KR20140147797A - 암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물 - Google Patents

암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20140147797A
KR20140147797A KR1020147002239A KR20147002239A KR20140147797A KR 20140147797 A KR20140147797 A KR 20140147797A KR 1020147002239 A KR1020147002239 A KR 1020147002239A KR 20147002239 A KR20147002239 A KR 20147002239A KR 20140147797 A KR20140147797 A KR 20140147797A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
sodium
benzenesulfonate
optionally substituted
sulfonato
nhc
Prior art date
Application number
KR1020147002239A
Other languages
English (en)
Inventor
케빈 데이비드 밀스
무니어 글람후시엔 하샴
캐롤라인 가드너 맥피
Original Assignee
더 잭슨 래보라토리
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 더 잭슨 래보라토리 filed Critical 더 잭슨 래보라토리
Publication of KR20140147797A publication Critical patent/KR20140147797A/ko

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C331/00—Derivatives of thiocyanic acid or of isothiocyanic acid
    • C07C331/16—Isothiocyanates
    • C07C331/30—Isothiocyanates containing at least two isothiocyanate groups bound to the same carbon skeleton
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A61K31/166—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the carbon of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. procainamide, procarbazine, metoclopramide, labetalol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C307/00—Amides of sulfuric acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfate groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C307/04—Diamides of sulfuric acids
    • C07C307/10—Diamides of sulfuric acids having nitrogen atoms of the sulfamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/45—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton
    • C07C309/51—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton at least one of the nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C311/08—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/14—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C335/00—Thioureas, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C335/04—Derivatives of thiourea
    • C07C335/16—Derivatives of thiourea having nitrogen atoms of thiourea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C335/20—Derivatives of thiourea having nitrogen atoms of thiourea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C381/00—Compounds containing carbon and sulfur and having functional groups not covered by groups C07C301/00 - C07C337/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/10—Screening for compounds of potential therapeutic value involving cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)

Abstract

본 명세서에 기재된 기술은 세포사(cell death) 유도 방법에 관한 것이다. 본 명세서에 기재된 기술은 추가로 암 및 자가면역 질환을 포함한 이상(condition)을 치료하는 것에 관한 것이며, 본 치료는 이본쇄 절단 수복의 억제제를 투여하는 것을 포함한다. 본 명세서에는 또한, 이본쇄 절단 수복의 억제제 및 그러한 억제제의 선별 방법이 기재된다.

Description

암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물{METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATMENT OF CANCER AND AUTOIMMUNE DISEASE}
관련 출원에 대한 상호참조
본 출원은 2011년 6월 27일에 출원된 미국 가출원 제61/501,522호에 대하여 35 U.S.C. § 119(e) 하에서 이득을 주장하며, 이의 내용은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
서열 목록
본 출원은 EFS-Web을 통해 ASCII 서식으로 제출된 서열 목록을 포함하며, 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 2012년 6월 7일에 생성된 상기 ASCII 사본의 파일명은 060636PC.txt이며, 그의 크기는 547,092 바이트이다.
기술분야
본 명세서에 기재된 기술은 DNA 이본쇄 절단 수복 기전을 억제함으로써 활성화-유도 시티딘 데아미나제(활성화-유도 시티딘 데아미나제, AID)를 발현하는 암 및 자가면역 질환의 치료 방법에 관한 것이다.
2010년에, 미국에서만 백혈병, 림프종 및 다발성 골수종의 새로운 사례가 137,000 건인 것으로 평가되었으며, 이들 암으로부터의 사망수가 54,000명을 초과하는 것으로 평가되었다. 백혈병/림프종 치료에서의 현재의 표준 치료(standard of care)는 흔히 집중적인 장기간 화학치료를 수반하는데, 이는 환자에게 신체적으로 부담을 줄 수 있다. 종래의 화학치료의 흔한 부작용에는 면역 시스템 붕괴, 골수억제, 골수 파괴, 구역, 피로, 간 독성, 체중 손실, 모발 손실, 장기적 인지 손상 및 치료-관련 2차 종양이 포함된다. 표준 화학치료와 관련된 중대한 문제는 암 환자에서의 건강한 세포 및 조직에 대해 입혀진 손상이다. 현재의 치료는 흔히 장기적 관해(remission)를 달성하는 데 실패하며, 생존한 환자들은 일상적으로 장기간에 걸친 화학치료-관련 건강상의 문제를 경험하는데, 이러한 건강상의 문제는 그들이 언제나 진정으로 잘 살아가는 것을 방해한다.
특이적으로 암 세포에 대한 치료의 선택적 표적화는 이들 심각한 부작용의 대부분을 개선할 수 있다. 불행하게도, 거의 예외 없이 선택적 표적화는 기술적으로 어렵거나 불가능하다. 그러므로, 표적을 벗어난(off-target) 부작용을 최소화하면서 암 세포의 선택적 표적화를 행하기 위한 추가적인 또는 대안적인 접근법이 절실히 요구된다.
본 명세서에 기재된 기술은 DNA 수복의 억제제에 의해 활성 DNA 편집 효소를 갖는 세포를 치료하는 것에 관한 것이다. 본 명세서에 사용되는 "DNA 편집 효소"는 DNA 분절(segment)의 돌연변이, 교환 또는 절제를 정상적으로 촉매하는 효소, 특히 점 돌연변이, DNA 일본쇄 절단, DNA 이본쇄 절단 또는 단백질-DNA 부가물을 발생시키거나 발생을 촉진시킬 수 있는 효소를 말한다. 본 명세서에 언급된 바와 같이 DNA 편집 효소는 반드시 그의 작용에서 부위-특이적인 것은 아니다. 유사하게, 이는 반드시 세포 특이적인 것은 아니다. 일부 실시 형태에서, 세포는 검출가능한 양의 그러한 효소를 발현하는 B 세포이다. DNA 편집 효소의 비제한적인 예에는 재조합 활성화 유전자 1(RAG1; NCBI 유전자 번호(Gene ID): 5896, 예: 서열 번호(SEQ ID NO): 0157; NCBI 참조번호(Ref): NM_000448 (mRNA) 및 서열 번호 0158; NCBI 참조번호: NP_000439 (폴리펩티드)), 재조합 활성화 유전자 1(RAG2; NCBI 유전자 번호: 5897, 예: 서열 번호: 0159; NCBI 참조번호: NM_001243785(mRNA) 및 서열 번호: 160; NCBI 참조번호: NP_001230714 (폴리펩티드)), 포자형성-특이적 단백질 11(SPO11; NCBI 유전자 번호: 23626, 예: 서열 번호: 0161; NCBI 참조번호: NM_012444 (mRNA) 및 서열 번호 0162; NCBI 참조번호: NP_036576 (폴리펩티드)), APOBEC 패밀리 구성원 및/또는 AID가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID일 수 있다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 APOBEC(아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사) 패밀리의 구성원일 수 있다. 본 명세서에 사용되는 "APOBEC 패밀리"는 N-말단 아연-의존성 시티딘 데아미나제 촉매 도메인 및 C-말단 유사촉매 도메인을 갖는 시티딘 데아미나제 효소의 패밀리를 말한다. APOBEC 패밀리 구성원의 비제한적인 예에는 AID, APOBEC1, APOBEC2, APOBEC3A, APOBEC3C, APOBEC3E, APOBEC3F, APOBEC3G, APOBEC3H, 및 APOBEC4가 포함된다.
본 명세서에 기재된 기술의 실시 형태는 DNA 편집 효소, 예컨대 B-세포 재조합효소(recombinase)인 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID, 또는 AICDA)를 이용하는데, 이는 세포에서 발현될 때 광범위한 게놈 절단을 일으킨다. 또한, 본 발명자들은 DNA 상동적 재조합 능력(이본쇄 절단 수복)이 저하 및/또는 억제될 경우, DNA 편집 효소, 예컨대 AID의 이러한 활성이 세포사(cell death)를 일으킬 것이라는 것을 알아내었다. 구체적으로는, 본 명세서에 입증된 바와 같이, AID를 발현하는 세포 내의 DNA 이본쇄 절단(DSB) 수복의 억제는 AID에 의해 발생된 올바르지 않은 표적을 벗어난 이본쇄 절단으로 인해 세포독성을 가져온다.
일 태양에서는, AID를 발현하는 세포, 예를 들어 암성 B-세포 또는 자가면역 질환의 B-세포, 또는 다른 암성 세포, 예컨대 장관암 세포, 결장암 세포, 폐암 세포, 간암 세포, 상피암 세포, 유방암 세포, 식도암 세포, 갑상선암 세포, 전립선암 세포, 신장암, 흑색종 등의 자기-파괴(self-destruction)를 선택적으로 유도하는 암 치료 패러다임이 본 명세서에 제공된다. 일부 실시 형태에서, 본 방법은 DNA 재조합 시스템을 활용하여 종양 세포 자기-파괴를 유도함으로써, 예를 들어 (정상 세포를 보존하면서) 암 세포를 선택적으로 치료한다. 이 접근법은, AID가 광범위한 게놈 절단을 유도하고, DNA 상동적 재조합 능력을 저하시킨 세포에서 세포사를 유도한다는 연구결과를 이용한다. 본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 발명자들은 AID의 상승된 발현에 의해 특징지워지는 세포 집단이 이본쇄 절단 수복(DSB)의 억제제로 치료될 경우, 세포사가 일어난다는 것을 알아내었다. 따라서, 상승된 AID 발현을 갖는 암 또는 자가면역 질환을 가진 환자를 이본쇄 절단 수복의 억제제로 치료하는 방법이 제공된다.
DSB 수복 억제제는 DSB 수복에 필요한 임의의 유전자 또는 단백질의 발현 또는 활성을 감소시키는 억제제일 수 있다. 본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4 (DNA 리가제 4); XRCC4; PRKDC (DNA-PKcs7 XRCC7); DCLRE1C; XRCC6 (Ku70); XRCC5 (Ku80) 및/또는 XLF (NHEJ1; XRCC4-유사 인자)의 발현 또는 활성을 감소 또는 억제하는 억제제이다. 본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4 (DNA 리가제 4); XRCC4; PRKDC (DNA-PKcs7 XRCC7); DCLRE1C; XRCC6 (Ku70); XRCC5 (Ku80) 및/또는 XLF (NHEJ1; XRCC4-유사 인자)의 발현 또는 활성을 감소시키는 억제제이다. 일부 실시 형태에서, 이본쇄 절단 수복의 억제제는 Rad51 패밀리 구성원(예: Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3)을 억제할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 이본쇄 절단 수복의 억제제는 비상동적 말단 결합(non-homologous end joining, NHEJ) 단백질 구성원(예: LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; XLF)을 억제할 수 있다.
본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 RAD51-매개 쇄 교환 수복의 억제제이며, 스틸벤 유도체이다. 스틸벤 유도체에는 스틸벤 ((E)-1,2-디페닐에텐), 트랜스-스틸벤, ((E)-스틸벤, 트랜스-1,2-디페닐에틸렌) 유도체, 시스-스틸벤 유도체, 콤브레타스타틴 (5-[(2R)-2-하이드록시-2-(3,4,5-트리메톡시페닐)에틸]-2-메톡시페놀), 레스베라트롤 (트랜스-3,5,4'-트리하이드록시스틸벤; (E)-5-(4-하이드록시스티릴)벤젠-1,3-디올), 디에틸스틸보에스트롤 (4,4'-(3E)-헥스-3-엔-3,4-디일디페놀), 콜히친, 및 ((S) N-(5,6,7,9-테트라하이드로-1,2,3,IO-테트라메톡시-9-옥소벤조 [알파] 헵타이엔-7-일) 아세트아미드)가 포함될 수 있지만 이로 한정되는 것은 아니다. 일 실시 형태에서, RAD51-매개 쇄 교환 수복의 억제제는 4,4'디이소티오시아노스틸벤-2,2'-디설폰산 (DIDS)이다. DIDS는 Rad51 복합체를 붕괴시키고 헤테로이본쇄(heteroduplex) 형성을 억제한다고 보고된 바 있다(문헌[Ishida, T., et al., Nucleic Acids Res, 2009, 37(10): p. 3367-76]).
본 명세서에 제공된 일부 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 살라진산 또는 그의 유도체이다. 본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 스틱트산 또는 그의 유도체이다. 본 명세서에 제공된 일부 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 STK856883 또는 그의 유도체이다. 본 명세서에 제공된 일부 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 4'-브로모-3'니트로프로피오페논 (NS-123) 또는 그의 유도체 (문헌[Lally et al, Cancer Res 2007, 67; 8791])이다.
상승된 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 임의의 암이 본 명세서에 기재된 방법 및 조성물에 따라 치료될 수 있다. 예를 들어, 암은 유방암, 전립선암, 난소암, 뇌암, 피부암, 결장직장암(결장암; 대장암), 간암, 림프종, 폐암, 구강암, 두경부암, 비장암, 림프 결절암, 소장암, 혈액세포암, 위암, 신장암, 췌장암, 자궁내막암, 고환암, 피부암, 식도암, 골수암, 혈액암, 자궁경부암, 방광암, 유잉 육종(Ewing's sarcoma), 갑상선암, 신경교종암, 및/또는 위장암일 수 있다. 본 발명은 본 명세서에 논의된 다른 암(전암(pre-cancer) 포함)에도 적용가능하다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 B 세포의 암, 예를 들어 만성 림프구성 백혈병(CLL)이다.
AID를 발현하는 임의의 암이 치료될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 림프종 또는 백혈병이다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 림프종은 비호지킨 림프종이며, 이에는 예를 들어 버킷 림프종, 여포성 림프종, 만성 림프구성 백혈병(CLL), B-세포 급성 림프구성 백혈병(B-ALL), 급성 림프모구성 백혈병, 모발상 세포 백혈병, 비장 번연 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종(DLBCL, DLBL, DLCL) 및/또는 형질세포종이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 백혈병이며, 이에는, 예를 들어 호지킨 질환, 급성 골수원성(myelogenous) 백혈병(AML), 만성 골수원성 백혈병(CML), 말트(MALT) 림프종 및/또는 T-세포 백혈병 및 림프종이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 육종, 암종, 결장암, 간암, 위암, 장관암, 폐암, 유방암, 전립선암, 신장암, 흑색종, 전립선암, 식도암, 및/또는 담관암종이다.
상승된 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 임의의 자가면역 질환이 치료될 수 있다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 자가면역 질환은 홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 자가면역 매개 혈액학적 질환, 염증성 만성 비부비동염, 결장염, 셀리악 질환, 염증성 장질환, 바렛 식도, 및/또는 염증성 위염이다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 상기 억제제 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물 내에 함유된다. 추가 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 약제학적으로 허용되는 담체 및 또 다른 화학치료 화합물을 포함하는 조성물 내에 함유될 수 있다. 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제를 포함하는 조성물이 암을 위한 또 다른 치료를 또한 받고 있는 환자에게 투여될 수 있다. 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제를 포함하는 조성물이 자가면역 질환을 위한 또 다른 치료를 또한 받고 있는 환자에게 투여될 수 있다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제에 의한 높은 AID 발현을 갖는 암을 가진 환자의 치료는 암의 지표(indicator), 마커, 증상, 중증도, 전이 속도, 재발 및/또는 종양 크기를, DSB 수복 억제제에 의한 치료 전의 지표, 마커, 증상, 중증도, 전이, 재발 및/또는 종양 크기에 대비하여, 또는 DSB 수복 억제제에 의한 치료를 받지 않은 환자에 대비하여, 10% 이상으로, 예를 들어 20% 이상, 30% 이상, 50% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 90% 이상 또는 그 초과로 감소시킨다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제에 의한 높은 AID 발현을 갖는 자가면역 질환을 가진 환자의 치료는 자가면역 질환의 지표, 마커, 증상, 및/또는 중증도를, DSB 수복 억제제에 의한 치료 전의 지표, 마커, 증상, 중증도, 전이, 재발 및/또는 종양 크기에 대비하여, 또는 DSB 수복 억제제에 의한 치료를 받지 않은 환자에 대비하여, 10% 이상으로, 예를 들어 20% 이상, 30% 이상, 50% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 90% 이상 또는 그 초과로 감소시킨다.
또한, 환자의 세포 내의 AID의 단백질 또는 mRNA의 수준을 결정함으로써 환자에서의 암 또는 자가면역 질환이 DSB 수복 억제제에 의한 치료에 반응할지를 결정하는 방법이 본 명세서에 제공된다. 일부 실시 형태에서, 일부 실시 형태에서, 대상체로부터 얻어진 암성 세포 내의 AID mRNA 및/또는 단백질의 수준이 결정된다. 일부 실시 형태에서, AID mRNA 및/또는 단백질의 수준은 대상체로부터 얻어진 자기반응성 세포에서 결정된다. 고수준의 AID 발현 생산물, 즉 mRNA 또는 단백질은 그 질환이 DSB 수복 억제제에 의해 치료가능함을 나타낸다. 예를 들어, 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 세포의 시험 샘플 내의 단백질 또는 mRNA의 수준을 측정하고, 그 수준을 건강한 대상체로부터 얻어진 세포의 동일한 유형의 샘플 내에서 발견된 AID의 수준에 대비함으로써, 상승된 수준의 AID를 발현하는 세포를 갖는 대상체가 확인될 수 있으며, 여기서 시험 샘플 내의 증가된 양의 AID는 이본쇄 절단 수복의 억제제에 의한 치료를 필요로 하는 대상체의 지표가 된다.
특정 실시 형태에서, AID 단백질의 수준의 결정은 하기의 검정 중 하나 이상의 사용을 포함한다: 웨스턴 블롯(Western blot); 면역침전; 효소-결합 면역흡수 검정(ELISA); 방사면역학적 검정(RIA); 샌드위치 검정; 형광 동소 교잡(fluorescence in situ hybridization, FISH); 면역조직학적 염색; 방사면역측정 검정; 겔 확산 침전 반응; 면역확산 검정; 현장 면역검정; 침전 반응; 응집 검정; 보체 고정 검정; 면역형광검정; 단백질 A 검정; 질량 분석 및/또는 면역전기영동 검정. 특정 실시 형태에서, AID 단백질의 수준의 결정은 항체, 항체 단편, 항체의 에피토프-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드, 단일클론 항체, 단일클론 항체 단편, 단백질 결합성 단백질, 및/또는 AID-결합성 펩티드의 사용을 포함한다.
특정 실시 형태에서, AID mRNA의 수준의 결정은 하기의 검정 중 하나 이상의 사용을 포함한다: RT-PCR, 정량적 RT-PCR, RNA-seq, 노턴 블롯(Northern blot), 마이크로어레이 기반 발현 분석, 전사 증폭 및/또는 자기-지속 서열 복제. 특정 실시 형태에서, AID mRNA의 수준의 결정은 항체, 항체 단편, 단일클론 항체, 및/또는 단일클론 항체 단편 및/또는 단백질 결합성 단백질의 사용을 포함한다. 특정 실시 형태에서, RT-PCR을 위한 AID 프라이머에는 서열 번호: 101 및 서열 번호: 102가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
특정 실시 형태에서, AID의 수준은 그의 활성에 의해 결정되고, 그의 표적 유전자 및/또는 그 표적 유전자에 의해 암호화된 전사물(transcript)의 서열 분석, PCR 또는 FISH 분석에 의해 결정될 수 있다. AID 표적 유전자에는 IGH (NCBI 유전자 번호 3492), BCL6 (NCBI 유전자 번호 604; 서열 번호: 001), MYC (NCBI 유전자 번호 4609; 서열 번호: 002), BCL11A (NCBI 유전자 번호 53335; 서열 번호: 003), CD93 (NCBI 유전자 번호 22918; 서열 번호: 004), PIM1 (NCBI 유전자 번호 5292; 서열 번호: 005) 및/또는 PAX5 (NCBI 유전자 번호 5079; 서열 번호: 006)가 포함될 수 있지만 이로 한정되는 것은 아니다.
유전자좌 내의 초돌연변이(hypermutation)의 검출은 AID 활성의 지표이다. 특정 실시 형태에서, AID의 활성은 전체 게놈 서열 분석 또는 완전 게놈 서열 분석을 사용하고, 전체 게놈에 걸치거나 IGH, BCL6, MYC, BCL11a, CD93, PIM1 및/또는 PAX5를 포함한 특이적 표적 유전자 내의 초돌연변이의 수준을 결정함으로써 결정된다.
특정 실시 형태에서, AID의 활성은 FISH 분석을 사용하여 이본쇄 절단을 검출함으로써, 예를 들어 DNA 절단 검출 FISH (DNA breakage detection fish, DBD-FISH)를 사용함으로써 결정된다 (문헌[Volpi and Bridger, BioTechniques, Vol. 45, No. 4, 385-409]).
특정 실시 형태에서, AID의 활성은 포스포(phospho)-H2AX 검정을 사용함으로써 결정된다(문헌[Rakiman et al., Advance Biotech 2008, 39-42]).
특정 실시 형태에서, AID mRNA 또는 단백질의 수준을 결정하는 데 사용되는 항체, 항체 단편, 단일클론 항체, 단일클론 항체 단편, 단백질 결합성 단백질, 및/또는 AID-결합성 펩티드는 검출가능한 표지로 표지된다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제의 유효 용량이 환자에게 1회 투여될 수 있다. 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제의 유효 용량이 환자에게 반복해서 투여될 수 있다.
일 태양에서, 본 명세서에 기재된 기술은 세포사를 일으키는 방법에 관한 것이며, 본 방법은 (a) DNA 편집 효소의 유효량을 세포에 투여하는 단계; 및 (b) 이후에, 단계 (a)의 세포를 이본쇄 절단 수복의 억제제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 그럼으로써 세포사를 일으킨다. 일 태양에서, 본 명세서에 기재된 기술은 세포를 세포사에 감작(sensitize)시키는 방법에 관한 것이며, 본 방법은 (a) 이본쇄 절단 수복의 억제제의 사용에 의해 세포를 세포사에 감작시키기 위해 DNA 편집 효소의 치료학적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계; 및 (b) 이후에, 이본쇄 절단 수복의 억제제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 폴리펩티드; DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산; 및 DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산을 포함하는 벡터로 이루어진 군으로부터 선택된 형태로 투여된다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 APOBEC 패밀리의 구성원일 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)일 수 있다.
다양한 실시 형태의 세부 사항이 하기의 상세한 설명에 개시된다. 본 명세서에 기재된 기술의 다른 특징, 목적, 및 이점이 상세한 설명 및 도면으로부터, 그리고 특허청구범위로부터 명백할 것이다.
도 1은 유세포 분석(flow cytometry) 데이터의 그래프를 도시하며, 이 그래프는 XRCC2 녹다운(knockdown)이 활성화 유도 세포독성으로 이어진다는 것을 나타낸다. Xrcc2-특이적 shRNA (XKD) 또는 대조 shRNA (Ctrl)를 발현하는 작제물로 형질도입된 야생형 및 Trp53 -/- 마우스 비장세포로부터의 eGFP+ 세포의 유세포 분석을, 자극 후 3일째에 수행하였다. Ctrl 로 형질도입된 야생형(WT) 세포(백색 막대), XKD로 형질도입된 야생형 세포(흑색 막대) 및 XKD로 형질도입된 Trp53 -/- 세포(회색 막대)가 도시되어 있다. 데이터는 3회 반복 실험에 의한 2개의 실험의 대표값(평균 및 s.e.m.)이다.
도 2는 Xrcc2-특이적 (XKD) 또는 대조 shRNA (Ctrl)로 형질도입된, 활성화된(ACT) 및 비활성화된(NON) 야생형(Aicda+/+, 빈 막대) 또는 Aicda -/- 마우스 비장세포(채워진 막대)의 유세포 분석 데이터의 그래프를 도시한다. eGFP+ 세포의 유세포 분석을, 자극 후 3일째에 수행하였다. 데이터는 4회 반복 실험에 의한 2개의 실험의 대표값(평균 및 s.e.m.)이다.
도 3은 Xrcc2-특이적 shRNA로 형질도입되고 항-CD40 + IL-4에 의해 0, 2 또는 3일 동안 자극된 B 세포로부터의 유세포 분석 데이터의 그래프를 도시하며; 이때 항-CD40 및 IL-4로 활성화된 세포의 총 카운트가 항-CD40 단독으로 자극된 세포의 카운트로 정규화되어 있다. 일수 0의 데이터는 백색 막대로 도시되어 있고, 일수 2의 데이터는 회색 막대로 도시되어 있고, 일수 3의 데이터는 흑색 막대로 도시되어 있다. 데이터는 4회 반복 실험에 의한 2개의 실험의 대표값(평균 및 s.e.m.)이다. x축은 세포의 유전자형을 나타낸다.
도 4는 비활성화(Non) 또는 활성화(Act) 조건에서 성장된 Aicda +/+ 및 Aicda -/- XKD 및 대조(Ctrl) 비장 B 세포 내의 γ-H2AX의 좌를 도시하며, 이는 γ-H2AX+ 세포(하나 이상의 좌; 채워진 막대) 대 γ-H2AX- 세포(좌 없음; 빈 막대)의 비로서 제시되어 있다.
도 5는 Aicda +/+ 및 Aicda -/- XKD 및 대조(Ctrl) 비장 B 세포 내의 DSB 수복 좌의 개수를 나타낸 그래프를 도시한다. y축은 γ-H2AX 좌의 개수를 나타내며; 이때 빈 막대는 XKD 또는 대조(Ctrl) shRNA 비장 B 세포로 처리된 Aicda +/+ 및 Aicda -/-에서의 비활성화 조건을 나타내고, 채워진 막대는 그것에서의 활성화 조건을 나타낸다. *P < 0.05 및 **P < 0.01 (2-샘플 t-검정). 데이터는 4개의 실험의 대표값(오차 막대, s.e.m.)이다.
도 6은 활성화된 XKD 또는 대조(Ctrl) 마우스 CH12-F3 세포에서의 감마-H2AX 좌의 좌 분포를 도시한다.
도 7은 세포 카운트의 그래프를 도시하는데, 이 그래프는 DIDS 처리가 자극된 비장세포의 생존을 감소시킨다는 것을 나타낸다. 야생형(AID+/+; 채워진 표시) 또는 AICDA 녹아웃(knock-out) (AID-/-, 빈 표시) 마우스의 비장으로부터 단리된 세포를 일수 0 및 일수 2에 항-CD40 항체 및 IL-4로 자극하였다. DIDS를 일수 0 및 일수 2에 0μM, 50μM, 100μM 및 150μM의 농도로 첨가하였다. 생존 세포의 총 개수를 트리판 블루(Trypan blue) 염색을 사용하여 일수 1, 2, 3, 4 및 6에 결정하였다.
도 8a 및 도 8b에 도시된 그래프는 암세포가 고수준의 AICDA 발현을 나타낸다는 것을 나타낸다. x축 상의 각각의 컬럼/틱은 상이한 세포 또는 조직 유형을 나타내며, 한편 y축은 데이터세트 중간 수준을 초과하는 배율 변화(fold change)로서의 AICDA 발현의 수준을 나타낸다. 도 8a는 59개의 암-유래 인간 세포주의 수집물로부터의 발현 데이터를 도시한다. 도 8b는 1차 인간 조직 및 암으로부터의 발현 데이터를 도시한다.
도 9는 구아바 이지사이트(Guava EasyCyte) 유세포 분석기를 사용한 비장세포 생존력의 그래프를 도시한다. 야생형(WT) 또는 AICDA 녹아웃(-/-) 마우스의 비장으로부터 단리된 세포를 일수 0 및 일수 2에 항-CD40 항체 및 IL-4로 자극하였다. DIDS를 일수 0 및 일수 2에 0 또는 150μM의 농도로 첨가하였다. 항-CD40 항체 + IL-4로 자극되고 DIDS로 처리된 WT 세포는 채워진 네모로 나타나 있으며; 항-CD40 항체 + IL-4로 자극되고 DIDS로 처리된 AICDA-/- 세포는 원으로 나타나 있으며; 항-CD40 항체 + IL-4로 자극된 WT 세포는 빈 다이아몬드로 나타나 있으며; 항-CD40 + IL-4 항체로 자극된 AICDA-/- 세포는 빈 삼각형으로 나타나 있다. 생존 세포의 총 개수를 격일로 결정하였다. 일수는 x축에 나타나 있고, 생존 세포의 분율은 y축에 나타나 있다.
도 10은 멀티톡스-플루오르 다중 세포독성 검정(MultiTox-Fluor Multiplex Cytotoxicity Assay)을 사용한 DIDS 유도체의 선별 결과를 도시한다. 화합물 정체(identity)는 x축에 나타나 있고, 생존 세포의 분율은 y축에 나타나 있다.
도 11은 DIDS로 처리된 14개의 1차 만성 림프구성 백혈병(CLL) 환자로부터의 1차 인간 CLL 세포를 도시한다. CLL 세포를 0 uM (n=5, 대조군), 150 uM (n=4), 또는 600 uM (n=2)로 처리하였다. 배양 일수 2, 4, 6, 및 8에 혈구계에서 수동으로 카운팅함으로써 DIDS에 의한 생존 세포 카운트를 결정하였다. 오차 막대는 평균의 표준 오차를 나타낸다.
도 12는 B-세포를 활성화하기 위해 CD40 + IL-4로 보충된 RPMI 배지 중에서 1X10^6 세포수/ml의 농도로 일수 0에 배양액 중에 시딩된 1차 AID-녹아웃 마우스 비장세포의 그래프를 도시한다. 개별 배양액을 0 (원), 0.5 (삼각형), 5 (다이아몬드), 50 (정사각형), 또는 500 uM (원) NS-123으로 보충하고, 일수 1, 2, 3, 및 4에 트리판 블루 염색 후에 생존 세포를 카운팅하였다.
도 13은 B-세포를 활성화하기 위해 CD40 + IL-4로 보충된 RPMI 배지 중에서 1X10^6 세포수/ml의 농도로 일수 0에 배양액 중에 시딩된 1차 AID-녹아웃 마우스 비장세포의 생존력에 대한 NS-123의 용량 반응의 그래프를 도시한다. 0, 5, 10, 20, 30 및 50 uM의 NS-123 농도를 시험하였다.
도 14는 1차 마우스 B-세포 및 DIDS 에 대한 그들의 반응의 그래프를 도시한다. 이어서, 세포를 0 (채워진 원) 또는 2.5 Gy (=250 rad; 빈 원)에 노출시켰다. 오차 막대는 3개의 독립된 실험으로부터의 평균의 표준 오차(S.E.M)를 나타낸다.
도 15a는 다양한 DIDS 농도로 처리된 비활성화된 CH12-F3 세포의 총 세포수를 도시한다. 도 15b는 다양한 DIDS 농도로 처리된 활성화된 CH12-F3 세포의 총 세포수를 도시한다. 0μM DIDS에 대한 결과는 채워진 정사각형으로 나타나 있으며, 50μM DIDS는 채워진 원으로, 100μM DIDS는 빈 정사각형으로, 그리고 150μM DIDS는 빈 원으로 나타나 있다.
도 16a는 활성화되고 150μM DIDS로 처리된, AID-녹아웃 마우스 및 B6 야생형 마우스로부터 단리된 AID-널(null) (AID-/-) 및 AID 양성 (AID+/+) 비장세포에서 검출된 좌의 개수를 도시한다. 도 16b는 AID-/- 배양액에 대비하여 AID+/+에 대해 정량화된, 포스포-H2AX 양성 세포(채워진 막대) 대 포스포-H2AX 음성 세포(빈 막대)의 비율을 도시한다. 도 16c는 세포당 좌의 개수를 DIDS-처리된 AID+/+ (채워진 막대) 대 AID-/- (빈 막대) 세포에 대해 정량화한 것을 도시한다.
도 17은 비처리 또는 30μM DIDS로 처리된 AID-발현(AID+) 또는 AID-음성(AID-) 1차 인간 CLL 세포의 세포 생존력을 도시한다.
도 18a는 1차 인간 CLL 세포에 대한 AID의 RT-PCR 발현을 도시한다. 도 18b는 DIDS에 따른 1차 인간 CLL 세포의 세포 생존력을 도시한다.
도 19a는 25 mg/kg DIDS로 처리된 BXSB.Yaa Cd8/IL15-/- 마우스의 체중을 도시한다. 도 19b는 25 mg/kg DIDS로 처리된 BXSB.Yaa Cd8/IL15-/- 마우스 내의 IgG2b 혈청 함량을 도시한다.
도 20a 및 도 20b는 BXSB.Yaa Cd8/Il15-/- 마우스를 25 mg/kg DIDS (도 20a) 또는 50 mg/kg DIDS (도 20b)로 처리한 후의 로그-순위 맨틀 콕스 생존 도표(log-rank Mantel Cox survival plot)를 도시하며, 이는 처리 시작 후의 일수로 나타나 있다.
도 21a 및 도 21b는 25 mg/kg DIDS (도 21a) 또는 50 mg/kg DIDS (도 21b)로 처리된 BXSB.Yaa Cd8/IL15-/- 마우스의 생존을 도시하며, 이는 게한-브레슬로우-윌콕산 검증(Gehan-Breslow-Wilcoxan test)을 적용하여 마우스의 일령(age in days)으로 그려져 있다.
도 22는 DIDS가 DNA 손상 후에 RAD51 좌 형성을 파괴하는 것을 도시한다. DIDS에 노출되지 않은(0 mM) 조사된 세포는 효율적인 좌 형성을 나타낸다. DIDS 노출(150 mM)은 방사선-유도 RAD51 좌 형성을 완전히 억제하여, Rad51 좌+ 세포의 분율을 (비조사된 0 Gy 샘플에서의 것과 등가인) 기준선 수준으로 감소시킨다. 오차 막대는 3개의 독립된 실험으로부터의 평균의 표준 오차(S.E.M)를 나타낸다.
도 23a 및 도 23b는 DIDS 처리에 따른 AID-양성(AID+) 및 AID-음성(AID-) 인간 세포 내의 포스포-H2AX 좌의 개수를 도시한다. 좌의 개수는 x축 상에 나타나 있다. 도 23a는 0μM DIDS 대조군에 의한 처리의 결과를 도시하고, 도 23b는 30μM DIDS에 의한 처리의 결과를 도시한다. 오차 막대는 AID-/- 샘플(빈 막대)의 4개의 독립된 배양액 및 AID+ 샘플(채워진 막대)의 5개의 독립된 배양액에 대한 평균의 표준 오차(S.E.M.)를 나타낸다.
도 24a는 DIDS 처리 및 AID 발현에 따른 활성화된 카스파제 3(AC3) 양성 세포를 도시한다. 오차 막대는 AID-/- 샘플(빈 막대)의 4개의 독립된 배양액 및 AID+ 샘플(채워진 막대)의 5개의 독립된 배양액에 대한 평균의 표준 오차(S.E.M.)를 나타낸다.
도 25a는 마우스 모델에서 전신 DIDS 처리의 효과를 시험하기 위한 실험 설계를 도시한다. 도 25b는 대조 마우스의 체질량의 분율 변화를 도시한다. 도 25c는 DIDS로 처리된 마우스의 체질량의 분율 변화를 도시한다.
도 26은 DNP-KLH로 면역화되고 0, 10, 또는 50 mg/kg DIDS로 처리된 AID-/- 및 AID+/+ 마우스로부터의 골수, 비장, 및 말초 혈액의 종점 유세포 분석 도트 도표 분석을 도시한다. 도표는 B220 (y축) 및 CD19 (x축)의 발현에 대해 염색된 림프구 게이트(lymphocyte gate) 내의 세포의 집단을 나타낸다. 각각의 도표의 상단 우측 코너에 있는 숫자는 각각의 분석에 대한 B220+/CD19+ 세포의 백분율을 제공한다. 초기/전-GC(early/pre-GC)로부터 후-GC(post-GC)까지의 B-세포 성숙의 진행이 하단부에 표시되어 있다.
도 27은 엡스타인-바르 바이러스(Epstein-Barr virus)로 형질전환된 말초 인간 B-림프구에서의 AID 및 GAPDH (대조군)에 대한 RT-PCR 발현 분석을 도시한다.
정의
편의상, 본 명세서, 실시예, 및 첨부된 특허청구범위에 사용된 특정 용어 및 어구의 의미가 이하에 제공된다. 당업계에서의 용어의 용법과 본 명세서에 제공된 그의 정의 사이에 명백한 차이가 있다면, 본 명세서 내에서 제공된 정의가 우선할 것이다.
세포 생물학 및 분자 생물학에서의 일반 용어의 정의는 문헌["The Merck Manual of Diagnosis and Therapy", 18th Edition, published by Merck Research Laboratories, 2006 (ISBN 0-911910-18-2)]; [Robert S. Porter et al. (eds.), The Encyclopedia of Molecular Biology, published by Blackwell Science Ltd., 1994 (ISBN 0-632-02182-9)]; 및 [Robert A. Meyers (ed.), Molecular Biology and Biotechnology: a Comprehensive Desk Reference, published by VCH Publishers, Inc., 1995 (ISBN 1-56081-569-8)]; [The ELISA guidebook (Methods in molecular biology 149) by Crowther J. R. (2000)]; [Fundamentals of RIA and Other Ligand Assays by Jeffrey Travis, 1979, Scientific Newsletters]; [Immunology by Werner Luttmann, published by Elsevier, 2006. Definitions of common terms in molecular biology are also be found in Benjamin Lewin, Genes IX, published by Jones & Bartlett Publishing, 2007 (ISBN-13: 9780763740634)]; [Kendrew et al. (eds.), , Molecular Biology and Biotechnology: a Comprehensive Desk Reference, published by VCH Publishers, Inc., 1995 (ISBN 1-56081-569-8)] 및 [Current Protocols in Protein Sciences 2009, Wiley Intersciences, Coligan et al., eds.]에서 찾아볼 수 있다.
달리 기재되지 않는 한, 본 명세서에 기재된 기술은, 예를 들어 문헌[Methods in Enzymology, Volume 289: Solid-Phase Peptide Synthesis, J. N. Abelson, M. I. Simon, G. B. Fields (Editors), Academic Press; 1st edition (1997) (ISBN-13: 978-0121821906)]; 미국 특허 제4,965,343호, 및 제5,849,954호; 문헌[Maniatis et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., USA (1982)]; [Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3 ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., USA (2000)]; [Davis et al., Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier Science Publishing, Inc., New York, USA (1995)]; 또는 [Methods in Enzymology: Guide to Molecular Cloning Techniques Vol.152, S. L. Berger and A. R. Kimmel Eds., Academic Press Inc., San Diego, USA (1987)]; [Current Protocols in Protein Science (CPPS) (John E. Coligan, et. al., ed., John Wiley and Sons, Inc.), Current Protocols in Cell Biology (CPCB) (Juan S. Bonifacino et. al. ed., John Wiley and Sons, Inc.), and Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique by R. Ian Freshney, Publisher: Wiley-Liss; 5th edition (2005)], [Animal Cell Culture Methods (Methods in Cell Biology, Vol. 57, Jennie P. Mather and David Barnes editors, Academic Press, 1st edition, 1998)]에 기재된 바와 같은 표준 절차를 사용하여 수행하였으며, 이들은 모두 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
단수 용어("a", "an" 및 "the")는 문맥이 달리 명확히 지시하지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다. 유사하게, 단어 "또는"은 문맥이 달리 명확히 지시하지 않는 한 "및"을 포함하고자 한다. 본 명세서에 기재된 것들과 유사하거나 등가인 방법 및 재료가 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있긴 하지만, 적합한 방법 및 재료가 하기에 기재된다. 약어 "예(e.g.)"는 라틴어('exempli gratia')로부터 유래되며, 본 명세서에서 비제한적인 예를 지시하는 데 사용된다. 따라서, 약어 "예"는 용어 "예를 들어(for example)"와 동의어이다.
실행 중인 실시예에서나 달리 지시된 곳 이외에, 본 발명에 사용되는 성분의 양 또는 반응 조건을 표현하는 모든 수치는 모든 경우에 용어 "약"에 의해 수식된 것으로 이해되어야 한다. 용어 "약"은 백분율과 함께 사용될 때 ±1%를 의미할 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "투여하다"는 원하는 효과가 생성되도록 원하는 부위에서 조성물의 적어도 부분적인 국부화를 가져오는 방법 또는 경로에 의해 대상체 내로 조성물을 투입하는 것을 말한다. 본 명세서에 기재된 화합물 또는 조성물은 당업계에 공지된 임의의 적절한 경로에 의해 투여될 수 있으며, 이러한 경로에는 경구, 장내 또는 비경구 경로(정맥내, 근육내, 피하, 경진피, 기도(에어로졸), 폐, 경비, 비강내, 직장, 및 국소(구강 및 설하 포함) 투여 포함)가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
예시적인 투여 방식에는 주사, 주입, 점적, 흡입, 또는 섭취가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. "주사"에는 제한 없이, 정맥내, 근육내, 동맥내, 수강내, 뇌실내, 낭내, 안와내, 심장내, 진피내, 복강내, 경기관, 피하, 표피하, 관절내, 낭하, 지주막하, 척수내, 뇌척수내, 및 흉골내 주사 및 주입이 포함된다. 바람직한 실시 형태에서, 조성물은 정맥내 주입 또는 주사로 투여된다.
본 명세서에 사용된 용어 "자가면역 질환" 또는 "자가면역 장애"는 대상체 자신의 항체가 숙주 조직과 반응하는 경우와 같이 자기-조직에 대한 공격으로 인한 면역-매개 이상(condition)을 말하지만, 또한 미생물에 대한 면역 반응을 수반할 수 있다. 그러한 이상에는 홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스, 원판상 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 염증성 만성 비부비동염, 결장염, 셀리악 질환, 염증성 장질환, 바렛 식도, 염증성 위염, 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 및 자가면역 매개 혈액학적 질환이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
용어 "감소하다", "저하하다", "저하", "억제하다" 또는 "억제"는 모두 본 명세서에서 일반적으로 통계학적으로 유의한 양으로의 감소를 의미하는 데 사용된다. 그러나, 불확실함을 피하기 위해, "감소하다", "저하된", "저하", "억제하다" 또는 "억제"는 참조 수준과 비교하여 5% 이상 감소, 예를 들어 참조 수준과 비교하여 약 10% 이상, 또는 약 20% 이상, 또는 약 30% 이상, 또는 약 40% 이상, 또는 약 50% 이상, 또는 약 60% 이상, 또는 약 70% 이상, 또는 약 80% 이상, 또는 약 90% 이상, 또는 약 95% 이상, 또는 약 98% 이상 또는 약 99% 이상, 또는 그 초과의 감소를 의미한다.
용어 "증가된", "증가하다" 또는 "향상시키다" 또는 "활성화하다" 또는 "상승된"은 모두 본 명세서에서 일반적으로 통계학적으로 유의한 양으로의 증가를 의미하는 데 사용되며; 불확실함을 피하기 위해, 용어 "증가된", "증가하다" 또는 "향상시키다" 또는 "활성화하다" 또는 "상승된"은 통계학적으로 유의한 증가, 예컨대 참조 수준과 비교하여 5% 이상의 증가, 예를 들어 참조 수준과 비교하여 약 10% 이상, 약 20% 이상, 또는 약 30% 이상, 또는 약 40% 이상, 또는 약 50% 이상, 또는 약 60% 이상, 또는 약 70% 이상, 또는 약 80% 이상, 또는 약 90% 이상의 증가 또는 최대 100% 증가 또는 5 내지 100%의 임의의 증가, 또는 참조 수준과 비교하여 약 2배 이상, 또는 약 3배 이상, 또는 약 4배 이상, 또는 약 5배 이상 또는 약 10배 이상의 증가, 또는 2배 내지 10배 또는 그 초과의 임의의 증가를 의미한다.
용어 "통계학적으로 유의한" 또는 "유의하게"는 통계학적 유의성을 말하며, 일반적으로 마커의 농도가 정상보다 2 표준 편차(2SD) 미만 또는 초과이거나, 또는 더 낮거나, 또는 더 높은 것을 의미한다. 이 용어는 차이가 있다는 통계학적 증거를 말한다. 이는 귀무 가설이 실제로 진실일 경우 귀무 가설을 거부할 결정을 내릴 확률로서 정의된다. 이러한 결정은 흔히 p-값을 사용하여 내려진다.
본 명세서에 사용된 용어 "화합물" 또는 "작용제(agent)"는 상호교환가능하게 사용되며, DSB 수복을 억제하는 분자 및/또는 조성물을 말한다. 화합물/작용제에는 화학적 화합물 및 화학적 화합물의 혼합물, 예를 들어 유기 또는 무기 소분자; 사카라이드; 올리고사카라이드; 폴리사카라이드; 생물학적 거대분자, 예를 들어 펩티드, 단백질, 및 펩티드 유사체 및 유도체; 펩티드모방체(peptidomimetic); 핵산; 핵산 유사체 및 유도체; 세균, 식물, 진균, 또는 포유류 세포 또는 조직과 같은 생물학적 재료로부터 제조된 추출물; 천연 발생 또는 합성 조성물; 펩티드; 압타머(aptamer); 및 항체, 또는 그의 단편이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 용어 "시험 화합물" 또는 "시험 작용제"는 본 명세서에 확인된 바와 같이, DSB 수복에 관여하는 유전자 또는 단백질의 발현 및/또는 활성을 억제할 수 있는 그들의 능력에 대해 선별하고자 하는 화합물 또는 작용제 및/또는 그의 조성물을 말한다.
본 명세서에 사용된 용어 "DSB 수복 억제제"는 이본쇄 DNA 절단의 수복을 억제하는 임의의 화합물 또는 작용제이다. 특정 실시 형태에서, 그러한 억제제에는 상동적 재조합 및 비상동적 말단 결합(NHEJ)을 억제하는 것이 포함될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 그러한 억제제에는 RAD51-매개 쇄 교환의 억제제가 포함될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 그러한 억제제에는, 예를 들어 Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; 및 XLF의 억제제가 포함될 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "항체"는 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적으로 활성인 부분, 즉 하나 이상의 에피토프를 포함하는 항원과 특이적으로 결합하는 항원 결합 부위를 함유하는 분자를 말한다. 이들 용어는 또한 2개의 면역글로불린 중쇄 및 2개의 면역글로불린 경쇄로 구성된 항체뿐만 아니라 항체 이외의 다양한 형태를 말하는데; 이에는, 예를 들어 Fv, Fab, 및 F(ab)'2뿐만 아니라 이작용성 하이브리드 항체(예: 문헌[Lanzavecchia et al., Eur. J. Immunol. 17, 105 (1987)]) 및 단쇄(예: 문헌[Hustonet al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 85, 5879-5883 (1988)] 및 [Bird et al., Science 242, 423-426 (1988)], 이들은 본 명세서에 참고로 포함됨) 및 단일 도메인 항체(sdAb) (예를 들어, 나노바디(nanobody), 카멜리드(camelid) (VHH 단편) 및 면역글로불린 새로운 항원 수용체(immunoglobulin new antigen receptor, IgNAR) 포함) (문헌[Harmsen et al. 2007, Appl. Microbiol. Biotechnol. 77 (1): 13-22]; [Holt et al. 2003, Trends in Biotechnology 21 (11): 484-490]; 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함됨)가 포함된다. (일반적으로 문헌[Hood et al., Immunology, Benjamin, N.Y., 2ND ed. (1984)], [Harlow and Lane, Antibodies. A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory (1988)] 및 [Hunkapiller and Hood, Nature, 323, 15-16 (1986)]을 참조하며, 이들은 본 명세서에 참고로 포함된다). 이 용어는 또한 인트라바디(intrabody), 즉 세포 내에서 작용하고 세포내 단백질에 결합하는 항체를 포함한다. 인트라바디에는 전 항체 또는 그의 항체 결합성 단편, 예를 들어 단일 Fv, Fab 및 F(ab)'2 등이 포함될 수 있다. 본 명세서에 사용된 용어 "에피토프"는 동물에서, 바람직하게는 포유류에서, 가장 바람직하게는 인간에서 항원성 또는 면역원성 활성을 갖는 비단백질 분자 또는 폴리펩티드 또는 단백질의 단편을 말한다. 면역원성 활성을 갖는 에피토프는 동물에서 항체 반응을 이끌어내는 폴리펩티드 또는 단백질의 단편이다. 항체가 면역특이적으로 결합되는 에피토프는 당업자에게 익히 공지된 임의의 방법에 의해, 예를 들어 면역검정에 의해 결정될 수 있다. 항원성 에피토프는 반드시 면역원성일 필요는 없다.
용어 "단백질 결합성 단백질"은 비면역글로불린 결합성 단백질을 말하며, 항체 하위구조(예: Fc 단편), 미니바디(minibody), 애드넥틴(adnectin), 안티칼린(anticalin), 아피바디(affibody), 아필린(affilin), 안키린 반복 단백질(ankyrin repeat protein), DARPin, 크노틴(knottin), 글루바디(glubody), C형 렉틴-유사 도메인 단백질, 테트라넨틴, 크링글 도메인(kringle domain, KD), 쿠니츠 도메인 단백질(kunitz domain protein), 티오레독신, 시토크롬 b562, 아연 손가락 골격(zinc finger scaffold), 포도상구균 뉴클레아제 골격(Staphylococcal nuclease scaffold), 피브로넥틴 또는 피브로넥틴 이량체, 테나신, N-카드헤린, E-카드헤린, ICAM, 티틴, GCSF-수용체, 사이토카인 수용체, 글리코시다제 억제제, 항생물질 색소단백질, 수초막 접착 분자(myelin membrane adhesion molecule) P0, CD8, CD4, CD2, 클래스 I MHC, T-세포 항원 수용체, CD1, C2 및 VCAM-1의 I-세트 도메인, 미오신-결합성 단백질 C의 1-세트 면역글로불린 도메인, 미오신-결합성 단백질 H의 1-세트 면역글로불린 도메인, 텔로킨의 I-세트 면역글로불린 도메인, NCAM, 트위친(twitchin), 뉴로글리안(neuroglian), 성장 호르몬 수용체, 에리트로포이에틴 수용체, 프로락틴 수용체, 인터페론-감마 수용체, β-갈락토시다제/글루쿠로니다제, β-글루쿠로니다제, 트랜스글루타미나제, T-세포 항원 수용체, 초산화물 디스뮤타제, 조직 인자 도메인, 시토크롬 F, 녹색 형광 단백질, GroEL, 및 타우마틴으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 그러한 비면역글로불린 결합성 단백질의 제조 방법은 당업계에 익히 공지되어 있다(문헌[Binz et al. 2005, Nat Biotechnol 1257-6]; [Lee et al. 2010, Proc Natl Acad Sci USA 107(21):9567-71]; [Gebauer and Skerra 2009, Curr Opin Chem Biol. 13(3):245-255]).
용어 "발현"은 RNA 및 단백질을 생산하는 데, 그리고 필요에 따라 단백질을 분비하는 데 관여하는 세포 과정을 말하며, 이에는, 적용가능한 경우, 예를 들어 전사, 번역, 접힘(folding), 개질(modification) 및 처리(processing)가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 용어 "발현 생산물" 또는 "발현 생산물들"은 유전자로부터 전사된 RNA, 및 유전자로부터 전사된 mRNA의 번역에 의해 수득된 폴리펩티드를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 발현 생산물은 폴리펩티드를 암호화하지 않는 서열, 예컨대 microRNA 또는 RNAi로부터 전사된다.
본 명세서에 사용된 용어 "상보적인" 또는 "상보적인 염기쌍"은 DNA 내의 A:T 및 G:C와 RNA 내의 A:U를 말한다. 대부분의 DNA는 단지 4개의 질소성 염기의 뉴클레오티드의 서열로 이루어진다: 염기 또는 염기 아데닌(A), 티민(T), 구아닌(G), 및 시토신(C). 이들 염기가 함께 유전 알파벳을 형성하고, 그들의 정돈된 긴 서열은 암호화된 형태로 유전자 내에 존재하는 많은 정보를 함유한다. 대부분의 RNA 또한 단지 4개의 염기의 서열로 이루어진다. 그러나 RNA에서, 티민은 우리딘(U)으로 대체된다.
본 명세서에 사용된 용어 "핵산" 또는 "핵산 서열"은 리보핵산, 데옥시리보핵산 또는 그의 유사체의 단위, 폴리뉴클레오티드, 예컨대 데옥시리보핵산(DNA), 및 필요에 따라, 리보핵산(RNA), 그의 중합체를 일본쇄 또는 이본쇄 형태로 포함하는 임의의 분자, 바람직하게는 중합체 분자를 말한다. 일본쇄 핵산은 변성 이본쇄 DNA의 하나의 쇄 핵산일 수 있다. 대안적으로, 이는 어떠한 이본쇄 DNA로부터도 유래되지 않은 일본쇄 핵산일 수 있다. 일 태양에서, 주형 핵산은 DNA이다. 또 다른 태양에서, 주형은 RNA이다. 적합한 핵산 분자는 DNA이며, 이에는 게놈 DNA, 리보솜 DNA 및 cDNA가 포함된다. 다른 적합한 핵산 분자는 RNA이며, 이에는 mRNA, rRNA 및 tRNA가 포함된다. 핵산 분자는 게놈 DNA에서와 같이 천연 발생일 수 있거나, 또는 이는 합성, 즉 인간 활동에 기초하여 제조될 수 있거나, 또는 이들의 조합일 수 있다. 달리 특별히 제한되지 않는 한, 이 용어는 천연 뉴클레오티드의 공지된 유사체를 함유하는 핵산을 포함하는데, 이때 이러한 핵산은 참조 핵산과 유사한 결합 특성을 가지며 천연 발생 뉴클레오티드와 유사한 방식으로 대사된다. 달리 나타내지 않는 한, 특정 핵산 서열은 또한 명시적으로 지시된 서열뿐만 아니라, 그의 보존적으로 개질된 변이체(예: 축퇴 코돈 치환) 및 상보적인 서열을 암시적으로 포함한다. 구체적으로, 축퇴 코돈 치환은 하나 이상의 선택된(또는 모든) 코돈의 제3 위치가 혼합된-염기 및/또는 데옥시이노신 잔기로 치환된 서열을 발생시킴으로써 달성될 수 있다(문헌[Batzer, et al., Nucleic Acid Res. 19:5081 (1991)]; [Ohtsuka, et al., J. Biol. Chem. 260:2605-2608 (1985)], 및 [Rossolini, et al., Mol. Cell. Probes 8:91-98 (1994)]). 핵산 분자는 또한 특정 개질, 예컨대 미국 특허 출원 제20070213292호에 기재된 바와 같은 2'-데옥시, 2'-데옥시-2'-플루오로, 2'-O-메틸, 2'-O-메톡시에틸 (2'-O-MOE), 2'-O-아미노프로필 (2'-O-AP), 2'-O-디메틸아미노에틸 (2'-O-DMAOE), 2'-O-디메틸아미노프로필 (2'-O-DMAP), 2'-O-디메틸아미노에틸옥시에틸 (2'-O-DMAEOE), 또는 2'-O--N-메틸아세트아미도 (2'-O-NMA), 콜레스테롤 부가, 및 포스포로티오에이트 골격; 및 미국 특허 제6,268,490호에 기재된 바와 같은 2'-산소와 4'-탄소 원자 사이에서 메틸렌 단위에 의해 결합된 특정 리보뉴클레오시드를 가질 수 있으며, 여기서 특허 및 특허 출원 둘 모두는 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 용어 "핵산"은 또한 뉴클레오티드 유사체, 및 일본쇄(센스 또는 안티센스) 및 이본쇄 폴리뉴클레오티드로부터 제조된 RNA 또는 DNA의 등가체, 유도체, 변이체 또는 유사체를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
용어 "유전자"는 적절한 조절 서열에 작동가능하게 연결될 때 시험관내에서(in vitro) 또는 생체내에서(in vivo) RNA로 전사되는 핵산 서열(DNA)을 의미한다. 유전자는 암호화 영역의 전과 후의 영역, 예를 들어 5' 비번역(5'UTR) 또는 "선도(leader)" 서열 및 3' UTR 또는 "꼬리(trailer)" 서열뿐만 아니라 개별 암호화 분절(엑손)들 사이에 개재 서열(인트론)을 포함할 수 있거나 포함할 수 없다.
본 명세서에 사용된 용어 "단백질" 및 "폴리펩티드 및 "펩티드"는 인접한 잔기의 알파-아미노 기와 카르복시 기 사이에서 펩티드 결합에 의해 다른 것에 연결된 일련의 아미노산 잔기를 지정하기 위하여 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용된다. 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용되는 용어 "단백질", 및 "폴리펩티드 및 "펩티드"는 개질된 아미노산(예: 인산화, 당화, 글리코실화 등) 및 아미노산 유사체를 포함한 아미노산의 중합체를 말하며, 이때 그의 크기 또는 기능에는 관계 없다. "단백질"은 흔히 상대적으로 큰 폴리펩티드를 말할 때 사용되고, "펩티드"는 흔히 작은 폴리펩티드를 말할 때 사용되긴 하지만, 당업계에서의 이들 용어의 용법은 중첩되고 변동된다. 본 명세서에 사용된 용어 "펩티드"는 달리 언급되지 않는 한, 펩티드, 폴리펩티드, 단백질 및 단백질의 단편을 말한다. 용어 "단백질" 및 "폴리펩티드" 및 "펩티드"는 유전자 생산물 및 그의 단편에 대해 말할 때 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용된다. 따라서, 예시적인 펩티드 또는 단백질에는 유전자 생산물, 천연 발생 단백질, 호몰로그(homolog), 오솔로그(ortholog), 파랄로그(paralog), 단편 및 상기의 다른 등가체, 변이체, 단편, 및 유사체가 포함된다.
본 명세서에 사용된 용어 "벡터"는 숙주 세포에의 전달 또는 상이한 숙주 세포들 사이에서의 이동을 위해 설계된 핵산 작제물을 말한다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 벡터는 바이러스성 또는 비바이러스성일 수 있다. 벡터에는 클로닝 벡터, 발현 벡터, 플라스미드, 파지, 트랜스포존, 코스미드, 세균 인공 염색체(bacterial artificial chromosome, BAC), 효모 인공 염색체(yeast artificial chromosome, YAC), 바이러스, 비리온, 레트로바이러스 등이 포함될 수 있지만 이로 한정되는 것은 아니다. 일부 실시 형태에서, 벡터는 에피솜성(episomal)이다. 적합한 에피솜성 벡터의 사용은 고 복제수 염색체외 DNA(high copy number extra chromosomal DNA) 내에 대상체에서의 관심 대상의 뉴클레오티드를 유지하는 수단을 제공하며, 그럼으로써 염색체 통합의 잠재적인 효과를 제거한다.
본 명세서에 사용된 용어 "발현 벡터"는 세포 내에 이종 핵산 단편을 포함시키고 발현하는 능력을 갖는 벡터를 말한다. 발현 벡터는 추가 요소를 포함할 수 있는데, 예를 들어 발현 벡터는 2개의 복제 시스템을 가질 수 있으며, 이에 따라 그것이 2개의 유기체 내에, 예를 들어 발현을 위한 인간 세포 내에, 그리고 클로닝 및 증폭을 위한 원핵생물 숙주 내에 유지되게 할 수 있다. 발현 벡터는 그 벡터 상의 전사적 조절 서열에 연결된 서열로부터 RNA 또는 폴리펩티드의 발현을 지시할 수 있다. 발현된 서열은 반드시는 아니지만 흔히 세포에 대해 이종일 것이다. 발현 벡터는 추가 요소를 포함할 수 있는데, 예를 들어 발현 벡터는 2개의 복제 시스템을 가질 수 있으며, 이에 따라 그것이 2개의 유기체 내에, 예를 들어 발현을 위한 인간 세포 내에, 그리고 클로닝 및 증폭을 위한 원핵생물 숙주 내에 유지되게 할 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "바이러스성 벡터"는 바이러스 기원의 적어도 하나의 요소를 포함하고 바이러스성 벡터 입자 내로 패키징될 수 있는 능력을 갖는 핵산 벡터 작제물을 말한다. 바이러스성 벡터는 비필수 바이러스성 유전자 대신에 표적 유전자를 함유할 수 있다. 벡터 및/또는 입자는 임의의 핵산을 시험관내 또는 생체내에서 세포 내로 이동시키려는 목적에 이용될 수 있다. 다수의 형태의 바이러스성 벡터가 당업계에 공지되어 있으며, 이에는 거대세포바이러스, 아데노바이러스, 렌티바이러스, 폭스 바이러스, 헤르페스 바이러스, 레트로바이러스(예: MMLV, HIV-1 또는 ALV)가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 바이러스성 벡터는 세포 내로의 핵산 조절 화합물의 캐리어로서 사용될 수 있다. 예를 들어, 조절 화합물을 함유하는 작제물은 세포 내로의 감염 또는 형질도입을 위하여, 아데노바이러스, 아데노-관련 바이러스(AAV), 또는 헤르페스 단순 바이러스(HSV) 또는 기타(레트로바이러스성 및 렌티바이러스성 벡터 포함)와 같은 비복제성의 결함 바이러스성 게놈 내로 통합되고 패키징될 수 있다. 대안적으로, 이 작제물은 에피솜성 복제가 가능한 벡터, 예를 들어 EPV 및 EBV 벡터 내로 포함될 수 있다. 그러한 벡터 내로 포함된 핵산은, 발현 제어 서열이 그 폴리뉴클레오티드 서열의 전사 및 번역을 제어 및 조절할 때, 발현 제어 서열에 작동적으로 연결될 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "작동적으로 연결된" 또는 "작동가능하게 연결된"은 제2 핵산과 기능적인 관계에 있는 핵산을 말한다. 용어 "작동가능하게 연결된"은 2개 이상의 핵산 분자, 예컨대 전사하고자 하는 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드 및 조절 요소(예컨대, 프로모터 또는 인핸서 요소, 이는 전사하고자 하는 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드의 전사를 가능하게 함)의 기능적 결합을 포함한다. 일부 예에서, 핵산 조절 화합물의 전사는 발현이 의도된 세포 유형에서의 핵산의 발현을 제어하는 프로모터 서열(또는 다른 전사적 조절 서열)의 제어 하에 있다. 또한, 조절 핵산은 단백질의 천연 발생 형태의 전사를 제어하는 서열과 동일하거나 상이한 전사적 조절 서열의 제어 하에 있을 수 있다는 것이 이해될 것이다. 일부 경우에, 프로모터 서열은 세포의 합성 장치(synthetic machinery), 또는 도입된 합성 장치에 의해 인식되며, 특이적 유전자의 전사를 개시하는 데 필요하다. 프로모터 서열은 "조직-특이적 프로모터"일 수 있는데, 이는 프로모터로서의 역할을 하는, 즉 프로모터에 작동가능하게 연결된 선택된 핵산 서열의 발현을 조절하는 핵산 서열을 의미하고, 특이적 세포, 예를 들어 림프구 또는 상피 세포 내에서의 선택된 핵산 서열의 발현에 영향을 준다. 이 용어는 또한 이른바 "리키(leaky)" 프로모터도 포함하는데, 이는 선택된 핵산의 발현을 한 조직 내에서 1차적으로 조절하지만, 다른 조직에서도 마찬가지로 발현을 일으킨다.
본 명세서에 사용된 용어 "이종 핵산 단편"은 그 세포 내에서 천연적으로 발생하지 않는 핵산 서열을 말한다. 예를 들어, 이종 유전자, 예컨대 DNA 편집 효소(예: AID)가 세균 또는 바이러스의 게놈 내로 삽입될 경우, 그 유전자는 그 수용 세균 또는 바이러스에 대해 이종인데, 그 이유는 세균성 및 바이러스성 게놈은 DNA 편집 효소 유전자를 천연적으로 갖지 않기 때문이다.
본 명세서에 사용된 용어 "복제 불능(replication incompetent)"은 바이러스성 벡터가 그의 게놈을 추가로 복제 및 패키징할 수 없다는 것을 의미한다. 예를 들어, 대상체의 세포를 복제 불능 재조합 아데노-관련 바이러스(recombinant adeno-associated virus, rAAV) 비리온으로 감염시키는 경우, 이종 유전자(도입유전자(transgene)로도 알려짐)는 환자의 세포 내에서 발현되지만, rAAV는 복제 결함을 나타내며(예를 들어, 바이러스를 패키징하는 것으로부터 필수 단백질을 암호화하는 악세서리 유전자가 결여되며), 바이러스성 입자가 환자의 세포 내에 형성될 수 없다.
본 명세서에 사용된 용어 "단리된" 또는 "부분 정제된"은, 핵산 또는 폴리펩티드의 경우, 그의 천연 공급원에서 발견된 핵산 또는 폴리펩티드와 함께 존재하고/하거나 분비된 폴리펩티드의 경우 분비되거나, 세포에 의해 발현될 때 핵산 또는 폴리펩티드와 함께 존재하게 될 적어도 하나의 다른 성분(예: 핵산 또는 폴리펩티드)으로부터 분리된 핵산 또는 폴리펩티드를 말한다. 화학적으로 합성된 핵산 또는 폴리펩티드 또는 시험관내 전사/번역을 사용하여 합성된 것은 "단리된" 것으로 간주된다.
질환과 관련하여 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "치료하다", "치료", "치료하는" 등은 본 명세서에 기재된 바와 같이 암의 지표, 증상, 마커, 물리적 파라미터, 종양 크기 또는 재발의 심각도의 감소를 말한다. 본 명세서에 기재된 기술와 관련하여, 본 명세서에 언급된 이상 중 임의의 것에 관한 한에 있어서, 용어 "치료하다", "치료", "치료하는" 등은 그러한 암 또는 자가면역 장애와 관련된 적어도 하나의 증상 또는 합병증의 진행, 증악, 악화, 진행, 예측된 진행 또는 중증도의 완화, 경감, 개선, 억제, 감속, 지연, 반전, 또는 중지를 의미하거나, 또는 그러한 질환 또는 장애의 발병을 지연시키는 것을 의미한다. 일 실시 형태에서, 암 또는 자가면역 장애의 증상은 5% 이상, 10% 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 또는 50% 이상으로 경감된다.
질환 또는 장애 마커 또는 증상과 관련하여 "낮추다"는 그러한 수준에서의 통계학적으로 유의한 감소를 의미한다. 이러한 감소는, 예를 들어 10% 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상 또는 그 초과일 수 있으며, 바람직하게는 그러한 질환 또는 장애를 갖지 않는 개체에 대하여 정상 범위 내에서 허용되는 수준까지 내려간다.
질환 또는 장애 마커 또는 증상과 관련하여 "높이다"는 그러한 수준에서의 통계학적으로 유의한 증가를 의미한다. 이러한 감소는, 예를 들어 10% 이상, 20% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상 또는 그 초과일 수 있으며, 바람직하게는 그러한 질환 또는 장애를 갖지 않는 개체에 대하여 정상 범위 내에서 허용되는 수준으로부터 올라간다.
본 명세서에 사용되는 어구 "치료학적 유효량", "유효량" 또는 "유효 용량"은 본 명세서에 기재된 이상(예: 암 또는 자가면역 질환)의 치료, 예방, 또는 관리에서 치료학적 이득을 제공하는 양, 예를 들어 그러한 이상의 적어도 하나의 증상에서 통계학적으로 유의한 감소를 제공하는 양을 말한다. 치료학적 유효량의 결정은 충분히 당업자의 능력 내에 있다. 일반적으로, 치료학적 유효량은 대상체에서의 의학적 상태의 중증도 및 유형, 및 다른 약제학적 활성제의 투여뿐만 아니라 대상체의 이력, 연령, 상태, 성별에 따라서도 변동될 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "약제학적 조성물"은 제약 산업에서 일반적으로 사용되는 약제학적으로 허용되는 담체와 배합된 활성제를 말한다.
본 명세서에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는"은 과도한 독성, 자극, 알러지성 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 올바른 의학적 판단의 범주 내에서 인간 및 동물의 조직과의 접촉에 사용하기에 적합하며 합리적인 이득/위험 비에 부합되는 화합물, 재료, 조성물, 및/또는 투여형을 말한다.
본 명세서에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 담체"는 임의의 약제학적으로 허용되는 재료, 조성물, 매질, 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제(예: 염료, 향미제, 결합제, 연화제, 충전제, 윤활제, 방부제, 옥수수 전분, 락토오스, 활석, 마그네슘 스테아레이트, 수크로오스, 젤라틴, 칼슘 스테아레이트, 이산화규소, 셸락 및 글레이즈), 용매 또는 캡슐화 재료, 코팅, 계면활성제, 흡수 지연제, 제조 보조제(예: 윤활제, 활석 마그네슘, 칼슘 또는 아연 스테아레이트, 또는 스테아르산), 염, 방부제, 안정제, 젤, 붕해제, 감미제, 유사 재료 및 이들의 조합을 의미하며, 이들은 당업자에게 공지되어 있는 바와 같을 것이다(예를 들어, 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289-1329] 참조). 임의의 통상적인 담체가 활성 성분과 불상용성인 경우를 제외하고는, 치료학적 또는 약제학적 조성물에서의 그의 사용이 고려된다. 각각의 담체는 제형의 다른 성분들과 상용성이고 환자에게 해롭지 않다는 의미에서 "허용"되어야 한다. 예를 들어, 담체는 치료에 대한 작용제의 영향을 감소시키지 않는다. 다시 말하면, 담체는 약제학적으로 불활성이다. 약제학적으로 허용되는 담체로서의 역할을 할 수 있는 재료의 일부 예에는 하기가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다: (1) 당, 예컨대 락토오스, 글루코오스 및 수크로오스; (2) 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분; (3) 셀룰로오스, 및 그의 유도체, 예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 미세결정질 셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트; (4) 분말형 트래거캔스; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 라우릴 설페이트 및 탈크; (8) 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌제 왁스; (9) 오일, 예컨대 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유; (10) 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜; (11) 폴리올, 예컨대 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜 (PEG); (12) 에스테르, 예컨대 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트; (13) 한천; (14) 완충제, 예컨대 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄; (15) 알긴산; (16) 발열성 물질 제거수(pyrogen-free water); (17) 등장성 식염수; (18) 링거액; (19) 에틸 알코올; (20) pH 완충 용액; (21) 폴리에스테르, 폴리카르보네이트 및/또는 폴리무수물; (22) 증량제(bulking agent), 예컨대 폴리펩타이드 및 아미노산; (23) 혈청 성분, 예컨대 혈청 알부민, HDL 및 LDL; (22) C2-C12 알코올, 예컨대 에탄올; 및 (23) 약제학적 제형에 사용되는 다른 비독성의 상용성 물질. 습윤제, 결합제, 충전제, 윤활제, 착색제, 붕해제, 이형제, 코팅제, 감미제, 향미제, 방향제, 방부제, 물, 염 용액, 알코올, 산화방지제, 폴리에틸렌 글리콜, 젤라틴, 락토오스, 아밀로오스, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 규산, 점성 파라핀, 하이드록시메틸셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈 등이 또한 제형 내에 존재할 수 있다. "부형제", "담체", "약제학적으로 허용되는 담체" 등과 같은 용어는 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용된다.
본 명세서에 사용된 용어 "소분자"는 펩티드, 펩티드모방체, 아미노산, 아미노산 유사체, 폴리뉴클레오티드, 폴리뉴클레오티드 유사체, 압타머, 뉴클레오티드, 뉴클레오티드 유사체, 분자량이 약 10,000 g/mol 미만인 유기 또는 무기 화합물(즉, 헤테로유기 및 유기금속 화합물 포함), 분자량이 약 5,000 g/mol 미만인 유기 또는 무기 화합물, 분자량이 약 1,000 g/mol 미만인 유기 또는 무기 화합물, 분자량이 약 500 g/mol 미만인 유기 또는 무기 화합물, 및 그러한 화합물의 염, 에스테르, 및 다른 약제학적으로 허용되는 형태를 포함할 수 있지만 이로 한정되지는 않는 화학적 작용제를 말한다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, "대상체"는 인간 또는 동물을 의미한다. 일 실시 형태에서, 동물은 영장류, 설치류, 가축, 조류, 어류 또는 수렵 동물과 같은 척추동물이다. 용어 "환자", "개체" 및 "대상체"는 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용된다.
바람직하게는, 대상체는 포유류이다. 포유류는 인간, 인간 이외의 영장류, 마우스, 래트, 개, 고양이, 말, 또는 소일 수 있지만, 이들 예로 한정되는 것은 아니다. 유리하게는 인간 이외의 포유류가 암, 자가면역 질환, 또는 염증성 질환의 동물 모델을 나타내는 대상체로서 사용될 수 있다. 게다가, 본 명세서에 기재된 방법은 가축 및/또는 애완동물을 치료하는 데 사용될 수 있다. 대상체는 남성(수컷) 또는 여성(암컷)일 수 있다. 대상체는 이전에 암 또는 자가면역 질환으로 진단받았던 자, 또는 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 합병증을 갖는 것으로 확인된 대상체일 수 있으며, 선택적으로, 그러나 이들은 이미 암 또는 자가면역 질환 또는 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 합병증에 대한 치료를 받았을 필요는 없다. 대상체는 또한 암 또는 자가면역 질환을 앓지 않는 자일 수 있다. 예를 들어, 대상체는 암 또는 자가면역 질환 또는 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 합병증에 대한 하나 이상의 위험 인자를 나타내는 자일 수 있다. 대상체는 암 또는 자가면역 질환 또는 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 합병증에 대해 무증상일 수 있다. 일 실시 형태에서, 대상체는 암 또는 자가면역 질환을 갖거나 가질 위험에 있는 자로 선택된다. 대상체는 또한 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 합병증으로 진단받았거나 이를 갖는 것으로 확인되었던 자일 수 있거나, 또는 대안적으로, 대상체는 이전에 암 또는 자가면역 질환과 관련된 하나 이상의 합병증으로 진단받았거나 이를 갖는 것으로 확인되었된 적이 없는 자일 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "알킬"은 포화 직쇄, 분지쇄, 또는 사이클릴 탄화수소 라디칼을 말한다. 용어 "알킬"은 사이클로알킬 또는 사이클릭 알킬을 포함한다. 게다가, 알킬의 골격은 하나 이상의 헤테로원자, 예컨대 O, N, 또는 S를 포함할 수 있다. 알킬 라디칼의 예에는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 네오펜틸, n-헥실, 및 n-옥틸 라디칼이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 용어 "알케닐"은 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 불포화 직쇄, 분지쇄, 또는 사이클릴 탄화수소 라디칼을 말한다. 용어 "알케닐"은 사이클로알킬 또는 사이클로알케닐을 포함한다. 게다가, 알케닐의 골격은 하나 이상의 헤테로원자, 예컨대 O, N, 또는 S를 포함할 수 있다. 알케닐 라디칼의 예에는 알릴, 부테닐, 및 헥세닐 라디칼이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 용어 "알키닐"은 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 불포화 탄화수소 라디칼을 말한다. 게다가, 알키닐의 골격은 하나 이상의 헤테로원자, 예컨대 O, N, 또는 S를 포함할 수 있다. 대표적인 알키닐 기에는 에티닐, 1-프로피닐, 1-부티닐, 이소펜티닐, 1,3-헥사디이닐, n-헥시닐, 3-펜티닐, 1-헥센-3-이닐 등이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 용어 "할로겐"은 불소, 염소, 브롬 및 요오드로부터 선택된 원자를 말한다. 용어 "할로겐 방사성 동위원소"는 불소, 염소, 브롬 및 요오드로부터 선택된 원자의 방사성 핵종을 말한다.
본 명세서에 사용된 용어 "사이클릴"은 3 내지 12개의 탄소, 바람직하게는 3 내지 8개의 탄소, 그리고 더 바람직하게는 3 내지 6개의 탄소를 갖는 포화 및 부분 불포화 사이클릭 탄화수소 기를 말하며, 여기서 사이클릴 기는 선택적으로 치환될 수 있다. 사이클릴 기의 예에는 제한 없이, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜테닐, 사이클로헥실, 사이클로헥세닐, 사이클로헵틸, 및 사이클로옥틸이 포함된다.
본 명세서에 사용된 용어 "헤테로사이클릴"은 모노사이클릭일 경우 1 내지 3개의 헤테로원자, 바이사이클릭일 경우 1 내지 6개의 헤테로원자, 또는 트리사이클릭일 경우 1 내지 9개의 헤테로원자를 갖는 비방향족 5 내지 8원 모노사이클릭, 8 내지 12원 바이사이클릭, 또는 11 내지 14원 트리사이클릭 고리 시스템을 말하며, 이때 상기 헤테로원자는 O, N, 또는 S로부터 선택되며(예를 들어, 모노사이클릭, 바이사이클릭, 또는 트리사이클릭일 경우 각각 N, O, 또는 S의 1 내지 3개, 1 내지 6개, 또는 1 내지 9개의 헤테로원자 및 탄소 원자), 여기서 각각의 고리의 0, 1, 2 또는 3개의 원자는 치환체로 치환될 수 있다. 헤테로사이클릴 기의 예에는 피페라지닐, 피롤리디닐, 디옥사닐, 모르폴리닐, 테트라하이드로푸라닐 등이 포함된다.
본 명세서에 사용된 용어 "아릴"은 6-탄소 모노사이클릭, 10-탄소 바이사이클릭, 14-탄소 트리사이클릭 방향족 고리 시스템을 말하며, 여기서 각각의 고리는 1 내지 4개의 치환체를 가질 수 있다. 아릴 기의 예에는 페닐, 메틸페닐, 나프틸, 및 안트라세닐이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 모노사이클릭일 경우 1 내지 3개의 헤테로원자, 바이사이클릭일 경우 1 내지 6개의 헤테로원자, 또는 트리사이클릭일 경우 1 내지 9개의 헤테로원자를 갖는 방향족 5 내지 8원 모노사이클릭, 8 내지 12원 바이사이클릭, 또는 11 내지 14원 트리사이클릭 고리 시스템을 말하며, 이때 상기 헤테로원자는 O, N, 또는 S로부터 선택되며(예를 들어, 모노사이클릭, 바이사이클릭, 또는 트리사이클릭일 경우 각각 N, O, 또는 S의 1 내지 3개, 1 내지 6개, 또는 1 내지 9개의 헤테로원자 및 탄소 원자), 여기서 각각의 고리는 1 내지 5개의 치환체를 가질 수 있다. 헤테로아릴 기의 예에는 피리딜, 푸릴 또는 푸라닐, 이미다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 피리미디닐, 피롤릴, 피라지닐, 티오페닐 또는 티에닐, 퀴놀리닐, 인돌릴, 티아졸릴 등이 포함된다.
본 명세서에 사용된 용어 "치환된"은 치환된 부분 상의 수소 원자 중 하나 이상을 알킬, 알케닐, 헤테로사이클로알킬, 알콕시, 아릴옥시, 하이드록시, 아미노, 아미도, 알킬아미노, 아릴아미노, 시아노, 할로, 메르캅토, 니트로, 카르보닐, 아실, 아릴 및 헤테로아릴 기로부터 독립적으로 선택되지만 이로 한정되지는 않는 치환체로 독립적으로 대체하는 것을 말한다.
본 명세서에 사용된 용어 "이성체"는 동일한 분자식을 갖지만 구조가 상이한 화합물을 말한다. 단지 입체배치(configuration) 및/또는 입체형태(conformation)만이 상이한 이성체는 "입체이성체"라 지칭된다. 용어 "이성체"는 또한 거울상 이성체를 말하는 데 사용된다.
용어 "거울상 이성질체"는 서로 거울상이고 겹쳐질 수 없는 한 쌍의 분자 이성체 중 하나를 기술하는 데 사용된다. 거울상 이성체를 지정하거나 말하는 데 사용되는 다른 용어에는 "입체이성체" (키랄 중심 주위의 상이한 배열 또는 입체화학 때문이며; 모든 거울상 이성체는 입체이성체이지만, 모든 입체이성체가 거울상 이성체인 것은 아님) 또는 "광학 이성체" (순수 거울상 이성체의 광학 활성 때문이며, 이는 상이한 순수 거울상 이성체가 평면 편광을 상이한 방향으로 회전시킬 수 있는 능력임)가 포함된다. 거울상 이성체는 일반적으로 동일한 물리적 특성, 예컨대 융점 및 비점을 가지며, 또한 동일한 분광학적 특성을 갖는다. 거울상 이성체는 평면 편광과의 그들의 상호작용에 대해, 그리고 생물학적 활성에 대해 서로 상이할 수 있다.
용어 "라세미 혼합물", "라세미 화합물" 또는 "라세미체"는 한 화합물의 2개의 거울상 이성체의 혼합물을 말한다. 이상적인 라세미 혼합물은, (+) 거울상 이성체의 광학 회전이 (-) 거울상 이성체의 광학 회전을 상쇄하도록 화합물의 양쪽 거울상 이성체의 50:50 혼합물이 존재하는 것이다.
라세미 혼합물과 관련하여 사용될 경우 용어 "분할하는" 또는 "분할"은 라세미체를 그의 2개의 거울상 형태(enantiomorphic form) (즉, (+) 및 (-); 또는 (R) 및 (S) 형태)로 분리하는 것을 말한다. 이들 용어는 또한 라세미체의 한 이성체의 생성물로의 거울상 선택적 전환을 말할 수 있다.
용어 "거울상 이성체 과잉(enantiomeric excess)" 또는 "ee"는 한 거울상 이성체가 다른 한 거울상 이성체의 과잉으로 생성되는 반응 생성물을 말하며, (+)- 및 (-)-거울상 이성체의 혼합물에 대해 정의되는데, 이때 조성은 몰 또는 중량 또는 부피 분율 F(+) 및 F(-) (여기서, F(+)와 F(-)의 합 = 1)로서 주어진다. 거울상 이성체 과잉은 * F(+) -F(-) *로 정의되며, %거울상 이성체 과잉은 100x* F(+) -F(-) *로 정의된다. 거울상 이성체의 "순도"는 그의 ee 또는 % ee 값(% ee)으로 기술된다.
"정제된 거울상 이성체" 또는 "순수 거울상 이성체" 또는 "분할된 거울상 이성체" 또는 "거울상 이성체 과잉의 화합물"로서 표현되든, 이들 용어는 한 거울상 이성체의 양이 다른 한 거울상 이성체의 양을 초과하는 것을 나타내는 것으로 의미된다. 따라서, 거울상 이성체 제제에 대해 언급할 경우, 주요 거울상 이성체의 % (예를 들어, 몰 기준 또는 중량 기준 또는 부피 기준) 및(또는) 주요 거울상 이성체의 % 거울상 이성체 과잉의 양쪽(또는 어느 한쪽)이, 그 제제가 정제된 거울상 이성체 제제를 나타내는지의 여부를 결정하는 데 사용될 수 있다.
이성체의 "거울상 이성체 순도" 또는 "거울상체 순도"라는 용어는 정제된 거울상 이성체의 정성적 또는 정량적 척도를 말하며; 통상적으로, 이 측정은 ee 또는 거울상 이성체 과잉에 기초하여 표현된다.
용어 "실질적으로 정제된 거울상 이성체", "실질적으로 분할된 거울상 이성체", "실질적으로 정제된 거울상 이성체 제제"는 한 거울상 이성체가 다른 한 거울상 이성체에 비하여 부화(enrich)되어 있으며, 더 바람직하게는 다른 한 거울상 이성체는 거울상 이성체 또는 거울상 이성체 제제의 20% 미만, 더 바람직하게는 10% 미만, 그리고 더 바람직하게는 5% 미만, 그리고 훨씬 더 바람직하게는, 2% 미만을 나타내는 제제(예를 들어, 광학적으로 비활성인 출발 재료, 기질, 또는 중간체로부터 유도됨)를 가리키는 것으로 의미된다.
용어 "정제된 거울상 이성체", "분할된 거울상 이성체" 및 "정제된 거울상 이성체 제제"는 한 거울상 이성체(예를 들어, R-거울상 이성체)가 다른 한 거울상 이성체에 비하여 부화되며, 더 바람직하게는 다른 한 거울상 이성체(예를 들어, S-거울상 이성체)는 제제의 30% 미만, 바람직하게는 20% 미만, 더 바람직하게는 10% 미만(예를 들어, 이러한 특정 경우에, R-거울상 이성체는 S-거울상 이성체가 실질적으로 없음), 그리고 더 바람직하게는 5% 미만, 그리고 훨씬 더 바람직하게는, 2% 미만을 나타내는 제제(예를 들어, 광학적으로 비활성인 출발 재료, 기질, 또는 중간체로부터 유도됨)를 가리키는 것으로 의미된다. 정제된 거울상 이성체는 다른 한 거울상 이성체가 실질적으로 없도록 합성될 수 있거나, 또는 정제된 거울상 이성체는 입체적으로 바람직한 절차(stereopreferred procedure)로 합성된 후 분리 단계가 후속될 수 있거나, 또는 정제된 거울상 이성체는 라세미 혼합물로부터 유도될 수 있다.
기호 "E"로 표시된 거울상 이성체 비로도 불리는 용어 "거울상 선택성"은 라세미 기질로부터 한 거울상 이성체를 생성물 라세미 혼합물 내의 다른 한 거울상 이성체에 대해 발생시킬 수 있는 효소의 선택적 능력을 말한다. 비선택적 반응은 E가 1이며, E가 20 초과인 분할이 일반적으로 합성 또는 분할에 유용한 것으로 여겨진다. 거울상 선택성은 대상이 되는 거울상 이성체들 사이의 전환율의 차이에 놓여 있다. 거울상 이성체 중 하나가 부화된 반응 생성물이 수득되며; 대조적으로, 남아 있는 기질은 다른 한 거울상 이성체가 부화된다. 실용적으로는, 거울상 이성체 중 하나가 크게 과잉으로 수득될 것이 일반적으로 요망된다. 이는 특정 전환도에서 전환 공정을 종결시킴으로써 달성된다.
본 발명의 화합물은 전구약물 형태로 존재할 수 있다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, "전구약물"은 그러한 전구약물이 대상체에게 투여될 경우 생체내 본 발명의 방법에 사용된 활성 약물 또는 다른 화합물로 생체내에서 대사되는 활성 부모 약물 또는 화합물을 방출하는 임의의 캐리어를 포함하고자 한다. 전구약물은 약제의 다수의 바람직한 품질(예: 용해성, 생체이용률, 제조성 등)을 향상시키는 것으로 알려져 있기 때문에, 본 발명의 일부 방법에 사용된 화합물은, 필요에 따라, 전구약물 형태로 전달될 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 발명의 화합물의 전구약물뿐만 아니라 전구 약물의 전달 방법도 고려한다. 본 발명에 사용된 화합물의 전구약물은 화합물 내에 존재하는 작용기를 개질하되, 일상적인 조작으로 또는 생체내에서 그 개질체가 부모 화합물로 절단되는 방법으로 개질함으로써 제조될 수 있다. 따라서 전구약물에는 예를 들어, 전구약물이 대상체에게 투여될 경우 절단되어 유리 하이드록실산, 유리 아미노산, 또는 카르복실산을 형성하는 임의의 기에 각각 하이드록시, 아미노, 또는 카르복시 기가 결합된 본 명세서에 기재된 화합물이 포함된다. 다른 예에는 알코올 및 아민 작용기의 아세테이트, 포르메이트, 및 벤조에이트 유도체; 및 알킬, 카르보사이클릭, 아릴, 및 알킬 아릴 에스테르, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 사이클로프로필, 페닐, 벤질, 및 페네틸 에스테르 등이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은, 예를 들어 비독성 유기 또는 무기 산으로부터의, 치료제 또는 화합물 또는 전구약물의 무기 및 유기 염, 통상적인 비독성 염 또는 4급 암모늄 염을 말한다. 이들 염은 투여 비히클 또는 투여형 제조 공정에서 동일계내에서(in situ) 제조될 수 있거나, 또는 유리 염기 또는 산 형태의 치료제를 적합한 유기 또는 무기 산 또는 염기와 별도로 반응시키고, 이렇게 형성된 염을 후속 정제 동안 단리함으로써 제조될 수 있다. 통상적인 비독성 염에는 황산, 설팜산, 인산, 질산 등과 같은 무기 산으로부터 유도된 염; 및 아세트산, 프로피온산, 석신산, 글리콜산, 스테아르산, 락트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 팔미트산, 말레산, 하이드록시말레산, 페닐아세트산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 설파닐산, 2-아세톡시벤조산, 푸마르산, 톨루엔설폰산, 메탄설폰산, 에탄디설폰산, 옥살산, 이소티온산, 아디프산, 아스파르트산, 카르본산, 글루콘산, 글루쿠론산, 말론산, 올레산, 파모산 등과 같은 유기 산으로부터 제조된 염이 포함된다. 예를 들어, 문헌[Berge et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm . Sci . 66:1-19 (1977)] 또는 [P. H. Stahl and C. G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Weinheim/Zuerich:Wiley-VCH/VHCA, 2002]을 참조하며, 이들 내용은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 용어 "염" 또는 "염들"은 "약제학적으로 허용되는 염"과 상호교환가능하게 사용된다.
본 명세서에 기재된 태양의 일부 실시 형태에서, 대표적인 염에는 브롬화수소산염, 염산염, 황산염, 중황산염, 인산염, 질산염, 아세트산염, 석신산염, 발레르산염, 올레산염, 팔미트산염, 스테아르산염, 라우르산염, 벤조산염, 락트산염, 토실산염, 시트르산염, 말레산염, 푸마르산염, 석신산염, 타르트산염, 나프틸산염, 메실산염, 인산일수소염, 글루코헵톤산염, 락토비온산염, 라우릴 설폰산염, 피로인산염, 피로황산염, 및 나트륨 염 등이 포함된다.
확인된 모든 특허 및 다른 간행물은, 예를 들어 본 명세서에 기재된 기술과 함께 사용될 수 있는 그러한 간행물에서 기술된 방법론을 설명하고 개시하려는 목적으로 본 명세서에 그 전문이 참고로 명시적으로 포함된다. 이들 간행물은 오로지 본 출원의 출원일 전에 그들의 개시만을 위해 제공된다. 이에 관하여 어떤 것도, 본 발명자들이 종래 발명에 의해 또는 임의의 다른 이유로 그러한 개시보다 선행되지 않음을 인정하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 이들 문헌의 내용에 관한 표현 및 날짜에 관한 모든 진술은 출원인이 이용가능한 정보에 기초하며, 이들 문헌의 내용 또는 날짜의 정확함에 대해 어떠한 것도 인정하는 것으로 여겨지지 않는다.
DNA -편집 효소 및 이본쇄 DNA 절단 수복
본 명세서에 기재된 기술의 실시 형태는 아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사(APOBEC)의 구성원인 DNA-편집 효소인 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID, 또는 AICDA, 이는 ARP2, CDA2 또는 HIGM2로도 알려짐)가 저하된 상동적 재조합 능력을 갖는 세포(예: 저하된 DNA 이본쇄 절단 수복 능력을 갖는 세포)에서 폭넓은 게놈성 절단 및 세포사를 일으킬 것이라는 발견에 기초한다. 따라서, 세포사를 일으키는 방법이 본 명세서에 제공되며, 본 방법은 세포에서 DNA-편집 효소(예: AID)의 증가된 발현을 검출하는 단계 및 이후에 세포를 이본쇄 절단 수복의 억제제와 접촉시키는 단계를 포함하며; 그럼으로써 세포사가 일어난다. 따라서, 세포사를 일으키는 방법이 본 명세서에 제공되며, 본 방법은 세포에서 DNA-편집 효소(예: AID)의 발현을 증가시키는 단계 및 이후에 세포를 이본쇄 절단 수복의 억제제와 접촉시키는 단계를 포함하며; 그럼으로써 세포사가 일어난다. 따라서, 세포사를 일으키는 방법이 본 명세서에 제공되며, 본 방법은 DNA 편집 효소(예: AID)의 치료학적 유효량을 세포에 투여하는 단계 및 이후에 세포를 이본쇄 절단 수복의 억제제와 접촉시키는 단계를 포함하며; 그럼으로써 세포사가 일어난다.
AICDA 유전자(NCBI 유전자 번호: 57379)에 의해 암호화된 AID는 적절한 B-세포 기능에 필요하며, 중심모세포(centroblast) B-세포 내에서 가장 현저히 발현된다. 단백질은 체세포 초돌연변이, 유전자 변환, 및 면역글로불린 유전자의 클래스-스위치 재조합(class-switch recombination)에 관여한다. AID는 정상적으로는 항원-활성화된 배중심(germinal center) B-세포에서 거의 독점적으로 발현되는데, 여기서 그것은 면역글로불린 동형 클래스 스위칭을 개시한다(문헌[Manis et al. 2002, Trends Immunol, 23, 31-39]; [Chaudhuri and Alt, Nat Rev Immunol, 2004, 4, 541-552]; [Longerich et al., CurrOpinImmunol, 2006, 18, 164-174]; [Chaudhuri et al., Adv Immunol 2007, 94, 157-214]). AID는 활성화된 B 세포에서의 면역글로불린 클래스 스위칭 및 체세포 초돌연변이에 필요하다. AID 발현은 CD40 리간드, B-세포 수용체, IL4R, 또는 톨-유사 수용체(Toll-like receptor) 자극에 의해 조절된다(문헌[Crouch et al., J Exp Med 2007 204:1145-1156]; [Muramatsu et al., J Biol Chem 1999 274:18470-6]). 활성화 후에, AID는 과도적으로 상향조절되고, 면역글로불린 유전자 내에서 비특이적 방식으로 서열 내 DNA 이본쇄 절단 및 점 돌연변이를 유도하고, 이어서 하향조절된다(문헌[Longerich et al., CurrOpinImmunol, 2006, 18, 164-176]; [Chaudhuri et al., Adv Immunol 2007, 94, 157-214]). 전체적으로, AID는 임의의 주어진 시간에서 정상 세포(항원-활성화된 B-세포)의 미소한 집단에서만 활성이다. AID에 의해 제어된 게놈성 재배열 및 돌연변이는 항원-인식 다양성, 수용체 편집, 및 기능적 적응 면역에 필요한 림프성 이펙터(lymphoid effector) 기능의 발생으로 이어진다(문헌[Mills, et al. Immunol Rev 2003 194:77-95]). 최근에, AID가 표적을 벗어난 점 돌연변이 활성을 갖는다는 것으로 보고된 바 있다(문헌[Liu, M. et al., Nature 2008, 451, 841-845]; [Liuand Schatz, Trends Immunol. 2009, 30, 173-181]; [Perez-Duran et al., Carcinogenesis. 2007, 28(12):2427-33]). Robbiani et al.은 B-세포에서 AID의 표적을 벗어난 활성, 특히 c-myc/IgH 전좌를 보고한 바 있다(문헌[Robbiani et al., Mol Cell 2009, 36(4):631-41]). AID 발현은 Bcl6 유전자 도입 마우스에서 종양 발생의 속도를 가속시킨다(문헌[Pasqualucci et al., 2008, Nat. Genet. 40, 108-112]). 그러나, 탈조절된 AID는 B 세포에서 그대로는 악성 종양 또는 전좌-관련 암을 반드시 일으키지는 않는다(문헌[Muto et al., 2006, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103, 2752-2757]; [Okazaki et al., 2003, J. Exp. Med. 197, 1173-1181]; [Shen et al., 2008, Mol. Immunol. 45, 1883-1892]). 게다가, c-myc/IgH 전좌에서의 그의 필수적인 역할에도 불구하고, AID는 각각 IL-6 유전자 도입 마우스 또는 프리스탄-처리된 마우스에서 형질세포증가증 또는 형질세포종의 발생에 필요하지 않다(문헌[Kovalchuk et al., 2007, J. Exp. Med. 204, 2989-3001]; [Ramiro et al., 2004, J. Exp. Med. 200, 1103-1110]). 그러나, 대부분의 인간 B 세포 림프종-관련 전좌는 c-myc를 수반하지 않으며, 다수는 Ig 유전자를 수반하지 않는다(문헌[Kuppers, 2005, Oncogene 20, 5580-5594]).
AID의 과다발현이 만성 림프구성 백혈병(CLL)에서 보고된 바 있다(문헌[Hancer et al. Leuk Lymphoma. 2011 Jan; 52(1):79-84]; [Heintel et al., Leukemia. 2004 Apr; 18(4):756-62]). 또한, AID 발현은 골수성 백혈병(myeloid leukemia)에서의 치료 내성 및 모세포 발증 B 계통 백혈병(blast crisis B lineage leukemia)과 상관관계가 있는 것으로, 그리고 만성 B 림프구성 백혈병에서의 전반적으로 불량한 예후와 관련된 것으로 밝혀져 있다(문헌[Mao et al., Br J Dermatol 2001, 145:117-122]; [Chaudhuri et al., Nature 2004, 430:992-8]). 다양한 암으로부터의 종양 세포에서의 AID의 추가의 발현이 보고된 바 있으며, 이에는 하기가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다: 폐암, 유방암, 위암, 결장암, 장관암, 간암 및 담낭암종(문헌[Greeve et al., Blood 2003, 1010, 3574-3580]; [Feldhahn et al., J Exp Med 2007, 204, 1157-1166]; [Kotani et al., PNAS USA 2007, 104, 1616-1620]; [Engels et al., 2008, ApplImmunohistochem Mol Morphol16, 521-529]; [Klemm et al., 2009, Cancer Cell 6, 232-245]; [alacios et al., 2010, Blood 115(22), 4488-4496]; [Leuenberger et al., 2009, Mod Pathol 32, 177-186]; [Gruber et al., 2010, Cancer Res 70, 7411-7420]); 염증성 암(문헌[Marusawa 2008, Int J Biochem Cell Biol.40, 399-402]); 여포성 림프종(문헌[Hardianti et al., 2004, Leukemia 18, 826-831]; [Shikataet al., 2012, Cancer Sci. 103(3):415-21]); 갑상선암(문헌[Qiu et al. 2012, Mod Pathol 25(1), 36-45]); 유방암(문헌[Borchert et al. 2011, BMC Cancer 11:347]; [Marusawa, et al., 2011, Adv Immunol 111:109-41]; [Zhang et al. 2012, Hum Pathol 43(3):423-34]; [Komori et al., 2008, Hepatology 47(3):888-896]; [Hockley 2010, Leukemia 24(5):1084-6]); 성체 T-세포 백혈병(문헌[Nakamura et al., 2011, Br J Dermatol. 165(2):437-9]). 전술한 단락 내의 모든 참고문헌은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
상승된 수준의 AID가 관절염(문헌[Xu et al. Scand. J. Immunol. 2009, 296, 2033-6])에서, 그리고 MRL/Fas(lpr/lpr) 마우스 루푸스 모델(문헌[White et al. 2011, Autoimmunity 44(8), 585-98])에서 보고된 바 있다. 전술한 단락 내의 모든 참고문헌은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
DSB 수복이 억제될 경우, AID에 의해 발생되는 DSB의 정도가 이전에 의심되었던 것보다 훨씬 더 높고 게놈성 손상의 정도가 너무 심각해서 세포사로 이어진다는 것이 본 명세서에 입증되어 있다. 따라서, 본 명세서에 기재된 기술의 일 실시 형태에는 치료 방법이 제공되어 있으며, 본 방법은 (a) 상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준의 AID란, AID의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 AID의 수준보다 더 높은 수준의 것이다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID를 발현하는 세포는 B 세포이다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID를 발현하는 B 세포는 암성 B 세포 또는 자가면역 질환과 관련된 B 세포이다. 일부 실시 형태에서, 대상체는 인간 대상체일 수 있다.
본 명세서에 제공된 방법은 이본쇄 절단 수복을 억제함으로써 암 및/또는 자가면역 장애를 치료한다. 이러한 억제는 AID를 발현하는 세포에 치명적인 것으로 입증되는데, 그 이유는 AID가 폭넓은 게놈성 절단을 발생시키고, 이본쇄 절단 수복의 억제제에 의한 치료가 세포 그 자체에 의해 발생되고 있는 이들 병변의 수복을 방해하기 때문이다. 이는 대상체에서 세포사로 이어지는데, 이때 이러한 세포사는 AID를 발현하는 세포, 예를 들어 암성 B 세포 및/또는 자가면역 세포에 특이적이다. 따라서, 본 명세서에 기재된 바와 같이, 일 실시 형태에는 건강한 조직에서의 의도하지 않은 부작용을 줄이면서 특정 병든 세포의 자기-파괴를 선택적으로 유도하는 치료 패러다임이 제공되어 있다.
RAD51-매개 쇄 교환 수복은 상동적 재조합의 구성요소이며, 이는 조사, 가교결합성 약물에 의해 발생되거나 AID와 같은 효소의 활성의 결과로서 발생되는 DNA 이본쇄 절단(DSB)을 수복하는 데 사용된다(문헌[Klein2008, DNA Repair, 7:686-93]).
RAD51(NCBI 유전자 번호: 5888)은 ATP-의존성 DNA 결합 활성을 갖는 진핵생물의 재조합효소이며, 포유류에서 감수분열성 재조합 및 DNA 수복에서 역할을 한다. RAD51은 DSB의 3'-꼬리(tailed) 일본쇄에 결합하고, 상동적 서열과의 대합(pairing)을 촉진시킨다. 추가의 단계는 쇄 침입 및 수복을 포함한다(문헌[San Filippo et al., Annual Review of Biochemistry 2008, 77:229-257] 참조). 추가로, RAD51은 항체 성숙 동안 클래스 스위치 재조합에서 기능을 갖는 것으로 밝혀져 있다(문헌[Li et al., PNAS 1996, 93:10222-7]). 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 RAD51의 발현 또는 활성을 억제한다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 하기를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 단백질 및/또는 전사물 중 하나 이상의 발현 또는 활성을 억제한다: Rad51AP1 (NCBI 유전자 번호: 10635; 예: 서열 번호: 007 (mRNA) 및 서열 번호: 114 (단백질)); Rad51B (NCBI 유전자 번호: 5890; 예: 서열 번호: 008 (mRNA) 및 서열 번호: 115 (단백질)); Rad51C (NCBI 유전자 번호: 5889 예: 서열 번호: 0163 (mRNA; NM_058216) 및 서열 번호: 0164 (단백질; NP_478123) 또는 서열 번호: 0165 (mRNA; NM_002876) 및 서열 번호: 0166 (단백질; NP_002867); Rad51D (NCBI 유전자 번호: 5892; 예: 서열 번호: 009 (mRNA) 및 서열 번호: 116 (단백질)) ; XRCC2 (NCBI 유전자 번호: 7516; 예: 서열 번호: 010 (mRNA) 및 서열 번호: 117 (단백질)); XRCC3 (NCBI 유전자 번호: 7517; 예: 서열 번호: 011 (mRNA) 및 서열 번호: 118 (단백질)); RAD54 (NCBI 유전자 번호: 546; 예: 서열 번호: 012 (mRNA) 및 서열 번호: 119 (단백질)); RAD52 (NCBI 유전자 번호: 5893; 예: 서열 번호: 013 (mRNA) 및 서열 번호: 120 (단백질)); BRCA1 (NCBI 유전자 번호: 672; 예: 서열 번호: 014 (mRNA) 및 서열 번호: 121 (단백질)); BRCA2 (NCBI 유전자 번호: 675; 예: 서열 번호: 015 (mRNA) 및 서열 번호: 122 (단백질)); ATM (NCBI 유전자 번호: 472; 예: 서열 번호: 016 (mRNA) 및 서열 번호: 123 (단백질)); ATR (NCBI 유전자 번호: 545; 예: 서열 번호: 017 (mRNA) 및 서열 번호: 124 (단백질)); MRE11 (NCBI 유전자 번호: 4361; 예: 서열 번호: 018 (mRNA) 및 서열 번호: 125 (단백질)); RAD50 (NCBI 유전자 번호: 10111: 예: 서열 번호: 019 (mRNA) 및 서열 번호: 126 (단백질)); NBS1 (NCBI 유전자 번호: 4683; 예: 서열 번호: 020 (mRNA) 및 서열 번호: 127 (단백질)); WRN (NCBI 유전자 번호: 7486; 예: 서열 번호: 021 (mRNA) 및 서열 번호: 128 (단백질)); BLM (NCBI 유전자 번호: 641; 예: 서열 번호: 022 (mRNA) 및 서열 번호: 129)); RECQ4 (NCBI 유전자 번호: 9401; 예: 서열 번호: 023 (mRNA) 및 서열 번호: 130 (단백질)); LIG4 (DNA 리가제 4; NCBI 유전자 번호: 3981; 예: 서열 번호: 024 (mRNA) 및 서열 번호: 131 (단백질)); XRCC4 (NCBI 유전자 번호: 7518; 예: 서열 번호: 025 (mRNA) 및 서열 번호: 132 (단백질)); PRKDC (DNA-PKcs7; XRCC7; NCBI 유전자 번호: 5591; 예: 서열 번호: 026 (mRNA) 및 서열 번호: 133 (단백질)); DCLRE1C (NCBI 유전자 번호: 64421; 예: 서열 번호: 027 (mRNA) 및 서열 번호: 134 (단백질)); XRCC6 (Ku70; NCBI 유전자 번호: 2547; 예: 서열 번호: 028 (mRNA) 및 서열 번호: 135 (단백질)); XRCC5 (Ku80; NCBI 유전자 번호: 7520; 예: 서열 번호: 029 (mRNA) 및 서열 번호: 136 (단백질)) 및/또는 XLF (NHEJ1; XRCC4-유사 인자; NCBI 유전자 번호: 79840; 예: 서열 번호: 030 (mRNA) 및 서열 번호: 137 (단백질)).
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 유전자에 의해 암호화된 하나 이상의 단백질 및/또는 전사물의 발현 또는 활성을 억제한다: Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; 및 XLF.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 유전자에 의해 암호화된 하나 이상의 단백질 및/또는 전사물의 발현 또는 활성을 억제한다: Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4; 및 PRKDC.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 하기를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 단백질 및/또는 전사물 중 하나 이상에 결합한다: Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; 및/또는 Rad51D.
일부 실시 형태에서, 이본쇄 절단 수복의 억제제는 Rad51 패밀리 구성원(예: Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3)의 발현 또는 활성을 억제할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 이본쇄 절단 수복의 억제제는 비상동적 말단 결합(NHEJ) 단백질 구성원(예: LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; XLF)을 억제할 수 있다.
효모에서, Rad52는 Rad51의 ssDNA에 대한 결합을 매개하는 것으로 밝혀져 있다. BRCA2 또한 재조합 매개체로서의 기능, 즉 RAD51의 ssDNA에 대한 결합의 촉진 기능 및 경우에 따라서는 RAD51의 핵에 대한 전좌의 매개 기능을 하는 것으로 나타난다. RAD51B, Rad51C, RAD51D, XRCC2 및 XRCC3은 RAD51의 파랄로그이며, 이들 모두는 DSBR 경로의 HR에서 기능하고 있다(문헌[Yokoyama et al. J Biol Chem. 2003, 278(4):2767-72]; [Thacker, Trends Genet. 1999, 15:166-168]; [Schild D, et al., J. Biol. Chem. 2000, 275:16443-16449]). Rad51AP1은 분지된 DNA 분자에 대한 결합을 촉진시키는 RAD51 관련 단백질이다(문헌[Modesti et al., Mol Cell 2007, 28:468-481]; [Dunlop et al., 2012, J Biol Chem 6, 287, 12343-7]). RAD54는 dsDNA-의존성 ATPase 활성을 갖는 단백질이며, 이 활성은 RAD51의 존재에 의해 향상된다. 효모에서, Rad54는 DNA 상동성에 대한 탐색, 염색질의 재구성(remodeling), 침입 복합체의 형성, 및 dsDNA로부터의 Rad51의 최종적인 제거를 촉진시킨다. 인간에서, 그것은 DNA 수복 및 재조합에서의 핵심 중간체인 홀리데이 접합(Holliday junction)의 분지 이동에서 기능하는 것으로 밝혀져 있다(문헌[San Filippo et al., Annual Review of Biochemistry 2008, 77:229-257]; [Mazina et al., 2012, J Biol Chem 6, 287(15):11820-32]). BRCA1은 DSB의 RAD51-매개 수복을 촉진시키고 교차형(crossover type) 수복을 억제한다(문헌[Cousineau et al., Cancer Res 2005 65:11384-91]). ATM 및 ATR은 단백질 키나제이다. ATM은 DSB가 검출될 때 표적을 인산화하고, 세포 주기를 정지한다. MRE11, RAD50 및 NBS1은 DSB에 ATM을 동원하는 MRN 복합체를 형성한다. 대조적으로, ATR은 ssDNA에 의해 활성화된다. WRN, BLM, 및 RECQ4는 RECQ 헬리카제 패밀리의 구성원이다. WRN은 헬리카제 및 엑소뉴클레아제이며, 이는 HR 동안 형성된 홀리데이 접합을 풀며, 이에 의해 부적절한 재조합을 감소시키는 것으로 여겨진다(문헌[Yang et al., J Biol Chem 2002, 277, 31980-7]). BLM 및 RECQ4는 둘 모두 헬리카제이며, 이는 RAD51과의 상호작용에 의해 활성화된다(문헌[Brosh et al., 2000, J Biol Chem, 275:23500-8]; [Rossi et al., 2010, DNA Repair 9:796-804]).
XRCC2는 포유류의 상동적-재조합 인자의 RAD51 패밀리의 핵심 구성원이며(문헌[Thacker, Biochimie 1999, 81:77-85]; [Braybrooke et al., J Biol Chem 2000, 275:29110-6]; [Deans et al., EMBO J 2000, 19:6675-6685]), 그의 DSB 수복 기능에 대해 알려져 있다(문헌[Johnson et al., Nature 1999, 401:397-9]). 인간 게놈에서, XRCC2는 다양한 암에서 빈번하게 재배열되는 영역인 염색체 7의 시토밴드(cytoband) q36 (7q36) 상에 위치된다(문헌[Dohner et al., Blood 1998, 92:4031-5]; [Simmons et al., Leukemia 2002, 16:2408-2416]; [Mao et al., Br J Dermatol 2001, 145:117-122]). XRCC2-결핍 세포는 증식 결함, 이온화 방사선 및 다른 DNA-손상제에 대한 과다감수성, 및 자발적 염색체 불안정성을 보여준다(문헌[Deans et al., EMBO J 2000, 19:6675-6685]; [Liu et al., J Biomed Biotechnol 2002, 2:106-113]; [Deans et al., Cancer Res 2003, 63:8181-7]). XRCC2는 초기에 발생하는 B 세포에서 성공적인 증식 및 게놈 완전성에 필요하다(문헌[Caddle, et al., 2008, Mol. Cell. Biol. 28, 2295-2303]). Xrcc2의 동형접합성 결실을 갖는 마우스는 임신 중기(mid-gestation) 동안 사망하는데, 이는 폭넓은 세포 아폽토시스와 관련된다(문헌[Deans et al., EMBO J 2000, 19:6675-6685]; [Orii et al., PNAS 2006, 103:10017-10022]; [Adam et al., DNA Repair(Amst.) 2007, 6:224-234]). 본 명세서 및 문헌[Hasham et al. (Nature Immunology, 2010, 11 (9), 820-826)]에 기재된 바와 같이, 본 발명자들은 XRCC2-결함 성숙 B 세포에서의 AID 발현이 폭넓은 고도로 세포독성인 DSB로 이어진다는 것을 알아내었다.
XRCC3은, 상동적 재조합에 참여하여 염색체 안정성을 유지하고 DNA 손상을 수복하는 RecA/Rad51-관련 단백질 패밀리의 구성원이다. XRCC4는 DNA 이본쇄 절단 수복 유전자이며, 게놈 안정성에 중요하다. 이는 DNA 리가제 IV와 상호작용하는 것으로 알려져 있다.
DSB 수복 억제제
특정 실시 형태에서, 예를 들어 RAD51-매개 쇄 교환 수복의 억제제인 DSB 수복 억제제는 스틸벤 유도체일 수 있다. 스틸벤 유도체에는 스틸벤, 트랜스-스틸벤 유도체, 시스-스틸벤 유도체, 시스-스틸벤 옥사이드, 트랜스-스틸벤 옥사이드, 4,4'-비스(2-벤족사졸릴)스틸벤, 4-니트로-4'-(옥타데실아미노)스틸벤, α, β-비스(페닐아조)스틸벤, 메소-1,2-디브로모-1,2-디페닐에탄, (Z)-1,2-디페닐-1,2-에틸렌디보론산 비스(피나콜) 에스테르, 2,4-디니트로-3',4'-(메틸렌디옥시)-스틸벤, 폴리메톡시스틸벤, 디하이드로스틸벤, 콤브레타스타틴, 콤브레타스타틴 A-4,3,5,4'-트리메톡시-트랜스-스틸벤, 3,4,5,4'-테트라메톡시스틸벤, 레스베라트롤, 디에틸스틸보에스트롤, 2,4,6-트리하이드로페난트렌-2-O-글루코사이드, 레스베라트롤-2-C-글루코사이드, 시스-ε-비니페린 디글루코사이드, 트랜스-ε-비니페린 디글루코사이드, 팔리돌 글루코사이드, 팔리돌 디글루코사이드, 시스-3,4',5-트리메톡시-3'-아미노스틸벤, 시스-3,4',5-트리메톡시-3'-하이드록시스틸벤, 콜히친, 콤브레타스타틴 A4-포스페이트, 데속시라폰티제닌(desoxyrhapontigenin), 디메틸아미노니트로스틸벤, 라폰티제닌, 피세아타놀, 4-하이드록시스틸벤, 4,4'-디하이드록시스틸벤, 3,5-디하이드록시스틸벤, 트리메틸레스베라트롤, 실바미딘, 디에틸스틸베스트롤, 파르테노시신, 팔리돌, 쿼드란굴라린 A, 쿼드란굴라린 B, 쿼드란굴라린 C, ZD6126이 포함될 수 있지만 이로 한정되는 것은 아니다. 스틸벤 유도체의 비제한적인 예에는 미국 특허 제4,723,034호, 제4,326,055호, 제4,723,028호, 제4,892,949호, 제6,562,834호, 제5,589,506호, 제7,655,696호, 제4,996,237호, 제5,561,122호, 제5,525,632호, 제5,430,062호, 제5,731,353호, 제7,781,580호, 미국 특허 출원 공개 US2004/0147788호, US2008/071364호, 일본 특허 출원 공개(Kokai) JP-A-7-225558호, JP-A-8-301831호 및 JP-A-10-81673호, 문헌[Roberti et al., J. Med. Chem 2003 46:3546-54]; [Baderschneider and Winterhalter J of Agricultural and Food Chem 2000 48:2681-6]; [Hillis and Ishikura, Journal of Chromatography A 1968 32:323-336]; [Kim et al., J Med Chem 2002 45:160-4]; [Young et al., J Am Chem Soc 1972 94:3976-81]; [Iliya et al., Phytochemistry 2003 62:601-6]; [Aguamah et al., Phytochemistry 1981 20:1381-3]; 및 [Kim et al., J Biol Chem2002 277:16340-4]에 개시된 구조가 포함되며, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 공지된 화합물뿐만 아니라 미래에 발견될 스틸벤 화합물도 그러한 새롭게 발견된 화합물이 스틸벤 유도체로 분류된다면, 본 명세서에 기재된 기술에서의 스틸벤 유도체에 포함된다. 본 명세서에 기재된 기술의 스틸벤 유도체는 또한 대상체 체내에서 스틸벤 유도체로 전환될 수 있는 바이오전구체 또는 화합물을 포함한다. 스틸벤 유도체(이는 약제학적으로 허용되는 염, 에스테르, 수화물 및 용매화물의 형태일 수 있음)의 제조업체, 및 스틸벤 유도체, 그의 불활성인 약제학적으로 허용되는 담체(들) 및/또는 희석제(들)를 포함하는 약제학적 조성물의 제조업체는 미국 특허 제5,525,632호 및 상기에 열거된 간행물에 개시되어 있다. 특정 스틸벤 유도체는 또한 구매가능한데, 예를 들어 시스-스틸벤 (#S2259 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich), 미국 미주리주 세인트 루이스 소재), 트랜스-스틸벤 (#S6382 시그마-알드리치, 미국 미주리주 세인트 루이스 소재), 레스베라트롤 (#R5010 시그마-알드리치, 미국 미주리주 세인트 루이스 소재), 또는 4,4'디이소티오시아노스틸벤-2,2'-디설폰산 (#D3514 시그마-알드리치, 미국 미주리주 세인트 루이스 소재)이 있다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 RAD51-매개 쇄 교환 수복의 억제제인 4,4'디이소티오시아노스틸벤-2,2'-디설폰산 (DIDS; 화학식 XXVI)일 수 있다.
[화학식 XXVI]
Figure pct00001
일부 실시 형태에서는, 화학식 V의 스틸벤 또는 그의 유도체가 본 명세서에 기재된다:
[화학식 V]
Figure pct00002

R1은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R1은 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R1은 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
R2는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R2는 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R2는 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
R3은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R3은 수소, 헤테로사이클릴, OR21, NO2, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHSO2R21, N(R22)2, NHC(O)N(R22)2, NHC(S)N(R22)2, 또는 NHSO2N(R22)2이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R3은 수소, OH, OCH3, N=C=S, NH2, NHCH3, NO2, NH-옥타데칸, NHC(O)CH3, NHC(O)CH(CH3)2, NHC(O)CH2OCH3, NHSO2CH3, NHSO2-사이클로프로판, NHSO2CH(CH3)2, NHSO2N(CH3)2, NHC(S)NHCH3, NHC(S)NHCH(CH3)2, NHC(S)NH-사이클로프로판, NHC(O)NHCH3, NHC(O)NHCH(CH3)2, 벤족사졸릴, 또는 NHC(O)NH-사이클로프로판이다.
R4는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R4는 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R4는 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
R5는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R5는 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R5는 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
R6은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R6은 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R6은 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
R7은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R7은 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R7은 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
R8은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R8은 수소, 헤테로사이클릴, OR21, NO2, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHSO2R21, N(R22)2, NHC(O)N(R22)2, NHC(S)N(R22)2, 또는 NHSO2N(R22)2이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R8은 수소, OH, OCH3, N=C=S, NH2, NHCH3, NO2, NH-옥타데칸, NHC(O)CH3, NHC(O)CH(CH3)2, NHC(O)CH2OCH3, NHSO2CH3, NHSO2-사이클로프로판, NHSO2CH(CH3)2, NHSO2N(CH3)2, NHC(S)NHCH3, NHC(S)NHCH(CH3)2, NHC(S)NH-사이클로프로판, NHC(O)NHCH3, NHC(O)NHCH(CH3)2, 벤족사졸릴, 또는 NHC(O)NH-사이클로프로판이다.
R9는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R9는 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R9는 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
R10은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R10은 수소, OR21, NO2, N(R22)2, OP(O)(OH)2, 또는 SO3R21이며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 일부 실시 형태에서, R10은 수소, OH, OCH3, NO2, NH2, OP(O)(OH)2, SO3H, 또는 SO3Na이다.
X는 C(R21)2, -C(O)N(R22)-, -C(O)-, -C(O)O-, -S(O)-, -SO2- -CH(R11)CH(R12)-, -C(R11)=C(R12)-, 및
Figure pct00003
로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는 X는 -C(R11)=C(R12)- 또는
Figure pct00004
이다. X가 -C(R11)=C(R12)- 또는
Figure pct00005
일 경우, 치환체 R11 및 R12 는 시스- 또는 트랜스-형태 중 어느 하나로 존재할 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 추가로, X가
Figure pct00006
일 경우, R11 및 R12가 부착된 탄소는 독립적으로 R 또는 S 배치를 가질 수 있다. 따라서, X는
Figure pct00007
,
Figure pct00008
또는
Figure pct00009
일 수 있다.
R11은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, R11은 수소, C1-C10 알킬, 할로겐, OR21, 사이클릴, 또는 헤테로사이클릴이다. 일부 실시 형태에서, R11은 수소, 메틸, 에틸, OH, OCH3, Br, N2-페닐,
Figure pct00010
이다.
R12는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 일부 실시 형태에서, R12는 수소이다.
추가로, R11 및 R12는 둘 모두 동일하거나 둘 모두 상이할 수 있다. 일부 실시 형태에서, R11 및 R12는 둘 모두 수소이다. 일부 실시 형태에서, X는 -CH2CH2-, -CH=CH-,
Figure pct00011
, 또는
Figure pct00012
이다.
각각의 R21은 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다. 바람직하게는, R21은 수소 또는 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬렌이다. 일부 실시 형태에서, R21은 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 펜틸, t-부틸, 사이클로프로필, 또는 CH2OCH3일 수 있다.
각각의 R22는 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다. 바람직하게는, R22는 수소 또는 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬렌이다. 일부 실시 형태에서, R22는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 펜틸, t-부틸, 또는 사이클로프로필일 수 있다.
R3 및 R8은 동일하거나 상이할 수 있다. 따라서, 일부 실시 형태에서, R3 및 R8은 수소, 헤테로사이클릴, OR21, NO2, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHSO2R21, N(R22)2, NHC(O)N(R22)2, NHC(S)N(R22)2, 및 NHSO2N(R22)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 R21은 H 또는 C1-C4알킬일 수 있고, R22는 H 또는 C1-C10 알킬일 수 있다. 예를 들어, R3 및 R8은 수소, OH, OCH3, N=C=S, NH2, NHCH3, NO2, NH-옥타데칸, NHC(O)CH3, NHC(O)CH(CH3)2, NHC(O)CH2OCH3, NHSO2CH3, NHSO2-사이클로프로판, NHSO2CH(CH3)2, NHSO2N(CH3)2, NHC(S)NHCH3, NHC(S)NHCH(CH3)2, NHC(S)NH-사이클로프로판, NHC(O)NHCH3, NHC(O)NHCH(CH3)2, 벤족사졸릴, 또는 NHC(O)NH-사이클로프로판으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
일부 실시 형태에서, R3 및 R8 중 적어도 하나는 수소가 아니다. 일부 실시 형태에서, R3 및 R8 둘 모두는 수소가 아니다.
일부 실시 형태에서, R3 및 R8은 상이하며, 수소, OH, OCH3, N=C=S, NH2, NHCH3, NO2, NH-옥타데칸, NHC(O)CH3, NHC(O)CH(CH3)2, NHC(O)CH2OCH3, NHSO2CH3, NHSO2-사이클로프로판, NHSO2CH(CH3)2, NHSO2N(CH3)2, NHC(S)NHCH3, NHC(S)NHCH(CH3)2, NHC(S)NH-사이클로프로판, NHC(O)NHCH3, NHC(O)NHCH(CH3)2, 벤족사졸릴, 또는 NHC(O)NH-사이클로프로판으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 예를 들어, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NH2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 H일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NH2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHCO)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)CH2OCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-N(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NHCH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHSO2-NH-사이클로프로판일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NHCH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(S)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(S)NH-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)NH-CH3일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-사이클로프로판일 수 있거나, R3 및 R8 중 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있고 다른 하나는 NHC(O)NH-CH(CH3)2일 수 있다.
일부 실시 형태에서, R3 및 R8은 둘 모두 N=C=S, NH2, NHC(O)CH3, NHC(O)CH(CH3)2, NHC(O)CH2OCH3, NHSO2CH3, NHSO2-사이클로프로판, NHSO2CH(CH3)2, NHSO2N(CH3)2, NHC(S)NHCH3, NHC(S)NHCH(CH3)2, NHC(S)NH-사이클로프로판, NHC(O)NHCH3, NHC(O)NHCH(CH3)2, 또는 NHC(O)NH-사이클로프로판이다.
일부 실시 형태에서, R1 및 R6 중 적어도 하나(예를 들어, 하나 또는 둘 모두)는 SO3R21이다. 예를 들어, R1 및 R6 중 적어도 하나(예를 들어, 하나 또는 둘 모두)는 SO3H 또는 그의 염이다.
일부 실시 형태에서, R1 및 R6 중 적어도 하나(예를 들어, 하나 또는 둘 모두)는 SO3R21일 수 있고, R3 및 R8은 수소, 헤테로사이클릴, OR21, NO2, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHSO2R21, N(R22)2, NHC(O)N(R22)2, NHC(S)N(R22)2, 및 NHSO2N(R22)2로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있으며, 여기서 R21 및 R22는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이다. 예를 들어, R1 및 R6 중 적어도 하나(예를 들어, 하나 또는 둘 모두)는 SO3H일 수 있고, R3 및 R8은 수소, OH, OCH3, N=C=S, NH2, NHCH3, NO2, NH-옥타데칸, NHC(O)CH3, NHC(O)CH(CH3)2, NHC(O)CH2OCH3, NHSO2CH3, NHSO2-사이클로프로판, NHSO2CH(CH3)2, NHSO2N(CH3)2, NHC(S)NHCH3, NHC(S)NHCH(CH3)2, NHC(S)NH-사이클로프로판, NHC(O)NHCH3, NHC(O)NHCH(CH3)2, 벤족사졸릴, 또는 NHC(O)NH-사이클로프로판으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
일부 실시 형태에서, R1 및 R6 중 적어도 하나(예를 들어, 하나 또는 둘 모두)는 SO3R21일 수 있고, R3 및 R8은 둘 모두 동일하며 수소, N=C=S, NHC(O)R21, NHSO2R21, N(R22)2, NHC(O)N(R22)2, NHC(S)N(R22)2, 및 NHSO2N(R22)2로 이루어진 군으로부터 선택된다. 예를 들어, R1 및 R6 중 적어도 하나(예를 들어, 하나 또는 둘 모두)는 SO3H일 수 있고, R3 및 R8은 동일하며 수소, N=C=S, NH2, NHC(O)CH3, NHC(O)CH(CH3)2, NHC(O)CH2OCH3, NHSO2CH3, NHSO2-사이클로프로판, NHSO2CH(CH3)2, NHSO2N(CH3)2, NHC(S)NHCH3, NHC(S)NHCH(CH3)2, NHC(S)NH-사이클로프로판, NHC(O)NHCH3, NHC(O)NHCH(CH3)2, 및 NHC(O)NH-사이클로프로판으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
일부 실시 형태에서, R1 내지 R10 중 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개는 OH 또는 OCH3이다.
화학식 V의 화합물은 그의 약제학적으로 허용되는 염, 입체이성체 혼합물, 및 거울상 이성체를 포함한다. 본 명세서에 기재된 기술의 화합물은 또한 화학식 V의 화합물의 생리학적으로 허용되는 염을 포함할 수 있다. 화학식 V의 화합물은 라세미 혼합물로서 또는 실질적으로 순수한 입체이성체 또는 거울상 이성체로서 존재할 수 있다.
스틸벤의 제조 방법은 당업계에 익히 공지되어 있으며, 예를 들어 미국 특허 제7,321,050호; 제6,022,998호; 제6,177,220호; 제5,068,300호; 제3,387,050호; 제5,563,298호; 제7,820,848호; 제8,101,804호; 제6,218,108호; 및 제7,714,161호; 미국 특허 출원 공개 제2007/0276172호 및 제2004/0143023호; 문헌[Likhtenstein, Gertz I. "Stilbenes Synthesis and Applications" in Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical Technology. 2000, John Wiley & Sons, Inc.]; [Likhtenshtein, G. "Stilbenes Preparation and Analysis" in "Applications in Chemistry, Life Sciences and Materials Science" 2010, Wiley-VCH]에 기재되어 있으며, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 스틸벤 및 스틸벤 유도체의 합성은 또한 상업 서비스로서 이용가능하다(예: 메르카켐(Mercachem, 네덜란드 네이메헨 소재); 프로테로스(Proteros, 독일 마틴즈리트 소재); AMRI(미국 뉴욕주 알바니 소재); WuXi Apptec(중국 상하이 소재); 및 리치맨 케미칼 인크.(Richman Chemical Inc., 미국 펜실베이니아주 귀네드 소재). 일부 실시 형태에서, 스틸벤은 아미드 및 설폰아미드 유도체로 추가로 작용화될 수 있다.
일부 예시적인 화학식 V의 화합물은 (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디아세트아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메틸프로판아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메톡시아세트아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디메탄설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디사이클로프로판설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(디메틸아미노-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-아미노스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-메틸티오우레아); (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-이소프로필티오우레아); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)이소부티르아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-2-메톡시아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)메탄설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; N'-(4-{(E)-2-[4-(디메틸아미노)페닐]-1-에테닐}페닐)-N,N-디메틸설파미드; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필티오우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)우레아; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(메틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-사이클로프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(메틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-메틸티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-메틸티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-이소프로필벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N,N-디메틸벤즈아미드); (E)-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(모르폴리노메타논); 및 (E)-5-(4-하이드록시스티릴)벤젠-1,3디올(3,5,4'-트리하이드록시-트랜스-스틸벤)이다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 VI, 본 명세서에서 BB5-4로도 지칭됨); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드 (화학식 VII, 본 명세서에서 BB2-5로도 지칭됨); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드) (화학식 VIII, 본 명세서에서 BB1-6으로도 지칭됨); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(디메틸아미노-설폰아미드) (화학식 IX, 본 명세서에서 BB1-7로도 지칭됨); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드 (화학식 X, 본 명세서에서 BB2-6으로도 지칭됨); (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XI, 본 명세서에서 BB5-39로도 지칭됨); 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트) (화학식 XII, 본 명세서에서 BB4B-2로도 지칭됨); (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XIII, 본 명세서에서 BB5-47로도 지칭됨); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드) (화학식 XIV, 본 명세서에서 BB8-1로도 지칭됨); (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXIII, 본 명세서에서 BB5-6으로도 지칭됨); 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXVII); 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXVIII); 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXIX); 및 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXX)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
[화학식 VI]
Figure pct00013
[화학식 VII]
Figure pct00014
[화학식 VIII]
[화학식 IX]
Figure pct00016
[화학식 X]
Figure pct00017
[화학식 XI]
Figure pct00018
[화학식 XII]
Figure pct00019
[화학식 XIII]
Figure pct00020
[화학식 XIV]
Figure pct00021
[화학식 XXIII]
Figure pct00022
[화학식 XXVII]
Figure pct00023
[화학식 XXVIII]
Figure pct00024
[화학식 XXIX]
Figure pct00025
[화학식 XXX]
Figure pct00026
특정 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 VI); 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXVII); 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXIX); 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트 (화학식 XXVIII); 및 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트 (화학식 XII, 본 명세서에서 BB4B-2로도 지칭됨)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 화학식 XXIV의 구조를 가질 수 있다:
[화학식 XXIV]
Figure pct00027
상기 화학식 XXIV에서, X는 임의의 약제학적으로 허용되는 염의 양이온일 수 있다. 비제한적인 예로서, X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 화학식 XXV의 구조를 가질 수 있다:
[화학식 XXV]
Figure pct00028
상기 화학식 XXV에서, X는 임의의 약제학적으로 허용되는 염의 양이온일 수 있다. 비제한적인 예로서, X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 화학식 XXXI의 구조를 가질 수 있다:
[화학식 XXXI]
Figure pct00029
상기 화학식 XXXI 에서, X는 임의의 약제학적으로 허용되는 염의 양이온일 수 있다. 비제한적인 예로서, X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 화학식 XXXII의 구조를 가질 수 있다:
[화학식 XXXII]
Figure pct00030
상기 화학식 XXXII에서, X는 임의의 약제학적으로 허용되는 염의 양이온일 수 있다. 비제한적인 예로서, X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 화학식 XXXIII의 구조를 가질 수 있다:
[화학식 XXXIII]
Figure pct00031
상기 화학식 XXXIII에서, X는 임의의 약제학적으로 허용되는 염의 양이온일 수 있다. 비제한적인 예로서, X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트)일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 화학식 XXXIV의 구조를 가질 수 있다:
[화학식 XXXIV]
Figure pct00032
상기 화학식 XXXIV에서, X는 임의의 약제학적으로 허용되는 염의 양이온일 수 있다. 비제한적인 예로서, X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 스틸벤 유도체는 화학식 XXXV의 구조를 가질 수 있다:
[화학식 XXXV]
Figure pct00033
상기 화학식 XXXV에서, X는 임의의 약제학적으로 허용되는 염의 양이온일 수 있다. 비제한적인 예로서, X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에서 상기에 기재된 스틸벤 및 스틸벤 유도체는 이본쇄 절단 수복의 억제제일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 상기에 기재된 스틸벤 및 스틸벤 유도체는 본 명세서에 기재된 방법에 사용될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 이본쇄 절단 수복의 억제제는 스틸베노이드일 수 있다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, "스틸베노이드"는 하이드록실화 스틸벤 유도체이다. 스틸베노이드의 비제한적인 예에는 레스베라트롤; 아글리콘; 피세타놀; 피노실빈; 프테로스틸벤; 알파-비니페린; 암펠롭신 A; 암펠롭신 E; 디프토인도네신 C; 디프토인도네신 F; 엡실론-비니페린; 플렉수오솔 A; 그네틴 H; 헴슬레이아놀 D; 호페아페놀; 트랜스-디프토인도네신 B; 바티카놀 B; 아스트린진; 피세이드; 디프토인도네신 A가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, 억제제는 살라진산 (화학식 I) (퍼브켐 물질 번호(Pubchem Substance ID): 24840333; 화합물 A03)일 수 있다. 살라진산은 1,4,10-트리하이드록시-5-(하이드록시메틸)-8-메틸-3,7-디옥소-1,3-디하이드로-7H-2,6,12-트리옥사벤조[5,6]사이클로헵타[1,2-e]인덴-11-카르브알데하이드로도 지칭될 수 있다.
[화학식 I]
Figure pct00034

