatcaaagaa 1560 ttttactcac ttaaacaaag tcgacctaaa cgcgcacaga gaaaaactgt aagatctggt 1620 ccttgggaac ctcagtccgg cccagcaact ctttcatccc ccgccaacca accacgagaa 1680 aaacaaccag cccaacagag aacccccctg ctcagctgcc cctctcagcc cttcacttca 1740 aaactcgccc tgcttggaca ggtgtttctg gactcctctt gatttaaaca cgcggccgct 1800 aatcagccat accacatttg tagaggtttt acttgcttta aaaaacctcc cacacctccc 1860 cctgaacctg aaacataaaa tgaatgcaat tgttgttgtt aacttgttta ttgcagctta 1920 taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat ttttttcact 1980 gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct accggtaggg 2040 cccctctctt catgtgagca aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt 2100 tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa 2160 gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct 2220 ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc 2280 cttcgggaag cgtggcgctt tctcaatgct cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg 2340 tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct 2400 tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag 2460 cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga 2520 agtggtggcc taactacggc tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga 2580 agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg 2640 gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag 2700 aagatccttt gatcttttct acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag 2760 ggattttggt catgggcgcg cctcatactc ctgcaggcat gagattatca aaaaggatct 2820 tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt 2880 aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc 2940 tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg 3000 gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga taccgcgaga cccacgctca ccggctccag 3060 atttatcagc aataaaccag ccagccggaa gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt 3120 tatccgcctc catccagtct attaattgtt gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag 3180 ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt 3240 ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca 3300 tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg 3360 ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag cactgcataa ttctcttact gtcatgccat 3420 ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta 3480 tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt caatacggga taataccgcg ccacatagca 3540 gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct 3600 taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat 3660 cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa 3720 agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa tactcatact cttccttttt caatattatt 3780 gaagcattta tcagggttat tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa 3840 ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt gccacctgac gtcaggtacc 3900 aagcctaggc ctccaaaaaa gcctcctcac tacttctgga atagctcaga ggcagaggcg 3960 gcctcggcct ctgcataaat aaaaaaaatt agtcagccat ggggcggaga atgggcggaa 4020 ctgggcggag ttaggggcgg gatgggcgga gttaggggcg ggactatggt tgctgactaa 4080 ttgagatgca tgctttgcat acttctgcct gctggggagc ctggggactt tccacacctg 4140 gttgctgact aattgagatg catgctttgc atacttctgc ctgctgggga gcctggggac 4200 tttccacacc ggatccacca tgggatcggc cattgaacaa gatggattgc acgcaggttc 4260 tccggccgct tgggtggaga ggctattcgg ctatgactgg gcacaacaga caatcggctg 4320 ctctgatgcc gccgtgttcc ggctgtcagc gcaggggcgc ccggttcttt ttgtcaagac 4380 cgacctgtcc ggtgccctga atgaactgca ggacgaggca gcgcggctat cgtggctggc 4440 cacgacgggc gttccttgcg cagctgtgct cgacgttgtc actgaagcgg gaagggactg 4500 gctgctattg ggcgaagtgc cggggcagga tctcctgtca tctcaccttg ctcctgccga 4560 gaaagtatcc atcatggctg atgcaatgcg gcggctgcat acgcttgatc cggctacctg 4620 cccattcgac caccaagcga aacatcgcat cgagcgagca cgtactcgga tggaagccgg 4680 tcttgtcgat caggatgatc tggacgaaga gcatcagggg ctcgcgccag ccgaactgtt 4740 cgccaggctc aaggcgcgca tgcccgacgg cgatgatctc gtcgtgaccc atggcgatgc 4800 ctgcttgccg aatatcatgg tggaaaatgg ccgcttttct ggattcatcg actgtggccg 4860 gctgggtgtg gcggaccgct atcaggacat agcgttggct acccgtgata ttgctgaaga 4920 gcttggcggc gaatgggctg accgcttcct cgtgctttac ggtatcgccg ctcccgattc 4980 gcagcgcatc gccttctatc gccttcttga cgagttcttc tgaacgcgtg ctgtaagtct 5040 gcagaaattg atgatctatt aaacaataaa gatgtccact aaaatggaag tttttcctgt 5100 catactttgt taagaagggt gagaacagag tacctacatt ttgaatggaa ggattggagc 5160 tacgggggtg ggggtggggt gggattagat aaatgcctgc tctttactga aggctcttta 5220 ctattgcttt atgataatgt ttcatagttg gatatcataa tttaaacaag caaaaccaaa 5280 ttaagggcca gctcattcct cccactcatg atctatggat ctatagatct ctcgtgcagc 5340 tggggctcta gggggtatcc ccacgcgccc tgtagcggcg cattaagcgc ggcgggtgtg 5400 gtggttacgc gcagcgtgac cgctacactt gccagcgccc tagcgcccgc tcctttcgct 5460 ttcttccctt cctttctcgc cacgttcgcc ggctttcccc gtcaagctct aaatcggggg 5520 ctccctttag ggttccgatt tagtgcttta cggcacctcg accccaaaaa acttgattag 5580 ggtgatggtt cacgtagtgg gccatcgccc tgatagacgg tttttcgccc tttgacgttg 5640 gagtccacgt tctttaatag tggactcttg ttccaaactg gaacaacact caaccctatc 5700 tcggtctatt cttttgattt ataagggatt ttgccgattt cggcctattg gttaaaaaat 5760 gagctgattt aacaaaaatt taacgcgaat taattctgtg gaatgtgtgt cagttagtcg 5820 cgaggcctcc gcgccgggtt ttggcgcctc ccgcgggcgc ccccctcctc acggcgagcg 5880 ctgccacgtc agacgaaggg cgcagcgagc gtcctgatcc ttccgcccgg acgctcagga 5940 cagcggcccg ctgctcataa gactcggcct tagaacccca gtatcagcag aaggacattt 6000 taggacggga cttgggtgac tctagggcac tggttttctt tccagagagc ggaacaggcg 6060 aggaaaagta gtcccttctc ggcgattctg cggagggatc tccgtggggc ggtgaacgcc 6120 gatgattata taaggacgcg ccgggtgtgg cacagctagt tccgtcgcag ccgggatttg 6180 ggtcgcggtt cttgtttgtg gatcgctgtg atcgtcactt ggtgagtagc gggctgctgg 6240 gctggccggg gctttcgtgg ccgccgggcc gctcggtggg acggaagcgt gtggagagac 6300 cgccaagggc tgtagtctgg gtccgcgagc aaggttgccc tgaactgggg gttgggggga 6360 gcgcagcaaa atggcggctg ttcccgagtc ttgaatggaa gacgcttgtg aggcgggctg 6420 tgaggtcgtt gaaacaaggt ggggggcatg gtgggcggca agaacccaag gtcttgaggc 6480 cttcgctaat gcgggaaagc tcttattcgg gtgagatggg ctggggcacc atctggggac 6540 cctgacgtga agtttgtcac tgactggaga actcggtttg tcgtctgttg cgggggcggc 6600 agttatggcg gtgccgttgg gcagtgcacc cgtacctttg ggagcgcgcg ccctcgtcgt 6660 gtcgtgacgt cacccgttct gttggcttat aatgcagggt ggggccacct gccggtaggt 6720 gtgcggtagg cttttctccg tcgcaggacg cagggttcgg gcctagggta ggctctcctg 6780 aatcgacagg cgccggacct ctggtgaggg gagggataag tgaggcgtca gtttctttgg 6840 tcggttttat gtacctatct tcttaagtag ctgaagctcc ggttttgaac tatgcgctcg 6900 gggttggcga gtgtgttttg tgaagttttt taggcacctt ttgaaatgta atcatttggg 6960 tcaatatgta attttcagtg ttagactagt aaattgtccg ctaaattctg gccgtttttg 7020 gcttttttgt tagacgtcga ccgatcctga gaacttcagg gtgagtttgg ggacccttga 7080 ttgttctttc tttttcgcta ttgtaaaatt catgttatat ggagggggca aagttttcag 7140 ggtgttgttt agaatgggaa gatgtccctt gtatcaccat ggaccctcat gataattttg 7200 tttctttcac tttctactct gttgacaacc attgtctcct cttattttct tttcattttc 7260 tgtaactttt tcgttaaact ttagcttgca tttgtaacga atttttaaat tcacttttgt 7320 ttatttgtca gattgtaagt actttctcta atcacttttt tttcaaggca atcagggtat 7380 attatattgt acttcagcac agttttagag aacaattgtt ataattaaat gataaggtag 7440 aatatttctg catataaatt ctggctggcg tggaaatatt cttattggta gaaacaacta 7500 caccctggtc atcatcctgc ctttctcttt atggttacaa tgatatacac tgtttgagat 7560 gaggataaaa tactctgagt ccaaaccggg cccctctgct aaccatgttc atgccttctt 7620 ctctttccta cagctcctgg gcaacgtgct ggttgttgtg ctgtctcatc attttggcaa 7680 agaatt 7686 <210> 15 <211> 7257 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 15 aagcttatac tcgagctcta gattgggaac ccgggtctct cgaattcgat gccttttaga 60 ctcctgatac cattgggtct tgtttgcgtt ctcctccctc tccatcacgg cgccccaggt 120 ccagacggta ccgcacctga tcctgcccat taccgcgaac gcgttaaagc catgttctac 180 cacgcctatg actcctatct ggaaaatgca ttcccctatg atgagctccg accccttacc 240 tgcgatggtc atgatacttg gggctctttt tcccttaccc ttattgacgc tctggacaca 300 ctccttatcc tcggaaacac cagcgaattt caaagagtag ttgaagtact tcaggacaat 360 gtcgactttg acatcgatgt gaacgcatca gttttcgaaa caaatataag agtcgttgga 420 ggtctgctct ccgcccacct tctctctaaa aaagccggag tagaagttga agctggctgg 480 ccctgctccg gacccctcct tcgtatggct gaagaagctg cccgcaaact ccttcccgct 540 tttcagaccc caaccggtat gccctatggt actgttaacc tcctgcacgg agtaaatccc 600 ggcgaaaccc ccgtcacatg tacagccgga attggaacct ttattgtgga atttgcaacc 660 cttagcagcc tgaccggaga tcctgtattc gaagacgtgg ctcgggttgc cctgatgcga 720 ctgtgggaat ccaggtctga tatcggtctg gtcggtaacc atatagacgt actcactggt 780 aaatgggttg cacaagacgc tggaattggg gcaggcgtgg attcttattt tgaatatctc 840 gtaaaagggg ccatactctt gcaggacaaa aaacttatgg ctatgttcct ggaatataac 900 aaagctatta ggaactacac acacttcgat gattggtatt tgtgggtcca aatgtataaa 960 ggaaccgttt ctatgcctgt ctttcagtca ctggaggctt attggcctgg tctgcaatcc 1020 ctgatcggag acattgacaa tgcaatgagg acattcctta attattacac tgtttggaag 1080 cagttcggcg gattgcccga attttacaac attcctcaag gctatacagt tgaaaaaaga 1140 gaaggatatc ccctgcgccc cgagcttatt gaaagcgcta tgtatctgta tcgtgcaaca 1200 ggtgatccaa ccctgcttga actgggacga gacgccgtcg aatcaatcga gaaaatttca 1260 aaagtggaat gcggctttgc aacaattaaa gatcttagag accacaaact ggataatcgc 1320 atggagtcat tctttttggc tgagaccgtc aagtatctgt atctgctttt tcatcccaac 1380 aacttcatcc ataataacgg gtccaccttc gattcagtca tgacccctca cggtgaatgc 1440 atactcggag ctggaggcta tatttttaac actgaagctc acccaattga cccagctgcc 1500 cttcattgtt gtcgacgtct gaaagaagaa caatgggagg ttgaagattt gatcaaagaa 1560 ttttactcac ttaaacaaag tcgacctaaa cgcgcacaga gaaaaactgt aagatctggt 1620 ccttgggaac ctcagtccgg cccagcaact ctttcatccc ccgccaacca accacgagaa 1680 aaacaaccag cccaacagag aacccccctg ctcagctgcc cctctcagcc cttcacttca 1740 aaactcgccc tgcttggaca ggtgtttctg gactcctctt gatttaaaca cgcggccgct 1800 aatcagccat accacatttg tagaggtttt acttgcttta aaaaacctcc cacacctccc 1860 cctgaacctg aaacataaaa tgaatgcaat tgttgttgtt aacttgttta ttgcagctta 1920 taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat ttttttcact 1980 gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct accggtaggg 2040 cccctctctt catgtgagca aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt 2100 tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa 2160 gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct 2220 ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc 2280 cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg 2340 tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct 2400 tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag 2460 cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga 2520 agtggtggcc taactacggc tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga 2580 agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg 2640 gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag 2700 aagatccttt gatcttttct acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag 2760 ggattttggt catgggcgcg cctcatactc ctgcaggcat gagattatca aaaaggatct 2820 tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt 2880 aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc 2940 tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg 3000 gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga taccgcgaga cccacgctca ccggctccag 3060 atttatcagc aataaaccag ccagccggaa gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt 3120 tatccgcctc catccagtct attaattgtt gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag 3180 ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt 3240 ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca 3300 tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg 3360 ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag cactgcataa ttctcttact gtcatgccat 3420 ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta 3480 tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt caatacggga taataccgcg ccacatagca 3540 gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct 3600 taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat 3660 cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa 3720 agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa tactcatact cttccttttt caatattatt 3780 gaagcattta tcagggttat tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa 3840 ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt gccacctgac gtcaggtacc 3900 aagcctaggc ctccaaaaaa gcctcctcac tacttctgga atagctcaga ggcagaggcg 3960 gcctcggcct ctgcataaat aaaaaaaatt agtcagccat ggggcggaga atgggcggaa 4020 ctgggcggag ttaggggcgg gatgggcgga gttaggggcg ggactatggt tgctgactaa 4080 ttgagatgca tgctttgcat acttctgcct gctggggagc ctggggactt tccacacctg 4140 gttgctgact aattgagatg catgctttgc atacttctgc ctgctgggga gcctggggac 4200 tttccacacc ggatccacca tggccaagtt gaccagtgcc gttccggtgc tcaccgcgcg 4260 cgacgtcgcc ggagcggtcg agttctggac cgaccggctc gggttctccc gggacttcgt 4320 ggaggacgac ttcgccggtg tggtccggga cgacgtgacc ctgttcatca gcgcggtcca 4380 ggaccaggtg gtgccggaca acaccctggc ctgggtgtgg gtgcgcggcc tggacgagct 4440 gtacgccgag tggtcggagg tcgtgtccac gaacttccgg gacgcctccg ggccggccat 4500 gaccgagatc ggcgagcagc cgtgggggcg ggagttcgcc ctgcgcgacc cggccggcaa 4560 ctgcgtgcac ttcgtggccg aggagcagga ctgaacgcgt gctgtaagtc tgcagaaatt 4620 gatgatctat taaacaataa agatgtccac taaaatggaa gtttttcctg tcatactttg 4680 ttaagaaggg tgagaacaga gtacctacat tttgaatgga aggattggag ctacgggggt 4740 gggggtgggg tgggattaga taaatgcctg ctctttactg aaggctcttt actattgctt 4800 tatgataatg tttcatagtt ggatatcata atttaaacaa gcaaaaccaa attaagggcc 4860 agctcattcc tcccactcat gatctatgga tctatagatc tctcgtgcag ctggggctct 4920 agggggtatc cccacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg 4980 cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct 5040 tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta 5100 gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt 5160 tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg 5220 ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat 5280 tcttttgatt tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt 5340 taacaaaaat ttaacgcgaa ttaattctgt ggaatgtgtg tcagttagtc gcgaggcctc 5400 cgcgccgggt tttggcgcct cccgcgggcg cccccctcct cacggcgagc gctgccacgt 5460 cagacgaagg gcgcagcgag cgtcctgatc cttccgcccg gacgctcagg acagcggccc 5520 gctgctcata agactcggcc ttagaacccc agtatcagca gaaggacatt ttaggacggg 5580 acttgggtga ctctagggca ctggttttct ttccagagag cggaacaggc gaggaaaagt 5640 agtcccttct cggcgattct gcggagggat ctccgtgggg cggtgaacgc cgatgattat 5700 ataaggacgc gccgggtgtg gcacagctag ttccgtcgca gccgggattt gggtcgcggt 5760 tcttgtttgt ggatcgctgt gatcgtcact tggtgagtag cgggctgctg ggctggccgg 5820 ggctttcgtg gccgccgggc cgctcggtgg gacggaagcg tgtggagaga ccgccaaggg 5880 ctgtagtctg ggtccgcgag caaggttgcc ctgaactggg ggttgggggg agcgcagcaa 5940 aatggcggct gttcccgagt cttgaatgga agacgcttgt gaggcgggct gtgaggtcgt 6000 tgaaacaagg tggggggcat ggtgggcggc aagaacccaa ggtcttgagg ccttcgctaa 6060 tgcgggaaag ctcttattcg ggtgagatgg gctggggcac catctgggga ccctgacgtg 6120 aagtttgtca ctgactggag aactcggttt gtcgtctgtt gcgggggcgg cagttatggc 6180 ggtgccgttg ggcagtgcac ccgtaccttt gggagcgcgc gccctcgtcg tgtcgtgacg 6240 tcacccgttc tgttggctta taatgcaggg tggggccacc tgccggtagg tgtgcggtag 6300 gcttttctcc gtcgcaggac gcagggttcg ggcctagggt aggctctcct gaatcgacag 6360 gcgccggacc tctggtgagg ggagggataa gtgaggcgtc agtttctttg gtcggtttta 6420 tgtacctatc ttcttaagta gctgaagctc cggttttgaa ctatgcgctc ggggttggcg 6480 agtgtgtttt gtgaagtttt ttaggcacct tttgaaatgt aatcatttgg gtcaatatgt 6540 aattttcagt gttagactag taaattgtcc gctaaattct ggccgttttt ggcttttttg 6600 ttagacgtcg accgatcctg agaacttcag ggtgagtttg gggacccttg attgttcttt 6660 ctttttcgct attgtaaaat tcatgttata tggagggggc aaagttttca gggtgttgtt 6720 tagaatggga agatgtccct tgtatcacca tggaccctca tgataatttt gtttctttca 6780 ctttctactc tgttgacaac cattgtctcc tcttattttc ttttcatttt ctgtaacttt 6840 ttcgttaaac tttagcttgc atttgtaacg aatttttaaa ttcacttttg tttatttgtc 6900 agattgtaag tactttctct aatcactttt ttttcaaggc aatcagggta tattatattg 6960 tacttcagca cagttttaga gaacaattgt tataattaaa tgataaggta gaatatttct 7020 gcatataaat tctggctggc gtggaaatat tcttattggt agaaacaact acaccctggt 7080 catcatcctg cctttctctt tatggttaca atgatataca ctgtttgaga tgaggataaa 7140 atactctgag tccaaaccgg gcccctctgc taaccatgtt catgccttct tctctttcct 7200 acagctcctg ggcaacgtgc tggttgttgt gctgtctcat cattttggca aagaatt 7257 <210> 16 <211> 3892 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 16 aggcctccgc gccgggtttt ggcgcctccc gcgggcgccc ccctcctcac ggcgagcgct 60 gccacgtcag acgaagggcg cagcgagcgt cctgatcctt ccgcccggac gctcaggaca 120 gcggcccgct gctcataaga ctcggcctta gaaccccagt atcagcagaa ggacatttta 180 ggacgggact tgggtgactc tagggcactg gttttctttc cagagagcgg aacaggcgag 240 gaaaagtagt cccttctcgg cgattctgcg gagggatctc cgtggggcgg tgaacgccga 300 tgattatata aggacgcgcc gggtgtggca cagctagttc cgtcgcagcc gggatttggg 360 tcgcggttct tgtttgtgga tcgctgtgat cgtcacttgg tgagtagcgg gctgctgggc 420 tggccggggc tttcgtggcc gccgggccgc tcggtgggac ggaagcgtgt ggagagaccg 480 ccaagggctg tagtctgggt ccgcgagcaa ggttgccctg aactgggggt tggggggagc 540 gcagcaaaat ggcggctgtt cccgagtctt gaatggaaga cgcttgtgag gcgggctgtg 600 aggtcgttga aacaaggtgg ggggcatggt gggcggcaag aacccaaggt cttgaggcct 660 tcgctaatgc gggaaagctc ttattcgggt gagatgggct ggggcaccat ctggggaccc 720 tgacgtgaag tttgtcactg actggagaac tcggtttgtc gtctgttgcg ggggcggcag 780 ttatggcggt gccgttgggc agtgcacccg tacctttggg agcgcgcgcc ctcgtcgtgt 840 cgtgacgtca cccgttctgt tggcttataa tgcagggtgg ggccacctgc cggtaggtgt 900 gcggtaggct tttctccgtc gcaggacgca gggttcgggc ctagggtagg ctctcctgaa 