본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, 억제제는 스틱트산 (화학식 II)(퍼브켐 물질 번호: 24840609; 화합물 A10)일 수 있다. 이 화합물은 NSC-87511, 스코풀라르산, 스테로카울론산; 및 1,3-디하이드로-1,4-디하이드록시-10-메톡시-5,8-디메틸-3,7-디옥소-7H-이소벤조푸로[4,5-b][1,4]벤조디옥세핀-11-카르브알데하이드로도 알려져 있다.
[화학식 II]
Figure pct00035

본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, 억제제는 STK856883 (화학식 III)(퍼브켐 물질 번호: 24787209; 화합물 B02)일 수 있다. 이 화합물은 또한 3-벤질-2-[(E)-2-피리딘-3-일에테닐]퀴나졸린-4-온으로도 지칭될 수 있다. STK856883은 RAD51 억제제로서 확인되어 있다(문헌[Huang et al. ACS Chem Biol. 2011 Mar 23]).
[화학식 III]
Figure pct00036

본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, 억제제는 4'-브로모-3'니트로프로피오페논 (화학식 IV)(칼바이오켐(Calbiochem) 카탈로그 번호 323115)일 수 있다. 4'-브로모-3'-니트로프로피오페논(NS-123 또는 1-(4-브로모-3-니트로페닐)프로판-1-온으로도 알려짐)은 WO2009036297호에 기재된 세포-투과성 니트로-로피오페논 화합물이며, 이 화합물은 우선적으로는 이온화 방사선의 종양 성장-억제 효과를 향상시키는데(약 5μM; U251, HT-29 및 A549 종양 세포 내에서, 그리고 U251 이종이식 마우스 모델 내에서; 50 mg/kg, i.p.), 이때 정상 인간 교세포, 제브라피시 배아(Zebrafish embryo) 및 누드 마우스에 대해서는 명확한 효과를 갖지 않는다. 이는 비수복 이본쇄 DNA 절단의 축적을 증가시키고 손상-의존성 신호전달을 연장시키는 것으로 밝혀져 있다.
[화학식 IV]
Figure pct00037

일부 실시 형태에서, 억제제는 4-메틸퀴나졸린-2-카르복스아미드 (화학식 XV); 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민 (화학식 XVI); 5,6-디메틸-2-메르캅토메틸벤즈이미다졸 (화학식 XVII); (E)-1-(2-하이드록시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔-1-온 (화학식 XVIII); N4-부틸-6-클로로피리미딘-2,4-디아민 (화학식 XIX); 1-테르모프신 (화학식 XX); 6-아미노-5-니트로소-2-페닐피리미딘-4(1H)-온 (화학식 XXI); 및 4-(2-아미노-4-니트로페닐아미노)페닐 (화학식 XXII)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
[화학식 XV]
Figure pct00038
[화학식 XVI]
Figure pct00039
[화학식 XVII]
Figure pct00040
[화학식 XVIII]
Figure pct00041
[화학식 XIX]
Figure pct00042
[화학식 XX]
Figure pct00043
[화학식 XXI]
Figure pct00044
[화학식 XXII]
Figure pct00045

일부 실시 형태에서, 억제제는 7-아자인돌-3-카르복스알데하이드 (CAS4649-09-6); 2-아미노-4-페닐페놀 (CAS1134-36-7); 3-(1-메틸-3-피롤리디닐)인돌 (CAS3671-00-9); 1-메틸- [1,2,4]트리아졸로[4,3-a]퀴놀론 (CAS35359-22-9); 2-아미노-5-니트로-1H-벤즈이미다졸 (CAS6232-92-4); 2-(5-니트로-2-푸르푸릴리덴)아미노에탄올-N-옥사이드 (CAS19561-70-7; 니푸라트론); 알파-메르캅토-N,2-나프틸아세트아미드 (CAS93-42-5; 티오날리드); (CAS486-90-8; 1-테르모스핀); N4-부틸-6-클로로-2,4-피리미딘디아민 (CAS5457-91-0); 2-(2-하이드록시-6-프로판-2-일옥시-사이클로헥실)아세트산 (CAS7248-04-6); 6-아미노-5-니트로소-2-페닐-1H-피리미딘-4-온 (CAS5466-66-0); 4-아미노-2-하이드록시페닐)아르손산 (CAS6318-57-6); 스피로[1,2-디하이드로인덴-3,5'-이미다졸리딘]-2',4'-디온 (CAS6252-98-8); N~4~-(4-메톡시페닐)-6-메틸피리미딘-2,4-디아민 (CAS93001-35-5); 2-아미노-9-펜틸-3H-퓨린-6-티온(CAS24397-98-6); 2-(4-메톡시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔니트릴 (CAS92437-25-7); 2-클로로피리미딘-4,6-디카르복스아미드 (CAS7150-30-3); 2-아미노-3H-페녹사진-3-온 (CAS1916-59-2); 2-메틸-N-벤질-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민; 4-(벤질아미노)-2-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘; NSC-106570 (CAS1866-43-9; 롤로딘); 2-아미노-1-나프탈렌설폰산 (CAS81-16-3); N-sec-부틸-3-메틸벤즈아미드 (NSC 34983); 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 및 2-(2-메틸사이클로헥실리덴)하이드라진카르복스아미드로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 ATM 억제제일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 억제제는 2-모르폴린-4-일-6-티안트렌-1-일-피란-4-온 (KU-55933, S1092 셀렉 케미칼스 엘엘씨(Selleck Chemicals LLC, 미국 텍사스주 휴스턴 소재); WO/03070726호) 또는 2-((2R, 6S)-2,6-디메틸-모르폴린-4-일)-N-[5-(6-모르폴린-4-일-4-옥소-4H-피란-2-일)-9H-티오잔텐-2-일]-아세트아미드 (KU-60019 또는 KU60019; WO/2007/026157호; S1570 셀렉 케미칼스 엘엘씨(미국 텍사스주 휴스턴 소재); 문헌[Mol Cancer Ther 2009, 8(10): 2894-2902])이다. 또한 비제한적인 예로서, DSB 수복 억제제는 유럽 특허 EP1946757호 및 WO 03/070726호 및 WO 2005/016919호에 개시된 것들과 같은 화합물일 수 있다.
Figure pct00046
본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 DSB 수복을 촉진시키는 임의의 유전자 또는 단백질의 발현 또는 활성을 저하시키는 억제제이다. 이들 유전자 또는 단백질은, DSB 수복에 참여하는 효소의 활성을 제어하는 RAD51-매개 쇄 교환 또는 조절 또는 골격형성 유전자 또는 단백질에서, DSB 수복에 참여하는 효소일 수 있다. 유전자 또는 단백질은 그러한 유전자 또는 단백질의 발현 또는 활성의 감소가 DSB 수복의 감소로 이어질 경우 DSB 수복을 촉진시키는 유전자 또는 단백질인 것으로 여겨진다. DSB 수복의 저하는 시험되는 유전자 또는 단백질의 정상 발현 또는 활성을 갖는 대조군에 대비하여 약 5%, 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 약 100%, 약 125%, 약 150% 또는 그 초과일 수 있다. DSB 수복은 당업자에게 익히 공지된 방법에 의해 측정될 수 있다. 비제한적인 예로서, DSB 수복은 H2AX-S139PO4 (γ-H2AX, 인산화 히스톤 2A) 좌의 비색 또는 면역형광 검출에 의해 측정될 수 있다(문헌[Rogakou et al., J Biol Chem 1998, 273:5858-5868]; [Rothkamm and Loerich, Proc Natl Acad Sci USA, 2003, 100(9): 5057-5062]; [Redon et al., Aging 2011, 3(2):168-74]; [Rakiman et al. 2008, Advanced Biotech 39]). 비제한적인 예로서, DSB 수복은 감마-H2AX 인산화의 검출에 의해 측정될 수 있다. 비제한적인 예로서, DSB 수복은 COMET 검정에 의해 측정될 수 있다(문헌[Orlow et al.2008, J. Clin. Oncol. 26, 3560-3566]; [Muller et al 1994, International Journal of Radiation Biology 65, 315-319]; [Fairbairn et al. 1995, Mutation Research/Reviews in Genetic Toxicology 339, 37-59]). 비제한적인 예로서, DSB 수복은 DSB 수복의 구성요소인 RAD51-매개 쇄 교환을 측정함으로써 평가될 수 있다. RAD51-매개 쇄 교환은 문헌[Ishida et al., Nucleic Acids Res 2009 37:3367-3376]에 기재된 시험관내 쇄-교환 검정에 의해 측정될 수 있다. 전술한 단락 내의 모든 참고문헌은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
본 명세서에 제공된 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 하기를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 단백질 중 하나 이상의 발현 또는 활성을 저하시키는 억제제이다: Rad51AP1 (NCBI 유전자 번호: 10635; 서열 번호: 007); Rad51B (NCBI 유전자 번호: 5890; 서열 번호: 008); Rad51D (NCBI 유전자 번호: 5892; 서열 번호; 009); Rad51C (NCBI 유전자 번호: 5889 예: 서열 번호: 0163 (mRNA; NM_058216) 및 서열 번호: 0164 (단백질; NP_478123) 또는 서열 번호: 0165 (mRNA; NM_002876) 및 서열 번호: 0166 (단백질; NP_002867); XRCC2 (NCBI 유전자 번호: 7516; 서열 번호: 010); XRCC3 (NCBI 유전자 번호: 7517; 서열 번호: 011); RAD54 (NCBI 유전자 번호: 546; 서열 번호: 012); RAD52 (NCBI 유전자 번호: 5893; 서열 번호: 013); BRCA1 (NCBI 유전자 번호: 672; 서열 번호: 014); BRCA2 (NCBI 유전자 번호: 675; 서열 번호: 015); ATM (NCBI 유전자 번호: 472; 서열 번호: 016); ATR (NCBI 유전자 번호: 545; 서열 번호: 017); MRE11 (NCBI 유전자 번호: 4361; 서열 번호: 018); RAD50 (NCBI 유전자 번호: 10111: 서열 번호: 019); NBS1 (NCBI 유전자 번호: 4683; 서열 번호: 020); WRN (NCBI 유전자 번호: 7486; 서열 번호: 021); BLM (NCBI 유전자 번호: 641; 서열 번호: 022); RECQ4 (NCBI 유전자 번호: 9401; 서열 번호: 023); LIG4 (DNA 리가제 4; NCBI 유전자 번호: 3981; 서열 번호: 024; XRCC4 (NCBI 유전자 번호: 7518; 서열 번호: 025); PRKDC (DNA-PKcs7; XRCC7; NCBI 유전자 번호: 5591; 서열 번호: 026); DCLRE1C (NCBI 유전자 번호: 64421; 서열 번호: 027); XRCC6 (Ku70; NCBI 유전자 번호: 2547; 서열 번호: 028); XRCC5 (Ku80; NCBI 유전자 번호: 7520; 서열 번호: 029) 및/또는 XLF (NHEJ1; XRCC4-유사 인자; NCBI 유전자 번호: 79840; 서열 번호: 030).
DSB 수복 억제제는 핵산(DNA 또는 RNA), 소분자, 압타머, 단백질, 펩티드, 항체, 항체의 에피토프-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드, 항체 단편, 펩티드-핵산(PNA), 잠금 핵산(locked nucleic acid, LNA) 또는 리보자임일 수 있다. 일부 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 소분자, 압타머, 단백질, 펩티드, 항체, 항체의 에피토프-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드, 항체 단편, 및 펩티드-핵산(PNA)으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
LNA 염기는 리보스 고리의 2' 산소와 4' 탄소 사이에 메틸렌 결합을 함유하는 리보뉴클레오티드 유사체이다(문헌[Koshkin A.A., 1998, Tetrahedron, 54:3607-3630]; [Obika S., 1998, Tetrahedron Lett., 39:5401-5404]). 당 부분에 대한 구속은 잠겨진 3'-엔도 형태를 발생시키는데, 이러한 형태는 교잡을 위해 염기를 사전조직화하고 염기당 10℃만큼 용융 온도(Tm) 값을 증가시킨다(문헌[Wengel J., 1999, Acc. Chem. Res., 32:301-310]; [Braasch D.A. and Corey, D.R., 2001, Chem. Biol., 8:1-7]). LNA 염기는 DNA 합성에 대한 표준 프로토콜을 사용하여 올리고뉴클레오티드 내로 포함될 수 있다. LNA 염기의 도입은 또한 올리고머의 5' 및 3' 말단에 포함될 경우 뉴클레아제에 대한 내성을 제공한다(문헌[Crinelli R., et. al., 2002, Nucleic Acids Res., 30:2435-2443]). 일부 실시 형태에서, 유전자 사일런싱제(gene silencing agent)는 LNA-DNA 키메라이다. LNA-함유 올리고머의 합성은 당업계에 알려져 있으며, 예를 들어 미국 특허 제6316198호, 제6670461호, 제6794499호, 제6977295호, 제6998484호, 제7053195호, 및 미국 특허 출원 공개 US 2004/0014959호에 기재된 것들이 있다.
일부 실시 형태에서, DSB 억제제는 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 RNA 간섭 서열(interfering sequence)을 포함한다: 서열 번호: 050, 서열 번호: 051, 서열 번호: 052, 서열 번호: 053, 서열 번호: 054, 서열 번호: 055, 서열 번호: 056, 서열 번호: 057, 서열 번호: 058, 서열 번호: 059, 서열 번호: 060, 서열 번호: 061, 서열 번호: 062, 서열 번호: 063, 서열 번호: 064, 서열 번호: 065, 서열 번호: 066, 서열 번호: 067, 서열 번호: 068, 서열 번호: 069, 서열 번호: 070, 서열 번호: 071, 서열 번호: 072, 서열 번호: 073, 서열 번호: 074, 서열 번호: 075, 서열 번호: 076, 서열 번호: 077, 서열 번호: 078, 서열 번호: 079, 서열 번호: 080, 서열 번호: 081, 서열 번호: 082, 서열 번호: 083, 서열 번호: 084, 서열 번호: 085, 서열 번호: 086, 서열 번호: 087, 서열 번호: 088, 서열 번호: 089, 서열 번호: 090, 서열 번호: 091, 서열 번호: 092, 서열 번호: 093, 서열 번호: 094, 서열 번호: 095, 서열 번호: 096, 서열 번호: 097, 및 서열 번호: 098.
DSB 수복 억제제는 당업자에게 익히 공지된 방법을 사용하여 재조합적으로 생산될 수 있다(문헌[Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2 ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., USA (1989)] 참조). 대안적으로, DSB 수복은 상업적으로 입수될 수 있거나(예: DIDS (#38440 시그마-알드리치; 미국 미주리주 세인트 루이스 소재); 4'-브로모-3'니트로프로피오페논(칼바이오켐 카탈로그 번호 323115)), 또는 화학적으로 합성될 수 있다.
시험 화합물 및 작용제는 DSB 수복을 억제할 수 있는 그들의 능력에 대해 선별될 수 있다. DSB 수복의 억제는 생체내에서 또는 시험관내에서 모니터링될 수 있다. 일 실시 형태에서, DSB 수복의 붕괴는 시험 화합물의 존재하 및 부재하에 DNA 편집 효소(예: AID)를 발현하는 세포 내에 존재하는 이본쇄 절단(DSB)의 수준을, 예를 들어 본 명세서에 기재된 바와 같이 핵형 분석(karyotyping)에 의해 평가함으로써 모니터링된다. 일 실시 형태에서, DSB는 γ-H2AX 좌 형성에 의해 측정된다. 일 실시 형태에서, DSB 수복은 53BP1 또는 Rad50 좌 형성에 의해 측정된다. 일 실시 형태에서, DSB 수복을 붕괴시킬 수 있는 시험 화합물의 능력은 생체내에서, 예를 들어 암성 세포가 AID를 발현하는 암의 마커, 증상 또는 종양 성장을 방지 또는 저하시킬 수 있는 능력을 결정함으로써 모니터링된다. DSB 수복은 또한 문헌[Ishida et al., Nucleic Acids Res 2009 37:3367-3376]에 기재된 쇄-교환 검정에 의해 시험관내에서 측정될 수 있다.
일 실시 형태에서는, 결합된 핵산 분자의 생산을 모니터링하는 시험관내 쇄 교환 검정이 수행된다. 예를 들어, 45 mM NaCl, 0.03 mM EDTA, 0.6 mM 2-메르캅토에탄올, 3% 글리세롤, 1 mM MgCl2, 1 mM DTT, 1 mM ATP, 0.1 mg/ml 소혈청 알부민, 2 mM CaCl2, 20 mM 크레아틴 포스페이트 및 75μg/ml 크레아틴 키나제를 함유하는 10μl의 26 mM HEPES 완충액(pH 7.5) 중에서 37℃에서 10분 동안 시험 작용제의 존재하에 RAD51 (6μM)과 함께 ΦX174 환형 ssDNA (20μM)를 인큐베이션한다. 이 인큐베이션 후에, 2μM RPA를 반응 혼합물에 첨가하고, 이 혼합물을 추가 10분 동안 37℃에서 인큐베이션한다. 이어서, 20μM ΦX174 선형 dsDNA를 첨가함으로써 반응을 개시하고, 60분 동안 계속한다. 0.1% SDS 및 1.97 mg/ml 단백질분해효소 K (로슈 어플라이드 사이언스(Roche Applied Science), 스위스 바젤 소재)를 첨가함으로써 반응을 중단시키고, 20분 동안 37℃에서 추가로 인큐베이션한다. 6배 로딩 염료(6-fold loading dye)를 첨가한 후에, 탈단백화된 반응 생성물을 4시간 동안 3.3 V/cm로 1x TAE 완충액 중에서 1% 아가로오스 겔 전기영동을 행함으로써 분리한다. 이러한 생성물은 SYBR 골드(SYBR Gold) (인비트로겐(Invitrogen), 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재) 염색에 의해 시각화된다.
검정의 또 다른 실시 형태에서, 반응은 32P-표지 dsDNA를 사용하여 수행될 수 있다. 시각화는 겔을 건조시키고, 그들을 이미징 플레이트에 노출시키고, FLA-7000 이미징 분석기(후지필름(Fujifilm), 일본 도쿄 소재)를 사용하여 플레이트를 시각화함으로써 수행된다.
반응이 시각화될 때, 과잉으로 제공된 ssDNA 및 dsDNA 분자는 가시적이게 될 것이다. DSB 수복이 일어날 경우, 더 큰 결합 분자(joint molecule)가 검출될 것이다. DSB 수복 억제제는 결합 분자의 양의 저하가 가시적이게 할 것이다.
시험 작용제는 통상적으로 먼저 시험관내에서 유전자 발현 또는 단백질 활성을 억제할 수 있는 그들의 능력에 대해 선별되며, 유전자 발현 또는 단백질 활성에 대해 억제 효과를 갖는 시험 작용제가 확인된다. 이어서, 양성 억제제가 시험관내 또는 생체내 검정에 의해 DSB 수복의 억제에 대한 효능에 대해 시험된다.
일반적으로, 화합물은 적절한 기간에 걸쳐 대조군에 대해 발현 또는 단백질 활성을 조절할 수 있는 임의의 농도에서 시험될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 화합물은 약 0.1 nM 내지 약 1000　mM 범위의 농도에서 시험된다. 일 실시 형태에서, 화합물은 약 0.1μM 내지 약 20μM, 약 0.1μM 내지 약 10μM, 또는 약 0.1μM 내지 약 5μM의 범위에서 시험된다. 일 실시 형태에서, 화합물은 1　μM에서 시험된다.
실시되는 특정 실시 형태에 따라, 시험 화합물은 용액 중에서 자유로운 상태로 제공될 수 있거나, 담체, 또는 고체 지지체(예: 비드)에 부착될 수 있다. 다수의 적합한 고체 지지체가 시험 화합물의 고정화에 사용될 수 있다. 적합한 고체 지지체의 예에는 아가로오스, 셀룰로오스, 덱스트란(즉, 세파덱스(Sephadex), 세파로스(Sepharose)로서 구매가능함) 카르복시메틸 셀룰로오스, 폴리스티렌, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 여과지, 니트로셀룰로오스, 이온 교환 수지, 플라스틱 필름, 폴리아민메틸비닐에테르 말레산 공중합체, 유리 비드, 아미노산 공중합체, 에틸렌-말레산 공중합체, 나일론, 실크 등이 포함된다. 추가적으로, 본 명세서에 기재된 방법을 위해, 시험 화합물은 개별적으로, 또는 그룹으로 선별될 수 있다. 그룹 선별은 효과적인 시험 화합물에 대한 히트율(hit rate)이, 주어진 그룹에 대해 하나 초과의 양성 결과를 예측할 수 없을 정도로 낮을 것으로 예측되는 경우에 특히 유용하다.
시험 작용제를 선별하기 위하여, 시험관내 검정 시스템 및/또는 세포-기반 검정 시스템이 사용될 수 있다. 예를 들어, 시험 작용제는 유전자 또는 유전자에 의해 암호화된 단백질에 대한 결합에 대해 선별되거나, 유전자의 발현 수준의 변경에 대해 선별되거나, 유전자에 의해 암호화된 단백질의 활성/기능의 조절에 대해 선별될 수 있다.
일 실시 형태에서, 단백질/펩티드 시험 작용제(항체, 또는 그의 단편 포함)는 시험관내에서 암호화된 단백질과 결합할 수 있는 그들의 능력에 대해 평가될 수 있다. 직접 결합 검정의 에에는 시험관내 표지 단백질-단백질 결합 검정, 전기영동 이동도 시프트 검정, 단백질 결합에 대한 면역검정, ELISA 검정, 공동-면역침전 검정, 경쟁 검정(예: 공지된 결합제를 이용함) 등이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 예를 들어, 미국 특허 제4,366,241호; 제4,376,110호; 제4,517,288호; 및 제4,837,168호; 및 또한 문헌[Bevan et al., Trends in Biotechnology 13:115-122, 1995]; [Ecker and Crooke, 1995, Biotechnology (NY)13:351-360]; 및 [Hodgson, Biotechnology (NY)10:973-980, 1992]를 참조한다. 시험 작용제는 또한 그 작용제가 관심 대상의 단백질에 결합된다는 것을 나타내는 신호, 예를 들어 형광 소광(fluorescence quenching) 또는 FRET를 검출함으로써 확인될 수 있다. 시험 작용제 폴리펩티드는 또한 시험관내에서 핵산과 결합하는 그들의 능력에 대해 모니터링될 수 있으며, 예를 들어 ELISA-포맷 검정은 핵산에 결합되는 단백질의 분석을 위하여 겔 이동도 시프트 검정(EMSA)의 편리한 대안이 될 수 있다. 암호화된 단백질에 대한 시험 작용제의 결합은 그 작용제가 단백질 활성의 억제제일 수 있다는 지표를 제공한다.
일 실시 형태에서, 시험 작용제는 유전자에 의해 암호화된 단백질의 생물학적 활성 또는 기능을 하향조절할 수 있는 능력에 대해 검정된다. 사용된 검정은 단백질의 기능에 좌우될 것이며, 숙련자에 의해 용이하게 결정될 수 있는데, 예를 들어 시험관내에서 RAD51-매개 수복의 억제를 모니터링하는 것이다.
일 실시 형태에서, 시험 작용제는 유전자의 전사를 억제할 수 있는 능력에 대해 검정된다. 전사 검정은 당업자에게 익히 알려져 있다(예를 들어, 미국 특허 제7,319,933호 및 제6,913,880호 참조). 예를 들어, 유전자의 발현의 조절은 배양된 세포주 내로의 리포터 발현 벡터의 일시적 또는 안정한 형질감염에 의해 세포-기반 시스템에서 조사될 수 있다. 시험 화합물은 유전자의 전사 조절 요소(예: 프로모터 서열)의 제어 하에서 리포터 유전자(예: 루시페라제 유전자)의 발현을 억제 또는 증가시킬 수 있는 능력에 대해 검정될 수 있다. 리포터 유전자에 작동가능하게 연결된 전사 조절 요소를 담지하는 검정 벡터가 프로모터 활성의 검정을 위한 임의의 포유류 세포주 내로 형질감염될 수 있다. 통상적으로 리포터 유전자는, 숙주 세포로부터는 천연적으로 존재하지 않는 용이하게 검정되는 효소 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화한다. 진핵생물의 프로모터를 위한 통상적인 리포터 폴리펩티드에는, 예를 들어 클로람페니콜 아세틸 아세틸트랜스페라제(CAT), 반딧불이 또는 레닐라(Renilla) 루시페라제, 베타-갈락토시다제, 베타-글루쿠로니다제, 알칼리성 포스파타제, 덴드라2(Dendra2), mCherry, mRaspberry, mPlum, tdTomato, 녹색 형광 단백질(GFP), 황색 형광 단백질(YFP), 향상된 녹색 형광 단백질(eGFP), 적색 형광 단백질(RFP), 시안 형광 단백질(CFP) 등이 포함된다. 유전자의 전자 조절 요소의 제어 하에서 리포터 유전자를 발현하는 벡터는 분자생물학의 일상적으로 실시되는 기술 및 방법을 사용하여 제조될 수 있다(예를 들어, 문헌[Sambrook et al., 상기 참조]; 문헌[Brent et al., 상기 참조] 참조).
리포터 유전자에 더하여, 벡터는 또한 숙주 세포에서의 증식 또는 유지에 필요한 요소, 및 폴리아데닐화 서열 및 전사 종결자와 같은 요소를 포함할 수 있다. 예시적인 검정 벡터의 예에는 pGL3 시리즈의 벡터(프로메가(Promega), 미국 위스콘신주 매디슨 소재; 미국 특허 제5,670,356호)가 포함되는데, 이 시리즈는 루시페라제 유전자의 폴리링커 서열 5'를 포함한다. 세포 배양, 형질감염, 및 리포터 유전자 검정의 일반적 방법은 당업계에 기재되어 있다(예를 들어, 문헌[Sambrook et al., 상기 참조]; 및 [Transfection Guide, Promega Corporation, Madison, WI (1998)]). 임의의 용이하게 형질감염 가능한 포유류 세포주가 벡터로부터 리포터 유전자의 발현을 검정하는 데 사용될 수 있으며, 예를 들어 3T3, 카코-2(Caco-2), CCRF-CEM, CHO, COS-7, HCT 116, HEK 293, CH12-F3, MCF-7, HepG2, 주르카트(Jurkat), Mo-B, KG-1, K-562, MOLT-4 및 HL-60 세포가 있다.
대안적으로, 예를 들어 생화학적 및 분자생물학 기술, 예컨대 노턴 블로팅 또는 다른 교잡 검정, 뉴클레아제 보호 검정, 역전사(정량적 RT-PCR) 기술, RNA-Seq, 고성능 서열 분석(high throughput sequencing) 등을 사용하여 mRNA 수준의 결정이 평가될 수 있다. 그러한 검정은 당업자에게 익히 공지되어 있다. 일 실시 형태에서는, 핵 "런-온(run-on)" (또는 "런-오프(run-off)") 전사 검정이 사용된다(예를 들어, 문헌[Methods in Molecular Biology, Volume: 49, Sep-27-1995, Page Range: 229-238] 참조). 어레이가 또한 사용될 수 있는데; 어레이, 및 그러한 어레이를 사용하여 mRNA를 분석하는 방법은, 예를 들어 EP0834575호, EP0834576호, WO96/31622호, 미국 특허 제5,837,832호 또는 WO98/30883호에 이전에 기재된 바 있다. WO97/10365호는 고밀도 올리고뉴클레오티드 어레이를 사용하여 다양한 유전자의 발현 수준을 모니터링하는 방법을 제공한다.
일 실시 형태에서, 시험하고자 하는 대상체로부터의 하나 이상의 세포가 얻어지고 RNA가 그 세포로부터 단리된다. 세포를 얻을 때에는, 원하는 유형의 세포를 주로 함유하는 샘플, 예를 들어 세포의 약 50% 이상, 바람직하게는 약 60% 이상, 더욱 더 바람직하게는 약 70%, 80% 이상, 그리고 더욱 더 바람직하게는, 약 90% 이상이 원하는 유형을 갖는 세포의 샘플을 얻는 것이 바람직하다. 조직 샘플은 당업계에 공지된 방법에 따라 얻을 수 있다.
또한, 대상체로부터 세포 샘플을 얻고, 이어서 그것을 원하는 세포 유형으로 부화시키는 것이 가능하다. 예를 들어, 세포는 다양한 기술을 사용하여 단리될 수 있는데, 예컨대 원하는 세포 유형의 세포 표면 상의 에피토프에 결합되는 항체에 의한 단리를 사용하여 다른 세포로부터 단리될 수 있다. 원하는 세포가 고체 조직 내에 있는 경우, 특정 세포가, 예를 들어 미세해부(microdissection), 또는 레이저 포획 미세해부(laser capture microdissection, LCM)에 의해 해부될 수 있다.
개체로부터의 조직 샘플 또는 세포로부터 RNA를 단리할 경우에는, 조직 또는 세포가 대상체로부터 적출된 후에 유전자 발현에서의 어떠한 추가의 변화를 방지하는 것이 중요할 수 있다. 발현 수준의 변화는 교란(perturbation), 예를 들어 리포폴리사카라이드(LPS) 또는 다른 시약에 의한 활성화 또는 열 충격 후에
급속히 변화되는 것으로 알려져 있다. 게다가, 조직 및 세포 내의 RNA는 재빨리 분해되게 될 수 있다. 따라서, 바람직한 실시 형태에서, 대상체로부터 얻어진 조직 또는 세포는 급속 냉동되거나 또는 가능한 한 곧바로 RNAlater로 처리된다.
RNA는 다양한 방법, 예를 들어 구아니듐 티오시아네이트 용해 및 후행하는 CsCl 원심분리에 의해 조직 샘플로부터 추출될 수 있다(문헌[Chirgwin et al., 1979, Biochemistry 18:5294-5299]). 단일 세포로부터의 RNA는 단일 세포로부터 cDNA 라이브러리를 제조하는 방법에 기재된 바와 같이 얻을 수 있으며, 예컨대 그러한 방법에는 문헌[Dulac, C. (1998) Curr. Top. Dev. Biol. 36, 245] 및 [Jena et al. (1996) J. Immunol. Methods 190: 199]에 기재된 것들이 있다. 예를 들어 RNAsin의 포함에 의해, RNA 분해를 피하도록 주의해야 한다.
이어서, RNA 샘플이 특정 종에서 부화될 수 있다. 일 실시 형태에서, 폴리(A)+ RNA가 RNA 샘플로부터 단리된다. 일반적으로, 그러한 정제는 mRNA 상의 폴리-A 꼬리를 이용한다. 상기에 기재된 바와 같이 특히, 폴리-T 올리고뉴클레오티드는 고체 지지체 상 내에서 고정화되어 mRNA를 위한 친화성 리간드로서의 역할을 할 수 있다. 이 목적을 위한 키트는, 예를 들어 퀵엑스트랙트(QuickExtract)® 키트(에피센트레 바이오테크놀로지스(Epicentre Biotechnologies), 미국 위시콘신주 매디슨 소재; 올리고텍스 디렉트(Oligotex Direct) mRNA 키트, 퀴아젠(Qiagen), 미국 캘리포니아주 발렌시아 소재)로 구매가능하다.
본 명세서에 기재된 방법에 사용될 수 있는 프로브의 유형에는 cDNA, 리보프로브, 합성 올리고뉴클레오티드 및 게놈성 프로브가 포함된다. 사용되는 프로브의 유형은 일반적으로 특정 상황에 의해 결정될 것이며, 예컨대 동소 교잡의 경우에는 리보프로브, 그리고 노턴 블로팅의 경우에는 cDNA이다. 일 실시 형태에서, 프로브는 RNA에 고유한 뉴클레오티드 영역으로 안내된다. 이들 프로브는 조절가능한 단백질의 mRNA 전사물을 차별적으로 인식하는 데 요구되는 만큼 짧을 수 있으며, 예를 들어 15개의 염기만큼 짧을 수 있지만; 그러나, 17, 18, 19 또는 20개 이상 또는 그 초과의 염기의 프로브가 사용될 수 있다. 일 실시 형태에서, 프라이머 및 프로브는 검정하고자 하는 단백질을 암호화하는 유전자에 상응하는 뉴클레오티드 서열을 갖는 DNA 단편에 대해 엄격한 조건 하에서 특이적으로 교잡된다. 본 명세서에 사용된 용어 "엄격한 조건"은 뉴클레오티드 서열에서 95% 이상의 동일성(identity)이 존재하는 경우에만 교잡이 일어날 것임을 의미한다. 또 다른 실시 형태에서, "엄격한 조건" 하에서의 교잡은 서열들 사이에 97% 이상의 동일성이 존재할 경우에 일어난다.
일 실시 형태에서, 시험 작용제는 유전자의 번역을 억제할 수 있는 능력에 대해 검정된다. 유전자 번역은 유전자로부터 발현되는 단백질의 정량화에 의해, 예를 들어 웨스턴 블로팅, 단백질의 면역학적 검출, ELISA (효소-결합 면역흡수 검정), 방사면역검정(RIA) 또는 다른 면역검정 및 형광-활성화된 세포 분석(FACS), 질량 분석, 또는 단백질을 검출하기 위한 단백질 서열 분석에 의해 측정될 수 있다.
소분자, 중합체 및 게놈 기반 라이브러리를 개발하는 방법은, 예를 들어 문헌[Ding, et al., J Am. Chem. Soc. 124: 1594-1596 (2002)] 및 [Lynn, et al., J. Am. Chem. Soc. 123: 8155-8156 (2001)]에 기재되어 있다. 구매가능한 화합물 라이브러리는, 예를 들어 아르쿨레(ArQule), 파르마코피아(Pharmacopia), 그래피니티(graffinity), 판베라(Panvera), 비타스-엠 랩(Vitas-M Lab), 바이오몰 인터내셔널(Biomol International), 셀렉 케미칼스(Selleck Chemicals) 및 옥스포드 케미칼스 리미티드(Oxford Chemicals Limited)로부터 입수될 수 있다. 이들 라이브러리는 본 명세서에 기재된 방법을 사용하여 DSB 수복을 억제할 수 있는 능력에 대해 선별될 수 있다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 DSB 수복을 촉진시키는 단백질을 암호화하는 유전자의 발현을 억제할 수 있는 핵산이다. 비제한적인 예로서, DSB 수복 억제제는 DSB 수복의 안티센스 억제제, 예를 들어 미국 특허 출원 공개 제2002/0137698호에 개시된 RAD51의 안티센스 억제제일 수 있다. 유전자 사일런싱 또는 RNAi가 사용될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 세포를 DSB 수복 억제제와 접촉시키면, 그 결과 표적 유전자를 위한 세포 내 mRNA 수준이 miRNA 또는 RNA 간섭 분자의 부재하에 세포 내에서 발견된 mRNA 수준의 적어도 약 5%, 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 약 60%, 약 70%, 약 80%, 약 90%, 약 95%, 약 99%, 약 100%로 감소된다. 일 실시 형태에서, mRNA 수준은 적어도 약 70%, 약 80%, 약 90%, 약 95%, 약 99%, 약 100%로 감소된다. 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 RNAi 분자를 포함하는 발현 벡터 또는 바이러스성 벡터를 포함한다.
본 명세서에 사용된 용어 "RNAi"는 RNAi, siRNA, shRNA, 내인성 microRNA 및 인공 microRNA를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 임의의 유형의 간섭 RNA를 말한다. 예를 들어, 이는 RNA의 다운-스트림 과정의 기전에 관계없이 이전에 siRNA로서 확인된 서열을 포함한다(즉, siRNA가 mRNA의 절단으로 이어지는 생체내 과정의 특이적 방법을 갖는 것으로 여겨지더라도, 그러한 서열은 본 명세서에 기재된 플랭킹 서열(flanking sequence)과 관련하여 벡터 내로 포함될 수 있음). 본 명세서에 기재된 기술의 작용제에 관하여 용어 "RNAi" 및 "RNA 간섭"은 본 명세서에서 상호교환가능하게 사용된다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, "siRNA"는 이본쇄 RNA를 형성하는 핵산을 말하며, 이때 이본쇄 RNA는 siRNA가 표적 유전자와 동일한 세포 내에 존재하거나 발현될 때 유전자 또는 표적 유전자의 발현을 저하 또는 억제하는 능력을 갖는다. 이본쇄 RNA siRNA는 상보적인 쇄들에 의해 형성될 수 있다. 일 실시 형태에서, siRNA는 이본쇄 siRNA를 형성할 수 있는 핵산을 말한다. siRNA의 서열은 전 길이 표적 유전자, 또는 그의 부분서열(subsequence)에 상응할 수 있다. 통상적으로, siRNA는 약 15 내지 50개 이상의 뉴클레오티드 길이이다(예를 들어, 이본쇄 siRNA의 각각의 상보적인 서열은 약 15 내지 50개의 뉴클레오티드 길이이며, 이본쇄 siRNA는 약 15 내지 50개의 염기쌍 길이, 바람직하게는 약 19 내지 30개의 염기 뉴클레오티드, 바람직하게는 약 20 내지 25개의 뉴클레오티드 길이, 예를 들어 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 또는 30개의 뉴클레오티드 길이임).
본 명세서에 사용된 바와 같이, "shRNA" 또는 "짧은 헤어핀(small hairpin) RNA" (스템 루프(stem loop)로도 불림)는 siRNA 유형이다. 일 실시 형태에서, 이들 shRNA는 짧은(예를 들어, 약 19 내지 약 25개의 뉴클레오티드) 안티센스 쇄와, 후행하는 약 5 내지 약 9개의 뉴클레오티드의 뉴클레오티드 루프, 및 유사 센스 쇄로 구성된다. 대안적으로, 센스 쇄는 뉴클레오티드 루프 구조를 선행할 수 있으며, 안티센스 쇄는 후행할 수 있다.
RNAi는, 예를 들어 문헌[Schiffelers and Storm, Expert Opin Drug Deliv. 2006 May; 3(3):445-54]에 기재된 나노입자, 또는 리포솜(예를 들어, 문헌[Hughes et al., Methods Mol Biol. 2010; 605:445-59])의 도움으로 전달될 수 있다.
특정 실시 형태에서, 핵산인 DSB 수복 억제제는 안티센스 RNA일 수 있다.
특정 실시 형태에서, 핵산인 DSB 수복 억제제는 리보자임일 수 있다. 세포 mRNA 전사물을 촉매적으로 절단하도록 설계된 리보자임 분자가 또한 세포 mRNA의 번역 및 세포 폴리펩티드의 발현, 또는 둘 모두를 방지하는 데 사용될 수 있다(예를 들어, PCT 국제 공개 W090111364호; 문헌[Sarver et al. 1990, Science 247, 1222-1225] 및 미국 특허 제5,093,246호 참조). 부위 특이적 인식 서열에서 mRNA를 절단하는 리보자임이 세포 mRNA를 파괴하는 데 사용될 수 있지만, 햄머헤드(hammerhead) 리보자임의 사용이 바람직하다. 햄머헤드 리보자임은 표적 mRNA와 상보적인 염기쌍을 형성하는 플랭킹 영역에 의해 결정되는 위치에서 mRNA를 절단한다. 유일한 요건은 표적 mRNA가 다음과 같은 2개의 염기의 서열을 갖는다는 것이다: 5'-UG-3'. 햄머헤드 리보자임의 작제 및 생산은 당업계에 익히 공지되어 있으며, 문헌[Haseloff and Gerlach 1988, Nature 334:585-591]에 더 상세히 기재되어 있다. 리보자임은 절단 인식 부위가 세포 mRNA의 5' 말단 부근에 위치되도록 가공될 수 있는데, 즉 이는 효율을 증가시키고 비기능적 mRNA 전사물의 세포내 축적을 최소화하기 위함이다.
본 명세서에 제시된 방법 및 조성물의 리보자임은 또한 RNA 엔도리보뉴클레아제(이하, "세치-유형(Cech-type) 리보자임"), 예컨대 테트라히메나 서모필라(Tetrahymena thermophia)에서 천연적으로 발생되고(IVS, 또는 L-19IVS RNA로 알려짐), 세치 및 공동연구자에 의해 광범위하게 기재된 것을 포함한다(문헌[Zaug, et al. 1984, Science 224:574-578]; [Zaug, et al. 1986, Science 231:470-475]; [Zaug, et al. 1986 Nature 324:429-433]; 공개된 국제 특허 출원 WO88/04300호; 문헌[Been, et al. 1986, Cell 47:207-216]). 세치-유형 리보자임은, 표적 RNA 서열에 교잡되고 이후에는 표적 RNA의 절단이 일어나는 8개의 염기쌍 활성 부위를 갖는다. 본 발명의 방법 및 조성물은 세포 유전자 내에 존재하는 8개의 염기쌍 활성 부위 서열을 표적으로 하는 세치-유형 리보자임을 포함한다.
안티센스 접근에서와 같이, 리보자임은 개질된 올리고뉴클레오티드(예를 들어, 개선된 안정성, 표적화 등을 위하여)로 구성될 수 있으며, 생체내에서 DNA 편집 효소 유전자를 발현하는 세포로 전달되어야 한다. 바람직한 전달 방법은 강한 구성적 pol HI 또는 pol II 프로모터의 제어 하에서 리보자임을 암호화하는 DNA 작제물을 사용하는 것을 포함하는데, 이러한 작제물의 사용으로 형질감염된 세포가 충분한 양의 리보자임을 생산하여 내인성 세포 메시지를 파괴하고 번역을 억제하게 될 것이다. 안티센스 분자와 달리 리보자임은 촉매적이기 때문에, 효율에 있어 더 낮은 세포내 농도가 필요하다.
본 명세서에서 상호교환가능하게 사용되는 용어 "microRNA" 또는 "miRNA"는 내인성 RNA이며, 이들 중 일부는 전사 후 수준에서 단백질-암호화 유전자의 발현을 조절하는 것으로 알려져 있다. 내인성 microRNA는 게놈 내에 천연적으로 존재하는 작은 RNA이며, 이때 작은 RNA는 mRNA의 생산적 이용을 조절할 수 있다. 용어 "인공 microRNA"는 내인성 microRNA 이외에, mRNA의 생산적 이용을 조절할 수 있는 RNA 서열의 유형을 포함한다. microRNA 서열은 문헌[Lim, et al., Genes & Development, 17, p. 991-1008 (2003)]; [Lim et al., Science 299, 1540 (2003)]; [Lee and Ambros, Science, 294, 862 (2001)]; [Lau et al., Science 294, 858-861 (2001)]; [Lagos-Quintana et al., Current Biology, 12, 735-739 (2002)]; [Lagos Quintana et al., Science 294, 853-857 (2001)]; 및 [Lagos-Quintana et al., RNA, 9, 175-179 (2003)]와 같은 간행물에 기재된 바 있으며, 이들은 참고로 포함된다. 다수의 microRNA가 또한 전구체 분자 내로 포함될 수 있다. 더욱이, miRNA-유사 스템-루프가 비히클로서 세포 내에서 발현되어, miRNA 및 또는 RNAi 경로를 통한 내인성 유전자의 발현을 조절하려는 목적으로 인공 miRNA 및 짧은 간섭 RNA(siRNA)를 전달할 수 있다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, "이본쇄 RNA" 또는 "dsRNA"는 2개의 쇄로 구성된 RNA 분자를 말한다. 이본쇄 분자는 그 스스로가 다시 겹쳐져서 이본쇄 구조를 형성하는 단일 RNA 분자로 구성된 것들을 포함한다. 예를 들어, 일본쇄 miRNA가 유래되는 전구 분자(progenitor molecule; 전구-miRNA (pre-miRNA)라 불림) (문헌[Bartel et al., 2004, Cell 116:281-297])의 스템 루프 구조는 dsRNA 분자를 포함한다.
표적 유전자 발현의 억제제 또는 활성화제로서의 역할을 할 수 있는 뉴클레오티드 서열(예: RNAi, siRNA, shRNA)을 선택하기 위한 수단은 당업자에게 익히 공지되어 실시되고 있다. 특정 핵산 서열에 대한 RNAi 작용제를 설계하는 데 많은 컴퓨터 프로그램이 이용가능하다. RNAi의 표적화된 영역(예: siRNA 등)이 주어진 표적 유전자 서열(예: RAD51)로부터 선택될 수 있는데, 이때 출발 코돈의 다운스트림은 약 25 내지 50개의 뉴클레오티드, 약 50 내지 75개의 뉴클레오티드, 또는 약 75 내지 100개의 뉴클레오티드로부터 시작된다. 뉴클레오티드 서열은 5' 또는 3' UTR 및 출발 코돈 부근의 영역을 함유할 수 있다. 본 명세서에 기재된 기술의 siRNA 분자를 설계하는 한 가지 방법은 23 뉴클레오티드 서열 모티프 AA(N19)TT (여기서, N은 임의의 뉴클레오티드일 수 있음) (서열 번호: 156)를 확인하고, 적어도 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70% 또는 75% G/C 함량을 갖는 히트를 선택하는 것을 포함한다. 이 서열의 "TT" 부분은 선택적이다. 대안적으로, 그러한 서열이 발견되지 않을 경우, 검색은 모티프 NA(N21)을 사용하여 확장될 수 있으며, 여기서 N은 임의의 뉴클레오티드일 수 있다. 이러한 상황에서, 센스 siRNA의 3' 말단은 TT로 변환되어 센스 및 안티센스 3' 오버행의 서열 조성에 대해 대칭 이본쇄(symmetric duplex)의 생성을 가능하게 한다. 이어서, 안티센스 RNAi 분자는 23 뉴클레오티드 서열 모티프의 뉴클레오티드 위치 1 내지 21에 대한 보체로서 합성될 수 있다. 대칭 3' TT 오버행의 사용은, 예를 들어 작은 간섭 리보핵단백질 입자(siRNP)가 대략 동일한 비의 센스 및 안티센스 표적 RNA-절단성 siRNP로 형성되는 것을 보장하는 데 유리할 수 있다(문헌[Elbashir et al. 2001], 상기 참조).
일부 실시 형태에서, RNAi 작용제는 확인된 표적 유전자 서열 내의 적어도 5개의 연속된 뉴클레오티드를 표적으로 한다. 일 실시 형태에서, RNAi 작용제는 확인된 표적 서열 내의 적어도 6, 7, 8, 9 또는 10개의 연속된 뉴클레오티드를 표적으로 한다. 일부 실시 형태에서, RNAi 작용제는 확인된 표적 서열 내의 적어도 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 또는 19개의 연속된 뉴클레오티드를 표적으로 한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 개시된 RNAi 작용제에서 뉴클레아제 내성을 증가시키기 위하여, 비-인산디에스테르 골격 결합, 예를 들어 메틸포스포네이트, 포스포로티오에이트 또는 포스포로디티오에이트 결합 또는 이들의 조합을 RNAi 작용제의 하나 이상의 비-RNASE H-활성화 영역 내로 포함시킬 수 있다. 그러한 비활성화 영역은 추가적으로 2'-치환체를 포함할 수 있으며, 또한 키랄적으로 선택된 골격 결합을 포함하여 결합 친화성 및 이본쇄의 안정성을 증가시킬 수 있다. 다른 작용기가 또한 올리고뉴클레오시드 서열에 결합되어 다양한 바람직한 특성을 부여할 수 있는데, 예컨대 세포막을 통한 올리고뉴클레오시드 서열의 흡수를 향상시키거나, 안정성을 향상시키거나 표적 핵산과의 하이브리드 형성을 향상시키거나, 또는 (프소랄렌 광가교결합성 치환체와 같이) 표적과의 가교결합을 촉진시킬 수 있다. 예를 들어, PCT 공개 WO 92/02532호를 참조하며, 이는 본 명세서에 참고로 포함된다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 항체, 단일클론 항체, 또는 항체 단편이다(전반적으로 문헌[Hood et al., Immunology, Benjamin, N.Y., 2ND ed. (1984), Harlow and Lane, Antibodies], [A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory (1988)] 및 [Hunkapiller and Hood, Nature, 323, 15-16 (1986)], 이들은 본 명세서에 참고로 포함됨). 항체는 당업자에게 익히 공지된 방법을 사용하여 제조된다. 통상적으로, 원하는 항원으로 면역화된 동물로부터의 비장 세포가, 일반적으로는 골수종 세포와의 융합에 의해 불사화(immortalize)된다(문헌[Kohler and Milstein (1976) Eur, J. Immunol. 6:511-519] 참조, 이는 본 명세서에 참고로 포함됨). 불사화의 대안적인 방법에는 엡스타인 바르 바이러스, 암유전자, 또는 레트로바이러스에 의한 형질전환, 또는 당업계에 공지된 다른 방법이 포함된다. 단일 불사화 세포로부터 발생되는 콜로니는 항원에 대한 원하는 특이성 및 친화성의 항체의 생산에 대해 선별되며, 그러한 세포에 의해 생산된 단일클론 항체의 수율은 척추동물 숙주의 복막강 내로의 주사를 포함한 다양한 기술에 의해 향상될 수 있다. 대안적으로, 예를 들어 문헌[Huse, et al. (1989), Science 246:1275-1281]에 개략적으로 설명된 일반적 프로토콜에 따라 인간 B 세포로부터 DNA 라이브러리를 선별함으로써, 또는 파지 제시(phage display) 라이브러리를 선별함으로써 단일클론 항체 또는 항체 단편 또는 그의 결합성 단편을 암호화하는 DNA 서열을 단리할 수 있다(예를 들어, WO 91/17271호 및 WO 92/01047호 참조). 특정 실시 형태에서, RAD51-매개 쇄 교환 수복의 억제제는 인트라바디이다. 인트라바디 생산 방법은, 예를 들어 WO 2002/086096호에 기재된 바와 같이 당업자에게 익히 공지되어 있다. 항체는 적어도 KD가 약 1 mM, 예를 들어 1 mM 이하, 300μM 이하, 30μM 이하, 10μM 이하, 3μM 이하, 1μM 이하, 100 nM 이하, 또는 10 nM 이하인 값으로 통상 결합할 것이다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 단백질 또는 펩티드이다. 펩티드 작용제는 천연 발생 단백질의 단편, 또는 RAD51-매개 교환 수복의 단백질의 모방체 또는 펩티드모방체일 수 있다. 단백질 및/또는 펩티드 또는 그의 단편의 형태의 작용제는 본 명세서에 기재된 DSB 수복에 관여하는 유전자 또는 단백질을 조절하도록, 즉 유전자 발현 또는 암호화된 단백질 활성을 조절하도록 설계될 수 있다. 그러한 작용제는 통상 부재하는 단백질뿐만 아니라 세포 내에서 통상 내재적으로 발현되는, 예를 들어 저수준으로 발현되는 단백질도 포함하고자 한다. 유용한 단백질의 예는 돌연변이 단백질, 유전자 가공 단백질, 펩티드, 합성 펩티드, 재조합 단백질, 키메라 단백질, 인간화 단백질, 개질 단백질 및 이들의 단편이다. 유전자 발현 또는 단백질 활성의 조절은 직접적 또는 간접적일 수 있다. 일 실시 형태에서, 단백질/펩티드 작용제는 본 명세서에서 확인된 유전자에 의해 암호화된 단백질에 직접 결합되거나, 또는 본 명세서에서 확인된 유전자의 핵산에 직접 결합된다.
펩티드는 억제 활성에 대해 선별될 수 있다. 펩티드 라이브러리, 예를 들어 펩티드 또는 다른 화합물의 조합 라이브러리는 완전 랜덤화될 수 있으며, 임의의 위치에서의 서열 선호 또는 일정은 없다. 대안적으로, 라이브러리는 바이어스될 수 있으며, 즉 서열 내의 일부 위치는 일정하게 유지되거나, 또는 한정된 수의 가능성으로부터 선택된다. 예를 들어, 일부 경우에, 뉴클레오티드 또는 아미노산 잔기는, 예를 들어, 시스테인의 생성을 향하거나, SH-3 도메인을 위한 프롤린, 인산화 부위를 위한 세린, 트레오닌, 티로신 또는 히스티딘의 가교결합을 위하거나, 퓨린에 대한, 소수성 아미노산, 친수성 잔기, 입체적으로 바이어스된(작거나 큰) 잔기의 규정된 클래스 내에서 랜덤화된다.
시험 작용제는 천연 발생 단백질 또는 그의 단편일 수 있다. 그러한 시험 작용제는 천연 공급원, 예를 들어 세포 또는 조직 용해물로부터 얻어질 수 있다. 폴리펩티드 작용제의 라이브러리는 또한, 예를 들어 구매가능하거나 또는 일상적 방법에 의해 생성된 cDNA 라이브러리로부터 제조될 수 있다. 시험 작용제는 또한 펩티드, 예를 들어 약 5 내지 약 30개의 아미노산의 펩티드일 수 있으며, 약 5 내지 약 20개의 아미노산이 바람직하며, 약 7 내지 약 15개가 특히 바람직하다. 펩티드는 천연 발생 단백질의 소화물(digest), 랜덤 펩티드, 또는 "바이어스된" 랜덤 펩티드일 수 있다. 일부 방법에서, 시험 작용제는 폴리펩티드, 펩티드 또는 단백질이다. 시험 작용제는 또한 핵산일 수 있다. 핵산 시험 작용제는 천연 발생 핵산, 랜덤 핵산, 또는 "바이어스된" 랜덤 핵산일 수 있다. 예를 들어, 원핵생물 또는 진핵생물 게놈의 소화물이 단백질에 대해 상기에 기재된 것과 유사하게 사용될 수 있다.
선별하고자 하는 시험 작용제의 라이브러리는 또한 본 명세서에서 확인된 유전자에 의해 암호화된 단백질 또는 그의 단편의 구조적 연구에 기초하여 생성될 수 있다. 그러한 구조적 연구는 단백질에 결합되고 그의 활성을 조절할 가능성이 더 높은 시험 작용제의 확인을 가능하게 한다. 단백질의 3차원적 구조는 다수의 방법, 예를 들어 결정 구조 및 분자 모델링으로 연구될 수 있다. X선 결정학을 사용하여 단백질 구조를 연구하는 방법은 문헌에 익히 공지되어 있다. 문헌[Physical Bio-chemistry, Van Holde, K. E. (Prentice-Hall, New Jersey 1971), pp. 221-239], 및 [Physical Chemistry with Applications to the Life Sciences, D. Eisenberg & D. C. Crothers (Benjamin Cummings, Menlo Park 1979)]을 참조한다. 구조의 컴퓨터 모델링은 시험 작용제를 조절제에 대해 선별하도록 설계하기 위한 또 다른 수단을 제공한다. 분자 모델링 방법은 문헌, 예를 들어 발명의 명칭이 "감도 인자를 이용하여 분자 모델링을 하기 위한 시스템 및 방법" (System and method for molecular modeling utilizing a sensitivity factor)인 미국 특허 제5,612,894호, 및 발명의 명칭이 "분자 모델링 방법 및 시스템" (Molecular modeling method and system)인 미국 특허 제5,583,973호에 기재된 바 있다. 게다가, 단백질 구조는 또한 중성자 회절 및 핵자기 공명(NMR)에 의해 결정될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Physical Chemistry, 4th Ed. Moore, W. J. (Prentice-Hall, New Jersey 1972)], 및 [NMR of Proteins and Nucleic Acids, K. Wuthrich (Wiley-Interscience, New York 1986)]을 참조한다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에서 확인된 유전자의 발현을 억제하는 것으로 선별되고 확인하거나, 또는 본 명세서에서 확인된 유전자에 의해 암호화된 단백질의 활성을 억제하는 것으로 확인된 시험 화합물은 DSB 수복을 비처리된 대조군에 대하여 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 50%, 70%, 80%, 90%, 1배, 1.1배, 1.5배, 2배, 3배, 4배, 5배, 10배, 50배, 100배 이상 또는 그 초과로 억제할 수 있다.
대안적으로, 작용제는 유전자를 조절하는 어떤 것을 생산하도록 세포내에서 이용되거나 개질될 수 있는데, 예를 들어 세포 내로의 핵산 서열의 도입, 및 유전자 발현 또는 단백질 활성의 억제제 또는 활성화제의 생산으로 이어지는 그의 전사가 있다.
치료
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술은 (a) 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준이란, AID의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술은 (a) 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 B 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준이란, DNA 편집 효소의 수준이 건강한 개체로부터의 B 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소의 발현은 건강한 대상체에서 검출 불가능하다. 일부 실시 형태에서, 대상체는 인간 대상체일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준과 비교하여 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 대상체는 대상체로부터 얻어진 세포의 샘플 내의 DNA 편집 효소 단백질 및/또는 mRNA의 수준을 결정함으로써 확인된다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준은 건강한 대상체로부터의 정상 세포보다 유의하게 더 높다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 DNA 편집 효소의 수준보다 유의하게 더 높다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 B 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 AID의 수준보다 유의하게 더 높다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술은 (a) 상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준이란, AID의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 AID의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술은 (a) 상승된 수준의 AID를 발현하는 B 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준이란, AID의 수준이 건강한 개체로부터의 B 세포 내의 AID의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시 형태에서, AID 발현은 건강한 대상체에서 검출 불가능하다.
일부 실시 형태에서, 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 AID의 수준과 비교하여 상승된 수준의 AID를 발현하는 세포를 갖는 대상체는 대상체로부터 얻어진 세포의 샘플 내의 AID 단백질 및/또는 mRNA의 수준을 결정함으로써 확인된다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID를 발현하는 세포 내의 AID의 수준은 건강한 대상체로부터의 정상 세포보다 유의하게 더 높다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID를 발현하는 세포 내의 AID의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 AID의 수준보다 유의하게 더 높다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID를 발현하는 B 세포 내의 AID의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 AID의 수준보다 유의하게 더 높다.
또한, 대상체의 세포 내의 DNA 편집 효소(예: AID) 단백질, mRNA 및/또는 활성의 수준을 결정함으로써 대상체에서의 이상(예: 암 또는 자가면역 질환)이 DSB 수복 억제제에 의한 치료에 반응할지를 결정하는 방법이 본 명세서에 제공된다. 대상체의 세포(시험 샘플) 내의 고수준의 DNA 편집 효소의 존재는 대상체가 DSB 수복 억제제에 의한 치료에 반응할 것이라는 지표가 될 수 있다. DNA 편집 효소의 수준은, 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 수준을 평가하고, 관찰된 수준을 대조 참조 샘플 내에서 발견된 DNA 편집 효소의 수준에 대비함으로써 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
일 실시 형태에서, 치료하고자 하는 이상(예: 암 또는 자가면역 질환)은 고수준의 DNA 편집 효소를 갖는 것으로 당업자에게 이미 알려져 있으며, 따라서 DSB 수복 억제제에 의한 치료는 환자로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 단백질, mRNA, 및/또는 발현의 수준을 측정할 필요 없이 적응된다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, "생물학적 샘플"은 환자, 바람직하게는 인간 환자로부터 얻어진 생물학적 재료의 샘플을 말하며, 이러한 샘플에는 조직 샘플(예: 조직 생검, 예컨대 흡인 생검, 브러시 생검, 표면 생검, 바늘 생검, 펀치 생검, 절제 생검, 개방 생검, 절개 생검 또는 내시경 생검 또는 세포 샘플(예: 상피 세포 또는 림프구)이 포함된다. 생물학적 샘플은 또한 생물학적 유체 샘플, 예를 들어 정액, 소변, 혈액, 혈청, 타액, 뇌척수액, 및 세포 용해물(cell lysate)로부터의 상청액(예: 림프구 분획)일 수 있다. 본 명세서에 기재된 기술의 일부 실시 형태는 또한 본 명세서에 기재된 방법에서의 생물학적 샘플의 단리물(isolate)의 사용을 포함한다.
대조 참조 샘플은 건강한 개체, 즉 암 또는 자가면역 질환을 갖지 않는 개체로부터 얻어진 (동일한 유형의) 생물학적 샘플일 수 있다. 대조 참조 샘플은 또한 동일한 유형의 생물학적 샘플에서 정상적으로 발견되는 것과 동일한 농도의 DNA 편집 효소를 함유하고 건강한 개체로부터 얻어진 표준 샘플일 수 있다. 예를 들어, 특정 세포 분획(예: 림프구), 정액, 소변, 혈액, 뇌척수액, 또는 조직과 같은 생물학적 샘플에서 정상적으로 발견되는 DNA 편집 효소의 양에 대한 표준 참조 대조 샘플이 있을 수 있다. 일 실시 형태에서, 대조 참조 샘플은 암 또는 자가면역 질환을 갖지 않는 건강한 개체 집단으로부터의 세포에서 발견되는 DNA 편집 효소 mRNA 또는 DNA 편집 효소 단백질의 평균 또는 중앙값 농도를 함유하는 표준 참조 샘플이다. 일 실시 형태에서, 예를 들어 세포가 B 세포일 경우, 참조 수준은 건강한 개체로부터의 비활성화된 B-림프구 집단에서 발견되는 DNA 편집 효소 단백질 또는 mRNA의 수준이다. 일 실시 형태에서, 대조 참조 샘플은 환자로부터의 건강한 세포 또는 조직으로부터의 환자의 생물학적 샘플이며, 예를 들어 환자가 림프종을 가질 경우, 구강 면봉 채취 검체(cheek swab) 또는 피부 생검이 참조 샘플로서 사용될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 클래스 스위칭을 거친 B-세포의 집단에서 발견되는 DNA 편집 효소 mRNA, 단백질, 및/또는 활성의 수준은 적합한 대조 참조 샘플이 아니다.
대상체로부터 얻어진 세포는 대상체의 세포(예: 암성 또는 자가면역 세포를 포함하는 생물학적 샘플)에서 검출된 DNA 편집 효소 단백질, DNA 편집 효소 mRNA, 및/또는 DNA 편집 효소 활성의 수준이 건강한 대상체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준을 대표하는 참조 대조 샘플에서 발견된 DNA 편집 효소 단백질, mRNA 및/또는 활성의 수준보다 통계학적으로 유의한 양으로 더 높을 경우, 증가된 또는 상승된 수준의 DNA 편집 효소 단백질 및/또는 mRNA를 갖는 것으로 특징지워진다. DNA 편집 효소의 수준은 임의의 단위, 예를 들어 덴시토미터, 루미노미터, 또는 ELISA 플레이트 리더 등으로부터 얻어진 단위로 나타낼 수 있다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
본 명세서에 사용된 바와 같이, DNA 편집 효소단백질, mRNA, 및/또는 활성의 "고수준", "상승된 수준", 및/또는 "증가된 수준"이란 용어는 상호교환가능하게 사용되며, 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준을 대표하는 대조 참조 샘플 내에 존재하는 DNA 편집 효소단백질, mRNA, 및/또는 활성의 양보다 유의하게 더 큰 DNA 편집 효소단백질, mRNA, 및/또는 활성의 양을 말한다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
일부 실시 형태에서, 대조 참조 샘플은 DNA 편집 효소 수준을 결정하고자 하는 세포와 동일한 유형의 건강한 세포를 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 대조 참조 샘플의 세포는 DNA 편집 효소 발현의 수준을 결정하고자 하는 세포와 유사한 연령, 발달 상태, 성별, 및/또는 세포 유형의 것일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 대조 참조 샘플은 DNA 편집 효소 발현의 수준을 결정하고자 하는 대상 유기체와 유사한 연령, 발달 상태, 및/또는 성별의 건강한 유기체로부터 얻어질 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 샘플 및 대조 참조 샘플은 동일한 유형의 것이며, 즉 동일한 생물학적 공급원으로부터 얻어지고, 동일한 조성, 예를 들어 동일한 개수 또는 유형의 세포를 포함한다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
일부 실시 형태에서, 대조 참조 샘플은 건강한, 비활성화된 및/또는 비형질전환된 B 세포를 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 DNA 편집 효소는 건강한, 비활성화된 및/또는 비형질전환된 B 세포에서의 것보다 유의하게 더 큰 수준이다. 일부 실시 형태에서, 클래스-스위칭을 거친 B-세포는 유용한 참조 샘플인 것으로 여겨지지 않는다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
대부분의 정상 세포에서, AID 단백질/mRNA는 검출 불가능하며, 따라서 일부 실시 형태에서, AID의 단순한 검출은 건강한 개체로부터의 세포 내에 검출 불가능한 수준이 존재하는 것과 비교하여 증가된 수준인 것으로 여겨질 수 있다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID란, AID의 수준이, 예를 들어 본 명세서의 실시예 11에서 추가로 기재된 바와 같이 프라이머 서열 번호 서열 번호: 101 및 서열 번호: 102를 사용하는 RT-PCR 검정을 사용하여 검출가능한 수준의 것일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 1 mL당 1 pg의 AID mRNA 또는 그 초과, 예를 들어 10 pg/mL, 100 pg/mL, 1 ng/mL, 10 ng/mL 또는 그 초과일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 1 mL당 10 pg의 AID mRNA 또는 그 초과일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 1 mL당 100 pg의 AID mRNA 또는 그 초과일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 1 mL당 1 ng의 AID mRNA 또는 그 초과일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 1 mL당 1 ng의 AID mRNA 또는 그 초과일 수 있다. 검출가능한 수준의 AID는 혈액 1 mL당 10 ng의 AID mRNA 또는 그 초과일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 1 mL당 100 ng의 AID mRNA 또는 그 초과일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 세포당 5개의 복제물(예: 전사물)의 AID mRNA 또는 그 초과, 예를 들어 세포당 10개의 복제물, 100개의 복제물, 1,000개의 복제물 또는 그 초과일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는, 면역조직화학에 의해 측정했을 때, 조직 절편 내 20 제곱마이크로미터당 1개의 AID 폴리펩티드 또는 그 초과, 예를 들어 조직 절편 내 20 제곱마이크로미터당 1개의 폴리펩티드, 10개의 폴리펩티드, 100개의 폴리펩티드, 1,000개의 폴리펩티드일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 또는 혈청 mL당 0.1 pg의 AID 폴리펩티드 또는 그 초과, 예를 들어 혈액 mL당 0.1 pg, 1 pg, 10 pg, 100 pg, 1 ng, 10 ng, 또는 그 초과일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 또는 혈청 mL당 0.1 pg 이상의 AID 폴리펩티드일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 mL당 10 pg 이상의 AID 폴리펩티드일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 mL당 100 pg 이상의 AID 폴리펩티드일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 mL당 1 ng 이상의 AID 폴리펩티드일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 mL당 10 ng 이상의 AID 폴리펩티드일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 검출가능한 수준의 AID는 혈액 mL당 100 ng 이상의 AID 폴리펩티드일 수 있다.
일부 실시 형태에서는, 혈청을 포함하는 샘플로부터 먼저 혈청 알부민을 감소시켜 감도를 증가시킬 수 있다. 일부 실시 형태에서는, DNA 편집 효소의 수준을 검출하기 전에 혈액을 포함하는 샘플이 B-세포에 대해 또는 암성 세포에 대해 부화될 수 있다. 일부 실시 형태에서는, 발현 수치가 소프트웨어(예: 마이크로소프트(Microsoft) 엑셀(EXCEL)® 스프레드시트 및 어피메트릭스(Affymetrix) 진칩(GENECHIP)® 소프트웨어)에 의해 정량화되고 분석될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 대상체는 대상체의 세포 내 AID의 수준이 대조 참조 샘플 내에 존재하는 AID의 수준보다 유의하게 더 클 경우, 본 명세서에 기재된 방법에 따라 치료하기 위한 후보대상이다. 일부 실시 형태에서, 대상체는 대상체의 세포 내 AID의 수준이 대조 참조 샘플 내에 존재하는 AID의 수준보다 적어도 1.5배, 2배, 5배, 10배 더 클 경우, 예를 들어 1.5배 이상, 2배 이상, 3배 이상, 4배 이상, 5배 이상, 또는 6배 이상일 경우, 본 명세서에 기재된 방법에 따라 치료하기 위한 후보대상이다.
일부 실시 형태에서, 건강한 대상체 및/또는 본 명세서에 기재된 방법에 따른 치료를 필요로 하지 않는 대상체는 세포가 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 발현하지 않는 자이다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID일 수 있다.
본 명세서에 기재된 바와 같은 AID의 수준은 당업자에게 공지된 임의의 수단에 의해 측정될 수 있다. 특정 실시 형태에서, AID 단백질의 수준의 결정은 하기의 검정 중 하나 이상의 사용을 포함한다: 웨스턴 블롯; 면역침전; 효소-결합 면역흡수 검정(ELISA); 방사면역학적 검정(RIA); 샌드위치 검정; 형광 동소 교잡(FISH); 면역조직학적 염색; 방사면역측정 검정; 겔 확산 침전 반응; 면역확산 검정; 현장 면역검정; 침전 반응; 응집 검정; 보체 고정 검정; 면역형광 검정; 단백질 A 검정; 질량 분석 및/또는 면역전기영동 검정. 특정 실시 형태에서, AID 단백질의 수준의 결정은 항체, 항체 단편, 단일클론 항체, 단일클론 항체 단편, 단백질 결합성 단백질, 및/또는 AID-결합성 펩티드의 사용을 포함한다.
특정 실시 형태에서, AID mRNA의 수준의 결정은 하기의 검정 중 하나 이상의 사용을 포함한다: RT-PCR, 정량적 RT-PCR, 교잡 검정, RNA-Seq, 노턴 블롯, 고성능 서열 분석, 마이크로어레이 기반 발현 분석, 전사 증폭 및/또는 자기-지속 서열 복제. 특정 실시 형태에서, AID mRNA의 수준의 결정은 항체, 항체 단편, 단일클론 항체, 및/또는 단일클론 항체 단편의 사용을 포함한다.
mRNA 의 수준을 평가하는 방법은 당업자에게 익히 공지되어 있다. 바람직한 실시 형태가 본 명세서에 기재되어 있다. 레이저 포획 미세해부(LCM)가 당업자에게 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌[Simon et al. (1998) Trends in Genetics 14:272] 및 [Emmert-Buck et al. (1996) Science 274:998-1001]을 참조한다. 본 명세서에 기재된 기술의 일 실시 형태에서는, 종양 샘플 또는 생검이 얻어지고, 분석을 위한 유전 물질, 예컨대 mRNA를 얻기 위해 LCM이 사용된다. 당업계에 익히 공지된 다수의 절차 중 임의의 것을 사용하여 특정 생물학적 샘플로부터 핵산 분자가 단리될 수 있으며, 이때 선택된 특정 단리 절차는 특정 생물학적 샘플에 적절한 것이다. 예를 들어, 냉동-해동 및 알칼리 용해 절차는 고체 재료로부터 핵산 분자를 얻는 데 유용할 수 있으며; 열 및 알칼리 용해 절차는 소변으로부터 핵산 분자를 얻는 데 유용할 수 있으며; 단백질분해효소 K 추출은 혈액으로부터 핵산을 얻는 데 사용될 수 있다(문헌[Rolff, A et al. PCR: Clinical Diagnostics and Research, Springer (1994)]).
실시간 PCR은 mRNA 발현의 수준을 결정하는 데 사용될 수 있는 증폭 기술이다. (예를 들어 문헌[Gibson et al., Genome Research 6:995-1001, 1996]; [Heid et al., Genome Research 6:986-994, 1996] 참조). 실시간 PCR은 증폭 동안 PCR 생산물 축적의 수준을 평가한다. 이 기술은 다수의 샘플에서의 mRNA 수준의 정량적 평가를 가능하게 한다. mRNA 수준의 경우, 생물학적 샘플, 예를 들어 종양 및 정상 조직으로부터 mRNA를 추출하고, 표준 기술을 사용하여 cDNA를 제조한다. 예를 들어, 퍼킨 엘머/어플라이드 바이오시스템즈(Perkin Elmer/Applied Biosystems, 미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재) 7700 프리즘 기기를 사용하여 실시간 PCR이 수행될 수 있다. 프라이머 및 형광 프로브의 정합이, 예를 들어 퍼킨 엘머/어플라이드 바이오시스템즈(미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재)에 의해 제공된 프라이머 발현 프로그램을 사용하여 관심 대상의 유전자에 대해 설계될 수 있다. 프라이머 및 프로브의 최적 농도가 초기에 당업자에 의해 결정될 수 있으며, 대조(예를 들어, 베타-액틴) 프라이머 및 프로브가, 예를 들어 퍼킨 엘머/어플라이드 바이오시스템즈(미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재)로부터 상업적으로 입수될 수 있다.
샘플 내의 관심 대상의 특정 핵산의 양을 정량화하기 위해, 대조군을 사용하여 표준 곡선을 생성한다. 표준 곡선은 실시간 PCR에서 결정된 Ct 값을 사용하여 생성될 수 있는데, 이 값은 검정에 사용된 관심 대상의 핵산의 초기 농도와 관련된다. 관심 대상의 유전자의 10 내지 106개 범위의 복제물에 이르는 표준 희석액이면 일반적으로 충분하다. 게다가, 표준 곡선은 대조 서열에 대해 생성된다. 이는 비교 목적을 위한 대조군의 양에 대해 조직 샘플 내의 관심 대상의 핵산의 초기 함량의 표준화를 가능하게 한다. TaqMan 프로브를 사용한 실시간 정량적 PCR의 방법이 당업계에 익히 공지되어 있다. 실시간 정량적 PCR에 대한 상세 프로토콜이, 예를 들어 RNA에 대해서는 문헌[Gibson et al., 1996 Genome Res., 10:995-1001]에, 그리고 DNA에 대해서는 문헌[Heid et al., 1996 Genome Res., 10:986-994]에 제공되어 있다.
TaqMan-기반 검정은 또한 발현 수준을 정량화하는 데 사용될 수 있다. TaqMan-기반 검정은 5' 형광 염료 및 3' 소광제를 함유하는 형광성 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용한다. 이 프로브는 PCR 생산물에 교잡되지만, 3' 말단에서의 차단제로 인해 그 자체는 연장될 수 없다. PCR 생산물이 후속 주기에서 증폭될 경우, 폴리머라제, 예를 들어 AmpliTaq의 5' 뉴클레아제 활성은 TaqMan 프로브의 절단을 발생시킨다. 이 절단은 5' 형광 염료와 3' 소광제를 분리시키고, 그럼으로써 증폭의 함수로서 형광을 증가시킨다.
또 다른 실시 형태에서, 예를 들어 RNA 전사물의 검출이 노턴 블로팅에 의해 달성될 수 있는데, 여기서는 RNA의 조제물이 변성 아가로스 겔 상에서 러닝(running)되고, 적합한 지지체, 예컨대 활성화된 셀룰로오스, 니트로셀룰로오스 또는 유리 또는 나일론 막으로 이동된다. 이어서, 표지된(예를 들어, 방사성 표지된) cDNA 또는 RNA가 조제물에 교잡되고, 세척되고, 오토라디오그래피와 같은 방법에 의해 분석된다.
mRNA 수준을 모니터링하기 위해, 예를 들어 시험하고자 하는 생물학적 샘플로부터 mRNA를 추출하고, 역전사하고, 형광-표지된 cDNA 프로브를 생성한다. 이어서, 조절가능한 단백질을 암호화하는 전사물로부터 생성된 cDNA에 교잡될 수 있는 마이크로어레이를 표지된 cDNA 프로브로 프로빙하고, 슬라이드를 스캐닝하고 형광 강도를 측정한다. 이 강도는 교잡 강도 및 발현 수준과 상관된다.
특정 종 또는 서열로 부화되거나 그렇지 않은 RNA 집단은 추가로 증폭될 수 있다. 본 명세서에 정의된 바와 같이, "증폭 과정"은 RNA 내의 분자를 강화, 증가, 또는 증강시키도록 설계된다. 예를 들어, RNA가 mRNA일 경우, 신호가 검출가능하거나 검출이 향상되도록 mRNA를 증폭시키기 위하여 증폭 과정, 예컨대 RT-PCR이 이용될 수 있다. 그러한 증폭 과정은 생물학적 조직 또는 종양 샘플이 작은 크기 또는 부피를 가질 경우에 특히 유익하다.
RNA 전사물의 검출은 추가로 공지된 증폭 방법을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, mRNA를 cDNA에 역전사한 후 폴리머라제 연쇄 반응(RT-PCR)을 행하거나; 또는 미국 특허 제5,322,770호에 기재된 바와 같이 두 단계 모두에 대해 단일 효소를 사용하거나, 문헌[R. L. Marshall, et al., PCR Methods and Applications 4: 80-84 (1994)]에 기재된 바와 같이 mRNA를 cDNA에 역전사한 후 비대칭 갭 리가제 연쇄 반응(RT-AGLCR)을 행하는 것은 본 명세서에 기재된 기술의 범주 내에 있다. 실시간 PCR이 또한 사용될 수 있다. 다른 적합한 방법은 하기를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 등온 검출 방법이다: 리가제 사슬 반응(LCR) (예를 들어, 문헌[Wu and Wallace 1989, Genomics 4, 560 Landegren et al. 1988, Science 241, 1077] 참조); 자기-지속 서열 복제(SSR) (예를 들어, 문헌[Guatelli et al. 1990, PNAS USA, 87, 1874] 참조); 전사 증폭 (예를 들어, 문헌[Kwoh et al. 1989, PNAS USA 86, 1173] 참조); 쇄 치환 증폭(문헌[G. T. Walker et al., 1996, Clin. Chem. 42: 9-13] 및 유럽 특허 출원 제684315호); 롤링 서클 증폭(rolling circle amplification); 루프-매개 등온 증폭; 핵산의 등온 키메라 프라이머-개시 증폭; Q-베타 증폭 시스템(유럽 특허 출원(EPA) 제4544610호); 또는 OCEAN (OneCutEventAmplificatioN; 문헌[Clinical Chemistry 52, 1855-1863 (2006)]). 이러한 등온 검출 방법은 추가로 뉴클레아제 연쇄 반응(NCR), RNAse-매개 뉴클레아제 연쇄 반응(RNCR), 폴리머라제 뉴클레아제 연쇄 반응(PNCR), RNAse-매개 검출(RMD), 탠덤 반복 제한 효소 촉진(TR-REF) 연쇄 반응 또는 반전된 역보체 제한 효소 촉진(Inverted reverse Complement Restriction Enzyme Facilitated (IRC-REF)) 연쇄 반응을 이용할 수 있다. 본 발명에서 이용될 수 있는 다른 공지된 증폭 방법에는 문헌[PNAS USA 87: 1874-1878 (1990)]에 기재되고 또한 문헌[Nature 350 (No. 6313): 91-92 (1991)] 및 [Mollasalehi et al., 2012, Anal Biochem, 425, 91-95]에 기재된 이른바 "NASBA" (핵산 서열 기반 증폭) 또는 "3SR" (자기-지속 서열 복제) 기술; 및 PCT 공개 WO9322461호 및 PCT 공개 WO2010/019898A1호에 기재된 표적 매개 증폭이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
일부 실시 형태에서, AID 핵산은 서열 분석 방법, 예를 들어 고성능 서열 분석, 전체 전사체 숏건 서열 분석(whole transcriptome shotgun sequencing) 또는 RNA-seq를 사용하여 검출될 수 있다. RNA-seq는 다수의 차세대 구매가능한 서열 분석 기술(예: 454 시퀀싱(SEQUENCING)™ 또는 일루미나(ILLUMINA)™) 중 임의의 것을 이용하여 전체 전사체 또는 그의 일부의 고성능 서열 분석을 생성할 수 있다. RNA-seq는, 예를 들어 문헌[Ryan et al. (2008). BioTechniques　45　(1): 81-94]; [Wang Z, et al. (2009). Nature Reviews Genetics　10　(1): 57-63]; [Maher CA, et al.(2009). Nature　458　(7234): 97-101]에 기재되어 있으며, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
또 다른 실시 형태에서, AID 핵산은 "자기-지속 서열 복제"를 사용하여 검출될 수 있다. 이는 레트로바이러스 복제에 본질적인 3개의 효소 활성, 즉 (1) 역전사효소, (2) RNase H, 및 (3) DNA-의존성 RNA 폴리머라제를 이용함으로써 등온 조건 하에서 시험관내에서 지수적으로 증폭되는(복제되는) 표적 핵산 서열을 사용하는 핵산 증폭의 방법이다(문헌[Guatelli, et al. 1990, Proc . Natl. Acad . Sci . USA 87:1874]). cDNA 중간체에 의한 RNA 복제의 레트로바이러스 전략을 모방함으로써, 이 반응은 원래 표적의 cDNA 및 RNA 복제물을 축적한다. '실질적으로 등온'이란, 온도가 대략 1시간 반응 시간 과정에 걸쳐 약 37℃ 내지 50℃의 온도 범위 내에서 변동될 수 있다는 것을 의미한다. 대안적으로, 하나의 온도가 전체 반응을 수행하도록 선택될 수 있다. 45℃에서의 자기-지속 서열 복제가 바람직하다.
또 다른 실시 형태에서, AID 핵산은 "전사 증폭"을 사용하여 검출될 수 있다. 핵산 증폭의 이 방법에서, 각각의 주기는 2개의 단계로 구성된다. 제1 단계에서는, RNA 또는 DNA 표적의 cDNA 복제가 이루어지고, 제2 단계에서는, 각각의 cDNA 복제의 다수의 RNA 전사물이 생성된다(예를 들어, 문헌[Kwoh (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 1173] 참조).
동소 교잡 시각화가 또한 사용될 수 있는데, 여기서는 방사능으로 표지된 안티센스 RNA 프로브가 생검 샘플의 박편과 함께 교잡되고, 세척되고, RNase로 절단되고, 오토라디오그래피를 위한 감광성 에멀젼(sensitive emulsion)에 노출된다. 샘플은 헤마톡실린으로 염색되어 샘플의 조직학적 조성을 입증할 수 있으며, 적합한 광 필터에 의한 암시야 이미징(dark field imaging)은 현상된 에멀젼을 보여준다. 디곡시게닌과 같은 비방사성 표지가 또한 사용될 수 있다.
대안적으로, mRNA 발현은 DNA 어레이, 칩 또는 마이크로어레이 상에서 검출될 수 있다. DNA 편집 효소에 상응하는 핵산이 칩 상에 고정화되고, 이어서 이것은 환자로부터 얻어진 시험 샘플의 표지된 핵산과 교잡된다. DNA 편집 효소의 전사물을 함유하는 샘플에 대해 양성 교잡 신호가 얻어진다. DNA 어레이의 제조 방법 및 그들의 용도는 당업계에 익히 공지되어 있다. (예를 들어, 미국 특허 제6,618,6796호; 제6,379,897호; 제6,664,377호; 제6,451,536호; 제548,257호; 미국 특허 출원 공개 제20030157485호 및 문헌[Schena et al. 1995, Science 20:467-470]; [Gerhold et al. 1999, Trends in Biochem. Sci. 24, 168-173]; 및 [Lennon et al. 2000, Drug discovery Today 5: 59-65] 참조, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함됨). 유전자 발현의 연속 분석(SAGE)이 또한 수행될 수 있다(예를 들어, 미국 특허 출원 공개 20030215858호 참조). mRNA 수준을 모니터링하기 위해, 예를 들어 시험하고자 하는 생물학적 샘플로부터 mRNA를 추출하고, 역전사하고, 형광-표지된 cDNA 프로브를 생성한다. 이어서, DNA 편집 효소 cDNA에 교잡될 수 있는 마이크로어레이를 표지된 cDNA 프로브로 프로빙하고, 슬라이드를 스캐닝하고 형광 강도를 측정한다. 이 강도는 교잡 강도 및 발현 수준과 상관된다. "정량적" 증폭의 정량적 PCR 방법은 당업자에게 익히 공지되어 있다. 예를 들어, 정량적 PCR은 동일한 프라이머를 사용하여 기지량의 대조 서열을 동시에 공증폭(co-amplify)시키는 것을 포함한다. 이는 PCR 반응을 교정하는 데 사용될 수 있는 내부 표준을 제공한다. 정량적 PCR에 대한 상세 프로토콜은, 예를 들어 문헌[Innis et al. (1990), PCR Protocols, A Guide to Methods and Applications, Academic Press, Inc. N.Y.]에 제공되어 있다.
DNA 편집 효소 단백질 수준 또는 DNA 편집 효소 활성이 또한, 특히 생물학적 샘플이 세포 용해물과 같은 유체 샘플일 경우에 측정될 수 있다. 일 실시 형태에서, DNA 편집 효소 단백질의 수준은 생물학적 샘플을 DNA 편집 효소 또는 DNA 편집 효소의 단편에 특이적으로 결합되는 항체 부분 또는 단백질-결합성 단백질과 접촉시킴으로써 측정될 수 있다. 이어서, 항체-DNA 편집 효소 복합체의 형성이 DNA 편집 효소 수준의 척도로서 검출될 수 있다. DNA 편집 효소(예: AID)를 인식하는 항체는 상업적으로 입수되거나 본 명세서의 어딘가 다른 곳에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다.
AID 단백질 수준 또는 AID 활성이 또한 측정될 수 있다. 일 실시 형태에서, AID 단백질의 수준은 생물학적 샘플을 AID 또는 AID의 단편에 특이적으로 결합되는 항체 부분 또는 단백질-결합성 단백질과 접촉시킴으로써 측정된다. 이어서, 항체-AID 복합체의 형성이 AID 수준의 척도로서 검출된다. AID를 인식하는 항체는 상업적으로 입수되거나(ab59361, ab93596 또는 ab77401; 에이비캠(AbCam), 미국 매사추세츠주 케임브리지 소재), 본 명세서의 어딘가 다른 곳에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다. 조직 샘플은 절편으로서, 예를 들어 냉동 또는 고정된 절편으로서 제조되고 항체로 염색될 수 있다. 액체 샘플은, 예를 들어 ELISA 또는 유세포 분석으로 분석될 수 있다.
일 실시 형태에서, 항체 부분은 검출가능하게 표지된다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, "표지된 항체"에는 검출가능한 수단에 의해 표지된 항체가 포함되며, 효소로, 방사능으로, 형광으로, 그리고 화학발광으로 표지된 항체가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 항체는 또한 검출가능한 태그, 예컨대 c-Myc, HA, VSV-G, HSV, FLAG, V5, 또는 HIS로 표지될 수 있다. AID의 검출을 위한 항체-기반 결합 부분을 사용하는 본 명세서에 기재된 진단 및 예후 방법에서, 생물학적 샘플 내에 존재하는 AID의 수준은 검출가능하게 표지된 항체로부터 방출되는 신호의 강도에 상관된다. 일 바람직한 실시 형태에서, 항체-기반 결합 부분은 항체를 효소에 연결시킴으로써 검출가능하게 표지된다. 다시, 효소는 그의 기질에 노출될 때, 예를 들어 분광광도법, 형광측정법에 의해 또는 시각적 수단에 의해 검출될 수 있는 화학적 부분을 생성하도록 하는 방법으로 기질과 반응할 것이다. 본 명세서에 기재된 기술의 항체를 검출가능하게 표지하는 데 사용될 수 있는 효소에는 말레이트 탈수소효소, 포도상구균 뉴클레아제, 델타-V-스테로이드 이성화효소, 효모 알코올 탈수소효소, 알파-글리세로인산 탈수소효소, 트리오스 인산 이성화효소, 고추냉이 과산화효소, 알칼리 포스파타제, 아스파라기나제, 글루코오스 옥시다제, 베타-갈락토시다제, 리보뉴클레아제, 우레아제, 카탈라제, 글루코오스-VI-인산 탈수소효소, 글루코아밀라제 및 아세틸콜린에스테라제가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
다양한 다른 면역검정 중 임의의 것을 사용하여 검출이 또한 수행될 수 있다. 예를 들어, 항체를 방사능으로 표지함으로써, 방사면역 검정의 사용을 통해 항체를 검출하는 것이 가능하다. 방사성 동위원소는 감마 계수기 또는 섬광 계수기의 사용과 같은 수단에 의해 또는 오토라디오그래피에 의해 검출될 수 있다. 본 명세서에 기재된 기술의 목적에 특히 유용한 동위원소는 3H, 131I, 35S, 14C, 그리고 바람직하게는 125I이다. 또한, 항체를 형광 화합물로 표지하는 것이 가능하다. 형광으로 표지된 항체가 적절한 파장의 광에 노출될 경우, 형광으로 인해 그의 존재가 검출될 수 있다. 가장 흔히 사용되는 형광 표지 화합물 중에는 CYE 염료, 플루오레세인 이소티오시아네이트, 로다민, 피코에리트린, 피코시아닌, 알로피코시아닌, o-프탈알데하이드 및 플루오레스카민이 있다. 항체는 또한 형광 방출 금속, 예컨대 152Eu, 또는 란탄족 계열의 다른 금속을 사용하여 검출가능하게 표지될 수 있다. 이들 금속은 디에틸렌트리아민펜타아세트산 (DTPA) 또는 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA)과 같은 금속 킬레이트 기를 사용하여 항체에 부착될 수 있다. 항체는 또한 그것을 화학발광 화합물에 커플링함으로써 검출가능하게 표지될 수 있다. 이어서, 화학 반응 과정 동안 발생되는 발광의 존재를 검출함으로써 화학발광-항체의 존재가 결정된다. 특히 유용한 화학발광 표지 화합물의 예는 루미놀, 루시페린, 이소루미놀, 테로마틱(theromatic) 아크리디늄 에스테르, 이미다졸, 아크리디늄 염 및 옥살산 에스테르이다.
일 실시 형태에서, AID 단백질의 수준은 면역검정, 예컨대 효소 결합 면역흡수 검정(ELISA), 웨스턴 블로팅, 면역세포화학 또는 유세포 분석에 의해 검출된다. 면역검정, 예컨대 ELISA, 유세포 분석 또는 RIA는 매우 신속할 수 있다. 항체 어레이 또는 단백질 칩이 또한 사용될 수 있으며, 예를 들어 미국 특허 출원 공개 제20030013208A1호; 제20020155493A1호; 제20030017515호 및 미국 특허 제 6,329,209호; 제6,365,418호를 참조하며, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
가장 흔한 효소 면역검정은 효소-결합 면역흡수 검정(ELISA)이다. ELISA는 항체의 표지된(예: 효소 결합된) 형태를 사용하여 항원의 농도를 검출 및 측정하기 위한 기술이다. 상이한 형태의 ELISA가 있으며, 이러한 형태는 당업자에게 익히 공지되어 있다. ELISA에 대해 당업계에 공지된 표준 기술은 문헌["Methods in Immunodiagnosis", 2nd Edition, Rose and Bigazzi, eds. John Wiley & Sons, 1980]; [Campbell et al., "Methods and Immunology", W. A. Benjamin, Inc., 1964]; 및 [Oellerich, M. 1984, J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 22:895-904]에 기재되어 있다.
"샌드위치 ELISA"에서는, 항체(예: 항-AID)가 고체상(solid phase) (즉, 마이크로타이터 플레이트)에 결합되고, 이는 항원(예: AID)을 함유하는 생물학적 샘플에 노출된다. 이어서, 고체상을 세척하여 비결합 항원을 제거한다. 이어서, 표지된 항체(예: 효소 결합된)가 결합 항원(존재한다면)에 결합되어 항체-항원-항체 샌드위치를 형성한다. 그 항체에 결합될 수 있는 효소의 예는 알칼리 포스파타제, 고추냉이 과산화효소, 루시페라제, 우레아제, 및 B-갈락토시다제이다. 효소-결합된 항체는 기질과 반응하여 측정될 수 있는 착색된 반응 생성물을 생성한다.
"경쟁적 ELISA"에서는, 항체가 항원(즉, AID)을 함유하는 샘플과 인큐베이션된다. 이어서, 항원-항체 혼합물을 항원(즉, AID)으로 코팅된 고체상(예: 마이크로타이터 플레이트)과 접촉시킨다. 샘플 내에 존재하는 항원이 더 많을수록, 고체상에 결합되는 데 이용가능하게 될 유리 항체는 더 적다. 이어서, 표지된(예: 효소 결합된) 2차 항체를 고체상에 첨가하여 고체상에 결합된 1차 항체의 양을 결정한다. "면역조직화학 검정"에서는, 조직 또는 세포의 절편이 특정 단백질에 대해 시험되는데, 이는 검정되고 있는 단백질에 특이적인 항체에 조직을 노출시킴으로써 행해진다. 면역조직화학 검정에는 동소 면역형광, 또는 광시야 낙사형광 현미경법(widefield epifluorescence microscopy), 및 면역형광 현미경법이 포함될 수 있지만 이로 한정되는 것은 아니다.
"침전 검정" 또는 "겔 확산 침전 반응"이 또한 AID 단백질을 검출하는 데 사용될 수 있다. 항체가 항원(즉, AID)을 함유하는 샘플과 인큐베이션된다. 당량점에 도달할 때 침전물이 형성될 것이다. 겔 확산 침전 반응에서, 항원 및 항체는, 통상적으로 상이한 점에서 한천 겔 내로 도입되고, 겔 내로 자유롭게 확산된다. 반응물이 최적 비율로 접촉할 경우, 침전물이 형성될 것이다. 침전 검정의 변형 형태에는 방사상 면역확산(radial immunodiffusion), 이중 확산 겔 침전 및 오크터로니 이중 면역확산(Ouchterlony double immunodiffusion)이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 정량적 침전 검정은 당업자에게 공지되어 있다(문헌[Basic Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Sharma and Sangha (Eds), I.K. International Publishers Pvt. Lt, New Delhi, India (2009)]; [Essentials of Immunology and Serology, Stanley, J. Thomson, Albany, New York, (2002)]).
이어서, 항체는 존재하는 단백질의 존재 및 양을 결정하기 위해 다수의 방법 중 임의의 것에 의해 시각화된다. 항체를 시각화하기 위해 사용되는 방법의 예에는, 예를 들어 항체에 결합된 효소(예: 루시페라제, 알칼리 포스파타제, 고추냉이 과산화효소, 또는 베타-갈락토시다제)를 통한 방법, 또는 화학적 방법(예: DAB/기질 크로마겐)이 있다. 대안적으로, "방사면역검정"이 사용될 수 있다. 방사면역검정은 표지된(예: 방사능으로 또는 형광으로 표지된) 형태의 항원 또는 에피토프를 사용하여 항원의 농도를 검출 및 측정하기 위한 기술이다. 항원을 위한 방사성 표지의 예에는 3H, 14C, 및 125I가 포함된다. 생물학적 샘플 내의 항원의 농도는 생물학적 샘플 내의 항원 또는 에피토프가 항원에 대한 항체에 결합되기 위한 표지된(예: 방사능으로 표지된) 항원과 경쟁되게 함으로써 측정된다. 표지된 항원과 비표지된 항원 사이의 경쟁적 결합을 보장하기 위하여, 표지된 항원은 항체의 결합 부위를 포화시키기에 충분한 농도로 존재한다. 샘플 내의 항원의 농도가 더 높을수록, 항체에 결합되게 될 표지된 항원의 농도는 더 낮다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소의 수준은 동소 어레이 내 단백질(protein in situ array, PISA)을 사용함으로써 측정될 수 있다. 간단히 말해서, PISA는 유리된 또는 고정화된 PCR DNA를 포함하여 무세포 시스템(예: 래빗 망상적혈구 추출물) 내에서 단백질 합성을 템플레이팅하는 어레이 표면을 포함하며, 단백질은 어레이 표면 상에 이미 사전코팅된 포획 시약과 조합하는 태크 서열을 통한 동시 고정화를 거친다. PISA는, 예를 들어 특허 공개 WO 02/14860호에 기재되어 있으며, 이는 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소의 수준은 정량적 동소 단백질 분석, 예를 들어 AQUA™를 사용함으로써 측정될 수 있다. AQUA™는, 예를 들어 문헌[Stemmann O., Zou H., Gerber S. A., Gygi S. P., Kirschner M. W.]; [Dual inhibition of sister chromatid separation at metaphase, Cell 2001, Dec 14, 107: 715-726] 및 [Keshishian, et al. 2007, Molecular & Cellular Proteomics6.12, 2212-2229]에 기재되어 있으며, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
본 개시내용에 기초하여 실시자의 선호에 따라 DNA 편집 효소를 검출하는 데 다른 기술이 사용될 수 있다. 한 가지 그러한 기술은 웨스턴 블로팅(문헌[Towbin et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 76:4350 (1979)])이며, 여기서는 적합하게 처리된 샘플이 고체 담체, 예컨대 니트로셀룰로오스 필터로 이동되기 전에 SDS-PAGE 겔 상에서 러닝된다. 이어서, 검출가능하게 표지된 항-DNA 편집 효소 항체가 DNA 편집 효소 수준을 평가하는 데 사용될 수 있는데, 여기서 검출가능한 표지로부터의 신호의 강도는 존재하는 DNA 편집 효소의 양에 상응한다. 수준은, 예를 들어 덴시토미터에 의해 정량화될 수 있다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
게다가, 질량 분석, 예컨대 MALDI/TOF (time-of-flight, 비행 시간), SELDI/TOF, 액체 크로마토그래피-질량 분석(LC-MS), 기체 크로마토그래피-질량 분석(GC-MS), 고성능 액체 크로마토그래피-질량 분석(HPLC-MS), 모세관 전기영동-질량 분석, 핵자기 공명 분광법, 또는 탠덤 질량 분석(예: MS/MS, MS/MS/MS, ESI-MS/MS 등)을 사용하여 DNA 편집 효소가 검출될 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 제20030199001호, 제20030134304호, 및 제20030077616호를 참조하며, 이들은 본 명세서에 참고로 포함된다. 질량 분석 방법은 당업계에 익히 공지되어 있으며, 생체분자, 예컨대 단백질을 정량 및/또는 확인하는 데 사용되어 왔다(예를 들어, 문헌[Li et al. (2000), Tibtech 18:151-160]; [Rowley et al. (2000), Methods 20: 383-397]; 및 [Kuster and Mann (1998), Curr. Opin. Structural Biol. 8: 393-400] 참조). 추가로, 단리된 단백질의 적어도 부분적인 데 노보 서열 분석(de novo sequencing)을 가능하게 하는 질량 분석 기술이 개발되어 있으며(문헌[Chait et al., Science 262:89-92 (1993)]; [Keough et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 96:7131-6 (1999)]); [Bergman, EXS 88:133-44 (2000)]에 개관되어 있다. 특정 실시 형태에서, 가스상 이온 분광광도계가 사용된다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
다른 실시 형태에서는, 레이저-탈착/이온화 질량 분석이 샘플을 분석하는 데 사용된다. 현대의 레이저 탈착/이온화 질량 분석("LDI-MS")은 2개의 주요 변형 형태로 실시될 수 있다: 매트릭스 지원 레이저 탈착/이온화(matrix assisted laser desorption/ionization, "MALDI") 질량 분석 및 표면-향상 레이저 탈착/이온화(surface-enhanced laser desorption/ionization, "SELDI"). MALDI에서는, 분석물을 매트릭스를 함유하는 용액과 혼합하고, 액체 한 방울을 기질의 표면 상에 떨어뜨린다. 이어서, 매트릭스 용액이 생물학적 분자와 공결정화된다. 기질을 질량 분석계 내로 삽입한다. 레이저 에너지를 기질 표면에 직행시키며, 여기서 레이저 에너지는 생물학적 분자를 크게 단편화하지 않고서 이들을 탈착 및 이온화시킨다. 그러나, MALDI는 분석 툴로서 제한을 갖는다. 이는 샘플을 분획화하기 위한 수단을 제공하지 않으며, 매트릭스 재료는, 특히 저분자량 분석물에 대한 검출을 방해할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 제5,118,937호(Hillenkamp et al.), 및 미국 특허 제5,045,694호(Beavis & Chait)를 참조한다. SELDI에서는, 기질 표면이 탈착 과정에서 능동적인 참여체가 되도록 개질된다. 일 변형 형태에서, 표면은, 관심 대상의 단백질과 선택적으로 결합하는 흡착제 및/또는 포획 시약에 의해 유도체화된다. 또 다른 변형 형태에서, 표면은, 레이저와 충돌될 때 탈착되지 않는 에너지 흡수 분자에 의해 유도체화된다. 또 다른 변형 형태에서, 표면은, 관심 대상의 단백질과 결합하고 레이저 적용시에 파괴되는 광분해 결합을 함유하는 분자에 의해 유도체화된다. 각각의 이들 방법에서, 유도체화제는 일반적으로 샘플이 적용되는 기질 표면 상의 특정 위치로 국재화된다. 예를 들어, 미국 특허 제5,719,060호 및 WO 98/59361호를 참조한다. 이들 2가지 방법은 조합될 수 있는데, 이러한 조합은, 예를 들어 SELDI 친화성 표면을 사용하여 분석물을 포획하고 매트릭스-함유 액체를 포획된 분석물에 첨가하여 에너지 흡수 물질을 제공함으로써 행해질 수 있다.
질량 분석계에 관한 추가 정보에 대해서는, 예를 들어 문헌[Principles of Instrumental Analysis, 3rd edition, Skoog, Saunders College Publishing, Philadelphia, 1985]; 및 [Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical Technology, 4.sup.th ed. Vol. 15 (John Wiley & Sons, New York 1995), pp. 1071-1094]을 참조한다. DNA 편집 효소 mRNA 또는 단백질의 존재의 검출은 통상적으로 신호 강도의 검출을 수반할 것이다. 다시, 이는 기질에 결합된 폴리펩티드의 양 및 특징을 반영할 수 있다. 예를 들어, 특정 실시 형태에서는, 제1 샘플 및 제2 샘플의 스펙트럼으로부터의 피크값의 신호 강도를 (예를 들어, 시각적으로, 컴퓨터 분석 등에 의해) 비교하여 특정 생체분자들의 상대량을 결정할 수 있다. 소프트웨어 프로그램, 예컨대 바이오마커 위저드(Biomarker Wizard) 프로그램(사이퍼젠 바이오시스템즈, 인크.(Ciphergen Biosystems, Inc.), 미국 캘리포니아주 프레몬트 소재)이 질량 스펙트럼을 분석하는 데 사용될 수 있다. 질량 분석계 및 그의 기술은 당업자에게 익히 공지되어 있다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소의 활성은 세포의 게놈의 전부 또는 일부에서의 전체 돌연변이 상태를 결정함으로써 측정될 수 있다. 참조 세포 내의 전체 돌연변이 상태의 적어도 2% 초과, 예를 들어 2% 초과 또는 그 초과, 3% 초과 또는 그 초과, 5% 초과 또는 그 초과, 10% 초과 또는 그 초과, 또는 20% 초과 또는 그 초과인 전체 돌연변이 상태는 증가된, 상승된, 및/또는 유의한 수준의 DNA 편집 효소 활성의 지표가 될 수 있다. 일부 실시 형태에서는, 초돌연변이의 수준이 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 전체 게놈 또는 그의 일부에서의 전체 돌연변이 상태는 FISH, 전체 게놈 서열 분석, 고성능 서열 분석, 엑솜 서열 분석, 교잡, 및/또는 PCR을 사용하여 결정될 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소의 활성은 IGH, BCL6, MYC, BCL11A, CD93, PIM1 및/또는 PAX5를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 특이적 표적 유전자에서의 초돌연변이의 수준을 결정함으로써 측정될 수 있다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다. 유전자좌에서의 초돌연변이의 검출은 AID 활성의 지표가 된다. 일부 실시 형태에서, IGH, BCL6, MYC, BCL11A, CD93, PIM1 및/또는 PAX5를 포함한 특이적 표적 유전자에서의 돌연변이의 수준이 참조 세포 내의 IGH, BCL6, MYC, BCL11A, CD93, PIM1 및/또는 PAX5에서의 돌연변이의 수준의 적어도 2% 초과, 예를 들어 2% 초과 또는 그 초과, 3% 초과 또는 그 초과, 5% 초과 또는 그 초과, 10% 초과 또는 그 초과, 또는 20% 초과 또는 그 초과일 경우, 이 수준은 증가된, 상승된, 및/또는 유의한 수준의 AID 활성의 지표가 될 수 있다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소의 활성은 FISH 분석을 사용하여 DNA 이본쇄 절단을 검출함으로써, 예를 들어 DNA 절단 검출 FISH (DBD-FISH)를 사용함으로써 결정된다(문헌[Volpi and Bridger, BioTechniques, Vol. 45, No. 4, October 2008, pp. 385-409]). 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소의 활성은 포스포-H2AX 검정(예를 들어, 문헌[Rakiman et al., Advance Biotech 2008, 39-42]; 이는 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함됨), 53BP1 검정(예를 들어, 문헌[Schultz et al., Journal of Cell Biology 2000, 151:1381-1390]; 이는 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함됨), 또는 RAD51 검정(예를 들어, 문헌[Hochegger and Takeda (2006), Subcell Biochem., 40, 313-325]; 이는 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함됨)을 사용함으로써 결정된다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
본 명세서에 사용된 어구 "적어도 하나의 DSB 수복 억제제를 필요로 하는 대상체"는 암을 앓고 있는 것으로 진단되거나 확인된 대상체를 말할 수 있는데, 이때 상기 암의 세포는 증가된 수준의 DNA 편집 효소 단백질 또는 DNA 편집 효소 mRNA 또는 DNA 편집 효소 활성을 갖는다. 본 명세서에 사용된 어구 "적어도 하나의 DSB 수복 억제제를 필요로 하는 대상체"는 또한 자가면역 질환을 앓고 있는 것으로 진단되거나 확인된 대상체를 말할 수 있는데, 이때 상기 자가면역 질환의 세포는 증가된 수준의 DNA 편집 효소 단백질 또는 DNA 편집 효소 mRNA 또는 DNA 편집 효소 활성을 갖는다. 적어도 하나의 DSB 수복 억제제를 필요로 하는 대상체는 본 명세서에 기재된 생물학적 샘플 내에 존재하는 mRNA 또는 단백질 또는 DNA 편집 효소 활성의 수준을 결정하는 데 사용된 임의의 방법을 사용하여 확인될 수 있다. 대안적으로, 어구 "적어도 하나의 DSB 수복 억제제를 필요로 하는 대상체"는 B-세포 질환 또는 자가면역 장애 또는 암을 앓고 있는 것으로 진단되거나 확인된 대상체를 말할 수 있다. 대상체의 암 세포 또는 B-세포는 증가된 수준의 DNA 편집 효소 단백질 또는 DNA 편집 효소 mRNA 또는 DNA 편집 효소 활성을 가질 수 있다. B-세포 질환의 비제한적인 예에는 B 세포 암(예: 림프종 및 백혈병), 이상(aberrant) B 세포 증식, 클래스 스위칭, 및/또는 활성화에 의해 특징지워지는 자가면역 질환이 포함된다. 일부 실시 형태에서, 자가면역 질환은 세포에서의 이상 DNA 편집 효소 활성에 의해 특징지워진다. 이상 DNA 편집 효소 활성을 갖는 자가면역 질환에는 홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 염증성 만성 비부비동염, 결장염, 셀리악 질환, 염증성 장질환, 바렛 식도, 염증성 위염 및 자가면역 매개 혈액학적 질환이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 방법은 DSB 수복 억제제를 필요로 하는 것으로 확인된 대상체를 선택하는 단계를 추가로 포함한다. DSB 수복 억제제를 필요로 하는 대상체는 DNA 편집 효소 mRNA, 또는 DNA 편집 효소 단백질 또는 DNA 편집 효소 활성의 수준에 기초하여 선택될 수 있다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
일부 실시 형태에서, DSB 수복 억제제를 필요로 하는 것으로 확인된 대상체는 증가된 수준의 DNA 편집 효소 단백질 또는 DNA 편집 효소 mRNA 또는 DNA 편집 효소 활성에 더하여, IGH 에서 초돌연변이를 나타낼 수 있다. 특정 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다.
DNA 편집 효소의 비정상 발현에 의해 특징지워지는 암의 치료 방법
본 명세서에서 상기에 기재된 바와 같이, 본 발명의 일부 실시 형태는 (a) DNA 편집 효소, 예를 들어 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법에 관한 것이다.
본 발명의 일부 실시 형태는 (a) 상승된 수준의 DNA 편집 효소, 예를 들어 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준의 DNA 편집 효소란, DNA 편집 효소의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시 형태에서, 치료 방법은 (a) DNA 편집 효소를 발현하는 B 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 치료 방법은 (a) 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 B 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준의 DNA 편집 효소란, DNA 편집 효소의 수준이 건강한 개체로부터의 B 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것이다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 암성 세포이다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소를 발현하는 B 세포는 암성 세포이다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다. 본 명세서에 사용된 용어 "암성 세포"는 비조절된 방식으로 증식되는 세포를 말한다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 암성 B 세포를 갖는 대상체는 본 명세서에서 하기에 기재된 바와 같이, B-세포 암(예: B 세포 림프종 또는 백혈병)을 갖거나 이를 갖는 것으로 진단된 대상체일 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID이다. 일부 실시 형태에서, 고수준의 DNA 편집 효소는 혈액, 혈청 또는 생검 샘플에서 검출된다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 방법은 재조합 및 DNA 수복 시스템을 활용하여 종양 세포 자기-파괴를 유도함으로써 B-세포 신생물, 림프종, 및 백혈병을 선택적으로 치료한다. 이 접근법은 DNA 편집 효소가 저하된 상동적 재조합 능력을 갖는 1차 B-세포에서 폭넓은 게놈성 절단 및 세포사를 유도한다는 연구결과를 이용한다. 본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 발명자들은 증가된 발현의 AID에 의해 특징지워지는 세포 집단이 DSB 수복 억제제로 치료되는 경우, 그 결과 세포사가 발생된다는 것을 알아내었다. 따라서, DNA 편집 효소(예: AID)의 높은 발현을 갖는 암을 가진 환자를 DSB 수복 억제제로 치료하는 방법이 본 명세서에 제공된다.
특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 DNA 편집 효소의 높은 발현을 갖는 유형이다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 B-세포 신생물이다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 림프종이다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 버킷 림프종, 여포성 림프종, 말트(MALT) 림프종, 다발성 골수종, 소 림프구성 림프종, 림프형질세포성 림프종, 형질 세포 골수종, 거대 B-세포 림프종 및/또는 T-세포 림프종이다. 림프종은 면역 시스템의 림프 세포(예: B 세포, T 세포, 또는 천연 살해(NK) 세포) 내의 악성 종양이다. 림프종은 흔히 림프절에서 기원되고 고체 종양으로 제시된다. 이들은 뇌, 골, 또는 피부와 같은 다른 기관으로 전이될 수 있다. 림프절외 부위는 흔히 복부 내에 위치된다. 림프종은 림프성 백혈병과 밀접하게 관련되어 있으며, 일부 경우에 특정 형태의 암은 림프종 및 백혈병 둘 모두로 분류된다.
몇몇 분류 시스템이 림프종에 대해 존재하는데, 가장 최근의 것은 2001년에 개발되고 2008년에 업데이트된 세계보건기구(World Health Organization) 분류이다(문헌[Jaffe, E.S., et al., (Eds.) World Health Organization Classification of Tumors, Pathology and Genetics of tumors of hematopoietic and lymphoid tissues IARC Press: Lyon, France 2001]). WHO 시스템은 림프종을 3개의 1차 카테고리로 나눈다: 성숙 B-세포 림프종, 성숙 T-세포 림프종 및 성숙 NK 세포 림프종. 구분된 카테고리 내에는 호지킨 림프종(비정상 B 세포로 구성됨) 및 다수의 다른 덜 일반적인 림프종이 포함된다.
림프종은 생검에 의해 진단될 수 있다. 생검으로부터 얻어진 조직은 조직학적 검사를 받아서 악성 세포의 존재, 유형, 및 배열을 결정한다. 세포는 또한, 그것이 림프구인지, 그리고 만약 그렇다면, 무슨 유형의 림프구인지를 결정하기 위해 시험된다. 림프종의 범주를 결정하고 그것이 체내 어디에 위치하는지를 결정하기 위한 추가의 시험에는 추가의 생검, 핵 의학, X선, CT 스캔 또는 MRI가 포함될 수 있다(미국 특허 출원 공개 US2003/0129665호 참조). 호지킨 림프종은 리드-스턴버그 세포(Reed-Sternberg cell)의 존재 및 이에 더하여 이 질환의 특징인 다른 비정상 세포 패턴에 의해 진단될 수 있다. 각각의 유형의 림프종을 구별하는 마커 및 조직학적 징후는 당업자에게 공지되어 있다(문헌[Jaffe, E.S., et al. (Eds.) World Health Organization Classification of Tumors, Pathology and Genetics of tumors of hematopoietic and lymphoid tissues IARC Press: Lyon, France 2001]).
특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 백혈병이다. 백혈병은 조혈 조직의 악성 신생물이다. 백혈병은 2개의 우세형, 즉 만성 및 급성으로 분류된다. 급성 백혈병은 미성숙 혈액 세포의 급속한 증가에 의해 특징지워지는데, 이는 건강한 혈액 세포를 생산할 수 있는 골수의 능력을 손상시킨다. 만성 백혈병은 상대적으로 성숙하지만 비정상인 백혈구의 축적에 의해 특징지워진다. 비정상 세포는 정상 세포보다 훨씬 더 높은 속도로 생산되며, 그 결과 혈액 내에 비정상 백혈구가 축적되게 된다. 그러나 이들 분류에도 불구하고, 정상 조혈의 병리학적 손상은 모든 백혈병의 특징이다.
추가로, 백혈병은 어떤 혈액 세포가 영향을 받는냐에 따라 세분된다. 예를 들어, 백혈병은 림프모구성 또는 림프구성 백혈병 및 골수성(myeloid) 또는 골수원성(myelogenous) 백혈병으로 나누어질 수 있다. 림프모구성 또는 림프구성 백혈병에서는, 전구-림프구 세포가 통상적으로 영향을 받으며, 이는 림프구로부터 유래되는 세포의 감염-방어 특성을 손상시킨다. 대부분의 림프구성 백혈병은 림프구의 특정 아형인 B 세포가 관여한다. 골수성 또는 골수원성 백혈병에서는, 백혈구 전구체가 흔히 영향을 받으며, 일부 다른 유형의 적혈구, 및 혈소판도 영향을 받는다. 따라서, 백혈병은 일반적으로 다음과 같이 4개의 카테고리로 세분될 수 있다: 급성 림프모구성 백혈병(ALL), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 및 만성 골수원성 백혈병(CML). 각각의 아형의 특이적 소견은 B 세포가 관여할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 용어 "백혈병"은 버킷 백혈병; 만성 림프구성 백혈병(CLL), 급성 골수원성 백혈병(AML); B-세포 급성 림프구성 백혈병(B-ALL) 및 T-세포 급성 림프모구성 백혈병(T-ALL)을 포함한다. 일 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 용어 "백혈병"은 또한 모발상 세포 백혈병을 포함하는데, 이는 흔히 상기에 기재된 분류 체계 밖에 있는 것으로 여겨진다.
백혈병은 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 진단될 수 있다. 통상적으로, 전혈 카운트(complete blood count, CBC) 시험이 초기에 수행된다. CBC는 혈액 샘플 내의 백혈구, 적혈구, 및 혈소판의 개수를 카운트한다. 높은 수의 백혈구 및 저수준의 적혈구 또는 혈소판을 갖는 혈액의 샘플은 백혈병임을 나타낼 수 있으며, 비정상 간 및 신장 기능 시험은 백혈병이 그러한 기관에 영향을 주었는지를 알려줄 것이다. 보다 정확한 진단을 위해, 유세포 분석이 또한 사용될 수 있는데, 이는 예를 들어 성숙 골수성 마커, 예컨대 CD11b 및 Gr-1을 사용하여 세포 유형, 세포수, 및/또는 세포 형태를 결정함으로써 행해질 수 있다. 각각의 유형의 암을 구별하는 마커 및 조직학적 징후는 당업자에게 공지되어 있다(문헌[Jaffe, E.S., et al. (Eds.) World Health Organization Classification of Tumors, Pathology and Genetics of tumors of hematopoietic and lymphoid tissues IARC Press: Lyon, France 2001]). AML의 경우, 적혈구, 혈소판, 및 정상 백혈구의 저하가 있을 것이다. 이들 증상에는 피로, 숨가쁨(shortness of breath), 타박상 및 출혈이 쉽게 일어남, 및 증가된 감염 위험이 포함된다. 이들 증상은 정상 골수가 백혈병 세포로 대체됨으로써 일어나는데, 이때 백혈병 세포는 주로 골수 내에 축적되고 정상 혈액 세포의 생산을 방해하는 미성숙된 비정상 백혈구이다.
특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 B-세포 신생물, B-세포 백혈병, B-세포 급성 림프모구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수원성 백혈병, 버킷 백혈병, 급성 골수원성 백혈병 및/또는 T-ALL이다. B 세포의 성숙은 외래 항원이 중화되었을 때 대부분 통상적으로는 중단되거나 실질적으로 감소된다. 그러나, 때때로, 특정 B 세포의 증식은 약화되지 않고 계속될 것이며; 그러한 증식은 "B-세포 림프종" 또는 "B-세포 백혈병"으로 지칭되는 암으로 이어질 수 있다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 만성 림프구성 백혈병(CLL) 또는 만성 골수원성 백혈병(CML)이다.
일 실시 형태에서, 골수 생검이 백혈병의 진단을 돕는 데 사용된다. 골수 생검 샘플은 골수 조직 또는 골수 및 골의 혼합물을 포함할 수 있다. 또 다른 실시 형태에서, 개별 세포 내의 염색체를 조사하는 데 세포유전학이 사용된다. 세포유전학 시험은 채혈 또는 골수 또는 림프절 생검으로부터 취해진 샘플을 사용한다. 샘플의 염색체는 세포의 DNA에 대한 손상을 나타내는 비정상성에 대해 현미경으로 조사되고 백혈병의 진단을 지지한다. 또 다른 실시 형태에서, 백혈병의 진단에 척추 천자가 사용될 수 있다. 통상적으로, 뇌척수액의 샘플이 하배부(요부)로부터 취해진다. 이어서, 뇌척수액 샘플은 백혈병 세포 및 다른 비정상성에 대해 검사된다. MRI(자기 공명 영상화), CT(컴퓨터 체축 단층촬영) 스캔, 및 X선이 백혈병의 진단을 지지하는 데 사용될 수 있는 영상화 기법이다.
특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 형질 세포 신생물(plasma cell neoplasm)이다. 형질 세포 신생물에 대한 예에는 다발성 골수종; 형질 세포 골수종; 형질 세포 백혈병 및 형질세포종이 포함된다.
고수준의 DNA 편집 효소 발현에 의해 특징지워지는 임의의 암은 DSB 수복 억제제로 치료될 수 있다. 예를 들어, 육종, 상피 세포암(암종), 결장암, 위암, 장관암, 간암, 간세포암, 유방암, 갑상선암, 식도암, 폐암, 뇌암, 두경부암, 흑색종, 신장암, 전립선암, 혈관종, 횡문근육종, 연골육종, 골육종, 섬유육종 및 담관암종은 고수준의 DNA 편집 효소(예: AID) 발현에 의해 특징지워질 수 있다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 암은 결장암, 간암, 위암, 장관암, 유방암, 폐암, 갑상선암 및/또는 담관암종이다. 이들 암 중 임의의 것이 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 진단될 수 있다. 생검, 결장내시경검사, 스툴 샘플, 영상화 또는 당업계에 공지된 다른 수단이 종양 및/또는 폴립의 존재를 검출하는 데 사용될 수 있다. 이들 방법에 의해 얻어진 조직은 조직학적 검사를 받아서 악성 세포의 존재, 유형, 및 배열을 결정한다. 각각의 유형의 림프종을 구별하는 마커 및 조직학적 징후는 당업자에게 공지되어 있다(문헌[Diagnostic Histopathology of Tumors, Fletcher, C.D.M. (Ed.), 3rd Edition, Churchill Livingstone Elsevier, China (2007)]; [Methods of Cancer Diagnosis, Therapy and Prognosis. Hayat, M.A. (Ed), (Vol 3), Springer (2009)]). 암의 범주를 결정하고 그것이 체내 어디에 위치하는지를 결정하기 위한 추가의 시험에는 추가의 생검, 핵 의학, X선, CT 스캔 또는 MRI가 포함될 수 있다.
특정 실시 형태에서, 높은 DNA 편집 효소(예: AID) 발현을 갖는 암을 가진 환자의 DSB 수복 억제제에 의한 치료는 암의 지표, 마커, 증상, 중증도, 전이, 재발 및/또는 종량 크기를, DSB 수복 억제제에 의한 치료 전의 지표, 마커, 증상, 중증도, 전이, 재발 및/또는 종량 크기에 대비하여, 또는 DSB 수복 억제제에 의한 치료를 받지 않은 환자에 대비하여, 10% 이상, 예를 들어 20% 이상, 30% 이상, 50% 이상, 75% 이상, 100% 이상, 200% 이상 또는 그 초과로 감소시킨다.
본 명세서에 기재된 기술은 증가된 수준의 AID 단백질 또는 mRNA를 갖는 암의 치료를 위한 적어도 하나의 DSB 수복 억제제 및 적어도 하나의 그러한 DSB 수복 억제제를 포함하는 조성물의 용도에 관한 것일 수 있다. 예를 들어, 암의 종양 크기, 종양 성장, 암세포 카운트, 암세포 확장 또는 전이를 저하시키기 위해 DSB 수복 억제제를 함유하는 조성물이 사용된다. 예를 들어, 단지 예로서 제공된 하기 중 하나와 관련된 증상의 중증도, 지속기간, 또는 개수를 저하시키기 위해 DSB 수복 억제제를 함유하는 조성물이 사용된다: B-세포암, 백혈병, 림프종, 결장암, 간암, 위암, 장관암, 유방암, 폐암, 갑상선암, 뇌암, 신장암, 흑색종, 전립선암 또는 담관암종.
본 명세서에 기재된 기술은 또한, DSB 수복 억제제로 치료받지 않은 환자에 대비하여, DSB 수복 억제제로 치료받은 환자에서 기대 수명(life expectancy)을 증가시키거나 관해에 이르기까지의 시간을 증가시키기 위한 RAD51-매개 쇄 교환 수복의 적어도 하나의 억제제 또는 RAD51-매개 쇄 교환 수복의 억제제를 포함하는 조성물의 용도에 관한 것일 수 있다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 DSB 수복 억제제 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물 내에 함유된다. 추가 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 약제학적으로 허용되는 담체 및 또 다른 약제학적으로 유효한 화합물을 포함하는 조성물 내에 함유될 수 있다.
본 명세서에 기재된 기술의 약제학적 조성물은 단독으로 또는 다른 치료와 조합하여 투여될 수 있으며, 이때 조합될 수 있는 다른 치료에는 제한 없이, 면역치료 또는 면역치료제, 또는 암을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합이 포함된다. 본 명세서에 기재된 기술의 치료제는 본 명세서에 기재된 암 중 하나에 대해 유효한 임의의 다른 치료와 함께 투여될 수 있다는 것이 고려된다. 2개 이상의 치료제가 함께 투여될 경우, 이들은 동시에 투여되거나 또는 이들의 투여 사이에 약간의 지연을 두고서 (즉, 최적화된 전달 일정에 따라) 투여될 수 있다. 추가 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술의 약제학적 조성물은 적어도 하나의 DSB 수복 억제제 및 적어도 하나의 추가 약제학적 작용제를 포함할 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "면역치료"는 항체 또는 항체-기반 치료제에 의한 대상체의 치료를 말한다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 면역치료는 수동적 또는 능동적일 수 있다. 본 명세서에 정의된 바와 같이, 수동적 면역치료는 항체의 대상체(환자)에 대한 수동적 전달이다. 능동적 면역화는 대상체(환자) 내에서의 항체 및/또는 T-세포 반응의 유도이다.
예시적인 면역치료제에는 베바시주맙(아바스틴(Avastin)®), 알렘투주맙(캠파스(Campath)®), 세툭시맙(에르비툭스(Erbitux)), 이브리투모맙 티욱세탄(제발린(Zevalin)), 파니투무맙(벡티빅스), 리툭시맙(리툭산(Rituxan)®), 및 131I를 갖는 토시투모맙(벡사르(Bexxar)®, 코릭시아 코포레이션(Corixia Corp.))가 포함된다. 리툭시맙은 CD20+ B 세포를 선택적으로 고갈함으로써 작용한다. 리툭시맙의 치료 유효성은 문헌[Collins-Burow et al., Rituximab and its Role as Maintenance Therapy in non-Hodgkin Lymphoma, Expert Rev Anticancer Ther 7(3):257-73 (2007)]; [Marcus et al., The Therapeutic Use of Rituximab in non-Hodgkin's Lymphoma, Eur J Haemotal Suppl(67):5-14 (2007)]; [Plosker et al., Rituximab: A Review of its Use in non-Hodgkin's Lymphoma and Chronic Lymphocytic Leukaemia, Drugs (2003)]에 기재되어 있으며, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다. 베바시주맙(아바스틴(Avastin)®, 제넨텍/로슈(Genentech/Roche))은 혈관신생을 차단하고, 다양한 암을 치료하는 데 사용된다. 세툭시맙(IMC-C225; 에르비툭스®)은 상피 성장 인자 수용체(EGFR) 억제제에 대한 키메라(마우스/인간) 단일클론 항체이며, 전이성 결장직장암 및 두경부의 편평 세포 암종의 치료를 위하여 정맥내 주입에 의해 제공된다. 이브리투모맙 티욱세탄(제발린)은 일부 형태의 B 세포 비호지킨 림프종을 위한 단일클론 항체 방사면역치료제이며, CD20 항원에 결합된다. 파니투무맙은 결장직장암을 치료하기 위한 상피 성장 인자 수용체(EGF 수용체, EGFR, ErbB-1 및 HER1로도 알려짐)에 특이적인 완전 인간 단일클론 항체이다.
본 명세서에 기재된 일부 암을 위한 추가 형태의 치료는 줄기 세포 이식이다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술의 약제학적 조성물은 다른 치료 후 또는 전에 투여될 수 있는데, 이때 이러한 다른 치료에는 제한 없이, 면역치료제, 화학치료제, 방사선 치료 또는 암을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합이 포함된다.
일부 실시 형태에서는, 본 명세서에 기재된 DSB 수복 억제제를 포함하는 조성물의 투여를 포함하는 한 주기의 치료가 대상체에게 투여된다. 이어서, 또 다른 화학치료, 면역치료, 방사선 또는 암을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합의 투여를 포함하는 한 주기의 치료가 대상체에게 투여된다. 각각의 치료 주기는 조성물 또는 치료제의 1회 이상의 투여, 즉 1회 투여, 2회 투여, 3회 투여, 5회 투여, 10회 투여, 20회 투여 또는 그 초과를 포함할 수 있다. 각각의 치료 주기는 적어도 1일, 즉 1일 이상, 2일 이상, 1주 이상, 2주 이상, 3주 이상, 4주 이상, 6주 이상 또는 그 초과로 지속될 수 있다. 일부 실시 형태에서는, 치료 주기 사이에 공백 또는 휴지기간이 적어도 1일, 즉 1일 이상, 2일 이상, 1주 이상, 2주 이상, 3주 이상, 4주 이상, 6주 이상 또는 그 초과로 지속될 수 있다. 본 명세서에 기재된 DSB 수복 억제제에 의한 한 주기의 치료, 선택적으로 휴지기간, 및 또 다른 화학치료, 면역치료, 방사선 또는 암을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합에 의한 한 주기의 치료, 및 선택적으로 제2 휴지기간을 포함하는 치료 과정은 부분적으로 또는 전체적으로 반복될 수 있다. 일부 실시 형태에서는, DSB 수복 억제제에 의한 치료 주기가 제2 주기이고, 다른 항암 치료가 제1 주기에 사용된다. 일부 실시 형태에서, 다른 화학치료, 면역치료, 방사선 또는 암을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합은 대상체의 DNA에 대해 손상을 일으키는 치료를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 다른 화학치료, 면역치료, 방사선 또는 암을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합은 독소루비신을 포함한다. 일부 실시 형태에서, 다른 화학치료, 면역치료, 방사선 또는 암을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합은 플루다라빈을 포함한다.
다른 치료에는 제한 없이, 본 명세서에 기재된 방법 전, 동안 또는 후에 행해질 수 있는 화학치료가 포함된다. 일 실시 형태에서, 화학치료는 본 명세서에 기재된 조성물 또는 방법에 의한 치료 전 또는 후에 투여되지만, 치료 동안에는 투여되지 않는다. 화학치료의 비제한적인 예에는 방사선 또는 다음과 같은 화학치료제에 의한 치료가 포함된다: 악티노마이신, 암사크린(암시딘(Amsidine)®), 안트라사이클린, 블레오마이신(블레녹산(Blenoxane)®), 부술판, 캄프토테신, 카르보플라틴(파라플라틴(Paraplatin)®), 클로람부실(류케란®), 시스플라틴, 사이클로포스파미드(사이톡산(Cytoxan®), 클라드리빈, 사이타라빈(사이토사르(Cytosar)-U®), 사이톡산, 다카르바진(DTIC-Dome®), 닥티노마이신, 다우노루비신, 덱사메타손(데카드론(Decadron)®), 도세탁셀, 독소루비신(아드리아마이신(Adriamycin)®), 에피루비신, 에토포시드(에토포포스(Etopophos)®), 플루다라빈(플루다라(Fludara)®), 헥사메틸멜라민옥살리플라틴, 이포스파미드(이펙스(Ifex)®), 이포스파미드, 멜팔란, 메르클로레타민, 메토트렉세이트, 미토마이신, 미톡산트론, 니트로소우레아, 파클리탁셀, 플리카마이신, 프레드니손, 프로카르바진, 테니포시드, 트리에틸렌티오포스포르아미드, 에토포시드(VPI6), 빈크리스틴(온코빈(Oncovin)®), 빈블라스틴, 벤다무스틴(로보무스틴(Ribomustin) 및 트레안다(Treanda)), CHOP 치료, c-myc 유전자의 단일클론 항체 및 억제제, DNA 메틸트랜스페라제, 프로테아솜 및 사이클린-의존성 키나제의 억제제.
화학치료제에는 DNA 손상을 유도할 수 있는 작용제가 포함될 수 있다. 그러한 작용제의 비제한적인 예에는 알킬화제, 니트로소우레아, 항대사물, 식물 알칼로이드, 식물 추출물, 또는 방사성 동위원소가 포함될 수 있다.
또한, 하기를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 치료 과정이 포함된다: 1) CODOX-M/IVAC 계획(regimen) (마그라스(Magrath) 프로토콜) - IVAC(이포스파미드, 에토포시드 및 고용량 사이타라빈)와 교대하는 CODOX-M(사이클로포스파미드, 빈크리스틴, 독소루비신 및 고용량 메토트렉세이트) 2회 주기, 2) CODOX-M 3회 주기. 또한, 그러한 병용 치료의 변형된 버전, 예컨대 영국 림프종 그룹(United Kingdom Lymphoma Group) 및 다나-파버 암 연구소(Dana-Farber Cancer Institute)의 개조된 마그라스 프로토콜이 포함된다.
자가면역 장애의 치료 방법
본 명세서에서 상기에 기재된 바와 같이, 본 발명의 일부 실시 형태는 (a) 상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준의 AID란, AID의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 AID의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법에 관한 것이다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID를 발현하는 세포는 자가면역 세포이다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, "자가면역 세포" 또는 "자가반응성 세포"는 세포가 유래되는 유기체의 세포 또는 생물학적 성분에 대하여 활성을 갖고/갖거나 이를 인식하는 면역 세포를 말한다. 자가면역 세포일 수 있는 세포의 예에는 성체 비장세포, T 세포, 및 B 세포가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 일부 실시 형태에서, 대상체는 인간 대상체일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 본 치료 방법은 (a) 상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 B 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및 (b) 대상체에게 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 상승된 수준의 AID란, AID의 수준이 건강한 개체로부터의 B 세포 내의 AID의 수준보다 더 높은 수준의 것이다. 일부 실시 형태에서, 상승된 수준의 AID 를 발현하는 B 세포는 자가면역 질환과 관련된 B 세포이다. 본 명세서에 사용된 용어 "자가면역 질환과 관련된 B 세포"는 특정 자가면역 질환에서 비정상 기능, 거동, 및/또는 증식을 갖는 B 세포를 말한다. 일부 실시 형태에서, 자가면역 질환과 관련된 B 세포는 그의 비정상 기능, 거동, 및/또는 증식으로 인해 질환을 일으키는 B 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 자가면역 질환과 관련된 B 세포는 그의 비정상 기능, 거동, 및/또는 증식으로 인해 자가면역 질환의 하나 이상의 증상을 일으키는 B 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 자가면역 질환과 관련된 B 세포를 갖는 대상체는 비정상 기능, 거동, 및/또는 증식을 갖는 B 세포에 의해 특징지워지거나 야기된 자가면역 질환을 갖거나 이를 갖는 것으로 진단된 대상체일 수 있다. 비제한적인 예로서, 전신성 홍반성 루푸스에서는, 대상체의 B 세포가 자가-항원에 특이적인 항체를 비정상적으로 생산하고, 류마티스성 관절염에서는, 대상체의 B 세포가 대상체의 T 세포와 비정상적으로 상호작용한다.
특정 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 방법은 림프성 재조합 시스템(lymphoid recombination system)을 활용하여, 정상 세포는 보존하면서 병든 B-세포의 자기-파괴를 유도함으로써 자가면역 질환을 선택적으로 치료한다. 이 접근법은 B-세포 재조합효소 AID 가 저하된 상동적 재조합 능력을 갖는 1차 B-세포에서 폭넓은 게놈성 절단 및 세포사를 유도한다는 연구결과를 이용한다. 본 명세서에 기재된 바와 같이, 증가된 발현의 DNA 편집 효소(예: AID)에 의해 특징지워지는 세포 집단이 DSB 수복 억제제로 치료되는 경우, 그 결과 세포사가 발생된다는 것을 알아내었다. 따라서, 이상 B 세포 증식, 클래스 스위칭, 또는 활성화에 의해 특징지워지는 자가면역 질환을 가진 환자를 치료하는 방법이 본 명세서에 제공된다. 일부 실시 형태에서, 자가면역 질환은 증가된 B 세포 증식, 클래스 스위칭, 또는 활성화에 의해 특징지워질 수 있다. 일부 실시 형태에서, 자가면역 질환은 높은 AID 발현을 갖는 B 세포를 갖는 것에 의해 특징지워질 수 있다. 일부 실시 형태에서, 본 방법은 높은 DNA 편집 효소 발현을 갖는 자가면역 질환을 가진 대상체를 DSB 수복 억제제로 치료하는 것에 관한 것이다. 일부 실시 형태에서, 본 방법은 높은 AID 발현을 갖는 B 세포 및 자가면역 질환을 가진 대상체를 DSB 수복 억제제로 치료하는 것에 관한 것이다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 자가면역 질환은 AID의 높은 발현을 갖는 B 세포를 가진 유형이다. 이상 B 세포 증식, 클래스 스위칭 및/또는 활성화에 의해 특징지워지는 것으로 알려진 자가면역 질환에는 하기와 같은 것이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다: 홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스; 원판상 루푸스; 아급성 피부 홍반성 루푸스; 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함); 만성 관절염; 쇼그렌 증후군; 자가면역 신장염; 자가면역 혈관염; 자가면역 간염; 자가면역 심장염; 자가면역 뇌염; 및 자가면역 매개 혈액학적 질환. 특정 실시 형태에서, 자가면역 질환은 DNA 편집 효소의 이상 발현에 의해 특징지워진다. 특정 실시 형태에서, 치료하고자 하는 자가면역 질환은 크론병, 궤양성 결장염, 혈관염, 강직 척추염; 베체트병; 종양수반성 자가면역 또는 피부근염이다. 일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 방법에 따라 치료하고자 하는 자가면역 질환은 이상 B 세포 증식에 의해 특징지워지는 자가면역 질환이다.
루푸스 또는 홍반성 루푸스 또는 전신성 홍반성 루푸스(SLE)는 신체의 다양한 부위, 특히 피부, 관절, 혈액, 및 신장에서 만성 염증을 일으킬 수 있는 자가면역 장애이다. 신체의 면역 시스템은 정상적으로는 바이러스, 세균, 및 다른 외래 물질(즉, 항원)에 대해 신체를 보호하기 위해 항체라 불리는 단백질을 만든다. 루푸스, 또는 홍반성 루푸스 또는 SLE와 같은 자가면역 장애에서, 면역 시스템은 항원과 그 자신의 세포 및 조직 사이를 식별할 수 있는 능력을 상실하며, 따라서 그 자신의 세포 및 조직에 대한 항체를 만들어서 면역 복합체를 형성할 수 있다. 이들 면역 복합체는 조직 내에 축적되고 염증, 조직에 대한 손상 및/또는 통증을 일으킬 수 있다. 루푸스의 가장 흔한 3가지 유형에는 전신성 홍반성 루푸스(SLE), 피부 홍반성 루푸스(CLE) 및 약물-유도 루푸스가 포함된다. 자가면역 장애의 추가 유형에는 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 류마티스성 관절염, 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 및 자가면역 매개 혈액학적 질환이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 루푸스 또는 홍반성 루푸스에 대한 보다 상세한 설명은 문헌[Wallace, 2000, The Lupus Book : A Guide for Patients and Their Families, Oxford University Press, Revised and Expanded Edition]; [Kuhn et al., 2004, Cutaneous Lupus Erythematosus, Springer, First Edition]; 및 [Lahita, 1999, Systemic Lupus Erythematosus, Academic Press, Third Edition]에서 찾아볼 수 있으며, 이들은 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
홍반성 루푸스의 진단 방법은 당업계에 익히 공지되어 있다. 루푸스의 존재에 대한 실험실 시험에는 LE 세포 시험, 항-핵 항체 시험, 및 항-DNA 항체를 위한 시험이 포함된다. 그러나, 루푸스는 하기를 포함한 특정 임상 소견에 의해 흔히 인식된다: (i) 관절염(전신성 루푸스를 가진 사람의 90 내지 95%에서 발생됨), (ii) 피부 변화, 예컨대 콧등을 가로지르고/가로지르거나, 뺨을 가로지르고/지르거나 및/또는 눈 바로 아래에 나타나는 광민감성 유도 "나비(butterfly)" 발진, 및/또는 신체상 어느 곳에서도 나타나는, 원판상 루푸스로 알려진 적색의 융기된 낙설성 반점(루푸스를 가진 사람의 75 내지 80%에서 일어남), (iii) 혈액학적 비정상, 예컨대 빈혈, 백혈구감소증, 및 혈소판감소증(루푸스를 가진 사람의 약 50%에서 일어남), (iv) 신장 손상(루푸스를 가진 사람의 약 50%에서 일어남), (v) 심장 또는 폐 질환, 예컨대 심장염 또는 흉막염을 일으키는 심장 또는 폐 점막의 자극(루푸스를 가진 사람의 약 30%에서 일어남), 및 (vi) 신경정신병학적 변화(루푸스를 가진 사람의 약 10% 내지 20%에서 일어남). 비제한적인 예로서, 대상체는 전신성 홍반성 루푸스로 진단되지 않은 대상체에서의 자가항체의 수준에 비하여 상승된 수준의 적어도 하나의 자가항체를 가짐으로써 전신성 홍반성 루푸스로 진단될 수 있다. 전신성 홍반성 루푸스의 진단을 위한 예시적인 자가항체에는 항-핵 항체(ANA), 항-이본쇄 DNA 항체(항-dsDNA), 항 Sm 핵 항원 항체(항-Sm), 항-인지질 항체, 및 이들의 임의의 조합이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 그러한 상승된 수준은 전신성 홍반성 루푸스로 진단되지 않은 대상체에 대비하여 5% 이상, 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 1배 이상, 2배 이상, 3배 이상, 4배 이상, 5배 이상, 또는 10배 이상 또는 그 초과일 수 있다. 대안적으로, 대상체는 전신성 홍반성 루푸스로 진단되지 않은 대상체에서의 수준에 비하여 상승된 수준의 인터페론-베타 및 또는 인터페론-베타 유전자 발현을 가짐으로써 전신성 홍반성 루푸스로 진단될 수 있다. 그러한 상승된 수준은 전신성 홍반성 루푸스로 진단되지 않은 대상체에 대비하여 5% 이상, 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 1배 이상, 2배 이상, 3배 이상, 4배 이상, 5배 이상, 또는 10배 이상 또는 그 초과일 수 있다.
특정 실시 형태에서, 높은 AID 발현을 갖는 B 세포를 갖는 자가면역 질환 또는 자가면역 장애를 가진 환자의 DSB 수복 억제제에 의한 치료는 자가면역 질환의 지표, 마커, 증상, 및/또는 중증도를, DSB 수복 억제제에 의한 치료 전의 지표, 마커, 증상, 및/또는 중증도에 대비하여, 또는 DSB 수복 억제제에 의한 치료를 받지 않은 환자에 대비하여, 10% 이상, 예를 들어 20% 이상, 30% 이상, 50% 이상, 75% 이상, 80% 이상, 90% 이상, 95% 이상 또는 그 초과로 감소시킨다.
본 명세서에 기재된 기술은 증가된 수준의 AID 단백질 또는 mRNA를 갖는 B 세포를 갖는 자가면역 질환 또는 자가면역 장애의 치료를 위한 적어도 하나의 DSB 수복 억제제 및 적어도 하나의 그러한 DSB 수복 억제제를 포함하는 조성물의 용도에 관한 것일 수 있다. 예를 들어, 단지 예로서 제공된 하기 중 하나와 관련된 증상의 중증도, 지속기간, 또는 개수를 저하시키기 위해 DSB 수복 억제제를 함유하는 조성물이 사용된다: 홍반성 루푸스; 전신성 홍반성 루푸스(SLE); 피부 홍반성 루푸스(CLE); 약물-유도 루푸스; 아급성 피부 홍반성 루푸스; 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함); 류마티스성 관절염; 쇼그렌 증후군; 자가면역 신장염; 자가면역 혈관염; 자가면역 간염; 자가면역 심장염; 자가면역 뇌염; 및 자가면역 매개 혈액학적 질환. 이와 관련하여 "저하시킨다"는 그러한 수준에서의 통계학적으로 유의한 감소를 의미한다. 이러한 감소는, 예를 들어 10% 이상, 20% 이상, 50% 이상, 90% 이상 또는 그 초과일 수 있다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 DSB 수복 억제제 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물 내에 함유된다. 추가 실시 형태에서, DSB 수복 억제제는 약제학적으로 허용되는 담체 및 또 다른 약제학적으로 유효한 화합물을 포함하는 조성물 내에 함유될 수 있다.
본 명세서에 기재된 기술의 약제학적 조성물은 단독으로 또는 다른 치료와 조합하여 투여될 수 있으며, 이때 이러한 다른 치료에는 제한 없이, 항염증제, 또는 자가면역 질환을 가진 환자에 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합이 포함된다. 본 명세서에 기재된 기술의 치료제는 본 명세서에 기재된 자가면역 질환 중 하나에 대해 유효한 임의의 다른 치료와 함께 투여될 수 있다는 것이 고려된다. 2개 이상의 치료제가 함께 투여될 경우, 이들은 동시에 투여되거나 또는 이들의 투여 사이에 약간의 지연을 두고서 (즉, 최적화된 전달 일정에 따라) 투여될 수 있다. 추가 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술의 약제학적 조성물은 적어도 하나의 DSB 수복 억제제 및 적어도 하나의 추가 약제학적 작용제를 포함할 수 있다.
홍반성 루푸스의 치료를 위한 작용제에는 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID), 코르티코스테로이드, 항말라리아제(예: 클로로퀴닌; 하이드록시클로로퀸; 및 퀴나크린), 면역억제제(예: 아자티오프린, 사이클로스포린 A, 알킬화제, 질소 머스타드, 클로람부실 또는 사이클로포스파미드), 헤파린, 아스피린, 다나졸(다노크린(Danocrine)), 데하이드로에피안드로스테론(DHEA), 빈크리스틴(온코빈), 와르파린, 메틸프레드니솔론 플러스 테라피, 다프손, 탈리도미드(사이노비르(Synovir)); 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트(A-메타프레드(A-Methapred), 솔루-메드롤(Solu-Medrol)), 메토트렉세이트(류마트렉스(Rheumatrex)), 하이드록시클로로퀸(플라퀘닐(Plaquenil)), 트리암시놀론(아리스토스판(Aristospan)), 레티노이드(예: 이스트레티노인 및 에트레티네이트)가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 항염증 약물(NSAID)의 비제한적인 예에는 아스피린, 살리실레이트, 이부프로펜, 나프록센, 클리노릴, 옥사프로진 및 톨메틴과 같은 것이 포함된다.
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술의 약제학적 조성물은 다른 치료 후 또는 전에 투여될 수 있는데, 이때 이러한 다른 치료에는 제한 없이, 항염증제 또는 면역억제제 또는 자가면역 질환을 가진 환자에게 유익할 수 있는 다른 치료 또는 이들의 조합이 포함된다.
세포사에 대한 세포의 감작( sensitizing )
일부 실시 형태에서, 세포를 세포사에 감작시키고/시키거나 세포사를 유도 또는 일으키는 방법이 본 명세서에 제공되어 있다. 일부 실시 형태에서, 세포사를 일으키는 방법이 본 명세서에 제공되어 있으며, 본 방법은 DNA 편집 효소의 유효량을 세포에 투여하는 단계; 및 이후에, 상기 세포를 이본쇄 절단 수복의 억제제와 접촉시키는 단계를 포함하며, 그럼으로써 세포사를 일으킨다. 일부 실시 형태에서, 세포를 세포사에 감작시키는 방법이 본 명세서에 제공되어 있으며, 본 방법은 DNA 편집 효소의 치료학적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계; 및 이후에, 이본쇄 절단 수복의 억제제를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하며, 그럼으로써 대상체 내의 세포를 세포사에 감작시킨다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 APOBEC패밀리의 구성원, 또는 AID, Rag1 또는 Rag2 또는 SPO11일 수 있다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 APOBEC 패밀리의 구성원일 수 있다. APOBEC 패밀리 구성원의 비제한적인 예에는 APOBEC1 (예: 서열 번호: 138); APOBEC2 (예: 서열 번호: 139), APOBEC3A (예: 서열 번호: 140); APOBEC3C (예: 서열 번호: 141); APOBEC3E (예: 서열 번호: 142); APOBEC3F (예: 서열 번호: 143); APOBEC3G (예: 서열 번호: 144); APOBEC3H (예: 서열 번호: 145); 및 APOBEC4 (예: 서열 번호: 146)가 포함된다.
일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 폴리펩티드, DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산, 및 DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산을 포함하는 벡터의 형태로 투여될 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소는 AID일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 세포에 투여되는 DNA 편집 효소는 서열 번호: 099의 서열을 포함하는 폴리펩티드 또는 그의 변이체, 기능적 단편, 또는 호몰로그이다. 일부 실시 형태에서, 세포에 투여되는 DNA 편집 효소는 AID 폴리펩티드를 암호화하는 핵산, 예를 들어 서열 번호: 100의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산이며, AID 또는 그의 변이체, 기능적 단편, 또는 호몰로그가 그 핵산을 투여한 세포에서 발현되도록 하는 그러한 것이다.
유전자 치료 조성물 및 방법이 또한 본 명세서에 기재된 방법과 함께 사용되는 것에 대해 고려된다. 그러한 방법은 임상의가 관심 대상의 폴리펩티드 또는 RNA 분자를 암호화하는 DNA를 환자 내로(생체내 유전자 치료) 또는 환자 또는 공여자로부터 단리된 세포 내로(생체외(ex vivo) 유전자 치료) 직접 도입하는 것을 가능하게 한다. 유전자 치료 후 형질도입된 세포에 의해 생산된 치료용 단백질은 직접 투여되는 단백질과 비교하여, 예를 들어 암성 세포(예: 대상체의 종양) 내에서 상대적으로 일정한 수준으로 유지될 수 있다. 치료제, 예컨대 AID 및/또는 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 그러한 지속된 생산은 만성 질환, 예컨대 암의 치료에 있어 특히 적절하다.
추가로, 소분자 유도제를 사용한 조절가능한 유전자 작제물이 개발되어 왔는데, 이는 본 명세서에 기재된 본 발명의 일부 실시 형태에서 사용하고자 하는 벡터 내에 포함될 수 있다. (문헌[Rivera et al. (1996) Nat. Med. 2:1028-32]; [No et al. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93:3346-51]; [Gossen and Bujard (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:5547-51]; 진스위치(GeneSwitch)® 시스템(발렌티스, 인크.(Valentis, Inc.), 미국 캘리포니아주 벌링게임 소재)). 이들 시스템은, 소분자 약물 및 도입유전자에 의해 활성이 제어되고, 조절된 전사 인자에 의해 발현이 유도되는 가공된 전사 인자의 사용에 기초한다(문헌[Rivera et al. (1996) Nat. Med. 2:1028-32]; [Pollock et al. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:13221-26]; 미국 특허 제6,043,082호 및 제6,649,595호; 문헌[Rivera et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96:8657-62]).
본 명세서에 기재된 방법에 유용한 벡터에는, 플라스미드, 레트로바이러스성 벡터, 아데노바이러스성 벡터, 아데노-관련 바이러스성 벡터, 헤르페스 바이러스 및 폭스 바이러스 벡터가 포함될 수 있지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 사용된 용어 "형질도입"은 바이러스성 입자 또는 바이러스를 사용하여 외인성 핵산을 세포 내로 도입하는 것을 말한다.
방법, 예컨대 화학적 방법과 관련하여 본 명세서에 사용된 용어 "형질감염"은 외인성 핵산, 예컨대 본 명세서에 기재된 AID의 활성 및/또는 수준을 증가시키는 작용제를 암호화하는 핵산 서열을 세포 내로 도입하는 것을 말한다. 본 명세서에 사용된 용어 "형질감염"은 외인성 핵산을 세포 내로 도입하는 바이러스-기반 방법을 포함시키지 않는다. 형질감염의 방법에는 물리적 처리(전기천공법, 나노입자, 마그네토펙션(magnetofection)), 및 화학적-기반 형질감염 방법이 포함된다. 화학적-기반 형질감염 방법에는 사이클로덱스트린, 중합체, 리포솜, 나노입자, 양이온성 지질 또는 이들의 혼합물(예: DOPA, 리포펙타민(Lipofectamine) 및 업티펙틴(UptiFectin)), 및 양이온성 중합체, 예컨대 DEAE-덱스트란 또는 폴리에틸렌이민을 사용하는 방법이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
이본쇄 절단 수복의 억제제, 예를 들어 본 명세서에서 상기에 기재된 소분자, 폴리펩티드, 단백질, RNAi 작용제, 스틸벤 유도체, 항체, 또는 항체의 에피토프-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드가 본 명세서에서 상기에 기재된 바와 같이 사용될 수 있다.
일부 실시 형태에서, 세포는 시험관내 세포, 세포 배양액 내의 세포, 또는 대상체로부터 얻어진 샘플 내의 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소, 및/또는 이본쇄 절단 수복의 억제제는, 예를 들어 세포가 유지되고 있는 세포 배양 배지에 첨가될 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소, 및/또는 이본쇄 절단 수복의 억제제는, 예를 들어 세포 내로의 그들의 진입을 매개하거나 향상시키는 조성물에 의해 포함될 수 있다. 작용제를 생체내에서 또는 시험관내에서 세포로 전달하기에 적합한 조성물, 예를 들어 리포솜이 본 명세서에서 하기에 기재되어 있다.
일부 실시 형태에서, 세포는 생체내 세포, 예를 들어 대상체 내의 세포일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 예를 들어 벡터의 유효성을 향상시키기 위해, 유효 용량을 최소화하기 위해, 및/또는 부작용 또는 표적을 벗어난 효과를 최소화하기 위해 관심 대상의 특이적 세포 또는 조직(표적화된 세포 또는 조직)을 표적으로 하는 것이 바람직하다. 작용제를 특정 세포 유형에 대해 표적화하는 방법은 당업계에 익히 공지되어 있다. 개관을 위하여, 문헌[Peng et al., "Viral Vector Targeting", Curr. Opin. Biotechnol. 10:454-457, 1999]; [Gunzburg et al., "Retroviral Vector Targeting for　Gene Therapy", Cytokines Mol. Ther. 2:177-184, 1996.]; [Wickham, "Targeting Adenovirus", Gene Ther. 7:110-114, 2000]; [Dachs et al., "Targeting　Gene Therapy to Cancer: A Review", Oncol. Res. 9:313-325, 1997]; [Curiel, "Strategies to Adapt Adenoviral Vectors for Targeted Delivery", Ann NY Acad. Sci. 886:158171, 1999]; [Findeis et al., "Targeted Delivery of DNA for　Gene Therapy via Receptors", Trends Biotechnol. 11:202205, 1993]을 참조하며, 이들 모두는 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
일부 표적화 전략은 전체적으로 또는 부분적으로 세포 수용체 및 그의 천연 리간드를 사용한다. 예를 들어, 문헌[Cristiano et al., "Strategies to Accomplish Gene Delivery Via the Receptor-Mediated Endocytosis Pathway", Cancer Gene Ther., Vol. 3, No. 1, pp. 49-57, January-February 1996.]; [S. C. Philips, "Receptor-Mediated DNA Delivery Approaches to Human　Gene Therapy", Biologicals, Vol. 23, No. 1, pp. 13-6, March 1995]; [Michael et al., "Strategies to Achieve Targeted Gene Delivery Via the Receptor-Mediated Endocytosis Pathway", Gene Ther., Vol.　1, No. 4, pp. 223-32, July 1994]; [Lin et al., "Antiangiogenic　Gene Therapy Targeting The Endothelium-Specific Receptor Tyrosine Kinase Tie2", Proc. Natl. Acad. Sci., USA, Vol. 95, pp. 8829-8834, 1998. Sudimack et al, "Targeted Drug Delivery Via the Folate Receptor", Adv. Drug Deliv., pp. 147-62, March 2000]; [Fan et al., "Therapeutic Application of Anti-Growth Factor Receptor Antibodies", Curr. Opin. Oncol., Vol. 10, No. 1, pp. 67-73, January 1998]; [Wadhwa et al., "Receptor Mediated Glycotargeting", J. Drug　Target, Vol. 3, No. 2, pp. 111-27, 1995]; [Perales et al, "An Evaluation of Receptor-Mediated Gene Transfer Using Synthetic DNA-Ligand Complexes", Eur. J. Biochem, Vol. 1, No 2, pp. 226, 255-66, December 1994]; [Smith et al., "HepatocyteDirected Gene Delivery by Receptor-Mediated Endocytosis", Semin Liver Dis., Vol. 19, No. 1, pp. 83-92, 1999]을 참조하며, 이들은 모두 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
특정 세포 유형에 특이적인 표면 항원에 대한 항체, 특히 일본쇄 항체가 또한 표적화 요소로서 사용될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Kuroki et al., "Specific Targeting Strategies of Cancer Gene Therapy Using a Single-Chain Variable Fragment (scFv) with a High Affinity for CEA", Anticancer Res., pp. 4067-71, 2000]; 발명의 명칭이 "항체-외피 융합 단백질을 함유하는 레트로바이러스성 벡터를 사용한 세포-유형 특이적 유전자 도입" (Cell-Type Specific Gene Transfer Using Retroviral Vectors Containing Antibody-Envelope Fusion Proteins)인 Dornburg의 미국 특허 제6,146,885호; [Jiang et al., "In Vivo Cell Type-Specific Gene Delivery With Retroviral Vectors That Display Single Chain Antibodies", Gene Ther. 1999, 6:1982-7]; [Engelstadter et al., "Targeting Human T Cells By Retroviral Vectors Displaying Antibody Domains Selected From A Phage Display Library", Hum. Gene Ther. 2000, 11:293-303]; [Jiang et al., "Cell-Type-Specific Gene Transfer Into Human Cells With Retroviral Vectors That Display Single-Chain Antibodies", J. Virol 1998,72:10148-56]; [Chu et al., "Toward Highly Efficient Cell-Type-Specific Gene Transfer With Retroviral Vectors Displaying Single-Chain Antibodies", J. Virol 1997, 71:720-5]; [Chu et al., Retroviral Vector Particles Displaying The Antigen-Binding Site Of An Antibody Enable Cell-Type-Specific Gene Transfer, J. Virol 1995, 69:2659-63]; 및 [Chu et al, "Cell Targeting With Retroviral Vector Particles Containing Antibody-Envelope Fusion Proteins", Gene Ther. 1994, 1:292-9]을 참조하며, 이들 모두는 본 명세서에 그 전문이 참고로 포함된다.
투여 및 투여량
DSB 수복 억제제 및 제2 약제학적 활성제는 동일한 약제학적 조성물로 또는 (동시에 또는 상이한 시간에) 상이한 약제학적 조성물로 대상체에게 투여될 수 있다. 상이한 시간에 투여되는 경우, DSB 수복 억제제 및 약제학적 활성제는 다른 하나를 투여한지 5분, 10분, 20분, 60분, 2시간, 3시간, 4시간, 8시간, 12시간, 24시간, 48시간, 72시간, 1주, 2주, 3주 또는 그 초과 이내에 투여될 수 있다. DSB 수복 억제제 및 약제학적 활성제가 상이한 약제학적 조성물로 투여되는 경우, 투여 경로는 상이할 수 있다. 예를 들어, DSB 수복의 억제제는 경구 또는 비경구 경로(정맥내, 근육내, 종양내, 병변내, 진피내, 복강내, 피하, 경진피, 기도(에어로졸), 폐, 경비, 직장, 및 국소(구강 및 설하 포함) 투여 포함)를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 당업계에 공지된 임의의 적절한 경로에 의해 투여되고, 약제학적 활성제는 상이한 경로, 예를 들어 상기 약제학적 활성제의 투여를 위해 당업계에서 흔히 사용되는 경로에 의해 투여된다. 비제한적인 예로, DSB 수복 억제제는 경구 투여될 수 있으며, 한편 약제학적 활성제는 피하 투여될 수 있다.
DSB 수복 억제제의 투여를 위한 투여량 범위는 화합물의 형태, 그의 효능, 및 암의 증상, 마커, 또는 지표가 저하되어야 하는 정도, 예를 들어 증상, 구역, 종양 크기 등에 요구되는 백분율 감소에 좌우된다. 특정 실시 형태에서, 투여량은 유해한 부작용을 일으킬 정도로 커서는 안 된다. 일반적으로, 투여량은 환자의 연령, 상태, 및 성별에 따라 변동될 것이며, 당업자에 의해 결정될 수 있다. 투여량은 또한 임의의 합병증이 발생될 경우 개별 의사에 의해 조정될 수 있다.
특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제의 유효 용량이 환자에게 1회 투여된다. 특정 실시 형태에서, DSB 수복 억제제의 유효 용량이 환자에게 반복해서 투여된다. DSB 수복 억제제의 치료량, 예컨대 0.5 mg/kg, 1.0 mg/kg, 2.0 mg/kg, 2.5 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg, 15 mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 40 mg/kg 또는 50 mg/kg이 환자에게 투여될 수 있다. DSB 수복 억제제는 일정 기간에 걸쳐, 예를 들어 5분, 10분, 15분, 20분, 또는 25분의 기간에 걸쳐 정맥내 주입에 의해 투여될 수 있다. 투여는, 예를 들어, 정기적으로, 예컨대 3시간, 6시간, 12시간 또는 그 초과의 시간 동안 매시간마다, 또는 예컨대 1개월, 2개월, 3개월, 4개월 또는 그 초과의 개월 동안 2주마다(즉, 격주로) 반복된다. 초기 치료 계획 후에, 치료는 덜 빈번하게 투여될 수 있다. 예를 들어, 3개월 동안 2주마다 투여 후에, 투여는 6개월 또는 1년 또는 그 초과의 기간 동안 1개월당 1회 반복될 수 있다. DSB 수복 억제제의 투여는 암의 마커 또는 증상, 예를 들어 종양 크기의 수준을 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 25% 이상, 30% 이상, 40% 이상, 50% 이상, 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상 또는 90% 이상 또는 그 초과로 저하시킬 수 있다.
DSB 수복 억제제의 전체 용량의 투여 전에, 더 작은 용량, 예컨대 5% 주입량이 환자에게 투여되고 부작용, 예컨대 알러지성 반응에 대해 모니터링될 수 있다.
암 또는 자가면역에 대한 영향 덕택으로, DSB 수복 억제제 또는 그로부터 제조된 약제학적 조성물은 생활의 질을 향상시킬 수 있다.
효능 측정
질환의 치료 또는 예방의 효능은, 예를 들어 암의 마커, 지표, 또는 증상 또는 적절한 임의의 다른 측정가능한 파라미터를 측정함으로써 평가될 수 있다. 그러한 파라미터 중 어느 하나, 또는 파라미터의 임의의 조합을 측정함으로써 치료 또는 예방의 효능을 모니터링하는 것은 충분히 당업자의 능력 내에 있다.
암의 하나 이상의 파라미터에서 통계학적으로 유의한 개선이 있을 경우, 또는 그렇지 않으면 예측될 수 있는 증상의 악화 또는 발생이 일어나지 않은 것에 의해 치료가 명백하다. 한 예로서, 암의 측정가능한 파라미터에서의 10% 이상, 그리고 바람직하게는 적어도 20%, 30%, 40%, 50% 또는 그 초과의 유리한 변화는 효과적인 치료의 지표일 수 있다. 주어진 DSB 수복 억제제 또는 그러한 약물의 제형에 대한 효능은 또한 당업계에 공지된 바와 같이 암을 위한 실험용 동물 모델을 사용하여 판단될 수 있다. 실험용 동물 모델을 사용할 경우, 마커에서의 통계학적으로 유의한 증가가 관찰될 때 치료 효능이 입증된다.
주어진 RAD51-쇄 변환 수복 억제제의 효능은 숙련된 임상의에 의해 결정될 수 있다. 그러나, 치료는, 이 용어가 본 명세서에 사용된 바와 같이, 본 명세서에 기재된 화합물에 의한 치료 후, 암의 징후, 증상 또는 마커 중 어느 하나 또는 전부가 유익한 방식으로 변경되거나, 다른 임상적으로 허용되는 증상이 개선되거나, 또는 심지어는, 예를 들어 10% 이상으로 향상되는 경우에 "효과적인 치료"로 여겨진다. 효능은 또한 입원, 또는 의학적 중재에 대한 필요성에 의해 평가했을 때 개체의 악화가 일어나지 않은 것(즉, 질환의 진행이 정지됨)에 의해 측정될 수 있다. 이들 지표의 측정 방법은 당업자에게 공지되어 있고/있거나 본 명세서에 기재되어 있다. 예를 들어, 백혈병의 치료에는 개체 또는 동물(일부 비제한적인 예에는 인간, 또는 포유류가 포함됨)에서의 백혈병의 임의의 치료가 포함되며, (1) 질환을 억제하는 것, 예를 들어 신생 혈관의 병원성 성장을 정지 또는 감속시키는 것; 또는 (2) 질환을 완화시키는 것, 예를 들어 증상의 퇴행을 일으키는 것, 백혈병 개시 세포(leukemia initiating cell)의 개수를 저하시키는 것; 및 (3) 백혈병 발생의 가능성을 방지 또는 저하시키는 것이 포함된다. 질환의 치료에 대한 유효량은 질환의 치료를 필요로 하는 포유류에 투여되는 경우, 그 용어가 본 명세서에 정의된 바와 같이 그 질환에 대해 효과적인 치료를 가져오기에 충분한 양을 의미한다. 작용제의 효능은, 예를 들어 백혈병의 물리적 지표(예: 높은 백혈구 카운트, 감염에 대한 손상된 면역 반응, 백혈병 개시 세포의 존재 등)를 평가함으로써 결정될 수 있다. 효능은 암의 동물 모델, 예를 들어 인간 암 세포가 이식된 마우스에서 평가될 수 있으며, 조성물 또는 제형의 임의의 치료 또는 투여는 암의 적어도 하나의 증상, 마커, 또는 파라미터의 감소로 이어진다.
본 명세서에 기재된 암의 증상 중 임의의 것에서의 저하, 예를 들어 타박상, 출혈, 점상출혈, 감염, 호흡곤란, 창백, 구역, 열, 오한, 야간 발한, 플루-유사 증상, 피로, 팽만감, 및/또는 혈액의 혈소판, 백혈구, 및/또는 적혈구에서의 증가에 의해 효능이 측정될 수 있다.
효능은 또한 입원, 또는 의학적 중재에 대한 필요성에 의해 평가했을 때 개체의 악화가 일어나지 않은 것(즉, 질환의 진행이 정지되거나 적어도 감속됨)에 의해 측정될 수 있다.
본 명세서에 기재된 치료의 효능의 또 다른 마커는 생존이다. 특정 암에 대한 통계학적 생존율이 잘 확립되어 있다 - 본 명세서에 기재된 방법에 따라 치료된 개체 또는 개체 집단이 예측 시간을 초과하여 또는 예측률보다 더 큰 값으로 생존할 경우, 그 치료는 효과적이라고 여겨질 수 있다.
효능 시험은 본 명세서에 기재된 방법을 사용하여 치료 과정 동안 수행될 수 있다. 특정 병과 관련된 다수의 증상의 중증도의 측정은 치료 시작 전에, 그리고 이어서 치료 시작 후 나중의 특정 기간에 수행된다. 예를 들어, 백혈병은 골수에서 개시되고 그것이 검출되기 전에 다른 장기로 퍼질 수 있으며, 따라서 다른 암 유형에 대해 일상적으로 수행되는 종양의 전통적인 병기분류(staging)는 백혈병의 병기분류에는 유용하지 않다. 대신에, 의사는 세포학적(세포) 분류 시스템을 이용하여 백혈병의 유형 및 아형을 확인한다. 특정 백혈병의 예후 또는 결과, 및 또한 치료에 대한 예상 반응은 그러한 세포 분류 시스템을 사용하여 결정될 수 있다. 일 실시 형태에서, 급성 백혈병의 분류 방법은 프랑스-미국-영국(FAB) 시스템이다. FAB 분류에 따르면, 급성 백혈병은 8개의 아형의 급성 골수원성 백혈병(AML) 및 3개의 아형의 급성 림프구성 백혈병(ALL)으로 나누어진다. 당업자는 다양한 상이한 백혈병에서의 질환 중증도를 결정하기 위한 그러한 방법을 인식하며, 그러한 분류 체계에 기초하여 백혈병의 중증도를 용이하게 진단할 수 있다.
본 명세서에 기재된 방법에 따른 치료의 효능은 암의 대리 또는 간접 마커를 추적함으로써 평가될 수 있다. 제한하고자 함이 없이, 암의 치료의 효능을 나타내는 그러한 마커에는 적혈구 또는 혈소판 카운트에서의 증가, 백혈구 카운트의 정상화, 간 및 신장 기능 시험에서의 개선, 락테이트 탈수소효소 수준에서의 감소, 여포성 림프종 국제 예후 지수(FLIPI)에 대한 개선된 점수(문헌[Lopez-Guillermo, A. et al., J Clin Oncol 1994; 12:1343-1348]; [Solal-Celigny et al., Blood 2004 104:1258-1265]), CD11b+ 및 Gr-1+ 세포에서의 감소, 골수 생검에 의해 결정했을 때 개선된 골수 형태, 세포발생 시험에 의해 결정했을 때 비정상 DNA를 갖는 세포에서의 감소, 및 뇌척수액 내의 암 세포의 감소된 존재가 포함될 수 있다. 각각의 유형의 암에 특이적인 시험은 당업자에게 공지되어 있다. 비제한적인 예로서, 버킷 림프종은 사실상 모든 세포 Ki67+(증식)와 함께, CD20+, CD10+, Bcl-6+, Bcl-2-, TdT-, 및 단일형 sIg+인 면역표현형, 및 bcl -2 또는 bcl -6 유전자가 관여하는 재배열 없이 c-myc 및 IgH 또는 IgL이 관여하는 전좌를 갖는 세포를 검출함으로써 진단되고 모니터링될 수 있다.
숙련된 기술자는 조사 중에 진단적 질문을 개선하기 위하여 2개 이상의 마커의 측정을 사용하는 많은 방법이 있다는 것을 이해할 것이다. 매우 단순하지만, 그럼에도 불구하고 흔히 효과적인 접근법에서는, 조사되는 마커 중 적어도 하나에 대해 샘플이 양성일 경우 양성 결과인 것으로 가정된다. 이는, 예를 들어, 사실상 모든 세포 Ki67+(증식)와 함께, CD20+, CD10+, Bcl-6+, Bcl-2-, TdT-, 및 단일형 sIg+인 면역표현형, 및 bcl -2 또는 bcl -6 유전자가 관여하는 재배열 없이 c-myc 및 IgH 또는 IgL이 관여하는 전좌를 갖는 세포를 검출함으로써 암인 버킷 림프종을 진단하는 경우일 수 있다. 그러나 빈번하게는, 마커들의 조합이 수학적으로/통계적으로 평가된다. 바람직하게는, 마커 패널의 마커들, 예를 들어 버킷 림프종에 대한 면역표현형 및 혈액 패널 카운트에 대해 측정된 값은 수학적으로 조합되고, 조합된 값은 기초적인 진단적 질문과 상관된다. 바람직하게는, 진단적 질문은 암의 치료에 있어서의 DSB 수복 억제제의 유효성이다. 바람직하게는, DSB 수복 억제제를 투여받지 않은 대조군에 대비하여 상대 위험도(relative risk)가 제공된다. 바람직하게는, 대조군은 연령 및 다른 공변량에 대해 매칭된다.
마커 값은 임의의 적절한 최신의 수학적 방법에 의해 조합될 수 있다. 마커 조합을 질환 또는 질환 발생 위험에 상관시키기 위한 익히 공지된 수학적 방법은 판별 분석(Discriminant Analysis, DA) (즉, 선형-, 2차-, 정규화-DA), 커널(Kernel) 방법(즉, SVM), 비파라미터적 방법(즉, k-최근린 분류자(k-Nearest-Neighbor Classifier)), PLS (Partial Least Square, 부분 최소 제곱법), 트리-기반 방법(Tree-Based Method) (즉, 논리 회귀, CART, 랜덤 포레스트 방법(Random Forest Method), 부스팅/배킹 방법(Boosting/Bagging Method)), 일반화 선형 모델(즉, 로지스틱 회귀), 주성분 기반 방법(Principal Components based Method) (즉, SIMCA), 일반화 가법 모델, 퍼지 논리 기반 방법, 신경망 및 유전적 알고리즘 기반 방법과 같은 방법을 이용한다. 숙련된 기술자는 본 명세서에 기재된 기술의 마커 조합을 평가하기에 적절한 방법을 선택하는 데 문제가 없을 것이다. 바람직하게는, 마커를, 예를 들어 암의 부재 또는 존재에 상관시키는 데 사용되는 방법은 DA(즉, 선형-, 2차-, 정규화 판별 분석), 커널 방법(즉, SVM), 비파라미터적 방법(즉, k-최근린 분류자), PLS(부분 최소 제곱법), 트리-기반 방법(즉, 로직 회귀, CART, 랜덤 포레스트 방법, 부스팅 방법), 또는 일반화 선형 모델(즉, 로지스틱 회귀)로부터 선택된다. 이들 통계학적 방법에 관한 상세 내용은 하기의 참고문헌에서 찾아진다: 문헌[Ruczinski, I., J. of Computational and Graphical Statistics, 12 (2003) 475-511]; [Friedman, J. H., Regularized Discriminant Analysis, JASA 84 (1989) 165-175]; [Hastie, T., Tibshirani, R., Friedman, J., The Elements of Statistical Learning, Springer Series in Statistics, 2001]; [Breiman, L., Friedman, J. H., Olshen, R. A., Stone, C. J., (1984) Classification and regression trees, California: Wadsworth; Breiman, L. Random Forests, Machine Learning, 45 (2001) 5-32]; [Pepe, M. S., The Statistical Evaluation of Medical Tests for Classification and Prediction, Oxford Statistical Science Series, 28 (2003)] 및 [Duda, R. O., Hart, P. E., Stork, D. G., Pattern Classification, Wiley Interscience, 2nd Edition (2001)].
일부 실시 형태에서, 생물학적 마커들의 기초적인 조합을 위해 최적화된 다변량 컷-오프가, 예를 들어 암 발생의 저위험, 중간위험 및 고위험을 가진 환자들을 판별하는 데 사용될 수 있다. 이러한 유형의 다변량 분석에서, 마커들은 더 이상 독립적이지 않고 마커 패널을 형성한다.
진단 방법의 정확도는 그의 수용자-반응 특성(receiver-operating characteristic, ROC)에 의해 가장 잘 설명된다(특히 문헌[Zweig, M. H., and Campbell, G., Clin. Chem. 39 (1993) 561-577] 참조). ROC 그래프는 관찰되는 데이터의 전체 범위에 걸쳐 결정 역치(decision threshhold)를 연속적으로 변동시키는 것으로부터 생성된 모든 감도/특이도 쌍의 도표이다.
실험실 시험의 임상 성적은 그것의 진단 정확도, 또는 대상체를 임상적으로 관련된 하위집단으로 올바르게 분류하는 능력에 좌우된다. 진단 정확도는 해당 시험이 조사되는 대상체의 2개의 상이한 상태를 올바르게 구별할 수 있는 능력을 측정한다. 그러한 상태는, 예를 들어 각각 건강과 질환 또는 양성 대 악성 질환이다.
각각의 경우에, ROC 도표는 결정 역치의 전체 범위에 대해 감도 대 1-특이도를 표시함으로써 2개의 분포 사이의 중첩을 도시한다. y축 상에는 감도, 또는 참-양성(true-positive) 분율[(참-양성 시험 결과의 개수)/(참-양성 시험 결과의 개수 + 거짓-음성(false-negative) 시험 결과의 개수)로 정의됨]이 있다. 이는 또한 질환 또는 이상의 존재시에 양성으로 지칭되어 왔다. 이는 오로지 영향을 받은 하위집단으로부터만 계산된다. x축 상에는 거짓-양성(false-positive) 분율, 또는 1-특이도[(거짓-양성 결과의 개수)/(참-음성(true-negative) 결과의 개수 + 거짓-양성 결과의 개수)로 정의됨]이 있다. 이는 특이도의 지수이며, 영향받지 않은 하위집단으로부터 전적으로 계산된다. 참-양성 분율 및 거짓-양성 분율은 2개의 상이한 하위집단으로부터의 시험 결과를 사용함으로써 전적으로 별개로 계산되기 때문에, ROC 도표는 샘플에서의 질환의 유병률과 독립적이다. ROC 도표 상의 각각의 점은 특정 결정 역치에 상응하는 감도/1-특이도 쌍을 나타낸다. 완전한 차별화(2개의 결과 분포에 중첩이 없음)를 갖는 시험은 상단 좌측 코너를 통과하는 ROC 도표를 가지며, 여기서 참-양성 분율은 1.0, 또는 100% (완전한 감도)이고, 거짓-양성 분율은 0이다(완전한 특이도). (2개의 집단에 대한 결과의 동일한 분포를 갖는) 차별화를 갖지 않는 시험에 대한 이론상의 도표는 하단 좌측 코너로부터 상단 우측 코너까지의 45도 대각선이다. 대부분의 도표는 이들 2개의 극한 사이에 들어온다. (ROC 도표가 45 대각선 아래에 완전히 들어오는 경우, 이는 "양성"에 대한 기준을 "초과"로부터 "미만" 또는 그 반대로 역전시킴으로써 용이하게 교정된다.) 정성적으로, 도표가 상단 좌측 코너에 근접할수록, 시험의 전체 정확도는 더 높아진다.
실험실 시험의 진단 정확도를 정량화하기 위한 한 가지 편리한 목표는 단일 숫자로 그의 성적을 나타내는 것이다. 가장 흔한 전체적 측정은 ROC 도표 아래의 면적이다. 관례상, 이 면적은 항상 >0.5이다(만약 그것이 아닌 경우, 결정 규칙을 역전시켜 그것을 그렇게 되게 할 수 있다). 값은 1.0 (2개의 집단의 시험 값의 완전한 분리)과 0.5 (시험 값의 2개의 집단 사이에 명확한 분포 차이가 없음) 사이의 범위에 있다. 이 면적은 대각선에 가장 근접한 점 또는 90% 특이도에서의 감도과 같은 도표의 특정 부분에만 좌우되지 않고 전체 도표에 좌우된다. 이는 ROC 도표가 완전한 것(면적=1.0)에 얼마나 근접하는지에 대한 정량적이며 기술적인 표현이다.
용량-제한 독성( DLT )의 정의
용량 점증을 평가하려는 목적을 위한 DLT의 결정은 특정 약물의 공지되고 수용된 독성의 고려하에 NCI CTC 버전 3.0 기준을 사용하여 하기와 같이 정의된다. 전투약(pre-medication) 없이 도달한 독성은 DLT로 여겨지지 않는다. DLT에 대한 기준에는 하기가 포함된다: 최대 진토 (anti-emetic) 전투약에 의한 등급 3 이상의 임의의 구역, 구토; 등급 3 이상의 모든 다른 약물-관련 비혈액학적 독성; 7일 초과 동안 호중구 카운트 <500 세포수/ul; 약물 투여 후 호중구 카운트 <500 세포수/ul의 임의의 발열성 호중구감소증(T >101℉로 정의됨); 혈액 생산 또는 혈소판 수혈을 필요로 하는 출혈의 증거인 등급 3 또는 혈소판 카운트 <10,000 세포수/ul; 에리트로포이에틴 동시투여와 함께 등급 4 독성 이상의 헤모글로빈. 이 반응은 표준 기준에 의해 측정된다. 환자는 매 2회의 치료 주기 후에 재평가된다. 기준선/선별 스캔에 더하여, 객관적 반응의 초기 문서화 후 4주째에 확인 스캔이 얻어진다.
약제학적 조성물
대상체에 대한 투여를 위하여, 본 화합물은 약제학적으로 허용되는 조성물로 제공될 수 있다. 이들 약제학적으로 허용되는 조성물은 상기에 기재된 적어도 하나의 DSB 수복 억제제의 치료학적 유효량을, 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체(첨가제) 및/또는 희석제와 함께 제형화하여 포함한다. 하기에 상세히 기재된 바와 같이, 본 명세서에 기재된 기술의 약제학적 조성물은 고체 또는 액체 형태로의 투여를 위하여 특별히 제형화될 수 있는데, 이에는 하기의 투여에 적합화된 것들이 포함된다: (1) 경구 투여, 예를 들어 드렌치(drench) (수성 또는 비수성 용액 또는 현탁액), 로젠지, 당의정, 캡슐, 환제, 정제(예: 구강, 설하, 및 전신 흡수를 목표로 한 것들), 볼루스, 분말, 과립, 혀에 적용하기 위한 페이스트; (2) 비경구 투여(예를 들어, 피하, 근육내, 정맥내 또는 경막외 주사에 의한 투여), 예를 들어 멸균 용액 또는 현탁액, 또는 지속 방출 제형으로서의 것; (3) 국소 적용, 예를 들어 크림, 로션, 겔, 연고, 또는 피부에 적용되는 제어-방출 패치 또는 스프레이로서의 것; (4) 질내 또는 직장내 투여, 예를 들어 페서리(pessary), 크림, 좌제 또는 폼(foam)으로서의 것; (5) 설하 투여; (6) 안내 투여; (7) 경진피 투여; (8) 경점막 투여; 또는 (9) 경비 투여. 추가적으로, 화합물은 환자 내로 삽입되거나 약물 전달 시스템을 사용하여 주입될 수 있다. 코팅된 전달 장치가 또한 유용할 수 있다. 예를 들어, 문헌[Urquhart, et al., Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 24: 199-236 (1984)]; [Lewis, ed. "Controlled Release of Pesticides and Pharmaceuticals" (Plenum Press, New York, 1981)]; 미국 특허 제3,773,919호; 미국 특허 제6,747,014호; 및 미국 특허 제35 3,270,960호를 참조한다.
많은 유기화된 계면활성제 구조가 약물의 제형을 위해 연구되고 사용되어 왔다. 이들에는 단분자층, 미셀(micelle), 이분자층 및 소포(vesicle)가 포함된다. 소포, 예컨대 리포솜은 약물 전달의 관점으로부터 그들이 제공하는 작용의 지속기간 및 그들의 특이성으로 인해 큰 관심을 끌어 왔다. 리포솜은 친유성 재료로부터 형성된 막 및 수성 내부(aqueous interior)를 갖는 단층(unilamellar) 또는 다층(multilamellar) 소포이다. 수성 부분은 전달하고자 하는 조성물을 함유한다. 리포솜은 양이온성(문헌[Wang et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 1987, 147, 980-985]), 음이온성(문헌[Zhou et al., Journal of Controlled Release, 1992, 19, 269-274]), 또는 비이온성(문헌[Hu et al. S.T.P.Pharma. Sci., 1994, 4, 6, 466])일 수 있다. 리포솜은 특정 응용에 유용한 특정 성질을 부여할 수 있고 당업계에 기재된 바 있는, 다수의 상이한 인지질, 지질, 당지질, 및/또는 중합체를 포함할 수 있다(문헌[Allen et al., FEBS Letters, 1987, 223, 42]; [Wu et al., Cancer Research, 1993, 53, 3765]; [Papahadjopoulos et al. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1987, 507, 64]; [Gabizon et al. PNAS, 1988, 85, 6949]; [Klibanov et al. FEBS Lett., 1990, 268, 235]; [Sunamoto et al. Bull. Chem. Soc. Jpn., 1980, 53, 2778]; [Illum et al. FEBS Lett., 1984, 167, 79]; [Blume et al. Biochimica et Biophysica Acta, 1990, 1029, 91]; [Hughes et al., Methods Mol Biol. 2010; 605:445-59]; 미국 특허 제4,837,028호; 제5,543,152호; 제4,426,330호; 제4,534,899호; 제5,013,556호; 제5,356,633호; 제5,213,804호; 제5,225,212호; 제5,540,935호; 제5,556,948호; 제5,264,221호; 제5,665,710호; 유럽 특허 EP 0 445 131 B1호; EP 0 496 813 B1호; 및 유럽 특허 공개 WO 88/04924호; WO 97/13499호; WO 90/04384호; WO 91/05545호; WO 94/20073호; WO 96/10391호; WO 96/40062호; WO 97/0478호).
본 명세서에 기재된 기술의 조성물은 에멀젼 또는 마이크로에머젼으로서 제조되고 제형화될 수 있다. 에멀젼은 통상적으로 한 액체가 또 다른 액체 중에 분산된 불균일 시스템이며, 이는 직경이 0.1μm를 통상 초과하는 소적(droplet)의 형태이며, 당업계에 기재된 바 있다. 마이크로에멀젼은 광학적으로 등방성이고 열역학적으로 안정한 단일 액체 용액인 물, 오일 및 양친매성 물질의 시스템으로서 정의될 수 있으며, 계면활성제 및 공계면활성제를 포함할 수 있다. 이들 약물 전달 수단 둘 모두는 당업계에 기재된 바 있다(예를 들어, 문헌[Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., and Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY]; [Idson, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199]; [Rosoff, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., Volume 1, p. 245]; [Block in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 2, p. 199, 245, & 335]; [Higuchi et al., in Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1985, p. 301]; [Leung and Shah, in: Controlled Release of Drugs: Polymers and Aggregate Systems, Rosoff, M., Ed., 1989, VCH Publishers, New York, pages 185-215]; [Schott, in Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1985, p. 271]; [Constantinides et al., Pharmaceutical Research, 1994, 11, 1385-1390]; [Ritschel, Meth. Find. Exp. Clin. Pharmacol., 1993, 13, 205]; [Ho et al., J. Pharm. Sci., 1996, 85, 138-143]; [Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, p. 92]; 미국 특허 제6,191,105호; 제7,063,860호; 제7,070,802호; 제7,157,099호 참조).
일 실시 형태에서, 리포솜 또는 에멀젼 제형은 계면활성제를 포함한다. 계면활성제는 에멀젼(마이크로에멀젼 포함) 및 리포솜과 같은 제형에서 넓은 응용을 갖는다. 친수성 기("헤드"로도 알려짐)의 성질은 제형에 사용되는 상이한 계면활성제를 분류하는 데 가장 유용한 수단을 제공한다(문헌[Rieger, in Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 1988, p. 285]). 적합한 계면활성제에는 지방산 및/또는 에스테르 또는 그의 염, 담즙산 및/또는 그의 염이 포함된다. 일부 실시 형태에서, 계면활성제는 음이온성, 양이온성, 또는 비이온성일 수 있다. 약물 제품, 제형 및 에멀젼에서의 계면활성제의 사용은 검토된 바 있다(문헌[Rieger, in Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 1988, p. 285]).
일 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술은 세포막을 가로질러 DSB 수복 억제제의 효율적인 전달을 달성하기 위해 다양한 침투 향상제(penetration enhancer)를 사용한다. 침투 향상제는 5개의 넓은 카테고리, 즉 계면활성제, 지방산, 담즙 염, 킬레이트화제, 및 비킬레이트화 비계면활성제(이들 모두는 어딘가에 기재된 바 있음) 중 하나에 속하는 것으로 분류될 수 있다(예를 들어, 문헌[Malmsten, M. Surfactants and polymers in drug delivery, Informa Health Care, New York, NY, 2002]; [Lee et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1991, p.92]; [Takahashi et al., J. Pharm. Pharmacol., 1988, 40, 252]; [Touitou, E., et al. Enhancement in Drug Delivery, CRC Press, Danvers, MA, 2006]; [Muranishi, Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1990, 7, 1-33]; [El Hariri et al., J. Pharm. Pharmacol., 1992, 44, 651-654]; [Brunton, Chapter 38 in: Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Ed., Hardman et al. Eds., McGraw-Hill, New York, 1996, pp. 934-935]; [Swinyard, Chapter 39 In: Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1990, pages 782-783]; [Yamamoto et al., J. Pharm. Exp. Ther., 1992, 263, 25]; [Yamashita et al., J. Pharm. Sci., 1990, 79, 579-583]; [Jarrett, J. Chromatogr., 1993, 618, 315-339]; [Katdare, A. et al., Excipient development for pharmaceutical, biotechnology, and drug delivery, CRC Press, Danvers, MA, 2006]; [Buur et al., J. Control Rel., 1990, 14, 43-51] 참조).
경구 제형 및 그들의 제조는 미국 특허 제6,887,906호, 미국 특허 출원 공개 제20030027780호, 및 미국 특허 제6,747,014호에 상세히 기재되어 있으며, 이들 각각은 본 명세서에 참고로 포함된다. 비경구, 뇌실질내, 경막내, 뇌실내 또는 간내 투여를 위한 조성물 및 제형은 멸균 수용액을 포함할 수 있으며, 이때 멸균 수용액은 또한 완충제, 희석제 및 다른 적합한 첨가제, 예컨대, 이로 한정되지는 않지만, 침투 향상제, 담체 화합물 및 다른 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 함유할 수 있다. 수성 현탁액은 현탁액의 점도를 증가시키는 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 이러한 물질에는, 예를 들어 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 소르비톨 및/또는 덱스트란이 포함된다. 현탁액은 또한 안정제를 함유할 수 있다.
본 명세서에 기재된 기술의 조성물은 약제학적 조성물에서 종래적으로 발견되는 다른 보조 성분들을 본 기술분야에서 확립된 그들의 사용 수준으로 추가로 함유할 수 있다. 따라서, 예를 들어, 조성물은 추가의 상용성인 약제학적으로 활성인 물질, 예컨대 항소양제, 수렴제, 국소 마취제 또는 항염증제를 함유할 수 있거나, 또는 본 명세서에 기재된 기술의 조성물의 다양한 투여형을 물리적으로 제형화하는 데 유용한 추가의 물질, 예컨대 염료, 향미제, 방부제, 산화방지제, 불투명화제, 증점제 및 안정제를 함유할 수 있다. 그러나, 그러한 물질이 첨가될 경우, 이들은 본 명세서에 기재된 기술의 조성물의 성분들의 생물학적 활성을 과도하게 방해해서는 안 된다. 제형은 멸균화될 수 있으며, 필요하다면, 보조제, 예를 들어 윤활제, 방부제, 안정제, 습윤제, 유화제, 삼투압에 영향을 주기 위한 염, 완충제, 착색제, 향미제 및/또는 방향족 물질 등과 혼합될 수 있는데, 이때 이들은 제형의 DSB 수복 억제제(들)와 유해하게 상호작용하지 않는 것이다.
적합한 유화제에는 합성 비이온성 유화제, 예컨대 에톡실화 에테르, 에톡실화 에스테르, 폴리옥시프로필렌-폴리옥시에틸렌 블록 공중합체 및 인지질이 포함된다. 천연 발생 인지질, 예컨대 난황 인지질 또는 대두 인지질, 및 개질된 또는 인공적으로 조작된 인지질 또는 이들의 혼합물이 또한 사용될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 유화제는 난황 인지질 및 대두 인지질이다. 난황 인지질에는 포스파티딜콜린, 레시틴 및 포스파티딜에탄올아민이 포함된다.
본 명세서에 기재된 기술의 조성물은 또한 안정제를 포함할 수 있다. 음이온성 안정제에는, 예를 들어 폴리에틸렌 글리콜과 컨쥬게이트된 포스파티딜에탄올아민(PEG-PE) 및 포스파티딜글리세롤이 포함되며, 이의 구체적인 예는 디미리스톨포스파티딜글리세롤 (DMPG)이다. 추가의 안정제에는 올레산 및 그의 나트륨 염, 콜산 및 데옥시콜산 및 이들의 각각의 염, 양이온성 지질, 예컨대 스테아릴아민 및 올레일아민, 및 3|3-[N-(N', N'-디메틸아미노에탄)카르바모일]콜레스테롤 (DC-Chol)이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에 기재된 기술의 조성물은 적절한 장력 개질제(tonicity modifier)를 포함시킴으로써 혈액과 등장성이 되게 할 수 있다. 장력 개질제로서 글리세롤이 가장 빈번하게 사용된다. 대안적인 장력 개질제에는 자일리톨, 만니톨 및 소르비톨이 포함된다. 약제학적 조성물은 통상적으로 생리학적으로 중성인 pH(통상적으로 6.0 내지 8.5의 범위)에 있도록 제형화된다. pH는 염기, 예를 들어 NaOH 또는 NaHCO3, 또는 일부 경우에는 산, 예컨대 HCl의 첨가에 의해 조정될 수 있다.
본 기술의 조성물은 식물성 오일, 포스파티드 유화제(통상적으로는, 난황 레시틴 또는 대두 레시틴), 및 장력 개질제, 예컨대 리포신(Liposyn)® II 및 리포신® III (아보트 래버러토리즈(Abbott Laboratories), 미국 일리노이주 노스 시카고 소재) 및 인트라리피드(Intralipid)® (프레세니우스 카비 에이비(Fresenius Kabi AB), 스웨덴 웁살라 소재)를 포함하는 약제학적으로 안전한 유-수 에멀젼(oil-water emulsion), 또는 다른 유사한 유-수 에멀젼과 함께 제형화될 수 있다.
독성 및 치료 효능은 세포 배양액 또는 실험용 동물에서, 예를 들어 LD50 (집단의 50%까지 치사되는 용량) 및 ED50 (집단의 50%에서의 치료학적으로 유효한 용량)을 결정하기 위한 표준 약제학적 절차에 의해 결정될 수 있다. 독성 효과와 치료 효과 사이의 용량비가 치료 치수이며, 이는 LD50/ED50 비로 표현될 수 있다. 큰 치료 지수를 나타내는 조성물이 바람직하다. 쥣과 유전학(murine genetics)은 DSB 수복 억제제의 연구를 위한 다수의 마우스 모델을 발생시켜 왔다. 그러한 모델은 DSB 수복 억제제의 생체내 시험에 사용될 뿐만 아니라 치료학적 유효 용량의 결정에도 사용될 수 있다. 적합한 마우스 모델은, 예를 들어 본 명세서에 기재된 AICDA -/- 마우스 또는 환자 유래 조직 이종이식(PDX)을 사용하여 발생시킨 모델이다. DSB 수복 억제제 연구에 유용하게 될 본 기술의 특정 실시 형태에서는, 면역손상된 마우스 주, 예컨대 Nod-scid, NSG (NOD-scid Il2ry-null; NOD.Cg-Prkdc-scid<Il2rg>/Wjl/SzJ) 또는 NRG (NOD-RagIl2ry-null; NOD-Rag1<null> IL2rg<null>/Wjl/SzJ)가 1차 인간 암 세포(예컨대, 백혈병)로 생착된다.
세포 배양액 검정 및 동물 연구로부터 얻어진 데이터는 인간에서 사용하기 위한 일정 범위의 투여량을 제형화하는 데 사용될 수 있다. 그러한 화합물의 투여량은, 바람직하게는 거의 또는 전혀 독성 없이 ED50을 포함하는 일정 범위의 계산 농도 내에 놓여 있다. 투여량은 사용되는 투여형 및 이용되는 투여 경로에 따라 이 범위 내에서 변동될 수 있다.
치료학적 유효 용량은 세포 배양액 검정으로부터 초기에 평가될 수 있다. 동물 모델에서, 세포 배양액에서 결정된 IC50(즉, 증상의 최대 절반 억제를 달성하는 치료제의 농도)을 포함하는 순환 혈장 농도 범위를 달성하도록 용량이 제형화될 수 있다. 혈장 내 화합물의 수준은, 예를 들어 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 측정될 수 있다. 임의의 특정 투여량의 효과가 적합한 생물검정에 의해 모니터링될 수 있다.
단회 투여형을 생산하기 위해 담체 재료와 병용될 수 있는 DSB 수복 억제제의 양은 일반적으로 치료 효과를 생성하는 화합물의 양일 것이다. 일반적으로 100%로부터, 이 양은 화합물의 약 0.1% 내지 99%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 70%, 가장 바람직하게는 10% 내지 약 30%의 범위일 것이다.
투여량은 의사에 의해 결정되고, 필요에 따라 치료의 관찰된 효과에 적합하도록 조정될 수 있다. 일반적으로, 조성물은 DSB 수복 억제제가 1μg/kg 내지 150 mg/kg, 1μg/kg 내지 100 mg/kg, 1μg/kg 내지 50 mg/kg, 1μg/kg 내지 20 mg/kg, 1μg/kg 내지 10 mg/kg, 1μg/kg 내지 1 mg/kg, 100μg/kg 내지 100 mg/kg, 100μg/kg 내지 50 mg/kg, 100μg/kg 내지 20 mg/kg, 100μg/kg 내지 10 mg/kg, 100μg/kg 내지 1 mg/kg, 1 mg/kg 내지 100 mg/kg, 1 mg/kg 내지 50 mg/kg, 1 mg/kg 내지 20 mg/kg, 1 mg/kg 내지 10 mg/kg, 10 mg/kg 내지 100 mg/kg, 10 mg/kg 내지 50 mg/kg, 또는 10 mg/kg 내지 20 mg/kg의 용량으로 제공되도록 투여된다. 본 명세서에 제공된 범위는 모든 중간 범위의 범위를 포함한다는 것이 이해되어야 하며, 예를 들어 범위 1 mg/kg 내지 10 mg/kg은 1 mg/kg 내지 2 mg/kg, 1 mg/kg 내지 3 mg/kg, 1 mg/kg 내지 4 mg/kg, 1 mg/kg 내지 5 mg/kg, 1 mg/kg 내지 6 mg/kg, 1 mg/kg 내지 7 mg/kg, 1 mg/kg 내지 8 mg/kg, 1 mg/kg 내지 9 mg/kg, 2 mg/kg 내지 10 mg/kg, 3 mg/kg 내지 10 mg/kg, 4 mg/kg 내지 10 mg/kg, 5 mg/kg 내지 10 mg/kg, 6 mg/kg 내지 10 mg/kg, 7 mg/kg 내지 10 mg/kg, 8 mg/kg 내지 10 mg/kg, 9 mg/kg 내지 10 mg/kg 등을 포함한다. 상기에 제공된 것에 대한 중간 범위가 또한 본 명세서에 기재된 기술의 범주 내에 있다는 것이 추가로 이해되어야 하며, 예를 들어 범위 1 mg/kg 내지 10 mg/kg에서, 2 mg/kg 내지 8 mg/kg, 3 mg/kg 내지 7 mg/kg, 4 mg/kg 내지 6 mg/kg 등과 같은 용량 범위이다.
치료의 지속기간 및 빈도에 대하여, 숙련된 임상의는 치료가 언제 치료 이득을 제공하는지를 결정하기 위해, 그리고 투여량을 증가 또는 감소시킬지의 여부, 투여 빈도를 증가 또는 감소시킬지의 여부, 치료 중지의 여부, 치료 재개의 여부 또는 치료 계획에 대한 다른 변경 여부를 결정하기 위해 대상체를 모니터링하는 것이 통상적이다. 투약 일정은 다수의 임상 인자, 예컨대 DSB 수복 억제제에 대한 대상체의 감도에 따라 주 1회로부터 매일에 이르기까지 변동될 수 있다. 원하는 용량은 한꺼번에 투여되거나 하위용량, 예를 들어 2 내지 4개의 하위용량으로 나누어질 수 있으며, 예를 들어 하루를 통해 적절한 간격으로 또는 다른 적절한 일정으로 일정 기간에 걸쳐 투여될 수 있다. 그러한 하위용량은 단위 투여형으로서 투여될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 투여는 만성적이며, 예를 들어 수 주 또는 수 개월의 기간에 걸쳐 매일마다 1회 이상의 용량이다. 투약 일정의 예는 1주, 2주, 3주, 4주, 1개월, 2개월, 3개월, 4개월, 5개월, 또는 6개월 또는 그 초과의 기간에 걸쳐 매일 2회, 매일 3회 또는 매일 4회 이상의 매일 투여이다. 원하는 용량은 연속 주입 또는 제어 방출 제형을 통한 지연을 사용하여 투여될 수 있다. 그 경우에, 각각의 하위용량 내에 함유된 DSB 수복의 억제제는 총 일일 투여량을 달성하기 위해 상응하여 더 작아야 한다. 투여 단위는 또한, 예를 들어 수 일 기간에 걸쳐 DSB 수복 억제제의 지속 방출을 제공하는 통상의 지속 방출 제형을 사용하여, 수 일에 걸쳐 전달하기 위해 배합될 수 있다. 지속 방출 제형은 당업계에 익히 공지되어 있으며, 본 명세서에 기재된 기술의 작용제와 함께 사용될 수 있는 것과 같은, 특정 부위에서의 작용제의 전달에 특히 유용하다. 이 실시 형태에서, 투여 단위는 상응하는 다회의 일일 용량을 함유한다.
숙련된 기술자는 특정 인자들이 대상체를 효과적으로 치료하는 데 필요한 투여량 및 시기에 영향을 줄 수 있다는 것을 이해할 것이며, 이때 이러한 특정 인자에는 질환 또는 장애의 중증도, 이전 치료, 대상체의 전반적인 건강 및/또는 연령, 및 존재하는 다른 질환이 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 더욱이, 조성물의 치료학적 유효량에 의한 대상체의 치료는 단회 치료 또는 연속 치료를 포함할 수 있다. 본 명세서에 기재된 DSB 수복 억제제에 대한 유효 투여량 및 생체내 반수명의 평가가 통상의 방법을 사용하거나, 또는 본 명세서의 어딘가 다른 곳에 기재된 바와 같이 적절한 동물 모델을 사용한 생체내 시험에 기초하여 행해질 수 있다.
일부 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 본 명세서에 기재된 바와 같이 (a) 하나 이상의 DSB 수복 억제제 및 (b) 하나 이상의 치료학적으로 유효한 화합물을 포함할 수 있다.
선별 검정
일부 실시 형태에서, 본 명세서에 기재된 기술은 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제인지를 결정하는 방법, 예를 들어 작용제 중 하나 이상이 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제인지를 결정하기 위해 작용제를 선별하는 방법에 관한 것이다.
일부 실시 형태에서, 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제인지를 결정하는 방법은 (a) DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 시험 작용제와 접촉시키는 단계; 및 (b) 세포 생존력을 결정하는 단계를 포함하며, 여기서 감소된 세포 생존력은 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제임을 나타낸다.
일부 실시 형태에서, 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제인지를 결정하는 방법은 (a) DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 시험 작용제와 접촉시키는 단계; 및 (b) 단계 (a)의 세포의 세포 생존력을 결정하는 단계; (c) DNA 편집 효소를 발현하지 않는 세포를 상기 시험 작용제와 접촉시키는 단계; (d) 단계 (c)의 세포의 세포 생존력을 결정하는 단계; 및 (e) 단계 (c)의 생세포의 분율을 단계 (d)의 생세포의 분율로 나눔으로써 비를 결정하는 단계를 포함하며, 여기서 0.8 미만의 비는 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제임을 나타낸다.
본 명세서에 기재된 선별 방법과 관련하여, DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 대조 참조 세포에서의 수준보다 더 높은 수준으로 DNA 편집 효소를 발현하는 세포이다. 일부 실시 형태에서, 대조 참조 세포는 비활성화되고 비형질전환된 건강한 B 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, "DNA 편집 효소를 발현하는 세포"는 비활성화되고 비형질전환된 건강한 인간 B 세포에서 관찰된 전체 돌연변이율보다 더 높은 전체 돌연변이율을 갖는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 상승된 수준의 AID를 발현하는 세포이다.
일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 하나의 복제물의 DNA 편집 효소 mRNA, 예를 들어 세포당 1개 이상의 복제물, 세포당 10개 이상의 복제물, 또는 세포당 10개 이상의 복제물을 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 5개의 복제물의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 10개의 복제물의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 100개의 복제물의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 100개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, 예를 들어 세포당 100개 이상의 복제물, 세포당 200개 이상의 복제물, 세포당 300개 이상의 복제물, 세포당 400개 이상의 복제물, 세포당 500개 이상의 복제물, 세포당 600개 이상의 복제물, 세포당 1000개 이상의 복제물, 세포당 5000개 이상의 복제물, 또는 세포당 10,000개 이상의 복제물을 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 200개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 300개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 400개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 500개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 600개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 1,000개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 5,000개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 세포당 적어도 10,000개의 복제물의 DNA 편집 효소 폴리펩티드를 발현하는 세포일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 세포는 자극된 B 세포, 비장 B 세포, 암성 세포, 또는 자가면역 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 세포일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 암성 세포는 림프종; 백혈병; 버킷 림프종; 여포성 림프종; 미만성 거대 B-세포 림프종; B-세포 백혈병; B-세포 급성 림프모구성 백혈병; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 골수원성 백혈병(AML); 만성 골수원성 백혈병(CML)으로 이루어진 군으로부터 선택된 질환을 갖는 대상체로부터의 B 세포; 및 엡스타인-바르 바이러스로 형질전환된 말초 인간 B-림프구 유래 세포주 GM05881, GM07323, 및 GM13689일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 시험 작용제와 접촉되는 세포는 안정하게 형질감염된 세포주일 수 있으며, 여기서 세포주는 DNA 편집 효소를 암호화하는 벡터로 형질감염되었다. 형질감염에 적합한 세포주에는 3T3, CH12F3, 카코(Caco)-2, CCRF-CEM, CHO, CH12-F3, COS-7, HCT 116, HEK 293, HL-60, HepG2, 주르카트(Jurkat), KG-1, K-562, MCF-7, MDCK, MG-63, Mo-B, MOLT-4, 라모스(Ramos) (RA 1) 및 U2-OS가 포함되지만 이로 한정되는 것은 아니다. 추가로, 1차 세포, 배아 줄기 세포 및 유도 다능성 세포(induced pluripotent cell, iPS)로부터 확립된 세포주가 선별에 유용할 수 있다.
일부 실시 형태에서, 세포는 더 높은 수준의 DNA 편집 효소를 발현시키도록 조작된 세포, 예를 들어 자극된 B 세포 또는 DNA 편집 효소를 포함하는 외인성 폴리펩티드를 함유하는 세포 및/또는 DNA 편집 효소를 암호화하는 외인성 핵산일 수 있다.
본 명세서에 기재된 선별 방법과 관련하여, "시험 작용제" 또는 "시험 화합물"은 핵산(DNA 또는 RNA), 소분자, 압타머, 단백질, 펩티드, 항체, 항체의 에피토프-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드, 항체 단편, 펩티드-핵산(PNA), 잠금 핵산(LNA), 유기 또는 무기 소분자; 사카라이드; 올리고사카라이드; 폴리사카라이드; 생물학적 거대분자, 예를 들어 펩티드, 단백질, 및 펩티드 유사체 및 유도체; 펩티드모방체; 핵산; 핵산 유사체 및 유도체; 세균, 식물, 진균, 또는 포유류 세포 또는 조직과 같은 생물학적 재료로부터 제조된 추출물; 천연 발생 또는 합성 조성물; 펩티드; 압타머; 및 항체, 또는 그의 단편일 수 있다. 일부 실시 형태에서, 시험 작용제는 본 명세서에서 상기에 기재된 스틸벤, 스틸벤 유도체, 또는 스틸베노이드일 수 있다. 스틸벤, 스틸벤 유도체, 스틸베노이드, 및 DNA 이본쇄 절단 수복의 다른 억제제의 예가 본 명세서에서 상기에 기재되어 있다. 시험 작용제 및 화합물이 또한 본 명세서에서 상기에 기재되어 있다.
본 명세서에 기재된 선별 방법과 관련하여, "세포 생존력을 결정하는 것"은 세포 대사, 성장, 구조, 및/또는 증식의 임의의 양상을 측정하거나 검출하는 것을 말하며, 이는 건강한 생존 세포 또는 죽고/죽거나 생존불가능한 세포의 지표이다. 당업계에 공지된 비색, 발광, 방사측정, 및/또는 형광측정 검정이 사용될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 세포 생존력을 결정하는 것은 혈구계를 사용한 세포의 수동 카운팅을 포함할 수 있다. 일부 실시 형태에서, 세포 생존력을 결정하는 것은 생세포-사세포 염색(live-dead cell stain), 예를 들어 생세포 또는 사세포 중 어느 하나를 염색하게 될 염색의 사용을 포함할 수 있다.
세포 생존력을 결정하기 위한 비색 기술에는, 비제한적인 예로서 트리판 블루 배제(Trypan Blue exclusion)가 포함된다. 간단히 말해서, 트리판 블루로 세포가 염색되고 혈구계를 사용하여 카운팅된다. 생존 세포는 염료를 배제시키며, 한편 사세포 및 죽어가는 세포는 청색 염료를 흡수하여 광학 현미경 하에서 용이하게 구별된다. 중성 적색이 생존 세포에 의해 흡착되고 세포 리소좀 내에 농축되며; 광학 현미경을 사용하여, 중성 적색으로 염색된 세포의 개수를 정량함으로써 생존 세포가 결정될 수 있다.
세포 생존력을 결정하기 위한 형광측정 기술에는, 비제한적인 예로서, 형광 DNA 삽입제인 요오드화프로피디움이 포함된다. 요오드화프로피디움은 생존 세포로부터는 배제되지만 사세포의 핵은 염색한다. 이어서, 요오드화프로피디움 표지 세포의 유세포 분석이 생존 세포 및 사세포를 정량화하는 데 사용될 수 있다. 락테이트 탈수소효소(LDH)의 방출은 세포의 구조적 손상 및 죽음을 나타내며, 이는 분광광도 효소 검정에 의해 측정될 수 있다. 브로모데옥시우리딘(BrdU)은 새로 합성된 DNA 내로 포함되며, 형광색소 표지 항체로 검출될 수 있다. 형광 염료 회히스트(Hoechst) 33258은 DNA를 표지하며, 세포의 증식을 정량화(예: 유세포 분석)하는 데 사용될 수 있다. 형광 염료 카르복시플루오레세인 디아세테이트 석신이미딜 에스테르 (CFSE 또는 CFDA-SE)의 정량적 포함은 세포 분열 분석(예: 유세포 분석)을 제공할 수 있다. 이 기술은 시험관내 또는 생체내에서 사용될 수 있다. 7-아미노악티노마이신 D (7-AAD)는 DNA와의 회합시에 스펙트럼 이동을 겪는 형광 삽입제이며, 세포 분열 분석(예: 유세포 분석)을 제공할 수 있다.
세포 증식을 결정하기 위한 방사측정 기술에는, 비제한적인 예로서, [3H]-티미딘이 포함되며, 이는 생세포의 새로 합성된 DNA 내로 포함되어 세포의 증식을 결정하는 데 빈번하게 사용된다. 세포 생존력을 정량화하기 위해 사세포로부터의 크롬(51Cr)-방출이 섬광 카운팅에 의해 정량화될 수 있다.
세포 생존력을 결정하기 위한 발광 기술에는, 비제한적인 예로서, 셀타이터-글로(CellTiter-Glo) 발광 세포 생존력 검정(프로메가, 미국 위스콘신주 매디슨 소재)이 포함된다. 이 기술은 존재하는 ATP의 양을 정량화하여 생존 세포의 개수를 결정한다.
세포 생존력을 결정하기 위한 키트는 구매가능하며, 예를 들어 멀티톡스-플루오르™ 다중 세포독성 검정(카탈로그 번호 G9200; 프로메가, 인크.; 미국 위스콘신주 매디슨 소재)이다.
일부 실시 형태에서, 세포 생존력을 결정하는 수단은 고처리량 방법을 포함할 수 있으며, 예를 들어 생세포-사세포 염색이 형광-가능 멀티플레이트 리더를 사용하여 검출될 수 있다. 일부 실시 형태에서는, 자동화된 영상 획득 및 분석을 통해 영상화 분석이 수행될 수 있다.
본 명세서에 기재된 기술의 일부 실시 형태는 하기의 번호 매긴 단락 중 어느 한 단락으로서 정의될 수 있다:
1.
(a) 대상체로부터 유래된 생물학적 샘플을 얻는 단계;
(b) DNA 편집 효소의 수준을 측정하는 단계; 및
(c) 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계
를 포함하는 치료 방법.
2.
검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 것으로 결정된 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계
를 포함하는 치료 방법.
3.
(a) 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및
(b) 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며,
여기서 상승된 수준의 DNA 편집 효소란, DNA 편집 효소의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법.
4. 단락 1에 있어서, 상기 생물학적 샘플은 혈액 세포(blood cells)를 포함하는, 방법.
5. 단락 1에 있어서, 상기 생물학적 샘플은 B 세포를 포함하는, 방법.
6. 단락 1 내지 단락 5 중 어느 한 단락에 있어서, 검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준은 건강한 대상체로부터의 정상 세포에서보다 통계학적으로 유의하게 더 높은, 방법.
7. 단락 1 내지 단락 6 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 편집 효소는
재조합 활성화 유전자 1(RAG1); 재조합 활성화 유전자 2(RAG2); 포자형성-특이적 단백질 11(SPO11); 아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사(APOBEC) 패밀리 구성원; 및 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
8. 단락 7에 있어서, 상기 DNA 편집 효소는 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)인, 방법.
9. 단락 8에 있어서, 상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 B 세포 내의 AID의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 AID의 수준보다 유의하게 더 높은, 방법.
10. 단락 1 내지 단락 9 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는 인간 대상체인, 방법.
11. 단락 1 내지 단락 10 중 어느 한 단락에 있어서, 검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 암성 세포인, 방법.
12. 단락 1 내지 단락 11 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는 암을 갖는, 방법.
13. 단락 1 내지 단락 11 중 어느 한 단락에 있어서, 검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 자가면역 세포인, 방법.
14. 단락 1 내지 단락 13 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는
림프종, 백혈병, 및 형질 세포 신생물
로 이루어진 군으로부터 선택된 이상(condition)을 갖는, 방법.
15. 단락 14에 있어서, 상기 림프종은
비호지킨 림프종; 버킷 림프종, 소 림프구성 림프종; 림프형질세포성 림프종; 말트(MALT) 림프종; 여포성 림프종; 미만성 거대 B-세포 림프종; 및 T-세포 림프종
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
16. 단락 14에 있어서, 상기 백혈병은
급성 림프모구성 백혈병(ALL), 버킷 백혈병; B-세포 백혈병; B-세포 급성 림프모구성 백혈병; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 골수원성 백혈병(AML); 만성 골수원성 백혈병(CML); 및 T-세포 급성 림프모구성 백혈병(T-ALL)
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
17. 단락 14에 있어서, 상기 형질 세포 신생물은
다발성 골수종; 형질 세포 골수종; 형질 세포 백혈병; 및 형질세포종
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
18. 단락 12에 있어서, 상기 대상체는
상피 세포암; 결장암, 간암, 위암; 장관암; 식도암; 유방암; 폐암; 및 갑상선암
으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 갖는, 방법.
19. 단락 1 내지 단락 10 또는 단락 13 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는 자가면역 질환을 갖는, 방법.
20. 단락 19에 있어서, 상기 자가면역 질환은
홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스, 원판상 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 염증성 만성 비부비동염, 결장염, 셀리악 질환(celiac disease), 염증성 장질환, 바렛 식도, 염증성 위염 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 및 자가면역 매개 혈액학적 질환
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
21. 단락 1 내지 단락 20 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; 및 XLF
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 발현 또는 활동을 감소시키는, 방법.
22. 단락 1 내지 단락 21 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
소분자; 단백질; 펩티드; 항체; 항체 단편; 단백질 결합 단백질; 리보핵산; 데옥시리보핵산; 압타머(aptamer); 펩티드 핵산(PNA); 및 잠금 핵산(locked nucleic acid, LNA)
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
23. 단락 1 내지 단락 20 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 스틸벤, 스틸베노이드, 또는 그의 유도체인, 방법.
24. 단락 23에 있어서, 상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는 화학식 V의 화합물, 또는 그의 입체이성체, 거울상 이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염인, 방법:
[화학식 V]
Figure pct00047

상기 화학식 V에서,
R1은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R2는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R3은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R4는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R5는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R6은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R7은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R8은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R9는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R10은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
X는 C(R21)2, -C(O)N(R22)-, -C(O)-, -C(O)O-, -S(O)-, -SO2- -CH(R11)CH(R12)-, -C(R11)=C(R12)-, 및
Figure pct00048
로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
여기서,
R11은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R12는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
각각의 R21 은 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있고;
각각의 R22는 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
25. 단락 21에 있어서, 상기 스틸벤 유도체는 4,4'디이소티오시아노스틸벤-2,2'-디설폰산 (DIDS)인, 방법.
26. 단락 21에 있어서, 상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
(E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디아세트아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메틸프로판아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메톡시아세트아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디메탄설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디사이클로프로판설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-아미노스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-메틸티오우레아); (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-이소프로필티오우레아); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)이소부티르아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-2-메톡시아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)메탄설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; N'-(4-{(E)-2-[4-(디메틸아미노)페닐]-1-에테닐}페닐)-N,N-디메틸설파미드; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필티오우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)우레아; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(메틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-사이클로프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(메틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-메틸티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-메틸티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-이소프로필벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N,N-디메틸벤즈아미드); (E)-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(모르폴리노메타논); (E)-5-(4-하이드록시스티릴)벤젠-1,3-디올(3,5,4'-트리하이드록시-트랜스-스틸벤); 및 레스베라트롤
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
27. 단락 21에 있어서, 상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
(E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(디메틸아미노-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 및 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
28. 단락 20에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
4-메틸퀴나졸린-2-카르복스아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 5,6-디메틸-2-메르캅토메틸벤즈이미다졸; (E)-1-(2-하이드록시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔-1-온; N4-부틸-6-클로로피리미딘-2,4-디아민; 1-테르모프신(thermopsine); 6-아미노-5-니트로소-2-페닐피리미딘-4(1H)-온; 및 4-(2-아미노-4-니트로페닐아미노)페닐
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
29. 단락 20에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
7-아자인돌-3-카르복스알데하이드; 2-아미노-4-페닐페놀; 3-(1-메틸-3-피롤리디닐)인돌; 1-메틸-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]퀴놀론; 2-아미노-5-니트로-1H-벤즈이미다졸; 2-(5-니트로-2-푸르푸릴리덴)아미노에탄올-N-옥사이드; 니푸라트론; 알파-메르캅토-N,2-나프틸아세트아미드; 1-테르모스핀; N4-부틸-6-클로로-2,4-피리미딘디아민; 2-(2-하이드록시-6-프로판-2-일옥시-사이클로헥실)아세트산; 6-아미노-5-니트로소-2-페닐-1H-피리미딘-4-온; 4-아미노-2-하이드록시페닐)아르손산; 스피로[1,2-디하이드로인덴-3,5'-이미다졸리딘]-2',4'-디온; N~4~-(4-메톡시페닐)-6-메틸피리미딘-2,4-디아민; 2-아미노-9-펜틸-3H-퓨린-6-티온; 2-(4-메톡시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔니트릴; 2-클로로피리미딘-4,6-디카르복스아미드; 2-아미노-3H-페녹사진-3-온; 2-메틸-N-벤질-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민; 4-(벤질아미노)-2-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘; 2-아미노-1-나프탈렌설폰산; N-sec-부틸-3-메틸벤즈아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 및 2-(2-메틸사이클로헥실리덴)하이드라진카르복스아미드
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
30. 단락 1 내지 단락 20 중 어느 한 단락에 있어서,
상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 항체 또는 항체의 항원-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드 또는 단백질 결합 단백질인, 방법.
31. 단락 1 내지 단락 20 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
miRNA; shRNA; siRNA; amiRNA; dsRNA, 안티센스 RNA 또는 리보자임
으로 이루어진 군으로부터 선택된 RNAi 작용제(RNAi agent)인, 방법.
32. 단락 1 내지 단락 31 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 약제학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하는, 방법.
33. 단락 1 내지 단락 32 중 어느 한 단락에 있어서, 치료제의 투여를 추가로 포함하는, 방법.
34. 단락 1 내지 단락 33 중 어느 한 단락에 있어서, 검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 검출가능하거나 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정함으로써 확인되는, 방법.
35. 단락 1 내지 단락 34 중 어느 한 단락에 있어서,
검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정하고, 그 수준을 건강한 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내에서 발견된 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준에 대비함으로써 확인되며,
여기서 시험 샘플 내의 증가된 양의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성은 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제에 의한 치료를 필요로 하는 대상체의 지표가 되는, 방법.
36. 단락 34 또는 단락 35에 있어서, 상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은
웨스턴 블롯(Western blot); 면역침전; 효소-결합 면역흡수 검정(ELISA); 방사면역학적 검정(RIA); 샌드위치 검정; 단백질 동소 어레이(protein in situ array); 면역조직학적 염색; 방사면역측정 검정; 겔 확산 침전 반응; 면역확산 검정; 현장(in situ) 면역검정; 침전 반응; 면역형광 검정; 정량적 동소 단백질 분석(AQUA); 질량 분석 및 면역전기영동 검정
으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는, 방법.
37. 단락 34 내지 단락 36 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질, 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드를 사용하는 검정을 포함하는, 방법.
38. 단락 34 내지 단락 37 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 단일클론 항체인, 방법.
39. 단락 34 내지 단락 38 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드는 검출가능한 표지로 표지되는, 방법.
40. 단락 34 또는 단락 35에 있어서, 상기 DNA 편집 효소 mRNA의 수준의 측정은
RT-PCR; 정량적 RT-PCR; 교잡 검정; 노턴 블롯(Northern blot); 마이크로어레이 기반 발현 분석; 전사 증폭; 자기-지속 서열 복제; 고성능 서열 분석(high throughput sequencing); 및 RNA-Seq
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는 방법.
41. 단락 1 내지 단락 40 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 편집 효소 활성의 활성의 측정은
교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜(exome) 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 게놈 또는 그의 단백질의 전체 돌연변이 상태를 결정하는 것을 포함하며,
여기서 정상 돌연변이 상태의 2% 이상의 돌연변이 상태는 DNA 편집 효소의 활성임을 나타내는, 방법.
42. 단락 35 또는 단락 36 또는 단락 41 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)의 활성의 측정은
교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 표적 유전자 IGH, BCL6, MYC, BCL11A, CD93, PIM1 및/또는 PAX5에서의 초돌연변이(hypermutation)의 상태를 결정하는 것을 포함하는, 방법.
43. 단락 35 또는 단락 36에 있어서, 상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)의 활성의 측정은 포스포(phospho)-H2AX 검정, 53BP1 검정, 또는 RAD51 검정을 사용하는 것을 포함하는, 방법.
44. 세포사(cell death)를 일으키는 방법으로서,
(a) DNA 편집 효소의 유효량을 세포에 투여하는 단계; 및
(b) 이후에, 단계 (a)의 세포를 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제와 접촉시키는 단계를 포함하며,
그럼으로써 세포사를 일으키는, 방법.
45. 세포를 세포사에 감작(sensitize)시키는 방법으로서,
(c) DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 사용에 의해 세포를 세포사에 감작시키기 위해 DNA 편집 효소의 치료학적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계; 및
(d) 이후에, DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제를 대상체에게 투여하는 단계
를 포함하는, 방법.
46. 단락 44 또는 단락 44에 있어서, 상기 DNA 편집 효소는
폴리펩티드; DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산; 및 DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산을 포함하는 벡터
로 이루어진 군으로부터 선택된 형태로 투여되는, 방법.
47. 단락 44 내지 단락 46 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 편집 효소는
재조합 활성화 유전자 1(RAG1); 재조합 활성화 유전자 2(RAG2); 포자형성-특이적 단백질 11(SPO11); 아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사(APOBEC) 패밀리 구성원; 및 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
48. 단락 44 내지 단락 47 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 편집 효소는 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)인, 방법.
49. 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제인지를 결정하는 방법으로서,
a) DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 시험 작용제와 접촉시키는 단계; 및
b) 단계 a)의 세포의 세포 생존력을 결정하는 단계
를 포함하며,
여기서 감소된 세포 생존력은 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제임을 나타내는, 방법.
50. 단락 49에 있어서,
c) DNA 편집 효소를 발현하지 않는 세포를 상기 시험 작용제와 접촉시키는 단계;
d) 단계 c)의 세포의 세포 생존력을 결정하는 단계; 및
e) 단계 b)의 생세포의 분율을 단계 d)의 생세포의 분율로 나눔으로써 비를 결정하는 단계
를 추가로 포함하며,
여기서 0.8 미만의 비는 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제임을 나타내는, 방법.
51. 단락 49 또는 단락 50에 있어서, 상기 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 AID를 발현하는 세포인, 방법.
52. 단락 51에 있어서, 상기 AID를 발현하는 세포는 자극된 B 세포인, 방법.
53. 단락 49 내지 단락 52 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 세포는 암성 세포인, 방법.
54. 단락 49 내지 단락 53 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 세포는 DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산 벡터로 형질감염된, 방법.
55. 단락 49 내지 단락 54 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 세포는 CH12-F3, 3T3, CH12F3, 카코(Caco)-2, CCRF-CEM, CHO, CH12-F3, COS-7, HCT 116, HEK 293, HL-60, HepG2, 주르카트(Jurkat), KG-1, K-562, MCF-7, MDCK, MG-63, Mo-B, MOLT-4, 라모스(Ramos) (RA 1) 및 U2-OS로 이루어진 군으로부터 선택된 세포주(cell line)인, 방법.
56. 단락 49 내지 단락 55 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 세포는 자가면역 세포인, 방법.
57. 화학식 XXIV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
[화학식 XXIV]
Figure pct00049
상기 화학식 XXIV에서,
X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
58. 단락 57에 있어서, X는 나트륨인, 화합물.
59. 화학식 VIII의 화합물, 그의 입체이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염:
[화학식 VIII]
Figure pct00050
60. 화학식 X의 화합물, 그의 입체이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염:
[화학식 X]
Figure pct00051
61. 화학식 XXV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
[화학식 XXV]
Figure pct00052
상기 화학식 XXV에서,
X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
62. 단락 61에 있어서,
X는 나트륨인, 화합물.
63. 화학식 XXXI의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
[화학식 XXXI]
Figure pct00053
상기 화학식 XXXI에서,
X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
64. 단락 63에 있어서,
X는 나트륨인, 화합물.
65. 화학식 XXXII의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
[화학식 XXXII]
Figure pct00054
상기 화학식 XXXII에서,
X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
66. 단락 65에 있어서, X는 나트륨인, 화합물.
67. 화학식 XXXIII의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
[화학식 XXXIII]
Figure pct00055
상기 화학식 XXXIII에서,
X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
68. 단락 67에 있어서, X는 나트륨인, 화합물.
69. 화학식 XXXIV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
[화학식 XXXIV]
Figure pct00056
상기 화학식 XXXIV에서,
X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
70. 단락 69에 있어서,
X는 나트륨인, 화합물.
71. 화학식 XXXV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
[화학식 XXXV]
Figure pct00057
상기 화학식 XXXV에서,
X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
72. 단락 71에 있어서, X는 나트륨인, 화합물.
73. 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 것으로 결정된 대상체를 치료하기 위한 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 용도.
74. 단락 73에 있어서, 상기 대상체는
(a) 대상체로부터 유래된 생물학적 샘플을 얻는 단계; 및
(b) DNA 편집 효소의 수준을 측정하는 단계
에 의해 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 것으로 결정되는, 용도.
75. 대상체를 치료하기 위한 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 용도로서, 방법은
(a) 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및
(b) 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며,
여기서 상승된 수준의 DNA 편집 효소란, DNA 편집 효소의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것인 용도.
76. 단락 73에 있어서, 상기 생물학적 샘플은 혈액 세포를 포함하는, 용도.
77. 단락 73에 있어서, 상기 생물학적 샘플은 B 세포를 포함하는, 용도.
78. 단락 73 내지 단락 77 중 어느 한 단락에 있어서,
검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준은 건강한 대상체로부터의 정상 세포에서보다 통계학적으로 유의하게 더 높은, 용도.
79. 단락 73 내지 단락 78 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 편집 효소는
재조합 활성화 유전자 1(RAG1); 재조합 활성화 유전자 2(RAG2); 포자형성-특이적 단백질 11(SPO11); 아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사(APOBEC) 패밀리 구성원; 및 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
80. 단락 79에 있어서, 상기 DNA 편집 효소는 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)인, 용도.
81. 단락 80에 있어서, 상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 B 세포 내의 AID의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 AID의 수준보다 유의하게 더 높은, 용도.
82. 단락 73 내지 단락 81 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는 인간 대상체인, 용도.
83. 단락 73 내지 단락 82 중 어느 한 단락에 있어서, 검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 암성 세포인, 용도.
84. 단락 73 내지 단락 83 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는 암을 갖는, 용도.
85. 단락 73 내지 단락 84 중 어느 한 단락에 있어서, 검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 자가면역 세포인, 용도.
86. 단락 73 내지 단락 85 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는
림프종, 백혈병, 및 형질 세포 신생물
로 이루어진 군으로부터 선택된 이상을 갖는, 용도.
87. 단락 86에 있어서, 상기 림프종은
비호지킨 림프종; 버킷 림프종, 소 림프구성 림프종; 림프형질세포성 림프종; 말트 림프종; 여포성 림프종; 미만성 거대 B-세포 림프종; 및 T-세포 림프종
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
88. 단락 86에 있어서, 상기 백혈병은
급성 림프모구성 백혈병(ALL), 버킷 백혈병; B-세포 백혈병; B-세포 급성 림프모구성 백혈병; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 골수원성 백혈병(AML); 만성 골수원성 백혈병(CML); 및 T-세포 급성 림프모구성 백혈병(T-ALL)
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
89. 단락 86에 있어서, 상기 형질 세포 신생물은
다발성 골수종; 형질 세포 골수종; 형질 세포 백혈병; 및 형질세포종
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
90. 단락 86에 있어서, 상기 대상체는
상피 세포암; 결장암; 간암, 위암; 장관암; 식도암; 유방암; 폐암; 및 갑상선암
으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 갖는, 용도.
91. 단락 73 내지 단락 82 또는 단락 85 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 대상체는 자가면역 질환을 갖는, 용도.
92. 단락 91에 있어서, 상기 자가면역 질환은
홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스, 원판상 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 염증성 만성 비부비동염, 결장염, 셀리악 질환, 염증성 장질환, 바렛 식도, 염증성 위염 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 및 자가면역 매개 혈액학적 질환
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
93. 단락 73 내지 단락 92 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; 및 XLF
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 발현 또는 활동을 감소시키는, 용도.
94. 단락 73 내지 단락 93 중 어느 한 단락에 있어서, DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
소분자; 단백질; 펩티드; 항체; 항체 단편; 단백질 결합 단백질; 리보핵산; 데옥시리보핵산; 압타머; 펩티드 핵산(PNA); 및 잠금 핵산(LNA)
으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
95. 단락 73 내지 단락 93 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 스틸벤, 스틸베노이드, 또는 그의 유도체인, 용도.
96. 단락 95에 있어서, 상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는 화학식 V의 화합물, 또는 그의 입체이성체, 거울상 이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염인, 용도:
[화학식 V]
Figure pct00058

상기 화학식 V에서,
R1은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R2는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R3은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R4는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R5는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R6은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R7은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R8은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R9는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R10은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
X는 C(R21)2, -C(O)N(R22)-, -C(O)-, -C(O)O-, -S(O)-, -SO2- -CH(R11)CH(R12)-, -C(R11)=C(R12)-, 및
Figure pct00059
로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
여기서,
R11은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
R12는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
각각의 R21 은 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있고;
각각의 R22는 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
97. 단락 95에 있어서, 상기 스틸벤 유도체는 4,4'디이소티오시아노스틸벤-2,2'-디설폰산 (DIDS)인, 용도.
98. 단락 95에 있어서, 상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
(E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디아세트아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메틸프로판아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메톡시아세트아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디메탄설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디사이클로프로판설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-아미노스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-메틸티오우레아); (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-이소프로필티오우레아); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)이소부티르아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-2-메톡시아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)메탄설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; N'-(4-{(E)-2-[4-(디메틸아미노)페닐]-1-에테닐}페닐)-N,N-디메틸설파미드; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필티오우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)우레아; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(메틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-사이클로프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(메틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-메틸티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-메틸티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-이소프로필벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N,N-디메틸벤즈아미드); (E)-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(모르폴리노메타논); (E)-5-(4-하이드록시스티릴)벤젠-1,3-디올(3,5,4'-트리하이드록시-트랜스-스틸벤); 및 레스베라트롤
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
99. 단락 95에 있어서, 상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
(E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(디메틸아미노-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 및 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
100. 단락 94에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
4-메틸퀴나졸린-2-카르복스아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 5,6-디메틸-2-메르캅토메틸벤즈이미다졸; (E)-1-(2-하이드록시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔-1-온; N4-부틸-6-클로로피리미딘-2,4-디아민; 1-테르모프신; 6-아미노-5-니트로소-2-페닐피리미딘-4(1H)-온; 및 4-(2-아미노-4-니트로페닐아미노)페닐
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
101. 단락 94에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
7-아자인돌-3-카르복스알데하이드; 2-아미노-4-페닐페놀; 3-(1-메틸-3-피롤리디닐)인돌; 1-메틸-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]퀴놀론; 2-아미노-5-니트로-1H-벤즈이미다졸; 2-(5-니트로-2-푸르푸릴리덴)아미노에탄올-N-옥사이드; 니푸라트론; 알파-메르캅토-N,2-나프틸아세트아미드; 1-테르모스핀; N4-부틸-6-클로로-2,4-피리미딘디아민; 2-(2-하이드록시-6-프로판-2-일옥시-사이클로헥실)아세트산; 6-아미노-5-니트로소-2-페닐-1H-피리미딘-4-온; 4-아미노-2-하이드록시페닐)아르손산; 스피로[1,2-디하이드로인덴-3,5'-이미다졸리딘]-2',4'-디온; N~4~-(4-메톡시페닐)-6-메틸피리미딘-2,4-디아민; 2-아미노-9-펜틸-3H-퓨린-6-티온; 2-(4-메톡시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔니트릴; 2-클로로피리미딘-4,6-디카르복스아미드; 2-아미노-3H-페녹사진-3-온; 2-메틸-N-벤질-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민; 4-(벤질아미노)-2-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘; 2-아미노-1-나프탈렌설폰산; N-sec-부틸-3-메틸벤즈아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 및 2-(2-메틸사이클로헥실리덴)하이드라진카르복스아미드
로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
102. 단락 73 내지 단락 94 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 항체 또는 항체의 항원-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드 또는 단백질 결합 단백질인, 용도.
103. 단락 73 내지 단락 94 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
miRNA; shRNA; siRNA; amiRNA; dsRNA; 안티센스 RNA 또는 리보자임
으로 이루어진 군으로부터 선택된 RNAi 작용제인, 용도.
104. 단락 73 내지 단락 103 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 약제학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하는, 용도.
105. 단락 73 내지 단락 104 중 어느 한 단락에 있어서, 치료제의 투여를 추가로 포함하는, 용도.
106. 단락 73 내지 단락 105 중 어느 한 단락에 있어서, 검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 검출가능하거나 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정함으로써 확인되는, 용도.
107. 단락 73 내지 단락 106 중 어느 한 단락에 있어서,
검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정하고, 그 수준을 건강한 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내에서 발견된 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준에 대비함으로써 확인되며,
여기서 시험 샘플 내의 증가된 양의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성은 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제에 의한 치료를 필요로 하는 대상체의 지표가 되는, 용도.
108. 단락 106 또는 단락 107에 있어서, 상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은
웨스턴 블롯; 면역침전; 효소-결합 면역흡수 검정(ELISA); 방사면역학적 검정(RIA); 샌드위치 검정; 단백질 동소 어레이; 면역조직학적 염색; 방사면역측정 검정; 겔 확산 침전 반응; 면역확산 검정; 현장 면역검정; 침전 반응; 면역형광 검정; 정량적 동소 단백질 분석(AQUA); 질량 분석 및 면역전기영동 검정
으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는, 용도.
109. 단락 106 또는 단락 107에 있어서, 상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질, 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드를 사용하는 검정을 포함하는, 용도.
110. 단락 106 내지 단락 109 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 단일클론 항체인, 용도.
111. 단락 106 내지 단락 110 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드는 검출가능한 표지로 표지되는, 용도.
112. 단락 106 또는 단락 107에 있어서, 상기 DNA 편집 효소 mRNA의 수준의 측정은
RT-PCR; 정량적 RT-PCR; 교잡 검정; 노턴 블롯; 마이크로어레이 기반 발현 분석; 전사 증폭; 자기-지속 서열 복제; 고성능 서열 분석; 및 RNA-Seq
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는 용도.
113. 단락 106 또는 단락 107에 있어서, 상기 DNA 편집 효소의 활성의 측정은
교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 게놈 또는 그의 단백질의 전체 돌연변이 상태를 결정하는 것을 포함하며,
여기서 정상 돌연변이 상태의 2% 이상의 돌연변이 상태는 DNA 편집 효소의 활성임을 나타내는, 용도.
114. 단락 106 또는 단락 107 또는 단락 113 중 어느 한 단락에 있어서, 상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID) 활성의 활성의 측정은
교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 표적 유전자 IGH, BCL6, MYC, BCL11A, CD93, PIM1 및/또는 PAX5에서의 초돌연변이의 상태를 결정하는 것을 포함하는, 용도.
115. 단락 106 또는 단락 107에 있어서, 상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)의 활성의 측정은 포스포(phospho)-H2AX 검정, 53BP1 검정, 또는 RAD51 검정을 사용하는 것을 포함하는, 용도.
실시예
실시예 1: 비장세포에서의 XRCC2 의 억제
4 내지 6개월령 C57BL6/J 마우스로부터 성체 비장세포를 단리하였다. 미세 멸균 메쉬를 통한 비장을 10% (v/v) 열-불활성화된 소태아 혈청(FBS, 깁코(Gibco))과 함께 2 내지 10 mM L-글루타민(깁코)을 함유하는 RPMI-1640 배지 중에 분산시킴으로써 기계적 파괴에 의해 단일 세포 현탁액을 제조하였다. pH 7.5에서 0.01 M Tris-HCl 완충액 중 8.3 g/L의 염화암모늄을 사용하여 저장성 용해에 의해 적혈구를 제거하였다. 남아 있는 비장세포를 37℃에서 5% CO2 가습된 대기 중에서 10% 소태아 혈청(FBS)으로 보충된 2 내지 10 mM L-글루타민을 함유하는 보충된 RPMI-1640 중에서 배양하였다. Xrcc2를 표적으로 하는 렌티바이러스성 shRNA 벡터(TRCN0000071023, TRCN0000071024 및 TRCN0000071027; 시그마(Sigma)로부터의 것임)로 세포를 형질도입시켰다. Xrcc2-특이적 짧은 헤어핀 RNA(shRNA) 또는 (스크램블 서열을 갖는) 대조 shRNA를 안정하게 발현하는 CH12-F3-유도체주를, 개별 shRNA 벡터에 의한 직접 형질도입 후, 퓨로마이신 내성에 대한 선택을 행함으로써 발생시켰다. 1차 비장세포의 형질도입의 경우, 퓨로마이신-내성 카세트를 향상된 녹색 형광 단백질(eGFP) (클론테크(Clontech))을 암호화하는 서열로 대체함으로써 원래의 벡터를 변형시켰다. 대조군으로서, 엠티(empty) pLKO.1-eGFP 벡터 또는 스크램블 shRNA를 발현하는 벡터를 사용하였다. 벡터를 위형(pseudotyped) 바이러스 내로 패키징하고, 이를 사용하여 문헌[Hasham, and Tsygankov, 2004, Virology 320, 313-329]에 기개된 바와 같이 1차 세포를 형질도입시켰다. Xrcc2-특이적shRNA로 형질도입된 세포를 XKD 세포라 불렀으며, 대조군을 Ctrl로 표지하였다. 하나의 하위세트는 CD40에 대한 1　μg/ml 항체(항-CD40; HM40-3; 파르민젠(Pharmingen)) 단독을 사용하여 비활성화된(Non) 것으로서 배양하여 클래스 스위칭 없이 증식을 유도하고, 다른 하나는 1　μg/ml 항-CD40 + 25　ng/ml 인터루킨 4 (IL-4; 페프로테크(Peprotech), 카탈로그 번호 214-14)를 사용하여 활성화된(Act) 것으로서 설정하여 증식 및 클래스-스위치 재조합을 유도하였다. 배지 및 사이토카인을 2일 후에 보충하였다. 3일의 자극 후, eGFP의 발현을 사용하여 생존력에 대해 세포를 평가하였다. 도 1은 모든 비활성화된 세포는 동일하게 거동한다는 것을 보여준다. 활성화된 세포에서, Xrcc2의 녹다운은 세포수를 크게 감소시킨다. 도 1은 p53의 결여(Trp53-/-)가 Xrcc2 shRNA를 발현하는 집단에서 관찰된 세포독성을 부분적으로 저지할 수 있다는 것을 추가로 보여준다.
실시예 2: AID 발현 세포와 AID -결핍 세포의 비교
실시예 1에 기재된 바와 같이 야생형 마우스 (AID +/+) 또는 AID-결핍 (AID -/- ) 마우스(문헌[Muramatsu et al. et al., 2000, Cell 102:553-63])로부터 비장세포를 단리하고 배양하였으며, 실시예 1에 기재된 바와 같이 Xrcc2 shRNA (XKD) 또는 대조 shRNA로 형질도입시켰다. AID +/+ B 세포 내의 XRCC2의 녹다운은 활성화 후의 생존을 손상시켰다(도 2). 대조적으로, AID -/- 마우스로부터의 XKD B 세포의 활성화는 세포 생존력 또는 생존에서 검출가능한 변화를 초래하지 않았다. 자기 비드-기반 세포 분류(120-000-302; 밀테니(Miltenyi))를 통한 CD43-발현 세포의 고갈에 의해 B220+IgM+ B 세포에 대해 XKD 세포를 특이적으로 부화시키고 세포 생존력 또는 생존에 대하여 활성화 후의 다양한 시점에서 검정했을 때, AID -/- 세포에서 어떠한 변화도 관찰되지 않았다(도 3). AID를 발현하는 B-세포(WT)에서는, 일수 2 및 일수 3에 세포사에서의 증가가 관찰되었다.
AID +/+ 또는 AID -/- XKD B 세포 배양액을 1μg/ml 항-CD40 (비활성화됨, Non) 또는 1μg/ml 항-CD40 + 25 ng/ml IL-4 (활성화됨, Act)와 함께 배양하고, 이어서 인산화된 γ-H2AX에 대한 다중클론 항체(1:400 희석액; A300-018A; 베틸 래버러토리즈(Bethyl Laboratories), 미국 텍사스주 몽고메리 소재)를 사용하여 비수복된 이본쇄 절단(DSB)의 마커인 γ-H2AX의 좌에 대해 세포를 염색하였다(문헌[Rogakou et al., J Biol Chem 1998, 273:5858-5868]). 대조 및 XKD B 세포 배양액 둘 모두는 활성화 후 γ-H2AX+ 세포(하나의 γ-H2AX 좌 또는 그 초과의 γ-H2AX 좌를 함유하는 세포)의 AID-의존성 분율이 더 크다는 것을 보여주었다(도 4). 대조 shRNA 또는 AID -/- XKD 배양액으로 형질도입된 AID -/- 배양액은 활성화 후 γ-H2AX 양성에서 어떠한 변화도 나타내지 않았다(도 5). 그러나, 세포당 좌를 γ-H2AX+ 분율로 정량화했을 때, XKD 세포는 세포당 γ-H2AX 좌의 개수에서 특이하고 유의한 증가를 가진다는 것을 확인하였다(활성화 전의 세포당 대략 2개의 좌로부터 활성화 후의 세포당 4개 초과의 좌까지; 도 5). 이 효과는 AID -/- 세포에서는 관찰되지 않았으며, 이는 그것이 AID에 좌우된다는 것을 제시한다.
1차 세포(CH12-XKD 세포)에서 사용된 것과 동일한 Xrcc2-녹다운 작제물을 함유하는 클래스-스위치-경쟁 마우스 B 세포주 CH12-F3 (문헌[Nakamura, M. et al. 1996, Int. Immunol. 8, 193-201])에서 유사한 γ-H2AX 반응을 관찰하였다(도 6). 2 내지 10 mM L-글루타민(깁코) 10% (v/v) 열-불활성화된 소태아 혈청(FBS) (오메가 사이언티픽(Omega Scientific)) 및 5% (v/v) NCTC 109 배지(깁코)로 보충된 RPMI-1640 배지 중에 CH12-F3 세포를 유지하였다. Xrcc2-특이적 shRNA 또는 (스크램블 서열을 갖는) 대조 shRNA를 안정하게 발현하는 CH12-F3-유도체주를, 개별 shRNA 벡터에 의한 직접 형질도입 후, 퓨로마이신 내성에 대한 선택을 행함으로써 발생시켰다. DNA DSB의 또 다른 마커인 DNA 손상-반응 인자 53BP1을 사용하여, 활성화-유도 좌의 축적이 XKD 세포에서는 특이적으로 관찰되었지만 대조 세포에서는 관찰되지 않았다.
요약하면, AID가 B 세포 게놈을 무차별하게 공격하여 폭넓은 DSB를 초래할 수 있다는 것이 본 명세서에서 입증된다. 상동적 재조합 인자 XRCC2가 AID-유도 부수적 손상에 대한 내성(이는 B 세포 생존력 및 게놈 안정성을 보장함)에서 중요하다는 것이 본 명세서에 추가로 입증되어 있다. 구체적으로, 이들 연구결과는 발생적으로 프로그램된 DSB를 도입시키는 것과 동일한 기전이 대체적으로 게놈에 대해 고유의 동시적 위험을 가질 수 있다는 것을 나타낸다. 이는 상동적 재조합이 정상 림프구 발생에 있어서뿐만 아니라 면역결핍 또는 암과 같은 림프성 병상(lymphoid pathology)의 방지에 있어서도 중요하다는 것을 제시한다.
실시예 3: DIDS 는 수용 세포의 세포 생존력을 감소시킨다
잠재적인 작용제로서의 DIDS를 입증하기 위하여, 그리고 그의 DSB 수복 억제 활성을 확인하기 위하여, DIDS에 노출시킨 후에 1차 야생형 마우스 비장세포의 방사선 감수성(radiosensitivity)을 측정하였다. 총 2x106개의 비장세포를 0, 300　μM, 600μM 또는 1000μM DIDS를 함유하는 배지 중에, 또는 비히클 단독 대조군 중에 현탁시키고, 137Cs 조사기(셰파드(Shepard))를 사용하여 여기에 2.5 Gy 이온화 방사선을 즉시 제공하였다. 이어서, 동일한 DIDS 농도를 함유하는 배지 중에서 세포를 배양하고, 36시간의 회복 시간 후에 세포 카운트를 결정하였다. DIDS 처리는 비히클-대조군에 비하여, 용량 의존적으로 2.5 Gy 조사에 대해 고감수성을 가져왔다. 0 및 300μM DIDS에서, 세포 카운트는 비히클-단독인 것과 유사하였다. 그러나, 600μM DIDS 중에서 배양된 세포는 생존력에서 대략 25% 감소를 나타냈으며, 1000μM DIDS 중에서 배양된 세포는 생존력에서 87% 감소를 나타냈다. 이들 데이터는, DIDS 처리가 RAD51 억제에서의 그의 공지된 역할과 일치하여, 1차 비장세포에 대해 예측된 방사선 감수성을 제공한다는 것을 보여준다.
성체 C57BL/6J 마우스 (AID+/+)의 비장으로부터 및 AID 녹아웃 마우스 (AID-/-)로부터 1차 마우스 B-세포를 단리하였다(실시예 1 및 실시예 2 참조). 1x10^6개의 1차 B-세포를 조직 배양 플레이트 내로 시딩(seeding)하고, 일수 0 및 일수 2에 1μg/ml 항-CD40 항체 (항-CD40; 비디 파르민젠(BD Pharmingen); 카탈로그 번호 553721) 및 25 ng/ml IL-4로, 또는 항-CD40 단독으로 자극하였다. 배양 부피를 세포 성장을 수용하도록 조정했을 때, 배양 개시 후 0 및 2일째에 0, 50　μM, 100μM 또는 150μM의 DIDS를 첨가하였다. 세포를 6일에 걸쳐 배양하였다. 일수 1, 2, 3, 4 및 6에 트리판 블루로 염색한 후에 혈구계를 사용하여 생존 세포의 개수를 카운팅하였다. 도 7에는, DIDS로 처리한 후의 C57BL/6J 마우스 (AID +/+) 및 AID -녹아웃 마우스 (AID -/-)로부터의 생존 1차 B-세포의 개수가 나타나 있다. AID +/+ B-세포에서, 150μM DIDS는 일수 3에서부터 세포 생존력을 크게 저하시킨다. B-세포 생존력의 감소는 또한 100μM DIDS의 농도에서 관찰된다. AID+/+ B-세포가 항-CD40 + IL-4로 자극되지 않을 경우, DIDS는 세포 생존력에 영향을 주지 않는다. 추가로, AID-/- 세포는 DIDS에 의해 영향을 받지 않으며, 세포 생존력에서 어떠한 유의한 변화도 나타내지 않는다.
야생형 또는 AID 녹아웃(-/-) 마우스의 비장으로부터 세포를 단리하고, 배양하고, 일수 0 및 일수 2에 항-CD40 항체 및 IL-4로 자극하였다. DIDS를 0 또는 150μM의 농도로 일수 0 및 일수 2에 첨가하였다. 구아바 이지사이트 유세포 분석기 검정을 사용하여 격일로 생존 세포의 총 개수를 결정하였다. 150μM DIDS로 처리된 자극된 세포는 더 낮은 생존력을 나타내었다(도 9).
실시예 4: AID 유전자 발현 프로파일링
다양한 조직, 즉 뇌, 혈액 및 골수, 가슴, 결장, 신장, 폐, 난소, 전립선 및 피부로부터 유래된 59개의 인간 암세포주의 NCI-60 세트에서 AID의 발현을 프로파일링하였다. 도 8a에 도시된 바와 같이, 높은 AID 발현이 림프종 및 백혈병 세포주에서 검출되었다. 1차 인간 세포/조직에서 발현을 추가로 특징규명하였으며, 높은 발현이 백혈병 및 림프종 샘플에서 검출되었다(도 8b).
실시예 5: 새로운 생체활성 화합물의 선별
DIDS의 생체활성 유도체를 확인하기 위하여, 설포네이트 또는 이소티오시아네이트 기를 다른 화학적 독립체(chemical entity)로 대체함으로써, 또는 스틸벤 골격 내의 2개의 고리를 연결시키는 이중 결합을 변경시킴으로써 DIDS의 105개의 화학적 변이체의 라이브러리를 발생시켰다. 모든 화합물을 100 마이크로몰의 스톡(stock) 농도로 디메틸 설폭사이드 (DMSO) 중에 재현탁시키고, 10, 50, 또는 150μM의 작업 농도를 생성하도록 연속 희석에 의해 사용하였다. 이들을 개별적으로2회 반복하여 96웰 마이크로타이터 배양 디쉬 내로 피펫팅하여, 10μM 화합물의 2개의 플레이트, 50μM 화합물의 2개의 플레이트, 및 150μM 화합물의 2개의 플레이트를 생성하였다. 각각의 세트에서, 하나의 플레이트는 자기 비드 기반 분류에 의해 단리되어 B220+ IgM+ B-세포에 대해 부화시킨 100,000개의 정상 C57BL/6J 비장 B-세포 (AID+/+)로 시딩하고, 하나의 플레이트는 동일하게 단리된 AID-/- 마우스로부터의 100,000개의 비장 B-세포로 시딩하였다. 각각의 배양액을 일수 0에 1μg/ml 항-CD40 + 25 ng/ml IL-4의 첨가에 의해 자극하여 증식 및 클래스-스위치 재조합을 유도하였다. 2일 후에, 각각의 배양액을 추가의 1　μg/ml 항-CD40 + 25 ng/ml IL-4에 의해 재자극하였다. 총 4일의 자극을 위하여 배양하에서의 추가 2일 후, 멀티톡스-플루오르 다중 세포독성 검정(프로메가, 인크.)을 사용하여 각각의 플레이트의 각각의 웰에서 생존 세포 카운트를 결정하였다. 생존력 측정을 위하여, 100 마이크로리터의 2X 멀티톡스-플루오르 다중 세포독성 시약을 각각의 웰에 첨가하고 혼합한 후, 30분 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 이어서, 플레이트를 형광-가능 멀티플레이트 리더로 이동시키고, 400 nm 여기 및 505 nm 방출의 검출을 사용하여 분석하여 남아있는 생세포의 분율을 측정하였다. 대조군으로서, 비히클 단독(DMSO) 또는 150μM DIDS가 들어 있는 웰을 각각의 플레이트 상에 포함시켰다. 정상 B-세포 플레이트 내의 생세포의 분율을 상응하는 AID 녹아웃 플레이트 내의 생세포의 분율로 나눈 것으로서 각각의 화합물에 대한 생존력 점수를 결정하였다. 정상/AID 녹아웃 비를 DIDS 비의 수준 이하로 생성하는 화합물은 추가의 입증 및 시험을 위한 후보 화합물로서 고려하였다. DIDS 화합물의 부재시에, AID-/- 세포에 비하여 AID+/+ 세포에서 선택적으로 세포 생존력이 저하된 결과(AID+/+ : AID-/- 비가 1 미만이 됨)는 초기 양성 히트로서 점수를 매긴다. 초기 선별은 10개의 유도체, 즉 BB5-6, BB1-6, BB1-7, BB2-6, BB2-5, BB5-39, BB4B-2, BB5-4, BB5-47, 및 BB8-1을 확인하였다(도 10).
실시예 6: 인간 CLL 세포에 대한 DIDS 의 영향
비디 배큐테이너(BD Vacutainer) CPT 튜브(비디(BD), 미국 뉴저지주 프랭클린 레이크스) 내로의 말초 출혈을 통해 환자로부터의 혈액 샘플(8 내지 16 mL)을 수집하고, 제조업체의 사용설명서에 따라 원심분리하여 분리 겔 아래로 적혈구를 격리시키고, 24시간 이내에 잭슨 래버리토리(Jackson Laboratory)로 이송하였다. 수령시, 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 제조업체의 사양서에 따라 샘플로부터 단리하였다. 인간 환자로부터의 14개의 1차 만성 림프구성 백혈병(CLL) 샘플로부터의 백혈구(WBC) 카운트를 차이를 두고서 전혈 카운트(CBC)로부터 계산하였다. 세포를 분리하고 밤새 운송된 후의 실험적 세포 카운트와 계산값을 비교하였다. 이는 현저하게 일관성 있는 단리 효율임을 밝혀낸다. 1차 CLL 샘플(WBC)을 표준 농도로 희석하고, 3.0x10^6개의 세포를 배양액 중에 시딩하였다. 복제(replicate) 배양액을 0μM (n=5), 150μM DIDS (n=4), 또는 600μM DIDS (n=2)로 보충하였다. 배양 일수 2, 4, 6, 및 8에 혈구계를 사용하여 수동으로 카운팅함으로써 생존 세포 카운트를 결정하였다. DIDS-처리된 배양액은 비처리된 대조군에 비하여 생존 세포 카운트에서 유의한 하강을 나타내었다(도 11).
실시예 7: 비장세포에 대한 4'- 브로모 -3'- 니트로프로피오페논의 영향
실시예 1에 기재된 바와 같이 성체 AID-/- 마우스의 비장으로부터 1차 마우스 B-세포를 단리하였다. 10% FBS를 함유하는 PMI-1640 배지 중에 ml당 1x10^6개 세포의 농도로 배양액을 확립하였다. 배양액을 항-CD40 항체 + IL-4로 활성화시키고, 0.5, 5, 50, 또는 500μM 농도의 4'-브로모-3'니트로프로피오페논 (NS-123) (칼바이오켐로부터 구매됨; CAS 번호 101860-83-7)으로 처리하였다. 세포를 배양하에 2일 후에 항-CD40 + IL-4에 의해 재활성화시켰다. 배양하에서의 1, 2, 3, 및 4일 후에 트리판 블루 염색에 의해 세포 카운트를 결정하였다. 50μM 및 500μM 농도의 NS-123에서, AID-널(null) 비장세포는 생존 불가능하였다. 5μM 농도의 NS-123에서, 비장세포의 생존력은 비처리된 비장세포에 대비할 때 저하된다(도 12).
B-세포를 활성화시키기 위해 항-CD40 + IL-4로 보충된 RPMI-1640 배지 중에, 1차 AID-녹아웃 마우스 비장세포를 1x10^6개 세포수/ml의 농도로 일수 0에 배양액 중에 시딩하였다. 개별 배양액을 0, 5, 10, 20, 30, 40, 또는 50μM NS-123으로 보충하고, 일수 1, 2, 3, 및 4에 트리판 블루 염색 후에 생존 세포를 카운팅하였다(도 13). AID-널 비장세포에서의 NS-123에 대한 LD50은 14　μM인 것으로 결정되었다. NS-123의 유효성을 입증하기 위하여, 야생형 마우스(AID 발현)로부터 단리된 비장세포를 AID -/- 마우스로부터의 비장세포(활성화된 것 및 비활성화된 것)에 대비하여 시험할 수 있다.
실시예 8: DSB 억제제의 생체내 시험
AID를 어디에서나 또는 조직-특이적으로 과다발현하는 마우스를 DSB 억제제로 처리한다. 하나의 그러한 적합한 마우스 모델은 B6.Cg-Tg(Igk-Aicda)14Mnz/J(여기서는 AID가 B 림프구(B 세포)에서 과다발현됨) 또는 C57BL/6-Tg(CAG-Aicda)B1Hon/HonRbrc(여기서는 AID가 어디에서나 발현됨)이며, 이때 발현은 CAG (치킨 베타-액틴 프로모터, 래빗 베타-글로빈 폴리 A, CMV-IE 인핸서) 프로모터를 사용한다(문헌[Okazaki et al., J Exp Med. 2003, 197(9):1173-81]). 그러한 마우스 모델은 림프종 및 다른 암성 병변을 발생시키는 것으로 보고된 바 있다. DSB 억제제(예: 스틸벤, DIDS, NS-123, 또는 레스베라트롤)를 마우스에 투여할 수 있다. 투여는 정맥내(i.v.), 복강내(i.p.), 근육내(i.m.) 또는 피하(s.c.) 주사에 의해, 또는 연속 처리용 삼투 펌프를 사용하여 또는 음용수를 통해 행해질 수 있다.
C57BL/6-Tg(CAG-Aicda) 마우스의 경우에, 이들 마우스는 T 세포 림프종을 발생시키고 도입유전자 삽입에 따라 40 내지 80주에 사망하는 것으로 보고된 바 있다(문헌[Okazaki et al., J Exp Med. 2003, 197(9):1173-81]). DSB 억제제에 의한 처리는 림프종의 감소 및 수명 연장을 가져올 수 있다.
실시예 9: 이종이식 마우스 모델
AID 활성을 갖는 1차 만성 림프구성 백혈병(CLL) 환자로부터의 5x10^6 1차 백혈구(WBC)를 0.1 mL의 PBS 중에 현탁시키고, 이어서 면역결핍 마우스, 예를 들어 NOD-scid 또는 NOD-scid IL2R감마 (NSG) 내로 정맥내 주사할 수 있거나 삼투 펌프에 의해 투여할 수 있다. 종양이 말초 혈액 상에 유동을 형성한 후에, 마우스를 4개의 집단 중 하나에 무작위로 할당할 수 있다: 비히클 대조군, 5 mg/kg DIDS, 25 mg/kg DIDS 및 50 mg/kg DIDS를 30% 프로필렌 글리콜을 함유하는 DMSO 중에서 혼합하고, 4 내지 8주 동안 1주 간격으로 정맥내 주사한다. DIDS를 투여받지 않은 집단은 30% 프로필렌 글리콜 중에 용해된 동일한 부피의 DMSO 단독으로 처리될 수 있다. 말초 혈액을 1주 간격으로 유동에 의해 분석할 수 있다. 연구의 종료시에, 마우스를 희생시키고 조직학적 분석을 수행할 수 있다.
실시예 10: AID + 또는 AID - 인간 종양 샘플을 갖는 이종이식 마우스 모델
NOD-scid IL2R감마 (NSG 마우스)를 AID+ 및 AID- 인간 종양 샘플로 생착시켜 환자 질환을 가능한 한 근접하게 반영하는 다수의 복제 생체내 모델을 생성할 수 있다. 이어서, 이들을 사용하여 유전자 화학치료의 생체내 효능을 시험하고, 효능을 AID 발현 수준에 관련시키고, 잠재적인 유전자 화학치료 부작용을 평가할 수 있다.
각각의 환자 샘플로부터 다수의 수용자(recipient) (최대 15마리)를 생성하기 위하여, 각각의 환자 샘플로부터의 1x10^6 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 정맥내, 비장내, 또는 필요하다면, 골수내 주사에 의해 6주령 수컷 NSG 마우스 내로 도입할 수 있다. 이전 연구는 B-림프성 암이 60% 초과의 NSG 마우스의 성공적인 생착률을 가진다는 것을 나타내어 왔다(문헌[Immunol, 2005, 174(10), 6477-89]; [Leukemia. 24(11), 1859-66]; [Ann NY Acad Sci, 2007. 1103: p. 90-3]). 생착 후, 각각의 수용자 집단은 각각 최대 5마리 마우스의 처리 하위군으로 세분될 수 있다. 주사 후 1주 내지 1개월에, 마우스(최대 5마리 집단 내)를 DIDS (실험적으로 결정된 농도를 사용함), 비히클 대조군으로 처리하거나, 또는 그대로의 처리하지 않은 상태로 둘 수 있다. 출발 계획으로서, 4 내지 8주 동안 1주 간격으로 정맥내 주사에 의해 DIDS 또는 다른 화합물로 마우스를 처리할 수 있거나, 또는 약물 주사 사이에 1주 간격으로 말초 혈액을 수집하여, 유세포 분석에 의해 순환 중인 인간 림프성 세포에 대해 모니터링할 수 있다. 4 내지 8주의 처리 후, 모든 수용 마우스를 안락사시킬 수 있으며, 이어서 종양 발생, 부하(burden), 퇴행, 및 생존 시간을 각각의 처리군 내의 모든 마우스에 대해 결정할 수 있다.
종양 부하: 희생시, 말초 혈액 및 림프성 기관 조직을 유세포 분석 또는 면역형광에 의해 인간 백혈병 세포에 대해 분석할 것이다. 인간 세포를 검출하고 이들을 마우스 세포로부터 구별하기 위하여, 인간 백혈병 진단 마커 hCD19, hCD22, 및 hCD79a뿐만 아니라 마우스 마커, 예컨대 mCD19에 대한 공염색(co-stain)을 수행할 수 있다. 인간 세포의 개수를 비처리된 수용자, 비히클-처리된 수용자, 및 DIDS-처리된 수용자에서 비교할 수 있다. DIDS가 유전자 화학치료 반응을 이끌어낸다면, 대조군에 비하여 처리군에서 더 적은 개수의 인간 백혈병 세포가 예측될 것이다.
아폽토시스는 형광 표지된 아넥신(Annexin) V로 염색하고, DNA 결합성 염료인 7-아미노-악티노마이신 D (7-AAD)로 대비염색함으로써 측정할 수 있다. 인간 세포를 상기에서와 같이 마우스로부터 구별할 수 있다. 아폽토시스성 세포의 백분율은 유세포 분석에 의해 결정할 수 있다. 대안적으로, 아폽토시스는 면역형광 현미경법에 의해 AC3를 검출함으로써 측정할 수 있다.
처리 후( post - treatment ) 조직병리 분석. 환자 유래 이종이식 마우스의 유전자 화학치료에 대한 반응 또는 내성을 평가하기 위해, 약물 처리된 모든 마우스 및 대조 마우스에 철저한 조직병리 분석이 행해질 수 있다. 이전 연구는 골수 미세환경 내의 백혈병 세포가 그 외의 다른 세포독성 화학치료에서 생존할 수 있다는 것을 제시해 왔다. 따라서, 종양 세포 점유에 대한 골수, 다른 림프성 니치(nich), 및 잠재적인 피난 부위(sanctuary site), 예컨대 CNS에 대한 분석뿐만 아니라 CD5, CD19, CD22, CD23, 또는 CD79a와 같은 인간 B-세포 마커에 대한 염색을 수행할 수 있다. 니치 그 자체에 대한 약물 처리의 영향은 적절한 마우스 조직 염색 및 마커를 사용하여 병행 마우스 조직병리를 수행함으로써 조사할 수 있다. 조직병리를 위해 수집된 모든 조직(골수, 비장, 비정상의 증거를 나타내는 다른 조직)은 포르말린 중에 고정시키고, 트리밍하고, 파라핀 포매할 수 있다. 모두 고정되었으면, 조직을 헤마톡실린 및 에오신(H&E)으로 염색할 수 있다. 이들 분석을 위하여, 마우스 내의 인간 백혈병의 존재, 및 약물 처리 계획에 의해 야기된 해부학적 비정상이 탐색될 수 있다. 이종이식 마우스로부터의 대퇴골 및 비장의 포르말린-고정된 파라핀 포매 절편을 인간 CD19, CD22, 및 CD79a (B-세포 백혈병 마커)뿐만 아니라 음성 대조군으로서의 다른 계통 마커 패널(예: CD33, CD34 골수성 마커)에 대해 특이적으로 면역염색시켜 골수 및 2차 조혈 기관의 인간 세포 성분을 정확히 찾아낼 수 있다. 이들 분석의 목표는 잔존하는 인간 세포를 측정하고, 그들이 거주하는 미세환경을 확인하는 것일 것이다.
실시예 11: AID 발현 분석 및 유전자형 결정( genotyping )
RNA 및 DNA 제조를 위하여, 표준 분자 생물학 프로토콜을 사용하여 1x10^6개 세포 내지 5x10^7개 세포가 추출될 수 있다. 각각의 샘플에서 정량적 역전사 PCR (qRT-PCR)에 의해 AID mRNA 발현을 측정할 수 있다. 인간 AID 전사물을 검출하기 위한 올리고뉴클레오티드 프라이머 서열은 hAID fwd 5'- TCCTTTTCACTGGACTTTGG-3' (서열 번호: 101); 및 hAID rev　5'-GACTGAGGTTGGGGTTCC-3' (서열 번호: 102)이다. 이들 프라이머에 의한 RT-PCR은 인간 AID에 특이적인 196 bp 반응 생산물을 생산한다. (로딩 대조군(loading control)의 유형에 대한) 인간 GAPDH 전사물에 대한 프라이머 서열은 hGAPDH fwd 5'-GAGTCAACGGATTTGGTCGT-3' (서열 번호: 103); 및 hGAPDH rev　5'-TTGATTTTGGAGGGATCTCG-3' (서열 번호: 104)이다. 이들 프라이머에 의한 RT-PCR은 인간 GAPDH 유전자에 특이적인 238 bp의 반응 생산물을 생산한다. 발현 수준은 문헌[Woo et al., Oncogene 2007, 26(41), 6010-20]에 따른 다중 정규화 프로토콜을 사용하여 정량화하여, 종양 세포 집합체 전체에 걸쳐 샘플-대-샘플 비교에서의 최고 수준의 신뢰도를 보장한다. 각각의 qRT-PCR 검정에서는, 정상 인간 섬유모세포(NHF)와 같은 AID-음성 대조군을 포함시킬 수 있다. 음성 대조군에서의 기준선 수준 초과의 AID mRNA 수준을 나타내는 종양은 AID 발현(+)으로 분류될 수 있으며; 대조 수준 이하의 AID mRNA 수준을 갖는 샘플은 AID 음성(-) 카테고리로 분류될 수 있다. AID 발현 데이터는 임상 진단 정보, 특히 표면 Ig 및 체세포 초돌연변이 상태와 통합될 수 있다. AID+ 카테고리 내에서, 샘플은 AID mRNA 발현 수준, 및 Ig 좌에서의 체세포 초돌연변이의 존재 또는 부재에 따라 등급 매겨질 수 있는데, 이때 이는 표준 임상 대리 마커에 의해 또는 샘플 수집 후의 직접 서열 분석에 의해 결정된다.
실시예 12: AID 활성을 측정하기 위한 서열 분석
유전자 화학치료에 대한 기초는 종양 세포에서의 AID 활성이다. 따라서, AID 돌연변이적 활성을 측정하기 위해 게놈 서열 분석을 수행할 수 있다. AID는 Igh (주요 생리학적 표적)에, 그리고 Myc, Bcl6, Bcl11a (모두 빈번하게 표적화되는 암유전자), CD93 및 빈도가 다양한 다수의 기타를 포함한 비-Ig 유전자의 숙주에 작용하는 것으로 알려져 있다. 모든 알려진 인간 단백질 암호화 유전자 - 대략 26,000개의 유전자 - 에 대한 게놈성 DNA 플랭킹 프로모터 요소(유전자당 1 내지 2 kb)를 단리하기 위해 로봇 포획 시스템을 사용할 수 있다. 이러한 방법으로, 기지 및 미지 둘 모두의 AID 표적뿐만 아니라 비표적화된(음성 대조) 유전자를 분석할 수 있다. 모든 포획된 서열은 HiSeq 기기(일루미나(Illumina), 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재)를 사용한 서열 분석을 위하여 바코드화되고 다중화(레인(lane)당 2 내지 4개의 샘플)될 수 있다. 현재, 표준 HiSeq 레인은 서열의 200억 개 초과의 뉴클레오티드를 제공하기 때문에, 4X 다중화는 2% 미만 빈도로 임의의 단일 유전자에서 일어나는 돌연변이를 검출하기에 충분한 커버리지를 제공할 수 있다(하기의 "분석 전략" 참조). 알려진 AID 표적 (IGH (NCBI 유전자 번호 3492), BCL6 (NCBI 유전자 번호 604), MYC (NCBI 유전자 번호 4609), BCL11A (NCBI 유전자 번호 53335), CD93 (NCBI 유전자 번호 22918), PIM1 (NCBI 유전자 번호 5292) 및/또는 PAX5)뿐만 아니라 MEF2B CD93 (NCBI 유전자 번호 100271849) 및 LTB (NCBI 유전자 번호 4050) (이들 2개의 유전자는 점 돌연변이 또는 DNA 절단(음성 대조군)을 위하여 AID에 의해 아주 드물게 표적화됨)을 분석할 수 있다. 이 접근법은 종양 및 비종양 세포의 혼합을 함유하는 이종 세포 집단에서 비선택된 체세포 돌연변이를 검출하는 데 이상적이다. 버로우즈-휠러 정렬기(Burrows-Wheeler Aligner, BWA)를 사용하여 서열을 인간 참조 게놈 서열에 대해 정렬한 후에, 자발적으로 발생하는 체세포 돌연변이를 다음과 같은 서열 차이로서 확인할 수 있다: (1) 샘플당 적어도 2개의 독립된 판독값에서 생기고, 따라서 서열 분석 오차가 아닐 가능성이 높은 서열 차이; 및 50% 미만의 빈도로 생기고, 따라서 생식계열 다형이라기보다는 오히려 비-클론성 체세포 사건인 서열 차이(문헌[Bioinformatics 2009, 25(14): 1754-60]). 대부분의 샘플에 대해, AID-의존성 종양 돌연변이율을 측정할 수 있는 내부의 환자-특이적 샘플로서 사용하기 위해 많은 환자의 혈액으로부터 비-CLL 세포를 분류할 수 있다.
XKD 세포에서의 염색체 손상. 비처리된 상태로 두거나(배양 보충액 없음) 또는 비활성화 조건(항-CD40) 또는 활성화 조건(항-CD40 + IL-4 + TGF-β) 하에서 배양된, 대조 shRNA (CH12-Ctrl) 및 CH12-XKD 세포로 형질도입된, 마우스 림프종 세포주인 CH12-F3 세포의 핵형:

CH12-Ctrl CH12-XKD
비처리됨 비활성화됨 활성화됨 비처리됨 비활성화됨 활성화됨
절단을 갖는 세포수 (%) 13 9 21 29 29 76
염색체수 (평균) 40 41 40 40 41 39
중기(metaphse) 세포수 23 22 24 21 21 21
실시예 13: DIDS 는 1차 마우스 B를 방사선 감작(radiosensitize)시킨다
1차 마우스 비장 B-세포를 실시예 1에 기재된 바와 같이 정상 야생형 C57BL/6J 마우스로부터 단리하고, 자기 비드(밀테니)로 분류하여 B220+ IgM+ B-세포를 부화시켰다. 정제된 B-세포를 0, 50, 100, 또는 150 마이크로몰 DIDS와 함께 10% FBS를 갖는 완전 중에서 배양하였다. 이어서, Cs137 조사기에서 0 (도 14, 채워진 원) 또는 2.5 Gy (=250 rad; 도 14, 빈 원)의 감마 조사를 세포에 가하였다. 이어서, 조사 후 24시간째에 혈구계 및 트리판 블루 염료 배제를 사용하여 수동 세포분석(manual cytometry)에 의해, 세포 생존력을 각각의 조건에 대해 점수 매기고 DIDS 무함유 조건에 대하여 도시하였다. 생존 세포의 분율은 상응하는 0μM DIDS 조건에 대해 정규화하여 보고한다. 오차 막대는 3개의 독립된 실험으로부터의 평균의 표준 오차(S.E.M)를 나타낸다. 이 데이터는 DIDS와 조합된 조사 처리가 50 마이크로몰 DIDS의 농도에서 출발하여 유의하게 생존력을 감소시킨다는 것을 나타낸다.
실시예 14: DIDS 는 AID ( AICDA )와 상승작용하여 형질전환된 B-세포의 성장을 억제하고 생존을 저해시킨다
마우스 B-림프구성 백혈병 세포주 CH12-F3을 2 내지 10 mM L-글루타민(깁코), 10% (v/v) 열-불활성화된 소태아 혈청(오메가 사이언티픽) 및 5% (v/v) NCTC 109 배지(깁코)로 보충된 RPMI-1640 배지(완전 RPMI; 비활성화됨), 또는 1μg/ml 항-CD40 항체, 25 ng/ml IL-4 및 1 ng/ml 형질전환 성장 인자 베타 1 (TGF-beta1)을 함유하는 완전 RPMI-1640 배지(활성화됨) 중에서 배양하였다. 배양액을 0, 50, 100, 또는 150 마이크로몰 DIDS로 보충하고, 배양하에서의 0, 1, 2, 3, 4, 또는 6일 후에 수동 세포분석에 의해 총 세포 카운트를 결정하였다. 도 15a에서, 다양한 DIDS 농도로 처리된 비활성화된 세포는 세포 생존력 또는 세포 증식에서 어떠한 차이도 나타내지 않는다. 대조적으로, 150 마이크로몰 DIDS에 노출된 활성화된 CH12-F3 세포에서는 총 세포수의 큰 감소가 관찰되었다(도 15b).
실시예 15: DIDS 처리는 AID 에 의해 발생된 DNA 손상의 수복을 방지한다
실시예 1에 기재된 8 내지 12주령 야생형(AID+/+) 및 AID-녹아웃(AID-/-) 마우스로부터 단리된 마우스 1차 비장세포를 150 마이크로몰 DIDS에 노출시키고, 항-CD40 항체 + 인터루킨-4에 의해 활성화하고, 고정시키고, 형광 DNA 염색 염료인 4',6-디아미디노-2-페닐인돌 (DAPI)을 사용하여 DNA 절단 마커인 포스포-H2AX 및 핵 DNA에 대해 염색하였다. 도 16a에서는, 0, 1 내지 2개, 또는 2개 초과의 포스포-H2AX 양성 좌를 함유하는 세포의 분율을 AID+/+ (채워진 막대) 및 AID-/- (빈 막대) 세포에 대해 정량화하였다. 2개 초과의 좌를 갖는 세포의 유의한 더 높은 분율이 DIDS-처리된 AID+/+ 세포에서 특이적으로 관찰되었다. 도 16b에서는, 포스포-H2AX 양성 세포(채워진 막대) 대 포스포-H2AX 음성 세포(빈 막대)의 비율을 AID-/- 배양액에 대비하여 AID+/+ 배양액에 대해 정량화하였다. AID+/+ 세포는 더 높은 백분율의 포스포-H2AX 양성 세포를 나타낸다. 도 16c에서는, 세포당 좌의 개수를 DIDS-처리된 AID+/+ (채워진 막대) 대 AID-/- (빈 막대) 세포에 대해 정량화하였다. 데이터는 표시된 개수의 포스포-H2AX 좌(0 내지 >20; x축)를 품는 세포의 절대 개수(y축)로서 표현되어 있다.
실시예 16: AID ( AICDA ) 발현 상태는 유전자 화학치료에 대한 후보 환자를 확인하는 바이오마커이다
IGVH 초돌연변이 상태와 조합된 AID (AICDA) 발현 상태는 유전자 화학치료에 대한 후보 환자를 추가로 계층화하는 바이오마커이다. 표준 실무에서, IGVH 돌연변이-양성(참조 서열로부터의 편차가 2% 초과임) CLL은 IGVH 돌연변이 음성(참조 서열로부터의 편차가 2% 미만임)보다 일반적으로 더 우수한 예후와 관련된다. 게놈 DNA를 1차 인간 만성 림프구성 백혈병(CLL) 세포로부터 단리하고, 특이적 IGVH 분절을 PCR에 의해 증폭시키고, 표준 생거 서열 분석(standard Sanger sequencing)을 사용하여 서열 분석하였다. IGVH 유전자 분절의 증폭을 위한 프라이머 서열은 다음과 같다:
VH1-FR1　5'-GGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAG-3' (서열 번호: 107);
VH2-FR1 5'-GTCTGGTCCTACGCTGGTGAAACCC-3' (서열 번호: 108);
VH3-FR1 5'-CTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTG-3' (서열 번호: 109);
VH4-FR1 5'-CTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTG-3' (서열 번호: 110);
VH5-FR1 5'-CGGGGAGTCTCTGAAGATCTCCTGT-3' (서열 번호: 111);
VH6-FR1 5'-TCGCAGACCCTCTCACTCACCTGTG-3' (서열 번호: 112);
JH 공통(consensus)　5'-CTTACCTGAGGAGACGGTGACC (서열 번호: 113).
참조 게놈 서열에 대한 뉴클레오티드 차이로서 돌연변이를 확인하였으며, 전체 뉴클레오티드의 백분율로서 정량화하였다. 돌연변이-양성 샘플을, 임상 진단 표준에 따라, 참조로부터 2% 초과의 편차를 갖는 샘플로서 확인하였다. 표 2에서 돌연변이 양성 샘플은 JE1010, JE1014, JE1015, JE1021, JE1030, JE1048 및 JE1061이다. 샘플 JE1050은 돌연변이를 나타내지 않는다. 샘플 JE1010, JE1014, JE1048 및 JE1050은 또한 AID 발현에 대해 양성이었다.
IgVH 초돌연변이 분석
CDR2 (IGVH4-34) 서열 번호
생식계열 GAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGT 147
JE1010(AID+) GATATCAGTCATAGTGGCATCCCCAAGTACAACCCGTCCCTCAAGAGT 148
JE1014(AID+) GAAATCAATCATGGTGGAAATCCCAACTACAACCCGTCTCTCAGGAGC 149
JE1015(AID-) GAAATCAATCATGTTGGAAGTACCACCTACAACCCCTCCCTCAAGAGT 150
JE1021(AID-) GCAATCAATAATAGTGGAAACACCTTGTTCACCCCATCCCTCACGAGT 151
JE1030(AID-) GAAATCAATCACAGTGGAAGAACCAACCACAACCCGTCCCTCAGGAGT 152
JE1048(AID+) GAAACCTATCATAGTGCATACACCAAGTACAGCCCGTCCCTCCAGGGT 153
JE1061(AID-) GAGATCGATTATAGTGGAAACGCCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGT 154
JE1050(AID+) GAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGT 155
실시예 17: DIDS 는 AID ( AICDA )와 상승작용하여 CLL 세포의 생존을 저하시킨다
AID-발현(AID+) 또는 AID-음성(AID-) 1차 인간 CLL 세포를 실시예 4에 기재된 바와 같이 배양하였다. 보충 없이(비처리됨; 도 17에서 삼각형) 또는 30 마이크로몰 DIDS와 함께 염기성 RPMI-1640 배지 중에서 세포를 배양하였다. 빈 원은 30 마이크로몰 DIDS로 처리된 AID-음성 세포에 대한 데이터를 나타내고, 채워진 네모는 30 마이크로몰 DIDS로 처리된 AID-양성 세포에 대한 데이터를 나타낸다. 2, 4, 또는 8일의 노출 후의 생존 세포에 대한 수동 세포분석에 의해 세포 생존을 점수 매겼다. 비처리 및 DIDS-처리된 AID- 세포 배양액은 구별 불가능하였으며, 한편 DIDS-처리된 AID+ 배양액은 저하된 세포 생존력을 나타내었다.
실시예 18: 바이오마커로서의 AID 발현의 사용은 DIDS 에 의한 유전자 화학치료에 반응하는 CLL 환자를 확인한다
인간 AID 또는 인간 GAPDH (로딩 대조군)에 특이적인 올리고뉴클레오티드 프라이머로 역전사(RT)-PCR을 사용하여 4개의 개별 AID-발현(AID+) 인간 CLL 샘플(JE1010, JE1036, JE1070, JE1075) 및 4개의 개별 AID-음성(AID-) 인간 CLL 샘플(JE1015, JE1019, JE1031, JE1057)을 확인하였다. RT-PCR은 제조업체의 프로토콜(퀴아젠(Qiagen))에 따라 원-스텝(One-Step) RT-PCR 키트를 사용하여 행하였다. Xrcc2 및 GAPDH를 검출하는 데 사용된 올리고뉴클레오티드 프라이머 및 PCR 조건은 기재된 바 있다(문헌[Deans et al., EMBO J 2000 19:6675-6685]). 녹다운 연구에 대한 특이성 대조군으로서, 관련 유전자 Rad51을 RT-PCR에 의해 검출하였다. AID 전사물을 검출하기 위한 올리고뉴클레오티드는 hAID fwd　5'-TCCTTTTCACTGGACTTTGG-3' (서열 번호: 101); 및 hAID rev　5'-GACTGAGGTTGGGGTTCC-3' (서열 번호: 102)였다. 이들 프라이머에 의한 RT-PCR은 196 bp 반응 생산물을 생산한다. 인간 GAPDH를 검출하기 위한 올리고뉴클레오티드는 5'-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3' (서열 번호: 105) 및 5'-TCCACCACCCTGTGGCTGTA-3' (서열 번호: 106)였으며, 이들은 238 bp 반응 생산물을 생산한다. 역전사 및 PCR 조건은 다음과 같았다: 단계 1. 50℃, 30분; 단계 2. 95℃, 15분; 단계 3. 94℃, 1분; 단계 4. 55℃, 30초; 단계 5.℃, 1분; 단계 6. 단계 3 내지 5를 순환함, 35회; 단계 7. 72℃, 10분; 단계 8. 4℃, 및 무한 유지.
RT-PCR 생산물을 1.0% 아가로오스 겔(브롬화에티듐 함유) 상에서 전기영동에 의해 분리하고, 바이오-라드(Bio-Rad) 겔 독(Gel Doc) 시스템으로 시각화하였다.
이 검정은 도 18a에 도시된 바와 같이, 신속하게 그리고 민감하게 AID+ 및 AID- 환자 샘플을 확인하며, 이 도면에서는 8개의 대표 샘플이 나타나 있다. 8개의 AID+ 및 8개의 AID- CLL 샘플을 염기성 RPMI-1640 배지 + 30 마이크로몰 DIDS 중에서 배양하였으며, 2, 4, 6, 또는 8일 후의 생존 세포에 대한 수동 세포분석에 의해 생존을 점수 매겼다. 이 분석은 DIDS가 AID-음성 1차 인간 CLL 세포에서보다 AID-양성에서 세포 생존력을 더 강하게 저하시킨다는 것을 밝혀내었다. 이는 또한 단일 마커로서의 AID 발현이 DIDS-반응성 샘플을 효과적으로 확인한다는 것을 밝혀낸다. AID를 발현하는 CLL 세포를 10μM DIDS로 처리하였을 때, 세포 생존력에 대한 유의한 효과를 결정하였다. 총 117명의 림프종 또는 백혈병 환자를 연구하였으며, 이들 중 106명은 CLL 환자였다. 47%에서, RT-PCR에 의해 AID 발현이 결정되었다.
실시예 16: 전신성 홍반성 루푸스 ( SLE ) 마우스 모델에 대한 DIDS 의 영향
BXSB.Yaa Cd8/IL15-/- 마우스는 SLE에 대해 확립된 모델이다. 이들 마우스는 고감마글로불린혈증, 순환성 항-핵 항체 및 면역 복합체 매개 사구체신염을 포함한 인간 SLE의 많은 특성을 나타내며, 결국에는 약 24주령에 질환에 걸리게 된다(문헌[Andrews et al. 1978, J Exp Med 148: 1198-215]; [Dixon et al. 1978, Arthritis Rheum 21: S64-7]; [Izui et al. 2000, Int Rev Immunol 19: 447-72]). 모델로부터의 Cd8a 및 IL15의 유전자 결실은 유사한 임상 표현형을 가져오는데, 이러한 표현형은 훨씬 초기에 나타나며, 이때 생존 평균은 14주령이다(문헌[McPhee et al. 2011, J Immunol 187:4695-4704]).
6주령 수컷 BXSB.Cg-Cd8a<tm1Mak>IL15<tm1Imx>/Dcr (BXSB.Yaa Cd8/IL15-/-로 약기됨) 마우스를 헤파린 프라이밍된 튜브 내로 후완와(retro-orbital) 출혈하여 혈청을 수집하였다. PBS를 함유하는 4% 중탄산칼륨 중 25 mg/kg (n=5) 또는 50 mg/kg DIDS (n=6) 또는 등가 부피의 4% 중탄산칼륨(n=2 및 n=4)을 일수 0, 및 5주 동안 매 7일마다 복강내 투여하였다. 마우스의 체중을 매주 측정하고, 5주 기간 동안 14일 간격으로 혈청을 수집하였다. 이어서, 이들 마우스를 생존을 위해 노령화시켰다. 혈청을 IgG1 및 IgG2b 함량에 대해 ELISA에 의해 분석하였다. ELISA를 위하여, 플레이트를 염소 항-마우스 Ig (IgG1 또는 IgG2b)로 코팅하고, 40℃에서 하룻밤 인큐베이션하였다. 플레이트를 세척하고, 혈청 샘플을 마우스 동형 표준물(mouse isotype standard)과 함께 적절한 희석액으로 적용하고, 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 3회 세척하고, 1시간 동안 알칼리성 포스파타제에 접합된 염소 항-마우스 항체와 함께 인큐베이션하였다. 플레이트를 3회 세척하고, P-니트로페닐 포스페이트(p-NPP, 암레스코(AMRESCO))를 적용하고, 표준물이 적절하게 발생될 때까지 인큐베이션하고, 소프트맥스프로(SoftmaxPro) 소프트웨어를 사용하여 스펙트라맥스(SpectraMax) ELISA 플레이트 리더 상에서 판독하였다. 데이터는 동형-특이적 정제된 마우스 표준물의 적정에 기초하여 IgG의 농도(mg/ml)로서 표현되어 있다. 도 19a는 대조군과 처리된 동물 사이에 어떠한 체중 차이도 나타내지 않는다. 그러나, IgG2b의 분석은 현저한 감소를 나타내었는데, 이는 루푸스 치료에 효과적임을 나타낸다(도 20b). IgG1에 대해서는 어떠한 유의한 차이도 관찰되지 않았다(데이터는 나타내지 않음). 그래프패드 프리즘(Graphpad Prism) 소프트웨어를 사용하여 생존 데이터를 분석하고, 로그-순위 맨틀 곡스(도 20a는 25 mg/kg 집단에 대한 것으로, 이때 p 값은 0.4289이고, 도 20b는 50 mg/kg 집단에 대한 것으로, 이때 p 값은 0.3698임) 및 게한-브레슬로우-윌콕산 검증(도 21a는 25 mg/kg 집단에 대한 것으로, 이때 p 값은 0.7003이고, 도 21b는 50 mg/kg 집단에 대한 것으로, 이때 p 값은 0.7505임) 둘 모두를 사용하여 통계학적 유의성에 대해 평가하였다.
실시예 17: DIDS 는 DNA 손상 후 RAD51 좌 형성을 파괴한다
자기 비드 기반 분류(밀테니)에 의해 야생형 C57BL/6J 마우스의 비장으로부터 1차 마우스 B-세포를 단리하여 B220+ IgM+ B-세포를 정제하였다. 이어서, B-세포를 0 또는 150μM DIDS의 존재하에 10% FBS로 보충된 표준 RPMI-1640 배지 중에서 배양하고, Cs137 조사기에서 0 또는 2.5 Gy 이온화 방사선에 노출시키고, 이어서 상동적 재조합 인자 RAD51의 좌에 대해 면역형광에 의해 염색하였다. 핵 내 RAD51 좌의 형성을 나타내는 각각의 배양액 내의 세포의 분율을 보고한다. DIDS (0μM)와 함께 배양되지 않은 조사된 세포는 효율적인 좌 형성을 나타낸다. DIDS 노출 (150μM)은 방사선-유도 RAD51 좌 형성을 완전히 억제하여, 도 22에 도시된 바와 같이 Rad51 좌+ 세포의 분율을 기준선 수준(비조사된, 0 Gy 샘플에서의 것과 등가임)으로 감소시킨다. 오차 막대는 3개의 독립된 실험으로부터의 평균의 표준 오차(S.E.M)를 나타낸다.
실시예 18: DIDS 처리는, 우선적으로 AID -발현 1차 인간 만성 림프구성 백혈병( CLL ) 세포에서 포스포 - H2AX 좌의 증가된 수준으로 이어진다
일상의 임상 모니터링시에 수집된 말초 출혈로부터 1차 인간 CLL 환자 유래 세포를 얻었다. 일상의 정맥천자를 통해 비디 배큐테이너 CPT 세포 분리 튜브(벡톤 딕킨슨(Becton Dickinson)) 내로 1차 말초 혈액 샘플을 수집하였다. 샘플을 원심분리하여 적혈구(RBC)를 분리하고, 이어서 도치시켜 그들 자신의 혈장 내에 단핵 세포를 재현탁시켰다. 샘플을 실온에서 수집 현장에서 하룻밤 저장하고, 이어서 배달업체를 통해 분석 현장으로 운송하였다. 인간 AID mRNA의 존재를 검출하기 위해 각각의 샘플을 역전사 PCR (RT-PCR)에 의해 AID 발현 상태에 대해 시험하였다(실시예 11 참조). 이어서, 샘플을 AID+ (검출가능한 수준의 AID mRNA를 나타내는 것) 및 AID- (백그라운드를 초과하는 어떠한 검출가능한 AID mRNA도 나타내지 않는 것) 집단으로 나누었다. 상이한 AID+ 및 AID- 샘플로부터의 다수의 독립된 배양을 10% FBS + 0 또는 30　μM DIDS를 함유하는 표준 RPMI-1640 배지 중에서 개시하였다. 배양하에서의 2일 후, 각각의 배양액/조건으로부터의 세포를 파라포름알데하이드를 사용하여 고정시키고, 현미경 커버슬립 위에 올려 놓고, 약한 세제로 세척함으로써 투과되게 하고, DNA 이본쇄 절단 마커인 포스포-H2AX (1차 항체: 카탈로그 번호 A300-081A, 베틸 래버러토리즈; 1:400 희석액)의 면역형광 검출을 위해 처리하였다. 염색 후, 니콘(Nikon) 90i 정립 낙사형광 현미경을 사용하여 세포를 영상화하고, 100개의 개별 핵을 각각의 샘플에 대해 영상화하였다. 핵 DNA를 4',6-디아미디노-2-페닐인돌 (DAPI)로 대비염색하였다. 1 내지 2개(낮음), 3 내지 10개(보통), 또는 10개 초과(높음)의 포스포-H2AX 좌를 나타내는 세포의 평균 백분율이 도 23a 및 도 23b에 도시되어 있다. 오차 막대는 AID- (빈 막대) 샘플의 4개의 독립된 배양액 및 AID+ 샘플(채워진 막대)의 5개의 독립된 배양액에 대한 평균의 표준 오차(S.E.M.)를 나타낸다. 이들 데이터는 DIDS가 AID-매개 게놈 DNA 이본쇄 절단(DSB)의 수복을 억제한다는 것을 나타낸다.
실시예 19: DIDS 처리는, 우선적으로 AID + 1차 인간 CLL 세포에서 아폽토시스로 이어진다
일상의 임상 모니터링시에 수집된 말초 출혈로부터 1차 인간 CLL 환자 유래 세포를 얻었다. 일상의 정맥천자를 통해 비디 배큐테이너 CPT 세포 분리 튜브 내로 1차 말초 혈액 샘플을 수집하였다. 샘플을 원심분리하여 적혈구(RBC)를 분리하고, 이어서 도치시켜 그들 자신의 혈장 내에 단핵 세포를 재현탁시켰다. 샘플을 실온에서 수집 현장에서 하룻밤 저장하고, 이어서 배달업체를 통해 분석 현장으로 운송하였다. 인간 AID mRNA의 존재를 검출하기 위해 각각의 샘플을 역전사 PCR (RT-PCR)에 의해 AID 발현 상태에 대해 시험하였다(실시예 11 참조). 이어서, 샘플을 AID+ (검출가능한 수준의 AID mRNA를 나타내는 것) 및 AID- (백그라운드를 초과하는 어떠한 검출가능한 AID mRNA도 나타내지 않는 것) 집단으로 나누었다. 상이한 AID+ 및 AID- 샘플로부터의 다수의 독립된 배양을 10% FBS + 0 또는 30　μM DIDS를 함유하는 표준 RPMI-1640 배지 중에서 개시하였다. 배양하에서의 3일 후, 세포를 파라포름알데하이드를 사용하여 고정시키고, 현미경 커버슬립 위에 올려 놓고, 약한 세제로 세척함으로써 투과되게 하고, 아폽토시스 마커인 활성화된 카스파제 3 (AC3) (1차 항체: 카탈로그 번호 ab13847, 에이비캠; 1:100 희석액)의 면역형광 검출을 위해 처리하였다. 핵 DNA를 4',6-디아미디노-2-페닐인돌 (DAPI)로 대비염색하였다. 염색 후, 니콘 90i 정립 낙사형광 현미경을 사용하여 세포를 영상화하였다. AC3에 대해 양성 염색을 나타내는 세포의 분율이 AID+ (도 24, 채워진 막대) 및 AID- 샘플(도 24, 빈 막대)에 대해 나타나 있다. 오차 막대는 AID- 샘플의 4개의 독립된 배양액 및 AID+ 샘플의 5개의 독립된 배양액에 대한 평균의 표준 오차(S.E.M.)를 나타낸다. 30μM DIDS로 처리된 AID 양성 세포는 더 높은 분율의 AC3-양성 세포를 나타낸다.
실시예 20: AID 발현 및 1차 인간 만성 림프구성 백혈병 예후와의 그의 관련
AID 발현은 1차 인간 만성 림프구성 백혈병에서 더 나쁜 전체 질환과 관련된다. 8개의 개별 AID+ 및 8개의 개별 AID- 1차 인간 CLL 샘플을 높은 백혈구(WBC) 카운트(마이크로리터당 58,000 초과)에 기초하여 선택하였다. 이어서, 이들을 진단시의 평균 및 중앙값 연령(Age @ Dx)에 대해 그리고 치료에 대해 분석하였다. AID+ 샘플은 진단시에 더 낮은 평균 연령(63.75세 대 68세) 및 중앙값 연령(62.5세 대 68.5세)을 나타내었다(표 3). 더욱이, 4/8의 AID+ 환자가 치료를 받았으며, 한편 1/8의 AID- 환자가 치료를 받았다.
[표 3] AID 발현을 분석한 인간 CLL 샘플
Figure pct00060