960 tcgacaggcg ccggacctct ggtgagggga gggataagtg aggcgtcagt ttctttggtc 1020 ggttttatgt acctatcttc ttaagtagct gaagctccgg ttttgaacta tgcgctcggg 1080 gttggcgagt gtgttttgtg aagtttttta ggcacctttt gaaatgtaat catttgggtc 1140 aatatgtaat tttcagtgtt agactagtaa attgtccgct aaattctggc cgtttttggc 1200 ttttttgtta gacgtcgacc gatcctgaga acttcagggt gagtttgggg acccttgatt 1260 gttctttctt tttcgctatt gtaaaattca tgttatatgg agggggcaaa gttttcaggg 1320 tgttgtttag aatgggaaga tgtcccttgt atcaccatgg accctcatga taattttgtt 1380 tctttcactt tctactctgt tgacaaccat tgtctcctct tattttcttt tcattttctg 1440 taactttttc gttaaacttt agcttgcatt tgtaacgaat ttttaaattc acttttgttt 1500 atttgtcaga ttgtaagtac tttctctaat cacttttttt tcaaggcaat cagggtatat 1560 tatattgtac ttcagcacag ttttagagaa caattgttat aattaaatga taaggtagaa 1620 tatttctgca tataaattct ggctggcgtg gaaatattct tattggtaga aacaactaca 1680 ccctggtcat catcctgcct ttctctttat ggttacaatg atatacactg tttgagatga 1740 ggataaaata ctctgagtcc aaaccgggcc cctctgctaa ccatgttcat gccttcttct 1800 ctttcctaca gctcctgggc aacgtgctgg ttgttgtgct gtctcatcat tttggcaaag 1860 aattaagctt atactcgagc tctagattgg gaacccgggt ctctcgaatt cgatgccttt 1920 tagactcctg ataccattgg gtcttgtttg cgttctcctc cctctccatc acggcgcccc 1980 aggtccagac ggtaccgcac ctgatcctgc ccattaccgc gaacgcgtta aagccatgtt 2040 ctaccacgcc tatgactcct atctggaaaa tgcattcccc tatgatgagc tccgacccct 2100 tacctgcgat ggtcatgata cttggggctc tttttccctt acccttattg acgctctgga 2160 cacactcctt atcctcggaa acaccagcga atttcaaaga gtagttgaag tacttcagga 2220 caatgtcgac tttgacatcg atgtgaacgc atcagttttc gaaacaaata taagagtcgt 2280 tggaggtctg ctctccgccc accttctctc taaaaaagcc ggagtagaag ttgaagctgg 2340 ctggccctgc tccggacccc tccttcgtat ggctgaagaa gctgcccgca aactccttcc 2400 cgcttttcag accccaaccg gtatgcccta tggtactgtt aacctcctgc acggagtaaa 2460 tcccggcgaa acccccgtca catgtacagc cggaattgga acctttattg tggaatttgc 2520 aacccttagc agcctgaccg gagatcctgt attcgaagac gtggctcggg ttgccctgat 2580 gcgactgtgg gaatccaggt ctgatatcgg tctggtcggt aaccatatag acgtactcac 2640 tggtaaatgg gttgcacaag acgctggaat tggggcaggc gtggattctt attttgaata 2700 tctcgtaaaa ggggccatac tcttgcagga caaaaaactt atggctatgt tcctggaata 2760 taacaaagct attaggaact acacacactt cgatgattgg tatttgtggg tccaaatgta 2820 taaaggaacc gtttctatgc ctgtctttca gtcactggag gcttattggc ctggtctgca 2880 atccctgatc ggagacattg acaatgcaat gaggacattc cttaattatt acactgtttg 2940 gaagcagttc ggcggattgc ccgaatttta caacattcct caaggctata cagttgaaaa 3000 aagagaagga tatcccctgc gccccgagct tattgaaagc gctatgtatc tgtatcgtgc 3060 aacaggtgat ccaaccctgc ttgaactggg acgagacgcc gtcgaatcaa tcgagaaaat 3120 ttcaaaagtg gaatgcggct ttgcaacaat taaagatctt agagaccaca aactggataa 3180 tcgcatggag tcattctttt tggctgagac cgtcaagtat ctgtatctgc tttttcatcc 3240 caacaacttc atccataata acgggtccac cttcgattca gtcatgaccc ctcacggtga 3300 atgcatactc ggagctggag gctatatttt taacactgaa gctcacccaa ttgacccagc 3360 tgcccttcat tgttgtcgac gtctgaaaga agaacaatgg gaggttgaag atttgatcaa 3420 agaattttac tcacttaaac aaagtcgacc taaacgcgca cagagaaaaa ctgtaagatc 3480 tggtccttgg gaacctcagt ccggcccagc aactctttca tcccccgcca accaaccacg 3540 agaaaaacaa ccagcccaac agagaacccc cctgctcagc tgcccctctc agcccttcac 3600 ttcaaaactc gccctgcttg gacaggtgtt tctggactcc tcttgattta aacacgcggc 3660 cgctaatcag ccataccaca tttgtagagg ttttacttgc tttaaaaaac ctcccacacc 3720 tccccctgaa cctgaaacat aaaatgaatg caattgttgt tgttaacttg tttattgcag 3780 cttataatgg ttacaaataa agcaatagca tcacaaattt cacaaataaa gcattttttt 3840 cactgcattc tagttgtggt ttgtccaaac tcatcaatgt atcttatcat gt 3892 <210> 17 <211> 6629 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 17 aagcttatac tcgagctcta gattgggaac ccgggtctct cgaattcatg gtggtggtgg 60 ctgctgctcc ttctgctgct acagctgctc ctaaggtgct gctgctgtct ggacagcctg 120 cttctggagg aagagctctg cctctgatgg tgcctggacc tagagctgct ggatctgagg 180 cttctggaac acctcaggct agaaagagac agagactgac acatctgtct cctgaagaaa 240 aggctctgag aagaaagctg aagaatagag tggctgctca gacagctaga gatagaaaga 300 aggctagaat gtctgaactg gaacagcagg tggtggatct ggaagaagaa aatcataagc 360 tgcagctgga aaatcagctg ctgagagaaa agacacatgg actggtggtg gaaaatcagg 420 aactgagaac aagactggga atggatacac tggatcctga tgaagtgcct gaagtggaag 480 ctaagggatc tggagtgaga ctggtggctg gatctgctga atctgctgct ggagctggac 540 ctgtggtgac atctcctgaa catctgccta tggattctga tacagtggct tcttctgatt 600 ctgaatctga tatcctgctg ggaatcctgg ataagctgga tcctgtgatg ttttttaagt 660 gtccttctcc tgaatctgct tctctggaag aactgcctga agtgtatcct gaaggacctt 720 cttctctgcc tgcttctctg tctctgtctg tgggaacatc ttctgctaag ctggaagcta 780 tcaatgaact gatcagattt gatcatgtgt atacaaagcc tctggtgctg gaaatccctt 840 ctgaaacaga atctcagaca aatgtggtgg tgaagatcga agaagctcct ctgtcttctt 900 ctgaagaaga tcatcctgaa tttatcgtgt ctgtgaagaa ggaacctctg gaagatgatt 960 ttatccctga actgggaatc tctaatctgc tgtcttcttc tcattgtctg agacctcctt 1020 cttgtctgct ggatgctcat tctgattgtg gatatgaagg atctccttct cctttttctg 1080 atatgtcttc tcctctggga acagatcatt cttgggaaga tacatttgct aatgaactgt 1140 ttcctcagct gatctctgtg tgagcggccg ctaatcagcc ataccacatt tgtagaggtt 1200 ttacttgctt taaaaaacct cccacacctc cccctgaacc tgaaacataa aatgaatgca 1260 attgttgttg ttaacttgtt tattgcagct tataatggtt acaaataaag caatagcatc 1320 acaaatttca caaataaagc atttttttca ctgcattcta gttgtggttt gtccaaactc 1380 atcaatgtat cttatcatgt ctaccggtag ggcccctctc ttcatgtgag caaaaggcca 1440 gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg tttttccata ggctccgccc 1500 ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg tggcgaaacc cgacaggact 1560 ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg cgctctcctg ttccgaccct 1620 gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga agcgtggcgc tttctcatag 1680 ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc tccaagctgg gctgtgtgca 1740 cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt aactatcgtc ttgagtccaa 1800 cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact ggtaacagga ttagcagagc 1860 gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg cctaactacg gctacactag 1920 aaggacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt accttcggaa aaagagttgg 1980 tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt ggtttttttg tttgcaagca 2040 gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct ttgatctttt ctacggggtc 2100 tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg gtcatgggcg cgcctcatac 2160 tcctgcaggc atgagattat caaaaaggat cttcacctag atccttttaa attaaaaatg 2220 aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg tctgacagtt accaatgctt 2280 aatcagtgag gcacctatct cagcgatctg tctatttcgt tcatccatag ttgcctgact 2340 ccccgtcgtg tagataacta cgatacggga gggcttacca tctggcccca gtgctgcaat 2400 gataccgcga gacccacgct caccggctcc agatttatca gcaataaacc agccagccgg 2460 aagggccgag cgcagaagtg gtcctgcaac tttatccgcc tccatccagt ctattaattg 2520 ttgccgggaa gctagagtaa gtagttcgcc agttaatagt ttgcgcaacg ttgttgccat 2580 tgctacaggc atcgtggtgt cacgctcgtc gtttggtatg gcttcattca gctccggttc 2640 ccaacgatca aggcgagtta catgatcccc catgttgtgc aaaaaagcgg ttagctcctt 2700 cggtcctccg atcgttgtca gaagtaagtt ggccgcagtg ttatcactca tggttatggc 2760 agcactgcat aattctctta ctgtcatgcc atccgtaaga tgcttttctg tgactggtga 2820 gtactcaacc aagtcattct gagaatagtg tatgcggcga ccgagttgct cttgcccggc 2880 gtcaatacgg gataataccg cgccacatag cagaacttta aaagtgctca tcattggaaa 2940 acgttcttcg gggcgaaaac tctcaaggat cttaccgctg ttgagatcca gttcgatgta 3000 acccactcgt gcacccaact gatcttcagc atcttttact ttcaccagcg tttctgggtg 3060 agcaaaaaca ggaaggcaaa atgccgcaaa aaagggaata agggcgacac ggaaatgttg 3120 aatactcata ctcttccttt ttcaatatta ttgaagcatt tatcagggtt attgtctcat 3180 gagcggatac atatttgaat gtatttagaa aaataaacaa ataggggttc cgcgcacatt 3240 tccccgaaaa gtgccacctg acgtcaggta ccaagcctag gcctccaaaa aagcctcctc 3300 actacttctg gaatagctca gaggcagagg cggcctcggc ctctgcataa ataaaaaaaa 3360 ttagtcagcc atggggcgga gaatgggcgg aactgggcgg agttaggggc gggatgggcg 3420 gagttagggg cgggactatg gttgctgact aattgagatg catgctttgc atacttctgc 3480 ctgctgggga gcctggggac tttccacacc tggttgctga ctaattgaga tgcatgcttt 3540 gcatacttct gcctgctggg gagcctgggg actttccaca ccggatccac catggccaag 3600 ttgaccagtg ccgttccggt gctcaccgcg cgcgacgtcg ccggagcggt cgagttctgg 3660 accgaccggc tcgggttctc ccgggacttc gtggaggacg acttcgccgg tgtggtccgg 3720 gacgacgtga ccctgttcat cagcgcggtc caggaccagg tggtgccgga caacaccctg 3780 gcctgggtgt gggtgcgcgg cctggacgag ctgtacgccg agtggtcgga ggtcgtgtcc 3840 acgaacttcc gggacgcctc cgggccggcc atgaccgaga tcggcgagca gccgtggggg 3900 cgggagttcg ccctgcgcga cccggccggc aactgcgtgc acttcgtggc cgaggagcag 3960 gactgaacgc gtgctgtaag tctgcagaaa ttgatgatct attaaacaat aaagatgtcc 4020 actaaaatgg aagtttttcc tgtcatactt tgttaagaag ggtgagaaca gagtacctac 4080 attttgaatg gaaggattgg agctacgggg gtgggggtgg ggtgggatta gataaatgcc 4140 tgctctttac tgaaggctct ttactattgc tttatgataa tgtttcatag ttggatatca 4200 taatttaaac aagcaaaacc aaattaaggg ccagctcatt cctcccactc atgatctatg 4260 gatctataga tctctcgtgc agctggggct ctagggggta tccccacgcg ccctgtagcg 4320 gcgcattaag cgcggcgggt gtggtggtta cgcgcagcgt gaccgctaca cttgccagcg 4380 ccctagcgcc cgctcctttc gctttcttcc cttcctttct cgccacgttc gccggctttc 4440 cccgtcaagc tctaaatcgg gggctccctt tagggttccg atttagtgct ttacggcacc 4500 tcgaccccaa aaaacttgat tagggtgatg gttcacgtag tgggccatcg ccctgataga 4560 cggtttttcg ccctttgacg ttggagtcca cgttctttaa tagtggactc ttgttccaaa 4620 ctggaacaac actcaaccct atctcggtct attcttttga tttataaggg attttgccga 4680 tttcggccta ttggttaaaa aatgagctga tttaacaaaa atttaacgcg aattaattct 4740 gtggaatgtg tgtcagttag tcgcgaggcc tccgcgccgg gttttggcgc ctcccgcggg 4800 cgcccccctc ctcacggcga gcgctgccac gtcagacgaa gggcgcagcg agcgtcctga 4860 tccttccgcc cggacgctca ggacagcggc ccgctgctca taagactcgg ccttagaacc 4920 ccagtatcag cagaaggaca ttttaggacg ggacttgggt gactctaggg cactggtttt 4980 ctttccagag agcggaacag gcgaggaaaa gtagtccctt ctcggcgatt ctgcggaggg 5040 atctccgtgg ggcggtgaac gccgatgatt atataaggac gcgccgggtg tggcacagct 5100 agttccgtcg cagccgggat ttgggtcgcg gttcttgttt gtggatcgct gtgatcgtca 5160 cttggtgagt agcgggctgc tgggctggcc ggggctttcg tggccgccgg gccgctcggt 5220 gggacggaag cgtgtggaga gaccgccaag ggctgtagtc tgggtccgcg agcaaggttg 5280 ccctgaactg ggggttgggg ggagcgcagc aaaatggcgg ctgttcccga gtcttgaatg 5340 gaagacgctt gtgaggcggg ctgtgaggtc gttgaaacaa ggtggggggc atggtgggcg 5400 gcaagaaccc aaggtcttga ggccttcgct aatgcgggaa agctcttatt cgggtgagat 5460 gggctggggc accatctggg gaccctgacg tgaagtttgt cactgactgg agaactcggt 5520 ttgtcgtctg ttgcgggggc ggcagttatg gcggtgccgt tgggcagtgc acccgtacct 5580 ttgggagcgc gcgccctcgt cgtgtcgtga cgtcacccgt tctgttggct tataatgcag 5640 ggtggggcca cctgccggta ggtgtgcggt aggcttttct ccgtcgcagg acgcagggtt 5700 cgggcctagg gtaggctctc ctgaatcgac aggcgccgga cctctggtga ggggagggat 5760 aagtgaggcg tcagtttctt tggtcggttt tatgtaccta tcttcttaag tagctgaagc 5820 tccggttttg aactatgcgc tcggggttgg cgagtgtgtt ttgtgaagtt ttttaggcac 5880 cttttgaaat gtaatcattt gggtcaatat gtaattttca gtgttagact agtaaattgt 5940 ccgctaaatt ctggccgttt ttggcttttt tgttagacgt cgaccgatcc tgagaacttc 6000 agggtgagtt tggggaccct tgattgttct ttctttttcg ctattgtaaa attcatgtta 6060 tatggagggg gcaaagtttt cagggtgttg tttagaatgg gaagatgtcc cttgtatcac 6120 catggaccct catgataatt ttgtttcttt cactttctac tctgttgaca accattgtct 6180 cctcttattt tcttttcatt ttctgtaact ttttcgttaa actttagctt gcatttgtaa 6240 cgaattttta aattcacttt tgtttatttg tcagattgta agtactttct ctaatcactt 6300 ttttttcaag gcaatcaggg tatattatat tgtacttcag cacagtttta gagaacaatt 6360 gttataatta aatgataagg tagaatattt ctgcatataa attctggctg gcgtggaaat 6420 attcttattg gtagaaacaa ctacaccctg gtcatcatcc tgcctttctc tttatggtta 6480 caatgatata cactgtttga gatgaggata aaatactctg agtccaaacc gggcccctct 6540 gctaaccatg ttcatgcctt cttctctttc ctacagctcc tgggcaacgt gctggttgtt 6600 gtgctgtctc atcattttgg caaagaatt 6629 <210> 18 <211> 3264 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 18 ggcctccgcg ccgggttttg gcgcctcccg cgggcgcccc cctcctcacg gcgagcgctg 60 ccacgtcaga cgaagggcgc agcgagcgtc ctgatccttc cgcccggacg ctcaggacag 120 cggcccgctg ctcataagac tcggccttag aaccccagta tcagcagaag gacattttag 180 gacgggactt gggtgactct agggcactgg ttttctttcc agagagcgga acaggcgagg 240 aaaagtagtc ccttctcggc gattctgcgg agggatctcc gtggggcggt gaacgccgat 300 gattatataa ggacgcgccg ggtgtggcac agctagttcc gtcgcagccg ggatttgggt 360 cgcggttctt gtttgtggat cgctgtgatc gtcacttggt gagtagcggg ctgctgggct 420 ggccggggct ttcgtggccg ccgggccgct cggtgggacg gaagcgtgtg gagagaccgc 480 caagggctgt agtctgggtc cgcgagcaag gttgccctga actgggggtt ggggggagcg 540 cagcaaaatg gcggctgttc ccgagtcttg aatggaagac gcttgtgagg cgggctgtga 600 ggtcgttgaa acaaggtggg gggcatggtg ggcggcaaga acccaaggtc ttgaggcctt 660 cgctaatgcg ggaaagctct tattcgggtg agatgggctg gggcaccatc tggggaccct 720 gacgtgaagt ttgtcactga ctggagaact cggtttgtcg tctgttgcgg gggcggcagt 780 tatggcggtg ccgttgggca gtgcacccgt acctttggga gcgcgcgccc tcgtcgtgtc 840 gtgacgtcac ccgttctgtt ggcttataat gcagggtggg gccacctgcc ggtaggtgtg 900 cggtaggctt ttctccgtcg caggacgcag ggttcgggcc tagggtaggc tctcctgaat 960 cgacaggcgc cggacctctg gtgaggggag ggataagtga ggcgtcagtt tctttggtcg 1020 gttttatgta cctatcttct taagtagctg aagctccggt tttgaactat gcgctcgggg 1080 ttggcgagtg tgttttgtga agttttttag gcaccttttg aaatgtaatc atttgggtca 1140 atatgtaatt ttcagtgtta gactagtaaa ttgtccgcta aattctggcc gtttttggct 1200 tttttgttag acgtcgaccg atcctgagaa cttcagggtg agtttgggga cccttgattg 1260 ttctttcttt ttcgctattg taaaattcat gttatatgga gggggcaaag ttttcagggt 1320 gttgtttaga atgggaagat gtcccttgta tcaccatgga ccctcatgat aattttgttt 1380 ctttcacttt ctactctgtt gacaaccatt gtctcctctt attttctttt cattttctgt 1440 aactttttcg ttaaacttta gcttgcattt gtaacgaatt tttaaattca cttttgttta 1500 tttgtcagat tgtaagtact ttctctaatc actttttttt caaggcaatc agggtatatt 1560 atattgtact tcagcacagt tttagagaac aattgttata attaaatgat aaggtagaat 1620 atttctgcat ataaattctg gctggcgtgg aaatattctt attggtagaa acaactacac 1680 cctggtcatc atcctgcctt tctctttatg gttacaatga tatacactgt ttgagatgag 1740 gataaaatac tctgagtcca aaccgggccc ctctgctaac catgttcatg ccttcttctc 1800 tttcctacag ctcctgggca acgtgctggt tgttgtgctg tctcatcatt ttggcaaaga 1860 attaagctta tactcgagct ctagattggg aacccgggtc tctcgaattc atggtggtgg 1920 tggctgctgc tccttctgct gctacagctg ctcctaaggt gctgctgctg tctggacagc 1980 ctgcttctgg aggaagagct ctgcctctga tggtgcctgg acctagagct gctggatctg 2040 aggcttctgg aacacctcag gctagaaaga gacagagact gacacatctg tctcctgaag 2100 aaaaggctct gagaagaaag ctgaagaata gagtggctgc tcagacagct agagatagaa 2160 agaaggctag aatgtctgaa ctggaacagc aggtggtgga tctggaagaa gaaaatcata 2220 agctgcagct ggaaaatcag ctgctgagag aaaagacaca tggactggtg gtggaaaatc 2280 aggaactgag aacaagactg ggaatggata cactggatcc tgatgaagtg cctgaagtgg 2340 aagctaaggg atctggagtg agactggtgg ctggatctgc tgaatctgct gctggagctg 2400 gacctgtggt gacatctcct gaacatctgc ctatggattc tgatacagtg gcttcttctg 2460 attctgaatc tgatatcctg ctgggaatcc tggataagct ggatcctgtg atgtttttta 2520 agtgtccttc tcctgaatct gcttctctgg aagaactgcc tgaagtgtat cctgaaggac 2580 cttcttctct gcctgcttct ctgtctctgt ctgtgggaac atcttctgct aagctggaag 2640 ctatcaatga actgatcaga tttgatcatg tgtatacaaa gcctctggtg ctggaaatcc 2700 cttctgaaac agaatctcag acaaatgtgg tggtgaagat cgaagaagct cctctgtctt 2760 cttctgaaga agatcatcct gaatttatcg tgtctgtgaa gaaggaacct ctggaagatg 2820 attttatccc tgaactggga atctctaatc tgctgtcttc ttctcattgt ctgagacctc 2880 cttcttgtct gctggatgct cattctgatt gtggatatga aggatctcct tctccttttt 2940 ctgatatgtc ttctcctctg ggaacagatc attcttggga agatacattt gctaatgaac 3000 tgtttcctca gctgatctct gtgtgagcgg ccgctaatca gccataccac atttgtagag 3060 gttttacttg ctttaaaaaa cctcccacac ctccccctga acctgaaaca taaaatgaat 3120 gcaattgttg ttgttaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata aagcaatagc 3180 atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg tttgtccaaa 3240 ctcatcaatg tatcttatca tgtc 3264 <210> 19 <211> 447 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Glu Val Gln Val Leu Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ala Tyr 20 25 30 Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Gly Ala Trp Lys Met Ser Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Thr Val Ile Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 20 <211> 110 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser 1 5 10 15 Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ala Tyr Ala Met Thr Trp Val 20 25 30 Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly 35 40 45 Ser Gly Gly Ser Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr 50 55 60 Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser 65 70 75 80 Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Gly Ala 85 90 95 Trp Lys Met Ser Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 <210> 21 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asp Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ile Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Thr Thr Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Arg Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asp Ser Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 22 <211> 100 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile 1 5 10 15 Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asp Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln 20 25 30 Gln Lys Pro Gly Lys Ile Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Thr Thr Ser Thr 35 40 45 Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Arg Gly Ser Gly Ser Gly Thr 50 55 60 Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr 65 70 75 80 Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asp Ser Ala Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly 85 90 95 Thr Lys Val Glu 100 <210> 23 <211> 2971 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 23 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg 60 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 120 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca 180 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc 240 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta 300 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac 360 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg 420 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg 480 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt 540 acggtgggag gtctatataa gcagagctca tgatagaagc actctactat tcgtcgaccg 600 atcctgagaa cttcagggtg agtttgggga cccttgattg ttctttcttt ttcgctattg 660 taaaattcat gttatatgga gggggcaaag ttttcagggt gttgtttaga atgggaagat 720 gtcccttgta tcaccatgga ccctcatgat aattttgttt ctttcacttt ctactctgtt 780 gacaaccatt gtctcctctt attttctttt cattttctgt aactttttcg ttaaacttta 840 gcttgcattt gtaacgaatt tttaaattca cttttgttta tttgtcagat tgtaagtact 900 ttctctaatc actttttttt caaggcaatc agggtatatt atattgtact tcagcacagt 960 tttagagaac aattgttata attaaatgat aaggtagaat atttctgcat ataaattctg 1020 gctggcgtgg aaatattctt attggtagaa acaactacac cctggtcatc atcctgcctt 1080 tctctttatg gttacaatga tatacactgt ttgagatgag gataaaatac tctgagtcca 1140 aaccgggccc ctctgctaac catgttcatg ccttcttctc tttcctacag ctcctgggca 1200 acgtgctggt tgttgtgctg tctcatcatt ttggcaaaga attaagctta tactcgagct 1260 ctagattggg aacccgggtc tctcgaattc gagatctcca ccatgcacag acctagacgt 1320 cgtggaactc gtccacctcc actggcactg ctcgctgctc tcctcctggc tgcacgtggt 1380 gctgatgcag aggtgcaggt gttggagtct gggggagact tggtacagcc tggggggtcc 1440 ctgagactct cctgtgcagc ctctggattc acctttagtg cctatgccat gacctgggtc 1500 cgccaggctc cagggaaggg gctggagtgg gtctcagcta ttagtggtag tggtggtagc 1560 gcatactacg cagactccgt gaagggccgg ttcaccatct ccagagacaa ttccaagaac 1620 acggtatatc tgcagatgaa cagcctgaga gccgaggaca cggccgtata ttactgtgcg 1680 aaagatgggg cctggaaaat gtccggtttg gacgtctggg gccaagggac cacggtcatc 1740 gtctcctcag cctccaccaa gggcccatcg gtcttccccc tggcgccctg ctccaggagc 1800 acctccgaga gcacagccgc cctgggctgc ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg 1860 acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta 1920 cagtcctcag gactctactc cctcagcagc gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc 1980 acgaagacct acacctgcaa cgtagatcac aagcccagca acaccaaggt ggacaagaga 2040 gttgagtcca aatatggtcc cccatgccca ccctgcccag cacctgagtt cctgggggga 2100 ccatcagtct tcctgttccc cccaaaaccc aaggacactc tcatgatctc ccggacccct 2160 gaggtcacgt gcgtggtggt ggacgtgagc caggaagacc ccgaggtcca gttcaactgg 2220 tacgtggatg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagttcaac 2280 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaacggcaag 2340 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaaggc ctcccgtcct ccatcgagaa aaccatctcc 2400 aaagccaaag ggcagccccg agagccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccaggaggag 2460 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctaccc cagcgacatc 2520 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 2580 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaggctca ccgtggacaa gagcaggtgg 2640 caggagggga atgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacaca 2700 cagaagtccc tctccctgtc tctgggtaaa tgagcggccg ctaatcagcc ataccacatt 2760 tgtagaggtt ttacttgctt taaaaaacct cccacacctc cccctgaacc tgaaacataa 2820 aatgaatgca attgttgttg ttaacttgtt tattgcagct tataatggtt acaaataaag 2880 caatagcatc acaaatttca caaataaagc atttttttca ctgcattcta gttgtggttt 2940 gtccaaactc atcaatgtat cttatcatgt c 2971 <210> 24 <211> 7013 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 24 tcgcgatgtg tgactagtta gttattaata gtaatcaatt acggggtcat tagttcatag 60 cccatatatg gagttccgcg ttacataact tacggtaaat ggcccgcctg gctgaccgcc 120 caacgacccc cgcccattga cgtcaataat gacgtatgtt cccatagtaa cgccaatagg 180 gactttccat tgacgtcaat gggtggagta tttacggtaa actgcccact tggcagtaca 240 tcaagtgtat catatgccaa gtacgccccc tattgacgtc aatgacggta aatggcccgc 300 ctggcattat gcccagtaca tgaccttatg ggactttcct acttggcagt acatctacgt 360 attagtcatc gctattacca tggtgatgcg gttttggcag tacatcaatg ggcgtggata 420 gcggtttgac tcacggggat ttccaagtct ccaccccatt gacgtcaatg ggagtttgtt 480 ttggcaccaa aatcaacggg actttccaaa atgtcgtaac aactccgccc cattgacgca 540 aatgggcggt aggcgtgtac ggtgggaggt ctatataagc agagctcatg atagaagcac 600 tctactattc gtcgaccgat cctgagaact tcagggtgag tttggggacc cttgattgtt 660 ctttcttttt cgctattgta aaattcatgt tatatggagg gggcaaagtt ttcagggtgt 720 tgtttagaat gggaagatgt cccttgtatc accatggacc ctcatgataa ttttgtttct 780 ttcactttct actctgttga caaccattgt ctcctcttat tttcttttca ttttctgtaa 840 ctttttcgtt aaactttagc ttgcatttgt aacgaatttt taaattcact tttgtttatt 900 tgtcagattg taagtacttt ctctaatcac ttttttttca aggcaatcag ggtatattat 960 attgtacttc agcacagttt tagagaacaa ttgttataat taaatgataa ggtagaatat 1020 ttctgcatat aaattctggc tggcgtggaa atattcttat tggtagaaac aactacaccc 1080 tggtcatcat cctgcctttc tctttatggt tacaatgata tacactgttt gagatgagga 1140 taaaatactc tgagtccaaa ccgggcccct ctgctaacca tgttcatgcc ttcttctctt 1200 tcctacagct cctgggcaac gtgctggttg ttgtgctgtc tcatcatttt ggcaaagaat 1260 taagcttata ctcgagctct agattgggaa cccgggtctc tcgaattcga gatctccacc 1320 atgcacagac ctagacgtcg tggaactcgt ccacctccac tggcactgct cgctgctctc 1380 ctcctggctg cacgtggtgc tgatgcagag gtgcaggtgt tggagtctgg gggagacttg 1440 gtacagcctg gggggtccct gagactctcc tgtgcagcct ctggattcac ctttagtgcc 1500 tatgccatga cctgggtccg ccaggctcca gggaaggggc tggagtgggt ctcagctatt 1560 agtggtagtg gtggtagcgc atactacgca gactccgtga agggccggtt caccatctcc 1620 agagacaatt ccaagaacac ggtatatctg cagatgaaca gcctgagagc cgaggacacg 1680 gccgtatatt actgtgcgaa agatggggcc tggaaaatgt ccggtttgga cgtctggggc 1740 caagggacca cggtcatcgt ctcctcagcc tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg 1800 gcgccctgct ccaggagcac ctccgagagc acagccgccc tgggctgcct ggtcaaggac 1860 tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac 1920 accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg 1980 ccctccagca gcttgggcac gaagacctac acctgcaacg tagatcacaa gcccagcaac 2040 accaaggtgg acaagagagt tgagtccaaa tatggtcccc catgcccacc ctgcccagca 2100 cctgagttcc tggggggacc atcagtcttc ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc 2160 atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc 2220 gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 2280 cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 2340 gactggctga acggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc 2400 atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag agccacaggt gtacaccctg 2460 cccccatccc aggaggagat gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 2520 ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 2580 aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caggctcacc 2640 gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct 2700 ctgcacaacc actacacaca gaagtccctc tccctgtctc tgggtaaatg agcggccgct 2760 aatcagccat accacatttg tagaggtttt acttgcttta aaaaacctcc cacacctccc 2820 cctgaacctg aaacataaaa tgaatgcaat tgttgttgtt aacttgttta ttgcagctta 2880 taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat ttttttcact 2940 gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct accggtcctg 3000 cagggcccct ctcttcatgt gagcaaaagg ccagcaaaag gccaggaacc gtaaaaaggc 3060 cgcgttgctg gcgtttttcc ataggctccg cccccctgac gagcatcaca aaaatcgacg 3120 ctcaagtcag aggtggcgaa acccgacagg actataaaga taccaggcgt ttccccctgg 3180 aagctccctc gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt accggatacc tgtccgcctt 3240 tctcccttcg ggaagcgtgg cgctttctca atgctcacgc tgtaggtatc tcagttcggt 3300 gtaggtcgtt cgctccaagc tgggctgtgt gcacgaaccc cccgttcagc ccgaccgctg 3360 cgccttatcc ggtaactatc gtcttgagtc caacccggta agacacgact tatcgccact 3420 ggcagcagcc actggtaaca ggattagcag agcgaggtat gtaggcggtg ctacagagtt 3480 cttgaagtgg tggcctaact acggctacac tagaaggaca gtatttggta tctgcgctct 3540 gctgaagcca gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct tgatccggca aacaaaccac 3600 cgctggtagc ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt acgcgcagaa aaaaaggatc 3660 tcaagaagat cctttgatct tttctacggg gtctgacgct cagtggaacg aaaactcacg 3720 ttaagggatt ttggtcatgg gcgcgcctca tactcctgca ggcatgagat tatcaaaaag 3780 gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata 3840 tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta tctcagcgat 3900 ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg 3960 ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac gctcaccggc 4020 tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc 4080 aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc 4140 gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg tgtcacgctc 4200 gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc 4260 ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa 4320 gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc ttactgtcat 4380 gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat tctgagaata 4440 gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca 4500 tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag 4560 gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc 4620 agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc 4680 aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc tttttcaata 4740 ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg aatgtattta 4800 gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac atttccccga aaagtgccac ctgacgtcag 4860 gtaccaagcc taggcctcca aaaaagcctc ctcactactt ctggaatagc tcagaggcag 4920 aggcggcctc ggcctctgca taaataaaaa aaattagtca gccatggggc ggagaatggg 4980 cggaactggg cggagttagg ggcgggatgg gcggagttag gggcgggact atggttgctg 5040 actaattgag atgcatgctt tgcatacttc tgcctgctgg ggagcctggg gactttccac 5100 acctggttgc tgactaattg agatgcatgc tttgcatact tctgcctgct ggggagcctg 5160 gggactttcc acaccggatc caccatggat agatccggaa agcctgaact caccgcgacg 5220 tctgtcgaga agtttctgat cgaaaagttc gacagcgtct ccgacctgat gcagctctcg 5280 gagggcgaag aatctcgtgc tttcagcttc gatgtaggag ggcgtggata tgtcctgcgg 5340 gtaaatagct gcgccgatgg tttctacaaa gatcgttatg tttatcggca ctttgcatcg 5400 gccgcgctcc cgattccgga agtgcttgac attggggagt tcagcgagag cctgacctat 5460 tgcatctccc gccgtgcaca gggtgtcacg ttgcaagacc tgcctgaaac cgaactgccc 5520 gctgttctgc agccggtcgc ggaggccatg gatgcgatcg ctgcggccga tcttagccag 5580 acgagcgggt tcggcccatt cggaccgcaa ggaatcggtc aatacactac atggcgtgat 5640 ttcatatgcg cgattgctga tccccatgtg tatcactggc aaactgtgat ggacgacacc 5700 gtcagtgcgt ccgtcgcgca ggctctcgat gagctgatgc tttgggccga ggactgcccc 5760 gaagtccggc acctcgtgca cgcggatttc ggctccaaca atgtcctgac ggacaatggc 5820 cgcataacag cggtcattga ctggagcgag gcgatgttcg gggattccca atacgaggtc 5880 gccaacatct tcttctggag gccgtggttg gcttgtatgg agcagcagac gcgctacttc 5940 gagcggaggc atccggagct tgcaggatcg ccgcggctcc gggcgtatat gctccgcatt 6000 ggtcttgacc aactctatca gagcttggtt gacggcaatt tcgatgatgc agcttgggcg 6060 cagggtcgat gcgacgcaat cgtccgatcc ggagccggga ctgtcgggcg tacacaaatc 6120 gcccgcagaa gcgcggccgt ctggaccgat ggctgtgtag aagtactcgc cgatagtgga 6180 aaccgacgcc ccagcactcg tccgagggca aaggaataga cgcgtgctgt aagtctgcag 6240 aaattgatga tctattaaac aataaagatg tccactaaaa tggaagtttt tcctgtcata 6300 ctttgttaag aagggtgaga acagagtacc tacattttga atggaaggat tggagctacg 6360 ggggtggggg tggggtggga ttagataaat gcctgctctt tactgaaggc tctttactat 6420 tgctttatga taatgtttca tagttggata tcataattta aacaagcaaa accaaattaa 6480 gggccagctc attcctccca ctcatgatct atggatctat agatctctcg tgcagctggg 6540 gctctagggg gtatccccac gcgccctgta gcggcgcatt aagcgcggcg ggtgtggtgg 6600 ttacgcgcag cgtgaccgct acacttgcca gcgccctagc gcccgctcct ttcgctttct 6660 tcccttcctt tctcgccacg ttcgccggct ttccccgtca agctctaaat cgggggctcc 6720 ctttagggtt ccgatttagt gctttacggc acctcgaccc caaaaaactt gattagggtg 6780 atggttcacg tagtgggcca tcgccctgat agacggtttt tcgccctttg acgttggagt 6840 ccacgttctt taatagtgga ctcttgttcc aaactggaac aacactcaac cctatctcgg 6900 tctattcttt tgatttataa gggattttgc cgatttcggc ctattggtta aaaaatgagc 6960 tgatttaaca aaaatttaac gcgaattaat tctgtggaat gtgtgtcagt tag 7013 <210> 25 <211> 2272 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 25 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg 60 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 120 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca 180 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc 240 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta 300 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac 360 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg 420 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg 480 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt 540 acggtgggag gtctatataa gcagagctca tgatagaagc actctactat tcgtcgaccg 600 atcctgagaa cttcagggtg agtttgggga cccttgattg ttctttcttt ttcgctattg 660 taaaattcat gttatatgga gggggcaaag ttttcagggt gttgtttaga atgggaagat 720 gtcccttgta tcaccatgga ccctcatgat aattttgttt ctttcacttt ctactctgtt 780 gacaaccatt gtctcctctt attttctttt cattttctgt aactttttcg ttaaacttta 840 gcttgcattt gtaacgaatt tttaaattca cttttgttta tttgtcagat tgtaagtact 900 ttctctaatc actttttttt caaggcaatc agggtatatt atattgtact tcagcacagt 960 tttagagaac aattgttata attaaatgat aaggtagaat atttctgcat ataaattctg 1020 gctggcgtgg aaatattctt attggtagaa acaactacac cctggtcatc atcctgcctt 1080 tctctttatg gttacaatga tatacactgt ttgagatgag gataaaatac tctgagtcca 1140 aaccgggccc ctctgctaac catgttcatg ccttcttctc tttcctacag ctcctgggca 1200 acgtgctggt tgttgtgctg tctcatcatt ttggcaaaga attaagctta tactcgagct 1260 ctagattggg aacccgggtc tctcgaattc gagatctcca ccatgcacag acctagacgt 1320 cgtggaactc gtccacctcc actggcactg ctcgctgctc tcctcctggc tgcacgtggt 1380 gctgatgcag acatccagat gacccagtct ccagcctccc tgtctgcatc tgttggagac 1440 agagtcacca tcacttgtcg ggcgagtcag gacattagcg attatttagc ctggtatcag 1500 cagaaaccag ggaaaattcc taggctcctg atctatacta catccacttt gcaatcaggg 1560 gtcccatctc ggttccgtgg cagtgggtct gggacagatt tcactctcac catcagcagc 1620 ctgcagcctg aagatgttgc aacttattac tgtcagaagt atgacagtgc cccgctcact 1680 ttcggcggag ggaccaaggt ggagatcaaa cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc 1740 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 1800 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 1860 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 1920 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 1980 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttaggcggcc 2040 gctaatcagc cataccacat ttgtagaggt tttacttgct ttaaaaaacc tcccacacct 2100 ccccctgaac ctgaaacata aaatgaatgc aattgttgtt gttaacttgt ttattgcagc 2160 ttataatggt tacaaataaa gcaatagcat cacaaatttc acaaataaag catttttttc 2220 actgcattct agttgtggtt tgtccaaact catcaatgta tcttatcatg tc 2272 <210> 26 <211> 6335 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 26 tcgagctcta gattgggaac ccgggtctct cgaattcgag atctccacca tgcacagacc 60 tagacgtcgt ggaactcgtc cacctccact ggcactgctc gctgctctcc tcctggctgc 120 acgtggtgct gatgcagaca tccagatgac ccagtctcca gcctccctgt ctgcatctgt 180 tggagacaga gtcaccatca cttgtcgggc gagtcaggac attagcgatt atttagcctg 240 gtatcagcag aaaccaggga aaattcctag gctcctgatc tatactacat ccactttgca 300 atcaggggtc ccatctcggt tccgtggcag tgggtctggg acagatttca ctctcaccat 360 cagcagcctg cagcctgaag atgttgcaac ttattactgt cagaagtatg acagtgcccc 420 gctcactttc ggcggaggga ccaaggtgga gatcaaacga actgtggctg caccatctgt 480 cttcatcttc ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga actgcctctg ttgtgtgcct 540 gctgaataac ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg aaggtggata acgccctcca 600 atcgggtaac tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc aaggacagca cctacagcct 660 cagcagcacc ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa cacaaagtct acgcctgcga 720 agtcacccat cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc ttcaacaggg gagagtgtta 780 ggcggccgct aatcagccat accacatttg tagaggtttt acttgcttta aaaaacctcc 840 cacacctccc cctgaacctg aaacataaaa tgaatgcaat tgttgttgtt aacttgttta 900 ttgcagctta taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat 960 ttttttcact gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct 1020 accggtaggg cccctctctt catgtgagca aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa 1080 aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat 1140 cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca ggcgtttccc 1200 cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc 1260 gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcaatgct cacgctgtag gtatctcagt 1320 tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac 1380 cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg 1440 ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca 1500 gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc 1560 gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa 1620 accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa 1680 ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac 1740 tcacgttaag ggattttggt catgggcgcg ggcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc 1800 tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact 1860 tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt 1920 cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta 1980 ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac gctcaccggc tccagattta 2040 tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc 2100 gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc gccagttaat 2160 agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt 2220 atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg 2280 tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca 2340 gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc ttactgtcat gccatccgta 2400 agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg 2460 cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca tagcagaact 2520 ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg 2580 ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt 2640 actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga 2700 ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc 2760 atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa 2820 caaatagggg ttccgcgcac atttccccga aaagtgccac ctgacgtcag gtacacttag 2880 gcgcgccatt agagttcctg caggctacat ggtaccaagc ctaggcctcc aaaaaagcct 2940 cctcactact tctggaatag ctcagaggca gaggcggcct cggcctctgc ataaataaaa 3000 aaaattagtc agccatgggg cggagaatgg gcggaactgg gcggagttag gggcgggatg 3060 ggcggagtta ggggcgggac tatggttgct gactaattga gatgcatgct ttgcatactt 3120 ctgcctgctg gggagcctgg ggactttcca cacctggttg ctgactaatt gagatgcatg 3180 ctttgcatac ttctgcctgc tggggagcct ggggactttc cacaccggat ccaccatgga 3240 tagatccgga aagcctgaac tcaccgcgac gtctgtcgag aagtttctga tcgaaaagtt 3300 cgacagcgtc tccgacctga tgcagctctc ggagggcgaa gaatctcgtg ctttcagctt 3360 cgatgtagga gggcgtggat atgtcctgcg ggtaaatagc tgcgccgatg gtttctacaa 3420 agatcgttat gtttatcggc actttgcatc ggccgcgctc ccgattccgg aagtgcttga 3480 cattggggag ttcagcgaga gcctgaccta ttgcatctcc cgccgtgcac agggtgtcac 3540 gttgcaagac ctgcctgaaa ccgaactgcc cgctgttctg cagccggtcg cggaggccat 3600 ggatgcgatc gctgcggccg atcttagcca gacgagcggg ttcggcccat tcggaccgca 3660 aggaatcggt caatacacta catggcgtga tttcatatgc gcgattgctg atccccatgt 3720 gtatcactgg caaactgtga tggacgacac cgtcagtgcg tccgtcgcgc aggctctcga 3780 tgagctgatg ctttgggccg aggactgccc cgaagtccgg cacctcgtgc acgcggattt 3840 cggctccaac aatgtcctga cggacaatgg ccgcataaca gcggtcattg actggagcga 3900 ggcgatgttc ggggattccc aatacgaggt cgccaacatc ttcttctgga ggccgtggtt 3960 ggcttgtatg gagcagcaga cgcgctactt cgagcggagg catccggagc ttgcaggatc 4020 gccgcggctc cgggcgtata tgctccgcat tggtcttgac caactctatc agagcttggt 4080 tgacggcaat ttcgatgatg cagcttgggc gcagggtcga tgcgacgcaa tcgtccgatc 4140 cggagccggg actgtcgggc gtacacaaat cgcccgcaga agcgcggccg tctggaccga 4200 tggctgtgta gaagtactcg ccgatagtgg aaaccgacgc cccagcactc gtccgagggc 4260 aaaggaatag acgcgtgctg taagtctgca gaaattgatg atctattaaa caataaagat 4320 gtccactaaa atggaagttt ttcctgtcat actttgttaa gaagggtgag aacagagtac 4380 ctacattttg aatggaagga ttggagctac gggggtgggg gtggggtggg attagataaa 4440 tgcctgctct ttactgaagg ctctttacta ttgctttatg ataatgtttc atagttggat 4500 atcataattt aaacaagcaa aaccaaatta agggccagct cattcctccc actcatgatc 4560 tatggatcta tagatctctc gtgcagctgg ggctctaggg ggtatcccca cgcgccctgt 4620 agcggcgcat taagcgcggc gggtgtggtg gttacgcgca gcgtgaccgc tacacttgcc 4680 agcgccctag cgcccgctcc tttcgctttc ttcccttcct ttctcgccac gttcgccggc 4740 tttccccgtc aagctctaaa tcgggggctc cctttagggt tccgatttag tgctttacgg 4800 cacctcgacc ccaaaaaact tgattagggt gatggttcac gtagtgggcc atcgccctga 4860 tagacggttt ttcgcccttt gacgttggag tccacgttct ttaatagtgg actcttgttc 4920 caaactggaa caacactcaa ccctatctcg gtctattctt ttgatttata agggattttg 4980 ccgatttcgg cctattggtt aaaaaatgag ctgatttaac aaaaatttaa cgcgaattaa 5040 ttctgtggaa tgtgtgtcag ttagtcgcga tgtgtgacta gttagttatt aatagtaatc 5100 aattacgggg tcattagttc atagcccata tatggagttc cgcgttacat aacttacggt 5160 aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta 5220 tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg 5280 gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga 5340 cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag tacatgacct tatgggactt 5400 tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt accatggtga tgcggttttg 5460 gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg ggatttccaa gtctccaccc 5520 cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa cgggactttc caaaatgtcg 5580 taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt gtacggtggg aggtctatat 5640 aagcagagct catgatagaa gcactctact attcgtcgac cgatcctgag aacttcaggg 5700 tgagtttggg gacccttgat tgttctttct ttttcgctat tgtaaaattc atgttatatg 5760 gagggggcaa agttttcagg gtgttgttta gaatgggaag atgtcccttg tatcaccatg 5820 gaccctcatg ataattttgt ttctttcact ttctactctg ttgacaacca ttgtctcctc 5880 ttattttctt ttcattttct gtaacttttt cgttaaactt tagcttgcat ttgtaacgaa 5940 tttttaaatt cacttttgtt tatttgtcag attgtaagta ctttctctaa tcactttttt 6000 ttcaaggcaa tcagggtata ttatattgta cttcagcaca gttttagaga acaattgtta 6060 taattaaatg ataaggtaga atatttctgc atataaattc tggctggcgt ggaaatattc 6120 ttattggtag aaacaactac accctggtca tcatcctgcc tttctcttta tggttacaat 6180 gatatacact gtttgagatg aggataaaat actctgagtc caaaccgggc ccctctgcta 6240 accatgttca tgccttcttc tctttcctac agctcctggg caacgtgctg gttgttgtgc 6300 tgtctcatca ttttggcaaa gaattaagct tatac 6335 <210> 27 <211> 452 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Asp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Gly Pro Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Gly Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Gly Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Leu Ile Thr Phe Gly Gly Leu Ile Ala Pro Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser 210 215 220 Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 225 230 235 240 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 245 250 255 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 260 265 270 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 275 280 285 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 290 295 300 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 305 310 315 320 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 325 330 335 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 340 345 350 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 355 360 365 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 370 375 380 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 385 390 395 400 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 405 410 415 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 420 425 430 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 435 440 445 Ser Pro Gly Lys 450 <210> 28 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser 1 5 10 15 Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Asp Ile His Trp Val 20 25 30 Arg Gln Ala Thr Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Gly Pro 35 40 45 Ala Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Gly Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile 50 55 60 Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu 65 70 75 80 Arg Ala Gly Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Leu Ile Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Leu Ile Ala Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 <210> 29 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Thr 20 25 30 Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Asp Asn Ser Gln 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 30 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu 1 5 10 15 Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Thr Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Asp Asn Ser Gln Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 31 <211> 2986 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 31 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg 60 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 120 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca 180 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc 240 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta 300 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac 360 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg 420 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg 480 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt 540 acggtgggag gtctatataa gcagagctca tgatagaagc actctactat tcgtcgaccg 600 atcctgagaa cttcagggtg agtttgggga cccttgattg ttctttcttt ttcgctattg 660 taaaattcat gttatatgga gggggcaaag ttttcagggt gttgtttaga atgggaagat 720 gtcccttgta tcaccatgga ccctcatgat aattttgttt ctttcacttt ctactctgtt 780 gacaaccatt gtctcctctt attttctttt cattttctgt aactttttcg ttaaacttta 840 gcttgcattt gtaacgaatt tttaaattca cttttgttta tttgtcagat tgtaagtact 900 ttctctaatc actttttttt caaggcaatc agggtatatt atattgtact tcagcacagt 960 tttagagaac aattgttata attaaatgat aaggtagaat atttctgcat ataaattctg 1020 gctggcgtgg aaatattctt attggtagaa acaactacac cctggtcatc atcctgcctt 1080 tctctttatg gttacaatga tatacactgt ttgagatgag gataaaatac tctgagtcca 1140 aaccgggccc ctctgctaac catgttcatg ccttcttctc tttcctacag ctcctgggca 1200 acgtgctggt tgttgtgctg tctcatcatt ttggcaaaga attaagctta tactcgagct 1260 ctagattggg aacccgggtc tctcgaattc gagatctcca ccatgcacag acctagacgt 1320 cgtggaactc gtccacctcc actggcactg ctcgctgctc tcctcctggc tgcacgtggt 1380 gctgatgcag aggtgcagct ggtggagtct gggggaggct tggtacagcc gggggggtcc 1440 ctgagactct cctgtgcagc ctctggattc accttcagta gctacgacat acactgggtc 1500 cgtcaagcta caggaaaagg tctggagtgg gtctcagcta ttggtcctgc tggtgacaca 1560 tactatccag gctccgtgaa gggccgattc accatctcca gagaaaatgc caagaactcc 1620 ttgtatcttc aaatgaacag cctgagagcc ggggacacgg ctgtgtatta ctgtgcaaga 1680 ggtttgatta cgtttggggg gcttatcgcc ccgtttgact actggggcca gggaaccctg 1740 gtcaccgtct cctcagcctc caccaagggc ccatcggtct tccccctggc accctcctcc 1800 aagagcacct ctgggggcac agcggccctg ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa 1860 ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct 1920 gtcctacagt cctcaggact ctactccctc agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc 1980 ttgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg aatcacaagc ccagcaacac caaggtggac 2040 aagaaagttg agcccaaatc ttgtgacaaa actcacacat gcccaccgtg cccagcacct 2100 gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa aacccaagga caccctcatg 2160 atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg gtggtggacg tgagccacga agaccctgag 2220 gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg 2280 gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac 2340 tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aagccctccc agcccccatc 2400 gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc 2460 ccatcccggg atgagctgac caagaaccag gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc 2520 tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag 2580 accacgcctc ccgtgctgga ctccgacggc tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg 2640 gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg 2700 cacaaccact acacgcagaa gtccctctcc ctgtctccgg gtaaatgagc ggccgctaat 2760 cagccatacc acatttgtag aggttttact tgctttaaaa aacctcccac acctccccct 2820 gaacctgaaa cataaaatga atgcaattgt tgttgttaac ttgtttattg cagcttataa 2880 tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat aaagcatttt tttcactgca 2940 ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatcttat catgtc 2986 <210> 32 <211> 7028 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 32 tcgcgatgtg tgactagtta gttattaata gtaatcaatt acggggtcat tagttcatag 60 cccatatatg gagttccgcg ttacataact tacggtaaat ggcccgcctg gctgaccgcc 120 caacgacccc cgcccattga cgtcaataat gacgtatgtt cccatagtaa cgccaatagg 180 gactttccat tgacgtcaat gggtggagta tttacggtaa actgcccact tggcagtaca 240 tcaagtgtat catatgccaa gtacgccccc tattgacgtc aatgacggta aatggcccgc 300 ctggcattat gcccagtaca tgaccttatg ggactttcct acttggcagt acatctacgt 360 attagtcatc gctattacca tggtgatgcg gttttggcag tacatcaatg ggcgtggata 420 gcggtttgac tcacggggat ttccaagtct ccaccccatt gacgtcaatg ggagtttgtt 480 ttggcaccaa aatcaacggg actttccaaa atgtcgtaac aactccgccc cattgacgca 540 aatgggcggt aggcgtgtac ggtgggaggt ctatataagc agagctcatg atagaagcac 600 tctactattc gtcgaccgat cctgagaact tcagggtgag tttggggacc cttgattgtt 660 ctttcttttt cgctattgta aaattcatgt tatatggagg gggcaaagtt ttcagggtgt 720 tgtttagaat gggaagatgt cccttgtatc accatggacc ctcatgataa ttttgtttct 780 ttcactttct actctgttga caaccattgt ctcctcttat tttcttttca ttttctgtaa 840 ctttttcgtt aaactttagc ttgcatttgt aacgaatttt taaattcact tttgtttatt 900 tgtcagattg taagtacttt ctctaatcac ttttttttca aggcaatcag ggtatattat 960 attgtacttc agcacagttt tagagaacaa ttgttataat taaatgataa ggtagaatat 1020 ttctgcatat aaattctggc tggcgtggaa atattcttat tggtagaaac aactacaccc 1080 tggtcatcat cctgcctttc tctttatggt tacaatgata tacactgttt gagatgagga 1140 taaaatactc tgagtccaaa ccgggcccct ctgctaacca tgttcatgcc ttcttctctt 1200 tcctacagct cctgggcaac gtgctggttg ttgtgctgtc tcatcatttt ggcaaagaat 1260 taagcttata ctcgagctct agattgggaa cccgggtctc tcgaattcga gatctccacc 1320 atgcacagac ctagacgtcg tggaactcgt ccacctccac tggcactgct cgctgctctc 1380 ctcctggctg cacgtggtgc tgatgcagag gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcttg 1440 gtacagccgg gggggtccct gagactctcc tgtgcagcct ctggattcac cttcagtagc 1500 tacgacatac actgggtccg tcaagctaca ggaaaaggtc tggagtgggt ctcagctatt 1560 ggtcctgctg gtgacacata ctatccaggc tccgtgaagg gccgattcac catctccaga 1620 gaaaatgcca agaactcctt gtatcttcaa atgaacagcc tgagagccgg ggacacggct 1680 gtgtattact gtgcaagagg tttgattacg tttggggggc ttatcgcccc gtttgactac 1740 tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc tcagcctcca ccaagggccc atcggtcttc 1800 cccctggcac cctcctccaa gagcacctct gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc 1860 aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc 1920 gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc tcaggactct actccctcag cagcgtggtg 1980 accgtgccct ccagcagctt gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc 2040 agcaacacca aggtggacaa gaaagttgag cccaaatctt gtgacaaaac tcacacatgc 2100 ccaccgtgcc cagcacctga actcctgggg ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa 2160 cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg 2220 agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 2280 gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 2340 accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 2400 gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 2460 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 2520 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 2580 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc 2640 tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2700 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaagt ccctctccct gtctccgggt 2760 aaatgagcgg ccgctaatca gccataccac atttgtagag gttttacttg ctttaaaaaa 2820 cctcccacac ctccccctga acctgaaaca taaaatgaat gcaattgttg ttgttaactt 2880 gtttattgca gcttataatg gttacaaata aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa 2940 agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg tttgtccaaa ctcatcaatg tatcttatca 3000 tgtctaccgg tcctgcaggg cccctctctt catgtgagca aaaggccagc aaaaggccag 3060 gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc ctgacgagca 3120 tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca 3180 ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg 3240 atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcaatgct cacgctgtag 3300 gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt 3360 tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca 3420 cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg 3480 cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa ggacagtatt 3540 tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc 3600 cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc agattacgcg 3660 cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg acgctcagtg 3720 gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgggcgcg cctcatactc ctgcaggcat 3780 gagattatca aaaaggatct tcacctagat ccttttaaat taaaaatgaa gttttaaatc 3840 aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa tcagtgaggc 3900 acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc ccgtcgtgta 3960 gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga taccgcgaga 4020 cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag ccagccggaa gggccgagcg 4080 cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct attaattgtt gccgggaagc 4140 tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg ctacaggcat 4200 cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc aacgatcaag 4260 gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg gtcctccgat 4320 cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag cactgcataa 4380 ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa 4440 gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt caatacggga 4500 taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac gttcttcggg 4560 gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac ccactcgtgc 4620 acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag caaaaacagg 4680 aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa tactcatact 4740 cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat tgtctcatga gcggatacat 4800 atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt 4860 gccacctgac gtcaggtacc aagcctaggc ctccaaaaaa gcctcctcac tacttctgga 4920 atagctcaga ggcagaggcg gcctcggcct ctgcataaat aaaaaaaatt agtcagccat 4980 ggggcggaga atgggcggaa ctgggcggag ttaggggcgg gatgggcgga gttaggggcg 5040 ggactatggt tgctgactaa ttgagatgca tgctttgcat acttctgcct gctggggagc 5100 ctggggactt tccacacctg gttgctgact aattgagatg catgctttgc atacttctgc 5160 ctgctgggga gcctggggac tttccacacc ggatccacca tggatagatc cggaaagcct 5220 gaactcaccg cgacgtctgt cgagaagttt ctgatcgaaa agttcgacag cgtctccgac 5280 ctgatgcagc tctcggaggg cgaagaatct cgtgctttca gcttcgatgt aggagggcgt 5340 ggatatgtcc tgcgggtaaa tagctgcgcc gatggtttct acaaagatcg ttatgtttat 5400 cggcactttg catcggccgc gctcccgatt ccggaagtgc ttgacattgg ggagttcagc 5460 gagagcctga cctattgcat ctcccgccgt gcacagggtg tcacgttgca agacctgcct 5520 gaaaccgaac tgcccgctgt tctgcagccg gtcgcggagg ccatggatgc gatcgctgcg 5580 gccgatctta gccagacgag cgggttcggc ccattcggac cgcaaggaat cggtcaatac 5640 actacatggc gtgatttcat atgcgcgatt gctgatcccc atgtgtatca ctggcaaact 5700 gtgatggacg acaccgtcag tgcgtccgtc gcgcaggctc tcgatgagct gatgctttgg 5760 gccgaggact gccccgaagt ccggcacctc gtgcacgcgg atttcggctc caacaatgtc 5820 ctgacggaca atggccgcat aacagcggtc attgactgga gcgaggcgat gttcggggat 5880 tcccaatacg aggtcgccaa catcttcttc tggaggccgt ggttggcttg tatggagcag 5940 cagacgcgct acttcgagcg gaggcatccg gagcttgcag gatcgccgcg gctccgggcg 6000 tatatgctcc gcattggtct tgaccaactc tatcagagct tggttgacgg caatttcgat 6060 gatgcagctt gggcgcaggg tcgatgcgac gcaatcgtcc gatccggagc cgggactgtc 6120 gggcgtacac aaatcgcccg cagaagcgcg gccgtctgga ccgatggctg tgtagaagta 6180 ctcgccgata gtggaaaccg acgccccagc actcgtccga gggcaaagga atagacgcgt 6240 gctgtaagtc tgcagaaatt gatgatctat taaacaataa agatgtccac taaaatggaa 6300 gtttttcctg tcatactttg ttaagaaggg tgagaacaga gtacctacat tttgaatgga 6360 aggattggag ctacgggggt gggggtgggg tgggattaga taaatgcctg ctctttactg 6420 aaggctcttt actattgctt tatgataatg tttcatagtt ggatatcata atttaaacaa 6480 gcaaaaccaa attaagggcc agctcattcc tcccactcat gatctatgga tctatagatc 6540 tctcgtgcag ctggggctct agggggtatc cccacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg 6600 cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg 6660 ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc 6720 taaatcgggg gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa 6780 aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc 6840 ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac 6900 tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttgccgatt tcggcctatt 6960 ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttaattctgt ggaatgtgtg 7020 tcagttag 7028 <210> 33 <211> 2272 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 33 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg 60 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 120 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca 180 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc 240 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta 300 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac 360 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg 420 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg 480 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt 540 acggtgggag gtctatataa gcagagctca tgatagaagc actctactat tcgtcgaccg 600 atcctgagaa cttcagggtg agtttgggga cccttgattg ttctttcttt ttcgctattg 660 taaaattcat gttatatgga gggggcaaag ttttcagggt gttgtttaga atgggaagat 720 gtcccttgta tcaccatgga ccctcatgat aattttgttt ctttcacttt ctactctgtt 780 gacaaccatt gtctcctctt attttctttt cattttctgt aactttttcg ttaaacttta 840 gcttgcattt gtaacgaatt tttaaattca cttttgttta tttgtcagat tgtaagtact 900 ttctctaatc actttttttt caaggcaatc agggtatatt atattgtact tcagcacagt 960 tttagagaac aattgttata attaaatgat aaggtagaat atttctgcat ataaattctg 1020 gctggcgtgg aaatattctt attggtagaa acaactacac cctggtcatc atcctgcctt 1080 tctctttatg gttacaatga tatacactgt ttgagatgag gataaaatac tctgagtcca 1140 aaccgggccc ctctgctaac catgttcatg ccttcttctc tttcctacag ctcctgggca 1200 acgtgctggt tgttgtgctg tctcatcatt ttggcaaaga attaagctta tactcgagct 1260 ctagattggg aacccgggtc tctcgaattc gagatctcca ccatgcacag acctagacgt 1320 cgtggaactc gtccacctcc actggcactg ctcgctgctc tcctcctggc tgcacgtggt 1380 gctgatgcag aaattgtgtt gacgcagtct ccaggcaccc tgtctttgtc tccaggggaa 1440 agagccaccc tctcctgcag ggccagtcag agtgttagca gcacctactt agcctggtac 1500 cagcagaaac ctggccaggc tcccaggctc ctcatctatg gtgcatccag cagggccact 1560 ggcatcccag acaggttcag tggcagtggg tctgggacag acttcactct caccatcagc 1620 agactggagc ctgaagattt tgcagtgtat tactgtcagc attatgataa ctcacaaacg 1680 ttcggccaag ggaccaaggt ggagatcaaa cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc 1740 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 1800 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 1860 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 1920 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 1980 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttaggcggcc 2040 gctaatcagc cataccacat ttgtagaggt tttacttgct ttaaaaaacc tcccacacct 2100 ccccctgaac ctgaaacata aaatgaatgc aattgttgtt gttaacttgt ttattgcagc 2160 ttataatggt tacaaataaa gcaatagcat cacaaatttc acaaataaag catttttttc 2220 actgcattct agttgtggtt tgtccaaact catcaatgta tcttatcatg tc 2272 <210> 34 <211> 6335 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 34 tcgagctcta gattgggaac ccgggtctct cgaattcgag atctccacca tgcacagacc 60 tagacgtcgt ggaactcgtc cacctccact ggcactgctc gctgctctcc tcctggctgc 120 acgtggtgct gatgcagaaa ttgtgttgac gcagtctcca ggcaccctgt ctttgtctcc 180 aggggaaaga gccaccctct cctgcagggc cagtcagagt gttagcagca cctacttagc 240 ctggtaccag cagaaacctg gccaggctcc caggctcctc atctatggtg catccagcag 300 ggccactggc atcccagaca ggttcagtgg cagtgggtct gggacagact tcactctcac 360 catcagcaga ctggagcctg aagattttgc agtgtattac tgtcagcatt atgataactc 420 acaaacgttc ggccaaggga ccaaggtgga gatcaaacga actgtggctg caccatctgt 480 cttcatcttc ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga actgcctctg ttgtgtgcct 540 gctgaataac ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg aaggtggata acgccctcca 600 atcgggtaac tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc aaggacagca cctacagcct 660 cagcagcacc ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa cacaaagtct acgcctgcga 720 agtcacccat cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc ttcaacaggg gagagtgtta 780 ggcggccgct aatcagccat accacatttg tagaggtttt acttgcttta aaaaacctcc 840 cacacctccc cctgaacctg aaacataaaa tgaatgcaat tgttgttgtt aacttgttta 900 ttgcagctta taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat 960 ttttttcact gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct 1020 accggtaggg cccctctctt catgtgagca aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa 1080 aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat 1140 cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca ggcgtttccc 1200 cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc 1260 gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcaatgct cacgctgtag gtatctcagt 1320 tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac 1380 cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg 1440 ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca 1500 gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc 1560 gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa 1620 accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa 1680 ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac 1740 tcacgttaag ggattttggt catgggcgcg ggcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc 1800 tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact 1860 tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt 1920 cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta 1980 ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac gctcaccggc tccagattta 2040 tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc 2100 gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc gccagttaat 2160 agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt 2220 atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg 2280 tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca 2340 gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc ttactgtcat gccatccgta 2400 agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg 2460 cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca tagcagaact 2520 ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg 2580 ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt 2640 actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga 2700 ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc 2760 atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa 2820 caaatagggg ttccgcgcac atttccccga aaagtgccac ctgacgtcag gtacacttag 2880 gcgcgccatt agagttcctg caggctacat ggtaccaagc ctaggcctcc aaaaaagcct 2940 cctcactact tctggaatag ctcagaggca gaggcggcct cggcctctgc ataaataaaa 3000 aaaattagtc agccatgggg cggagaatgg gcggaactgg gcggagttag gggcgggatg 3060 ggcggagtta ggggcgggac tatggttgct gactaattga gatgcatgct ttgcatactt 3120 ctgcctgctg gggagcctgg ggactttcca cacctggttg ctgactaatt gagatgcatg 3180 ctttgcatac ttctgcctgc tggggagcct ggggactttc cacaccggat ccaccatgga 3240 tagatccgga aagcctgaac tcaccgcgac gtctgtcgag aagtttctga tcgaaaagtt 3300 cgacagcgtc tccgacctga tgcagctctc ggagggcgaa gaatctcgtg ctttcagctt 3360 cgatgtagga gggcgtggat atgtcctgcg ggtaaatagc tgcgccgatg gtttctacaa 3420 agatcgttat gtttatcggc actttgcatc ggccgcgctc ccgattccgg aagtgcttga 3480 cattggggag ttcagcgaga gcctgaccta ttgcatctcc cgccgtgcac agggtgtcac 3540 gttgcaagac ctgcctgaaa ccgaactgcc cgctgttctg cagccggtcg cggaggccat 3600 ggatgcgatc gctgcggccg atcttagcca gacgagcggg ttcggcccat tcggaccgca 3660 aggaatcggt caatacacta catggcgtga tttcatatgc gcgattgctg atccccatgt 3720 gtatcactgg caaactgtga tggacgacac cgtcagtgcg tccgtcgcgc aggctctcga 3780 tgagctgatg ctttgggccg aggactgccc cgaagtccgg cacctcgtgc acgcggattt 3840 cggctccaac aatgtcctga cggacaatgg ccgcataaca gcggtcattg actggagcga 3900 ggcgatgttc ggggattccc aatacgaggt cgccaacatc ttcttctgga ggccgtggtt 3960 ggcttgtatg gagcagcaga cgcgctactt cgagcggagg catccggagc ttgcaggatc 4020 gccgcggctc cgggcgtata tgctccgcat tggtcttgac caactctatc agagcttggt 4080 tgacggcaat ttcgatgatg cagcttgggc gcagggtcga tgcgacgcaa tcgtccgatc 4140 cggagccggg actgtcgggc gtacacaaat cgcccgcaga agcgcggccg tctggaccga 4200 tggctgtgta gaagtactcg ccgatagtgg aaaccgacgc cccagcactc gtccgagggc 4260 aaaggaatag acgcgtgctg taagtctgca gaaattgatg atctattaaa caataaagat 4320 gtccactaaa atggaagttt ttcctgtcat actttgttaa gaagggtgag aacagagtac 4380 ctacattttg aatggaagga ttggagctac gggggtgggg gtggggtggg attagataaa 4440 tgcctgctct ttactgaagg ctctttacta ttgctttatg ataatgtttc atagttggat 4500 atcataattt aaacaagcaa aaccaaatta agggccagct cattcctccc actcatgatc 4560 tatggatcta tagatctctc gtgcagctgg ggctctaggg ggtatcccca cgcgccctgt 4620 agcggcgcat taagcgcggc gggtgtggtg gttacgcgca gcgtgaccgc tacacttgcc 4680 agcgccctag cgcccgctcc tttcgctttc ttcccttcct ttctcgccac gttcgccggc 4740 tttccccgtc aagctctaaa tcgggggctc cctttagggt tccgatttag tgctttacgg 4800 cacctcgacc ccaaaaaact tgattagggt gatggttcac gtagtgggcc atcgccctga 4860 tagacggttt ttcgcccttt gacgttggag tccacgttct ttaatagtgg actcttgttc 4920 caaactggaa caacactcaa ccctatctcg gtctattctt ttgatttata agggattttg 4980 ccgatttcgg cctattggtt aaaaaatgag ctgatttaac aaaaatttaa cgcgaattaa 5040 ttctgtggaa tgtgtgtcag ttagtcgcga tgtgtgacta gttagttatt aatagtaatc 5100 aattacgggg tcattagttc atagcccata tatggagttc cgcgttacat aacttacggt 5160 aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta 5220 tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg 5280 gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga 5340 cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag tacatgacct tatgggactt 5400 tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt accatggtga tgcggttttg 5460 gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg ggatttccaa gtctccaccc 5520 cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa cgggactttc caaaatgtcg 5580 taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt gtacggtggg aggtctatat 5640 aagcagagct catgatagaa gcactctact attcgtcgac cgatcctgag aacttcaggg 5700 tgagtttggg gacccttgat tgttctttct ttttcgctat tgtaaaattc atgttatatg 5760 gagggggcaa agttttcagg gtgttgttta gaatgggaag atgtcccttg tatcaccatg 5820 gaccctcatg ataattttgt ttctttcact ttctactctg ttgacaacca ttgtctcctc 5880 ttattttctt ttcattttct gtaacttttt cgttaaactt tagcttgcat ttgtaacgaa 5940 tttttaaatt cacttttgtt tatttgtcag attgtaagta ctttctctaa tcactttttt 6000 ttcaaggcaa tcagggtata ttatattgta cttcagcaca gttttagaga acaattgtta 6060 taattaaatg ataaggtaga atatttctgc atataaattc tggctggcgt ggaaatattc 6120 ttattggtag aaacaactac accctggtca tcatcctgcc tttctcttta tggttacaat 6180 gatatacact gtttgagatg aggataaaat actctgagtc caaaccgggc ccctctgcta 6240 accatgttca tgccttcttc tctttcctac agctcctggg caacgtgctg gttgttgtgc 6300 tgtctcatca ttttggcaaa gaattaagct tatac 6335 <210> 35 <211> 449 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Ile His 20 25 30 His Trp Thr Trp Ile Arg His Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ala Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Leu Arg Phe Leu Asp Trp Leu Ser Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 36 <211> 103 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Gln Ser Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr 1 5 10 15 Cys Thr Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Ile His His Trp Thr Trp Ile 20 25 30 Arg His Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn His 35 40 45 Arg Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile 50 55 60 Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ala Val 65 70 75 80 Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Leu Arg Phe 85 90 95 Leu Asp Trp Leu Ser Ser Tyr 100 <210> 37 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 37 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asp Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Asn Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ala Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Tyr Asn Thr Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 38 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 38 Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp 1 5 10 15 Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asp Tyr Leu 20 25 30 Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Asn Leu Leu Ile Tyr 35 40 45 Ala Ala Ser Ala Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu 65 70 75 80 Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Tyr Asn Thr Ala Pro Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 39 <211> 2977 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 39 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg 60 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 120 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca 180 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc 240 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta 300 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac 360 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg 420 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg 480 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt 540 acggtgggag gtctatataa gcagagctca tgatagaagc actctactat tcgtcgaccg 600 atcctgagaa cttcagggtg agtttgggga cccttgattg ttctttcttt ttcgctattg 660 taaaattcat gttatatgga gggggcaaag ttttcagggt gttgtttaga atgggaagat 720 gtcccttgta tcaccatgga ccctcatgat aattttgttt ctttcacttt ctactctgtt 780 gacaaccatt gtctcctctt attttctttt cattttctgt aactttttcg ttaaacttta 840 gcttgcattt gtaacgaatt tttaaattca cttttgttta tttgtcagat tgtaagtact 900 ttctctaatc actttttttt caaggcaatc agggtatatt atattgtact tcagcacagt 960 tttagagaac aattgttata attaaatgat aaggtagaat atttctgcat ataaattctg 1020 gctggcgtgg aaatattctt attggtagaa acaactacac cctggtcatc atcctgcctt 1080 tctctttatg gttacaatga tatacactgt ttgagatgag gataaaatac tctgagtcca 1140 aaccgggccc ctctgctaac catgttcatg ccttcttctc tttcctacag ctcctgggca 1200 acgtgctggt tgttgtgctg tctcatcatt ttggcaaaga attaagctta tactcgagct 1260 ctagattggg aacccgggtc tctcgaattc gagatctcca ccatgcacag acctagacgt 1320 cgtggaactc gtccacctcc actggcactg ctcgctgctc tcctcctggc tgcacgtggt 1380 gctgatgcac aggtacagct gcagcagtcg ggcgcaggac tgttgaagcc ttcggagacc 1440 ctgtccctca cctgcactgt ctatggtgga tccttcagta ttcatcactg gacctggatc 1500 cgccatcccc cagggaaggg gctggagtgg attggggaga tcaatcatcg tggaagcacc 1560 aactacaacc cgtccctcaa gagtcgagtc accatatcaa tagacacgtc caagaaccag 1620 ttctccctga agctgagcgc tgtgaccgcc gcggacacgg ctgtatatta ctgtgcgaga 1680 ggcttacgat ttttggactg gttatcgtcc tactttgact actggggcca gggaaccctg 1740 gtcaccgtct cctcagcctc caccaagggc ccatcggtct tccccctggc gccctgctcc 1800 aggagcacct ccgagagcac agccgccctg ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa 1860 ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct 1920 gtcctacagt cctcaggact ctactccctc agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc 1980 ttgggcacga agacctacac ctgcaacgta gatcacaagc ccagcaacac caaggtggac 2040 aagagagttg agtccaaata tggtccccca tgcccaccct gcccagcacc tgagttcctg 2100 gggggaccat cagtcttcct gttcccccca aaacccaagg acactctcat gatctcccgg 2160 acccctgagg tcacgtgcgt ggtggtggac gtgagccagg