실시예 21: 마우스 모델에서의 AID 의 생체내 시험
DIDS의 생체내 유효성을 시험하기 위하여, AID+/+ (C57BL/6) 또는 AID-/- 마우스(문헌[Muramatsu et al. et al., 2000], 상기 참조)에 매주 간격으로 DIDS (10 mg/kg 또는 50 mg/kg)를 투여하고, 프로인트 완전 애쥬번트(complete Freund's adjuvant, CFA) 중에서 1주째에 디니트로페놀 컨쥬게이트된 키홀 림펫 헤모시아닌(DNP-KLH(Keyhole limpet hemocyanin))으로 면역화하여 림프구 활성화를 자극하고, (프로인트 불완전 애쥬번트(incomplete Freund's adjuvant, IFA) 중에서) DNP-KLH로 4주 후에 부스팅(boosting)하였다. 총 7주(도 25a) 후에, 마우스를 안락사시켰다. 집단 크기는 n=5였다. 대조군 또는 DIDS-처리군에서의 어떠한 동물들도 비처리된 대조군에 비하여 독성의 뚜렷한 징후를 나타내지 않았다. 5주 후에, AID+/+ 마우스는 AID-/- 마우스보다 약간 더 큰 체중 획득을 나타내었지만, 이 효과는 DIDS 노출과는 무관해서, 0 mg/kg 대조 코호트(cohort) 및 50 mg/kg 실험 코호트에 동일하게 영향을 주었다(도 25b). 이를 위해, 마우스의 체중을 매주 측정하였으며, 데이터는 5마리의 동물에 대한 체질량에서의 평균 분율 변화를 나타내고, 오차 막대는 S.E.M을 나타낸다.
7주의 시험 기간(trial window) 후에, 처리된 동물 및 대조 동물로부터의 조직을 고정시키고, 절편화하고, 헤마톡실린 및 에오신(H&E) 염색 후에 분석하였다. 비장 절편의 분석은 비처리된 동물과 DIDS-처리된 동물 사이의 배중심(GC) 구조에서의 육안 해부학적 결함 또는 차이가 없고, AID+/+ 마우스와 AID-/- 대조군 사이에 차이가 없다는 것을 밝혀내었다. 이들 데이터는 DIDS(적어도 최대 50 mg/kg)가 AID+/+ 또는 AID-/- 마우스에서 비장 생리에서의 유의한 독성 또는 일반적 결함을 유도하지 않는다는 것을 제시한다. DIDS가 DIDS-처리된 AID+/+ 대 AID-/- 마우스로부터 AID, 골수, 비장, 및 말초 혈액에 관한 B-세포 특이적 표현형을 유도하였는지의 여부를 결정하기 위하여, 유세포 분석에 의해 B220+ CD19+ B-세포의 존재에 대해 분석하였다(도 26). B220+ CD19+ B-세포에서의 작은(25%) 저하가 10μM 및 50μM로 처리된 AID+/+ 마우스 둘 모두의 골수에서 관찰되었지만, AID+/+ 또는 AID-/- 마우스에서의 비장 B-세포의 백분율에서는 어떠한 일관성 있는 차이도 관찰되지 않았다. 대조적으로, 10μM 및 50μM DIDS 둘 모두는, 특히 AID-/- 마우스는 아니고 AID+/+ 마우스에서, 순환성 B-림프성 세포에서 특히 유의한(9 내지 11배) 저하를 유도하였다. 도 26에는, DNP-KLH로 면역화되고 0, 10, 또는 50 mg/kg DIDS로 처리된 AID-/- 및 AID+/+ 마우스로부터의 골수, 비장, 및 말초 혈액의 종점 유세포 분석 도트 도표 분석이 도시되어 있다. 도표는 B220 (y축) 및 CD19 (x축)의 발현에 대해 염색된 림프구 게이트 내의 세포의 집단을 나타낸다. 각각의 도표의 상단 우측 코너에 있는 숫자는 각각의 분석에 대한 B220+/CD19+ 세포의 백분율을 제공한다. 초기/전-GC로부터 후-GC까지의 B-세포 성숙의 진행이 하단부에 표시되어 있다.
이들 데이터는 생체내 전신 DIDS 처리가 선택적으로 성숙한 후-배중심 B-세포에는 영향을 주지만 초기 또는 전-GC B-세포에 대해서는 무시할 만한 영향을 가졌다는 것을 제시한다. 이는 본 명세서에 기재된 세포 배양 데이터와 일치하며, 이는 AID 및 DIDS의 조합 효과에 의해 유도된 상승적 세포독성을 입증한다. 유의하게는, AID+/+ 또는 AID-/- 코호트에서 DIDS 처리된 동물 중 어느 것도 뚜렷한 비-B-세포 독성의 증거를 나타내지 않았다. 종합했을 때, 이들 데이터는 DIDS의 생체내 투여가 AID-발현 B-세포 - 배중심 반응을 거쳤거나 AID를 이소성으로 발현하는 것 - 를 특이적으로 감작시킨다는 것을 강하게 암시한다.
실시예 22: 엡스타인- 바르 바이러스로 형질전환된 말초 인간 B-림프구에서의 AID 발현 분석
엡스타인-바르 바이러스로 형질전환된 말초 인간 B-림프구 유래 세포주 GM05881, GM07323, 및 GM13689 (코리엘 인스터튜트(Coriell Institute), NIGMS HGCR (Human Genetic Cell Repository)로부터 얻어짐)는 인간 비호지킨 림프종의 우수한 표현물이다. 이들 세포를 2 mM 글루타민 및 15% 소태아 혈청으로 보충된 RPMI1640 배지 중에 배양하였다. 표준 리보핵산 추출 방법에 의해, 각각의 배양된 세포주로부터, 또는 인간 1차 자극된 B-세포(Stim B)로부터, 또는 인간 배아 신장 세포주 HEK293T로부터 전체 RNA를 제조하였다(실시예 11 참조). 실시예 11에 기재된 것과 동일한 프라이머를 사용하여 AID 전사물에 대해, 그리고 GAPDH 전사물(로딩 대조군)에 대해 역전사(RT)-PCR에 의해 RNA를 분석하였다. 이들 데이터는 정제된 활성화된 1차 B-세포에서보다 훨씬 더 높은 수준으로 이들 형질전환된 B-세포주에서 AID가 고도로 발현된다는 것을 나타낸다(도 27 참조).
서열 번호
서열 번호 설명
001 BCL6 mRNA; NM_001130845
002 MYC mRNA; NM_002467
003 BCL11A mRNA; NM_018014
004 CD93 mRNA; NM_012072
005 PIM1 mRNA; NM_002648
006 PAX5 mRNA; NM_016734
007 Rad51AP1 mRNA; NM_001130862
008 Rad51B mRNA; NM_002877
009 Rad51D mRNA; NM_002878
010 XRCC2 mRNA; NM_005431
011 XRCC3 mRNA; NM_001100119
012 RAD54 mRNA; NM_000489
013 RAD52 mRNA; NM_134424
014 BRCA1 mRNA; NM_007300
015 BRCA2 mRNA; NM_000059
016 ATM mRNA; NM_000051
017 ATR mRNA; NM_001184
018 MRE11 mRNA; NM_005591
019 RAD50 mRNA; NM_005732
020 NBS1 mRNA; NM_002485
021 WRN mRNA; NM_000553
022 BLM mRNA; NM_000057
023 RECQ4 mRNA; NM_004260
024 LIG4 mRNA; NM_001098268
025 XRCC4 mRNA; NM_003401
026 PRKDC mRNA; NM_006904
027 DCLRE1C mRNA; NM_001033855
028 XRCC6 mRNA; NM_001469
029 XRCC5 mRNA; NM_021141
030 XLF mRNA; NM_024782
050 XRCC2 억제 RNA
051 XRCC2 억제 RNA
052 XRCC2 억제 RNA
053 XRCC2 억제 RNA
054 XRCC2 억제 RNA
055 XRCC2 억제 RNA
056 XRCC2 억제 RNA
057 XRCC2 억제 RNA
058 XRCC2 억제 RNA
059 XRCC3 억제 RNA
060 XRCC3 억제 RNA
061 XRCC3 억제 RNA
062 XRCC3 억제 RNA
063 XRCC3 억제 RNA
064 RAD51 억제 RNA
065 RAD51 억제 RNA
066 RAD51 억제 RNA
067 RAD51 억제 RNA
068 RAD51 억제 RNA
069 RAD51 억제 RNA
070 RAD51 억제 RNA
071 RAD51 억제 RNA
072 RAD51 억제 RNA
073 RAD51B 억제 RNA
074 RAD51B 억제 RNA
075 RAD51B 억제 RNA
076 RAD51B 억제 RNA
077 RAD51B 억제 RNA
078 RAD51B 억제 RNA
079 RAD51B 억제 RNA
080 RAD51B 억제 RNA
081 RAD51C 억제 RNA
082 RAD51C 억제 RNA
083 RAD51C 억제 RNA
084 RAD51C 억제 RNA
085 RAD51C 억제 RNA
086 RAD51C 억제 RNA
087 RAD51C 억제 RNA
088 RAD51C 억제 RNA
089 RAD51C 억제 RNA
090 RAD51D 억제 RNA
091 RAD51D 억제 RNA
092 RAD51D 억제 RNA
093 RAD51D 억제 RNA
094 RAD51D 억제 RNA
095 RAD51D 억제 RNA
096 RAD51D 억제 RNA
097 RAD51D 억제 RNA
098 RAD51D 억제 RNA
099 AID 아미노산 서열; NCBI 참조 서열(Ref Seq): NP_065712
0100 AID mRNA 서열; NCBI 참조 서열: NP_020661
0101 hAID 순방향 프라이머
0102 hAID 역방향 프라이머
0103 hGAPDH 순방향 프라이머
0104 hGAPDH 역방향 프라이머
0105 GAPDH 프라이머
0106 GAPDH 프라이머
0107 VH1-FR1　
0108 VH2-FR1
0109 VH3-FR1
0110 VH4-FR1
0111 VH5-FR1
0112 VH6-FR1
0113 JH 공통　
0114 Rad51AP1 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001124334
0115 RAD51B 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_002868
0116 RAD51D 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001136043
0117 XRCC2 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_005422
0118 XRCC3 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001093588
0119 RAD54 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_000480
0120 RAD52 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_602296
0121 BRCA1 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_009225
0122 BRCA2 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_000050
0123 ATM 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_000042
0124 ATR 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001175
0125 MRE11 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_005582
0126 RAD50 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_005723
0127 NBS1 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_002476
0128 WRN 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_000544
0129 BLM 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_000048
0130 RECQ4 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_004251
0131 LIG4 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001091738
0132 XRCC4 아미노산 서열; NCBI 참조번호:NP_071801
0133 PRKDC 아미노산 서열; NCBI 참조번호:NP_008835
0134 DCLRE1C 아미노산 서열; NCBI 참조번호:NP_001029027
0135 XRCC6 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001460
0136 XRCC5 아미노산 서열; NCBI 참조번호:NP_066964
0137 XLF 아미노산 서열; NCBI 참조번호:NP_079058
0138 APOBEC1 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001635
0139 APOBEC2 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_006780
0140 APOBEC3A 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NNP_663745
0141 APOBEC3C 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_055323
0142 APOBEC3E 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_689639
0143 APOBEC3F 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_660341
0144 APOBEC3G 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_068594
0145 APOBEC3H 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001159475
0146 APOBEC4 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_982279
0157 RAG1 mRNA 서열; NCBI 참조번호: NM_00448
0158 RAG1 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_000439
0159 RAG2 mRNA 서열; NCBI 참조번호:NM_001243785
0160 RAG2 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_001230714
0161 SPO11 mRNA 서열; NCBI 참조번호: NM_012444
0162 SPO11 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_036576
0163 Rad51C 이소형(isoform) 1 mRNA 서열; NCBI 참조번호: NM_058216
0164 Rad51C 이소형 1 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_478123
0165 Rad51C 이소형 2 mRNA 서열; NCBI 참조번호: NM_002876
0166 Rad51C 이소형 2 아미노산 서열; NCBI 참조번호: NP_002867
SEQUENCE LISTING <110> JACKSON LABORATORY <120> METHODS FOR TREATING CANCERS EXPRESSING ACTIVATION-INDUCED CYTIDINE DEAMINASE <130> 060636-069471-PCT <140> <141> <150> 61/501,522 <151> 2011-06-27 <160> 156 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 3662 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 gcgagctggt ggttgaagct ggttaaagaa cagcctaggt attccagaag tgtttgagga 60 tcccttccat gaaggaagag aggaaagttt ttaagtaaac ctcccactcc catgtgtctt 120 cagctttctt ttgcaaagga gaaaatcctt gaagtttggt aaagaccgag ttagtctatc 180 tctctttgcc tatctcgagt tgggctgggg agaggaggag ataggttctt ttgtcttttt 240 ctgtcttctc ccttccccac ttccttccct ccagtcccca ctcactcaca tgcacacact 300 aaccttggag ccgatgggat tgagtgactg gcacttggga ccacagagaa atgtcagagt 360 gtttggttac agactcaagg aaacctctca ttttagagtg ctcatttggt tttgagcaaa 420 attttggact gtgaagcaag gcattggtga agacaaaatg gcctcgccgg ctgacagctg 480 tatccagttc acccgccatg ccagtgatgt tcttctcaac cttaatcgtc tccggagtcg 540 agacatcttg actgatgttg tcattgttgt gagccgtgag cagtttagag cccataaaac 600 ggtcctcatg gcctgcagtg gcctgttcta tagcatcttt acagaccagt tgaaatgcaa 660 ccttagtgtg atcaatctag atcctgagat caaccctgag ggattctgca tcctcctgga 720 cttcatgtac acatctcggc tcaatttgcg ggagggcaac atcatggctg tgatggccac 780 ggctatgtac ctgcagatgg agcatgttgt ggacacttgc cggaagttta ttaaggccag 840 tgaagcagag atggtttctg ccatcaagcc tcctcgtgaa gagttcctca acagccggat 900 gctgatgccc caagacatca tggcctatcg gggtcgtgag gtggtggaga acaacctgcc 960 actgaggagc gcccctgggt gtgagagcag agcctttgcc cccagcctgt acagtggcct 1020 gtccacaccg ccagcctctt attccatgta cagccacctc cctgtcagca gcctcctctt 1080 ctccgatgag gagtttcggg atgtccggat gcctgtggcc aaccccttcc ccaaggagcg 1140 ggcactccca tgtgatagtg ccaggccagt ccctggtgag tacagccggc cgactttgga 1200 ggtgtccccc aatgtgtgcc acagcaatat ctattcaccc aaggaaacaa tcccagaaga 1260 ggcacgaagt gatatgcact acagtgtggc tgagggcctc aaacctgctg ccccctcagc 1320 ccgaaatgcc ccctacttcc cttgtgacaa ggccagcaaa gaagaagaga gaccctcctc 1380 ggaagatgag attgccctgc atttcgagcc ccccaatgca cccctgaacc ggaagggtct 1440 ggttagtcca cagagccccc agaaatctga ctgccagccc aactcgccca cagagtcctg 1500 cagcagtaag aatgcctgca tcctccaggc ttctggctcc cctccagcca agagccccac 1560 tgaccccaaa gcctgcaact ggaagaaata caagttcatc gtgctcaaca gcctcaacca 1620 gaatgccaaa ccagaggggc ctgagcaggc tgagctgggc cgcctttccc cacgagccta 1680 cacggcccca cctgcctgcc agccacccat ggagcctgag aaccttgacc tccagtcccc 1740 aaccaagctg agtgccagcg gggaggactc caccatccca caagccagcc ggctcaataa 1800 catcgttaac aggtccatga cgggctctcc ccgcagcagc agcgagagcc actcaccact 1860 ctacatgcac cccccgaagt gcacgtcctg cggctctcag tccccacagc atgcagagat 1920 gtgcctccac accgctggcc ccacgttccc tgaggagatg ggagagaccc agtctgagta 1980 ctcagattct agctgtgaga acggggcctt cttctgcaat gagtgtgact gccgcttctc 2040 tgaggaggcc tcactcaaga ggcacacgct gcagacccac agtgacaaac cctacaagtg 2100 tgaccgctgc caggcctcct tccgctacaa gggcaacctc gccagccaca agaccgtcca 2160 taccggtgag aaaccctatc gttgcaacat ctgtggggcc cagttcaacc ggccagccaa 2220 cctgaaaacc cacactcgaa ttcactctgg agagaagccc tacaaatgcg aaacctgcgg 2280 agccagattt gtacaggtgg cccacctccg tgcccatgtg cttatccaca ctggtgagaa 2340 gccctatccc tgtgaaatct gtggcacccg tttccggcac cttcagactc tgaagagcca 2400 cctgcgaatc cacacaggag agaaacctta ccattgtgag aagtgtaacc tgcatttccg 2460 tcacaaaagc cagctgcgac ttcacttgcg ccagaagcat ggcgccatca ccaacaccaa 2520 ggtgcaatac cgcgtgtcag ccactgacct gcctccggag ctccccaaag cctgctgaag 2580 catggagtgt tgatgctttc gtctccagcc ccttctcaga atctacccaa aggatactgt 2640 aacactttac aatgttcatc ccatgatgta gtgcctcttt catccactag tgcaaatcat 2700 agctgggggt tgggggtggt gggggtcggg gcctggggga ctgggagccg cagcagctcc 2760 ccctccccca ctgccataaa acattaagaa aatcatattg cttcttctcc tatgtgtaag 2820 gtgaaccatg tcagcaaaaa gcaaaatcat tttatatgtc aaagcagggg agtatgcaaa 2880 agttctgact tgactttagt ctgcaaaatg aggaatgtat atgttttgtg ggaacagatg 2940 tttcttttgt atgtaaatgt gcattctttt aaaagacaag acttcagtat gttgtcaaag 3000 agagggcttt aattttttta accaaaggtg aaggaatata tggcagagtt gtaaatatat 3060 aaatatatat atatataaaa taaatatata taaacctaaa aaagatatat taaaaatata 3120 aaactgcgtt aaaggctcga ttttgtatct gcaggcagac acggatctga gaatctttat 3180 tgagaaagag cacttaagag aatattttaa gtattgcatc tgtataagta agaaaatatt 3240 ttgtctaaaa tgcctcagtg tatttgtatt tttttgcaag tgaaggttta caatttacaa 3300 agtgtgtatt aaaaaaaaca aaaagaacaa aaaaatctgc agaaggaaaa atgtgtaatt 3360 ttgttctagt tttcagtttg tatatacccg tacaacgtgt cctcacggtg ccttttttca 3420 cggaagtttt caatgatggg cgagcgtgca ccatcccttt ttgaagtgta ggcagacaca 3480 gggacttgaa gttgttacta actaaactct ctttgggaat gtttgtctca tcccattctg 3540 cgtcatgctt gtgttataac tactccggag acagggtttg gctgtgtcta aactgcatta 3600 ccgcgttgta aaatatagct gtacaaatat aagaataaaa tgttgaaaag tcaaactgga 3660 aa 3662 <210> 2 <211> 2379 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 2 gacccccgag ctgtgctgct cgcggccgcc accgccgggc cccggccgtc cctggctccc 60 ctcctgcctc gagaagggca gggcttctca gaggcttggc gggaaaaaga acggagggag 120 ggatcgcgct gagtataaaa gccggttttc ggggctttat ctaactcgct gtagtaattc 180 cagcgagagg cagagggagc gagcgggcgg ccggctaggg tggaagagcc gggcgagcag 240 agctgcgctg cgggcgtcct gggaagggag atccggagcg aatagggggc ttcgcctctg 300 gcccagccct cccgctgatc ccccagccag cggtccgcaa cccttgccgc atccacgaaa 360 ctttgcccat agcagcgggc gggcactttg cactggaact tacaacaccc gagcaaggac 420 gcgactctcc cgacgcgggg aggctattct gcccatttgg ggacacttcc ccgccgctgc 480 caggacccgc ttctctgaaa ggctctcctt gcagctgctt agacgctgga tttttttcgg 540 gtagtggaaa accagcagcc tcccgcgacg atgcccctca acgttagctt caccaacagg 600 aactatgacc tcgactacga ctcggtgcag ccgtatttct actgcgacga ggaggagaac 660 ttctaccagc agcagcagca gagcgagctg cagcccccgg cgcccagcga ggatatctgg 720 aagaaattcg agctgctgcc caccccgccc ctgtccccta gccgccgctc cgggctctgc 780 tcgccctcct acgttgcggt cacacccttc tcccttcggg gagacaacga cggcggtggc 840 gggagcttct ccacggccga ccagctggag atggtgaccg agctgctggg aggagacatg 900 gtgaaccaga gtttcatctg cgacccggac gacgagacct tcatcaaaaa catcatcatc 960 caggactgta tgtggagcgg cttctcggcc gccgccaagc tcgtctcaga gaagctggcc 1020 tcctaccagg ctgcgcgcaa agacagcggc agcccgaacc ccgcccgcgg ccacagcgtc 1080 tgctccacct ccagcttgta cctgcaggat ctgagcgccg ccgcctcaga gtgcatcgac 1140 ccctcggtgg tcttccccta ccctctcaac gacagcagct cgcccaagtc ctgcgcctcg 1200 caagactcca gcgccttctc tccgtcctcg gattctctgc tctcctcgac ggagtcctcc 1260 ccgcagggca gccccgagcc cctggtgctc catgaggaga caccgcccac caccagcagc 1320 gactctgagg aggaacaaga agatgaggaa gaaatcgatg ttgtttctgt ggaaaagagg 1380 caggctcctg gcaaaaggtc agagtctgga tcaccttctg ctggaggcca cagcaaacct 1440 cctcacagcc cactggtcct caagaggtgc cacgtctcca cacatcagca caactacgca 1500 gcgcctccct ccactcggaa ggactatcct gctgccaaga gggtcaagtt ggacagtgtc 1560 agagtcctga gacagatcag caacaaccga aaatgcacca gccccaggtc ctcggacacc 1620 gaggagaatg tcaagaggcg aacacacaac gtcttggagc gccagaggag gaacgagcta 1680 aaacggagct tttttgccct gcgtgaccag atcccggagt tggaaaacaa tgaaaaggcc 1740 cccaaggtag ttatccttaa aaaagccaca gcatacatcc tgtccgtcca agcagaggag 1800 caaaagctca tttctgaaga ggacttgttg cggaaacgac gagaacagtt gaaacacaaa 1860 cttgaacagc tacggaactc ttgtgcgtaa ggaaaagtaa ggaaaacgat tccttctaac 1920 agaaatgtcc tgagcaatca cctatgaact tgtttcaaat gcatgatcaa atgcaacctc 1980 acaaccttgg ctgagtcttg agactgaaag atttagccat aatgtaaact gcctcaaatt 2040 ggactttggg cataaaagaa cttttttatg cttaccatct tttttttttc tttaacagat 2100 ttgtatttaa gaattgtttt taaaaaattt taagatttac acaatgtttc tctgtaaata 2160 ttgccattaa atgtaaataa ctttaataaa acgtttatag cagttacaca gaatttcaat 2220 cctagtatat agtacctagt attataggta ctataaaccc taattttttt tatttaagta 2280 cattttgctt tttaaagttg atttttttct attgttttta gaaaaaataa aataactggc 2340 aaatatatca ttgagccaaa tcttaaaaaa aaaaaaaaa 2379 <210> 3 <211> 3958 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 3 tttttttttt ttttttgctt aaaaaaaagc catgacggct ctcccacaat tcatcttccc 60 tgcgccatct ttgtattatt tctaatttat tttggatgtc aaaaggcact gatgaagata 120 ttttctctgg agtctccttc tttctaaccc ggctctcccg atgtgaaccg agccgtcgtc 180 cgcccgccgc cgccgccgcc gccgccgccg cccgccccgc agcccaccat gtctcgccgc 240 aagcaaggca aaccccagca cttaagcaaa cgggaattct cgcccgagcc tcttgaagcc 300 attcttacag atgatgaacc agaccacggc ccgttgggag ctccagaagg ggatcatgac 360 ctcctcacct gtgggcagtg ccagatgaac ttcccattgg gggacattct tatttttatc 420 gagcacaaac ggaaacaatg caatggcagc ctctgcttag aaaaagctgt ggataagcca 480 ccttcccctt caccaatcga gatgaaaaaa gcatccaatc ccgtggaggt tggcatccag 540 gtcacgccag aggatgacga ttgtttatca acgtcatcta gaggaatttg ccccaaacag 600 gaacacatag cagataaact tctgcactgg aggggcctct cctcccctcg ttctgcacat 660 ggagctctaa tccccacgcc tgggatgagt gcagaatatg ccccgcaggg tatttgtaaa 720 gatgagccca gcagctacac atgtacaact tgcaaacagc cattcaccag tgcatggttt 780 ctcttgcaac acgcacagaa cactcatgga ttaagaatct acttagaaag cgaacacgga 840 agtcccctga ccccgcgggt tggtatccct tcaggactag gtgcagaatg tccttcccag 900 ccacctctcc atgggattca tattgcagac aataacccct ttaacctgct aagaatacca 960 ggatcagtat cgagagaggc ttccggcctg gcagaagggc gctttccacc cactcccccc 1020 ctgtttagtc caccaccgag acatcacttg gacccccacc gcatagagcg cctgggggcg 1080 gaagagatgg ccctggccac ccatcacccg agtgcctttg acagggtgct gcggttgaat 1140 ccaatggcta tggagcctcc cgccatggat ttctctagga gacttagaga gctggcaggg 1200 aacacgtcta gcccaccgct gtccccaggc cggcccagcc ctatgcaaag gttactgcaa 1260 ccattccagc caggtagcaa gccgcccttc ctggcgacgc cccccctccc tcctctgcaa 1320 tccgcccctc ctccctccca gcccccggtc aagtccaagt catgcgagtt ctgcggcaag 1380 acgttcaaat ttcagagcaa cctggtggtg caccggcgca gccacacggg cgagaagccc 1440 tacaagtgca acctgtgcga ccacgcgtgc acccaggcca gcaagctgaa gcgccacatg 1500 aagacgcaca tgcacaaatc gtcccccatg acggtcaagt ccgacgacgg tctctccacc 1560 gccagctccc cggaacccgg caccagcgac ttggtgggca gcgccagcag cgcgctcaag 1620 tccgtggtgg ccaagttcaa gagcgagaac gaccccaacc tgatcccgga gaacggggac 1680 gaggaggaag aggaggacga cgaggaagag gaagaagagg aggaagagga ggaggaggag 1740 ctgacggaga gcgagagggt ggactacggc ttcgggctga gcctggaggc ggcgcgccac 1800 cacgagaaca gctcgcgggg cgcggtcgtg ggcgtgggcg acgagagccg cgccctgccc 1860 gacgtcatgc agggcatggt gctcagctcc atgcagcact tcagcgaggc cttccaccag 1920 gtcctgggcg agaagcataa gcgcggccac ctggccgagg ccgagggcca cagggacact 1980 tgcgacgaag actcggtggc cggcgagtcg gaccgcatag acgatggcac tgttaatggc 2040 cgcggctgct ccccgggcga gtcggcctcg gggggcctgt ccaaaaagct gctgctgggc 2100 agccccagct cgctgagccc cttctctaag cgcatcaagc tcgagaagga gttcgacctg 2160 cccccggccg cgatgcccaa cacggagaac gtgtactcgc agtggctcgc cggctacgcg 2220 gcctccaggc agctcaaaga tcccttcctt agcttcggag actccagaca atcgcctttt 2280 gcctcctcgt cggagcactc ctcggagaac gggagtttgc gcttctccac accgcccggg 2340 gagctggacg gagggatctc ggggcgcagc ggcacgggaa gtggagggag cacgccccat 2400 attagtggtc cgggcccggg caggcccagc tcaaaagagg gcagacgcag cgacacttgt 2460 tcttcacaca cccccattcg gcgtagtacc cagagagctc aagatgtgtg gcagttttcg 2520 gatggaagct cgagagccct taagttctga gaaaatttga agcccccagg ggtggggtgg 2580 acgcgtgccg cccagtcgac gtcagcgtgg tctgtcatcc tgctagtttg tgatgttttc 2640 tgacagtagc ctccaagaag ccgttgtgcg aagacagagt cctgcagagt ccttccagcc 2700 taggcctgca gcgccatttt atttatattt tttaataaaa agtaaaaaca aaaaaacaga 2760 cccacattgg aacagtgaat cagtcccata gagagggccc gtggaccatc gctgtcatga 2820 gtgatgccct ggcccttctg aaaccagcca acctaattac ctgtattgtg gaaatgcgca 2880 tgagtcccca accccttgtt tctatacatt ctatgttgtc ttttaaaaag tgtgcttaac 2940 attgacacaa taaatgttgg agctttaggt ggtgtttgct tgttctttaa tttttaatgc 3000 ttataagaca atgaggctgc ttatgatttt gtacttctgt acctgtttcc tacagacacc 3060 catcgggtgg gtaggaggaa cagatttgag aaatgggcag gagatgtagg aggggaacta 3120 ggttaccgct tatcagatgg cataaatttt caaggagaat caaaatgcaa aacttgggaa 3180 taaatcatag caatatcata attaatgtag tagtaatatt gctgtttatt aatgctgaag 3240 tgtggttttc ctaactgtct gacttataat ttgcatacca ttaaataatg cataatatgg 3300 cacgccgaat cctgtttttc aaatatatgc ttttggtggc taccatgcag gatttgaatt 3360 tgtcttttaa tttagcttag gaaagaacat cactgggcga gcggtaaatc ctaaagaagg 3420 tgataaatgt cagtagtttc ttattaaata ttctaatttt aggttcccaa accttcagga 3480 aatatatctt aatgcagaca aacaaacata aaacttcttt agtacttaca tcaggaaatt 3540 tggggcagat tttagagggg ggaaattata ggaggaaaga agttcacatc agaacagaca 3600 atcacagcaa tgctctattc cttagaaatt agtgccacaa ataagttaca tctacaaaca 3660 ggtggtaaaa attctttctg gcccagttaa tttgcacaga acttttctca gtttggtatt 3720 ttttactgct tggagatcca gaagagaatt agaaacaaca tagcaaatta aaataggttt 3780 gtcaataata gagctcagac acctgtgtgc tgtagattca catacaggcc gtgaacctaa 3840 gtggggaaaa tcctacctat ccaccttctg gctagattac ctagcttagt gaaaagatag 3900 ccaaataatt ggcatgtgaa ttatttcctg cttattcata ataaataatg actgtcta 3958 <210> 4 <211> 6701 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 4 aaagccctca gcctttgtgt ccttctctgc gccggagtgg ctgcagctca cccctcagct 60 ccccttgggg cccagctggg agccgagata gaagctcctg tcgccgctgg gcttctcgcc 120 tcccgcagag ggccacacag agaccgggat ggccacctcc atgggcctgc tgctgctgct 180 gctgctgctc ctgacccagc ccggggcggg gacgggagct gacacggagg cggtggtctg 240 cgtggggacc gcctgctaca cggcccactc gggcaagctg agcgctgccg aggcccagaa 300 ccactgcaac cagaacgggg gcaacctggc cactgtgaag agcaaggagg aggcccagca 360 cgtccagcga gtactggccc agctcctgag gcgggaggca gccctgacgg cgaggatgag 420 caagttctgg attgggctcc agcgagagaa gggcaagtgc ctggacccta gtctgccgct 480 gaagggcttc agctgggtgg gcggggggga ggacacgcct tactctaact ggcacaagga 540 gctccggaac tcgtgcatct ccaagcgctg tgtgtctctg ctgctggacc tgtcccagcc 600 gctccttccc agccgcctcc ccaagtggtc tgagggcccc tgtgggagcc caggctcccc 660 cggaagtaac attgagggct tcgtgtgcaa gttcagcttc aaaggcatgt gccggcctct 720 ggccctgggg ggcccaggtc aggtgaccta caccaccccc ttccagacca ccagttcctc 780 cttggaggct gtgccctttg cctctgcggc caatgtagcc tgtggggaag gtgacaagga 840 cgagactcag agtcattatt tcctgtgcaa ggagaaggcc cccgatgtgt tcgactgggg 900 cagctcgggc cccctctgtg tcagccccaa gtatggctgc aacttcaaca atgggggctg 960 ccaccaggac tgctttgaag ggggggatgg ctccttcctc tgcggctgcc gaccaggatt 1020 ccggctgctg gatgacctgg tgacctgtgc ctctcgaaac ccttgcagct ccagcccatg 1080 tcgtgggggg gccacgtgcg tcctgggacc ccatgggaaa aactacacgt gccgctgccc 1140 ccaagggtac cagctggact cgagtcagct ggactgtgtg gacgtggatg aatgccagga 1200 ctccccctgt gcccaggagt gtgtcaacac ccctgggggc ttccgctgcg aatgctgggt 1260 tggctatgag ccgggcggtc ctggagaggg ggcctgtcag gatgtggatg agtgtgctct 1320 gggtcgctcg ccttgcgccc agggctgcac caacacagat ggctcatttc actgctcctg 1380 tgaggagggc tacgtcctgg ccggggagga cgggactcag tgccaggacg tggatgagtg 1440 tgtgggcccg gggggccccc tctgcgacag cttgtgcttc aacacacaag ggtccttcca 1500 ctgtggctgc ctgccaggct gggtgctggc cccaaatggg gtctcttgca ccatggggcc 1560 tgtgtctctg ggaccaccat ctgggccccc cgatgaggag gacaaaggag agaaagaagg 1620 gagcaccgtg ccccgtgctg caacagccag tcccacaagg ggccccgagg gcacccccaa 1680 ggctacaccc accacaagta gaccttcgct gtcatctgac gcccccatca catctgcccc 1740 actcaagatg ctggccccca gtgggtcccc aggcgtctgg agggagccca gcatccatca 1800 cgccacagct gcctctggcc cccaggagcc tgcaggtggg gactcctccg tggccacaca 1860 aaacaacgat ggcactgacg ggcaaaagct gcttttattc tacatcctag gcaccgtggt 1920 ggccatccta ctcctgctgg ccctggctct ggggctactg gtctatcgca agcggagagc 1980 gaagagggag gagaagaagg agaagaagcc ccagaatgcg gcagacagtt actcctgggt 2040 tccagagcga gctgagagca gggccatgga gaaccagtac agtccgacac ctgggacaga 2100 ctgctgaaag tgaggtggcc ctagagacac tagagtcacc agccaccatc ctcagagctt 2160 tgaactcccc attccaaagg ggcacccaca tttttttgaa agactggact ggaatcttag 2220 caaacaattg taagtctcct ccttaaaggc cccttggaac atgcaggtat tttctacggg 2280 tgtttgatgt tcctgaagtg gaagctgtgt gttggcgtgc cacggtgggg atttcgtgac 2340 tctataatga ttgttactcc ccctcccttt tcaaattcca atgtgaccaa ttccggatca 2400 gggtgtgagg aggccggggc taaggggctc ccctgaatat cttctctgct cacttccacc 2460 atctaagagg aaaaggtgag ttgctcatgc tgattaggat tgaaatgatt tgtttctctt 2520 cctaggatga aaactaaatc aattaattat tcaattaggt aagaagatct ggttttttgg 2580 tcaaagggaa catgttcgga ctggaaacat ttctttacat ttgcattcct ccatttcgcc 2640 agcacaagtc ttgctaaatg tgatactgtt gacatcctcc agaatggcca gaagtgcaat 2700 taacctctta ggtggcaagg aggcaggaag tgcctcttta gttcttacat ttctaatagc 2760 cttgggttta tttgcaaagg aagcttgaaa aatatgagaa aagttgcttg aagtgcatta 2820 caggtgtttg tgaagtcaca taatctacgg ggctagggcg agagaggcca gggatttgtt 2880 cacagatact tgaattaatt catccaaatg tactgaggtt accacacact tgactacgga 2940 tgtgatcaac actaacaagg aaacaaattc aaggacaacc tgtctttgag ccagggcagg 3000 cctcagacac cctgcctgtg gccccgcctc cacttcatcc tgcccggaat gccagtgctc 3060 cgagctcaga cagaggaagc cctgcagaaa gttccatcag gctgtttcct aaaggatgtg 3120 tgaacgggag atgatgcact gtgttttgaa agttgtcatt ttaaagcatt ttagcacagt 3180 tcatagtcca cagttgatgc agcatcctga gattttaaat cctgaagtgt gggtggcgca 3240 cacaccaagt agggagctag tcaggcagtt tgcttaagga acttttgttc tctgtctctt 3300 ttccttaaaa ttgggggtaa ggagggaagg aagagggaaa gagatgacta actaaaatca 3360 tttttacagc aaaaactgct caaagccatt taaattatat cctcatttta aaagttacat 3420 ttgcaaatat ttctccctat gataatgtag tcgatagtgt gcactctttc tctctctctc 3480 tctctctcac acacacacac acacacacac acacacacac agagacacgg caccattctg 3540 cctggggcac tggaacacat tcctgggggt caccgatggt cagagtcact agaagttacc 3600 tgagtatctc tgggaggcct catgtctcct gtgggctttt taccaccact gtgcaggaga 3660 acagacagag gaaatgtgtc tccctccaag gccccaaagc ctcagagaaa gggtgtttct 3720 ggttttgcct tagcaatgca tcggtctctg aggtgacact ctggagtggt tgaagggcca 3780 caaggtgcag ggttaatact cttgccagtt ttgaaatata gatgctatgg ttcagattgt 3840 ttttaataga aaactaaagg ggcaggggaa gtgaaaggaa agatggaggt tttgtgcggc 3900 tcgatggggc atttggaact tctttttaaa gtcatctcat ggtctccagt tttcagttgg 3960 aactctggtg tttaacactt aagggagaca aaggctgtgt ccatttggca aaacttcctt 4020 ggccacgaga ctctaggtga tgtgtgaagc tgggcagtct gtggtgtgga gagcagccat 4080 ctgtctggcc attcagagga ttctaaagac atggctggat gcgctgctga ccaacatcag 4140 cacttaaata aatgcaaatg caacatttct ccctctgggc cttgaaaatc cttgccctta 4200 tcatttgggg tgaaggagac atttctgtcc ttggcttccc acagccccaa cgcagtctgt 4260 gtatgattcc tgggatccaa cgagccctcc tattttcaca gtgttctgat tgctctcaca 4320 gcccaggccc atcgtctgtt ctctgaatgc agccctgttc tcaacaacag ggaggtcatg 4380 gaacccctct gtggaaccca caaggggaga aatgggtgat aaagaatcca gttcctcaaa 4440 accttccctg gcaggctggg tccctctcct gctgggtggt gctttctctt gcacaccact 4500 cccaccacgg ggggagagcc agcaacccaa ccagacagct caggttgtgc atctgatgga 4560 aaccactggg ctcaaacacg tgctttattc tcctgtttat ttttgctgtt actttgaagc 4620 atggaaattc ttgtttgggg gatcttgggg ctacagtagt gggtaaacaa atgcccaccg 4680 gccaagaggc cattaacaaa tcgtccttgt cctgaggggc cccagcttgc tcgggcgtgg 4740 cacagtgggg aatccaaggg tcacagtatg gggagaggtg caccctgcca cctgctaact 4800 tctcgctaga cacagtgttt ctgcccaggt gacctgttca gcagcagaac aagccagggc 4860 catggggacg ggggaagttt tcacttggag atggacacca agacaatgaa gatttgttgt 4920 ccaaataggt caataattct gggagactct tggaaaaaac tgaatatatt caggaccaac 4980 tctctccctc ccctcatccc acatctcaaa gcagacaatg taaagagaga acatctcaca 5040 cacccagctc gccatgccta ctcattcctg aatttcaggt gccatcactg ctctttcttt 5100 cttctttgtc atttgagaaa ggatgcagga ggacaattcc cacagataat ctgaggaatg 5160 cagaaaaacc agggcaggac agttatcgac aatgcattag aacttggtga gcatcctctg 5220 tagagggact ccacccctgc tcaacagctt ggcttccagg caagaccaac cacatctggt 5280 ctctgccttc ggtggcccac acacctaagc gtcatcgtca ttgccatagc atcatgatgc 5340 aacacatcta cgtgtagcac tacgacgtta tgtttgggta atgtggggat gaactgcatg 5400 aggctctgat taaggatgtg gggaagtggg ctgcggtcac tgtcggcctt gcaaggccac 5460 ctggaggcct gtctgttagc cagtggtgga ggagcaaggc ttcaggaagg gccagccaca 5520 tgccatcttc cctgcgatca ggcaaaaaag tggaattaaa aagtcaaacc tttatatgca 5580 tgtgttatgt ccattttgca ggatgaactg agtttaaaag aatttttttt tctcttcaag 5640 ttgctttgtc ttttccatcc tcatcacaag cccttgtttg agtgtcttat ccctgagcaa 5700 tctttcgatg gatggagatg atcattaggt acttttgttt caacctttat tcctgtaaat 5760 atttctgtga aaactaggag aacagagatg agatttgaca aaaaaaaatt gaattaaaaa 5820 taacacagtc tttttaaaac taacatagga aagcctttcc tattatttct cttcttagct 5880 tctccattgt ctaaatcagg aaaacaggaa aacacagctt tctagcagct gcaaaatggt 5940 ttaatgcccc ctacatattt ccatcacctt gaacaatagc tttagcttgg gaatctgaga 6000 tatgatccca gaaaacatct gtctctactt cggctgcaaa acccatggtt taaatctata 6060 tggtttgtgc attttctcaa ctaaaaatag agatgataat ccgaattctc catatattca 6120 ctaatcaaag acactatttt catactagat tcctgagaca aatactcact gaagggcttg 6180 tttaaaaata aattgtgttt tggtctgttc ttgtagataa tgcccttcta ttttaggtag 6240 aagctctgga atccctttat tgtgctgttg ctcttatctg caaggtggca agcagttctt 6300 ttcagcagat tttgcccact attcctctga gctgaagttc tttgcataga tttggcttaa 6360 gcttgaatta gatccctgca aaggcttgct ctgtgatgtc agatgtaatt gtaaatgtca 6420 gtaatcactt catgaatgct aaatgagaat gtaagtattt ttaaatgtgt gtatttcaaa 6480 tttgtttgac taattctgga attacaagat ttctatgcag gatttacctt catcctgtgc 6540 atgtttccca aactgtgagg agggaaggct cagagatcga gcttctcctc tgagttctaa 6600 caaaatggtg ctttgagggt cagcctttag gaaggtgcag ctttgttgtc ctttgagctt 6660 tctgttatgt gcctatccta ataaactctt aaacacattg a 6701 <210> 5 <211> 2751 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 5 ccctttactc ctggctgcgg ggcgagccgg gcgtctgctg cagcggccgc ggtggctgag 60 gaggcccgag aggagtcggt ggcagcggcg gcggcgggac cggcagcagc agcagcagca 120 gcagcagcag caaccactag cctcctgccc cgcggcgctg ccgcacgagc cccacgagcc 180 gctcaccccg ccgttctcag cgctgcccga ccccgctggc gcgccctccc gccgccagtc 240 ccggcagcgc cctcagttgt cctccgactc gccctcggcc ttccgcgcca gccgcagcca 300 cagccgcaac gccacccgca gccacagcca cagccacagc cccaggcata gccttcggca 360 cagccccggc tccggctcct gcggcagctc ctctgggcac cgtccctgcg ccgacatcct 420 ggaggttggg atgctcttgt ccaaaatcaa ctcgcttgcc cacctgcgcg ccgcgccctg 480 caacgacctg cacgccacca agctggcgcc cggcaaggag aaggagcccc tggagtcgca 540 gtaccaggtg ggcccgctac tgggcagcgg cggcttcggc tcggtctact caggcatccg 600 cgtctccgac aacttgccgg tggccatcaa acacgtggag aaggaccgga tttccgactg 660 gggagagctg cctaatggca ctcgagtgcc catggaagtg gtcctgctga agaaggtgag 720 ctcgggtttc tccggcgtca ttaggctcct ggactggttc gagaggcccg acagtttcgt 780 cctgatcctg gagaggcccg agccggtgca agatctcttc gacttcatca cggaaagggg 840 agccctgcaa gaggagctgg cccgcagctt cttctggcag gtgctggagg ccgtgcggca 900 ctgccacaac tgcggggtgc tccaccgcga catcaaggac gaaaacatcc ttatcgacct 960 caatcgcggc gagctcaagc tcatcgactt cgggtcgggg gcgctgctca aggacaccgt 1020 ctacacggac ttcgatggga cccgagtgta tagccctcca gagtggatcc gctaccatcg 1080 ctaccatggc aggtcggcgg cagtctggtc cctggggatc ctgctgtatg atatggtgtg 1140 tggagatatt cctttcgagc atgacgaaga gatcatcagg ggccaggttt tcttcaggca 1200 gagggtctct tcagaatgtc agcatctcat tagatggtgc ttggccctga gaccatcaga 1260 taggccaacc ttcgaagaaa tccagaacca tccatggatg caagatgttc tcctgcccca 1320 ggaaactgct gagatccacc tccacagcct gtcgccgggg cccagcaaat agcagccttt 1380 ctggcaggtc ctcccctctc ttgtcagatg cccgagggag gggaagcttc tgtctccagc 1440 ttcccgagta ccagtgacac gtctcgccaa gcaggacagt gcttgataca ggaacaacat 1500 ttacaactca ttccagatcc caggcccctg gaggctgcct cccaacagtg gggaagagtg 1560 actctccagg ggtcctaggc ctcaactcct cccatagata ctctcttctt ctcataggtg 1620 tccagcattg ctggactctg aaatatcccg ggggtggggg gtgggggtgg gtcagaaccc 1680 tgccatggaa ctgtttcctt catcatgagt tctgctgaat gccgcgatgg gtcaggtagg 1740 ggggaaacag gttgggatgg gataggacta gcaccatttt aagtccctgt cacctcttcc 1800 gactctttct gagtgccttc tgtggggact ccggctgtgc tgggagaaat acttgaactt 1860 gcctctttta cctgctgctt ctccaaaaat ctgcctgggt tttgttccct atttttctct 1920 cctgtcctcc ctcaccccct ccttcatatg aaaggtgcca tggaagaggc tacagggcca 1980 aacgctgagc cacctgccct tttttctgcc tcctttagta aaactccgag tgaactggtc 2040 ttcctttttg gtttttactt aactgtttca aagccaagac ctcacacaca caaaaaatgc 2100 acaaacaatg caatcaacag aaaagctgta aatgtgtgta cagttggcat ggtagtatac 2160 aaaaagattg tagtggatct aatttttaag aaattttgcc tttaagttat tttacctgtt 2220 tttgtttctt gttttgaaag atgcgcattc taacctggag gtcaatgtta tgtatttatt 2280 tatttattta tttggttccc ttcctattcc aagcttccat agctgctgcc ctagttttct 2340 ttcctccttt cctcctctga cttggggacc ttttggggga gggctgcgac gcttgctctg 2400 tttgtggggt gacgggactc aggcgggaca gtgctgcagc tccctggctt ctgtggggcc 2460 cctcacctac ttacccaggt gggtcccggc tctgtgggtg atggggaggg gcattgctga 2520 ctgtgtatat aggataatta tgaaaagcag ttctggatgg tgtgccttcc agatcctctc 2580 tggggctgtg ttttgagcag caggtagcct gctggtttta tctgagtgaa atactgtaca 2640 ggggaataaa agagatctta tttttttttt tatacttggc gttttttgaa taaaaacctt 2700 ttgtcttaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa a 2751 <210> 6 <211> 3650 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 6 agcactgctg ctctcccggc ttcccgctct actccggccg ggccgggtcc gccacgtctg 60 gcgcgctgag caggcccggc cgcgcagcgc ctaccctttc ctcgctccgg gccggcagtg 120 tggggcggcg cgctgggggc gcggcgtgtc tggggacatc ttgtgatgtt ggcgagaaca 180 ggacatgatc tcacatggcg agaagctctt tagttcctta atcatttcac ggtgccttcg 240 gacgcttttt ttccacctaa aacgtttagt ttcagctcag tgatcagcta ccccagctcg 300 gcgggggagc ggaaggcttg aattattccg acctgtgagc ggcccctggc accaaaaaaa 360 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa agaaaaaaaa aggcacaaaa aagtggaaac ttttccctgt 420 ccattccatc aagtcctgaa aaatcaaaat ggatttagag aaaaattatc cgactcctcg 480 gaccagcagg acaggacatg gaggagtgaa tcagcttggg ggggtttttg tgaatggacg 540 gccactcccg gatgtagtcc gccagaggat agtggaactt gctcatcaag gtgtcaggcc 600 ctgcgacatc tccaggcagc ttcgggtcag ccatggttgt gtcagcaaaa ttcttggcag 660 gtattatgag acaggaagca tcaagcctgg ggtaattgga ggatccaaac caaaggtcgc 720 cacacccaaa gtggtggaaa aaatcgctga atataaacgc caaaatccca ccatgtttgc 780 ctgggagatc agggaccggc tgctggcaga gcgggtgtgt gacaatgaca ccgtgcctag 840 cgtcagttcc atcaacagga tcatccggac aaaagtacag cagccaccca accaaccagt 900 cccagcttcc agtcacagca tagtgtccac tggctccgtg acgcaggtgt cctcggtgag 960 cacggattcg gccggctcgt cgtactccat cagcggcatc ctgggcatca cgtcccccag 1020 cgccgacacc aacaagcgca agagagacga aggtattcag gagtctccgg tgccgaacgg 1080 ccactcgctt ccgggcagag acttcctccg gaagcagatg cggggagact tgttcacaca 1140 gcagcagctg gaggtgctgg accgcgtgtt tgagaggcag cactactcag acatcttcac 1200 caccacagag cccatcaagc ccgagcagac cacagagtat tcagccatgg cctcgctggc 1260 tggtgggctg gacgacatga aggccaatct ggccagcccc acccctgctg acatcgggag 1320 cagtgtgcca ggcccgcagt cctaccccat tgtgacaggc cgtgacttgg cgagcacgac 1380 cctccccggg taccctccac acgtcccccc cgctggacag ggcagctact cagcaccgac 1440 gctgacaggg atggtgcctg ggagtgagtt ttccgggagt ccctacagcc accctcagta 1500 ttcctcgtac aacgactcct ggaggttccc caacccgggg ctgcttggct ccccctacta 1560 ttatagcgct gccgcccgag gagccgcccc acctgcagcc gccactgcct atgaccgtca 1620 ctgacccttg gagccaggcg ggcaccaaac actgatggca cctattgagg gtgacagcca 1680 cccagccctc ctgaagatag ccagagagcc catgagaccg tcccccagca tcccccactt 1740 gcctgaagct cccctcttcc tctcttcctc cagggactct ggggcccttt ggtggggccg 1800 ttggacttct ggatgcttgt ctatttctaa aagccaatct atgagcttct cccgatggcc 1860 actgggtctc tgcaaaccaa tagactgtcc tgcaaataac cgcagcccca gcccagcctg 1920 cctgtcctcc agctgtctga ctatccatcc atcataacca ccccagcctg ggaaggagag 1980 cttgcttttg ttgcttcagc agcacccatg taaatacctt cttgcttttc tgtgggcctg 2040 aaggtccgac tgagaagact gctccaccca tgatgcatct cgcactcttg gtgcatcacc 2100 ggacatctta gacctatggc agagcatcct ctctgccctg ggtgaccctg gcaggtgcgc 2160 tcagagctgt cctcaagatg gaggatgctg cccttgggcc ccagcctcct gctcatccct 2220 ccttctttag tatctttacg aggagtctca ctgggctggt tgtgctgcag gctccccctg 2280 aggcccctct ccaagaggag cacactttgg ggagatgtcc tggtttcctg cctccatttc 2340 tctgggaccg atgcagtatc agcagctctt ttccagatca aagaactcaa agaaaactgt 2400 ctgggagatt cctcagctac ttttccgaag cagaatgtca tccgaggtat tgattacatt 2460 gtggactttg aatgtgaggg ctggatggga cgcaggagat catctgatcc cagccaagga 2520 ggggcctgag gctctcccta ctccctcagc ccctggaacg gtgttttctg aggcatgccc 2580 aggttcaggt cacttcggac acctgccatg gacacttcac ccaccctcca ggaccccagc 2640 aagtggattc tgggcaagcc tgttccggtg atgtagacaa taattaacac agaggacttt 2700 cccccacacc cagatcacaa acagcctaca gccagaactt ctgagcatcc tctcggggca 2760 gaccctcccc gtcctcgtgg agcttagcag gcagctgggc atggaggtgc tggggctggg 2820 gcagatgcct aatttcgcac aatgcatgcc cacctgttga tctaaggggc cgcgatggtc 2880 agggccacgg ccaagggcca cgggaacttg gagagggagc ttggagaact cactgtgggc 2940 tagggtggtc agaggaagcc agcagggaag atctggggga cagaggaagg cctcctgagg 3000 gaggggcagg agagcagtga ggagctgctg tgtgacctgg gagtgatttt gacatggggg 3060 tgccaggtgc catcatctct ttacctgggg ccttaattcc ttgcatagtc tctcttgtca 3120 agtcagaaca gccaggtaga gcccttgtcc aaacctgggc tgaatgacag tgatgagagg 3180 gggcttggcc ttcttaggtg acaatgtccc ccatatctgt atgtcaccag gatggcagag 3240 agccagggca gagagagact ggacttggga tcagcaggcc aggcaggtct tgtcctggtc 3300 ctggccacat gtctttgctg tgggacctca gacaaaaccc tgcacctctt tgagccttgg 3360 ctgccttggt gcagcagggt catctgtagg gccaccccac agctctttcc ttcccctcct 3420 ctctccaggg agccggggct gtgagaggat catctggggc aggccctcca cttccaagca 3480 agcagatggg ggtgggcacc tgaggcccaa taatatttgg accaagtggg aaacaagaac 3540 actcggaggg gcgggaatca gaagagcctg gaaaaagacc tagcccaact tcccttgtgg 3600 gaaactgagg cccagcttgg ggaaggccag gaccatgcag ggagaaaaag 3650 <210> 7 <211> 2269 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 7 acagcgcgtg cgccgccgca agcatggctg gtgatgattg gacgactggt aacagggggc 60 ggagggctcc gaagtctggt tttgggcggg aattgaaacc gccgctgaag ccaacaagaa 120 tttgagaact gtaaatacca agccttgaaa gggaccatgg tgcggcctgt gagacataag 180 aaaccagtca attactcaca gtttgaccac tctgacagtg atgatgattt tgtttctgca 240 actgtacctt taaacaagaa atccagaaca gcaccaaagg agttaaaaca agataaacca 300 aaacctaact tgaacaatct ccggaaagaa gaaatcccag tacaagagaa aacccctaaa 360 aaaagactcc ctgaaggtac ttttagtatt ccagctagtg cagtgccttg tacaaagatg 420 gctttagatg acaagctcta ccagagagac ttagaagttg cactagcttt atcagtgaag 480 gaacttccaa cagtcaccac taatgtgcag aactctcaag ataaaagcat tgaaaaacat 540 ggcagtagta aaatagaaac aatgaataag tctcctcata tctctaattg cagtgtagcc 600 agtgattatt tagatttgga taagattact gtggaagatg atgttggtgg tgttcaaggg 660 aaaagaaaag cagcatctaa agctgcagca cagcagagga agattcttct ggaaggcagt 720 gatggtgata gtgctaatga cactgaacca gactttgcac ctggtgaaga ttctgaggat 780 gattctgatt tttgtgagag tgaggataat gacgaagact tctctatgag aaaaagtaaa 840 gttaaagaaa ttaaaaagaa agaagtgaag gtaaaatccc cagtagaaaa gaaagagaag 900 aaatctaaat ccaaatgtaa tgctttggtg acttcggtgg actctgctcc agctgccgtc 960 aaatcagaat ctcagtcctt gccaaaaaag gtttctctgt cttcagatac cactaggaaa 1020 ccattagaaa tacgcagtcc ttcagctgaa agcaagaaac ctaaatgggt cccaccagcg 1080 gcatctggag gtagcagaag tagcagcagc ccactggtgg tagtgtctgt gaagtctccc 1140 aatcagagtc tccgccttgg cttgtccaga ttagcacgag ttaaaccttt gcatccaaat 1200 gccactagca cctgagtgtg gtacaggagg aatgtttggt tgggagaatc acagctttac 1260 aagggtgttt atatttgatt tgtgtttata tttgaggcag gtattgtaat ataaaggaat 1320 ccattaccat gtcctataaa tgacctctag ccattttatg attatgttct ctgtaaaact 1380 cttcaagact tcaatgagaa gtttgtttat aagaattatc ttctcatacc tttccttgtg 1440 aagagcgtat tctgtttttc tatcagttcg acatgaagtc cacatcacat gctgttcttt 1500 tctagttaca tgatgtgcct ttctagcttt gtctagttta tagcacctta actttaactg 1560 ttcagtttta tctggcagag gaaaacattc ttatttcttt cagaagacat ttctgaaatc 1620 ttataagcta cttaagctac gttgtcagtt ttatcgcaaa gatgttttgt attttagcca 1680 aatcttttta tagtacaaac ttagaattat tttacacact aaaatggttg cagttttatg 1740 gcatatgtct ccgatttaga tggttattct ctagaaaata gtatttaaag acattttatg 1800 aaatcttcat tgtcaaaacc tttaataaaa gtggaaatat tttgaaatgc cctttttctt 1860 gataccactc atccacgtgt tcctgattgt ccacatttca tgataaaatg agagctccgc 1920 agagaatgtt agcctttctg ttgtaaatgt aatcttcaag tagtcacttt ttgttaagtt 1980 ctttagaaag tagttgtcaa gtacttagtc atccctatta tgatatgaga tagtacagct 2040 tttcaggaag cttagatctg aatttacttt gaaaaacaat tgtaatgaat attttatatt 2100 tacattgaga atttcaacta gcttctgatc aatttttaat aaaaaatttt caaatcatgt 2160 tagctgttaa aaaatgtata ataactcagt ttttcttggt ttatggaaat atctatatta 2220 atgtgaaaat aattaattta gaattgtgat taaagtgagc atttgtcta 2269 <210> 8 <211> 1888 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 8 gttgctttgc ggcgttttcc gcggggaaac tgtgtaaagg gtggggaaac ttgaaagttg 60 gatgctgcag acccggcatg ggtagcaaga aactaaaacg agtgggttta tcacaagagc 120 tgtgtgaccg tctgagtaga catcagatcc ttacctgtca ggacttttta tgtctttccc 180 cactggagct tatgaaggtg actggtctga gttatcgagg tgtccatgaa cttctatgta 240 tggtcagcag ggcctgtgcc ccaaagatgc aaacggctta tgggataaaa gcacaaaggt 300 ctgctgattt ctcaccagca ttcttatcta ctaccctttc tgctttggac gaagccctgc 360 atggtggtgt ggcttgtgga tccctcacag agattacagg tccaccaggt tgtggaaaaa 420 ctcagttttg tataatgatg agcattttgg ctacattacc caccaacatg ggaggattag 480 aaggagctgt ggtgtacatt gacacagagt ctgcatttag tgctgaaaga ctggttgaaa 540 tagcagaatc ccgttttccc agatatttta acactgaaga aaagttactt ttgacaagta 600 gtaaagttca tctttatcgg gaactcacct gtgatgaagt tctacaaagg attgaatctt 660 tggaagaaga aattatctca aaaggaatta aacttgtgat tcttgactct gttgcttctg 720 tggtcagaaa ggagtttgat gcacaacttc aaggcaatct caaagaaaga aacaagttct 780 tggcaagaga ggcatcctcc ttgaagtatt tggctgagga gttttcaatc ccagttatct 840 tgacgaatca gattacaacc catctgagtg gagccctggc ttctcaggca gacctggtgt 900 ctccagctga tgatttgtcc ctgtctgaag gcacttctgg atccagctgt gtgatagccg 960 cactaggaaa tacctggagt cacagtgtga atacccggct gatcctccag taccttgatt 1020 cagagagaag acagattctt attgccaagt cccctctggc tcccttcacc tcatttgtct 1080 acaccatcaa ggaggaaggc ctggttcttc aagcctatgg aaattcctag agacagataa 1140 atgtgcaaac ctgttcatct tgccaagaaa aatccgcttt tctgccacag aaacaaaata 1200 ttgggaaaga gtcttgtggt gaaacaccca tcgttctctg ctaaaacatt tggttgctac 1260 tgtgtagact cagcttaagt catggaattc tagaggatgt atctcacaag taggatcaag 1320 aacaagccca acagtaatct gcatcataag ctgatttgat accatggcac tgacaatggg 1380 cactgatttg ataccatggc actgacaatg ggcacacagg gaacaggaaa tgggaatgag 1440 agcaagggtt gggttgtgtt cgtggaacac ataggttttt tttttttaac tttctctttc 1500 taaaatattt cattttgatg gaggtgaaat ttatataaga tgaaattaac cattttaaag 1560 taaacaattc cgtggcaact agatatcatg atgtgcaacc agcatctctg tctagttcca 1620 aatattttca tcaccccaaa agcaagaccc ataaccatta tgcaagtgtt cctatttccc 1680 cctcctccca gctcctggaa acccaccaat ctactttgtt gctatggctt tacctattct 1740 ggatatttca tataaatgga atcatatagt gtctgtcttc tttcactagt atgttttcaa 1800 gtctcctcca tggtgtagcg tgcatcagta cttcattctt tttatggctg aataatattg 1860 cattgtcagg aaaaaaaaaa aaaaaaaa 1888 <210> 9 <211> 2418 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 9 ctggaacccg gaagcggcag cgcggcgcga cccggcgggc gggctctggg cgcgggaatc 60 ccggcggatc ccgggcgggc ggatgacccc cagccctacc cttggtgccg cctcctcctc 120 tctcctttct cctccggcag ccagcgcgcc tgtgtcctct ctaggaaggg gtaggggagg 180 ggcgtctgga gaggaccccc cgcgaatgcc cacgtgacgt gcagtccccc tggggctgtt 240 ccggcctgcg gggaacatgg gcgtgctcag ggtcggactg tgccctggcc ttaccgagga 300 gatgatccag cttctcagga gccacaggat caagacagtg gtggacctgg tttctgcaga 360 cctggaagag gtagctcaga aatgtggctt gtcttacaag gccctggttg ccctgaggcg 420 ggtgctgctg gctcagttct cggctttccc cgtgaatggc gctgatctct acgaggaact 480 gaagacctcc actgccatcc tgtccactgg cattggcagt cttgataaac tgcttgatgc 540 tggtctctat actggagaag tgactgaaat tgtaggaggc ccaggtagcg gcaaaactca 600 ggtatgtctc tgtatggcag caaatgtggc ccatggcctg cagcaaaacg tcctatatgt 660 agattccaat ggagggctga cagcttcccg cctcctccag ctgcttcagg ctaaaaccca 720 ggatgaggag gaacaggcag aagctctccg gaggatccag gtggtgcatg catttgacat 780 cttccagatg ctggatgtgc tgcaggagct ccgaggcact gtggcccagc aggtgactgg 840 ttcttcagga actgtgaagg tggtggttgt ggactcggtc actgcggtgg tttccccact 900 tctgggaggt cagcagaggg aaggcttggc cttgatgatg cagctggccc gagagctgaa 960 gaccctggcc cgggaccttg gcatggcagt ggtggtgacc aaccacataa ctcgagacag 1020 ggacagcggg aggctcaaac ctgccctcgg acgctcctgg agctttgtgc ccagcactcg 1080 gattctcctg gacaccatcg agggagcagg agcatcaggc ggccggcgca tggcgtgtct 1140 ggccaaatct tcccgacagc caacaggttt ccaggagatg gtagacattg ggacctgggg 1200 gacctcagag cagagtgcca cattacaggg tgatcagaca tgacctgtgc tgttgtttgg 1260 gaaacaggga agcattgggg acccctccca acttttcttc ccagtaacgc ctgctgttta 1320 ctgccacctg gcactggtga ctacagacgt tctcaggctg gccagaagag acatcttggg 1380 ttccttggcc tcactctctg taagcatata aaccacaggc gaaagaggat gctgcattgc 1440 gaggacccag aaattcatac tggtgccacg tttccttccc ttatttctaa cgtgtatgtt 1500 tctggtggaa accaagttca ccctggctgg gagcatctct gatgaggcat gctggcgact 1560 ggatggataa tcctgtgcat caccattgtg tcctgtgctc cctcctagcg cagtggccaa 1620 gccgggaaag cctctaactt gcctttgctg ctgctgcctt ttttttcttt tgtctctgcc 1680 tttccatttg ttagatgggg gcccactctt ccttagctct gtctctgagt tactgggtgg 1740 aaataagctt ataaatgaaa tactcttctt catctctgtt ttgctcttaa aaatataaaa 1800 aggcaattcc ccgagcccta gagccacctg atttcccctt agaaggctgt ttttcagttt 1860 cccccagtga ggcccaaaga acagtttatt cctcctttcc tcttgctgat ttggtttcag 1920 acctgcctgc atcaccatga ctaggtgaga acgtgtgggc tcgctgcagt tccagggata 1980 taatttaaca gaaagggagg gtatgacctg ctcctggtga atccagccac tcatttaata 2040 tgcatggtgc cctgtggggc ccctccacag tacagcataa ccagaggtgc tgaaccatgg 2100 ccttgcccat aaacagacag aggagaattt gcacagtaaa tagagccagc tgggaaaatt 2160 gatgctgacg taaataatac atggcaaatc tagtccttta tgcagaaatt cattgctggt 2220 ggctccaaga tgcaatataa ttacacctct cttcctgcca gctgtaccac agctagtgcc 2280 ctagtgtatg aaataatccc tctgtctttc accagcactg tggccatccg tctgagagcc 2340 atgaccctgg ctgggagggg acgaagacac cagggaatgg aaaataaaag gaaaagtaca 2400 gaaaaaaaaa aaaaaaaa 2418 <210> 10 <211> 3094 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 10 tttgactggc cgtagagtct gcgcagttgg tgaatggcgt tggtggcggg aaagttgagt 60 ctctcctgcg ccgagccttc ggggcgatgt gtagtgcctt ccatagggct gagtctggga 120 ccgagctcct tgcccgactt gaaggtagaa gttccttgaa agaaatagaa ccaaatctgt 180 ttgctgatga agattcacct gtgcatggtg atattcttga atttcatggc ccagaaggaa 240 caggaaaaac agaaatgctt tatcacctaa cagcacgatg tatacttccc aaatcagaag 300 gtggcctgga agtagaagtc ttatttattg atacagatta ccactttgat atgctccggc 360 tagttacaat tcttgagcac agactatccc aaagctctga agaaataatc aaatactgcc 420 tgggaagatt ttttttggtg tactgcagta gtagcaccca cttacttctt acactttact 480 cactagaaag tatgttttgt agtcacccat ctctctgcct tttgattttg gatagcctgt 540 cagcttttta ctggatagac cgcgtcaatg gaggagaaag tgtgaactta caggagtcta 600 ctctgaggaa atgttctcag tgcttagaga agcttgtaaa tgactatcgc ctggttcttt 660 ttgcaacgac acaaactata atgcagaaag cctcgagctc atcagaagaa ccttctcatg 720 cctctcgacg actgtgtgat gtggacatag actacagacc ttatctctgt aaggcatggc 780 agcaactggt gaagcacagg atgtttttct ccaaacaaga tgattctcaa agcagcaacc 840 aattttcatt agtttcacgt tgtttaaaaa gtaacagttt aaaaaaacat ttttttatta 900 ttggagaaag tggggttgaa ttttgttgat atacatcata aaatagtctt ttgcagggta 960 ctacgcaagc cttaaaattt ttcttaagac agagtcttgc tctgtctccc aggctggagt 1020 gcagtggcac aatcatggct cactgcagcc ttgaactcct ggcctcaagg gatcctccta 1080 tgtgtgcctc ctagagtgca gggattacag gcgtgagcca ctgctcgtgg ccaaaagttt 1140 tctttttttt tttttttctt tttgaaacag tcttactctg tctcccaggc tgctggagtg 1200 cagtggcaca atctcggccc gctgcagcct ctgcctcttg ggttcaagtg attcttccac 1260 ctcagcctcc caggtagctg ggattacagg cacccaccac cacgcctggc taatttttgt 1320 atttttaata gagacggggt ttcaccatgt tggccaggct ggtctcgaac tcctgacctc 1380 aagtgatcca cccacctcgg cctcccaaag tgctaggatt acaggcccgt gcccagccct 1440 aaagttttaa actctagggg aattaacagt atttctttac agaatggatt tgttaaacta 1500 gcacagtaaa agtaaagact attctgtttc taggctgttg aatcaaagtg attttagcaa 1560 ttaaactttg tattaattta ccaccaatat ttcttcacaa aggaactttt aaaagattat 1620 ctcagaaagt aaatctgaga ggtaagaagt aataatgagt aaatggtaag tacttgagta 1680 aatctaaaga aatattgata gtaaggcaat cctaagcaaa aagaacaaag ctggaggcat 1740 cacgctaccc agcttcaaac tatactacaa ggctacagta accaaaacag catagtactg 1800 gcacaaaaac acacgtagac tgatggaaca gaatagagaa tttagaaatg agaccacaca 1860 cctataattt ttttgatctt cgatgaacct gacaaaaaca agcaatgggc aatggattct 1920 ctattcaata aatcgtgctg ggataactgg ccagccatat ggaaaagatt gaaaatggac 1980 gccttcctta tgccatatac aaaaattaac tcaagatgga ttaaagactt aatgtaaaac 2040 ccaaaacagt aaaaatcctg gaagacaacc caggcagtac cattcaggac ataggcacag 2100 gcaaagattt catgacgaag acgccaaaaa caattgcaac agaagcaaaa attcacaaat 2160 gggatctaat taaactaaag agctgcacag caaaagaaac tatcaagaga gtaaacagac 2220 agcttacaga atgggagaaa attgttgcaa actatgcatc tgagaaaggt ctgaaatcca 2280 gcatctatac gtaatttaaa caaatttaga agaaaaaacc accccattaa aaagtgggca 2340 aaggacatga acagacactt ttcaaaagaa gacatctgtg gccaacaatc ctatggaaaa 2400 aagcccagca tcactgatca ttagagaaat gcaaatcgaa acaacaacga gataccatct 2460 cacaccagtc caaatggcta ttataaaaat gtcagaaaat aacagatgct ggtgaggttg 2520 tggagaaaaa gatatgctta tacactgttg gtggaaatgt aaattaaatt agttcagcca 2580 ttgtggaaga cagtgtgggg ataaagacag agataccatt caacccagca atctcattac 2640 tgggtatata cccaaaggaa tagaaatcat tgttataaag acacatgcac gcgtatgttc 2700 gttgcagcac tgcccatcag tgacagactg gattaaaaaa atgtggtaca tacacaccag 2760 ggaatactat acagccataa aaaggaacaa gactgactgg gcgtggtggc tcatgcctgt 2820 gatcctagca ctttgcgagg ccgaggtggg tggattgccc gcgctcagga ggtcaagacc 2880 agcctgggca acacggtgaa accccatctc tattaaaata caaaaaatta gctgggcatg 2940 gtggtgcgtg cctgtagtgc cagctactca ggaggccgag gcaggagaat tgctggaacc 3000 caggaggtgg aggttgcagt gagctgagat cgcgccattg cactcccgcc tgggcgactc 3060 catctctaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaa 3094 <210> 11 <211> 2657 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 11 ctattggagg agaaggccga gaggagcagg acggcgggaa gaggagtgcg gaacccgcgg 60 gagactttga gccaggcctg ttaaaccaag ttctcagcag gatgtgcaca gagggcccag 120 gaggagcctc aggagccgga ctgccgttgg ccaaccgagt ccccagggag acacttaagg 180 gaaattaaac tgcagagtgc aagagatgcc tcagtcaagt cagccaaaaa cacgcgggtc 240 atccccaagc cccagagagt gacagagccc cgatgacacg gacacctcgg ctgctgtcac 300 ttccctggtt cgggcctccc acaggctttg aattgaaggc gagtgcctca gaatttgcat 360 ccattgttct gtctttcctg ggaagttatt catcctggtg gccagcccac cgacaaaatg 420 gatttggatc tactggacct gaatcccaga attattgctg caattaagaa agccaaactg 480 aaatcggtaa aggaggtttt acacttttct ggaccagact tgaagagact gaccaacctc 540 tccagccccg aggtctggca cttgctgaga acggcctcct tacacttgcg gggaagcagc 600 atccttacag cactgcagct gcaccagcag aaggagcggt tccccacgca gcaccagcgc 660 ctgagcctgg gctgcccggt gctggacgcg ctgctccgcg gtggcctgcc cctggacggc 720 atcactgagc tggccggacg cagctcggca gggaagaccc agctggcgct gcagctctgc 780 ctggctgtgc agttcccgcg gcagcacgga ggcctggagg ctggagccgt ctacatctgc 840 acggaagacg ccttcccgca caagcgcctg cagcagctca tggcccagca gccgcggctg 900 cgcactgacg ttccaggaga gctgcttcag aagctccgat ttggcagcca gatcttcatc 960 gagcacgtgg ccgatgtgga caccttgttg gagtgtgtga ataagaaggt ccccgtactg 1020 ctgtctcggg gcatggctcg cctggtggtc atcgactcgg tggcagcccc attccgctgt 1080 gaatttgaca gccaggcctc cgcccccagg gccaggcatc tgcagtccct gggggccacg 1140 ctgcgtgagc tgagcagtgc cttccagagc cctgtgctgt gcatcaacca ggtgacagag 1200 gccatggagg agcagggcgc agcacacggg ccgctggggt tctgggacga acgtgtttcc 1260 ccagcccttg gcataacctg ggctaaccag ctcctggtga gactgctggc tgaccggctc 1320 cgcgaggaag aggctgccct cggctgccca gcccggaccc tgcgggtgct ctctgccccc 1380 cacctgcccc cctcctcctg ttcctacacg atcagtgccg aaggggtgcg agggacacct 1440 gggacccagt cccactgaca cggtggcggc tgcacaacag ccctgcctga gaagccccga 1500 cacacggggc tcgggccttt aaaacgcgtc tgcctgggcc gtggcacagc tgggagcctg 1560 gttcagacac agctcttcca gggcagcggc tccactttct catccgaaga tggtggccac 1620 agactgaccc ccatctgagc tggggggatg ttctgcctct ccctgggtct ggggacaggc 1680 ccgcttgctg ggtacctggt ccccactgct gagctggccc ttggggagag gtgattctca 1740 gggctggagc ctggggtgtc ctacagtgac tccctgggag ccgcctgctt cttctctcca 1800 catggaagcc caactggggt tgcgtctgag gcctgccccc tgggctgggg cctcagaccc 1860 cctcagcctt gggaccgtgc ccacgagggt ctcccctcct gcacacaggg cagtccttac 1920 tcccccacca ctcaggccac agtggggctg caggcaggcg gctcctcctc acccacctct 1980 gggtccttgg ctcccggggg ccccacctcg gcacacactg tgccccacaa aacttcagtg 2040 tggtacaagg tggagaaagc atatcccacc aacctccagt gtcagggtcc aggagagcct 2100 gggggtgggg ggactgcctt gtctctagta gtgtggcctg tgccagcacc acagccggtc 2160 agaggagcgc aggcagcgca gggctggcac gtgacaggct cgtcagccac ctgggaacac 2220 agttctgggc aaagaggatc cgaggttgag aggaaggagg gtcccggtgt atcctggccc 2280 tgggggtctg ggcgtccagc tcagccctgg cctggctggg tggtattctg gtagggatat 2340 ggcaggactc ctggcagggc cacctgcagg accctgtcct gcagtcccac actgtgcaga 2400 cccagtccca cactgtggcc aggccttaca tctggctgga aagcagagcc tcctgggaac 2460 acatctggct gcacaggctg aaatatccac ccagcaggca gagtggcgtg gcctccccat 2520 gggcacagtg gtgaccccct tgattcccac cgtacaaccc cctccacccc ccactcagtg 2580 cctccacatg ctgcctggca cagaccaggc ctttgacaaa taaatgttca atggatgcaa 2640 aaaaaaaaaa aaaaaaa 2657 <210> 12 <211> 11202 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 12 aattctcctg cctgagcctc ggcccaacaa aatggcggcg gcagcggtgt cgctttgttt 60 ccgcggctcc tgcggcggtg gcagtggtag cggcctttga gctgtgggga ggttccagca 120 gcagctacag tgacgactaa gactccagtg catttctatc gtaaccgggc gcgggggagc 180 gcagatcggc gcccagcaat cacagaagcc gacaaggcgt tcaagcgaaa acatgaccgc 240 tgagcccatg agtgaaagca agttgaatac attggtgcag aagcttcatg acttccttgc 300 acactcatca gaagaatctg aagaaacaag ttctcctcca cgacttgcaa tgaatcaaaa 360 cacagataaa atcagtggtt ctggaagtaa ctctgatatg atggaaaaca gcaaggaaga 420 gggaactagc tcttcagaaa aatccaagtc ttcaggatcg tcacgatcaa agaggaaacc 480 ttcaattgta acaaagtatg tagaatcaga tgatgaaaaa cctttggatg atgaaactgt 540 aaatgaagat gcgtctaatg aaaattcaga aaatgatatt actatgcaga gcttgccaaa 600 aggtacagtg attgtacagc cagagccagt gctgaatgaa gacaaagatg attttaaagg 660 gcctgaattt agaagcagaa gtaaaatgaa aactgaaaat ctcaaaaaac gcggagaaga 720 tgggcttcat gggattgtga gctgcactgc ttgtggacaa caggtcaatc attttcaaaa 780 agattccatt tatagacacc cttcattgca agttcttatt tgtaagaatt gctttaagta 840 ttacatgagt gatgatatta gccgtgactc agatggaatg gatgaacaat gtaggtggtg 900 tgcggaaggt ggaaacttga tttgttgtga cttttgccat aatgctttct gcaagaaatg 960 cattctacgc aaccttggtc gaaaggagtt gtccacaata atggatgaaa acaaccaatg 1020 gtattgctac atttgtcacc cagagccttt gttggacttg gtcactgcat gtaacagcgt 1080 atttgagaat ttagaacagt tgttgcagca aaataagaag aagataaaag ttgacagtga 1140 aaagagtaat aaagtatatg aacatacatc cagattttct ccaaagaaga ctagttcaaa 1200 ttgtaatgga gaagaaaaga aattagatga ttcctgttct ggctctgtaa cctactctta 1260 ttccgcacta attgtgccca aagagatgat taagaaggca aaaaaactga ttgagaccac 1320 agccaacatg aactccagtt atgttaaatt tttaaagcag gcaacagata attcagaaat 1380 cagttctgct acaaaattac gtcagcttaa ggcttttaag tctgtgttgg ctgatattaa 1440 gaaggctcat cttgcattgg aagaagactt aaattccgag tttcgagcga tggatgctgt 1500 aaacaaagag aaaaatacca aagagcataa agtcatagat gctaagtttg aaacaaaagc 1560 acgaaaagga gaaaaacctt gtgctttgga aaagaaggat atttcaaagt cagaagctaa 1620 actttcaaga aaacaggtag atagtgagca catgcatcag aatgttccaa cagaggaaca 1680 aagaacaaat aaaagtaccg gtggtgaaca taagaaatct gatagaaaag aagaacctca 1740 atatgaacct gccaacactt ctgaagattt agacatggat attgtgtctg ttccttcctc 1800 agttccagaa gacatttttg agaatcttga gactgctatg gaagttcaga gttcagttga 1860 tcatcaaggg gatggcagca gtggaactga acaagaagtg gagagttcat ctgtaaaatt 1920 aaatatttct tcaaaagaca acagaggagg tattaaatca aaaactacag ctaaagtaac 1980 aaaagaatta tatgttaaac tcactcctgt ttccctttct aattccccaa ttaaaggtgc 2040 tgattgtcag gaagttccac aagataaaga tggctataaa agttgtggtc tgaaccccaa 2100 gttagagaaa tgtggacttg gacaggaaaa cagtgataat gagcatttgg ttgaaaatga 2160 agtttcatta cttttagagg aatctgatct tcgaagatcc ccacgtgtaa agactacacc 2220 cttgaggcga ccgacagaaa ctaaccctgt aacatctaat tcagatgaag aatgtaatga 2280 aacagttaag gagaaacaaa aactatcagt tccagtgaga aaaaaggata agcgtaattc 2340 ttctgacagt gctatagata atcctaagcc taataaattg ccaaaatcta agcaatcaga 2400 gactgtggat caaaattcag attctgatga aatgctagca atcctcaaag aggtgagcag 2460 gatgagtcac agttcttctt cagatactga tattaatgaa attcatacaa accataagac 2520 tttgtatgat ttaaagactc aggcggggaa agatgataaa ggaaaaagga aacgaaaaag 2580 ttctacatct ggctcagatt ttgatactaa aaagggcaaa tcagctaaga gctctataat 2640 ttctaaaaag aaacgacaaa cccagtctga gtcttctaat tatgactcag aattagaaaa 2700 agagataaag agcatgagta aaattggtgc tgccagaacc accaaaaaaa gaattccaaa 2760 tacaaaagat tttgactctt ctgaagatga gaaacacagc aaaaaaggaa tggataatca 2820 agggcacaaa aatttgaaga cctcacaaga aggatcatct gatgatgctg aaagaaaaca 2880 agagagagag actttctctt cagcagaagg cacagttgat aaagacacga ccatcatgga 2940 attaagagat cgacttccta agaagcagca agcaagtgct tccactgatg gtgtcgataa 3000 gctttctggg aaagagcaga gttttacttc tttggaagtt agaaaagttg ctgaaactaa 3060 agaaaagagc aagcatctca aaaccaaaac atgtaaaaaa gtacaggatg gcttatctga 3120 tattgcagag aaattcctaa agaaagacca gagcgatgaa acttctgaag atgataaaaa 3180 gcagagcaaa aagggaactg aagaaaaaaa gaaaccttca gactttaaga aaaaagtaat 3240 taaaatggaa caacagtatg aatcttcatc tgatggcact gaaaagttac ctgagcgaga 3300 agaaatttgt cattttccta agggcataaa acaaattaag aatggaacaa ctgatggaga 3360 aaagaaaagt aaaaaaataa gagataaaac ttctaaaaag aaggatgaat tatctgatta 3420 tgctgagaag tcaacaggga aaggagatag ttgtgactct tcagaggata aaaagagtaa 3480 gaatggagca tatggtagag agaagaaaag gtgcaagttg cttggaaaga gttcaaggaa 3540 gagacaagat tgttcatcat ctgatactga gaaatattcc atgaaagaag atggttgtaa 3600 ctcttctgat aagagactga aaagaataga attgagggaa agaagaaatt taagttcaaa 3660 gagaaatact aaggaaatac aaagtggctc atcatcatct gatgctgagg aaagttctga 3720 agataataaa aagaagaagc aaagaacttc atctaaaaag aaggcagtca ttgtcaagga 3780 gaaaaagaga aactccctaa gaacaagcac taaaaggaag caagctgaca ttacatcctc 3840 atcttcttct gatatagaag atgatgatca gaattctata ggtgagggaa gcagcgatga 3900 acagaaaatt aagcctgtga ctgaaaattt agtgctgtct tcacatactg gattttgcca 3960 atcttcagga gatgaagcct tatctaaatc agtgcctgtc acagtggatg atgatgatga 4020 cgacaatgat cctgagaata gaattgccaa gaagatgctt ttagaagaaa ttaaagccaa 4080 tctttcctct gatgaggatg gatcttcaga tgatgagcca gaagaaggga aaaaaagaac 4140 tggaaaacaa aatgaagaaa acccaggaga tgaggaagca aaaaatcaag tcaattctga 4200 atcagattca gattctgaag aatctaagaa gccaagatac agacataggc ttttgcggca 4260 caaattgact gtgagtgacg gagaatctgg agaagaaaaa aagacaaagc ctaaagagca 4320 taaagaagtc aaaggcagaa acagaagaaa ggtgagcagt gaagattcag aagattctga 4380 ttttcaggaa tcaggagtta gtgaagaagt tagtgaatcc gaagatgaac agcggcccag 4440 aacaaggtct gcaaagaaag cagagttgga agaaaatcag cggagctata aacagaaaaa 4500 gaaaaggcga cgtattaagg ttcaagaaga ttcatccagt gaaaacaaga gtaattctga 4560 ggaagaagag gaggaaaaag aagaggagga ggaagaggag gaggaggagg aagaggagga 4620 ggaagatgaa aatgatgatt ccaagtctcc tggaaaaggc agaaagaaaa ttcggaagat 4680 tcttaaagat gataaactga gaacagaaac acaaaatgct cttaaggaag aggaagagag 4740 acgaaaacgt attgctgaga gggagcgtga gcgagaaaaa ttgagagagg tgatagaaat 4800 tgaagatgct tcacccacca agtgtccaat aacaaccaag ttggttttag atgaagatga 4860 agaaaccaaa gaacctttag tgcaggttca tagaaatatg gttatcaaat tgaaacccca 4920 tcaagtagat ggtgttcagt ttatgtggga ttgctgctgt gagtctgtga aaaaaacaaa 4980 gaaatctcca ggttcaggat gcattcttgc ccactgtatg ggccttggta agactttaca 5040 ggtggtaagt tttcttcata cagttctttt gtgtgacaaa ctggatttca gcacggcgtt 5100 agtggtttgt cctcttaata ctgctttgaa ttggatgaat gaatttgaga agtggcaaga 5160 gggattaaaa gatgatgaga agcttgaggt ttctgaatta gcaactgtga aacgtcctca 5220 ggagagaagc tacatgctgc agaggtggca agaagatggt ggtgttatga tcataggcta 5280 tgagatgtat agaaatcttg ctcaaggaag gaatgtgaag agtcggaaac ttaaagaaat 5340 atttaacaaa gctttggttg atccaggccc tgattttgtt gtttgtgatg aaggccatat 5400 tctaaaaaat gaagcatctg ctgtttctaa agctatgaat tctatacgat caaggaggag 5460 gattatttta acaggaacac cacttcaaaa taacctaatt gagtatcatt gtatggttaa 5520 ttttatcaag gaaaatttac ttggatccat taaggagttc aggaatagat ttataaatcc 5580 aattcaaaat ggtcagtgtg cagattctac catggtagat gtcagagtga tgaaaaaacg 5640 tgctcacatt ctctatgaga tgttagctgg atgtgttcag aggaaagatt atacagcatt 5700 aacaaaattc ttgcctccaa aacacgaata tgtgttagct gtgagaatga cttctattca 5760 gtgcaagctc tatcagtact acttagatca cttaacaggt gtgggcaata atagtgaagg 5820 tggaagagga aaggcaggtg caaagctttt ccaagatttt cagatgttaa gtagaatatg 5880 gactcatcct tggtgtttgc agctagacta cattagcaaa gaaaataagg gttattttga 5940 tgaagacagt atggatgaat ttatagcctc agattctgat gaaacctcca tgagtttaag 6000 ctccgatgat tatacaaaaa agaagaaaaa agggaaaaag gggaaaaaag atagtagctc 6060 aagtggaagt ggcagtgaca atgatgttga agtgattaag gtctggaatt caagatctcg 6120 gggaggtggt gaaggaaatg tggatgaaac aggaaacaat ccttctgttt ctttaaaact 6180 ggaagaaagt aaagctactt cttcttctaa tccaagcagc ccagctccag actggtacaa 6240 agattttgtt acagatgctg atgctgaggt tttagagcat tctgggaaaa tggtacttct 6300 ctttgaaatt cttcgaatgg cagaggaaat tggggataaa gtccttgttt tcagccagtc 6360 cctcatatct ctggacttga ttgaagattt tcttgaatta gctagtaggg agaagacaga 6420 agataaagat aaacccctta tttataaagg tgaggggaag tggcttcgaa acattgacta 6480 ttaccgttta gatggttcca ctactgcaca gtcaaggaag aagtgggctg aagaatttaa 6540 tgatgaaact aatgtgagag gacgattatt tatcatttct actaaagcag gatctctagg 6600 aattaatctg gtagctgcta atcgagtaat tatattcgac gcttcttgga atccatctta 6660 tgacatccag agtatattca gagtttatcg ctttggacaa actaagcctg tttatgtata 6720 taggttctta gctcagggaa ccatggaaga taagatttat gatcggcaag taactaagca 6780 gtcactgtct tttcgagttg ttgatcagca gcaggtggag cgtcatttta ctatgaatga 6840 gcttactgaa ctttatactt ttgagccaga cttattagat gaccctaatt cagaaaagaa 6900 gaagaagagg gatactccca tgctgccaaa ggataccata cttgcagagc tccttcagat 6960 acataaagaa cacattgtag gataccatga acatgattct cttttggacc acaaagaaga 7020 agaagagttg actgaagaag aaagaaaagc agcttgggct gagtatgaag cagagaagaa 7080 gggactgacc atgcgtttca acataccaac tgggaccaat ttaccccctg tcagtttcaa 7140 ctctcaaact ccttatattc ctttcaattt gggagccctg tcagcaatga gtaatcaaca 7200 gctggaggac ctcattaatc aaggaagaga aaaagttgta gaagcaacaa acagtgtgac 7260 agcagtgagg attcaacctc ttgaggatat aatttcagct gtatggaagg agaacatgaa 7320 tctctcagag gcccaagtac aggcgttagc attaagtaga caagccagcc aggagcttga 7380 tgttaaacga agagaagcaa tctacaatga tgtattgaca aaacaacaga tgttaatcag 7440 ctgtgttcag cgaatactta tgaacagaag gctccagcag cagtacaatc agcagcaaca 7500 gcaacaaatg acttatcaac aagcaacact gggtcacctc atgatgccaa agcccccaaa 7560 tttgatcatg aatccttcta actaccagca gattgatatg agaggaatgt atcagccagt 7620 ggctggtggt atgcagccac caccattaca gcgtgcacca cccccaatga gaagcaaaaa 7680 tccaggacct tcccaaggga aatcaatgtg attttgcact aaaagcttaa tggattgtta 7740 aaatcataga aagatctttt atttttttag gaatcaatga cttaacagaa ctcaactgta 7800 taaatagttt ggtcccctta aatgccaatc ttccatatta gttttacttt tttttttttt 7860 aaatagggca taccatttct tcctgacatt tgtcagtgat gttgcctaga atcttcttac 7920 acacgctgag tacagaagat atttcaaatt gttttcagtg aaaacaagtc cttccataat 7980 agtaacaact ccacagattt cctctctaaa tttttatgcc tgcttttagc aaccataaaa 8040 ttgtcataaa attaataaat ttaggaaaga ataaagattt atatattcat tctttacata 8100 taaaaacaca cagctgagtt cttagagttg attcctcaag ttatgaaata cttttgtact 8160 taatccattt cttgattaaa gtgattgaaa tggttttaat gttcttttga ctgaagtctg 8220 aaactgggct cctgctttat tgtctctgtg actgaaagtt agaaactgag ggttatcttt 8280 gacacagaat tgtgtgcaat attcttaaat actactgctc taaaagttgg agaagtcttg 8340 cagttatctt agcattgtat aaacagcctt aagtatagcc taagaagaga attccttttt 8400 cttctttagt ccttctgcca ttttttattt tcagttatat gtgctgaaat aattactggt 8460 aaaatttcag ggttgtggat tatcttccac acatgaattt tctctctcct ggcacgaata 8520 taaagcacat ctcttaactg catggtgcca gtgctaatgc ttcatcctgt tgctggcagt 8580 gggatgtgga cttagaaaat caagttctag cattttagta ggttaacact gaagttgtgg 8640 ttgttaggtt cacaccctgt tttataaaca acatcaaaat ggcagaacca ttgctgactt 8700 taggttcaca tgaggaatgt acttttaaca attcccagta ctatcagtat tgtgaaataa 8760 ttcctctgaa agataagaat cactggcttc tatgcgcttc ttttctctca tcatcatgtt 8820 cttttacccc agtttcctta cattttttta aattgtttca gagtttgttt tttttttagt 8880 ttagattgtg aggcaattat taaatcaaaa ttaattcatc caatacccct ttactagaag 8940 ttttactaga aaatgtatta cattttattt tttcttaatc cagttctgca aaaatgacct 9000 ataaatttat tcatgtacaa ttttggttac ttgaattgtt aaagaaaaca ttgtttttga 9060 ctatgggagt caactcaaca tggcagaacc atttttgaga tgatgataca acaggtagtg 9120 aaacagctta agaattccaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaagaaaac tgggtttggg 9180 ctttgcttta ggtatcactg gattagaatg agtttaacat tagctaaaac tgctttgagt 9240 tgtttggatg attaagagat tgccattttt atcttggaag aactagtggt aaaacatcca 9300 agagcactag gattgtgata cagaatttgt gaggtttggt ggatccacgc ccctctcccc 9360 cactttccca tgatgaaata tcactaataa atcctgtata tttagatatt atgctagcca 9420 tgtaatcaga tttatttaat tgggtggggc aggtgtgtat ttactttaga aaaaatgaaa 9480 aagacaagat ttatgagaaa tatttgaagg cagtacactc tggccaactg ttaccagttg 9540 gtatttctac aagttcagaa tattttaaac ctgatttact agacctggga attttcaaca 9600 tggtctaatt atttactcaa agacatagat gtgaaaattt taggcaacct tctaaatctt 9660 tttcaccatg gatgaaacta taacttaaag aataatactt agaagggtta attggaaatc 9720 agagtttgaa ataaaacttg gaccactttg tatacactct tctcacttga cattttagct 9780 atataatatg tactttgagt ataacatcaa gctttaacaa atatttaaag acaaaaaaat 9840 cacgtcagta aaatactaaa aggctcattt ttatatttgt tttagatgtt ttaaatagtt 9900 gcaatggatt aaaaatgatg atttaaaatg ttgcttgtaa tacagttttg cctgctaaat 9960 tctccacatt ttgtaacctg ttttatttct ttgggtgtaa agcgtttttg cttagtattg 10020 tgatattgta tatgttttgt cccagttgta tagtaatgtt tcagtccatc atccagcttt 10080 ggctgctgaa atcatacagc tgtgaagact tgcctttgtt tctgttagac tgcttttcag 10140 ttctgtattg agtatcttaa gtactgtaga aaagatgtca cttcttcctt taaggctgtt 10200 ttgtaatata tataaggact ggaattgtgt ttttaaagaa aagcattcaa gtatgacaat 10260 atactatctg tgttttcacc attcaaagtg ctgtttagta gttgaaactt aaactattta 10320 atgtcattta ataaagtgac caaaatgtgt tgtgctcttt attgtatttt cacagctttg 10380 aaaatctgtg cacatactgt ttcatagaaa atgtatagct tttgttgtcc tatataatgg 10440 tggttctttt gcacatttag ttatttaata ttgagaggtc acgaagtttg gttattgaat 10500 ctgttatata ctaaattctg taaagggaga tctctcatct caaaaagaat ttacatacca 10560 ggaagtccat gtgtgtttgt gttagttttg gatgtctttg tgtaatccag ccccatttcc 10620 tgtttcccaa cagctgtaac actcatttta agtcaagcag ggctaccaac ccacacttga 10680 tagaaaagct gcttaccatt cagaagcttc cttattacct ggcctccaaa tgagctgaat 10740 attttgtagc cttcccttag ctatgttcat tttccctcca ttatcataaa atcagatcga 10800 tatttatgtg ccccaaacaa aactttaaga gcagttacat tctgtcccag tagcccttgt 10860 ttcctttgag agtagcatgt tgtgaggcta tagagactta ttctaccagt aaaacaggtc 10920 aatcctttta catgtttatt atactaaaaa ttatgttcag ggtatttact actttatttc 10980 accagactca gtctcaagtg acttggctat ctccaaatca gatctaccct tagagaataa 11040 acatttttct accgttattt tttttcaagt ctataatctg agccagtccc aaaggagtga 11100 tcaagtttca gaaatgcttt catcttcaca acattttata tatactatta tatggggtga 11160 ataaagtttt aaatccgaaa tataaaaaaa aaaaaaaaaa aa 11202 <210> 13 <211> 2673 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 13 cccattctcc tctgcgcggc ctccatctaa gatctcttcc ccttgtccat agcctagatc 60 gagctccctg tgtgcaccgc gcgctgcccg aggcgcaggt caaccagaat caagatgtct 120 gggactgagg aagcaattct tggaggacgt gacagccatc ctgctgctgg cggcggctca 180 gtgttatgct ttggacagtg ccagtacaca gcagaagagt accaggccat ccagaaggcc 240 ctgaggcaga ggctgggccc agaatacata agtagccgca tggctggcgg aggccagaag 300 gtgtgctaca ttgagggtca tcgggtaatt aatctggcca atgagatgtt tggttacaat 360 ggctgggcac actccatcac gcagcagaat gtggattttg ttgacctcaa caatggcaag 420 ttctacgtgg gagtctgtgc atttgtgagg gtccagctga aggatggttc atatcatgaa 480 gatgttggtt atggtgttag tgagggcctc aagtccaagg ctttatcttt ggagaaggca 540 aggaaggagg cggtgacaga cgggctgaag cgagccctca ggagttttgg gaatgcactt 600 ggaaactgta ttctggacaa agactacctg agatcactaa ataagcttcc acgccagttg 660 cctcttgaag tggatttaac taaagcgaag agacaagatc ttgaaccgtc tgtggaggag 720 gcaagataca acagctgccg accgaacatg gccctgggac acccacagct gcagcaggtg 780 acctcccctt ccagacccag ccatgctgtg ataccggcgg accaggactg cagctcccga 840 agcctgagct catccgccgt ggagagcgag gccacgcacc agcggaagct ccggcagaag 900 cagctgcagc agcagttccg ggagcggatg gagaagcagc aggttcgagt ctccacgccg 960 tcagctgaga agagtgaggc agcgcctccg gcccctcctg tgacgcacag cactcctgta 1020 actgtctcag aaccactcct ggagaaagac ttccttgcag gagtgactca agaattaatc 1080 aagactcttg aagacaactc tgaaaagtgg gctgtgactc ccgatgcagg ggatggtgtg 1140 gtcaagccct cgtctagagc agacccagcc cagacctctg acacattagc cttgaacaac 1200 cagatggtga cccagaacag gactccacac agcgtttgcc accagaaacc acaagcaaaa 1260 tctggatctt gggacctcca aacttatagc gctgaccaac gcacaacagg aaactgggaa 1320 tctcatagga agagccagga catgaagaaa aggaaatatg atccatctta actgaggctc 1380 aggccacata attggactct gtcacaaagg gactttggaa aactactttt tggtcatgaa 1440 attgttcatc gctgctggag aatgaacgtc attgcgattt atcttgcttc attctgaacc 1500 ttatcaagag gatctgactg agagcccact gcagttagag ctgagcactt ttgaaaagct 1560 tgtccatcac tctagtaggg agaggctctg gacagatgaa taccttttct tcggcttgtg 1620 aggcttccca ctatttatta ctgaactatt atgttaatga agatggacat tttaggaatc 1680 accaatggct ccttgccctc aagcaatata ggccagactt ggtcctaagc acctgcctca 1740 gcaattgtct acattcagtt gttttgcata acgtctgcct tctttccttt acggtccatg 1800 cctttaatgt tgcccacatt aagcactgtg gatcacgaca ggaaaaaggt tggagcagtg 1860 cttttcacta ctttgtatca atccaggcta caatcttcat ttaatataaa taatttatgg 1920 atttatgaca ttacaatcct gcattgtttc aagactgaca ttttttccta aggaaggaaa 1980 taatcatcta agaccacgaa aaaaggctgt tttttgtttt tttttttttt tttttttttg 2040 agacggggtc tggctgtgtt gccctgactg gagttcagtg gtgcaaacac agctctctcc 2100 acaacctctt gggcccaagt gatactccca cctctgcctt acaaaataca gggattactg 2160 gtgtgagcca ctgtgtctgg ccagaaaagg catttttgag aaagcaaatc gtatacctta 2220 ttaacaaaat agaatatata tatattgctt atctgaaatg cttgaaacca gaattgtttt 2280 gcattttttg aatatttgta tacacataat gagaccttgg ggatgggacc caagtctgaa 2340 cgtggaattc acctgtgttt cgtgtatatg cctcatacac ataattttgt gcatgaaaca 2400 gagtttttgt ataagaagat acactgcagc tgaagagggc tgggtttttt tttctcttag 2460 ggtcgctgca taaactgttg tatgcctggt gctttgcgac ttgtcacacg aggtcacgtg 2520 tggaattttc cacttctggc atcacgtcag tgctcagaaa ttttctgatc tcagagcatt 2580 tcaattaggg atgctcaaac gcaactgttt ctacttcccc atttcaggtg tgagatgtaa 2640 cccaccttga ccataaattg gcttttcata gtg 2673 <210> 14 <211> 7287 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 14 gtaccttgat ttcgtattct gagaggctgc tgcttagcgg tagccccttg gtttccgtgg 60 caacggaaaa gcgcgggaat tacagataaa ttaaaactgc gactgcgcgg cgtgagctcg 120 ctgagacttc ctggacgggg gacaggctgt ggggtttctc agataactgg gcccctgcgc 180 tcaggaggcc ttcaccctct gctctgggta aagttcattg gaacagaaag aaatggattt 240 atctgctctt cgcgttgaag aagtacaaaa tgtcattaat gctatgcaga aaatcttaga 300 gtgtcccatc tgtctggagt tgatcaagga acctgtctcc acaaagtgtg accacatatt 360 ttgcaaattt tgcatgctga aacttctcaa ccagaagaaa gggccttcac agtgtccttt 420 atgtaagaat gatataacca aaaggagcct acaagaaagt acgagattta gtcaacttgt 480 tgaagagcta ttgaaaatca tttgtgcttt tcagcttgac acaggtttgg agtatgcaaa 540 cagctataat tttgcaaaaa aggaaaataa ctctcctgaa catctaaaag atgaagtttc 600 tatcatccaa agtatgggct acagaaaccg tgccaaaaga cttctacaga gtgaacccga 660 aaatccttcc ttgcaggaaa ccagtctcag tgtccaactc tctaaccttg gaactgtgag 720 aactctgagg acaaagcagc ggatacaacc tcaaaagacg tctgtctaca ttgaattggg 780 atctgattct tctgaagata ccgttaataa ggcaacttat tgcagtgtgg gagatcaaga 840 attgttacaa atcacccctc aaggaaccag ggatgaaatc agtttggatt ctgcaaaaaa 900 ggctgcttgt gaattttctg agacggatgt aacaaatact gaacatcatc aacccagtaa 960 taatgatttg aacaccactg agaagcgtgc agctgagagg catccagaaa agtatcaggg 1020 tagttctgtt tcaaacttgc atgtggagcc atgtggcaca aatactcatg ccagctcatt 1080 acagcatgag aacagcagtt tattactcac taaagacaga atgaatgtag aaaaggctga 1140 attctgtaat aaaagcaaac agcctggctt agcaaggagc caacataaca gatgggctgg 1200 aagtaaggaa acatgtaatg ataggcggac tcccagcaca gaaaaaaagg tagatctgaa 1260 tgctgatccc ctgtgtgaga gaaaagaatg gaataagcag aaactgccat gctcagagaa 1320 tcctagagat actgaagatg ttccttggat aacactaaat agcagcattc agaaagttaa 1380 tgagtggttt tccagaagtg atgaactgtt aggttctgat gactcacatg atggggagtc 1440 tgaatcaaat gccaaagtag ctgatgtatt ggacgttcta aatgaggtag atgaatattc 1500 tggttcttca gagaaaatag acttactggc cagtgatcct catgaggctt taatatgtaa 1560 aagtgaaaga gttcactcca aatcagtaga gagtaatatt gaagacaaaa tatttgggaa 1620 aacctatcgg aagaaggcaa gcctccccaa cttaagccat gtaactgaaa atctaattat 1680 aggagcattt gttactgagc cacagataat acaagagcgt cccctcacaa ataaattaaa 1740 gcgtaaaagg agacctacat caggccttca tcctgaggat tttatcaaga aagcagattt 1800 ggcagttcaa aagactcctg aaatgataaa tcagggaact aaccaaacgg agcagaatgg 1860 tcaagtgatg aatattacta atagtggtca tgagaataaa acaaaaggtg attctattca 1920 gaatgagaaa aatcctaacc caatagaatc actcgaaaaa gaatctgctt tcaaaacgaa 1980 agctgaacct ataagcagca gtataagcaa tatggaactc gaattaaata tccacaattc 2040 aaaagcacct aaaaagaata ggctgaggag gaagtcttct accaggcata ttcatgcgct 2100 tgaactagta gtcagtagaa atctaagccc acctaattgt actgaattgc aaattgatag 2160 ttgttctagc agtgaagaga taaagaaaaa aaagtacaac caaatgccag tcaggcacag 2220 cagaaaccta caactcatgg aaggtaaaga acctgcaact ggagccaaga agagtaacaa 2280 gccaaatgaa cagacaagta aaagacatga cagcgatact ttcccagagc tgaagttaac 2340 aaatgcacct ggttctttta ctaagtgttc aaataccagt gaacttaaag aatttgtcaa 2400 tcctagcctt ccaagagaag aaaaagaaga gaaactagaa acagttaaag tgtctaataa 2460 tgctgaagac cccaaagatc tcatgttaag tggagaaagg gttttgcaaa ctgaaagatc 2520 tgtagagagt agcagtattt cattggtacc tggtactgat tatggcactc aggaaagtat 2580 ctcgttactg gaagttagca ctctagggaa ggcaaaaaca gaaccaaata aatgtgtgag 2640 tcagtgtgca gcatttgaaa accccaaggg actaattcat ggttgttcca aagataatag 2700 aaatgacaca gaaggcttta agtatccatt gggacatgaa gttaaccaca gtcgggaaac 2760 aagcatagaa atggaagaaa gtgaacttga tgctcagtat ttgcagaata cattcaaggt 2820 ttcaaagcgc cagtcatttg ctccgttttc aaatccagga aatgcagaag aggaatgtgc 2880 aacattctct gcccactctg ggtccttaaa gaaacaaagt ccaaaagtca cttttgaatg 2940 tgaacaaaag gaagaaaatc aaggaaagaa tgagtctaat atcaagcctg tacagacagt 3000 taatatcact gcaggctttc ctgtggttgg tcagaaagat aagccagttg ataatgccaa 3060 atgtagtatc aaaggaggct ctaggttttg tctatcatct cagttcagag gcaacgaaac 3120 tggactcatt actccaaata aacatggact tttacaaaac ccatatcgta taccaccact 3180 ttttcccatc aagtcatttg ttaaaactaa atgtaagaaa aatctgctag aggaaaactt 3240 tgaggaacat tcaatgtcac ctgaaagaga aatgggaaat gagaacattc caagtacagt 3300 gagcacaatt agccgtaata acattagaga aaatgttttt aaagaagcca gctcaagcaa 3360 tattaatgaa gtaggttcca gtactaatga agtgggctcc agtattaatg aaataggttc 3420 cagtgatgaa aacattcaag cagaactagg tagaaacaga gggccaaaat tgaatgctat 3480 gcttagatta ggggttttgc aacctgaggt ctataaacaa agtcttcctg gaagtaattg 3540 taagcatcct gaaataaaaa agcaagaata tgaagaagta gttcagactg ttaatacaga 3600 tttctctcca tatctgattt cagataactt agaacagcct atgggaagta gtcatgcatc 3660 tcaggtttgt tctgagacac ctgatgacct gttagatgat ggtgaaataa aggaagatac 3720 tagttttgct gaaaatgaca ttaaggaaag ttctgctgtt tttagcaaaa gcgtccagaa 3780 aggagagctt agcaggagtc ctagcccttt cacccataca catttggctc agggttaccg 3840 aagaggggcc aagaaattag agtcctcaga agagaactta tctagtgagg atgaagagct 3900 tccctgcttc caacacttgt tatttggtaa agtaaacaat ataccttctc agtctactag 3960 gcatagcacc gttgctaccg agtgtctgtc taagaacaca gaggagaatt tattatcatt 4020 gaagaatagc ttaaatgact gcagtaacca ggtaatattg gcaaaggcat ctcaggaaca 4080 tcaccttagt gaggaaacaa aatgttctgc tagcttgttt tcttcacagt gcagtgaatt 4140 ggaagacttg actgcaaata caaacaccca ggatcctttc ttgattggtt cttccaaaca 4200 aatgaggcat cagtctgaaa gccagggagt tggtctgagt gacaaggaat tggtttcaga 4260 tgatgaagaa agaggaacgg gcttggaaga aaataatcaa gaagagcaaa gcatggattc 4320 aaacttaggt gaagcagcat ctgggtgtga gagtgaaaca agcgtctctg aagactgctc 4380 agggctatcc tctcagagtg acattttaac cactcagcag agggatacca tgcaacataa 4440 cctgataaag ctccagcagg aaatggctga actagaagct gtgttagaac agcatgggag 4500 ccagccttct aacagctacc cttccatcat aagtgactct tctgcccttg aggacctgcg 4560 aaatccagaa caaagcacat cagaaaaaga ttcgcatata catggccaaa ggaacaactc 4620 catgttttct aaaaggccta gagaacatat atcagtatta acttcacaga aaagtagtga 4680 ataccctata agccagaatc cagaaggcct ttctgctgac aagtttgagg tgtctgcaga 4740 tagttctacc agtaaaaata aagaaccagg agtggaaagg tcatcccctt ctaaatgccc 4800 atcattagat gataggtggt acatgcacag ttgctctggg agtcttcaga atagaaacta 4860 cccatctcaa gaggagctca ttaaggttgt tgatgtggag gagcaacagc tggaagagtc 4920 tgggccacac gatttgacgg aaacatctta cttgccaagg caagatctag agggaacccc 4980 ttacctggaa tctggaatca gcctcttctc tgatgaccct gaatctgatc cttctgaaga 5040 cagagcccca gagtcagctc gtgttggcaa cataccatct tcaacctctg cattgaaagt 5100 tccccaattg aaagttgcag aatctgccca gagtccagct gctgctcata ctactgatac 5160 tgctgggtat aatgcaatgg aagaaagtgt gagcagggag aagccagaat tgacagcttc 5220 aacagaaagg gtcaacaaaa gaatgtccat ggtggtgtct ggcctgaccc cagaagaatt 5280 tatgctcgtg tacaagtttg ccagaaaaca ccacatcact ttaactaatc taattactga 5340 agagactact catgttgtta tgaaaacaga tgctgagttt gtgtgtgaac ggacactgaa 5400 atattttcta ggaattgcgg gaggaaaatg ggtagttagc tatttctggg tgacccagtc 5460 tattaaagaa agaaaaatgc tgaatgagca tgattttgaa gtcagaggag atgtggtcaa 5520 tggaagaaac caccaaggtc caaagcgagc aagagaatcc caggacagaa agatcttcag 5580 ggggctagaa atctgttgct atgggccctt caccaacatg cccacagatc aactggaatg 5640 gatggtacag ctgtgtggtg cttctgtggt gaaggagctt tcatcattca cccttggcac 5700 aggtgtccac ccaattgtgg ttgtgcagcc agatgcctgg acagaggaca atggcttcca 5760 tgcaattggg cagatgtgtg aggcacctgt ggtgacccga gagtgggtgt tggacagtgt 5820 agcactctac cagtgccagg agctggacac ctacctgata ccccagatcc cccacagcca 5880 ctactgactg cagccagcca caggtacaga gccacaggac cccaagaatg agcttacaaa 5940 gtggcctttc caggccctgg gagctcctct cactcttcag tccttctact gtcctggcta 6000 ctaaatattt tatgtacatc agcctgaaaa ggacttctgg ctatgcaagg gtcccttaaa 6060 gattttctgc ttgaagtctc ccttggaaat ctgccatgag cacaaaatta tggtaatttt 6120 tcacctgaga agattttaaa accatttaaa cgccaccaat tgagcaagat gctgattcat 6180 tatttatcag ccctattctt tctattcagg ctgttgttgg cttagggctg gaagcacaga 6240 gtggcttggc ctcaagagaa tagctggttt ccctaagttt acttctctaa aaccctgtgt 6300 tcacaaaggc agagagtcag acccttcaat ggaaggagag tgcttgggat cgattatgtg 6360 acttaaagtc agaatagtcc ttgggcagtt ctcaaatgtt ggagtggaac attggggagg 6420 aaattctgag gcaggtatta gaaatgaaaa ggaaacttga aacctgggca tggtggctca 6480 cgcctgtaat cccagcactt tgggaggcca aggtgggcag atcactggag gtcaggagtt 6540 cgaaaccagc ctggccaaca tggtgaaacc ccatctctac taaaaataca gaaattagcc 6600 ggtcatggtg gtggacacct gtaatcccag ctactcaggt ggctaaggca ggagaatcac 6660 ttcagcccgg gaggtggagg ttgcagtgag ccaagatcat accacggcac tccagcctgg 6720 gtgacagtga gactgtggct caaaaaaaaa aaaaaaaaaa ggaaaatgaa actagaagag 6780 atttctaaaa gtctgagata tatttgctag atttctaaag aatgtgttct aaaacagcag 6840 aagattttca agaaccggtt tccaaagaca gtcttctaat tcctcattag taataagtaa 6900 aatgtttatt gttgtagctc tggtatataa tccattcctc ttaaaatata agacctctgg 6960 catgaatatt tcatatctat aaaatgacag atcccaccag gaaggaagct gttgctttct 7020 ttgaggtgat ttttttcctt tgctccctgt tgctgaaacc atacagcttc ataaataatt 7080 ttgcttgctg aaggaagaaa aagtgttttt cataaaccca ttatccagga ctgtttatag 7140 ctgttggaag gactaggtct tccctagccc ccccagtgtg caagggcagt gaagacttga 7200 ttgtacaaaa tacgttttgt aaatgttgtg ctgttaacac tgcaaataaa cttggtagca 7260 aacacttcca aaaaaaaaaa aaaaaaa 7287 <210> 15 <211> 11386 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 15 gtggcgcgag cttctgaaac taggcggcag aggcggagcc gctgtggcac tgctgcgcct 60 ctgctgcgcc tcgggtgtct tttgcggcgg tgggtcgccg ccgggagaag cgtgagggga 120 cagatttgtg accggcgcgg tttttgtcag cttactccgg ccaaaaaaga actgcacctc 180 tggagcggac ttatttacca agcattggag gaatatcgta ggtaaaaatg cctattggat 240 ccaaagagag gccaacattt tttgaaattt ttaagacacg ctgcaacaaa gcagatttag 300 gaccaataag tcttaattgg tttgaagaac tttcttcaga agctccaccc tataattctg 360 aacctgcaga agaatctgaa cataaaaaca acaattacga accaaaccta tttaaaactc 420 cacaaaggaa accatcttat aatcagctgg cttcaactcc aataatattc aaagagcaag 480 ggctgactct gccgctgtac caatctcctg taaaagaatt agataaattc aaattagact 540 taggaaggaa tgttcccaat agtagacata aaagtcttcg cacagtgaaa actaaaatgg 600 atcaagcaga tgatgtttcc tgtccacttc taaattcttg tcttagtgaa agtcctgttg 660 ttctacaatg tacacatgta acaccacaaa gagataagtc agtggtatgt gggagtttgt 720 ttcatacacc aaagtttgtg aagggtcgtc agacaccaaa acatatttct gaaagtctag 780 gagctgaggt ggatcctgat atgtcttggt caagttcttt agctacacca cccaccctta 840 gttctactgt gctcatagtc agaaatgaag aagcatctga aactgtattt cctcatgata 900 ctactgctaa tgtgaaaagc tatttttcca atcatgatga aagtctgaag aaaaatgata 960 gatttatcgc ttctgtgaca gacagtgaaa acacaaatca aagagaagct gcaagtcatg 1020 gatttggaaa aacatcaggg aattcattta aagtaaatag ctgcaaagac cacattggaa 1080 agtcaatgcc aaatgtccta gaagatgaag tatatgaaac agttgtagat acctctgaag 1140 aagatagttt ttcattatgt ttttctaaat gtagaacaaa aaatctacaa aaagtaagaa 1200 ctagcaagac taggaaaaaa attttccatg aagcaaacgc tgatgaatgt gaaaaatcta 1260 aaaaccaagt gaaagaaaaa tactcatttg tatctgaagt ggaaccaaat gatactgatc 1320 cattagattc aaatgtagca aatcagaagc cctttgagag tggaagtgac aaaatctcca 1380 aggaagttgt accgtctttg gcctgtgaat ggtctcaact aaccctttca ggtctaaatg 1440 gagcccagat ggagaaaata cccctattgc atatttcttc atgtgaccaa aatatttcag 1500 aaaaagacct attagacaca gagaacaaaa gaaagaaaga ttttcttact tcagagaatt 1560 ctttgccacg tatttctagc ctaccaaaat cagagaagcc attaaatgag gaaacagtgg 1620 taaataagag agatgaagag cagcatcttg aatctcatac agactgcatt cttgcagtaa 1680 agcaggcaat atctggaact tctccagtgg cttcttcatt tcagggtatc aaaaagtcta 1740 tattcagaat aagagaatca cctaaagaga ctttcaatgc aagtttttca ggtcatatga 1800 ctgatccaaa ctttaaaaaa gaaactgaag cctctgaaag tggactggaa atacatactg 1860 tttgctcaca gaaggaggac tccttatgtc caaatttaat tgataatgga agctggccag 1920 ccaccaccac acagaattct gtagctttga agaatgcagg tttaatatcc actttgaaaa 1980 agaaaacaaa taagtttatt tatgctatac atgatgaaac atcttataaa ggaaaaaaaa 2040 taccgaaaga ccaaaaatca gaactaatta actgttcagc ccagtttgaa gcaaatgctt 2100 ttgaagcacc acttacattt gcaaatgctg attcaggttt attgcattct tctgtgaaaa 2160 gaagctgttc acagaatgat tctgaagaac caactttgtc cttaactagc tcttttggga 2220 caattctgag gaaatgttct agaaatgaaa catgttctaa taatacagta atctctcagg 2280 atcttgatta taaagaagca aaatgtaata aggaaaaact acagttattt attaccccag 2340 aagctgattc tctgtcatgc ctgcaggaag gacagtgtga aaatgatcca aaaagcaaaa 2400 aagtttcaga tataaaagaa gaggtcttgg ctgcagcatg tcacccagta caacattcaa 2460 aagtggaata cagtgatact gactttcaat cccagaaaag tcttttatat gatcatgaaa 2520 atgccagcac tcttatttta actcctactt ccaaggatgt tctgtcaaac ctagtcatga 2580 tttctagagg caaagaatca tacaaaatgt cagacaagct caaaggtaac aattatgaat 2640 ctgatgttga attaaccaaa aatattccca tggaaaagaa tcaagatgta tgtgctttaa 2700 atgaaaatta taaaaacgtt gagctgttgc cacctgaaaa atacatgaga gtagcatcac 2760 cttcaagaaa ggtacaattc aaccaaaaca caaatctaag agtaatccaa aaaaatcaag 2820 aagaaactac ttcaatttca aaaataactg tcaatccaga ctctgaagaa cttttctcag 2880 acaatgagaa taattttgtc ttccaagtag ctaatgaaag gaataatctt gctttaggaa 2940 atactaagga acttcatgaa acagacttga cttgtgtaaa cgaacccatt ttcaagaact 3000 ctaccatggt tttatatgga gacacaggtg ataaacaagc aacccaagtg tcaattaaaa 3060 aagatttggt ttatgttctt gcagaggaga acaaaaatag tgtaaagcag catataaaaa 3120 tgactctagg tcaagattta aaatcggaca tctccttgaa tatagataaa ataccagaaa 3180 aaaataatga ttacatgaac aaatgggcag gactcttagg tccaatttca aatcacagtt 3240 ttggaggtag cttcagaaca gcttcaaata aggaaatcaa gctctctgaa cataacatta 3300 agaagagcaa aatgttcttc aaagatattg aagaacaata tcctactagt ttagcttgtg 3360 ttgaaattgt aaataccttg gcattagata atcaaaagaa actgagcaag cctcagtcaa 3420 ttaatactgt atctgcacat ttacagagta gtgtagttgt ttctgattgt aaaaatagtc 3480 atataacccc tcagatgtta ttttccaagc aggattttaa ttcaaaccat aatttaacac 3540 ctagccaaaa ggcagaaatt acagaacttt ctactatatt agaagaatca ggaagtcagt 3600 ttgaatttac tcagtttaga aaaccaagct acatattgca gaagagtaca tttgaagtgc 3660 ctgaaaacca gatgactatc ttaaagacca cttctgagga atgcagagat gctgatcttc 3720 atgtcataat gaatgcccca tcgattggtc aggtagacag cagcaagcaa tttgaaggta 3780 cagttgaaat taaacggaag tttgctggcc tgttgaaaaa tgactgtaac aaaagtgctt 3840 ctggttattt aacagatgaa aatgaagtgg ggtttagggg cttttattct gctcatggca 3900 caaaactgaa tgtttctact gaagctctgc aaaaagctgt gaaactgttt agtgatattg 3960 agaatattag tgaggaaact tctgcagagg tacatccaat aagtttatct tcaagtaaat 4020 gtcatgattc tgttgtttca atgtttaaga tagaaaatca taatgataaa actgtaagtg 4080 aaaaaaataa taaatgccaa ctgatattac aaaataatat tgaaatgact actggcactt 4140 ttgttgaaga aattactgaa aattacaaga gaaatactga aaatgaagat aacaaatata 4200 ctgctgccag tagaaattct cataacttag aatttgatgg cagtgattca agtaaaaatg 4260 atactgtttg tattcataaa gatgaaacgg acttgctatt tactgatcag cacaacatat 4320 gtcttaaatt atctggccag tttatgaagg agggaaacac tcagattaaa gaagatttgt 4380 cagatttaac ttttttggaa gttgcgaaag ctcaagaagc atgtcatggt aatacttcaa 4440 ataaagaaca gttaactgct actaaaacgg agcaaaatat aaaagatttt gagacttctg 4500 atacattttt tcagactgca agtgggaaaa atattagtgt cgccaaagag tcatttaata 4560 aaattgtaaa tttctttgat cagaaaccag aagaattgca taacttttcc ttaaattctg 4620 aattacattc tgacataaga aagaacaaaa tggacattct aagttatgag gaaacagaca 4680 tagttaaaca caaaatactg aaagaaagtg tcccagttgg tactggaaat caactagtga 4740 ccttccaggg acaacccgaa cgtgatgaaa agatcaaaga acctactcta ttgggttttc 4800 atacagctag cgggaaaaaa gttaaaattg caaaggaatc tttggacaaa gtgaaaaacc 4860 tttttgatga aaaagagcaa ggtactagtg aaatcaccag ttttagccat caatgggcaa 4920 agaccctaaa gtacagagag gcctgtaaag accttgaatt agcatgtgag accattgaga 4980 tcacagctgc cccaaagtgt aaagaaatgc agaattctct caataatgat aaaaaccttg 5040 tttctattga gactgtggtg ccacctaagc tcttaagtga taatttatgt agacaaactg 5100 aaaatctcaa aacatcaaaa agtatctttt tgaaagttaa agtacatgaa aatgtagaaa 5160 aagaaacagc aaaaagtcct gcaacttgtt acacaaatca gtccccttat tcagtcattg 5220 aaaattcagc cttagctttt tacacaagtt gtagtagaaa aacttctgtg agtcagactt 5280 cattacttga agcaaaaaaa tggcttagag aaggaatatt tgatggtcaa ccagaaagaa 5340 taaatactgc agattatgta ggaaattatt tgtatgaaaa taattcaaac agtactatag 5400 ctgaaaatga caaaaatcat ctctccgaaa aacaagatac ttatttaagt aacagtagca 5460 tgtctaacag ctattcctac cattctgatg aggtatataa tgattcagga tatctctcaa 5520 aaaataaact tgattctggt attgagccag tattgaagaa tgttgaagat caaaaaaaca 5580 ctagtttttc caaagtaata tccaatgtaa aagatgcaaa tgcataccca caaactgtaa 5640 atgaagatat ttgcgttgag gaacttgtga ctagctcttc accctgcaaa aataaaaatg 5700 cagccattaa attgtccata tctaatagta ataattttga ggtagggcca cctgcattta 5760 ggatagccag tggtaaaatc gtttgtgttt cacatgaaac aattaaaaaa gtgaaagaca 5820 tatttacaga cagtttcagt aaagtaatta aggaaaacaa cgagaataaa tcaaaaattt 5880 gccaaacgaa aattatggca ggttgttacg aggcattgga tgattcagag gatattcttc 5940 ataactctct agataatgat gaatgtagca cgcattcaca taaggttttt gctgacattc 6000 agagtgaaga aattttacaa cataaccaaa atatgtctgg attggagaaa gtttctaaaa 6060 tatcaccttg tgatgttagt ttggaaactt cagatatatg taaatgtagt atagggaagc 6120 ttcataagtc agtctcatct gcaaatactt gtgggatttt tagcacagca agtggaaaat 6180 ctgtccaggt atcagatgct tcattacaaa acgcaagaca agtgttttct gaaatagaag 6240 atagtaccaa gcaagtcttt tccaaagtat tgtttaaaag taacgaacat tcagaccagc 6300 tcacaagaga agaaaatact gctatacgta ctccagaaca tttaatatcc caaaaaggct 6360 tttcatataa tgtggtaaat tcatctgctt tctctggatt tagtacagca agtggaaagc 6420 aagtttccat tttagaaagt tccttacaca aagttaaggg agtgttagag gaatttgatt 6480 taatcagaac tgagcatagt cttcactatt cacctacgtc tagacaaaat gtatcaaaaa 6540 tacttcctcg tgttgataag agaaacccag agcactgtgt aaactcagaa atggaaaaaa 6600 cctgcagtaa agaatttaaa ttatcaaata acttaaatgt tgaaggtggt tcttcagaaa 6660 ataatcactc tattaaagtt tctccatatc tctctcaatt tcaacaagac aaacaacagt 6720 tggtattagg aaccaaagtg tcacttgttg agaacattca tgttttggga aaagaacagg 6780 cttcacctaa aaacgtaaaa atggaaattg gtaaaactga aactttttct gatgttcctg 6840 tgaaaacaaa tatagaagtt tgttctactt actccaaaga ttcagaaaac tactttgaaa 6900 cagaagcagt agaaattgct aaagctttta tggaagatga tgaactgaca gattctaaac 6960 tgccaagtca tgccacacat tctcttttta catgtcccga aaatgaggaa atggttttgt 7020 caaattcaag aattggaaaa agaagaggag agccccttat cttagtggga gaaccctcaa 7080 tcaaaagaaa cttattaaat gaatttgaca ggataataga aaatcaagaa aaatccttaa 7140 aggcttcaaa aagcactcca gatggcacaa taaaagatcg aagattgttt atgcatcatg 7200 tttctttaga gccgattacc tgtgtaccct ttcgcacaac taaggaacgt caagagatac 7260 agaatccaaa ttttaccgca cctggtcaag aatttctgtc taaatctcat ttgtatgaac 7320 atctgacttt ggaaaaatct tcaagcaatt tagcagtttc aggacatcca ttttatcaag 7380 tttctgctac aagaaatgaa aaaatgagac acttgattac tacaggcaga ccaaccaaag 7440 tctttgttcc accttttaaa actaaatcac attttcacag agttgaacag tgtgttagga 7500 atattaactt ggaggaaaac agacaaaagc aaaacattga tggacatggc tctgatgata 7560 gtaaaaataa gattaatgac aatgagattc atcagtttaa caaaaacaac tccaatcaag 7620 cagcagctgt aactttcaca aagtgtgaag aagaaccttt agatttaatt acaagtcttc 7680 agaatgccag agatatacag gatatgcgaa ttaagaagaa acaaaggcaa cgcgtctttc 7740 cacagccagg cagtctgtat cttgcaaaaa catccactct gcctcgaatc tctctgaaag 7800 cagcagtagg aggccaagtt ccctctgcgt gttctcataa acagctgtat acgtatggcg 7860 tttctaaaca ttgcataaaa attaacagca aaaatgcaga gtcttttcag tttcacactg 7920 aagattattt tggtaaggaa agtttatgga ctggaaaagg aatacagttg gctgatggtg 7980 gatggctcat accctccaat gatggaaagg ctggaaaaga agaattttat agggctctgt 8040 gtgacactcc aggtgtggat ccaaagctta tttctagaat ttgggtttat aatcactata 8100 gatggatcat atggaaactg gcagctatgg aatgtgcctt tcctaaggaa tttgctaata 8160 gatgcctaag cccagaaagg gtgcttcttc aactaaaata cagatatgat acggaaattg 8220 atagaagcag aagatcggct ataaaaaaga taatggaaag ggatgacaca gctgcaaaaa 8280 cacttgttct ctgtgtttct gacataattt cattgagcgc aaatatatct gaaacttcta 8340 gcaataaaac tagtagtgca gatacccaaa aagtggccat tattgaactt acagatgggt 8400 ggtatgctgt taaggcccag ttagatcctc ccctcttagc tgtcttaaag aatggcagac 8460 tgacagttgg tcagaagatt attcttcatg gagcagaact ggtgggctct cctgatgcct 8520 gtacacctct tgaagcccca gaatctctta tgttaaagat ttctgctaac agtactcggc 8580 ctgctcgctg gtataccaaa cttggattct ttcctgaccc tagacctttt cctctgccct 8640 tatcatcgct tttcagtgat ggaggaaatg ttggttgtgt tgatgtaatt attcaaagag 8700 cataccctat acagtggatg gagaagacat catctggatt atacatattt cgcaatgaaa 8760 gagaggaaga aaaggaagca gcaaaatatg tggaggccca acaaaagaga ctagaagcct 8820 tattcactaa aattcaggag gaatttgaag aacatgaaga aaacacaaca aaaccatatt 8880 taccatcacg tgcactaaca agacagcaag ttcgtgcttt gcaagatggt gcagagcttt 8940 atgaagcagt gaagaatgca gcagacccag cttaccttga gggttatttc agtgaagagc 9000 agttaagagc cttgaataat cacaggcaaa tgttgaatga taagaaacaa gctcagatcc 9060 agttggaaat taggaaggcc atggaatctg ctgaacaaaa ggaacaaggt ttatcaaggg 9120 atgtcacaac cgtgtggaag ttgcgtattg taagctattc aaaaaaagaa aaagattcag 9180 ttatactgag tatttggcgt ccatcatcag atttatattc tctgttaaca gaaggaaaga 9240 gatacagaat ttatcatctt gcaacttcaa aatctaaaag taaatctgaa agagctaaca 9300 tacagttagc agcgacaaaa aaaactcagt atcaacaact accggtttca gatgaaattt 9360 tatttcagat ttaccagcca cgggagcccc ttcacttcag caaattttta gatccagact 9420 ttcagccatc ttgttctgag gtggacctaa taggatttgt cgtttctgtt gtgaaaaaaa 9480 caggacttgc ccctttcgtc tatttgtcag acgaatgtta caatttactg gcaataaagt 9540 tttggataga ccttaatgag gacattatta agcctcatat gttaattgct gcaagcaacc 9600 tccagtggcg accagaatcc aaatcaggcc ttcttacttt atttgctgga gatttttctg 9660 tgttttctgc tagtccaaaa gagggccact ttcaagagac attcaacaaa atgaaaaata 9720 ctgttgagaa tattgacata ctttgcaatg aagcagaaaa caagcttatg catatactgc 9780 atgcaaatga tcccaagtgg tccaccccaa ctaaagactg tacttcaggg ccgtacactg 9840 ctcaaatcat tcctggtaca ggaaacaagc ttctgatgtc ttctcctaat tgtgagatat 9900 attatcaaag tcctttatca ctttgtatgg ccaaaaggaa gtctgtttcc acacctgtct 9960 cagcccagat gacttcaaag tcttgtaaag gggagaaaga gattgatgac caaaagaact 10020 gcaaaaagag aagagccttg gatttcttga gtagactgcc tttacctcca cctgttagtc 10080 ccatttgtac atttgtttct ccggctgcac agaaggcatt tcagccacca aggagttgtg 10140 gcaccaaata cgaaacaccc ataaagaaaa aagaactgaa ttctcctcag atgactccat 10200 ttaaaaaatt caatgaaatt tctcttttgg aaagtaattc aatagctgac gaagaacttg 10260 cattgataaa tacccaagct cttttgtctg gttcaacagg agaaaaacaa tttatatctg 10320 tcagtgaatc cactaggact gctcccacca gttcagaaga ttatctcaga ctgaaacgac 10380 gttgtactac atctctgatc aaagaacagg agagttccca ggccagtacg gaagaatgtg 10440 agaaaaataa gcaggacaca attacaacta aaaaatatat ctaagcattt gcaaaggcga 10500 caataaatta ttgacgctta acctttccag tttataagac tggaatataa tttcaaacca 10560 cacattagta cttatgttgc acaatgagaa aagaaattag tttcaaattt acctcagcgt 10620 ttgtgtatcg ggcaaaaatc gttttgcccg attccgtatt ggtatacttt tgcttcagtt 10680 gcatatctta aaactaaatg taatttatta actaatcaag aaaaacatct ttggctgagc 10740 tcggtggctc atgcctgtaa tcccaacact ttgagaagct gaggtgggag gagtgcttga 10800 ggccaggagt tcaagaccag cctgggcaac atagggagac ccccatcttt acaaagaaaa 10860 aaaaaagggg aaaagaaaat cttttaaatc tttggatttg atcactacaa gtattatttt 10920 acaagtgaaa taaacatacc attttctttt agattgtgtc attaaatgga atgaggtctc 10980 ttagtacagt tattttgatg cagataattc cttttagttt agctactatt ttaggggatt 11040 ttttttagag gtaactcact atgaaatagt tctccttaat gcaaatatgt tggttctgct 11100 atagttccat cctgttcaaa agtcaggatg aatatgaaga gtggtgtttc cttttgagca 11160 attcttcatc cttaagtcag catgattata agaaaaatag aaccctcagt gtaactctaa 11220 ttccttttta ctattccagt gtgatctctg aaattaaatt acttcaacta aaaattcaaa 11280 tactttaaat cagaagattt catagttaat ttattttttt tttcaacaaa atggtcatcc 11340 aaactcaaac ttgagaaaat atcttgcttt caaattggca ctgatt 11386 <210> 16 <211> 13147 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 16 ccggagcccg agccgaaggg cgagccgcaa acgctaagtc gctggccatt ggtggacatg 60 gcgcaggcgc gtttgctccg acgggccgaa tgttttgggg cagtgttttg agcgcggaga 120 ccgcgtgata ctggatgcgc atgggcatac cgtgctctgc ggctgcttgg cgttgcttct 180 tcctccagaa gtgggcgctg ggcagtcacg cagggtttga accggaagcg ggagtaggta 240 gctgcgtggc taacggagaa aagaagccgt ggccgcggga ggaggcgaga ggagtcggga 300 tctgcgctgc agccaccgcc gcggttgata ctactttgac cttccgagtg cagtgacagt 360 gatgtgtgtt ctgaaattgt gaaccatgag tctagtactt aatgatctgc ttatctgctg 420 ccgtcaacta gaacatgata gagctacaga acgaaagaaa gaagttgaga aatttaagcg 480 cctgattcga gatcctgaaa caattaaaca tctagatcgg cattcagatt ccaaacaagg 540 aaaatatttg aattgggatg ctgtttttag atttttacag aaatatattc agaaagaaac 600 agaatgtctg agaatagcaa aaccaaatgt atcagcctca acacaagcct ccaggcagaa 660 aaagatgcag gaaatcagta gtttggtcaa atacttcatc aaatgtgcaa acagaagagc 720 acctaggcta aaatgtcaag aactcttaaa ttatatcatg gatacagtga aagattcatc 780 taatggtgct atttacggag ctgattgtag caacatacta ctcaaagaca ttctttctgt 840 gagaaaatac tggtgtgaaa tatctcagca acagtggtta gaattgttct ctgtgtactt 900 caggctctat ctgaaacctt cacaagatgt tcatagagtt ttagtggcta gaataattca 960 tgctgttacc aaaggatgct gttctcagac tgacggatta aattccaaat ttttggactt 1020 tttttccaag gctattcagt gtgcgagaca agaaaagagc tcttcaggtc taaatcatat 1080 cttagcagct cttactatct tcctcaagac tttggctgtc aactttcgaa ttcgagtgtg 1140 tgaattagga gatgaaattc ttcccacttt gctttatatt tggactcaac ataggcttaa 1200 tgattcttta aaagaagtca ttattgaatt atttcaactg caaatttata tccatcatcc 1260 gaaaggagcc aaaacccaag aaaaaggtgc ttatgaatca acaaaatgga gaagtatttt 1320 atacaactta tatgatctgc tagtgaatga gataagtcat ataggaagta gaggaaagta 1380 ttcttcagga tttcgtaata ttgccgtcaa agaaaatttg attgaattga tggcagatat 1440 ctgtcaccag gtttttaatg aagataccag atccttggag atttctcaat cttacactac 1500 tacacaaaga gaatctagtg attacagtgt cccttgcaaa aggaagaaaa tagaactagg 1560 ctgggaagta ataaaagatc accttcagaa gtcacagaat gattttgatc ttgtgccttg 1620 gctacagatt gcaacccaat taatatcaaa gtatcctgca agtttaccta actgtgagct 1680 gtctccatta ctgatgatac tatctcagct tctaccccaa cagcgacatg gggaacgtac 1740 accatatgtg ttacgatgcc ttacggaagt tgcattgtgt caagacaaga ggtcaaacct 1800 agaaagctca caaaagtcag atttattaaa actctggaat aaaatttggt gtattacctt 1860 tcgtggtata agttctgagc aaatacaagc tgaaaacttt ggcttacttg gagccataat 1920 tcagggtagt ttagttgagg ttgacagaga attctggaag ttatttactg ggtcagcctg 1980 cagaccttca tgtcctgcag tatgctgttt gactttggca ctgaccacca gtatagttcc 2040 aggaacggta aaaatgggaa tagagcaaaa tatgtgtgaa gtaaatagaa gcttttcttt 2100 aaaggaatca ataatgaaat ggctcttatt ctatcagtta gagggtgact tagaaaatag 2160 cacagaagtg cctccaattc ttcacagtaa ttttcctcat cttgtactgg agaaaattct 2220 tgtgagtctc actatgaaaa actgtaaagc tgcaatgaat tttttccaaa gcgtgccaga 2280 atgtgaacac caccaaaaag ataaagaaga actttcattc tcagaagtag aagaactatt 2340 tcttcagaca acttttgaca agatggactt tttaaccatt gtgagagaat gtggtataga 2400 aaagcaccag tccagtattg gcttctctgt ccaccagaat ctcaaggaat cactggatcg 2460 ctgtcttctg ggattatcag aacagcttct gaataattac tcatctgaga ttacaaattc 2520 agaaactctt gtccggtgtt cacgtctttt ggtgggtgtc cttggctgct actgttacat 2580 gggtgtaata gctgaagagg aagcatataa gtcagaatta ttccagaaag ccaagtctct 2640 aatgcaatgt gcaggagaaa gtatcactct gtttaaaaat aagacaaatg aggaattcag 2700 aattggttcc ttgagaaata tgatgcagct atgtacacgt tgcttgagca actgtaccaa 2760 gaagagtcca aataagattg catctggctt tttcctgcga ttgttaacat caaagctaat 2820 gaatgacatt gcagatattt gtaaaagttt agcatccttc atcaaaaagc catttgaccg 2880 tggagaagta gaatcaatgg aagatgatac taatggaaat ctaatggagg tggaggatca 2940 gtcatccatg aatctattta acgattaccc tgatagtagt gttagtgatg caaacgaacc 3000 tggagagagc caaagtacca taggtgccat taatccttta gctgaagaat atctgtcaaa 3060 gcaagatcta cttttcttag acatgctcaa gttcttgtgt ttgtgtgtaa ctactgctca 3120 gaccaatact gtgtccttta gggcagctga tattcggagg aaattgttaa tgttaattga 3180 ttctagcacg ctagaaccta ccaaatccct ccacctgcat atgtatctaa tgcttttaaa 3240 ggagcttcct ggagaagagt accccttgcc aatggaagat gttcttgaac ttctgaaacc 3300 actatccaat gtgtgttctt tgtatcgtcg tgaccaagat gtttgtaaaa ctattttaaa 3360 ccatgtcctt catgtagtga aaaacctagg tcaaagcaat atggactctg agaacacaag 3420 ggatgctcaa ggacagtttc ttacagtaat tggagcattt tggcatctaa caaaggagag 3480 gaaatatata ttctctgtaa gaatggccct agtaaattgc cttaaaactt tgcttgaggc 3540 tgatccttat tcaaaatggg ccattcttaa tgtaatggga aaagactttc ctgtaaatga 3600 agtatttaca caatttcttg ctgacaatca tcaccaagtt cgcatgttgg ctgcagagtc 3660 aatcaataga ttgttccagg acacgaaggg agattcttcc aggttactga aagcacttcc 3720 tttgaagctt cagcaaacag cttttgaaaa tgcatacttg aaagctcagg aaggaatgag 3780 agaaatgtcc catagtgctg agaaccctga aactttggat gaaatttata atagaaaatc 3840 tgttttactg acgttgatag ctgtggtttt atcctgtagc cctatctgcg aaaaacaggc 3900 tttgtttgcc ctgtgtaaat ctgtgaaaga gaatggatta gaacctcacc ttgtgaaaaa 3960 ggttttagag aaagtttctg aaacttttgg atatagacgt ttagaagact ttatggcatc 4020 tcatttagat tatctggttt tggaatggct aaatcttcaa gatactgaat acaacttatc 4080 ttcttttcct tttattttat taaactacac aaatattgag gatttctata gatcttgtta 4140 taaggttttg attccacatc tggtgattag aagtcatttt gatgaggtga agtccattgc 4200 taatcagatt caagaggact ggaaaagtct tctaacagac tgctttccaa agattcttgt 4260 aaatattctt ccttattttg cctatgaggg taccagagac agtgggatgg cacagcaaag 4320 agagactgct accaaggtct atgatatgct taaaagtgaa aacttattgg gaaaacagat 4380 tgatcactta ttcattagta atttaccaga gattgtggtg gagttattga tgacgttaca 4440 tgagccagca aattctagtg ccagtcagag cactgacctc tgtgactttt caggggattt 4500 ggatcctgct cctaatccac ctcattttcc atcgcatgtg attaaagcaa catttgccta 4560 tatcagcaat tgtcataaaa ccaagttaaa aagcatttta gaaattcttt ccaaaagccc 4620 tgattcctat cagaaaattc ttcttgccat atgtgagcaa gcagctgaaa caaataatgt 4680 ttataagaag cacagaattc ttaaaatata tcacctgttt gttagtttat tactgaaaga 4740 tataaaaagt ggcttaggag gagcttgggc ctttgttctt cgagacgtta tttatacttt 4800 gattcactat atcaaccaaa ggccttcttg tatcatggat gtgtcattac gtagcttctc 4860 cctttgttgt gacttattaa gtcaggtttg ccagacagcc gtgacttact gtaaggatgc 4920 tctagaaaac catcttcatg ttattgttgg tacacttata ccccttgtgt atgagcaggt 4980 ggaggttcag aaacaggtat tggacttgtt gaaatactta gtgatagata acaaggataa 5040 tgaaaacctc tatatcacga ttaagctttt agatcctttt cctgaccatg ttgtttttaa 5100 ggatttgcgt attactcagc aaaaaatcaa atacagtaga ggaccctttt cactcttgga 5160 ggaaattaac cattttctct cagtaagtgt ttatgatgca cttccattga caagacttga 5220 aggactaaag gatcttcgaa gacaactgga actacataaa gatcagatgg tggacattat 5280 gagagcttct caggataatc cgcaagatgg gattatggtg aaactagttg tcaatttgtt 5340 gcagttatcc aagatggcaa taaaccacac tggtgaaaaa gaagttctag aggctgttgg 5400 aagctgcttg ggagaagtgg gtcctataga tttctctacc atagctatac aacatagtaa 5460 agatgcatct tataccaagg cccttaagtt atttgaagat aaagaacttc agtggacctt 5520 cataatgctg acctacctga ataacacact ggtagaagat tgtgtcaaag ttcgatcagc 5580 agctgttacc tgtttgaaaa acattttagc cacaaagact ggacatagtt tctgggagat 5640 ttataagatg acaacagatc caatgctggc ctatctacag ccttttagaa catcaagaaa 5700 aaagttttta gaagtaccca gatttgacaa agaaaaccct tttgaaggcc tggatgatat 5760 aaatctgtgg attcctctaa gtgaaaatca tgacatttgg ataaagacac tgacttgtgc 5820 ttttttggac agtggaggca caaaatgtga aattcttcaa ttattaaagc caatgtgtga 5880 agtgaaaact gacttttgtc agactgtact tccatacttg attcatgata ttttactcca 5940 agatacaaat gaatcatgga gaaatctgct ttctacacat gttcagggat ttttcaccag 6000 ctgtcttcga cacttctcgc aaacgagccg atccacaacc cctgcaaact tggattcaga 6060 gtcagagcac tttttccgat gctgtttgga taaaaaatca caaagaacaa tgcttgctgt 6120 tgtggactac atgagaagac aaaagagacc ttcttcagga acaattttta atgatgcttt 6180 ctggctggat ttaaattatc tagaagttgc caaggtagct cagtcttgtg ctgctcactt 6240 tacagcttta ctctatgcag aaatctatgc agataagaaa agtatggatg atcaagagaa 6300 aagaagtctt gcatttgaag aaggaagcca gagtacaact atttctagct tgagtgaaaa 6360 aagtaaagaa gaaactggaa taagtttaca ggatcttctc ttagaaatct acagaagtat 6420 aggggagcca gatagtttgt atggctgtgg tggagggaag atgttacaac ccattactag 6480 actacgaaca tatgaacacg aagcaatgtg gggcaaagcc ctagtaacat atgacctcga 6540 aacagcaatc ccctcatcaa cacgccaggc aggaatcatt caggccttgc agaatttggg 6600 actctgccat attctttccg tctatttaaa aggattggat tatgaaaata aagactggtg 6660 tcctgaacta gaagaacttc attaccaagc agcatggagg aatatgcagt gggaccattg 6720 cacttccgtc agcaaagaag tagaaggaac cagttaccat gaatcattgt acaatgctct 6780 acaatctcta agagacagag aattctctac attttatgaa agtctcaaat atgccagagt 6840 aaaagaagtg gaagagatgt gtaagcgcag ccttgagtct gtgtattcgc tctatcccac 6900 acttagcagg ttgcaggcca ttggagagct ggaaagcatt ggggagcttt tctcaagatc 6960 agtcacacat agacaactct ctgaagtata tattaagtgg cagaaacact cccagcttct 7020 caaggacagt gattttagtt ttcaggagcc tatcatggct ctacgcacag tcattttgga 7080 gatcctgatg gaaaaggaaa tggacaactc acaaagagaa tgtattaagg acattctcac 7140 caaacacctt gtagaactct ctatactggc cagaactttc aagaacactc agctccctga 7200 aagggcaata tttcaaatta aacagtacaa ttcagttagc tgtggagtct ctgagtggca 7260 gctggaagaa gcacaagtat tctgggcaaa aaaggagcag agtcttgccc tgagtattct 7320 caagcaaatg atcaagaagt tggatgccag ctgtgcagcg aacaatccca gcctaaaact 7380 tacatacaca gaatgtctga gggtttgtgg caactggtta gcagaaacgt gcttagaaaa 7440 tcctgcggtc atcatgcaga cctatctaga aaaggcagta gaagttgctg gaaattatga 7500 tggagaaagt agtgatgagc taagaaatgg aaaaatgaag gcatttctct cattagcccg 7560 gttttcagat actcaatacc aaagaattga aaactacatg aaatcatcgg aatttgaaaa 7620 caagcaagct ctcctgaaaa gagccaaaga ggaagtaggt ctccttaggg aacataaaat 7680 tcagacaaac agatacacag taaaggttca gcgagagctg gagttggatg aattagccct 7740 gcgtgcactg aaagaggatc gtaaacgctt cttatgtaaa gcagttgaaa attatatcaa 7800 ctgcttatta agtggagaag aacatgatat gtgggtattc cgactttgtt ccctctggct 7860 tgaaaattct ggagtttctg aagtcaatgg catgatgaag agagacggaa tgaagattcc 7920 aacatataaa tttttgcctc ttatgtacca attggctgct agaatgggga ccaagatgat 7980 gggaggccta ggatttcatg aagtcctcaa taatctaatc tctagaattt caatggatca 8040 cccccatcac actttgttta ttatactggc cttagcaaat gcaaacagag atgaatttct 8100 gactaaacca gaggtagcca gaagaagcag aataactaaa aatgtgccta aacaaagctc 8160 tcagcttgat gaggatcgaa cagaggctgc aaatagaata atatgtacta tcagaagtag 8220 gagacctcag atggtcagaa gtgttgaggc actttgtgat gcttatatta tattagcaaa 8280 cttagatgcc actcagtgga agactcagag aaaaggcata aatattccag cagaccagcc 8340 aattactaaa cttaagaatt tagaagatgt tgttgtccct actatggaaa ttaaggtgga 8400 ccacacagga gaatatggaa atctggtgac tatacagtca tttaaagcag aatttcgctt 8460 agcaggaggt gtaaatttac caaaaataat agattgtgta ggttccgatg gcaaggagag 8520 gagacagctt gttaagggcc gtgatgacct gagacaagat gctgtcatgc aacaggtctt 8580 ccagatgtgt aatacattac tgcagagaaa cacggaaact aggaagagga aattaactat 8640 ctgtacttat aaggtggttc ccctctctca gcgaagtggt gttcttgaat ggtgcacagg 8700 aactgtcccc attggtgaat ttcttgttaa caatgaagat ggtgctcata aaagatacag 8760 gccaaatgat ttcagtgcct ttcagtgcca aaagaaaatg atggaggtgc aaaaaaagtc 8820 ttttgaagag aaatatgaag tcttcatgga tgtttgccaa aattttcaac cagttttccg 8880 ttacttctgc atggaaaaat tcttggatcc agctatttgg tttgagaagc gattggctta 8940 tacgcgcagt gtagctactt cttctattgt tggttacata cttggacttg gtgatagaca 9000 tgtacagaat atcttgataa atgagcagtc agcagaactt gtacatatag atctaggtgt 9060 tgcttttgaa cagggcaaaa tccttcctac tcctgagaca gttcctttta gactcaccag 9120 agatattgtg gatggcatgg gcattacggg tgttgaaggt gtcttcagaa gatgctgtga 9180 gaaaaccatg gaagtgatga gaaactctca ggaaactctg ttaaccattg tagaggtcct 9240 tctatatgat ccactctttg actggaccat gaatcctttg aaagctttgt atttacagca 9300 gaggccggaa gatgaaactg agcttcaccc tactctgaat gcagatgacc aagaatgcaa 9360 acgaaatctc agtgatattg accagagttt caacaaagta gctgaacgtg tcttaatgag 9420 actacaagag aaactgaaag gagtggaaga aggcactgtg ctcagtgttg gtggacaagt 9480 gaatttgctc atacagcagg ccatagaccc caaaaatctc agccgacttt tcccaggatg 9540 gaaagcttgg gtgtgatctt cagtatatga attacccttt cattcagcct ttagaaatta 9600 tattttagcc tttattttta acctgccaac atactttaag tagggattaa tatttaagtg 9660 aactattgtg ggtttttttg aatgttggtt ttaatacttg atttaatcac cactcaaaaa 9720 tgttttgatg gtcttaagga acatctctgc tttcactctt tagaaataat ggtcattcgg 9780 gctgggcgca gcggctcacg cctgtaatcc cagcactttg ggaggccgag gtgagcggat 9840 cacaaggtca ggagttcgag accagcctgg ccaagagacc agcctggcca gtatggtgaa 9900 accctgtctc tactaaaaat acaaaaatta gccgagcatg gtggcgggca cctgtaatcc 9960 cagctactcg agaggctgag gcaggagaat ctcttgaacc tgggaggtga aggttgctgt 10020 gggccaaaat catgccattg cactccagcc tgggtgacaa gagcgaaact ccatctcaaa 10080 aaaaaaaaaa aaaaaacaga aacgtatttg gatttttcct agtaagatca ctcagtgtta 10140 ctaaataatg aagttgttat ggagaacaaa tttcaaagac acagttagtg tagttactat 10200 ttttttaagt gtgtattaaa acttctcatt ctattctctt tatcttttaa gcccttctgt 10260 actgtccatg tatgttatct ttctgtgata acttcataga ttgccttcta gttcatgaat 10320 tctcttgtca gatgtatata atctctttta ccctatccat tgggcttctt ctttcagaaa 10380 ttgtttttca tttctaatta tgcatcattt ttcagatctc tgtttcttga tgtcattttt 10440 aatgtttttt taatgttttt tatgtcacta attattttaa atgtctgtac ttgatagaca 10500 ctgtaatagt tctattaaat ttagttcctg ctgtttatat ctgttgattt ttgtatttga 10560 taggctgttc atccagtttt gtctttttga aaagtgagtt tattttcagc aaggctttat 10620 ctatgggaat cttgagtgtc tgtttatgtc atattcccag ggctgttgct gcacacaagc 10680 ccattcttat tttaatttct tggctttagg gtttccatac ctgaagtgta gcataaatac 10740 tgataggaga tttcccaggc caaggcaaac acacttcctc ctcatctcct tgtgctagtg 10800 ggcagaatat ttgattgatg cctttttcac tgagagtata agcttccatg tgtcccacct 10860 ttatggcagg ggtggaagga ggtacattta attcccactg cctgcctttg gcaagccctg 10920 ggttctttgc tccccatata gatgtctaag ctaaaagccg tgggttaatg agactggcaa 10980 attgttccag gacagctaca gcatcagctc acatattcac ctctctggtt tttcattccc 11040 ctcatttttt tctgagacag agtcttgctc tgtcacccag gctggagtgc agtggcatga 11100 tctcagctca ctgaaacctc tgcctcctgg gttcaagcaa ttctcctgcc tcagcctccc 11160 gagtagctgg gactacaggc gtgtgccaac acgcccggct aattttttgt atttttatta 11220 gagacggagt ttcaccgtgt tagccaggat ggtctcgatc gcttgacctc gtgatccacc 11280 ctcctcggcc tcccaaagtg ctgggattac aggtgtgagc caccgcgccc ggcctcattc 11340 ccctcatttt tgaccgtaag gatttcccct ttcttgtaag ttctgctatg tatttaaaag 11400 aatgttttct acattttatc cagcatttct ctgtgttctg ttggaaggga agggcttagg 11460 tatctagttt gatacatagg tagaagtgga acatttctct gtcccccagc tgtcatcata 11520 taagataaac atcagataaa aagccacctg aaagtaaaac tactgactcg tgtattagtg 11580 agtataatct cttctccatc cttaggaaaa tgttcatccc agctgcggag attaacaaat 11640 gggtgattga gctttctcct cgtatttgga ccttgaaggt tatataaatt tttttcttat 11700 gaagagttgg catttctttt tattgccaat ggcaggcact cattcatatt tgatctcctc 11760 accttcccct cccctaaaac caatctccag aactttttgg actataaatt tcttggtttg 11820 acttctggag aactgttcag aatattactt tgcatttcaa attacaaact taccttggtg 11880 tatctttttc ttacaagctg cctaaatgaa tatttggtat atattggtag ttttattact 11940 atagtaaatc aaggaaatgc agtaaactta aaatgtcttt aagaaagccc tgaaatcttc 12000 atgggtgaaa ttagaaatta tcaactagat aatagtatag ataaatgaat ttgtagctaa 12060 ttcttgctag ttgttgcatc cagagagctt tgaataacat cattaatcta ctctttagcc 12120 ttgcatggta tgctatgagg ctcctgttct gttcaagtat tctaatcaat ggctttgaaa 12180 agtttatcaa atttacatac agatcacaag cctaggagaa ataactaatt cacagatgac 12240 agaattaaga ttataaaaga tttttttttt gtaattttag tagagacagg gttgccattg 12300 tattccagcc ttggcgacag agcaagactc tgcctcaaaa aaaaaaaaaa aaaggttttg 12360 gcaagctgga actctttctg caaatgacta agatagaaaa ctgccaagga caaatgagga 12420 gtagttagat tttgaaaata ttaatcatag aatagttgtt gtatgctaag tcactgaccc 12480 atattatgta cagcatttct gatctttact ttgcaagatt agtgatacta tcccaataca 12540 ctgctggaga aatcagaatt tggagaaata agttgtccaa ggcaagaaga tagtaaatta 12600 taagtacaag tgtaatatgg acagtatcta acttgaaaag atttcaggcg aaaagaatct 12660 ggggtttgcc agtcagttgc tcaaaaggtc aatgaaaacc aaatagtgaa gctatcagag 12720 aagctaataa attatagact gcttgaacag ttgtgtccag attaagggag ataatagctt 12780 tcccacccta ctttgtgcag gtcatacctc cccaaagtgt ttacctaatc agtaggttca 12840 caaactcttg gtcattatag tatatgccta aaatgtatgc acttaggaat gctaaaaatt 12900 taaatatggt ctaaagcaaa taaaagcaaa gaggaaaaac tttggacagc gtaaagacta 12960 gaatagtctt ttaaaaagaa agccagtata ttggtttgaa atatagagat gtgtcccaat 13020 ttcaagtatt ttaattgcac cttaatgaaa ttatctattt tctatagatt ttagtactat 13080 tgaatgtatt actttactgt tacctgaatt tattataaag tgtttttgaa taaataattc 13140 taaaagc 13147 <210> 17 <211> 8258 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 17 ttccgggagg agttttggcc tccacacggc tccgtcgggc gccgcgctct tccggcagcg 60 gtagctttgg agacgccggg aacccgcgtt ggcgtggttg actagtgcct cgcagcctca 120 gcatggggga acatggcctg gagctggctt ccatgatccc cgccctgcgg gagctgggca 180 gtgccacacc agaggaatat aatacagttg tacagaagcc aagacaaatt ctgtgtcaat 240 tcattgaccg gatacttaca gatgtaaatg ttgttgctgt agaacttgta aagaaaactg 300 actctcagcc aacctccgtg atgttgcttg atttcatcca gcatatcatg aaatcctccc 360 cacttatgtt tgtaaatgtg agtggaagcc atgaggccaa aggcagttgt attgaattca 420 gtaattggat cataacgaga cttctgcgga ttgcagcaac tccctcctgt catttgttac 480 acaagaaaat ctgtgaagtc atctgttcat tattatttct ttttaaaagc aagagtcctg 540 ctatttttgg ggtactcaca aaagaattat tacaactttt tgaagacttg gtttacctcc 600 atagaagaaa tgtgatgggt catgctgtgg aatggccagt ggtcatgagc cgatttttaa 660 gtcaattaga tgaacacatg ggatatttac aatcagctcc tttgcagttg atgagtatgc 720 aaaatttaga atttattgaa gtcactttat taatggttct tactcgtatt attgcaattg 780 tgttttttag aaggcaagaa ctcttacttt ggcagatagg ttgtgttctg ctagagtatg 840 gtagtccaaa aattaaatcc ctagcaatta gctttttaac agaacttttt cagcttggag 900 gactaccagc acaaccagct agcacttttt tcagctcatt tttggaatta ttaaaacacc 960 ttgtagaaat ggatactgac caattgaaac tctatgaaga gccattatca aagctgataa 1020 agacactatt tccctttgaa gcagaagctt atagaaatat tgaacctgtc tatttaaata 1080 tgctgctgga aaaactctgt gtcatgtttg aagacggtgt gctcatgcgg cttaagtctg 1140 atttgctaaa agcagctttg tgccatttac tgcagtattt ccttaaattt gtgccagctg 1200 ggtatgaatc tgctttacaa gtcaggaagg tctatgtgag aaatatttgt aaagctcttt 1260 tggatgtgct tggaattgag gtagatgcag agtacttgtt gggcccactt tatgcagctt 1320 tgaaaatgga aagtatggaa atcattgagg agattcaatg ccaaactcaa caggaaaacc 1380 tcagcagtaa tagtgatgga atatcaccca aaaggcgtcg tctcagctcg tctctaaacc 1440 cttctaaaag agcaccaaaa cagactgagg aaattaaaca tgtggacatg aaccaaaaga 1500 gcatattatg gagtgcactg aaacagaaag ctgaatccct tcagatttcc cttgaataca 1560 gtggcctaaa gaatcctgtt attgagatgt tagaaggaat tgctgttgtc ttacaactga 1620 ctgctctgtg tactgttcat tgttctcatc aaaacatgaa ctgccgtact ttcaaggact 1680 gtcaacataa atccaagaag aaaccttctg tagtgataac ttggatgtca ttggattttt 1740 acacaaaagt gcttaagagc tgtagaagtt tgttagaatc tgttcagaaa ctggacctgg 1800 aggcaaccat tgataaggtg gtgaaaattt atgatgcttt gatttatatg caagtaaaca 1860 gttcatttga agatcatatc ctggaagatt tatgtggtat gctctcactt ccatggattt 1920 attcccattc tgatgatggc tgtttaaagt tgaccacatt tgccgctaat cttctaacat 1980 taagctgtag gatttcagat agctattcac cacaggcaca atcacgatgt gtgtttcttc 2040 tgactctgtt tccaagaaga atattccttg agtggagaac agcagtttac aactgggccc 2100 tgcagagctc ccatgaagta atccgggcta gttgtgttag tggatttttt atcttattgc 2160 agcagcagaa ttcttgtaac agagttccca agattcttat agataaagtc aaagatgatt 2220 ctgacattgt caagaaagaa tttgcttcta tacttggtca acttgtctgt actcttcacg 2280 gcatgtttta tctgacaagt tctttaacag aacctttctc tgaacacgga catgtggacc 2340 tcttctgtag gaacttgaaa gccacttctc aacatgaatg ttcatcttct caactaaaag 2400 cttctgtctg caagccattc cttttcctac tgaaaaaaaa aatacctagt ccagtaaaac 2460 ttgctttcat agataatcta catcatcttt gtaagcatct tgattttaga gaagatgaaa 2520 cagatgtaaa agcagttctt ggaactttat taaatttaat ggaagatcca gacaaagatg 2580 ttagagtggc ttttagtgga aatatcaagc acatattgga atccttggac tctgaagatg 2640 gatttataaa ggagcttttt gtcttaagaa tgaaggaagc atatacacat gcccaaatat 2700 caagaaataa tgagctgaag gataccttga ttcttacaac aggggatatt ggaagggccg 2760 caaaaggaga tttggtacca tttgcactct tacacttatt gcattgtttg ttatccaagt 2820 cagcatctgt ctctggagca gcatacacag aaattagagc tctggttgca gctaaaagtg 2880 ttaaactgca aagttttttc agccagtata agaaacccat ctgtcagttt ttggtagaat 2940 cccttcactc tagtcagatg acagcacttc cgaatactcc atgccagaat gctgacgtgc 3000 gaaaacaaga tgtggctcac cagagagaaa tggctttaaa tacgttgtct gaaattgcca 3060 acgttttcga ctttcctgat cttaatcgtt ttcttactag gacattacaa gttctactac 3120 ctgatcttgc tgccaaagca agccctgcag cttctgctct cattcgaact ttaggaaaac 3180 aattaaatgt caatcgtaga gagattttaa taaacaactt caaatatatt ttttctcatt 3240 tggtctgttc ttgttccaaa gatgaattag aacgtgccct tcattatctg aagaatgaaa 3300 cagaaattga actggggagc ctgttgagac aagatttcca aggattgcat aatgaattat 3360 tgctgcgtat tggagaacac tatcaacagg tttttaatgg tttgtcaata cttgcctcat 3420 ttgcatccag tgatgatcca tatcagggcc cgagagatat catatcacct gaactgatgg 3480 ctgattattt acaacccaaa ttgttgggca ttttggcttt ttttaacatg cagttactga 3540 gctctagtgt tggcattgaa gataagaaaa tggccttgaa cagtttgatg tctttgatga 3600 agttaatggg acccaaacat gtcagttctg tgagggtgaa gatgatgacc acactgagaa 3660 ctggccttcg attcaaggat gattttcctg aattgtgttg cagagcttgg gactgctttg 3720 ttcgctgcct ggatcatgct tgtctgggct cccttctcag tcatgtaata gtagctttgt 3780 tacctcttat acacatccag cctaaagaaa ctgcagctat cttccactac ctcataattg 3840 aaaacaggga tgctgtgcaa gattttcttc atgaaatata ttttttacct gatcatccag 3900 aattaaaaaa gataaaagcc gttctccagg aatacagaaa ggagacctct gagagcactg 3960 atcttcagac aactcttcag ctctctatga aggccattca acatgaaaat gtcgatgttc 4020 gtattcatgc tcttacaagc ttgaaggaaa ccttgtataa aaatcaggaa aaactgataa 4080 agtatgcaac agacagtgaa acagtagaac ctattatctc acagttggtg acagtgcttt 4140 tgaaaggttg ccaagatgca aactctcaag ctcggttgct ctgtggggaa tgtttagggg 4200 aattgggggc gatagatcca ggtcgattag atttctcaac aactgaaact caaggaaaag 4260 attttacatt tgtgactgga gtagaagatt caagctttgc ctatggatta ttgatggagc 4320 taacaagagc ttaccttgcg tatgctgata atagccgagc tcaagattca gctgcctatg 4380 ccattcagga gttgctttct atttatgact gtagagagat ggagaccaac ggcccaggtc 4440 accaattgtg gaggagattt cctgagcatg ttcgggaaat actagaacct catctaaata 4500 ccagatacaa gagttctcag aagtcaaccg attggtctgg agtaaagaag ccaatttact 4560 taagtaaatt gggtagtaac tttgcagaat ggtcagcatc ttgggcaggt tatcttatta 4620 caaaggttcg acatgatctt gccagtaaaa ttttcacctg ctgtagcatt atgatgaagc 4680 atgatttcaa agtgaccatc tatcttcttc cacatattct ggtgtatgtc ttactgggtt 4740 gtaatcaaga agatcagcag gaggtttatg cagaaattat ggcagttcta aagcatgacg 4800 atcagcatac cataaatacc caagacattg catctgatct gtgtcaactc agtacacaga 4860 ctgtgttctc catgcttgac catctcacac agtgggcaag gcacaaattt caggcactga 4920 aagctgagaa atgtccacac agcaaatcaa acagaaataa ggtagactca atggtatcta 4980 ctgtggatta tgaagactat cagagtgtaa cccgttttct agacctcata ccccaggata 5040 ctctggcagt agcttccttt cgctccaaag catacacacg agctgtaatg cactttgaat 5100 catttattac agaaaagaag caaaatattc aggaacatct tggattttta cagaaattgt 5160 atgctgctat gcatgaacct gatggagtgg ccggagtcag tgcaattaga aaggcagaac 5220 catctctaaa agaacagatc cttgaacatg aaagccttgg cttgctgagg gatgccactg 5280 cttgttatga cagggctatt cagctagaac cagaccagat cattcattat catggtgtag 5340 taaagtccat gttaggtctt ggtcagctgt ctactgttat cactcaggtg aatggagtgc 5400 atgctaacag gtccgagtgg acagatgaat taaacacgta cagagtggaa gcagcttgga 5460 aattgtcaca gtgggatttg gtggaaaact atttggcagc agatggaaaa tctacaacat 5520 ggagtgtcag actgggacag ctattattat cagccaaaaa aagagatatc acagcttttt 5580 atgactcact gaaactagtg agagcagaac aaattgtacc tctttcagct gcaagctttg 5640 aaagaggctc ctaccaacga ggatatgaat atattgtgag attgcacatg ttatgtgagt 5700 tggagcatag catcaaacca cttttccagc attctccagg tgacagttct caagaagatt 5760 ctctaaactg ggtagctcga ctagaaatga cccagaattc ctacagagcc aaggagccta 5820 tcctggctct ccggagggct ttactaagcc tcaacaaaag accagattac aatgaaatgg 5880 ttggagaatg ctggctgcag agtgccaggg tagctagaaa ggctggtcac caccagacag 5940 cctacaatgc tctccttaat gcaggggaat cacgactcgc tgaactgtac gtggaaaggg 6000 caaagtggct ctggtccaag ggtgatgttc accaggcact aattgttctt caaaaaggtg 6060 ttgaattatg ttttcctgaa aatgaaaccc cacctgaggg taagaacatg ttaatccatg 6120 gtcgagctat gctactagtg ggccgattta tggaagaaac agctaacttt gaaagcaatg 6180 caattatgaa aaaatataag gatgtgaccg cgtgcctgcc agaatgggag gatgggcatt 6240 tttaccttgc caagtactat gacaaattga tgcccatggt cacagacaac aaaatggaaa 6300 agcaaggtga tctcatccgg tatatagttc ttcattttgg cagatctcta caatatggaa 6360 atcagttcat atatcagtca atgccacgaa tgttaactct atggcttgat tatggtacaa 6420 aggcatatga atgggaaaaa gctggccgct ccgatcgtgt acaaatgagg aatgatttgg 6480 gtaaaataaa caaggttatc acagagcata caaactattt agctccatat caatttttga 6540 ctgctttttc acaattgatc tctcgaattt gtcattctca cgatgaagtt tttgttgtct 6600 tgatggaaat aatagccaaa gtatttctag cctatcctca acaagcaatg tggatgatga 6660 cagctgtgtc aaagtcatct tatcccatgc gtgtgaacag atgcaaggaa atcctcaata 6720 aagctattca tatgaaaaaa tccttagaga agtttgttgg agatgcaact cgcctaacag 6780 ataagcttct agaattgtgc aataaaccgg ttgatggaag tagttccaca ttaagcatga 6840 gcactcattt taaaatgctt aaaaagctgg tagaagaagc aacatttagt gaaatcctca 6900 ttcctctaca atcagtcatg atacctacac ttccatcaat tctgggtacc catgctaacc 6960 atgctagcca tgaaccattt cctggacatt gggcctatat tgcagggttt gatgatatgg 7020 tggaaattct tgcttctctt cagaaaccaa agaagatttc tttaaaaggc tcagatggaa 7080 agttctacat catgatgtgt aagccaaaag atgacctgag aaaggattgt agactaatgg 7140 aattcaattc cttgattaat aagtgcttaa gaaaagatgc agagtctcgt agaagagaac 7200 ttcatattcg aacatatgca gttattccac taaatgatga atgtgggatt attgaatggg 7260 tgaacaacac tgctggtttg agacctattc tgaccaaact atataaagaa aagggagtgt 7320 atatgacagg aaaagaactt cgccagtgta tgctaccaaa gtcagcagct ttatctgaaa 7380 aactcaaagt attccgagaa tttctcctgc ccaggcatcc tcctattttt catgagtggt 7440 ttctgagaac attccctgat cctacatcat ggtacagtag tagatcagct tactgccgtt 7500 ccactgcagt aatgtcaatg gttggttata ttctggggct tggagaccgt catggtgaaa 7560 atattctctt tgattctttg actggtgaat gcgtacatgt agatttcaat tgtcttttca 7620 ataagggaga aacctttgaa gttccagaaa ttgtgccatt tcgcctgact cataatatgg 7680 ttaatggaat gggtcctatg ggaacagagg gtctttttcg aagagcatgt gaagttacaa 7740 tgaggctgat gcgtgatcag cgagagcctt taatgagtgt cttaaagact tttctacatg 7800 atcctcttgt ggaatggagt aaaccagtga aagggcattc caaagcgcca ctgaatgaaa 7860 ctggagaagt tgtcaatgaa aaggccaaga cccatgttct tgacattgag cagcgactac 7920 aaggtgtaat caagactcga aatagagtga caggactgcc gttatctatt gaaggacatg 7980 tgcattacct tatacaggaa gctactgatg aaaacttact atgccagatg tatcttggtt 8040 ggactccata tatgtgaaat gaaattatgt aaaagaatat gttaataatc taaaagtaat 8100 gcatttggta tgaatctgtg gttgtatctg ttcaattcta aagtacaaca taaatttacg 8160 ttctcagcaa ctgttatttc tctctgatca ttaattatat gtaaaataat atacattcag 8220 ttattaagaa ataaactgct ttcttaatac aaaaaaaa 8258 <210> 18 <211> 5141 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 18 acgttatcca tgaagtgtcg cgagagaaac ggacgccgtt ctctcccgcg gaattcaggt 60 ttacggccct gcgggttctc agagaatttc tagaatttgg aatcgagtgc attttctgac 120 atttgagtac agtacccagg ggttcttgga gaagaacctg gtcccagagg agcttgactg 180 accataaaaa tgagtactgc agatgcactt gatgatgaaa acacatttaa aatattagtt 240 gcaacagata ttcatcttgg atttatggag aaagatgcag tcagaggaaa tgatacgttt 300 gtaacactcg atgaaatttt aagacttgcc caggaaaatg aagtggattt tattttgtta 360 ggtggtgatc tttttcatga aaataagccc tcaaggaaaa cattacatac ctgcctcgag 420 ttattaagaa aatattgtat gggtgatcgg cctgtccagt ttgaaattct cagtgatcag 480 tcagtcaact ttggttttag taagtttcca tgggtgaact atcaagatgg caacctcaac 540 atttcaattc cagtgtttag tattcatggc aatcatgacg atcccacagg ggcagatgca 600 ctttgtgcct tggacatttt aagttgtgct ggatttgtaa atcactttgg acgttcaatg 660 tctgtggaga agatagacat tagtccggtt ttgcttcaaa aaggaagcac aaagattgcg 720 ctatatggtt taggatccat tccagatgaa aggctctatc gaatgtttgt caataaaaaa 780 gtaacaatgt tgagaccaaa ggaagatgag aactcttggt ttaacttatt tgtgattcat 840 cagaacagga gtaaacatgg aagtactaac ttcattccag aacaattttt ggatgacttc 900 attgatcttg ttatctgggg ccatgaacat gagtgtaaaa tagctccaac caaaaatgaa 960 caacagctgt tttatatctc acaacctgga agctcagtgg ttacttctct ttccccagga 1020 gaagctgtaa agaaacatgt tggtttgctg cgtattaaag ggaggaagat gaatatgcat 1080 aaaattcctc ttcacacagt gcggcagttt ttcatggagg atattgttct agctaatcat 1140 ccagacattt ttaacccaga taatcctaaa gtaacccaag ccatacaaag cttctgtttg 1200 gagaagattg aagaaatgct tgaaaatgct gaacgggaac gtctgggtaa ttctcaccag 1260 ccagagaagc ctcttgtacg actgcgagtg gactatagtg gaggttttga acctttcagt 1320 gttcttcgct ttagccagaa atttgtggat cgggtagcta atccaaaaga cattatccat 1380 tttttcaggc atagagaaca aaaggaaaaa acaggagaag agatcaactt tgggaaactt 1440 atcacaaagc cttcagaagg aacaacttta agggtagaag atcttgtaaa acagtacttt 1500 caaaccgcag agaagaatgt gcagctctca ctgctaacag aaagagggat gggtgaagca 1560 gtacaagaat ttgtggacaa ggaggagaaa gatgccattg aggaattagt gaaataccag 1620 ttggaaaaaa cacagcgatt tcttaaagaa cgtcatattg atgccctcga agacaaaatc 1680 gatgaggagg tacgtcgttt cagagaaacc agacaaaaaa atactaatga agaagatgat 1740 gaagtccgtg aggctatgac cagggccaga gcactcagat ctcagtcaga ggagtctgct 1800 tctgccttta gtgctgatga ccttatgagt atagatttag cagaacagat ggctaatgac 1860 tctgatgata gcatctcagc agcaaccaac aaaggaagag gccgaggaag aggtcgaaga 1920 ggtggaagag ggcagaattc agcatcgaga ggagggtctc aaagaggaag agcagacact 1980 ggtctggaga cttctacccg tagcaggaac tcaaagactg ctgtgtcagc atctagaaat 2040 atgtctatta tagatgcctt taaatctaca agacagcagc cttcccgaaa tgtcactact 2100 aagaattatt cagaggtgat tgaggtagat gaatcagatg tggaagaaga catttttcct 2160 accacttcaa agacagatca aaggtggtcc agcacatcat ccagcaaaat catgtcccag 2220 agtcaagtat cgaaaggggt tgattttgaa tcaagtgagg atgatgatga tgatcctttt 2280 atgaacacta gttctttaag aagaaataga agataatata tttaatggca ctgagaaaca 2340 tgcaagatac aggaaaaatg aaaatgttac aagctaagag tttacagttt aagattttaa 2400 gtattgtttc ctgagcataa ctccataagt aagaaatttc tagttcacag acatacaata 2460 gcattgattc accttgtttt tttaacctgg ttgttgtagt aagagctttg tttcaatatc 2520 actcttgagt aaagattaaa ataaagctac cattttacat ttctatttca taatgaaaaa 2580 ctatgtcagt attttaatat ggttacattt agccaaagtt gagggaaaga gcttataaaa 2640 tttaacttct tcataatttt agtaatttcc tagaggttct gggttttctg aaagtaaaac 2700 aatttatgcg aacctatgtc taaattcact gtttgttact atgtatgttt ttttccaatg 2760 cttcttataa gactaaatga ttagaagtac ctaatagttt gaacagatat gtttttattt 2820 aaaagagtag aataaccttt cagaattact gagtttttta ttccagttgt agcaaagatt 2880 tcaaaagatt gtgttcccat taagtggtag taatttcctt tattattctg tatccttaat 2940 ggtgttctct ctctctctct ctctctctct ctctccctct cccccccgtt ccccactctt 3000 cctttctcct ttgctttttc ttctctttca tacatatatg cgtgcctagt tctaggagga 3060 aacgggttaa aaattgtttt aaactacatc ttgaaaatat tgaagaattt gttttaggta 3120 gagtggtcag ttgaacctta cagtaaagta tagaaatata tttaatgtgg aatgtcaatg 3180 ccaggatttc tcattaacaa tattttatct caactttggt tcctgtgata catttctgaa 3240 tgggcaattc cagaaatctt agtagcccat gttaagcttc tattttttac ttgttttcgg 3300 ggagaaataa gaattagaca tcttcagatt taagttaaat aatcccattc tttataatcc 3360 tctgtaaaaa gatccctgag attattcctt cttctagttt tatgcgacag ctttacttta 3420 aaattcaagt tatacatctt gggagtacaa tggcccgaca tttcttcata ggtagaaaca 3480 aatacttgac tcagtgatac tcatgaccat tagaatagtc atacctggaa tgtgtcaaat 3540 tataagagac agacacttgg ttagtggctg cctcatatag cacttttgaa gaggcctaag 3600 tcaaaacttg caatataaca ttctattgac tttcttaaaa atattttttc tgtacctaac 3660 ttgagcataa gggttatttg agcaagtaac attaactcag tggaaggcat tgtcctgtga 3720 aatattctta ggcagatctg cccacatctt tattgaactt gaaatctaat atttctagta 3780 tttgaacaaa gcagaaggtt aagtcaggga agagcagtgc tgtccatgat gtaatggaag 3840 ctaccagggg aggcagtgtc tggatgatgc tgtgctacct acccctgcac aagccatgct 3900 ggctcagtct gagctgtggg ccacatcagc tagtggctct tctcatgcat cagttaggtg 3960 ggtctgggtg agagttatag tgagggaatg gtcactaaag tatcctgaca agttcctagg 4020 aaaaaaggaa taaagttttt ttccttaaaa aaaaaaaaat tgctcttggc tgtgaaaaga 4080 ggtactaaat gcgattcagt tcaccgctaa ggaaagtgat gacatagcag ttacagaggg 4140 tgataaatct ctccagctaa ttcaggtcat tttgtgaata ctatgtatca agccctgaaa 4200 atatggtaaa taaaacgtga cagggaaacc tttttttgat tgaatattgt tacatagtta 4260 aatgtgctat atatccttaa tattttatat tgatcctgca aaatctgttg gttttagggg 4320 agttttgttt tttgtttcta acaattttca gacctgttgg tataggaatg tagaagtctt 4380 tcagatgatt tgaaagcagc tgcatttgct cttggaggct ttgggagagc aggaatgaaa 4440 acattcagag gaagacatct gtagggaatt cttctgttac ttaccaaaga ataagtgtct 4500 ttctggtgtt ttatttccta tcataaaaat acaacagtgc atttacaagg ttaaagattc 4560 ctcgaagttc taggaaattc ttgaaaatat aagtggtgct tagaaaattc aagcatttag 4620 gaatgtgacc tttaattcag gtatgtaaaa gacttttttc ccaaactttt aaaagtagga 4680 aatacaataa atacagaaaa gtcatatggt tgaataaata attataaatt gagcactgat 4740 ggaatccctc tacaggtcaa gaaatagcgc agtgtcctgg atgcccatta tattgttttc 4800 tcctttctgg gtaacaagcc ctaacttctg taatttaaaa gctcctactt ttgccacaag 4860 gtggtgcttc tgccattaga cgcagttagg aggatgcaac tgcaaatcta aaattacgaa 4920 gttagtgtag ttgcaataaa cttagaacat atgcattaat actaaaccta tgcagtaata 4980 ccataattag ccttctaatc atgtaatttg ctttacttag gtatttcatt tggttcagcc 5040 tgttatggaa tttaccagct tgataaattt gcctataaag ttttataaag aaaaggaata 5100 ttttgttttc ataaagagga aaatccattc ttagaaaaaa a 5141 <210> 19 <211> 6597 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 19 tttcccggcg tgccccagga gagcggcgtg gacgcgtgcg ggcctagagg cccacgtgat 60 ccgcagggcg gccgaggcag gaagctgtga gtgcgcggtt gcggggtcgc attgtggcta 120 cggctttgcg tccccggcgg gcagccccag gctggtcccc gcctccgctc tccccaccgg 180 cggggaaagc agctggtgtg ggaggaaagg ctccatcccc cgccccctct ctcccgctgt 240 tggctggcag gatcttttgg cagtcctgtg gcctcgctcc ccgcccggat cctcctgacc 300 ctgagattcg cgggtctcac gtcccgtgca cgccttgctt cggcctcagt taagcctttg 360 tggactccag gtccctggtg agattagaaa cgtttgcaaa catgtcccgg atcgaaaaga 420 tgagcattct gggcgtgcgg agttttggaa tagaggacaa agataagcaa attatcactt 480 tcttcagccc ccttacaatt ttggttggac ccaatggggc gggaaagacg accatcattg 540 aatgtctaaa atatatttgt actggagatt tccctcctgg aaccaaagga aatacatttg 600 tacacgatcc caaggttgct caagaaacag atgtgagagc ccagattcgt ctgcaatttc 660 gtgatgtcaa tggagaactt atagctgtgc aaagatctat ggtgtgtact cagaaaagca 720 aaaagacaga atttaaaact ctggaaggag tcattactag aacaaagcat ggtgaaaagg 780 tcagtctgag ctctaagtgt gcagaaattg accgagaaat gatcagttct cttggggttt 840 ccaaggctgt gctaaataat gtcattttct gtcatcaaga agattctaat tggcctttaa 900 gtgaaggaaa ggctttgaag caaaagtttg atgagatttt ttcagcaaca agatacatta 960 aagccttaga aacacttcgg caggtacgtc agacacaagg tcagaaagta aaagaatatc 1020 aaatggaact aaaatatctg aagcaatata aggaaaaagc ttgtgagatt cgtgatcaga 1080 ttacaagtaa ggaagcccag ttaacatctt caaaggaaat tgtcaaatcc tatgagaatg 1140 aacttgatcc attgaagaat cgtctaaaag aaattgaaca taatctctct aaaataatga 1200 aacttgacaa tgaaattaaa gccttggata gccgaaagaa gcaaatggag aaagataata 1260 gtgaactgga agagaaaatg gaaaaggttt ttcaagggac tgatgagcaa ctaaatgact 1320 tatatcacaa tcaccagaga acagtaaggg agaaagaaag gaaattggta gactgtcatc 1380 gtgaactgga aaaactaaat aaagaatcta ggcttctcaa tcaggaaaaa tcagaactgc 1440 ttgttgaaca gggtcgtcta cagctgcaag cagatcgcca tcaagaacat atccgagcta 1500 gagattcatt aattcagtct ttggcaacac agctagaatt ggatggcttt gagcgtggac 1560 cattcagtga aagacagatt aaaaattttc acaaacttgt gagagagaga caagaagggg 1620 aagcaaaaac tgccaaccaa ctgatgaatg actttgcaga aaaagagact ctgaaacaaa 1680 aacagataga tgagataaga gataagaaaa ctggactggg aagaataatt gagttaaaat 1740 cagaaatcct aagtaagaag cagaatgagc tgaaaaatgt gaagtatgaa ttacagcagt 1800 tggaaggatc ttcagacagg attcttgaac tggaccagga gctcataaaa gctgaacgtg 1860 agttaagcaa ggctgagaaa aacagcaatg tagaaacctt aaaaatggaa gtaataagtc 1920 tccaaaatga aaaagcagac ttagacagga ccctgcgtaa acttgaccag gagatggagc 1980 agttaaacca tcatacaaca acacgtaccc aaatggagat gctgaccaaa gacaaagctg 2040 acaaagatga acaaatcaga aaaataaaat ctaggcacag tgatgaatta acctcactgt 2100 tgggatattt tcccaacaaa aaacagcttg aagactggct acatagtaaa tcaaaagaaa 2160 ttaatcagac cagggacaga cttgccaaat tgaacaagga actagcttca tctgagcaga 2220 ataaaaatca tataaataat gaactaaaaa gaaaggaaga gcagttgtcc agttacgaag 2280 acaagctgtt tgatgtttgt ggtagccagg attttgaaag tgatttagac aggcttaaag 2340 aggaaattga aaaatcatca aaacagcgag ccatgctggc tggagccaca gcagtttact 2400 cccagttcat tactcagcta acagacgaaa accagtcatg ttgccccgtt tgtcagagag 2460 tttttcagac agaggctgag ttacaagaag tcatcagtga tttgcagtct aaactgcgac 2520 ttgctccaga taaactcaag tcaacagaat cagagctaaa aaaaaaggaa aagcggcgtg 2580 atgaaatgct gggacttgtg cccatgaggc aaagcataat tgatttgaag gagaaggaaa 2640 taccagaatt aagaaacaaa ctgcagaatg tcaatagaga catacagcgc ctaaagaacg 2700 acatagaaga acaagaaaca ctcttgggta caataatgcc tgaagaagaa agtgccaaag 2760 tatgcctgac agatgttaca attatggaga ggttccagat ggaacttaaa gatgttgaaa 2820 gaaaaattgc acaacaagca gctaagctac aaggaataga cttagatcga actgtccaac 2880 aagtcaacca ggagaaacaa gagaaacagc acaagttaga cacagtttct agtaagattg 2940 aattgaatcg taagcttata caggaccagc aggaacagat tcaacatcta aaaagtacaa 3000 caaatgagct aaaatctgag aaacttcaga tatccactaa tttgcaacgt cgtcagcaac 3060 tggaggagca gactgtggaa ttatccactg aagttcagtc tttgtacaga gagataaagg 3120 atgctaaaga gcaggtaagc cctttggaaa caacattgga aaagttccag caagaaaaag 3180 aagaattaat caacaaaaaa aatacaagca acaaaatagc acaggataaa ctgaatgata 3240 ttaaagagaa ggttaaaaat attcatggct atatgaaaga cattgagaat tatattcaag 3300 atgggaaaga cgactataag aagcaaaaag aaactgaact taataaagta atagctcaac 3360 taagtgaatg cgagaaacac aaagaaaaga taaatgaaga tatgagactc atgagacaag 3420 atattgatac acagaagata caagaaaggt ggctacaaga taaccttact ttaagaaaaa 3480 gaaatgagga actaaaagaa gttgaagaag aaagaaaaca acatttgaag gaaatgggtc 3540 aaatgcaggt tttgcaaatg aaaagtgaac atcagaagtt ggaagagaac atagacaata 3600 taaaaagaaa tcataatttg gcattagggc gacagaaagg ttatgaagaa gaaattattc 3660 attttaagaa agaacttcga gaaccacaat ttcgggatgc tgaggaaaag tatagagaaa 3720 tgatgattgt tatgaggaca acagaacttg tgaacaagga tctggatatt tattataaga 3780 ctcttgacca agcaataatg aaatttcaca gtatgaaaat ggaagaaatc aataaaatta 3840 tacgtgacct gtggcgaagt acctatcgtg gacaagatat tgaatacata gaaatacggt 3900 ctgatgccga tgaaaatgta tcagcttctg ataaaaggcg gaattataac taccgagtgg 3960 tgatgctgaa gggagacaca gccttggata tgcgaggacg atgcagtgct ggacaaaagg 4020 tattagcctc actcatcatt cgcctggccc tggctgaaac gttctgcctc aactgtggca 4080 tcattgcctt ggatgagcca acaacaaatc ttgaccgaga aaacattgaa tctcttgcac 4140 atgctctggt tgagataata aaaagtcgct cacagcagcg taacttccag cttctggtaa 4200 tcactcatga tgaagatttt gtggagcttt taggacgttc tgaatatgtg gagaaattct 4260 acaggattaa aaagaacatc gatcagtgct cagagattgt gaaatgcagt gttagctccc 4320 tgggattcaa tgttcattaa aaatatccaa gatttaaatg ccatagaaat gtaggtcctc 4380 agaaagtgta taataagaaa cttatttctc atatcaactt agtcaataag aaaatatatt 4440 ctttcaaagg aacattgtgt ctaggatttt ggatgttgag aggttctaaa atcatgaaac 4500 ttgtttcact gaaaattgga cagattgcct gtttctgatt tgctgctctt catcccattc 4560 caggcagcct ctgtcaggcc ttcagggttc agcagtacag ccgagactcg actctgtgcc 4620 tccctcccca gtgcaaatgc atgcttcttc tcaaagcact gttgagaagg agataattac 4680 tgccttgaaa atttatggtt ttggtatttt tttaaatcat agttaaatgt tacctctgaa 4740 tttacttcct tgcatgtggt ttgaaaaact gagtattaat atctgaggat gaccagaaat 4800 ggtgagatgt atgtttggct ctgcttttaa ctttataaat ccagtgacct ctctctctgg 4860 gacttggttt ccccaactaa aatttgaagt agttgaatgg ggtctcaaag tttgacagga 4920 accttaagta atcatctaag tcagtaccca ccaccttctt ctcctacata tcccttccag 4980 atggtcatcc agactcagag ctctctctac agagaggaaa ttctccactg tgcacaccca 5040 cctttggaaa gctctgacca cttgaggcct gatctgccca tcgtgaagaa gcctgtaaca 5100 ctcctctgcg tctatcctgt gtagcatact ggcttcacca tcaatcctga ttcctctcta 5160 agtgggcatt gccatgtgga aggcaagcca ggctcactca cagagtcaag gcctgctccc 5220 tgtagggtcc aaccagacct ggaagaacag gcctctccat ttgctcttca gatgccactt 5280 ctaagaaaag cctaatcaca gtttttcctg gaattgccag ctgacatctt gaatccttcc 5340 attccacaca gaatgcaacc aagtcacacg cttttgaatt atgctttgta gagttttgtc 5400 attcagagtc agccaggacc ataccgggtc ttgattcagt cacatggcat ggttttgtgc 5460 catctgtagc tataatgagc atgtttgcct agacagcttt tctcaactgg gtccagaaga 5520 gaattaagcc ctaaggtcct aaggcatcta tctgtgctag gttaaatggt tggcccccaa 5580 agatagacag gtcctgattt ctagaacccg tgactgttac tttatacagc aaaggaaact 5640 ttgcagatgt gattaaagct aaggacctta agacagagta tcctgggggt ggtggtgggg 5700 tggggggggg tcctaaatgt aatcacgagt aagattaaga gcaaatcaat tctagtcata 5760 tattaaacat ccacaataac caagatattt ttatcccaag aatgcaagat ttcagaaaat 5820 gaaaaatctg ttgataaatc catcactata ataaaaccga aggtgaaaaa aattctgaaa 5880 aaattctagc agctatattt gataaaattc aacatctcct agctttagca aactcacagt 5940 tttgcaaata atattttctt aatgttatct gttgctaaat caaaattaaa cagtcatctt 6000 aactgcaaaa taaaacattt ctcagtaaat attaaagcca gttaccttct atcaacatgt 6060 taatgaaagt gctagttgtt gcagcaaaga ataacaaagg caatacacga tcaatatagg 6120 cagtgaaaca aaagtatcat ttgcaagtta aaacagactt cccaatttta aatctggttt 6180 ccccctgaat atgtggcatc cttggcagca cttctgagag tggctgcttt cattccaaga 6240 agcccatggg tttggaggtg ggataggtgc ctttctggct tctcattgct gcttctagat 6300 cagtctccaa atatccccct tccccacatt ggaatgaata gccatcacag catggatgga 6360 ggttagaatg agccagactg cctgggctca aatcctagca caccactcac tagctgggga 6420 ccttgagcaa gttatttgtc ctgttttctg tttccttata tgtaaaagtg ggtaaaatgg 6480 tacatatttt gtagggttgt tatgaagatt gaatgacatt atttacaaac tgcttagaac 6540 tgcttgccac ctactaaata ctgtgtaagt gttcaagaaa aagctgtctt catttca 6597 <210> 20 <211> 4639 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 20 gagcgcgcac gtcccggagc ccatgccgac cgcaggcgcc gtatccgcgc tcgtctagca 60 gccccggtta cgcggttgca cgtcggcccc agccctgagg agccggaccg atgtggaaac 120 tgctgcccgc cgcgggcccg gcaggaggag aaccatacag acttttgact ggcgttgagt 180 acgttgttgg aaggaaaaac tgtgccattc tgattgaaaa tgatcagtcg atcagccgaa 240 atcatgctgt gttaactgct aacttttctg taaccaacct gagtcaaaca gatgaaatcc 300 ctgtattgac attaaaagat aattctaagt atggtacctt tgttaatgag gaaaaaatgc 360 agaatggctt ttcccgaact ttgaagtcgg gggatggtat tacttttgga gtgtttggaa 420 gtaaattcag aatagagtat gagcctttgg ttgcatgctc ttcttgttta gatgtctctg 480 ggaaaactgc tttaaatcaa gctatattgc aacttggagg atttactgta aacaattgga 540 cagaagaatg cactcacctt gtcatggtat cagtgaaagt taccattaaa acaatatgtg 600 cactcatttg tggacgtcca attgtaaagc cagaatattt tactgaattc ctgaaagcag 660 ttgagtccaa gaagcagcct ccacaaattg aaagttttta cccacctctt gatgaaccat 720 ctattggaag taaaaatgtt gatctgtcag gacggcagga aagaaaacaa atcttcaaag 780 ggaaaacatt tatatttttg aatgccaaac agcataagaa attgagttcc gcagttgtct 840 ttggaggtgg ggaagctagg ttgataacag aagagaatga agaagaacat aatttctttt 900 tggctccggg aacgtgtgtt gttgatacag gaataacaaa ctcacagacc ttaattcctg 960 actgtcagaa gaaatggatt cagtcaataa tggatatgct ccaaaggcaa ggtcttagac 1020 ctattcctga agcagaaatt ggattggcgg tgattttcat gactacaaag aattactgtg 1080 atcctcaggg ccatcccagt acaggattaa agacaacaac tccaggacca agcctttcac 1140 aaggcgtgtc agttgatgaa aaactaatgc caagcgcccc agtgaacact acaacatacg 1200 tagctgacac agaatcagag caagcagata catgggattt gagtgaaagg ccaaaagaaa 1260 tcaaagtctc caaaatggaa caaaaattca gaatgctttc acaagatgca cccactgtaa 1320 aggagtcctg caaaacaagc tctaataata atagtatggt atcaaatact ttggctaaga 1380 tgagaatccc aaactatcag ctttcaccaa ctaaattgcc aagtataaat aaaagtaaag 1440 atagggcttc tcagcagcag cagaccaact ccatcagaaa ctactttcag ccgtctacca 1500 aaaaaaggga aagggatgaa gaaaatcaag aaatgtcttc atgcaaatca gcaagaatag 1560 aaacgtcttg ttctctttta gaacaaacac aacctgctac accctcattg tggaaaaata 1620 aggagcagca tctatctgag aatgagcctg tggacacaaa ctcagacaat aacttattta 1680 cagatacaga tttaaaatct attgtgaaaa attctgccag taaatctcat gctgcagaaa 1740 agctaagatc aaataaaaaa agggaaatgg atgatgtggc catagaagat gaagtattgg 1800 aacagttatt caaggacaca aaaccagagt tagaaattga tgtgaaagtt caaaaacagg 1860 aggaagatgt caatgttaga aaaaggccaa ggatggatat agaaacaaat gacactttca 1920 gtgatgaagc agtaccagaa agtagcaaaa tatctcaaga aaatgaaatt gggaagaaac 1980 gtgaactcaa ggaagactca ctatggtcag ctaaagaaat atctaacaat gacaaacttc 2040 aggatgatag tgagatgctt ccaaaaaagc tgttattgac tgaatttaga tcactggtga 2100 ttaaaaactc tacttccaga aatccatctg gcataaatga tgattatggt caactaaaaa 2160 atttcaagaa attcaaaaag gtcacatatc ctggagcagg aaaacttcca cacatcattg 2220 gaggatcaga tctaatagct catcatgctc gaaagaatac agaactagaa gagtggctaa 2280 ggcaggaaat ggaggtacaa aatcaacatg caaaagaaga gtctcttgct gatgatcttt 2340 ttagatacaa tccttattta aaaaggagaa gataactgag gattttaaaa agaagccatg 2400 gaaaaacttc ctagtaagca tctacttcag gccaacaagg ttatatgaat atatagtgta 2460 tagaagcgat ttaagttaca atgttttatg gcctaaattt attaaataaa atgcacaaaa 2520 ctttgattct tttgtatgta acaattgttt gttctgtttt caggctttgt cattgcatct 2580 ttttttcatt tttaaatgtg ttttgtttat taaatagtta atatagtcac agttcaaaat 2640 tctaaatgta cgtaaggtaa agactaaagt cacccttcca ccattgtcct agctacttgg 2700 ttcccctcag aaaaaaattc atgatactca tttcttatga atctttccag ggatttttga 2760 gtcctattca aattcctatt tttaaataat ttcctacaca aatgatagca taacatatgc 2820 agtgttctac accttgcttt tttacttagt agattaaaaa ttataggaat atcaatataa 2880 tgtttttaat attttttctt ttccattatg ctgtagtctt acctaaactc tggtgatcca 2940 aacaaaatgg cttcagtggt gcagatgtca cctacatgtt attctagtac tagaaactga 3000 agaccatgtg gagacttcat caaacatggg tttagttttc accagaatgg aaagacctgt 3060 accccttttt ggtggtctta ctgagctggg tgggtgtctg ttttgagctt atttagagtc 3120 ctagttttcc tacttataaa gtagaaatgg tgagattgtt ttctttttct accttaaagg 3180 gagatggtaa gaaacaatga atgtcttttt tcaaacttta ttgacaagtg attttcaagt 3240 ctgtgttcaa aaatatattc atgtacctgt gatccagcaa gaagggagtt ccagtcaaga 3300 gtcactacaa ctgattagtt gtttagagaa tgagaaatgg aacagtgagg aatggaggcc 3360 atatttccat gacttccctt gtaaacagaa gcaacagaag ggacaagagg ctggcctcta 3420 catcactctc accttccaaa tcttgtggaa gtgcatctac ttgccagaac caaattaact 3480 tacttccaag ttctggctgc ttgcaggtgg aactccagct gcaagggagt tagggaaatg 3540 aaggtctttt tttaaaagct tctcagcctt cctagggaac agaaattggg tgagccaatc 3600 tgcaatttct actacaggca ttgagaccag ttagattatt gaaatattat agagagttat 3660 gaacacttaa attatgatag tggtatgaca ttggatagaa catgggatac tttagaagta 3720 gaattgacag ggcatattag ttgatgaaat ggagtcattt gagtctctta atagccatgt 3780 atcataatta ccaagtgaag ctggtggaac atatggtctc cattttacag ttaaggaata 3840 taatggacag attaatattg ttctctgtca tgcccacaat ccctttctaa ggaagactgc 3900 cctactatag cagtttttat atttgtcaat ttatgaatat aatgaatgag agttctggta 3960 cctcctgtct ttacaaatat tggtgttgtc agtatttttc ctttttaacc attccaatcg 4020 gtgtgtagtg atgtttcatt ttggttttaa tttgtatatc cctgatagct ataattgggt 4080 catagaaatt ctttatacat tctagatgca agtctcttgt cggatatatg tattgagata 4140 ttacacctag tctgtggctt gactgttttc tttatgtctt ttgatgaata gaagttttaa 4200 attttgacaa ggtcaaattt atttttttct tttgtttgat attttttctc tccaatttaa 4260 ccccaagatt tcagatattc tgctctatta tataaacttt atatttttat atttgtgatc 4320 taccttgaat tgatatgtat gttgtgaatt atggatcagg gttctttttt tcccccatac 4380 aagtatccag tcattgtaac actgtttatt gaaagaatta tcctttcctc attaaattac 4440 cttgccaatt agtaaaaaat caattaacca taatggtgga tctgtttctg gactttctgt 4500 ttggttacac tgaaatgttt gtccatcctt gcactcactc ataccatact gccttgaatt 4560 actgtagctg catagatgct ccttaagttg ggattacatt gtaataaacg caatgtaagt 4620 taaaaaaaaa aaaaaaaaa 4639 <210> 21 <211> 5765 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 21 cagccgcccc tcctgcggcc gctgcggggg ccgccgcctg acttcggaca ccggccccgc 60 acccgccagg aggggaggga aggggaggcg gggagagcga cggcgggggg cgggcggtgg 120 accccgcctc ccccggcaca gcctgctgag gggaagaggg ggtctccgct cttcctcagt 180 gcactctctg actgaagccc ggcgcgtggg gtgcagcggg agtgcgaggg gactggacag 240 gtgggaagat gggaatgagg accgggcggc gggaatgttc tcacttctcc ggattccacc 300 gggatgcagg actctagctg cccagccgca cctgcgaaga gactacactt cccgaggtgc 360 tcagcggcag cgagggcctc cacgcatgcg caccgcggcg cgctgggcgg ggctggatgg 420 gctgtggtgg gagggttgca gcgccgcgag aaaggcgagc cgggccgggg gcggggaaag 480 gggtggggca ggaacggggg cggggacggc gctggagggg cgggtcgggt aggtctcccg 540 gagctgatgt gtactgtgtg cgccggggag gcgccggctt gtactcggca gcgcgggaat 600 aaagtttgct gatttggtgt ctagcctgga tgcctgggtt gcaggccctg cttgtggtgg 660 cgctccacag tcatccggct gaagaagacc tgttggactg gatcttctcg ggttttcttt 720 cagatattgt tttgtattta cccatgaaga cattgttttt tggactctgc aaataggaca 780 tttcaaagat gagtgaaaaa aaattggaaa caactgcaca gcagcggaaa tgtcctgaat 840 ggatgaatgt gcagaataaa agatgtgctg tagaagaaag aaaggcatgt gttcggaaga 900 gtgtttttga agatgacctc cccttcttag aattcactgg atccattgtg tatagttacg 960 atgctagtga ttgctctttc ctgtcagaag atattagcat gagtctatca gatggggatg 1020 tggtgggatt tgacatggag tggccaccat tatacaatag agggaaactt ggcaaagttg 1080 cactaattca gttgtgtgtt tctgagagca aatgttactt gttccacgtt tcttccatgt 1140 cagtttttcc ccagggatta aaaatgttgc ttgaaaataa agcagttaaa aaggcaggtg 1200 taggaattga aggagatcag tggaaacttc tacgtgactt tgatatcaaa ttgaagaatt 1260 ttgtggagtt gacagatgtt gccaataaaa agctgaaatg cacagagacc tggagcctta 1320 acagtctggt taaacacctc ttaggtaaac agctcctgaa agacaagtct atccgctgta 1380 gcaattggag taaatttcct ctcactgagg accagaaact gtatgcagcc actgatgctt 1440 atgctggttt tattatttac cgaaatttag agattttgga tgatactgtg caaaggtttg 1500 ctataaataa agaggaagaa atcctactta gcgacatgaa caaacagttg acttcaatct 1560 ctgaggaagt gatggatctg gctaagcatc ttcctcatgc tttcagtaaa ttggaaaacc 1620 cacggagggt ttctatctta ctaaaggata tttcagaaaa tctatattca ctgaggagga 1680 tgataattgg gtctactaac attgagactg aactgaggcc cagcaataat ttaaacttat 1740 tatcctttga agattcaact actgggggag tacaacagaa acaaattaga gaacatgaag 1800 ttttaattca cgttgaagat gaaacatggg acccaacact tgatcattta gctaaacatg 1860 atggagaaga tgtacttgga aataaagtgg aacgaaaaga agatggattt gaagatggag 1920 tagaagacaa caaattgaaa gagaatatgg aaagagcttg tttgatgtcg ttagatatta 1980 cagaacatga actccaaatt ttggaacagc agtctcagga agaatatctt agtgatattg 2040 cttataaatc tactgagcat ttatctccca atgataatga aaacgatacg tcctatgtaa 2100 ttgagagtga tgaagattta gaaatggaga tgcttaagca tttatctccc aatgataatg 2160 aaaacgatac gtcctatgta attgagagtg atgaagattt agaaatggag atgcttaagt 2220 ctttagaaaa cctcaatagt ggcacggtag aaccaactca ttctaaatgc ttaaaaatgg 2280 aaagaaatct gggtcttcct actaaagaag aagaagaaga tgatgaaaat gaagctaatg 2340 aaggggaaga agatgatgat aaggactttt tgtggccagc acccaatgaa gagcaagtta 2400 cttgcctcaa gatgtacttt ggccattcca gttttaaacc agttcagtgg aaagtgattc 2460 attcagtatt agaagaaaga agagataatg ttgctgtcat ggcaactgga tatggaaaga 2520 gtttgtgctt ccagtatcca cctgtttatg taggcaagat tggccttgtt atctctcccc 2580 ttatttctct gatggaagac caagtgctac agcttaaaat gtccaacatc ccagcttgct 2640 tccttggatc agcacagtca gaaaatgttc taacagatat taaattaggt aaataccgga 2700 ttgtatacgt aactccagaa tactgttcag gtaacatggg cctgctccag caacttgagg 2760 ctgatattgg tatcacgctc attgctgtgg atgaggctca ctgtatttct gagtgggggc 2820 atgattttag ggattcattc aggaagttgg gctccctaaa gacagcactg ccaatggttc 2880 caatcgttgc acttactgct actgcaagtt cttcaatccg ggaagacatt gtacgttgct 2940 taaatctgag aaatcctcag atcacctgta ctggttttga tcgaccaaac ctgtatttag 3000 aagttaggcg aaaaacaggg aatatccttc aggatctgca gccatttctt gtcaaaacaa 3060 gttcccactg ggaatttgaa ggtccaacaa tcatctactg tccttctaga aaaatgacac 3120 aacaagttac aggtgaactt aggaaactga atctatcctg tggaacatac catgcgggca 3180 tgagttttag cacaaggaaa gacattcatc ataggtttgt aagagatgaa attcagtgtg 3240 tcatagctac catagctttt ggaatgggca ttaataaagc tgacattcgc caagtcattc 3300 attacggtgc tcctaaggac atggaatcat attatcagga gattggtaga gctggtcgtg 3360 atggacttca aagttcttgt cacgtcctct gggctcctgc agacattaac ttaaataggc 3420 accttcttac tgagatacgt aatgagaagt ttcgattata caaattaaag atgatggcaa 3480 agatggaaaa atatcttcat tctagcagat gtaggagaca aatcatcttg tctcattttg 3540 aggacaaaca agtacaaaaa gcctccttgg gaattatggg aactgaaaaa tgctgtgata 3600 attgcaggtc cagattggat cattgctatt ccatggatga ctcagaggat acatcctggg 3660 actttggtcc acaagcattt aagcttttgt ctgctgtgga catcttaggc gaaaaatttg 3720 gaattgggct tccaatttta tttctccgag gatctaattc tcagcgtctt gccgatcaat 3780 atcgcaggca cagtttattt ggcactggca aggatcaaac agagagttgg tggaaggctt 3840 tttcccgtca gctgatcact gagggattct tggtagaagt ttctcggtat aacaaattta 3900 tgaagatttg cgcccttacg aaaaagggta gaaattggct tcataaagct aatacagaat 3960 ctcagagcct catccttcaa gctaatgaag aattgtgtcc aaagaagttg cttctgccta 4020 gttcgaaaac tgtatcttcg ggcaccaaag agcattgtta taatcaagta ccagttgaat 4080 taagtacaga gaagaagtct aacttggaga agttatattc ttataaacca tgtgataaga 4140 tttcttctgg gagtaacatt tctaaaaaaa gtatcatggt acagtcacca gaaaaagctt 4200 acagttcctc acagcctgtt atttcggcac aagagcagga gactcagatt gtgttatatg 4260 gcaaattggt agaagctagg cagaaacatg ccaataaaat ggatgttccc ccagctattc 4320 tggcaacaaa caagatactg gtggatatgg ccaaaatgag accaactacg gttgaaaacg 4380 taaaaaggat tgatggtgtt tctgaaggca aagctgccat gttggcccct ctgttggaag 4440 tcatcaaaca tttctgccaa acaaatagtg ttcagacaga cctcttttca agtacaaaac 4500 ctcaagaaga acagaagacg agtctggtag caaaaaataa aatatgcaca ctttcacagt 4560 ctatggccat cacatactct ttattccaag aaaagaagat gcctttgaag agcatagctg 4620 agagcaggat tctgcctctc atgacaattg gcatgcactt atcccaagcg gtgaaagctg 4680 gctgccccct tgatttggag cgagcaggcc tgactccaga ggttcagaag attattgctg 4740 atgttatccg aaaccctccc gtcaactcag atatgagtaa aattagccta atcagaatgt 4800 tagttcctga aaacattgac acgtacctta tccacatggc aattgagatc cttaaacatg 4860 gtcctgacag cggacttcaa ccttcatgtg atgtcaacaa aaggagatgt tttcccggtt 4920 ctgaagagat ctgttcaagt tctaagagaa gcaaggaaga agtaggcatc aatactgaga 4980 cttcatctgc agagagaaag agacgattac ctgtgtggtt tgccaaagga agtgatacca 5040 gcaagaaatt aatggacaaa acgaaaaggg gaggtctttt tagttaagct ggcaattacc 5100 agaacaatta tgtttcttgc tgtattataa gaggatagct atattttatt tctgaagagt 5160 aaggagtagt attttggctt aaaaatcatt ctaattacaa agttcactgt ttattgaaga 5220 actggcatct taaatcagcc ttccgcaatt catgtagttt ctgggtcttc tgggagccta 5280 cgtgagtaca tcacctaaca gaatattaaa ttagacttcc tgtaagattg ctttaagaaa 5340 ctgttactgt cctgttttct aatctcttta ttaaaacagt gtatttggaa aatgttatgt 5400 gctctgattt gatatagata acagattagt agttacatgg taattatgtg atataaaata 5460 ttcatatatt atcaaaattc tgttttgtaa atgtaagaaa gcatagttat tttacaaatt 5520 gtttttactg tcttttgaag aagttcttaa atacgttgtt aaatggtatt agttgaccag 5580 ggcagtgaaa atgaaaccgc attttgggtg ccattaaata gggaaaaaac atgtaaaaaa 5640 tgtaaaatgg agaccaattg cactaggcaa gtgtatattt tgtattttat atacaatttc 5700 tattattttt caagtaataa aacaatgttt ttcatactga atattaaaaa aaaaaaaaaa 5760 aaaaa 5765 <210> 22 <211> 4528 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 22 ggcgggaagt gagccagggc ttggcgcggc ggccgtggtt gcggcgcggg aagtttggat 60 cctggttccg tccgctagga gtctgcgtgc gaggattatg gctgctgttc ctcaaaataa 120 tctacaggag caactagaac gtcactcagc cagaacactt aataataaat taagtctttc 180 aaaaccaaaa ttttcaggtt tcacttttaa aaagaaaaca tcttcagata acaatgtatc 240 tgtaactaat gtgtcagtag caaaaacacc tgtattaaga aataaagatg ttaatgttac 300 cgaagacttt tccttcagtg aacctctacc caacaccaca aatcagcaaa gggtcaagga 360 cttctttaaa aatgctccag caggacagga aacacagaga ggtggatcaa aatcattatt 420 gccagatttc ttgcagactc cgaaggaagt tgtatgcact acccaaaaca caccaactgt 480 aaagaaatcc cgggatactg ctctcaagaa attagaattt agttcttcac cagattcttt 540 aagtaccatc aatgattggg atgatatgga tgactttgat acttctgaga cttcaaaatc 600 atttgttaca ccaccccaaa gtcactttgt aagagtaagc actgctcaga aatcaaaaaa 660 gggtaagaga aactttttta aagcacagct ttatacaaca aacacagtaa agactgattt 720 gcctccaccc tcctctgaaa gcgagcaaat agatttgact gaggaacaga aggatgactc 780 agaatggtta agcagcgatg tgatttgcat cgatgatggc cccattgctg aagtgcatat 840 aaatgaagat gctcaggaaa gtgactctct gaaaactcat ttggaagatg aaagagataa 900 tagcgaaaag aagaagaatt tggaagaagc tgaattacat tcaactgaga aagttccatg 960 tattgaattt gatgatgatg attatgatac ggattttgtt ccaccttctc cagaagaaat 1020 tatttctgct tcttcttcct cttcaaaatg ccttagtacg ttaaaggacc ttgacacctc 1080 tgacagaaaa gaggatgttc ttagcacatc aaaagatctt ttgtcaaaac ctgagaaaat 1140 gagtatgcag gagctgaatc cagaaaccag cacagactgt gacgctagac agataagttt 1200 acagcagcag cttattcatg tgatggagca catctgtaaa ttaattgata ctattcctga 1260 tgataaactg aaacttttgg attgtgggaa cgaactgctt cagcagcgga acataagaag 1320 gaaacttcta acggaagtag attttaataa aagtgatgcc agtcttcttg gctcattgtg 1380 gagatacagg cctgattcac ttgatggccc tatggagggt gattcctgcc ctacagggaa 1440 ttctatgaag gagttaaatt tttcacacct tccctcaaat tctgtttctc ctggggactg 1500 tttactgact accaccctag gaaagacagg attctctgcc accaggaaga atctttttga 1560 aaggccttta ttcaataccc atttacagaa gtcctttgta agtagcaact gggctgaaac 1620 accaagacta ggaaaaaaaa atgaaagctc ttatttccca ggaaatgttc tcacaagcac 1680 tgctgtgaaa gatcagaata aacatactgc ttcaataaat gacttagaaa gagaaaccca 1740 accttcctat gatattgata attttgacat agatgacttt gatgatgatg atgactggga 1800 agacataatg cataatttag cagccagcaa atcttccaca gctgcctatc aacccatcaa 1860 ggaaggtcgg ccaattaaat cagtatcaga aagactttcc tcagccaaga cagactgtct 1920 tccagtgtca tctactgctc aaaatataaa cttctcagag tcaattcaga attatactga 1980 caagtcagca caaaatttag catccagaaa tctgaaacat gagcgtttcc aaagtcttag 2040 ttttcctcat acaaaggaaa tgatgaagat ttttcataaa aaatttggcc tgcataattt 2100 tagaactaat cagctagagg cgatcaatgc tgcactgctt ggtgaagact gttttatcct 2160 gatgccgact ggaggtggta agagtttgtg ttaccagctc cctgcctgtg tttctcctgg 2220 ggtcactgtt gtcatttctc ccttgagatc acttatcgta gatcaagtcc aaaagctgac 2280 ttccttggat attccagcta catatctgac aggtgataag actgactcag aagctacaaa 2340 tatttacctc cagttatcaa aaaaagaccc aatcataaaa cttctatatg tcactccaga 2400 aaagatctgt gcaagtaaca gactcatttc tactctggag aatctctatg agaggaagct 2460 cttggcacgt tttgttattg atgaagcaca ttgtgtcagt cagtggggac atgattttcg 2520 tcaagattac aaaagaatga atatgcttcg ccagaagttt ccttctgttc cggtgatggc 2580 tcttacggcc acagctaatc ccagggtaca gaaggacatc ctgactcagc tgaagattct 2640 cagacctcag gtgtttagca tgagctttaa cagacataat ctgaaatact atgtattacc 2700 gaaaaagcct aaaaaggtgg catttgattg cctagaatgg atcagaaagc accacccata 2760 tgattcaggg ataatttact gcctctccag gcgagaatgt gacaccatgg ctgacacgtt 2820 acagagagat gggctcgctg ctcttgctta ccatgctggc ctcagtgatt ctgccagaga 2880 tgaagtgcag cagaagtgga ttaatcagga tggctgtcag gttatctgtg ctacaattgc 2940 atttggaatg gggattgaca aaccggacgt gcgatttgtg attcatgcat ctctccctaa 3000 atctgtggag ggttactacc aagaatctgg cagagctgga agagatgggg aaatatctca 3060 ctgcctgctt ttctatacct atcatgatgt gaccagactg aaaagactta taatgatgga 3120 aaaagatgga aaccatcata caagagaaac tcacttcaat aatttgtata gcatggtaca 3180 ttactgtgaa aatataacgg aatgcaggag aatacagctt ttggcctact ttggtgaaaa 3240 tggatttaat cctgattttt gtaagaaaca cccagatgtt tcttgtgata attgctgtaa 3300 aacaaaggat tataaaacaa gagatgtgac tgacgatgtg aaaagtattg taagatttgt 3360 tcaagaacat agttcatcac aaggaatgag aaatataaaa catgtaggtc cttctggaag 3420 atttactatg aatatgctgg tcgacatttt cttggggagt aagagtgcaa aaatccagtc 3480 aggtatattt ggaaaaggat ctgcttattc acgacacaat gccgaaagac tttttaaaaa 3540 gctgatactt gacaagattt tggatgaaga cttatatatc aatgccaatg accaggcgat 3600 cgcttatgtg atgctcggaa ataaagccca aactgtacta aatggcaatt taaaggtaga 3660 ctttatggaa acagaaaatt ccagcagtgt gaaaaaacaa aaagcgttag tagcaaaagt 3720 gtctcagagg gaagagatgg ttaaaaaatg tcttggagaa cttacagaag tctgcaaatc 3780 tctggggaaa gtttttggtg tccattactt caatattttt aataccgtca ctctcaagaa 3840 gcttgcagaa tctttatctt ctgatcctga ggttttgctt caaattgatg gtgttactga 3900 agacaaactg gaaaaatatg gtgcggaagt gatttcagta ttacagaaat actctgaatg 3960 gacatcgcca gctgaagaca gttccccagg gataagcctg tccagcagca gaggccccgg 4020 aagaagtgcc gctgaggagc tcgacgagga aatacccgta tcttcccact actttgcaag 4080 taaaaccaga aatgaaagga agaggaaaaa gatgccagcc tcccaaaggt ctaagaggag 4140 aaaaactgct tccagtggtt ccaaggcaaa gggggggtct gccacatgta gaaagatatc 4200 ttccaaaacg aaatcctcca gcatcattgg atccagttca gcctcacata cttctcaagc 4260 gacatcagga gccaatagca aattggggat tatggctcca ccgaagccta taaatagacc 4320 gtttcttaag ccttcatatg cattctcata acaaccgaat ctcaatgtac atagaccctc 4380 tttcttgttt gtcagcatct gaccatctgt gactataaag ctgttattct tgttatacca 4440 tttgaagttt ttactcgtct ctattaatat ttaaataaat gctggggggt gatagttctt 4500 ctttttaaaa taaacatttt cttttgaa 4528 <210> 23 <211> 3840 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 23 ctggacgatc gcaagcgcgg aggccgggcg ggcgcgcgcg ccatggagcg gctgcgggac 60 gtgcgggagc ggctgcaggc gtgggagcgc gcgttccgac ggcagcgcgg gcggcgaccg 120 agccaggacg acgtggaggc ggcgccggag gagacccgcg cgctctaccg ggaataccgc 180 actctgaagc gtaccacggg ccaggccggc ggcgggctcc gcagctccga gtcgctcccc 240 gcggcggccg aagaggcgcc agagccccgc tgctgggggc cccatctgaa tcgggctgcg 300 accaagagtc cacagcctac gccagggcgg agccgccagg gctcggtgcc ggactacggg 360 cagcggctca aggccaatct gaaaggcacc ctgcaggccg gaccagccct gggccgcaga 420 ccgtggcctc taggaagagc ctcatctaag gcatccaccc caaagccccc aggtacaggg 480 cctgtcccct cctttgcaga aaaagtcagt gatgagcctc cacagctccc tgagccccag 540 ccaaggccag gccggctcca gcatctgcag gcatccctga gccagcggct gggctcccta 600 gatcctggct ggttacagcg atgtcacagt gaggtcccag attttctggg ggcccccaaa 660 gcctgcaggc ctgatctagg ctcagaggaa tcacaacttc tgatccctgg tgagtcggct 720 gtccttggtc ctggtgctgg ctcccagggc ccagaggctt cagccttcca agaagtcagc 780 atccgtgtgg ggagccccca gcccagcagc agtggaggcg agaagcggag atggaacgag 840 gagccctggg agagccccgc acaggtccag caggagagca gccaagctgg acccccatcg 900 gagggggctg gggctgtagc agttgaggaa gaccctccag gggaacctgt acaggcacag 960 ccacctcagc cctgcagcag cccatcgaac cccaggtacc acggactcag cccctccagt 1020 caagctaggg ctgggaaggc tgagggcaca gcccccctgc acatcttccc tcggctggcc 1080 cgccatgaca ggggcaatta cgtacggctc aacatgaagc agaaacacta cgtgcggggc 1140 cgggcactcc gtagcaggct cctccgcaag caggcatgga agcagaagtg gcggaagaaa 1200 ggggagtgtt ttgggggtgg tggtgccaca gtcacaacca aggagtcttg tttcctgaac 1260 gagcagttcg atcactgggc agcccagtgt ccccggccag caagtgagga agacacagat 1320 gctgttgggc ctgagccact ggttccttca ccacaacctg tacctgaggt gcccagcctg 1380 gaccccaccg tgctgccact ctactccctg gggccctcag ggcagttggc agagacgccg 1440 gctgaggtgt tccaggccct ggagcagctg gggcaccaag cctttcgccc tgggcaggag 1500 cgtgcagtca tgcggatcct gtctggcatc tccacgctgc tggtgctgcc tacaggtgcc 1560 ggcaagtccc tgtgctacca gctcccagcg ctgctctaca gccggcgcag cccctgcctc 1620 acgttggtcg tctctcccct gctgtcactc atggatgacc aggtgtctgg cctgccaccg 1680 tgtctcaagg cggcctgcat acactcgggc atgaccagga agcaacggga atctgtcctg 1740 cagaagattc gggcagccca ggtacacgtg ctgatgctga cacctgaggc actggtgggg 1800 gcgggaggcc tccctccagc cgcacagctg cctccagttg cttttgcctg cattgatgag 1860 gcccactgcc tctcccagtg gtcccacaac ttccggccct gctacctgcg cgtctgcaag 1920 gtgcttcggg agcgcatggg cgtgcactgc ttcctgggcc tcacagccac agccacacgc 1980 cgcactgcca gtgacgtggc acagcacctg gctgtggctg aagagcctga cctccacggg 2040 ccagccccag ttcccaccaa cctgcacctt tccgtgtcca tggacaggga cacagaccag 2100 gcactgttga cgctgctgca aggcaaacgt tttcaaaacc tcgattccat tatcatttac 2160 tgcaaccggc gcgaggacac agagcggatc gctgcgctcc tccgaacctg cctgcacgca 2220 gcctgggtcc cagggtctgg aggtcgtgcc cccaaaacca cagccgaggc ctaccacgcg 2280 ggcatgtgca gccgggaacg gcggcgggta cagcgagcct tcatgcaggg ccagttgcgg 2340 gtggtggtgg ccacggtggc ctttgggatg gggctggacc ggccagatgt gcgggctgtg 2400 ctgcatctgg ggctgccccc aagcttcgag agctacgtgc aggccgtggg ccgggccggg 2460 cgtgacgggc agcctgccca ctgccacctc ttcctgcagc cccagggcga agacctgcga 2520 gagctgcgca gacatgtgca cgccgacagc acggacttcc tggctgtgaa gaggctggta 2580 cagcgcgtgt tcccagcctg cacctgcacc tgcaccaggc cgccctcgga gcaggaaggg 2640 gccgtgggtg gggagaggcc tgtgcccaag tacccccctc aagaggctga gcagcttagc 2700 caccaagcag ccccaggacc cagaagggtc tgcatgggcc atgagcgggc actcccaata 2760 cagcttaccg tacaggcttt ggacatgccg gaggaggcca tcgagacttt gctgtgctac 2820 ctggagctgc acccacacca ctggctggag ctgctggcga ccacctatac ccattgccgt 2880 ctgaactgcc ctgggggccc tgcccagctc caggccctgg cccacaggtg tccccctttg 2940 gctgtgtgct tggcccagca gctgcctgag gacccagggc aaggcagcag ctccgtggag 3000 tttgacatgg tcaagctggt ggactccatg ggctgggagc tggcctctgt gcggcgggct 3060 ctctgccagc tgcagtggga ccacgagccc aggacaggtg tgcggcgtgg gacaggggtg 3120 cttgtggagt tcagtgagct ggccttccac cttcgcagcc cgggggacct gaccgctgag 3180 gagaaggacc agatatgtga cttcctctat ggccgtgtgc aggcccggga gcgccaggcc 3240 ctggcccgtc tgcgcagaac cttccaggcc tttcacagcg tagccttccc cagctgcggg 3300 ccctgcctgg agcagcagga tgaggagcgc agcaccaggc tcaaggacct gctcggccgc 3360 tactttgagg aagaggaagg gcaggagccg ggaggcatgg aggacgcaca gggccccgag 3420 ccagggcagg ccagactcca ggattgggag gaccaggtcc gctgcgacat ccgccagttc 3480 ctgtccctga ggccagagga gaagttctcc agcagggctg tggcccgcat cttccacggc 3540 atcggaagcc cctgctaccc ggcccaggtg tacgggcagg accgacgctt ctggagaaaa 3600 tacctgcacc tgagcttcca tgccctggtg ggcctggcca cggaagagct cctgcaggtg 3660 gcccgctgac tgcactgcat tgggggatgt cgggtagagc tggggttgtc agaggctagg 3720 gcagtgactg aggacctggg caaaacctgc cacagggtgt gggaacgagg aggctccaaa 3780 atgcagaata aaaaatgctc actttgtttt tatgggaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 3840 <210> 24 <211> 4077 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 24 gccagtgagc ccccgcgacg gtggcccgga cggaaaagat acctcggcgg cgtgggcccg 60 gctccctgct ccaggaccta gggatcttgg ccttccaccc tcctccgagc accaggactc 120 cctccagttc cgtacccgag gcctccgtgg tgaagaggtg ccggacccga tgagctcggg 180 agtccaccat cgctctgcaa gccgcagtta aacgagaaga ttcatcaccg ctttgatggc 240 tgcctcacaa acttcacaaa ctgttgcatc tcacgttcct tttgcagatt tgtgttcaac 300 tttagaacga atacagaaaa gtaaaggacg tgcagaaaaa atcagacact tcagggaatt 360 tttagattct tggagaaaat ttcatgatgc tcttcataag aaccacaaag atgtcacaga 420 ctctttttat ccagcaatga gactaattct tcctcagcta gaaagagaga gaatggccta 480 tggaattaaa gaaactatgc ttgctaagct ttatattgag ttgcttaatt tacctagaga 540 tggaaaagat gccctcaaac ttttaaacta cagaacaccc actggaactc atggagatgc 600 tggagacttt gcaatgattg catattttgt gttgaagcca agatgtttac agaaaggaag 660 tttaaccata cagcaagtaa acgacctttt agactcaatt gccagcaata attctgctaa 720 aagaaaagac ctaataaaaa agagccttct tcaacttata actcagagtt cagcacttga 780 gcaaaagtgg cttatacgga tgatcataaa ggatttaaag cttggtgtta gtcagcaaac 840 tatcttttct gtttttcata atgatgctgc tgagttgcat aatgtcacta cagatctgga 900 aaaagtctgt aggcaactgc atgatccttc tgtaggactc agtgatattt ctatcacttt 960 attttctgca tttaaaccaa tgctagctgc tattgcagat attgagcaca ttgagaagga 1020 tatgaaacat cagagtttct acatagaaac caagctagat ggtgaacgta tgcaaatgca 1080 caaagatgga gatgtatata aatacttctc tcgaaatgga tataactaca ctgatcagtt 1140 tggtgcttct cctactgaag gttctcttac cccattcatt cataatgcat tcaaagcaga 1200 tatacaaatc tgtattcttg atggtgagat gatggcctat aatcctaata cacaaacttt 1260 catgcaaaag ggaactaagt ttgatattaa aagaatggta gaggattctg atctgcaaac 1320 ttgttattgt gtttttgatg tattgatggt taataataaa aagctagggc atgagactct 1380 gagaaagagg tatgagattc ttagtagtat ttttacacca attccaggta gaatagaaat 1440 agtgcagaaa acacaagctc atactaagaa tgaagtaatt gatgcattga atgaagcaat 1500 agataaaaga gaagagggaa ttatggtaaa acaacctcta tccatctaca agccagacaa 1560 aagaggtgaa gggtggttaa aaattaaacc agagtatgtc agtggactaa tggatgaatt 1620 ggacatttta attgttggag gatattgggg taaaggatca cggggtggaa tgatgtctca 1680 ttttctgtgt gcagtagcag agaagccccc tcctggtgag aagccatctg tgtttcatac 1740 tctctctcgt gttgggtctg gctgcaccat gaaagaactg tatgatctgg gtttgaaatt 1800 ggccaagtat tggaagcctt ttcatagaaa agctccacca agcagcattt tatgtggaac 1860 agagaagcca gaagtataca ttgaaccttg taattctgtc attgttcaga ttaaagcagc 1920 agagatcgta cccagtgata tgtataaaac tggctgcacc ttgcgttttc cacgaattga 1980 aaagataaga gatgacaagg agtggcatga gtgcatgacc ctggacgacc tagaacaact 2040 tagggggaag gcatctggta agctcgcatc taaacacctt tatataggtg gtgatgatga 2100 accacaagaa aaaaagcgga aagctgcccc aaagatgaag aaagttattg gaattattga 2160 gcacttaaaa gcacctaacc ttactaacgt taacaaaatt tctaatatat ttgaagatgt 2220 agagttttgt gttatgagtg gaacagatag ccagccaaag cctgacctgg agaacagaat 2280 tgcagaattt ggtggttata tagtacaaaa tccaggccca gacacgtact gtgtaattgc 2340 agggtctgag aacatcagag tgaaaaacat aattttgtca aataaacatg atgttgtcaa 2400 gcctgcatgg cttttagaat gttttaagac caaaagcttt gtaccatggc agcctcgctt 2460 tatgattcat atgtgcccat caaccaaaga acattttgcc cgtgaatatg attgctatgg 2520 tgatagttat ttcattgata cagacttgaa ccaactgaag gaagtattct caggaattaa 2580 aaattctaac gagcagactc ctgaagaaat ggcttctctg attgctgatt tagaatatcg 2640 gtattcctgg gattgctctc ctctcagtat gtttcgacgc cacaccgttt atttggactc 2700 gtatgctgtt attaatgacc tgagtaccaa aaatgagggg acaaggttag ctattaaagc 2760 cttggagctt cggtttcatg gagcaaaagt agtttcttgt ttagctgagg gagtgtctca 2820 tgtaataatt ggggaagatc atagtcgtgt tgcagatttt aaagctttta gaagaacttt 2880 taagagaaag tttaaaatcc taaaagaaag ttgggtaact gattcaatag acaagtgtga 2940 attacaagaa gaaaaccagt atttgattta aagctaggtt tcctagtgag gaaagcctct 3000 gatctggcag actcattgca gcaggtggta atgataaaat actaaactac attttatttt 3060 tgtatcttaa aaatctatgc ctaaaaagta tcattacata taggaaaaca ataattttaa 3120 cttttaaggt tgaaaagaca atagcccaaa gccaagaaag aaaaattatc ttgaatgtag 3180 tattcaatga ttttttatga tcaaggtgaa ataaacagtc taaagaagag gtgtttttat 3240 aatatccata tagaaatcta gaatttttac ttagatacta ataaaataca tttagaaact 3300 tttaaagtca tgaaaaagca ttaaccttct aaacagtata ttctaaaaag tcaaaacgtt 3360 aacaatagtt tttatctaat aaaagcactg caagaaaata gggtagaatt gttacagctg 3420 gacttgtaaa aatatgtctt tttactcagg gtttaaaatg tcccatttaa atatgaaatg 3480 taaacaaatt tgttttttaa ggttaaggcc aaatgtaaca ataaaaccct gtcgatggtt 3540 ttagctaaat tagaggaagt tgtatgagac ttaatgatct aaaaacttaa aattgaattg 3600 gtttgattaa aaataaagct tgcaatttta aaagtagctc acatttaatt tcttgtgtga 3660 aatagaacat gctttaaagg aagtattttt atgtgaattt gcattccagt ataaatagta 3720 ttcacaaaaa agattttcct agattttatc tattgaatag gtgtcaatat ggcatgcata 3780 ttgtaacttt cattagaaat aagttgcttt gacttttaaa aatgacatag ttagattatt 3840 taaagtcaat gtatatagta tatattatgt atggatttat ataccaaatt ttggaataca 3900 gcctatctca tgaccatatt gaaatgtacg gaatttgatc catgcgatac tatgtgtgca 3960 ttatttgaaa gttattggaa attttattca aaccgtggaa caaatgtatg tgattttgtt 4020 atacttctta atttaaataa aatatttaat gcactattaa aaaaaaaaaa aaaaaaa 4077 <210> 25 <211> 1688 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 25 cgggatttag atcacgtccc gcaggccggc ggaagtagct gatactctca ttggttgcaa 60 aaccttgatc tgtgaaagcg ggcgttttgg aagataccgg aagtagagtc acggagaggt 120 attaagaaat ggagagaaaa ataagcagaa tccaccttgt ttctgaaccc agtataactc 180 attttctaca agtatcttgg gagaaaacac tggaatctgg ttttgttatt acacttactg 240 atggtcattc agcatggact gggacagttt ctgaatcaga gatttcccaa gaagctgatg 300 acatggcaat ggaaaaaggg aaatatgttg gtgaactgag aaaagcattg ttgtcaggag 360 caggaccagc tgatgtatac acgtttaatt tttctaaaga gtcttgttat ttcttctttg 420 agaaaaacct gaaagatgtc tcattcagac ttggttcctt caacctagag aaagttgaaa 480 acccagctga agtcattaga gaacttattt gttattgctt ggacaccatt gcagaaaatc 540 aagccaaaaa tgagcacctg cagaaagaaa atgaaaggct tctgagagat tggaatgatg 600 ttcaaggacg atttgaaaaa tgtgtgagtg ctaaggaagc tttggagact gatctttata 660 agcggtttat tctggtgttg aatgagaaga aaacaaaaat cagaagtttg cataataaat 720 tattaaatgc agctcaagaa cgagaaaagg acatcaaaca agaaggggaa actgcaatct 780 gttctgaaat gactgctgac cgagatccag tctatgatga gagtactgat gaggaaagtg 840 aaaaccaaac tgatctctct gggttggctt cagctgctgt aagtaaagat gattccatta 900 tttcaagtct tgatgtcact gatattgcac caagtagaaa aaggagacag cgaatgcaaa 960 gaaatcttgg gacagaacct aaaatggctc ctcaggagaa tcagcttcaa gaaaaggaaa 1020 agcctgattc ttcactacct gagacgtcta aaaaggagca catctcagct gaaaacatgt 1080 ctttagaaac tctgagaaac agcagcccag aagacctctt tgatgagatt taacagtctc 1140 aaaaaatact ttgatgttca ctagactatg ttttctattc atttctttaa aatgaaaaag 1200 gagaatttca agtcagcagc cgctattacc gtatcttaca atttaattac atacacagtg 1260 aattgaaacc attgtgcaaa atggattaca catgtataca aagatacgat ttgatgatga 1320 cactggcaca ttattctaaa ctattcattc agcatgccta taattacata aattgtatga 1380 gactttttgt tgcaaaggac acatttatca tattcattca cacatattat atgtgatagc 1440 tgtccaacat cctgtctggg aagattttga aaacaggaca aagaaaacat cattttaaaa 1500 tgtcttcagc tttttttgaa tagacgtatt caaacatatt ctgaacattg atgtttgaac 1560 attttaattt gtgtgatgat gtagaaaata taattttagt ttgtacataa acattgtgaa 1620 aatctgataa taaaattttt gatacattga aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 1680 aaaaaaaa 1688 <210> 26 <211> 13509 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 26 ggggcatttc cgggtccggg ccgagcgggc gcacgcgcgg gagcgggact cggcggcatg 60 gcgggctccg gagccggtgt gcgttgctcc ctgctgcggc tgcaggagac cttgtccgct 120 gcggaccgct gcggtgctgc cctggccggt catcaactga tccgcggcct ggggcaggaa 180 tgcgtcctga gcagcagccc cgcggtgctg gcattacaga catctttagt tttttccaga 240 gatttcggtt tgcttgtatt tgtccggaag tcactcaaca gtattgaatt tcgtgaatgt 300 agagaagaaa tcctaaagtt tttatgtatt ttcttagaaa aaatgggcca gaagatcgca 360 ccttactctg ttgaaattaa gaacacttgt accagtgttt atacaaaaga tagagctgct 420 aaatgtaaaa ttccagccct ggaccttctt attaagttac ttcagacttt tagaagttct 480 agactcatgg atgaatttaa aattggagaa ttatttagta aattctatgg agaacttgca 540 ttgaaaaaaa aaataccaga tacagtttta gaaaaagtat atgagctcct aggattattg 600 ggtgaagttc atcctagtga gatgataaat aatgcagaaa acctgttccg cgcttttctg 660 ggtgaactta agacccagat gacatcagca gtaagagagc ccaaactacc tgttctggca 720 ggatgtctga aggggttgtc ctcacttctg tgcaacttca ctaagtccat ggaagaagat 780 ccccagactt caagggagat ttttaatttt gtactaaagg caattcgtcc tcagattgat 840 ctgaagagat atgctgtgcc ctcagctggc ttgcgcctat ttgccctgca tgcatctcag 900 tttagcacct gccttctgga caactacgtg tctctatttg aagtcttgtt aaagtggtgt 960 gcccacacaa atgtagaatt gaaaaaagct gcactttcag ccctggaatc ctttctgaaa 1020 caggtttcta atatggtggc gaaaaatgca gaaatgcata aaaataaact gcagtacttt 1080 atggagcagt tttatggaat catcagaaat gtggattcga acaacaagga gttatctatt 1140 gctatccgtg gatatggact ttttgcagga ccgtgcaagg ttataaacgc aaaagatgtt 1200 gacttcatgt acgttgagct cattcagcgc tgcaagcaga tgttcctcac ccagacagac 1260 actggtgacg accgtgttta tcagatgcca agcttcctcc agtctgttgc aagcgtcttg 1320 ctgtaccttg acacagttcc tgaggtgtat actccagttc tggagcacct cgtggtgatg 1380 cagatagaca gtttcccaca gtacagtcca aaaatgcagc tggtgtgttg cagagccata 1440 gtgaaggtgt tcctagcttt ggcagcaaaa gggccagttc tcaggaattg cattagtact 1500 gtggtgcatc agggtttaat cagaatatgt tctaaaccag tggtccttcc aaagggccct 1560 gagtctgaat ctgaagacca ccgtgcttca ggggaagtca gaactggcaa atggaaggtg 1620 cccacataca aagactacgt ggatctcttc agacatctcc tgagctctga ccagatgatg 1680 gattctattt tagcagatga agcatttttc tctgtgaatt cctccagtga aagtctgaat 1740 catttacttt atgatgaatt tgtaaaatcc gttttgaaga ttgttgagaa attggatctt 1800 acacttgaaa tacagactgt tggggaacaa gagaatggag atgaggcgcc tggtgtttgg 1860 atgatcccaa cttcagatcc agcggctaac ttgcatccag ctaaacctaa agatttttcg 1920 gctttcatta acctggtgga attttgcaga gagattctcc ctgagaaaca agcagaattt 1980 tttgaaccat gggtgtactc attttcatat gaattaattt tgcaatctac aaggttgccc 2040 ctcatcagtg gtttctacaa attgctttct attacagtaa gaaatgccaa gaaaataaaa 2100 tatttcgagg gagttagtcc aaagagtctg aaacactctc ctgaagaccc agaaaagtat 2160 tcttgctttg ctttatttgt gaaatttggc aaagaggtgg cagttaaaat gaagcagtac 2220 aaagatgaac ttttggcctc ttgtttgacc tttcttctgt ccttgccaca caacatcatt 2280 gaactcgatg ttagagccta cgttcctgca ctgcagatgg ctttcaaact gggcctgagc 2340 tataccccct tggcagaagt aggcctgaat gctctagaag aatggtcaat ttatattgac 2400 agacatgtaa tgcagcctta ttacaaagac attctcccct gcctggatgg atacctgaag 2460 acttcagcct tgtcagatga gaccaagaat aactgggaag tgtcagctct ttctcgggct 2520 gcccagaaag gatttaataa agtggtgtta aagcatctga agaagacaaa gaacctttca 2580 tcaaacgaag caatatcctt agaagaaata agaattagag tagtacaaat gcttggatct 2640 ctaggaggac aaataaacaa aaatcttctg acagtcacgt cctcagatga gatgatgaag 2700 agctatgtgg cctgggacag agagaagcgg ctgagctttg cagtgccctt tagagagatg 2760 aaacctgtca ttttcctgga tgtgttcctg cctcgagtca cagaattagc gctcacagcc 2820 agtgacagac aaactaaagt tgcagcctgt gaacttttac atagcatggt tatgtttatg 2880 ttgggcaaag ccacgcagat gccagaaggg ggacagggag ccccacccat gtaccagctc 2940 tataagcgga cgtttcctgt gctgcttcga cttgcgtgtg atgttgatca ggtgacaagg 3000 caactgtatg agccactagt tatgcagctg attcactggt tcactaacaa caagaaattt 3060 gaaagtcagg atactgttgc cttactagaa gctatattgg atggaattgt ggaccctgtt 3120 gacagtactt taagagattt ttgtggtcgg tgtattcgag aattccttaa atggtccatt 3180 aagcaaataa caccacagca gcaggagaag agtccagtaa acaccaaatc gcttttcaag 3240 cgactttata gccttgcgct tcaccccaat gctttcaaga ggctgggagc atcacttgcc 3300 tttaataata tctacaggga attcagggaa gaagagtctc tggtggaaca gtttgtgttt 3360 gaagccttgg tgatatacat ggagagtctg gccttagcac atgcagatga gaagtcctta 3420 ggtacaattc aacagtgttg tgatgccatt gatcacctat gccgcatcat tgaaaagaag 3480 catgtttctt taaataaagc aaagaaacga cgtttgccgc gaggatttcc accttccgca 3540 tcattgtgtt tattggatct ggtcaagtgg cttttagctc attgtgggag gccccagaca 3600 gaatgtcgac acaaatccat tgaactcttt tataaattcg ttcctttatt gccaggcaac 3660 agatccccta atttgtggct gaaagatgtt ctcaaggaag aaggtgtctc ttttctcatc 3720 aacacctttg aggggggtgg ctgtggccag ccctcgggca tcctggccca gcccaccctc 3780 ttgtaccttc gggggccatt cagcctgcag gccacgctat gctggctgga cctgctcctg 3840 gccgcgttgg agtgctacaa cacgttcatt ggcgagagaa ctgtaggagc gctccaggtc 3900 ctaggtactg aagcccagtc ttcacttttg aaagcagtgg ctttcttctt agaaagcatt 3960 gccatgcatg acattatagc agcagaaaag tgctttggca ctggggcagc aggtaacaga 4020 acaagcccac aagagggaga aaggtacaac tacagcaaat gcaccgttgt ggtccggatt 4080 atggagttta ccacgactct gctaaacacc tccccggaag gatggaagct cctgaagaag 4140 gacttgtgta atacacacct gatgagagtc ctggtgcaga cgctgtgtga gcccgcaagc 4200 ataggtttca acatcggaga cgtccaggtt atggctcatc ttcctgatgt ttgtgtgaat 4260 ctgatgaaag ctctaaagat gtccccatac aaagatatcc tagagaccca tctgagagag 4320 aaaataacag cacagagcat tgaggagctt tgtgccgtca acttgtatgg ccctgacgcg 4380 caagtggaca ggagcaggct ggctgctgtt gtgtctgcct gtaaacagct tcacagagct 4440 gggcttctgc ataatatatt accgtctcag tccacagatt tgcatcattc tgttggcaca 4500 gaacttcttt ccctggttta taaaggcatt gcccctggag atgagagaca gtgtctgcct 4560 tctctagacc tcagttgtaa gcagctggcc agcggacttc tggagttagc ctttgctttt 4620 ggaggactgt gtgagcgcct tgtgagtctt ctcctgaacc cagcggtgct gtccacggcg 4680 tccttgggca gctcacaggg cagcgtcatc cacttctccc atggggagta tttctatagc 4740 ttgttctcag aaacgatcaa cacggaatta ttgaaaaatc tggatcttgc tgtattggag 4800 ctcatgcagt cttcagtgga taataccaaa atggtgagtg ccgttttgaa cggcatgtta 4860 gaccagagct tcagggagcg agcaaaccag aaacaccaag gactgaaact tgcgactaca 4920 attctgcaac actggaagaa gtgtgattca tggtgggcca aagattcccc tctcgaaact 4980 aaaatggcag tgctggcctt actggcaaaa attttacaga ttgattcatc tgtatctttt 5040 aatacaagtc atggttcatt ccctgaagtc tttacaacat atattagtct acttgctgac 5100 acaaagctgg atctacattt aaagggccaa gctgtcactc ttcttccatt cttcaccagc 5160 ctcactggag gcagtctgga ggaacttaga cgtgttctgg agcagctcat cgttgctcac 5220 ttccccatgc agtccaggga atttcctcca ggaactccgc ggttcaataa ttatgtggac 5280 tgcatgaaaa agtttctaga tgcattggaa ttatctcaaa gccctatgtt gttggaattg 5340 atgacagaag ttctttgtcg ggaacagcag catgtcatgg aagaattatt tcaatccagt 5400 ttcaggagga ttgccagaag gggttcatgt gtcacacaag taggccttct ggaaagcgtg 5460 tatgaaatgt tcaggaagga tgacccccgc ctaagtttca cacgccagtc ctttgtggac 5520 cgctccctcc tcactctgct gtggcactgt agcctggatg ctttgagaga attcttcagc 5580 acaattgtgg tggatgccat tgatgtgttg aagtccaggt ttacaaagct aaatgaatct 5640 acctttgata ctcaaatcac caagaagatg ggctactata agattctaga cgtgatgtat 5700 tctcgccttc ccaaagatga tgttcatgct aaggaatcaa aaattaatca agttttccat 5760 ggctcgtgta ttacagaagg aaatgaactt acaaagacat tgattaaatt gtgctacgat 5820 gcatttacag agaacatggc aggagagaat cagctgctgg agaggagaag actttaccat 5880 tgtgcagcat acaactgcgc catatctgtc atctgctgtg tcttcaatga gttaaaattt 5940 taccaaggtt ttctgtttag tgaaaaacca gaaaagaact tgcttatttt tgaaaatctg 6000 atcgacctga agcgccgcta taattttcct gtagaagttg aggttcctat ggaaagaaag 6060 aaaaagtaca ttgaaattag gaaagaagcc agagaagcag caaatgggga ttcagatggt 6120 ccttcctata tgtcttccct gtcatatttg gcagacagta ccctgagtga ggaaatgagt 6180 caatttgatt tctcaaccgg agttcagagc tattcataca gctcccaaga ccctagacct 6240 gccactggtc gttttcggag acgggagcag cgggacccca cggtgcatga tgatgtgctg 6300 gagctggaga tggacgagct caatcggcat gagtgcatgg cgcccctgac ggccctggtc 6360 aagcacatgc acagaagcct gggcccgcct caaggagaag aggattcagt gccaagagat 6420 cttccttctt ggatgaaatt cctccatggc aaactgggaa atccaatagt accattaaat 6480 atccgtctct tcttagccaa gcttgttatt aatacagaag aggtctttcg cccttacgcg 6540 aagcactggc ttagcccctt gctgcagctg gctgcttctg aaaacaatgg aggagaagga 6600 attcactaca tggtggttga gatagtggcc actattcttt catggacagg cttggccact 6660 ccaacagggg tccctaaaga tgaagtgtta gcaaatcgat tgcttaattt cctaatgaaa 6720 catgtctttc atccaaaaag agctgtgttt agacacaacc ttgaaattat aaagaccctt 6780 gtcgagtgct ggaaggattg tttatccatc ccttataggt taatatttga aaagttttcc 6840 ggtaaagatc ctaattctaa agacaactca gtagggattc aattgctagg catcgtgatg 6900 gccaatgacc tgcctcccta tgacccacag tgtggcatcc agagtagcga atacttccag 6960 gctttggtga ataatatgtc ctttgtaaga tataaagaag tgtatgccgc tgcagcagaa 7020 gttctaggac ttatacttcg atatgttatg gagagaaaaa acatactgga ggagtctctg 7080 tgtgaactgg ttgcgaaaca attgaagcaa catcagaata ctatggagga caagtttatt 7140 gtgtgcttga acaaagtgac caagagcttc cctcctcttg cagacaggtt catgaatgct 7200 gtgttctttc tgctgccaaa atttcatgga gtgttgaaaa cactctgtct ggaggtggta 7260 ctttgtcgtg tggagggaat gacagagctg tacttccagt taaagagcaa ggacttcgtt 7320 caagtcatga gacatagaga tgatgaaaga caaaaagtat gtttggacat aatttataag 7380 atgatgccaa agttaaaacc agtagaactc cgagaacttc tgaaccccgt tgtggaattc 7440 gtttcccatc cttctacaac atgtagggaa caaatgtata atattctcat gtggattcat 7500 gataattaca gagatccaga aagtgagaca gataatgact cccaggaaat atttaagttg 7560 gcaaaagatg tgctgattca aggattgatc gatgagaacc ctggacttca attaattatt 7620 cgaaatttct ggagccatga aactaggtta ccttcaaata ccttggaccg gttgctggca 7680 ctaaattcct tatattctcc taagatagaa gtgcactttt taagtttagc aacaaatttt 7740 ctgctcgaaa tgaccagcat gagcccagat tatccaaacc ccatgttcga gcatcctctg 7800 tcagaatgcg aatttcagga atataccatt gattctgatt ggcgtttccg aagtactgtt 7860 ctcactccga tgtttgtgga gacccaggcc tcccagggca ctctccagac ccgtacccag 7920 gaagggtccc tctcagctcg ctggccagtg gcagggcaga taagggccac ccagcagcag 7980 catgacttca cactgacaca gactgcagat ggaagaagct catttgattg gctgaccggg 8040 agcagcactg acccgctggt cgaccacacc agtccctcat ctgactcctt gctgtttgcc 8100 cacaagagga gtgaaaggtt acagagagca cccttgaagt cagtggggcc tgattttggg 8160 aaaaaaaggc tgggccttcc aggggacgag gtggataaca aagtgaaagg tgcggccggc 8220 cggacggacc tactacgact gcgcagacgg tttatgaggg accaggagaa gctcagtttg 8280 atgtatgcca gaaaaggcgt tgctgagcaa aaacgagaga aggaaatcaa gagtgagtta 8340 aaaatgaagc aggatgccca ggtcgttctg tacagaagct accggcacgg agaccttcct 8400 gacattcaga tcaagcacag cagcctcatc accccgttac aggccgtggc ccagagggac 8460 ccaataattg caaaacagct ctttagcagc ttgttttctg gaattttgaa agagatggat 8520 aaatttaaga cactgtctga aaaaaacaac atcactcaaa agttgcttca agacttcaat 8580 cgttttctta ataccacctt ctctttcttt ccaccctttg tctcttgtat tcaggacatt 8640 agctgtcagc acgcagccct gctgagcctc gacccagcgg ctgttagcgc tggttgcctg 8700 gccagcctac agcagcccgt gggcatccgc ctgctagagg aggctctgct ccgcctgctg 8760 cctgctgagc tgcctgccaa gcgagtccgt gggaaggccc gcctccctcc tgatgtcctc 8820 agatgggtgg agcttgctaa gctgtataga tcaattggag aatacgacgt cctccgtggg 8880 atttttacca gtgagatagg aacaaagcaa atcactcaga gtgcattatt agcagaagcc 8940 agaagtgatt attctgaagc tgctaagcag tatgatgagg ctctcaataa acaagactgg 9000 gtagatggtg agcccacaga agccgagaag gatttttggg aacttgcatc ccttgactgt 9060 tacaaccacc ttgctgagtg gaaatcactt gaatactgtt ctacagccag tatagacagt 9120 gagaaccccc cagacctaaa taaaatctgg agtgaaccat tttatcagga aacatatcta 9180 ccttacatga tccgcagcaa gctgaagctg ctgctccagg gagaggctga ccagtccctg 9240 ctgacattta ttgacaaagc tatgcacggg gagctccaga aggcgattct agagcttcat 9300 tacagtcaag agctgagtct gctttacctc ctgcaagatg atgttgacag agccaaatat 9360 tacattcaaa atggcattca gagttttatg cagaattatt ctagtattga tgtcctctta 9420 caccaaagta gactcaccaa attgcagtct gtacaggctt taacagaaat tcaggagttc 9480 atcagcttta taagcaaaca aggcaattta tcatctcaag ttccccttaa gagacttctg 9540 aacacctgga caaacagata tccagatgct aaaatggacc caatgaacat ctgggatgac 9600 atcatcacaa atcgatgttt ctttctcagc aaaatagagg agaagcttac ccctcttcca 9660 gaagataata gtatgaatgt ggatcaagat ggagacccca gtgacaggat ggaagtgcaa 9720 gagcaggaag aagatatcag ctccctgatc aggagttgca agttttccat gaaaatgaag 9780 atgatagaca gtgcccggaa gcagaacaat ttctcacttg ctatgaaact actgaaggag 9840 ctgcataaag agtcaaaaac cagagacgat tggctggtga gctgggtgca gagctactgc 9900 cgcctgagcc actgccggag ccggtcccag ggctgctctg agcaggtgct cactgtgctg 9960 aaaacagtct ctttgttgga tgagaacaac gtgtcaagct acttaagcaa aaatattctg 10020 gctttccgtg accagaacat tctcttgggt acaacttaca ggatcatagc gaatgctctc 10080 agcagtgagc cagcctgcct tgctgaaatc gaggaggaca aggctagaag aatcttagag 10140 ctttctggat ccagttcaga ggattcagag aaggtgatcg cgggtctgta ccagagagca 10200 ttccagcacc tctctgaggc tgtgcaggcg gctgaggagg aggcccagcc tccctcctgg 10260 agctgtgggc ctgcagctgg ggtgattgat gcttacatga cgctggcaga tttctgtgac 10320 caacagctgc gcaaggagga agagaatgca tcagttattg attctgcaga actgcaggcg 10380 tatccagcac ttgtggtgga gaaaatgttg aaagctttaa aattaaattc caatgaagcc 10440 agattgaagt ttcctagatt acttcagatt atagaacggt atccagagga gactttgagc 10500 ctcatgacaa aagagatctc ttccgttccc tgctggcagt tcatcagctg gatcagccac 10560 atggtggcct tactggacaa agaccaagcc gttgctgttc agcactctgt ggaagaaatc 10620 actgataact acccgcaggc tattgtttat cccttcatca taagcagcga aagctattcc 10680 ttcaaggata cttctactgg tcataagaat aaggagtttg tggcaaggat taaaagtaag 10740 ttggatcaag gaggagtgat tcaagatttt attaatgcct tagatcagct ctctaatcct 10800 gaactgctct ttaaggattg gagcaatgat gtaagagctg aactagcaaa aacccctgta 10860 aataaaaaaa acattgaaaa aatgtatgaa agaatgtatg cagccttggg tgacccaaag 10920 gctccaggcc tgggggcctt tagaaggaag tttattcaga cttttggaaa agaatttgat 10980 aaacattttg ggaaaggagg ttctaaacta ctgagaatga agctcagtga cttcaacgac 11040 attaccaaca tgctactttt aaaaatgaac aaagactcaa agccccctgg gaatctgaaa 11100 gaatgttcac cctggatgag cgacttcaaa gtggagttcc tgagaaatga gctggagatt 11160 cccggtcagt atgacggtag gggaaagcca ttgccagagt accacgtgcg aatcgccggg 11220 tttgatgagc gggtgacagt catggcgtct ctgcgaaggc ccaagcgcat catcatccgt 11280 ggccatgacg agagggaaca ccctttcctg gtgaagggtg gcgaggacct gcggcaggac 11340 cagcgcgtgg agcagctctt ccaggtcatg aatgggatcc tggcccaaga ctccgcctgc 11400 agccagaggg ccctgcagct gaggacctat agcgttgtgc ccatgacctc caggttagga 11460 ttaattgagt ggcttgaaaa tactgttacc ttgaaggacc ttcttttgaa caccatgtcc 11520 caagaggaga aggcggctta cctgagtgat cccagggcac cgccgtgtga atataaagat 11580 tggctgacaa aaatgtcagg aaaacatgat gttggagctt acatgctaat gtataagggc 11640 gctaatcgta ctgaaacagt cacgtctttt agaaaacgag aaagtaaagt gcctgctgat 11700 ctcttaaagc gggccttcgt gaggatgagt acaagccctg aggctttcct ggcgctccgc 11760 tcccacttcg ccagctctca cgctctgata tgcatcagcc actggatcct cgggattgga 11820 gacagacatc tgaacaactt tatggtggcc atggagactg gcggcgtgat cgggatcgac 11880 tttgggcatg cgtttggatc cgctacacag tttctgccag tccctgagtt gatgcctttt 11940 cggctaactc gccagtttat caatctgatg ttaccaatga aagaaacggg ccttatgtac 12000 agcatcatgg tacacgcact ccgggccttc cgctcagacc ctggcctgct caccaacacc 12060 atggatgtgt ttgtcaagga gccctccttt gattggaaaa attttgaaca gaaaatgctg 12120 aaaaaaggag ggtcatggat tcaagaaata aatgttgctg aaaaaaattg gtacccccga 12180 cagaaaatat gttacgctaa gagaaagtta gcaggtgcca atccagcagt cattacttgt 12240 gatgagctac tcctgggtca tgagaaggcc cctgccttca gagactatgt ggctgtggca 12300 cgaggaagca aagatcacaa cattcgtgcc caagaaccag agagtgggct ttcagaagag 12360 actcaagtga agtgcctgat ggaccaggca acagacccca acatccttgg cagaacctgg 12420 gaaggatggg agccctggat gtgaggtctg tgggagtctg cagatagaaa gcattacatt 12480 gtttaaagaa tctactatac tttggttggc agcattccat gagctgattt tcctgaaaca 12540 ctaaagagaa atgtcttttg tgctacagtt tcgtagcatg agtttaaatc aagattatga 12600 tgagtaaatg tgtatgggtt aaatcaaaga taaggttata gtaacatcaa agattaggtg 12660 aggtttatag aaagatagat atccaggctt accaaagtat taagtcaaga atataatatg 12720 tgatcagctt tcaaagcatt tacaagtgct gcaagttagt gaaacagctg tctccgtaaa 12780 tggaggaaat gtggggaagc cttggaatgc ccttctggtt ctggcacatt ggaaagcaca 12840 ctcagaaggc ttcatcacca agattttggg agagtaaagc taagtatagt tgatgtaaca 12900 ttgtagaagc agcataggaa caataagaac aataggtaaa gctataatta tggcttatat 12960 ttagaaatga ctgcatttga tattttagga tatttttcta ggttttttcc tttcatttta 13020 ttctcttcta gttttgacat tttatgatag atttgctctc tagaaggaaa cgtctttatt 13080 taggagggca aaaattttgg tcatagcatt cacttttgct attccaatct acaactggaa 13140 gatacataaa agtgctttgc attgaatttg ggataacttc aaaaatccca tggttgttgt 13200 tagggatagt actaagcatt tcagttccag gagaataaaa gaaattccta tttgaaatga 13260 attcctcatt tggaggaaaa aaagcatgca ttctagcaca acaagatgaa attatggaat 13320 acaaaagtgg ctccttccca tgtgcagtcc ctgtcccccc ccgccagtcc tccacaccca 13380 aactgtttct gattggcttt tagctttttg ttgttttttt ttttccttct aacacttgta 13440 tttggaggct cttctgtgat tttgagaagt atactcttga gtgtttaata aagttttttt 13500 ccaaaagta 13509 <210> 27 <211> 3701 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 27 gcttcccgga agtggcggcg cggtcagggc tggccttggc ttcagctgcg gttttggggt 60 cccggactct gggatcggcg gcgctatgag ttctttcgag gggcagatgg ccgagtatcc 120 aactatctcc atagaccgct tcgataggga gaacctgagg gcccgcgcct acttcctgtc 180 ccactgccac aaagatcaca tgaaaggatt aagagcccct accttgaaaa gaaggttgga 240 gtgcagcttg aaggtttatc tatactgttc acctgtgact aaggagttgt tgttaacgag 300 cccgaaatac agattttgga agaaacgaat tatatctatt gaaatcgaga ctcctaccca 360 gatatcttta gtggatgaag catcaggaga gaaggaagag attgttgtga ctctcttacc 420 agctggtcac tgtccgggat cagttatgtt tttatttcag ggcaataatg gaactgtcct 480 gtacacagga gacttcagat tggcgcaagg agaagctgct agaatggagc ttctgcactc 540 cgggggcaga gtcaaagaca tccaaagtgt atatttggat actacgttct gtgatccaag 600 attttaccaa attccaagtc gggaggagtg tttaagtgga gtcttagagc tggtccgaag 660 ctggatcact cggagcccgt accatgttgt gtggctgaac tgcaaagcgg cttatggcta 720 tgaatatctg ttcaccaacc ttagtgaaga attaggagtc caggttcatg tgaataagct 780 agacatgttt aggaacatgc ctgagatcct tcatcatctc acaacagacc gcaacactca 840 gatccatgca tgccggcatc ccaaggcaga ggaatatttt cagtggagca aattaccctg 900 tggaattact tccagaaata gaattccact ccacataatc agcattaagc catccaccat 960 gtggtttgga gaaaggagca gaaaaacaaa tgtaattgtg aggactggag agagttcata 1020 cagagcttgt ttttcttttc actcctccta cagtgagatt aaagatttct tgagctacct 1080 ctgtcctgtg aacgcatatc caaatgtcat tccagttggc acaactatgg ataaagttgt 1140 cgaaatctta aagcctttat gccggtcttc ccaaagtacg gagccaaagt ataaaccact 1200 gggaaaactg aagagagcta gaacagttca ccgagactca gaggaggaag atgactatct 1260 ctttgatgat cctctgccaa tacctttaag gcacaaagtt ccatacccgg aaacttttca 1320 ccctgaggta ttttcaatga ctgcagtatc agaaaagcag cctgaaaaac tgagacaaac 1380 cccaggatgc tgcagagcag agtgtatgca gagctctcgt ttcacaaact ttgtagattg 1440 tgaagaatcc aacagtgaaa gtgaagaaga agtaggaatc ccagcttcac tgcaaggaga 1500 tctgggctct gtacttcacc tgcaaaaggc tgatggggat gtaccccagt gggaagtatt 1560 ctttaaaaga aatgatgaaa tcacagatga gagtttggaa aacttccctt cctccacagt 1620 ggcaggggga tctcagtcac caaagctttt cagtgactct gatggagaat caactcacat 1680 ctcctcccag aattcttccc agtcaacaca cataacagaa caaggaagtc aaggctggga 1740 cagccaatct gatactgttt tgttatcttc ccaagagaga aacagtgggg atattacttc 1800 cttggacaaa gctgactaca gaccaacaat caaagagaat attcctgcct ctctcatgga 1860 acaaaatgta atttgcccaa aggatactta ctctgatttg aaaagcagag ataaagatgt 1920 gacaatagtt cctagtactg gagaaccaac tactctaagc agtgagacac atatacccga 1980 ggaaaaaagt ttgctaaatc ttagcacaaa tgcagattcc cagagctctt ctgattttga 2040 agttccctca actccagaag ctgagttacc taaacgagag catttacaat atttatatga 2100 gaagctggca actggtgaga gtatagcagt caaaaaaaga aaatgctcac tcttagatac 2160 ctaagaattc aaagcgtttc aacctagagc aaccactaaa aaacctgcac agagatgaca 2220 gtcaatatta caatagagaa aatacagtac ttaaaaatgt tcaaataacc tggttgggtg 2280 tggtggctca cacttgtaat cccagcactt tgaggtgggc aatggcttga gcccaggagt 2340 tcgacaccag cctggccaac acagtgaaat gtgtctctac ttacaaaaaa aaaaaaaaaa 2400 aaaaaagcca ggcatggtgg tgggctactc tggaggccct tgaggatcac ttgagcccag 2460 gagattgagg ctgcagtgag ccatgactgt gccactgcac ctctagtctg ggtgacagag 2520 caagaccctg tttaaaaaag aaaaaggcca ggcacggtgg ctcatgcctg taatcccagc 2580 tacgcaggag gccaaggcag gagaatcact tgaacctggg aggtggtggt tgcagtgagc 2640 tgagattgtg tcattgcact ccagcctggg caacaagagc aaaactctgt ctcaaaaaaa 2700 aaaaaaaaaa aaaagaaaaa aaaatggtag aactaaaccc atacgtatca atgattacat 2760 taaatgtaaa tggtctaagt gcatcaatga caagagacac ggaaaaaacc aacataaccc 2820 agtgatctgc tgtctataaa gaaagtcaat tcaagtgatt gataggttaa aaggatggaa 2880 aaaccatgta aacaattaaa aatggagtgg ttatatggac agtttcctaa tgataaaagg 2940 tctagttcac caagaagaca aaataatcct aaacgtatat gcacctaaca gctccaaaaa 3000 tttatgaagc tagaacagct gaaaagagac aaactaatgc acaattacag ctagggatta 3060 atttaacatc cctccttagt aacagaacta gtatatacac attaatcagt aagaatatag 3120 aactgaaaat cataagccga ctggattaaa ttgacattta tagaacacac caccccaaac 3180 tagcagaatg tatctcctga agtacacatg gaacattcag catgatcata tctttgctca 3240 taaacacacc tgatttaaat tgacaaactt ggatctagta tgataaactg atggctatag 3300 acaaaatcag caccttattt atccccaaag atgttaagtc acttaacctt gatgtgaata 3360 cggtggccaa attagaagcg gacaattaga atataaaaga aaatgctcaa gaattaaatg 3420 gtggccaggc acagtaactc ctgcctgcaa tcccagtact ttgggaggct cgcttgagct 3480 cagggttttg agtccagcct gggcaacaca cagggagacc ctgtctccac aaaatgttag 3540 ccagacatgg tggtgtgcac ctgtagtcct cgctacttgg aaggcttagg tggcaggatg 3600 gattgagccc aggaggttga aactgcagtg agctgattgt gcccagcctg ggcaacaaag 3660 caagacccca tctcaagaaa aataaattaa aaaaaactaa a 3701 <210> 28 <211> 2156 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 28 gcgcatgcgt ggattgtcgt cttctgtcca agttggtcgc ttccctgcgc caaagtgagc 60 agtagccaac atgtcagggt gggagtcata ttacaaaacc gagggcgatg aagaagcaga 120 ggaagaacaa gaagagaacc ttgaagcaag tggagactat aaatattcag gaagagatag 180 tttgattttt ttggttgatg cctccaaggc tatgtttgaa tctcagagtg aagatgagtt 240 gacacctttt gacatgagca tccagtgtat ccaaagtgtg tacatcagta agatcataag 300 cagtgatcga gatctcttgg ctgtggtgtt ctatggtacc gagaaagaca aaaattcagt 360 gaattttaaa aatatttacg tcttacagga gctggataat ccaggtgcaa aacgaattct 420 agagcttgac cagtttaagg ggcagcaggg acaaaaacgt ttccaagaca tgatgggcca 480 cggatctgac tactcactca gtgaagtgct gtgggtctgt gccaacctct ttagtgatgt 540 ccaattcaag atgagtcata agaggatcat gctgttcacc aatgaagaca acccccatgg 600 caatgacagt gccaaagcca gccgggccag gaccaaagcc ggtgatctcc gagatacagg 660 catcttcctt gacttgatgc acctgaagaa acctgggggc tttgacatat ccttgttcta 720 cagagatatc atcagcatag cagaggatga ggacctcagg gttcactttg aggaatccag 780 caagctagaa gacctgttgc ggaaggttcg cgccaaggag accaggaagc gagcactcag 840 caggttaaag ctgaagctca acaaagatat agtgatctct gtgggcattt ataatctggt 900 ccagaaggct ctcaagcctc ctccaataaa gctctatcgg gaaacaaatg aaccagtgaa 960 aaccaagacc cggaccttta atacaagtac aggcggtttg cttctgccta gcgataccaa 1020 gaggtctcag atctatggga gtcgtcagat tatactggag aaagaggaaa cagaagagct 1080 aaaacggttt gatgatccag gtttgatgct catgggtttc aagccgttgg tactgctgaa 1140 gaaacaccat tacctgaggc cctccctgtt cgtgtaccca gaggagtcgc tggtgattgg 1200 gagctcaacc ctgttcagtg ctctgctcat caagtgtctg gagaaggagg ttgcagcatt 1260 gtgcagatac acaccccgca ggaacatccc tccttatttt gtggctttgg tgccacagga 1320 agaagagttg gatgaccaga aaattcaggt gactcctcca ggcttccagc tggtcttttt 1380 accctttgct gatgataaaa ggaagatgcc ctttactgaa aaaatcatgg caactccaga 1440 gcaggtgggc aagatgaagg ctatcgttga gaagcttcgc ttcacataca gaagtgacag 1500 ctttgagaac cccgtgctgc agcagcactt caggaacctg gaggccttgg ccttggattt 1560 gatggagccg gaacaagcag tggacctgac attgcccaag gttgaagcaa tgaataaaag 1620 actgggctcc ttggtggatg agtttaagga gcttgtttac ccaccagatt acaatcctga 1680 agggaaagtt accaagagaa aacacgataa tgaaggttct ggaagcaaaa ggcccaaggt 1740 ggagtattca gaagaggagc tgaagaccca catcagcaag ggtacgctgg gcaagttcac 1800 tgtgcccatg ctgaaagagg cctgccgggc ttacgggctg aagagtgggc tgaagaagca 1860 ggagctgctg gaagccctca ccaagcactt ccaggactga ccagaggccg cgcgtccagc 1920 tgcccttccg cagtgtggcc aggctgcctg gccttgtcct cagccagtta aaatgtgttt 1980 ctcctgagct aggaagagtc tacccgacat aagtcgaggg actttatgtt tttgaggctt 2040 tctgttgcca tggtgatggt gtagccctcc cactttgctg ttccttactt tactgcctga 2100 ataaagagcc ctaagtttgt actatatact gttaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa 2156 <210> 29 <211> 3448 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 29 acggtttccc cgcccctttc aggcctagca ggaaacgaag cggctctttc cgctatctgc 60 cgcttgtcca ccggaagcga gttgcgacac ggcaggttcc cgcccggaag aagcgaccaa 120 agcgcctgag gaccggcaac atggtgcggt cggggaataa ggcagctgtt gtgctgtgta 180 tggacgtggg ctttaccatg agtaactcca ttcctggtat agaatcccca tttgaacaag 240 caaagaaggt gataaccatg tttgtacagc gacaggtgtt tgctgagaac aaggatgaga 300 