aagaccccga ggtccagttc 2220 aactggtacg tggatggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 2280 ttcaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaac 2340 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaaggcctcc cgtcctccat cgagaaaacc 2400 atctccaaag ccaaagggca gccccgagag ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccag 2460 gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc 2520 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 2580 cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca ggctcaccgt ggacaagagc 2640 aggtggcagg aggggaatgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 2700 tacacacaga agtccctctc cctgtctctg ggtaaatgag cggccgctaa tcagccatac 2760 cacatttgta gaggttttac ttgctttaaa aaacctccca cacctccccc tgaacctgaa 2820 acataaaatg aatgcaattg ttgttgttaa cttgtttatt gcagcttata atggttacaa 2880 ataaagcaat agcatcacaa atttcacaaa taaagcattt ttttcactgc attctagttg 2940 tggtttgtcc aaactcatca atgtatctta tcatgtc 2977 <210> 40 <211> 7019 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 40 tcgcgatgtg tgactagtta gttattaata gtaatcaatt acggggtcat tagttcatag 60 cccatatatg gagttccgcg ttacataact tacggtaaat ggcccgcctg gctgaccgcc 120 caacgacccc cgcccattga cgtcaataat gacgtatgtt cccatagtaa cgccaatagg 180 gactttccat tgacgtcaat gggtggagta tttacggtaa actgcccact tggcagtaca 240 tcaagtgtat catatgccaa gtacgccccc tattgacgtc aatgacggta aatggcccgc 300 ctggcattat gcccagtaca tgaccttatg ggactttcct acttggcagt acatctacgt 360 attagtcatc gctattacca tggtgatgcg gttttggcag tacatcaatg ggcgtggata 420 gcggtttgac tcacggggat ttccaagtct ccaccccatt gacgtcaatg ggagtttgtt 480 ttggcaccaa aatcaacggg actttccaaa atgtcgtaac aactccgccc cattgacgca 540 aatgggcggt aggcgtgtac ggtgggaggt ctatataagc agagctcatg atagaagcac 600 tctactattc gtcgaccgat cctgagaact tcagggtgag tttggggacc cttgattgtt 660 ctttcttttt cgctattgta aaattcatgt tatatggagg gggcaaagtt ttcagggtgt 720 tgtttagaat gggaagatgt cccttgtatc accatggacc ctcatgataa ttttgtttct 780 ttcactttct actctgttga caaccattgt ctcctcttat tttcttttca ttttctgtaa 840 ctttttcgtt aaactttagc ttgcatttgt aacgaatttt taaattcact tttgtttatt 900 tgtcagattg taagtacttt ctctaatcac ttttttttca aggcaatcag ggtatattat 960 attgtacttc agcacagttt tagagaacaa ttgttataat taaatgataa ggtagaatat 1020 ttctgcatat aaattctggc tggcgtggaa atattcttat tggtagaaac aactacaccc 1080 tggtcatcat cctgcctttc tctttatggt tacaatgata tacactgttt gagatgagga 1140 taaaatactc tgagtccaaa ccgggcccct ctgctaacca tgttcatgcc ttcttctctt 1200 tcctacagct cctgggcaac gtgctggttg ttgtgctgtc tcatcatttt ggcaaagaat 1260 taagcttata ctcgagctct agattgggaa cccgggtctc tcgaattcga gatctccacc 1320 atgcacagac ctagacgtcg tggaactcgt ccacctccac tggcactgct cgctgctctc 1380 ctcctggctg cacgtggtgc tgatgcacag gtacagctgc agcagtcggg cgcaggactg 1440 ttgaagcctt cggagaccct gtccctcacc tgcactgtct atggtggatc cttcagtatt 1500 catcactgga cctggatccg ccatccccca gggaaggggc tggagtggat tggggagatc 1560 aatcatcgtg gaagcaccaa ctacaacccg tccctcaaga gtcgagtcac catatcaata 1620 gacacgtcca agaaccagtt ctccctgaag ctgagcgctg tgaccgccgc ggacacggct 1680 gtatattact gtgcgagagg cttacgattt ttggactggt tatcgtccta ctttgactac 1740 tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc tcagcctcca ccaagggccc atcggtcttc 1800 cccctggcgc cctgctccag gagcacctcc gagagcacag ccgccctggg ctgcctggtc 1860 aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc 1920 gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc tcaggactct actccctcag cagcgtggtg 1980 accgtgccct ccagcagctt gggcacgaag acctacacct gcaacgtaga tcacaagccc 2040 agcaacacca aggtggacaa gagagttgag tccaaatatg gtcccccatg cccaccctgc 2100 ccagcacctg agttcctggg gggaccatca gtcttcctgt tccccccaaa acccaaggac 2160 actctcatga tctcccggac ccctgaggtc acgtgcgtgg tggtggacgt gagccaggaa 2220 gaccccgagg tccagttcaa ctggtacgtg gatggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 2280 aagccgcggg aggagcagtt caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 2340 caccaggact ggctgaacgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa aggcctcccg 2400 tcctccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagagcc acaggtgtac 2460 accctgcccc catcccagga ggagatgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 2520 aaaggcttct accccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 2580 aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcagg 2640 ctcaccgtgg acaagagcag gtggcaggag gggaatgtct tctcatgctc cgtgatgcat 2700 gaggctctgc acaaccacta cacacagaag tccctctccc tgtctctggg taaatgagcg 2760 gccgctaatc agccatacca catttgtaga ggttttactt gctttaaaaa acctcccaca 2820 cctccccctg aacctgaaac ataaaatgaa tgcaattgtt gttgttaact tgtttattgc 2880 agcttataat ggttacaaat aaagcaatag catcacaaat ttcacaaata aagcattttt 2940 ttcactgcat tctagttgtg gtttgtccaa actcatcaat gtatcttatc atgtctaccg 3000 gtcctgcagg gcccctctct tcatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa 3060 aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa 3120 tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc 3180 ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc 3240 cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcaatgc tcacgctgta ggtatctcag 3300 ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga 3360 ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc 3420 gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac 3480 agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga aggacagtat ttggtatctg 3540 cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca 3600 aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa 3660 aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa 3720 ctcacgttaa gggattttgg tcatgggcgc gcctcatact cctgcaggca tgagattatc 3780 aaaaaggatc ttcacctaga tccttttaaa ttaaaaatga agttttaaat caatctaaag 3840 tatatatgag taaacttggt ctgacagtta ccaatgctta atcagtgagg cacctatctc 3900 agcgatctgt ctatttcgtt catccatagt tgcctgactc cccgtcgtgt agataactac 3960 gatacgggag ggcttaccat ctggccccag tgctgcaatg ataccgcgag acccacgctc 4020 accggctcca gatttatcag caataaacca gccagccgga agggccgagc gcagaagtgg 4080 tcctgcaact ttatccgcct ccatccagtc tattaattgt tgccgggaag ctagagtaag 4140 tagttcgcca gttaatagtt tgcgcaacgt tgttgccatt gctacaggca tcgtggtgtc 4200 acgctcgtcg tttggtatgg cttcattcag ctccggttcc caacgatcaa ggcgagttac 4260 atgatccccc atgttgtgca aaaaagcggt tagctccttc ggtcctccga tcgttgtcag 4320 aagtaagttg gccgcagtgt tatcactcat ggttatggca gcactgcata attctcttac 4380 tgtcatgcca tccgtaagat gcttttctgt gactggtgag tactcaacca agtcattctg 4440 agaatagtgt atgcggcgac cgagttgctc ttgcccggcg tcaatacggg ataataccgc 4500 gccacatagc agaactttaa aagtgctcat cattggaaaa cgttcttcgg ggcgaaaact 4560 ctcaaggatc ttaccgctgt tgagatccag ttcgatgtaa cccactcgtg cacccaactg 4620 atcttcagca tcttttactt tcaccagcgt ttctgggtga gcaaaaacag gaaggcaaaa 4680 tgccgcaaaa aagggaataa gggcgacacg gaaatgttga atactcatac tcttcctttt 4740 tcaatattat tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg 4800 tatttagaaa aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga 4860 cgtcaggtac caagcctagg cctccaaaaa agcctcctca ctacttctgg aatagctcag 4920 aggcagaggc ggcctcggcc tctgcataaa taaaaaaaat tagtcagcca tggggcggag 4980 aatgggcgga actgggcgga gttaggggcg ggatgggcgg agttaggggc gggactatgg 5040 ttgctgacta attgagatgc atgctttgca tacttctgcc tgctggggag cctggggact 5100 ttccacacct ggttgctgac taattgagat gcatgctttg catacttctg cctgctgggg 5160 agcctgggga ctttccacac cggatccacc atggatagat ccggaaagcc tgaactcacc 5220 gcgacgtctg tcgagaagtt tctgatcgaa aagttcgaca gcgtctccga cctgatgcag 5280 ctctcggagg gcgaagaatc tcgtgctttc agcttcgatg taggagggcg tggatatgtc 5340 ctgcgggtaa atagctgcgc cgatggtttc tacaaagatc gttatgttta tcggcacttt 5400 gcatcggccg cgctcccgat tccggaagtg cttgacattg gggagttcag cgagagcctg 5460 acctattgca tctcccgccg tgcacagggt gtcacgttgc aagacctgcc tgaaaccgaa 5520 ctgcccgctg ttctgcagcc ggtcgcggag gccatggatg cgatcgctgc ggccgatctt 5580 agccagacga gcgggttcgg cccattcgga ccgcaaggaa tcggtcaata cactacatgg 5640 cgtgatttca tatgcgcgat tgctgatccc catgtgtatc actggcaaac tgtgatggac 5700 gacaccgtca gtgcgtccgt cgcgcaggct ctcgatgagc tgatgctttg ggccgaggac 5760 tgccccgaag tccggcacct cgtgcacgcg gatttcggct ccaacaatgt cctgacggac 5820 aatggccgca taacagcggt cattgactgg agcgaggcga tgttcgggga ttcccaatac 5880 gaggtcgcca acatcttctt ctggaggccg tggttggctt gtatggagca gcagacgcgc 5940 tacttcgagc ggaggcatcc ggagcttgca ggatcgccgc ggctccgggc gtatatgctc 6000 cgcattggtc ttgaccaact ctatcagagc ttggttgacg gcaatttcga tgatgcagct 6060 tgggcgcagg gtcgatgcga cgcaatcgtc cgatccggag ccgggactgt cgggcgtaca 6120 caaatcgccc gcagaagcgc ggccgtctgg accgatggct gtgtagaagt actcgccgat 6180 agtggaaacc gacgccccag cactcgtccg agggcaaagg aatagacgcg tgctgtaagt 6240 ctgcagaaat tgatgatcta ttaaacaata aagatgtcca ctaaaatgga agtttttcct 6300 gtcatacttt gttaagaagg gtgagaacag agtacctaca ttttgaatgg aaggattgga 6360 gctacggggg tgggggtggg gtgggattag ataaatgcct gctctttact gaaggctctt 6420 tactattgct ttatgataat gtttcatagt tggatatcat aatttaaaca agcaaaacca 6480 aattaagggc cagctcattc ctcccactca tgatctatgg atctatagat ctctcgtgca 6540 gctggggctc tagggggtat ccccacgcgc cctgtagcgg cgcattaagc gcggcgggtg 6600 tggtggttac gcgcagcgtg accgctacac ttgccagcgc cctagcgccc gctcctttcg 6660 ctttcttccc ttcctttctc gccacgttcg ccggctttcc ccgtcaagct ctaaatcggg 6720 ggctcccttt agggttccga tttagtgctt tacggcacct cgaccccaaa aaacttgatt 6780 agggtgatgg ttcacgtagt gggccatcgc cctgatagac ggtttttcgc cctttgacgt 6840 tggagtccac gttctttaat agtggactct tgttccaaac tggaacaaca ctcaacccta 6900 tctcggtcta ttcttttgat ttataaggga ttttgccgat ttcggcctat tggttaaaaa 6960 atgagctgat ttaacaaaaa tttaacgcga attaattctg tggaatgtgt gtcagttag 7019 <210> 41 <211> 2272 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic construct <400> 41 tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata tggagttccg 60 cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc cccgcccatt 120 gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc attgacgtca 180 atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt atcatatgcc 240 aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt atgcccagta 300 catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca tcgctattac 360 catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg actcacgggg 420 atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc aaaatcaacg 480 ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg gtaggcgtgt 540 acggtgggag gtctatataa gcagagctca tgatagaagc actctactat tcgtcgaccg 600 atcctgagaa cttcagggtg agtttgggga cccttgattg ttctttcttt ttcgctattg 660 taaaattcat gttatatgga gggggcaaag ttttcagggt gttgtttaga atgggaagat 720 gtcccttgta tcaccatgga ccctcatgat aattttgttt ctttcacttt ctactctgtt 780 gacaaccatt gtctcctctt attttctttt cattttctgt aactttttcg ttaaacttta 840 gcttgcattt gtaacgaatt tttaaattca cttttgttta tttgtcagat tgtaagtact 900 ttctctaatc actttttttt caaggcaatc agggtatatt atattgtact tcagcacagt 960 tttagagaac aattgttata attaaatgat aaggtagaat atttctgcat ataaattctg 1020 gctggcgtgg aaatattctt attggtagaa acaactacac cctggtcatc atcctgcctt 1080 tctctttatg gttacaatga tatacactgt ttgagatgag gataaaatac tctgagtcca 1140 aaccgggccc ctctgctaac catgttcatg ccttcttctc tttcctacag ctcctgggca 1200 acgtgctggt tgttgtgctg tctcatcatt ttggcaaaga attaagctta tactcgagct 1260 ctagattggg aacccgggtc tctcgaattc gagatctcca ccatgcacag acctagacgt 1320 cgtggaactc gtccacctcc actggcactg ctcgctgctc tcctcctggc tgcacgtggt 1380 gctgatgcag acatccagat gacccagtct ccatcctccc tgtctgcatc tgtaggagac 1440 agagtcacca tcacttgccg ggcgagtcag ggcattagcg attatttagc ctggtatcag 1500 cagaaaccag ggaaagttcc taacctcctg atctatgctg cgtccgcttt acaatcaggg 1560 gtcccatctc gtttcagtgg cagtggatct gggacagatt tcactctcac catcagcagc 1620 ctgcagcctg aggatgttgc aacttattac tgtcaaaatt ataacactgc cccgctcact 1680 ttcggcgggg ggaccaaggt ggaaatcaaa cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc 1740 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 1800 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 1860 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 1920 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 1980 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttaggcggcc 2040 gctaatcagc cataccacat ttgtagaggt tttacttgct ttaaaaaacc tcccacacct 2100 ccccctgaac ctgaaacata aaatgaatgc aattgttgtt gttaacttgt ttattgcagc 2160 ttataatggt tacaaataaa gcaatagcat cacaaatttc acaaataaag catttttttc 2220 actgcattct agttgtggtt tgtccaaact catcaatgta tcttatcatg tc 2272 <210> 42 <211> 6335 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> Synthetic plasmid <400> 42 tcgagctcta gattgggaac ccgggtctct cgaattcgag atctccacca tgcacagacc 60 tagacgtcgt ggaactcgtc cacctccact ggcactgctc gctgctctcc tcctggctgc 120 acgtggtgct gatgcagaca tccagatgac ccagtctcca tcctccctgt ctgcatctgt 180 aggagacaga gtcaccatca cttgccgggc gagtcagggc attagcgatt atttagcctg 240 gtatcagcag aaaccaggga aagttcctaa cctcctgatc tatgctgcgt ccgctttaca 300 atcaggggtc ccatctcgtt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat 360 cagcagcctg cagcctgagg atgttgcaac ttattactgt caaaattata acactgcccc 420 gctcactttc ggcgggggga ccaaggtgga aatcaaacga actgtggctg caccatctgt 480 cttcatcttc ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga actgcctctg ttgtgtgcct 540 gctgaataac ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg aaggtggata acgccctcca 600 atcgggtaac tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc aaggacagca cctacagcct 660 cagcagcacc ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa cacaaagtct acgcctgcga 720 agtcacccat cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc ttcaacaggg gagagtgtta 780 ggcggccgct aatcagccat accacatttg tagaggtttt acttgcttta aaaaacctcc 840 cacacctccc cctgaacctg aaacataaaa tgaatgcaat tgttgttgtt aacttgttta 900 ttgcagctta taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca aataaagcat 960 ttttttcact gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct tatcatgtct 1020 accggtaggg cccctctctt catgtgagca aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa 1080 aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat 1140 cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat aaagatacca ggcgtttccc 1200 cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc 1260 gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcaatgct cacgctgtag gtatctcagt 1320 tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac 1380 cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg 1440 ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca 1500 gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa ggacagtatt tggtatctgc 1560 gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta gctcttgatc cggcaaacaa 1620 accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa 1680 ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac 1740 tcacgttaag ggattttggt catgggcgcg ggcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc 1800 tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact 1860 tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt 1920 cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta 1980 ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac gctcaccggc tccagattta 2040 tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc 2100 gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc gccagttaat 2160 agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt 2220 atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg 2280 tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca 2340 gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc ttactgtcat gccatccgta 2400 agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg 2460 cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca tagcagaact 2520 ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg 2580 ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt 2640 actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga 2700 ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc 2760 atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa 2820 caaatagggg ttccgcgcac atttccccga aaagtgccac ctgacgtcag gtacacttag 2880 gcgcgccatt agagttcctg caggctacat ggtaccaagc ctaggcctcc aaaaaagcct 2940 cctcactact tctggaatag ctcagaggca gaggcggcct cggcctctgc ataaataaaa 3000 aaaattagtc agccatgggg cggagaatgg gcggaactgg gcggagttag gggcgggatg 3060 ggcggagtta ggggcgggac tatggttgct gactaattga gatgcatgct ttgcatactt 3120 ctgcctgctg gggagcctgg ggactttcca cacctggttg ctgactaatt gagatgcatg 3180 ctttgcatac ttctgcctgc tggggagcct ggggactttc cacaccggat ccaccatgga 3240 tagatccgga aagcctgaac tcaccgcgac gtctgtcgag aagtttctga tcgaaaagtt 3300 cgacagcgtc tccgacctga tgcagctctc ggagggcgaa gaatctcgtg ctttcagctt 3360 cgatgtagga gggcgtggat atgtcctgcg ggtaaatagc tgcgccgatg gtttctacaa 3420 agatcgttat gtttatcggc actttgcatc ggccgcgctc ccgattccgg aagtgcttga 3480 cattggggag ttcagcgaga gcctgaccta ttgcatctcc cgccgtgcac agggtgtcac 3540 gttgcaagac ctgcctgaaa ccgaactgcc cgctgttctg cagccggtcg cggaggccat 3600 ggatgcgatc gctgcggccg atcttagcca gacgagcggg ttcggcccat tcggaccgca 3660 aggaatcggt caatacacta catggcgtga tttcatatgc gcgattgctg atccccatgt 3720 gtatcactgg caaactgtga tggacgacac cgtcagtgcg tccgtcgcgc aggctctcga 3780 tgagctgatg ctttgggccg aggactgccc cgaagtccgg cacctcgtgc acgcggattt 3840 cggctccaac aatgtcctga cggacaatgg ccgcataaca gcggtcattg actggagcga 3900 ggcgatgttc ggggattccc aatacgaggt cgccaacatc ttcttctgga ggccgtggtt 3960 ggcttgtatg gagcagcaga cgcgctactt cgagcggagg catccggagc ttgcaggatc 4020 gccgcggctc cgggcgtata tgctccgcat