ttgctttagt cctgtttggt acagatggca ctgacaatcc cctttctggt ggggatcagt 360 atcagaacat cacagtgcac agacatctga tgctaccaga ttttgatttg ctggaggaca 420 ttgaaagcaa aatccaacca ggttctcaac aggctgactt cctggatgca ctaatcgtga 480 gcatggatgt gattcaacat gaaacaatag gaaagaagtt tgagaagagg catattgaaa 540 tattcactga cctcagcagc cgattcagca aaagtcagct ggatattata attcatagct 600 tgaagaaatg tgacatctcc ctgcaattct tcttgccttt ctcacttggc aaggaagatg 660 gaagtgggga cagaggagat ggcccctttc gcttaggtgg ccatgggcct tcctttccac 720 taaaaggaat taccgaacag caaaaagaag gtcttgagat agtgaaaatg gtgatgatat 780 ctttagaagg tgaagatggg ttggatgaaa tttattcatt cagtgagagt ctgagaaaac 840 tgtgcgtctt caagaaaatt gagaggcatt ccattcactg gccctgccga ctgaccattg 900 gctccaattt gtctataagg attgcagcct ataaatcgat tctacaggag agagttaaaa 960 agacttggac agttgtggat gcaaaaaccc taaaaaaaga agatatacaa aaagaaacag 1020 tttattgctt aaatgatgat gatgaaactg aagttttaaa agaggatatt attcaagggt 1080 tccgctatgg aagtgatata gttcctttct ctaaagtgga tgaggaacaa atgaaatata 1140 aatcggaggg gaagtgcttc tctgttttgg gattttgtaa atcttctcag gttcagagaa 1200 gattcttcat gggaaatcaa gttctaaagg tctttgcagc aagagatgat gaggcagctg 1260 cagttgcact ttcctccctg attcatgctt tggatgactt agacatggtg gccatagttc 1320 gatatgctta tgacaaaaga gctaatcctc aagtcggcgt ggcttttcct catatcaagc 1380 ataactatga gtgtttagtg tatgtgcagc tgcctttcat ggaagacttg cggcaataca 1440 tgttttcatc cttgaaaaac agtaagaaat atgctcccac cgaggcacag ttgaatgctg 1500 ttgatgcttt gattgactcc atgagcttgg caaagaaaga tgagaagaca gacacccttg 1560 aagacttgtt tccaaccacc aaaatcccaa atcctcgatt tcagagatta tttcagtgtc 1620 tgctgcacag agctttacat ccccgggagc ctctaccccc aattcagcag catatttgga 1680 atatgctgaa tcctcccgct gaggtgacaa caaaaagtca gattcctctc tctaaaataa 1740 agaccctttt tcctctgatt gaagccaaga aaaaggatca agtgactgct caggaaattt 1800 tccaagacaa ccatgaagat ggacctacag ctaaaaaatt aaagactgag caagggggag 1860 cccacttcag cgtctccagt ctggctgaag gcagtgtcac ctctgttgga agtgtgaatc 1920 ctgctgaaaa cttccgtgtt ctagtgaaac agaagaaggc cagctttgag gaagcgagta 1980 accagctcat aaatcacatc gaacagtttt tggatactaa tgaaacaccg tattttatga 2040 agagcataga ctgcatccga gccttccggg aagaagccat taagttttca gaagagcagc 2100 gctttaacaa cttcctgaaa gcccttcaag agaaagtgga aattaaacaa ttaaatcatt 2160 tctgggaaat tgttgtccag gatggaatta ctctgatcac caaagaggaa gcctctggaa 2220 gttctgtcac agctgaggaa gccaaaaagt ttctggcccc caaagacaaa ccaagtggag 2280 acacagcagc tgtatttgaa gaaggtggtg atgtggacga tttattggac atgatatagg 2340 tcgtggatgt atggggaatc taagagagct gccatcgctg tgatgctggg agttctaaca 2400 aaacaagttg gatgcggcca ttcaagggga gccaaaatct caagaaattc ccagcaggtt 2460 acctggaggc ggatcatcta attctctgtg gaatgaatac acacatatat attacaaggg 2520 ataatttaga ccccatacaa gtttataaag agtcattgtt attttctggt tggtgtatta 2580 ttttttctgt ggtcttactg atctttgtat attacataca tgctttgaag tttctggaaa 2640 gtagatcttt tcttgaccta gtatatcagt gacagttgca gcccttgtga tgtgattagt 2700 gtctcatgtg gaaccatggc atggttattg atgagtttct taaccctttc cagagtcctc 2760 ctttgcctga tcctccaaca gctgtcacaa cttgtgttga gcaagcagta gcatttgctt 2820 cctcccaaca agcagctggg ttaggaaaac catgggtaag gacggactca cttctctttt 2880 tagttgaggc cttctagtta ccacattact ctgcctctgt atataggtgg ttttctttaa 2940 gtggggtggg aaggggagca caatttccct tcatactcct tttaagcagt gagttatggt 3000 ggtggtctca tgaagaaaag accttttggc ccaatctctg ccatatcagt gaacctttag 3060 aaactcaaaa actgagaaat ttactacagt agttagaatt atatcacttc actgttctct 3120 acttgcaagc ctcaaagaga gaaagtttcg ttatattaaa acacttaggt aacttttcgg 3180 tctttcccat ttctacctaa gtcagctttc atctttgtgg atggtgtctc ctttactaaa 3240 taagaaaata acaaagccct tattctcttt ttttcttgtc ctcattcttg ccttgagttc 3300 cagttcctct ttggtgtaca gacttcttgg tacccagtca cctctgtctt cagcaccctc 3360 ataagtcgtc actaatacac agttttgtac atgtaacatt aaaggcataa atgactcatc 3420 tctctgtgaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa 3448 <210> 30 <211> 2119 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 30 ataggccccg cccctgtatc ccaagaccct gcctcctctt gcggtggggg gaaagcggcc 60 tcttactcta ggcctttcgg tttgcgcgag cgggcaggaa agcgtgcgtg cggctaagag 120 agtgggcgct ctcgcggccg ctgacgatgg aagaactgga gcaaggcctg ttgatgcagc 180 catgggcgtg gctacagctt gcagagaact ccctcttggc caaggttttt atcaccaagc 240 agggctatgc cttgttggtt tcagatcttc aacaggtgtg gcatgaacag gtggacacta 300 gtgtggtcag ccagcgagcc aaggagctga acaagcggct cactgctcct cctgcagctt 360 tcctctgtca tttggataat ctccttcgcc cattgttgaa ggacgctgct caccctagcg 420 aagctacctt ctcctgtgat tgtgtggcag atgcactgat tctacgggtg cgaagtgagc 480 tctctggcct ccccttctat tggaatttcc actgcatgct agctagtcct tccctggtct 540 cccaacattt gattcgtcct ctgatgggca tgagtctggc attacagtgc caagtgaggg 600 agctagcaac gttacttcat atgaaagacc tagagatcca agactaccag gagagtgggg 660 ctacgctgat tcgagatcga ttgaagacag aaccatttga agaaaattcc ttcttggaac 720 aatttatgat agagaaactg ccagaggcat gcagcattgg tgatggaaag ccctttgtca 780 tgaatctgca ggatctgtat atggcagtca ccacacaaga ggtccaagtg ggacagaagc 840 atcaaggcgc tggagatcct catacctcaa acagtgcttc cctgcaagga atcgatagcc 900 aatgtgtaaa ccagccagaa caactggtct cctcagcccc aaccctctca gcacctgaga 960 aagagtccac gggtacttca ggccctctgc agagacctca gctgtcaaag gtcaagagga 1020 agaagccaag gggtctcttc agttaatctg ttgtggcctc agctgctgag gatggacttg 1080 gagaacagct tccaagcttc accttgaaag aagcttacat ggcagcaata tttctaaaat 1140 agtgatacag tcagaggcct cctgtaaggg cgagagaact gaagttgatg ttgacaggcc 1200 cacagggaat tggccttccc tgttcaagtg gaagccagtc tctgagaatc ccgtgctctc 1260 ctctcttttg gtggaggttc tgtaggttca ggtttctacc atggacttta ggtatatagg 1320 gcaagtcagc aagaaagcac cacacactca ggaagccttg tctacctttc cctagcgtct 1380 ctagccagcc agccccagat actcctcaga gacccacttc tctcttttgc atggaataaa 1440 aagcactcac agtccctgct tttgggatta cttatgctgt ggaactcata acccaattca 1500 cttccttcac tgggtcccac cccattgttg tctctggatg aagtctagcc atcagtctgg 1560 tccttcagat tcttcgtaaa cttttctgca gttgccagag ctaagtctcc atttggaaac 1620 tttgatctca agaactctct tgatggtggg cacaagacag ataggtgatt gctgctttcc 1680 tttgccaaac ttggatgcat ttttctcttt gtttccaaag tataggcaac aggttaaact 1740 accacgtggg gtagtttatc aatcctcccg cctcatcctt ctgcataact gggactaaag 1800 gcacacacca ccacacctag ctaatttttg tatttttttg tgtgtggaga caaggctttg 1860 ccatgttgcc caggctggtc ttgaactcct ggactctagt gatctgccca cctcaacctc 1920 ccaaagtgct gggattacag gcatgagcta ccacgcctat ccaatttctg gtttatttac 1980 tttcgatggt taaatgcctc cttattcaaa tatcctgtat atatactggc gtttctgtcc 2040 tgatgtcaag tctcgagaga agatgatcaa acaataataa aataattata ataagaacaa 2100 caaaaaaaaa aaaaaaaaa 2119 <210> 31 <400> 31 000 <210> 32 <400> 32 000 <210> 33 <400> 33 000 <210> 34 <400> 34 000 <210> 35 <400> 35 000 <210> 36 <400> 36 000 <210> 37 <400> 37 000 <210> 38 <400> 38 000 <210> 39 <400> 39 000 <210> 40 <400> 40 000 <210> 41 <400> 41 000 <210> 42 <400> 42 000 <210> 43 <400> 43 000 <210> 44 <400> 44 000 <210> 45 <400> 45 000 <210> 46 <400> 46 000 <210> 47 <400> 47 000 <210> 48 <400> 48 000 <210> 49 <400> 49 000 <210> 50 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 50 ccggccagtc caaatggcta ttatactcga gtataatagc catttggact ggtttttg 58 <210> 51 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 51 ccggcccact tacttcttac actttctcga gaaagtgtaa gaagtaagtg ggtttttg 58 <210> 52 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 52 ccggcccgac ttgaaggtag aagttctcga gaacttctac cttcaagtcg ggtttttg 58 <210> 53 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 53 ccggacccac ttacttctta cacttctcga gaagtgtaag aagtaagtgg gttttttg 58 <210> 54 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 54 ccggtgatat gctccggcta gttacctcga ggtaactagc cggagcatat catttttg 58 <210> 55 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 55 ccggatgaga ccacacacct ataatctcga gattataggt gtgtggtctc attttttg 58 <210> 56 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 56 ccggtcatta gtttcacgtt gtttactcga gtaaacaacg tgaaactaat gatttttg 58 <210> 57 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 57 ccggtgcaac gacacaaact ataatctcga gattatagtt tgtgtcgttg catttttg 58 <210> 58 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 58 ccggcaccta acagcacgat gtatactcga gtatacatcg tgctgttagg tgtttttg 58 <210> 59 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 59 ccgggcctgc ttcttctctc catatctcga gatatggaga gaagaagcag gctttttg 58 <210> 60 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 60 ccggcccaga attattgctg caattctcga gaattgcagc aataattctg ggtttttg 58 <210> 61 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 61 ccgggctgca attaagaaag ccaaactcga gtttggcttt cttaattgca gctttttg 58 <210> 62 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 62 ccggctgctt cagaagctcc gatttctcga gaaatcggag cttctgaagc agtttttg 58 <210> 63 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 63 ccggcttgtt ggagtgtgtg aataactcga gttattcaca cactccaaca agtttttg 58 <210> 64 <211> 57 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 64 ccgggctgaa gctatgttcg ccattctcga gaatggcgaa catagcttca gcttttt 57 <210> 65 <211> 57 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 65 ccggcggtca gagatcatac agattctcga gaatctgtat gatctctgac cgttttt 57 <210> 66 <211> 57 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 66 ccgggctaag actaactcaa gataactcga gttatcttga gttagtctta gcttttt 57 <210> 67 <211> 57 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 67 ccggcgccct ttacagaaca gactactcga gtagtctgtt ctgtaaaggg cgttttt 57 <210> 68 <211> 57 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 68 ccggccacaa cccatttcac ggttactcga gtaaccgtga aatgggttgt ggttttt 57 <210> 69 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 69 ccggcggtca gagatcatac agattctcga gaatctgtat gatctctgac cgtttttg 58 <210> 70 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 70 ccggcgccct ttacagaaca gactactcga gtagtctgtt ctgtaaaggg cgtttttg 58 <210> 71 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 71 ccggttagag cagtgtggca taaatctcga gatttatgcc acactgctct aatttttg 58 <210> 72 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 72 ccgggctgaa gctatgttcg ccattctcga gaatggcgaa catagcttca gctttttg 58 <210> 73 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 73 ccggcctgtg atgaagttct acaaactcga gtttgtagaa cttcatcaca ggttttttg 59 <210> 74 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 74 ccggccatta tgcaagtgtt cctatctcga gataggaaca cttgcataat ggttttttg 59 <210> 75 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 75 ccgggcaaac ggcttatggg ataaactcga gtttatccca taagccgttt gcttttttg 59 <210> 76 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 76 ccggcccagt tatcttgacg aatcactcga gtgattcgtc aagataactg ggttttttg 59 <210> 77 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 77 ccggcccaaa gatgcaaacg gcttactcga gtaagccgtt tgcatctttg ggttttttg 59 <210> 78 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 78 ccggccaaag atgcaaacgg cttatctcga gataagccgt ttgcatcttt ggtttttg 58 <210> 79 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 79 ccggggcatc ctccttgaag tatttctcga gaaatacttc aaggaggatg cctttttg 58 <210> 80 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 80 ccggttgaca cagagtctgc atttactcga gtaaatgcag actctgtgtc aatttttg 58 <210> 81 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 81 ccggcagaag agaatgtctc acaaactcga gtttgtgaga cattctcttc tgttttttg 59 <210> 82 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 82 ccgggttggg atatctaaag cagaactcga gttctgcttt agatatccca acttttttg 59 <210> 83 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 83 ccgggcttca taatcacctt ctgttctcga gaacagaagg tgattatgaa gcttttttg 59 <210> 84 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 84 ccgggcaaag aagttgggat atctactcga gtagatatcc caacttcttt gcttttttg 59 <210> 85 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 85 ccgggaagcc ttagaaactc tgcaactcga gttgcagagt ttctaaggct tcttttttg 59 <210> 86 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 86 ccgggttggg atatctaaag cagaactcga gttctgcttt agatatccca actttttg 58 <210> 87 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 87 ccggcagaag agaatgtctc acaaactcga gtttgtgaga cattctcttc tgtttttg 58 <210> 88 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 88 ccggagcata cccagggctt cataactcga gttatgaagc cctgggtatg cttttttg 58 <210> 89 <211> 58 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 89 ccgggcaaag aagttgggat atctactcga gtagatatcc caacttcttt gctttttg 58 <210> 90 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 90 ccgggaaatg tggcttgtct tacaactcga gttgtaagac aagccacatt tcttttttg 59 <210> 91 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 91 ccgggtctct atactggaga agtgactcga gtcacttctc cagtatagag acttttttg 59 <210> 92 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 92 ccggccacgt ttccttccct tatttctcga gaaataaggg aaggaaacgt ggttttttg 59 <210> 93 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 93 ccggcgtgta tgtttctggt ggaaactcga gtttccacca gaaacataca cgttttttg 59 <210> 94 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 94 ccgggctggt ctctatactg gagaactcga gttctccagt atagagacca gcttttttg 59 <210> 95 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 95 ccgggctcag aaatgtggct tgtctctcga gagacaagcc acatttctga gcttttttg 59 <210> 96 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 96 ccggcctgtg ctgttgtttg ggaaactcga gtttcccaaa caacagcaca ggttttttg 59 <210> 97 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 97 ccggctggaa gaggtagctc agaaactcga gtttctgagc tacctcttcc agttttttg 59 <210> 98 <211> 59 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 98 ccggcaggta tgtctctgta tggcactcga gtgccataca gagacatacc tgttttttg 59 <210> 99 <211> 198 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 99 Met Asp Ser Leu Leu Met Asn Arg Arg Lys Phe Leu Tyr Gln Phe Lys 1 5 10 15 Asn Val Arg Trp Ala Lys Gly Arg Arg Glu Thr Tyr Leu Cys Tyr Val 20 25 30 Val Lys Arg Arg Asp Ser Ala Thr Ser Phe Ser Leu Asp Phe Gly Tyr 35 40 45 Leu Arg Asn Lys Asn Gly Cys His Val Glu Leu Leu Phe Leu Arg Tyr 50 55 60 Ile Ser Asp Trp Asp Leu Asp Pro Gly Arg Cys Tyr Arg Val Thr Trp 65 70 75 80 Phe Thr Ser Trp Ser Pro Cys Tyr Asp Cys Ala Arg His Val Ala Asp 85 90 95 Phe Leu Arg Gly Asn Pro Asn Leu Ser Leu Arg Ile Phe Thr Ala Arg 100 105 110 Leu Tyr Phe Cys Glu Asp Arg Lys Ala Glu Pro Glu Gly Leu Arg Arg 115 120 125 Leu His Arg Ala Gly Val Gln Ile Ala Ile Met Thr Phe Lys Asp Tyr 130 135 140 Phe Tyr Cys Trp Asn Thr Phe Val Glu Asn His Glu Arg Thr Phe Lys 145 150 155 160 Ala Trp Glu Gly Leu His Glu Asn Ser Val Arg Leu Ser Arg Gln Leu 165 170 175 Arg Arg Ile Leu Leu Pro Leu Tyr Glu Val Asp Asp Leu Arg Asp Ala 180 185 190 Phe Arg Thr Leu Gly Leu 195 <210> 100 <211> 2794 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 100 agagaaccat cattaattga agtgagattt ttctggcctg agacttgcag ggaggcaaga 60 agacactctg gacaccacta tggacagcct cttgatgaac cggaggaagt ttctttacca 120 attcaaaaat gtccgctggg ctaagggtcg gcgtgagacc tacctgtgct acgtagtgaa 180 gaggcgtgac agtgctacat ccttttcact ggactttggt tatcttcgca ataagaacgg 240 ctgccacgtg gaattgctct tcctccgcta catctcggac tgggacctag accctggccg 300 ctgctaccgc gtcacctggt tcacctcctg gagcccctgc tacgactgtg cccgacatgt 360 ggccgacttt ctgcgaggga accccaacct cagtctgagg atcttcaccg cgcgcctcta 420 cttctgtgag gaccgcaagg ctgagcccga ggggctgcgg cggctgcacc gcgccggggt 480 gcaaatagcc atcatgacct tcaaagatta tttttactgc tggaatactt ttgtagaaaa 540 ccacgaaaga actttcaaag cctgggaagg gctgcatgaa aattcagttc gtctctccag 600 acagcttcgg cgcatccttt tgcccctgta tgaggttgat gacttacgag acgcatttcg 660 tactttggga ctttgatagc aacttccagg aatgtcacac acgatgaaat atctctgctg 720 aagacagtgg ataaaaaaca gtccttcaag tcttctctgt ttttattctt caactctcac 780 tttcttagag tttacagaaa aaatatttat atacgactct ttaaaaagat ctatgtcttg 840 aaaatagaga aggaacacag gtctggccag ggacgtgctg caattggtgc agttttgaat 900 gcaacattgt cccctactgg gaataacaga actgcaggac ctgggagcat cctaaagtgt 960 caacgttttt ctatgacttt taggtaggat gagagcagaa ggtagatcct aaaaagcatg 1020 gtgagaggat caaatgtttt tatatcaaca tcctttatta tttgattcat ttgagttaac 1080 agtggtgtta gtgatagatt tttctattct tttcccttga cgtttacttt caagtaacac 1140 aaactcttcc atcaggccat gatctatagg acctcctaat gagagtatct gggtgattgt 1200 gaccccaaac catctctcca aagcattaat atccaatcat gcgctgtatg ttttaatcag 1260 cagaagcatg tttttatgtt tgtacaaaag aagattgtta tgggtgggga tggaggtata 1320 gaccatgcat ggtcaccttc aagctacttt aataaaggat cttaaaatgg gcaggaggac 1380 tgtgaacaag acaccctaat aatgggttga tgtctgaagt agcaaatctt ctggaaacgc 1440 aaactctttt aaggaagtcc ctaatttaga aacacccaca aacttcacat atcataatta 1500 gcaaacaatt ggaaggaagt tgcttgaatg ttggggagag gaaaatctat tggctctcgt 1560 gggtctcttc atctcagaaa tgccaatcag gtcaaggttt gctacatttt gtatgtgtgt 1620 gatgcttctc ccaaaggtat attaactata taagagagtt gtgacaaaac agaatgataa 1680 agctgcgaac cgtggcacac gctcatagtt ctagctgctt gggaggttga ggagggagga 1740 tggcttgaac acaggtgttc aaggccagcc tgggcaacat aacaagatcc tgtctctcaa 1800 aaaaaaaaaa aaaaaaaaga aagagagagg gccgggcgtg gtggctcacg cctgtaatcc 1860 cagcactttg ggaggccgag ccgggcggat cacctgtggt caggagtttg agaccagcct 1920 ggccaacatg gcaaaacccc gtctgtactc aaaatgcaaa aattagccag gcgtggtagc 1980 aggcacctgt aatcccagct acttgggagg ctgaggcagg agaatcgctt gaacccagga 2040 ggtggaggtt gcagtaagct gagatcgtgc cgttgcactc cagcctgggc gacaagagca 2100 agactctgtc tcagaaaaaa aaaaaaaaaa gagagagaga gagaaagaga acaatatttg 2160 ggagagaagg atggggaagc attgcaagga aattgtgctt tatccaacaa aatgtaagga 2220 gccaataagg gatccctatt tgtctctttt ggtgtctatt tgtccctaac aactgtcttt 2280 gacagtgaga aaaatattca gaataaccat atccctgtgc cgttattacc tagcaaccct 2340 tgcaatgaag atgagcagat ccacaggaaa acttgaatgc acaactgtct tattttaatc 2400 ttattgtaca taagtttgta aaagagttaa aaattgttac ttcatgtatt catttatatt 2460 ttatattatt ttgcgtctaa tgatttttta ttaacatgat ttccttttct gatatattga 2520 aatggagtct caaagcttca taaatttata actttagaaa tgattctaat aacaacgtat 2580 gtaattgtaa cattgcagta atggtgctac gaagccattt ctcttgattt ttagtaaact 2640 tttatgacag caaatttgct tctggctcac tttcaatcag ttaaataaat gataaataat 2700 tttggaagct gtgaagataa aataccaaat aaaataatat aaaagtgatt tatatgaagt 2760 taaaataaaa aatcagtatg atggaataaa cttg 2794 <210> 101 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 101 tccttttcac tggactttgg 20 <210> 102 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 102 gactgaggtt ggggttcc 18 <210> 103 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 103 gagtcaacgg atttggtcgt 20 <210> 104 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 104 ttgattttgg agggatctcg 20 <210> 105 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 105 accacagtcc atgccatcac 20 <210> 106 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 106 tccaccaccc tgtggctgta 20 <210> 107 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 107 ggcctcagtg aaggtctcct gcaag 25 <210> 108 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 108 gtctggtcct acgctggtga aaccc 25 <210> 109 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 109 ctggggggtc cctgagactc tcctg 25 <210> 110 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 110 cttcggagac cctgtccctc acctg 25 <210> 111 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 111 cggggagtct ctgaagatct cctgt 25 <210> 112 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic primer" <400> 112 tcgcagaccc tctcactcac ctgtg 25 <210> 113 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic consensus sequence" <400> 113 cttacctgag gagacggtga cc 22 <210> 114 <211> 352 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 114 Met Val Arg Pro Val Arg His Lys Lys Pro Val Asn Tyr Ser Gln Phe 1 5 10 15 Asp His Ser Asp Ser Asp Asp Asp Phe Val Ser Ala Thr Val Pro Leu 20 25 30 Asn Lys Lys Ser Arg Thr Ala Pro Lys Glu Leu Lys Gln Asp Lys Pro 35 40 45 Lys Pro Asn Leu Asn Asn Leu Arg Lys Glu Glu Ile Pro Val Gln Glu 50 55 60 Lys Thr Pro Lys Lys Arg Leu Pro Glu Gly Thr Phe Ser Ile Pro Ala 65 70 75 80 Ser Ala Val Pro Cys Thr Lys Met Ala Leu Asp Asp Lys Leu Tyr Gln 85 90 95 Arg Asp Leu Glu Val Ala Leu Ala Leu Ser Val Lys Glu Leu Pro Thr 100 105 110 Val Thr Thr Asn Val Gln Asn Ser Gln Asp Lys Ser Ile Glu Lys His 115 120 125 Gly Ser Ser Lys Ile Glu Thr Met Asn Lys Ser Pro His Ile Ser Asn 130 135 140 Cys Ser Val Ala Ser Asp Tyr Leu Asp Leu Asp Lys Ile Thr Val Glu 145 150 155 160 Asp Asp Val Gly Gly Val Gln Gly Lys Arg Lys Ala Ala Ser Lys Ala 165 170 175 Ala Ala Gln Gln Arg Lys Ile Leu Leu Glu Gly Ser Asp Gly Asp Ser 180 185 190 Ala Asn Asp Thr Glu Pro Asp Phe Ala Pro Gly Glu Asp Ser Glu Asp 195 200 205 Asp Ser Asp Phe Cys Glu Ser Glu Asp Asn Asp Glu Asp Phe Ser Met 210 215 220 Arg Lys Ser Lys Val Lys Glu Ile Lys Lys Lys Glu Val Lys Val Lys 225 230 235 240 Ser Pro Val Glu Lys Lys Glu Lys Lys Ser Lys Ser Lys Cys Asn Ala 245 250 255 Leu Val Thr Ser Val Asp Ser Ala Pro Ala Ala Val Lys Ser Glu Ser 260 265 270 Gln Ser Leu Pro Lys Lys Val Ser Leu Ser Ser Asp Thr Thr Arg Lys 275 280 285 Pro Leu Glu Ile Arg Ser Pro Ser Ala Glu Ser Lys Lys Pro Lys Trp 290 295 300 Val Pro Pro Ala Ala Ser Gly Gly Ser Arg Ser Ser Ser Ser Pro Leu 305 310 315 320 Val Val Val Ser Val Lys Ser Pro Asn Gln Ser Leu Arg Leu Gly Leu 325 330 335 Ser Arg Leu Ala Arg Val Lys Pro Leu His Pro Asn Ala Thr Ser Thr 340 345 350 <210> 115 <211> 350 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 115 Met Gly Ser Lys Lys Leu Lys Arg Val Gly Leu Ser Gln Glu Leu Cys 1 5 10 15 Asp Arg Leu Ser Arg His Gln Ile Leu Thr Cys Gln Asp Phe Leu Cys 20 25 30 Leu Ser Pro Leu Glu Leu Met Lys Val Thr Gly Leu Ser Tyr Arg Gly 35 40 45 Val His Glu Leu Leu Cys Met Val Ser Arg Ala Cys Ala Pro Lys Met 50 55 60 Gln Thr Ala Tyr Gly Ile Lys Ala Gln Arg Ser Ala Asp Phe Ser Pro 65 70 75 80 Ala Phe Leu Ser Thr Thr Leu Ser Ala Leu Asp Glu Ala Leu His Gly 85 90 95 Gly Val Ala Cys Gly Ser Leu Thr Glu Ile Thr Gly Pro Pro Gly Cys 100 105 110 Gly Lys Thr Gln Phe Cys Ile Met Met Ser Ile Leu Ala Thr Leu Pro 115 120 125 Thr Asn Met Gly Gly Leu Glu Gly Ala Val Val Tyr Ile Asp Thr Glu 130 135 140 Ser Ala Phe Ser Ala Glu Arg Leu Val Glu Ile Ala Glu Ser Arg Phe 145 150 155 160 Pro Arg Tyr Phe Asn Thr Glu Glu Lys Leu Leu Leu Thr Ser Ser Lys 165 170 175 Val His Leu Tyr Arg Glu Leu Thr Cys Asp Glu Val Leu Gln Arg Ile 180 185 190 Glu Ser Leu Glu Glu Glu Ile Ile Ser Lys Gly Ile Lys Leu Val Ile 195 200 205 Leu Asp Ser Val Ala Ser Val Val Arg Lys Glu Phe Asp Ala Gln Leu 210 215 220 Gln Gly Asn Leu Lys Glu Arg Asn Lys Phe Leu Ala Arg Glu Ala Ser 225 230 235 240 Ser Leu Lys Tyr Leu Ala Glu Glu Phe Ser Ile Pro Val Ile Leu Thr 245 250 255 Asn Gln Ile Thr Thr His Leu Ser Gly Ala Leu Ala Ser Gln Ala Asp 260 265 270 Leu Val Ser Pro Ala Asp Asp Leu Ser Leu Ser Glu Gly Thr Ser Gly 275 280 285 Ser Ser Cys Val Ile Ala Ala Leu Gly Asn Thr Trp Ser His Ser Val 290 295 300 Asn Thr Arg Leu Ile Leu Gln Tyr Leu Asp Ser Glu Arg Arg Gln Ile 305 310 315 320 Leu Ile Ala Lys Ser Pro Leu Ala Pro Phe Thr Ser Phe Val Tyr Thr 325 330 335 Ile Lys Glu Glu Gly Leu Val Leu Gln Ala Tyr Gly Asn Ser 340 345 350 <210> 116 <211> 348 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 116 Met Gly Val Leu Arg Val Gly Leu Cys Pro Gly Leu Thr Glu Glu Met 1 5 10 15 Ile Gln Leu Leu Arg Ser His Arg Ile Lys Thr Val Val Asp Leu Val 20 25 30 Ser Ala Asp Leu Glu Glu Val Ala Gln Lys Cys Gly Leu Ser Tyr Lys 35 40 45 Thr Trp Arg Ala His Ser Ser Gly Asn Leu Gly Gly Leu Gln Leu Pro 50 55 60 Gln Val Pro Ala Gly Arg Ser Trp Ser Gly Val Arg Asn Ala Leu Lys 65 70 75 80 Lys Ala Gly Leu Gly His Gly Gly Thr Asp Gly Leu Ser Leu Asn Ala 85 90 95 Phe Asp Glu Arg Gly Thr Ala Val Ser Thr Ser Arg Leu Asp Lys Leu 100 105 110 Leu Asp Ala Gly Leu Tyr Thr Gly Glu Val Thr Glu Ile Val Gly Gly 115 120 125 Pro Gly Ser Gly Lys Thr Gln Val Cys Leu Cys Met Ala Ala Asn Val 130 135 140 Ala His Gly Leu Gln Gln Asn Val Leu Tyr Val Asp Ser Asn Gly Gly 145 150 155 160 Leu Thr Ala Ser Arg Leu Leu Gln Leu Leu Gln Ala Lys Thr Gln Asp 165 170 175 Glu Glu Glu Gln Ala Glu Ala Leu Arg Arg Ile Gln Val Val His Ala 180 185 190 Phe Asp Ile Phe Gln Met Leu Asp Val Leu Gln Glu Leu Arg Gly Thr 195 200 205 Val Ala Gln Gln Val Thr Gly Ser Ser Gly Thr Val Lys Val Val Val 210 215 220 Val Asp Ser Val Thr Ala Val Val Ser Pro Leu Leu Gly Gly Gln Gln 225 230 235 240 Arg Glu Gly Leu Ala Leu Met Met Gln Leu Ala Arg Glu Leu Lys Thr 245 250 255 Leu Ala Arg Asp Leu Gly Met Ala Val Val Val Thr Asn His Ile Thr 260 265 270 Arg Asp Arg Asp Ser Gly Arg Leu Lys Pro Ala Leu Gly Arg Ser Trp 275 280 285 Ser Phe Val Pro Ser Thr Arg Ile Leu Leu Asp Thr Ile Glu Gly Ala 290 295 300 Gly Ala Ser Gly Gly Arg Arg Met Ala Cys Leu Ala Lys Ser Ser Arg 305 310 315 320 Gln Pro Thr Gly Phe Gln Glu Met Val Asp Ile Gly Thr Trp Gly Thr 325 330 335 Ser Glu Gln Ser Ala Thr Leu Gln Gly Asp Gln Thr 340 345 <210> 117 <211> 280 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 117 Met Cys Ser Ala Phe His Arg Ala Glu Ser Gly Thr Glu Leu Leu Ala 1 5 10 15 Arg Leu Glu Gly Arg Ser Ser Leu Lys Glu Ile Glu Pro Asn Leu Phe 20 25 30 Ala Asp Glu Asp Ser Pro Val His Gly Asp Ile Leu Glu Phe His Gly 35 40 45 Pro Glu Gly Thr Gly Lys Thr Glu Met Leu Tyr His Leu Thr Ala Arg 50 55 60 Cys Ile Leu Pro Lys Ser Glu Gly Gly Leu Glu Val Glu Val Leu Phe 65 70 75 80 Ile Asp Thr Asp Tyr His Phe Asp Met Leu Arg Leu Val Thr Ile Leu 85 90 95 Glu His Arg Leu Ser Gln Ser Ser Glu Glu Ile Ile Lys Tyr Cys Leu 100 105 110 Gly Arg Phe Phe Leu Val Tyr Cys Ser Ser Ser Thr His Leu Leu Leu 115 120 125 Thr Leu Tyr Ser Leu Glu Ser Met Phe Cys Ser His Pro Ser Leu Cys 130 135 140 Leu Leu Ile Leu Asp Ser Leu Ser Ala Phe Tyr Trp Ile Asp Arg Val 145 150 155 160 Asn Gly Gly Glu Ser Val Asn Leu Gln Glu Ser Thr Leu Arg Lys Cys 165 170 175 Ser Gln Cys Leu Glu Lys Leu Val Asn Asp Tyr Arg Leu Val Leu Phe 180 185 190 Ala Thr Thr Gln Thr Ile Met Gln Lys Ala Ser Ser Ser Ser Glu Glu 195 200 205 Pro Ser His Ala Ser Arg Arg Leu Cys Asp Val Asp Ile Asp Tyr Arg 210 215 220 Pro Tyr Leu Cys Lys Ala Trp Gln Gln Leu Val Lys His Arg Met Phe 225 230 235 240 Phe Ser Lys Gln Asp Asp Ser Gln Ser Ser Asn Gln Phe Ser Leu Val 245 250 255 Ser Arg Cys Leu Lys Ser Asn Ser Leu Lys Lys His Phe Phe Ile Ile 260 265 270 Gly Glu Ser Gly Val Glu Phe Cys 275 280 <210> 118 <211> 346 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 118 Met Asp Leu Asp Leu Leu Asp Leu Asn Pro Arg Ile Ile Ala Ala Ile 1 5 10 15 Lys Lys Ala Lys Leu Lys Ser Val Lys Glu Val Leu His Phe Ser Gly 20 25 30 Pro Asp Leu Lys Arg Leu Thr Asn Leu Ser Ser Pro Glu Val Trp His 35 40 45 Leu Leu Arg Thr Ala Ser Leu His Leu Arg Gly Ser Ser Ile Leu Thr 50 55 60 Ala Leu Gln Leu His Gln Gln Lys Glu Arg Phe Pro Thr Gln His Gln 65 70 75 80 Arg Leu Ser Leu Gly Cys Pro Val Leu Asp Ala Leu Leu Arg Gly Gly 85 90 95 Leu Pro Leu Asp Gly Ile Thr Glu Leu Ala Gly Arg Ser Ser Ala Gly 100 105 110 Lys Thr Gln Leu Ala Leu Gln Leu Cys Leu Ala Val Gln Phe Pro Arg 115 120 125 Gln His Gly Gly Leu Glu Ala Gly Ala Val Tyr Ile Cys Thr Glu Asp 130 135 140 Ala Phe Pro His Lys Arg Leu Gln Gln Leu Met Ala Gln Gln Pro Arg 145 150 155 160 Leu Arg Thr Asp Val Pro Gly Glu Leu Leu Gln Lys Leu Arg Phe Gly 165 170 175 Ser Gln Ile Phe Ile Glu His Val Ala Asp Val Asp Thr Leu Leu Glu 180 185 190 Cys Val Asn Lys Lys Val Pro Val Leu Leu Ser Arg Gly Met Ala Arg 195 200 205 Leu Val Val Ile Asp Ser Val Ala Ala Pro Phe Arg Cys Glu Phe Asp 210 215 220 Ser Gln Ala Ser Ala Pro Arg Ala Arg His Leu Gln Ser Leu Gly Ala 225 230 235 240 Thr Leu Arg Glu Leu Ser Ser Ala Phe Gln Ser Pro Val Leu Cys Ile 245 250 255 Asn Gln Val Thr Glu Ala Met Glu Glu Gln Gly Ala Ala His Gly Pro 260 265 270 Leu Gly Phe Trp Asp Glu Arg Val Ser Pro Ala Leu Gly Ile Thr Trp 275 280 285 Ala Asn Gln Leu Leu Val Arg Leu Leu Ala Asp Arg Leu Arg Glu Glu 290 295 300 Glu Ala Ala Leu Gly Cys Pro Ala Arg Thr Leu Arg Val Leu Ser Ala 305 310 315 320 Pro His Leu Pro Pro Ser Ser Cys Ser Tyr Thr Ile Ser Ala Glu Gly 325 330 335 Val Arg Gly Thr Pro Gly Thr Gln Ser His 340 345 <210> 119 <211> 2492 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 119 Met Thr Ala Glu Pro Met Ser Glu Ser Lys Leu Asn Thr Leu Val Gln 1 5 10 15 Lys Leu His Asp Phe Leu Ala His Ser Ser Glu Glu Ser Glu Glu Thr 20 25 30 Ser Ser Pro Pro Arg Leu Ala Met Asn Gln Asn Thr Asp Lys Ile Ser 35 40 45 Gly Ser Gly Ser Asn Ser Asp Met Met Glu Asn Ser Lys Glu Glu Gly 50 55 60 Thr Ser Ser Ser Glu Lys Ser Lys Ser Ser Gly Ser Ser Arg Ser Lys 65 70 75 80 Arg Lys Pro Ser Ile Val Thr Lys Tyr Val Glu Ser Asp Asp Glu Lys 85 90 95 Pro Leu Asp Asp Glu Thr Val Asn Glu Asp Ala Ser Asn Glu Asn Ser 100 105 110 Glu Asn Asp Ile Thr Met Gln Ser Leu Pro Lys Gly Thr Val Ile Val 115 120 125 Gln Pro Glu Pro Val Leu Asn Glu Asp Lys Asp Asp Phe Lys Gly Pro 130 135 140 Glu Phe Arg Ser Arg Ser Lys Met Lys Thr Glu Asn Leu Lys Lys Arg 145 150 155 160 Gly Glu Asp Gly Leu His Gly Ile Val Ser Cys Thr Ala Cys Gly Gln 165 170 175 Gln Val Asn His Phe Gln Lys Asp Ser Ile Tyr Arg His Pro Ser Leu 180 185 190 Gln Val Leu Ile Cys Lys Asn Cys Phe Lys Tyr Tyr Met Ser Asp Asp 195 200 205 Ile Ser Arg Asp Ser Asp Gly Met Asp Glu Gln Cys Arg Trp Cys Ala 210 215 220 Glu Gly Gly Asn Leu Ile Cys Cys Asp Phe Cys His Asn Ala Phe Cys 225 230 235 240 Lys Lys Cys Ile Leu Arg Asn Leu Gly Arg Lys Glu Leu Ser Thr Ile 245 250 255 Met Asp Glu Asn Asn Gln Trp Tyr Cys Tyr Ile Cys His Pro Glu Pro 260 265 270 Leu Leu Asp Leu Val Thr Ala Cys Asn Ser Val Phe Glu Asn Leu Glu 275 280 285 Gln Leu Leu Gln Gln Asn Lys Lys Lys Ile Lys Val Asp Ser Glu Lys 290 295 300 Ser Asn Lys Val Tyr Glu His Thr Ser Arg Phe Ser Pro Lys Lys Thr 305 310 315 320 Ser Ser Asn Cys Asn Gly Glu Glu Lys Lys Leu Asp Asp Ser Cys Ser 325 330 335 Gly Ser Val Thr Tyr Ser Tyr Ser Ala Leu Ile Val Pro Lys Glu Met 340 345 350 Ile Lys Lys Ala Lys Lys Leu Ile Glu Thr Thr Ala Asn Met Asn Ser 355 360 365 Ser Tyr Val Lys Phe Leu Lys Gln Ala Thr Asp Asn Ser Glu Ile Ser 370 375 380 Ser Ala Thr Lys Leu Arg Gln Leu Lys Ala Phe Lys Ser Val Leu Ala 385 390 395 400 Asp Ile Lys Lys Ala His Leu Ala Leu Glu Glu Asp Leu Asn Ser Glu 405 410 415 Phe Arg Ala Met Asp Ala Val Asn Lys Glu Lys Asn Thr Lys Glu His 420 425 430 Lys Val Ile Asp Ala Lys Phe Glu Thr Lys Ala Arg Lys Gly Glu Lys 435 440 445 Pro Cys Ala Leu Glu Lys Lys Asp Ile Ser Lys Ser Glu Ala Lys Leu 450 455 460 Ser Arg Lys Gln Val Asp Ser Glu His Met His Gln Asn Val Pro Thr 465 470 475 480 Glu Glu Gln Arg Thr Asn Lys Ser Thr Gly Gly Glu His Lys Lys Ser 485 490 495 Asp Arg Lys Glu Glu Pro Gln Tyr Glu Pro Ala Asn Thr Ser Glu Asp 500 505 510 Leu Asp Met Asp Ile Val Ser Val Pro Ser Ser Val Pro Glu Asp Ile 515 520 525 Phe Glu Asn Leu Glu Thr Ala Met Glu Val Gln Ser Ser Val Asp His 530 535 540 Gln Gly Asp Gly Ser Ser Gly Thr Glu Gln Glu Val Glu Ser Ser Ser 545 550 555 560 Val Lys Leu Asn Ile Ser Ser Lys Asp Asn Arg Gly Gly Ile Lys Ser 565 570 575 Lys Thr Thr Ala Lys Val Thr Lys Glu Leu Tyr Val Lys Leu Thr Pro 580 585 590 Val Ser Leu Ser Asn Ser Pro Ile Lys Gly Ala Asp Cys Gln Glu Val 595 600 605 Pro Gln Asp Lys Asp Gly Tyr Lys Ser Cys Gly Leu Asn Pro Lys Leu 610 615 620 Glu Lys Cys Gly Leu Gly Gln Glu Asn Ser Asp Asn Glu His Leu Val 625 630 635 640 Glu Asn Glu Val Ser Leu Leu Leu Glu Glu Ser Asp Leu Arg Arg Ser 645 650 655 Pro Arg Val Lys Thr Thr Pro Leu Arg Arg Pro Thr Glu Thr Asn Pro 660 665 670 Val Thr Ser Asn Ser Asp Glu Glu Cys Asn Glu Thr Val Lys Glu Lys 675 680 685 Gln Lys Leu Ser Val Pro Val Arg Lys Lys Asp Lys Arg Asn Ser Ser 690 695 700 Asp Ser Ala Ile Asp Asn Pro Lys Pro Asn Lys Leu Pro Lys Ser Lys 705 710 715 720 Gln Ser Glu Thr Val Asp Gln Asn Ser Asp Ser Asp Glu Met Leu Ala 725 730 735 Ile Leu Lys Glu Val Ser Arg Met Ser His Ser Ser Ser Ser Asp Thr 740 745 750 Asp Ile Asn Glu Ile His Thr Asn His Lys Thr Leu Tyr Asp Leu Lys 755 760 765 Thr Gln Ala Gly Lys Asp Asp Lys Gly Lys Arg Lys Arg Lys Ser Ser 770 775 780 Thr Ser Gly Ser Asp Phe Asp Thr Lys Lys Gly Lys Ser Ala Lys Ser 785 790 795 800 Ser Ile Ile Ser Lys Lys Lys Arg Gln Thr Gln Ser Glu Ser Ser Asn 805 810 815 Tyr Asp Ser Glu Leu Glu Lys Glu Ile Lys Ser Met Ser Lys Ile Gly 820 825 830 Ala Ala Arg Thr Thr Lys Lys Arg Ile Pro Asn Thr Lys Asp Phe Asp 835 840 845 Ser Ser Glu Asp Glu Lys His Ser Lys Lys Gly Met Asp Asn Gln Gly 850 855 860 His Lys Asn Leu Lys Thr Ser Gln Glu Gly Ser Ser Asp Asp Ala Glu 865 870 875 880 Arg Lys Gln Glu Arg Glu Thr Phe Ser Ser Ala Glu Gly Thr Val Asp 885 890 895 Lys Asp Thr Thr Ile Met Glu Leu Arg Asp Arg Leu Pro Lys Lys Gln 900 905 910 Gln Ala Ser Ala Ser Thr Asp Gly Val Asp Lys Leu Ser Gly Lys Glu 915 920 925 Gln Ser Phe Thr Ser Leu Glu Val Arg Lys Val Ala Glu Thr Lys Glu 930 935 940 Lys Ser Lys His Leu Lys Thr Lys Thr Cys Lys Lys Val Gln Asp Gly 945 950 955 960 Leu Ser Asp Ile Ala Glu Lys Phe Leu Lys Lys Asp Gln Ser Asp Glu 965 970 975 Thr Ser Glu Asp Asp Lys Lys Gln Ser Lys Lys Gly Thr Glu Glu Lys 980 985 990 Lys Lys Pro Ser Asp Phe Lys Lys Lys Val Ile Lys Met Glu Gln Gln 995 1000 1005 Tyr Glu Ser Ser Ser Asp Gly Thr Glu Lys Leu Pro Glu Arg Glu 1010 1015 1020 Glu Ile Cys His Phe Pro Lys Gly Ile Lys Gln Ile Lys Asn Gly 1025 1030 1035 Thr Thr Asp Gly Glu Lys Lys Ser Lys Lys Ile Arg Asp Lys Thr 1040 1045 1050 Ser Lys Lys Lys Asp Glu Leu Ser Asp Tyr Ala Glu Lys Ser Thr 1055 1060 1065 Gly Lys Gly Asp Ser Cys Asp Ser Ser Glu Asp Lys Lys Ser Lys 1070 1075 1080 Asn Gly Ala Tyr Gly Arg Glu Lys Lys Arg Cys Lys Leu Leu Gly 1085 1090 1095 Lys Ser Ser Arg Lys Arg Gln Asp Cys Ser Ser Ser Asp Thr Glu 1100 1105 1110 Lys Tyr Ser Met Lys Glu Asp Gly Cys Asn Ser Ser Asp Lys Arg 1115 1120 1125 Leu Lys Arg Ile Glu Leu Arg Glu Arg Arg Asn Leu Ser Ser Lys 1130 1135 1140 Arg Asn Thr Lys Glu Ile Gln Ser Gly Ser Ser Ser Ser Asp Ala 1145 1150 1155 Glu Glu Ser Ser Glu Asp Asn Lys Lys Lys Lys Gln Arg Thr Ser 1160 1165 1170 Ser Lys Lys Lys Ala Val Ile Val Lys Glu Lys Lys Arg Asn Ser 1175 1180 1185 Leu Arg Thr Ser Thr Lys Arg Lys Gln Ala Asp Ile Thr Ser Ser 1190 1195 1200 Ser Ser Ser Asp Ile Glu Asp Asp Asp Gln Asn Ser Ile Gly Glu 1205 1210 1215 Gly Ser Ser Asp Glu Gln Lys Ile Lys Pro Val Thr Glu Asn Leu 1220 1225 1230 Val Leu Ser Ser His Thr Gly Phe Cys Gln Ser Ser Gly Asp Glu 1235 1240 1245 Ala Leu Ser Lys Ser Val Pro Val Thr Val Asp Asp Asp Asp Asp 1250 1255 1260 Asp Asn Asp Pro Glu Asn Arg Ile Ala Lys Lys Met Leu Leu Glu 1265 1270 1275 Glu Ile Lys Ala Asn Leu Ser Ser Asp Glu Asp Gly Ser Ser Asp 1280 1285 1290 Asp Glu Pro Glu Glu Gly Lys Lys Arg Thr Gly Lys Gln Asn Glu 1295 1300 1305 Glu Asn Pro Gly Asp Glu Glu Ala Lys Asn Gln Val Asn Ser Glu 1310 1315 1320 Ser Asp Ser Asp Ser Glu Glu Ser Lys Lys Pro Arg Tyr Arg His 1325 1330 1335 Arg Leu Leu Arg His Lys Leu Thr Val Ser Asp Gly Glu Ser Gly 1340 1345 1350 Glu Glu Lys Lys Thr Lys Pro Lys Glu His Lys Glu Val Lys Gly 1355 1360 1365 Arg Asn Arg Arg Lys Val Ser Ser Glu Asp Ser Glu Asp Ser Asp 1370 1375 1380 Phe Gln Glu Ser Gly Val Ser Glu Glu Val Ser Glu Ser Glu Asp 1385 1390 1395 Glu Gln Arg Pro Arg Thr Arg Ser Ala Lys Lys Ala Glu Leu Glu 1400 1405 1410 Glu Asn Gln Arg Ser Tyr Lys Gln Lys Lys Lys Arg Arg Arg Ile 1415 1420 1425 Lys Val Gln Glu Asp Ser Ser Ser Glu Asn Lys Ser Asn Ser Glu 1430 1435 1440 Glu Glu Glu Glu Glu Lys Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu 1445 1450 1455 Glu Glu Glu Glu Glu Glu Asp Glu Asn Asp Asp Ser Lys Ser Pro 1460 1465 1470 Gly Lys Gly Arg Lys Lys Ile Arg Lys Ile Leu Lys Asp Asp Lys 1475 1480 1485 Leu Arg Thr Glu Thr Gln Asn Ala Leu Lys Glu Glu Glu Glu Arg 1490 1495 1500 Arg Lys Arg Ile Ala Glu Arg Glu Arg Glu Arg Glu Lys Leu Arg 1505 1510 1515 Glu Val Ile Glu Ile Glu Asp Ala Ser Pro Thr Lys Cys Pro Ile 1520 1525 1530 Thr Thr Lys Leu Val Leu Asp Glu Asp Glu Glu Thr Lys Glu Pro 1535 1540 1545 Leu Val Gln Val His Arg Asn Met Val Ile Lys Leu Lys Pro His 1550 1555 1560 Gln Val Asp Gly Val Gln Phe Met Trp Asp Cys Cys Cys Glu Ser 1565 1570 1575 Val Lys Lys Thr Lys Lys Ser Pro Gly Ser Gly Cys Ile Leu Ala 1580 1585 1590 His Cys Met Gly Leu Gly Lys Thr Leu Gln Val Val Ser Phe Leu 1595 1600 1605 His Thr Val Leu Leu Cys Asp Lys Leu Asp Phe Ser Thr Ala Leu 1610 1615 1620 Val Val Cys Pro Leu Asn Thr Ala Leu Asn Trp Met Asn Glu Phe 1625 1630 1635 Glu Lys Trp Gln Glu Gly Leu Lys Asp Asp Glu Lys Leu Glu Val 1640 1645 1650 Ser Glu Leu Ala Thr Val Lys Arg Pro Gln Glu Arg Ser Tyr Met 1655 1660 1665 Leu Gln Arg Trp Gln Glu Asp Gly Gly Val Met Ile Ile Gly Tyr 1670 1675 1680 Glu Met Tyr Arg Asn Leu Ala Gln Gly Arg Asn Val Lys Ser Arg 1685 1690 1695 Lys Leu Lys Glu Ile Phe Asn Lys Ala Leu Val Asp Pro Gly Pro 1700 1705 1710 Asp Phe Val Val Cys Asp Glu Gly His Ile Leu Lys Asn Glu Ala 1715 1720 1725 Ser Ala Val Ser Lys Ala Met Asn Ser Ile Arg Ser Arg Arg Arg 1730 1735 1740 Ile Ile Leu Thr Gly Thr Pro Leu Gln Asn Asn Leu Ile Glu Tyr 1745 1750 1755 His Cys Met Val Asn Phe Ile Lys Glu Asn Leu Leu Gly Ser Ile 1760 1765 1770 Lys Glu Phe Arg Asn Arg Phe Ile Asn Pro Ile Gln Asn Gly Gln 1775 1780 1785 Cys Ala Asp Ser Thr Met Val Asp Val Arg Val Met Lys Lys Arg 1790 1795 1800 Ala His Ile Leu Tyr Glu Met Leu Ala Gly Cys Val Gln Arg Lys 1805 1810 1815 Asp Tyr Thr Ala Leu Thr Lys Phe Leu Pro Pro Lys His Glu Tyr 1820 1825 1830 Val Leu Ala Val Arg Met Thr Ser Ile Gln Cys Lys Leu Tyr Gln 1835 1840 1845 Tyr Tyr Leu Asp His Leu Thr Gly Val Gly Asn Asn Ser Glu Gly 1850 1855 1860 Gly Arg Gly Lys Ala Gly Ala Lys Leu Phe Gln Asp Phe Gln Met 1865 1870 1875 Leu Ser Arg Ile Trp Thr His Pro Trp Cys Leu Gln Leu Asp Tyr 1880 1885 1890 Ile Ser Lys Glu Asn Lys Gly Tyr Phe Asp Glu Asp Ser Met Asp 1895 1900 1905 Glu Phe Ile Ala Ser Asp Ser Asp Glu Thr Ser Met Ser Leu Ser 1910 1915 1920 Ser Asp Asp Tyr Thr Lys Lys Lys Lys Lys Gly Lys Lys Gly Lys 1925 1930 1935 Lys Asp Ser Ser Ser Ser Gly Ser Gly Ser Asp Asn Asp Val Glu 1940 1945 1950 Val Ile Lys Val Trp Asn Ser Arg Ser Arg Gly Gly Gly Glu Gly 1955 1960 1965 Asn Val Asp Glu Thr Gly Asn Asn Pro Ser Val Ser Leu Lys Leu 1970 1975 1980 Glu Glu Ser Lys Ala Thr Ser Ser Ser Asn Pro Ser Ser Pro Ala 1985 1990 1995 Pro Asp Trp Tyr Lys Asp Phe Val Thr Asp Ala Asp Ala Glu Val 2000 2005 2010 Leu Glu His Ser Gly Lys Met Val Leu Leu Phe Glu Ile Leu Arg 2015 2020 2025 Met Ala Glu Glu Ile Gly Asp Lys Val Leu Val Phe Ser Gln Ser 2030 2035 2040 Leu Ile Ser Leu Asp Leu Ile Glu Asp Phe Leu Glu Leu Ala Ser 2045 2050 2055 Arg Glu Lys Thr Glu Asp Lys Asp Lys Pro Leu Ile Tyr Lys Gly 2060 2065 2070 Glu Gly Lys Trp Leu Arg Asn Ile Asp Tyr Tyr Arg Leu Asp Gly 2075 2080 2085 Ser Thr Thr Ala Gln Ser Arg Lys Lys Trp Ala Glu Glu Phe Asn 2090 2095 2100 Asp Glu Thr Asn Val Arg Gly Arg Leu Phe Ile Ile Ser Thr Lys 2105 2110 2115 Ala Gly Ser Leu Gly Ile Asn Leu Val Ala Ala Asn Arg Val Ile 2120 2125 2130 Ile Phe Asp Ala Ser Trp Asn Pro Ser Tyr Asp Ile Gln Ser Ile 2135 2140 2145 Phe Arg Val Tyr Arg Phe Gly Gln Thr Lys Pro Val Tyr Val Tyr 2150 2155 2160 Arg Phe Leu Ala Gln Gly Thr Met Glu Asp Lys Ile Tyr Asp Arg 2165 2170 2175 Gln Val Thr Lys Gln Ser Leu Ser Phe Arg Val Val Asp Gln Gln 2180 2185 2190 Gln Val Glu Arg His Phe Thr Met Asn Glu Leu Thr Glu Leu Tyr 2195 2200 2205 Thr Phe Glu Pro Asp Leu Leu Asp Asp Pro Asn Ser Glu Lys Lys 2210 2215 2220 Lys Lys Arg Asp Thr Pro Met Leu Pro Lys Asp Thr Ile Leu Ala 2225 2230 2235 Glu Leu Leu Gln Ile His Lys Glu His Ile Val Gly Tyr His Glu 2240 2245 2250 His Asp Ser Leu Leu Asp His Lys Glu Glu Glu Glu Leu Thr Glu 2255 2260 2265 Glu Glu Arg Lys Ala Ala Trp Ala Glu Tyr Glu Ala Glu Lys Lys 2270 2275 2280 Gly Leu Thr Met Arg Phe Asn Ile Pro Thr Gly Thr Asn Leu Pro 2285 2290 2295 Pro Val Ser Phe Asn Ser Gln Thr Pro Tyr Ile Pro Phe Asn Leu 2300 2305 2310 Gly Ala Leu Ser Ala Met Ser Asn Gln Gln Leu Glu Asp Leu Ile 2315 2320 2325 Asn Gln Gly Arg Glu Lys Val Val Glu Ala Thr Asn Ser Val Thr 2330 2335 2340 Ala Val Arg Ile Gln Pro Leu Glu Asp Ile Ile Ser Ala Val Trp 2345 2350 2355 Lys Glu Asn Met Asn Leu Ser Glu Ala Gln Val Gln Ala Leu Ala 2360 2365 2370 Leu Ser Arg Gln Ala Ser Gln Glu Leu Asp Val Lys Arg Arg Glu 2375 2380 2385 Ala Ile Tyr Asn Asp Val Leu Thr Lys Gln Gln Met Leu Ile Ser 2390 2395 2400 Cys Val Gln Arg Ile Leu Met Asn Arg Arg Leu Gln Gln Gln Tyr 2405 2410 2415 Asn Gln Gln Gln Gln Gln Gln Met Thr Tyr Gln Gln Ala Thr Leu 2420 2425 2430 Gly His Leu Met Met Pro Lys Pro Pro Asn Leu Ile Met Asn Pro 2435 2440 2445 Ser Asn Tyr Gln Gln Ile Asp Met Arg Gly Met Tyr Gln Pro Val 2450 2455 2460 Ala Gly Gly Met Gln Pro Pro Pro Leu Gln Arg Ala Pro Pro Pro 2465 2470 2475 Met Arg Ser Lys Asn Pro Gly Pro Ser Gln Gly Lys Ser Met 2480 2485 2490 <210> 120 <211> 418 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 120 Met Ser Gly Thr Glu Glu Ala Ile Leu Gly Gly Arg Asp Ser His Pro 1 5 10 15 Ala Ala Gly Gly Gly Ser Val Leu Cys Phe Gly Gln Cys Gln Tyr Thr 20 25 30 Ala Glu Glu Tyr Gln Ala Ile Gln Lys Ala Leu Arg Gln Arg Leu Gly 35 40 45 Pro Glu Tyr Ile Ser Ser Arg Met Ala Gly Gly Gly Gln Lys Val Cys 50 55 60 Tyr Ile Glu Gly His Arg Val Ile Asn Leu Ala Asn Glu Met Phe Gly 65 70 75 80 Tyr Asn Gly Trp Ala His Ser Ile Thr Gln Gln Asn Val Asp Phe Val 85 90 95 Asp Leu Asn Asn Gly Lys Phe Tyr Val Gly Val Cys Ala Phe Val Arg 100 105 110 Val Gln Leu Lys Asp Gly Ser Tyr His Glu Asp Val Gly Tyr Gly Val 115 120 125 Ser Glu Gly Leu Lys Ser Lys Ala Leu Ser Leu Glu Lys Ala Arg Lys 130 135 140 Glu Ala Val Thr Asp Gly Leu Lys Arg Ala Leu Arg Ser Phe Gly Asn 145 150 155 160 Ala Leu Gly Asn Cys Ile Leu Asp Lys Asp Tyr Leu Arg Ser Leu Asn 165 170 175 Lys Leu Pro Arg Gln Leu Pro Leu Glu Val Asp Leu Thr Lys Ala Lys 180 185 190 Arg Gln Asp Leu Glu Pro Ser Val Glu Glu Ala Arg Tyr Asn Ser Cys 195 200 205 Arg Pro Asn Met Ala Leu Gly His Pro Gln Leu Gln Gln Val Thr Ser 210 215 220 Pro Ser Arg Pro Ser His Ala Val Ile Pro Ala Asp Gln Asp Cys Ser 225 230 235 240 Ser Arg Ser Leu Ser Ser Ser Ala Val Glu Ser Glu Ala Thr His Gln 245 250 255 Arg Lys Leu Arg Gln Lys Gln Leu Gln Gln Gln Phe Arg Glu Arg Met 260 265 270 Glu Lys Gln Gln Val Arg Val Ser Thr Pro Ser Ala Glu Lys Ser Glu 275 280 285 Ala Ala Pro Pro Ala Pro Pro Val Thr His Ser Thr Pro Val Thr Val 290 295 300 Ser Glu Pro Leu Leu Glu Lys Asp Phe Leu Ala Gly Val Thr Gln Glu 305 310 315 320 Leu Ile Lys Thr Leu Glu Asp Asn Ser Glu Lys Trp Ala Val Thr Pro 325 330 335 Asp Ala Gly Asp Gly Val Val Lys Pro Ser Ser Arg Ala Asp Pro Ala 340 345 350 Gln Thr Ser Asp Thr Leu Ala Leu Asn Asn Gln Met Val Thr Gln Asn 355 360 365 Arg Thr Pro His Ser Val Cys His Gln Lys Pro Gln Ala Lys Ser Gly 370 375 380 Ser Trp Asp Leu Gln Thr Tyr Ser Ala Asp Gln Arg Thr Thr Gly Asn 385 390 395 400 Trp Glu Ser His Arg Lys Ser Gln Asp Met Lys Lys Arg Lys Tyr Asp 405 410 415 Pro Ser <210> 121 <211> 1863 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 121 Met Asp Leu Ser Ala Leu Arg Val Glu Glu Val Gln Asn Val Ile Asn 1 5 10 15 Ala Met Gln Lys Ile Leu Glu Cys Pro Ile Cys Leu Glu Leu Ile Lys 20 25 30 Glu Pro Val Ser Thr Lys Cys Asp His Ile Phe Cys Lys Phe Cys Met 35 40 45 Leu Lys Leu Leu Asn Gln Lys Lys Gly Pro Ser Gln Cys Pro Leu Cys 50 55 60 Lys Asn Asp Ile Thr Lys Arg Ser Leu Gln Glu Ser Thr Arg Phe Ser 65 70 75 80 Gln Leu Val Glu Glu Leu Leu Lys Ile Ile Cys Ala Phe Gln Leu Asp 85 90 95 Thr Gly Leu Glu Tyr Ala Asn Ser Tyr Asn Phe Ala Lys Lys Glu Asn 100 105 110 Asn Ser Pro Glu His Leu Lys Asp Glu Val Ser Ile Ile Gln Ser Met 115 120 125 Gly Tyr Arg Asn Arg Ala Lys Arg Leu Leu Gln Ser Glu Pro Glu Asn 130 135 140 Pro Ser Leu Gln Glu Thr Ser Leu Ser Val Gln Leu Ser Asn Leu Gly 145 150 155 160 Thr Val Arg Thr Leu Arg Thr Lys Gln Arg Ile Gln Pro Gln Lys Thr 165 170 175 Ser Val Tyr Ile Glu Leu Gly Ser Asp Ser Ser Glu Asp Thr Val Asn 180 185 190 Lys Ala Thr Tyr Cys Ser Val Gly Asp Gln Glu Leu Leu Gln Ile Thr 195 200 205 Pro Gln Gly Thr Arg Asp Glu Ile Ser Leu Asp Ser Ala Lys Lys Ala 210 215 220 Ala Cys Glu Phe Ser Glu Thr Asp Val Thr Asn Thr Glu His His Gln 225 230 235 240 Pro Ser Asn Asn Asp Leu Asn Thr Thr Glu Lys Arg Ala Ala Glu Arg 245 250 255 His Pro Glu Lys Tyr Gln Gly Ser Ser Val Ser Asn Leu His Val Glu 260 265 270 Pro Cys Gly Thr Asn Thr His Ala Ser Ser Leu Gln His Glu Asn Ser 275 280 285 Ser Leu Leu Leu Thr Lys Asp Arg Met Asn Val Glu Lys Ala Glu Phe 290 295 300 Cys Asn Lys Ser Lys Gln Pro Gly Leu Ala Arg Ser Gln His Asn Arg 305 310 315 320 Trp Ala Gly Ser Lys Glu Thr Cys Asn Asp Arg Arg Thr Pro Ser Thr 325 330 335 Glu Lys Lys Val Asp Leu Asn Ala Asp Pro Leu Cys Glu Arg Lys Glu 340 345 350 Trp Asn Lys Gln Lys Leu Pro Cys Ser Glu Asn Pro Arg Asp Thr Glu 355 360 365 Asp Val Pro Trp Ile Thr Leu Asn Ser Ser Ile Gln Lys Val Asn Glu 370 375 380 Trp Phe Ser Arg Ser Asp Glu Leu Leu Gly Ser Asp Asp Ser His Asp 385 390 395 400 Gly Glu Ser Glu Ser Asn Ala Lys Val Ala Asp Val Leu Asp Val Leu 405 410 415 Asn Glu Val Asp Glu Tyr Ser Gly Ser Ser Glu Lys Ile Asp Leu Leu 420 425 430 Ala Ser Asp Pro His Glu Ala Leu Ile Cys Lys Ser Glu Arg Val His 435 440 445 Ser Lys Ser Val Glu Ser Asn Ile Glu Asp Lys Ile Phe Gly Lys Thr 450 455 460 Tyr Arg Lys Lys Ala Ser Leu Pro Asn Leu Ser His Val Thr Glu Asn 465 470 475 480 Leu Ile Ile Gly Ala Phe Val Thr Glu Pro Gln Ile Ile Gln Glu Arg 485 490 495 Pro Leu Thr Asn Lys Leu Lys Arg Lys Arg Arg Pro Thr Ser Gly Leu 500 505 510 His Pro Glu Asp Phe Ile Lys Lys Ala Asp Leu Ala Val Gln Lys Thr 515 520 525 Pro Glu Met Ile Asn Gln Gly Thr Asn Gln Thr Glu Gln Asn Gly Gln 530 535 540 Val Met Asn Ile Thr Asn Ser Gly His Glu Asn Lys Thr Lys Gly Asp 545 550 555 560 Ser Ile Gln Asn Glu Lys Asn Pro Asn Pro Ile Glu Ser Leu Glu Lys 565 570 575 Glu Ser Ala Phe Lys Thr Lys Ala Glu Pro Ile Ser Ser Ser Ile Ser 580 585 590 Asn Met Glu Leu Glu Leu Asn Ile His Asn Ser Lys Ala Pro Lys Lys 595 600 605 Asn Arg Leu Arg Arg Lys Ser Ser Thr Arg His Ile His Ala Leu Glu 610 615 620 Leu Val Val Ser Arg Asn Leu Ser Pro Pro Asn Cys Thr Glu Leu Gln 625 630 635 640 Ile Asp Ser Cys Ser Ser Ser Glu Glu Ile Lys Lys Lys Lys Tyr Asn 645 650 655 Gln Met Pro Val Arg His Ser Arg Asn Leu Gln Leu Met Glu Gly Lys 660 665 670 Glu Pro Ala Thr Gly Ala Lys Lys Ser Asn Lys Pro Asn Glu Gln Thr 675 680 685 Ser Lys Arg His Asp Ser Asp Thr Phe Pro Glu Leu Lys Leu Thr Asn 690 695 700 Ala Pro Gly Ser Phe Thr Lys Cys Ser Asn Thr Ser Glu Leu Lys Glu 705 710 715 720 Phe Val Asn Pro Ser Leu Pro Arg Glu Glu Lys Glu Glu Lys Leu Glu 725 730 735 Thr Val Lys Val Ser Asn Asn Ala Glu Asp Pro Lys Asp Leu Met Leu 740 745 750 Ser Gly Glu Arg Val Leu Gln Thr Glu Arg Ser Val Glu Ser Ser Ser 755 760 765 Ile Ser Leu Val Pro Gly Thr Asp Tyr Gly Thr Gln Glu Ser Ile Ser 770 775 780 Leu Leu Glu Val Ser Thr Leu Gly Lys Ala Lys Thr Glu Pro Asn Lys 785 790 795 800 Cys Val Ser Gln Cys Ala Ala Phe Glu Asn Pro Lys Gly Leu Ile His 805 810 815 Gly Cys Ser Lys Asp Asn Arg Asn Asp Thr Glu Gly Phe Lys Tyr Pro 820 825 830 Leu Gly His Glu Val Asn His Ser Arg Glu Thr Ser Ile Glu Met Glu 835 840 845 Glu Ser Glu Leu Asp Ala Gln Tyr Leu Gln Asn Thr Phe Lys Val Ser 850 855 860 Lys Arg Gln Ser Phe Ala Pro Phe Ser Asn Pro Gly Asn Ala Glu Glu 865 870 875 880 Glu Cys Ala Thr Phe Ser Ala His Ser Gly Ser Leu Lys Lys Gln Ser 885 890 895 Pro Lys Val Thr Phe Glu Cys Glu Gln Lys Glu Glu Asn Gln Gly Lys 900 905 910 Asn Glu Ser Asn Ile Lys Pro Val Gln Thr Val Asn Ile Thr Ala Gly 915 920 925 Phe Pro Val Val Gly Gln Lys Asp Lys Pro Val Asp Asn Ala Lys Cys 930 935 940 Ser Ile Lys Gly Gly Ser Arg Phe Cys Leu Ser Ser Gln Phe Arg Gly 945 950 955 960 Asn Glu Thr Gly Leu Ile Thr Pro Asn Lys His Gly Leu Leu Gln Asn 965 970 975 Pro Tyr Arg Ile Pro Pro Leu Phe Pro Ile Lys Ser Phe Val Lys Thr 980 985 990 Lys Cys Lys Lys Asn Leu Leu Glu Glu Asn Phe Glu Glu His Ser Met 995 1000 1005 Ser Pro Glu Arg Glu Met Gly Asn Glu Asn Ile Pro Ser Thr Val 1010 1015 1020 Ser Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ile Arg Glu Asn Val Phe Lys Glu 1025 1030 1035 Ala Ser Ser Ser Asn Ile Asn Glu Val Gly Ser Ser Thr Asn Glu 1040 1045 1050 Val Gly Ser Ser Ile Asn Glu Ile Gly Ser Ser Asp Glu Asn Ile 1055 1060 1065 Gln Ala Glu Leu Gly Arg Asn Arg Gly Pro Lys Leu Asn Ala Met 1070 1075 1080 Leu Arg Leu Gly Val Leu Gln Pro Glu Val Tyr Lys Gln Ser Leu 1085 1090 1095 Pro Gly Ser Asn Cys Lys His Pro Glu Ile Lys Lys Gln Glu Tyr 1100 1105 1110 Glu Glu Val Val Gln Thr Val Asn Thr Asp Phe Ser Pro Tyr Leu 1115 1120 1125 Ile Ser Asp Asn Leu Glu Gln Pro Met Gly Ser Ser His Ala Ser 1130 1135 1140 Gln Val Cys Ser Glu Thr Pro Asp Asp Leu Leu Asp Asp Gly Glu 1145 1150 1155 Ile Lys Glu Asp Thr Ser Phe Ala Glu Asn Asp Ile Lys Glu Ser 1160 1165 1170 Ser Ala Val Phe Ser Lys Ser Val Gln Lys Gly Glu Leu Ser Arg 1175 1180 1185 Ser Pro Ser Pro Phe Thr His Thr His Leu Ala Gln Gly Tyr Arg 1190 1195 1200 Arg Gly Ala Lys Lys Leu Glu Ser Ser Glu Glu Asn Leu Ser Ser 1205 1210 1215 Glu Asp Glu Glu Leu Pro Cys Phe Gln His Leu Leu Phe Gly Lys 1220 1225 1230 Val Asn Asn Ile Pro Ser Gln Ser Thr Arg His Ser Thr Val Ala 1235 1240 1245 Thr Glu Cys Leu Ser Lys Asn Thr Glu Glu Asn Leu Leu Ser Leu 1250 1255 1260 Lys Asn Ser Leu Asn Asp Cys Ser Asn Gln Val Ile Leu Ala Lys 1265 1270 1275 Ala Ser Gln Glu His His Leu Ser Glu Glu Thr Lys Cys Ser Ala 1280 1285 1290 Ser Leu Phe Ser Ser Gln Cys Ser Glu Leu Glu Asp Leu Thr Ala 1295 1300 1305 Asn Thr Asn Thr Gln Asp Pro Phe Leu Ile Gly Ser Ser Lys Gln 1310 1315 1320 Met Arg His Gln Ser Glu Ser Gln Gly Val Gly Leu Ser Asp Lys 1325 1330 1335 Glu Leu Val Ser Asp Asp Glu Glu Arg Gly Thr Gly Leu Glu Glu 1340 1345 1350 Asn Asn Gln Glu Glu Gln Ser Met Asp Ser Asn Leu Gly Glu Ala 1355 1360 1365 Ala Ser Gly Cys Glu Ser Glu Thr Ser Val Ser Glu Asp Cys Ser 1370 1375 1380 Gly Leu Ser Ser Gln Ser Asp Ile Leu Thr Thr Gln Gln Arg Asp 1385 1390 1395 Thr Met Gln His Asn Leu Ile Lys Leu Gln Gln Glu Met Ala Glu 1400 1405 1410 Leu Glu Ala Val Leu Glu Gln His Gly Ser Gln Pro Ser Asn Ser 1415 1420 1425 Tyr Pro Ser Ile Ile Ser Asp Ser Ser Ala Leu Glu Asp Leu Arg 1430 1435 1440 Asn Pro Glu Gln Ser Thr Ser Glu Lys Ala Val Leu Thr Ser Gln 1445 1450 1455 Lys Ser Ser Glu Tyr Pro Ile Ser Gln Asn Pro Glu Gly Leu Ser 1460 1465 1470 Ala Asp Lys Phe Glu Val Ser Ala Asp Ser Ser Thr Ser Lys Asn 1475 1480 1485 Lys Glu Pro Gly Val Glu Arg Ser Ser Pro Ser Lys Cys Pro Ser 1490 1495 1500 Leu Asp Asp Arg Trp Tyr Met His Ser Cys Ser Gly Ser Leu Gln 1505 1510 1515 Asn Arg Asn Tyr Pro Ser Gln Glu Glu Leu Ile Lys Val Val Asp 1520 1525 1530 Val Glu Glu Gln Gln Leu Glu Glu Ser Gly Pro His Asp Leu Thr 1535 1540 1545 Glu Thr Ser Tyr Leu Pro Arg Gln Asp Leu Glu Gly Thr Pro Tyr 1550 1555 1560 Leu Glu Ser Gly Ile Ser Leu Phe Ser Asp Asp Pro Glu Ser Asp 1565 1570 1575 Pro Ser Glu Asp Arg Ala Pro Glu Ser Ala Arg Val Gly Asn Ile 1580 1585 1590 Pro Ser Ser Thr Ser Ala Leu Lys Val Pro Gln Leu Lys Val Ala 1595 1600 1605 Glu Ser Ala Gln Ser Pro Ala Ala Ala His Thr Thr Asp Thr Ala 1610 1615 1620 Gly Tyr Asn Ala Met Glu Glu Ser Val Ser Arg Glu Lys Pro Glu 1625 1630 1635 Leu Thr Ala Ser Thr Glu Arg Val Asn Lys Arg Met Ser Met Val 1640 1645 1650 Val Ser Gly Leu Thr Pro Glu Glu Phe Met Leu Val Tyr Lys Phe 1655 1660 1665 Ala Arg Lys His His Ile Thr Leu Thr Asn Leu Ile Thr Glu Glu 1670 1675 1680 Thr Thr His Val Val Met Lys Thr Asp Ala Glu Phe Val Cys Glu 1685 1690 1695 Arg Thr Leu Lys Tyr Phe Leu Gly Ile Ala Gly Gly Lys Trp Val 1700 1705 1710 Val Ser Tyr Phe Trp Val Thr Gln Ser Ile Lys Glu Arg Lys Met 1715 1720 1725 Leu Asn Glu His Asp Phe Glu Val Arg Gly Asp Val Val Asn Gly 1730 1735 1740 Arg Asn His Gln Gly Pro Lys Arg Ala Arg Glu Ser Gln Asp Arg 1745 1750 1755 Lys Ile Phe Arg Gly Leu Glu Ile Cys Cys Tyr Gly Pro Phe Thr 1760 1765 1770 Asn Met Pro Thr Asp Gln Leu Glu Trp Met Val Gln Leu Cys Gly 1775 1780 1785 Ala Ser Val Val Lys Glu Leu Ser Ser Phe Thr Leu Gly Thr Gly 1790 1795 1800 Val His Pro Ile Val Val Val Gln Pro Asp Ala Trp Thr Glu Asp 1805 1810 1815 Asn Gly Phe His Ala Ile Gly Gln Met Cys Glu Ala Pro Val Val 1820 1825 1830 Thr Arg Glu Trp Val Leu Asp Ser Val Ala Leu Tyr Gln Cys Gln 1835 1840 1845 Glu Leu Asp Thr Tyr Leu Ile Pro Gln Ile Pro His Ser His Tyr 1850 1855 1860 <210> 122 <211> 3418 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 122 Met Pro Ile Gly Ser Lys Glu Arg Pro Thr Phe Phe Glu Ile Phe Lys 1 5 10 15 Thr Arg Cys Asn Lys Ala Asp Leu Gly Pro Ile Ser Leu Asn Trp Phe 20 25 30 Glu Glu Leu Ser Ser Glu Ala Pro Pro Tyr Asn Ser Glu Pro Ala Glu 35 40 45 Glu Ser Glu His Lys Asn Asn Asn Tyr Glu Pro Asn Leu Phe Lys Thr 50 55 60 Pro Gln Arg Lys Pro Ser Tyr Asn Gln Leu Ala Ser Thr Pro Ile Ile 65 70 75 80 Phe Lys Glu Gln Gly Leu Thr Leu Pro Leu Tyr Gln Ser Pro Val Lys 85 90 95 Glu Leu Asp Lys Phe Lys Leu Asp Leu Gly Arg Asn Val Pro Asn Ser 100 105 110 Arg His Lys Ser Leu Arg Thr Val Lys Thr Lys Met Asp Gln Ala Asp 115 120 125 Asp Val Ser Cys Pro Leu Leu Asn Ser Cys Leu Ser Glu Ser Pro Val 130 135 140 Val Leu Gln Cys Thr His Val Thr Pro Gln Arg Asp Lys Ser Val Val 145 150 155 160 Cys Gly Ser Leu Phe His Thr Pro Lys Phe Val Lys Gly Arg Gln Thr 165 170 175 Pro Lys His Ile Ser Glu Ser Leu Gly Ala Glu Val Asp Pro Asp Met 180 185 190 Ser Trp Ser Ser Ser Leu Ala Thr Pro Pro Thr Leu Ser Ser Thr Val 195 200 205 Leu Ile Val Arg Asn Glu Glu Ala Ser Glu Thr Val Phe Pro His Asp 210 215 220 Thr Thr Ala Asn Val Lys Ser Tyr Phe Ser Asn His Asp Glu Ser Leu 225 230 235 240 Lys Lys Asn Asp Arg Phe Ile Ala Ser Val Thr Asp Ser Glu Asn Thr 245 250 255 Asn Gln Arg Glu Ala Ala Ser His Gly Phe Gly Lys Thr Ser Gly Asn 260 265 270 Ser Phe Lys Val Asn Ser Cys Lys Asp His Ile Gly Lys Ser Met Pro 275 280 285 Asn Val Leu Glu Asp Glu Val Tyr Glu Thr Val Val Asp Thr Ser Glu 290 295 300 Glu Asp Ser Phe Ser Leu Cys Phe Ser Lys Cys Arg Thr Lys Asn Leu 305 310 315 320 Gln Lys Val Arg Thr Ser Lys Thr Arg Lys Lys Ile Phe His Glu Ala 325 330 335 Asn Ala Asp Glu Cys Glu Lys Ser Lys Asn Gln Val Lys Glu Lys Tyr 340 345 350 Ser Phe Val Ser Glu Val Glu Pro Asn Asp Thr Asp Pro Leu Asp Ser 355 360 365 Asn Val Ala Asn Gln Lys Pro Phe Glu Ser Gly Ser Asp Lys Ile Ser 370 375 380 Lys Glu Val Val Pro Ser Leu Ala Cys Glu Trp Ser Gln Leu Thr Leu 385 390 395 400 Ser Gly Leu Asn Gly Ala Gln Met Glu Lys Ile Pro Leu Leu His Ile 405 410 415 Ser Ser Cys Asp Gln Asn Ile Ser Glu Lys Asp Leu Leu Asp Thr Glu 420 425 430 Asn Lys Arg Lys Lys Asp Phe Leu Thr Ser Glu Asn Ser Leu Pro Arg 435 440 445 Ile Ser Ser Leu Pro Lys Ser Glu Lys Pro Leu Asn Glu Glu Thr Val 450 455 460 Val Asn Lys Arg Asp Glu Glu Gln His Leu Glu Ser His Thr Asp Cys 465 470 475 480 Ile Leu Ala Val Lys Gln Ala Ile Ser Gly Thr Ser Pro Val Ala Ser 485 490 495 Ser Phe Gln Gly Ile Lys Lys Ser Ile Phe Arg Ile Arg Glu Ser Pro 500 505 510 Lys Glu Thr Phe Asn Ala Ser Phe Ser Gly His Met Thr Asp Pro Asn 515 520 525 Phe Lys Lys Glu Thr Glu Ala Ser Glu Ser Gly Leu Glu Ile His Thr 530 535 540 Val Cys Ser Gln Lys Glu Asp Ser Leu Cys Pro Asn Leu Ile Asp Asn 545 550 555 560 Gly Ser Trp Pro Ala Thr Thr Thr Gln Asn Ser Val Ala Leu Lys Asn 565 570 575 Ala Gly Leu Ile Ser Thr Leu Lys Lys Lys Thr Asn Lys Phe Ile Tyr 580 585 590 Ala Ile His Asp Glu Thr Ser Tyr Lys Gly Lys Lys Ile Pro Lys Asp 595 600 605 Gln Lys Ser Glu Leu Ile Asn Cys Ser Ala Gln Phe Glu Ala Asn Ala 610 615 620 Phe Glu Ala Pro Leu Thr Phe Ala Asn Ala Asp Ser Gly Leu Leu His 625 630 635 640 Ser Ser Val Lys Arg Ser Cys Ser Gln Asn Asp Ser Glu Glu Pro Thr 645 650 655 Leu Ser Leu Thr Ser Ser Phe Gly Thr Ile Leu Arg Lys Cys Ser Arg 660 665 670 Asn Glu Thr Cys Ser Asn Asn Thr Val Ile Ser Gln Asp Leu Asp Tyr 675 680 685 Lys Glu Ala Lys Cys Asn Lys Glu Lys Leu Gln Leu Phe Ile Thr Pro 690 695 700 Glu Ala Asp Ser Leu Ser Cys Leu Gln Glu Gly Gln Cys Glu Asn Asp 705 710 715 720 Pro Lys Ser Lys Lys Val Ser Asp Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Ala 725 730 735 Ala Cys His Pro Val Gln His Ser Lys Val Glu Tyr Ser Asp Thr Asp 740 745 750 Phe Gln Ser Gln Lys Ser Leu Leu Tyr Asp His Glu Asn Ala Ser Thr 755 760 765 Leu Ile Leu Thr Pro Thr Ser Lys Asp Val Leu Ser Asn Leu Val Met 770 775 780 Ile Ser Arg Gly Lys Glu Ser Tyr Lys Met Ser Asp Lys Leu Lys Gly 785 790 795 800 Asn Asn Tyr Glu Ser Asp Val Glu Leu Thr Lys Asn Ile Pro Met Glu 805 810 815 Lys Asn Gln Asp Val Cys Ala Leu Asn Glu Asn Tyr Lys Asn Val Glu 820 825 830 Leu Leu Pro Pro Glu Lys Tyr Met Arg Val Ala Ser Pro Ser Arg Lys 835 840 845 Val Gln Phe Asn Gln Asn Thr Asn Leu Arg Val Ile Gln Lys Asn Gln 850 855 860 Glu Glu Thr Thr Ser Ile Ser Lys Ile Thr Val Asn Pro Asp Ser Glu 865 870 875 880 Glu Leu Phe Ser Asp Asn Glu Asn Asn Phe Val Phe Gln Val Ala Asn 885 890 895 Glu Arg Asn Asn Leu Ala Leu Gly Asn Thr Lys Glu Leu His Glu Thr 900 905 910 Asp Leu Thr Cys Val Asn Glu Pro Ile Phe Lys Asn Ser Thr Met Val 915 920 925 Leu Tyr Gly Asp Thr Gly Asp Lys Gln Ala Thr Gln Val Ser Ile Lys 930 935 940 Lys Asp Leu Val Tyr Val Leu Ala Glu Glu Asn Lys Asn Ser Val Lys 945 950 955 960 Gln His Ile Lys Met Thr Leu Gly Gln Asp Leu Lys Ser Asp Ile Ser 965 970 975 Leu Asn Ile Asp Lys Ile Pro Glu Lys Asn Asn Asp Tyr Met Asn Lys 980 985 990 Trp Ala Gly Leu Leu Gly Pro Ile Ser Asn His Ser Phe Gly Gly Ser 995 1000 1005 Phe Arg Thr Ala Ser Asn Lys Glu Ile Lys Leu Ser Glu His Asn 1010 1015 1020 Ile Lys Lys Ser Lys Met Phe Phe Lys Asp Ile Glu Glu Gln Tyr 1025 1030 1035 Pro Thr Ser Leu Ala Cys Val Glu Ile Val Asn Thr Leu Ala Leu 1040 1045 1050 Asp Asn Gln Lys Lys Leu Ser Lys Pro Gln Ser Ile Asn Thr Val 1055 1060 1065 Ser Ala His Leu Gln Ser Ser Val Val Val Ser Asp Cys Lys Asn 1070 1075 1080 Ser His Ile Thr Pro Gln Met Leu Phe Ser Lys Gln Asp Phe Asn 1085 1090 1095 Ser Asn His Asn Leu Thr Pro Ser Gln Lys Ala Glu Ile Thr Glu 1100 1105 1110 Leu Ser Thr Ile Leu Glu Glu Ser Gly Ser Gln Phe Glu Phe Thr 1115 1120 1125 Gln Phe Arg Lys Pro Ser Tyr Ile Leu Gln Lys Ser Thr Phe Glu 1130 1135 1140 Val Pro Glu Asn Gln Met Thr Ile Leu Lys Thr Thr Ser Glu Glu 1145 1150 1155 Cys Arg Asp Ala Asp Leu His Val Ile Met Asn Ala Pro Ser Ile 1160 1165 1170 Gly Gln Val Asp Ser Ser Lys Gln Phe Glu Gly Thr Val Glu Ile 1175 1180 1185 Lys Arg Lys Phe Ala Gly Leu Leu Lys Asn Asp Cys Asn Lys Ser 1190 1195 1200 Ala Ser Gly Tyr Leu Thr Asp Glu Asn Glu Val Gly Phe Arg Gly 1205 1210 1215 Phe Tyr Ser Ala His Gly Thr Lys Leu Asn Val Ser Thr Glu Ala 1220 1225 1230 Leu Gln Lys Ala Val Lys Leu Phe Ser Asp Ile Glu Asn Ile Ser 1235 1240 1245 Glu Glu Thr Ser Ala Glu Val His Pro Ile Ser Leu Ser Ser Ser 1250 1255 1260 Lys Cys His Asp Ser Val Val Ser Met Phe Lys Ile Glu Asn His 1265 1270 1275 Asn Asp Lys Thr Val Ser Glu Lys Asn Asn Lys Cys Gln Leu Ile 1280 1285 1290 Leu Gln Asn Asn Ile Glu Met Thr Thr Gly Thr Phe Val Glu Glu 1295 1300 1305 Ile Thr Glu Asn Tyr Lys Arg Asn Thr Glu Asn Glu Asp Asn Lys 1310 1315 1320 Tyr Thr Ala Ala Ser Arg Asn Ser His Asn Leu Glu Phe Asp Gly 1325 1330 1335 Ser Asp Ser Ser Lys Asn Asp Thr Val Cys Ile His Lys Asp Glu 1340 1345 1350 Thr Asp Leu Leu Phe Thr Asp Gln His Asn Ile Cys Leu Lys Leu 1355 1360 1365 Ser Gly Gln Phe Met Lys Glu Gly Asn Thr Gln Ile Lys Glu Asp 1370 1375 1380 Leu Ser Asp Leu Thr Phe Leu Glu Val Ala Lys Ala Gln Glu Ala 1385 1390 1395 Cys His Gly Asn Thr Ser Asn Lys Glu Gln Leu Thr Ala Thr Lys 1400 1405 1410 Thr Glu Gln Asn Ile Lys Asp Phe Glu Thr Ser Asp Thr Phe Phe 1415 1420 1425 Gln Thr Ala Ser Gly Lys Asn Ile Ser Val Ala Lys Glu Ser Phe 1430 1435 1440 Asn Lys Ile Val Asn Phe Phe Asp Gln Lys Pro Glu Glu Leu His 1445 1450 1455 Asn Phe Ser Leu Asn Ser Glu Leu His Ser Asp Ile Arg Lys Asn 1460 1465 1470 Lys Met Asp Ile Leu Ser Tyr Glu Glu Thr Asp Ile Val Lys His 1475 1480 1485 Lys Ile Leu Lys Glu Ser Val Pro Val Gly Thr Gly Asn Gln Leu 1490 1495 1500 Val Thr Phe Gln Gly Gln Pro Glu Arg Asp Glu Lys Ile Lys Glu 1505 1510 1515 Pro Thr Leu Leu Gly Phe His Thr Ala Ser Gly Lys Lys Val Lys 1520 1525 1530 Ile Ala Lys Glu Ser Leu Asp Lys Val Lys Asn Leu Phe Asp Glu 1535 1540 1545 Lys Glu Gln Gly Thr Ser Glu Ile Thr Ser Phe Ser His Gln Trp 1550 1555 1560 Ala Lys Thr Leu Lys Tyr Arg Glu Ala Cys Lys Asp Leu Glu Leu 1565 1570 1575 Ala Cys Glu Thr Ile Glu Ile Thr Ala Ala Pro Lys Cys Lys Glu 1580 1585 1590 Met Gln Asn Ser Leu Asn Asn Asp Lys Asn Leu Val Ser Ile Glu 1595 1600 1605 Thr Val Val Pro Pro Lys Leu Leu Ser Asp Asn Leu Cys Arg Gln 1610 1615 1620 Thr Glu Asn Leu Lys Thr Ser Lys Ser Ile Phe Leu Lys Val Lys 1625 1630 1635 Val His Glu Asn Val Glu Lys Glu Thr Ala Lys Ser Pro Ala Thr 1640 1645 1650 Cys Tyr Thr Asn Gln Ser Pro Tyr Ser Val Ile Glu Asn Ser Ala 1655 1660 1665 Leu Ala Phe Tyr Thr Ser Cys Ser Arg Lys Thr Ser Val Ser Gln 1670 1675 1680 Thr Ser Leu Leu Glu Ala Lys Lys Trp Leu Arg Glu Gly Ile Phe 1685 1690 1695 Asp Gly Gln Pro Glu Arg Ile Asn Thr Ala Asp Tyr Val Gly Asn 1700 1705 1710 Tyr Leu Tyr Glu Asn Asn Ser Asn Ser Thr Ile Ala Glu Asn Asp 1715 1720 1725 Lys Asn His Leu Ser Glu Lys Gln Asp Thr Tyr Leu Ser Asn Ser 1730 1735 1740 Ser Met Ser Asn Ser Tyr Ser Tyr His Ser Asp Glu Val Tyr Asn 1745 1750 1755 Asp Ser Gly Tyr Leu Ser Lys Asn Lys Leu Asp Ser Gly Ile Glu 1760 1765 1770 Pro Val Leu Lys Asn Val Glu Asp Gln Lys Asn Thr Ser Phe Ser 1775 1780 1785 Lys Val Ile Ser Asn Val Lys Asp Ala Asn Ala Tyr Pro Gln Thr 1790 1795 1800 Val Asn Glu Asp Ile Cys Val Glu Glu Leu Val Thr Ser Ser Ser 1805 1810 1815 Pro Cys Lys Asn Lys Asn Ala Ala Ile Lys Leu Ser Ile Ser Asn 1820 1825 1830 Ser Asn Asn Phe Glu Val Gly Pro Pro Ala Phe Arg Ile Ala Ser 1835 1840 1845 Gly Lys Ile Val Cys Val Ser His Glu Thr Ile Lys Lys Val Lys 1850 1855 1860 Asp Ile Phe Thr Asp Ser Phe Ser Lys Val Ile Lys Glu Asn Asn 1865 1870 1875 Glu Asn Lys Ser Lys Ile Cys Gln Thr Lys Ile Met Ala Gly Cys 1880 1885 1890 Tyr Glu Ala Leu Asp Asp Ser Glu Asp Ile Leu His Asn Ser Leu 1895 1900 1905 Asp Asn Asp Glu Cys Ser Thr His Ser His Lys Val Phe Ala Asp 1910 1915 1920 Ile Gln Ser Glu Glu Ile Leu Gln His Asn Gln Asn Met Ser Gly 1925 1930 1935 Leu Glu Lys Val Ser Lys Ile Ser Pro Cys Asp Val Ser Leu Glu 1940 1945 1950 Thr Ser Asp Ile Cys Lys Cys Ser Ile Gly Lys Leu His Lys Ser 1955 1960 1965 Val Ser Ser Ala Asn Thr Cys Gly Ile Phe Ser Thr Ala Ser Gly 1970 1975 1980 Lys Ser Val Gln Val Ser Asp Ala Ser Leu Gln Asn Ala Arg Gln 1985 1990 1995 Val Phe Ser Glu Ile Glu Asp Ser Thr Lys Gln Val Phe Ser Lys 2000 2005 2010 Val Leu Phe Lys Ser Asn Glu His Ser Asp Gln Leu Thr Arg Glu 2015 2020 2025 Glu Asn Thr Ala Ile Arg Thr Pro Glu His Leu Ile Ser Gln Lys 2030 2035 2040 Gly Phe Ser Tyr Asn Val Val Asn Ser Ser Ala Phe Ser Gly Phe 2045 2050 2055 Ser Thr Ala Ser Gly Lys Gln Val Ser Ile Leu Glu Ser Ser Leu 2060 2065 2070 His Lys Val Lys Gly Val Leu Glu Glu Phe Asp Leu Ile Arg Thr 2075 2080 2085 Glu His Ser Leu His Tyr Ser Pro Thr Ser Arg Gln Asn Val Ser 2090 2095 2100 Lys Ile Leu Pro Arg Val Asp Lys Arg Asn Pro Glu His Cys Val 2105 2110 2115 Asn Ser Glu Met Glu Lys Thr Cys Ser Lys Glu Phe Lys Leu Ser 2120 2125 2130 Asn Asn Leu Asn Val Glu Gly Gly Ser Ser Glu Asn Asn His Ser 2135 2140 2145 Ile Lys Val Ser Pro Tyr Leu Ser Gln Phe Gln Gln Asp Lys Gln 2150 2155 2160 Gln Leu Val Leu Gly Thr Lys Val Ser Leu Val Glu Asn Ile His 2165 2170 2175 Val Leu Gly Lys Glu Gln Ala Ser Pro Lys Asn Val Lys Met Glu 2180 2185 2190 Ile Gly Lys Thr Glu Thr Phe Ser Asp Val Pro Val Lys Thr Asn 2195 2200 2205 Ile Glu Val Cys Ser Thr Tyr Ser Lys Asp Ser Glu Asn Tyr Phe 2210 2215 2220 Glu Thr Glu Ala Val Glu Ile Ala Lys Ala Phe Met Glu Asp Asp 2225 2230 2235 Glu Leu Thr Asp Ser Lys Leu Pro Ser His Ala Thr His Ser Leu 2240 2245 2250 Phe Thr Cys Pro Glu Asn Glu Glu Met Val Leu Ser Asn Ser Arg 2255 2260 2265 Ile Gly Lys Arg Arg Gly Glu Pro Leu Ile Leu Val Gly Glu Pro 2270 2275 2280 Ser Ile Lys Arg Asn Leu Leu Asn Glu Phe Asp Arg Ile Ile Glu 2285 2290 2295 Asn Gln Glu Lys Ser Leu Lys Ala Ser Lys Ser Thr Pro Asp Gly 2300 2305 2310 Thr Ile Lys Asp Arg Arg Leu Phe Met His His Val Ser Leu Glu 2315 2320 2325 Pro Ile Thr Cys Val Pro Phe Arg Thr Thr Lys Glu Arg Gln Glu 2330 2335 2340 Ile Gln Asn Pro Asn Phe Thr Ala Pro Gly Gln Glu Phe Leu Ser 2345 2350 2355 Lys Ser His Leu Tyr Glu His Leu Thr Leu Glu Lys Ser Ser Ser 2360 2365 2370 Asn Leu Ala Val Ser Gly His Pro Phe Tyr Gln Val Ser Ala Thr 2375 2380 2385 Arg Asn Glu Lys Met Arg His Leu Ile Thr Thr Gly Arg Pro Thr 2390 2395 2400 Lys Val Phe Val Pro Pro Phe Lys Thr Lys Ser His Phe His Arg 2405 2410 2415 Val Glu Gln Cys Val Arg Asn Ile Asn Leu Glu Glu Asn Arg Gln 2420 2425 2430 Lys Gln Asn Ile Asp Gly His Gly Ser Asp Asp Ser Lys Asn Lys 2435 2440 2445 Ile Asn Asp Asn Glu Ile His Gln Phe Asn Lys Asn Asn Ser Asn 2450 2455 2460 Gln Ala Ala Ala Val Thr Phe Thr Lys Cys Glu Glu Glu Pro Leu 2465 2470 2475 Asp Leu Ile Thr Ser Leu Gln Asn Ala Arg Asp Ile Gln Asp Met 2480 2485 2490 Arg Ile Lys Lys Lys Gln Arg Gln Arg Val Phe Pro Gln Pro Gly 2495 2500 2505 Ser Leu Tyr Leu Ala Lys Thr Ser Thr Leu Pro Arg Ile Ser Leu 2510 2515 2520 Lys Ala Ala Val Gly Gly Gln Val Pro Ser Ala Cys Ser His Lys 2525 2530 2535 Gln Leu Tyr Thr Tyr Gly Val Ser Lys His Cys Ile Lys Ile Asn 2540 2545 2550 Ser Lys Asn Ala Glu Ser Phe Gln Phe His Thr Glu Asp Tyr Phe 2555 2560 2565 Gly Lys Glu Ser Leu Trp Thr Gly Lys Gly Ile Gln Leu Ala Asp 2570 2575 2580 Gly Gly Trp Leu Ile Pro Ser Asn Asp Gly Lys Ala Gly Lys Glu 2585 2590 2595 Glu Phe Tyr Arg Ala Leu Cys Asp Thr Pro Gly Val Asp Pro Lys 2600 2605 2610 Leu Ile Ser Arg Ile Trp Val Tyr Asn His Tyr Arg Trp Ile Ile 2615 2620 2625 Trp Lys Leu Ala Ala Met Glu Cys Ala Phe Pro Lys Glu Phe Ala 2630 2635 2640 Asn Arg Cys Leu Ser Pro Glu Arg Val Leu Leu Gln Leu Lys Tyr 2645 2650 2655 Arg Tyr Asp Thr Glu Ile Asp Arg Ser Arg Arg Ser Ala Ile Lys 2660 2665 2670 Lys Ile Met Glu Arg Asp Asp Thr Ala Ala Lys Thr Leu Val Leu 2675 2680 2685 Cys Val Ser Asp Ile Ile Ser Leu Ser Ala Asn Ile Ser Glu Thr 2690 2695 2700 Ser Ser Asn Lys Thr Ser Ser Ala Asp Thr Gln Lys Val Ala Ile 2705 2710 2715 Ile Glu Leu Thr Asp Gly Trp Tyr Ala Val Lys Ala Gln Leu Asp 2720 2725 2730 Pro Pro Leu Leu Ala Val Leu Lys Asn Gly Arg Leu Thr Val Gly 2735 2740 2745 Gln Lys Ile Ile Leu His Gly Ala Glu Leu Val Gly Ser Pro Asp 2750 2755 2760 Ala Cys Thr Pro Leu Glu Ala Pro Glu Ser Leu Met Leu Lys Ile 2765 2770 2775 Ser Ala Asn Ser Thr Arg Pro Ala Arg Trp Tyr Thr Lys Leu Gly 2780 2785 2790 Phe Phe Pro Asp Pro Arg Pro Phe Pro Leu Pro Leu Ser Ser Leu 2795 2800 2805 Phe Ser Asp Gly Gly Asn Val Gly Cys Val Asp Val Ile Ile Gln 2810 2815 2820 Arg Ala Tyr Pro Ile Gln Trp Met Glu Lys Thr Ser Ser Gly Leu 2825 2830 2835 Tyr Ile Phe Arg Asn Glu Arg Glu Glu Glu Lys Glu Ala Ala Lys 2840 2845 2850 Tyr Val Glu Ala Gln Gln Lys Arg Leu Glu Ala Leu Phe Thr Lys 2855 2860 2865 Ile Gln Glu Glu Phe Glu Glu His Glu Glu Asn Thr Thr Lys Pro 2870 2875 2880 Tyr Leu Pro Ser Arg Ala Leu Thr Arg Gln Gln Val Arg Ala Leu 2885 2890 2895 Gln Asp Gly Ala Glu Leu Tyr Glu Ala Val Lys Asn Ala Ala Asp 2900 2905 2910 Pro Ala Tyr Leu Glu Gly Tyr Phe Ser Glu Glu Gln Leu Arg Ala 2915 2920 2925 Leu Asn Asn His Arg Gln Met Leu Asn Asp Lys Lys Gln Ala Gln 2930 2935 2940 Ile Gln Leu Glu Ile Arg Lys Ala Met Glu Ser Ala Glu Gln Lys 2945 2950 2955 Glu Gln Gly Leu Ser Arg Asp Val Thr Thr Val Trp Lys Leu Arg 2960 2965 2970 Ile Val Ser Tyr Ser Lys Lys Glu Lys Asp Ser Val Ile Leu Ser 2975 2980 2985 Ile Trp Arg Pro Ser Ser Asp Leu Tyr Ser Leu Leu Thr Glu Gly 2990 2995 3000 Lys Arg Tyr Arg Ile Tyr His Leu Ala Thr Ser Lys Ser Lys Ser 3005 3010 3015 Lys Ser Glu Arg Ala Asn Ile Gln Leu Ala Ala Thr Lys Lys Thr 3020 3025 3030 Gln Tyr Gln Gln Leu Pro Val Ser Asp Glu Ile Leu Phe Gln Ile 3035 3040 3045 Tyr Gln Pro Arg Glu Pro Leu His Phe Ser Lys Phe Leu Asp Pro 3050 3055 3060 Asp Phe Gln Pro Ser Cys Ser Glu Val Asp Leu Ile Gly Phe Val 3065 3070 3075 Val Ser Val Val Lys Lys Thr Gly Leu Ala Pro Phe Val Tyr Leu 3080 3085 3090 Ser Asp Glu Cys Tyr Asn Leu Leu Ala Ile Lys Phe Trp Ile Asp 3095 3100 3105 Leu Asn Glu Asp Ile Ile Lys Pro His Met Leu Ile Ala Ala Ser 3110 3115 3120 Asn Leu Gln Trp Arg Pro Glu Ser Lys Ser Gly Leu Leu Thr Leu 3125 3130 3135 Phe Ala Gly Asp Phe Ser Val Phe Ser Ala Ser Pro Lys Glu Gly 3140 3145 3150 His Phe Gln Glu Thr Phe Asn Lys Met Lys Asn Thr Val Glu Asn 3155 3160 3165 Ile Asp Ile Leu Cys Asn Glu Ala Glu Asn Lys Leu Met His Ile 3170 3175 3180 Leu His Ala Asn Asp Pro Lys Trp Ser Thr Pro Thr Lys Asp Cys 3185 3190 3195 Thr Ser Gly Pro Tyr Thr Ala Gln Ile Ile Pro Gly Thr Gly Asn 3200 3205 3210 Lys Leu Leu Met Ser Ser Pro Asn Cys Glu Ile Tyr Tyr Gln Ser 3215 3220 3225 Pro Leu Ser Leu Cys Met Ala Lys Arg Lys Ser Val Ser Thr Pro 3230 3235 3240 Val Ser Ala Gln Met Thr Ser Lys Ser Cys Lys Gly Glu Lys Glu 3245 3250 3255 Ile Asp Asp Gln Lys Asn Cys Lys Lys Arg Arg Ala Leu Asp Phe 3260 3265 3270 Leu Ser Arg Leu Pro Leu Pro Pro Pro Val Ser Pro Ile Cys Thr 3275 3280 3285 Phe Val Ser Pro Ala Ala Gln Lys Ala Phe Gln Pro Pro Arg Ser 3290 3295 3300 Cys Gly Thr Lys Tyr Glu Thr Pro Ile Lys Lys Lys Glu Leu Asn 3305 3310 3315 Ser Pro Gln Met Thr Pro Phe Lys Lys Phe Asn Glu Ile Ser Leu 3320 3325 3330 Leu Glu Ser Asn Ser Ile Ala Asp Glu Glu Leu Ala Leu Ile Asn 3335 3340 3345 Thr Gln Ala Leu Leu Ser Gly Ser Thr Gly Glu Lys Gln Phe Ile 3350 3355 3360 Ser Val Ser Glu Ser Thr Arg Thr Ala Pro Thr Ser Ser Glu Asp 3365 3370 3375 Tyr Leu Arg Leu Lys Arg Arg Cys Thr Thr Ser Leu Ile Lys Glu 3380 3385 3390 Gln Glu Ser Ser Gln Ala Ser Thr Glu Glu Cys Glu Lys Asn Lys 3395 3400 3405 Gln Asp Thr Ile Thr Thr Lys Lys Tyr Ile 3410 3415 <210> 123 <211> 3056 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 123 Met Ser Leu Val Leu Asn Asp Leu Leu Ile Cys Cys Arg Gln Leu Glu 1 5 10 15 His Asp Arg Ala Thr Glu Arg Lys Lys Glu Val Glu Lys Phe Lys Arg 20 25 30 Leu Ile Arg Asp Pro Glu Thr Ile Lys His Leu Asp Arg His Ser Asp 35 40 45 Ser Lys Gln Gly Lys Tyr Leu Asn Trp Asp Ala Val Phe Arg Phe Leu 50 55 60 Gln Lys Tyr Ile Gln Lys Glu Thr Glu Cys Leu Arg Ile Ala Lys Pro 65 70 75 80 Asn Val Ser Ala Ser Thr Gln Ala Ser Arg Gln Lys Lys Met Gln Glu 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Val Lys Tyr Phe Ile Lys Cys Ala Asn Arg Arg Ala 100 105 110 Pro Arg Leu Lys Cys Gln Glu Leu Leu Asn Tyr Ile Met Asp Thr Val 115 120 125 Lys Asp Ser Ser Asn Gly Ala Ile Tyr Gly Ala Asp Cys Ser Asn Ile 130 135 140 Leu Leu Lys Asp Ile Leu Ser Val Arg Lys Tyr Trp Cys Glu Ile Ser 145 150 155 160 Gln Gln Gln Trp Leu Glu Leu Phe Ser Val Tyr Phe Arg Leu Tyr Leu 165 170 175 Lys Pro Ser Gln Asp Val His Arg Val Leu Val Ala Arg Ile Ile His 180 185 190 Ala Val Thr Lys Gly Cys Cys Ser Gln Thr Asp Gly Leu Asn Ser Lys 195 200 205 Phe Leu Asp Phe Phe Ser Lys Ala Ile Gln Cys Ala Arg Gln Glu Lys 210 215 220 Ser Ser Ser Gly Leu Asn His Ile Leu Ala Ala Leu Thr Ile Phe Leu 225 230 235 240 Lys Thr Leu Ala Val Asn Phe Arg Ile Arg Val Cys Glu Leu Gly Asp 245 250 255 Glu Ile Leu Pro Thr Leu Leu Tyr Ile Trp Thr Gln His Arg Leu Asn 260 265 270 Asp Ser Leu Lys Glu Val Ile Ile Glu Leu Phe Gln Leu Gln Ile Tyr 275 280 285 Ile His His Pro Lys Gly Ala Lys Thr Gln Glu Lys Gly Ala Tyr Glu 290 295 300 Ser Thr Lys Trp Arg Ser Ile Leu Tyr Asn Leu Tyr Asp Leu Leu Val 305 310 315 320 Asn Glu Ile Ser His Ile Gly Ser Arg Gly Lys Tyr Ser Ser Gly Phe 325 330 335 Arg Asn Ile Ala Val Lys Glu Asn Leu Ile Glu Leu Met Ala Asp Ile 340 345 350 Cys His Gln Val Phe Asn Glu Asp Thr Arg Ser Leu Glu Ile Ser Gln 355 360 365 Ser Tyr Thr Thr Thr Gln Arg Glu Ser Ser Asp Tyr Ser Val Pro Cys 370 375 380 Lys Arg Lys Lys Ile Glu Leu Gly Trp Glu Val Ile Lys Asp His Leu 385 390 395 400 Gln Lys Ser Gln Asn Asp Phe Asp Leu Val Pro Trp Leu Gln Ile Ala 405 410 415 Thr Gln Leu Ile Ser Lys Tyr Pro Ala Ser Leu Pro Asn Cys Glu Leu 420 425 430 Ser Pro Leu Leu Met Ile Leu Ser Gln Leu Leu Pro Gln Gln Arg His 435 440 445 Gly Glu Arg Thr Pro Tyr Val Leu Arg Cys Leu Thr Glu Val Ala Leu 450 455 460 Cys Gln Asp Lys Arg Ser Asn Leu Glu Ser Ser Gln Lys Ser Asp Leu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Trp Asn Lys Ile Trp Cys Ile Thr Phe Arg Gly Ile Ser 485 490 495 Ser Glu Gln Ile Gln Ala Glu Asn Phe Gly Leu Leu Gly Ala Ile Ile 500 505 510 Gln Gly Ser Leu Val Glu Val Asp Arg Glu Phe Trp Lys Leu Phe Thr 515 520 525 Gly Ser Ala Cys Arg Pro Ser Cys Pro Ala Val Cys Cys Leu Thr Leu 530 535 540 Ala Leu Thr Thr Ser Ile Val Pro Gly Thr Val Lys Met Gly Ile Glu 545 550 555 560 Gln Asn Met Cys Glu Val Asn Arg Ser Phe Ser Leu Lys Glu Ser Ile 565 570 575 Met Lys Trp Leu Leu Phe Tyr Gln Leu Glu Gly Asp Leu Glu Asn Ser 580 585 590 Thr Glu Val Pro Pro Ile Leu His Ser Asn Phe Pro His Leu Val Leu 595 600 605 Glu Lys Ile Leu Val Ser Leu Thr Met Lys Asn Cys Lys Ala Ala Met 610 615 620 Asn Phe Phe Gln Ser Val Pro Glu Cys Glu His His Gln Lys Asp Lys 625 630 635 640 Glu Glu Leu Ser Phe Ser Glu Val Glu Glu Leu Phe Leu Gln Thr Thr 645 650 655 Phe Asp Lys Met Asp Phe Leu Thr Ile Val Arg Glu Cys Gly Ile Glu 660 665 670 Lys His Gln Ser Ser Ile Gly Phe Ser Val His Gln Asn Leu Lys Glu 675 680 685 Ser Leu Asp Arg Cys Leu Leu Gly Leu Ser Glu Gln Leu Leu Asn Asn 690 695 700 Tyr Ser Ser Glu Ile Thr Asn Ser Glu Thr Leu Val Arg Cys Ser Arg 705 710 715 720 Leu Leu Val Gly Val Leu Gly Cys Tyr Cys Tyr Met Gly Val Ile Ala 725 730 735 Glu Glu Glu Ala Tyr Lys Ser Glu Leu Phe Gln Lys Ala Lys Ser Leu 740 745 750 Met Gln Cys Ala Gly Glu Ser Ile Thr Leu Phe Lys Asn Lys Thr Asn 755 760 765 Glu Glu Phe Arg Ile Gly Ser Leu Arg Asn Met Met Gln Leu Cys Thr 770 775 780 Arg Cys Leu Ser Asn Cys Thr Lys Lys Ser Pro Asn Lys Ile Ala Ser 785 790 795 800 Gly Phe Phe Leu Arg Leu Leu Thr Ser Lys Leu Met Asn Asp Ile Ala 805 810 815 Asp Ile Cys Lys Ser Leu Ala Ser Phe Ile Lys Lys Pro Phe Asp Arg 820 825 830 Gly Glu Val Glu Ser Met Glu Asp Asp Thr Asn Gly Asn Leu Met Glu 835 840 845 Val Glu Asp Gln Ser Ser Met Asn Leu Phe Asn Asp Tyr Pro Asp Ser 850 855 860 Ser Val Ser Asp Ala Asn Glu Pro Gly Glu Ser Gln Ser Thr Ile Gly 865 870 875 880 Ala Ile Asn Pro Leu Ala Glu Glu Tyr Leu Ser Lys Gln Asp Leu Leu 885 890 895 Phe Leu Asp Met Leu Lys Phe Leu Cys Leu Cys Val Thr Thr Ala Gln 900 905 910 Thr Asn Thr Val Ser Phe Arg Ala Ala Asp Ile Arg Arg Lys Leu Leu 915 920 925 Met Leu Ile Asp Ser Ser Thr Leu Glu Pro Thr Lys Ser Leu His Leu 930 935 940 His Met Tyr Leu Met Leu Leu Lys Glu Leu Pro Gly Glu Glu Tyr Pro 945 950 955 960 Leu Pro Met Glu Asp Val Leu Glu Leu Leu Lys Pro Leu Ser Asn Val 965 970 975 Cys Ser Leu Tyr Arg Arg Asp Gln Asp Val Cys Lys Thr Ile Leu Asn 980 985 990 His Val Leu His Val Val Lys Asn Leu Gly Gln Ser Asn Met Asp Ser 995 1000 1005 Glu Asn Thr Arg Asp Ala Gln Gly Gln Phe Leu Thr Val Ile Gly 1010 1015 1020 Ala Phe Trp His Leu Thr Lys Glu Arg Lys Tyr Ile Phe Ser Val 1025 1030 1035 Arg Met Ala Leu Val Asn Cys Leu Lys Thr Leu Leu Glu Ala Asp 1040 1045 1050 Pro Tyr Ser Lys Trp Ala Ile Leu Asn Val Met Gly Lys Asp Phe 1055 1060 1065 Pro Val Asn Glu Val Phe Thr Gln Phe Leu Ala Asp Asn His His 1070 1075 1080 Gln Val Arg Met Leu Ala Ala Glu Ser Ile Asn Arg Leu Phe Gln 1085 1090 1095 Asp Thr Lys Gly Asp Ser Ser Arg Leu Leu Lys Ala Leu Pro Leu 1100 1105 1110 Lys Leu Gln Gln Thr Ala Phe Glu Asn Ala Tyr Leu Lys Ala Gln 1115 1120 1125 Glu Gly Met Arg Glu Met Ser His Ser Ala Glu Asn Pro Glu Thr 1130 1135 1140 Leu Asp Glu Ile Tyr Asn Arg Lys Ser Val Leu Leu Thr Leu Ile 1145 1150 1155 Ala Val Val Leu Ser Cys Ser Pro Ile Cys Glu Lys Gln Ala Leu 1160 1165 1170 Phe Ala Leu Cys Lys Ser Val Lys Glu Asn Gly Leu Glu Pro His 1175 1180 1185 Leu Val Lys Lys Val Leu Glu Lys Val Ser Glu Thr Phe Gly Tyr 1190 1195 1200 Arg Arg Leu Glu Asp Phe Met Ala Ser His Leu Asp Tyr Leu Val 1205 1210 1215 Leu Glu Trp Leu Asn Leu Gln Asp Thr Glu Tyr Asn Leu Ser Ser 1220 1225 1230 Phe Pro Phe Ile Leu Leu Asn Tyr Thr Asn Ile Glu Asp Phe Tyr 1235 1240 1245 Arg Ser Cys Tyr Lys Val Leu Ile Pro His Leu Val Ile Arg Ser 1250 1255 1260 His Phe Asp Glu Val Lys Ser Ile Ala Asn Gln Ile Gln Glu Asp 1265 1270 1275 Trp Lys Ser Leu Leu Thr Asp Cys Phe Pro Lys Ile Leu Val Asn 1280 1285 1290 Ile Leu Pro Tyr Phe Ala Tyr Glu Gly Thr Arg Asp Ser Gly Met 1295 1300 1305 Ala Gln Gln Arg Glu Thr Ala Thr Lys Val Tyr Asp Met Leu Lys 1310 1315 1320 Ser Glu Asn Leu Leu Gly Lys Gln Ile Asp His Leu Phe Ile Ser 1325 1330 1335 Asn Leu Pro Glu Ile Val Val Glu Leu Leu Met Thr Leu His Glu 1340 1345 1350 Pro Ala Asn Ser Ser Ala Ser Gln Ser Thr Asp Leu Cys Asp Phe 1355 1360 1365 Ser Gly Asp Leu Asp Pro Ala Pro Asn Pro Pro His Phe Pro Ser 1370 1375 1380 His Val Ile Lys Ala Thr Phe Ala Tyr Ile Ser Asn Cys His Lys 1385 1390 1395 Thr Lys Leu Lys Ser Ile Leu Glu Ile Leu Ser Lys Ser Pro Asp 1400 1405 1410 Ser Tyr Gln Lys Ile Leu Leu Ala Ile Cys Glu Gln Ala Ala Glu 1415 1420 1425 Thr Asn Asn Val Tyr Lys Lys His Arg Ile Leu Lys Ile Tyr His 1430 1435 1440 Leu Phe Val Ser Leu Leu Leu Lys Asp Ile Lys Ser Gly Leu Gly 1445 1450 1455 Gly Ala Trp Ala Phe Val Leu Arg Asp Val Ile Tyr Thr Leu Ile 1460 1465 1470 His Tyr Ile Asn Gln Arg Pro Ser Cys Ile Met Asp Val Ser Leu 1475 1480 1485 Arg Ser Phe Ser Leu Cys Cys Asp Leu Leu Ser Gln Val Cys Gln 1490 1495 1500 Thr Ala Val Thr Tyr Cys Lys Asp Ala Leu Glu Asn His Leu His 1505 1510 1515 Val Ile Val Gly Thr Leu Ile Pro Leu Val Tyr Glu Gln Val Glu 1520 1525 1530 Val Gln Lys Gln Val Leu Asp Leu Leu Lys Tyr Leu Val Ile Asp 1535 1540 1545 Asn Lys Asp Asn Glu Asn Leu Tyr Ile Thr Ile Lys Leu Leu Asp 1550 1555 1560 Pro Phe Pro Asp His Val Val Phe Lys Asp Leu Arg Ile Thr Gln 1565 1570 1575 Gln Lys Ile Lys Tyr Ser Arg Gly Pro Phe Ser Leu Leu Glu Glu 1580 1585 1590 Ile Asn His Phe Leu Ser Val Ser Val Tyr Asp Ala Leu Pro Leu 1595 1600 1605 Thr Arg Leu Glu Gly Leu Lys Asp Leu Arg Arg Gln Leu Glu Leu 1610 1615 1620 His Lys Asp Gln Met Val Asp Ile Met Arg Ala Ser Gln Asp Asn 1625 1630 1635 Pro Gln Asp Gly Ile Met Val Lys Leu Val Val Asn Leu Leu Gln 1640 1645 1650 Leu Ser Lys Met Ala Ile Asn His Thr Gly Glu Lys Glu Val Leu 1655 1660 1665 Glu Ala Val Gly Ser Cys Leu Gly Glu Val Gly Pro Ile Asp Phe 1670 1675 1680 Ser Thr Ile Ala Ile Gln His Ser Lys Asp Ala Ser Tyr Thr Lys 1685 1690 1695 Ala Leu Lys Leu Phe Glu Asp Lys Glu Leu Gln Trp Thr Phe Ile 1700 1705 1710 Met Leu Thr Tyr Leu Asn Asn Thr Leu Val Glu Asp Cys Val Lys 1715 1720 1725 Val Arg Ser Ala Ala Val Thr Cys Leu Lys Asn Ile Leu Ala Thr 1730 1735 1740 Lys Thr Gly His Ser Phe Trp Glu Ile Tyr Lys Met Thr Thr Asp 1745 1750 1755 Pro Met Leu Ala Tyr Leu Gln Pro Phe Arg Thr Ser Arg Lys Lys 1760 1765 1770 Phe Leu Glu Val Pro Arg Phe Asp Lys Glu Asn Pro Phe Glu Gly 1775 1780 1785 Leu Asp Asp Ile Asn Leu Trp Ile Pro Leu Ser Glu Asn His Asp 1790 1795 1800 Ile Trp Ile Lys Thr Leu Thr Cys Ala Phe Leu Asp Ser Gly Gly 1805 1810 1815 Thr Lys Cys Glu Ile Leu Gln Leu Leu Lys Pro Met Cys Glu Val 1820 1825 1830 Lys Thr Asp Phe Cys Gln Thr Val Leu Pro Tyr Leu Ile His Asp 1835 1840 1845 Ile Leu Leu Gln Asp Thr Asn Glu Ser Trp Arg Asn Leu Leu Ser 1850 1855 1860 Thr His Val Gln Gly Phe Phe Thr Ser Cys Leu Arg His Phe Ser 1865 1870 1875 Gln Thr Ser Arg Ser Thr Thr Pro Ala Asn Leu Asp Ser Glu Ser 1880 1885 1890 Glu His Phe Phe Arg Cys Cys Leu Asp Lys Lys Ser Gln Arg Thr 1895 1900 1905 Met Leu Ala Val Val Asp Tyr Met Arg Arg Gln Lys Arg Pro Ser 1910 1915 1920 Ser Gly Thr Ile Phe Asn Asp Ala Phe Trp Leu Asp Leu Asn Tyr 1925 1930 1935 Leu Glu Val Ala Lys Val Ala Gln Ser Cys Ala Ala His Phe Thr 1940 1945 1950 Ala Leu Leu Tyr Ala Glu Ile Tyr Ala Asp Lys Lys Ser Met Asp 1955 1960 1965 Asp Gln Glu Lys Arg Ser Leu Ala Phe Glu Glu Gly Ser Gln Ser 1970 1975 1980 Thr Thr Ile Ser Ser Leu Ser Glu Lys Ser Lys Glu Glu Thr Gly 1985 1990 1995 Ile Ser Leu Gln Asp Leu Leu Leu Glu Ile Tyr Arg Ser Ile Gly 2000 2005 2010 Glu Pro Asp Ser Leu Tyr Gly Cys Gly Gly Gly Lys Met Leu Gln 2015 2020 2025 Pro Ile Thr Arg Leu Arg Thr Tyr Glu His Glu Ala Met Trp Gly 2030 2035 2040 Lys Ala Leu Val Thr Tyr Asp Leu Glu Thr Ala Ile Pro Ser Ser 2045 2050 2055 Thr Arg Gln Ala Gly Ile Ile Gln Ala Leu Gln Asn Leu Gly Leu 2060 2065 2070 Cys His Ile Leu Ser Val Tyr Leu Lys Gly Leu Asp Tyr Glu Asn 2075 2080 2085 Lys Asp Trp Cys Pro Glu Leu Glu Glu Leu His Tyr Gln Ala Ala 2090 2095 2100 Trp Arg Asn Met Gln Trp Asp His Cys Thr Ser Val Ser Lys Glu 2105 2110 2115 Val Glu Gly Thr Ser Tyr His Glu Ser Leu Tyr Asn Ala Leu Gln 2120 2125 2130 Ser Leu Arg Asp Arg Glu Phe Ser Thr Phe Tyr Glu Ser Leu Lys 2135 2140 2145 Tyr Ala Arg Val Lys Glu Val Glu Glu Met Cys Lys Arg Ser Leu 2150 2155 2160 Glu Ser Val Tyr Ser Leu Tyr Pro Thr Leu Ser Arg Leu Gln Ala 2165 2170 2175 Ile Gly Glu Leu Glu Ser Ile Gly Glu Leu Phe Ser Arg Ser Val 2180 2185 2190 Thr His Arg Gln Leu Ser Glu Val Tyr Ile Lys Trp Gln Lys His 2195 2200 2205 Ser Gln Leu Leu Lys Asp Ser Asp Phe Ser Phe Gln Glu Pro Ile 2210 2215 2220 Met Ala Leu Arg Thr Val Ile Leu Glu Ile Leu Met Glu Lys Glu 2225 2230 2235 Met Asp Asn Ser Gln Arg Glu Cys Ile Lys Asp Ile Leu Thr Lys 2240 2245 2250 His Leu Val Glu Leu Ser Ile Leu Ala Arg Thr Phe Lys Asn Thr 2255 2260 2265 Gln Leu Pro Glu Arg Ala Ile Phe Gln Ile Lys Gln Tyr Asn Ser 2270 2275 2280 Val Ser Cys Gly Val Ser Glu Trp Gln Leu Glu Glu Ala Gln Val 2285 2290 2295 Phe Trp Ala Lys Lys Glu Gln Ser Leu Ala Leu Ser Ile Leu Lys 2300 2305 2310 Gln Met Ile Lys Lys Leu Asp Ala Ser Cys Ala Ala Asn Asn Pro 2315 2320 2325 Ser Leu Lys Leu Thr Tyr Thr Glu Cys Leu Arg Val Cys Gly Asn 2330 2335 2340 Trp Leu Ala Glu Thr Cys Leu Glu Asn Pro Ala Val Ile Met Gln 2345 2350 2355 Thr Tyr Leu Glu Lys Ala Val Glu Val Ala Gly Asn Tyr Asp Gly 2360 2365 2370 Glu Ser Ser Asp Glu Leu Arg Asn Gly Lys Met Lys Ala Phe Leu 2375 2380 2385 Ser Leu Ala Arg Phe Ser Asp Thr Gln Tyr Gln Arg Ile Glu Asn 2390 2395 2400 Tyr Met Lys Ser Ser Glu Phe Glu Asn Lys Gln Ala Leu Leu Lys 2405 2410 2415 Arg Ala Lys Glu Glu Val Gly Leu Leu Arg Glu His Lys Ile Gln 2420 2425 2430 Thr Asn Arg Tyr Thr Val Lys Val Gln Arg Glu Leu Glu Leu Asp 2435 2440 2445 Glu Leu Ala Leu Arg Ala Leu Lys Glu Asp Arg Lys Arg Phe Leu 2450 2455 2460 Cys Lys Ala Val Glu Asn Tyr Ile Asn Cys Leu Leu Ser Gly Glu 2465 2470 2475 Glu His Asp Met Trp Val Phe Arg Leu Cys Ser Leu Trp Leu Glu 2480 2485 2490 Asn Ser Gly Val Ser Glu Val Asn Gly Met Met Lys Arg Asp Gly 2495 2500 2505 Met Lys Ile Pro Thr Tyr Lys Phe Leu Pro Leu Met Tyr Gln Leu 2510 2515 2520 Ala Ala Arg Met Gly Thr Lys Met Met Gly Gly Leu Gly Phe His 2525 2530 2535 Glu Val Leu Asn Asn Leu Ile Ser Arg Ile Ser Met Asp His Pro 2540 2545 2550 His His Thr Leu Phe Ile Ile Leu Ala Leu Ala Asn Ala Asn Arg 2555 2560 2565 Asp Glu Phe Leu Thr Lys Pro Glu Val Ala Arg Arg Ser Arg Ile 2570 2575 2580 Thr Lys Asn Val Pro Lys Gln Ser Ser Gln Leu Asp Glu Asp Arg 2585 2590 2595 Thr Glu Ala Ala Asn Arg Ile Ile Cys Thr Ile Arg Ser Arg Arg 2600 2605 2610 Pro Gln Met Val Arg Ser Val Glu Ala Leu Cys Asp Ala Tyr Ile 2615 2620 2625 Ile Leu Ala Asn Leu Asp Ala Thr Gln Trp Lys Thr Gln Arg Lys 2630 2635 2640 Gly Ile Asn Ile Pro Ala Asp Gln Pro Ile Thr Lys Leu Lys Asn 2645 2650 2655 Leu Glu Asp Val Val Val Pro Thr Met Glu Ile Lys Val Asp His 2660 2665 2670 Thr Gly Glu Tyr Gly Asn Leu Val Thr Ile Gln Ser Phe Lys Ala 2675 2680 2685 Glu Phe Arg Leu Ala Gly Gly Val Asn Leu Pro Lys Ile Ile Asp 2690 2695 2700 Cys Val Gly Ser Asp Gly Lys Glu Arg Arg Gln Leu Val Lys Gly 2705 2710 2715 Arg Asp Asp Leu Arg Gln Asp Ala Val Met Gln Gln Val Phe Gln 2720 2725 2730 Met Cys Asn Thr Leu Leu Gln Arg Asn Thr Glu Thr Arg Lys Arg 2735 2740 2745 Lys Leu Thr Ile Cys Thr Tyr Lys Val Val Pro Leu Ser Gln Arg 2750 2755 2760 Ser Gly Val Leu Glu Trp Cys Thr Gly Thr Val Pro Ile Gly Glu 2765 2770 2775 Phe Leu Val Asn Asn Glu Asp Gly Ala His Lys Arg Tyr Arg Pro 2780 2785 2790 Asn Asp Phe Ser Ala Phe Gln Cys Gln Lys Lys Met Met Glu Val 2795 2800 2805 Gln Lys Lys Ser Phe Glu Glu Lys Tyr Glu Val Phe Met Asp Val 2810 2815 2820 Cys Gln Asn Phe Gln Pro Val Phe Arg Tyr Phe Cys Met Glu Lys 2825 2830 2835 Phe Leu Asp Pro Ala Ile Trp Phe Glu Lys Arg Leu Ala Tyr Thr 2840 2845 2850 Arg Ser Val Ala Thr Ser Ser Ile Val Gly Tyr Ile Leu Gly Leu 2855 2860 2865 Gly Asp Arg His Val Gln Asn Ile Leu Ile Asn Glu Gln Ser Ala 2870 2875 2880 Glu Leu Val His Ile Asp Leu Gly Val Ala Phe Glu Gln Gly Lys 2885 2890 2895 Ile Leu Pro Thr Pro Glu Thr Val Pro Phe Arg Leu Thr Arg Asp 2900 2905 2910 Ile Val Asp Gly Met Gly Ile Thr Gly Val Glu Gly Val Phe Arg 2915 2920 2925 Arg Cys Cys Glu Lys Thr Met Glu Val Met Arg Asn Ser Gln Glu 2930 2935 2940 Thr Leu Leu Thr Ile Val Glu Val Leu Leu Tyr Asp Pro Leu Phe 2945 2950 2955 Asp Trp Thr Met Asn Pro Leu Lys Ala Leu Tyr Leu Gln Gln Arg 2960 2965 2970 Pro Glu Asp Glu Thr Glu Leu His Pro Thr Leu Asn Ala Asp Asp 2975 2980 2985 Gln Glu Cys Lys Arg Asn Leu Ser Asp Ile Asp Gln Ser Phe Asn 2990 2995 3000 Lys Val Ala Glu Arg Val Leu Met Arg Leu Gln Glu Lys Leu Lys 3005 3010 3015 Gly Val Glu Glu Gly Thr Val Leu Ser Val Gly Gly Gln Val Asn 3020 3025 3030 Leu Leu Ile Gln Gln Ala Ile Asp Pro Lys Asn Leu Ser Arg Leu 3035 3040 3045 Phe Pro Gly Trp Lys Ala Trp Val 3050 3055 <210> 124 <211> 2644 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 124 Met Gly Glu His Gly Leu Glu Leu Ala Ser Met Ile Pro Ala Leu Arg 1 5 10 15 Glu Leu Gly Ser Ala Thr Pro Glu Glu Tyr Asn Thr Val Val Gln Lys 20 25 30 Pro Arg Gln Ile Leu Cys Gln Phe Ile Asp Arg Ile Leu Thr Asp Val 35 40 45 Asn Val Val Ala Val Glu Leu Val Lys Lys Thr Asp Ser Gln Pro Thr 50 55 60 Ser Val Met Leu Leu Asp Phe Ile Gln His Ile Met Lys Ser Ser Pro 65 70 75 80 Leu Met Phe Val Asn Val Ser Gly Ser His Glu Ala Lys Gly Ser Cys 85 90 95 Ile Glu Phe Ser Asn Trp Ile Ile Thr Arg Leu Leu Arg Ile Ala Ala 100 105 110 Thr Pro Ser Cys His Leu Leu His Lys Lys Ile Cys Glu Val Ile Cys 115 120 125 Ser Leu Leu Phe Leu Phe Lys Ser Lys Ser Pro Ala Ile Phe Gly Val 130 135 140 Leu Thr Lys Glu Leu Leu Gln Leu Phe Glu Asp Leu Val Tyr Leu His 145 150 155 160 Arg Arg Asn Val Met Gly His Ala Val Glu Trp Pro Val Val Met Ser 165 170 175 Arg Phe Leu Ser Gln Leu Asp Glu His Met Gly Tyr Leu Gln Ser Ala 180 185 190 Pro Leu Gln Leu Met Ser Met Gln Asn Leu Glu Phe Ile Glu Val Thr 195 200 205 Leu Leu Met Val Leu Thr Arg Ile Ile Ala Ile Val Phe Phe Arg Arg 210 215 220 Gln Glu Leu Leu Leu Trp Gln Ile Gly Cys Val Leu Leu Glu Tyr Gly 225 230 235 240 Ser Pro Lys Ile Lys Ser Leu Ala Ile Ser Phe Leu Thr Glu Leu Phe 245 250 255 Gln Leu Gly Gly Leu Pro Ala Gln Pro Ala Ser Thr Phe Phe Ser Ser 260 265 270 Phe Leu Glu Leu Leu Lys His Leu Val Glu Met Asp Thr Asp Gln Leu 275 280 285 Lys Leu Tyr Glu Glu Pro Leu Ser Lys Leu Ile Lys Thr Leu Phe Pro 290 295 300 Phe Glu Ala Glu Ala Tyr Arg Asn Ile Glu Pro Val Tyr Leu Asn Met 305 310 315 320 Leu Leu Glu Lys Leu Cys Val Met Phe Glu Asp Gly Val Leu Met Arg 325 330 335 Leu Lys Ser Asp Leu Leu Lys Ala Ala Leu Cys His Leu Leu Gln Tyr 340 345 350 Phe Leu Lys Phe Val Pro Ala Gly Tyr Glu Ser Ala Leu Gln Val Arg 355 360 365 Lys Val Tyr Val Arg Asn Ile Cys Lys Ala Leu Leu Asp Val Leu Gly 370 375 380 Ile Glu Val Asp Ala Glu Tyr Leu Leu Gly Pro Leu Tyr Ala Ala Leu 385 390 395 400 Lys Met Glu Ser Met Glu Ile Ile Glu Glu Ile Gln Cys Gln Thr Gln 405 410 415 Gln Glu Asn Leu Ser Ser Asn Ser Asp Gly Ile Ser Pro Lys Arg Arg 420 425 430 Arg Leu Ser Ser Ser Leu Asn Pro Ser Lys Arg Ala Pro Lys Gln Thr 435 440 445 Glu Glu Ile Lys His Val Asp Met Asn Gln Lys Ser Ile Leu Trp Ser 450 455 460 Ala Leu Lys Gln Lys Ala Glu Ser Leu Gln Ile Ser Leu Glu Tyr Ser 465 470 475 480 Gly Leu Lys Asn Pro Val Ile Glu Met Leu Glu Gly Ile Ala Val Val 485 490 495 Leu Gln Leu Thr Ala Leu Cys Thr Val His Cys Ser His Gln Asn Met 500 505 510 Asn Cys Arg Thr Phe Lys Asp Cys Gln His Lys Ser Lys Lys Lys Pro 515 520 525 Ser Val Val Ile Thr Trp Met Ser Leu Asp Phe Tyr Thr Lys Val Leu 530 535 540 Lys Ser Cys Arg Ser Leu Leu Glu Ser Val Gln Lys Leu Asp Leu Glu 545 550 555 560 Ala Thr Ile Asp Lys Val Val Lys Ile Tyr Asp Ala Leu Ile Tyr Met 565 570 575 Gln Val Asn Ser Ser Phe Glu Asp His Ile Leu Glu Asp Leu Cys Gly 580 585 590 Met Leu Ser Leu Pro Trp Ile Tyr Ser His Ser Asp Asp Gly Cys Leu 595 600 605 Lys Leu Thr Thr Phe Ala Ala Asn Leu Leu Thr Leu Ser Cys Arg Ile 610 615 620 Ser Asp Ser Tyr Ser Pro Gln Ala Gln Ser Arg Cys Val Phe Leu Leu 625 630 635 640 Thr Leu Phe Pro Arg Arg Ile Phe Leu Glu Trp Arg Thr Ala Val Tyr 645 650 655 Asn Trp Ala Leu Gln Ser Ser His Glu Val Ile Arg Ala Ser Cys Val 660 665 670 Ser Gly Phe Phe Ile Leu Leu Gln Gln Gln Asn Ser Cys Asn Arg Val 675 680 685 Pro Lys Ile Leu Ile Asp Lys Val Lys Asp Asp Ser Asp Ile Val Lys 690 695 700 Lys Glu Phe Ala Ser Ile Leu Gly Gln Leu Val Cys Thr Leu His Gly 705 710 715 720 Met Phe Tyr Leu Thr Ser Ser Leu Thr Glu Pro Phe Ser Glu His Gly 725 730 735 His Val Asp Leu Phe Cys Arg Asn Leu Lys Ala Thr Ser Gln His Glu 740 745 750 Cys Ser Ser Ser Gln Leu Lys Ala Ser Val Cys Lys Pro Phe Leu Phe 755 760 765 Leu Leu Lys Lys Lys Ile Pro Ser Pro Val Lys Leu Ala Phe Ile Asp 770 775 780 Asn Leu His His Leu Cys Lys His Leu Asp Phe Arg Glu Asp Glu Thr 785 790 795 800 Asp Val Lys Ala Val Leu Gly Thr Leu Leu Asn Leu Met Glu Asp Pro 805 810 815 Asp Lys Asp Val Arg Val Ala Phe Ser Gly Asn Ile Lys His Ile Leu 820 825 830 Glu Ser Leu Asp Ser Glu Asp Gly Phe Ile Lys Glu Leu Phe Val Leu 835 840 845 Arg Met Lys Glu Ala Tyr Thr His Ala Gln Ile Ser Arg Asn Asn Glu 850 855 860 Leu Lys Asp Thr Leu Ile Leu Thr Thr Gly Asp Ile Gly Arg Ala Ala 865 870 875 880 Lys Gly Asp Leu Val Pro Phe Ala Leu Leu His Leu Leu His Cys Leu 885 890 895 Leu Ser Lys Ser Ala Ser Val Ser Gly Ala Ala Tyr Thr Glu Ile Arg 900 905 910 Ala Leu Val Ala Ala Lys Ser Val Lys Leu Gln Ser Phe Phe Ser Gln 915 920 925 Tyr Lys Lys Pro Ile Cys Gln Phe Leu Val Glu Ser Leu His Ser Ser 930 935 940 Gln Met Thr Ala Leu Pro Asn Thr Pro Cys Gln Asn Ala Asp Val Arg 945 950 955 960 Lys Gln Asp Val Ala His Gln Arg Glu Met Ala Leu Asn Thr Leu Ser 965 970 975 Glu Ile Ala Asn Val Phe Asp Phe Pro Asp Leu Asn Arg Phe Leu Thr 980 985 990 Arg Thr Leu Gln Val Leu Leu Pro Asp Leu Ala Ala Lys Ala Ser Pro 995 1000 1005 Ala Ala Ser Ala Leu Ile Arg Thr Leu Gly Lys Gln Leu Asn Val 1010 1015 1020 Asn Arg Arg Glu Ile Leu Ile Asn Asn Phe Lys Tyr Ile Phe Ser 1025 1030 1035 His Leu Val Cys Ser Cys Ser Lys Asp Glu Leu Glu Arg Ala Leu 1040 1045 1050 His Tyr Leu Lys Asn Glu Thr Glu Ile Glu Leu Gly Ser Leu Leu 1055 1060 1065 Arg Gln Asp Phe Gln Gly Leu His Asn Glu Leu Leu Leu Arg Ile 1070 1075 1080 Gly Glu His Tyr Gln Gln Val Phe Asn Gly Leu Ser Ile Leu Ala 1085 1090 1095 Ser Phe Ala Ser Ser Asp Asp Pro Tyr Gln Gly Pro Arg Asp Ile 1100 1105 1110 Ile Ser Pro Glu Leu Met Ala Asp Tyr Leu Gln Pro Lys Leu Leu 1115 1120 1125 Gly Ile Leu Ala Phe Phe Asn Met Gln Leu Leu Ser Ser Ser Val 1130 1135 1140 Gly Ile Glu Asp Lys Lys Met Ala Leu Asn Ser Leu Met Ser Leu 1145 1150 1155 Met Lys Leu Met Gly Pro Lys His Val Ser Ser Val Arg Val Lys 1160 1165 1170 Met Met Thr Thr Leu Arg Thr Gly Leu Arg Phe Lys Asp Asp Phe 1175 1180 1185 Pro Glu Leu Cys Cys Arg Ala Trp Asp Cys Phe Val Arg Cys Leu 1190 1195 1200 Asp His Ala Cys Leu Gly Ser Leu Leu Ser His Val Ile Val Ala 1205 1210 1215 Leu Leu Pro Leu Ile His Ile Gln Pro Lys Glu Thr Ala Ala Ile 1220 1225 1230 Phe His Tyr Leu Ile Ile Glu Asn Arg Asp Ala Val Gln Asp Phe 1235 1240 1245 Leu His Glu Ile Tyr Phe Leu Pro Asp His Pro Glu Leu Lys Lys 1250 1255 1260 Ile Lys Ala Val Leu Gln Glu Tyr Arg Lys Glu Thr Ser Glu Ser 1265 1270 1275 Thr Asp Leu Gln Thr Thr Leu Gln Leu Ser Met Lys Ala Ile Gln 1280 1285 1290 His Glu Asn Val Asp Val Arg Ile His Ala Leu Thr Ser Leu Lys 1295 1300 1305 Glu Thr Leu Tyr Lys Asn Gln Glu Lys Leu Ile Lys Tyr Ala Thr 1310 1315 1320 Asp Ser Glu Thr Val Glu Pro Ile Ile Ser Gln Leu Val Thr Val 1325 1330 1335 Leu Leu Lys Gly Cys Gln Asp Ala Asn Ser Gln Ala Arg Leu Leu 1340 1345 1350 Cys Gly Glu Cys Leu Gly Glu Leu Gly Ala Ile Asp Pro Gly Arg 1355 1360 1365 Leu Asp Phe Ser Thr Thr Glu Thr Gln Gly Lys Asp Phe Thr Phe 1370 1375 1380 Val Thr Gly Val Glu Asp Ser Ser Phe Ala Tyr Gly Leu Leu Met 1385 1390 1395 Glu Leu Thr Arg Ala Tyr Leu Ala Tyr Ala Asp Asn Ser Arg Ala 1400 1405 1410 Gln Asp Ser Ala Ala Tyr Ala Ile Gln Glu Leu Leu Ser Ile Tyr 1415 1420 1425 Asp Cys Arg Glu Met Glu Thr Asn Gly Pro Gly His Gln Leu Trp 1430 1435 1440 Arg Arg Phe Pro Glu His Val Arg Glu Ile Leu Glu Pro His Leu 1445 1450 1455 Asn Thr Arg Tyr Lys Ser Ser Gln Lys Ser Thr Asp Trp Ser Gly 1460 1465 1470 Val Lys Lys Pro Ile Tyr Leu Ser Lys Leu Gly Ser Asn Phe Ala 1475 1480 1485 Glu Trp Ser Ala Ser Trp Ala Gly Tyr Leu Ile Thr Lys Val Arg 1490 1495 1500 His Asp Leu Ala Ser Lys Ile Phe Thr Cys Cys Ser Ile Met Met 1505 1510 1515 Lys His Asp Phe Lys Val Thr Ile Tyr Leu Leu Pro His Ile Leu 1520 1525 1530 Val Tyr Val Leu Leu Gly Cys Asn Gln Glu Asp Gln Gln Glu Val 1535 1540 1545 Tyr Ala Glu Ile Met Ala Val Leu Lys His Asp Asp Gln His Thr 1550 1555 1560 Ile Asn Thr Gln Asp Ile Ala Ser Asp Leu Cys Gln Leu Ser Thr 1565 1570 1575 Gln Thr Val Phe Ser Met Leu Asp His Leu Thr Gln Trp Ala Arg 1580 1585 1590 His Lys Phe Gln Ala Leu Lys Ala Glu Lys Cys Pro His Ser Lys 1595 1600 1605 Ser Asn Arg Asn Lys Val Asp Ser Met Val Ser Thr Val Asp Tyr 1610 1615 1620 Glu Asp Tyr Gln Ser Val Thr Arg Phe Leu Asp Leu Ile Pro Gln 1625 1630 1635 Asp Thr Leu Ala Val Ala Ser Phe Arg Ser Lys Ala Tyr Thr Arg 1640 1645 1650 Ala Val Met His Phe Glu Ser Phe Ile Thr Glu Lys Lys Gln Asn 1655 1660 1665 Ile Gln Glu His Leu Gly Phe Leu Gln Lys Leu Tyr Ala Ala Met 1670 1675 1680 His Glu Pro Asp Gly Val Ala Gly Val Ser Ala Ile Arg Lys Ala 1685 1690 1695 Glu Pro Ser Leu Lys Glu Gln Ile Leu Glu His Glu Ser Leu Gly 1700 1705 1710 Leu Leu Arg Asp Ala Thr Ala Cys Tyr Asp Arg Ala Ile Gln Leu 1715 1720 1725 Glu Pro Asp Gln Ile Ile His Tyr His Gly Val Val Lys Ser Met 1730 1735 1740 Leu Gly Leu Gly Gln Leu Ser Thr Val Ile Thr Gln Val Asn Gly 1745 1750 1755 Val His Ala Asn Arg Ser Glu Trp Thr Asp Glu Leu Asn Thr Tyr 1760 1765 1770 Arg Val Glu Ala Ala Trp Lys Leu Ser Gln Trp Asp Leu Val Glu 1775 1780 1785 Asn Tyr Leu Ala Ala Asp Gly Lys Ser Thr Thr Trp Ser Val Arg 1790 1795 1800 Leu Gly Gln Leu Leu Leu Ser Ala Lys Lys Arg Asp Ile Thr Ala 1805 1810 1815 Phe Tyr Asp Ser Leu Lys Leu Val Arg Ala Glu Gln Ile Val Pro 1820 1825 1830 Leu Ser Ala Ala Ser Phe Glu Arg Gly Ser Tyr Gln Arg Gly Tyr 1835 1840 1845 Glu Tyr Ile Val Arg Leu His Met Leu Cys Glu Leu Glu His Ser 1850 1855 1860 Ile Lys Pro Leu Phe Gln His Ser Pro Gly Asp Ser Ser Gln Glu 1865 1870 1875 Asp Ser Leu Asn Trp Val Ala Arg Leu Glu Met Thr Gln Asn Ser 1880 1885 1890 Tyr Arg Ala Lys Glu Pro Ile Leu Ala Leu Arg Arg Ala Leu Leu 1895 1900 1905 Ser Leu Asn Lys Arg Pro Asp Tyr Asn Glu Met Val Gly Glu Cys 1910 1915 1920 Trp Leu Gln Ser Ala Arg Val Ala Arg Lys Ala Gly His His Gln 1925 1930 1935 Thr Ala Tyr Asn Ala Leu Leu Asn Ala Gly Glu Ser Arg Leu Ala 1940 1945 1950 Glu Leu Tyr Val Glu Arg Ala Lys Trp Leu Trp Ser Lys Gly Asp 1955 1960 1965 Val His Gln Ala Leu Ile Val Leu Gln Lys Gly Val Glu Leu Cys 1970 1975 1980 Phe Pro Glu Asn Glu Thr Pro Pro Glu Gly Lys Asn Met Leu Ile 1985 1990 1995 His Gly Arg Ala Met Leu Leu Val Gly Arg Phe Met Glu Glu Thr 2000 2005 2010 Ala Asn Phe Glu Ser Asn Ala Ile Met Lys Lys Tyr Lys Asp Val 2015 2020 2025 Thr Ala Cys Leu Pro Glu Trp Glu Asp Gly His Phe Tyr Leu Ala 2030 2035 2040 Lys Tyr Tyr Asp Lys Leu Met Pro Met Val Thr Asp Asn Lys Met 2045 2050 2055 Glu Lys Gln Gly Asp Leu Ile Arg Tyr Ile Val Leu His Phe Gly 2060 2065 2070 Arg Ser Leu Gln Tyr Gly Asn Gln Phe Ile Tyr Gln Ser Met Pro 2075 2080 2085 Arg Met Leu Thr Leu Trp Leu Asp Tyr Gly Thr Lys Ala Tyr Glu 2090 2095 2100 Trp Glu Lys Ala Gly Arg Ser Asp Arg Val Gln Met Arg Asn Asp 2105 2110 2115 Leu Gly Lys Ile Asn Lys Val Ile Thr Glu His Thr Asn Tyr Leu 2120 2125 2130 Ala Pro Tyr Gln Phe Leu Thr Ala Phe Ser Gln Leu Ile Ser Arg 2135 2140 2145 Ile Cys His Ser His Asp Glu Val Phe Val Val Leu Met Glu Ile 2150 2155 2160 Ile Ala Lys Val Phe Leu Ala Tyr Pro Gln Gln Ala Met Trp Met 2165 2170 2175 Met Thr Ala Val Ser Lys Ser Ser Tyr Pro Met Arg Val Asn Arg 2180 2185 2190 Cys Lys Glu Ile Leu Asn Lys Ala Ile His Met Lys Lys Ser Leu 2195 2200 2205 Glu Lys Phe Val Gly Asp Ala Thr Arg Leu Thr Asp Lys Leu Leu 2210 2215 2220 Glu Leu Cys Asn Lys Pro Val Asp Gly Ser Ser Ser Thr Leu Ser 2225 2230 2235 Met Ser Thr His Phe Lys Met Leu Lys Lys Leu Val Glu Glu Ala 2240 2245 2250 Thr Phe Ser Glu Ile Leu Ile Pro Leu Gln Ser Val Met Ile Pro 2255 2260 2265 Thr Leu Pro Ser Ile Leu Gly Thr His Ala Asn His Ala Ser His 2270 2275 2280 Glu Pro Phe Pro Gly His Trp Ala Tyr Ile Ala Gly Phe Asp Asp 2285 2290 2295 Met Val Glu Ile Leu Ala Ser Leu Gln Lys Pro Lys Lys Ile Ser 2300 2305 2310 Leu Lys Gly Ser Asp Gly Lys Phe Tyr Ile Met Met Cys Lys Pro 2315 2320 2325 Lys Asp Asp Leu Arg Lys Asp Cys Arg Leu Met Glu Phe Asn Ser 2330 2335 2340 Leu Ile Asn Lys Cys Leu Arg Lys Asp Ala Glu Ser Arg Arg Arg 2345 2350 2355 Glu Leu His Ile Arg Thr Tyr Ala Val Ile Pro Leu Asn Asp Glu 2360 2365 2370 Cys Gly Ile Ile Glu Trp Val Asn Asn Thr Ala Gly Leu Arg Pro 2375 2380 2385 Ile Leu Thr Lys Leu Tyr Lys Glu Lys Gly Val Tyr Met Thr Gly 2390 2395 2400 Lys Glu Leu Arg Gln Cys Met Leu Pro Lys Ser Ala Ala Leu Ser 2405 2410 2415 Glu Lys Leu Lys Val Phe Arg Glu Phe Leu Leu Pro Arg His Pro 2420 2425 2430 Pro Ile Phe His Glu Trp Phe Leu Arg Thr Phe Pro Asp Pro Thr 2435 2440 2445 Ser Trp Tyr Ser Ser Arg Ser Ala Tyr Cys Arg Ser Thr Ala Val 2450 2455 2460 Met Ser Met Val Gly Tyr Ile Leu Gly Leu Gly Asp Arg His Gly 2465 2470 2475 Glu Asn Ile Leu Phe Asp Ser Leu Thr Gly Glu Cys Val His Val 2480 2485 2490 Asp Phe Asn Cys Leu Phe Asn Lys Gly Glu Thr Phe Glu Val Pro 2495 2500 2505 Glu Ile Val Pro Phe Arg Leu Thr His Asn Met Val Asn Gly Met 2510 2515 2520 Gly Pro Met Gly Thr Glu Gly Leu Phe Arg Arg Ala Cys Glu Val 2525 2530 2535 Thr Met Arg Leu Met Arg Asp Gln Arg Glu Pro Leu Met Ser Val 2540 2545 2550 Leu Lys Thr Phe Leu His Asp Pro Leu Val Glu Trp Ser Lys Pro 2555 2560 2565 Val Lys Gly His Ser Lys Ala Pro Leu Asn Glu Thr Gly Glu Val 2570 2575 2580 Val Asn Glu Lys Ala Lys Thr His Val Leu Asp Ile Glu Gln Arg 2585 2590 2595 Leu Gln Gly Val Ile Lys Thr Arg Asn Arg Val Thr Gly Leu Pro 2600 2605 2610 Leu Ser Ile Glu Gly His Val His Tyr Leu Ile Gln Glu Ala Thr 2615 2620 2625 Asp Glu Asn Leu Leu Cys Gln Met Tyr Leu Gly Trp Thr Pro Tyr 2630 2635 2640 Met <210> 125 <211> 708 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 125 Met Ser Thr Ala Asp Ala Leu Asp Asp Glu Asn Thr Phe Lys Ile Leu 1 5 10 15 Val Ala Thr Asp Ile His Leu Gly Phe Met Glu Lys Asp Ala Val Arg 20 25 30 Gly Asn Asp Thr Phe Val Thr Leu Asp Glu Ile Leu Arg Leu Ala Gln 35 40 45 Glu Asn Glu Val Asp Phe Ile Leu Leu Gly Gly Asp Leu Phe His Glu 50 55 60 Asn Lys Pro Ser Arg Lys Thr Leu His Thr Cys Leu Glu Leu Leu Arg 65 70 75 80 Lys Tyr Cys Met Gly Asp Arg Pro Val Gln Phe Glu Ile Leu Ser Asp 85 90 95 Gln Ser Val Asn Phe Gly Phe Ser Lys Phe Pro Trp Val Asn Tyr Gln 100 105 110 Asp Gly Asn Leu Asn Ile Ser Ile Pro Val Phe Ser Ile His Gly Asn 115 120 125 His Asp Asp Pro Thr Gly Ala Asp Ala Leu Cys Ala Leu Asp Ile Leu 130 135 140 Ser Cys Ala Gly Phe Val Asn His Phe Gly Arg Ser Met Ser Val Glu 145 150 155 160 Lys Ile Asp Ile Ser Pro Val Leu Leu Gln Lys Gly Ser Thr Lys Ile 165 170 175 Ala Leu Tyr Gly Leu Gly Ser Ile Pro Asp Glu Arg Leu Tyr Arg Met 180 185 190 Phe Val Asn Lys Lys Val Thr Met Leu Arg Pro Lys Glu Asp Glu Asn 195 200 205 Ser Trp Phe Asn Leu Phe Val Ile His Gln Asn Arg Ser Lys His Gly 210 215 220 Ser Thr Asn Phe Ile Pro Glu Gln Phe Leu Asp Asp Phe Ile Asp Leu 225 230 235 240 Val Ile Trp Gly His Glu His Glu Cys Lys Ile Ala Pro Thr Lys Asn 245 250 255 Glu Gln Gln Leu Phe Tyr Ile Ser Gln Pro Gly Ser Ser Val Val Thr 260 265 270 Ser Leu Ser Pro Gly Glu Ala Val Lys Lys His Val Gly Leu Leu Arg 275 280 285 Ile Lys Gly Arg Lys Met Asn Met His Lys Ile Pro Leu His Thr Val 290 295 300 Arg Gln Phe Phe Met Glu Asp Ile Val Leu Ala Asn His Pro Asp Ile 305 310 315 320 Phe Asn Pro Asp Asn Pro Lys Val Thr Gln Ala Ile Gln Ser Phe Cys 325 330 335 Leu Glu Lys Ile Glu Glu Met Leu Glu Asn Ala Glu Arg Glu Arg Leu 340 345 350 Gly Asn Ser His Gln Pro Glu Lys Pro Leu Val Arg Leu Arg Val Asp 355 360 365 Tyr Ser Gly Gly Phe Glu Pro Phe Ser Val Leu Arg Phe Ser Gln Lys 370 375 380 Phe Val Asp Arg Val Ala Asn Pro Lys Asp Ile Ile His Phe Phe Arg 385 390 395 400 His Arg Glu Gln Lys Glu Lys Thr Gly Glu Glu Ile Asn Phe Gly Lys 405 410 415 Leu Ile Thr Lys Pro Ser Glu Gly Thr Thr Leu Arg Val Glu Asp Leu 420 425 430 Val Lys Gln Tyr Phe Gln Thr Ala Glu Lys Asn Val Gln Leu Ser Leu 435 440 445 Leu Thr Glu Arg Gly Met Gly Glu Ala Val Gln Glu Phe Val Asp Lys 450 455 460 Glu Glu Lys Asp Ala Ile Glu Glu Leu Val Lys Tyr Gln Leu Glu Lys 465 470 475 480 Thr Gln Arg Phe Leu Lys Glu Arg His Ile Asp Ala Leu Glu Asp Lys 485 490 495 Ile Asp Glu Glu Val Arg Arg Phe Arg Glu Thr Arg Gln Lys Asn Thr 500 505 510 Asn Glu Glu Asp Asp Glu Val Arg Glu Ala Met Thr Arg Ala Arg Ala 515 520 525 Leu Arg Ser Gln Ser Glu Glu Ser Ala Ser Ala Phe Ser Ala Asp Asp 530 535 540 Leu Met Ser Ile Asp Leu Ala Glu Gln Met Ala Asn Asp Ser Asp Asp 545 550 555 560 Ser Ile Ser Ala Ala Thr Asn Lys Gly Arg Gly Arg Gly Arg Gly Arg 565 570 575 Arg Gly Gly Arg Gly Gln Asn Ser Ala Ser Arg Gly Gly Ser Gln Arg 580 585 590 Gly Arg Ala Asp Thr Gly Leu Glu Thr Ser Thr Arg Ser Arg Asn Ser 595 600 605 Lys Thr Ala Val Ser Ala Ser Arg Asn Met Ser Ile Ile Asp Ala Phe 610 615 620 Lys Ser Thr Arg Gln Gln Pro Ser Arg Asn Val Thr Thr Lys Asn Tyr 625 630 635 640 Ser Glu Val Ile Glu Val Asp Glu Ser Asp Val Glu Glu Asp Ile Phe 645 650 655 Pro Thr Thr Ser Lys Thr Asp Gln Arg Trp Ser Ser Thr Ser Ser Ser 660 665 670 Lys Ile Met Ser Gln Ser Gln Val Ser Lys Gly Val Asp Phe Glu Ser 675 680 685 Ser Glu Asp Asp Asp Asp Asp Pro Phe Met Asn Thr Ser Ser Leu Arg 690 695 700 Arg Asn Arg Arg 705 <210> 126 <211> 1312 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 126 Met Ser Arg Ile Glu Lys Met Ser Ile Leu Gly Val Arg Ser Phe Gly 1 5 10 15 Ile Glu Asp Lys Asp Lys Gln Ile Ile Thr Phe Phe Ser Pro Leu Thr 20 25 30 Ile Leu Val Gly Pro Asn Gly Ala Gly Lys Thr Thr Ile Ile Glu Cys 35 40 45 Leu Lys Tyr Ile Cys Thr Gly Asp Phe Pro Pro Gly Thr Lys Gly Asn 50 55 60 Thr Phe Val His Asp Pro Lys Val Ala Gln Glu Thr Asp Val Arg Ala 65 70 75 80 Gln Ile Arg Leu Gln Phe Arg Asp Val Asn Gly Glu Leu Ile Ala Val 85 90 95 Gln Arg Ser Met Val Cys Thr Gln Lys Ser Lys Lys Thr Glu Phe Lys 100 105 110 Thr Leu Glu Gly Val Ile Thr Arg Thr Lys His Gly Glu Lys Val Ser 115 120 125 Leu Ser Ser Lys Cys Ala Glu Ile Asp Arg Glu Met Ile Ser Ser Leu 130 135 140 Gly Val Ser Lys Ala Val Leu Asn Asn Val Ile Phe Cys His Gln Glu 145 150 155 160 Asp Ser Asn Trp Pro Leu Ser Glu Gly Lys Ala Leu Lys Gln Lys Phe 165 170 175 Asp Glu Ile Phe Ser Ala Thr Arg Tyr Ile Lys Ala Leu Glu Thr Leu 180 185 190 Arg Gln Val Arg Gln Thr Gln Gly Gln Lys Val Lys Glu Tyr Gln Met 195 200 205 Glu Leu Lys Tyr Leu Lys Gln Tyr Lys Glu Lys Ala Cys Glu Ile Arg 210 215 220 Asp Gln Ile Thr Ser Lys Glu Ala Gln Leu Thr Ser Ser Lys Glu Ile 225 230 235 240 Val Lys Ser Tyr Glu Asn Glu Leu Asp Pro Leu Lys Asn Arg Leu Lys 245 250 255 Glu Ile Glu His Asn Leu Ser Lys Ile Met Lys Leu Asp Asn Glu Ile 260 265 270 Lys Ala Leu Asp Ser Arg Lys Lys Gln Met Glu Lys Asp Asn Ser Glu 275 280 285 Leu Glu Glu Lys Met Glu Lys Val Phe Gln Gly Thr Asp Glu Gln Leu 290 295 300 Asn Asp Leu Tyr His Asn His Gln Arg Thr Val Arg Glu Lys Glu Arg 305 310 315 320 Lys Leu Val Asp Cys His Arg Glu Leu Glu Lys Leu Asn Lys Glu Ser 325 330 335 Arg Leu Leu Asn Gln Glu Lys Ser Glu Leu Leu Val Glu Gln Gly Arg 340 345 350 Leu Gln Leu Gln Ala Asp Arg His Gln Glu His Ile Arg Ala Arg Asp 355 360 365 Ser Leu Ile Gln Ser Leu Ala Thr Gln Leu Glu Leu Asp Gly Phe Glu 370 375 380 Arg Gly Pro Phe Ser Glu Arg Gln Ile Lys Asn Phe His Lys Leu Val 385 390 395 400 Arg Glu Arg Gln Glu Gly Glu Ala Lys Thr Ala Asn Gln Leu Met Asn 405 410 415 Asp Phe Ala Glu Lys Glu Thr Leu Lys Gln Lys Gln Ile Asp Glu Ile 420 425 430 Arg Asp Lys Lys Thr Gly Leu Gly Arg Ile Ile Glu Leu Lys Ser Glu 435 440 445 Ile Leu Ser Lys Lys Gln Asn Glu Leu Lys Asn Val Lys Tyr Glu Leu 450 455 460 Gln Gln Leu Glu Gly Ser Ser Asp Arg Ile Leu Glu Leu Asp Gln Glu 465 470 475 480 Leu Ile Lys Ala Glu Arg Glu Leu Ser Lys Ala Glu Lys Asn Ser Asn 485 490 495 Val Glu Thr Leu Lys Met Glu Val Ile Ser Leu Gln Asn Glu Lys Ala 500 505 510 Asp Leu Asp Arg Thr Leu Arg Lys Leu Asp Gln Glu Met Glu Gln Leu 515 520 525 Asn His His Thr Thr Thr Arg Thr Gln Met Glu Met Leu Thr Lys Asp 530 535 540 Lys Ala Asp Lys Asp Glu Gln Ile Arg Lys Ile Lys Ser Arg His Ser 545 550 555 560 Asp Glu Leu Thr Ser Leu Leu Gly Tyr Phe Pro Asn Lys Lys Gln Leu 565 570 575 Glu Asp Trp Leu His Ser Lys Ser Lys Glu Ile Asn Gln Thr Arg Asp 580 585 590 Arg Leu Ala Lys Leu Asn Lys Glu Leu Ala Ser Ser Glu Gln Asn Lys 595 600 605 Asn His Ile Asn Asn Glu Leu Lys Arg Lys Glu Glu Gln Leu Ser Ser 610 615 620 Tyr Glu Asp Lys Leu Phe Asp Val Cys Gly Ser Gln Asp Phe Glu Ser 625 630 635 640 Asp Leu Asp Arg Leu Lys Glu Glu Ile Glu Lys Ser Ser Lys Gln Arg 645 650 655 Ala Met Leu Ala Gly Ala Thr Ala Val Tyr Ser Gln Phe Ile Thr Gln 660 665 670 Leu Thr Asp Glu Asn Gln Ser Cys Cys Pro Val Cys Gln Arg Val Phe 675 680 685 Gln Thr Glu Ala Glu Leu Gln Glu Val Ile Ser Asp Leu Gln Ser Lys 690 695 700 Leu Arg Leu Ala Pro Asp Lys Leu Lys Ser Thr Glu Ser Glu Leu Lys 705 710 715 720 Lys Lys Glu Lys Arg Arg Asp Glu Met Leu Gly Leu Val Pro Met Arg 725 730 735 Gln Ser Ile Ile Asp Leu Lys Glu Lys Glu Ile Pro Glu Leu Arg Asn 740 745 750 Lys Leu Gln Asn Val Asn Arg Asp Ile Gln Arg Leu Lys Asn Asp Ile 755 760 765 Glu Glu Gln Glu Thr Leu Leu Gly Thr Ile Met Pro Glu Glu Glu Ser 770 775 780 Ala Lys Val Cys Leu Thr Asp Val Thr Ile Met Glu Arg Phe Gln Met 785 790 795 800 Glu Leu Lys Asp Val Glu Arg Lys Ile Ala Gln Gln Ala Ala Lys Leu 805 810 815 Gln Gly Ile Asp Leu Asp Arg Thr Val Gln Gln Val Asn Gln Glu Lys 820 825 830 Gln Glu Lys Gln His Lys Leu Asp Thr Val Ser Ser Lys Ile Glu Leu 835 840 845 Asn Arg Lys Leu Ile Gln Asp Gln Gln Glu Gln Ile Gln His Leu Lys 850 855 860 Ser Thr Thr Asn Glu Leu Lys Ser Glu Lys Leu Gln Ile Ser Thr Asn 865 870 875 880 Leu Gln Arg Arg Gln Gln Leu Glu Glu Gln Thr Val Glu Leu Ser Thr 885 890 895 Glu Val Gln Ser Leu Tyr Arg Glu Ile Lys Asp Ala Lys Glu Gln Val 900 905 910 Ser Pro Leu Glu Thr Thr Leu Glu Lys Phe Gln Gln Glu Lys Glu Glu 915 920 925 Leu Ile Asn Lys Lys Asn Thr Ser Asn Lys Ile Ala Gln Asp Lys Leu 930 935 940 Asn Asp Ile Lys Glu Lys Val Lys Asn Ile His Gly Tyr Met Lys Asp 945 950 955 960 Ile Glu Asn Tyr Ile Gln Asp Gly Lys Asp Asp Tyr Lys Lys Gln Lys 965 970 975 Glu Thr Glu Leu Asn Lys Val Ile Ala Gln Leu Ser Glu Cys Glu Lys 980 985 990 His Lys Glu Lys Ile Asn Glu Asp Met Arg Leu Met Arg Gln Asp Ile 995 1000 1005 Asp Thr Gln Lys Ile Gln Glu Arg Trp Leu Gln Asp Asn Leu Thr 1010 1015 1020 Leu Arg Lys Arg Asn Glu Glu Leu Lys Glu Val Glu Glu Glu Arg 1025 1030 1035 Lys Gln His Leu Lys Glu Met Gly Gln Met Gln Val Leu Gln Met 1040 1045 1050 Lys Ser Glu His Gln Lys Leu Glu Glu Asn Ile Asp Asn Ile Lys 1055 1060 1065 Arg Asn His Asn Leu Ala Leu Gly Arg Gln Lys Gly Tyr Glu Glu 1070 1075 1080 Glu Ile Ile His Phe Lys Lys Glu Leu Arg Glu Pro Gln Phe Arg 1085 1090 1095 Asp Ala Glu Glu Lys Tyr Arg Glu Met Met Ile Val Met Arg Thr 1100 1105 1110 Thr Glu Leu Val Asn Lys Asp Leu Asp Ile Tyr Tyr Lys Thr Leu 1115 1120 1125 Asp Gln Ala Ile Met Lys Phe His Ser Met Lys Met Glu Glu Ile 1130 1135 1140 Asn Lys Ile Ile Arg Asp Leu Trp Arg Ser Thr Tyr Arg Gly Gln 1145 1150 1155 Asp Ile Glu Tyr Ile Glu Ile Arg Ser Asp Ala Asp Glu Asn Val 1160 1165 1170 Ser Ala Ser Asp Lys Arg Arg Asn Tyr Asn Tyr Arg Val Val Met 1175 1180 1185 Leu Lys Gly Asp Thr Ala Leu Asp Met Arg Gly Arg Cys Ser Ala 1190 1195 1200 Gly Gln Lys Val Leu Ala Ser Leu Ile Ile Arg Leu Ala Leu Ala 1205 1210 1215 Glu Thr Phe Cys Leu Asn Cys Gly Ile Ile Ala Leu Asp Glu Pro 1220 1225 1230 Thr Thr Asn Leu Asp Arg Glu Asn Ile Glu Ser Leu Ala His Ala 1235 1240 1245 Leu Val Glu Ile Ile Lys Ser Arg Ser Gln Gln Arg Asn Phe Gln 1250 1255 1260 Leu Leu Val Ile Thr His Asp Glu Asp Phe Val Glu Leu Leu Gly 1265 1270 1275 Arg Ser Glu Tyr Val Glu Lys Phe Tyr Arg Ile Lys Lys Asn Ile 1280 1285 1290 Asp Gln Cys Ser Glu Ile Val Lys Cys Ser Val Ser Ser Leu Gly 1295 1300 1305 Phe Asn Val His 1310 <210> 127 <211> 754 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 127 Met Trp Lys Leu Leu Pro Ala Ala Gly Pro Ala Gly Gly Glu Pro Tyr 1 5 10 15 Arg Leu Leu Thr Gly Val Glu Tyr Val Val Gly Arg Lys Asn Cys Ala 20 25 30 Ile Leu Ile Glu Asn Asp Gln Ser Ile Ser Arg Asn His Ala Val Leu 35 40 45 Thr Ala Asn Phe Ser Val Thr Asn Leu Ser Gln Thr Asp Glu Ile Pro 50 55 60 Val Leu Thr Leu Lys Asp Asn Ser Lys Tyr Gly Thr Phe Val Asn Glu 65 70 75 80 Glu Lys Met Gln Asn Gly Phe Ser Arg Thr Leu Lys Ser Gly Asp Gly 85 90 95 Ile Thr Phe Gly Val Phe Gly Ser Lys Phe Arg Ile Glu Tyr Glu Pro 100 105 110 Leu Val Ala Cys Ser Ser Cys Leu Asp Val Ser Gly Lys Thr Ala Leu 115 120 125 Asn Gln Ala Ile Leu Gln Leu Gly Gly Phe Thr Val Asn Asn Trp Thr 130 135 140 Glu Glu Cys Thr His Leu Val Met Val Ser Val Lys Val Thr Ile Lys 145 150 155 160 Thr Ile Cys Ala Leu Ile Cys Gly Arg Pro Ile Val Lys Pro Glu Tyr 165 170 175 Phe Thr Glu Phe Leu Lys Ala Val Glu Ser Lys Lys Gln Pro Pro Gln 180 185 190 Ile Glu Ser Phe Tyr Pro Pro Leu Asp Glu Pro Ser Ile Gly Ser Lys 195 200 205 Asn Val Asp Leu Ser Gly Arg Gln Glu Arg Lys Gln Ile Phe Lys Gly 210 215 220 Lys Thr Phe Ile Phe Leu Asn Ala Lys Gln His Lys Lys Leu Ser Ser 225 230 235 240 Ala Val Val Phe Gly Gly Gly Glu Ala Arg Leu Ile Thr Glu Glu Asn 245 250 255 Glu Glu Glu His Asn Phe Phe Leu Ala Pro Gly Thr Cys Val Val Asp 260 265 270 Thr Gly Ile Thr Asn Ser Gln Thr Leu Ile Pro Asp Cys Gln Lys Lys 275 280 285 Trp Ile Gln Ser Ile Met Asp Met Leu Gln Arg Gln Gly Leu Arg Pro 290 295 300 Ile Pro Glu Ala Glu Ile Gly Leu Ala Val Ile Phe Met Thr Thr Lys 305 310 315 320 Asn Tyr Cys Asp Pro Gln Gly His Pro Ser Thr Gly Leu Lys Thr Thr 325 330 335 Thr Pro Gly Pro Ser Leu Ser Gln Gly Val Ser Val Asp Glu Lys Leu 340 345 350 Met Pro Ser Ala Pro Val Asn Thr Thr Thr Tyr Val Ala Asp Thr Glu 355 360 365 Ser Glu Gln Ala Asp Thr Trp Asp Leu Ser Glu Arg Pro Lys Glu Ile 370 375 380 Lys Val Ser Lys Met Glu Gln Lys Phe Arg Met Leu Ser Gln Asp Ala 385 390 395 400 Pro Thr Val Lys Glu Ser Cys Lys Thr Ser Ser Asn Asn Asn Ser Met 405 410 415 Val Ser Asn Thr Leu Ala Lys Met Arg Ile Pro Asn Tyr Gln Leu Ser 420 425 430 Pro Thr Lys Leu Pro Ser Ile Asn Lys Ser Lys Asp Arg Ala Ser Gln 435 440 445 Gln Gln Gln Thr Asn Ser Ile Arg Asn Tyr Phe Gln Pro Ser Thr Lys 450 455 460 Lys Arg Glu Arg Asp Glu Glu Asn Gln Glu Met Ser Ser Cys Lys Ser 465 470 475 480 Ala Arg Ile Glu Thr Ser Cys Ser Leu Leu Glu Gln Thr Gln Pro Ala 485 490 495 Thr Pro Ser Leu Trp Lys Asn Lys Glu Gln His Leu Ser Glu Asn Glu 500 505 510 Pro Val Asp Thr Asn Ser Asp Asn Asn Leu Phe Thr Asp Thr Asp Leu 515 520 525 Lys Ser Ile Val Lys Asn Ser Ala Ser Lys Ser His Ala Ala Glu Lys 530 535 540 Leu Arg Ser Asn Lys Lys Arg Glu Met Asp Asp Val Ala Ile Glu Asp 545 550 555 560 Glu Val Leu Glu Gln Leu Phe Lys Asp Thr Lys Pro Glu Leu Glu Ile 565 570 575 Asp Val Lys Val Gln Lys Gln Glu Glu Asp Val Asn Val Arg Lys Arg 580 585 590 Pro Arg Met Asp Ile Glu Thr Asn Asp Thr Phe Ser Asp Glu Ala Val 595 600 605 Pro Glu Ser Ser Lys Ile Ser Gln Glu Asn Glu Ile Gly Lys Lys Arg 610 615 620 Glu Leu Lys Glu Asp Ser Leu Trp Ser Ala Lys Glu Ile Ser Asn Asn 625 630 635 640 Asp Lys Leu Gln Asp Asp Ser Glu Met Leu Pro Lys Lys Leu Leu Leu 645 650 655 Thr Glu Phe Arg Ser Leu Val Ile Lys Asn Ser Thr Ser Arg Asn Pro 660 665 670 Ser Gly Ile Asn Asp Asp Tyr Gly Gln Leu Lys Asn Phe Lys Lys Phe 675 680 685 Lys Lys Val Thr Tyr Pro Gly Ala Gly Lys Leu Pro His Ile Ile Gly 690 695 700 Gly Ser Asp Leu Ile Ala His His Ala Arg Lys Asn Thr Glu Leu Glu 705 710 715 720 Glu Trp Leu Arg Gln Glu Met Glu Val Gln Asn Gln His Ala Lys Glu 725 730 735 Glu Ser Leu Ala Asp Asp Leu Phe Arg Tyr Asn Pro Tyr Leu Lys Arg 740 745 750 Arg Arg <210> 128 <211> 1432 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 128 Met Ser Glu Lys Lys Leu Glu Thr Thr Ala Gln Gln Arg Lys Cys Pro 1 5 10 15 Glu Trp Met Asn Val Gln Asn Lys Arg Cys Ala Val Glu Glu Arg Lys 20 25 30 Ala Cys Val Arg Lys Ser Val Phe Glu Asp Asp Leu Pro Phe Leu Glu 35 40 45 Phe Thr Gly Ser Ile Val Tyr Ser Tyr Asp Ala Ser Asp Cys Ser Phe 50 55 60 Leu Ser Glu Asp Ile Ser Met Ser Leu Ser Asp Gly Asp Val Val Gly 65 70 75 80 Phe Asp Met Glu Trp Pro Pro Leu Tyr Asn Arg Gly Lys Leu Gly Lys 85 90 95 Val Ala Leu Ile Gln Leu Cys Val Ser Glu Ser Lys Cys Tyr Leu Phe 100 105 110 His Val Ser Ser Met Ser Val Phe Pro Gln Gly Leu Lys Met Leu Leu 115 120 125 Glu Asn Lys Ala Val Lys Lys Ala Gly Val Gly Ile Glu Gly Asp Gln 130 135 140 Trp Lys Leu Leu Arg Asp Phe Asp Ile Lys Leu Lys Asn Phe Val Glu 145 150 155 160 Leu Thr Asp Val Ala Asn Lys Lys Leu Lys Cys Thr Glu Thr Trp Ser 165 170 175 Leu Asn Ser Leu Val Lys His Leu Leu Gly Lys Gln Leu Leu Lys Asp 180 185 190 Lys Ser Ile Arg Cys Ser Asn Trp Ser Lys Phe Pro Leu Thr Glu Asp 195 200 205 Gln Lys Leu Tyr Ala Ala Thr Asp Ala Tyr Ala Gly Phe Ile Ile Tyr 210 215 220 Arg Asn Leu Glu Ile Leu Asp Asp Thr Val Gln Arg Phe Ala Ile Asn 225 230 235 240 Lys Glu Glu Glu Ile Leu Leu Ser Asp Met Asn Lys Gln Leu Thr Ser 245 250 255 Ile Ser Glu Glu Val Met Asp Leu Ala Lys His Leu Pro His Ala Phe 260 265 270 Ser Lys Leu Glu Asn Pro Arg Arg Val Ser Ile Leu Leu Lys Asp Ile 275 280 285 Ser Glu Asn Leu Tyr Ser Leu Arg Arg Met Ile Ile Gly Ser Thr Asn 290 295 300 Ile Glu Thr Glu Leu Arg Pro Ser Asn Asn Leu Asn Leu Leu Ser Phe 305 310 315 320 Glu Asp Ser Thr Thr Gly Gly Val Gln Gln Lys Gln Ile Arg Glu His 325 330 335 Glu Val Leu Ile His Val Glu Asp Glu Thr Trp Asp Pro Thr Leu Asp 340 345 350 His Leu Ala Lys His Asp Gly Glu Asp Val Leu Gly Asn Lys Val Glu 355 360 365 Arg Lys Glu Asp Gly Phe Glu Asp Gly Val Glu Asp Asn Lys Leu Lys 370 375 380 Glu Asn Met Glu Arg Ala Cys Leu Met Ser Leu Asp Ile Thr Glu His 385 390 395 400 Glu Leu Gln Ile Leu Glu Gln Gln Ser Gln Glu Glu Tyr Leu Ser Asp 405 410 415 Ile Ala Tyr Lys Ser Thr Glu His Leu Ser Pro Asn Asp Asn Glu Asn 420 425 430 Asp Thr Ser Tyr Val Ile Glu Ser Asp Glu Asp Leu Glu Met Glu Met 435 440 445 Leu Lys His Leu Ser Pro Asn Asp Asn Glu Asn Asp Thr Ser Tyr Val 450 455 460 Ile Glu Ser Asp Glu Asp Leu Glu Met Glu Met Leu Lys Ser Leu Glu 465 470 475 480 Asn Leu Asn Ser Gly Thr Val Glu Pro Thr His Ser Lys Cys Leu Lys 485 490 495 Met Glu Arg Asn Leu Gly Leu Pro Thr Lys Glu Glu Glu Glu Asp Asp 500 505 510 Glu Asn Glu Ala Asn Glu Gly Glu Glu Asp Asp Asp Lys Asp Phe Leu 515 520 525 Trp Pro Ala Pro Asn Glu Glu Gln Val Thr Cys Leu Lys Met Tyr Phe 530 535 540 Gly His Ser Ser Phe Lys Pro Val Gln Trp Lys Val Ile His Ser Val 545 550 555 560 Leu Glu Glu Arg Arg Asp Asn Val Ala Val Met Ala Thr Gly Tyr Gly 565 570 575 Lys Ser Leu Cys Phe Gln Tyr Pro Pro Val Tyr Val Gly Lys Ile Gly 580 585 590 Leu Val Ile Ser Pro Leu Ile Ser Leu Met Glu Asp Gln Val Leu Gln 595 600 605 Leu Lys Met Ser Asn Ile Pro Ala Cys Phe Leu Gly Ser Ala Gln Ser 610 615 620 Glu Asn Val Leu Thr Asp Ile Lys Leu Gly Lys Tyr Arg Ile Val Tyr 625 630 635 640 Val Thr Pro Glu Tyr Cys Ser Gly Asn Met Gly Leu Leu Gln Gln Leu 645 650 655 Glu Ala Asp Ile Gly Ile Thr Leu Ile Ala Val Asp Glu Ala His Cys 660 665 670 Ile Ser Glu Trp Gly His Asp Phe Arg Asp Ser Phe Arg Lys Leu Gly 675 680 685 Ser Leu Lys Thr Ala Leu Pro Met Val Pro Ile Val Ala Leu Thr Ala 690 695 700 Thr Ala Ser Ser Ser Ile Arg Glu Asp Ile Val Arg Cys Leu Asn Leu 705 710 715 720 Arg Asn Pro Gln Ile Thr Cys Thr Gly Phe Asp Arg Pro Asn Leu Tyr 725 730 735 Leu Glu Val Arg Arg Lys Thr Gly Asn Ile Leu Gln Asp Leu Gln Pro 740 745 750 Phe Leu Val Lys Thr Ser Ser His Trp Glu Phe Glu Gly Pro Thr Ile 755 760 765 Ile Tyr Cys Pro Ser Arg Lys Met Thr Gln Gln Val Thr Gly Glu Leu 770 775 780 Arg Lys Leu Asn Leu Ser Cys Gly Thr Tyr His Ala Gly Met Ser Phe 785 790 795 800 Ser Thr Arg Lys Asp Ile His His Arg Phe Val Arg Asp Glu Ile Gln 805 810 815 Cys Val Ile Ala Thr Ile Ala Phe Gly Met Gly Ile Asn Lys Ala Asp 820 825 830 Ile Arg Gln Val Ile His Tyr Gly Ala Pro Lys Asp Met Glu Ser Tyr 835 840 845 Tyr Gln Glu Ile Gly Arg Ala Gly Arg Asp Gly Leu Gln Ser Ser Cys 850 855 860 His Val Leu Trp Ala Pro Ala Asp Ile Asn Leu Asn Arg His Leu Leu 865 870 875 880 Thr Glu Ile Arg Asn Glu Lys Phe Arg Leu Tyr Lys Leu Lys Met Met 885 890 895 Ala Lys Met Glu Lys Tyr Leu His Ser Ser Arg Cys Arg Arg Gln Ile 900 905 910 Ile Leu Ser His Phe Glu Asp Lys Gln Val Gln Lys Ala Ser Leu Gly 915 920 925 Ile Met Gly Thr Glu Lys Cys Cys Asp Asn Cys Arg Ser Arg Leu Asp 930 935 940 His Cys Tyr Ser Met Asp Asp Ser Glu Asp Thr Ser Trp Asp Phe Gly 945 950 955 960 Pro Gln Ala Phe Lys Leu Leu Ser Ala Val Asp Ile Leu Gly Glu Lys 965 970 975 Phe Gly Ile Gly Leu Pro Ile Leu Phe Leu Arg Gly Ser Asn Ser Gln 980 985 990 Arg Leu Ala Asp Gln Tyr Arg Arg His Ser Leu Phe Gly Thr Gly Lys 995 1000 1005 Asp Gln Thr Glu Ser Trp Trp Lys Ala Phe Ser Arg Gln Leu Ile 1010 1015 1020 Thr Glu Gly Phe Leu Val Glu Val Ser Arg Tyr Asn Lys Phe Met 1025 1030 1035 Lys Ile Cys Ala Leu Thr Lys Lys Gly Arg Asn Trp Leu His Lys 1040 1045 1050 Ala Asn Thr Glu Ser Gln Ser Leu Ile Leu Gln Ala Asn Glu Glu 1055 1060 1065 Leu Cys Pro Lys Lys Leu Leu Leu Pro Ser Ser Lys Thr Val Ser 1070 1075 1080 Ser Gly Thr Lys Glu His Cys Tyr Asn Gln Val Pro Val Glu Leu 1085 1090 1095 Ser Thr Glu Lys Lys Ser Asn Leu Glu Lys Leu Tyr Ser Tyr Lys 1100 1105 1110 Pro Cys Asp Lys Ile Ser Ser Gly Ser Asn Ile Ser Lys Lys Ser 1115 1120 1125 Ile Met Val Gln Ser Pro Glu Lys Ala Tyr Ser Ser Ser Gln Pro 1130 1135 1140 Val Ile Ser Ala Gln Glu Gln Glu Thr Gln Ile Val Leu Tyr Gly 1145 1150 1155 Lys Leu Val Glu Ala Arg Gln Lys His Ala Asn Lys Met Asp Val 1160 1165 1170 Pro Pro Ala Ile Leu Ala Thr Asn Lys Ile Leu Val Asp Met Ala 1175 1180 1185 Lys Met Arg Pro Thr Thr Val Glu Asn Val Lys Arg Ile Asp Gly 1190 1195 1200 Val Ser Glu Gly Lys Ala Ala Met Leu Ala Pro Leu Leu Glu Val 1205 1210 1215 Ile Lys His Phe Cys Gln Thr Asn Ser Val Gln Thr Asp Leu Phe 1220 1225 1230 Ser Ser Thr Lys Pro Gln Glu Glu Gln Lys Thr Ser Leu Val Ala 1235 1240 1245 Lys Asn Lys Ile Cys Thr Leu Ser Gln Ser Met Ala Ile Thr Tyr 1250 1255 1260 Ser Leu Phe Gln Glu Lys Lys Met Pro Leu Lys Ser Ile Ala Glu 1265 1270 1275 Ser Arg Ile Leu Pro Leu Met Thr Ile Gly Met His Leu Ser Gln 1280 1285 1290 Ala Val Lys Ala Gly Cys Pro Leu Asp Leu Glu Arg Ala Gly Leu 1295 1300 1305 Thr Pro Glu Val Gln Lys Ile Ile Ala Asp Val Ile Arg Asn Pro 1310 1315 1320 Pro Val Asn Ser Asp Met Ser Lys Ile Ser Leu Ile Arg Met Leu 1325 1330 1335 Val Pro Glu Asn Ile Asp Thr Tyr Leu Ile His Met Ala Ile Glu 1340 1345 1350 Ile Leu Lys His Gly Pro Asp Ser Gly Leu Gln Pro Ser Cys Asp 1355 1360 1365 Val Asn Lys Arg Arg Cys Phe Pro Gly Ser Glu Glu Ile Cys Ser 1370 1375 1380 Ser Ser Lys Arg Ser Lys Glu Glu Val Gly Ile Asn Thr Glu Thr 1385 1390 1395 Ser Ser Ala Glu Arg Lys Arg Arg Leu Pro Val Trp Phe Ala Lys 1400 1405 1410 Gly Ser Asp Thr Ser Lys Lys Leu Met Asp Lys Thr Lys Arg Gly 1415 1420 1425 Gly Leu Phe Ser 1430 <210> 129 <211> 1417 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 129 Met Ala Ala Val Pro Gln Asn Asn Leu Gln Glu Gln Leu Glu Arg His 1 5 10 15 Ser Ala Arg Thr Leu Asn Asn Lys Leu Ser Leu Ser Lys Pro Lys Phe 20 25 30 Ser Gly Phe Thr Phe Lys Lys Lys Thr Ser Ser Asp Asn Asn Val Ser 35 40 45 Val Thr Asn Val Ser Val Ala Lys Thr Pro Val Leu Arg Asn Lys Asp 50 55 60 Val Asn Val Thr Glu Asp Phe Ser Phe Ser Glu Pro Leu Pro Asn Thr 65 70 75 80 Thr Asn Gln Gln Arg Val Lys Asp Phe Phe Lys Asn Ala Pro Ala Gly 85 90 95 Gln Glu Thr Gln Arg Gly Gly Ser Lys Ser Leu Leu Pro Asp Phe Leu 100 105 110 Gln Thr Pro Lys Glu Val Val Cys Thr Thr Gln Asn Thr Pro Thr Val 115 120 125 Lys Lys Ser Arg Asp Thr Ala Leu Lys Lys Leu Glu Phe Ser Ser Ser 130 135 140 Pro Asp Ser Leu Ser Thr Ile Asn Asp Trp Asp Asp Met Asp Asp Phe 145 150 155 160 Asp Thr Ser Glu Thr Ser Lys Ser Phe Val Thr Pro Pro Gln Ser His 165 170 175 Phe Val Arg Val Ser Thr Ala Gln Lys Ser Lys Lys Gly Lys Arg Asn 180 185 190 Phe Phe Lys Ala Gln Leu Tyr Thr Thr Asn Thr Val Lys Thr Asp Leu 195 200 205 Pro Pro Pro Ser Ser Glu Ser Glu Gln Ile Asp Leu Thr Glu Glu Gln 210 215 220 Lys Asp Asp Ser Glu Trp Leu Ser Ser Asp Val Ile Cys Ile Asp Asp 225 230 235 240 Gly Pro Ile Ala Glu Val His Ile Asn Glu Asp Ala Gln Glu Ser Asp 245 250 255 Ser Leu Lys Thr His Leu Glu Asp Glu Arg Asp Asn Ser Glu Lys Lys 260 265 270 Lys Asn Leu Glu Glu Ala Glu Leu His Ser Thr Glu Lys Val Pro Cys 275 280 285 Ile Glu Phe Asp Asp Asp Asp Tyr Asp Thr Asp Phe Val Pro Pro Ser 290 295 300 Pro Glu Glu Ile Ile Ser Ala Ser Ser Ser Ser Ser Lys Cys Leu Ser 305 310 315 320 Thr Leu Lys Asp Leu Asp Thr Ser Asp Arg Lys Glu Asp Val Leu Ser 325 330 335 Thr Ser Lys Asp Leu Leu Ser Lys Pro Glu Lys Met Ser Met Gln Glu 340 345 350 Leu Asn Pro Glu Thr Ser Thr Asp Cys Asp Ala Arg Gln Ile Ser Leu 355 360 365 Gln Gln Gln Leu Ile His Val Met Glu His Ile Cys Lys Leu Ile Asp 370 375 380 Thr Ile Pro Asp Asp Lys Leu Lys Leu Leu Asp Cys Gly Asn Glu Leu 385 390 395 400 Leu Gln Gln Arg Asn Ile Arg Arg Lys Leu Leu Thr Glu Val Asp Phe 405 410 415 Asn Lys Ser Asp Ala Ser Leu Leu Gly Ser Leu Trp Arg Tyr Arg Pro 420 425 430 Asp Ser Leu Asp Gly Pro Met Glu Gly Asp Ser Cys Pro Thr Gly Asn 435 440 445 Ser Met Lys Glu Leu Asn Phe Ser His Leu Pro Ser Asn Ser Val Ser 450 455 460 Pro Gly Asp Cys Leu Leu Thr Thr Thr Leu Gly Lys Thr Gly Phe Ser 465 470 475 480 Ala Thr Arg Lys Asn Leu Phe Glu Arg Pro Leu Phe Asn Thr His Leu 485 490 495 Gln Lys Ser Phe Val Ser Ser Asn Trp Ala Glu Thr Pro Arg Leu Gly 500 505 510 Lys Lys Asn Glu Ser Ser Tyr Phe Pro Gly Asn Val Leu Thr Ser Thr 515 520 525 Ala Val Lys Asp Gln Asn Lys His Thr Ala Ser Ile Asn Asp Leu Glu 530 535 540 Arg Glu Thr Gln Pro Ser Tyr Asp Ile Asp Asn Phe Asp Ile Asp Asp 545 550 555 560 Phe Asp Asp Asp Asp Asp Trp Glu Asp Ile Met His Asn Leu Ala Ala 565 570 575 Ser Lys Ser Ser Thr Ala Ala Tyr Gln Pro Ile Lys Glu Gly Arg Pro 580 585 590 Ile Lys Ser Val Ser Glu Arg Leu Ser Ser Ala Lys Thr Asp Cys Leu 595 600 605 Pro Val Ser Ser Thr Ala Gln Asn Ile Asn Phe Ser Glu Ser Ile Gln 610 615 620 Asn Tyr Thr Asp Lys Ser Ala Gln Asn Leu Ala Ser Arg Asn Leu Lys 625 630 635 640 His Glu Arg Phe Gln Ser Leu Ser Phe Pro His Thr Lys Glu Met Met 645 650 655 Lys Ile Phe His Lys Lys Phe Gly Leu His Asn Phe Arg Thr Asn Gln 660 665 670 Leu Glu Ala Ile Asn Ala Ala Leu Leu Gly Glu Asp Cys Phe Ile Leu 675 680 685 Met Pro Thr Gly Gly Gly Lys Ser Leu Cys Tyr Gln Leu Pro Ala Cys 690 695 700 Val Ser Pro Gly Val Thr Val Val Ile Ser Pro Leu Arg Ser Leu Ile 705 710 715 720 Val Asp Gln Val Gln Lys Leu Thr Ser Leu Asp Ile Pro Ala Thr Tyr 725 730 735 Leu Thr Gly Asp Lys Thr Asp Ser Glu Ala Thr Asn Ile Tyr Leu Gln 740 745 750 Leu Ser Lys Lys Asp Pro Ile Ile Lys Leu Leu Tyr Val Thr Pro Glu 755 760 765 Lys Ile Cys Ala Ser Asn Arg Leu Ile Ser Thr Leu Glu Asn Leu Tyr 770 775 780 Glu Arg Lys Leu Leu Ala Arg Phe Val Ile Asp Glu Ala His Cys Val 785 790 795 800 Ser Gln Trp Gly His Asp Phe Arg Gln Asp Tyr Lys Arg Met Asn Met 805 810 815 Leu Arg Gln Lys Phe Pro Ser Val Pro Val Met Ala Leu Thr Ala Thr 820 825 830 Ala Asn Pro Arg Val Gln Lys Asp Ile Leu Thr Gln Leu Lys Ile Leu 835 840 845 Arg Pro Gln Val Phe Ser Met Ser Phe Asn Arg His Asn Leu Lys Tyr 850 855 860 Tyr Val Leu Pro Lys Lys Pro Lys Lys Val Ala Phe Asp Cys Leu Glu 865 870 875 880 Trp Ile Arg Lys His His Pro Tyr Asp Ser Gly Ile Ile Tyr Cys Leu 885 890 895 Ser Arg Arg Glu Cys Asp Thr Met Ala Asp Thr Leu Gln Arg Asp Gly 900 905 910 Leu Ala Ala Leu Ala Tyr His Ala Gly Leu Ser Asp Ser Ala Arg Asp 915 920 925 Glu Val Gln Gln Lys Trp Ile Asn Gln Asp Gly Cys Gln Val Ile Cys 930 935 940 Ala Thr Ile Ala Phe Gly Met Gly Ile Asp Lys Pro Asp Val Arg Phe 945 950 955 960 Val Ile His Ala Ser Leu Pro Lys Ser Val Glu Gly Tyr Tyr Gln Glu 965 970 975 Ser Gly Arg Ala Gly Arg Asp Gly Glu Ile Ser His Cys Leu Leu Phe 980 985 990 Tyr Thr Tyr His Asp Val Thr Arg Leu Lys Arg Leu Ile Met Met Glu 995 1000 1005 Lys Asp Gly Asn His His Thr Arg Glu Thr His Phe Asn Asn Leu 1010 1015 1020 Tyr Ser Met Val His Tyr Cys Glu Asn Ile Thr Glu Cys Arg Arg 1025 1030 1035 Ile Gln Leu Leu Ala Tyr Phe Gly Glu Asn Gly Phe Asn Pro Asp 1040 1045 1050 Phe Cys Lys Lys His Pro Asp Val Ser Cys Asp Asn Cys Cys Lys 1055 1060 1065 Thr Lys Asp Tyr Lys Thr Arg Asp Val Thr Asp Asp Val Lys Ser 1070 1075 1080 Ile Val Arg Phe Val Gln Glu His Ser Ser Ser Gln Gly Met Arg 1085 1090 1095 Asn Ile Lys His Val Gly Pro Ser Gly Arg Phe Thr Met Asn Met 1100 1105 1110 Leu Val Asp Ile Phe Leu Gly Ser Lys Ser Ala Lys Ile Gln Ser 1115 1120 1125 Gly Ile Phe Gly Lys Gly Ser Ala Tyr Ser Arg His Asn Ala Glu 1130 1135 1140 Arg Leu Phe Lys Lys Leu Ile Leu Asp Lys Ile Leu Asp Glu Asp 1145 1150 1155 Leu Tyr Ile Asn Ala Asn Asp Gln Ala Ile Ala Tyr Val Met Leu 1160 1165 1170 Gly Asn Lys Ala Gln Thr Val Leu Asn Gly Asn Leu Lys Val Asp 1175 1180 1185 Phe Met Glu Thr Glu Asn Ser Ser Ser Val Lys Lys Gln Lys Ala 1190 1195 1200 Leu Val Ala Lys Val Ser Gln Arg Glu Glu Met Val Lys Lys Cys 1205 1210 1215 Leu Gly Glu Leu Thr Glu Val Cys Lys Ser Leu Gly Lys Val Phe 1220 1225 1230 Gly Val His Tyr Phe Asn Ile Phe Asn Thr Val Thr Leu Lys Lys 1235 1240 1245 Leu Ala Glu Ser Leu Ser Ser Asp Pro Glu Val Leu Leu Gln Ile 1250 1255 1260 Asp Gly Val Thr Glu Asp Lys Leu Glu Lys Tyr Gly Ala Glu Val 1265 1270 1275 Ile Ser Val Leu Gln Lys Tyr Ser Glu Trp Thr Ser Pro Ala Glu 1280 1285 1290 Asp Ser Ser Pro Gly Ile Ser Leu Ser Ser Ser Arg Gly Pro Gly 1295 1300 1305 Arg Ser Ala Ala Glu Glu Leu Asp Glu Glu Ile Pro Val Ser Ser 1310 1315 1320 His Tyr Phe Ala Ser Lys Thr Arg Asn Glu Arg Lys Arg Lys Lys 1325 1330 1335 Met Pro Ala Ser Gln Arg Ser Lys Arg Arg Lys Thr Ala Ser Ser 1340 1345 1350 Gly Ser Lys Ala Lys Gly Gly Ser Ala Thr Cys Arg Lys Ile Ser 1355 1360 1365 Ser Lys Thr Lys Ser Ser Ser Ile Ile Gly Ser Ser Ser Ala Ser 1370 1375 1380 His Thr Ser Gln Ala Thr Ser Gly Ala Asn Ser Lys Leu Gly Ile 1385 1390 1395 Met Ala Pro Pro Lys Pro Ile Asn Arg Pro Phe Leu Lys Pro Ser 1400 1405 1410 Tyr Ala Phe Ser 1415 <210> 130 <211> 1208 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 130 Met Glu Arg Leu Arg Asp Val Arg Glu Arg Leu Gln Ala Trp Glu Arg 1 5 10 15 Ala Phe Arg Arg Gln Arg Gly Arg Arg Pro Ser Gln Asp Asp Val Glu 20 25 30 Ala Ala Pro Glu Glu Thr Arg Ala Leu Tyr Arg Glu Tyr Arg Thr Leu 35 40 45 Lys Arg Thr Thr Gly Gln Ala Gly Gly Gly Leu Arg Ser Ser Glu Ser 50 55 60 Leu Pro Ala Ala Ala Glu Glu Ala Pro Glu Pro Arg Cys Trp Gly Pro 65 70 75 80 His Leu Asn Arg Ala Ala Thr Lys Ser Pro Gln Pro Thr Pro Gly Arg 85 90 95 Ser Arg Gln Gly Ser Val Pro Asp Tyr Gly Gln Arg Leu Lys Ala Asn 100 105 110 Leu Lys Gly Thr Leu Gln Ala Gly Pro Ala Leu Gly Arg Arg Pro Trp 115 120 125 Pro Leu Gly Arg Ala Ser Ser Lys Ala Ser Thr Pro Lys Pro Pro Gly 130 135 140 Thr Gly Pro Val Pro Ser Phe Ala Glu Lys Val Ser Asp Glu Pro Pro 145 150 155 160 Gln Leu Pro Glu Pro Gln Pro Arg Pro Gly Arg Leu Gln His Leu Gln 165 170 175 Ala Ser Leu Ser Gln Arg Leu Gly Ser Leu Asp Pro Gly Trp Leu Gln 180 185 190 Arg Cys His Ser Glu Val Pro Asp Phe Leu Gly Ala Pro Lys Ala Cys 195 200 205 Arg Pro Asp Leu Gly Ser Glu Glu Ser Gln Leu Leu Ile Pro Gly Glu 210 215 220 Ser Ala Val Leu Gly Pro Gly Ala Gly Ser Gln Gly Pro Glu Ala Ser 225 230 235 240 Ala Phe Gln Glu Val Ser Ile Arg Val Gly Ser Pro Gln Pro Ser Ser 245 250 255 Ser Gly Gly Glu Lys Arg Arg Trp Asn Glu Glu Pro Trp Glu Ser Pro 260 265 270 Ala Gln Val Gln Gln Glu Ser Ser Gln Ala Gly Pro Pro Ser Glu Gly 275 280 285 Ala Gly Ala Val Ala Val Glu Glu Asp Pro Pro Gly Glu Pro Val Gln 290 295 300 Ala Gln Pro Pro Gln Pro Cys Ser Ser Pro Ser Asn Pro Arg Tyr His 305 310 315 320 Gly Leu Ser Pro Ser Ser Gln Ala Arg Ala Gly Lys Ala Glu Gly Thr 325 330 335 Ala Pro Leu His Ile Phe Pro Arg Leu Ala Arg His Asp Arg Gly Asn 340 345 350 Tyr Val Arg Leu Asn Met Lys Gln Lys His Tyr Val Arg Gly Arg Ala 355 360 365 Leu Arg Ser Arg Leu Leu Arg Lys Gln Ala Trp Lys Gln Lys Trp Arg 370 375 380 Lys Lys Gly Glu Cys Phe Gly Gly Gly Gly Ala Thr Val Thr Thr Lys 385 390 395 400 Glu Ser Cys Phe Leu Asn Glu Gln Phe Asp His Trp Ala Ala Gln Cys 405 410 415 Pro Arg Pro Ala Ser Glu Glu Asp Thr Asp Ala Val Gly Pro Glu Pro 420 425 430 Leu Val Pro Ser Pro Gln Pro Val Pro Glu Val Pro Ser Leu Asp Pro 435 440 445 Thr Val Leu Pro Leu Tyr Ser Leu Gly Pro Ser Gly Gln Leu Ala Glu 450 455 460 Thr Pro Ala Glu Val Phe Gln Ala Leu Glu Gln Leu Gly His Gln Ala 465 470 475 480 Phe Arg Pro Gly Gln Glu Arg Ala Val Met Arg Ile Leu Ser Gly Ile 485 490 495 Ser Thr Leu Leu Val Leu Pro Thr Gly Ala Gly Lys Ser Leu Cys Tyr 500 505 510 Gln Leu Pro Ala Leu Leu Tyr Ser Arg Arg Ser Pro Cys Leu Thr Leu 515 520 525 Val Val Ser Pro Leu Leu Ser Leu Met Asp Asp Gln Val Ser Gly Leu 530 535 540 Pro Pro Cys Leu Lys Ala Ala Cys Ile His Ser Gly Met Thr Arg Lys 545 550 555 560 Gln Arg Glu Ser Val Leu Gln Lys Ile Arg Ala Ala Gln Val His Val 565 570 575 Leu Met Leu Thr Pro Glu Ala Leu Val Gly Ala Gly Gly Leu Pro Pro 580 585 590 Ala Ala Gln Leu Pro Pro Val Ala Phe Ala Cys Ile Asp Glu Ala His 595 600 605 Cys Leu Ser Gln Trp Ser His Asn Phe Arg Pro Cys Tyr Leu Arg Val 610 615 620 Cys Lys Val Leu Arg Glu Arg Met Gly Val His Cys Phe Leu Gly Leu 625 630 635 640 Thr Ala Thr Ala Thr Arg Arg Thr Ala Ser Asp Val Ala Gln His Leu 645 650 655 Ala Val Ala Glu Glu Pro Asp Leu His Gly Pro Ala Pro Val Pro Thr 660 665 670 Asn Leu His Leu Ser Val Ser Met Asp Arg Asp Thr Asp Gln Ala Leu 675 680 685 Leu Thr Leu Leu Gln Gly Lys Arg Phe Gln Asn Leu Asp Ser Ile Ile 690 695 700 Ile Tyr Cys Asn Arg Arg Glu Asp Thr Glu Arg Ile Ala Ala Leu Leu 705 710 715 720 Arg Thr Cys Leu His Ala Ala Trp Val Pro Gly Ser Gly Gly Arg Ala 725 730 735 Pro Lys Thr Thr Ala Glu Ala Tyr His Ala Gly Met Cys Ser Arg Glu 740 745 750 Arg Arg Arg Val Gln Arg Ala Phe Met Gln Gly Gln Leu Arg Val Val 755 760 765 Val Ala Thr Val Ala Phe Gly Met Gly Leu Asp Arg Pro Asp Val Arg 770 775 780 Ala Val Leu His Leu Gly Leu Pro Pro Ser Phe Glu Ser Tyr Val Gln 785 790 795 800 Ala Val Gly Arg Ala Gly Arg Asp Gly Gln Pro Ala His Cys His Leu 805 810 815 Phe Leu Gln Pro Gln Gly Glu Asp Leu Arg Glu Leu Arg Arg His Val 820 825 830 His Ala Asp Ser Thr Asp Phe Leu Ala Val Lys Arg Leu Val Gln Arg 835 840 845 Val Phe Pro Ala Cys Thr Cys Thr Cys Thr Arg Pro Pro Ser Glu Gln 850 855 860 Glu Gly Ala Val Gly Gly Glu Arg Pro Val Pro Lys Tyr Pro Pro Gln 865 870 875 880 Glu Ala Glu Gln Leu Ser His Gln Ala Ala Pro Gly Pro Arg Arg Val 885 890 895 Cys Met Gly His Glu Arg Ala Leu Pro Ile Gln Leu Thr Val Gln Ala 900 905 910 Leu Asp Met Pro Glu Glu Ala Ile Glu Thr Leu Leu Cys Tyr Leu Glu 915 920 925 Leu His Pro His His Trp Leu Glu Leu Leu Ala Thr Thr Tyr Thr His 930 935 940 Cys Arg Leu Asn Cys Pro Gly Gly Pro Ala Gln Leu Gln Ala Leu Ala 945 950 955 960 His Arg Cys Pro Pro Leu Ala Val Cys Leu Ala Gln Gln Leu Pro Glu 965 970 975 Asp Pro Gly Gln Gly Ser Ser Ser Val Glu Phe Asp Met Val Lys Leu 980 985 990 Val Asp Ser Met Gly Trp Glu Leu Ala Ser Val Arg Arg Ala Leu Cys 995 1000 1005 Gln Leu Gln Trp Asp His Glu Pro Arg Thr Gly Val Arg Arg Gly 1010 1015 1020 Thr Gly Val Leu Val Glu Phe Ser Glu Leu Ala Phe His Leu Arg 1025 1030 1035 Ser Pro Gly Asp Leu Thr Ala Glu Glu Lys Asp Gln Ile Cys Asp 1040 1045 1050 Phe Leu Tyr Gly Arg Val Gln Ala Arg Glu Arg Gln Ala Leu Ala 1055 1060 1065 Arg Leu Arg Arg Thr Phe Gln Ala Phe His Ser Val Ala Phe Pro 1070 1075 1080 Ser Cys Gly Pro Cys Leu Glu Gln Gln Asp Glu Glu Arg Ser Thr 1085 1090 1095 Arg Leu Lys Asp Leu Leu Gly Arg Tyr Phe Glu Glu Glu Glu Gly 1100 1105 1110 Gln Glu Pro Gly Gly Met Glu Asp Ala Gln Gly Pro Glu Pro Gly 1115 1120 1125 Gln Ala Arg Leu Gln Asp Trp Glu Asp Gln Val Arg Cys Asp Ile 1130 1135 1140 Arg Gln Phe Leu Ser Leu Arg Pro Glu Glu Lys Phe Ser Ser Arg 1145 1150 1155 Ala Val Ala Arg Ile Phe His Gly Ile Gly Ser Pro Cys Tyr Pro 1160 1165 1170 Ala Gln Val Tyr Gly Gln Asp Arg Arg Phe Trp Arg Lys Tyr Leu 1175 1180 1185 His Leu Ser Phe His Ala Leu Val Gly Leu Ala Thr Glu Glu Leu 1190 1195 1200 Leu Gln Val Ala Arg 1205 <210> 131 <211> 911 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 131 Met Ala Ala Ser Gln Thr Ser Gln Thr Val Ala Ser His Val Pro Phe 1 5 10 15 Ala Asp Leu Cys Ser Thr Leu Glu Arg Ile Gln Lys Ser Lys Gly Arg 20 25 30 Ala Glu Lys Ile Arg His Phe Arg Glu Phe Leu Asp Ser Trp Arg Lys 35 40 45 Phe His Asp Ala Leu His Lys Asn His Lys Asp Val Thr Asp Ser Phe 50 55 60 Tyr Pro Ala Met Arg Leu Ile Leu Pro Gln Leu Glu Arg Glu Arg Met 65 70 75 80 Ala Tyr Gly Ile Lys Glu Thr Met Leu Ala Lys Leu Tyr Ile Glu Leu 85 90 95 Leu Asn Leu Pro Arg Asp Gly Lys Asp Ala Leu Lys Leu Leu Asn Tyr 100 105 110 Arg Thr Pro Thr Gly Thr His Gly Asp Ala Gly Asp Phe Ala Met Ile 115 120 125 Ala Tyr Phe Val Leu Lys Pro Arg Cys Leu Gln Lys Gly Ser Leu Thr 130 135 140 Ile Gln Gln Val Asn Asp Leu Leu Asp Ser Ile Ala Ser Asn Asn Ser 145 150 155 160 Ala Lys Arg Lys Asp Leu Ile Lys Lys Ser Leu Leu Gln Leu Ile Thr 165 170 175 Gln Ser Ser Ala Leu Glu Gln Lys Trp Leu Ile Arg Met Ile Ile Lys 180 185 190 Asp Leu Lys Leu Gly Val Ser Gln Gln Thr Ile Phe Ser Val Phe His 195 200 205 Asn Asp Ala Ala Glu Leu His Asn Val Thr Thr Asp Leu Glu Lys Val 210 215 220 Cys Arg Gln Leu His Asp Pro Ser Val Gly Leu Ser Asp Ile Ser Ile 225 230 235 240 Thr Leu Phe Ser Ala Phe Lys Pro Met Leu Ala Ala Ile Ala Asp Ile 245 250 255 Glu His Ile Glu Lys Asp Met Lys His Gln Ser Phe Tyr Ile Glu Thr 260 265 270 Lys Leu Asp Gly Glu Arg Met Gln Met His Lys Asp Gly Asp Val Tyr 275 280 285 Lys Tyr Phe Ser Arg Asn Gly Tyr Asn Tyr Thr Asp Gln Phe Gly Ala 290 295 300 Ser Pro Thr Glu Gly Ser Leu Thr Pro Phe Ile His Asn Ala Phe Lys 305 310 315 320 Ala Asp Ile Gln Ile Cys Ile Leu Asp Gly Glu Met Met Ala Tyr Asn 325 330 335 Pro Asn Thr Gln Thr Phe Met Gln Lys Gly Thr Lys Phe Asp Ile Lys 340 345 350 Arg Met Val Glu Asp Ser Asp Leu Gln Thr Cys Tyr Cys Val Phe Asp 355 360 365 Val Leu Met Val Asn Asn Lys Lys Leu Gly His Glu Thr Leu Arg Lys 370 375 380 Arg Tyr Glu Ile Leu Ser Ser Ile Phe Thr Pro Ile Pro Gly Arg Ile 385 390 395 400 Glu Ile Val Gln Lys Thr Gln Ala His Thr Lys Asn Glu Val Ile Asp 405 410 415 Ala Leu Asn Glu Ala Ile Asp Lys Arg Glu Glu Gly Ile Met Val Lys 420 425 430 Gln Pro Leu Ser Ile Tyr Lys Pro Asp Lys Arg Gly Glu Gly Trp Leu 435 440 445 Lys Ile Lys Pro Glu Tyr Val Ser Gly Leu Met Asp Glu Leu Asp Ile 450 455 460 Leu Ile Val Gly Gly Tyr Trp Gly Lys Gly Ser Arg Gly Gly Met Met 465 470 475 480 Ser His Phe Leu Cys Ala Val Ala Glu Lys Pro Pro Pro Gly Glu Lys 485 490 495 Pro Ser Val Phe His Thr Leu Ser Arg Val Gly Ser Gly Cys Thr Met 500 505 510 Lys Glu Leu Tyr Asp Leu Gly Leu Lys Leu Ala Lys Tyr Trp Lys Pro 515 520 525 Phe His Arg Lys Ala Pro Pro Ser Ser Ile Leu Cys Gly Thr Glu Lys 530 535 540 Pro Glu Val Tyr Ile Glu Pro Cys Asn Ser Val Ile Val Gln Ile Lys 545 550 555 560 Ala Ala Glu Ile Val Pro Ser Asp Met Tyr Lys Thr Gly Cys Thr Leu 565 570 575 Arg Phe Pro Arg Ile Glu Lys Ile Arg Asp Asp Lys Glu Trp His Glu 580 585 590 Cys Met Thr Leu Asp Asp Leu Glu Gln Leu Arg Gly Lys Ala Ser Gly 595 600 605 Lys Leu Ala Ser Lys His Leu Tyr Ile Gly Gly Asp Asp Glu Pro Gln 610 615 620 Glu Lys Lys Arg Lys Ala Ala Pro Lys Met Lys Lys Val Ile Gly Ile 625 630 635 640 Ile Glu His Leu Lys Ala Pro Asn Leu Thr Asn Val Asn Lys Ile Ser 645 650 655 Asn Ile Phe Glu Asp Val Glu Phe Cys Val Met Ser Gly Thr Asp Ser 660 665 670 Gln Pro Lys Pro Asp Leu Glu Asn Arg Ile Ala Glu Phe Gly Gly Tyr 675 680 685 Ile Val Gln Asn Pro Gly Pro Asp Thr Tyr Cys Val Ile Ala Gly Ser 690 695 700 Glu Asn Ile Arg Val Lys Asn Ile Ile Leu Ser Asn Lys His Asp Val 705 710 715 720 Val Lys Pro Ala Trp Leu Leu Glu Cys Phe Lys Thr Lys Ser Phe Val 725 730 735 Pro Trp Gln Pro Arg Phe Met Ile His Met Cys Pro Ser Thr Lys Glu 740 745 750 His Phe Ala Arg Glu Tyr Asp Cys Tyr Gly Asp Ser Tyr Phe Ile Asp 755 760 765 Thr Asp Leu Asn Gln Leu Lys Glu Val Phe Ser Gly Ile Lys Asn Ser 770 775 780 Asn Glu Gln Thr Pro Glu Glu Met Ala Ser Leu Ile Ala Asp Leu Glu 785 790 795 800 Tyr Arg Tyr Ser Trp Asp Cys Ser Pro Leu Ser Met Phe Arg Arg His 805 810 815 Thr Val Tyr Leu Asp Ser Tyr Ala Val Ile Asn Asp Leu Ser Thr Lys 820 825 830 Asn Glu Gly Thr Arg Leu Ala Ile Lys Ala Leu Glu Leu Arg Phe His 835 840 845 Gly Ala Lys Val Val Ser Cys Leu Ala Glu Gly Val Ser His Val Ile 850 855 860 Ile Gly Glu Asp His Ser Arg Val Ala Asp Phe Lys Ala Phe Arg Arg 865 870 875 880 Thr Phe Lys Arg Lys Phe Lys Ile Leu Lys Glu Ser Trp Val Thr Asp 885 890 895 Ser Ile Asp Lys Cys Glu Leu Gln Glu Glu Asn Gln Tyr Leu Ile 900 905 910 <210> 132 <211> 336 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 132 Met Glu Arg Lys Ile Ser Arg Ile His Leu Val Ser Glu Pro Ser Ile 1 5 10 15 Thr His Phe Leu Gln Val Ser Trp Glu Lys Thr Leu Glu Ser Gly Phe 20 25 30 Val Ile Thr Leu Thr Asp Gly His Ser Ala Trp Thr Gly Thr Val Ser 35 40 45 Glu Ser Glu Ile Ser Gln Glu Ala Asp Asp Met Ala Met Glu Lys Gly 50 55 60 Lys Tyr Val Gly Glu Leu Arg Lys Ala Leu Leu Ser Gly Ala Gly Pro 65 70 75 80 Ala Asp Val Tyr Thr Phe Asn Phe Ser Lys Glu Ser Cys Tyr Phe Phe 85 90 95 Phe Glu Lys Asn Leu Lys Asp Val Ser Phe Arg Leu Gly Ser Phe Asn 100 105 110 Leu Glu Lys Val Glu Asn Pro Ala Glu Val Ile Arg Glu Leu Ile Cys 115 120 125 Tyr Cys Leu Asp Thr Ile Ala Glu Asn Gln Ala Lys Asn Glu His Leu 130 135 140 Gln Lys Glu Asn Glu Arg Leu Leu Arg Asp Trp Asn Asp Val Gln Gly 145 150 155 160 Arg Phe Glu Lys Cys Val Ser Ala Lys Glu Ala Leu Glu Thr Asp Leu 165 170 175 Tyr Lys Arg Phe Ile Leu Val Leu Asn Glu Lys Lys Thr Lys Ile Arg 180 185 190 Ser Leu His Asn Lys Leu Leu Asn Ala Ala Gln Glu Arg Glu Lys Asp 195 200 205 Ile Lys Gln Glu Gly Glu Thr Ala Ile Cys Ser Glu Met Thr Ala Asp 210 215 220 Arg Asp Pro Val Tyr Asp Glu Ser Thr Asp Glu Glu Ser Glu Asn Gln 225 230 235 240 Thr Asp Leu Ser Gly Leu Ala Ser Ala Ala Val Ser Lys Asp Asp Ser 245 250 255 Ile Ile Ser Ser Leu Asp Val Thr Asp Ile Ala Pro Ser Arg Lys Arg 260 265 270 Arg Gln Arg Met Gln Arg Asn Leu Gly Thr Glu Pro Lys Met Ala Pro 275 280 285 Gln Glu Asn Gln Leu Gln Glu Lys Glu Asn Ser Arg Pro Asp Ser Ser 290 295 300 Leu Pro Glu Thr Ser Lys Lys Glu His Ile Ser Ala Glu Asn Met Ser 305 310 315 320 Leu Glu Thr Leu Arg Asn Ser Ser Pro Glu Asp Leu Phe Asp Glu Ile 325 330 335 <210> 133 <211> 4128 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 133 Met Ala Gly Ser Gly Ala Gly Val Arg Cys Ser Leu Leu Arg Leu Gln 1 5 10 15 Glu Thr Leu Ser Ala Ala Asp Arg Cys Gly Ala Ala Leu Ala Gly His 20 25 30 Gln Leu Ile Arg Gly Leu Gly Gln Glu Cys Val Leu Ser Ser Ser Pro 35 40 45 Ala Val Leu Ala Leu Gln Thr Ser Leu Val Phe Ser Arg Asp Phe Gly 50 55 60 Leu Leu Val Phe Val Arg Lys Ser Leu Asn Ser Ile Glu Phe Arg Glu 65 70 75 80 Cys Arg Glu Glu Ile Leu Lys Phe Leu Cys Ile Phe Leu Glu Lys Met 85 90 95 Gly Gln Lys Ile Ala Pro Tyr Ser Val Glu Ile Lys Asn Thr Cys Thr 100 105 110 Ser Val Tyr Thr Lys Asp Arg Ala Ala Lys Cys Lys Ile Pro Ala Leu 115 120 125 Asp Leu Leu Ile Lys Leu Leu Gln Thr Phe Arg Ser Ser Arg Leu Met 130 135 140 Asp Glu Phe Lys Ile Gly Glu Leu Phe Ser Lys Phe Tyr Gly Glu Leu 145 150 155 160 Ala Leu Lys Lys Lys Ile Pro Asp Thr Val Leu Glu Lys Val Tyr Glu 165 170 175 Leu Leu Gly Leu Leu Gly Glu Val His Pro Ser Glu Met Ile Asn Asn 180 185 190 Ala Glu Asn Leu Phe Arg Ala Phe Leu Gly Glu Leu Lys Thr Gln Met 195 200 205 Thr Ser Ala Val Arg Glu Pro Lys Leu Pro Val Leu Ala Gly Cys Leu 210 215 220 Lys Gly Leu Ser Ser Leu Leu Cys Asn Phe Thr Lys Ser Met Glu Glu 225 230 235 240 Asp Pro Gln Thr Ser Arg Glu Ile Phe Asn Phe Val Leu Lys Ala Ile 245 250 255 Arg Pro Gln Ile Asp Leu Lys Arg Tyr Ala Val Pro Ser Ala Gly Leu 260 265 270 Arg Leu Phe Ala Leu His Ala Ser Gln Phe Ser Thr Cys Leu Leu Asp 275 280 285 Asn Tyr Val Ser Leu Phe Glu Val Leu Leu Lys Trp Cys Ala His Thr 290 295 300 Asn Val Glu Leu Lys Lys Ala Ala Leu Ser Ala Leu Glu Ser Phe Leu 305 310 315 320 Lys Gln Val Ser Asn Met Val Ala Lys Asn Ala Glu Met His Lys Asn 325 330 335 Lys Leu Gln Tyr Phe Met Glu Gln Phe Tyr Gly Ile Ile Arg Asn Val 340 345 350 Asp Ser Asn Asn Lys Glu Leu Ser Ile Ala Ile Arg Gly Tyr Gly Leu 355 360 365 Phe Ala Gly Pro Cys Lys Val Ile Asn Ala Lys Asp Val Asp Phe Met 370 375 380 Tyr Val Glu Leu Ile Gln Arg Cys Lys Gln Met Phe Leu Thr Gln Thr 385 390 395 400 Asp Thr Gly Asp Asp Arg Val Tyr Gln Met Pro Ser Phe Leu Gln Ser 405 410 415 Val Ala Ser Val Leu Leu Tyr Leu Asp Thr Val Pro Glu Val Tyr Thr 420 425 430 Pro Val Leu Glu His Leu Val Val Met Gln Ile Asp Ser Phe Pro Gln 435 440 445 Tyr Ser Pro Lys Met Gln Leu Val Cys Cys Arg Ala Ile Val Lys Val 450 455 460 Phe Leu Ala Leu Ala Ala Lys Gly Pro Val Leu Arg Asn Cys Ile Ser 465 470 475 480 Thr Val Val His Gln Gly Leu Ile Arg Ile Cys Ser Lys Pro Val Val 485 490 495 Leu Pro Lys Gly Pro Glu Ser Glu Ser Glu Asp His Arg Ala Ser Gly 500 505 510 Glu Val Arg Thr Gly Lys Trp Lys Val Pro Thr Tyr Lys Asp Tyr Val 515 520 525 Asp Leu Phe Arg His Leu Leu Ser Ser Asp Gln Met Met Asp Ser Ile 530 535 540 Leu Ala Asp Glu Ala Phe Phe Ser Val Asn Ser Ser Ser Glu Ser Leu 545 550 555 560 Asn His Leu Leu Tyr Asp Glu Phe Val Lys Ser Val Leu Lys Ile Val 565 570 575 Glu Lys Leu Asp Leu Thr Leu Glu Ile Gln Thr Val Gly Glu Gln Glu 580 585 590 Asn Gly Asp Glu Ala Pro Gly Val Trp Met Ile Pro Thr Ser Asp Pro 595 600 605 Ala Ala Asn Leu His Pro Ala Lys Pro Lys Asp Phe Ser Ala Phe Ile 610 615 620 Asn Leu Val Glu Phe Cys Arg Glu Ile Leu Pro Glu Lys Gln Ala Glu 625 630 635 640 Phe Phe Glu Pro Trp Val Tyr Ser Phe Ser Tyr Glu Leu Ile Leu Gln 645 650 655 Ser Thr Arg Leu Pro Leu Ile Ser Gly Phe Tyr Lys Leu Leu Ser Ile 660 665 670 Thr Val Arg Asn Ala Lys Lys Ile Lys Tyr Phe Glu Gly Val Ser Pro 675 680 685 Lys Ser Leu Lys His Ser Pro Glu Asp Pro Glu Lys Tyr Ser Cys Phe 690 695 700 Ala Leu Phe Val Lys Phe Gly Lys Glu Val Ala Val Lys Met Lys Gln 705 710 715 720 Tyr Lys Asp Glu Leu Leu Ala Ser Cys Leu Thr Phe Leu Leu Ser Leu 725 730 735 Pro His Asn Ile Ile Glu Leu Asp Val Arg Ala Tyr Val Pro Ala Leu 740 745 750 Gln Met Ala Phe Lys Leu Gly Leu Ser Tyr Thr Pro Leu Ala Glu Val 755 760 765 Gly Leu Asn Ala Leu Glu Glu Trp Ser Ile Tyr Ile Asp Arg His Val 770 775 780 Met Gln Pro Tyr Tyr Lys Asp Ile Leu Pro Cys Leu Asp Gly Tyr Leu 785 790 795 800 Lys Thr Ser Ala Leu Ser Asp Glu Thr Lys Asn Asn Trp Glu Val Ser 805 810 815 Ala Leu Ser Arg Ala Ala Gln Lys Gly Phe Asn Lys Val Val Leu Lys 820 825 830 His Leu Lys Lys Thr Lys Asn Leu Ser Ser Asn Glu Ala Ile Ser Leu 835 840 845 Glu Glu Ile Arg Ile Arg Val Val Gln Met Leu Gly Ser Leu Gly Gly 850 855 860 Gln Ile Asn Lys Asn Leu Leu Thr Val Thr Ser Ser Asp Glu Met Met 865 870 875 880 Lys Ser Tyr Val Ala Trp Asp Arg Glu Lys Arg Leu Ser Phe Ala Val 885 890 895 Pro Phe Arg Glu Met Lys Pro Val Ile Phe Leu Asp Val Phe Leu Pro 900 905 910 Arg Val Thr Glu Leu Ala Leu Thr Ala Ser Asp Arg Gln Thr Lys Val 915 920 925 Ala Ala Cys Glu Leu Leu His Ser Met Val Met Phe Met Leu Gly Lys 930 935 940 Ala Thr Gln Met Pro Glu Gly Gly Gln Gly Ala Pro Pro Met Tyr Gln 945 950 955 960 Leu Tyr Lys Arg Thr Phe Pro Val Leu Leu Arg Leu Ala Cys Asp Val 965 970 975 Asp Gln Val Thr Arg Gln Leu Tyr Glu Pro Leu Val Met Gln Leu Ile 980 985 990 His Trp Phe Thr Asn Asn Lys Lys Phe Glu Ser Gln Asp Thr Val Ala 995 1000 1005 Leu Leu Glu Ala Ile Leu Asp Gly Ile Val Asp Pro Val Asp Ser 1010 1015 1020 Thr Leu Arg Asp Phe Cys Gly Arg Cys Ile Arg Glu Phe Leu Lys 1025 1030 1035 Trp Ser Ile Lys Gln Ile Thr Pro Gln Gln Gln Glu Lys Ser Pro 1040 1045 1050 Val Asn Thr Lys Ser Leu Phe Lys Arg Leu Tyr Ser Leu Ala Leu 1055 1060 1065 His Pro Asn Ala Phe Lys Arg Leu Gly Ala Ser Leu Ala Phe Asn 1070 1075 1080 Asn Ile Tyr Arg Glu Phe Arg Glu Glu Glu Ser Leu Val Glu Gln 1085 1090 1095 Phe Val Phe Glu Ala Leu Val Ile Tyr Met Glu Ser Leu Ala Leu 1100 1105 1110 Ala His Ala Asp Glu Lys Ser Leu Gly Thr Ile Gln Gln Cys Cys 1115 1120 1125 Asp Ala Ile Asp His Leu Cys Arg Ile Ile Glu Lys Lys His Val 1130 1135 1140 Ser Leu Asn Lys Ala Lys Lys Arg Arg Leu Pro Arg Gly Phe Pro 1145 1150 1155 Pro Ser Ala Ser Leu Cys Leu Leu Asp Leu Val Lys Trp Leu Leu 1160 1165 1170 Ala His Cys Gly Arg Pro Gln Thr Glu Cys Arg His Lys Ser Ile 1175 1180 1185 Glu Leu Phe Tyr Lys Phe Val Pro Leu Leu Pro Gly Asn Arg Ser 1190 1195 1200 Pro Asn Leu Trp Leu Lys Asp Val Leu Lys Glu Glu Gly Val Ser 1205 1210 1215 Phe Leu Ile Asn Thr Phe Glu Gly Gly Gly Cys Gly Gln Pro Ser 1220 1225 1230 Gly Ile Leu Ala Gln Pro Thr Leu Leu Tyr Leu Arg Gly Pro Phe 1235 1240 1245 Ser Leu Gln Ala Thr Leu Cys Trp Leu Asp Leu Leu Leu Ala Ala 1250 1255 1260 Leu Glu Cys Tyr Asn Thr Phe Ile Gly Glu Arg Thr Val Gly Ala 1265 1270 1275 Leu Gln Val Leu Gly Thr Glu Ala Gln Ser Ser Leu Leu Lys Ala 1280 1285 1290 Val Ala Phe Phe Leu Glu Ser Ile Ala Met His Asp Ile Ile Ala 1295 1300 1305 Ala Glu Lys Cys Phe Gly Thr Gly Ala Ala Gly Asn Arg Thr Ser 1310 1315 1320 Pro Gln Glu Gly Glu Arg Tyr Asn Tyr Ser Lys Cys Thr Val Val 1325 1330 1335 Val Arg Ile Met Glu Phe Thr Thr Thr Leu Leu Asn Thr Ser Pro 1340 1345 1350 Glu Gly Trp Lys Leu Leu Lys Lys Asp Leu Cys Asn Thr His Leu 1355 1360 1365 Met Arg Val Leu Val Gln Thr Leu Cys Glu Pro Ala Ser Ile Gly 1370 1375 1380 Phe Asn Ile Gly Asp Val Gln Val Met Ala His Leu Pro Asp Val 1385 1390 1395 Cys Val Asn Leu Met Lys Ala Leu Lys Met Ser Pro Tyr Lys Asp 1400 1405 1410 Ile Leu Glu Thr His Leu Arg Glu Lys Ile Thr Ala Gln Ser Ile 1415 1420 1425 Glu Glu Leu Cys Ala Val Asn Leu Tyr Gly Pro Asp Ala Gln Val 1430 1435 1440 Asp Arg Ser Arg Leu Ala Ala Val Val Ser Ala Cys Lys Gln Leu 1445 1450 1455 His Arg Ala Gly Leu Leu His Asn Ile Leu Pro Ser Gln Ser Thr 1460 1465 1470 Asp Leu His His Ser Val Gly Thr Glu Leu Leu Ser Leu Val Tyr 1475 1480 1485 Lys Gly Ile Ala Pro Gly Asp Glu Arg Gln Cys Leu Pro Ser Leu 1490 1495 1500 Asp Leu Ser Cys Lys Gln Leu Ala Ser Gly Leu Leu Glu Leu Ala 1505 1510 1515 Phe Ala Phe Gly Gly Leu Cys Glu Arg Leu Val Ser Leu Leu Leu 1520 1525 1530 Asn Pro Ala Val Leu Ser Thr Ala Ser Leu Gly Ser Ser Gln Gly 1535 1540 1545 Ser Val Ile His Phe Ser His Gly Glu Tyr Phe Tyr Ser Leu Phe 1550 1555 1560 Ser Glu Thr Ile Asn Thr Glu Leu Leu Lys Asn Leu Asp Leu Ala 1565 1570 1575 Val Leu Glu Leu Met Gln Ser Ser Val Asp Asn Thr Lys Met Val 1580 1585 1590 Ser Ala Val Leu Asn Gly Met Leu Asp Gln Ser Phe Arg Glu Arg 1595 1600 1605 Ala Asn Gln Lys His Gln Gly Leu Lys Leu Ala Thr Thr Ile Leu 1610 1615 1620 Gln His Trp Lys Lys Cys Asp Ser Trp Trp Ala Lys Asp Ser Pro 1625 1630 1635 Leu Glu Thr Lys Met Ala Val Leu Ala Leu Leu Ala Lys Ile Leu 1640 1645 1650 Gln Ile Asp Ser Ser Val Ser Phe Asn Thr Ser His Gly Ser Phe 1655 1660 1665 Pro Glu Val Phe Thr Thr Tyr Ile Ser Leu Leu Ala Asp Thr Lys 1670 1675 1680 Leu Asp Leu His Leu Lys Gly Gln Ala Val Thr Leu Leu Pro Phe 1685 1690 1695 Phe Thr Ser Leu Thr Gly Gly Ser Leu Glu Glu Leu Arg Arg Val 1700 1705 1710 Leu Glu Gln Leu Ile Val Ala His Phe Pro Met Gln Ser Arg Glu 1715 1720 1725 Phe Pro Pro Gly Thr Pro Arg Phe Asn Asn Tyr Val Asp Cys Met 1730 1735 1740 Lys Lys Phe Leu Asp Ala Leu Glu Leu Ser Gln Ser Pro Met Leu 1745 1750 1755 Leu Glu Leu Met Thr Glu Val Leu Cys Arg Glu Gln Gln His Val 1760 1765 1770 Met Glu Glu Leu Phe Gln Ser Ser Phe Arg Arg Ile Ala Arg Arg 1775 1780 1785 Gly Ser Cys Val Thr Gln Val Gly Leu Leu Glu Ser Val Tyr Glu 1790 1795 1800 Met Phe Arg Lys Asp Asp Pro Arg Leu Ser Phe Thr Arg Gln Ser 1805 1810 1815 Phe Val Asp Arg Ser Leu Leu Thr Leu Leu Trp His Cys Ser Leu 1820 1825 1830 Asp Ala Leu Arg Glu Phe Phe Ser Thr Ile Val Val Asp Ala Ile 1835 1840 1845 Asp Val Leu Lys Ser Arg Phe Thr Lys Leu Asn Glu Ser Thr Phe 1850 1855 1860 Asp Thr Gln Ile Thr Lys Lys Met Gly Tyr Tyr Lys Ile Leu Asp 1865 1870 1875 Val Met Tyr Ser Arg Leu Pro Lys Asp Asp Val His Ala Lys Glu 1880 1885 1890 Ser Lys Ile Asn Gln Val Phe His Gly Ser Cys Ile Thr Glu Gly 1895 1900 1905 Asn Glu Leu Thr Lys Thr Leu Ile Lys Leu Cys Tyr Asp Ala Phe 1910 1915 1920 Thr Glu Asn Met Ala Gly Glu Asn Gln Leu Leu Glu Arg Arg Arg 1925 1930 1935 Leu Tyr His Cys Ala Ala Tyr Asn Cys Ala Ile Ser Val Ile Cys 1940 1945 1950 Cys Val Phe Asn Glu Leu Lys Phe Tyr Gln Gly Phe Leu Phe Ser 1955 1960 1965 Glu Lys Pro Glu Lys Asn Leu Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ile Asp 1970 1975 1980 Leu Lys Arg Arg Tyr Asn Phe Pro Val Glu Val Glu Val Pro Met 1985 1990 1995 Glu Arg Lys Lys Lys Tyr Ile Glu Ile Arg Lys Glu Ala Arg Glu 2000 2005 2010 Ala Ala Asn Gly Asp Ser Asp Gly Pro Ser Tyr Met Ser Ser Leu 2015 2020 2025 Ser Tyr Leu Ala Asp Ser Thr Leu Ser Glu Glu Met Ser Gln Phe 2030 2035 2040 Asp Phe Ser Thr Gly Val Gln Ser Tyr Ser Tyr Ser Ser Gln Asp 2045 2050 2055 Pro Arg Pro Ala Thr Gly Arg Phe Arg Arg Arg Glu Gln Arg Asp 2060 2065 2070 Pro Thr Val His Asp Asp Val Leu Glu Leu Glu Met Asp Glu Leu 2075 2080 2085 Asn Arg His Glu Cys Met Ala Pro Leu Thr Ala Leu Val Lys His 2090 2095 2100 Met His Arg Ser Leu Gly Pro Pro Gln Gly Glu Glu Asp Ser Val 2105 2110 2115 Pro Arg Asp Leu Pro Ser Trp Met Lys Phe Leu His Gly Lys Leu 2120 2125 2130 Gly Asn Pro Ile Val Pro Leu Asn Ile Arg Leu Phe Leu Ala Lys 2135 2140 2145 Leu Val Ile Asn Thr Glu Glu Val Phe Arg Pro Tyr Ala Lys His 2150 2155 2160 Trp Leu Ser Pro Leu Leu Gln Leu Ala Ala Ser Glu Asn Asn Gly 2165 2170 2175 Gly Glu Gly Ile His Tyr Met Val Val Glu Ile Val Ala Thr Ile 2180 2185 2190 Leu Ser Trp Thr Gly Leu Ala Thr Pro Thr Gly Val Pro Lys Asp 2195 2200 2205 Glu Val Leu Ala Asn Arg Leu Leu Asn Phe Leu Met Lys His Val 2210 2215 2220 Phe His Pro Lys Arg Ala Val Phe Arg His Asn Leu Glu Ile Ile 2225 2230 2235 Lys Thr Leu Val Glu Cys Trp Lys Asp Cys Leu Ser Ile Pro Tyr 2240 2245 2250 Arg Leu Ile Phe Glu Lys Phe Ser Gly Lys Asp Pro Asn Ser Lys 2255 2260 2265 Asp Asn Ser Val Gly Ile Gln Leu Leu Gly Ile Val Met Ala Asn 2270 2275 2280 Asp Leu Pro Pro Tyr Asp Pro Gln Cys Gly Ile Gln Ser Ser Glu 2285 2290 2295 Tyr Phe Gln Ala Leu Val Asn Asn Met Ser Phe Val Arg Tyr Lys 2300 2305 2310 Glu Val Tyr Ala Ala Ala Ala Glu Val Leu Gly Leu Ile Leu Arg 2315 2320 2325 Tyr Val Met Glu Arg Lys Asn Ile Leu Glu Glu Ser Leu Cys Glu 2330 2335 2340 Leu Val Ala Lys Gln Leu Lys Gln His Gln Asn Thr Met Glu Asp 2345 2350 2355 Lys Phe Ile Val Cys Leu Asn Lys Val Thr Lys Ser Phe Pro Pro 2360 2365 2370 Leu Ala Asp Arg Phe Met Asn Ala Val Phe Phe Leu Leu Pro Lys 2375 2380 2385 Phe His Gly Val Leu Lys Thr Leu Cys Leu Glu Val Val Leu Cys 2390 2395 2400 Arg Val Glu Gly Met Thr Glu Leu Tyr Phe Gln Leu Lys Ser Lys 2405 2410 2415 Asp Phe Val Gln Val Met Arg His Arg Asp Asp Glu Arg Gln Lys 2420 2425 2430 Val Cys Leu Asp Ile Ile Tyr Lys Met Met Pro Lys Leu Lys Pro 2435 2440 2445 Val Glu Leu Arg Glu Leu Leu Asn Pro Val Val Glu Phe Val Ser 2450 2455 2460 His Pro Ser Thr Thr Cys Arg Glu Gln Met Tyr Asn Ile Leu Met 2465 2470 2475 Trp Ile His Asp Asn Tyr Arg Asp Pro Glu Ser Glu Thr Asp Asn 2480 2485 2490 Asp Ser Gln Glu Ile Phe Lys Leu Ala Lys Asp Val Leu Ile Gln 2495 2500 2505 Gly Leu Ile Asp Glu Asn Pro Gly Leu Gln Leu Ile Ile Arg Asn 2510 2515 2520 Phe Trp Ser His Glu Thr Arg Leu Pro Ser Asn Thr Leu Asp Arg 2525 2530 2535 Leu Leu Ala Leu Asn Ser Leu Tyr Ser Pro Lys Ile Glu Val His 2540 2545 2550 Phe Leu Ser Leu Ala Thr Asn Phe Leu Leu Glu Met Thr Ser Met 2555 2560 2565 Ser Pro Asp Tyr Pro Asn Pro Met Phe Glu His Pro Leu Ser Glu 2570 2575 2580 Cys Glu Phe Gln Glu Tyr Thr Ile Asp Ser Asp Trp Arg Phe Arg 2585 2590 2595 Ser Thr Val Leu Thr Pro Met Phe Val Glu Thr Gln Ala Ser Gln 2600 2605 2610 Gly Thr Leu Gln Thr Arg Thr Gln Glu Gly Ser Leu Ser Ala Arg 2615 2620 2625 Trp Pro Val Ala Gly Gln Ile Arg Ala Thr Gln Gln Gln His Asp 2630 2635 2640 Phe Thr Leu Thr Gln Thr Ala Asp Gly Arg Ser Ser Phe Asp Trp 2645 2650 2655 Leu Thr Gly Ser Ser Thr Asp Pro Leu Val Asp His Thr Ser Pro 2660 2665 2670 Ser Ser Asp Ser Leu Leu Phe Ala His Lys Arg Ser Glu Arg Leu 2675 2680 2685 Gln Arg Ala Pro Leu Lys Ser Val Gly Pro Asp Phe Gly Lys Lys 2690 2695 2700 Arg Leu Gly Leu Pro Gly Asp Glu Val Asp Asn Lys Val Lys Gly 2705 2710 2715 Ala Ala Gly Arg Thr Asp Leu Leu Arg Leu Arg Arg Arg Phe Met 2720 2725 2730 Arg Asp Gln Glu Lys Leu Ser Leu Met Tyr Ala Arg Lys Gly Val 2735 2740 2745 Ala Glu Gln Lys Arg Glu Lys Glu Ile Lys Ser Glu Leu Lys Met 2750 2755 2760 Lys Gln Asp Ala Gln Val Val Leu Tyr Arg Ser Tyr Arg His Gly 2765 2770 2775 Asp Leu Pro Asp Ile Gln Ile Lys His Ser Ser Leu Ile Thr Pro 2780 2785 2790 Leu Gln Ala Val Ala Gln Arg Asp Pro Ile Ile Ala Lys Gln Leu 2795 2800 2805 Phe Ser Ser Leu Phe Ser Gly Ile Leu Lys Glu Met Asp Lys Phe 2810 2815 2820 Lys Thr Leu Ser Glu Lys Asn Asn Ile Thr Gln Lys Leu Leu Gln 2825 2830 2835 Asp Phe Asn Arg Phe Leu Asn Thr Thr Phe Ser Phe Phe Pro Pro 2840 2845 2850 Phe Val Ser Cys Ile Gln Asp Ile Ser Cys Gln His Ala Ala Leu 2855 2860 2865 Leu Ser Leu Asp Pro Ala Ala Val Ser Ala Gly Cys Leu Ala Ser 2870 2875 2880 Leu Gln Gln Pro Val Gly Ile Arg Leu Leu Glu Glu Ala Leu Leu 2885 2890 2895 Arg Leu Leu Pro Ala Glu Leu Pro Ala Lys Arg Val Arg Gly Lys 2900 2905 2910 Ala Arg Leu Pro Pro Asp Val Leu Arg Trp Val Glu Leu Ala Lys 2915 2920 2925 Leu Tyr Arg Ser Ile Gly Glu Tyr Asp Val Leu Arg Gly Ile Phe 2930 2935 2940 Thr Ser Glu Ile Gly Thr Lys Gln Ile Thr Gln Ser Ala Leu Leu 2945 2950 2955 Ala Glu Ala Arg Ser Asp Tyr Ser Glu Ala Ala Lys Gln Tyr Asp 2960 2965 2970 Glu Ala Leu Asn Lys Gln Asp Trp Val Asp Gly Glu Pro Thr Glu 2975 2980 2985 Ala Glu Lys Asp Phe Trp Glu Leu Ala Ser Leu Asp Cys Tyr Asn 2990 2995 3000 His Leu Ala Glu Trp Lys Ser Leu Glu Tyr Cys Ser Thr Ala Ser 3005 3010 3015 Ile Asp Ser Glu Asn Pro Pro Asp Leu Asn Lys Ile Trp Ser Glu 3020 3025 3030 Pro Phe Tyr Gln Glu Thr Tyr Leu Pro Tyr Met Ile Arg Ser Lys 3035 3040 3045 Leu Lys Leu Leu Leu Gln Gly Glu Ala Asp Gln Ser Leu Leu Thr 3050 3055 3060 Phe Ile Asp Lys Ala Met His Gly Glu Leu Gln Lys Ala Ile Leu 3065 3070 3075 Glu Leu His Tyr Ser Gln Glu Leu Ser Leu Leu Tyr Leu Leu Gln 3080 3085 3090 Asp Asp Val Asp Arg Ala Lys Tyr Tyr Ile Gln Asn Gly Ile Gln 3095 3100 3105 Ser Phe Met Gln Asn Tyr Ser Ser Ile Asp Val Leu Leu His Gln 3110 3115 3120 Ser Arg Leu Thr Lys Leu Gln Ser Val Gln Ala Leu Thr Glu Ile 3125 3130 3135 Gln Glu Phe Ile Ser Phe Ile Ser Lys Gln Gly Asn Leu Ser Ser 3140 3145 3150 Gln Val Pro Leu Lys Arg Leu Leu Asn Thr Trp Thr Asn Arg Tyr 3155 3160 3165 Pro Asp Ala Lys Met Asp Pro Met Asn Ile Trp Asp Asp Ile Ile 3170 3175 3180 Thr Asn Arg Cys Phe Phe Leu Ser Lys Ile Glu Glu Lys Leu Thr 3185 3190 3195 Pro Leu Pro Glu Asp Asn Ser Met Asn Val Asp Gln Asp Gly Asp 3200 3205 3210 Pro Ser Asp Arg Met Glu Val Gln Glu Gln Glu Glu Asp Ile Ser 3215 3220 3225 Ser Leu Ile Arg Ser Cys Lys Phe Ser Met Lys Met Lys Met Ile 3230 3235 3240 Asp Ser Ala Arg Lys Gln Asn Asn Phe Ser Leu Ala Met Lys Leu 3245 3250 3255 Leu Lys Glu Leu His Lys Glu Ser Lys Thr Arg Asp Asp Trp Leu 3260 3265 3270 Val Ser Trp Val Gln Ser Tyr Cys Arg Leu Ser His Cys Arg Ser 3275 3280 3285 Arg Ser Gln Gly Cys Ser Glu Gln Val Leu Thr Val Leu Lys Thr 3290 3295 3300 Val Ser Leu Leu Asp Glu Asn Asn Val Ser Ser Tyr Leu Ser Lys 3305 3310 3315 Asn Ile Leu Ala Phe Arg Asp Gln Asn Ile Leu Leu Gly Thr Thr 3320 3325 3330 Tyr Arg Ile Ile Ala Asn Ala Leu Ser Ser Glu Pro Ala Cys Leu 3335 3340 3345 Ala Glu Ile Glu Glu Asp Lys Ala Arg Arg Ile Leu Glu Leu Ser 3350 3355 3360 Gly Ser Ser Ser Glu Asp Ser Glu Lys Val Ile Ala Gly Leu Tyr 3365 3370 3375 Gln Arg Ala Phe Gln His Leu Ser Glu Ala Val Gln Ala Ala Glu 3380 3385 3390 Glu Glu Ala Gln Pro Pro Ser Trp Ser Cys Gly Pro Ala Ala Gly 3395 3400 3405 Val Ile Asp Ala Tyr Met Thr Leu Ala Asp Phe Cys Asp Gln Gln 3410 3415 3420 Leu Arg Lys Glu Glu Glu Asn Ala Ser Val Ile Asp Ser Ala Glu 3425 3430 3435 Leu Gln Ala Tyr Pro Ala Leu Val Val Glu Lys Met Leu Lys Ala 3440 3445 3450 Leu Lys Leu Asn Ser Asn Glu Ala Arg Leu Lys Phe Pro Arg Leu 3455 3460 3465 Leu Gln Ile Ile Glu Arg Tyr Pro Glu Glu Thr Leu Ser Leu Met 3470 3475 3480 Thr Lys Glu Ile Ser Ser Val Pro Cys Trp Gln Phe Ile Ser Trp 3485 3490 3495 Ile Ser His Met Val Ala Leu Leu Asp Lys Asp Gln Ala Val Ala 3500 3505 3510 Val Gln His Ser Val Glu Glu Ile Thr Asp Asn Tyr Pro Gln Ala 3515 3520 3525 Ile Val Tyr Pro Phe Ile Ile Ser Ser Glu Ser Tyr Ser Phe Lys 3530 3535 3540 Asp Thr Ser Thr Gly His Lys Asn Lys Glu Phe Val Ala Arg Ile 3545 3550 3555 Lys Ser Lys Leu Asp Gln Gly Gly Val Ile Gln Asp Phe Ile Asn 3560 3565 3570 Ala Leu Asp Gln Leu Ser Asn Pro Glu Leu Leu Phe Lys Asp Trp 3575 3580 3585 Ser Asn Asp Val Arg Ala Glu Leu Ala Lys Thr Pro Val Asn Lys 3590 3595 3600 Lys Asn Ile Glu Lys Met Tyr Glu Arg Met Tyr Ala Ala Leu Gly 3605 3610 3615 Asp Pro Lys Ala Pro Gly Leu Gly Ala Phe Arg Arg Lys Phe Ile 3620 3625 3630 Gln Thr Phe Gly Lys Glu Phe Asp Lys His Phe Gly Lys Gly Gly 3635 3640 3645 Ser Lys Leu Leu Arg Met Lys Leu Ser Asp Phe Asn Asp Ile Thr 3650 3655 3660 Asn Met Leu Leu Leu Lys Met Asn Lys Asp Ser Lys Pro Pro Gly 3665 3670 3675 Asn Leu Lys Glu Cys Ser Pro Trp Met Ser Asp Phe Lys Val Glu 3680 3685 3690 Phe Leu Arg Asn Glu Leu Glu Ile Pro Gly Gln Tyr Asp Gly Arg 3695 3700 3705 Gly Lys Pro Leu Pro Glu Tyr His Val Arg Ile Ala Gly Phe Asp 3710 3715 3720 Glu Arg Val Thr Val Met Ala Ser Leu Arg Arg Pro Lys Arg Ile 3725 3730 3735 Ile Ile Arg Gly His Asp Glu Arg Glu His Pro Phe Leu Val Lys 3740 3745 3750 Gly Gly Glu Asp Leu Arg Gln Asp Gln Arg Val Glu Gln Leu Phe 3755 3760 3765 Gln Val Met Asn Gly Ile Leu Ala Gln Asp Ser Ala Cys Ser Gln 3770 3775 3780 Arg Ala Leu Gln Leu Arg Thr Tyr Ser Val Val Pro Met Thr Ser 3785 3790 3795 Arg Leu Gly Leu Ile Glu Trp Leu Glu Asn Thr Val Thr Leu Lys 3800 3805 3810 Asp Leu Leu Leu Asn Thr Met Ser Gln Glu Glu Lys Ala Ala Tyr 3815 3820 3825 Leu Ser Asp Pro Arg Ala Pro Pro Cys Glu Tyr Lys Asp Trp Leu 3830 3835 3840 Thr Lys Met Ser Gly Lys His Asp Val Gly Ala Tyr Met Leu Met 3845 3850 3855 Tyr Lys Gly Ala Asn Arg Thr Glu Thr Val Thr Ser Phe Arg Lys 3860 3865 3870 Arg Glu Ser Lys Val Pro Ala Asp Leu Leu Lys Arg Ala Phe Val 3875 3880 3885 Arg Met Ser Thr Ser Pro Glu Ala Phe Leu Ala Leu Arg Ser His 3890 3895 3900 Phe Ala Ser Ser His Ala Leu Ile Cys Ile Ser His Trp Ile Leu 3905 3910 3915 Gly Ile Gly Asp Arg His Leu Asn Asn Phe Met Val Ala Met Glu 3920 3925 3930 Thr Gly Gly Val Ile Gly Ile Asp Phe Gly His Ala Phe Gly Ser 3935 3940 3945 Ala Thr Gln Phe Leu Pro Val Pro Glu Leu Met Pro Phe Arg Leu 3950 3955 3960 Thr Arg Gln Phe Ile Asn Leu Met Leu Pro Met Lys Glu Thr Gly 3965 3970 3975 Leu Met Tyr Ser Ile Met Val His Ala Leu Arg Ala Phe Arg Ser 3980 3985 3990 Asp Pro Gly Leu Leu Thr Asn Thr Met Asp Val Phe Val Lys Glu 3995 4000 4005 Pro Ser Phe Asp Trp Lys Asn Phe Glu Gln Lys Met Leu Lys Lys 4010 4015 4020 Gly Gly Ser Trp Ile Gln Glu Ile Asn Val Ala Glu Lys Asn Trp 4025 4030 4035 Tyr Pro Arg Gln Lys Ile Cys Tyr Ala Lys Arg Lys Leu Ala Gly 4040 4045 4050 Ala Asn Pro Ala Val Ile Thr Cys Asp Glu Leu Leu Leu Gly His 4055 4060 4065 Glu Lys Ala Pro Ala Phe Arg Asp Tyr Val Ala Val Ala Arg Gly 4070 4075 4080 Ser Lys Asp His Asn Ile Arg Ala Gln Glu Pro Glu Ser Gly Leu 4085 4090 4095 Ser Glu Glu Thr Gln Val Lys Cys Leu Met Asp Gln Ala Thr Asp 4100 4105 4110 Pro Asn Ile Leu Gly Arg Thr Trp Glu Gly Trp Glu Pro Trp Met 4115 4120 4125 <210> 134 <211> 692 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 134 Met Ser Ser Phe Glu Gly Gln Met Ala Glu Tyr Pro Thr Ile Ser Ile 1 5 10 15 Asp Arg Phe Asp Arg Glu Asn Leu Arg Ala Arg Ala Tyr Phe Leu Ser 20 25 30 His Cys His Lys Asp His Met Lys Gly Leu Arg Ala Pro Thr Leu Lys 35 40 45 Arg Arg Leu Glu Cys Ser Leu Lys Val Tyr Leu Tyr Cys Ser Pro Val 50 55 60 Thr Lys Glu Leu Leu Leu Thr Ser Pro Lys Tyr Arg Phe Trp Lys Lys 65 70 75 80 Arg Ile Ile Ser Ile Glu Ile Glu Thr Pro Thr Gln Ile Ser Leu Val 85 90 95 Asp Glu Ala Ser Gly Glu Lys Glu Glu Ile Val Val Thr Leu Leu Pro 100 105 110 Ala Gly His Cys Pro Gly Ser Val Met Phe Leu Phe Gln Gly Asn Asn 115 120 125 Gly Thr Val Leu Tyr Thr Gly Asp Phe Arg Leu Ala Gln Gly Glu Ala 130 135 140 Ala Arg Met Glu Leu Leu His Ser Gly Gly Arg Val Lys Asp Ile Gln 145 150 155 160 Ser Val Tyr Leu Asp Thr Thr Phe Cys Asp Pro Arg Phe Tyr Gln Ile 165 170 175 Pro Ser Arg Glu Glu Cys Leu Ser Gly Val Leu Glu Leu Val Arg Ser 180 185 190 Trp Ile Thr Arg Ser Pro Tyr His Val Val Trp Leu Asn Cys Lys Ala 195 200 205 Ala Tyr Gly Tyr Glu Tyr Leu Phe Thr Asn Leu Ser Glu Glu Leu Gly 210 215 220 Val Gln Val His Val Asn Lys Leu Asp Met Phe Arg Asn Met Pro Glu 225 230 235 240 Ile Leu His His Leu Thr Thr Asp Arg Asn Thr Gln Ile His Ala Cys 245 250 255 Arg His Pro Lys Ala Glu Glu Tyr Phe Gln Trp Ser Lys Leu Pro Cys 260 265 270 Gly Ile Thr Ser Arg Asn Arg Ile Pro Leu His Ile Ile Ser Ile Lys 275 280 285 Pro Ser Thr Met Trp Phe Gly Glu Arg Ser Arg Lys Thr Asn Val Ile 290 295 300 Val Arg Thr Gly Glu Ser Ser Tyr Arg Ala Cys Phe Ser Phe His Ser 305 310 315 320 Ser Tyr Ser Glu Ile Lys Asp Phe Leu Ser Tyr Leu Cys Pro Val Asn 325 330 335 Ala Tyr Pro Asn Val Ile Pro Val Gly Thr Thr Met Asp Lys Val Val 340 345 350 Glu Ile Leu Lys Pro Leu Cys Arg Ser Ser Gln Ser Thr Glu Pro Lys 355 360 365 Tyr Lys Pro Leu Gly Lys Leu Lys Arg Ala Arg Thr Val His Arg Asp 370 375 380 Ser Glu Glu Glu Asp Asp Tyr Leu Phe Asp Asp Pro Leu Pro Ile Pro 385 390 395 400 Leu Arg His Lys Val Pro Tyr Pro Glu Thr Phe His Pro Glu Val Phe 405 410 415 Ser Met Thr Ala Val Ser Glu Lys Gln Pro Glu Lys Leu Arg Gln Thr 420 425 430 Pro Gly Cys Cys Arg Ala Glu Cys Met Gln Ser Ser Arg Phe Thr Asn 435 440 445 Phe Val Asp Cys Glu Glu Ser Asn Ser Glu Ser Glu Glu Glu Val Gly 450 455 460 Ile Pro Ala Ser Leu Gln Gly Asp Leu Gly Ser Val Leu His Leu Gln 465 470 475 480 Lys Ala Asp Gly Asp Val Pro Gln Trp Glu Val Phe Phe Lys Arg Asn 485 490 495 Asp Glu Ile Thr Asp Glu Ser Leu Glu Asn Phe Pro Ser Ser Thr Val 500 505 510 Ala Gly Gly Ser Gln Ser Pro Lys Leu Phe Ser Asp Ser Asp Gly Glu 515 520 525 Ser Thr His Ile Ser Ser Gln Asn Ser Ser Gln Ser Thr His Ile Thr 530 535 540 Glu Gln Gly Ser Gln Gly Trp Asp Ser Gln Ser Asp Thr Val Leu Leu 545 550 555 560 Ser Ser Gln Glu Arg Asn Ser Gly Asp Ile Thr Ser Leu Asp Lys Ala 565 570 575 Asp Tyr Arg Pro Thr Ile Lys Glu Asn Ile Pro Ala Ser Leu Met Glu 580 585 590 Gln Asn Val Ile Cys Pro Lys Asp Thr Tyr Ser Asp Leu Lys Ser Arg 595 600 605 Asp Lys Asp Val Thr Ile Val Pro Ser Thr Gly Glu Pro Thr Thr Leu 610 615 620 Ser Ser Glu Thr His Ile Pro Glu Glu Lys Ser Leu Leu Asn Leu Ser 625 630 635 640 Thr Asn Ala Asp Ser Gln Ser Ser Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser Thr 645 650 655 Pro Glu Ala Glu Leu Pro Lys Arg Glu His Leu Gln Tyr Leu Tyr Glu 660 665 670 Lys Leu Ala Thr Gly Glu Ser Ile Ala Val Lys Lys Arg Lys Cys Ser 675 680 685 Leu Leu Asp Thr 690 <210> 135 <211> 609 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 135 Met Ser Gly Trp Glu Ser Tyr Tyr Lys Thr Glu Gly Asp Glu Glu Ala 1 5 10 15 Glu Glu Glu Gln Glu Glu Asn Leu Glu Ala Ser Gly Asp Tyr Lys Tyr 20 25 30 Ser Gly Arg Asp Ser Leu Ile Phe Leu Val Asp Ala Ser Lys Ala Met 35 40 45 Phe Glu Ser Gln Ser Glu Asp Glu Leu Thr Pro Phe Asp Met Ser Ile 50 55 60 Gln Cys Ile Gln Ser Val Tyr Ile Ser Lys Ile Ile Ser Ser Asp Arg 65 70 75 80 Asp Leu Leu Ala Val Val Phe Tyr Gly Thr Glu Lys Asp Lys Asn Ser 85 90 95 Val Asn Phe Lys Asn Ile Tyr Val Leu Gln Glu Leu Asp Asn Pro Gly 100 105 110 Ala Lys Arg Ile Leu Glu Leu Asp Gln Phe Lys Gly Gln Gln Gly Gln 115 120 125 Lys Arg Phe Gln Asp Met Met Gly His Gly Ser Asp Tyr Ser Leu Ser 130 135 140 Glu Val Leu Trp Val Cys Ala Asn Leu Phe Ser Asp Val Gln Phe Lys 145 150 155 160 Met Ser His Lys Arg Ile Met Leu Phe Thr Asn Glu Asp Asn Pro His 165 170 175 Gly Asn Asp Ser Ala Lys Ala Ser Arg Ala Arg Thr Lys Ala Gly Asp 180 185 190 Leu Arg Asp Thr Gly Ile Phe Leu Asp Leu Met His Leu Lys Lys Pro 195 200 205 Gly Gly Phe Asp Ile Ser Leu Phe Tyr Arg Asp Ile Ile Ser Ile Ala 210 215 220 Glu Asp Glu Asp Leu Arg Val His Phe Glu Glu Ser Ser Lys Leu Glu 225 230 235 240 Asp Leu Leu Arg Lys Val Arg Ala Lys Glu Thr Arg Lys Arg Ala Leu 245 250 255 Ser Arg Leu Lys Leu Lys Leu Asn Lys Asp Ile Val Ile Ser Val Gly 260 265 270 Ile Tyr Asn Leu Val Gln Lys Ala Leu Lys Pro Pro Pro Ile Lys Leu 275 280 285 Tyr Arg Glu Thr Asn Glu Pro Val Lys Thr Lys Thr Arg Thr Phe Asn 290 295 300 Thr Ser Thr Gly Gly Leu Leu Leu Pro Ser Asp Thr Lys Arg Ser Gln 305 310 315 320 Ile Tyr Gly Ser Arg Gln Ile Ile Leu Glu Lys Glu Glu Thr Glu Glu 325 330 335 Leu Lys Arg Phe Asp Asp Pro Gly Leu Met Leu Met Gly Phe Lys Pro 340 345 350 Leu Val Leu Leu Lys Lys His His Tyr Leu Arg Pro Ser Leu Phe Val 355 360 365 Tyr Pro Glu Glu Ser Leu Val Ile Gly Ser Ser Thr Leu Phe Ser Ala 370 375 380 Leu Leu Ile Lys Cys Leu Glu Lys Glu Val Ala Ala Leu Cys Arg Tyr 385 390 395 400 Thr Pro Arg Arg Asn Ile Pro Pro Tyr Phe Val Ala Leu Val Pro Gln 405 410 415 Glu Glu Glu Leu Asp Asp Gln Lys Ile Gln Val Thr Pro Pro Gly Phe 420 425 430 Gln Leu Val Phe Leu Pro Phe Ala Asp Asp Lys Arg Lys Met Pro Phe 435 440 445 Thr Glu Lys Ile Met Ala Thr Pro Glu Gln Val Gly Lys Met Lys Ala 450 455 460 Ile Val Glu Lys Leu Arg Phe Thr Tyr Arg Ser Asp Ser Phe Glu Asn 465 470 475 480 Pro Val Leu Gln Gln His Phe Arg Asn Leu Glu Ala Leu Ala Leu Asp 485 490 495 Leu Met Glu Pro Glu Gln Ala Val Asp Leu Thr Leu Pro Lys Val Glu 500 505 510 Ala Met Asn Lys Arg Leu Gly Ser Leu Val Asp Glu Phe Lys Glu Leu 515 520 525 Val Tyr Pro Pro Asp Tyr Asn Pro Glu Gly Lys Val Thr Lys Arg Lys 530 535 540 His Asp Asn Glu Gly Ser Gly Ser Lys Arg Pro Lys Val Glu Tyr Ser 545 550 555 560 Glu Glu Glu Leu Lys Thr His Ile Ser Lys Gly Thr Leu Gly Lys Phe 565 570 575 Thr Val Pro Met Leu Lys Glu Ala Cys Arg Ala Tyr Gly Leu Lys Ser 580 585 590 Gly Leu Lys Lys Gln Glu Leu Leu Glu Ala Leu Thr Lys His Phe Gln 595 600 605 Asp <210> 136 <211> 732 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 136 Met Val Arg Ser Gly Asn Lys Ala Ala Val Val Leu Cys Met Asp Val 1 5 10 15 Gly Phe Thr Met Ser Asn Ser Ile Pro Gly Ile Glu Ser Pro Phe Glu 20 25 30 Gln Ala Lys Lys Val Ile Thr Met Phe Val Gln Arg Gln Val Phe Ala 35 40 45 Glu Asn Lys Asp Glu Ile Ala Leu Val Leu Phe Gly Thr Asp Gly Thr 50 55 60 Asp Asn Pro Leu Ser Gly Gly Asp Gln Tyr Gln Asn Ile Thr Val His 65 70 75 80 Arg His Leu Met Leu Pro Asp Phe Asp Leu Leu Glu Asp Ile Glu Ser 85 90 95 Lys Ile Gln Pro Gly Ser Gln Gln Ala Asp Phe Leu Asp Ala Leu Ile 100 105 110 Val Ser Met Asp Val Ile Gln His Glu Thr Ile Gly Lys Lys Phe Glu 115 120 125 Lys Arg His Ile Glu Ile Phe Thr Asp Leu Ser Ser Arg Phe Ser Lys 130 135 140 Ser Gln Leu Asp Ile Ile Ile His Ser Leu Lys Lys Cys Asp Ile Ser 145 150 155 160 Leu Gln Phe Phe Leu Pro Phe Ser Leu Gly Lys Glu Asp Gly Ser Gly 165 170 175 Asp Arg Gly Asp Gly Pro Phe Arg Leu Gly Gly His Gly Pro Ser Phe 180 185 190 Pro Leu Lys Gly Ile Thr Glu Gln Gln Lys Glu Gly Leu Glu Ile Val 195 200 205 Lys Met Val Met Ile Ser Leu Glu Gly Glu Asp Gly Leu Asp Glu Ile 210 215 220 Tyr Ser Phe Ser Glu Ser Leu Arg Lys Leu Cys Val Phe Lys Lys Ile 225 230 235 240 Glu Arg His Ser Ile His Trp Pro Cys Arg Leu Thr Ile Gly Ser Asn 245 250 255 Leu Ser Ile Arg Ile Ala Ala Tyr Lys Ser Ile Leu Gln Glu Arg Val 260 265 270 Lys Lys Thr Trp Thr Val Val Asp Ala Lys Thr Leu Lys Lys Glu Asp 275 280 285 Ile Gln Lys Glu Thr Val Tyr Cys Leu Asn Asp Asp Asp Glu Thr Glu 290 295 300 Val Leu Lys Glu Asp Ile Ile Gln Gly Phe Arg Tyr Gly Ser Asp Ile 305 310 315 320 Val Pro Phe Ser Lys Val Asp Glu Glu Gln Met Lys Tyr Lys Ser Glu 325 330 335 Gly Lys Cys Phe Ser Val Leu Gly Phe Cys Lys Ser Ser Gln Val Gln 340 345 350 Arg Arg Phe Phe Met Gly Asn Gln Val Leu Lys Val Phe Ala Ala Arg 355 360 365 Asp Asp Glu Ala Ala Ala Val Ala Leu Ser Ser Leu Ile His Ala Leu 370 375 380 Asp Asp Leu Asp Met Val Ala Ile Val Arg Tyr Ala Tyr Asp Lys Arg 385 390 395 400 Ala Asn Pro Gln Val Gly Val Ala Phe Pro His Ile Lys His Asn Tyr 405 410 415 Glu Cys Leu Val Tyr Val Gln Leu Pro Phe Met Glu Asp Leu Arg Gln 420 425 430 Tyr Met Phe Ser Ser Leu Lys Asn Ser Lys Lys Tyr Ala Pro Thr Glu 435 440 445 Ala Gln Leu Asn Ala Val Asp Ala Leu Ile Asp Ser Met Ser Leu Ala 450 455 460 Lys Lys Asp Glu Lys Thr Asp Thr Leu Glu Asp Leu Phe Pro Thr Thr 465 470 475 480 Lys Ile Pro Asn Pro Arg Phe Gln Arg Leu Phe Gln Cys Leu Leu His 485 490 495 Arg Ala Leu His Pro Arg Glu Pro Leu Pro Pro Ile Gln Gln His Ile 500 505 510 Trp Asn Met Leu Asn Pro Pro Ala Glu Val Thr Thr Lys Ser Gln Ile 515 520 525 Pro Leu Ser Lys Ile Lys Thr Leu Phe Pro Leu Ile Glu Ala Lys Lys 530 535 540 Lys Asp Gln Val Thr Ala Gln Glu Ile Phe Gln Asp Asn His Glu Asp 545 550 555 560 Gly Pro Thr Ala Lys Lys Leu Lys Thr Glu Gln Gly Gly Ala His Phe 565 570 575 Ser Val Ser Ser Leu Ala Glu Gly Ser Val Thr Ser Val Gly Ser Val 580 585 590 Asn Pro Ala Glu Asn Phe Arg Val Leu Val Lys Gln Lys Lys Ala Ser 595 600 605 Phe Glu Glu Ala Ser Asn Gln Leu Ile Asn His Ile Glu Gln Phe Leu 610 615 620 Asp Thr Asn Glu Thr Pro Tyr Phe Met Lys Ser Ile Asp Cys Ile Arg 625 630 635 640 Ala Phe Arg Glu Glu Ala Ile Lys Phe Ser Glu Glu Gln Arg Phe Asn 645 650 655 Asn Phe Leu Lys Ala Leu Gln Glu Lys Val Glu Ile Lys Gln Leu Asn 660 665 670 His Phe Trp Glu Ile Val Val Gln Asp Gly Ile Thr Leu Ile Thr Lys 675 680 685 Glu Glu Ala Ser Gly Ser Ser Val Thr Ala Glu Glu Ala Lys Lys Phe 690 695 700 Leu Ala Pro Lys Asp Lys Pro Ser Gly Asp Thr Ala Ala Val Phe Glu 705 710 715 720 Glu Gly Gly Asp Val Asp Asp Leu Leu Asp Met Ile 725 730 <210> 137 <211> 299 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 137 Met Glu Glu Leu Glu Gln Gly Leu Leu Met Gln Pro Trp Ala Trp Leu 1 5 10 15 Gln Leu Ala Glu Asn Ser Leu Leu Ala Lys Val Phe Ile Thr Lys Gln 20 25 30 Gly Tyr Ala Leu Leu Val Ser Asp Leu Gln Gln Val Trp His Glu Gln 35 40 45 Val Asp Thr Ser Val Val Ser Gln Arg Ala Lys Glu Leu Asn Lys Arg 50 55 60 Leu Thr Ala Pro Pro Ala Ala Phe Leu Cys His Leu Asp Asn Leu Leu 65 70 75 80 Arg Pro Leu Leu Lys Asp Ala Ala His Pro Ser Glu Ala Thr Phe Ser 85 90 95 Cys Asp Cys Val Ala Asp Ala Leu Ile Leu Arg Val Arg Ser Glu Leu 100 105 110 Ser Gly Leu Pro Phe Tyr Trp Asn Phe His Cys Met Leu Ala Ser Pro 115 120 125 Ser Leu Val Ser Gln His Leu Ile Arg Pro Leu Met Gly Met Ser Leu 130 135 140 Ala Leu Gln Cys Gln Val Arg Glu Leu Ala Thr Leu Leu His Met Lys 145 150 155 160 Asp Leu Glu Ile Gln Asp Tyr Gln Glu Ser Gly Ala Thr Leu Ile Arg 165 170 175 Asp Arg Leu Lys Thr Glu Pro Phe Glu Glu Asn Ser Phe Leu Glu Gln 180 185 190 Phe Met Ile Glu Lys Leu Pro Glu Ala Cys Ser Ile Gly Asp Gly Lys 195 200 205 Pro Phe Val Met Asn Leu Gln Asp Leu Tyr Met Ala Val Thr Thr Gln 210 215 220 Glu Val Gln Val Gly Gln Lys His Gln Gly Ala Gly Asp Pro His Thr 225 230 235 240 Ser Asn Ser Ala Ser Leu Gln Gly Ile Asp Ser Gln Cys Val Asn Gln 245 250 255 Pro Glu Gln Leu Val Ser Ser Ala Pro Thr Leu Ser Ala Pro Glu Lys 260 265 270 Glu Ser Thr Gly Thr Ser Gly Pro Leu Gln Arg Pro Gln Leu Ser Lys 275 280 285 Val Lys Arg Lys Lys Pro Arg Gly Leu Phe Ser 290 295 <210> 138 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 138 Met Thr Ser Glu Lys Gly Pro Ser Thr Gly Asp Pro Thr Leu Arg Arg 1 5 10 15 Arg Ile Glu Pro Trp Glu Phe Asp Val Phe Tyr Asp Pro Arg Glu Leu 20 25 30 Arg Lys Glu Ala Cys Leu Leu Tyr Glu Ile Lys Trp Gly Met Ser Arg 35 40 45 Lys Ile Trp Arg Ser Ser Gly Lys Asn Thr Thr Asn His Val Glu Val 50 55 60 Asn Phe Ile Lys Lys Phe Thr Ser Glu Arg Asp Phe His Pro Ser Met 65 70 75 80 Ser Cys Ser Ile Thr Trp Phe Leu Ser Trp Ser Pro Cys Trp Glu Cys 85 90 95 Ser Gln Ala Ile Arg Glu Phe Leu Ser Arg His Pro Gly Val Thr Leu 100 105 110 Val Ile Tyr Val Ala Arg Leu Phe Trp His Met Asp Gln Gln Asn Arg 115 120 125 Gln Gly Leu Arg Asp Leu Val Asn Ser Gly Val Thr Ile Gln Ile Met 130 135 140 Arg Ala Ser Glu Tyr Tyr His Cys Trp Arg Asn Phe Val Asn Tyr Pro 145 150 155 160 Pro Gly Asp Glu Ala His Trp Pro Gln Tyr Pro Pro Leu Trp Met Met 165 170 175 Leu Tyr Ala Leu Glu Leu His Cys Ile Ile Leu Ser Leu Pro Pro Cys 180 185 190 Leu Lys Ile Ser Arg Arg Trp Gln Asn His Leu Thr Phe Phe Arg Leu 195 200 205 His Leu Gln Asn Cys His Tyr Gln Thr Ile Pro Pro His Ile Leu Leu 210 215 220 Ala Thr Gly Leu Ile His Pro Ser Val Ala Trp Arg 225 230 235 <210> 139 <211> 224 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 139 Met Ala Gln Lys Glu Glu Ala Ala Val Ala Thr Glu Ala Ala Ser Gln 1 5 10 15 Asn Gly Glu Asp Leu Glu Asn Leu Asp Asp Pro Glu Lys Leu Lys Glu 20 25 30 Leu Ile Glu Leu Pro Pro Phe Glu Ile Val Thr Gly Glu Arg Leu Pro 35 40 45 Ala Asn Phe Phe Lys Phe Gln Phe Arg Asn Val Glu Tyr Ser Ser Gly 50 55 60 Arg Asn Lys Thr Phe Leu Cys Tyr Val Val Glu Ala Gln Gly Lys Gly 65 70 75 80 Gly Gln Val Gln Ala Ser Arg Gly Tyr Leu Glu Asp Glu His Ala Ala 85 90 95 Ala His Ala Glu Glu Ala Phe Phe Asn Thr Ile Leu Pro Ala Phe Asp 100 105 110 Pro Ala Leu Arg Tyr Asn Val Thr Trp Tyr Val Ser Ser Ser Pro Cys 115 120 125 Ala Ala Cys Ala Asp Arg Ile Ile Lys Thr Leu Ser Lys Thr Lys Asn 130 135 140 Leu Arg Leu Leu Ile Leu Val Gly Arg Leu Phe Met Trp Glu Glu Pro 145 150 155 160 Glu Ile Gln Ala Ala Leu Lys Lys Leu Lys Glu Ala Gly Cys Lys Leu 165 170 175 Arg Ile Met Lys Pro Gln Asp Phe Glu Tyr Val Trp Gln Asn Phe Val 180 185 190 Glu Gln Glu Glu Gly Glu Ser Lys Ala Phe Gln Pro Trp Glu Asp Ile 195 200 205 Gln Glu Asn Phe Leu Tyr Tyr Glu Glu Lys Leu Ala Asp Ile Leu Lys 210 215 220 <210> 140 <211> 199 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 140 Met Glu Ala Ser Pro Ala Ser Gly Pro Arg His Leu Met Asp Pro His 1 5 10 15 Ile Phe Thr Ser Asn Phe Asn Asn Gly Ile Gly Arg His Lys Thr Tyr 20 25 30 Leu Cys Tyr Glu Val Glu Arg Leu Asp Asn Gly Thr Ser Val Lys Met 35 40 45 Asp Gln His Arg Gly Phe Leu His Asn Gln Ala Lys Asn Leu Leu Cys 50 55 60 Gly Phe Tyr Gly Arg His Ala Glu Leu Arg Phe Leu Asp Leu Val Pro 65 70 75 80 Ser Leu Gln Leu Asp Pro Ala Gln Ile Tyr Arg Val Thr Trp Phe Ile 85 90 95 Ser Trp Ser Pro Cys Phe Ser Trp Gly Cys Ala Gly Glu Val Arg Ala 100 105 110 Phe Leu Gln Glu Asn Thr His Val Arg Leu Arg Ile Phe Ala Ala Arg 115 120 125 Ile Tyr Asp Tyr Asp Pro Leu Tyr Lys Glu Ala Leu Gln Met Leu Arg 130 135 140 Asp Ala Gly Ala Gln Val Ser Ile Met Thr Tyr Asp Glu Phe Lys His 145 150 155 160 Cys Trp Asp Thr Phe Val Asp His Gln Gly Cys Pro Phe Gln Pro Trp 165 170 175 Asp Gly Leu Asp Glu His Ser Gln Ala Leu Ser Gly Arg Leu Arg Ala 180 185 190 Ile Leu Gln Asn Gln Gly Asn 195 <210> 141 <211> 190 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 141 Met Asn Pro Gln Ile Arg Asn Pro Met Lys Ala Met Tyr Pro Gly Thr 1 5 10 15 Phe Tyr Phe Gln Phe Lys Asn Leu Trp Glu Ala Asn Asp Arg Asn Glu 20 25 30 Thr Trp Leu Cys Phe Thr Val Glu Gly Ile Lys Arg Arg Ser Val Val 35 40 45 Ser Trp Lys Thr Gly Val Phe Arg Asn Gln Val Asp Ser Glu Thr His 50 55 60 Cys His Ala Glu Arg Cys Phe Leu Ser Trp Phe Cys Asp Asp Ile Leu 65 70 75 80 Ser Pro Asn Thr Lys Tyr Gln Val Thr Trp Tyr Thr Ser Trp Ser Pro 85 90 95 Cys Pro Asp Cys Ala Gly Glu Val Ala Glu Phe Leu Ala Arg His Ser 100 105 110 Asn Val Asn Leu Thr Ile Phe Thr Ala Arg Leu Tyr Tyr Phe Gln Tyr 115 120 125 Pro Cys Tyr Gln Glu Gly Leu Arg Ser Leu Ser Gln Glu Gly Val Ala 130 135 140 Val Glu Ile Met Asp Tyr Glu Asp Phe Lys Tyr Cys Trp Glu Asn Phe 145 150 155 160 Val Tyr Asn Asp Asn Glu Pro Phe Lys Pro Trp Lys Gly Leu Lys Thr 165 170 175 Asn Phe Arg Leu Leu Lys Arg Arg Leu Arg Glu Ser Leu Gln 180 185 190 <210> 142 <211> 386 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 142 Met Asn Pro Gln Ile Arg Asn Pro Met Glu Arg Met Tyr Arg Asp Thr 1 5 10 15 Phe Tyr Asp Asn Phe Glu Asn Glu Pro Ile Leu Tyr Gly Arg Ser Tyr 20 25 30 Thr Trp Leu Cys Tyr Glu Val Lys Ile Lys Arg Gly Arg Ser Asn Leu 35 40 45 Leu Trp Asp Thr Gly Val Phe Arg Gly Pro Val Leu Pro Lys Arg Gln 50 55 60 Ser Asn His Arg Gln Glu Val Tyr Phe Arg Phe Glu Asn His Ala Glu 65 70 75 80 Met Cys Phe Leu Ser Trp Phe Cys Gly Asn Arg Leu Pro Ala Asn Arg 85 90 95 Arg Phe Gln Ile Thr Trp Phe Val Ser Trp Asn Pro Cys Leu Pro Cys 100 105 110 Val Val Lys Val Thr Lys Phe Leu Ala Glu His Pro Asn Val Thr Leu 115 120 125 Thr Ile Ser Ala Ala Arg Leu Tyr Tyr Tyr Arg Asp Arg Asp Trp Arg 130 135 140 Trp Val Leu Leu Arg Leu His Lys Ala Gly Ala Arg Val Lys Ile Met 145 150 155 160 Asp Tyr Glu Asp Phe Ala Tyr Cys Trp Glu Asn Phe Val Cys Asn Glu 165 170 175 Gly Gln Pro Phe Met Pro Trp Tyr Lys Phe Asp Asp Asn Tyr Ala Ser 180 185 190 Leu His Arg Thr Leu Lys Glu Ile Leu Arg Asn Pro Met Glu Ala Met 195 200 205 Tyr Pro His Ile Phe Tyr Phe His Phe Lys Asn Leu Leu Lys Ala Cys 210 215 220 Gly Arg Asn Glu Ser Trp Leu Cys Phe Thr Met Glu Val Thr Lys His 225 230 235 240 His Ser Ala Val Phe Arg Lys Arg Gly Val Phe Arg Asn Gln Val Asp 245 250 255 Pro Glu Thr His Cys His Ala Glu Arg Cys Phe Leu Ser Trp Phe Cys 260 265 270 Asp Asp Ile Leu Ser Pro Asn Thr Asn Tyr Glu Val Thr Trp Tyr Thr 275 280 285 Ser Trp Ser Pro Cys Pro Glu Cys Ala Gly Glu Val Ala Glu Phe Leu 290 295 300 Ala Arg His Ser Asn Val Asn Leu Thr Ile Phe Thr Ala Arg Leu Cys 305 310 315 320 Tyr Phe Trp Asp Thr Asp Tyr Gln Glu Gly Leu Cys Ser Leu Ser Gln 325 330 335 Glu Gly Ala Ser Val Lys Ile Met Gly Tyr Lys Asp Phe Val Ser Cys 340 345 350 Trp Lys Asn Phe Val Tyr Ser Asp Asp Glu Pro Phe Lys Pro Trp Lys 355 360 365 Gly Leu Gln Thr Asn Phe Arg Leu Leu Lys Arg Arg Leu Arg Glu Ile 370 375 380 Leu Gln 385 <210> 143 <211> 373 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 143 Met Lys Pro His Phe Arg Asn Thr Val Glu Arg Met Tyr Arg Asp Thr 1 5 10 15 Phe Ser Tyr Asn Phe Tyr Asn Arg Pro Ile Leu Ser Arg Arg Asn Thr 20 25 30 Val Trp Leu Cys Tyr Glu Val Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Pro Arg 35 40 45 Leu Asp Ala Lys Ile Phe Arg Gly Gln Val Tyr Ser Gln Pro Glu His 50 55 60 His Ala Glu Met Cys Phe Leu Ser Trp Phe Cys Gly Asn Gln Leu Pro 65 70 75 80 Ala Tyr Lys Cys Phe Gln Ile Thr Trp Phe Val Ser Trp Thr Pro Cys 85 90 95 Pro Asp Cys Val Ala Lys Leu Ala Glu Phe Leu Ala Glu His Pro Asn 100 105 110 Val Thr Leu Thr Ile Ser Ala Ala Arg Leu Tyr Tyr Tyr Trp Glu Arg 115 120 125 Asp Tyr Arg Arg Ala Leu Cys Arg Leu Ser Gln Ala Gly Ala Arg Val 130 135 140 Lys Ile Met Asp Asp Glu Glu Phe Ala Tyr Cys Trp Glu Asn Phe Val 145 150 155 160 Tyr Ser Glu Gly Gln Pro Phe Met Pro Trp Tyr Lys Phe Asp Asp Asn 165 170 175 Tyr Ala Phe Leu His Arg Thr Leu Lys Glu Ile Leu Arg Asn Pro Met 180 185 190 Glu Ala Met Tyr Pro His Ile Phe Tyr Phe His Phe Lys Asn Leu Arg 195 200 205 Lys Ala Tyr Gly Arg Asn Glu Ser Trp Leu Cys Phe Thr Met Glu Val 210 215 220 Val Lys His His Ser Pro Val Ser Trp Lys Arg Gly Val Phe Arg Asn 225 230 235 240 Gln Val Asp Pro Glu Thr His Cys His Ala Glu Arg Cys Phe Leu Ser 245 250 255 Trp Phe Cys Asp Asp Ile Leu Ser Pro Asn Thr Asn Tyr Glu Val Thr 260 265 270 Trp Tyr Thr Ser Trp Ser Pro Cys Pro Glu Cys Ala Gly Glu Val Ala 275 280 285 Glu Phe Leu Ala Arg His Ser Asn Val Asn Leu Thr Ile Phe Thr Ala 290 295 300 Arg Leu Tyr Tyr Phe Trp Asp Thr Asp Tyr Gln Glu Gly Leu Arg Ser 305 310 315 320 Leu Ser Gln Glu Gly Ala Ser Val Glu Ile Met Gly Tyr Lys Asp Phe 325 330 335 Lys Tyr Cys Trp Glu Asn Phe Val Tyr Asn Asp Asp Glu Pro Phe Lys 340 345 350 Pro Trp Lys Gly Leu Lys Tyr Asn Phe Leu Phe Leu Asp Ser Lys Leu 355 360 365 Gln Glu Ile Leu Glu 370 <210> 144 <211> 384 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 144 Met Lys Pro His Phe Arg Asn Thr Val Glu Arg Met Tyr Arg Asp Thr 1 5 10 15 Phe Ser Tyr Asn Phe Tyr Asn Arg Pro Ile Leu Ser Arg Arg Asn Thr 20 25 30 Val Trp Leu Cys Tyr Glu Val Lys Thr Lys Gly Pro Ser Arg Pro Pro 35 40 45 Leu Asp Ala Lys Ile Phe Arg Gly Gln Val Tyr Ser Glu Leu Lys Tyr 50 55 60 His Pro Glu Met Arg Phe Phe His Trp Phe Ser Lys Trp Arg Lys Leu 65 70 75 80 His Arg Asp Gln Glu Tyr Glu Val Thr Trp Tyr Ile Ser Trp Ser Pro 85 90 95 Cys Thr Lys Cys Thr Arg Asp Met Ala Thr Phe Leu Ala Glu Asp Pro 100 105 110 Lys Val Thr Leu Thr Ile Phe Val Ala Arg Leu Tyr Tyr Phe Trp Asp 115 120 125 Pro Asp Tyr Gln Glu Ala Leu Arg Ser Leu Cys Gln Lys Arg Asp Gly 130 135 140 Pro Arg Ala Thr Met Lys Ile Met Asn Tyr Asp Glu Phe Gln His Cys 145 150 155 160 Trp Ser Lys Phe Val Tyr Ser Gln Arg Glu Leu Phe Glu Pro Trp Asn 165 170 175 Asn Leu Pro Lys Tyr Tyr Ile Leu Leu His Ile Met Leu Gly Glu Ile 180 185 190 Leu Arg His Ser Met Asp Pro Pro Thr Phe Thr Phe Asn Phe Asn Asn 195 200 205 Glu Pro Trp Val Arg Gly Arg His Glu Thr Tyr Leu Cys Tyr Glu Val 210 215 220 Glu Arg Met His Asn Asp Thr Trp Val Leu Leu Asn Gln Arg Arg Gly 225 230 235 240 Phe Leu Cys Asn Gln Ala Pro His Lys His Gly Phe Leu Glu Gly Arg 245 250 255 His Ala Glu Leu Cys Phe Leu Asp Val Ile Pro Phe Trp Lys Leu Asp 260 265 270 Leu Asp Gln Asp Tyr Arg Val Thr Cys Phe Thr Ser Trp Ser Pro Cys 275 280 285 Phe Ser Cys Ala Gln Glu Met Ala Lys Phe Ile Ser Lys Asn Lys His 290 295 300 Val Ser Leu Cys Ile Phe Thr Ala Arg Ile Tyr Asp Asp Gln Gly Arg 305 310 315 320 Cys Gln Glu Gly Leu Arg Thr Leu Ala Glu Ala Gly Ala Lys Ile Ser 325 330 335 Ile Met Thr Tyr Ser Glu Phe Lys His Cys Trp Asp Thr Phe Val Asp 340 345 350 His Gln Gly Cys Pro Phe Gln Pro Trp Asp Gly Leu Asp Glu His Ser 355 360 365 Gln Asp Leu Ser Gly Arg Leu Arg Ala Ile Leu Gln Asn Gln Glu Asn 370 375 380 <210> 145 <211> 200 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 145 Met Ala Leu Leu Thr Ala Glu Thr Phe Arg Leu Gln Phe Asn Asn Lys 1 5 10 15 Arg Arg Leu Arg Arg Pro Tyr Tyr Pro Arg Lys Ala Leu Leu Cys Tyr 20 25 30 Gln Leu Thr Pro Gln Asn Gly Ser Thr Pro Thr Arg Gly Tyr Phe Glu 35 40 45 Asn Lys Lys Lys Cys His Ala Glu Ile Cys Phe Ile Asn Glu Ile Lys 50 55 60 Ser Met Gly Leu Asp Glu Thr Gln Cys Tyr Gln Val Thr Cys Tyr Leu 65 70 75 80 Thr Trp Ser Pro Cys Ser Ser Cys Ala Trp Glu Leu Val Asp Phe Ile 85 90 95 Lys Ala His Asp His Leu Asn Leu Gly Ile Phe Ala Ser Arg Leu Tyr 100 105 110 Tyr His Trp Cys Lys Pro Gln Gln Lys Gly Leu Arg Leu Leu Cys Gly 115 120 125 Ser Gln Val Pro Val Glu Val Met Gly Phe Pro Lys Phe Ala Asp Cys 130 135 140 Trp Glu Asn Phe Val Asp His Glu Lys Pro Leu Ser Phe Asn Pro Tyr 145 150 155 160 Lys Met Leu Glu Glu Leu Asp Lys Asn Ser Arg Ala Ile Lys Arg Arg 165 170 175 Leu Glu Arg Ile Lys Ile Pro Gly Val Arg Ala Gln Gly Arg Tyr Met 180 185 190 Asp Ile Leu Cys Asp Ala Glu Val 195 200 <210> 146 <211> 367 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 146 Met Glu Pro Ile Tyr Glu Glu Tyr Leu Ala Asn His Gly Thr Ile Val 1 5 10 15 Lys Pro Tyr Tyr Trp Leu Ser Phe Ser Leu Asp Cys Ser Asn Cys Pro 20 25 30 Tyr His Ile Arg Thr Gly Glu Glu Ala Arg Val Ser Leu Thr Glu Phe 35 40 45 Cys Gln Ile Phe Gly Phe Pro Tyr Gly Thr Thr Phe Pro Gln Thr Lys 50 55 60 His Leu Thr Phe Tyr Glu Leu Lys Thr Ser Ser Gly Ser Leu Val Gln 65 70 75 80 Lys Gly His Ala Ser Ser Cys Thr Gly Asn Tyr Ile His Pro Glu Ser 85 90 95 Met Leu Phe Glu Met Asn Gly Tyr Leu Asp Ser Ala Ile Tyr Asn Asn 100 105 110 Asp Ser Ile Arg His Ile Ile Leu Tyr Ser Asn Asn Ser Pro Cys Asn 115 120 125 Glu Ala Asn His Cys Cys Ile Ser Lys Met Tyr Asn Phe Leu Ile Thr 130 135 140 Tyr Pro Gly Ile Thr Leu Ser Ile Tyr Phe Ser Gln Leu Tyr His Thr 145 150 155 160 Glu Met Asp Phe Pro Ala Ser Ala Trp Asn Arg Glu Ala Leu Arg Ser 165 170 175 Leu Ala Ser Leu Trp Pro Arg Val Val Leu Ser Pro Ile Ser Gly Gly 180 185 190 Ile Trp His Ser Val Leu His Ser Phe Ile Ser Gly Val Ser Gly Ser 195 200 205 His Val Phe Gln Pro Ile Leu Thr Gly Arg Ala Leu Ala Asp Arg His 210 215 220 Asn Ala Tyr Glu Ile Asn Ala Ile Thr Gly Val Lys Pro Tyr Phe Thr 225 230 235 240 Asp Val Leu Leu Gln Thr Lys Arg Asn Pro Asn Thr Lys Ala Gln Glu 245 250 255 Ala Leu Glu Ser Tyr Pro Leu Asn Asn Ala Phe Pro Gly Gln Phe Phe 260 265 270 Gln Met Pro Ser Gly Gln Leu Gln Pro Asn Leu Pro Pro Asp Leu Arg 275 280 285 Ala Pro Val Val Phe Val Leu Val Pro Leu Arg Asp Leu Pro Pro Met 290 295 300 His Met Gly Gln Asn Pro Asn Lys Pro Arg Asn Ile Val Arg His Leu 305 310 315 320 Asn Met Pro Gln Met Ser Phe Gln Glu Thr Lys Asp Leu Gly Arg Leu 325 330 335 Pro Thr Gly Arg Ser Val Glu Ile Val Glu Ile Thr Glu Gln Phe Ala 340 345 350 Ser Ser Lys Glu Ala Asp Glu Lys Lys Lys Lys Lys Gly Lys Lys 355 360 365 <210> 147 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 147 gaaatcaatc atagtggaag caccaactac aacccgtccc tcaagagt 48 <210> 148 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 148 gatatcagtc atagtggcat ccccaagtac aacccgtccc tcaagagt 48 <210> 149 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 149 gaaatcaatc atggtggaaa tcccaactac aacccgtctc tcaggagc 48 <210> 150 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 150 gaaatcaatc atgttggaag taccacctac aacccctccc tcaagagt 48 <210> 151 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 151 gcaatcaata atagtggaaa caccttgttc accccatccc tcacgagt 48 <210> 152 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 152 gaaatcaatc acagtggaag aaccaaccac aacccgtccc tcaggagt 48 <210> 153 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 153 gaaacctatc atagtgcata caccaagtac agcccgtccc tccagggt 48 <210> 154 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 154 gagatcgatt atagtggaaa cgccaactac aacccgtccc tcaagagt 48 <210> 155 <211> 48 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 155 gaaatcaatc atagtggaag caccaactac aacccgtccc tcaagagt 48 <210> 156 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <220> <221> modified_base <222> (3)..(21) <223> a, c, t, g, unknown or other <400> 156 aannnnnnnn nnnnnnnnnn ntt 23

Claims (115)

  1. (d) 대상체로부터 유래된 생물학적 샘플을 얻는 단계;
    (e) DNA 편집 효소의 수준을 측정하는 단계; 및
    (f) 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계
    를 포함하는 치료 방법.
  2. 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 것으로 결정된 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계
    를 포함하는 치료 방법.
  3. (c) 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및
    (d) 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며,
    여기서 상승된 수준의 DNA 편집 효소란, DNA 편집 효소의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것인 치료 방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 생물학적 샘플은 혈액 세포를 포함하는, 방법.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 생물학적 샘플은 B 세포를 포함하는, 방법.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준은 건강한 대상체로부터의 정상 세포에서보다 통계학적으로 유의하게 더 높은, 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소는
    재조합 활성화 유전자 1(RAG1); 재조합 활성화 유전자 2(RAG2); 포자형성-특이적 단백질 11(SPO11); 아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사(APOBEC) 패밀리 구성원; 및 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소는 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)인, 방법.
  9. 제8항에 있어서,
    상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 B 세포 내의 AID의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 AID의 수준보다 유의하게 더 높은, 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 인간 대상체인, 방법.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 암성 세포인, 방법.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 암을 갖는, 방법.
  13. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 자가면역 세포인, 방법.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는
    림프종, 백혈병, 및 형질 세포 신생물
    로 이루어진 군으로부터 선택된 이상(condition)을 갖는, 방법.
  15. 제14항에 있어서,
    상기 림프종은
    비호지킨 림프종; 버킷 림프종, 소 림프구성 림프종; 림프형질세포성 림프종; 말트(MALT) 림프종; 여포성 림프종; 미만성 거대 B-세포 림프종; 및 T-세포 림프종
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  16. 제14항에 있어서,
    상기 백혈병은
    급성 림프모구성 백혈병(ALL), 버킷 백혈병; B-세포 백혈병; B-세포 급성 림프모구성 백혈병; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 골수원성(myelogenous) 백혈병(AML); 만성 골수원성 백혈병(CML); 및 T-세포 급성 림프모구성 백혈병(T-ALL)
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  17. 제14항에 있어서,
    상기 형질 세포 신생물은
    다발성 골수종; 형질 세포 골수종; 형질 세포 백혈병; 및 형질세포종
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  18. 제12항에 있어서,
    상기 대상체는
    상피 세포암; 결장암, 간암, 위암; 장관암; 식도암; 유방암; 폐암; 및 갑상선암
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 갖는, 방법.
  19. 제1항 내지 제10항 또는 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 자가면역 질환을 갖는, 방법.
  20. 제19항에 있어서,
    상기 자가면역 질환은
    홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스, 원판상 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 염증성 만성 비부비동염, 결장염, 셀리악 질환(celiac disease), 염증성 장질환, 바렛 식도, 염증성 위염 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 및 자가면역 매개 혈액학적 질환
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; 및 XLF
    로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 발현 또는 활동을 감소시키는, 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    소분자; 단백질; 펩티드; 항체; 항체 단편; 단백질 결합 단백질; 리보핵산; 데옥시리보핵산; 압타머(aptamer); 펩티드 핵산(PNA); 및 잠금 핵산(locked nucleic acid, LNA)
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  23. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 스틸벤, 스틸베노이드, 또는 그의 유도체인, 방법.
  24. 제23항에 있어서,
    상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는 화학식 V의 화합물, 또는 그의 입체이성체, 거울상 이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염인, 방법:
    [화학식 V]
    Figure pct00061