tggtcttgac caactctatc agagcttggt 4080 tgacggcaat ttcgatgatg cagcttgggc gcagggtcga tgcgacgcaa tcgtccgatc 4140 cggagccggg actgtcgggc gtacacaaat cgcccgcaga agcgcggccg tctggaccga 4200 tggctgtgta gaagtactcg ccgatagtgg aaaccgacgc cccagcactc gtccgagggc 4260 aaaggaatag acgcgtgctg taagtctgca gaaattgatg atctattaaa caataaagat 4320 gtccactaaa atggaagttt ttcctgtcat actttgttaa gaagggtgag aacagagtac 4380 ctacattttg aatggaagga ttggagctac gggggtgggg gtggggtggg attagataaa 4440 tgcctgctct ttactgaagg ctctttacta ttgctttatg ataatgtttc atagttggat 4500 atcataattt aaacaagcaa aaccaaatta agggccagct cattcctccc actcatgatc 4560 tatggatcta tagatctctc gtgcagctgg ggctctaggg ggtatcccca cgcgccctgt 4620 agcggcgcat taagcgcggc gggtgtggtg gttacgcgca gcgtgaccgc tacacttgcc 4680 agcgccctag cgcccgctcc tttcgctttc ttcccttcct ttctcgccac gttcgccggc 4740 tttccccgtc aagctctaaa tcgggggctc cctttagggt tccgatttag tgctttacgg 4800 cacctcgacc ccaaaaaact tgattagggt gatggttcac gtagtgggcc atcgccctga 4860 tagacggttt ttcgcccttt gacgttggag tccacgttct ttaatagtgg actcttgttc 4920 caaactggaa caacactcaa ccctatctcg gtctattctt ttgatttata agggattttg 4980 ccgatttcgg cctattggtt aaaaaatgag ctgatttaac aaaaatttaa cgcgaattaa 5040 ttctgtggaa tgtgtgtcag ttagtcgcga tgtgtgacta gttagttatt aatagtaatc 5100 aattacgggg tcattagttc atagcccata tatggagttc cgcgttacat aacttacggt 5160 aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta 5220 tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg 5280 gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga 5340 cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca ttatgcccag tacatgacct tatgggactt 5400 tcctacttgg cagtacatct acgtattagt catcgctatt accatggtga tgcggttttg 5460 gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt tgactcacgg ggatttccaa gtctccaccc 5520 cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca ccaaaatcaa cgggactttc caaaatgtcg 5580 taacaactcc gccccattga cgcaaatggg cggtaggcgt gtacggtggg aggtctatat 5640 aagcagagct catgatagaa gcactctact attcgtcgac cgatcctgag aacttcaggg 5700 tgagtttggg gacccttgat tgttctttct ttttcgctat tgtaaaattc atgttatatg 5760 gagggggcaa agttttcagg gtgttgttta gaatgggaag atgtcccttg tatcaccatg 5820 gaccctcatg ataattttgt ttctttcact ttctactctg ttgacaacca ttgtctcctc 5880 ttattttctt ttcattttct gtaacttttt cgttaaactt tagcttgcat ttgtaacgaa 5940 tttttaaatt cacttttgtt tatttgtcag attgtaagta ctttctctaa tcactttttt 6000 ttcaaggcaa tcagggtata ttatattgta cttcagcaca gttttagaga acaattgtta 6060 taattaaatg ataaggtaga atatttctgc atataaattc tggctggcgt ggaaatattc 6120 ttattggtag aaacaactac accctggtca tcatcctgcc tttctcttta tggttacaat 6180 gatatacact gtttgagatg aggataaaat actctgagtc caaaccgggc ccctctgcta 6240 accatgttca tgccttcttc tctttcctac agctcctggg caacgtgctg gttgttgtgc 6300 tgtctcatca ttttggcaaa gaattaagct tatac 6335 <210> 43 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> consensus sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (11)..(11) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (28)..(28) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (30)..(30) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (34)..(35) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (93)..(93) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (96)..(96) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (100)..(100) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> misc_feature <222> (111)..(111) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (114)..(114) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 43 Xaa Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Xaa Val Ser Ser Ala Ser 1 5 10 15 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Xaa Ser Xaa Ser Thr 20 25 30 Ser Xaa Xaa Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 35 40 45 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 50 55 60 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 65 70 75 80 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Xaa Thr Tyr Xaa 85 90 95 Cys Asn Val Xaa His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Xaa Val 100 105 110 Glu Xaa Lys 115 <210> 44 <211> 225 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> consensus sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(13) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (47)..(47) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (53)..(53) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (75)..(75) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (106)..(106) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (109)..(110) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (134)..(135) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> misc_feature <222> (137)..(137) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (188)..(188) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (198)..(198) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (224)..(224) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 44 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Xaa Leu Gly Gly 1 5 10 15 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 20 25 30 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Xaa Glu 35 40 45 Asp Pro Glu Val Xaa Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 50 55 60 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Xaa Asn Ser Thr Tyr Arg 65 70 75 80 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 85 90 95 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Xaa Leu Pro Xaa Xaa Ile Glu 100 105 110 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 115 120 125 Thr Leu Pro Pro Ser Xaa Xaa Glu Xaa Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 130 135 140 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 145 150 155 160 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 165 170 175 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Xaa Leu Thr Val Asp 180 185 190 Lys Ser Arg Trp Gln Xaa Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 195 200 205 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Xaa 210 215 220 Gly 225 <210> 45 <211> 60 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> consensus sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(14) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (16)..(16) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (21)..(22) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (24)..(27) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (31)..(31) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (34)..(34) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (48)..(48) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> misc_feature <222> (50)..(50) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (54)..(54) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (56)..(56) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 45 Ser Asp Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Xaa Xaa Pro Xaa 1 5 10 15 Leu Leu Ile Tyr Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Val Pro Xaa Arg 20 25 30 Phe Xaa Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Xaa 35 40 45 Leu Xaa Pro Glu Asp Xaa Ala Xaa Tyr Tyr Cys Gln 50 55 60 <210> 46 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> consensus sequence <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 46 Thr Phe Gly Xaa Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 1 5 10 15 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 20 25 30 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 35 40 45 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 50 55 60 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 65 70 75 80 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 85 90 95 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 100 105 110 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 115

Claims (135)

  1. 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드와 다중-하위유닛 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 세포.
  2. 제 1항에 있어서, 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴은 소포체 분해-증강 알파-만노시다제-유사 단백질 2(EDEM2)인 것을 특징으로 하는 세포.
  3. 제 2항에 있어서, EDEM2는 SEQ ID NO:8의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  4. 제 2항에 있어서, EDEM2는 SEQ ID NO:1에 적어도 92% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, 다중-하위유닛 단백질은 항체인 것을 특징으로 하는 세포.
  6. 제 5항에 있어서, 항체는 SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  7. 제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, EDEM2의 상류에서 작동하는 잘못 접혀진 단백질 반응 전사 인자를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  8. 제 7항에 있어서, 전사 인자는 XBP-1의 스플라이싱된 형태인 것을 특징으로 하는 세포.
  9. 제 8항에 있어서, XBP-1은 SEQ ID NO:13의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  10. 제 8항에 있어서, XBP-1은 SEQ ID NO:9에 적어도 86% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  11. 제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 포유류 세포인 것을 특징으로 하는 세포.
  12. 제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 CHO 세포인 것을 특징으로 하는 세포.
  13. 제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항의 세포로부터 유도된 셀라인.
  14. 제 13항에 있어서, 적어도 3g/L의 역가로 단백질을 생성하는 것을 특징으로 하는 셀라인.
  15. 제 13항 또는 제 14항에 있어서, 적어도 5g/L의 역가로 단백질을 생성하는 것을 특징으로 하는 셀라인.
  16. 제 13항 내지 제 15항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 8g/L의 역가로 단백질을 생성하는 것을 특징으로 하는 셀라인.
  17. 제 13항 내지 제 16항 중 어느 한 항에 있어서, 셀라인은 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 포함하지 않는 셀라인의 통합된 세포 밀도보다 적어도 약 30% 더 큰 통합된 세포 밀도를 가지는 것을 특징으로 하는 셀라인.
  18. 제 13항 내지 제 17항 중 어느 한 항에 있어서, 셀라인은 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 포함하지 않는 셀라인의 통합된 세포 밀도보다 적어도 약 50% 더 큰 통합된 세포 밀도를 가지는 것을 특징으로 하는 셀라인.
  19. 제 13항 내지 제 18항 중 어느 한 항에 있어서, 셀라인은 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 포함하지 않는 셀라인의 통합된 세포 밀도보다 적어도 약 60% 더 큰 통합된 세포 밀도를 가지는 것을 특징으로 하는 셀라인.
  20. 제 13항 내지 제 19항 중 어느 한 항에 있어서, 셀라인은 스트레스-유도된 만노스-결합 렉틴을 코드화하는 재조합 폴리뉴클레오티드를 포함하지 않는 셀라인의 통합된 세포 밀도보다 적어도 약 90% 더 큰 통합된 세포 밀도를 가지는 것을 특징으로 하는 셀라인.
  21. 포유류의 유비퀴틴 C 프로모터에 작동가능하게 연결되고, EDEM2를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  22. 제 21항에 있어서, EDEM2는 SEQ ID NO:8의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  23. 제 21항 또는 제 22항에 있어서, EDEM2는 SEQ ID NO:8의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  24. 제 21항 내지 제 23항 중 어느 한 항에 있어서, DEM2는 SEQ ID NO:1에 적어도 92% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  25. 제 21항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, DEM2는 SEQ ID NO:1에 적어도 92% 동일한 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  26. 제 21항 내지 제 25항 중 어느 한 항에 있어서, EDEM2는 SEQ ID NO:1의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  27. 제 21항 내지 제 26항 중 어느 한 항에 있어서, EDEM2는 SEQ ID NO:1의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  28. 제 21항 내지 제 27항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:16의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  29. 제 21항 내지 제 28항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:14 또는 SEQ ID NO:15의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  30. 제 21항 내지 제 29항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:14 또는 SEQ ID NO:15의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  31. 포유류 유비퀴틴 C 프로모터에 작동가능하게 연결되고, Xbp-1 단백질을 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  32. 제 31항에 있어서, Xbp-1 단백질은 SEQ ID NO:13의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  33. 제 31항 또는 제 32항에 있어서, Xbp-1 단백질은 SEQ ID NO:13의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  34. 제 31항 내지 제 33항 중 어느 한 항에 있어서, Xbp-1 단백질은 SEQ ID NO:9에 적어도 86% 동일한 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  35. 제 31항 내지 제 34항 중 어느 한 항에 있어서, Xbp-1 단백질은 SEQ ID NO:9에 적어도 86% 동일한 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  36. 제 31항 내지 제 35항 중 어느 한 항에 있어서, Xbp-1 단백질은 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  37. 제 31항 내지 제 36항 중 어느 한 항에 있어서, Xbp-1 단백질은 SEQ ID NO:9의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  38. 제 31항 내지 제 37항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:18의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  39. 제 31항 내지 제 38항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:17의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  40. 제 31항 내지 제 39항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:17의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  41. 포유류 유비퀴틴 C 프로모터 또는 사람 CMV-IE 프로모터에 작동가능하게 연결되고, 항-GDF8 항체 중쇄를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  42. 제 41항에 있어서, 항-GDF8 항체 중쇄는 SEQ ID NO:20의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  43. 제 41항 또는 제 42항에 있어서, 항-GDF8 항체 중쇄는 SEQ ID NO:19의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  44. 제 41항 내지 제 43항 중 어느 한 항에 있어서, 항-GDF8 항체 중쇄는 SEQ ID NO:19의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  45. 제 41항 내지 제 44항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:23의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  46. 제 41항 내지 제 45항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:24의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  47. 제 41항 내지 제 46항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:24의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  48. 포유류 유비퀴틴 C 프로모터 또는 사람 CMV-IE 프로모터에 작동가능하게 연결되고, 항-GDF8 항체 경쇄를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  49. 제 48항에 있어서, 항-GDF8 항체 경쇄는 SEQ ID NO:22의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  50. 제 48항 또는 제 49항에 있어서, 항-GDF8 항체 경쇄는 SEQ ID NO:21의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  51. 제 48항 내지 제 50항 중 어느 한 항에 있어서, 항-GDF8 항체 경쇄는 SEQ ID NO:21의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  52. 제 48항 내지 제 51항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:25의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  53. 제 48항 내지 제 52항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:26의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  54. 제 48항 내지 제 53항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:26의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  55. 포유류 유비퀴틴 C 프로모터 또는 사람 CMV-IE 프로모터에 작동가능하게 연결되고, 항-ANG2 항체 중쇄를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  56. 제 55항에 있어서, 항-ANG2 항체 중쇄는 SEQ ID NO:28의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  57. 제 55항 또는 제 56항에 있어서, 항-ANG2 항체 중쇄는 SEQ ID NO:27의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  58. 제 55항 내지 제 57항 중 어느 한 항에 있어서, 항-ANG2 항체 중쇄는 SEQ ID NO:27의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  59. 제 55항 내지 제 58항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:31의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  60. 제 55항 내지 제 59항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:32의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  61. 제 55항 내지 제 60항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:32의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  62. 포유류 유비퀴틴 C 프로모터 또는 사람 CMV-IE 프로모터에 작동가능하게 연결되고, 항-ANG2 항체 경쇄를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  63. 제 62항에 있어서, 항-ANG2 항체 경쇄는 SEQ ID NO:30의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  64. 제 62항 또는 제 63항에 있어서, 항-ANG2 항체 경쇄는 SEQ ID NO:29의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  65. 제 62항 내지 제 64항 중 어느 한 항에 있어서, 항-ANG2 항체 경쇄는 SEQ ID NO:29의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  66. 제 62항 내지 제 65항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:33의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  67. 제 62항 내지 제 66항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:34의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  68. 제 62항 내지 제 67항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:34의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  69. 포유류 유비퀴틴 C 프로모터 또는 사람 CMV-IE 프로모터에 작동가능하게 연결되고, 항-AngPtl4 항체 중쇄를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  70. 제 69항에 있어서, 항-AngPtl4 항체 중쇄는 SEQ ID NO:36의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  71. 제 69항 또는 제 70항에 있어서, 항-AngPtl4 항체 중쇄는 SEQ ID NO:35의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  72. 제 69항 내지 제 71항 중 어느 한 항에 있어서, 항-AngPtl4 항체 중쇄는 SEQ ID NO:35의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  73. 제 69항 내지 제 72항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:39의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  74. 제 69항 내지 제 73항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:40의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  75. 제 69항 내지 제 74항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:40의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  76. 포유류 유비퀴틴 C 프로모터 또는 사람 CMV-IE 프로모터에 작동가능하게 연결되고, 항-AngPtl4 항체 경쇄를 코드화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  77. 제 76항에 있어서, 항-AngPtl4 항체 경쇄는 SEQ ID NO:38의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  78. 제 76항 또는 제 77항에 있어서, 항-AngPtl4 항체 경쇄는 SEQ ID NO:37의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  79. 제 76항 내지 제 78항 중 어느 한 항에 있어서, 항-AngPtl4 항체 경쇄는 SEQ ID NO:37의 아미노산 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  80. 제 76항 내지 제 79항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:41의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  81. 제 76항 내지 제 80항 중 어느 한 항에 있어서, SEQ ID NO:42의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  82. 제 76항 내지 제 81항 중 어느 한 항에 있어서, 본질적으로 SEQ ID NO:42의 뉴클레오티드 서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드.
  83. SEQ ID NO:43의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  84. SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  85. SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  86. SEQ ID NO:45의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  87. SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  88. SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 분리된 폴리뉴클레오티드.
  89. 제 21항 내지 제 30항 중 어느 한 항의 분리된 폴리뉴클레오티드와 (b) 다중-하위유닛 단백질을 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 세포.
  90. 제 89항에 있어서, 다중-하위유닛 단백질은 항체인 것을 특징으로 하는 세포.
  91. 제 90항에 있어서, 항체는 제 83항 내지 제 88항 중 어느 한 항의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  92. 제 91항에 있어서, 항체는 제 85항 및 제 88항의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  93. 제 89항 내지 제 92항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 제 31항 내지 제 40항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  94. 제 89항 내지 제 93항 중 어느 한 항에 있어서, 제 41항 내지 제 47항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드와 제 48항 내지 제 54항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  95. 제 89항 내지 제 93항 중 어느 한 항에 있어서, 제 55항 내지 제 61항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드와 제 62항 내지 제 68항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  96. 제 89항 내지 제 93항 중 어느 한 항에 있어서, 제 69항 내지 제 75항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드와 제 76항 내지 제 82항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포.
  97. 제 89항 내지 제 96항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포인 것을 특징으로 하는 세포.
  98. 제 89항 내지 제 97항 중 어느 한 항의 세포를 배지에서 배양하는 단계로 이루어지는 다중-하위유닛 단백질의 제조 방법으로서, 이때 다중-하위유닛 단백질은 세포에 의해 배지 안으로 분비되는 것을 특징으로 하는 방법.
  99. 제 98항에 있어서, 분비된 다중-하위유닛 단백질은 적어도 약 3g/L의 배지 중의 역가를 획득하는 것을 특징으로 하는 방법.
  100. 제 98항 또는 제 99항에 있어서, 분비된 다중-하위유닛 단백질은 적어도 약 5g/L의 배지 중의 역가를 획득하는 것을 특징으로 하는 방법.
  101. 제 89항 내지 제 91항 중 어느 한 항에 있어서, 분비된 다중-하위유닛 단백질은 적어도 약 6g/L의 배지 중의 역가를 획득하는 것을 특징으로 하는 방법.
  102. 제 89항 내지 제 92항 중 어느 한 항에 있어서, 분비된 다중-하위유닛 단백질은 적어도 약 8g/L의 배지 중의 역가를 획득하는 것을 특징으로 하는 방법.
  103. 제 89항 내지 제 93항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 적어도 약 5×107 세포-일/mL의 통합된 세포 밀도로 배지중에서 분할되는 것을 특징으로 하는 방법.
  104. 제 89항 내지 제 94항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 적어도 약 1×108 세포-일/mL의 통합된 세포 밀도를 이루기 위해 배지중에서 분할되는 것을 특징으로 하는 방법.
  105. 제 89항 내지 제 95항 중 어느 한 항에 있어서, 세포는 적어도 약 1.5×108 세포-일/mL의 통합된 세포 밀도를 이루기 위해 배지중에서 분할되는 것을 특징으로 하는 방법.
  106. 제 89항 내지 제 96항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 분비된 다중-하위유닛 단백질을 배지로부터 정제하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  107. 제 98항 내지 제 106항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 다중-하위유닛 단백질.
  108. 제 107항에 있어서, 다중-하위유닛 단백질은 항체인 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  109. 제 108항에 있어서, 항체는 SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  110. 제 109항에 있어서, 항체는 항-GDF8 항체인 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  111. 제 110항에 있어서, 항체는 SEQ ID NO:20 및 SEQ ID NO:22의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  112. 제 109항에 있어서, 항체는 항-ANG2 항체인 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  113. 제 112항에 있어서, 항체는 SEQ ID NO:28 및 SEQ ID NO:30의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  114. 제 109항에 있어서, 항체는 항-AngPtl4 항체인 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  115. 제 114항에 있어서, 항체는 SEQ ID NO:36 및 SEQ ID NO:38의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 다중-하위유닛 단백질.
  116. SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  117. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드와 (b) SEQ ID NO:18의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  118. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  119. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:23의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:25의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  120. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:31의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:33의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  121. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:39의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:41의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  122. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:18의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  123. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:18의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:23의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:25의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  124. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:18의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:31의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:33의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  125. (a) SEQ ID NO:16의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:18의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:39 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:41의 핵산 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  126. SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  127. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드 및 (b) SEQ ID NO:17의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  128. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  129. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:24의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:26의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  130. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:32의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:34의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  131. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:40의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드 및 (c) SEQ ID NO:42의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  132. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:17의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:43 및 SEQ ID NO:44의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:45 및 SEQ ID NO:46의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코드화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  133. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:17의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:24의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:26의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  134. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:17의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:32의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:34의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
  135. (a) SEQ ID NO:14 또는 15의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (b) SEQ ID NO:17의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, (c) SEQ ID NO:40의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드 및 (d) SEQ ID NO:42의 핵산 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 생체 외 포유류 세포.
KR1020147033930A 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서 KR102126210B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020207017417A KR102346867B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261652549P 2012-05-29 2012-05-29
US61/652,549 2012-05-29
US13/904,587 US9079954B2 (en) 2012-05-29 2013-05-29 Production cell line enhancers
PCT/US2013/043116 WO2013181253A1 (en) 2012-05-29 2013-05-29 Production cell line enhancers
US13/904,587 2013-05-29

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207017417A Division KR102346867B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20150015492A true KR20150015492A (ko) 2015-02-10
KR102126210B1 KR102126210B1 (ko) 2020-06-25

Family

ID=49670701

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237014681A KR102663134B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서
KR1020147033930A KR102126210B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서
KR1020217043208A KR102528950B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서
KR1020207017417A KR102346867B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020237014681A KR102663134B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217043208A KR102528950B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서
KR1020207017417A KR102346867B1 (ko) 2012-05-29 2013-05-29 생성 셀라인 인핸서

Country Status (21)

Country Link
US (9) US9079954B2 (ko)
EP (3) EP3564262A1 (ko)
JP (5) JP6298455B2 (ko)
KR (4) KR102663134B1 (ko)
CN (2) CN110835624A (ko)
AU (4) AU2013267525B2 (ko)
BR (1) BR112014029095A2 (ko)
CA (1) CA2873131A1 (ko)
DK (1) DK2875047T5 (ko)
EA (2) EA201792213A1 (ko)
ES (1) ES2940900T3 (ko)
FI (1) FI2875047T3 (ko)
HK (1) HK1205137A1 (ko)
HU (1) HUE061479T2 (ko)
IL (3) IL235573B (ko)
MX (1) MX360359B (ko)
PL (1) PL2875047T3 (ko)
SG (2) SG10201606654XA (ko)
TW (2) TWI641687B (ko)
WO (1) WO2013181253A1 (ko)
ZA (1) ZA201408289B (ko)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI641687B (zh) 2012-05-29 2018-11-21 美商再生元醫藥公司 生產細胞株增強子
CN109071633B (zh) 2016-04-20 2022-11-18 瑞泽恩制药公司 基于使用表达增强性基因座来制备抗体的组合物和方法
KR102547738B1 (ko) 2016-04-20 2023-06-26 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 발현 강화 유전자좌의 사용에 기초하여 항체를 만들기 위한 조성물 및 방법
US10995152B2 (en) 2016-10-26 2021-05-04 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modified immunoglobulin hinge regions to reduce hemagglutination
US11135266B2 (en) 2016-11-21 2021-10-05 Just-Evotec Biologics, Inc. Aflibercept formulations and uses thereof
CA3067735A1 (en) 2017-08-17 2019-02-21 Just Biotherapeutics, Inc. Method of purifying glycosylated protein from host cell galectins and other contaminants

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20070061524A (ko) * 2004-07-20 2007-06-13 제넨테크, 인크. 안지오포이에틴-유사 4 단백질을 사용하는 조성물 및 방법
KR20100074321A (ko) * 2007-11-01 2010-07-01 와이어쓰 엘엘씨 성장 및 분화 인자-8에 대한 항체의 용도
KR20110055726A (ko) * 2008-10-08 2011-05-25 에프. 호프만-라 로슈 아게 이중특이성 항-ｖｅｇｆ/항-ａｎｇ-2 항체

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60211329T2 (de) 2001-01-16 2007-05-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Isolierung von sezernierte proteine exprimierenden zellen
US7455988B2 (en) 2002-05-29 2008-11-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Inducible eukaryotic expression system
CA2496897C (en) 2002-08-30 2012-01-31 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for modulating xbp-1 activity
NZ544335A (en) * 2003-06-11 2009-01-31 Biogen Idec Inc Method to increase protein production in culture
US20050106667A1 (en) * 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
JP2007537728A (ja) * 2004-03-31 2007-12-27 セントカー・インコーポレーテツド タンパク質生産速度の変更方法
ES2653843T3 (es) 2004-09-02 2018-02-09 Wyeth Llc Sistemas y procedimientos de producción de proteínas
JP2008513465A (ja) * 2004-09-15 2008-05-01 ザ プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ 肥満及び糖尿病の治療におけるｅｒストレス低減
EP1964922A1 (en) * 2007-03-02 2008-09-03 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH &amp; Co. KG Improvement of protein production
EP2129685B1 (en) 2007-03-21 2013-11-20 Danisco US Inc. Over expression of foldases and chaperones improves protein production
ES2522615T3 (es) 2007-06-04 2014-11-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Regiones de expresión y estabilidad potenciadas
EP3260129A1 (en) * 2007-08-03 2017-12-27 Eli Lilly and Company An fgf-21 compound and a glp-1 compound for use in the treatment of obesity
WO2009062789A1 (en) 2007-11-13 2009-05-22 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co Kg Improving the secretory capacity in host cells
US20090247609A1 (en) * 2007-12-20 2009-10-01 Hitto Kaufmann Sm-protein based secretion engineering
EP2297331B1 (en) * 2008-05-28 2015-03-25 Bayer HealthCare, LLC Methods and compositions for production of recombinant protein in hbx-expressing mammalian cells
WO2010008860A1 (en) 2008-06-23 2010-01-21 President And Fellows Of Harvard College Modulation of neurodegenerative disease by modulating xbp-1 activity
GB0902180D0 (en) 2009-02-10 2009-03-25 Ucb Pharma Sa Method for producing protein
US8722046B2 (en) * 2009-04-08 2014-05-13 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Human monoclonal antibodies protective against bubonic plague
DK2438171T3 (en) 2009-06-02 2015-01-26 Regeneron Pharma Fucosylerings-deficient cells
JO3182B1 (ar) 2009-07-29 2018-03-08 Regeneron Pharma مضادات حيوية بشرية عالية الالفة مع تولد الاوعية البشرية - 2
JO3274B1 (ar) * 2009-12-24 2018-09-16 Regeneron Pharma أجسام مضادة بشرية للبروتين 4 المشابه لأجيوبيوتين البشري
JO3340B1 (ar) 2010-05-26 2019-03-13 Regeneron Pharma مضادات حيوية لـعامل تمايز النمو 8 البشري
TWI641687B (zh) 2012-05-29 2018-11-21 美商再生元醫藥公司 生產細胞株增強子
EP3919069A1 (en) 2012-11-05 2021-12-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Xbp1, cd138, and cs1 peptides, pharmaceutical compositions that include the peptides, and methods of using such peptides and compositions

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20070061524A (ko) * 2004-07-20 2007-06-13 제넨테크, 인크. 안지오포이에틴-유사 4 단백질을 사용하는 조성물 및 방법
KR20100074321A (ko) * 2007-11-01 2010-07-01 와이어쓰 엘엘씨 성장 및 분화 인자-8에 대한 항체의 용도
KR20110055726A (ko) * 2008-10-08 2011-05-25 에프. 호프만-라 로슈 아게 이중특이성 항-ｖｅｇｆ/항-ａｎｇ-2 항체

Also Published As

Publication number Publication date
US20170291938A1 (en) 2017-10-12
JP2018108094A (ja) 2018-07-12
TW201402815A (zh) 2014-01-16
US20150353634A1 (en) 2015-12-10
EP2875047A1 (en) 2015-05-27
WO2013181253A1 (en) 2013-12-05
US9193786B2 (en) 2015-11-24
DK2875047T5 (da) 2024-10-14
US10351622B2 (en) 2019-07-16
JP2020022514A (ja) 2020-02-13
JP6622334B2 (ja) 2019-12-18
EA201792213A1 (ru) 2018-01-31
USRE48651E1 (en) 2021-07-20
EA028790B1 (ru) 2017-12-29
DK2875047T3 (da) 2023-03-27
SG10201606654XA (en) 2016-10-28
IL235573B (en) 2019-09-26
TW201823460A (zh) 2018-07-01
US20150299309A1 (en) 2015-10-22
CN104350068B (zh) 2019-12-03
PL2875047T3 (pl) 2023-05-29
TWI641687B (zh) 2018-11-21
IL279922A (en) 2021-03-01
EP4219546A3 (en) 2023-08-23
KR20230065370A (ko) 2023-05-11
US9382315B2 (en) 2016-07-05
JP2022044609A (ja) 2022-03-17
AU2021240303A1 (en) 2021-10-28
IL265867A (en) 2019-06-30
CA2873131A1 (en) 2013-12-05
HUE061479T2 (hu) 2023-07-28
AU2019203780B2 (en) 2021-07-01
AU2013267525B2 (en) 2017-11-16
CN104350068A (zh) 2015-02-11
BR112014029095A2 (pt) 2017-07-18
SG11201407652RA (en) 2014-12-30
US10611831B2 (en) 2020-04-07
US9079954B2 (en) 2015-07-14
US20150175688A1 (en) 2015-06-25
KR102528950B1 (ko) 2023-05-08
US20190270800A1 (en) 2019-09-05
JP6298455B2 (ja) 2018-03-20
JP2015518728A (ja) 2015-07-06
US9228012B2 (en) 2016-01-05
MX360359B (es) 2018-10-30
ES2940900T3 (es) 2023-05-12
US20130323788A1 (en) 2013-12-05
AU2019203780A1 (en) 2019-06-20
IL235573A0 (en) 2015-01-29
ZA201408289B (en) 2016-09-28
US20150299310A1 (en) 2015-10-22
EP3564262A1 (en) 2019-11-06
HK1205137A1 (en) 2015-12-11
JP7037535B2 (ja) 2022-03-16
AU2013267525A1 (en) 2014-12-11
US10227401B2 (en) 2019-03-12
KR20200074273A (ko) 2020-06-24
CN110835624A (zh) 2020-02-25
MX2014014630A (es) 2015-02-12
KR102346867B1 (ko) 2022-01-04
KR102663134B1 (ko) 2024-05-03
JP7382383B2 (ja) 2023-11-16
KR102126210B1 (ko) 2020-06-25
JP2023153268A (ja) 2023-10-17
US20160304598A1 (en) 2016-10-20
FI2875047T3 (fi) 2023-03-30
US9688751B2 (en) 2017-06-27
EA201492242A1 (ru) 2015-05-29
KR20220003165A (ko) 2022-01-07
EP2875047B1 (en) 2023-01-25
AU2018201094A1 (en) 2018-03-15
AU2018201094B2 (en) 2019-06-20
EP4219546A2 (en) 2023-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2019203780B2 (en) Production cell line enhancers
CN101553506B (zh) Lingo结合分子及其制药用途
CN110023500B (zh) 作为选择标记的减毒谷氨酰胺合成酶
KR101761709B1 (ko) 부위 특이적 통합
KR102636351B1 (ko) 고활성 조절 요소
CN109260478A (zh) 通过序列特异性转肽酶制备免疫配体/效应分子结合物的方法
CN101595228A (zh) 包括sorf构建体的多基因表达和使用多蛋白、前体蛋白和蛋白酶解的方法
CN101208425A (zh) 产生复制缺陷型腺病毒的细胞系
KR20070002052A (ko) ＩＬ-15/Ｆｃ 융합 단백질의 제조를 위한 발현 시스템 및이의 용도
CN101287498A (zh) Psma抗体-药物缀合物
KR20210144861A (ko) 아마이엘로이스로부터의 트랜스포사제를 이용한 핵산 작제물의 진핵세포 게놈으로의 전위
KR102584628B1 (ko) T-세포 수용체, t-세포 항원 및 이들의 기능성 상호작용의 식별 및 특징규명을 위한 조작된 다성분 시스템
KR20230056630A (ko) 신규의 omni-59, 61, 67, 76, 79, 80, 81 및 82 crispr 뉴클레아제
CN107207603A (zh) 趋化因子‑免疫球蛋白融合多肽，其组合物、制备方法以及用途
CN101180082A (zh) 利用siv-pedf载体治疗伴随眼组织细胞凋亡变性的疾患的药物
CN101160139A (zh) 含有pedf以及fgf2的伴随眼组织细胞凋亡变性的疾患的治疗药物
KR20240021906A (ko) 발현 벡터, 박테리아 서열-무함유 벡터, 및 이를 제조하고 사용하는 방법
CN117881788A (zh) 表达载体、无细菌序列载体及其制备和使用方法
KR20230117327A (ko) 가용성 알칼리성 포스파타제 작제물 및 가용성 알칼리성 포스파타제 작제물을 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터
CN110777147A (zh) 一种ikzf3基因沉默的t细胞及其应用
KR20070018054A (ko) 정제된 인터루킨-15／Ｆｃ융합 단백질 및 이의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
A107 Divisional application of patent
GRNT Written decision to grant