    상기 화학식 V에서,
    R1은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R2는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R3은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R4는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R5는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R6은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R7은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R8은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R9는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R10은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    X는 C(R21)2, -C(O)N(R22)-, -C(O)-, -C(O)O-, -S(O)-, -SO2- -CH(R11)CH(R12)-, -C(R11)=C(R12)-, 및
    Figure pct00062
    로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    여기서,
    R11은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R12는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    각각의 R21 은 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있고;
    각각의 R22는 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
  25. 제21항에 있어서,
    상기 스틸벤 유도체는 4,4'디이소티오시아노스틸벤-2,2'-디설폰산 (DIDS)인, 방법.
  26. 제21항에 있어서,
    상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
    (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디아세트아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메틸프로판아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메톡시아세트아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디메탄설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디사이클로프로판설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-아미노스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-메틸티오우레아); (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-이소프로필티오우레아); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)이소부티르아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-2-메톡시아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)메탄설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; N'-(4-{(E)-2-[4-(디메틸아미노)페닐]-1-에테닐}페닐)-N,N-디메틸설파미드; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필티오우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)우레아; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(메틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-사이클로프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(메틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-메틸티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-메틸티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-이소프로필벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N,N-디메틸벤즈아미드); (E)-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(모르폴리노메타논); (E)-5-(4-하이드록시스티릴)벤젠-1,3-디올(3,5,4'-트리하이드록시-트랜스-스틸벤); 및 레스베라트롤
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  27. 제21항에 있어서,
    상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
    (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(디메틸아미노-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 및 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  28. 제20항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    4-메틸퀴나졸린-2-카르복스아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 5,6-디메틸-2-메르캅토메틸벤즈이미다졸; (E)-1-(2-하이드록시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔-1-온; N4-부틸-6-클로로피리미딘-2,4-디아민; 1-테르모프신(thermopsine); 6-아미노-5-니트로소-2-페닐피리미딘-4(1H)-온; 및 4-(2-아미노-4-니트로페닐아미노)페닐
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  29. 제20항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    7-아자인돌-3-카르복스알데하이드; 2-아미노-4-페닐페놀; 3-(1-메틸-3-피롤리디닐)인돌; 1-메틸-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]퀴놀론; 2-아미노-5-니트로-1H-벤즈이미다졸; 2-(5-니트로-2-푸르푸릴리덴)아미노에탄올-N-옥사이드; 니푸라트론; 알파-메르캅토-N,2-나프틸아세트아미드; 1-테르모스핀; N4-부틸-6-클로로-2,4-피리미딘디아민; 2-(2-하이드록시-6-프로판-2-일옥시-사이클로헥실)아세트산; 6-아미노-5-니트로소-2-페닐-1H-피리미딘-4-온; 4-아미노-2-하이드록시페닐)아르손산; 스피로[1,2-디하이드로인덴-3,5'-이미다졸리딘]-2',4'-디온; N~4~-(4-메톡시페닐)-6-메틸피리미딘-2,4-디아민; 2-아미노-9-펜틸-3H-퓨린-6-티온; 2-(4-메톡시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔니트릴; 2-클로로피리미딘-4,6-디카르복스아미드; 2-아미노-3H-페녹사진-3-온; 2-메틸-N-벤질-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민; 4-(벤질아미노)-2-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘; 2-아미노-1-나프탈렌설폰산; N-sec-부틸-3-메틸벤즈아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 및 2-(2-메틸사이클로헥실리덴)하이드라진카르복스아미드
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  30. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 항체 또는 항체의 항원-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드 또는 단백질 결합 단백질인, 방법.
  31. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    miRNA; shRNA; siRNA; amiRNA; dsRNA, 안티센스 RNA 또는 리보자임
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 RNAi 작용제(RNAi agent)인, 방법.
  32. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 약제학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하는, 방법.
  33. 제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서,
    치료제의 투여를 추가로 포함하는, 방법.
  34. 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 검출가능하거나 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정함으로써 확인되는, 방법.
  35. 제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정하고, 그 수준을 건강한 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내에서 발견된 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준에 대비함으로써 확인되며,
    여기서 시험 샘플 내의 증가된 양의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성은 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제에 의한 치료를 필요로 하는 대상체의 지표가 되는, 방법.
  36. 제34항 또는 제35항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은
    웨스턴 블롯(Western blot); 면역침전; 효소-결합 면역흡수 검정(ELISA); 방사면역학적 검정(RIA); 샌드위치 검정; 단백질 동소 어레이(protein in situ array); 면역조직학적 염색; 방사면역측정 검정; 겔 확산 침전 반응; 면역확산 검정; 현장(in situ) 면역검정; 침전 반응; 면역형광 검정; 정량적 동소 단백질 분석(AQUA); 질량 분석 및 면역전기영동 검정
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는, 방법.
  37. 제34항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질, 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드를 사용하는 검정을 포함하는, 방법.
  38. 제34항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체 또는 항체 단편은 단일클론 항체인, 방법.
  39. 제34항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드는 검출가능한 표지로 표지되는, 방법.
  40. 제34항 또는 제35항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소 mRNA의 수준의 측정은
    RT-PCR; 정량적 RT-PCR; 교잡 검정; 노턴 블롯(Northern blot); 마이크로어레이 기반 발현 분석; 전사 증폭; 자기-지속 서열 복제; 고성능 서열 분석(high throughput sequencing); 및 RNA-Seq
    로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는 방법.
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소 활성의 활성의 측정은
    교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜(exome) 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 게놈 또는 그의 단백질의 전체 돌연변이 상태를 결정하는 것을 포함하며,
    여기서 정상 돌연변이 상태의 2% 이상의 돌연변이 상태는 DNA 편집 효소의 활성임을 나타내는, 방법.
  42. 제35항 또는 제36항 또는 제41항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)의 활성의 측정은
    교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 표적 유전자 IGH, BCL6, MYC, BCL11A, CD93, PIM1 및/또는 PAX5에서의 초돌연변이(hypermutation)의 상태를 결정하는 것을 포함하는, 방법.
  43. 제35항 또는 제36항에 있어서,
    상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)의 활성의 측정은 포스포(phospho)-H2AX 검정, 53BP1 검정, 또는 RAD51 검정을 사용하는 것을 포함하는, 방법.
  44. 세포사(cell death)를 일으키는 방법으로서,
    (e) DNA 편집 효소의 유효량을 세포에 투여하는 단계; 및
    (f) 이후에, 단계 (a)의 세포를 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제와 접촉시키는 단계를 포함하며,
    그럼으로써 세포사를 일으키는, 방법.
  45. 세포를 세포사에 감작(sensitize)시키는 방법으로서,
    (g) DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 사용에 의해 세포를 세포사에 감작시키기 위해 DNA 편집 효소의 치료학적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계; 및
    (h) 이후에, DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제를 대상체에게 투여하는 단계
    를 포함하는, 방법.
  46. 제44항 또는 제44항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소는
    폴리펩티드; DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산; 및 DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산을 포함하는 벡터
    로 이루어진 군으로부터 선택된 형태로 투여되는, 방법.
  47. 제44항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소는
    재조합 활성화 유전자 1(RAG1); 재조합 활성화 유전자 2(RAG2); 포자형성-특이적 단백질 11(SPO11); 아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사(APOBEC) 패밀리 구성원; 및 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  48. 제44항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소는 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)인, 방법.
  49. 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제인지를 결정하는 방법으로서,
    a) DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 시험 작용제와 접촉시키는 단계; 및
    b) 단계 a)의 세포의 세포 생존력을 결정하는 단계
    를 포함하며,
    여기서 감소된 세포 생존력은 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제임을 나타내는, 방법.
  50. 제49항에 있어서,
    c) DNA 편집 효소를 발현하지 않는 세포를 상기 시험 작용제와 접촉시키는 단계;
    d) 단계 c)의 세포의 세포 생존력을 결정하는 단계; 및
    e) 단계 b)의 생세포의 분율을 단계 d)의 생세포의 분율로 나눔으로써 비를 결정하는 단계
    를 추가로 포함하며,
    여기서 0.8 미만의 비는 시험 작용제가 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제임을 나타내는, 방법.
  51. 제49항 또는 제50항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소를 발현하는 세포는 AID를 발현하는 세포인, 방법.
  52. 제51항에 있어서,
    상기 AID를 발현하는 세포는 자극된 B 세포인, 방법.
  53. 제49항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포는 암성 세포인, 방법.
  54. 제49항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포는 DNA 편집 효소를 암호화하는 핵산 벡터로 형질감염된, 방법.
  55. 제49항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포는 CH12-F3, 3T3, CH12F3, 카코(Caco)-2, CCRF-CEM, CHO, CH12-F3, COS-7, HCT 116, HEK 293, HL-60, HepG2, 주르카트(Jurkat), KG-1, K-562, MCF-7, MDCK, MG-63, Mo-B, MOLT-4, 라모스(Ramos) (RA 1) 및 U2-OS로 이루어진 군으로부터 선택된 세포주(cell line)인, 방법.
  56. 제49항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 세포는 자가면역 세포인, 방법.
  57. 화학식 XXIV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
    [화학식 XXIV]
    Figure pct00063


    상기 화학식 XXIV에서,
    X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
  58. 제57항에 있어서,
    X는 나트륨인, 화합물.
  59. 화학식 VIII의 화합물, 그의 입체이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염:
    [화학식 VIII]
    Figure pct00064
  60. 화학식 X의 화합물, 그의 입체이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염:
    [화학식 X]
    Figure pct00065

  61. 화학식 XXV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
    [화학식 XXV]
    Figure pct00066


    상기 화학식 XXV에서,
    X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
  62. 제61항에 있어서,
    X는 나트륨인, 화합물.
  63. 화학식 XXXI의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
    [화학식 XXXI]
    Figure pct00067

    상기 화학식 XXXI에서,
    X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
  64. 제63항에 있어서,
    X는 나트륨인, 화합물.
  65. 화학식 XXXII의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
    [화학식 XXXII]
    Figure pct00068


    상기 화학식 XXXII에서,
    X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
  66. 제65항에 있어서,
    X는 나트륨인, 화합물.
  67. 화학식 XXXIII의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
    [화학식 XXXIII]
    Figure pct00069


    상기 화학식 XXXIII에서,
    X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
  68. 제67항에 있어서,
    X는 나트륨인, 화합물.
  69. 화학식 XXXIV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
    [화학식 XXXIV]
    Figure pct00070


    상기 화학식 XXXIV에서,
    X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
  70. 제69항에 있어서,
    X는 나트륨인, 화합물.
  71. 화학식 XXXV의 화합물, 그의 입체이성체, 또는 전구약물:
    [화학식 XXXV]
    Figure pct00071


    상기 화학식 XXXV에서,
    X는 나트륨, 칼륨, 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 바륨, 또는 아연이다.
  72. 제71항에 있어서,
    X는 나트륨인, 화합물.
  73. 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 것으로 결정된 대상체를 치료하기 위한 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 용도.
  74. 제73항에 있어서,
    상기 대상체는
    (c) 대상체로부터 유래된 생물학적 샘플을 얻는 단계; 및
    (d) DNA 편집 효소의 수준을 측정하는 단계
    에 의해 검출가능한 수준의 DNA 편집 효소를 갖는 것으로 결정되는, 용도.
  75. 대상체를 치료하기 위한 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 용도로서, 방법은
    (c) 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 대상체를 선택하는 단계; 및
    (d) 대상체에게 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하며,
    여기서 상승된 수준의 DNA 편집 효소란, DNA 편집 효소의 수준이 건강한 개체로부터의 동일한 유형의 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준보다 더 높은 수준의 것인 용도.
  76. 제73항에 있어서,
    상기 생물학적 샘플은 혈액 세포를 포함하는, 용도.
  77. 제73항에 있어서,
    상기 생물학적 샘플은 B 세포를 포함하는, 용도.
  78. 제73항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포 내의 DNA 편집 효소의 수준은 건강한 대상체로부터의 정상 세포에서보다 통계학적으로 유의하게 더 높은, 용도.
  79. 제73항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소는
    재조합 활성화 유전자 1(RAG1); 재조합 활성화 유전자 2(RAG2); 포자형성-특이적 단백질 11(SPO11); 아포지질단백질 B mRNA 편집 효소, 촉매 폴리펩티드-유사(APOBEC) 패밀리 구성원; 및 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  80. 제79항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소는 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)인, 용도.
  81. 제80항에 있어서,
    상승된 수준의 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)를 발현하는 B 세포 내의 AID의 수준은 건강한 대상체로부터의 비활성화된 B 세포에서 발현되는 AID의 수준보다 유의하게 더 높은, 용도.
  82. 제73항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 인간 대상체인, 용도.
  83. 제73항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 암성 세포인, 용도.
  84. 제73항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 암을 갖는, 용도.
  85. 제73항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 상기 생물학적 샘플 또는 세포는 자가면역 세포인, 용도.
  86. 제73항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는
    림프종, 백혈병, 및 형질 세포 신생물
    로 이루어진 군으로부터 선택된 이상을 갖는, 용도.
  87. 제86항에 있어서,
    상기 림프종은
    비호지킨 림프종; 버킷 림프종, 소 림프구성 림프종; 림프형질세포성 림프종; 말트 림프종; 여포성 림프종; 미만성 거대 B-세포 림프종; 및 T-세포 림프종
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  88. 제86항에 있어서,
    상기 백혈병은
    급성 림프모구성 백혈병(ALL), 버킷 백혈병; B-세포 백혈병; B-세포 급성 림프모구성 백혈병; 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 골수원성 백혈병(AML); 만성 골수원성 백혈병(CML); 및 T-세포 급성 림프모구성 백혈병(T-ALL)
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  89. 제86항에 있어서,
    상기 형질 세포 신생물은
    다발성 골수종; 형질 세포 골수종; 형질 세포 백혈병; 및 형질세포종
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  90. 제86항에 있어서,
    상기 대상체는
    상피 세포암; 결장암; 간암, 위암; 장관암; 식도암; 유방암; 폐암; 및 갑상선암
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 암을 갖는, 용도.
  91. 제73항 내지 제82항 또는 제85항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 대상체는 자가면역 질환을 갖는, 용도.
  92. 제91항에 있어서,
    상기 자가면역 질환은
    홍반성 루푸스; 비스코트-알드리치 증후군; 자가면역 림프증식성 증후군; 중증근무력증; 류마티스성 관절염(RA); 루푸스 신장염; 다발성 경화증; 전신성 홍반성 루푸스, 원판상 루푸스, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 피부 홍반성 루푸스(동창 홍반성 루푸스 포함), 만성 관절염, 쇼그렌 증후군, 염증성 만성 비부비동염, 결장염, 셀리악 질환, 염증성 장질환, 바렛 식도, 염증성 위염 자가면역 신장염, 자가면역 혈관염, 자가면역 간염, 자가면역 심장염, 자가면역 뇌염, 및 자가면역 매개 혈액학적 질환
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  93. 제73항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    Rad51; Rad51AP1; Rad51B; Rad51C; Rad51D; XRCC2; XRCC3; RAD54; RAD52; BRCA1; BRCA2; ATM; ATR; MRE11; RAD50; NBS1; WRN; BLM; RECQ4; LIG4; XRCC4; PRKDC; DCLRE1C; XRCC6; XRCC5; 및 XLF
    로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 발현 또는 활동을 감소시키는, 용도.
  94. 제73항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서,
    DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    소분자; 단백질; 펩티드; 항체; 항체 단편; 단백질 결합 단백질; 리보핵산; 데옥시리보핵산; 압타머; 펩티드 핵산(PNA); 및 잠금 핵산(LNA)
    으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  95. 제73항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 스틸벤, 스틸베노이드, 또는 그의 유도체인, 용도.
  96. 제95항에 있어서,
    상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는 화학식 V의 화합물, 또는 그의 입체이성체, 거울상 이성체, 전구약물, 또는 약제학적으로 허용되는 염인, 용도:
    [화학식 V]
    Figure pct00072


    상기 화학식 V에서,
    R1은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R2는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R3은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R4는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R5는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R6은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R7은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R8은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R9는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R10은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2, N=C=S, NHC(O)R21, NHC(O)OR21, NHC(S)R21, NHC(S)N(R22)2, NHSO2R21, NHSO2N(R22)2, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    X는 C(R21)2, -C(O)N(R22)-, -C(O)-, -C(O)O-, -S(O)-, -SO2- -CH(R11)CH(R12)-, -C(R11)=C(R12)-, 및
    Figure pct00073
    로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    여기서,
    R11은 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    R12는 수소, 할로겐, CF3, CN, C(O)R21, CO2R21, C(O)N(R22)2, OH, OR21, N(R22)2 NC(O)R21, NC(O)OR21, NC(S)R21, NC(S)N(R22)2, NSO2R21, NO2, N2-R22, SOR21, SO2R21, SO3R21, OP(O)(OH)2, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고;
    각각의 R21 은 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있고;
    각각의 R22는 수소, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C1-C10 알킬, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알케닐, 선택적으로 치환된 선형 또는 분지형 C2-C10 알키닐, 선택적으로 치환된 사이클릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다.
  97. 제95항에 있어서,
    상기 스틸벤 유도체는 4,4'디이소티오시아노스틸벤-2,2'-디설폰산 (DIDS)인, 용도.
  98. 제95항에 있어서,
    상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
    (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디아세트아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메틸프로판아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(2-메톡시아세트아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디메탄설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))디사이클로프로판설폰아미드; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-아미노스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-메틸티오우레아); (E)-1,1'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(3-이소프로필티오우레아); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)이소부티르아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-2-메톡시아세트아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)메탄설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; N'-(4-{(E)-2-[4-(디메틸아미노)페닐]-1-에테닐}페닐)-N,N-디메틸설파미드; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필티오우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)티오우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-메틸우레아; (E)-1-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)-3-이소프로필우레아; (E)-1-사이클로프로필-3-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)우레아; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-아세트아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-이소부티르아미도벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(2-메톡시아세트아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(메틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(사이클로프로판설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(1-메틸에틸설폰아미도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-((N,N-디메틸설파모일)아미노)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-사이클로프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(메틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-이소부티르아미도-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(메틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-에틸우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-이소부티르아미도-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(2-메톡시아세트아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-메틸티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-5-(3-이소프로필우레이도)-2-(2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-메틸티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필티오우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-에틸우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-6,6'-(에텐-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-이소프로필벤즈아미드); (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N,N-디메틸벤즈아미드); (E)-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(모르폴리노메타논); (E)-5-(4-하이드록시스티릴)벤젠-1,3-디올(3,5,4'-트리하이드록시-트랜스-스틸벤); 및 레스베라트롤
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  99. 제95항에 있어서,
    상기 스틸벤 또는 스틸벤 유도체는
    (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(프로판-2-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)사이클로프로판설폰아미드; 나트륨 (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-N,N'-(에텐-1,2-디일비스(4,1-페닐렌))비스(디메틸아미노-설폰아미드); (E)-N-(4-(4-(디메틸아미노)스티릴)페닐)프로판-2-설폰아미드; 나트륨 (E)-5-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-(4-(1-메틸에틸설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 나트륨 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); 나트륨 (E)-5-(3-에틸우레이도)-2-(4-(2-메톡시아세트아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-4,4'-(에텐-1,2-디일)비스(N-메틸벤즈아미드); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-사이클로프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-(사이클로프로판설폰아미도)-2-(4-(3-이소프로필우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-(4-(3-메틸티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 6,6'-(에탄-1,2-디일)비스(3-(3-이소프로필우레이도)벤젠설포네이트); (E)-5-아세트아미도-2-(4-(3-이소프로필티오우레이도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; (E)-5-아세트아미도-2-(4-(사이클로프로판설폰아미도)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트; 및 (E)-5-아세트아미도-2-(4-((N,N-디메틸설파모일)아미노)-2-설포네이토스티릴)벤젠설포네이트
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  100. 제94항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    4-메틸퀴나졸린-2-카르복스아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 5,6-디메틸-2-메르캅토메틸벤즈이미다졸; (E)-1-(2-하이드록시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔-1-온; N4-부틸-6-클로로피리미딘-2,4-디아민; 1-테르모프신; 6-아미노-5-니트로소-2-페닐피리미딘-4(1H)-온; 및 4-(2-아미노-4-니트로페닐아미노)페닐
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  101. 제94항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    7-아자인돌-3-카르복스알데하이드; 2-아미노-4-페닐페놀; 3-(1-메틸-3-피롤리디닐)인돌; 1-메틸-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]퀴놀론; 2-아미노-5-니트로-1H-벤즈이미다졸; 2-(5-니트로-2-푸르푸릴리덴)아미노에탄올-N-옥사이드; 니푸라트론; 알파-메르캅토-N,2-나프틸아세트아미드; 1-테르모스핀; N4-부틸-6-클로로-2,4-피리미딘디아민; 2-(2-하이드록시-6-프로판-2-일옥시-사이클로헥실)아세트산; 6-아미노-5-니트로소-2-페닐-1H-피리미딘-4-온; 4-아미노-2-하이드록시페닐)아르손산; 스피로[1,2-디하이드로인덴-3,5'-이미다졸리딘]-2',4'-디온; N~4~-(4-메톡시페닐)-6-메틸피리미딘-2,4-디아민; 2-아미노-9-펜틸-3H-퓨린-6-티온; 2-(4-메톡시페닐)-3-(피리딘-3-일)프로프-2-엔니트릴; 2-클로로피리미딘-4,6-디카르복스아미드; 2-아미노-3H-페녹사진-3-온; 2-메틸-N-벤질-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민; 4-(벤질아미노)-2-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘; 2-아미노-1-나프탈렌설폰산; N-sec-부틸-3-메틸벤즈아미드; 벤즈[h]이소퀴놀린-6-아민; 및 2-(2-메틸사이클로헥실리덴)하이드라진카르복스아미드
    로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
  102. 제73항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 항체 또는 항체의 항원-결합성 단편을 포함하는 폴리펩티드 또는 단백질 결합 단백질인, 용도.
  103. 제73항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는
    miRNA; shRNA; siRNA; amiRNA; dsRNA; 안티센스 RNA 또는 리보자임
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 RNAi 작용제인, 용도.
  104. 제73항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제는 약제학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하는, 용도.
  105. 제73항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서,
    치료제의 투여를 추가로 포함하는, 용도.
  106. 제73항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 검출가능하거나 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정함으로써 확인되는, 용도.
  107. 제73항 내지 제106항 중 어느 한 항에 있어서,
    검출가능하거나 상승된 수준의 DNA 편집 효소를 발현하는 세포를 갖는 상기 대상체는 상승된 수준을 가질 것으로 의심되는 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준을 측정하고, 그 수준을 건강한 대상체로부터 얻어진 생물학적 샘플 내에서 발견된 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성의 수준에 대비함으로써 확인되며,
    여기서 시험 샘플 내의 증가된 양의 DNA 편집 효소 폴리펩티드, mRNA, 또는 활성은 DNA 이본쇄 절단 수복의 억제제에 의한 치료를 필요로 하는 대상체의 지표가 되는, 용도.
  108. 제106항 또는 제107항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은
    웨스턴 블롯; 면역침전; 효소-결합 면역흡수 검정(ELISA); 방사면역학적 검정(RIA); 샌드위치 검정; 단백질 동소 어레이; 면역조직학적 염색; 방사면역측정 검정; 겔 확산 침전 반응; 면역확산 검정; 현장 면역검정; 침전 반응; 면역형광 검정; 정량적 동소 단백질 분석(AQUA); 질량 분석 및 면역전기영동 검정
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는, 용도.
  109. 제106항 또는 제107항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소 폴리펩티드의 수준의 측정은 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질, 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드를 사용하는 검정을 포함하는, 용도.
  110. 제106항 내지 제109항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체 또는 항체 단편은 단일클론 항체인, 용도.
  111. 제106항 내지 제110항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체, 항체 단편, 단백질 결합 단백질 또는 DNA 편집 효소 폴리펩티드에 결합되는 펩티드는 검출가능한 표지로 표지되는, 용도.
  112. 제106항 또는 제107항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소 mRNA의 수준의 측정은
    RT-PCR; 정량적 RT-PCR; 교잡 검정; 노턴 블롯; 마이크로어레이 기반 발현 분석; 전사 증폭; 자기-지속 서열 복제; 고성능 서열 분석; 및 RNA-Seq
    로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하는 것을 포함하는 용도.
  113. 제106항 또는 제107항에 있어서,
    상기 DNA 편집 효소의 활성의 측정은
    교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 게놈 또는 그의 단백질의 전체 돌연변이 상태를 결정하는 것을 포함하며,
    여기서 정상 돌연변이 상태의 2% 이상의 돌연변이 상태는 DNA 편집 효소의 활성임을 나타내는, 용도.
  114. 제106항 또는 제107항 또는 제113항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID) 활성의 활성의 측정은
    교잡; 고성능 서열 분석; 엑솜 서열 분석; 형광 동소 교잡(FISH), PCR, 및 게놈 서열 분석
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 검정을 사용하여 표적 유전자 IGH, BCL6, MYC, BCL11A, CD93, PIM1 및/또는 PAX5에서의 초돌연변이의 상태를 결정하는 것을 포함하는, 용도.
  115. 제106항 또는 제107항에 있어서,
    상기 활성화-유도 시티딘 데아미나제(AID)의 활성의 측정은 포스포(phospho)-H2AX 검정, 53BP1 검정, 또는 RAD51 검정을 사용하는 것을 포함하는, 용도.
KR1020147002239A 2011-06-27 2012-06-19 암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물 KR20140147797A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161501522P 2011-06-27 2011-06-27
US61/501,522 2011-06-27
PCT/US2012/043074 WO2013003112A1 (en) 2011-06-27 2012-06-19 Methods and compositions for treatment of cancer and autoimmune disease

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20140147797A true KR20140147797A (ko) 2014-12-30

Family

ID=46395740

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020147002239A KR20140147797A (ko) 2011-06-27 2012-06-19 암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물

Country Status (8)

Country Link
US (1) US10207988B2 (ko)
EP (1) EP2724156B1 (ko)
JP (1) JP2014527036A (ko)
KR (1) KR20140147797A (ko)
CN (1) CN103765212A (ko)
AU (1) AU2012275841A1 (ko)
CA (1) CA2839451A1 (ko)
WO (1) WO2013003112A1 (ko)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA201890869A3 (ru) 2010-06-03 2019-03-29 Фармасайкликс, Инк. Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (btk)
KR20140147797A (ko) 2011-06-27 2014-12-30 더 잭슨 래보라토리 암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물
CN104704129A (zh) 2012-07-24 2015-06-10 药品循环公司 与对布鲁顿酪氨酸激酶(btk)抑制剂的抗性相关的突变
CN104994858A (zh) 2012-11-02 2015-10-21 药品循环公司 Tec家族激酶抑制剂辅助疗法
US9302005B2 (en) 2013-03-14 2016-04-05 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer
EP3470081A1 (en) 2013-10-01 2019-04-17 Mayo Foundation for Medical Education and Research Methods for treating cancer in patients with elevated levels of bim
US20160340730A1 (en) * 2013-12-20 2016-11-24 Diogenix, Inc. Methods for evaluating neurological disease
WO2015143400A1 (en) 2014-03-20 2015-09-24 Pharmacyclics, Inc. Phospholipase c gamma 2 and resistance associated mutations
US10302653B2 (en) 2014-05-22 2019-05-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Distinguishing antagonistic and agonistic anti B7-H1 antibodies
EP3171896A4 (en) 2014-07-23 2018-03-21 Mayo Foundation for Medical Education and Research Targeting dna-pkcs and b7-h1 to treat cancer
US20170326098A1 (en) * 2014-09-22 2017-11-16 Middle Tennessee State University Cis-gnetin h and trans-gnetin h as therapeutic agents
TW201702218A (zh) * 2014-12-12 2017-01-16 美國杰克森實驗室 關於治療癌症、自體免疫疾病及神經退化性疾病之組合物及方法
WO2016112177A1 (en) * 2015-01-08 2016-07-14 Yale University Novel Compositions Useful for Killing DNA Repair-Deficient Cancer Cells, and Methods Using Same
JP6555708B2 (ja) * 2015-04-01 2019-08-07 学校法人北里研究所 リン脂質ヒドロペルオキシド依存性細胞死の検出方法及びキット
WO2017031036A1 (en) * 2015-08-14 2017-02-23 Gray Alana Lea Isothiocyanatostilbenes as a novel method and product for treating cancer
US10875923B2 (en) 2015-10-30 2020-12-29 Mayo Foundation For Medical Education And Research Antibodies to B7-H1
BR112018068128A2 (pt) * 2016-03-11 2019-01-15 Alcediag algoritmo e um método in vitro com base em edição de rna para selecionar o efeito particular induzido por compostos ativos
EP3436601B1 (en) 2016-03-31 2023-03-29 Centre National De La Recherche Scientifique Cytidine deaminase expression level in cancer as a new therapeutic target
CN105974125A (zh) * 2016-05-22 2016-09-28 杜护侠 一种心脑血管疾病特异性检测试剂盒
SG11201901432YA (en) * 2016-08-25 2019-03-28 Nantomics Llc Immunotherapy markers and uses therefor
CN106519007B (zh) * 2016-12-12 2019-07-02 王家祥 一种单链多肽及其在制备用于预防和治疗胃癌的药物中的应用
TW201920081A (zh) 2017-07-11 2019-06-01 美商維泰克斯製藥公司 作為鈉通道調節劑的羧醯胺
US11073462B2 (en) 2017-12-06 2021-07-27 Lightintegra Technology Inc. Non-activated platelet transfusion methods for enhancement of patient treatment outcomes
US20210085699A1 (en) * 2018-02-23 2021-03-25 The Jackson Laboratory Combination therapies for treating cancers
CN108186588A (zh) * 2018-03-13 2018-06-22 北京工业大学 包含n6-腙基-8-氮杂嘌呤类化合物的适用于口服给药的医药制剂
TWI698640B (zh) * 2018-04-23 2020-07-11 長庚醫療財團法人高雄長庚紀念醫院 用於檢測狼瘡性腎炎或評估狼瘡性腎炎風險的方法及其應用
CN108623683B (zh) * 2018-05-30 2021-06-04 福州迈新生物技术开发有限公司 抗Pax-5蛋白的单克隆抗体及其细胞株、制备方法和应用
CN110577953B (zh) * 2018-06-11 2024-02-20 深圳华大生命科学研究院 基因突变体及其应用
EP3883922A1 (en) * 2018-11-22 2021-09-29 Université de Nantes Disulfonate stilbenes for use in the treatment of proliferative diseases
CN110179820B (zh) * 2019-05-07 2022-11-04 上海交通大学医学院附属新华医院 抑制胃癌的药物组合物及其应用
CN112516145A (zh) * 2019-09-19 2021-03-19 华东师范大学 小分子化合物wk369在制备治疗卵巢癌药物中的应用
CN111411082B (zh) * 2020-03-26 2022-04-01 中山大学孙逸仙纪念医院 一种培养CD90posi细胞的培养基及其培养方法
CN113345525B (zh) * 2021-06-03 2022-08-09 谱天（天津）生物科技有限公司 一种用于高通量检测中减少协变量对检测结果影响的分析方法
CN115778962A (zh) * 2022-11-28 2023-03-14 中国医学科学院肿瘤医院 治疗男性食管癌患者的药物及其相关应用
CN116023512A (zh) * 2023-02-16 2023-04-28 浙江大学 一条靶向dna损伤修复蛋白的多肽及其用途
CN117275592B (zh) * 2023-11-17 2024-02-09 北京航空航天大学 一种基于Python的RMD模拟结果裂解反应路径的统计方法

Family Cites Families (132)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US548257A (en) 1895-10-22 Hay rake and loader
US3387050A (en) 1965-10-22 1968-06-04 Phillips Petroleum Co Production of stilbene and bibenzyl
US3828060A (en) 1969-07-31 1974-08-06 Procter & Gamble Heterocyclic nitrogen-and sulfur-containing optical brightener compounds
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4326055A (en) 1977-12-22 1982-04-20 Hoffmann-La Roche Inc. Stilbene derivatives
US4376110A (en) 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4366241A (en) 1980-08-07 1982-12-28 Syva Company Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays
US4517288A (en) 1981-01-23 1985-05-14 American Hospital Supply Corp. Solid phase system for ligand assay
US4534899A (en) 1981-07-20 1985-08-13 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
US4426330A (en) 1981-07-20 1984-01-17 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
DE3315437A1 (de) 1982-04-30 1983-11-10 Ricoh Co., Ltd., Tokyo Elektrophotographisches aufzeichnungsmaterial
JPS6122046A (ja) 1984-07-07 1986-01-30 Koichi Shiyudo スチルベン誘導体
DE3519280A1 (de) 1985-05-30 1986-12-04 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen Stilbenderivate und fungizide, die diese verbindungen enthalten
CA1291031C (en) 1985-12-23 1991-10-22 Nikolaas C.J. De Jaeger Method for the detection of specific binding agents and their correspondingbindable substances
US5322770A (en) 1989-12-22 1994-06-21 Hoffman-Laroche Inc. Reverse transcription with thermostable DNA polymerases - high temperature reverse transcription
US4987071A (en) 1986-12-03 1991-01-22 University Patents, Inc. RNA ribozyme polymerases, dephosphorylases, restriction endoribonucleases and methods
US5116742A (en) 1986-12-03 1992-05-26 University Patents, Inc. RNA ribozyme restriction endoribonucleases and methods
US4837028A (en) 1986-12-24 1989-06-06 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US4920016A (en) 1986-12-24 1990-04-24 Linear Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
CA1338645C (en) 1987-01-06 1996-10-15 George R. Pettit Isolation, structural elucidation and synthesis of novel antineoplastic substances denominated "combretastatins"
US4996237A (en) 1987-01-06 1991-02-26 Arizona Board Of Regents Combretastatin A-4
US4965343A (en) 1988-01-28 1990-10-23 Hoffmann-La Roche Inc. Method of peptide synthesis
CA1340955C (en) 1988-02-24 2000-04-11 Michael Klaus Stilbene derivatives
GB8824593D0 (en) 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Liposomes
DE3911221A1 (de) 1989-04-07 1990-10-11 Bayer Ag Verfahren zur herstellung von bifunktionellen, mindestens eine z-konfigurierte stilbengruppierung enthaltenden stilbenverbindungen, neue bifunktionelle, mindestens eine z-konfigurierte stilbengruppierung enthaltende stilbenverbindungen sowie die verwendung der stilbenverbindungen zur herstellung von polymeren
US6040138A (en) 1995-09-15 2000-03-21 Affymetrix, Inc. Expression monitoring by hybridization to high density oligonucleotide arrays
US5118937A (en) 1989-08-22 1992-06-02 Finnigan Mat Gmbh Process and device for the laser desorption of an analyte molecular ions, especially of biomolecules
US5045694A (en) 1989-09-27 1991-09-03 The Rockefeller University Instrument and method for the laser desorption of ions in mass spectrometry
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5356633A (en) 1989-10-20 1994-10-18 Liposome Technology, Inc. Method of treatment of inflamed tissues
US5225212A (en) 1989-10-20 1993-07-06 Liposome Technology, Inc. Microreservoir liposome composition and method
CA2040503A1 (en) 1990-04-25 1991-10-26 James E. Stefano Selective amplification system using q beta replicase
US5665710A (en) 1990-04-30 1997-09-09 Georgetown University Method of making liposomal oligodeoxynucleotide compositions
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
IL99068A (en) 1990-08-09 1998-01-04 Genta Inc Non-nucleotide binding reagents for oligomers
EP1231282A3 (en) 1990-12-06 2005-05-18 Affymetrix, Inc. Methods and compositions for identification of polymers
JP3220180B2 (ja) 1991-05-23 2001-10-22 三菱化学株式会社 薬剤含有タンパク質結合リポソーム
KR100249110B1 (ko) 1992-05-06 2000-04-01 다니엘 엘. 캐시앙 핵산 서열 증폭 방법, 이에 이용되는 조성물 및 키트
US5430062A (en) 1992-05-21 1995-07-04 Research Corporation Technologies, Inc. Stilbene derivatives as anticancer agents
CA2149889A1 (en) 1992-11-20 1994-06-09 Ralph C. Dornburg Cell-type specific gene transfer using retroviral vectors containing antibody-envelope fusion proteins
JP3351476B2 (ja) 1993-01-22 2002-11-25 三菱化学株式会社 リン脂質誘導体及びそれを含有するリポソーム
US5869337A (en) 1993-02-12 1999-02-09 President And Fellows Of Harvard College Regulated transcription of targeted genes and other biological events
US5395619A (en) 1993-03-03 1995-03-07 Liposome Technology, Inc. Lipid-polymer conjugates and liposomes
CA2135488A1 (en) 1993-03-10 1994-09-15 Koichi Hashimoto Stilbene derivative and stilbene analog derivative, and use thereof
US6191105B1 (en) 1993-05-10 2001-02-20 Protein Delivery, Inc. Hydrophilic and lipophilic balanced microemulsion formulations of free-form and/or conjugation-stabilized therapeutic agents such as insulin
ATE242485T1 (de) 1993-05-28 2003-06-15 Baylor College Medicine Verfahren und massenspektrometer zur desorption und ionisierung von analyten
US5837832A (en) 1993-06-25 1998-11-17 Affymetrix, Inc. Arrays of nucleic acid probes on biological chips
US5731353A (en) 1993-09-08 1998-03-24 Ajinomoto Co., Inc. Stilbene derivatives and pharmaceutical compositions containing them
TW325458B (en) 1993-09-08 1998-01-21 Ajinomoto Kk Stilbene derivatives and pharmaceutical compositions comprising the same for anti-cancer
US5583973A (en) 1993-09-17 1996-12-10 Trustees Of Boston University Molecular modeling method and system
US6309823B1 (en) 1993-10-26 2001-10-30 Affymetrix, Inc. Arrays of nucleic acid probes for analyzing biotransformation genes and methods of using the same
US5540935A (en) 1993-12-06 1996-07-30 Nof Corporation Reactive vesicle and functional substance-fixed vesicle
JPH07225558A (ja) 1994-02-14 1995-08-22 Bandai Co Ltd 磁気描画装置
KR0165729B1 (ko) 1994-02-18 1999-03-20 로베르트 뢰머 스틸벤 기재물질, 그 제조방법 및 그 사용
US5648211A (en) 1994-04-18 1997-07-15 Becton, Dickinson And Company Strand displacement amplification using thermophilic enzymes
US6048903A (en) 1994-05-03 2000-04-11 Robert Toppo Treatment for blood cholesterol with trans-resveratrol
US5543152A (en) 1994-06-20 1996-08-06 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US6379897B1 (en) 2000-11-09 2002-04-30 Nanogen, Inc. Methods for gene expression monitoring on electronic microarrays
US5820873A (en) 1994-09-30 1998-10-13 The University Of British Columbia Polyethylene glycol modified ceramide lipids and liposome uses thereof
US5670356A (en) 1994-12-12 1997-09-23 Promega Corporation Modified luciferase
US5561122A (en) 1994-12-22 1996-10-01 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Combretastatin A-4 prodrug
US5612894A (en) 1995-02-08 1997-03-18 Wertz; David H. System and method for molecular modeling utilizing a sensitivity factor
JP3163391B2 (ja) 1995-03-07 2001-05-08 味の素株式会社 スチルベン誘導体及びそれを含有する制癌剤
GB9507238D0 (en) 1995-04-07 1995-05-31 Isis Innovation Detecting dna sequence variations
US5756122A (en) 1995-06-07 1998-05-26 Georgetown University Liposomally encapsulated nucleic acids having high entrapment efficiencies, method of manufacturer and use thereof for transfection of targeted cells
US6187757B1 (en) 1995-06-07 2001-02-13 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Regulation of biological events using novel compounds
US5539878A (en) 1995-06-16 1996-07-23 Elonex Technologies, Inc. Parallel testing of CPU cache and instruction units
US5858397A (en) 1995-10-11 1999-01-12 University Of British Columbia Liposomal formulations of mitoxantrone
US5849954A (en) 1996-01-18 1998-12-15 Research Corporation Technologies, Inc. Method of peptide synthesis
US5858401A (en) 1996-01-22 1999-01-12 Sidmak Laboratories, Inc. Pharmaceutical composition for cyclosporines
US6218108B1 (en) 1997-05-16 2001-04-17 Research Corporation Technologies, Inc. Nucleoside analogs with polycyclic aromatic groups attached, methods of synthesis and uses therefor
JPH1081673A (ja) 1996-09-06 1998-03-31 Ajinomoto Co Inc 複素環誘導体、及びそれを含有する制癌剤
US6465611B1 (en) 1997-02-25 2002-10-15 Corixa Corporation Compounds for immunotherapy of prostate cancer and methods for their use
JP3756313B2 (ja) 1997-03-07 2006-03-15 武 今西 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体
NZ516848A (en) 1997-06-20 2004-03-26 Ciphergen Biosystems Inc Retentate chromatography apparatus with applications in biology and medicine
CA2294988C (en) 1997-07-01 2015-11-24 Isis Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal
US6022998A (en) 1997-07-24 2000-02-08 Mita Industrial Co., Ltd. Stilbene derivative and method for producing the same
US6794499B2 (en) 1997-09-12 2004-09-21 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
PT1068870E (pt) 1998-04-03 2006-10-31 Ajinomoto Kk Agentes antitumorais
US6406921B1 (en) 1998-07-14 2002-06-18 Zyomyx, Incorporated Protein arrays for high-throughput screening
US6913880B1 (en) 1998-10-09 2005-07-05 Xgene Corporation Method for determining transcription factor activity and its technical uses
JP3646012B2 (ja) 1998-10-29 2005-05-11 京セラミタ株式会社 電子写真感光体
US6361815B1 (en) 1998-12-21 2002-03-26 Pure World Botanicals, Inc. Products comprising trihydroxystilbenes and derivatives thereof and methods for their manufacture and use
AU3243300A (en) 1999-02-23 2000-09-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Multiparticulate formulation
US20020137698A1 (en) 1999-03-01 2002-09-26 Takanori Ohnishi Antisense inhibition of rad51
CA2368169C (en) 1999-03-18 2012-07-10 Exiqon A/S Detection of mutations in genes by specific lna primers
AU4657500A (en) 1999-04-21 2000-11-02 Pangene Corporation Locked nucleic acid hybrids and methods of use
US7321050B2 (en) 1999-12-06 2008-01-22 Welichem Biotech Inc. Anti-inflammatory and psoriasis treatment and protein kinase inhibition by hydroxy stilbenes and novel stilbene derivatives and analogues
US7429466B2 (en) 2000-01-24 2008-09-30 Hypromatrix, Inc Methods and arrays for detecting biological molecules
US6618679B2 (en) 2000-01-28 2003-09-09 Althea Technologies, Inc. Methods for analysis of gene expression
IT1318539B1 (it) 2000-05-26 2003-08-27 Italfarmaco Spa Composizioni farmaceutiche a rilascio prolungato per lasomministrazione parenterale di sostanze idrofile biologicamente
CA2419490C (en) 2000-08-15 2010-01-26 Discerna Limited Functional protein arrays
US20020058708A1 (en) 2000-08-16 2002-05-16 Inman Wayne D. Compositions containing hypotriglyceridemically active stilbenoids
WO2002028875A2 (en) 2000-10-04 2002-04-11 Cureon A/S Improved synthesis of purine locked nucleic acid analogues
JP2004517821A (ja) 2000-10-27 2004-06-17 アベンティス・ファーマ・ソシエテ・アノニム 癌治療のためのカンプトセシン及びスチルベン誘導体からなる組合せ
WO2002050007A2 (en) 2000-12-21 2002-06-27 Cancer Research Technology Limited Substituted stilbenes, their reactions and anticancer activity
GB0031263D0 (en) 2000-12-21 2001-01-31 Paterson Inst For Cancer Res Materials and methods for synthesizing stilbenes
WO2002086096A2 (en) 2001-01-23 2002-10-31 University Of Rochester Medical Center Methods of producing or identifying intrabodies in eukaryotic cells
WO2002086168A1 (en) 2001-04-19 2002-10-31 Ciphergen Biosystems, Inc. Biomolecule characterization using mass spectrometry and affinity tags
EP1390497A2 (en) 2001-05-25 2004-02-25 Genset Human cdnas and proteins and uses thereof
US7112408B2 (en) 2001-06-08 2006-09-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Detection of ovarian cancer based upon alpha-haptoglobin levels
US7053195B1 (en) 2001-06-12 2006-05-30 Syngenta Participatious Ag Locked nucleic acid containing heteropolymers and related methods
US20030013208A1 (en) 2001-07-13 2003-01-16 Milagen, Inc. Information enhanced antibody arrays
WO2003017177A2 (en) 2001-08-13 2003-02-27 Beyong Genomics, Inc. Method and system for profiling biological systems
AU2002323151A1 (en) 2001-08-13 2003-03-03 University Of Pittsburgh Application of lipid vehicles and use for drug delivery
US20030129665A1 (en) 2001-08-30 2003-07-10 Selvan Gowri Pyapali Methods for qualitative and quantitative analysis of cells and related optical bio-disc systems
US7811996B2 (en) * 2001-11-02 2010-10-12 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for prevention and treatment of inflammatory disease, autoimmune disease, and transplant rejection
BR0307944A (pt) 2002-02-25 2005-02-01 Kudos Pharm Ltd Piranonas úteis como inibidores de atm
US20030215858A1 (en) 2002-04-08 2003-11-20 Baylor College Of Medicine Enhanced gene expression system
AU2003239152A1 (en) 2002-04-23 2003-11-10 Millipore Corporation Sample preparation of biological fluids for proteomic applications
US7569575B2 (en) 2002-05-08 2009-08-04 Santaris Pharma A/S Synthesis of locked nucleic acid derivatives
WO2003094833A2 (en) 2002-05-10 2003-11-20 Orchid Chemicals & Pharmaceuticals Limited A new stereoselective route to produce tris-o-substituted-(e)-( 3,5-dihydroxyphenyl)-2-(4- hydroxyphenyl)ethene
WO2004009539A2 (en) 2002-07-19 2004-01-29 Orchid Chemicals And Pharmaceuticals Limited Method for the conversion of a z-isomer into e-isomer
US20060019932A1 (en) * 2002-09-06 2006-01-26 Mancini Joseph A Treatment of rheumatoid arthritis by inhibition of pde4
EP1418164A1 (en) 2002-11-07 2004-05-12 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) New stilbene derivatives and their use as aryl hydrocarbon receptor ligand antagonists
CA2458085A1 (en) 2003-03-21 2004-09-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Transcriptional activity assay
MXPA06001599A (es) 2003-08-13 2006-05-19 Kudos Pharm Ltd Aminopironas y su uso como inhibidores de atm.
EP1663926A2 (en) 2003-09-05 2006-06-07 DSM IP Assets B.V. Process for the preparation of stilbene derivatives
EP1753708B1 (en) 2004-01-20 2018-02-21 Brigham Young University Novel sirtuin activating compounds and methods for making the same
WO2005087139A1 (en) 2004-03-15 2005-09-22 Baker Medical Research Institute Treating valve failure
WO2006122156A2 (en) 2005-05-09 2006-11-16 Hydra Biosciences, Inc. Compounds for modulating trpv3 function
US20070213292A1 (en) 2005-08-10 2007-09-13 The Rockefeller University Chemically modified oligonucleotides for use in modulating micro RNA and uses thereof
US20070049588A1 (en) 2005-08-31 2007-03-01 Kudos Pharmaceuticals Limited Atm inhibitor
US20100048923A1 (en) 2005-10-21 2010-02-25 Hiroshi Nishida ATR Inhibitor
US20090182003A1 (en) * 2006-01-13 2009-07-16 President And Fellows Of Harvard College Methods and Compositions for Treatment Cell Proliferative Disorders
DE112007000790T5 (de) 2006-03-28 2009-04-23 Council Of Scientific & Industrial Research Einstufiges mikrowelleninduziertes Verfahren zur Herstellung von substituierten Stilbenen und deren Analoga
FR2904311B1 (fr) 2006-07-28 2013-01-11 Clariant Specialty Fine Chem F Nouveau procede de synthese de derives (e) stilbeniques perm permettant d'obtenir le resveratrol et le piceatannol
US7781580B2 (en) 2007-04-23 2010-08-24 Virginia Commonwealth University Stilbene derivatives as new cancer therapeutic agents
US8541476B2 (en) 2007-09-14 2013-09-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compounds for treatment of malignant tumors
WO2010019898A1 (en) 2008-08-14 2010-02-18 Zygem Corporation Limited Temperature controlled nucleic-acid detection method suitable for practice in a closed-system
KR20140147797A (ko) 2011-06-27 2014-12-30 더 잭슨 래보라토리 암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
EP2724156A1 (en) 2014-04-30
CN103765212A (zh) 2014-04-30
WO2013003112A9 (en) 2013-02-28
JP2014527036A (ja) 2014-10-09
AU2012275841A1 (en) 2014-01-16
CA2839451A1 (en) 2013-01-03
WO2013003112A1 (en) 2013-01-03
US20130184342A1 (en) 2013-07-18
US10207988B2 (en) 2019-02-19
EP2724156B1 (en) 2017-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20140147797A (ko) 암 및 자가면역 질환의 치료 방법 및 조성물
AU2020270508B2 (en) C/EBP alpha short activating RNA compositions and methods of use
AU2020202555B2 (en) Novel fusion molecules and uses thereof
US20210189342A1 (en) Compositions and methods for modulating monocyte and macrophage inflammatory phenotypes and immunotherapy uses thereof
KR102301464B1 (ko) 종양 세포에 의한 면역 억제를 감소시키기 위한 방법 및 조성물
RU2722784C2 (ru) Лечение злокачественных опухолей с применением комбинаций ингибиторов erk и raf
US20190300967A1 (en) Compositions and methods for predicting response and resistance to ctla4 blockade in melanoma using a gene expression signature
KR20190009804A (ko) 비-erk mapk 경로 억제제-내성 암을 치료하기 위한 방법 및 조성물
US20220389519A1 (en) Biomarkers predictive of anti-immune checkpoint response
KR20230011932A (ko) 신생물 질환의 치료를 위한 kif18a 저해제
KR20120082906A (ko) 자가포식현상-향상 유전자 생성물의 조절을 통한 자가포식현상의 조절 방법
US11821042B2 (en) Targeting chromosomal instability and downstream cytosolic DNA signaling for cancer treatment
KR20170096056A (ko) 세포사 유도제, 세포 증식 억제제 및 세포의 증식 이상에서 기인하는 질환의 치료용 의약 조성물
US20200300859A1 (en) Modulating biomarkers to increase tumor immunity and improve the efficacy of cancer immunotherapy
EP1602926A1 (en) Novel means and methods for the treatment of hearing loss and phantom hearing
WO2021162981A2 (en) Methods and compositions for identifying castration resistant neuroendocrine prostate cancer
CN109312407A (zh) 用于癌症的诊断和治疗方法
WO2021183218A1 (en) Compositions and methods for modulating the interaction between ss18-ssx fusion oncoprotein and nucleosomes
TW202309274A (zh) 產生成熟角膜內皮細胞之方法
US20220265798A1 (en) Cancer vaccine compositions and methods for using same to prevent and/or treat cancer
US20210324478A1 (en) Compositions and methods for identification assessment, prevention, and treatment of ewing sarcoma using tp53 dependency biomarkers and modulators
KR20190126812A (ko) 질환 진단용 바이오마커
KR20110036560A (ko) 대장암 진단용 조성물 및 그 용도
CA2431585A1 (en) Compositions and methods related to the minn1 tumor suppressor gene and protein

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid