KR20140015113A - 기도 감염의 예방 및/또는 치료를 위한 일가, 이가 및 삼가 항 인간 호흡기 세포융합 바이러스 (ｈｒｓｖ) 나노바디 구조물 - Google Patents
기도 감염의 예방 및/또는 치료를 위한 일가, 이가 및 삼가 항 인간 호흡기 세포융합 바이러스 (ｈｒｓｖ) 나노바디 구조물 Download PDFInfo
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Abstract
hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열뿐만 아니라, 하나 이상의 그러한 아미노산 서열을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 화합물 또는 구조물, 및 특히 단백질 및 폴리펩티드가 제공된다. 본 발명에 의해 제공되는 아미노산 서열, 폴리펩티드 및 치료학적 화합물 및 조성물은 향상된 안정성, 보다 덜한 면역원성, 및/또는 hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 결합력(avidity)을 나타낸다. 본 발명은 또한 예방학적 및/또는 치료학적 목적을 위한 상기 아미노산 서열, 폴리펩티드, 화합물 또는 구조물의 용도에 관한 것이다.
Description
본 발명은 hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합(본원에 정의된 바와 같음)할 수 있는 아미노산 서열뿐만 아니라, 1개 이상의 그러한 아미노산 서열을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 화합물 또는 구조물, 특히 단백질 및 폴리펩티드(각각 "본 발명의 아미노산 서열(들)", "본 발명의 화합물(들)", "본 발명의 구조물(들)", 및 "본 발명의 폴리펩티드(들)"로도 본원에 지칭됨)에 관한 것이다.
본 발명은 또한 그러한 아미노산 서열 및 폴리펩티드를 코딩하는 핵산("본 발명의 핵산(들)" 또는 "본 발명의 뉴클레오티드 서열(들)"로도 본원에 지칭됨); 그러한 아미노산 서열 및 폴리펩티드의 제조 방법; 그러한 아미노산 서열 또는 폴리펩티드를 발현하거나 발현할 수 있는 숙주 세포; 그러한 아미노산 서열, 폴리펩티드, 화합물 또는 구조물, 핵산 및/또는 숙주 세포를 포함하는 조성물, 특히 약학적 조성물; 및 특히 예방학적 및/또는 치료학적 목적, 예컨대 본원에 언급된 예방학적 및/또는 치료학적 목적을 위한, 상기 아미노산 서열, 폴리펩티드, 화합물 또는 구조물, 핵산, 숙주 세포 및/또는 조성물의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 다른 양태, 실시양태, 이점 및 용도는 본원의 추가 설명을 통해 더욱 분명해질 것이다.
인간 호흡기 세포융합 바이러스(human respiratory syncytial virus: hRSV)는 파라마익소비리다에( Paramyxoviridae ) 종의 일원이고, 바이러스 입자의 스파이크를 만드는 2개의 주요 표면 당단백질을 가지는 외피 보유 바이러스이다. 이들 당단백질 중 하나(단백질 G)는 바이러스가 세포 표면에 결합하는 것을 매개하는 부착 단백질이다. 다른 당단백질(단백질 F 또는 융합체)은 바이러스막과 세포막의 융합을 매개하여, 바이러스 뉴클레오캅시드가 세포의 세포질에 침투되도록 한다. G 또는 F 당단백질에 의해 매개되는 단계의 억제는 감염 사이클의 초기 단계를 차단하고, 바이러스 감염도를 중화한다. 그러므로, G 또는 F에 대해 유도되고 이들의 각 활성을 억제하는 항체는 바이러스 감염도를 중화할 수 있고, hRSV 감염으로부터 보호할 수 있다. F 단백질은 잘 보존되고, 활성화 시에 형태 변화를 겪는 삼량체성 스파이크를 형성한다.
hRSV는 유아 및 매우 어린 아동의 심한 하기도 감염(기관지염 및 폐렴)의 주요 원인이고, 겨울철 수개월간 연례 유행병이다. 이 바이러스는 또한 기저 심폐 장애를 가지는 노령자 및 성인 간의 상당한 질환 부담을 유발하고/하거나, 면역억제 상태도 또한 심한 hRSV 질환을 앓을 위험에 처해 있다. 면역 반응은 재감염을 예방하지 못한다.
hRSV 감염의 예방에 유용한 백신이 없다. 시중 입수가능한 유일의 약물 제품은 심한 hRSV 감염을 겪을 위험이 매우 큰 아동에게 예방학적으로 사용되는 바이러스 당단백질(단백질 F) 중 하나에 대해 유도되는 인간화 단클론 항체(시나지스(Synagis)
)이다. 시나지스
의 사용 제한은 적어도 부분적으로 그 제품의 높은 원가로 인한 것이다. 명백히, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료를 위한, 향상되고/되거나 보다 저렴한 예방제 및/또는 치료제가 요망된다.
발명의 개요
본 발명은, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고 종래 기술의 아미노산 서열 및 항체와 대비하여, 다른 유리한 성질(예컨대, 예를 들어 향상된 제조 용이성 및/또는 감소된 자재 비용)뿐만 아니라, 향상된 예방학적, 치료적 및/또는 약물학적 성질을 가지는 아미노산 서열("본 발명의 아미노산 서열(들)"로도 지칭됨), 폴리펩티드("본 발명의 폴리펩티드(들)"로도 지칭됨), 및 치료학적 화합물 및 조성물을 제공한다. 이 향상되고 유리한 성질들은 본원의 추가 설명을 통해 명백해질 것이다. 제한되는 것은 아니나, 본 발명에 의해 제공되는 아미노산 서열, 폴리펩티드 및 치료학적 화합물 및 조성물은 향상된 안정성, 보다 적은 면역원성, hRSV의 단백질 F에의 향상된 결합, hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 결합력(avidity), 중화 hRSV에 대한 향상된 효능(efficacy) 및/또는 강도(potency)(본원에 정의된 바와 같음), hRSV의 단백질 F에 대한 증가된 선택도를 나타내고/거나, hRSV의 단백질 F의 표적 숙주 세포 및/또는 그것의 막과의 상호작용을 부분적으로 또는 바람직하게는 완전히 차단할 수 있다. 이들은 hRSV 감염도의 조절, 억제 및/또는 방지, 표적 숙주 세포(의 세포막)와의 hRSV 융합의 조절, 억제 및/또는 방지, 및/또는 표적 숙주 세포 내 hRSV 침투의 조절(본원에 정의된 바와 같음), 억제 및/또는 방지에 의해, hRSV을 중화할 수 있다. 이들은 hRSV의 상이한 균주 및/또는 다른 hRSV 도피 돌연변이체와 교차-반응성이거나, 그것들을 중화할 수 있다.
제1 양태에서, 본 발명은 hRSV의 단백질 F 상의 한 특정 에피토프에 결합하는 데 특히 적당한 아미노산 잔기의 다수의 신장부(stretch)(본원에 정의된 바와 같음)를 제공한다. 아미노산 잔기의 이들 신장부는, 특히 본 발명의 아미노산 서열의 항원 결합 부위(의 부분)를 형성하는 방식으로, 본 발명의 아미노산 서열 내에 존재하거나 그 서열 내에 도입될 수 있다. 생성되는 아미노산 서열은 hRSV의 단백질 F의 항원 부위 II(즉, hRSV의 단백질 F의 아미노산 잔기 250-275)에 있거나, 그것의 일부를 형성하거나 그것과 중복되거나(즉, 1차 구조 또는 3차 구조임), 또는 상기 부분에 매우 인접하는(즉, 1차 구조 또는 3차 구조임), hRSV의 단백질 F 상의 한 특정 에피토프에 결합할 수 있다.
따라서, 한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 아미노산 서열을 제공한다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김(Kabat numbering)에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 1개의 신장부가 하기의 것들로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열 내에 항상 존재하고, 아미노산 잔기의 제2 신장부는 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되도록 하는,
아미노산 잔기의 2개 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열을 제공한다.
더욱 더 바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열은
아미노산 잔기의 제1 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 또는
아미노산 잔기의 제2 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제3 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
아미노산 잔기의 3개 이상의 신장부를 포함한다.
아미노산 잔기의 하나 이상의 상기 특정 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 예를 들어 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 측정되고/되거나 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도와 같은 향상된 성질을 나타냈다.
본 발명의 아미노산 서열은 특히 도메인 항체(또는 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열), 단일 도메인 항체(또는 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열), "dAb"(또는 dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열) 또는 나노바디(Nanobody)
(본원에 정의된 바와 같고, 이에는 VHH 서열이 포함되나 이에 제한되지 않음); 기타 단일 가변 도메인, 또는 이들 중 임의의 것의 임의의 적당한 단편일 수 있다.
이와 관련하여, 본 발명의 아미노산 서열은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서 CDR2은 하기의 것들로부터 선택된다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨)을 가지고;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
이들 바람직한 상보성 결정 영역(CDR2 서열)은 또한 "본 발명의 CDR2 (들)"로도 지칭된다.
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서
CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
a) 서열 번호 102; 또는
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
CDR1 또는 CDR3 중 적어도 하나는 하기의 것들로부터 선택된다:
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR1:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및/또는
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR3:
e) 서열 번호 121; 또는
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
더욱 더 바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서
- CDR1은 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102; 또는
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR3는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 구체적 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 적어도 서열 번호 102를 포함한다. 바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121을 포함한다.
본 발명은 또한 hRSV의 단백질 F에 결합하는데 특히 적당한 다수의 인간화 아미노산 서열을 제공한다. 본 발명의 아미노산 서열은 인간 대상에게 투여할 때 감소된 면역원성을 나타낸다. 또한, 본 발명의 아미노산 서열은, 그것의 상응하는 야생형 아미노산 서열(PCT 출원 PCT/EP2009/056975 (발명의 명칭: "Amino acid sequences directed against envelope proteins of a virus and polypeptides comprising the same for the treatment of viral diseases" 2009년 6월 5일 Ablynx N.V. 출원)에 기재된 바와 같음)과 대비하여, 예를 들어 hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도와 같은 기타 향상된 성질을 나타낸다.
따라서, 또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열을 제공한다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열은 서열 번호 60-76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열을 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 아미노산 서열은 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열을 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열은 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열은 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열을 제공한다:
a) 서열 번호 146-153; 및
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열은 서열 번호 146-153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열을 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153; 및
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지며(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 아미노산 서열은 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명은 안정성 연구 중에 저장 시 증가된 안정성을 나타내고 hRSV의 단백질 F 결합에 특히 적합화된 다수의 서열 최적화 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 제공한다. 본 발명의 아미노산 서열은 N-말단의 감소된 파이로글루타메이트 번역후 변형을 나타내고, 이에 따라 증가된 산물 안정성을 나타낸다. 또한, 본 발명의 아미노산 서열은 그것의 상응하는 모 아미노산 서열([PCT 출원 PCT/EP2009/056975 발명의 명칭: "Amino acid sequences directed against envelope proteins of a virus and polypeptides comprising the same for the treatment of viral diseases", 2009년 6월 5일 Ablynx N.V. 출원]에 기재된 바와 같음)과 대비하여, 예를 들어 보다 덜한 면역원성, hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도와 같은 기타 향상된 성질을 나타낸다.
따라서, 본 발명의 한 양태에서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 제공된다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명에 의해 제공되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 바람직하게 본질적으로 단리된 형태(본원에 정의된 바와 같음)이거나, 본 발명의 1개 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 1개 이상의 추가의 아미노산 서열 또는 나노바디
(하나 이상의 적당한 링커를 통해 임의적으로 연결됨)를 포함할 수 있는 본 발명의 단백질 또는 폴리펩티드("본 발명의 폴리펩티드" 또는 "본 발명의 단백질"로도 지칭됨)의 일부를 형성한다.
따라서, 또 다른 양태에서, 본 발명은 또한 본 발명의 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
(또는 이의 적당한 단편)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 단백질 또는 폴리펩티드(각기 "본 발명의 폴리펩티드"로도 본원에서 지칭됨)에 관한 것이다.
예를 들어 또한 비제한적으로, 본 발명의 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 그러한 단백질 또는 폴리펩티드에서 결합 단위로 사용되어, 본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 일가, 다가 또는 다중파라토픽 폴리펩티드 모두를 각기 제공할 수 있다. 이에 따라, 본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 일가 구조물인 폴리펩티드에 관한 것이다. 이에 따라, 본 발명은 또한 예를 들어 이가 또는 삼가 폴리펩티드와 같은 다가 폴리펩티드인 폴리펩티드에 관한 것이다. 본 발명은 또한 예를 들어 이중파라토픽 또는 삼중파라토픽 폴리펩티드와 같은 다중파라토픽 폴리펩티드인 폴리펩티드에 관한 것이다.
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 본 발명의 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
(상기 기재된 바와 같음)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 아미노산 서열로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 양태에서, 본 발명은 1개의 신장부가 하기의 것들로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 다가 폴리펩티드의 일부를 형성하는 아미노산 서열 내에 항상 존재하게 되고, 아미노산 잔기의 제2 신장부는 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되게 되는,
아미노산 잔기의 2개 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
바람직한 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 아미노산 잔기의 3개 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서 아미노산 잔기의 제1 신장부가 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제2 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 보다 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단,
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제3 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서 CDR2은 하기의 것들로부터 선택된다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서 CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102; 또는
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
CDR1 또는 CDR3 중 적어도 하나는 하기의 것들로부터 선택되고:
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR1:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및/또는
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR3:
e) 서열 번호 121; 또는
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
바람직하게, 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있고, 여기에서
- CDR1는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102; 또는
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR3은 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 구체적 양태에서, 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 적어도 서열 번호 102를 포함하고, 바람직하게는 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121을 포함하는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 60-76으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 65 및 76으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 60-76으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 75 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 65 및 76으로 구성된 군으로부터 선택되는 3개 이상의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명의 한 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 62를 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 65를 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 76을 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 146-153으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지며(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 146-149 및 151-153으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153과 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 146-153과 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열은
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지며(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 146-149 및 151-153으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 138-141 및 154-157로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 138-141 및 154-157로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 77-79 및 158;
b) 서열 번호 77-79 및 158 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및/또는 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 폴리펩티드는, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 77-79 및 158 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 78 및 79;
b) 서열 번호 78 및 79 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및/또는 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 78 또는 79를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 77의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 78의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 79의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 158의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 159-161 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 폴리펩티드가
- 서열 번호 159와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 160과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 161과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 159-161을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 142-145 및 162-165;
b) 서열 번호 142-145 및 162-165 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내에 포함되는 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 142-145 및 162-165 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
이들 서열을 가지는 폴리펩티드는 예를 들어 향상된 안정성, 보다 적은 면역원성, 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도와 같은, 치료학적, 예방학적 및/또는 약물학적 활성제로서 사용하기에 유리한 성질을 나타낸다.
본 발명은 또한 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드(또는 이의 적당한 단편)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위를 추가로 포함하는, 화합물 또는 구조물, 및 특히 단백질 또는 폴리펩티드(이는 또한 "본 발명의 화합물(들)")에 관한 것이다. 본원의 추가 개시내용으로부터 숙련가에게 명백하듯이, 그러한 추가의 기, 잔기, 부분구조, 결합 단위 또는 아미노산 서열은 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드(및/또는 이것이 내부에 존재하는 화합물 또는 구조물)에 추가의 작용성을 제공하거나 제공하지 않고, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드의 특성을 변형시키거나 변형시키지 않을 수 있다.
본 발명의 아미노산 서열 및/또는 폴리펩티드의 부분, 단편, 유사체, 돌연변이체, 변형체, 대립형질체 및/또는 유도체를 사용하고/하거나, 그러한 부분, 단편, 유사체, 돌연변이체, 변형체, 대립형질체 및/또는 유도체 중 하나 이상을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 단백질 또는 폴리펩티드를 사용하는 것도, 이들이 본원에서 고려되는 용도에 적당한 한, 본 발명의 범주 내에 속한다. 그러한 부분, 단편, 유사체, 돌연변이체, 변형체, 대립형질체 및/또는 유도체는 통상적으로 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 대한 결합을 위한 기능적 항원 결합 부위(의 적어도 부분)를 포함하고; 더욱 바람직하게는 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합할 수 있고, 더욱 더 바람직하게는 본원에 정의된 바와 같은 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 결합할 수 있을 것이다. 그러한 부분, 단편, 유사체, 돌연변이체, 변형체, 대립형질체 및/또는 유도체는 또한 통상 본원에 정의된 바와 같은 hRSV 중화 효능 및/또는 강도를 가질 것이다. 그러한 부분, 단편, 유사체, 돌연변이체, 변형체, 대립형질체, 유도체, 단백질 및/또는 폴리펩티드의 비제한적인 몇몇 예는 본원의 추가 기재내용으로부터 명백해질 것이다. 본 발명의 부가적 단편 또는 폴리펩티드는 또한 본원에 기재된 1개 이상의 (보다 작은) 부분 또는 단편을 적당하게 조합함(즉, 연결 또는 유전적 융합에 의함)으로써 제공될 수도 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
및/또는 본 발명의 폴리펩티드(또는 이의 적당한 단편)를 코딩하는 핵산 또는 뉴클레오티드 서열에 관한 것이다. 그러한 핵산은 또한 "본 발명의 핵산(들)"으로도 본원에서 지칭될 것이고, 예를 들어 본원에 추가 기재되는 바와 같이, 유전적 구조물의 형태일 수도 있다. 따라서, 본 발명은 또한 유전적 구조물의 형태인 핵산 또는 뉴클레오티드 서열에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드 및/또는 본 발명의 화합물 또는 구조물을 발현(혹은 적당한 환경 하에서 그것을 발현)하고/하거나; 본 발명의 핵산을 함유하는 숙주 또는 숙주 세포에 관한 것이다. 그러한 숙주 또는 숙주 세포의 바람직하나 비제한적인 몇몇 예는 본원의 추가 기재내용으로부터 명백해질 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열(또는 이의 적당한 단편), 본 발명의 적어도 하나의 나노바디
, 본 발명의 적어도 하나의 폴리펩티드, 본 발명의 적어도 하나의 화합물 또는 구조물, 본 발명의 적어도 하나의 일가 구조물 및/또는 본 발명의 적어도 하나의 핵산, 및 임의적으로는, 즉 그 조성물의 의도된 용도에 따라 자체 공지된 상기 조성물의 1개 이상의 추가 성분을 함유하거나 포함하는 산물 또는 조성물에 관한 것이다. 그러한 산물 또는 조성물은 예를 들어 약학적 조성물(본원에 기재된 바와 같음) 또는 수의학적 조성물일 수 있다. 그러한 산물 또는 조성물의 바람직하나 비제한적인 몇몇 예는 본원의 추가 기재내용으로부터 명백할 것이다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 핵산, 숙주 세포, 산물 및 조성물의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물, 핵산, 숙주 세포, 산물 및 조성물의 적용 및 용도뿐만 아니라, hRSV에 의해 유발된 기도 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다. 바람직하나 비제한적인 몇몇 적용 및 용도는 본원의 추가 기재내용으로부터 명백해질 것이다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 일반적으로 hRSV의 단백질 F이 표적 숙주 세포 및/또는 그것의 막과 상호작용하는 것의 차단, hRSV(상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체)의 중화, (상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체의) hRSV 감염도의 억제 및 예방, 표적 숙주 세포(의 세포막)와의 (상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체)의 융합의 조절, 억제 및/또는 예방, 및/또는 (상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체의) 표적 숙주 세포의 hRSV 침투의 조절, 억제 및/또는 예방에 사용될 수 있다.
이와 같이, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 hRSV 감염과 관련된 질환 및 장애의 예방 및/또는 치료를 위해 사용될 수 있다. hRSV 감염과 관련된 그러한 질환 및 장애의 예는 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이며, 이에는 예를 들어 하기 질환 및 장애가 포함된다: 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염(폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및 천식.
따라서, 본 발명은 또한 hRSV에 의해 유발되는, 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염(폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및/또는 천식의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 적어도 하나의, 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 본 발명의 일가 구조물, 또는 본 발명의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및/또는 천식의 예방 및/또는 치료를 위한 약학적 조성물의 제조, 및/또는 본원에 기재된 하나 이상의 방법들에서의 사용을 위한, 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 본 발명의 일가 구조물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및/또는 천식의 예방 및/또는 치료를 위한, 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 또는 본 발명의 일가 구조물의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 및 화합물 및 조성물의 기타 적용 및 용도가 본 발명의 추가 개시내용으로부터 숙련가에게 명백해질 것이다.
도 1: 경쟁 ELISA: 실시예 8에 기재된 바와 같이, 시나지스
Fab는 FTM - 단백질에 결합하기 위해 정제된 RSV 결합 나노바디
및 뉴맥스(Numax) Fab와 경쟁한다. 나노바디
202A5는 인플루엔자의 비관련 나노바디
결합 HA이다.
도 2: 실시예 10에 기재된 바와 같은, FTM- 단백질에의 일가, 이가 및 삼가 나노바디
의 결합.
도 3a 및 b: 실시예 11에 기재된 바와 같은, 롱 및 B-1 RSV 균주를 중화하기 위한 일가, 이가 및 삼가 구조물의 강도(RSV 중화).
도 4: 약 2 μM 내지 6 nM 범위의 농도의 일가 나노바디
7B2 (A), 15H8, (B) NC41 (C), 및 약 20 nM 내지 100 pM 범위의 농도의 삼가 나노바디
RSV 400 (D), RSV404 (E), RSV 407 (F) 및 RSV 403 (G)에 의한, RSV 롱 및 도피 돌연변이체 R7C2/1; R7C2/11 및 R7.936/4의 중화 검정. 곡선 피팅은 단지 일가 나노바디
의 데이터에 대해서만 행해졌다.
도 5: 실시예 15에 기재된 바와 같은, 링커 길이가 상이한 삼가 NC41 나노바디
에 의한 RSV 롱 및 RSV B-1 균주의 중화.
도 6: 선택된 NC41 변형체에 도입된 인간화 잔기의 개략적 개요. 점은 야생형 잔기의 존재를 가리키고; 문자는 인간화 잔기에 상응한다. 넘버링은 카밧에 따른 것이다.
도 7: 본 발명의 바람직한 인간화 나노바디
서열의 정렬.
도 8: 일가 및 삼가 인간화 NC41 변형체에 의한 hRSV 롱 균주 및 B-1 균주의 중화. 도 8a에서는, 삼가 인간화 NC41 변형체(RSV414 및 RSV426) 중 2개의 중화가 이의 상응하는 일가 나노바디
와 비교되어 있다. 도 8b는 삼가 NC41 변형체(RSV414, RSV426 및 RSV427)에 의한 중화를 도시한다.
도 9: RSV407 및 RSV434에 의한 hRSV 롱(A) 및 B-1(B) 균주의 중화.
도 10: 실시예 21에 기재된 바와 같은, 코튼 래트 모델에서의 RSV407의 효능 시험(예방). 래트에 각종 농도의 RSV 감염(제0일) 24시간 전(제-1일)에 각종 농도의 RSV407을 비강내 투여하였다. 바이러스 역가(좌측, 평균±sem, n=6) 및 바이러스 RNA 수준(우측)을, 감염 4일 후 바이러스혈증의 피크 수준에서 폐 세척액 내에 결정하였다(*= 비처리군 대비 2-테일 스튜던트 t-테스트에서 P<0.05).
도 11: 실시예 21에 기재된 바와 같은, 코튼 래트에서의 RSV434의 효능 시험(치료). 래트를 제0일에 RSV로 감염시켰고, 제2일 및 제3일에 0, 1, 2, 4 또는 20 mg/kg의 RSV434로 비강내 주입(n=6)에 의해 처리하였다. 비강(A) 및 폐 세척액(B) 내 바이러스 역가를 (감염후 제4일에) 바이러스혈증의 피크 수준에서 결정하였다. 수평선은 검출 한도를 도시한다.
도 2: 실시예 10에 기재된 바와 같은, FTM- 단백질에의 일가, 이가 및 삼가 나노바디
도 3a 및 b: 실시예 11에 기재된 바와 같은, 롱 및 B-1 RSV 균주를 중화하기 위한 일가, 이가 및 삼가 구조물의 강도(RSV 중화).
도 4: 약 2 μM 내지 6 nM 범위의 농도의 일가 나노바디
도 5: 실시예 15에 기재된 바와 같은, 링커 길이가 상이한 삼가 NC41 나노바디
도 6: 선택된 NC41 변형체에 도입된 인간화 잔기의 개략적 개요. 점은 야생형 잔기의 존재를 가리키고; 문자는 인간화 잔기에 상응한다. 넘버링은 카밧에 따른 것이다.
도 7: 본 발명의 바람직한 인간화 나노바디
도 8: 일가 및 삼가 인간화 NC41 변형체에 의한 hRSV 롱 균주 및 B-1 균주의 중화. 도 8a에서는, 삼가 인간화 NC41 변형체(RSV414 및 RSV426) 중 2개의 중화가 이의 상응하는 일가 나노바디
도 9: RSV407 및 RSV434에 의한 hRSV 롱(A) 및 B-1(B) 균주의 중화.
도 10: 실시예 21에 기재된 바와 같은, 코튼 래트 모델에서의 RSV407의 효능 시험(예방). 래트에 각종 농도의 RSV 감염(제0일) 24시간 전(제-1일)에 각종 농도의 RSV407을 비강내 투여하였다. 바이러스 역가(좌측, 평균±sem, n=6) 및 바이러스 RNA 수준(우측)을, 감염 4일 후 바이러스혈증의 피크 수준에서 폐 세척액 내에 결정하였다(*= 비처리군 대비 2-테일 스튜던트 t-테스트에서 P<0.05).
도 11: 실시예 21에 기재된 바와 같은, 코튼 래트에서의 RSV434의 효능 시험(치료). 래트를 제0일에 RSV로 감염시켰고, 제2일 및 제3일에 0, 1, 2, 4 또는 20 mg/kg의 RSV434로 비강내 주입(n=6)에 의해 처리하였다. 비강(A) 및 폐 세척액(B) 내 바이러스 역가를 (감염후 제4일에) 바이러스혈증의 피크 수준에서 결정하였다. 수평선은 검출 한도를 도시한다.
본 발명의 상세한 설명, 실시예 및 특허청구범위에서,
a) 달리 지시되거나 정의되지 않는 한, 사용된 모든 용어는 당분야의 이들의 통상의 의미(이는 숙련가에게 명백할 것임)를 가진다. 예를 들어, 제WO 08/020079호의 46면의 단락 a)에 언급된 표준 편람을 참조하고;
b) 달리 지시되지 않는 한, 용어 "면역글로불린 서열", "서열", "뉴클레오티드 서열" 및 "핵산"은 제WO 08/020079호의 46면의 단락 b)에 기재되어 있으며;
c) 별도로 지시되지 않는 한, 구체적으로 상세히 설명되지 않은 모든 방법, 단계, 기법 및 조작은, 숙련가에게 명백한 바와 같이, 자체 공지된 방식으로 수행될 수 있거나 수행되어졌다. 예를 들어 이 역시 표준 편람 및 본원에 언급된 일반적 배경기술, 및 본원에 인용된 추가의 문헌뿐만 아니라; 예를 들어 하기 문헌[Presta, Adv. Drug Deliv. Rev. 2006, 58 (5-6): 640-56; Levin and Weiss, Mol. Biosyst. 2006, 2(1): 49-57; Irving et al., J. Immunol. Methods, 2001, 248(1-2), 31-45; Schmitz et al., Placenta, 2000, 21 Suppl. A, S106-12, Gonzales et al., Tumour Biol, 2005, 26(1), 31-43](이는 단백질 공학, 예컨대 친화도 증진을 위한 기법 및 단백질, 예컨대 면역글로불린의 특이성 및 다른 원하는 특성을 개선시키기 위한 다른 기법에 대해 기재함)을 참조하고;
d) 아미노산 잔기는 표준 3문자 또는 1문자 아미노산 코드에 따라 표시될 것이다. 제WO 08/020079호의 제48면의 표 A-2를 참조한다;
e) 뉴클레오티드 서열 또는 아미노산 서열이 또 다른 뉴클레오티드 서열 또는 아미노산 서열을 각기 "포함한다"고 기재되는 경우, 또는 또 다른 뉴클레오티드 서열 또는 아미노산 서열로 "본질적으로 구성된다"고 기재되는 경우, 이는 제WO 08/020079호의 제51-52면의 단락 i)에 제시된 의미를 가진다.
f) 용어 "본질적으로 단리된 형태"는 제WO 08/020079호의 제52면 및 제53면의 단락 j)에서 그것에 주어진 의미를 가진다.
g) 용어 "도메인" 및 "결합 도메인"은 제WO 08/020079호의 제53면의 단락 k)에서 그것에 주어진 의미를 가진다.
h) 본원에 상호교환적으로 사용될 수 있는 용어 "항원 결정자" 및 "에피토프"는 제WO 08/020079호의 제53면의 단락 l)에서 그것에 주어진 의미를 가진다.
i) 제WO 08/020079호의 제53면의 단락 m)에 추가 기재된 바와 같이, 한 특정 항원 결정자, 에피토프, 항원 또는 단백질(또는 이의 적어도 하나의 부분, 단편 또는 에피토프)에 (특이적으로) 결합할 수 있고, 한 특정 항원 결정자, 에피토프, 항원 또는 단백질(또는 이의 적어도 하나의 부분, 단편 또는 에피토프)에 대한 친화도 및/또는 특이성을 가지는 아미노산 서열(예컨대 본 발명의 나노바디
, 항체, 폴리펩티드, 또는 일반적으로 항원 결합 단백질 또는 폴리펩티드 또는 이의 단편)은, 상기 항원 결정자, 에피토프, 항원 또는 단백질에 "대한" 또는 그것에 "대해 유도된"이란 표현으로 기재된다.
j) 용어 "특이성"은 제WO 08/020079호의 제53-56면 상의 단락 n)에 주어진 의미를 가지고; 본원에 언급된 바와 같이, 특별한 항원 결합 분자 또는 항원 결합 단백질(예컨대 본 발명의 나노바디
또는 폴리펩티드) 분자가 결합할 수 있는 상이한 유형의 항원 또는 항원 결정자의 수를 지칭한다. 항원 결합 단백질의 특이성은 항원 결합 분자(예컨대 본 발명의 나노바디
또는 폴리펩티드) 및 이와 관련된 항원 간의 결합을 측정하는 몇몇 바람직한 기법을 역시 기재하고 있는 제WO 08/020079호(본원에 참조 인용됨)의 제53-56면에 기재된 바와 같이, 친화도 및/또는 결합력에 기초하여 결정될 수 있다. 통상, 항원 결합 단백질(예컨대 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드)은 그것의 항원에 10-5 내지 10-12 몰/리터 이하, 바람직하게는 10-7 내지 10-12 몰/리터 이하, 더욱 바람직하게는 10-8 내지 10-12 몰/리터의 해리 상수(KD)(즉, 105 내지 1012 리터/몰 이상, 바람직하게는 107 내지 1012 리터/몰 이상, 더욱 바람직하게는 108 내지 1012 리터/몰의 결합 상수)로 자신의 항원에 결합할 것이다. 104 몰/리터 초과의 임의의 KD 값(또는 104 M-1 미만의 임의의 KA 값) 리터/몰은 일반적으로 비특이적 결합을 가리키는 것으로 간주된다. 바람직하게, 본 발명의 일가 면역글로불린 서열은 500 nM 미만, 바람직하게는 200 nM 미만, 더욱 바람직하게는 10 nM 미만, 예컨대 예를 들어 10 내지 5 nM의 친화도로 원하는 항원에 결합할 것이다. 항원 결합 단백질의 항원 또는 항원 결정자에의 특이적 결합은, 예를 들어 스카차드(Scatchard) 분석 및/또는 경쟁 결합 검정, 예컨대 방사능면역검정(RIA), 효소 면역검정(EIA) 및 샌드위치 경쟁 검정, 및 이의 당업계에 자체 공지된 변법; 및 본원에 언급된 다른 기법을 포함한, 임의의 적당한 자체 공지된 방식으로 결정될 수 있다. 숙련가에게 명료하고 제WO 05/020079호의 제53-56면에 기재된 바와 같이, 해리 상수는 실제 또는 겉보기 해리 상수일 수 있다. 해리 상수의 결정 방법은 숙련가에게 명백할 것이며, 이에는 예를 들어 제WO 08/020079호의 제53-56면에 언급된 기법들이 포함된다.
k) 본 발명의 아미노산 서열, 화합물 또는 폴리펩티드의 반감기는 일반적으로 제WO 08/020079호의 제57면 상의 단락 o)에 기재되어 있는 바와 같이 정의될 수 있고, 본원에 언급된 바와 같이, 예를 들어 아미노산 서열, 화합물 또는 폴리펩티드의 분해 및/또는 자연 메커니즘에 의한 아미노산 서열, 화합물 또는 폴리펩티드의 소거 또는 봉착으로 인한, 생체내 아미노산 서열, 화합물 또는 폴리펩티드의 혈청 내 농도에 대해 소요되는 시간이 50% 감소됨을 지칭한다. 본 발명의 아미노산 서열, 화합물 또는 폴리펩티드의 생체내 반감기는 자체 공지된 임의의 방식, 예컨대 약물동력학 분석에 의해 결정될 수 있다. 적당한 기법은 당업계의 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어 일반적으로 제WO 08/020079호의 제57면의 단락 o)에 기재된 바와 같을 수 있다. 제WO 08/020079호의 제57면의 단락 o)에 언급된 바와 같이, 반감기는 매개변수, tl /2-알파, tl /2-베타 및 곡선 아래의 면적(AUC: area under the curve)을 사용하여 표현될 수 있다. 예를 들어 이하의 실험 파트뿐만 아니라, 표준 편람, 예컨대 문헌[Kenneth, A et at: Chemical Stability of Pharmaceuticals: A Handbook for Pharmacists and Peters et al., Pharmacokinetic analysis: A Practical Approach (1996)]를 참조한다. 또한 문헌["Pharmacokinetics", M Gibaldi & D Perron, published by Marcel Dekker, 2nd Rev. edition (1982)]도 참조한다. 용어 "반감기의 증가", 또는 "증가된 반감기"는 제WO 08/020079호의 제57면 상의 단락 o)에 정의된 바와 같고, 특히 tl /2-알파 및/또는 AUC 또는 이들 양자 모두의 증가와 함께 또는 이들의 증가없이 tl /2-베타의 증가를 지칭한다.
l) 표적 또는 항원에 있어서, 표적 또는 항원 상의 용어 "상호작용 부위"는, 표적 또는 항원의 리간드, 수용체 또는 다른 결합 파트너에 결합하기 위한 부위, 촉매적 부위, 분할 부위, 알로스테릭 상호작용을 위한 부위, 다중 결합에 관여된 부위(예컨대 동종결합 또는 이종이량체결합)인 표적 또는 항원 상의 아미노산 잔기의 부위, 에피토프, 항원 결정자, 부분, 도메인 또는 신장부; 또는 표적 또는 항원의 생물학적 작용 또는 기작에 관여된, 표적 또는 항원 상의 아미노산 잔기의 임의의 다른 부위, 에피토프, 항원 결정자, 부분, 도메인 또는 신장부를 의미한다. 보다 일반적으로, "상호작용 부위"는, 본 발명의 아미노산 서열 또는 폴리펩티드가 결합하여 표적 또는 항원(및/또는 표적 또는 항원이 관여된 임의의 경로, 상호작용, 신호, 생물학적 기작 또는 생물학적 효과)가 조정되도록 하는(본원에 정의됨), 표적 또는 항원 상의 아미노산 잔기의 임의의 부위, 에피토프, 항원 결정자, 부분, 도메인 또는 신장부일 수 있다.
m) 아미노산 서열 또는 폴리펩티드는, 아미노산 서열 또는 폴리펩티드가 제2 표적 또는 폴리펩티드에 결합하는 친화도와 대비하여 10배 이상, 예컨대 100배 이상, 바람직하게는 1000배 이상, 및 10000배까지 또는 그보다 더 큰 친화도(상기 기재된 바와 같고, 적당하게는 KD 값, KA 값, Koff 속도 및/또는 Kon 속도로 적당하게 표현됨)를 갖고 제1 항원에 결합할 경우, 제2 표적 또는 항원과 대비하여 제1 항원 또는 항체에 "대해 특이적"이라고 일컬어진다. 예를 들어, 제1 항원은, 상기 아미노산 서열 또는 폴리펩티드가 제2 표적 또는 폴리펩티드에 결합되는 KD 값과 대비하여 적어도 10배, 예컨대 적어도 100배, 바람직하게는 적어도 1000배 적고, 또한 10,000배까지 적거나, 그보다 더 작은 KD 값으로 표적 또는 항원에 결합될 수 있다. 바람직하게, 아미노산 서열 또는 폴리펩티드가 제2 표적 또는 항원과 대비하여 제1 표적 또는 항원에 "대해 특이적"인 경우, 이는 상기 제1 표적 또는 항원에 대해서는 (본원에 정의된 바와 같이) 유도되지만, 상기 제2 표적 또는 항원으로는 유도되지 않는다;
n) 용어 "(교차)-차단하다", "(교차)-차단된" 및 "(교차)-차단하는"이란, 아미노산 서열 또는 다른 결합제(예컨대 본 발명의 폴리펩티드)가 본 발명의 다른 아미노산 서열 또는 결합제의 소정의 표적으로의 결합을 간섭하는 능력을 의미하기 위해 상호교환적으로 본원에 사용된다. 본 발명의 아미노산 서열 또는 다른 결합제가 표적에의 결합을 간섭하여, 본 발명에 따른 교차-차단으로 칭해질 수 있을지의 여부는 경쟁 결합 검정을 사용하여 결정될 수 있다. 특히 적당한 정량적 교차-차단 검정은 표면 플라즈몬 공명 기술을 사용하여 상호작용 정도를 측정할 수 있는 비아코어(Biacore) 기계를 사용한다. 또 다른 적당한 정량적 교차-차단 검정은 아미노산 서열 또는 다른 결합제 사이의 경쟁을 그들의 표적에 대한 결합에 대해 측정하는 ELISA-기재 접근법을 사용한다.
이하, 아미노산 서열 또는 다른 결합제가 본 발명에 따른 교차-차단을 하거나 교차-차단을 할 수 있는지의 여부를 결정하기 위한 적당한 비아코어 검정을 일반적으로 설명한다. 이 검정이 본원에 기재된 임의의 아미노산 서열 또는 다른 결합제에 의해 사용될 수 있음을 이해할 것이다. 비아코어 기계(예를 들어 비아코어 3000)는 제조업체의 권고에 따라 작동된다. 따라서, 하나의 교차-차단 검정에서, 표준 아민 커플링 화학을 사용하여 표적 단백질을 CM5 비아코어 칩에 커플링시켜 표적으로 코팅된 표면을 생성한다. 전형적으로 표적의 200 내지 800 공명 단위를 칩에 커플링시킨다(쉽게 측정가능한 결합 수준을 제공하지만, 사용되는 시험 시약의 농도에 의해 용이하게 포화될 수 있는 양). 서로 교차-차단되는 능력을 평가받을 2개의 시험 아미노산 서열(A* 및 B*로 표시)을 적당한 완충액에서 결합 부위의 1 대 1 몰 비율로 혼합하여 시험 혼합물을 생성한다. 결합 부위에 기초한 농도를 계산할 경우, 아미노산 서열의 몰 중량은 아미노산 서열 상의 표적 결합 부위의 수로 나뉘어진 아미노산 서열의 총 몰 중량으로 간주된다. 이 시험 혼합물에서 각각의 아미노산 서열의 농도는 비아코어 칩 상에 포획된 표적 분자 상의 아미노산 서열에 대한 결합 부위를 쉽게 포화시키도록 충분히 높아야 한다. 혼합물에서 아미노산 서열은 동일한 몰 농도(결합 기준)이고, 그러한 농도는 전형적으로 1.00 내지 1.5 마이크로몰(결합 부위 기준)이다. A* 단독 및 B* 단독을 함유하는 별도의 용액을 또한 준비한다. 그러한 용액에서 A* 및 B*는 시험 혼합물에서와 동일한 완충액내에 동일한 조건 하에 있어야 한다. 시험 혼합물을 표적-코팅 비아코어 칩 상에 전달하고, 결합의 총량을 기록한다. 이어서 칩-결합 표적을 손상시키지 않으면서 결합된 아미노산 서열을 제거하는 방식으로 칩을 처리한다. 전형적으로, 이는 칩을 30 mM HCl로 60초동안 처리함으로써 이루어 진다. 이어서 A* 단독 용액을 표적-코팅된 표면 상으로 통과시키고, 결합량을 기록한다. 이 역시 칩-결합된 표적을 손상시키지 않으면서 결합된 모든 아미노산 서열을 제거하도록 칩을 처리한다. 이어서 B* 단독 용액을 표적-코팅된 표면 상으로 통과시키고, 결합량을 기록한다. 그런 다음, A* 및 B*의 혼합물의 최대이론적 결합을 계산하고, 이는 단지 표적 표면 상으로 통과될 경우의 각 아미노산 서열의 결합의 합이다. 실제 기록된 혼합물의 결합이 그러한 이론적 최대값 보다 작으면, 2개의 아미노산 서열은 서로 교차-차단한 것이다. 따라서, 일반적으로, 본 발명에 따른 교차-차단 아미노산 서열 또는 다른 결합제는, 상기 비아코어 교차-차단 검정에서, 검정 동안 본 발명의 제2 아미노산 서열 또는 다른 결합제의 존재 하에 기록된 결합이, 조합된 2개의 아미노산 서열 또는 결합제의 최대 이론적 결합(바로 위에서 정의된 바와 같음)의 80% 내지 0.1%(예를 들어 80% 내지 4%), 구체적으로 최대 이론적 결합의 75% 내지 0.1%(예를 들어 75% 내지 4%), 보다 구체적으로 최대 이론적 결합의 70% 내지 0.1%(예를 들어 70% 내지 4%)이도록 상기 검정에서 표적에 결합하는 것이다. 상기 기재된 비아코어 검정은 아미노산 서열 또는 다른 결합제가 본 발명에 따라 서로 교차-차단하는지를 결정하기 위해 사용되는 주요한 검정이다. 드문 경우에 특별한 아미노산 서열 또는 다른 결합제가 CM5 비아코어 칩으로 아민 화학을 통해 커플링된 표적에 결합하지 않을 수 있다(이는 통상적으로 표적 상의 관련 결합 부위가 칩으로의 커플링에 의해 차폐되거나 파괴될 경우 초래됨). 그러한 경우, 교차-차단은 표적의 태깅된(tagged) 버전, 예를 들어 N-말단 His-태깅 버전을 사용하여 결정될 수 있다. 그러한 특별한 포맷에서, 항-His 아미노산 서열을 비아코어 칩에 커플링시키고, 이어서 His-태깅 표적을 칩의 표면 상으로 통과시키고 항-His 아미노산 서열에 의해 포획한다. 교차-차단 분석은, 각각의 칩 재생 순환 이후에 새로운 His-태깅 표적이 항-His 아미노산 코팅된 표면으로 역 적재됨을 제외하고, 본질적으로 상기 기재된 바와 같이 수행된다. N-말단 His-태깅 표적을 사용하는 주어진 예에 더하여, 대안적으로는 C-말단 His-태깅 표적이 사용될 수 있다. 추가로, 당분야에 공지된 다양한 다른 태그 및 태그 결합 단백질 조합물이 그러한 교차-차단 분석에 사용될 수 있다(예를 들어 항-HA 항체를 가지는 HA 태그; 항-FLAG 항체를 가지는 FLAG 태그; 스트렙타비딘을 가지는 비오틴 태그).
이하, 표적에 대한 아미노산 서열 또는 결합제가 본원에 정의된 바와 같이 교차-차단하는지 또는 교차-차단가능한지의 여부를 결정하기 위한 ELISA 검정을 일반적으로 설명한다. 이 검정이 본원에 기재된 임의의 아미노산 서열(또는 본 발명의 다른 결합제, 예컨대 폴리펩티드)에 의해 사용될 수 있음을 이해할 것이다. 이 검정의 일반적 원리는 표적으로 유도되는 아미노산 서열 또는 결합제를 ELISA 플레이트의 웰(well) 상으로 코팅시키는 것이다. 과량의 제2의 잠재적 교차-차단 항-표적 아미노산 서열을 용액에 첨가한다(즉 ELISA 플레이트에 결합되지 않음). 이어서 제한된 양의 표적을 웰에 첨가한다. 코팅된 아미노산 서열 및 용액중의 아미노산 서열이 제한된 수의 표적 분자와 결합하기 위해 경쟁한다. 플레이트를 세척하여 코팅된 아미노산 서열과 결합되지 않은 과량의 표적을 제거하고, 또한 제2의 용액 상 아미노산 서열뿐만 아니라 제2의 용액 상 아미노산 서열과 표적 사이에 형성된 복합체를 제거한다. 이어서 표적을 검출하기에 적절한 시약을 사용하여 결합된 표적을 측정한다. 코팅된 아미노산 서열을 교차-차단할 수 있는 용액중의 아미노산 서열은, 코팅된 아미노산 서열이 제2의 용액 상 아미노산 서열의 부재 하에 결합될 수 있는 표적 분자의 수에 비하여, 코팅된 아미노산 서열이 결합될 수 있는 표적 분자의 수를 감소시킬 수 있을 것이다. 제1 아미노산 서열, 예를 들어 Ab-X가 고정화된 아미노산 서열인 것으로 선택되는 경우, 이를 ELISA 플레이트의 웰 상으로 코팅하고, 이후 플레이트를 적당한 차단 용액으로 차단시켜 후속적으로 첨가되는 시약의 비-특이적 결합을 최소화시킨다. 이어서, 과량의 제2 아미노산 서열, 즉 Ab-Y를 ELISA 플레이트에 첨가하여, 웰당 Ab-Y 표적 결합 부위의 몰은 ELISA 플레이트의 코팅 동안에 웰당 사용된 Ab-X 표적 결합 부위의 몰에 비하여 10배 이상 높도록 한다. 이어서, 표적을 첨가하여 웰당 첨가된 표적의 몰이 각각의 웰을 코팅하기 위해 사용된 Ab-X 표적 결합 부위의 몰에 비하여 25배 이상 낮도록 한다. 적절한 배양 기간후, ELISA 플레이트를 세척하고, 표적을 검출하기 위한 시약을 첨가하여 코팅된 항-표적 아미노산 서열(이 경우 Ab-X)에 의해 특이적으로 결합된 표적의 양을 측정한다. 검정을 위한 배경 신호는 코팅된 아미노산 서열(이 경우 Ab-X), 제 2의 용액 상 아미노산 서열(이 경우 Ab-Y), 표적 완충액 단독(즉, 첨가된 표적이 없음) 및 표적 검출 시약에 의해 웰에서 수득된 신호로서 정의된다. 검정을 위한 양성 제어 신호는 코팅된 아미노산 서열(이 경우 Ab-X), 제2의 용액 상 아미노산 서열 완충액 단독(즉, 첨가된 제2의 용액 상 아미노산 서열이 없음), 표적 및 표적 검출 시약에 의해 웰에서 수득된 신호로서 정의된다. ELISA 검정은 그러한 방식으로 수행되어 배경 신호의 6배 이상의 양성 제어 신호를 가진다. 코팅 아미노산 서열로서 사용하기 위한 아미노산 서열 및 제2(경쟁자) 아미노산 서열로서 사용하기 위한 아미노산 서열을 선택함으로써 야기된 임의의 인공산물(예를 들어 표적에 대한 Ab-X와 Ab-Y 사이의 유의적으로 상이한 친화도)을 피하기 위해, 교차-차단 검정은 다음의 이가지 포맷으로 수행된다: 1) 포맷 1은 Ab-X가 ELISA 플레이트 상으로 코팅되는 아미노산 서열이고, Ab-Y가 용액중의 경쟁자 아미노산 서열인 경우이고; 2) 포맷 2는 Ab-Y가 ELISA 플레이트 상으로 코팅되는 아미노산 서열이고, Ab-X가 용액 중의 경쟁자 아미노산 서열인 경우이다. Ab-X 및 Ab-Y는, 포맷 1 및 포맷 2에서, 용액 상 항-표적 아미노산 서열의 부재 하에(즉, 양성 제어 웰에서) 수득된 표적 검출 신호와 대비하여, 용액 상 항-표적 아미노산 서열이 표적 검출 신호(즉, 코팅된 아미노산 서열에 의해 결합된 표적의 양)를 60% 내지 100%, 특히 70% 내지 100%, 보다 특히 80% 내지 100% 감소시킬 수 있다.
o) 아미노산 서열은, 2개의 상이한 항원 또는 항원 결정자에 대해 (본원에 정의된 바와 같이) 특이적인 경우, 이들 2개의 상이한 항원 또는 항원 결정자(예컨대 예를 들어 2종의 상이한 포유동물로부터의 혈청 알부민, 예컨대 예를 들어 인간 혈청 알부민 및 사이노 혈청 알부민, 예컨대 예를 들어 hRSV의 상이한 균주의 단백질 F, 예컨대 예를 들어 hRSV의 상이한 도피 돌연변이체의 단백질 F)에 대해 "교차-반응성"인 것으로 일컬어진다.
p) 본원에 추가로 기재된 바와 같이, 나노바디
내 아미노산 잔기의 총 수는 110 내지 120, 바람직하게는 112 내지 115, 가장 바람직하게는 113일 수 있다. 그러나, 나노바디의 부분, 단편, 유사체 또는 유도체(본원에 추가로 기재된 바와 같음)는 그러한 부분, 단편, 유사체 또는 유도체가 본원에 개략된 추가의 요건을 충족하고 또한 바람직하게는 본원에 기재된 목적에 적당한 한, 그들의 길이 및/또는 크기에 특히 제한되지 않음을 주지해야 한다.
q) 제WO 08/020079호(본원에 참조 인용됨)의 제58면 및 제59면 상의 단락 q)에 추가 기재된 바와 같이, 나노바디
의 아미노산 잔기는, 문헌[Riechmann and Muyldermans, J. Immunol. Methods 2000 Jun 23; 240 (1-2): 185-195](예를 들어 이 발행물의 도 2를 참조함)에서 카멜리드로부터의 VHH 도메인에 적용된 바와 같이, 문헌[Kabat et al., "Sequence of proteins of immunological interest", US Public Health Services, NIH Bethesda, MD, Publication No. 91]에 제시되거나 또는 본원에 언급된 VH에 대한 일반적 번호매김에 따라 번호매겨진다. 그러한 번호매김에 따라, 나노바디
의 FR1은 위치 1-30의 아미노산 잔기를 포함하고, 나노바디
의 CDR1은 위치 31-35의 아미노산 잔기를 포함하고, 나노바디
의 FR2는 위치 36-49의 아미노산 잔기를 포함하고, 나노바디
의 CDR2는 위치 50-65의 아미노산 잔기를 포함하고, 나노바디
의 FR3은 위치 66-94의 아미노산 잔기를 포함하고, 나노바디
의 CDR3은 위치 95-102의 아미노산 잔기를 포함하고, 나노바디
의 FR4는 위치 103-113의 아미노산 잔기를 포함한다.
r) 본 발명과 관련하여, "(바이러스의) 표적 숙주 세포"는 일반적으로 생물 대상이거나 이로부터 유래되고, 상기 바이러스에 의해 감염되기 쉬운 특별한 세포를 지칭한다.
s) 본원에 사용되는 용어 "바이러스의 감염도"는, 상기 바이러스에 노출될 때, 실제로 상기 바이러스에 의해 감염되게 되는 생물체의 비율을 지칭한다.
t) 본원에 사용되는 용어 "바이러스의 중화"는, 적당한 시험관내, 세포내, 또는 생체내 검정(예컨대 예를 들어 문헌[Anderson et al. 1985 (J. Clin. Microbiol. 22: 1050-1052) 및 1988 (J. Virol. 62: 4232-4238)]에 기재된 마이크로중화 검정, 이들 검정의 변형법, 예를 들어 실시예 6에 기재된 방법; 예를 들어 문헌[Johnson et al. 1997 (J. Inf. Dis. 176: 1215-1224)]에 기재된 플라크 감소 검정, 및 이들의 변형법 및 본원에 언급된 방법들)을 이용하여 측정되는, 중화 화합물을 비리온에 결합시킴에 의한 바이러스의 감염도(본원에 정의된 바와 같음)의 조절 및/또는 감소 및/또는 방지 및/또는 억제를 지칭한다. 특히, "(바이러스의) 중화" 또는 "(바이러스를) 중화하는 것"은 적당한 시험관내, 세포내 또는 생체내 검정(예컨대 본원에 언급된 것들)을 이용하여 측정된 바이러스의 감염도(본원에 정의된 바와 같음)를, 적어도 동일한 조건 하, 단 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 부재 하에서의 조건 하에서 동일한 검정에서의, 정상(즉, 자연 발생) 바이러스의 감염도(본원에 정의된 바와 같음)에 비해, 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 by 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 조절, 감소, 방지 또는 억제함을 의미할 수 있다.
u) 본원에 사용되는 용어 "본 발명의 아미노산 서열의 강도", "본 발명의 나노바디
의 강도", "본 발명의 폴리펩티드의 강도", 및/또는 "본 발명의 화합물 또는 구조물의 강도"는, 특별한 바이러스(예컨대, 예를 들어 hRSV)의 중화; 바이러스의 감염도의 조절, 억제 및/또는 방지; 바이러스의 표적 숙주 세포(의 세포막)과의 융합의 억제 및/또는 방지; 및/또는 바이러스의 표적 숙주 세포(본원에 정의된 바와 같음) 내로의 침투의 조절, 억제 및/또는 방지를 위한, 상기 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 및/또는 본 발명의 화합물 또는 구조물의 성능을 지칭한다. 강도는 당업계에 공지되어 있거나 본원에 기재된 임의의 적당한 검정, 예컨대 예를 들어 실시예 단락에 기재된 마이크로중화 검정 및/또는 상기 t) 항목에 언급된 검정에 의해 측정될 수 있다.
v) 본원에 사용되는 용어 "바이러스 부착"은, 직접적으로(예를 들어 바이러스 수용체와의 상호작용에 의해) 또는 간접적으로(예를 들어 하나 이상의 다른 단백질 또는 분자의 바이러스 수용체와의 상호작용을 매개함으로써), 바이러스(예를 들어 hRSV)가 표적 숙주 세포에 부착되는 것이다.
w) 본원에 사용되는 용어 "바이러스 융합"은, 직접적으로(예를 들어 표적 숙주 세포의 막 화합물과의 상호작용에 의해) 또는 간접적으로(예를 들어 하나 이상의 다른 단백질 또는 분자의 표적 숙주 세포의 막 화합물과의 상호작용을 매개함으로써), 바이러스(예를 들어 hRSV)가 표적 숙주 세포에 융합되는 것이다.
x) 본원에 사용되는 용어 "바이러스 침투"는 표적 숙주 세포에의 비리온 부착 및/또는 표적 숙주 세포와의 바이러스 융합을 달성하는 데 필요한 임의의 바이러스-매개 생물학적 경로를 포함한다.
y) "아미노산 잔기의 신장부"는 상호 인접하거나 상호 매우 근접한, 즉 아미노산 서열의 1차 구조 또는 3차 구조를 가지는 2개 이상의 아미노산 잔기를 가진다. 본 발명과 관련하여, "아미노산 잔기의 신장부"는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 또는 구조물이 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 결합할 수 있도록 하는 데 (적어도 부분적으로) 기여할 것이다.
z) 아미노산 잔기의 2개의 신장부(또는 2개의 CDR 서열)를 비교할 때, 용어 "아미노산 차이"는 각기 a), c) 또는 e)의 아미노산 잔기의 신장부(또는 CDR 서열)와 대비하여, b), d) 또는 f)에 특정된 CDR 서열이 아미노산 잔기의 신장부의 위치 상의 단일 아미노산 잔기로 삽입, 결실 또는 치환됨을 지칭하고, 이 때 b), d) 및 f)의 아미노산 잔기(또는 CDR 서열)의 신장부는 각기 a), c) 또는 e)의 아미노산 잔기의 신장부에 비해 1개, 2개 또는 최대 3개의 그러한 아미노산 차이를 포함할 수 있다.
"아미노산 차이"는 본 발명의 아미노산 서열의 성질을 향상시키거나, 본 발명의 아미노산 서열의 원하는 성질이나 원하는 성질들의 균형 또는 조합에서 지나치게 이탈하지 않는, 임의의 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 및/또는 삽입, 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 이와 관련하여, 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도 hRSV의 단백질 F에, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 및/또는 삽입을 가지지 않는 아미노산 잔기의 하나 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 결합하고/하거나; 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 및/또는 삽입을 가지지 않는 아미노산 잔기의 하나 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도를 가져야 한다. 숙련가는 일반적으로 본원의 개시내용에 기초하여, 또한 임의적으로는, 예를 들어 제한된 수의 가능한 치환, 결실 또는 삽입을 도입하고 이것이 수득되는 아미노산 서열의 성질에 미치는 영향을 결정하는 것을 포함할 수 있는, 제한된 정도의 통상의 실험 후에, 적당한 치환, 결실 및/또는 삽입, 또는 이들의 적당한 조합을 결정하여 선택할 수 있을 것이다.
예를 들어, 또한 본 발명의 아미노산 서열을 발현하는 데 사용되는 숙주 유기체에 따라, 그러한 결실 및/또는 치환은, 당업계의 숙련가의 능력 내에 속하는, 번역후 변형을 위한 하나 이상의 부위(예컨대 하나 이상의 글리코실화 부위)가 제거되도록 하는 방식으로 고안될 수 있다.
본 발명의 바람직한 한 양태에서, "아미노산 차이"는 아미노산 치환이다. 아미노산 치환은 본 발명의 아미노산 서열의 성질을 향상시키거나 적어도 본 발명의 아미노산 서열의 원하는 성질이나 원하는 성질들의 균형 또는 조합에 지나치게 이탈하지 않는 임의의 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환일 수 있다. 이와 관련하여, 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환을 가지지 않는 아미노산 잔기의 하나 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합해야 하고/하거나; 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 및/또는 삽입을 가지지 않는 아미노산 잔기의 하나 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도를 가져야 한다.
숙련가는 일반적으로 본원의 개시내용에 기초하여, 또한 임의적으로는, 예를 들어 제한된 수의 가능한 치환, 결실 또는 삽입을 도입하고 이것이 수득되는 나노바디의 성질에 미치는 영향을 결정하는 것을 포함할 수 있는, 제한된 정도의 통상의 실험 후에, 적당한 치환, 결실 및/또는 삽입, 또는 이들의 적당한 조합을 결정하여 선택할 수 있을 것이다.
아미노산 잔기의 1개 이상의 신장부 내의 아미노산 치환은 보존적 아미노산 치환일 수 있다. "보존적" 아미노산 치환은 일반적으로 아미노산 잔기가 유사 화학 구조의 또 다른 아미노산 잔기로 대체되고 폴리펩티드의 기능, 활성 또는 다른 생물학적 특성에 거의 또는 본질적으로 전혀 영향을 주지 않는 아미노산 치환이다. 그러한 보존적 아미노산 치환은 당분야에, 예를 들어 제WO 04/037999호, 제GB-A-3 357 768호, 제WO 98/49185호, 제WO 00/46383호 및 제WO 01/09300호로부터 공지되어 있고; 그러한 치환의 (바람직한) 유형 및/또는 조합은 제WO 04/037999호뿐만 아니라 제WO 98/49185호 및 본원에 인용된 추가의 문헌으로부터의 적절한 교시에 기초하여 선택될 수 있다.
그러한 보존적 치환은 바람직하게는 하기 군 (a) 내지 (e) 내의 하나의 아미노산이 동일한 군 내의 또 다른 아미노산 잔기로 치환되는 치환이다: (a) 작은 지방족 비극성 또는 약극성의 잔기: Ala, Ser, Thr, Pro 및 Gly; (b) 극성의 음성으로 하전된 잔기 및 이들의 (비하전된) 아미드: Asp, Asn, Glu 및 Gln; (c) 극성의 양성으로 하전된 잔기: His, Arg 및 Lys; (d) 큰 지방족 비극성 잔기: Met, Leu, Ile, Val 및 Cys; 및 (e) 방향족 잔기: Phe, Tyr 및 Trp.
특히 바람직한 보존적 치환은 다음과 같다: Ala의 Gly 또는 Ser로의 치환; Arg의 Lys로의 치환; Asn의 Gln 또는 His로의 치환; Asp의 Glu로의 치환; Cys의 Ser로의 치환; Gln의 Asn로의 치환; Glu의 Asp로의 치환; Gly의 Ala 또는 Pro로의 치환; His의 Asn 또는 Gln로의 치환; Ile의 Leu 또는 Val로의 치환; Leu의 Ile 또는 Val로의 치환; Lys의 Arg, Gln 또는 Glu로의 치환; Met의 Leu, Tyr 또는 Ile로의 치환; Phe의 Met, Leu 또는 Tyr로의 치환; Ser의 Thr로의 치환; Thr의 Ser로의 치환; Trp의 Tyr로의 치환; Tyr의 Trp로의 치환; 및/또는 Phe의 Val, Ile 또는 Leu로의 치환.
아미노산 잔기의 1개 이상의 신장부 내의 아미노산 치환은 아미노산 서열에 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위한 증가된 친화도를 제공할 수 있다. 이는 무작위 또는 부위 지정 돌연변이형성 및/또는 자체 공지된 친화도 성숙을 위한 기타 기법, 예컨대 예를 들어 제WO 09/004065호, 제WO 05/003345호, 제WO 06/023144호, 제EP527809호, 제EP397834호에 기재된 기법과 같은 기법에 의해 행해질 수 있다.
비제한적으로, CDR에서의 아미노산 잔기 치환을 위한 (부분적으로 또는 완전히 준수되는) 규칙은 이하와 같다(즉, 유사한 측쇄 화학 특성을 가지는 아미노산으로의 치환):
- K는 R에 의해 치환되고;
- R는 K에 의해 치환되고;
- A는 S 또는 T에 의해 치환되고;
- S는 A 또는 T에 의해 치환되고;
- T는 A 또는 S에 의해 치환되고;
- I는 L 또는 V에 의해 치환되고;
- L는 I 또는 V에 의해 치환되고;
- V는 I 또는 L에 의해 치환되고;
- F는 Y에 의해 치환되고;
- Y는 F에 의해 치환되고;
- N는 D에 의해 치환되고;
- D는 N에 의해 치환되고;
- Q는 E에 의해 치환되고;
- E는 Q에 의해 치환되고;
- G는 A에 의해 치환되고;
- M는 L에 의해 치환되고;
- H, C, W 및 P는 그대로 유지된다.
부가적으로 또한 비제한적으로, CDR에서의 아미노산 잔기 치환을 위한 (부분적으로 또는 완전히 준수되는) 규칙은, 대안적으로 위치 27 내지 35 및 위치 50 내지 58(카밧 번호매김이 사용됨)에서의 치환의 경우에 이하와 같고, 여기에서 위치 27 내지 35에 대해:
- 위치 27(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 F; G; R; S; F, G, R, S 중 2개; F, G, R, S 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 28(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 A; I; S; T; A, I, S, T 중 2개; A, I, S, T 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 29(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 F; G; L; S; F, G, L, S 중 2개; F, G, L, S 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 30(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; G; S; T; D, G, S, T 중 2개; D, G, S, T 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 31(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; I; N; S; T; D, I, N, S, T 중 2개; D, I, N, S, T 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 32(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; N; Y; D, N, Y 중 2개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 33(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 A; G; T; V; A, G, T, V 중 2개; A, G, I, V 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 34(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 I; M; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 35(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 A; G; S; A, G, S 중 2개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
원래의 아미노산 서열이 위치 52a(카밧 번호매김이 사용됨)에 아미노산 서열을 가지는 경우, 위치 50 내지 58에 대해서는,
- 위치 50(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 A; C; G; S; T; A, C, G, S, T 중 2개; A, C, G, S, T 중 3개; A, C, G, S, T 중 4개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 51(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 I에 의해 치환되고;
- 위치 52(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 N; R; S; T; N, R, S, T 중 2개; N, R, S, T 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 52a(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 R; S; T; W; R, S, T, W 중 2개; R, S, T, W 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 53(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; G; N; S; T; D, G, N, S, T 중 2개; D, G, N, S, T 중 3개; D, G, N, S, T 중 4개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 54(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; G; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 55(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; G; S; D, G, S 중 2개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 56(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 I; N; R; S; T; I, N, R, S, T 중 2개; I, N, R, S, T 중 3개; I, N, R, S, T 중 4개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 57(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 T에 의해 치환되고;
- 위치 58(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; H; N; S; Y; D, H, N, S, Y 중 2개; D, H, N, S, Y 중 3개; D, H, N, S, Y 중 4개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
원래의 아미노산 서열이 위치 52a(카밧 번호매김이 사용됨)에 아미노산 서열을 가지지 않는 경우, 위치 50 내지 58에 대해서는,
- 위치 50(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 A; G; R; S; T; A, G, R, S, T 중 2개; A, G, R, S, T 중 3개; A, G, R, S, T 중 4개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 51(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 I에 의해 치환되고;
- 위치 52(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 N; S; T; N, S, T 중 2개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 53(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 N; R; S; T; Y; N, R, S, T, Y 중 2개; N, R, S, T, Y 중 3개; N, R, S, T, Y 중 4개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 54(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; G; R; S; D, G, R, S 중 2개; D, G, R, S 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 55(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 G에 의해 치환되고;
- 위치 56(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 G; N; R; S; T; D, N, R, S, T 중 2개; D, N, R, S, T 중 3개; D, N, R, S, T 중 4개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되고;
- 위치 57(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 T에 의해 치환되고;
- 위치 58(카밧 번호매김이 사용됨)의 원래의 아미노산 잔기는 D; N; T; Y; D, N, T, Y 중 2개; D, N, T, Y 중 3개; 또는 이들 모두, 바람직하게는 이들 모두에 의해 치환되며,
그 후 이에 따라 결정되는 잠재적으로 유용한 하나 이상의 치환들(또는 이들의 조합)이 (본원에 추가 기재되는 바와 같이, 자체 공지된 임의의 방식 이용) 상기 CDR 서열에 도입될 수 있고, (생성되는 아미노산 서열(들)은 hRSV의 단백질 F에 대한 친화도, 및/또는 다른 원하는 성질, 예컨대 예를 들어 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도에 대해 시험될 수 있다. 이러한 식으로, 제한된 정도의 시행착오로, CDR의 다른 적당한 치환(또는 이들의 적당한 조합)이 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에 의해 결정될 수 있다.
1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 삽입 또는 결실을 가지는 아미노산 잔기의 신장부를 포함하는 아미노산 서열, 및 이를 코딩하는 핵산 서열이 예를 들어 제WO 08/020079호의 제103면 및 제104면에 언급된 하나 이상의 기법을 이용하여, 자체 공지된 임의의 방식으로 제공될 수 있다.
생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 본원에 정의된 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나; 본원에 정의된 바와 같은 효능 및/또는 강도로 hRSV의 단백질 F를 중화하는 것이 바람직하다.
aa) 2개의 아미노산 서열을 비교할 때, 용어 "아미노산 차이"는, 제2 아미노산 서열과 대비한, 제1 아미노산 서열의 위치 상의 단일 아미노산 잔기의 삽입, 결실 또는 치환을 지칭하고; 2개의 아미노산 서열이 1개, 2개 또는 최대 3개의 그러한 아미노산 차이를 가질 수 있는 것으로 이해된다.
"아미노산 차이"는 아미노산 서열 내, 즉 본 발명의 아미노산 서열의 성질을 향상시키거나 적어도 본 발명의 아미노산 서열의 원하는 성질이나 원하는 성질들의 균형 또는 조합에 지나치게 이탈하지 않는, 하나 이상의 골격구조 영역 또는 하나 이상의 CDR(이는 본 발명의 CDR(즉, CDR2) 내의 것일 수 있고, 또 다른 CDR(즉 CDR1, CDR2 또는 CDR3) 내의 것일 수 있음), 또는 이들의 임의의 조합 내, 임의의 1개, 임의의 2개, 또는 최대 임의의 3개의 치환, 결실 또는 삽입일 수 있다. 이와 관련하여, 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 또는 삽입을 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하여야 하고/하거나; 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 및/또는 삽입을 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도를 가져야 한다. 숙련가는 일반적으로 본원의 개시내용에 기초하여, 또한 임의적으로는 예를 들어 제한된 수의 가능한 치환, 결실 또는 삽입을 도입하고, 이에 수득되는 아미노산 서열의 성질에 대한 영향을 결정하는 것을 포함할 수 있는 제한된 정도의 통상의 실험 후에, 적당한 치환, 결실 또는 삽입, 또는 이들의 적당한 조합을 결정하고 선택할 수 있을 것이다.
본 발명의 한 양태에서, "아미노산 차이"는 아미노산 치환이다. 아미노산 치환은 본 발명의 아미노산 서열의 성질을 향상시키거나 적어도 본 발명의 아미노산 서열의 원하는 성질이나 원하는 성질들의 균형 또는 조합에 지나치게 이탈하지 않는, 하나 이상의 골격구조 영역 또는 하나 이상의 CDR(이는 본 발명의 CDR(즉, CDR2) 내의 것일 수 있고, 또 다른 CDR(즉 CDR1, CDR2 또는 CDR3) 내의 것일 수 있음), 또는 이들의 임의의 조합 내, 임의의 1개, 임의의 2개, 또는 최대 임의의 3개의 치환일 수 있다. 이와 관련하여, 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환을 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하여야 하고/하거나; 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 적어도 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환을 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도를 가져야 한다. 숙련가는 일반적으로 본원의 개시내용에 기초하여, 또한 임의적으로는 예를 들어 제한된 수의 가능한 치환을 도입하고, 이에 수득되는 아미노산 서열의 성질에 대한 영향을 결정하는 것을 포함할 수 있는 제한된 정도의 통상의 실험 후에, 적당한 치환을 결정하고 선택할 수 있을 것이다.
상기 나타낸 바와 같이, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 골격구조 영역 및/또는 하나 이상의 CDR 내에 있을 수 있다. 상기 논의된 바와 같이(상기 z 항목) 단락 참조), 하나 이상의 CDR에서의 치환, 삽입 또는 결실은 "보존적 치환"(본원에 정의된 바와 같음)과 같은 임의의 가능한 임의의 가능한 치환, 삽입 또는 결실일 수 있고, 그것은 특정 규칙(본원에 정의된 바와 같음)에 의해 유도되고/되거나, 생성되는 아미노산 서열에 향상된 성질을 유도할 수 있다. 그러한 치환, 삽입 또는 결실이 하나 이상의 골격구조 영역에서 만들어질 경우, 이들은 하나 이상의 인증 잔기(예를 들어 제WO 08/020079호; 표 A-3 내지 A-8에 정의된 바와 같음) 및/또는 골격구조 잔기 내 하나 이상의 다른 위치에서 만들어질 수 있지만, 인증 잔기에서의 이러한 치환, 삽입 또는 결실은 일반적으로 덜 바람직하다(이들이 본원에 기재된 바와 같은 적당한 인간화 치환이 아닌 경우). 비제한적 예에 의해, 치환은 예를 들어 보존적 치환(본원에 기재된 바와 같음)이고/이거나, 아미노산 잔기는 또 다른 VHH 도메인(제WO 08/020079호, 표 A-5 내지 A-8 참조) 중의 동일한 위치에서 자연 발생되는 또 다른 아미노산 잔기에 의해 대체될 수 있지만, 본 발명은 일반적으로 이에 제한되지 않는다. 하나 이상의 골격구조 영역에서 (바람직하게) 만들어진 치환, 삽입 또는 결실은 인간화 치환(즉, 자연 발생 VHH 서열의 아미노산 서열 내 (및 특히 골격구조 서열 내) 1개 이상의 아미노산 잔기를 (인간으로부터의 통상의 4-쇄 항체로부터의 VH 도메인 내 상응하는 위치(들)에서 일어나는 1개 이상의 아미노산 잔기로 치환함)일 수 있다. 몇몇 바람직하나 바람직하지 않은 인간화 치환(및 이의 적당한 조합)은 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 수 있다. 잠재적으로 유용한 인간화 치환은 a)에 정의된 본 발명의 아미노산 서열 중 하나의 골격구조 영역의 서열을 하나 이상의 밀접 관련 인간 VH 서열의 상응하는 골격구조 서열과 비교함으로써 확인될 수 있고, 그 후 이에 결정되는 잠재적으로 유용한 하나 이상의 인간화 치환들(또는 이들의 조합)은, (본원에 추가 기재되는 바와 같이, 자체 공지된 임의의 방식으로) 상기 본 발명의 아미노산 서열에 도입될 수 있고, 생성되는 인간화 아미노산 서열은 HRSV의 단백질 F에 대한 친화도, 안정성, 발현 용이성 및 수준, 및/또는 본원에 정의된 다른 원하는 성질에 대해 시험할 수 있다. 이러한 식으로, 제한된 정도의 시행착오로, 다른 적당한 인간화 치환(또는 이들의 적당한 조합)이 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에 의해 결정될 수 있다.
생성되는 인간화 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 여전히 본원에 정의된 바와 같은 나노바디
의 바람직한 성질을 보유하도록 하는 인간화 치환이 선택되어야 한다. 숙련가는 일반적으로 적당한 인간화 치환 또는 인간화 치환의 적당한 조합을, 본원의 개시내용에 기초하여, 임의적으로는 제한된 수의 가능한 치환을 도입하고 이에 수득된 나노바디
의 성질에 대한 이들의 영향을 결정함을 포함하는 제한된 정도의 일상적 실험 이후에 결정하고 선택할 수 있다.
일반적으로, 인간화의 결과로서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 보다 "인간-유사"화될 수 있는 한편, 본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 나노바디
의 바람직한 성질을 보유한다. 그 결과, 이러한 인간화 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 상응하는 자연 발생 VHH 도메인에 비하여 수개의 이점, 예컨대 감소된 면역원성을 가질 수 있다. 이 역시, 본원의 개시내용에 기초하여, 임의적으로는 제한된 정도의 일상적 실험 이후에, 숙련가는 인간화 치환 또는 인간화 치환의 적당한 조합을 선택할 것이고, 이는 한편의 인간화 치환에 의해 제공된 바람직한 특성 및 다른 한 편의 자연 발생 VHH 도메인의 바람직한 특성 사이의 원하는 또는 적당한 균형을 최적화하거나 달성한다.
본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 임의의 골격구조 잔기(들), 예컨대 하나 이상의 인증 잔기(본원에 정의된 바와 같음)에서, 또는 하나 이상의 다른 골격구조 잔기(즉, 비-인증 잔기) 또는 이의 임의의 적당한 조합에서 적당하게 인간화될 수 있다. "P,R,S-103 군" 또는 "KERE 군"(제WO 08/020079호에 정의된 바와 같음)의 나노바디
에 바람직한 한 인간화 치환은 Q108의 L108로의 치환이다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 발현하는 데 사용되는 숙주 유기체에 따라, 그러한 결실 및/또는 치환은 또한, 당업계의 숙련가의 능력 내에 속하는 방식인, 번역후 변형을 위한 하나 이상의 부위(예컨대 하나 이상의 글리코실화 부위)가 제거되는 식으로 고안될 수도 있다. 대안적으로, 치환 또는 삽입은 작용기(본원에 기재된 바와 같음)의 부착을 위한 하나 이상의 부위를 도입하도록, 예를 들어 부위-특이적 페그화(역시 본원에 기재된 바와 같음)를 허용하도록 고안될 수 있다.
제WO 08/020079호의 표 A-5 내지 A-8에 제시된 VHH 엔트로피 및 VHH 가변능에 대한 데이터에서 볼 수 있는 바와 같이, 골격구조 영역 내의 몇몇 아미노산 잔기는 다른 것들보다 더 잘 보존된다. 일반적으로, 가장 광범위한 의미에서의 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니나, 바람직하게 임의의 치환, 결실 또는 삽입이 보다 덜 보존되는 위치에 만들어진다. 또한, 일반적으로, 아미노산 치환은 아미노산 결실 또는 삽입보다 바람직하다. 본원에 기재된 폴리펩티드에 적용된 임의의 아미노산 치환은 또한 문헌[Schulz et al., Principles of Protein Structure, Springer-Verlag, 1978]에 기재된 상이한 종의 상동 단백질 사이의 아미노산 편차의 빈도에 대한 분석, 문헌[Chou and Fasman, Biochemistry 13: 211, 1974] 및 문헌[Adv. EnzymoL, 47: 45-149, 1978]에 기재된 구조형성 전위의 분석, 및 문헌[Eisenberg et al., Proc. Nacl. Acad. Sci. USA 81: 140-144, 1984]; 문헌[Kyte & Doolittle; J Molec. Biol. 157: 105-132, 1981] 및 문헌[Goldman et al., Ann. Rev. Biophys. Chem. 15: 321-353, 1986]에 기재된 단백질에서 소수성 패턴의 분석에 기초할 수 있고, 이들 모두는 본원에 참고로 이들 전체가 인용되어 있다. 나노바디
의 1차, 2차 및 3차 구조에 대한 정보는 본원 기재내용 및 상기 인용된 일반적 배경지식에서 제공된다. 또한, 이를 위하여, 라마로부터의 VHH 도메인의 결정 구조는 예를 들어 문헌[Desmyter et al., Nature Structural Biology, Vol. 3, 9, 803(1996)]; 문헌[Spinelli et al., Natural Structural Biology (1996); 3, 752-757]; 및 문헌[Decanniere et al., Structure, Vol. 7, 4, 361 (1999)]에 의해 제공된다. 종래의 VH 도메인에서 VH/VL 계면 및 이들 위치에 잠재적 카멜화 치환을 형성하는 몇몇 아미노산 잔기에 대한 추가의 정보는 상기 인용된 선행 기술에서 찾아볼 수 있다.
1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 삽입 또는 결실을 가지는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
, 및 이를 코딩하는 핵산 서열은, 자체 공지된 임의의 방식으로, 예를 들어 제WO 08/020079호의 제103면 및 제104면에 언급된 하나 이상의 기법을 이용하여, 제공될 수 있다.
생성되는 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 바람직하게 본원에 정의된 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나; 본원에 정의된 바와 같은 효능 및/또는 강도로 hRSV를 중화해야 한다.
bb) 2개의 폴리펩티드 서열을 비교할 때, 용어 "아미노산 차이"는, 제2 폴리펩티드와 대비한, 제1 폴리펩티드의 위치 상의 단일 아미노산 잔기의 삽입, 결실 또는 치환을 지칭하고; 2개의 폴리펩티드가 1개, 2개 또는 최대 3개의 그러한 아미노산 차이를 가질 수 있는 것으로 이해된다.
"아미노산 차이"는 폴리펩티드 내, 즉 본 발명의 폴리펩티드의 성질을 향상시키거나 적어도 원하는 성질 또는 본 발명의 폴리펩티드의 원하는 성질의 균형 또는 조합에 지나치게 이탈하지 않는, 하나 이상의 골격구조 영역 또는 하나 이상의 CDR(이는 본 발명의 CDR(즉, CDR2) 내의 것일 수 있고, 또 다른 CDR(즉 CDR1, CDR2 또는 CDR3) 내의 것일 수 있음), 또는 이들의 임의의 조합 내, 임의의 1개, 임의의 2개, 또는 최대 임의의 3개의 치환, 결실 또는 삽입일 수 있다. 이와 관련하여, 생성되는 본 발명의 폴리펩티드는 적어도, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 또는 삽입을 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하여야 하고/하거나; 생성되는 본 발명의 폴리펩티드는 적어도 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 및/또는 삽입을 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도를 가져야 한다. 생성되는 본 발명의 폴리펩티드는 바람직하게 본원에 정의된 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나; 본원에 정의된 바와 같은 효능 및/또는 강도로 hRSV를 중화해야 한다. 숙련가는 일반적으로 본원의 개시내용에 기초하여, 또한 임의적으로는 예를 들어 제한된 수의 가능한 치환, 결실 또는 삽입을 도입하고, 이에 수득되는 폴리펩티드의 성질에 대한 영향을 결정하는 것을 포함할 수 있는 제한된 정도의 통상의 실험 후에, 적당한 치환, 결실 또는 삽입, 또는 이들의 적당한 조합을 결정하고 선택할 수 있을 것이다.
본 발명의 한 양태에서, "아미노산 차이"는 아미노산 치환이다. 아미노산 치환은 본 발명의 폴리펩티드의 성질을 향상시키거나 적어도 원하는 성질 또는 본 발명의 폴리펩티드의 원하는 성질의 균형 또는 조합에 지나치게 이탈하지 않는, 하나 이상의 골격구조 영역 또는 하나 이상의 CDR(이는 본 발명의 CDR(즉, CDR2) 내의 것일 수 있고, 또 다른 CDR(즉 CDR1, CDR2 또는 CDR3) 내의 것일 수 있음), 또는 이들의 임의의 조합 내, 임의의 1개, 임의의 2개, 또는 최대 임의의 3개의 치환일 수 있다. 이와 관련하여, 생성되는 본 발명의 폴리펩티드는 적어도, 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 또는 삽입을 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하여야 하고/하거나; 생성되는 본 발명의 폴리펩티드는 적어도 1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 결실 및/또는 삽입을 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도를 가져야 한다. 생성되는 본 발명의 폴리펩티드는 바람직하게 본원에 정의된 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나; 본원에 정의된 바와 같은 효능 및/또는 강도로 hRSV를 중화해야 한다. 숙련가는 일반적으로 본원의 개시내용에 기초하여, 또한 임의적으로는 예를 들어 제한된 수의 가능한 치환, 결실 또는 삽입을 도입하고, 이에 수득되는 폴리펩티드의 성질에 대한 영향을 결정하는 것을 포함할 수 있는 제한된 정도의 통상의 실험 후에, 적당한 치환, 결실 또는 삽입, 또는 이들의 적당한 조합을 결정하고 선택할 수 있을 것이다.
상기 논의된 바와 같이, 치환, 삽입 또는 결실은 하나 이상의 골격구조 영역 및/또는 하나 이상의 CDR에서의 것일 수 있다. 상기 논의된 바와 같이(상기 z 항목) 단락 참조), 하나 이상의 CDR에서의 치환, 삽입 또는 결실은 "보존적 치환"(본원에 정의된 바와 같음)과 같은 임의의 가능한 임의의 가능한 치환, 삽입 또는 결실일 수 있고, 그것은 특정 규칙(본원에 정의된 바와 같음)에 의해 유도되고/되거나, 생성되는 폴리펩티드에 향상된 성질을 유도할 수 있다.
그러한 치환, 삽입 또는 결실이 하나 이상의 골격구조 영역에서 만들어질 경우, 이들은 하나 이상의 인증 잔기(예를 들어 제WO 08/020079호; 표 A-3 내지 A-8에 정의된 바와 같음) 및/또는 골격구조 잔기 내 하나 이상의 다른 위치에서 만들어질 수 있지만, 인증 잔기에서의 이러한 치환, 삽입 또는 결실은 일반적으로 덜 바람직하다(이들이 본원에 기재된 바와 같은 적당한 인간화 치환이 아닌 경우). 비제한적 예에 의해, 치환은 예를 들어 보존적 치환(본원에 기재된 바와 같음)이고/이거나, 아미노산 잔기는 또 다른 VHH 도메인(제WO 08/020079호, 표 A-5 내지 A-8 참조) 중의 동일한 위치에서 자연 발생되는 또 다른 아미노산 잔기에 의해 대체될 수 있지만, 본 발명은 일반적으로 이에 제한되지 않는다. 하나 이상의 골격구조 영역에서 (바람직하게) 만들어진 치환, 삽입 또는 결실은 인간화 치환(즉, 자연 발생 VHH 서열의 아미노산 서열 내 (및 특히 골격구조 서열 내) 1개 이상의 아미노산 잔기를 (인간으로부터의 통상의 4-쇄 항체로부터의 VH 도메인 내 상응하는 위치(들)에서 일어나는 1개 이상의 아미노산 잔기로 치환함)일 수 있다. 몇몇 바람직하나 바람직하지 않은 인간화 치환(및 이의 적당한 조합)은 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 수 있다. 잠재적으로 유용한 인간화 치환은 a)에 정의된 본 발명의 폴리펩티드 내에 포함되는 아미노산 서열 중 하나의 골격구조 영역의 서열을 하나 이상의 밀접 관련 인간 VH 서열의 상응하는 골격구조 서열과 비교함으로써 확인될 수 있고, 그 후 이에 결정되는 잠재적으로 유용한 하나 이상의 인간화 치환들(또는 이들의 조합)은, (본원에 추가 기재되는 바와 같이, 자체 공지된 임의의 방식으로) 상기 본 발명의 아미노산 서열에 도입될 수 있고, 생성되는 폴리펩티드는 HRSV의 단백질 F에 대한 친화도, 안정성, 발현 용이성 및 수준, 및/또는 본원에 정의된 다른 원하는 성질에 대해 시험할 수 있다. 이러한 식으로, 제한된 정도의 시행착오로, 다른 적당한 인간화 치환(또는 이들의 적당한 조합)이 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에 의해 결정될 수 있다.
인간화 치환은 생성되는 인간화 폴리펩티드 서열이 여전히 본원에 정의된 바와 같은 폴리펩티드에 포함되는 나노바디
의 바람직한 성질을 보유하도록 선택되어야 한다. 숙련가는 일반적으로 적당한 인간화 치환 또는 인간화 치환의 적당한 조합을, 본원의 개시내용에 기초하여, 임의적으로는 제한된 수의 가능한 치환을 도입하고 이에 수득된 폴리펩티드에 포함되는 나노바디
의 성질에 대한 이들의 영향을 결정함을 포함하는 제한된 정도의 일상적 실험 이후에 결정하고 선택할 수 있다.
일반적으로, 인간화의 결과로서, 본 발명의 폴리펩티드는 보다 "인간-유사"화될 수 있는 한편, 본원에 기재된 바와 같은 본 발명의 폴리펩티드에 포함되는 나노바디
의 바람직한 성질을 보유한다. 그 결과, 이러한 인간화 폴리펩티드는 상응하는 자연 발생 VHH 도메인을 포함하는 폴리펩티드에 비하여 수개의 이점, 예컨대 감소된 면역원성을 가질 수 있다. 이 역시, 본원의 개시내용에 기초하여, 임의적으로는 제한된 정도의 일상적 실험 이후에, 숙련가는 인간화 치환 또는 인간화 치환의 적당한 조합을 선택할 것이고, 이는 한편의 인간화 치환에 의해 제공된 바람직한 특성 및 다른 한 편의 자연 발생 VHH 도메인의 바람직한 특성 사이의 원하는 또는 적당한 균형을 최적화하거나 달성한다. 본 발명의 폴리펩티드는 임의의 골격구조 잔기(들), 예컨대 하나 이상의 인증 잔기(본원에 정의된 바와 같음)에서, 또는 하나 이상의 다른 골격구조 잔기(즉, 비-인증 잔기) 또는 이의 임의의 적당한 조합에서 적당하게 인간화될 수 있다. "P,R,S-103 군" 또는 "KERE 군"의 나노바디
에 바람직한 한 인간화 치환은 L108로의 Q108이다.
본 발명의 폴리펩티드를 발현하는 데 사용되는 숙주 유기체에 따라, 그러한 결실 및/또는 치환은 또한, 당업계의 숙련가의 능력 내에 속하는 방식인, 번역후 변형을 위한 하나 이상의 부위(예컨대 하나 이상의 글리코실화 부위)가 제거되는 식으로 고안될 수도 있다. 대안적으로, 치환 또는 삽입은 작용기(본원에 기재된 바와 같음)의 부착을 위한 하나 이상의 부위를 도입하도록, 예를 들어 부위-특이적 페그화(역시 본원에 기재된 바와 같음)를 허용하도록 고안될 수 있다. 제WO 08/020079호의 표 A-5 내지 A-8에 제시된 VHH 엔트로피 및 VHH 가변능에 대한 데이터에서 볼 수 있는 바와 같이, 골격구조 영역 내의 몇몇 아미노산 잔기는 다른 것들보다 더 잘 보존된다. 일반적으로, 가장 광범위한 의미에서의 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니나, 바람직하게 임의의 치환, 결실 또는 삽입이 보다 덜 보존되는 위치에 만들어진다. 또한, 일반적으로, 아미노산 치환은 아미노산 결실 또는 삽입보다 바람직하다. 본원에 기재된 폴리펩티드에 적용된 임의의 아미노산 치환은 또한 문헌[Schulz et al., Principles of Protein Structure, Springer-Verlag, 1978]에 기재된 상이한 종의 상동 단백질 사이의 아미노산 편차의 빈도에 대한 분석, 문헌[Chou and Fasman, Biochemistry 13: 211, 1974] 및 문헌[Adv. EnzymoL, 47: 45-149, 1978]에 기재된 구조형성 전위의 분석, 및 문헌[Eisenberg et al., Proc. Nacl. Acad. Sci. USA 81: 140-144, 1984]; 문헌[Kyte & Doolittle; J Molec. Biol. 157: 105-132, 1981] 및 문헌[Goldman et al., Ann. Rev. Biophys. Chem. 15: 321-353, 1986]에 기재된 단백질에서 소수성 패턴의 분석에 기초할 수 있고, 이들 모두는 본원에 참고로 이들 전체가 인용되어 있다. 나노바디
의 1차, 2차 및 3차 구조에 대한 정보는 본원 기재내용 및 상기 인용된 일반적 배경지식에서 제공된다. 또한, 이를 위하여, 라마로부터의 VHH 도메인의 결정 구조는 예를 들어 문헌[Desmyter et al., Nature Structural Biology, Vol. 3, 9, 803(1996)]; 문헌[Spinelli et al., Natural Structural Biology (1996); 3, 752-757]; 및 문헌[Decanniere et al., Structure, Vol. 7, 4, 361 (1999)]에 의해 제공된다. 종래의 VH 도메인에서 VH/VL 계면 및 이들 위치에 잠재적 카멜화 치환을 형성하는 몇몇 아미노산 잔기에 대한 추가의 정보는 상기 인용된 선행 기술에서 찾아볼 수 있다.
1개, 2개 또는 최대 3개의 치환, 삽입 또는 결실을 가지는 폴리펩티드, 및 이를 코딩하는 핵산 서열은, 자체 공지된 임의의 방식으로, 예를 들어 제WO 08/020079호의 제103면 및 제104면에 언급된 하나 이상의 기법을 이용하여, 제공될 수 있다.
생성되는 본 발명의 폴리펩티드는 바람직하게 본원에 정의된 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나; 본원에 정의된 바와 같은 효능 및/또는 강도로 hRSV를 중화해야 한다.
cc) 숫자, 서열 목록 및 실험 파트/실시예는 단지 본 발명을 추가 설명하기 위해 제시된 것으로서, 본원에서 달리 명료히 지시되지 않는 한, 본 발명 및/또는 첨부된 특허청구범위의 범주를 어떠한 식으로도 제한하는 것으로 해석되거나 간주되어서는 안된다.
hRSV의 단백질 F 상의 에피토프에의 결합을 위해, 본 발명의 아미노산 서열은 통상적으로 그것의 아미노산 서열 내에 1개 이상의 아미노산 잔기 또는 아미노산 잔기의 하나 이상의 신장부(stretch)(즉, 각 "신장부"는 아미노산 서열의 1차 또는 3차 구조에서 서로에 대해 인접하거나 서로에 대해 아주 근접한 2개 이상의 아미노산 잔기를 포함함)를 함유하는데, 이를 통해 본 발명의 아미노산 서열은 hRSV의 단백질 F 상의 에피토프에 결합할 수 있고, 따라서 그러한 아미노산 잔기 또는 아미노산 잔기의 신장부는 hRSV의 단백질 F 상의 에피토프로의 결합을 위한 "부위"(또한 본원에 "항원 결합 부위"로서 지칭됨)를 형성한다.
본 발명은 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에의 결합을 위해 특히 적합화된 아미노산 잔기의 다수의 신장부(본원에 정의된 바와 같음)를 제공한다(hRSV F 단백질 내 항원 부위에 대한 설명을 위해, 문헌[Lopez et al. 1998, J. virol. 72: 6922-6928]을 참조한다). 이들 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열의 항원 결합 부위(의 부분)를 형성하도록 하는 식으로, 본 발명의 아미노산 서열 내에 존재하고/하거나 그 서열 내에 도입될 수 있다. 생성되는 아미노산 서열은 hRSV의 단백질 F의 항원 부위 II 내에 존재하거나, 그것의 부분을 형성하거나, 그것과 중첩되거나(즉, 1차 구조 또는 3차 구조임), 그것과 매우 근접하는(즉, 1차 구조 또는 3차 구조) 특정 hRSV의 단백질 F 상의 한 에피토프에 결합할 것이다. 또한, 생성되는 본 발명의 아미노산 서열은 바람직하게 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하고/하거나; 그것이 시나지스
로서 hRSV의 단백질 F 상의 동일 에피토프 또는 결합 부위 또는 상기 부위에 근접하고/하거나 상기 결합 부위와 중첩하는 에피토프에 결합할 수 있도록 할 것이다.
본 발명은 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 특히 적합화된 아미노산 잔기(서열 번호 102)의 신장부를 제공한다. 이 아미노산 잔기의 신장부(또는 본원에 정의된 바와 같은 서열 번호 102의 변형체)는 본 발명의 아미노산 서열의 항원 결합 부위(의 부분)를 형성하도록 하는 식으로, 본 발명의 아미노산 서열 내에 존재하고/하거나 그 서열 내에 도입될 수 있다. 아미노산 잔기의 신장부는, hRSV의 단백질 F에 대해 제기되고 인간화 NC41 나노바디
(실시예 단락에 기재된 바와 같음)를 발생시키기 위한 라이브러리 기법으로 추가 변형된 중쇄 항체 또는 VHH 서열 (NC41; 서열 번호 5)의 CDR2 서열로 생성되었다. 보다 특히, NC41의 CDR2의 위치 6의 글리신(Gly, G) 잔기는 아스파르트산(Asp, D) 잔기로 치환되었다. 놀랍게도, 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도가 이 아미노산 잔기(서열 번호 102)의 신장부를 포함하는 아미노산 서열에 대해 관찰되었다. 이 아미노산 잔기의 신장부(또는 서열 번호 102의 변형체, 본원에 정의된 바와 같음)도 또한 "본 발명의 CDR2 서열"로도 본원에서 지칭된다.
따라서, 한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 아미노산 서열을 제공한다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨); 및
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열 내에 항상 존재하여, 아미노산 잔기의 제2 신장부가 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되게 되는,
아미노산 잔기의 2개 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열을 제공한다.
더욱 더 바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열은 아미노산 잔기의 3개 이상의 신장부를 포함하는데, 여기에서
아미노산 잔기의 제1 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제2 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제3 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
아미노산 잔기의 하나 이상의 상기 특정 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 예를 들어 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 측정되고/되거나 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도와 같은 향상된 성질을 나타낸다.
보다 특히, 아미노산 잔기의 하나 이상의 상기 특정 신장부를 포함하는 본 발명의 아미노산 서열은 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합할 수 있고, 이에 따라 바람직하게 상기 아미노산 서열은
- 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 15 nM 내지 1 nM, 또는 더욱 더 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s-1 내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 10-2 s-1(t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합한다.
본 발명의 아미노산 서열을 hRSV의 단백질 F에 결합시키기 위한 몇몇 바람직한 IC50 값은 본원의 추가 기재내용 및 실시예를 통해 명백해질 것이다.
IC50을 결정하는 검정에는 경쟁 검정, 예컨대 경쟁 ELISA(예를 들어 시나지스
또는 이의 Fab 단편과의 경쟁) 또는 더욱 바람직하게는 중화 검정, 예컨대 문헌[Anderson et al. (1985, J. Clin. Microbiol 22: 1050-1052; 1988, J. Virol. 62: 4232-4238)]에 기재된 검정, 이들 검정의 변형법, 예컨대 실시예 6에 기재된 방법, 또는 예를 들어 문헌[Johnson et al.(1997, J. Inf. Dis. 176: 1215-1224)]에 기재된 플라크 감소 검정, 및 이들의 변형법과 같은 경쟁 검정이 포함된다.
예를 들어, 시나지스
의 Fab 단편과의 경쟁 검정에서, 본 발명의 아미노산 서열은 1 nM 내지 100 nM, 바람직하게는 10 nM 내지 50 nM, 또는 그 미만의 IC50 값을 가질 수 있다.
예를 들어, hRSV 롱 상의 마이크로중화 검정(예를 들어 실시예 6에 기재된 바와 같음)에서, 본 발명의 아미노산 서열은 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값을 가질 수 있다.
본 발명이 본 발명의 아미노산 서열(또는 이를 발현하는 데 사용되는 본 발명의 뉴클레오티드 서열)의 기원에 대해서 제한되지 않고, 또한 본 발명의 아미노산 서열 또는 뉴클레오티드 서열도 생성되거나 수득되지 않음(않았음)을 주지해야 한다. 따라서, 본 발명의 아미노산 서열은 (임의의 적당한 종으로부터의) 자연 발생 아미노산 서열이거나 합성 또는 반합성 아미노산 서열일 수 있다.
가장 광범위한 의미의 본 발명이, 아미노산 잔기의 신장부가 본 발명의 아미노산 서열이 특정 친화도 및/또는 강도(본원에 정의된 바와 같음)로 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 결합하도록 하는 한, 아미노산 잔기의 신장부가 본 발명의 아미노산 서열 내에 가질 수 있는 특정 구조 또는 기능에 제한되지 않음을 주지해야 한다. 따라서, 일반적으로, 가장 광범위한 의미의 본 발명은, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 결합할 수 있고 1개 이상의 추가 아미노산 서열을 통해 서로 적당하게 연결된 본원에 정의된 바와 같은 아미노산 잔기의 1개 이상의 신장부 (특히 상기 아미노산 잔기의 2개 이상의 신장부의 적당한 조합)을 포함하고, 이에 따라 전체 아미노산 서열은 hRSV의 단백질 F 상의 적당한 조합 II에 결합할 수 있는 결합 도메인 및/또는 결합 단위를 형성한다.
그러한 아미노산 서열은 그러한 CDR 서열에 상응하는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부(즉, 이의 항원 결합 부위의 일부로서)를 포함하는 적당한 "단백질 스카폴드(protein scaffold)"일 수 있다. 아미노산 서열을 제시하기에 적당한 스카폴드는 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어, 비제한적으로, 면역글로불린에 기초하거나 이로부터 유도된 결합 골격(즉, 본원에 이미 기재된 면역글로불린 서열과 다름), 단백질 A 도메인으로부터 유도된 단백질 스카폴드(예컨대 아피바디(Affibodies)TM), 텐다미스타트(tendamistat), 피브로넥틴(fibronectin), 리포칼린(lipocalin), CTLA-4, T-세포 수용체, 고안된 안키린(ankyrin) 반복부, 아비머(avimer) 및 PDZ 도메인(Binz et al., 2005, Nat. Biotech., Vol 23:1257), 및 DNA 또는 RNA에 기초한 결합 잔기, 제한되지 않지만 DNA 또는 RNA 압타머(aptamer)(문헌[Ulrich et al., 2006, Comb. Chem. High Throughput Screen 9(8): 619-32])가 포함된다.
이 역시, 본 발명의 아미노산 서열에 대해 본원에 정의된 바와 같은 아미노산 서열의 1개 이상의 신장부를 포함하는 본 발명의 임의의 아미노산 서열은 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합(본원에 정의된 바와 같음)할 수 있고, 보다 특히 본원에 정의된 바와 같은 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하는 것이 바람직하다. 본 발명의 아미노산 서열에 대해 본원에 정의된 바와 같은 아미노산 서열의 1개 이상의 신장부를 포함하는 본 발명의 임의의 아미노산 서열은, 본원에 정의된 바와 같은 강도(본원에 정의된 바와 같은 적당한 검정으로 측정된 바와 같음)로 hRSV를 중화하는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명의 아미노산 서열에 대해 본원에 언급된 하나 이상의 CDR을 다른 단백질 "스카폴드", 예를 들어 단 이에 제한되지 않지만 인간 스카폴드 또는 비-면역글로불린 스카폴드에 "이식"하는 것이 가능함은 당분야의 숙련가에게 명백할 것이다. 그러한 CDR 이식에 적당한 스카폴드 및 기법은 숙련가에게 명백할 것이고, 당분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 제US 7,180,370호, 제WO 01/27160호, 제EP 0 605 522호, 제EP 0 460 167호, 제US 7,054,297호, 문헌[Nicaise et al., Protein Science (2004), 13:1882-1891]; [Ewert et al., Methods, 2004 Oct; 34(2): 184-199]; [Kettleborough et al., Protein Eng. 1991 Oct; 4(7): 773-783]; [O'Brien and Jones, Methods Mol. Biol. 2003: 207: 81-100]; [Skerra, J. Mol. Recognit. 2000: 13: 167-187]; 및 [Saerens et al., J. Mol. Biol. 2005 Sep 23;352(3):597-607], 및 본원에 인용된 추가의 문헌을 참조한다. 예를 들어, 마우스 또는 래트 CDR을 인간 골격구조 및 스카폴드로 이식하는 자체 공지된 기법이 유사한 방식으로 사용되어 본 발명의 아미노산 서열 및 하나 이상의 인간 골격구조 영역 또는 서열에 대해 본원에 정의된 하나 이상의 CDR 서열을 포함하는 키메라성(chimeric) 단백질을 제공할 수 있다.
특정의, 다만 비제한적인 하나의 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열은 면역글로불린 접힘부(fold)를 포함하는 아미노산 서열이거나, 적당한 조건(예컨대 생리학적 조건)하에 면역글로불린 접힘부를 형성할 수 있는(즉, 접음으로써) 아미노산 서열일 수 있다. 무엇보다도 문헌[Halaby et al., J. 1999, Protein Eng. 12: 563-71]을 참조한다. 바람직하게, 면역글로불린 접힘부를 형성하도록 적절히 접힐 경우, 아미노산 잔기의 신장부는 hRSV의 단백질 F 상의 특정 항원 부위 II에 대한 항원 결합 부위를 형성할 수 있고; 보다 바람직하게는 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 본원에 정의된 바와 같은 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 결합될 수 있다.
또 다른 구체적이나 비제한적인 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열은 면역글로불린 서열이다. 특히, 단 비제한적으로, 본 발명의 아미노산 서열은 4개의 골격구조 영역(각각 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각각 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열; 또는 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 여전히 결합하는 상기 아미노산 서열의 임의의 적당한 단편일 수 있다.
그러한 본 발명의 아미노산 서열에서, 골격구조 서열은 임의의 적당한 골격구조 서열일 수 있고, 적당한 골격구조 서열의 예는 숙련가에게, 예를 들어 기초 표준 편람 및 본원에 언급된 추가 개시내용 및 종래 기술에 기초하여 명백할 것이다.
골격구조 서열은 바람직하게 면역글로불린 골격구조 서열, 또는 면역글로불린 골격구조 서열로부터 (예를 들어, 인간화 또는 카멜화에 의해) 유도된 골격구조 서열(의 적당한 조합)이다. 예를 들어, 골격구조 서열은 경쇄 가변 도메인(예를 들어 VL-서열) 및/또는 중쇄 가변 도메인(예를 들어 VH-서열)로부터 유래된 골격구조 서열일 수 있다. 본 발명의 아미노산 서열이 중쇄 가변 도메인 서열일 경우, 그것은 종래의 4-쇄 항체로부터 유도된 중쇄 가변 도메인 서열(예컨대, 비제한적으로, 인간 항체로부터 유도된 VH 서열), 또는 소위 "중쇄 항체"(본원에 정의된 바와 같음)로부터 유도된 소위 VHH-서열(본원에 정의된 바와 같음)이다. 한 특히 바람직한 양태에서, 골격구조 서열은 골격구조 서열이 임의적으로 부분 또는 완전 인간화되었을 수 있는) VHH-서열로부터 유도된 골격구조 서열이거나, 카멜화된 통상적 VH 서열(본원에 정의된 바와 같음)일 수 있다.
중쇄 항체 및 이의 가변 도메인의 일반 설명을 위해, 특히 본원에 인용된 종래 기술뿐만 아니라, 제WO 08/020079호의 제59면 및 국제특허출원 제WO 06/040153호의 제41면 내지 제43면에 언급된 참조문헌 목록을 참조하며, 이들 종래 기술 및 참조문헌은 본원에 참조 인용된다.
골격구조 서열은 본 발명의 아미노산 서열이 도메인 항체(또는 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열)인 것이 바람직할 수 있고; 단일 도메인 항체(또는 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열)이며; "dAb"(또는 dAb로 사용하게 적당한 아미노산 서열)이거나; 나노바디
(VHH 서열을 포함하나 이에 제한되지 않음)이다. 이 또한, 적당한 골격구조 서열은 숙련가에게, 예를 들어 기초 표준 편람 및 본원에 언급된 추가 개시내용 및 종래 기술에 기초하여 명백할 것이다.
특히, 본 발명의 아미노산 서열 내에 존재하는 골격구조 서열은 하나 이상의 인증 잔기(제WO 08/020079호(표 A-3 내지 A-8))에 정의된 바와 같음)를 포함할 수 있고, 이에 따라 본 발명의 아미노산 서열은 나노바디
이다. 그러한 골격구조 서열(의 적당한 조합)의 몇몇 바람직하나 비제한적인 예는 본원의 추가 개시내용으로부터 명백해질 것이다(예를 들어 표 A-6 참조). 일반적으로, 나노바디
(특히 VHH 서열 및 부분 인간화 나노바디
)는 (예를 들어 제WO 08/020079호, 제61면의 제24행 내지 제98면의 제3행에 추가 기재된 바와 같은) 특히 하나 이상의 골격구조 서열 내에 하나 이상의 "인증 잔기"가 존재하는 것을 특징으로 할 수 있다.
본원에 이미 기재된 바와 같이, 나노바디
의 아미노산 서열 및 구조는 이에 제한되지 않지만 4개의 골격구조 영역 또는 "FR"로 구성되는 것으로 간주될 수 있고, 이는 당분야 및 본원에 각기 "골격구조 영역 1" 또는 "FR1"; "골격구조 영역 2" 또는 "FR2"; "골격구조 영역 3" 또는 "FR3"; 및 "골격구조 영역 4" 또는 "FR4"로 지칭되고; 상기 골격구조 영역은 3개의 상보성 결정 영역 또는 "CDR"에 의해 중단되고, 이는 당분야에 각기 "상보성 결정 영역 1" 또는 "CDR1"; "상보성 결정 영역 2" 또는 "CDR2"; 및 "상보성 결정 영역 3" 또는 "CDR3"로 지칭된다. 본 발명의 나노바디
내에 존재하는 몇몇 바람직한 골격구조 서열 및 CDR(및 이의 조합)은 본원에 기재된 바와 같다.
따라서, 일반적으로 나노바디
는 하기 (일반) 구조를 가지는 아미노산 서열로서 정의될 수 있다:
FR1 - CDR1 - FR2 - CDR2 - FR3 - CDR3 - FR4
상기 식에서, FR1 내지 FR4는 각기 골격구조 영역 1 내지 4를 지칭하고, CDR1 내지 CDR3은 각기 상보성 결정 영역 1 내지 3을 지칭하고, 하나 이상의 인증 잔기는 본원에 추가로 정의된 바와 같다.
이와 관련하여, 본 발명의 아미노산 서열은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서 CDR2은 하기의 것들로부터 선택된다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨); 및
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
상기 바람직한 상보성 결정 영역(CDR2 서열)은 또한 "본 발명의 CDR2 (들)"로도 지칭된다.
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서 CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
CDR1 또는 CDR3 중 적어도 하나는 하기의 것들로부터 선택되며:
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR1:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및/또는
- CDR3는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
더욱 더 바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서
- CDR1는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 또는
0 CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR3는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 구체적 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 적어도 서열 번호 102를 포함한다.
또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함한다:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 적어도 서열 번호 102 및 적어도 2개의 아미노산 잔기(CDR 서열)의 신장부를 포함하는데, 여기에서 1개의 신장부는 a) 및 b)에 정의된 아미노산 잔기의 신장부로 구성된 군으로부터 선택되고, 다른 신장부는 c) 및 d)에 정의된 아미노산 잔기의 신장부로 구성된 군으로부터 선택된다.
또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 적어도 서열 번호 102, 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함한다.
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121을 포함한다.
CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열의 바람직한 조합이 또한 표 A-6에 나와 있다.
본 발명의 아미노산 서열은 종래의 4-쇄 항체로부터 유도된 중쇄 가변 도메인 서열로 본질적으로 구성될 수 있거나, 중쇄 항체로부터 유도된 중쇄 가변 도메인 서열로 본질적으로 구성될 수 있다. 본 발명의 아미노산 서열은 도메인 항체(또는 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열); 단일 도메인 항체(또는 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열); "dAb"(또는 dAb로 사용하게 적당한 아미노산 서열); 또는 나노바디
로 본질적으로 구성될 수 있다.
(단일) 도메인 항체의 일반 설명을 위해, 상기 인용된 종래 기술뿐만 아니라, EP 0 368 684도 참조할 수 있다. 용어 "dAb"에 대해서는, 예를 들어 문헌[Ward et al. (1989, Nature 341: 544-6)] 및 [Holt et al., 2003, Trends Biotechnol. 21: 484-490]뿐만 아니라; 예를 들어 제WO 06/030220, 제WO 06/003388호 및 [Domantis Ltd.]의 기타 공개 특허출원도 참조할 수 있다. 또한, 포유동물 기원이 아니기 때문에 본 발명과 관련하여 덜 바람직할 수 있으나, 단일 도메인 항체 또는 단일 가변 도메인이 특정 종의 상어로부터 유도될 수 있음도 주지해야 한다(예를 들어, 소위 "IgNAR 도메인", 예를 들어 제WO 05/18629호 참조).
특히, 본 발명의 아미노산 서열은 나노바디
(본원에 정의된 바와 같음) 또는 이의 적당한 단편으로 본질적으로 구성될 수 있다. [주: 나노바디 
, 나노바디 
들, 및 모노클론 ( Monoclone ) 
은 [Ablynx N.V.]의 등록 상표이다].
나노바디
는 이하 (일반) 구조를 가지는 아미노산 서열로 정의될 수 있다:
FR1 - CDR1 - FR2 - CDR2 - FR3 - CDR3 - FR4
여기에서, FR1 내지 FR4는 각기 골격구조 영역 1 내지 4를 지칭하고, CDR1 내지 CDR3은 각기 상보성 결정 영역 1 내지 3을 지칭하며, 하나 이상의 인증 잔기는 제WO 08/020079호(표 A-3 내지 A-8)에 정의된 바와 같다.
보다 특히, 나노바디
는 이하 (일반) 구조를 가지는 아미노산 서열일 수 있다:
FR1 - CDR1 - FR2 - CDR2 - FR3 - CDR3 - FR4
여기에서, FR1 내지 FR4는 각기 골격구조 영역 1 내지 4를 지칭하고, CDR1 내지 CDR3은 각기 상보성 결정 영역 1 내지 3을 지칭하고, 상기 나노바디
는:
i) 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157(표 A-4 참조)의 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 아미노산 동일성을 가진다(여기에서, 아미노산 동일도를 결정하기 위한 목적으로, CDR 서열을 형성하는 아미노산 잔기는 무시된다. 이와 관련하여, 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157(표 A-4 참조)의 나노바디
의 골격구조 1 서열(서열 번호 81-97 및 166), 골격구조 2 서열(서열 번호 99-100), 골격구조 3 서열(서열 번호 103-120 및 167-168) 및 골격구조 4 서열(서열 번호 123 및 169)을 열거하는 표 A-6도 또한 참조하고; 여기에서
ii) 바람직하게 카밧 번호매김에 따른 위치 11, 37, 44, 45, 47, 83, 84, 103, 104 및 108의 1개 이상의 아미노산 잔기가 제WO 08/020079호의 표 A-3 내지 표 A-8에 언급된 인증 잔기들로부터 선택된다.
나노바디
의 추가 일반 설명을 위해, 본원에 언급된 종래 기술, 예컨대 예를 들어 제WO 08/020079호(16면)를 참조한다.
그러한 나노바디
는 임의의 적당한 방식으로, 또한 임의의 적당한 출처로부터 유도될 수 있고, 예를 들어 자연 발생 VHH 서열(즉, 적당한 종의 카멜리드로부터의 서열), 또는 합성 또는 반합성 아미노산 서열일 수 있다.
이 또한, 그러한 나노바디
는 임의의 적당한 방식으로, 또한 임의의 적당한 출처로부터 유도될 수 있고, 예를 들어 자연 발생 VHH 서열(즉, 적당한 종의 카멜리드로부터의 서열) 또는 합성 또는 반합성 아미노산 서열일 수 있고, 이에는 제한되는 것은 아니나, "인간화" 나노바디
(본원에 정의된 바와 같음), "카멜화(camelized)" 나노바디
(본원에 정의된 바와 같음)뿐만 아니라, 친화도 증진(affinity maturation)(예를 들어, 합성, 랜덤 또는 자연 발생 면역글로불린 서열로부터 출발함), CDR 그라프팅(grafting), 베니어링(veneering), 상이한 면역글로불린 서열로부터의 단편들의 조합, 중첩 프라이머(primer)를 사용한 PCR 어셈블리, 및 숙련가에게 공지된 면역글로불린 서열을 조작하기 위한 유사 기법; 또는 본원에 추가 기재되는 바와 같은 전술된 기법들 중 임의의 적당한 조합 등의 기법에 의해 수득된 면역글로불린이 포함된다. 또한, 나노바디
는 VHH 서열을 포함하고, 상기 나노바디
는 본 발명의 1개 이상의 추가 (부분 또는 완전) 인간화 나노바디
를 제공하기 위해, 본원에 추가 기재되는 바와 같이 적당하게 인간화될 수 있다. 유사하게, 나노바디
가 합성 또는 반합성 서열(예컨대, 부분 인간화 서열)을 포함하는 경우, 상기 나노바디
는 이 역시 본 발명의 1개 이상의 추가 (부분 또는 완전) 인간화 나노바디
를 제공하기 위해, 역시 본원에 기재된 바와 같이, 임의적으로 추가 적당하게 인간화될 수 있다.
특히, 인간화 나노바디
는 적어도 하나의 아미노산 잔기가 존재(특히, 적어도 하나의 골격구조 잔기 내에 존재)하나, 인간화 치환(본원에 정의된 바와 같음)이거나 이에 상응하는 전단락에서 나노바디
에 대해 일반적으로 정의된 바와 같은 아미노산 서열일 수 있다. 바람직하나 비제한적인 몇몇 인간화 치환 (및 이의 적당한 조합)이 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이다. 또한, 또는 대안적으로, 다른 잠재적으로 유용한 인간화 치환은, 자연 발생 VHH 서열의 골격구조 영역의 서열을 하나 이상의 밀접 관련 인간 VH 서열의 상응하는 골격구조 서열과 비교함으로써 입증될 수 있고, 그 후, 이에 결정된 잠재적으로 유용한 인간화 치환(또는 이들의 조합)의 하나 이상은 상기 VHH 서열에 (추가 기재되는 바와 같이, 자체 공지된 임의의 방식으로) 도입될 수 있고, 생성되는 인간화 VHH 서열은 표적에 대한 친화도, 안정성, 발현 용이성 및 수준, 및/또는 본원에 정의된 다른 원하는 성질에 대해 시험할 수 있다. 이러한 식으로, 제한된 정도의 시행착오로, 다른 적당한 인간화 치환(또는 이들의 적당한 조합)이 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에 의해 결정될 수 있다. 또한, 전술된 내용에 기초하여, 나노바디
의 (골격구조 영역)은 부분 인간화 또는 완전 인간화된 것일 수 있다.
이와 관련하여, 본 발명의 몇몇 바람직한 나노바디
는,
hRSV의 단백질 F에 (본원에 추가 정의된 바와 같이) 특이적으로 결합하고,
i) 서열 번호 5(표 A-1)를 가지는 아미노산 서열의 인간화 변형체이고/이거나;
ii) 서열 번호 5(표 A-1 참조)의 아미노산 서열 중 적어도 하나 및/또는 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157(표 A-4)의 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 아미노산 동일성을 가지며(여기에서, 아미노산 동일도를 결정하기 위한 목적으로, CDR 서열을 형성하는 아미노산 잔기는 무시됨); 여기에서
iii) 바람직하게 카밧 넘버링에 따른 위치 11, 37, 44, 45, 47, 83, 84, 103, 104 및 108의 아미노산 잔기 중 하나 이상이 제WO 08/020079호의 표 A-3 내지 표 A-8에 언급된 인증 장기로부터 선택되는,
나노바디
이다.
본 발명은 hRSV의 단백질 F에의 결합에 특히 적합화된 다수의 인간화 및/또는 서열 최적화 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 제공한다. 그러므로, 본 발명의 한 양태에서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 제공된다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열, 단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 60-76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택된다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택된다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Glu, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명은 또한 하기의 것들로부터 선택되는 다수의 인간화 및/또는 서열 최적화 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 제공한다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 146-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택된다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
iii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디는 인간 대상에게 투여 시에 감소된 면역원성을 나타내고, 또한 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는, 그것의 상응하는 모 아미노산 서열(PCT 출원 PCT/EP2009/055975 발명의 명칭: "Amino acid sequences directed against envelope proteins of a virus and polypeptides comprising the same for the treatment of viral diseases" 2009년 6월 5일 Ablynx N.V. 출원에 기재된 바와 같음)에 비해, hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)을 나타낸다.
본 발명의 나노바디의 생성 중, 아미노 말단 상의 높은 수준의 파이로글루타메이트(pGlu)가 RP-HPLC에 의해 검출되었다. 15% 초과의 pGlu 수준이 발효 후에 검출되었고, pGlu의 수준은 안정성 연구 중에 저장 시에 꾸준히 증가하고 있었다. 이러한 변형은 최종 산물의 불균일성을 초래하고, 이를 피할 필요가 있다. 그러므로, pGlu 형성의 조절/방지가 치료 단백질을 그것의 tpxm 규격 내에 유지시키기 위해 중요하다. 특정 액체 제형 및/또는 저장 조건이 N-말단 글루탐산을 갖는 단백질에 필요하고, 이에 따라 파이로-글루탐산의 형성이 최소화된다.
본 발명에서, N-말단의 pGlu 번역후 변형 가능성은, N-말단 글루탐산(E)[HOOC-(CH2)2-단백질]을 증가된 산물 안정성을 초래하는 아스파르트산(D)[H0OC-CH2-단백질]으로 변화시킴으로써 소거되었고, 이는 산물 안정성 증가를 초래한다. 따라서, 본 발명은 또한 위치 1(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨)의 글루탐산을 아스파르트산으로 변경시킨, 상기 기재된 바와 같은 아미노산 서열 및 나노바디에 관한 것이다.
본 발명은 안정성 연구 중에 저장 시 증가된 안정성을 나타내는 다수의 서열 최적화 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 제공한다. 그러므로, 본 발명의 한 양태에서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 제공된다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 146-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 138을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 139를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 140를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 서열 번호 141을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디는 서열 번호 154-157 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, GlnlO8Leu 및 Gly54Asp; 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1(Glu)이 Asp로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 그것의 상응하는 야생형 아미노산 서열([PCT 출원 PCT/EP2009/056975 발명의 명칭: "Amino acid sequences directed against envelope proteins of a virus and polypeptides comprising the same for the treatment of viral diseases", 2009년 6월 5일 Ablynx N.V. 출원]에 기재된 바와 같음)에 비해, 예를 들어 향상된 안정성, 보다 덜한 면역원성, hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨), 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도와 같은 향상된 성질을 나타낸다.
보다 특히, 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합할 수 있고, 이에 따라 바람직하게 상기 아미노산 서열은
- 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 15 nM 내지 1 nM, 또는 더욱 더 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s-1 내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 10-2 s-1(t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합한다.
본 발명의 아미노산 서열을 hRSV의 단백질 F에 결합시키기 위한 몇몇 바람직한 IC50 값은 본원의 추가 기재내용 및 실시예를 통해 명백해질 것이다.
IC50을 결정하는 검정에는 경쟁 검정, 예컨대 경쟁 ELISA(예를 들어 시나지스
또는 이의 Fab 단편과의 경쟁) 또는 더욱 바람직하게는 중화 검정, 예컨대 문헌[Anderson et al. (1985, J. Clin. Microbiol 22: 1050-1052]; 문헌[1988, J. Virol. 62: 4232-4238)]에 기재된 검정, 이 검정의 변형법, 예컨대 실시예 6에 기재된 방법, 또는 예를 들어 문헌[Johnson et al.(1997, J. Inf. Dis. 176: 1215-1224)]에 기재된 플라크 감소 검정, 및 이들의 변형법과 같은 경쟁 검정이 포함된다.
예를 들어, 시나지스
의 Fab 단편과의 경쟁 검정에서, 본 발명의 아미노산 서열은 1 nM 내지 100 nM, 바람직하게는 10 nM 내지 50 nM, 또는 그 미만의 IC50 값을 가질 수 있다.
예를 들어, hRSV 롱 상의 마이크로중화 검정(예를 들어 실시예 6에 기재된 바와 같음)에서, 본 발명의 아미노산 서열은 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값을 가질 수 있다.
본 발명에 의해 제공된 아미노산 서열 및/또는 나노바디
는 바람직하게 본질적으로 단리된 형태(본원에 정의된 바와 같음)이거나, 본 발명의 1개 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있고, 임의적으로 1개 이상의 추가의 아미노산 서열 또는 나노바디
(이들 모두는 하나 이상의 적당한 링커를 통해 임의적으로 연결됨)를 포함할 수 있는 본 발명의 폴리펩티드("본 발명의 폴리펩티드" 또는 "본 발명의 구조물"로도 지칭되며; 양자 모두 혼용됨)의 일부를 형성한다.
따라서, 또 다른 양태에서, 본 발명은 또한 본 발명의 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
(또는 이의 적당한 단편)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 단백질 또는 폴리펩티드(각기 본원에서 "본 발명의 폴리펩티드"로도 지칭됨)에 관한 것이다.
본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
로부터 출발하여, 본 발명의 폴리펩티드를 고안/선택 및/또는 제조하는 공정은 또한 본 발명의 상기 아미노산 서열 또는 나노바디
를 "포맷팅( formatting )"하는 것으로 본원에 지칭되고; 본 발명의 폴리펩티드의 일부를 이루는 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 본 발명의 상기 폴리펩티드로 "포맷팅된다 ( formatted )" 또는 이의 "포맷( format )으로 있다"고 언급된다. 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
가 포맷팅될 수 있는 방식의 예 및 그러한 포맷의 예는 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이고; 그러한 포맷팅된 아미노산 서열 또는 나노바디
는 본 발명의 추가의 양태를 형성한다.
예를 들어, 또한 비제한적으로, 본 발명의 1개 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
는, (hRSV의 단백질 F 상의 동일하거나 또 다른 에피토프 및/또는 하나 이상의 다른 항원, hRSV의 단백질 F 외의 단백질 또는 표적에 대한) 결합 단위로 작용할 수 있는 1개 이상의 추가 아미노산 서열을 임의적으로 함유할 수 있는 상기 폴리펩티드 내 결합 단위로 사용되어, 본원에 기재된 바와 같은 모든 본 발명의 일가, 다가 또는 다중파라토픽 폴리펩티드를 각기 제공할 수 있다. 이에 따라, 본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 일가 구조물인 폴리펩티드에 관한 것이다. 이에 따라, 본 발명은 또한 예를 들어 이가 또는 삼가 폴리펩티드와 같은 다가 폴리펩티드인 폴리펩티드에 관한 것이다. 이에 따라, 본 발명은 또한 예를 들어 이중파라토픽 또는 삼중파라토픽 폴리펩티드와 같은 다중파라토픽 폴리펩티드인 폴리펩티드에 관한 것이다.
따라서, 바람직하나 비제한적인 한 양태에 따라서, 상기 1개 이상의 추가의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 적어도 하나의 추가의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하여, 적어도 2개, 예컨대 3, 4, 5개 또는 그 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 본 발명의 폴리펩티드를 제공하는데, 여기에서 상기 아미노산 서열 또는 나노바디
는 임의적으로는 하나 이상의 링커 서열(본원에 정의된 바와 같음)을 통해 연결될 수 있다. 2개 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
(이중 적어도 하나, 바람직하게는 이들 모두는 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
임)를 포함하는 본 발명의 폴리펩티드는 본원에서 본 발명의 "다가" 폴리펩티드로서 지칭될 것이고, 그러한 폴리펩티드에 존재하는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 또한 "다가 포맷"으로 존재하는 것으로 본원에 지칭될 것이다. 예를 들어 본 발명의 "이가" 폴리펩티드는, 임의적으로는 링커 서열을 통해 연결된 2개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 한편, 본 발명의 "삼가" 폴리펩티드는, 임의적으로는 2개의 링커 서열을 통해 연결된 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 등이고; 여기에서 폴리펩티드에 존재하는 아미노산 서열 또는 나노바디
중 적어도 하나 내지 폴리펩티드에 존재하는 모든 아미노산 서열 또는 나노바디
는 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
이다.
본 발명의 다가 폴리펩티드에서, 2개 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
는 동일하거나 상이하고, 동일한 항원 또는 항원 결정자(예를 들어 동일한 부분(들) 또는 에피토프(들), 또는 상이한 부분 또는 에피토프)로 유도될 수 있거나, 대안적으로는 상이한 항원 또는 항원 결정자, 또는 이의 임의의 적당한 조합으로 유도된다. 예를 들어, 본 발명의 이가 폴리펩티드는 (a) 2개의 동일한 나노바디
; (b) 단백질 또는 항원의 제1 항원 결정자에 대해 유도된 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 상기 단백질 또는 항원의 동일한 항원 결정자에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
(이는 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
와 상이함); (c) 단백질 또는 항원의 제1 항원 결정자에 대해 유도된 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 상기 단백질 또는 항원의 또 다른 항원 결정자에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
; 또는 (d) 제1 단백질 또는 항원에 대해 유도된 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 제2 단백질 또는 항원(즉, 상기 제1 항원과 상이함)에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함할 수 있다. 유사하게, 본 발명의 삼가 폴리펩티드는, 예를 들어 비제한적으로, (a) 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
; (b) 항원의 제1 항원 결정자에 대해 유도된 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
및 동일한 항원의 상이한 항원 결정자에 대해 유도된 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
; (c) 항원의 제1 항원 결정자에 대해 유도된 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
및 상기 제1 항원과 상이한 제2 항원에 대해 유도된 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
; (d) 제1 항원의 제1 항원 결정자에 대해 유도된 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
, 상기 제1 항원의 제2 항원 결정자에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 상기 제1 항원과 상이한 제2 항원에 대해 유도된 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
; 또는 (e) 제1 항원에 대해 유도된 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
, 상기 제1 항원과 상이한 제2 항원에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 상기 제1 및 제2 항원과 상이한 제3 항원에 대해 유도된 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함할 수 있다.
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 본 발명의 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
(상기 기재된 바와 같음)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 아미노산 서열로부터 선택되는, 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 양태에서, 본 발명은 아미노산 잔기의 2개 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공하는데, 여기에서 1개의 신장부가 하기의 것들로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열 내에 항상 존재하여, 아미노산 잔기의 제2 신장부가 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되도록 한다.
바람직한 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 아미노산 잔기의 3개 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열로부터 선택되는, 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되며, 여기에서 아미노산 잔기의 제1 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제2 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제3 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 양태에서, 본 발명은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공하고, 여기에서 CDR2은 하기의 것들로부터 선택된다:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 양태에서, 본 발명은 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공하고, 여기에서 CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
a) 서열 번호 102; 또는
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
CDR1 또는 CDR3 중 적어도 하나는 하기의 것들로부터 선택된다:
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR1:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR3:
e) 서열 번호 121; 또는
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
바람직하게, 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있고, 여기에서
- CDR1는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102; 또는
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR3는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택된다:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 구체적 양태에서, 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 적어도 서열 번호 102를 포함하는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있다.
또 다른 구체적 양태에서, 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 2(바람직하게 동일함)개 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있다:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
바람직한 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 적어도 서열 번호 102 및 적어도 2개의 아미노산 잔기(CDR 서열)의 신장부를 포함하는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있는데, 여기에서 1개의 신장부는 c) 및 d)에 정의된 아미노산 잔기의 신장부로 구성된 군으로부터 선택되고, 다른 신장부는 e) 및 f)에 정의된 아미노산 잔기의 신장부로 구성된 군으로부터 선택된다.
한 구체적 양태에서, 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 적어도 서열 번호 102, 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 2개(바람직하게 동일함) 또는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
; 또는 적어도 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121을 포함하는 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성될 수 있다
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 본 발명의 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
(상기 정의된 바와 같음)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된, 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 본 발명의 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
(상기 정의된 바와 같음)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 본 발명의 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
(상기 정의된 바와 같음)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
본 발명은 또한 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 60-76 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 146-153 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 폴리펩티드는 서열 번호 146-149 및 151-153으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 적어도 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨),
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 60-76 중 하나로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76,
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76,
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 65 및 76 중 하나로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명은 또한 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 146-153 중 하나로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 폴리펩티드는 서열 번호 146-149 및 151-153으로부터 선택되는 3개 이상의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개 이상(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개 이상(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개 이상(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개 이상(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개 이상(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg108Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
본 발명은 또한 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된, 상기 기재된 바와 같은 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
이와 관련하여, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디?를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, GlnlO8Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 이가 폴리펩티드이고, 서열 번호 60-76으로부터 선택되는 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 이가 폴리펩티드이고, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76으로부터 선택되는 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 이가 폴리펩티드이고, 서열 번호 65 및 76으로부터 선택되는 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명은 또한 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 이가 폴리펩티드이고, 서열 번호 146-153으로부터 선택되는 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 폴리펩티드는 서열 번호 146-149 및 151-153으로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택된, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택된, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택된, 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택된, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro;
- Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
본 발명은 또한 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 상기 기재된 바와 같은 이가 폴리펩티드를 제공한다.
이와 관련하여, 본 발명은 또한 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드를 제공한다:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg108Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 구성된 군으로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 삼가 폴리펩티드이고, 서열 번호 60-76 중 하나로부터 선택되는 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 삼가 폴리펩티드이고, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로부터 선택되는 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 삼가 폴리펩티드이고, 서열 번호 65 및 76 중 하나로부터 선택되는 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명은 또한 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 삼가 폴리펩티드이고, 서열 번호 146-153 중 하나로부터 선택되는 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 폴리펩티드는 서열 번호 146-149 및 151-153으로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg108Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
본 발명의 한 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 62를 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 65를 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 76을 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 75를 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 147을 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 149를 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 다가 폴리펩티드는 서열 번호 153을 가지는 3개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
본 발명은 또한 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 상기 기재된 바와 같은 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
이와 관련하여, 본 발명은 또한 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, GlnlO8Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 77-79 및 158;
b) 서열 번호 77-79 및 158 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내에 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및/또는 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 77-79 및 158;
b) 서열 번호 77-79 및 158 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 77-79 및 158 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 78 및 79;
b) 서열 번호 78 및 79 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및/또는 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 78 및 79; 또는
b) 서열 번호 78 및 79 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 78을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 79를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
를 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 159-161 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 폴리펩티드가:
- 서열 번호 159와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 160과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 161과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 159-161 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 77의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 78의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다.`또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 79의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 158-161 중 하나로 본질적으로 구성된다.
본 발명의 폴리펩티드의 생성 중, 아미노 말단 상의 높은 수준의 파이로글루타메이트(pGlu)가 RP-HPLC에 의해 검출되었다. 15% 초과의 pGlu 수준이 발효 후에 검출되었고, pGlu의 수준은 안정성 연구 중에 저장 시에 꾸준히 증가하고 있었다. 이러한 변형은 최종 산물의 불균일성을 초래하고, 이를 피할 필요가 있다. 그러므로, pGlu 형성의 조절/방지가 치료 단백질을 그것의 설정 규격 내에 유지시키기 위해 중요하다. 특정 액체 제형 및/또는 저장 조건이 N-말단 글루탐산을 갖는 단백질에 필요하고, 이에 따라 파이로-글루탐산의 형성이 최소화된다.
본 발명에서, N-말단의 pGlu 번역후 변형 가능성은, N-말단 글루탐산(E)[HOOC-(CH2)2-단백질]을 증가된 산물 안정성을 초래하는 아스파르트산(D)[H0OC-CH2-단백질]으로 변화시킴으로써 소거되었다. 따라서, 본 발명은 또한 위치 1의 글루탐산을 아스파르트산으로 변경시킨, 상기 기재된 바와 같은 폴리펩티드에 관한 것이다.
본 발명은 안정성 연구 중에 저장 시 증가된 안정성을 나타내는 다수의 서열 최적화 폴리펩티드를 제공한다. 따라서, 본 발명은 제1 아미노산(글루탐산)이 아스파르트산으로 변경된 폴리펩티드를 제공한다:
한 양태에서, 본 발명은 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다:
a) 서열 번호 142-145 및 162-165;
b) 서열 번호 142-145 및 162-165 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내에 포함되는 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐
본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드 서열 번호 142를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 143을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 144를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 본 발명의 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 145를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 또 다른 바람직한 삼가 폴리펩티드는 서열 번호 162-165 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된(Glu1Asp) 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산(Glu1Asp)으로 변경된 서열 번호 77을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산(Glu1Asp)으로 변경된 서열 번호 78을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산(Glu1Asp)으로 변경된 서열 번호 79를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산(Glu1Asp)으로 변경된 서열 번호 158을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산(Glu1Asp)으로 변경된 서열 번호 159를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산(Glu1Asp)으로 변경된 서열 번호 160을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산(Glu1Asp)으로 변경된 서열 번호 161을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된(Glu1Asp) 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된(Glu1Asp) 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된(Glu1Asp) 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된(Glu1Asp) 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드를 제공한다.
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, GlnlO8Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 142의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 143의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 144의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 145의 아미노산 서열로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 서열 번호 162-165 중 하나로 본질적으로 구성된다.
상기 기재된 바와 같은 아미노산 서열 및 폴리펩티드 서열을 가지는 폴리펩티드는 치료학적, 예방학적 및/또는 약물학적 활성제로서의 용도를 위해 유리한 성질, 예컨대 예를 들어 향상된 안정성, 보다 덜한 면역원성, hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 결합 특성(본원에 추가로 기재되는 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨), hRSV의 단백질 F에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 결합력 및/또는 hRSV 중화를 위한 향상된 효능 및/또는 강도를 나타냈다.
보다 특히, 본 발명의 이들 폴리펩티드 및 화합물은 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합할 수 있고, 이에 따라 바람직하게 상기 아미노산 서열은
- 100 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 10 nM 내지 0.1 nM 이하, 또는 더욱 바람직하게는 1 nM 내지 0.1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s-1 내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 10-2 s-1(t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 더욱 바람직하게는 5×10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합한다.
본 발명의 폴리펩티드를 hRSV의 단백질 F에 결합시키기 위한 몇몇 바람직한 IC50 값은 본원의 추가 기재내용 및 실시예를 통해 명백해질 것이다.
IC50을 결정하는 검정에는 경쟁 검정, 예컨대 경쟁 ELISA(예를 들어 시나지스
또는 이의 Fab 단편과의 경쟁) 또는 더욱 바람직하게는 중화 검정, 예컨대 문헌[Anderson et al. (1985, J. Clin. Microbiol 22: 1050-1052; 1988, J. Virol. 62: 4232-4238)]에 기재된 검정, 이들 검정의 변형법, 예컨대 실시예 6에 기재된 방법, 또는 예를 들어 문헌[Johnson et al.(1997, J. Inf. Dis. 176: 1215-1224)]에 기재된 플라크 감소 검정, 및 이들의 변형법과 같은 경쟁 검정이 포함된다.
예를 들어, 시나지스
의 Fab 단편과의 경쟁 검정에서, 본 발명의 폴리펩티드는 1 nM 내지 100 nM, 바람직하게는 10 nM 내지 50 nM, 또는 그 미만의 IC50 값을 가질 수 있다.
예를 들어, hRSV 롱 상의 마이크로중화 검정(예를 들어 실시예 6에 기재된 바와 같음)에서, 본 발명의 폴리펩티드는 10 pM 내지 1000 pM, 바람직하게는 10 pM 내지 250 pM, 더욱 바람직하게는 50 pM 내지 200 pM, 또는 그 미만의 IC50 값을 가질 수 있다. 마이크로중화 검정에서, 본 발명의 폴리펩티드는 시나지스
로 수득되는 IC50 값과 비교하여, 적어도 동일하거나, 바람직하게는 보다 더 양호한, 적어도 10배 더 양호한, 더 바람직하게는 20배 더 양호한, 더욱 더 바람직하게는 50배 이상 더 양호한, 더욱 더 바람직하게는 60, 70, 80배 이상 더 양호한 IC50 값을 가질 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 하나의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 일가 폴리펩티드 또는 구조물("본 발명의 일가 폴리펩티드" 또는 "본 발명의 일가 구조물"로도 지칭됨)에 관한 것이다. 본 발명의 바람직한 일가 구조물은 서열 번호 60-76 중 하나, 예컨대 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나, 예컨대 예를 들어 서열 번호 65 또는 75; 서열 번호 138-141 중 하나; 서열 번호 146-153 중 하나; 또는 서열 번호 154-157 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 본 발명의 이러한 일가 구조물뿐만 아니라, 아미노산 서열 및 나노바디
는 본 발명의 폴리펩티드, 예컨대 예를 들어 상기 기재된 본 발명의 다가 폴리펩티드의 제조를 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 폴리펩티드는 일반적으로 적어도, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 일가 구조물을 본 발명의 1개 이상의 추가 아미노산 서열, 나노바디
또는 일가 구조물에, 임의적으로는 하나 이상의 적당한 링커를 통해 적당히 연결하여, 본 발명의 폴리펩티드를 제공하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다. 본 발명의 폴리펩티드는 또한 일반적으로 적어도, 본 발명의 폴리펩티드를 코딩하는 핵산을 제공하는 단계, 상기 핵산을 적당한 방식으로 발현하는 단계, 및 본 발명의 발현된 발명의 폴리펩티드를 회수하는 단계를 포함하는 방법에 의해서도 제조될 수 있다. 그러한 방법은 자체 공지된 방식으로 수행될 수 있고, 이는 예를 들어 본원에 추가 기재되는 방법 및 기법에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이다.
본 발명의 다가, 다중파라토픽 및/또는 다중특이적 아미노산 또는 폴리펩티드는 적어도 본 발명의 2개 이상의 일가 아미노산 서열 또는 일가 구조물을 적당한 방식으로, 예를 들어 하나 이상의 링커를 통해 함께 연결하는 단계를 포함할 수 있다. 일가 구조물(및 링커)은 당업계에 공지되고 본원에 추가 기재된 바와 같은 임의의 방법에 의해 커플링될 수 있다. 바람직한 기법은, 일가 구조물(및 링커)을 코딩하는 핵산 서열을 연결하여, 다가, 다중파라토픽 및/또는 다중특이적 아미노산 서열 또는 폴리펩티드를 발현하는 유전적 구조물을 제조하는 것을 포함한다. 아미노산 서열 또는 핵산 서열을 연결하는 기법은 숙련가에게 명백할 것이고, 표준 편람, 예컨대 상기 언급된 문헌[Samorook et al and Ausubel et al.]뿐만 아니라 이후 실시예를 역시 참조할 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 본 발명의 다가 폴리펩티드를 제조함에 있어서의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 일가 구조물의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 일가 구조물을 본 발명의 적어도 하나의 추가 아미노산 서열, 나노바디
또는 일가 구조물을, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다. 이어서, 아미노산 서열, 나노바디
또는 일가 구조물은 2개(예를 들어 이가 폴리펩티드 내), 3개(예를 들어 삼가 폴리펩티드 내) 이상(예를 들어 다가 폴리펩티드 내)의 결합 단위를 포함하는 다가 폴리펩티드를 제공하고/하거나 제조하는 데 있어서의 결합 도메인 또는 결합 단위로 사용된다. 이와 관련하여, 아미노산 서열, 나노바디
및 일가 구조물은 2, 3개 이상의 결합 단위를 포함하는 본 발명의 다가, 바람직하게는 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제공하고/하거나 제조함에 있어서 결합 도메인 또는 결합 단위로 사용될 수 있다. 바람직하게, 결합 도메인 또는 결합 단위는 링커를 통해 연결되어, 다가 폴리펩티드는 바람직하게 분자가 결합에 비해 분자내 결합을 나타낸다. 또한, 바람직하게 다가 폴리펩티드는 RSV의 F 단백질 상의 2개 또는 3개의 모든 결합 부위에 동시 결합할 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
(상기 기재된 바와 같음)의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 적어도 하나의 추가 아미노산 서열 또는 나노바디
에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 60-76,
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 보다 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 60-76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76; 또는
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, 0), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 146-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지며(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 아미노산(글루탐산)이 아스파르트산으로 변경된, 상기 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
이와 관련하여, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨),
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 138을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 139를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 140을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 141을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 다가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 154-157을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
본 발명은 또한 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 본 발명의 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
(상기 기재된 바와 같음)의 용도에 관한 것이다. 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
따라서, 한 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 2개의 아미노산 서열은 서열 번호 60-76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 2개의 아미노산 서열은 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 146-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 2개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 2개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 2개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 2개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 2개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 2개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 아미노산(글루탐산)이 아스파르트산으로 변경된 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
이와 관련하여, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 이가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 138을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 139를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 140을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 141을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 이가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 154-157을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
본 발명은 또한 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 본 발명의 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
(상기 기재된 바와 같음)의 용도에 관한 것이다. 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 본 발명의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 3개의 아미노산 서열은 서열 번호 60-76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 3 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 3개의 아미노산 서열은 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 3개의 아미노산 서열은 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 146-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 3개(바람직하게 동일함)의 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 상호 간에, 임의적으로 1 또는 2개의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 3개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 3개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 3개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화된 3개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 3개(바람직하게 동일함)의 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 77의 제조에 있어서의 서열 번호 62의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 62를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 62를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 78의 제조에 있어서의 서열 번호 65의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 65를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 65를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 79의 제조에 있어서의 서열 번호 76의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 76을 갖는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 76을 갖는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 158의 제조에 있어서의 서열 번호 75의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 75를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 75를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결하는 것을 포함할 것이다
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 159의 제조에 있어서의 서열 번호 147의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 147를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 147를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 160의 제조에 있어서의 서열 번호 149의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 149를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 149를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결하는 것을 포함할 것이다
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 161의 제조에 있어서의 서열 번호 153의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 153을 갖는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 153을 갖는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 아미노산(글루탐산)이 아스파르트산으로 변경된 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
이와 관련하여, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐). 삼가 폴리펩티드의 제조 방법은 상기 아미노산 서열을 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결하는 것을 포함할 것이다.
한 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 138을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 139를 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 140을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 141을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 사용되는 아미노산 서열은 서열 번호 154-157을 포함하거나 이로 본질적으로 구성된다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 또는 9개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 하기의 것들로부터 선택되어 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열의 용도에 관한 것이다:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 142의 제조에 있어서의 서열 번호 138의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 138을 갖는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 서열 번호 138을 갖는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열(바람직하게는 서열 번호 5)에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 143의 제조에 있어서의 서열 번호 139의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 139를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 적어도 2개의 추가 아미노산 서열(바람직하게는 서열 번호 62)에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 144의 제조에 있어서의 서열 번호 140의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 140을 갖는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 적어도 2개의 추가 아미노산 서열(바람직하게는 서열 번호 65)에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 162의 제조에 있어서의 서열 번호 154의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 154를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 적어도 2개의 추가 아미노산 서열(바람직하게는 서열 번호 75)에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 163의 제조에 있어서의 서열 번호 155의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 155를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 적어도 2개의 추가 아미노산 서열(바람직하게는 서열 번호 147)에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 164의 제조에 있어서의 서열 번호 156의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 155를 가지는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 적어도 2개의 추가 아미노산 서열(바람직하게는 서열 번호 149)에 연결하는 것을 포함할 것이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 본 발명은 서열 번호 165의 제조에 있어서의 서열 번호 157의 용도에 관한 것이다. 다가 폴리펩티드의 제조 방법은 서열 번호 157을 갖는 아미노산 서열을 15GS(서열 번호 128) 링커를 통해 적어도 2개의 추가 아미노산 서열(바람직하게는 서열 번호 153)에 연결하는 것을 포함할 것이다.
적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
가 제1 항원(즉 hRSV의 단백질 F)에 대해 유도되고 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
가 제2 항원(즉 hRSV의 단백질 F과 상이한 항원)에 대해 유도된, 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 함유하는 본 발명의 폴리펩티드는 또한, 본 발명의 "다중특이적" 폴리펩티드로도 지칭될 것이고, 이러한 폴리펩티드 내에 존재하는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 또한 "다중특이적 포맷"으로도 지칭될 것이다. 따라서, 예를 들어, 본 발명의 "이중특이적" 폴리펩티드는 제1 항원(즉, hRSV의 단백질 F)에 대해 유도된 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
및 제2 항원(즉, hRSV의 단백질 F과 상이한 항원)에 대해 유도된 적어도 하나의 추가 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 폴리펩티드인 반면, 본 발명의 "삼중특이적" 폴리펩티드는 제1 항원(즉, hRSV의 단백질 F)에 대해 유도된 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
, 제2 항원(즉, hRSV의 단백질 F과 상이한 항원)에 대해 유도된 적어도 하나의 추가 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 제3 항원(즉, hRSV의 단백질 F 및 제2 항원과 상이한 항원)에 대해 유도된 적어도 하나의 추가 아미노산 서열 또는 나노바디
; 등을 포함하는 폴리펩티드이다.
따라서, 가장 간단한 형태로, 본 발명의 이중특이적 폴리펩티드는 hRSV의 단백질 F에 대해 유도된 본 발명의 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 제2 항원에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는(여기에서, 상기 제1 및 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
는 임의적으로 링커 서열(본원에 정의된 바와 같음)를 통해 연결될 수 있음) 본 발명의 이가 폴리펩티드(본원에 정의된 바와 같음)인 반면; 본 발명의 삼중특이적 폴리펩티드는 hRSV의 단백질 F에 대해 유도된 본 발명의 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
, 제2 항원에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 제3항원에 대해 유도된 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는(여기에서, 상기 제1, 제2 및 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
는 임의적으로 1개 이상, 특히 2개 이상의 링커 서열을 통해 연결될 수 있음) 본 발명의 삼가 폴리펩티드(본원에 정의된 바와 같음)이다.
한 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 삼가의 이중특이적 폴리펩티드이다. 가장 간단한 형태의 본 발명의 삼가의 이중특이적 폴리펩티드는 hRSV의 단백질 F에 대해 유도된 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
, 및 또 다른 항원에 대해 유도된 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
(여기에서, 상기 제1, 제2 및 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
는 임의적으로 1개 이상, 특히 2개 이상의 링커 서열을 통해 연결될 수 있음)를 포함하는 삼가 본 발명의 폴리펩티드(본원에 정의된 바와 같음)일 수 있음.
본 발명의 다중특이적 폴리펩티드의 바람직하나 비제한적인 한 예는 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열 또는 나노바디
및 증가된 반감기를 제공하는 적어도 하나의 나노바디
를 포함한다. 그러한 나노바디
의 몇몇 바람직하나 비제한적인 예에는 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민, 티록신-결합 단백질, (인간)트랜스페린(transferrin), 피브리노겐(fibrinogen), 면역글로불린, 예컨대 IgG, IgE 또는 IgM, 또는 제WO 04/003019호에 열거된 기타 혈청 단백질들 중 하나에 대해 유도된 나노바디
들이 포함된다.
예를 들어, 마우스에서의 실험의 경우, 마우스 혈청 알부민(MSA: mouse serum albumin)에 대해 유도된 나노바디
가 사용될 수 있는 반면, 약학적 용도를 위해, 인간 혈청 알부민에 대해 유도된 나노바디
가 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시양태는 상기 기재된 폴리펩티드 구조물로서, 상기 적어도 하나의 (인간) 혈청 단백질이 (인간) 혈청 알부민, (인간) 혈청 면역글로불린, (인간) 티록신-결합 단백질, (인간) 트랜스페린, (인간) 피브리노겐 등 중 임의의 것인 폴리펩티드 구조물이다.
한 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 hRSV의 단백질 F에 대해 유도된 본 발명의 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
및 (인간) 혈청 알부민에 대해 유도된 본 발명의 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 특이적 폴리펩티드(여기에서, 상기 제1 및 제2 아미노산 서열 또는 나노바디
는 링커 서열을 통해 연결될 수 있음)이다.
또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 hRSV의 단백질 F에 대해 유도된 본 발명의 2개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
및 (인간) 혈청 알부민에 대해 유도된 본 발명의 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 삼가의 이중특이적 폴리펩티드(여기에서, 상기 제1, 제2 및 제3 아미노산 서열 또는 나노바디
는 1개 이상, 특히 2개의 링커 서열을 통해 연결될 수 있음)이다.
또 다른 구체적 양태에서, 본 발명의 폴리펩티드는 hRSV의 단백질 F에 대해 유도된 본 발명의 3개의 동일한 아미노산 서열 또는 나노바디
및 (인간) 혈청 알부민에 대해 유도된 본 발명의 제4 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 삼가의 이중특이적 폴리펩티드(여기에서, 상기 제1, 제2, 제3 및 제4 아미노산 서열 또는 나노바디
는 1개 이상, 특히 2 또는 3개의 링커 서열을 통해 연결될 수 있음)이다.
본 발명의 구체적이나 비제한적인 한 양태에 따라, 본 발명의 폴리펩티드는 본 발명의 1개 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
외에도, 인간 혈청 알부민에 대해 유도된 적어도 하나의 나노바디
를 포함한다. 인간 혈청 알부민에 대해 유도된 상기 나노바디
는 일반적으로 상기 인용된 Ablynx N.V.의 출원(예를 들어 제WO 04/062551 참조)에 언급된 바와 같을 수 있다. 증가된 반감기를 제공하고 본 발명에 사용될 수 있는 몇몇 바람직한 나노바디
에는 제WO 06/122787호(표 II 및 III)에 개시된 나노바디
ALB-1 내지 ALB-10이 포함되고, 이 중 ALB-8(제WO 06/122787호의 서열 번호 62)이 특히 바람직하다.
또 다른 양태에서, 본 발명 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드(또는 이의 적당한 단편)를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위를 추가로 포함하는 화합물 또는 구조물, 및 특히 단백질 또는 폴리펩티드(이는 또한 "본 발명의 화합물")에 관한 것이다. 본원의 추가 개시내용으로부터 숙련가에게 자명한 바와 같이, 그러한 추가 기, 잔기, 부분구조, 결합 단위 또는 아미노산 서열은 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
폴리펩티드 (및/또는 화합물 구조물 또는 이것이 안에 존재하는 폴리펩티드)에 추가 작용성을 제공하거나 제공하지 않을 수 있고, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드의 성질을 변경시키거나 변경시키지 않을 수 있다.
그러한 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위는 예를 들어 자체 스스로 생물학적으로 및/또는 약물학적으로 활성이거나 그렇지 않을 수 있는 화학적 기, 잔기, 또는 부분구조일 수 있다. 예를 들어, 또한 비제한적으로, 그러한 기는 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드에 연결되어, 본원에 추가 기재되는 바와 같은, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드의 "유도체"를 제공할 수 있다.
또한 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 유도체를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위(이들은 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결됨)를 추가로 포함하는 화합물 또는 구조물도 또한 본 발명의 범주 내에 속한다. 바람직하게, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위는 아미노산 서열이다.
상기 기재된 화합물, 구조물 또는 폴리펩티드에서, 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드 및 하나 이상의 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위는 상호 간에 직접 또는 하나 이상의 적당한 링커 또는 스페이서를 통해 연결될 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 아미노산 서열일 경우, 링커는 또한 아미노산 서열일 수 있어, 이에 따라 생성되는 화합물, 구조물 또는 폴리펩티드가 융합 (단백질) 또는 융합 (폴리펩티드)가 되게 된다
본 발명의 화합물 또는 구조물은 그것의 아미노산 말단 단부, 카르복시 말단 단부, 또는 아미노산 말단 단부와 카르복시 말단 단부 모두에서 적어도 하나의 추가 아미노산 서열에 융합되어, 상기 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
또는 폴리펩티드 및 1개 이상의 추가 아미노산 서열을 포함하는 융합 단백질을 제공하게 되는, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
1개 이상의 추가 아미노산 서열은 임의의 적당한 및/또는 원하는 아미노산 서열일 수 있다. 추가의 아미노산 서열은 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 (생물학적) 특성을 변화시키거나, 바꾸거나 달리 영향을 주거나 주지 않을 수 있고, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드에 추가 작용성을 부가하거나 부가하지 않을 수 있다. 바람직하게, 추가 아미노산 서열은 하나 이상의 원하는 성질 또는 작용성을 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드에 부가하는 것이다.
그러한 아미노산 서열의 예는 숙련가에게 명백할 것이고, 일반적으로 종래의 항체 및 이의 단편(제한되지 않지만 ScFv 및 단일 도메인 항체가 포함됨)에 기초한 펩티드 융합에 사용되는 모든 아미노산 서열이 포함된다. 예를 들어 문헌[Holliger and Hudson, Nature Biotechnology, 23, 9, 1126-1136 (2005)]에 의한 검토를 참조한다.
예를 들어, 그러한 아미노산 서열은, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드 자체에 비하여, 본 발명의 화합물의 반감기, 용해도 또는 흡수성을 증가시키고, 면역원성 또는 독성을 감소시키고, 원치 않는 부작용을 제거 또는 약화시키고/시키거나, 다른 유리한 특성을 부여하고/하거나 원치 않는 특성을 감소시키는 아미노산 서열일 수 있다. 그러한 아미노산 서열의 몇몇 비제한적인 예는 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민(예를 들어 제WO 00/27435호 참조) 또는 합텐계(haptenic) 분자(예를 들어, 항체를 순환시킴으로써 인식되는 합텐, 예를 들어 제WO 98/22141호 참조)일 수 있다.
추가 아미노산 서열은 또한, 결합 부위가 임의의 원하는 단백질, 폴리펩티드, 항원, 항원 결정자 또는 에피토프(이에는 본 발명의 아미노산 서열 또는 나노바디
가 유도된 동일한 단백질, 폴리펩티드, 항원, 항원 결정자 또는 에피토프, 또는 상이한 단백질, 폴리펩티드, 항원, 항원 결정자 또는 에피토프가 포함되나 이에 제한되지 않음)에 대해 유도될 수 있는 제2 결합 부위를 제공할 수도 있다. 예를 들어, 추가 아미노산 서열은 혈청 단백질(예컨대, 예를 들어, 인간 혈청 알부민 또는 또 다른 혈청 단백질, 예컨대 IgG)에 대해 유도된 제2 결합 부위를 제공하여, 혈청 내 증가된 반감기를 제공할 수 있다. 그러한 아미노산 서열에는 예를 들어 나노바디
뿐만 아니라, 제WO 91/01743호, 제WO 01/45746호 및 제WO 02/076489호에 기재된 소형 펩티드 및 결합 단백질, 및 제WO 03/002609호 및 제WO 04/003019호에 기재된 dAb가 포함된다. 또한 문헌[Harmsen et al., Vaccine, 23 (41); 4926-42, 2005]뿐만 아니라 제EP 0 368 684호, 및 제WO 08/028977호, 제WO 08/043821호, 제WO 08/043822호(Ablynx N.V.) 및 제WO 08/068280호를 참조한다.
그러한 아미노산 서열은 특히 혈청 알부민(보다 특히 인간 혈청 알부민) 및/또는 IgG(보다 특히 인간 IgG)로 유도될 수 있다. 예를 들어, 그러한 아미노산 서열은 (인간)혈청 알부민으로 유도되는 아미노산 서열, 및 혈청 알부민의 FcRn로의 결합에 관여되지 않은 (인간)혈청 알부민 상의 아미노산 잔기에 결합할 수 있는 아미노산 서열(예를 들어 제WO 06/0122787호 참조) 및/또는 혈청 알부민의 도메인 III의 부분을 형성하지 않는 혈청 알부민 상의 아미노산 잔기에 결합가능한 아미노산 서열(이 역시 예를 들어 제WO 06/0122787호 참조); 증가된 반감기를 갖거나 제공할 수 있는 아미노산 서열(예를 들어 제WO 08/028977호 참조); 적어도 하나의 종의 포유동물, 특히 적어도 하나의 종의 영장류(예컨대, 비제한적으로, 마카카 속으로부터의 원숭이(예컨대, 특히, 사이노몰구스 원숭이(마카카 파시쿨라리스(Macaca fascicularis)) 및/또는 레서스 원숭이(마카카 물라타(Macaca Mulata)) 및 개코원숭이(파피오 우르시너스(Papio ursinus)), 이 역시 제WO 08/028977호 참조)로부터의 혈청 알부민과 교차-반응성인 인간 혈청 알부민에 대한 아미노산 서열; pH 독립적 방식으로 혈청 알부민에 결합할 수 있는 아미노산 서열(예를 들어 제WO 08/043821호 참조) 및/또는 조건적 결합제인 아미노산 서열(예를 들어 제WO 08/043822호 참조)일 수 있다.
또 다른 양태에 따라서, 1개 이상의 추가의 아미노산 서열은 종래의 4-쇄 항체(특히 인간 항체) 및/또는 중쇄 항체의 하나 이상의 부분, 단편 또는 도메인을 포함할 수 있다. 예를 들어, 통상적으로 덜 바람직하지만, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 종래의 (바람직하게는 인간) VH 또는 VL 도메인에, 또는 VH 또는 VL 도메인의 자연 또는 합성 유사체에, 이 역시 임의적으로는 링커 서열(제한되지 않지만 다른 (단일) 도메인 항체, 예컨대 (Ward et al.)에 의해 기재된 dAb가 포함됨)을 통해 연결될 수 있다.
따라서, 본 발명의 화합물 또는 구조물에서, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위는 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택된다
본 발명의 한 구체적인 양태에서, 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 포함하는 본 발명의 화합물, 구조물 또는 폴리펩티드는, 본 발명의 상응하는 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드에 비해 증가된 반감기를 가질 수 있다. 그러한 화합물, 구조물 및 폴리펩티드의 몇몇 바람직하나 비제한적인 몇몇 예는 본원의 추가 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어 이의 반감기가 증가하도록 화학적으로 변형된(예를 들어, 페그화(pegylation)에 의해) 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드; 또는 본 발명의 아미노산 서열의 반감기를 증가시키는 적어도 하나의 부분구조(및 특히 적어도 1개의 아미노산 서열)에 연결된 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 포함하는 본 발명의 화합물이 포함된다. 그러한 반감기 증진 부분구조를 포함하는 본 발명의 화합물의 예는 본원의 추가 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이고; 이에는 예를 들어, 비제한적으로, 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 하나 이상의 혈청 단백질 또는 이의 단편(예컨대 혈청 알부민 또는 이의 적당한 단편), 또는 혈청 단백질에 결합될 수 있는 하나 이상의 결합 단위에 적당하게 연결되는 화합물(예컨대, 예를 들어, 혈청 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 혈청 면역글로불린, 예컨대 IgG, 또는 트랜스페린에 결합할 수 있는 나노바디
또는 (단일) 도메인 항체); 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 Fc 부분(예컨대 인간 Fc) 또는 이의 적당한 부분 또는 단편에 연결된 화합물; 또는 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가, 혈청 단백질에 결합될 수 있는 하나 이상의 소단백질 또는 펩티드에 적당하게 연결된 화합물(예컨대, 비제한적으로, 제WO 91/01743호, 제WO 01/45746호, 제WO 02/076489호 참조)에 기재된 단백질 및 펩티드)가 포함된다.
적어도 1개의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 또한 하나 이상의 (바람직하게는 인간) CH1, CH2 및/또는 CH3 도메인에, 임의적으로는 링커 서열을 통해 연결될 수 있다. 예를 들어, 적당한 CH1 도메인에 연결된 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는, 예를 들어 적당한 경쇄와 함께, 종래의 Fab 단편 또는 F(ab')2 단편과 유사한 항체 단편/구조물을 생성하기 위해 사용될 수 있지만, 여기에서 종래의 VH 도메인들 중 하나((F(ab')2 단편의 경우) 또는 양자 모두는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드로 대체되어 졌다. 또한, 2개의 나노바디는 CH3 도메인(임의적으로 링커를 통해)에 연결되어 생체내의 반감기가 증가된 구조물을 제공할 수 있다.
구체적인 한 양태에 따라서, 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 하나 이상의 불변성 도메인(예를 들어, Fc 부분의 일부로서/이를 형성하기 위해 사용될 수 있는 2 또는 3개의 불변성 도메인), Fc 부분 및/또는 하나 이상의 항체 부분, 단편, 또는 도메인(본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드에 하나 이상의 이펙터(effector) 기능을 부여하고/하거나 하나 이상의 Fc 수용체에 결합할 수 있는 능력을 부여함)에 연결될 수 있다(임의적으로는 적당한 링커 또는 힌지(hinge) 영역을 통함). 예를 들어, 이를 위하여, 비제한적으로, 1개 이상의 추가의 아미노산 서열은 항체, 예컨대 중쇄 항체(본원에 기재된 바와 같음), 보다 바람직하게는 종래의 인간 4-쇄 항체로부터의 하나 이상의 CH2 및/또는 CH3 도메인을 포함할 수 있고/있거나; 예를 들어 IgG(예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4)로부터, IgE로부터 또는 또 다른 인간 Ig 예컨대 IgA, IgD 또는 IgM으로부터 Fc 영역(의 일부)를 형성할 수 있다. 예를 들어, 제WO 94/04678호는 카멜리드 VHH 도메인 또는 이의 인간화된 유도체(즉, 나노바디
)를 포함하는 중쇄 항체를 기재하고 있고, 여기에서 카멜리드 CH2 및/또는 CH3 도메인은 인간 CH2 및 CH3 도메인으로 대체되어 각각 나노바디
및 인간 CH2 및 CH3 도메인(그러나 CH1 도메인은 아님)을 포함하는 2개의 중쇄로 구성된 면역글로불린을 제공하고, 그러한 면역글로불린은 CH2 및 CH3 도메인에 의해 제공된 이펙터 기능을 갖고, 그러한 면역글로불린은 임의의 경쇄의 부재 하에 작용할 수 있다. 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드에 적당하게 연결되어 이펙터 기능을 제공할 수 있는 다른 아미노산 서열은 숙련가에게 명백할 것이고, 원하는 이펙터 기능(들)에 기초하여 선택된다. 예를 들어 제WO 04/058820호, 제WO 99/42077호, 제WO 02/056910호 및 제WO 05/017148호뿐만 아니라, 상기 문헌[Holliger and Hudson], 및 제WO 09/068628호를 참조한다. 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 Fc 부분으로의 커플링은 또한 본 발명의 상응하는 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드와 비교하여 증가된 반감기를 유도한다. 몇몇 적용분야를 위해, 임의의 생물학적으로 유의한 이펙터 기능없이 증가된 반감기를 부여하는 Fc 부분 및/또는 불변성 도메인(즉, CH2 및/또는 CH3 도메인)의 사용이 또한 적당하거나 더 바람직하다. 증가된 생체내 반감기를 가지는 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드 및 하나 이상의 불변성 도메인을 포함하는 다른 적당한 구조물은 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어 CH3 도메인에, 임의적으로는 링커 서열을 통해 연결된 2개의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 포함한다. 일반적으로, 증가된 반감기를 가지는 임의의 융합 단백질 또는 유도체는 바람직하게는 50 kD 초과의 분자량(신장 흡수에 대한 한계(cut-off) 값)을 가진다.
구체적이지만 비제한적인 또 다른 양태에서, 본 발명의 화합물을 형성하기 위해, 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 이량체로 자가-회합되는 경향이 감소된(또는 본질적으로 없는)(즉 종래의 4-쇄 항체에서 자연 발생된 불변성 도메인에 비하여) 자연 발생, 합성 또는 반합성 불변성 도메인(또는 이의 유사체, 변형체, 돌연변이체, 부분 또는 단편)에 연결될 수 있다(임의적으로는 적당한 링커 또는 힌지 영역을 통함). 그러한 단량체성(즉, 자가-회합되지 않은) Fc 쇄 변형체, 또는 이의 단편은 숙련가에게 명백할 것이다. 예를 들어, 문헌[Helm et al., J Biol Chem 1996 271 7494]에는 본 발명의 폴리펩티드 쇄에 사용될 수 있는 단량체성 Fcγ 쇄 변형체가 기재되어 있다.
또한, 그러한 단량체성 Fc 쇄 변형체는 (이들이 유도된 Fc 부분에 의존하여) 이들이 보충 또는 관련 Fc 수용체(들)에 여전히 결합가능하고/하거나, 이들이 유도되는 Fc 부분의 이펙터 기능의 일부 또는 전부를(또는 의도된 용도에 여전히 적당한 감소된 정도로) 가지는 것이 바람직하다. 대안적으로는, 본 발명의 그러한 폴리펩티드 쇄에서, 단량체성 Fc 쇄는 폴리펩티드 쇄에 증가된 반감기를 부여하기 위해 사용될 수 있고, 이 경우 단량체성 Fc 쇄는 또한 이펙터 기능을 갖지 않거나 본질적으로 가지지 않는다.
일반적으로, 증가된 반감기를 가지는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드(또는 화합물 또는 이를 포함하는 구조물)는 바람직하게 본 발명의 상응하는 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드 그 자체의 반감기보다 적어도 1.5배, 바람직하게는 적어도 2배, 예컨대 적어도 5배, 예를 들어 적어도 10배, 또는 20배 더 크다. 예를 들어, 증가된 반감기를 가지는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 또는 폴리펩티드는 본 발명의 상응하는 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드 그 자체에 비해 1시간 초과, 바람직하게는 2시간 초과, 더욱 바람직하게는 6시간 초과, 예컨대 12시간 초과, 또는 24, 48 또는 72시간 초과 더 증가된 반감기를 가질 수 있다.
본 발명의 바람직하나 비제한적인 항 양태에서, 본 발명의 그러한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 또는 폴리펩티드는 적어도 약 12시간, 바람직하게는 적어도 24시간, 더욱 바람직하게는 적어도 48시간, 더욱 더 바람직하게는 적어도 72시간 이상의 인간 내 혈청 반감기를 나타낼 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물 또는 폴리펩티드는 적어도 5일(예컨대 약 5 내지 10일), 바람직하게 적어도 9일(예컨대 약 9 내지 14일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 10일(예컨대 약 10 내지 15일), 또는 적어도 약 11일(예컨대 약 11 내지 16일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 12일(예컨대 약 12 내지 18일 이상), 또는 14일 이상(예컨대 약 14 내지 19일)의 반감기를 가질 수 있다.
추가의 아미노산 서열은 또한 합성 시에 숙주 세포로부터의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 분비를 유도하는 신호 서열 또는 리더 서열을 형성할 수 있다(예를 들어 본 발명의 폴리펩티드를 발현하기 위해 사용된 숙주 세포에 따라서, 본 발명의 폴리펩티드의 프리(pre)폴리펩티드, 프로(pro)폴리펩티드 또는 프리프로(prepro)폴리펩티드 형태를 제공하기 위함).
추가의 아미노산 서열은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 특정 기관, 조직, 세포, 또는 세포의 부분 또는 격실로 유도되고/되거나 침투하거나 진입하도록 허용하고/하거나, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 생물학적 장벽, 예컨대 세포막, 세포층, 예컨대 상피 세포층, 종양, 예컨대 고형 종양, 또는 혈뇌-장벽을 침투하거나 가로지르도록 허용하는 서열 또는 신호를 형성할 수 있다. 그러한 아미노산 서열의 적당한 예는 숙련가에게 명백할 것이고, 제한되는 것은 아니나, 예를 들어 상기 언급된 "펩트랜스(Peptrans)" 벡터, (Cardinale et al.)에 의해 기재된 서열, 및 본 발명의 나노바디
및 폴리펩티드를 발현 또는 생산하기 위해 사용될 수 있는 자체 공지된 아미노산 서열 및 항체 단편(소위 "인트라바디(intrabodies)")이 포함되고, 예를 들어 제WO 94/02610호, 제WO 95/22618호, 제US 7,004,940호, 제WO 03/014960호, 제WO 99/07414호; 제WO 05/01690호; 제EP 1 512 696호; 및 문헌[Cattaneo, A. & Biocca, S. (1997) Intracellular Antibodies: Development and Applications. Landes and Springer-Verlag] 및 [Kontermann, Methods 34, (2004), 163-170], 및 본원에 기재된 추가의 문헌에 기재된 바와 같다.
그러한 폴리펩티드, 화합물 또는 구조물은 또한 본질적으로 단리된 형태(본원에 정의된 바와 같음)의 것일 수 있다.
본 발명의 화합물 또는 폴리펩티드는 일반적으로, 적어도 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
, 일가 구조물 및/또는 폴리펩티드를 1개 이상의 추가 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위에, 임의적으로 하나 이상의 적당한 링커를 통해 적당히 연결하여, 본 발명의 화합물 또는 폴리펩티드를 제공하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다. 본 발명의 폴리펩티드는 또한 일반적으로 적어도 본 발명의 폴리펩티드를 코딩하는 핵산을 제공하는 단계, 상기 핵산을 적당한 방식으로 발현하는 단계, 및 본 발명의 발현된 폴리펩티드를 회수하는 단계를 포함하는 방법에 의해서도 제조될 수 있다. 그러한 방법은 예를 들어 본원에 추가 기재되는 방법 및 기법에 기초하여, 숙련가에게 명백한, 자체 공지된 방법으로 수행될 수 있다.
다가 및/또는 다중특이적 폴리펩티드 또는 구조물에 사용하기 위한 적당한 스페이서 또는 링커는 숙련가에게 명백할 것이고, 일반적으로 아미노산 서열을 연결하기 위해 당업계에서 사용되는 임의의 링커 또는 스페이서일 것이다. 바람직하게, 상기 링커 또는 스페이서는 약학적 용도로 의도된 단백질 또는 폴리펩티드를 구성하는 데 사용하기에 적당하다.
특히 바람직한 몇몇 스페이서에는 항체 단편 또는 항체 도메인을 연결하기 위해 당업계에 사용되는 스페이서 및 링커가 포함된다. 이에는 상기 언급된 일반 배경기술에서 언급된 링커들뿐만 아니라, 예를 들어 디아바디 또는 ScFv 단편을 구성하기 위해 당업계에서 사용되는 링커가 포함된다(그러나, 이와 관련하여, 디아바디 및 ScFv 단편에 있어, 사용되는 링커 서열은 이와 관련된 VH 및 VL 도메인이 항원 결합 부위를 형성하기 위해 회합하도록 하는 길이, 가요성 정도 및 기타 성질을 가져야 하는 반면, 각 아미노산 서열 또는 나노바디
가 단독으로 완전 항원 결합 부위를 형성하기 때문에, 본 발명의 폴리펩티드에 사용되는 링커의 길이 또는 가요성에 특별한 제한은 없다는 것을 주지한다).
예를 들어, 링커는 적당한 아미노산 서열, 특히 1 내지 50개, 바람직하게는 1 내지 30개, 예컨대 1 내지 10개 아미노산 잔기의 아미노산 서열일 수 있다. 그러한 아미노산 서열의 몇몇 바람직한 예로는 gly-ser 링커, 예를 들어 (glyxsery)z 유형의 링커, 예컨대 예를 들어 제WO 99/42077호에 기재된 바와 같은 (gly4ser)3 또는 (gly3ser2)3, 및 힌지-유사 영역, 예컨대 자연 발생 중쇄 항체의 힌지 영역 또는 유사 서열(예컨대 제WO 94/04678호에 기재됨)이 포함된다.
몇몇 특히 바람직한 다른 링커는 폴리-알라닌(예컨대 AAA)뿐만 아니라, 표 A-7에 언급된 링커(이 중 GS15가 특히 바람직함)이다.
다른 적당한 링커는 일반적으로 유기 화합물 또는 중합체, 특히 약학적 용도를 위해 단백질에 사용하기에 적당한 것들을 포함한다. 예를 들어, 폴리(에틸렌글리콜) 부분구조가 항체 도메인을 연결시키기 위해 사용되어 왔고, 예를 들어 제WO 04/081026호를 참조한다.
사용된 링커(들)의 길이, 가요성도 및/또는 다른 성질(중요하진 않지만, 통상적으로 ScFv 단편에 사용되는 링커에 대해서와 같음)이 본 발명의 최종 폴리펩티드의 특성, 제한되지 않지만 예컨대 hRSV의 단백질, 또는 하나 이상의 다른 항원에 대한 친화도, 특이성 또는 결합력에 어떤 영향을 미칠 수 있음은 본 발명의 범주내에 포함된다. 본원의 개시내용에 기초하여, 숙련가는 임의적으로는 몇몇 제한된 일상적 실험 이후에 본 발명의 특이적 폴리펩티드에 사용하기 위한 최적의 링커(들)를 결정할 수 있을 것이다.
또한 사용된 링커(들)가 하나 이상의 다른 바람직한 특성 또는 작용성을 본 발명의 폴리펩티드에 부여하고/하거나, 유도체의 형성 및/또는 작용기의 부착을 위한 하나 이상의 부위를 제공하는 것(예를 들어 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 및 폴리펩티드의 유도체를 위해 본원에 기재된 바와 같음)은 본 발명의 범주 내에 속한다. 예를 들어, 하나 이상의 하전된 아미노산 잔기를 함유하는 링커는 개선된 친수성 특성을 제공할 수 있는 반면, 작은 에피토프 또는 태그를 형성하거나 함유하는 링커는 검출, 동정 및/또는 정제를 위해 사용될 수 있다. 이 역시, 본원의 개시내용에 기초하여, 숙련가는 임의적으로는 몇몇 제한된 일상적 실험 이후에 본 발명의 특이적 폴리펩티드에 사용하기 위한 최적의 링커를 결정할 수 있을 것이다.
최종적으로, 2개 이상의 링커가 본 발명의 폴리펩티드에 사용되는 경우, 이들 링커는 동일하거나 상이할 수 있다. 이 역시, 본원의 개시내용에 기초하여, 숙련가는 임의적으로는 몇몇 제한된 일상적 실험 이후에 본 발명의 특이적 폴리펩티드에 사용하기 위한 최적의 링커를 결정할 수 있을 것이다.
통상적으로, 발현 및 생산의 용이성을 위해, 본 발명의 폴리펩티드는 선형 폴리펩티드일 것이다. 그러나, 본 발명은 그의 가장 광범위한 의미에서 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 본 발명의 폴리펩티드가 3개 이상의 아미노산 서열 또는 나노바디
를 포함하는 경우, 이들을 3개 이상의 "팔"(각각의 "팔"은 나노바디에 연결됨)을 갖는 링커를 사용하여 연결시켜, "성상(star-shaped)" 구조물을 제공할 수 있다. 또한 통상적으로 덜 바람직하나 원형 구조물을 사용할 수도 있다.
본원의 개시내용으로부터 명백한 바와 같이, 본원에 정의된 바와 같은 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 부분 또는 단편, 또는 2개 이상의 부분 또는 단편의 조합을 사용하는 것도, 또한 특히 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157의 아미노산 서열 또는 서열 번호 77-79, 142-145 및 158-165의 폴리펩티드의 의 부분 또는 단편을 사용하는 것도 본 발명의 범주 내에 속한다. 따라서, 본 발명의 한 실시양태에 따라, 용어 "본 발명의 아미노산 서열", "본 발명의 나노바디
" 및 "본 발명의 폴리펩티드"는 가장 광범위한 의미에서 상기 부분 또는 단편을 포함한다.
일반적으로, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드(본원에 정의된 바와 같은 이의 변형체 포함)의 그러한 부분 또는 단편은, 본 발명의 상응하는 전장 아미노산 서열 또는 나노바디
의 아미노산 서열과 대비하여, N-말단 단부의 아미노산 잔기 중 하나 이상, C-말단 단부의 1개 이상의 아미노산 잔기, 하나 이상의 인접 내부 아미노산 잔기, 또는 이들의 임의의 조합이 결실 및/또는 제거된 아미노산 서열을 가진다.
부분 또는 단편은 바람직하게 본원에 정의된 바와 같은 친화도(본원에 추가로 설명되는 바와 같이 KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로 적당하게 측정되거나/되고 표시됨)로 hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 결합할 수 있다.
특히, 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 및 부분 또는 단편은,
- 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 또는 더욱 더 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s-1 내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나;
- 10-2 s-1(t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 결합하는 것이 바람직하다.
부분 또는 단편의 hRSV의 단백질 F에 대한 친화도는, 예를 들어 본원에 기재된 검정을 이용하여, 자체 공지된 방식으로 결정될 수 있다.
그러한 부분 또는 단편은 통상 본원에 정의된 바와 같은 hRSV 중화 효능 및/또는 강도를 가질 것이다.
임의의 부분 또는 단편은 본 발명의 상응하는 전장 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 아미노산 서열의 10개 이상의 인접 아미노산 잔기, 바람직하게는 20개 이상의 인접 아미노산 잔기, 보다 바람직하게는 30개 이상의 인접 아미노산 잔기, 예컨대 40개 이상의 인접 아미노산 잔기를 포함하는 것이 바람직하다.
또한, 임의의 부분 또는 단편은 이것이 적어도 하나의 CDR(바람직하게는 적어도 CDR3 또는 이의 일부) 및 적어도 하나의 다른 CDR(즉, CDR1 또는 CDR2) 또는 적어도 이의 일부 일부(바람직하게는 적당한 골격구조 서열(들) 또는 적어도 이의 일부에 의해 연결됨)를 포함한다. 보다 바람직하게, 임의의 부분 또는 단편은 적어도 하나의 CDR(바람직하게는 적어도 CDR3 또는 이의 일부) 및 2개의 남은 CDR의 적어도 이의 일부(이 역시, 바람직하게는 적당한 골격구조 서열(들) 또는 적어도 이의 일부에 의해 연결됨)를 포함한다.
특히 바람직하나 비제한적인 또 다른 양태에 따라서, 그러한 부분 또는 단편은, 예를 들어 국제 출원 제WO 03/050531호(Lasters et al.)에 기재된 바와 같이, 적어도 본 발명의 상응하는 전장 나노바디의 CDR3, 예컨대 FR3, CDR3 및 FR4를 포함한다.
이미 상기에 언급된 바와 같이, 2개 이상의 그러한 부분 또는 단편(즉, 본 발명의 동일하거나 상이한 아미노산 서열 또는 나노바디
로부터)을 조합하는 것, 즉 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 추가의 부분 또는 단편(본원에 정의된 바와 같음)을 제공하는 것도 가능하다. 또한, 예를 들어 인간 VH 도메인의 하나 이상의 부분 또는 단편을 가지는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 하나 이상의 부분 또는 단편을 조합하는 것도 가능하다.
한 바람직한 실시양태에 따라서, 상기 부분 또는 단편은 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157 의 아미노산 서열 또는 나노바디
중 하나 또는 서열 번호 77-79, 142-145 및 158-165의 폴리펩티드의 하나와 50% 이상, 바람직하게는 60% 이상, 보다 바람직하게는 70% 이상, 보다 더 바람직하게는 80% 이상, 예컨대 90%, 95% 또는 99% 이상의 서열 동일도를 가진다.
상기 부분 및 단편, 및 이를 코딩하는 핵산 서열은 자체 공지된 임의의 방식으로 제공되고, 임의적으로는 조합될 수 있다. 예를 들어, 그러한 부분 또는 단편은 본 발명의 전체 크기의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 코딩하는 핵산에 종결 코돈을 삽입하고, 이어서 이렇게 수득된 핵산을 자체 공지된 방식(예를 들어 본원에 기재된 바와 같음)으로 발현시킴으로써 수득될 수 있다. 대안적으로는, 그러한 부분 또는 단편을 코딩하는 핵산은 본 발명의 전체 크기의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 코딩하는 핵산을 적당하게 제한하고, 그러한 핵산을 자체 공지된 방식으로 합성함으로써 수득될 수 있다. 부분 또는 단편은 자체 공지된 펩티드 합성을 위한 기법을 사용하여 제공될 수도 있다.
본 발명은 그의 가장 광범위한 의미에서 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 또는 폴리펩티드의 유도체를 포함한다. 그러한 유도체는 일반적으로 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 또는 폴리펩티드, 및/또는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 또는 폴리펩티드를 형성하는 1개 이상의 아미노산 잔기를 변형, 특히 화학적 및/또는 생물학적(예를 들어 효소적)으로 변형하여 수득될 수 있다.
그러한 변형의 예뿐만 아니라, 그러한 방식으로 변형될 수 있는 아미노산 서열, 나노바디
서열, 화합물 또는 폴리펩티드 서열 내의 아미노산 잔기의 예(즉, 단백질 주쇄, 그러나 바람직하게는 측쇄상), 그러한 변형을 도입하기 위해 사용될 수 있는 방법 및 기법, 및 그러한 변형의 잠재적 용도 및 이점은 숙련가에게 명백할 것이다.
예를 들어, 그러한 변형은 하나 이상의 작용기, 부분구조 또는 잔기의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드 내로의 또는 상으로의 도입(예를 들어 공유적 결합에 의해 또는 다른 적당한 방식 이용), 및 특히 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에 하나 이상의 원하는 특성 또는 작용성을 부여하는 하나 이상의 작용기, 부분구조 또는 잔기의 도입을 포함할 수 있다. 그러한 작용기의 예는 숙련가에게 명백할 것이다.
예를 들어, 그러한 변형은 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 반감기, 용해도 및/또는 흡수성을 증가시키고, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 면역원성 및/또는 독성을 감소시키고, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 원치 않는 부작용을 제거 또는 약화시키고/시키거나, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에게 다른 유리한 특성을 부여하고/하거나 이의 원치 않는 특성을 감소시키거나, 전술된 2개 이상의 임의의 조합된 특성을 가지는 하나 이상의 작용기의 도입(예를 들어 공유적 결합에 의해 또는 다른 적당한 방식으로)을 포함할 수 있다. 그러한 작용기 및 이를 도입하는 기법의 예는 숙련가에게 명백할 것이고, 일반적으로 상기 본원에 인용된 일반적 배경기술에서 언급된 모든 작용기 및 기법뿐만 아니라, 약학적 단백질의 변형, 특히 항체 또는 항체 단편(ScFv 및 단일 도메인 항체를 포함함)의 변형에 대해 자체 공지된 작용기 및 기법을 포함할 수 있고, 이를 위해 예를 들어 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1980)]을 참조한다. 그러한 작용기는 예를 들어 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에 직접(예컨대 공유적으로) 연결되거나, 이 역시 숙련가에게 명백한 바와 같이, 임의적으로는 적당한 링커 또는 스페이서를 통해 연결될 수 있다.
약학적 단백질의 반감기를 증가시키고/시키거나 면역원성을 감소시키기 위한 가장 널리 사용되는 기법중 하나는 적당한 약리학으로 허용가능한 중합체, 예컨대 폴리(에틸렌글리콜)(PEG) 또는 이의 유도체(예컨대 메톡시폴리(에틸렌글리콜) 또는 mPEG)의 부착을 포함한다. 일반적으로, 페그화의 임의의 적당한 형태, 예컨대 항체 및 항체 단편(제한되지 않지만 (단일) 도메인 항체 및 ScFv가 포함됨)을 위해 당분야에 사용되는 페그화가 이용될 수 있고; 예를 들어 문헌[Chapman, Nat. Biotechnol, 54, 531-545 (2002)]; [Veronese and Harris, Adv. Drug Deliv. Rev. 54, 453-456 (2003); [Harris and Chess, Nat. Rev. Drug. Discov., 2, (2003)] 및 제WO 04/060965호를 참조한다. 단백질의 페그화를 위한 다양한 시약은 또한 상업적으로 입수가능하고, 예를 들어 넥타 테라퓨틱스(Nektar Therapeutics)(미국 소재)로부터이다.
바람직하게, 부위 지정 페그화가, 특히 시스테인-잔기를 통해 사용된다(예를 들어 문헌[Yang et al., Protein Engineering, 16, 10, 761-770 (2003)] 참조). 예를 들어, 이를 위해, PEG는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에서 자연 발생되는 시스테인 잔기에 부착되고, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드는 PEG의 부착을 위한 하나 이상의 시스테인 잔기를 적당하게 도입하도록 변형되거나, PEG의 부착을 위한 하나 이상의 시스테인 잔기를 포함하는 아미노산 서열이 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 N- 및/또는 C-말단에 융합될 수 있고, 이들 모두 숙련가에게 자체 공지된 단백질 공학의 기법을 사용한다.
바람직하게, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에 대하여, 5000 초과, 예컨대 10,000초과 및 200,000 미만, 예컨대 100,000 미만; 예를 들어 20,000 내지 80,000 범위의 분자량을 가지는 PEG가 사용된다.
통상 덜 바람직한 또 다른 변형은 N-연결 또는 O-연결된 글리코실화를, 통상적으로 동시-번역 변형 및/또는 번역후 변형의 일부로서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드를 발현하기 위해 사용되는 숙주 세포에 따라 포함한다.
또 다른 변형은 하나 이상의 검출가능한 표지 또는 신호-발생 기 또는 부분구조를, 표지된 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 의도된 용도에 따라서 도입함을 포함한다. 이들을 부착하고, 사용하고, 검출하기에 적당한 표지 및 기법은 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어, 제한되지 않지만, 형광 표지(예컨대 플루오레세인(fluorescein), 이소티오시아네이트, 로다민(rhodamine), 피코에리트린(phycoerythrin), 피코시아닌(phycocyanin), 알로피코시아닌(allophycocyanin), o-프탈데히드(o-phthaldehyde) 및 플루오레스카민(fluorescamine) 및 형광 금속, 예컨대 152Eu 또는 란탄계족으로부터의 다른 금속), 인광성 표지, 화학발광성(chemiluminescent) 표지 또는 생물발광성 표지(예컨대 루미날(luminal), 이소루미놀(isoluminol), 써로마틱(theromatic) 아크리디늄 에스테르, 이미다졸, 아크리디늄 염, 옥살레이트 에스테르, 디옥스에탄 또는 GFP 및 그의 유사체), 방사성-동위원소(예컨대 3H, 125I, 32P, 35S, 14C, 51Cr, 36Cl, 57Co, 58Co, 59Fe, 및 75Se), 금속, 금속 킬레이트 또는 금속성 양이온(예를 들어, 금속성 양이온, 예컨대 99 mTc, 123I, 111In, 131I, 97Ru, 67Cu, 67Ga, 및 68Ga, 또는 생체내, 시험관내에서, 또는 제자리 진단 및 이미지화에 사용하기에 특히 적당한 다른 금속 또는 금속성 양이온(예컨대, 157Gd, 55Mn, 162Dy, 52Cr, 및 56Fe)뿐만 아니라, 발색단 및 효소(예컨대 말레이트 탈수소효소, 포도상구균 뉴클레아제(staphylococcal nuclease), 델타-V-스테로이드 이성화효소, 효모 알코올 탈수소효소, 알파-글리세로포스페이트 탈수소효소, 트리오즈(triose) 포스페이트 이성화효소, 비오티나비딘 퍼옥시다아제(biotinavidin peroxidase), 양고추냉이 퍼옥시다아제, 알칼리 포스파타아제(alkaline phosphatase), 아스파라기나아제(asparaginase), 글루코스 산화효소, 베타-갈락토시다아제(beta-galactosidase), 리보뉴클레아제(ribonuclease), 우레아제(urease), 카탈라아제(catalase), 글루코스-VI-포스페이트 탈수소효소, 글루코아밀라아제(glucoamylase) 및 아세틸콜린 에스테라아제(acetylcholine esterase))가 포함된다. 기타 적당한 표지는 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어 NMR 또는 ESR 분광기를 사용하여 검출될 수 있는 잔기가 포함된다.
본 발명의 그러한 표지된 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드는, 예를 들어, 특이적 표지의 선택에 따라, 시험관내, 생체내 또는 제자리 검정(자체 공지된 면역검정, 예컨대 ELISA, RIA, EIA 및 다른 "샌드위치 검정" 등이 포함됨)을 위해서 뿐만 아니라, 생체내 진단 및 이미지화 목적을 위해 사용될 수 있다.
숙련가에게 명백한 바와 같이, 또 다른 변형은, 예를 들어 상기 지칭된 금속 또는 금속 양이온중 하나를 킬레이트화하기 위한 킬레이트 기의 도입을 포함할 수 있다. 적당한 킬레이트 기로는, 예를 들어, 비제한적으로, 디에틸렌트리아민펜타아세트산(DTPA: diethylenetriaminepentaacetic acid) 또는 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA: ethylenediaminetetraacetic acid)이 포함된다.
또 다른 변형은 특이적 결합 쌍, 예컨대 비오틴-(스트렙트)아비딘 결합 쌍의 한 부분인 작용기의 도입을 포함할 수 있다. 그러한 작용기는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드를 결합 쌍의 나머지 반에, 즉 결합 쌍의 형성을 통해 결합되는 또 다른 단백질, 폴리펩티드 또는 화학적 화합물에 연결시키기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드는 비오틴에 접합되고(conjugated), 아비딘 또는 스트렙타비딘에 접합된 또 다른 단백질, 폴리펩티드, 화합물 또는 담체에 연결될 수 있다. 예를 들어, 그러한 접합된 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드는, 예를 들어 검출가능한 신호-생산 제제가 아비딘 또는 스트렙타비딘에 접합되어 있는 진단 시스템에서, 수용체로서 사용될 수 있다. 그러한 결합 쌍은, 예를 들어 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드를 담체, 예컨대 약학적 목적에 적당한 담체에 결합시키기 위해 사용될 수 있다. 한 비제한적인 예는 문헌[Cao and Suresh, Journal of Drug Targetting, 8, 4, 257 (2000)]에 기재된 리포솜 배합물이다. 그러한 결합 쌍은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에 치료 활성제를 연결시키기 위해 사용될 수 있다.
다른 잠재적 화학적 및 효소적 변형은 숙련가에게 명백할 것이다. 그러한 변형은 또한 조사 목적을 위해(예를 들어 기능-활성 상관관계를 연구하기 위해) 도입될 수 있다. 예를 들어 문헌[Lundblad and Bradshaw, Biotechnol. Appl. Biochem., 26, 143-151 (1997)]을 참조한다.
바람직하게, 유도체는 이들이 본원에 정의된(즉, 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에 대해 정의된) 바와 같은 친화도(본원에 추가로 기재된 바와 같이, KD 값(실제값 또는 겉보기값), KA 값(실제값 또는 겉보기값), kon 속도 및/또는 koff 속도, 또는 대안적으로는 IC50 값으로서 적당하게 측정되고/되거나 표현됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합할 수 있도록 한다.
상기 언급된 바와 같이, 본 발명은 또한 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드로 본질적으로 구성되거나 이를 포함하는 단백질 또는 폴리펩티드에 관한 것이다. "본질적으로 구성된다"라는 것은 본 발명의 폴리펩티드의 아미노산 서열이 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 아미노산 서열의 아미노 말단 단부, 카르복시 말단 단부, 또는 아미노 말단 단부 및 카르복시 말단 단부 양자 모두에 첨가된 제한된 수의 아미노산 잔기, 예컨대 1 내지 20개의 아미노산 잔기, 예를 들어 1 내지 10개의 아미노산 잔기, 바람직하게는 1 내지 6개의 아미노산 잔기, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개 아미노산 잔기를 가지는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 아미노산 서열과 정확히 동일하거나, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 아미노산 서열에 상응한다는 의미이다.
상기 아미노산 잔기는 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 (생물학적) 특성을 변화시키거나, 바꾸거나 달리 영향을 주거나 주지 않을 수 있고, 추가의 작용성을 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드에게 부가하거나 부가하지 않을 수 있다. 예를 들어, 그러한 아미노산 잔기는:
a) 예를 들어 이종기원의 숙주 세포 또는 숙주 유기체에서의 발현의 결과로서, N-말단 Met 잔기를 포함할 수 있고;
b) 합성시 숙주 세포로부터의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 분비를 이끄는 신호 서열 또는 리더(leader) 서열을 형성할 수 있다. 적당한 분비 리더 펩티드는 숙련가에게 명백할 것이고, 본원에 추가로 기재된 바와 같다. 통상적으로, 그러한 리더 서열은 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 N-말단에 연결되지만, 본 발명은 그의 가장 광범위한 의미에서 이에 제한되지 않으며;
c) 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드가 특정 유기체, 조직, 세포, 또는 세포의 부분 또는 격실로 유도되고/되거나 이에 침투하거나 진입하도록 허용하고/하거나, 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드가 생물학적 장벽, 예컨대 세포막, 세포층, 예컨대 상피 세포층, 종양, 예컨대 고형 종양, 또는 혈뇌-장벽을 침투하거나 가로지르도록 허용하는 서열 또는 신호를 형성할 수 있다. 그러한 아미노산 서열의 예는 숙련가에게 명백할 것이다. 몇몇 비제한적인 예는 제WO 03/026700호 및 문헌[Temsamani et al., Expert Opin. Biol. Ther., 1, 773 (2001)], [Temsamani and Vidal, Drug Discov. Today, 9, 1012 (004)] 및 [Rousselle, J. Pharmacol. Exp. Ther., 296, 124-131 (2001)]에 기재된 작은 펩티드 벡터("펩-트랜스 벡터(Pep-trans vectors)"), 및 문헌[Zhao et al., Apoptosis, 8, 631-637 (2003)]에 기재된 막 트랜스로케이터(translocator) 서열이다. 항체 단편의 세포내 표적화를 위한 C-말단 및 N-말단 아미노산 서열은 예를 들어 문헌[Cardinale et al., Methods, 34, 171 (2004)]에 기재되어 있다. 세포내 표적화를 위한 적당한 기법으로는, 이하 언급된 바와 같이, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드를 포함하는 소위 "인트라바디(intrabody)의 발현 및/또는 사용을 포함하며;
d) 예를 들어 서열 또는 잔기에 대한 친화도 기법을 사용하는, 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 정제를 허용하거나 촉진시키는 "태그(tag)", 예를 들어 아미노산 서열 또는 잔기를 형성할 수 있다. 이후, 상기 서열 또는 잔기는 제거되어(예를 들어 화학적 또는 효소적 분할에 의해) 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드 서열을 제공할 수 있다(이를 위해, 태그는 임의적으로는 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드 서열에 분할가능한 링커 서열을 통해 연결되거나, 분할가능한 잔기를 함유함). 그러한 잔기의 바람직하나 비제한적인 몇몇 예는 다중 히스티딘 잔기, 글루타티온 잔기 및 myc-태그, 예컨대 AAAEQKLISEEDLNGAA(서열 번호 111)이고;
e) 작용화되고/되거나 작용기의 부착을 위한 부위로서 작용할 수 있는 1개 이상의 아미노산 잔기일 수 있다. 적당한 아미노산 잔기 및 작용기는 숙련가에게 명백할 것이고, 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 폴리펩티드의 유도체에 대해 본원에 언급된 아미노산 잔기 및 작용기가 포함된다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물, 핵산, 숙주 세포, 산물 및 조성물의 제조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 핵산은, 본원의 추가 개시내용으로부터 숙련가에게 명백한 바와 같이, 자체 공지된 방식으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및 폴리펩티드는 항체의 제조, 특히 항체 단편(제한되지 않지만 (단일) 도메인 항체 및 ScFv 단편)의 제조에 대해 자체 공지된 임의의 방식으로 제조될 수 있다. 아미노산 서열, 나노바디, 폴리펩티드 및 핵산을 제조하기 위한 바람직하나 비제한적인 몇몇 방법으로는 본원에 기재된 방법 및 기법이 포함된다.
본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 또는 본 발명의 일가 구조물을 생성시키기 위한 방법은:
- 적당한 숙주 세포 또는 숙주 유기체(또한 "본 발명의 숙주"로도 지칭됨) 또는 또 다른 적당한 발현 시스템에서 본 발명의 상기 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 코딩하는 핵산(또한 "본 발명의 핵산"으로도 지칭됨)을 발현시키는 단계; 및 임의적으로 후속되는
- 상기 수득된 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디 또는 폴리펩티드를 단리 및/또는 정제하는 단계
를 포함할 수 있다.
특히, 그러한 방법은:
- 본 발명의 숙주가 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
및/또는 폴리펩티드를 발현 및/또는 생산하도록 하는 조건 하에 본 발명의 숙주를 배양 및/또는 유지시키는 단계; 및 임의적으로 후속되는
- 상기 수득된 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 단리 및/또는 정제하는 단계
를 포함할 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 또는 일가 구조물을 코딩하는 핵산 또는 뉴클레오티드 서열(또한 "본 발명의 핵산" 또는 "본 발명의 뉴클레오티드 서열"로도 지칭됨)에 관한 것이다. 본 발명의 핵산은 단일 또는 이중 가닥 DNA 또는 RNA일 수 있고, 바람직하게는 이중 가닥 DNA의 형태이다. 예를 들어, 본 발명의 뉴클레오티드 서열은 게놈(genomic) DNA, cDNA 또는 합성 DNA(예컨대 의도된 숙주 세포 또는 숙주 유기체에서 발현되도록 특별히 적합화된 코돈 유용성을 가지는 DNA)일 수 있다.
본 발명의 한 실시양태에 따라서, 본 발명의 핵산은 본원에 정의된 바와 같이 본질적으로 단리된 형태이다. 본 발명의 핵산은 또한 역시 효과적으로 단리된 형태일 수 있는 벡터, 예컨대 플라스미드, 코스미드(cosmid) 또는 YAC의 형태이고/이거나, 그것 내에 존재하고/하거나, 그것의 일부일 수 있다.
본 발명의 핵산은, 본원에 제공된 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드를 위한 아미노산 서열에 대한 정보에 기초하여, 자체 공지된 방식으로 제조되거나 수득될 수 있고/있거나, 적당한 자연 공급원으로부터 단리될 수 있다. 또한, 숙련가에게 명백한 바와 같이, 본 발명의 핵산을 제조하기 위해, 또한 수개의 뉴클레오티드 서열, 예컨대 아미노산 서열 또는 나노바디
를 코딩하는 적어도 하나의 뉴클레오티드 서열, 및 예를 들어 하나 이상의 링커를 코딩하는 핵산이 함께 적당한 방식으로 연결될 수 있다.
본 발명의 핵산을 생성하기 위한 기법은 숙련가에게 명백할 것이고, 제한되지 않지만, 예를 들어 자동화된 DNA 합성; 부위 지정 돌연변이생성; 2개 이상의 자연 발생 및/또는 합성 서열(또는 이의 2개 이상의 부분)의 조합; 끝이 절단된(truncated) 발현 산물의 발현을 유도하는 돌연변이의 도입; 하나 이상의 제한 부위의 도입(예를 들어 적당한 제한 효소를 사용하여 쉽게 소화 및/또는 결찰되는 카세트(cassette) 및/또는 영역을 생성하기 위함), 및/또는 하나 이상의 "미스매치된" 프라이머를 사용하는 PCR 반응에 의한 돌연변이의 도입이 포함된다. 이들 및 다른 기법은 숙련가에게 명백할 것이고, 이 역시 표준 편람, 예컨대 상기 언급된 문헌[Sambrook et al.] 및 [Ausubel et al.]뿐만 아니라, 하기 실시예를 참조한다.
본 발명의 핵산은 또한, 당분야의 숙련가에게 명백한 바와 같이, 유전적 구조물의 형태이고, 이에 존재하고/하거나 이의 일부일 수 있다. 일반적으로, 그러한 유전적 구조물은, 임의적으로는 자체 공지된 유전적 구조물의 하나 이상의 요소, 예컨대 예를 들어 하나 이상의 적당한 조절 요소(예컨대 적당한 프로모터(들), 인핸서(들), 터미네이터(들), 등) 및 본원에 지칭된 유전적 구조물의 추가의 요소에 연결되는 본 발명의 적어도 하나의 핵산을 포함한다. 본 발명의 적어도 하나의 핵산을 포함하는 그러한 유전적 구조물은 또한 본원에 "본 발명의 유전적 구조물"로서 지칭될 것이다.
본 발명의 유전적 구조물은 DNA 또는 RNA일 수 있고, 바람직하게는 이중-가닥 DNA이다. 본 발명의 유전적 구조물은 또한 의도된 숙주 세포 또는 숙주 유기체의 변형에 적당한 형태, 의도된 숙주 세포의 게놈 DNA내로 통합(integration)되기에 적당한 형태, 또는 의도된 숙주 유기체에서 독립적으로 복제, 유지 및/또는 승계(inheritance)하기에 적당한 형태일 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 유전적 구조물은 벡터, 예컨대 예를 들어 플라스미드, 코스미드, YAC, 바이러스성 벡터 또는 트랜스포슨(transposon)의 형태일 수 있다. 특히, 벡터는 발현 벡터, 즉 시험관내 및/또는 생체내에서(예를 들어 적당한 숙주 세포, 숙주 유기체 및/또는 발현 시스템에서) 발현을 제공할 수 있는 벡터일 수 있다.
바람직하나 비제한적인 한 실시양태에서, 본 발명의 유전적 구조물은,
a) 본 발명의 적어도 1개의 핵산; 이는 이하에 작동적으로 연결됨:
b) 하나 이상의 조절 요소, 예컨대 프로모터 및 임의적으로는 적당한 터미네이터; 및 임의적으로는 또한
c) 자체 공지된 유전적 구조물의 1개 이상의 추가의 요소를 포함하고;
여기에서, "조절 요소", "프로모터", "터미네이터" 및 "작동적으로 연결된"이란 용어는 당분야에서 그들의 일반적인 의미를 갖고(본원에 추가로 기재된 바와 같음); 여기에서 유전적 구조물에 존재하는 상기 "추가의 요소"는 예를 들어 3'- 또는 5'-UTR 서열, 리더 서열, 선택 마커, 발현 마커/리포터 유전자, 및/또는 변형 또는 통합(의 효율)을 촉진시키거나 증가시킬 수 있는 요소일 수 있다. 그러한 유전적 구조물에 적당한 이들 및 다른 요소는 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어 사용된 구조물의 유형, 의도된 숙주 세포 또는 숙주 유기체, 본 발명의 원하는 뉴클레오티드 서열이 발현되는 방식(예를 들어 구조적(constitutive), 일시적(transient) 또는 유도성(inducible) 발현을 통해); 및/또는 사용된 변형 기법에 좌우될 수 있다. 예를 들어, 항체 및 항체 단편(제한되지 않지만 (단일) 도메인 항체 및 ScFv 단편이 포함됨)의 발현 및 생산을 위해 자체 공지된 조절 서열, 프로모터 및 터미네이터가 본질적으로 유사한 방식으로 사용될 수 있다.
바람직하게, 본 발명의 유전적 구조물에서, 상기 본 발명의 적어도 하나의 핵산 및 상기 조절 요소, 및 임의적으로는 상기 1개 이상의 추가의 요소는 서로 "작동적으로 연결"되고, 이는 일반적으로 이들이 서로에 대해 작용적 관계임을 의미한다. 예를 들어, 프로모터가 코딩 서열의 전사 및/또는 발현을 개시하거나 달리는 제어/조절할 수 있다면, 그러한 프로모터는 코딩 서열에 "작동적으로 연결"된 것으로 고려된다(여기에서, 상기 코딩 서열은 상기 프로모터의 "제어 하"에 있는 것으로 이해되어야 함). 일반적으로, 2개의 뉴클레오티드 서열이 작동적으로 연결되는 경우, 이들은 동일한 배향에 놓이고, 통상적으로 또한 동일한 판독 프레임에 있을 것이다. 필요하지 않을 수도 있으나, 이들은 통상적으로 본질적으로 인접할 것이다.
바람직하게, 본 발명의 유전적 구조물의 조절 및 추가의 요소는 이들이 의도된 숙주 세포 또는 숙주 유기체에서 이들의 의도된 생물학적 기능을 제공할 수 있도록 한다.
예를 들어, 프로모터, 인핸서 또는 터미네이터는 의도된 숙주 세포 또는 숙주 유기체에서 "작동가능"해야 하고, 이는(예를 들어) 상기 프로모터가 (본원에 정의된 바와 같이) 작동가능하게 연결된 뉴클레오티드 서열, 예를 들어 코딩 서열의 전사 및/또는 발현을 개시하거나 달리는 제어/조절할 수 있어야 함을 의미한다.
특히 바람직한 몇몇 프로모터에는, 이에 제한되지 않지만, 본원에 언급된 숙주 세포에서 발현하기 위한 자체 공지된 프로모터; 특히 박테리아 세포에서 발현하기 위한 프로모터, 예컨대 본원에 언급되고/되거나 실시예에서 사용된 프로모터가 포함된다.
선택 마커는, 적절한 선택 조건 하에, 본 발명의 뉴클레오티드 서열로 (성공적으로)형질전환된 숙주 세포 및/또는 숙주 유기체가 (성공적으로)형질전환되지 않은 숙주 세포/유기체와 구별될 수 있도록 허용해야 한다. 그러한 마커의 바람직하나 비제한적인 몇몇 예는 항생물질(예컨대 카나마이신(kanamycin) 또는 암피실린(ampicillin))에 내성을 제공하는 유전자, 내온성을 제공하는 유전자, 또는 숙주 세포 또는 숙주 유기체가 형질전환되지 않은 세포 또는 유기체의 생존에 필수적인 배지중의 특정 인자, 화합물 및/또는 (식품) 성분의 부재 하에 유지될 수 있도록 허용하는 유전자이다.
리더 서열은, 의도된 숙주 세포 또는 숙주 유기체에서, 원하는 번역후 변형을 허용하고/하거나, 전사된 mRNA가 세포의 원하는 부분 또는 세포기관으로 향하도록 해야 한다. 이러 서열은 또한 상기 세포로부터 발현 산물이 분비되는 것을 허용할 수 있다. 따라서, 리더 서열은 숙주 세포 또는 숙주 유기체에서 작동가능한 임의의 프로-, 프리- 또는 프리프로-서열일 수 있다. 리더 서열은 박테리아 세포에서 발현하기 위해 필요하지 않을 수 있다. 예를 들어, 항체 및 항체 단편(단일 도메인 항체 및 ScFv 단편을 포함하나 이에 제한되지 않음)의 발현 및 생산을 위해 자체 공지된 리더 서열은 본질적으로 유사한 방식으로 사용될 수 있다.
발현 마커 또는 리포터 유전자는, 숙주 세포 또는 숙주 유기체에서, 유전적 구조물(상에 존재하는 유전자 또는 뉴클레오티드 서열)의 발현을 검출할 수 있도록 해야 한다. 발현 마커는 임의적으로는 발현된 산물의 편재화를, 예컨대 세포의 특정 부분 또는 세포기관 및/또는 다세포 유기체의 특정 세포(들), 조직(들), 기관(들) 또는 부분(들)에서 허용할 수 있다. 그러한 리포터 유전자는 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드와의 단백질 융합물로서 발현될 수 있다. 몇몇 바람직하나 비제한적인 예로는 형광 단백질, 예컨대 GFP가 포함된다.
적당한 프로모터, 터미네이터 및 추가의 요소의 바람직하나 비제한적인 몇몇 예로는 본원에 언급된 숙주 세포에서의 발현을 위해 사용될 수 있는 것들, 특히 박테리아 세포에서의 발현에 적당한 것들, 예컨대 본원에 언급된 것들 및/또는 하기 실시예에 사용된 것들이 포함된다. 프로모터, 선택 마커, 리더 서열, 발현 마커 및 본 발명의 유전적 구조물에 존재하는/사용되는 추가의 요소, 예컨대 터미네이터, 전사 및/또는 번역 인핸서 및/또는 통합 인자의 몇몇 (추가의) 비제한적인 예를 위해, 표준 편람, 예컨대 상기 언급된 문헌[Sambrook et al.] 및 [Ausubel et al.]뿐만 아니라, 제WO 95/07463호, 제WO 96/23810호, 제WO 95/07463호, 제WO 95/21191호, 제WO 97/11094호, 제WO 97/42320호, 제WO 98/06737호, 제WO 98/21355호, 제US-A-7,207,410호, 제US-A-5,693,492호 및 제EP1 085 089호를 참조한다. 다른 예는 숙련가에게 명백할 것이다. 또한 상기 인용된 일반적 배경기술 및 본원에 인용된 추가의 문헌을 참조한다.
본 발명의 유전적 구조물은 일반적으로 본 발명의 뉴클레오티드 서열(들)을 상기 기재된 1개 이상의 추가의 요소에, 예를 들어 표준 편람, 예컨대 상기 언급된 문헌[Sambrook et al.] 및 [Ausubel et al.]에 기재된 기법을 사용하여 적당하게 연결시킴으로써 제공될 수 있다.
종종, 본 발명의 유전적 구조물은 본 발명의 뉴클레오티드 서열을 자체 공지된 적당한 (발현)벡터에 삽입함으로써 수득될 것이다. 적당한 발현 벡터의 바람직하나 비제한적인 몇몇 예는 하기 실시예에 사용된 벡터뿐만 아니라, 본원에 언급된 벡터이다.
본 발명의 핵산 및/또는 본 발명의 유전적 구조물은 숙주 세포 또는 숙주 유기체를 형질전환시키기 위해, 즉 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 발현 및/또는 생산을 위해 사용될 수 있다. 적당한 숙주 또는 숙주 세포는 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어 임의의 적당한 진균류 세포, 원핵 세포 또는 진핵 세포, 또는 세포주 또는 임의의 적당한 진균류 유기체, 원핵 유기체 또는 진핵 유기체, 예를 들어:
- 박테리아 균주, 제한되지 않지만 예를 들어 그램-음성(gram-negative) 균주, 예컨대 에스케리치아 콜라이(Escherichia coli) 균주; 프로테우스(Proteus) 균주, 예를 들어 프로테우스 미라빌리스(Proteus mirabilis) 균주; 슈도모나스(Pseudomonas) 균주, 예를 들어 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens) 균주; 및 그램-양성(gram-positive) 균주, 예컨대 바실러스(Bacillus) 균주, 예를 들어 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 또는 바실 러스 브레비스(Bacillus brevis) 균주; 스트렙토마이세스(Streptomyces) 균주, 예를 들어 스트렙토마이세스 리비단스(Streptomyces lividans); 스타필로코커스(Staphylococcus) 균주, 예를 들어 스타필로코커스 카르노서스(Staphylococcus carnosus) 균주; 및 락토코커스(Lactococcus) 균주, 예를 들어 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 균주;
- 진균류 세포, 제한되지 않지만 예를 들어 트리코더마(Trichoderma), 예를 들어 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei); 뉴로스포라(Neurospora), 예를 들어 뉴로스포라 크라사(Neurospora crassa); 소르다르아(Sordaria), 예를 들어 소르다 리아 마크로스포라(Sordaria macrospora); 아스퍼길러스(Aspergillus), 예를 들어 아스퍼길러스 니거(Aspergillus niger) 또는 아스퍼길러스 소제(Aspergillus sojae); 또는 다른 섬유상 진균류 종으로부터의 세포;
- 효모 세포, 제한되지 않지만 예를 들어 사카로마이세스(Saccharomyces), 예를 들어 사카로마이세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae); 스키조사카로마이세 스(Schizosaccharomyces), 예를 들어 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe); 피키아(Pichia), 예를 들어 피키아 파스토리스(Pichia pastoris) 또는 피키아 메탄올리카(Pichia methanolica); 한세눌라(Hansenula), 예를 들어 한세눌라 폴리모파(Hansenula polymorpha); 클루이베로마이세스(Kluyveromyces), 예를 들어 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis); 아르슐라(Arxula), 예를 들어 아르슐라 아데니니포란스(Arxula adeninivorans); 야로위아(Yarrowia), 예를 들어 야로위아 리포리티카(Yarrowia lipolytica) 종으로부터의 세포;
- 양서류 세포 또는 세포주, 예컨대 제노퍼스 우사이테스(Xenopus oocytes);
- 곤충-유래 세포 또는 세포주, 예컨대 인시류(lepidoptera)로부터 유도된 세포/세포주, 제한되지 않지만 예를 들어 스포돕테라(Spodoptera) SF9 및 Sf21 세포, 또는 드로소필라(Drosophila)로부터 유도된 세포/세포주, 예컨대 슈나이더(Schneider) 및 Kc 세포;
- 식물 또는 식물 세포, 예를 들어 담배 식물; 및/또는
- 포유동물 세포 또는 세포주, 예를 들어 인간으로부터 유도된 세포 또는 세포주, 포유동물로부터의 세포 또는 세포주, 제한되지 않지만 예를 들어 CHO-세포, BHK-세포(예를 들어, BHK-21 세포) 및 인간 세포 또는 세포주, 예컨대 HeLa, COS(예를 들어 COS-7) 및 PER.C6 세포뿐만 아니라;
항체 및 항체 단편(이에는 제한되지 않지만 (단일) 도메인 항체 및 ScFv 단편이 포함됨)의 발현 및 생산을 위해 자체 공지된 다른 숙주 또는 숙주 세포(이는 숙련가에게 명백할 것임)이다. 또한 본원에 상기 인용된 일반적 배경 기술뿐만 아니라, 예를 들어 제WO 94/29457호; 제WO 96/34103호; 제WO 99/42077호; 상기 문헌[Frenken et al., (1998)]; 상기 문헌[Riechmann and Muyldermans, (1999)]; 상기 문헌[van der Linden, (2000)]; 상기 문헌[Thomassen et al., (2002)]; 상기 문헌[Joosten et al., (2003)]; 상기 문헌[Joosten et al., (2005)]; 및 본원에 인용된 추가의 문헌을 참조한다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및 폴리펩티드는 또한 다세포 유기체의 하나 이상의 세포, 조직 또는 기관에서, 예를 들어 예방학적 및/또는 치료학적 목적을 위해(예를 들어 유전자 치료법으로서) 도입되고 발현될 수 있다. 이를 위하여, 본 발명의 뉴클레오티드 서열은 임의의 적당한 방식으로, 예를 들어 그대로(예를 들어 리포솜 사용), 또는 이들이 적당한 치료 벡터내로 삽입된 후(예를 들어 레트로바이러스, 예컨대 아데노바이러스, 또는 파라보바이러스, 예컨대 아데노-연관된 바이러스로부터 유도된 후) 세포 또는 조직내로 도입될 수 있다. 역시 숙련가에게 명백한 바와 같이, 그러한 유전자 치료법은 본 발명의 핵산 또는 이를 코딩하는 적당한 유전자 치료 벡터를 환자, 또는 환자의 특정 세포 또는 특정 조직 또는 기관에 투여함으로써 환자의 신체내에서 제자리에 및/또는 생체내에서 수행될 수 있거나; 또는 적당한 세포(종종 치료될 환자의 신체, 예컨대 외식된 임파구, 골수 흡인 또는 조직 생검으로부터 취해짐)는 본 발명의 뉴클레오티드 서열로 시험관내에서 처리된 다음 환자의 신체내로 적당하게 (재)도입된다. 이들 모두는 숙련가에게 공지된 유전자 치료 벡터, 기법 및 전달 시스템을 사용하여 수행될 수 있고, 예를 들어 문헌[Culver, K. W., "Gene Therapy", 1994, p. xii, Mary Ann Liebert, Inc., Publishers, New York, N.Y.)]; 문헌[Giordano, Nature F Medicine 2 (1996), 534-539]; 문헌[Schaper, Circ. Res. 79 (1996), 911-919]; 문헌[Anderson, Science 256 (1992), 808-813]; 문헌[Verma, Nature 389 (1994), 239]; 문헌[Isner, Lancet 348 (1996), 370-374]; 문헌[Muhlhauser, Circ. Res. 77 (1995), 1077-1086]; 문헌[Onodera, Blood 91; (1998), 30-36]; 문헌[Verma, Gene Ther. 5 (1998), 692-699]; 문헌[Nabel, Ann. N.Y. Acad. Sci.: 811 (1997), 289-292]; 문헌[Verzeletti, Hum. Gene Ther. 9 (1998), 2243-51]; 문헌[Wang, Nature Medicine 2 (1996), 714-716]; 제WO 94/29469호; 제WO 97/00957호, 제US 5,580,859호; 제US 5,5895466호; 또는 문헌[Schaper, Current Opinion in Biotechnology 7 (1996), 635-640]에 기재되어 있다. 예를 들어, ScFv 단편의 제자리 발현(문헌[Afanasieva et al., Gene Ther., 10, 1850-1859 (2003)]) 및 디아바디의 제자리 발현(문헌[Blanco et al., J. Immunol, 171, 1070-1077 (2003)])은 당분야에 기재되어 있다.
세포 내 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드의 발현을 위해, 이들은 또한 소위 "인트라바디"로서 발현되고, 예를 들어 제WO 94/02610호, 제WO 95/22618호 및 제US-A-7004940호; 제WO 03/014960호; 문헌[Cattaneo, A. & Biocca, S. (1997) Intracellular Antibodies: Development and Applications. Landes and Springer-Verlag]; 및 문헌[Kontermann, Methods 34, (2004), 163-170]에 기재된 바와 같다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및 폴리펩티드는 예를 들어 유전자도입 포유동물에서의 유즙, 예를 들어 토끼, 소, 염소 또는 양의 유즙에서(포유동물내로의 유전자도입을 위한 일반적 기법을 위해 예를 들어 제US 6,741,957호, 제US 6,304,489호 및 제US 6,849,992호 참조), 식물 또는 식물의 부분, 제한되지 않지만 예를 들어 이들의 잎, 꽃, 과일, 씨앗, 뿌리 또는 줄기(turber)(예를 들어 담배, 옥수수, 대두 또는 자주개자리(alfalfa))에서, 또는 예를 들어 누에 봄빅스 모리(Bombix mori)의 번데기에서 생산될 수 있다.
또한, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및 폴리펩티드는 또한 세포-유리 발현 시스템에서 발현 및/또는 생산될 수 있고, 그러한 시스템의 적당한 예는 숙련가에게 명백할 것이다. 바람직하나 비제한적인 몇몇 예로는 맥아 시스템, 토끼 망상적혈구 용해물 또는 E. 콜라이(E. coli) 주베이(Zubay) 시스템에서의 발현이 포함된다.
상기 언급된 바와 같이, 나노바디
사용의 이점들 중 하나는 이에 기초한 폴리펩티드가 적당한 박테리아 시스템에서의 발현을 통해 제조될 수 있고, 적당한 박테리아 발현 시스템, 벡터, 숙주 세포, 조절 요소 등은 상기 인용된 문헌으로부터 숙련가에게 명백할 것이다. 그러나 본 발명은 그의 가장 광범위한 의미에서 박테리아 시스템에서의 발현에 제한되지 않음을 주지해야 한다.
바람직하게, 본 발명에서, 약학적 용도에 적당한 형태로 본 발명의 폴리펩티드를 제공하는 (생체내 또는 시험관내)발현 시스템, 예컨대 박테리아 발현 시스템이 사용되고, 그러한 발현 시스템도 역시 숙련가에게 명백할 것이다. 또한 숙련가에게 명백한 바와 같이, 약학적 용도에 적당한 본 발명의 폴리펩티드는 펩티드 합성을 위한 기법을 사용하여 제조될 수 있다.
산업적 규모로 생산하기 위해, 나노바디
또는 나노바디
-함유 단백질 치료제의 (산업적) 생산을 위한 바람직한 이종기원의 숙주로는 대규모 발현/생산/발효, 특히 대규모 약학적(즉, GMP 등급) 발현/생산/발효에 적당한 E. 콜라이, 피키 아 파스토리스 , S. 세레비지에(S. cerevisiae) 균주가 포함된다. 그러한 균주의 적당한 예는 숙련가에게 명백할 것이다. 그러한 균주 및 생산/발현 시스템은 또한 바이오비트룸(Biovitrum)(스웨덴 웁살라 소재)과 같은 회사에 의해 입수가능하다.
대안적으로는, 포유동물 세포주, 특히 차이니즈 햄스터 난소(CHO: Chinese hamster ovary) 세포는 대규모 발현/생산/발효, 특히 대규모 약학적 발현/생산/발효에 사용될 수 있다. 이 역시, 그러한 발현/생산/발효 시스템은 또한 상기 언급된 회사들 중 몇몇 회사에 의해 입수가능하다.
특정 발현 시스템의 선택은 특정 번역후 변형, 보다 구체적으로 글리코실화를 위한 요건에 부분적으로 좌우될 것이다. 글리코실화가 요망되거나 요구되는 나노바디
-함유 재조합 단백질의 생산은 발현된 단백질을 글리코실화할 수 있는 포유동물 발현 숙주의 사용을 필요로 할 것이다. 이와 관련하여, 수득된 글리코실화 패턴(즉, 부착된 잔기의 종류, 수 및 위치)가 발현에 사용된 세포 또는 세포주에 좌우됨은 숙련가에게 명백할 것이다. 바람직하게, 인간 세포 또는 세포주가 사용되거나(즉, 본질적으로 인간 글리코실화 패턴을 가지는 단백질을 유도함) 또 다른 포유동물 세포주가 사용되어 본질적으로 및/또는 기능적으로 인간 글리코실화와 동일하거나 적어도 인간 글리코실화와 유사한 글리코실화 패턴을 제공할 수 있다. 일반적으로, 원핵 숙주, 예컨대 E. 콜라이는 단백질을 글리코실화할 능력이 없고, 보다 하위 진핵생물, 예컨대 효모의 사용은 통상적으로 인간 글리코실화와 상이한 글리코실화 패턴을 유도한다. 그럼에도 불구하고, 모든 이전의 숙주 세포 및 발현 시스템은, 수득될 원하는 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드에 따라서, 본 발명에 사용될 수 있음을 알아야 한다.
따라서, 본 발명의 비제한적인 한 실시양태에 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 글리코실화된다. 본 발명의 또 다른 비제한적인 양태에 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 비-글리코실화된다.
본 발명의 바람직하나 비제한적인 한 실시양태에 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 박테리아 세포, 특히 대규모 약학적 생산에 적당한 박테리아 세포, 예컨대 상기 본원에 언급된 세포 균주에서 생산된다.
본 발명의 바람직하나 비제한적인 또 다른 실시양태에 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 효모 세포, 특히 대규모 약학적 생산에 적당한 효모 세포, 예컨대 상기 본원에 언급된 종의 세포에서 생산된다.
본 발명의 바람직하나 비제한적인 또 다른 실시양태에 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 포유동물 세포, 특히 인간 세포 또는 인간 세포주의 세포, 보다 특히 대규모 약학적 생산에 적당한 인간 세포 또는 인간 세포주의 세포, 예컨대 상기 본원에 언급된 세포주의 세포에서 생산된다.
숙주 세포에서의 발현이 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및 폴리펩티드를 생산하기 위해 사용될 경우, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및 폴리펩티드는 세포내로 생산될 수 있고(예를 들어 시토졸, 원형질막공간(periplasmic) 또는 봉입체(inclusion bodies) 내에서), 이어서 숙주 세포로부터 단리되고, 임의적으로는 추가로 정제되거나; 또는 세포외로 생산되고(예를 들어 숙주 세포가 배양되는 배지내에서), 이어서 배지로부터 단리되고, 임의적으로는 추가로 정제된다. 진핵 숙주 세포가 사용될 경우, 세포외 생산이 통상적으로 바람직한데, 그 이유는 이것이 수득된 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 및 단백질의 추가의 단리 및 다운스트림 처리과정을 상당히 촉진시키기 때문이다. 박테리아 세포, 예컨대 상기 언급된 E. 콜라이 균주는 정상적으로 소수 부류의 단백질, 예컨대 독소 및 용혈소를 제외하고는 단백질을 세포외로 배출하지 않고, E. 콜라이에서의 분비 생산은 내막을 가로질러 원형질막공간으로 단백질을 전위시키는 것이다. 원형질막공간 생산은 시토졸 생산에 비하여 우수한 몇몇 이점을 제공한다. 예를 들어, 분비된 산물의 N-말단 아미노산 서열은 특이적 신호 펩티다아제에 의해 분비 신호 서열이 분열된 이후 자연 유전자 산물과 동일할 수 있다. 또한, 세포질에서와 대비하여 원형질막공간에서 단백질분해효소 활성이 훨씬 낮은 것으로 나타난다. 또한, 단백질 정제는 원형질막공간에서의 보다 적은 오염 단백질에 기인하여 보다 더 단순하다. 또 다른 이점은 원형질막공간이 세포질에 비하여 보다 산화적인 환경을 제공하므로 적절한 이황화 결합이 형성된다는 것이다. 종종 E. 콜라이에서 과발현된 단백질이 소위 봉입체라고 불리는 불용성 응집체에서 발견된다. 이들 봉입체는 시토졸 또는 원형질막공간에 위치될 수 있고; 이들 봉입체로부터 생물학적 활성 단백질을 회수하기 위해 변성/리폴딩(refolding)이 요구된다. 치료학적 단백질을 비롯한 많은 재조합 단백질은 봉입체로부터 회수된다. 대안적으로는, 숙련가에게 명백한 바와 같이, 원하는 단백질, 특히 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 분비하도록 유전자적으로 변형된 박테리아의 재조합 균주가 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명의 비제한적인 한 실시양태에 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 세포내로 생산되고 숙주 세포, 특히 박테리아 세포 또는 박테리아 세포중의 봉입체로부터 단리되는 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드이다. 본 발명의 비제한적인 또 다른 양태에 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 세포외로 생산되어, 숙주 세포가 배양되는 배지로부터 단리된 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드이다.
이들 숙주 세포와 함께 사용하기에 바람직하나 비제한적인 몇몇 프로모터에는,
- E. 콜라이에서의 발현을 위해: lac 프로모터(및 이의 유도체, 예컨대 lacUV5 프로모터); 아라비노즈(arabinose) 프로모터; 파지 람다의 좌향(PL) 및 우향(PR) 프로모터; trp 오페론(operon)의 프로모터; 하이브리드(hybrid) lac/trp 프로모터(tac 및 trc); T7-프로모터(보다 구체적으로 T7-파지 유전자 10의 프로모터) 및 다른 T-파지 프로모터; Tn1O 테트라사이클린 내성 유전자의 프로모터; 외생성 조절 오퍼레이터(operator) 서열의 하나 이상의 카피를 포함하는 상기 프로모터의 조작된 변형체;
- S. 세레비지에에서의 발현을 위해: 구성적: ADH1(알코올 탈수소효소 1), ENO(에놀라아제(enolase)), CYC1(시토크롬(cytochrome) c 이소-1), GAPDH(글리세르알데히드-3-포스페이트 탈수소효소), PGK1(포스포글리세레이트 키나아제), PYK1(피루베이트 키나아제); 조절됨: GAL1,10,7(갈락토즈 대사 효소), ADH2(알코올 탈수소효소 2), PHO5(산 포스파타아제), CUP1(구리 메탈로티오네인(copper metallothionein)); 이종성: CaMV(콜리플라워 모자이크 바이러스(mosaic virus) 35S 프로모터);
- 피키아 파스토리스에서의 발현을 위해: AOX1 프로모터(알코올 산화효소 I);
- 포유동물 세포에서의 발현을 위해: 인간 사이토메갈로바이러스(hCMV: 인간 cytomegalovirus) 즉시적 조기 반응 인핸서/프로모터; 2개의 테트라사이클린 오퍼레이터 서열을 함유하여 프로모터가 Tet 리프레서(repressor)에 의해 조절되는 인간 사이토메갈로바이러스 (hCMV) 조기반응 프로모터 변형체; 단순포진 바이러스(Herpes Simplex Virus) 티미딘 키나아제(TK: thymidine kinase) 프로모터; 라우스 육종 바이러스 장기간 반복(RSV LTR: Rous Sarcoma Virus long terminal repeat) 인핸서/프로모터; 인간, 침팬지, 마우스 또는 래트로부터의 신장(elongation) 인자 1α(hEF-1α) 프로모터; SV40 초기(early) 프로모터; HIV-1 장기간 반복 프로모터; β-액틴(actin) 프로모터가 포함된다.
이들 숙주 세포와 사용하기에 바람직하나 비제한적인 몇몇 벡터에는:
- 포유동물 세포에서 발현하기 위한 벡터: pMAMneo(클론텍(Clontech)), pcDNA3(인비트로겐(Invitrogen)), pMClneo(스트라타겐(Stratagene)), pSG5(스트라타겐), EBO-pSV2-neo(ATCC37593), pBPV-1(8-2)(ATCC37110), pdBPV-MMTneo(342-12)(ATCC37224), pRSVgpt(ATCC37199), pRSVneo(ATCC37198), pSV2-dhfr(ATCC 37146), pUCTag(ATCC37460) 및 1ZD35(ATCC37565)뿐만 아니라, 바이러스-기재 발현 시스템, 예컨대 아데노바이러스에 기초한 시스템;
- 박테리아 세포에서의 발현을 위한 벡터: pET 벡터(노바겐(Novagen)) 및 pQE 벡터(키아젠(Qiagen));
- 효모 또는 다른 진균류 세포에서의 발현을 위한 벡터: pYES2(인비트로겐) 및 피키아 발현 벡터(인비트로겐);
- 곤충 세포에서의 발현을 위한 벡터: pBlueBacII(인비트로겐) 및 다른 바큘로바이러스(baculovirus) 벡터;
- 식물 또는 식물 세포에서의 발현을 위한 벡터: 예를 들어 콜리플라워 모자이크 바이러스 또는 담배 모자이크 바이러스, 아그로박테리움(Agrobacterium)의 적당한 균주에 기초한 벡터, 또는 Ti-플라스미드에 기초한 벡터가 포함된다.
이들 숙주 세포와 사용하기에 바람직하나 비제한적인 몇몇 분비 서열로는:
- 박테리아 세포, 예컨대 E. 콜라이에서 사용하기 위해: PelB, Bla, OmpA, OmpC, OmpF, OmpT, StII, PhoA, PhoE, MalE, Lpp, LamB 등; TAT 신호 펩티드, 용혈소 C-말단 분비 신호;
- 효모에서 사용하기 위해: α-교배 인자 프리프로-서열, 포스파타아제(pho1), 전화효소(Suc) 등;
- 포유동물 세포에서 사용하기 위해: 표적 단백질이 진핵생물 기원인 경우 고유의 신호; 뮤린(murine) Igκ쇄 V-J2-C 신호 펩티드 등이 포함된다.
본 발명의 숙주 또는 숙주 세포를 형질전환하기 위해 적당한 기법은 숙련가에게 명백할 것이고, 의도된 숙주 세포/숙주 유기체 및 사용되는 유전적 구조물에 좌우될 것이다. 이 역시 상기 언급된 편람 및 특허 출원을 참조한다.
형질전환후, 본 발명의 뉴클레오티드 서열/유전적 구조물에 의해 성공적으로 형질전환된 이들 숙주 세포 또는 숙주 유기체를 검출 및 선택하는 단계가 수행될 수 있다. 이는 예를 들어 본 발명의 유전적 구조물에 존재하는 선택가능한 마커에 기초한 선택 단계, 또는 예를 들어 특이적 항체를 사용하는, 본 발명의 아미노산 서열의 검출을 포함하는 단계일 수 있다.
형질전환된 숙주 세포(이는 안정한 세포주 형태일 수 있음) 또는 숙주 유기체(이는 안정한 돌연변이주 또는 균주의 형태일 수 있음)는 본 발명의 추가의 양태를 형성한다.
바람직하게, 이들 숙주 세포 또는 숙주 유기체는 이들이 예를 들어 적당한 조건 하에 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 발현하거나 (적어도)발현가능하도록 한다(숙주 유기체의 경우: 적어도 하나의 이의 세포 부분, 조직 또는 기관에서). 본 발명은 또한 추가로 세포 분열 또는 유성 또는 무성 생식에 의해 수득될 수 있는, 본 발명의 숙주 세포 또는 숙주 유기체의 산물, 세대, 및/또는 자손을 포함한다.
본 발명의 아미노산 서열의 발현을 생산/수득하기 위해, 형질전환된 숙주 세포 또는 형질전환된 숙주 유기체는 일반적으로 본 발명의 (원하는) 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 발현/생산되는 조건 하에 보존, 유지 및/또는 배양될 수 있다. 적당한 조건은 숙련가에게 명백할 것이고, 통상적으로 사용되는 숙주 세포/숙주 유기체뿐만 아니라, (관련) 뉴클레오티드 서열의 발현을 제어하는 조절 요소에 좌우될 것이다. 이 역시, 본 발명의 유전적 구조물에 대한 문단에서 상기 언급된 편람 및 특허 출원을 참조한다.
일반적으로, 적당한 조건으로는 적당한 배지의 사용, 적당한 식품 공급원 및/또는 적당한 영양소의 존재, 적당한 온도의 사용, 및 임의적으로는 적당한 유도 인자 또는 화합물의 존재(예를 들어 본 발명의 뉴클레오티드 서열이 유도성 프로모터의 제어하에 있는 경우)가 포함되고; 이들 모두는 숙련가에 의해 선택될 수 있다. 이 역시, 그러한 조건 하에, 본 발명의 아미노산 서열은 구성적 방식으로, 일시적 방식으로, 또는 단지 적당하게 유도될 경우에만 발현될 수 있다.
또한, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 (우선) 미성숙 형태(상기 언급된 바와 같음)로 발생되고, 이는 이어서 사용된 숙주 세포/숙주 유기체에 따라서 번역후 변형을 거칠 수 있음이 숙련가에게 명백할 것이다. 또한, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는, 사용된 숙주 세포/숙주 유기체에 따라서 글리코실화될 수 있다.
이어서 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드는 숙주 세포/숙주 유기체로부터 및/또는 상기 숙주 세포 또는 숙주 유기체가 배양되는 배지로부터, 자체 공지된 단백질 단리 및/또는 정제 기법, 예컨대 (예비용) 크로마토그래피 및/또는 전기이동 기법, 차등 침전 기법, 친화도 기법(예를 들어 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드와 융합된 특이적인 분열가능한 아미노산 서열 사용) 및/또는 예비용 면역학적 기법(즉, 단리된 아미노산 서열에 대한 항체 사용)에 의해 단리될 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열(또는 이의 적당한 단편), 본 발명의 적어도 하나의 나노바디
, 본 발명의 적어도 하나의 폴리펩티드, 본 발명의 적어도 하나의 화합물 또는 구조물, 본 발명의 적어도 하나의 일가 구조물 및/또는 본 발명의 적어도 하나의 핵산, 및 임의적으로 조성물의 의도된 용도에 따라서는 자체 공지된 상기 조성물의 1개 이상의 추가 성분을 함유 또는 포함하는 산물 또는 조성물에 관한 것이다. 그러한 산물 또는 조성물은 예를 들어 약학적 조성물(본원에 기재된 바와 같음), 수의학적 조성물, 또는 진단 용도의 산물 또는 조성물(역시 본원에 기재된 바와 같음)일 수 있다. 그러한 산물 또는 조성물의 바람직하나 비제한적인 몇몇 예는 본원의 추가의 기재내용으로부터 명백해질 것이다.
일반적으로, 본 발명의 폴리펩티드는, 약학적 용도를 위해, 본 발명의 적어도 1개의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제 및/또는 보조제, 및 임의적으로는 1개 이상의 추가의 약학적으로 활성인 폴리펩티드 및/또는 화합물을 포함하는 약학적 제제 또는 조성물로서 제형화될 수 있다. 비제한적 예에 의해, 그러한 제형은 경구 투여, 비경구 투여(예컨대 정맥내, 근육내 또는 피하 투여 또는 정맥 주입에 의해), 국소 투여, 흡입, 피부 패치(patch), 이식물(implant), 좌제 등에 의한 투여에 적당한 형태일 수 있다. 그러한 적당한 투여 형태-이는 투여 방식에 따라 고체, 반고체 또는 액체일 수 있음-뿐만 아니라 이의 제조에 사용하기 위한 방법 및 담체는 숙련가에게 명백할 것이고, 추가로 본원에 기재되어 있다.
따라서, 한 추가의 양태에서, 본 발명은 본 발명의 적어도 하나의 아미노산, 본 발명의 적어도 하나의 나노바디
또는 본 발명의 적어도 하나의 폴리펩티드 및 적어도 하나의 적당한 담체, 희석제 또는 부형제(즉, 적당한 약학적 용도를 위해), 및 임의적으로는 1개 이상의 추가의 활성 물질을 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
일반적으로, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 자체 공지된 임의의 적당한 방식으로 제형화되고 투여될 수 있고, 이를 위해 예를 들어 상기 인용된 일반적 배경기술(특히 제WO 04/041862호, 제WO 04/041863호, 제WO 04/041865호, 제WO 04/041867호 및 제WO 08/020079호)뿐만 아니라, 표준 편람, 예컨대 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Mack Publishing Company, USA (1990)], [Remington, the Science and Practice of Pharmacy, 21th Edition, Lippincott Williams and Wilkins (2005)]; 또는 문헌[Handbook of Therapeutic Antibodies (S. Dubel, Ed.), Wiley, Weinheim, 2007](예를 들어 제252면 내지 제255면 참조)을 참조한다.
예를 들어, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 종래의 항체 및 항체 단편(ScFv 및 디아바디 포함) 및 다른 약학적으로 활성인 단백질에 대해 자체 공지된 임의의 적당한 방식으로 제형화되고 투여될 수 있다. 그러한 제형 및 제조 방법은 숙련가에게 명백할 것이고, 예를 들어 비경구 투여(예를 들어 정맥내, 복막내, 피하, 근육내, 내강내(intraluminal), 동맥내 또는 척추관내(intrathecal) 투여) 또는 국소(즉, 경피 또는 피내) 투여에 적당한 제제가 포함된다.
비경구 투여용 제제는 예를 들어 주입 또는 주사에 적당한 멸균 용액, 현탁액, 분산액 또는 유화액일 수 있다. 그러한 제제에 적당한 담체 또는 희석제로는, 예를 들어 비제한적으로 제WO 08/020079호의 제143면에 언급된 것들이 포함된다. 통상적으로, 수용액 또는 현탁액이 바람직할 것이다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 전달 유전자 치료 방법을 사용하여 투여될 수도 있다. 예를 들어, 미국 특허 제5,399,346호를 참조하고, 이는 전체가 참고로 인용되어 있다. 전달 유전자 치료 방법을 사용하여, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드를 코딩하는 유전자로 형질감염된 1차 세포는 추가로 표적 특이적 기관, 조직, 이식편, 종양 또는 세포에 조직 특이적인 프로모터로 형질감염되고, 추가로 아세포적으로 편재화된 발현을 위한 신호 및 안정화 서열로 형질감염될 수 있다.
따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는, 예를 들어, 경구적으로, 약학적으로 허용가능한 비히클(vehicle), 예컨대 불활성 희석제 또는 동화가능한 식용 담체와 함께 전신적으로 투여될 수 있다. 이들은 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐내로 봉입되거나, 정제로 압축되거나, 환자 식이 식품에 직접 도입될 수 있다. 경구 치료적 투여를 위해, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 하나 이상의 부형제와 조합되고, 섭취가능한 정제, 구강 정제, 트로키제(troche), 캡슐, 엘릭시르(elixir), 현탁제, 시럽, 웨이퍼(wafer) 등의 형태로 사용된다. 그러한 조성물 및 제제는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드를 0.1% 이상 함유해야 한다. 조성물 및 제제중 이들의 백분율은, 물론 다양할 수 있고, 편리하게는 소정의 단위 투약 형태의 약 2 내지 약 60중량% 이다. 그러한 치료학적으로 유용한 조성물에서 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드의 양은 효과적인 투여량 수준이 수득될 수 있도록 한다.
정제, 트로키제, 환제, 캡슐 등은 또한 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제 또는 풍미제, 예컨대 제WO 08/020079호의 제143-144면에 언급된 것들을 함유할 수 있다. 단위 투약 형태가 캡슐인 경우, 이는 상기 유형의 물질에 더하여, 액체 담체, 예컨대 식물성 오일 또는 폴리에틸렌 글리콜을 함유할 수 있다. 다양한 다른 물질은 코팅제로서 또는 그렇지 않으면 고체 단위 투약 형태의 물리적 형태를 변형시키기 위해 존재할 수 있다. 예를 들어, 정제, 환제 또는 캡슐은 젤라틴, 밀납, 셸락(shellac) 또는 당류 등으로 코팅될 수 있다. 시럽 또는 엘릭시르는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드, 감미제로서의 자당 또는 과당, 보존제, 염료, 메틸 및 프로필파라벤, 및 체리 또는 오렌지향과 같은 풍미제를 함유할 수 있다. 물론, 임의의 단위 투약 형태를 제조하는 데 사용되는 임의의 물질은 사용되는 양으로 약학적으로 허용가능하고 실질적으로 무독성이어야 한다. 또한, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 서방성 제제 및 장치 내로 도입될 수 있다.
경구 투여를 위한 제제 및 제형에는 또한 본 발명의 구조물이 위 환경에 저항하여 소장으로 통과되도록 허용하는 장성(enteric) 코팅물이 제공될 수 있다. 보다 일반적으로, 경구 투여용 제제 및 제형은 위장관의 임의의 원하는 부분으로 전달되기 위해 적당하게 제형화될 수 있다. 또한 적당한 좌제는 위장관 내로 전달되기 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 또한 제WO 08/020079호의 제144면 및 제145면에 추가 기재된 바와 같이, 주입 또는 주사에 의해 정맥내 또는 복막내로 투여될 수 있다.
국소 투여를 위해, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 순수한 형태로, 즉 이들이 액체인 경우에 적용될 수 있다. 그러나, 일반적으로 이들을 제WO 08/020079호의 제144 및 145면에 추가 기재된 바와 같이, 피부에 조성물 또는 제형으로서 고체 또는 액체일 수 있는 피부학적으로 허용가능한 담체와 함께 투여하는 것이 바람직할 것이다.
일반적으로, 액체 조성물, 예컨대 로션에서 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드의 농도는 약 0.1 내지 25 중량%, 바람직하게는 약 0.5 내지 10 중량%이다. 반고체 또는 고체 조성물, 예컨대 겔 또는 분말에서의 농도는 약 0.1 내지 5 중량%, 바람직하게는 약 0.5 내지 2.5 중량%이다.
한 바람직한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함하는 조성물은 폐 조직에 투여된다. 본 발명과 관련하여, "폐 조직"은 본 발명의 목적을 위해 폐 조직 또는 폐와 균등한 것이다. 폐는 2개의 구분된 영역, 즉 전도 영역 및 호흡 영역(이 안에는 기도 및 혈관 구획이 있음)을 포함한다(예를 들어 문헌["Pulmonary Drug Delivery", Edited by Karoiine Bechtoid-Peters and Henrik Luessen, 2007, ISBN 978-3-87193-322-6 pages 16-28] 참조).
폐 전달을 위해, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드는 순수 형태로 적용될 수 있는데, 즉 이들이 액체 또는 건조 분말일 때 적용될 수 있다. 그러나, 이들을 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드 및 폐 전달에 적당한 담체를 포함하는 조성물 또는 제형으로서 조직에 투여하는 것이 바람직할 것이다. 따라서 본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드 및 폐 전달에 적당한 담체를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 폐 전달에 적당한 담체는 당업계에 공지되어 있다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드는 또한 폐 전달에 바람직한 입자 크기 및 분포를 가지는 순수 약물의 마이크로입자 또는 나노입자로서 투여될 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드의 폐 전달에 적당하고 이들을 포함하는 조성물의 사용에 적당한 약학적 장치에 관한 것이다. 이 장치는 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 포함하는 액체(예를 들어 고체 입자 또는 소적의 현탁액)를 위한 흡입기일 수 있다. 바람직하게, 이 장치는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 포함하는 에어로졸일 수 있다. 장치는 또한 건조 분말 형태의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 포함하는 건조 분말 흡입기일 수 있다.
한 바람직한 방법에서, 폐 조직으로의 투여는 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 조성물을 에어로졸 클라우드로 흡입시킴으로써 수행된다. 본 발명에 따라서, 에어로졸 클라우드의 흡입은 흡입기 장치에 의해 수행될 수 있다. 장치는 올바른 용량의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 함유하는, 포유동물 흡입 사이클의 적당한 순간에 원하는 입자 크기(분포)의 에어로졸 클라우드 내, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드 (및/또는 이를 포함하는 조성물)를 포함하는 제형으로부터 생성되게 된다(문헌["Pulmonary drug delivery", Bechtold-Peters and Luessen, eds., ISBN 978-3-87193-322-6, page 125]).
본 발명과 관련하여, "에어로졸"은, 본 발명의 목적을 위해 입자 및/또는 소적이 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 포함하는, 기체 내 미세 고체 입자 또는 액체 소적(또는 이들의 조합)의 현탁액을 나타낸다.
장치는 제형으로부터 올바른 용량의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 함유하는, 포유동물 흡입 사이클의 적당한 순간에 원하는 입자 크기(분포)의 에어로졸 클라우드를 생성시켜야 한다. 하기 4가지 요건(제형, 입자 크기, 시간 및 용량)이 고려되어야 한다(상기 문헌["Pulmonary Drug Delivery", Bechtold-Peters and Luessen, eds., pages 125 and 126]):
- 장치에 사용되는 제형은 네뷸라이저에 사용되는 수용액 또는 현탁액에서부터 계량 용량 흡입기 또는 건조 분말 흡입기를 위해 더욱 특별히 공학제작된 분말 혼합물에 사용되는 추진제-기재의 용액 또는 현탁액에 이르는 다양한 것일 수 있다. 이 모든 상이한 제형들은 장치 및 제형의 상호 의존성에 역점을 둔, 에어로졸 생성을 위한 상이한 원칙들을 요하고;
- 에어로졸 입자의 침착 부위가 (공기역학) 크기 및 속도에 의존하기 때문에, 에어로졸 클라우드의 원하는 입자 크기는 투여의 치료 목적과 관련된, 폐 내 침착의 원하는 부위에 따라 다양하며;
- 에어로졸 클라우드는 포유동물에 의해 생성되는 흡입 사이클 동안에 상이한 순간들에 방출되도록 조정될 수 있기 때문에, (폐의 주변 부분에 침착될) 본 발명의 제제를 위해, 에어로졸이 흡입 사이클의 개시점에 방출되는 것이 바람직하고;
- 용량은 상당히 변화할 수 있고, 예를 들어 예를 들어 인간의 경우에는, 수 마이크로그램 내재 수백 마이크로그램, 또는 심지어는 밀리그램, 예를 들어 대략 약 10 내지 100 밀리그램에까지 걸쳐 다양할 수 있다.
각종 흡입 시스템이 예를 들어 상기 검토 문헌["Pulmonary Drug Delivery", Bechtold-Peters and Luessen, eds.]의 제129면 내지 제148면에 기재되어 있고, 이에는 네뷸라이저, 용량 계량 액체 흡입기 및 건조 분말 흡입기가 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 조절 흡입 묘책에 대해 최적화되고 개별화된 호흡 패턴을 고려한 장치도 사용될 수 있다(상기 문헌["Pulmonary Drug Delivery", Bechtold-Peters and Luessen, eds.]의 제157면의 아키타(AKITA)
기술 참조).
그러나, 장치가 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드의 폐 전달에 중요할 뿐만 아니라, 올바른 제형 역시 효과적 전달을 달성하는 데 결정적이다. 이는 원칙적으로 하기 접근법을 이용함으로써 달성될 수 있다:
- 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 포함하는 수용액 또는 현탁액(예를 들어 비강 드롭제)의 비강 내로의 투여;
- 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드를 포함하는 수용액 또는 현탁액의 네뷸라이제이션;
- 액화 추진제를 이용한 아토마이제이션; 및
- 건조 분말의 분산.
그러므로, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드의 제형이 채택되어 선택된 흡입 장치에 맞게 조정되어야 한다. 적절한 제형, 즉 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및/또는 폴리펩티드에 부가되는 부형제가 예를 들어 상기 문헌["Pulmonary Drug Delivery", Bechtold-Peters and Luessen, eds.]의 제IV장에 기재되어 있다. 이와 관련하여, 미국 가특허출원 제61/303,447호(발명의 명칭: "Methods and Compositions for the preparation of aerosols", Ablynx N.V., 2010년 2월 12일 출원)도 또한 참조한다.
치료에 사용하기 위해 필요한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드의 양은 선택된 특정 아미노산 서열, 나노바디 또는 폴리펩티드,뿐만 아니라 투여 경로, 치료될 증상의 성질, 및 환자의 연령 및 증상에 따라 달라질 것이고, 궁극적으로 담당 의사 또는 임상학자의 재량일 것이다. 또한, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물, 구조물 및 폴리펩티드의 투여량은 표적 세포, 종양, 조직, 이식편 또는 기관에 따라 다양할 것이다.
원하는 용량은 편리하게 단일 용량으로 제시되거나 적절한 간격으로, 예를 들어 1일 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 하위 용량으로 투여되는 분할된 용량으로 존재할 수 있다. 하위 용량은 그 자체로, 예를 들어, 다수의 별개의 대충 이격된 투여로 추가로 분할될 수 있고; 예컨대 취입기로부터의 다중 흡입 또는 다수 점적으로 눈에의 적용을 들 수 있다.
투여 섭생은 장기간의 매일 치료를 포함할 수 있다. "장기간"은 적어도 2주, 바람직하게, 수주, 수개월, 또는 수년의 기간을 의미한다. 그러한 투여 범위에서의 필수적인 변형은 당분야의 숙련가에 의해 본원의 교시내용에 제공된 일상적 실험을 사용하여 결정될 수 있다. 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (Martin, E. W., ed. 4), Mack Publishing Co., Easton, PA]을 참조한다. 투여량은 또한 임의의 복합적인 경우에 개별 담당 의사에 의해 조정될 수 있다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물, 핵산, 숙주 세포, 산물 및 조성물의 용도 및 사용뿐만 아니라, hRSV에 의해 유발된 기도 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다. 바람직하나 비제한적인 몇몇 용도 및 사용은 추가의 기재내용으로부터 명백해질 것이다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 hRSV의 단백질 F와 표적 숙주 세포 및/또는 그것의 막과의 상호작용의 차단, hRSV(상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체)의 중화, (상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체의) hRSV 감염도의 조절, 억제 및/또는 방지, (상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체의) 표적 숙주 세포(의 세포막)과의 융합의 조절, 억제 및/또는 방지, (상이한 hRSV 균주 및/또는 도피 돌연변이체의) 표적 숙주 세포의 hRSV 침투의 조절, 억제 및/또는 방지를 위해 사용될 수 있다.
한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 자체 공지된 임의의 적당한 방식으로, 예를 들어 본원에 기재된 검정 중 하나를 이용하여 측정할 때, hRSV의 단백질 F의 표적 숙주 세포 및/또는 그것의 막과의 상호작용을, 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 존재하지 않는 조건 하에서의 hRSV의 단백질 F의 표적 숙주 세포 및/또는 그것의 막의 상호 작용에 비해, 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 차단할 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 자체 공지된 임의의 적당한 방식으로, 예를 들어 본원에 기재된 검정 중 하나를 이용하여 측정할 때, hRSV 감염도를, 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 존재하지 않는 조건 하에서의 hRSV의 감염도에 비해, 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 차단할 수 있다.
본 발명과 관련하여, "조절하는 것" 또는 "조절하다"란 일반적으로, 적당한 시험관내, 세포내 또는 생체내 검정(예컨대 본원에 언급된 것들)을 이용하여 측정할 때, 바이러스 감염도, 융합 및/또는 바이러스 침투의 감소, 방지 또는 억제, 및/또는 hRSV의 단백질 F에 의해 매개되는 생물학적 경로를 감소, 방지 또는 억제함을 의미한다. 특히, "조절하는 것" 또는 "조절하다"란 적당한 시험관내, 세포내 또는 생체내 검정(예컨대 본원에 언급된 것들)을 이용하여 측정할 때, 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 존재하지 않는 조건 하에서의 정상(즉, 자연 발생) 바이러스 감염도, 융합 및/또는 바이러스 침투 및/또는 hRSV의 단백질 F에 의해 매개되는 정상(즉, 자연 발생) 생물학적 경로에 비해, 바이러스 감염도, 융합 및/또는 바이러스 침투의 감소, 방지 또는 억제, 및/또는 hRSV의 단백질 F에 의해 매개되는 생물학적 경로를 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 감소, 방지 또는 억제함을 의미한다.
한 양태에서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 자체 공지된 임의의 적당한 방식으로, 예를 들어 본원에 기재된 검정 중 하나를 이용하여 측정할 때, hRSV의 감염도를, 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
또는 폴리펩티드가 존재하지 않는 조건 하에서의 hRSV의 감염도에 비해, 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 조절, 억제 및/또는 방지할 수 있다.
본원에 사용되는 용어 "바이러스 침투"는 표적 숙주 세포 및/또는 바이러스 융합체의 표적 숙주 세포로의 비리온 부착을 달성하는 데 필요한 임의의 바이러스-매개 생물학적 경로를 포함한다. 적당한 시험관내, 세포내 또는 생체내 검정(예컨대 본원에 언급된 것들)을 이용하여 측정할 때, 표적 숙주 세포에의 비리온 부착 및/또는 표적 숙주 세포와의 바이러스 융합을 달성하는 데 필요한 임의의 바이러스-매개 생물학적 경로일 수 있는 바이러스 침투가 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 및/또는 화합물의 특이적 결합에 의해 조절 및/또는 감소 및/또는 방지 및/또는 억제될 수 있음이 본 발명에 속한다. 특히, 적당한 시험관내, 세포내 또는 생체내 검정(예컨대 본원에 언급된 것들)을 이용하여 측정할 때, hRSV의 단백질 F에 의해 매개될 수 있는 바이러스 침투가 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 및/또는 화합물이 존재하지 않는 조건 하에서의 hRSV의 단백질 F에 의해 매개될 수 있는 정상(즉, 자연 발생) 바이러스 침투(본원에 정의된 바와 같음)에 비해, 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 조절, 감소, 방지 또는 억제될 수 있다. 따라서, 적당한 시험관내, 세포내 또는 생체내 검정(예컨대 본원에 언급된 것들)을 이용하여 측정할 때, 바이러스 부착 및/또는 바이러스 융합이 hRSV의 단백질 F에 의해 매개될 수 있는 바이러스 침투가 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 및/또는 화합물이 존재하지 않는 조건 하에서의 hRSV의 단백질 F에 의해 매개될 수 있는 정상(즉, 자연 발생) 바이러스 부착 및/또는 바이러스 융합에 비해, 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 조절 및/또는 감소 및/또는 방지 및/또는 억제될 수 있음도 본 발명에 속한다.
이와 관련하여, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은, 본원에 기재된 검정들 중 하나를 이용하여, 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 및/또는 화합물이 존재하지 않는 조건 하에서의 hRSV의 표적 숙주 세포(의 세포막)와의 융합에 비해, 표적 숙주 세포 내 hRSV 침투를 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 조절, 억제 및/또는 방지할 수 있다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 또한 본원에 기재된 검정들 중 하나를 이용하여, 동일한 조건, 다만 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드 및/또는 화합물이 존재하지 않는 조건 하에서의 hRSV의 표적 숙주 세포(의 세포막)와의 융합에 비해, hRSV의 표적 숙주 세포(의 세포막)과의 융합을 적어도 1%, 바람직하게는 적어도 5%, 예컨대 적어도 10% 또는 적어도 25%, 예를 들어 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 또는 90% 이상 조절, 억제 및/또는 방지할 수 있다.
본 발명의 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 일가 아미노산 서열 또는 나노바디
에 비해, hRSV의 상이한 유전자형, 하위형, 바이러스 도피 돌연변이체 및/또는 균주에 대한 향상된 친화도 및/또는 향상된 교차반응성을 나타냈다. 한 양태에서, 본 발명의 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 RSV의 다른 균주(예컨대 예를 들어 롱, A-2 및/또는 B-1)에 결합할 수 있다. 또 다른 양태에서, 본 발명의 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드는 hRSV의 상이한 도피 돌연변이체(예컨대 예를 들어 문헌[Lopez et al 1998, J Virol 72 6922-6928]에 기재됨) 및/또는 항원 부위 II, 항원 부위 IV-VI, 또는 양 항원 부위 모두에 대해 특이적인 도피 돌연변이체에 결합할 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 hRSV의 상이한 균주의 결합 및/또는 중화를 위한, 본 발명의 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드, 및/또는 이들을 포함하는 약학적 조성물의 용도에 관한 것이다. 한 바람직한 양태에서, 이가 인간화 및/또는 서열 최적화 NC41 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157)로부터 선택되는 2개의 나노바디
를 포함하는 이가 폴리펩티드)가 사용된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 삼가 인간화 및/또는 서열 최적화 NC41 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157로부터 선택되는 3개의 나노바디
를 포함하는 삼가 폴리펩티드)이 사용된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 서열 번호 77-79, 142-145 및 158-165 중 하나가 사용된다.
본 발명은 또한 hRSV의 하나 이상의 도피 돌연변이체의 결합 및/또는 중화를 위한, 본 발명의 다가(예컨대 이가 또는 삼가) 폴리펩티드, 및/또는 이들을 포함하는 약학적 조성물의 용도에 관한 것이다. 한 바람직한 양태에서, 이가 인간화 NC41 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157로부터 선택되는 2개의 나노바디
를 포함하는 이가 폴리펩티드)가 사용된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 삼가 인간화 NC41 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157로부터 선택되는 3개의 나노바디
를 포함하는 삼가 폴리펩티드)가 사용된다. 또 다른 바람직한 양태에서, 서열 번호 77-79, 142-145 및 158-165 중 하나가 사용된다.
본 발명은 또한 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 적어도 하나의 바이러스 질환의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다.
이와 같이, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 및 조성물은 hRSV 감염과 관련된 질환 및 장애의 예방 및/또는 치료를 위해 사용될 수 있다. hRSV 감염과 관련된 그러한 질환 및 장애의 예가 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이고, 이에는 예를 들어 하기 질환 및 장애가 포함된다: 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및 천식.
따라서, 본 발명은 또한 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 적어도 하나의 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물, 또는 본 발명의 구조물 또는 일가 구조물, 또는 본 발명의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염(폐 내 소기도의 염증), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및/또는 hRSV에 의해 유발되는 천식의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및/또는 천식의 예방 및/또는 치료를 위한 약학적 조성물의 제조; 및/또는 본원에 기재된 방법들 중 하나 이상에 사용하기 위한, 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 또는 본 발명의 일가 구조물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및/또는 천식의 예방 및/또는 치료를 위한 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 또는 본 발명의 일가 구조물에 관한 것이다.
본 발명과 관련하여, 용어 "예방 및/또는 치료"는 질환을 예방 및/또는 치료함을 포함할 뿐만 아니라, 일반적으로 질환의 개시를 방지하고, 질환의 진행을 둔화시키거나 역전시키고, 질환과 연관된 하나 이상의 증후의 개시를 방지하거나 둔화시키고, 질환과 연관된 하나 이상의 증후를 감소 및/또는 경감시키고, 질환 및/또는 이와 연관된 임의의 증후의 위중성 및/또는 기간을 감소시키고/시키거나, 질환 및/또는 이와 연관된 임의의 증후의 위중성의 추가의 증가를 방지하고, 질환에 의해 야기되는 임의의 생리학적 손상을 방지, 감소 또는 역전시킴, 및 치료되는 환자에게 유리한 임의의 약리학적 작용을 포함한다.
치료 대상은 임의의 온혈동물일 수 있으나, 특히 포유동물이고, 보다 특히 인간이다. 숙련가에게 명백한 바와 같이, 치료되는 대상은 특히 본원에 언급된 질환 및 장애를 앓거나 이에 걸릴 위험이 있는 사람일 것이다.
보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 본 발명의 다가(예를 들어 삼가 또는 이가) 폴리펩티드 또는 화합물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 이가 인간화 및/또는 서열 최적화 NC41 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157로부터 선택되는 2개의 나노바디
를 포함하는 이가 폴리펩티드)를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 삼가 본 발명의 화합물 또는 폴리펩티드를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 삼가 인간화 NCAl 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157로부터 선택되는 3개의 나노바디
를 포함하는 삼가 폴리펩티드)를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 서열 번호 77-79, 142-145 및 158-165 중 하나를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다.
보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에 약학적으로 활성인 양의 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 본원에 언급된 질환 및 장애를 앓거나 이에 걸릴 위험이 있는 대상에게 약학적으로 활성인 양의 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 면역요법, 특히 수동적 면역요법을 위한 방법에 관한 것이다.
상기 방법들에서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함한 조성물은, 사용된 특정 약학적 제형 또는 조성물에 따라, 적당한 방식으로 투여될 수 있다. 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
및/또는 폴리펩티드 및/또는 이를 포함한 조성물은, 사용된 특정 약학적 제형 또는 조성물에 따라, 예를 들어 경구적으로, 복막내로(예를 들어 정맥내로, 피하로, 근육내로, 또는 위장관을 우회하는 임의의 다른 투여 경로를 통해), 비강내로, 경피적으로, 국소적으로, 좌제의 의해, 흡입에 의해 투여될 수 있다. 임상학자는 적당한 투여 경로 및 그러한 투여에 사용되는 적당한 약학적 제형 또는 조성물을, 예방되거나 치료되는 질환 또는 장애, 및 임상학자에게 공지된 다른 인자에 따라 선택할 수 있을 것이다.
따라서, 일반적으로 본 발명에 따른 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 조성물은 임의의 적당한 방식으로 투여될 수 있고; 예를 들어 본 발명에 따른 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 조성물은 비강내 및/또는 흡입에 의해 및/또는 임의의 다른 적당한 형태의 폐 전달에 의해 투여될 수 있으나, 이에 제한되지 않고; 본 발명의 나노바디
, 아미노산 서열, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드의 폐 전달 및/또는 비강내 전달 및/또는 흡입에 의한 전달 방법이 숙련가에게 공지되어 있고, 예를 들어 문헌 표준 편람 문헌["Drug Delivery: Principles and Applications" (2005) by Binghe Wang, Teruna Stahaan and Richard Soltero (Eds. Wiley interscience (John WIley & Sons))]; 국제특허출원 제WO 08/049897호(Ablynx N.V. 발명의 명칭: "Intranasal delivery of polypeptides and proteins"); 문헌["Pharmacology PreTest™ Self-Assessment and Review" (11th Edition) by Rosenfeid G. C, Loose-Mitchell D.S.]; 및 문헌["Pharmacology" (3rd Edition) by Lippincott Williams & Wilkins, New York]; 문헌[Shlafer M. McGraw-Hill Medical Publishing Division, New York]; 문헌[Yang K.Y., Graff LR., Caughey A.B. Blueprints Pharmacology, Blackweil Publishing]에 기재되어 있다.
따라서, 본 발명은 또한 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함하는 조성물을 폐 조직에 투여하는 단계를 포함하는, 유효량의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함하는 조성물의 투여 방법에 관한 것이다. 이러한 방법에서, 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함하는 조성물은 폐 전달을 위해 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해, 예컨대 예를 들어 흡입기 또는 비강내 전달 장치 또는 에어로졸에 의해 전달될 수 있다.
본 발명의 바람직한 한 양태에서, 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드는 폐 조직 내 존재하는 바이러스를 결합 및/또는 중화할 것이다. 바람직하게, 그러한 폐 전달 방법에서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드의 적어도 5%, 바람직하게는 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 더욱 바람직하게는 적어도 50%, 60%, 70%, 및 더욱 더 바람직하게는 적어도 80% 또는 그 이상이 적어도 24시간, 바람직하게는 적어도 48시간 더욱 바람직하게는 적어도 72시간 동안 폐 조직 내에서 안정하다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드가 폐 조직 내 장기 안정성을 가진다는 것이 놀랍게도 밝혀졌다. 예를 들어, hRSV에 대해 유도된 나노바디
가 적어도 48시간 동안 폐 내 작용성이 유지된다는 것이 밝혀졌다(PCT/EP2009/056975(발명의 명칭: Amino acid sequences directed against envelope proteins of a virus and polypeptides comprising the same for the treatment of viral diseases, 2009년 6월 5일 Ablynx N.V. 출원) 참조). 따라서, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드의 평가된 장기 안정성이 취해질 때, 1일 1회, 매2, 3, 4, 5, 6일마다 1회 또는 매주 1회의 처리 간격을 가지는 본 발명의 실시양태가 가증한 것으로 사료된다.
따라서, 본 발명은 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드를 대상에게 폐 투여하는 단계를 포함하는, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드를 불활성화없이 대상의 폐 조직에 전달하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 약학적으로 활성인 양의 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에 투여하는 단계를 포함하는 hRSV 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다.
보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에 약학적으로 활성인 양의 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 나노바디
, 본 발명의 폴리펩티드, 본 발명의 화합물 또는 구조물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및/또는 천식의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다.
보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에 약학적으로 활성인 양의 본 발명의 다가(예를 들어 삼가, 이가) 폴리펩티드 또는 화합물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에, 약학적으로 활성인 양의 이가 본 발명의 화합물 또는 폴리펩티드를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에, 약학적으로 활성인 양의 이가 인간화 NC41 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157로부터 선택되는 2개의 나노바디
를 포함하는 이가 폴리펩티드) 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에, 약학적으로 활성인 양의 삼가 본 발명의 화합물 또는 폴리펩티드를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에, 약학적으로 활성인 양의 삼가 인간화 NC41 나노바디
(예컨대 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157를 포함하는 3개의 나노바디
를 포함하는 삼가 폴리펩티드)를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다. 보다 특히, 본 발명은 해당 치료가 필요한 대상의 폐 조직에, 약학적으로 활성인 양의 서열 번호 77-79, 142-145 및 158-165 중 하나를 투여하는 단계를 포함하는, hRSV에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것일 수 있다.
또한 예를 들어, 단 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명에 따른 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물, 및 폴리펩티드 및 이를 포함하는 조성물은 근육내 전달 및/또는 뇌로의 임의의 적당한 전달 형태, 예컨대 상기 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 화합물 또는 구조물 및 이를 포함하는 조성물이 혈관-뇌 장벽을 가로질러 수송되도록 하는 임의의 적당한 전달 형태로 투여될 수 있다. 이러한 본 발명의 나노바디
, 아미노산 서열 및/또는 폴리펩티드의 근육내 전달 및/또는 뇌로의 전달을 위한 임의의 적당한 전달 형태의 방법이 숙련가에게 공지되어 있고, 예를 들어 표준 편람 문헌["Drug Delivery: Principles and Applications" (2005) by Binghe Wang, Teams Siahaan and Richard Soltero (Eds. Wiley interscience (John Wiley & Sons))]; 문헌["Pharmacology PreTest™ Self-Assessment and Review" (11th Edition) by Rosenfeld G. C, Loose-Mitcheil D.S.]; 문헌["Pharmacology" (3rd Edition) by Lippincott Williams & Wilkins, New York]; 문헌[Shlafer M. McGraw-Hill Medical Publishing Division, New York]; 문헌[Yang K.Y., Graff L. R., Caughey A. B. Blueprints Pharmacology, Blackwell Publishing]에 기재되어 있다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함한 조성물은 예방 또는 치료되는 질환 또는 장애를 예방 및/또는 치료하기에 적당한 치료 섭생에 따라 투여된다. 임상학자는 일반적으로, 예컨대 예방 또는 치료되는 질환 또는 장애, 치료되는 질환의 위중성 및/또는 이의 증후의 위중성, 사용되는 본 발명의 특정 아미노산 서열, 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 또는 폴리펩티드, 특정 투여 경로 및 사용되는 약학적 제형 또는 조성물, 환자의 연령, 성별, 체중, 식이, 일반적 조건과 같은 요인, 및 임상학자에게 공지된 유사한 요인에 따라서, 적당한 치료 섭생을 결정할 수 있을 것이다.
일반적으로, 치료 섭생은 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드, 또는 이를 포함한 하나 이상의 조성물을 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 양 또는 용량으로 투여함을 포함할 것이다. 투여하기 위한 특정 양(들) 또는 용량은 임상학자에 의해, 이 역시 상기 인용된 요인들에 기초하여 결정될 수 있다.
일반적으로, 본원에 언급된 질환 및 장애를 예방 및/또는 치료하기 위해, 치료되는 특정 질환 또는 장애, 사용되는 본 발명의 특정 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및 폴리펩티드의 효능, 특정 투여 경로, 및 사용되는 특정 제형 또는 조성물에 따라, 일반적으로 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및 폴리펩티드는, 1 그램 내지 1 마이크로그램/체중kg/일, 바람직하게는 0.1 그램 내지 10 마이크로그램/체중kg/일, 가장 바람직하게는 0.01 그램 내지 100 마이크로그램/kg 체중/일, 예컨대 약 0.1, 0.5, 1, 2, 5 또는 10 밀리그램/체중kg/일의 양으로, 연속적으로(예를 들어 주입에 의해), 단일 1일 용량으로서 또는 1일 동안 수회 분할된 용량으로서, 투여될 것이다. 반감기 연장 부분구조를 함유하는, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및 폴리펩티드는 1월 1회 또는 2회, 1 밀리그램 내지 100 밀리그램/체중 kg, 바람직하게는 1 밀리그램 내지 50 밀리그램/체중 kg, 예컨대 약 10, 15, 20 또는 30 밀리그램/체중 kg의 양으로 투여될 수 있다. 임상학자는 일반적으로 본원에 언급된 요인들에 따라 적당한 일일 용량을 결정할 수 있을 것이다. 또한, 특정한 경우에, 임상학자는 예를 들어 상기 인용된 요인들 및 그의 숙련된 판단에 기초하여 그러한 양으로부터 벗어나서 선택할 수 있음이 명백할 것이다. 일반적으로, 투여되는 양에 대한 몇몇 지침은, 본질적으로 동일한 경로를 통해 투여되는 동일한 표적에 대한 필적할만한 종래의 항체 또는 항체 단편에 대해 통상적으로 투여되는 양으로부터, 그러나 친화도/결합력, 효능, 생물분포, 반감기 및 숙련가에게 공지된 유사 인자들을 고려하여 수득될 수 있다.
아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드, 및/또는 이를 포함하는 조성물이 폐 조직에 투여될 때, 치료 섭생은 1일 1회 또는 2회, 바람직하게는 1일 1회 또는 매2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일 1회로 투여될 수 있다.
통상적으로, 상기 방법에서, 본 발명의 단일 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물, 또는 폴리펩티드가 사용될 것이다. 그러나, 본 발명의 2개 이상의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 및/또는 폴리펩티드를 조합하여 사용하는 것은 본 발명의 범주 내에 속한다.
본 발명의 나노바디
, 아미노산 서열, 화합물 또는 구조물 및 폴리펩티드는 또한 상승 효과를 유도하거나 유도하지 않는 1개 이상의 추가의 약학적으로 활성인 화합물 또는 화학소와, 즉 조합 치료 섭생으로서 함께 사용될 수 있다. 이 역시, 임상학자는 상기 인용된 요인들 및 그의 숙련된 판단에 기초하여, 추가의 화합물 또는 화학소뿐만 아니라 적당한 조합 치료 섭생을 선택할 수 있을 것이다.
특히, 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 또는 폴리펩티드는 본원에 인용된 질환 및 장애를 예방 및/또는 치료하거나 이를 위해 사용될 수 있는 다른 약학적으로 활성인 화합물 또는 화학소와 함께 사용될 수 있고, 그 결과로서 상승 효과가 수득되거나 수득되지 않을 수 있다. 그러한 화합물 및 화학소의 예뿐만 아니라, 이를 투여하기 위한 경로, 방법 및 약학적 제형 또는 조성물은 임상학자에게 명백할 것이다.
2개 이상의 물질 또는 화학소가 조합 치료 섭생의 일부로서 사용되어야 할 경우, 이들은 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로를 통해, 본질적으로 동일하거나 상이한 시간에(예를 들어 본질적으로 동시에, 연속적으로, 또는 교대 섭생에 따라) 투여될 수 있다. 그러한 물질 또는 화학소가 동일한 투여 경로를 통해 동시에 투여되는 경우, 이들은, 숙련가에게 명백한 바와 같이, 상이한 약학적 제형 또는 조성물로서, 또는 조합된 약학적 제형 또는 조성물의 일부로서 투여될 수 있다.
또한, 2개 이상의 활성 물질 또는 화학소가 조합 치료 섭생의 일부로서 사용될 경우, 각각의 물질 또는 화학소는, 그 화합물 또는 화학소가 그 자체로 사용되는 경우와 동일한 양으로 동일한 섭생에 따라 투여될 수 있고, 그러한 조합된 사용은 상승 효과를 유도하거나 유도하지 않을 수 있다. 그러나, 2개 이상의 활성 물질 또는 화학소의 조합된 사용이 상승 작용을 유도할 경우, 또한 투여되는 하나 이상 또는 모든 물질 또는 화학소의 양을 감소시키지만, 여전히 원하는 치료 작용을 달성할 수 있다. 이는 예를 들어 이들이 원하는 약학적 또는 치료학적 효과를 여전히 수득하면서 이들의 일반적 양으로 사용될 경우 하나 이상의 물질 또는 화학소의 사용과 연관된 임의의 원치 않는 부작용을 방지, 제한 또는 감소하기 위해 유용할 것이다.
본 발명에 따라 사용되는 치료 섭생의 유효성은, 임상학자에게 명백한 바와 같이, 관여된 질환 또는 장애에 대해 자체 공지된 임의의 방식으로 결정되고/되거나 수행될 수 있다. 임상학자는, 적절한 경우 사항별에 근거(case-by-case basis)하여, 특별한 치료 섭생을 변경 또는 변화시켜, 원하는 치료 효과를 달성하고, 원치 않는 부작용을 방지, 제한 또는 감소시키고/시키거나, 한편으로는 원하는 치료 효과를 달성하고 다른 한편으로는 원치 않는 부작용을 방지, 제한 또는 감소시키는 적절한 균형을 달성할 수 있을 것이다.
일반적으로, 치료 섭생은 원하는 치료 효과가 달성될 때까지, 및/또는 원하는 치료 효과가 유지되는 한 수행될 것이다. 이 역시, 이는 임상학자에 의해 결정될 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 적어도 하나의 바이러스 질환 또는 장애를 예방 및/또는 치료, 및/또는 본원에 언급된 방법들 중 하나 이상에 사용하기 위한 약학적 조성물의 제조에 있어서의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 또는 폴리펩티드의 용도에 관한 것이다.
치료 대상은 온혈 동물일 수 있지만, 특히 포유동물이고, 보다 특히 인간이다. 숙련가에게 명백한 바와 같이, 치료되는 대상은 특히 본원에 언급된 질환 및 장애를 앓거나 이에 걸릴 위험이 있는 사람일 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 또는 폴리펩티드를 투여함으로써 예방 및/또는 치료될 수 있는 적어도 하나의 질환 또는 장애의 예방 및/또는 치료용 약학적 조성물의 제조에 있어서의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 또는 폴리펩티드의 용도에 관한 것이다.
보다 특히, 본 발명은 바이러스 질환의 예방 및/또는 치료, 특히 본원에 열거된 하나 질환 및 장애 중 하나 이상의 예방 및/또는 치료를 위한 약학적 조성물의 제조에 있어서의 본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 또는 폴리펩티드의 용도에 관한 것이다.
이 역시, 상기 약학적 조성물에서, 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열, 나노바디
, 화합물 또는 구조물 또는 폴리펩티드는 또한 본원에 언급된 것들과 같은 하나 이상의 다른 활성 화학소와 적당히 조합될 수 있다.
본 발명의 아미노산 서열, 나노바디
, 폴리펩티드, 핵산, 유전적 구조물, 및 숙주 및 숙주 세포의 추가의 용도는 본원의 개시내용에 기초하여 숙련가에게 명백할 것이다. 예를 들어, 비제한적으로, 본 발명의 아미노산 서열은 적당한 담체 또는 고체 지지체에 연결되어, 바이러스의 외피 단백질을, 이를 포함하는 조성물 및 제제로부터 정제하기 위해 자체 공지된 방식으로 사용될 수 있는 배지를 제공할 수 있다. 적당한 검출가능한 표지를 포함한 본 발명의 아미노산 서열의 유도체는 또한 마커로서 사용되어, 조성물 또는 제제 내의 바이러스의 외피 단백질의 존재를 (정성적 또는 정량적으로) 결정하거나, 세포 또는 조직의 표면상에 바이러스의 외피 단백질이 존재하는지를(예를 들어, 적당한 세포 분류 기법과 조합하여) 선택적으로 검출할 수 있다.
이제 본 발명은 하기 비제한적인 바람직한 양태, 실시예 및 도면에 의해 추가로 설명될 것이다.
본원 전반에 걸쳐 인용된 참조문헌(참조 문서, 허여된 특허, 공개 특허 출원 및 현재 계류 중인 특허 출원 포함)은, 특히 상기 참조되는 교시내용에 대해, 본원에 명시적으로 참조 인용된다.
양태
양태 A-1. hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하고, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 A-2. 양태 A-1에 있어서,
1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 대략 동일하거나, 또는 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 대략 동일하거나, 또는 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
a) 및 b) 중 하나에 상응하는 아미노산 잔기의 신장부는 항상 본 발명의 아미노산 서열 내에 존재하게 되고, 아미노산 잔기의 제2 신장부는 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되게 되는,
아미노산 잔기의 2개 이상의 신장부를 포함하는 아미노산 서열.
양태 A-3. 양태 A-1 또는 A-2에 있어서,
아미노산 잔기의 제1 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제2 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
아미노산 잔기의 제3 신장부는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
아미노산 잔기의 3개 이상의 신장부를 포함하는 것인 아미노산 서열.
양태 A-4. 양태 A-1 내지 A-3 중 임의의 양태에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합하고/하거나 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 아미노산 서열.
양태 A-5. 양태 A-1 내지 A-4 중 임의의 양태에 있어서, (임의의 적당한 종으로부터의) 자연 발생 아미노산 서열, 또는 합성 또는 반합성 아미노산 서열인 아미노산 서열.
양태 A-6. 양태 A-1 내지 A-5 중 임의의 양태에 있어서, 면역글로불린 폴드를 포함하거나, 적당한 조건 하에 면역글로불린 폴드를 형성할 수 있는 아미노산 서열.
양태 A-7. 양태 A-1 내지 A-6 중 임의의 양태에 있어서, 면역글로불린 서열인 아미노산 서열.
양태 A-8. 양태 A-1 내지 A-7 중 임의의 양태에 있어서, (임의의 적당한 종으로부터의) 자연 발생 면역글로불린 서열, 또는 합성 또는 반합성 면역글로불린 서열인 아미노산 서열.
양태 A-9. 양태 A-1 내지 A-8 중 임의의 양태에 있어서, 인간화 면역글로불린 서열, 카멜화 면역글로불린 서열, 또는 친화도 성숙과 같은 기법에 의해 수득된 면역글로불린 서열인 아미노산 서열.
양태 A-10. 양태 A-1 내지 A-9 중 임의의 양태에 있어서, 중쇄 가변 도메인 서열(예를 들어 VH-서열)로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 A-11. 양태 A-1 내지 A-10 중 임의의 양태에 있어서, 통상적 4-쇄 항체로부터 유래된 중쇄 가변 도메인 서열로 본질적으로 구성되거나, 중쇄 항체로부터 유래된 중쇄 가변 도메인 서열로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 A-12. 양태 A-1 내지 A-11 중 임의의 양태에 있어서, 도메인 항체(또는 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열), 단일 도메인 항체(또는 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열), "dAb"(또는 dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열) 또는 나노바디
(VHH 서열을 포함하나 이에 제한되지 않음)로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 A-13. 양태 A-1 내지 A-12 중 임의의 양태에 있어서, 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열로서,
CDR2이 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 A-14. 양태 A-13에 있어서, 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열로서,
CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102; 또는
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및
CDR1 또는 CDR3 중 적어도 하나는 하기의 것들로부터 선택되는:
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR1:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및/또는
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR3:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
아미노산 서열.
양태 A-15. 양태 A-13 또는 A-14 중 임의의 양태에 있어서, 4개의 골격구조 영역(각기 FR1 내지 FR4) 및 3개의 상보성 결정 영역(각기 CDR1 내지 CDR3)으로 구성된 아미노산 서열로서,
- CDR1는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR3는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
아미노산 서열.
양태 A-16. 양태 A-1 내지 A-15 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102를 포함하는 아미노산 서열.
양태 A-17. 양태 A-16에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 A-18. 양태 A-16 또는 A-17 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 CDR1 서열:
a) 서열 번호 98; 및
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및
하기의 것들로부터 선택되는 CDR3 서열:
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
을 포함하는 아미노산 서열.
양태 A-19. 양태 A-16 내지 A-18 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102, 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 아미노산 서열.
양태 A-20. 양태 A-15 내지 A-19 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121을 포함하는 아미노산 서열.
양태 A-21. 양태 A-1 내지 A-20 중 임의의 양태에 있어서,
a) 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157의 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 아미노산 동일성을 가지고(여기에서, 아미노산 동일도를 결정하기 위한 목적으로, CDR 서열을 형성하는 아미노산 잔기는 무시됨); 및
b) 바람직하게 카밧 번호매김에 따른 위치 11, 37, 44, 45, 47, 83, 84, 103, 104 및 108의 아미노산 잔기 중 하나 이상이 제WO 08/020079호의 표 A-3 내지 표 A-8에 언급된 인증 잔기들로부터 선택되는
나노바디
로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 A-22. 양태 A-1 내지 A-21 중 임의의 양태에 있어서, 인간화 나노바디
로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 A-23. 양태 A-22에 있어서, hRSV의 단백질 F에 결합(본원에 추가 정의된 바와 같음)할 수 있고,
i) 서열 번호 5의 아미노산 서열(표 A-1 참조)의 인간화 변형체이고/이거나;
ii) 서열 번호 5의 아미노산 서열(표 A-1 참조), 및/또는 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157의 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 아미노산 동일성을 가지고(여기에서, 아미노산 동일도를 결정하기 위한 목적으로, CDR 서열을 형성하는 아미노산 잔기는 무시됨);
iii) 바람직하게 카밧 번호매김에 따른 위치 11, 37, 44, 45, 47, 83, 84, 103, 104 및 108의 아미노산 잔기 중 하나 이상이 제WO 08/020079호의 표 A-3 내지 표 A-8에 언급된 인증 잔기들로부터 선택되는
인간화 나노바디
로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 A-24. 양태 A-1 내지 A-23 중 임의의 양태에 있어서, 본질적으로 단리된 형태인 아미노산 서열.
양태 A-25. 양태 A-1 내지 A-24 중 임의의 양태에 있어서, 대상에게 투여하기 위한 아미노산 서열로서, 상기 아미노산 서열이 상기 대상 내에서 자연 발생하지 않는 아미노산 서열.
양태 A-26. 양태 A-1 내지 A-25 중 임의의 양태에 있어서, 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 A-27. 양태 A-1 내지 A-26 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 A-28. 양태 A-1 내지 A-27 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 A-29. 양태 A-1 내지 A-28 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 아미노산 서열.
양태 B-1. CDR2가 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디
:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가짐(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 B-2. 양태 B-1에 있어서, CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 102; 또는
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가짐(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
CDR1 또는 CDR3 중 적어도 하나는 하기의 것들로부터 선택되는:
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR1:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및/또는
- 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 CDR3:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
것인 나노바디
.
양태 B-3. 양태 B-1 또는 B-2 중 임의의 양태에 있어서,
- CDR1는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR2는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되며:
c) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
- CDR3는 하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되고:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
인 것인 나노바디
.
양태 B-4. 양태 B-1 내지 B-3 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102를 포함하는 나노바디
.
양태 B-5. 양태 B-4에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 하나의 CDR 서열을 포함하는 나노바디
:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 B-6, 양태 B-4 또는 B-5 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 CDR1 서열:
a) 서열 번호 98; 및
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및
하기의 것들로부터 선택되는 CDR3 서열:
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
을 포함하는 나노바디
.
양태 B-7. 양태 B-4 내지 B-6 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 적어도 하나의 CDR 서열을 포함하는 나노바디
.
양태 B-8. 양태 B-4 내지 B-7 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121을 포함하는 나노바디
.
양태 B-9, 양태 B-1 내지 B-8 중 임의의 양태에 있어서, 본질적으로 단리된 형태인 나노바디
.
양태 B-10. 양태 B-1 내지 B-9 중 임의의 양태에 있어서, 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 B-11. 양태 B-1 내지 B-10 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 B-12. 양태 B-1 내지 B-11 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 B-13. 양태 B-1 내지 B-12 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 나노바디
.
양태 B-14. 양태 B-1 내지 B-13 중 임의의 양태에 있어서, (임의의 적당한 종으로부터의) 자연 발생 나노바디
, 또는 합성 또는 반합성 나노바디
인 나노바디
.
양태 B-15. 양태 B-1 내지 B-14 중 임의의 양태에 있어서, VHH 서열, 부분 인간화 VHH 서열, 완전 인간화 VHH 서열, 카멜화 중쇄 가변 도메인 또는 친화도 성숙과 같은 기법에 의해 수득된 나노바디
인 나노바디
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양태 B-16. 양태 B-1 내지 B-15 중 임의의 양태에 있어서, 부분 인간화 나노바디
인 나노바디
.
양태 B-17. 양태 8-1 내지 B-16 중 임의의 양태에 있어서, 완전 인간화 나노바디
인 나노바디
.
양태 B-18. 양태 8-1 내지 B-17 중 임의의 양태에 있어서, hRSV의 단백질 F에 결합(본원에 추가 정의된 바와 같음)할 수 있고,
i) 서열 번호 5의 아미노산 서열(표 A-1 참조)의 인간화 변형체이고/이거나;
ii) 서열 번호 5의 아미노산 서열(표 A-1 참조), 및/또는 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157의 아미노산 서열 중 적어도 하나와 적어도 80% 아미노산 동일성을 가지고(여기에서, 아미노산 동일도를 결정하기 위한 목적으로, CDR 서열을 형성하는 아미노산 잔기는 무시됨);
iii) 바람직하게 카밧 번호매김에 따른 위치 11, 37, 44, 45, 47, 83, 84, 103, 104 및 108의 아미노산 잔기 중 하나 이상이 제WO 08/020079호의 표 A-3 내지 표 A-8에 언급된 인증 잔기들로부터 선택되는
인간화 나노바디
로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 C-1: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-2: 양태 C-1에 있어서, 서열 번호 60-76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-3: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-4: 양태 C-3에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-5: 양태 C-3 또는 C-4 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-6: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-7: 양태 C-6에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-8: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-9: 양태 C-8에 있어서, 서열 번호 146-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-10: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-11: 양태 C-10에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 C-12: 양태 C-10 또는 C-11 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-13: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-14: 양태 C-13에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-15: 양태 C-14에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-16: 양태 C-15에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 4개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-17: 양태 C-16에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 5개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-18: 양태 C-17에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 6개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-19: 양태 C-18에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 7개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-20: 양태 C-19에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 8개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-21: 양태 C-20에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 9개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-22: 양태 C-21에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 10개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-23: 양태 C-22에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 C-24: 양태 C-13에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 C-25: 양태 C-13에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 C-26: 양태 C-25에 있어서, 하기의 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 C-27: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열아미노산 서열: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 C-28: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 C-29: 양태 C-8에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile2OLeu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln105Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 C-30: 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-31: 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-32: 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-33: 서열 번호 146-153 중 임의의 것을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 C-34: 양태 C-1 내지 C-33 중 임의의 양태에 있어서, 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 C-35: 양태 C-1 내지 C-34 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 C-36: 양태 C-1 내지 C-35 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 C-37: 양태 C-1 내지 C-36 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 아미노산 서열.
양태 C-38: 양태 C-1 내지 C-37 중 임의의 양태에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합하고/하거나 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 아미노산 서열.
양태 D-1: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디
:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-2: 양태 D-1에 있어서, 서열 번호 60-76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 D-3: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디
:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-4: 양태 D-3의 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 나노바디
:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-5: 양태 D-3 또는 D-4 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
양태 D-6: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디
:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-7: 양태 D-6의 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 나노바디
:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-8: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디
:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-9: 양태 D-8의 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 146-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디.
양태 D-10: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-11: 양태 D-10에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 나노바디:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아르기닌(Arg, R), 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 아르기닌(Arg, R) at 위치 83 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 D-12: 양태 D-10 또는 D-11 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디.
양태 D-13: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-14: 양태 D-13에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-15: 양태 D-14에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-16: 양태 D-150에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 4개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-17: 양태 D-16에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 5개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-18: 양태 D-17에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 6개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-19: 양태 D-18에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 7개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-20: 양태 D-19에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 8개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-21: 양태 D-20에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 9개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D,
양태 D-22: 양태 D-21에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 10개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-23: 양태 D-22에 있어서, 하기의 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 D-24: 양태 D-13에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 D-25: 양태 D-8에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 D-26: 양태 D-20에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 D-27: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 D-28: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 D-29: 양태 D-13에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 D-30: 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 D-31: 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 D-32: 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 D-33: 서열 번호 146-153 중 임의의 것을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 D-34: 양태 D-1 내지 D-33 중 임의의 양태에 있어서, 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 D-35: 양태 D-1 내지 D-34 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 D-36: 양태 D-1 내지 D-35 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 D-37: 양태 D-1 내지 D-36 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 나노바디
.
양태 D-38: 양태 D-1 내지 D-37 중 임의의 양태에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합하고/하거나 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 나노바디
.
양태 W-1: 양태 A-1 내지 A-29 및 C-1 내지 C-38 중 임의의 양태에 있어서, 아미노산 서열이 위치 1(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨)의 아스파르트산(Asp, D)을 가지는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디
.
양태 W-2: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 W-3: 양태 W-2에 있어서, 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-4: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-5: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-6: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-7: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-8: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-9: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-10: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-11: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-12: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-13: 양태 W-12에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-14: 양태 W-13에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-15: 양태 W-14에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 4개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-16: 양태 W-15에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 5개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-17: 양태 W-16에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 6개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-18: 양태 W-17에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 7개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-19: 양태 W-18에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 8개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-20: 양태 W-19에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 9개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-21: 양태 W-20에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 10개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-22: 양태 W-21에 있어서, 하기의 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-23: 양태 W-12에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-24: 양태 W-12에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-25: 양태 W-24에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-26: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-27: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-28: 양태 W-2 또는 W-3에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열:
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 W-29: 서열 번호 138을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-30: 서열 번호 139를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-31: 서열 번호 140을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-32: 서열 번호 141을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-33; 서열 번호 154-157 중 임의의 것을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열.
양태 W-34: 양태 W-1 내지 W-33 중 임의의 양태에 있어서, 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 W-35: 양태 W-1 내지 W-34 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 W-36: 양태 W-1 내지 W-35 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 아미노산 서열.
양태 W-37: 양태 W-1 내지 W-36 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때) 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 아미노산 서열.
양태 W-38: 양태 W-1 내지 W-37 중 임의의 양태에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합하고/하거나 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 아미노산 서열.
양태 X-1: 양태 B-1 내지 B-18 및 D-1 내지 D-38 중 임의의 양태에 있어서, 나노바디가 위치 1(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨)의 아스파르트산(Asp, D)을 가지는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디.
양태 X-2: 하기의 것들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 나노바디
:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 X-3: 양태 X-2에 있어서, 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-4: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-5: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-6: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-7: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-8: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-9: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-10: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-11: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-12: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-13: 양태 X-12에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-14: 양태 X-13에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-15: 양태 X-14에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 4개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-16: 양태 X-15에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 5개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-17: 양태 X-16에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 6개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-18: 양태 X-17에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 7개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-19: 양태 X-18에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 8개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-20: 양태 X-19에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 9개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-21: 양태 X-20에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 10개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-22: 양태 X-21에 있어서, 하기의 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-23: 양태 X-12에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-24: 양태 X-12에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-25: 양태 X-24에 있어서, 하기의 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-26: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-27: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-28: 양태 X-2에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
:
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg108Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 X-29: 서열 번호 138을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-30: 서열 번호 139를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-31: 서열 번호 140을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-32: 서열 번호 141을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-33: 서열 번호 154-157 중 임의의 것을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 나노바디
.
양태 X-34: 양태 X-1 내지 X-33에 있어서, 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 X-35: 양태 X-1 내지 X-34 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 X-36: 양태 X-1 내지 X-35 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 나노바디
.
양태 X-37: 양태 X-1 내지 X-36 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 100 nM 내지 1000 nM, 바람직하게는 100 nM 내지 500 nM, 또는 그 미만의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 나노바디
.
양태 X-38: X-1 내지 X-37 중 임의의 양태에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합하고/하거나 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 나노바디
.
양태 E-1: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 하나 이상의 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로는 하나 이상의 펩티드계 링커를 통해 임의적으로 연결된 하나 이상의 다른 아미노산 결합 단위를 추가로 포함하는 폴리펩티드.
양태 E-2: 양태 E-1에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 면역글로불린 서열인 폴리펩티드.
양태 E-3: 양태 E-1 또는 E-2 중 임의의 양태에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택되는 폴리펩티드.
양태 E-4: 양태 E-1 내지 E-3 중 임의의 양태에 있어서, 상기 1개 이상의 아미노산 서열이 면역글로불린 서열인 폴리펩티드.
양태 E-5: 양태 E-1 내지 E-4 중 임의의 양태에 있어서, 상기 1개 이상의 아미노산 서열이 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택되는 폴리펩티드.
양태 E-6: 양태 E-1 내지 E-5 중 임의의 양태에 있어서, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-8 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 하나 이상의 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 나노바디
인 폴리펩티드.
양태 E-7: 양태 E-1 내지 E-6 중 임의의 양태에 있어서, 다가 구조물인 폴리펩티드.
양태 E-8: 양태 E-7에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29 및 C-1 내지 C-38 중 임의의 양태에 따른 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 양태 B-1 내지 B-18 및 D-1 내지 D-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 및/또는 양태 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 양태 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 적어도 하나의 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-9: 양태 E-8에 있어서, 상기 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-10: 양태 E-7 내지 E-9 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-11: 양태 E-7 내지 E-10 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열 내에 항상 존재하여, 아미노산 잔기의 제2 신장부가 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되도록 하는,
적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-12: 양태 E-7 내지 E-11 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 아미노산 잔기의 제2 신장부:
C) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 제3 아미노산 잔기의 신장부:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
를 포함하는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-13: 양태 E-7 내지 E-12 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102를 포함하는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-14: 양태 E-7 내지 E-13 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-15: 양태 E-7 내지 E-14 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 CDR1 서열:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및
하기의 것들로부터 선택되는 CDR3 서열:
c) 서열 번호 121;
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
을 포함하는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-16: 양태 E-7 내지 E-15 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102, 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는, 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-17: 양태 E-7 내지 E-16 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121를 포함하는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-18: 양태 E-8 내지 E-17 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-19: 양태 E-7 내지 E-9 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-20: 양태 E-19에 있어서, 상기 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-21: 양태 E-20에 있어서, 서열 번호 60-76 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-22: 양태 E-7 내지 E-9 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-23: 양태 E-22에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-24: 양태 E-22 또는 E-23 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-25: 양태 E-24에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-26: 양태 E-7 내지 E-9 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-27: 양태 E-26에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-28: 양태 E-26 또는 E-27 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-29: 양태 E-28에 있어서, 서열 번호 65 및 76으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-30: 양태 E-7 내지 E-9 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-31: 양태 E-30에 있어서, 상기 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-32: 양태 E-31에 있어서, 서열 번호 146-153으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-33: 양태 E-7 내지 E-9 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-34: 양태 E-33에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-35: 양태 E-33 또는 E-34 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-36: 양태 E-35에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75, 76, 147, 149 및 153 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-37: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 E-38: 양태 E-37에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 E-39: 양태 E-37에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-40: 양태 E-37에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-41: 양태 E-40에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-42: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 E-43: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 E-44: 양태 E-37에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-45: 양태 E-7에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-46: 양태 E-45에 있어서, 상기 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-47: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-48: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열 내에 항상 존재하여, 아미노산 잔기의 제2 신장부가 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되도록 하는,
적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-49: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부:
a) 서열 번호 98; 및
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 아미노산 잔기의 제2 신장부:
c) 서열 번호 102; 및
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 아미노산 잔기의 제3 신장부:
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
를 포함하는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-50: 양태 E-45 내지 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102를 포함하는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-51: 양태 E-45 내지 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-52: 양태 E-45 내지 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 CDR1 서열:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및
하기의 것들로부터 선택되는 CDR3 서열:
c) 서열 번호 121;
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
을 포함하는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-53: 양태 E-45 내지 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102, 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는, 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-54: 양태 E-45 내지 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121를 포함하는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-55: 양태 E-47 내지 E-53 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-56: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-57: 양태 E-56에 있어서, 상기 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-58: 양태 E-57에 있어서, 서열 번호 60-76 중 하나로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-59: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-60: 양태 E-59에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-61: 양태 E-59 또는 E-60 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-62: 양태 E-61에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-63: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-64: 양태 E-63에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-65: 양태 E-63 또는 E-64 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-66: 양태 E-65에 있어서, 서열 번호 65 및 76으로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-67: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-68: 양태 E-67에 있어서, 상기 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-69: 양태 E-68에 있어서, 서열 번호 146-153으로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-70: 양태 E-45 또는 E-46 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-71: 양태 E-70에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-72: 양태 E-70 또는 E-71 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 다가 폴리펩티드.
양태 E-73: 양태 E-72에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75, 76, 147, 149 및 153 중 하나로부터 선택되는 적어도 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-74: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 E-75: 양태 E-74에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 E-76: 양태 E-74에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-77: 양태 E-74에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-78: 양태 E-77에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-79: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 E-80: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu,
양태 E-81: 양태 E-74에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-82: E-7 내지 E-9 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-83: 양태 E-82에 있어서, 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-84: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-85: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-86: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-87: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-88: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-89: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-90: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-91: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-92: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala34Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-93: 양태 E-92에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-94: 양태 E-92에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-95: 양태 E-92에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-96: 양태 E-95에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-97: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-98: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드.
양태 E-99: 양태 E-92에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 다가 폴리펩티드:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-100: 양태 E-7에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 2개의 아미노산 서열 및/또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-101: 양태 E-100에 있어서, 상기 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 이가 폴리펩티드.
양태 E-102: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-103: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열 내에 항상 존재하여, 아미노산 잔기의 제2 신장부가 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되도록 하는,
2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-104: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 아미노산 잔기의 제2 신장부:
C) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 제3 아미노산 잔기의 신장부:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
를 포함하는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-105: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102를 포함하는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-106: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-107: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 CDR1 서열:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및
하기의 것들로부터 선택되는 CDR3 서열:
c) 서열 번호 121;
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
을 포함하는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-108: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102, 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는, 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-109: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121를 포함하는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-110: 양태 E-102 내지 E-109 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 이가 폴리펩티드.
양태 E-111: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-112: 양태 E-111에 있어서, 상기 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 이가 폴리펩티드.
양태 E-113: 양태 E-112에 있어서, 서열 번호 60-76 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-114: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-115: 양태 E-114에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-116: 양태 E-114 또는 E-115 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 이가 폴리펩티드.
양태 E-117: 양태 E-116에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-118: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-119: 양태 E-118에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-120: 양태 E-118 또는 E-119 중 임의의 양태에 있어서, 상기 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 이가 폴리펩티드.
양태 E-121: 양태 E-120에 있어서, 서열 번호 65 및 76으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-122: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-123: 양태 E-122에 있어서, 상기 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 이가 폴리펩티드.
양태 E-124: 양태 E-123에 있어서, 서열 번호 146-153 중 하나로부터 선택되는 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-125: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-126: 양태 E-125에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-127: 양태 E-125 또는 E-126 중 임의의 양태에 있어서, 상기 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 이가 폴리펩티드.
양태 E-128: 양태 E-127에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75, 76, 147, 149 및 153 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-129: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala1APro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 E-130: 양태 E-129에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 E-131: 양태 E-129에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-132: 양태 E-129에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-133: 양태 E-132에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-134: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 E-135: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 E-136: 양태 E-129에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 2개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-137: 양태 E-100 또는 E-101 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-138: 양태 E-137에 있어서, 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-139: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-140: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-141: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-142: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-143: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-144: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-145: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-146: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-147: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 E-148 양태 E-147에 있어서, 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 E-149 양태 E-147에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-150: 양태 E-147에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-151: 양태 E-150에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-152: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-153: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-154: 양태 E-147에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-155: 양태 E-7에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 3개의 아미노산 서열 및/또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-156: 양태 E-155에 있어서, 상기 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 삼가 폴리펩티드.
양태 E-157: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-158: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하고:
a) 서열 번호 102;
b) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
적어도 1개의 신장부는 하기의 것들로부터 선택되어:
c) 서열 번호 98;
d) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
e) 서열 번호 121; 및
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐),
a) 및 b) 중 하나에 대응하는 아미노산 잔기의 신장부는 본 발명의 아미노산 서열 내에 항상 존재하여, 아미노산 잔기의 제2 신장부가 c), d), e) 및 f) 중 하나로부터 선택되도록 하는,
3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-159: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 아미노산 잔기의 제2 신장부:
C) 서열 번호 102;
d) 서열 번호 102와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단:
i) 아미노산 잔기의 상기 신장부는 위치 6의 아스파르트산(Asp, D)를 가지고(위치 54는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
하기의 것들로 구성된 군으로부터 선택되는 제3 아미노산 잔기의 신장부:
e) 서열 번호 121;
f) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
를 포함하는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-160: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102를 포함하는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-161: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐);
c) 서열 번호 121; 및
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-162: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102 및 하기의 것들로부터 선택되는 CDR1 서열:
a) 서열 번호 98;
b) 서열 번호 98과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐); 및
하기의 것들로부터 선택되는 CDR3 서열:
c) 서열 번호 121;
d) 서열 번호 121과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 잔기의 신장부(단, 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이가 없는 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 잔기의 상기 신장부를 포함하는 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐)
을 포함하는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-163: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 서열 번호 102, 및 서열 번호 98 및 서열 번호 121로부터 선택되는 아미노산 잔기(CDR 서열)의 적어도 1개의 신장부를 포함하는, 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-164: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 서열 번호 98, 서열 번호 102 및 서열 번호 121를 포함하는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-165: 양태 E-157 내지 E-164 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 삼가 폴리펩티드.
양태 E-166: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 아미노산 잔기의 적어도 1개의 신장부를 포함하는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-167: 양태 E-166에 있어서, 상기 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 삼가 폴리펩티드.
양태 E-168: 양태 E-167에 있어서, 서열 번호 60-76 중 하나로부터 선택되는 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-169: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-170: 양태 E-169에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-171: 양태 E-169 또는 E-170 중 임의의 양태에 있어서, 상기 적어도 2 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 삼가 폴리펩티드.
양태 E-172: 양태 E-171에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-173: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-174: 양태 E-173에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-175: 양태 E-173 또는 E-174 중 임의의 양태에 있어서, 상기 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 삼가 폴리펩티드.
양태 E-176: 양태 E-175에 있어서, 서열 번호 65 및 76으로부터 선택되는 적어도 2개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-177: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-178: 양태 E-177에 있어서, 상기 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 삼가 폴리펩티드.
양태 E-179: 양태 E-178에 있어서, 서열 번호 146-153 중 하나로부터 선택되는 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 폴리펩티드.
양태 E-180: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-181: 양태 E-180에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-182: 양태 E-180 또는 E-181 중 임의의 양태에 있어서, 상기 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
가 동일한 삼가 폴리펩티드.
양태 E-183: 양태 E-182에 있어서, 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75, 76, 147, 149 및 153 중 하나로부터 선택되는 3개의 동일한 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-184: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala1APro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 E-185: 양태 E-184에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 E-186: 양태 E-184에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-187: 양태 E-184에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-188: 양태 E-187에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-189: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 E-190: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 E-191: 양태 E-184에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-192: 서열 번호 62를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-193: 서열 번호 65를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-194: 서열 번호 76을 갖는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-195: 서열 번호 75를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-196: 서열 번호 147을 갖는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-197: 서열 번호 149를 가지는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-198: 서열 번호 153을 갖는 3개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-199: 양태 E-155 또는 E-156 중 임의의 양태에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-200: 양태 E-199에 있어서, 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로부터 선택되는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-201: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-202: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-203: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-204: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-205: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-206: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-207: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-208: 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 갖는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-209: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala34Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-210: 양태 E-209에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-211: 양태 E-209에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-212: 양태 E-209에 있어서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-213: 양태 E-212에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-214: 양태 E-209에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5를 가지는 적어도 1개의 아미노산 서열 및/또는 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-215: 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 77-79 및 158;
b) 서열 번호 77-79 및 158 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내에 포함된 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및/또는 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-216: 양태 E-215에 있어서, 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 77-79 및 158;
b) 서열 번호 77-79 및 158 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-217: 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 78 및 79;
b) 서열 번호 78 및 79 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및/또는 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-218: 양태 E-217에 있어서, 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 78 및 79; 또는
b) 서열 번호 78 및 79 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L), 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)를 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-219: 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-220: 양태 E-219에 있어서, 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-221: 양태 E-219 또는 E-220 중 임의의 양태에 있어서, 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 159-161;
b) 서열 번호 159-161 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 폴리펩티드가
- 서열 번호 159와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 160과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 161과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 때, 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디
는 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-222: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 E-223: 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 E-224: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-225: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-226: 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 E-227: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 E-228: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 E-229: 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 E-230: 서열 번호 77을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-231: 서열 번호 78을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-232: 서열 번호 79를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-233: 서열 번호 159-161을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-234: 하기 폴리펩티드들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 142-145 및 162-165;
b) 서열 번호 142-145 및 162-165 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드(단:
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 제1 아미노산 서열 또는 나노바디
는 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드는 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 E-235: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-236: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 77을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-237: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 78을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-238: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 79를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-239: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 158을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-240: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 159를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-241: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 160을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-242: 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 161을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-243: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-244: 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-245: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-246: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-247: 양태 E-212에 있어서, 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-248: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-249: 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개) 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-250: 서열 번호 53의 부분을 형성하는 적어도 1개(바람직하게 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디
/나노바디
들에서 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-251: 서열 번호 142를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-252: 서열 번호 143을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-253: 서열 번호 144를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-254: 서열 번호 145를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-255: 서열 번호 162-165를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
양태 E-256: 양태 E-1 내지 E-255 중 임의의 양태에 있어서, 100 nM 내지 0.1 nM 이하, 바람직하게는 10 nM 내지 0.1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 1 nM 내지 0.1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 폴리펩티드.
양태 E-257: 양태 E-1 내지 E-256 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 폴리펩티드.
양태 E-258: 양태 E-1 내지 E-257 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1/2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만, 더욱 바람직하게는 5×10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 폴리펩티드.
양태 E-259: 양태 E-1 내지 E-258 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 10 pM 내지 1000 pM, 바람직하게는 10 pM 내지 250 pM, 더욱 바람직하게는 50 pM 내지 200 pM 이하의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 폴리펩티드.
양태 E-260: 양태 E-1 내지 E-259 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 시나지스
로 수득된 IC50값에 비해, 적어도 동일한, 바람직하게는 더 양호한, 적어도 10배 더 양호한, 바람직하게는 20배 더 양호한, 더욱 더 바람직하게는 50배 더 양호한, 더욱 더 바람직하게는 60, 70, 80배 또는 그 이상 더 양호한 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 폴리펩티드.
양태 E-261: 양태 E-1 내지 E-260 중 임의의 양태에 있어서, 다중특이적 구조물인 폴리펩티드.
양태 F-1: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 1개의 아미노산 서열, 및/또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 1개의 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 일가 구조물.
양태 F-2: 양태 F-1에 있어서, 상기 아미노산 서열이 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택되는 일가 구조물.
양태 F-3: 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 1개의 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 일가 구조물.
양태 F-4: 서열 번호 60-76, 서열 번호 138-141 및 서열 번호 146-157을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 일가 구조물.
양태 F-5: 양태 E-1 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물의 용도.
양태 F-6: 양태 F-5에 있어서, 일가 구조물이 2개 이상의 결합 단위를 포함하는 다가 구조물의 제조에 있어서 결합 도메인 또는 결합 단위로 사용되는 일가 구조물의 용도.
양태 F-7: 양태 F-5 또는 F-6 중 임의의 양태에 있어서, 바람직하게 분자간 결합에 비해 분자내 결합을 나타내는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-8: 양태 F-5 내지 F-7 중 임의의 양태에 있어서, 결합 도메인 또는 결합 단위가 링커를 통해 연결되어, 다가 폴리펩티드가 바람직하게 분자간 결합에 비해 분자내 결합을 나타내게 되고/되거나, 다가 폴리펩티드가 hRSV의 단백질 F 상의 모든 결합 부위에 동시에 결합할 수 있는, 다가 구조물의 제조에 있어서의 결합 도메인 또는 결합 단위로서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-9: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 것인, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-10: 양태 F-9에 있어서, 일가 구조물이 서열 번호 60-76 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-11: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-12: 양태 F-11에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76; 또는
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-13: 양태 F-11 또는 F-12 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-14: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-15: 양태 F-14에 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-16: 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 서열 번호 62로 본질적으로 구성되는 일가 구조물의 용도.
양태 F-17: 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 서열 번호 65로 본질적으로 구성되는 일가 구조물의 용도.
양태 F-18: 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의, 서열 번호 76으로 본질적으로 구성되는 일가 구조물의 용도.
양태 F-19: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 146-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-20: 양태 F-19에 있어서, 일가 구조물이 서열 번호 146-153 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-21: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-22: 양태 F-21에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-23: 양태 F-21 또는 F-22 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-24: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 F-25: 양태 F-24에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 F-26: 양태 F-24에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-27: 양태 F-24에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-28: 양태 F-27에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-29: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 F-30: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 F-31: 양태 F-24에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 F-32: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1의 아스파르트산(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-33: 양태 F-32에 있어서, 일가 구조물이 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-34: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F 35: F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-36: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-37: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-38: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-39: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-40: F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-41: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 가지는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-42: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-43: 양태 F-42에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-44: 양태 F-42에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-45: 양태 F-42에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-46: 양태 F-42에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-47: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-48: 양태 F-5 내지 F-8 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-49: 양태 F-42에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 다가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, GlnlO8Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 F-50: 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 있어서, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-51: 양태 F-50에 있어서, 바람직하게 분자간 결합에 비해 분자내 결합을 나타내는 이가 구조물의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-52: 양태 F-50 내지 F-51 중 임의의 양태에 있어서, 결합 도메인 또는 결합 단위가 링커를 통해 연결되어, 이가 폴리펩티드가 바람직하게 분자간 결합에 비해 분자내 결합을 나타내게 되고/되거나, 이가 폴리펩티드가 hRSV의 단백질 F 상의 모든 결합 부위에 동시에 결합할 수 있는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 결합 도메인 또는 결합 단위로서의 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-53: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-54: 양태 F-53에 있어서, 2개의 일가 구조물이 동일한 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-55: 양태 F-53 또는 F-54에 있어서, 2개의 일가 구조물이 서열 번호 60-76 중 하나로 본질적으로 구성되는, 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-56: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-57: 양태 F-56에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-58: 양태 F-56 또는 F-57에 있어서, 2개의 일가 구조물이 동일한 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-59: 양태 F-58에 있어서, 2개의 일가 구조물이 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로 본질적으로 구성되는, 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-60: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-61: 양태 F-60에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-62: 양태 F-60 또는 F-61에 있어서, 2개의 일가 구조물이 동일한 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-63: 서열 번호 62로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-64: 서열 번호 65로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-65: 서열 번호 76으로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-66: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 145-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-67: 양태 F-66에 있어서, 2개의 일가 구조물이 동일한, 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-68: 양태 F-66 또는 F-67 중 임의의 양태에 있어서, 2개의 일가 구조물이 서열 번호 146-153 중 하나로 본질적으로 구성되는, 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-69: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-70: 양태 F-69에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-71: 양태 F-69 또는 F-70에 있어서, 2개의 일가 구조물이 동일한, 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-72: 양태 F-71에 있어, 2개의 일가 구조물이 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나로 본질적으로 구성되는, 2개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-73: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 F-74: 양태 F-73에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 F-75: 양태 F-73에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-76: 양태 F-73에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-77: 양태 F-76에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-78: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 F-79: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 F-80: 양태 F-73에 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 2개의 일가 구조물의 용도:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 F-81: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1의 아스파르트산(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-82: 양태 F-81에 있어서, 일가 구조물이 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-83: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 중 하나로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-84: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62를 중 하나로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-85: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65를 중 하나로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-86: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76을 포함하거나 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-87: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75를 중 하나로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-88: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147을 포함하거나 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-89: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149를 중 하나로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-90: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153을 포함하거나 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-91: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-92: 양태 F-91에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-93: 양태 F-91에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-94: 양태 F-91에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-95: 양태 F-94에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-96: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-97: 양태 F-50 내지 F-52 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-98: 양태 F-91에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 이가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, GlnlO8Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 F-99: 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 있어서, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-100: 양태 F-99에 있어서, 바람직하게 분자간 결합에 비해 분자내 결합을 나타내는 이가 구조물의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-101: 양태 F-99 내지 F-100 중 임의의 양태에 있어서, 결합 도메인 또는 결합 단위가 링커를 통해 연결되어, 삼가 폴리펩티드가 바람직하게 분자간 결합에 비해 분자내 결합을 나타내게 되고/되거나, 삼가 폴리펩티드가 hRSV의 단백질 F 상의 모든 결합 부위에 동시에 결합할 수 있는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 결합 도메인 또는 결합 단위로서의 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-102: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 60-76;
b) 서열 번호 60-76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-103: 양태 F-102에 있어서, 3개의 일가 구조물이 동일한 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-104: 양태 F-102 또는 F-103에 있어서, 3개의 일가 구조물이 서열 번호 60-76 중 하나로 본질적으로 구성되는, 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-105: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-106: 양태 F-105에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76;
b) 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-107: 양태 F-105 또는 F-106에 있어서, 3개의 일가 구조물이 동일한 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-108: 양태 F-107에 있어서, 3개의 일가 구조물이 서열 번호 62, 65, 67, 68, 75 및 76 중 하나로 본질적으로 구성되는, 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-109: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및/또는 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-110: 양태 F-109에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 65 및 76;
b) 서열 번호 65 및 76 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 54의 아스파르트산(Asp, D), 위치 105의 글루타민(Gln, Q), 위치 78의 루이신(Leu, L) 및 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-111: 양태 F-109 또는 F-110에 있어서, 3개의 일가 구조물이 동일한 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-112: 서열 번호 62로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-113: 서열 번호 65로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-114: 서열 번호 76으로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-115: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 145-153;
b) 서열 번호 146-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-116: 양태 F-115에 있어서, 3개의 일가 구조물이 동일한 일가 구조물의 용도.
양태 F-117: 양태 F-115 또는 F-116 중 임의의 양태에 있어서, 3개의 일가 구조물이 서열 번호 146-153 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-118: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-119: 양태 F-118에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 146-149 및 151-153;
b) 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고, 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가져, 아미노산 서열이:
- 서열 번호 146과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 147과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 148과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 149와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고;
- 서열 번호 151과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R)을 가지고;
- 서열 번호 152와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고;
- 서열 번호 153과 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가질 경우, 아미노산 서열은 바람직하게 위치 83의 아르기닌(Arg, R) 및 위치 85의 글루탐산(Glu, E)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-120: 양태 F-118 또는 F-119에 있어서, 3개의 일가 구조물이 동일한, 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-121: 양태 F-120에 있어, 3개의 일가 구조물이 서열 번호 146-149 및 151-153 중 하나로 본질적으로 구성되는, 3개의 일가 구조물의 용도.
양태 F-122: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
양태 F-123: 양태 F-122에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D.
양태 F-124: 양태 F-122에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-125: 양태 F-122에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-126: 양태 F-125에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D.
양태 F-127: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu.
양태 F-128; 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu.
양태 F-129: 양태 F-122에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 3개의 일가 구조물의 용도:
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Gly54Asp;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 F-130: 서열 번호 62를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 62를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 77을 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 62를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-131: 서열 번호 65를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 65를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 78을 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 65를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-132: 서열 번호 76을 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 76을 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 79를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 76을 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-133: 서열 번호 75를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 75를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 158을 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 75를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-134: 서열 번호 147를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 147를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 159를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 147를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-135: 서열 번호 149를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 149를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 160을 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 149를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-136: 서열 번호 153을 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 153을 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 161을 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 153을 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-137: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열(단:
i) 아미노산 서열은 위치 1에 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열은 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가짐).
양태 F-138: 양태 F-137에 있어서, 일가 구조물이 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나로 본질적으로 구성되는, 일가 구조물의 용도.
양태 F-139: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F 140: F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 62로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-141: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 65로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-142: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 76로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-143: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 75로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-144: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 147로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-145: F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 149로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-146: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 153로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-147: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-148: 양태 F-147에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-149: 양태 F-147에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ser19R, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-150: 양태 F-147에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4 또는 5개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-151: 양태 F-147에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화되고: Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54D; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-152: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3 또는 4개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-153: 양태 F-99 내지 F-101 중 임의의 양태에 있어서, 일가 구조물이 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고: Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu; 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도.
양태 F-154: 양태 F-147에 있어서, 일가 구조물이 하기 아미노산 잔기들이 돌연변이화된 서열 번호 5로 본질적으로 구성되는, 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 일가 구조물의 용도:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, GlnlO8Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp 및 Gly54Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln.
양태 F-155: 서열 번호 138를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 5를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 142를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 138를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-156: 서열 번호 139를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 62를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 143을 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 139를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-157: 서열 번호 140을 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 65를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 144를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 140을 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-158: 서열 번호 141을 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 76을 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 145를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 141을 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-159: 서열 번호 154를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 75를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 162를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 154를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-160: 서열 번호 155를 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 147을 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 163을 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 155를 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-161: 서열 번호 156을 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 149를 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 164를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 156을 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 F-162: 서열 번호 157을 가지는 아미노산 서열이 15GS 링커를 통해 서열 번호 153을 가지는 적어도 2개의 추가 아미노산 서열에 연결된, 서열 번호 165를 가지는 삼가 폴리펩티드의 제조에 있어서의 서열 번호 157을 가지는 아미노산 서열의 용도.
양태 E-262: 양태 E-1 내지 E-261 중 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체에 비해 증가된 반감기를 가지는 폴리펩티드.
양태 E-263: 양태 E-262에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체의 각각에 비해 증가된 반감기를 가지는 폴리펩티드.
양태 E-264: 양태 E-262 또는 E-263에 있어서, 폴리펩티드에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 혈청 단백질 또는 이의 단편, 혈청 단백질에 결합할 수 있는 결합 단위, Fc 부분, 및 혈청 단백질에 결합할 수 있는 소단백질 또는 펩티드로 구성된 군으로부터 선택되는 폴리펩티드.
양태 E-265: 양태 E-262 내지 E-264 중 임의의 양태에 있어서, 폴리펩티드에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 인간 혈청 알부민 또는 이의 단편으로 구성된 군으로부터 선택되는 폴리펩티드.
양태 E-266: 양태 E-262 내지 E-265 중 임의의 양태에 있어서, 폴리펩티드에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 혈청 알부민(예컨대 인간 혈청 알부민) 또는 혈청 면역글로불린(예컨대 IgG)에 결합할 수 있는 결합 단위들로 구성된 군으로부터 선택되는 폴리펩티드.
양태 E-267: 양태 E-262 내지 E-266 중 임의의 양태에 있어서, 폴리펩티드에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 혈청 알부민(예컨대 인간 혈청 알부민) 또는 혈청 면역글로불린(예컨대 IgG)에 결합할 수 있는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택되는 폴리펩티드.
양태 E-268: 양태 E-262 내지 E-267 중 임의의 양태에 있어서, 폴리펩티드에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 결합 단위가 혈청 알부민(예컨대 인간 혈청 알부민) 또는 혈청 면역글로불린(예컨대 IgG)에 결합할 수 있는 나노바디
인 폴리펩티드.
양태 E-269: 양태 E-262 내지 E-268 중 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디 그 자체
의 각각의 반감기에 비해, 적어도 1.5배, 바람직하게는 적어도 2배, 예컨대 적어도 5배, 예를 들어 적어도 10배, 또는 20배 초과 더 큰 혈청 반감기를 가지는 폴리펩티드.
양태 E-270: 양태 E-262 내지 E-269 중 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
의 각각에 비해, 1시간 초과, 바람직하게는 2시간 초과, 더욱 바람직하게는 6시간 초과, 예컨대 12시간 초과, 또는 심지어 24, 48 또는 72시간 초과로 증가된 혈청 반감기를 가지는 폴리펩티드.
양태 E-271: 양태 E-262 내지 E-270 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 약 12시간, 바람직하게는 적어도 24시간, 더욱 바람직하게는 적어도 48시간, 더욱 더 바람직하게는 적어도 72시간 이상; 예를 들어, 적어도 5일(예컨대 약 5 내지 10일), 바람직하게는 적어도 9일(예컨대 약 9 내지 14일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 10일(예컨대 약 10 내지 15일), 또는 적어도 약 11일(예컨대 약 11 내지 16일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 12일(예컨대 약 12 내지 18일 이상), 또는 14일 초과(예컨대 약 14 내지 19일)의 인간에서의 혈청 반감기를 가지는 폴리펩티드.
양태 G-1: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 1개 이상의 나노바디
및/또는 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 1개 이상의 폴리펩티드를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결된, 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위를 임의적으로 추가로 포함하는 화합물 또는 구조물.
양태 G-2: 양태 G-1에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 아미노산 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 G-3: 양태 G-1 또는 G-2 중 임의의 양태에 있어서, 상기 하나 이상의 링커가 존재하는 경우, 이는 1개 이상의 아미노산 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 G-4: 양태 G-1 내지 G-3 중 임의의 양태에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 면역글로불린 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 G-5: 양태 G-1 내지 G-4 중 임의의 양태에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 구조물.
양태 G-6: 양태 G-1 내지 G-5 중 임의의 양태에 있어서, 본 발명의 상기 하나 이상의 아미노산 서열이 면역글로불린 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 G-7: 양태 G-1 내지 G-6, 중 임의의 양태에 있어서, 본 발명의 상기 하나 이상의 아미노산 서열이 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 구조물.
양태 G-8: 양태 G-1 내지 G-7 중 임의의 양태에 있어서, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 1개 이상의 나노바디
를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 나노바디
인 화합물 또는 구조물.
양태 G-9: 양태 G-1 내지 G-8 중 임의의 양태에 있어서, 다가 구조물인 화합물 또는 구조물.
양태 G-10: 양태 G-1 내지 G-9 중 임의의 양태에 있어서, 다중특이적 구조물인 화합물 또는 구조물.
양태 G-11: 양태 G-1 내지 G-10 중 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체, 또는 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드 그 자체에 비해, 증가된 반감기를 가지는 화합물 또는 구조물.
양태 G-12: 양태 G-1 내지 G-11 중 임의의 양태에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 화합물 또는 구조물에 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체, 또는 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드 그 자체에 비해 증가된 반감기를 제공하는 화합물 또는 구조물.
양태 G-13: 양태 G-12에 있어서, 화합물 또는 구조물에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 혈청 단백질 또는 이의 단편, 혈청 단백질에 결합할 수 있는 결합 단위, Fc 부분, 및 혈청 단백질에 결합할 수 있는 소단백질 또는 펩티드로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 구조물.
양태 G-14: 양태 G-12 또는 G-13 중 임의의 양태에 있어서, 화합물 또는 구조물에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 인간 혈청 알부민 또는 이의 단편으로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 구조물.
양태 G-15: 양태 G-12 내지 G-14 중 임의의 양태에 있어서, 화합물 또는 구조물에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 혈청 알부민(예컨대 인간 혈청 알부민) 또는 혈청 면역글로불린(예컨대 IgG)에 결합할 수 있는 결합 단위들로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 구조물.
양태 G-16: 양태 G-12 내지 G-15 중 임의의 양태에 있어서, 화합물 또는 구조물에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 도메인 항체, 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 단일 도메인 항체, 단일 도메인 항체로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, "dAb", dAb로 사용하기에 적당한 아미노산 서열, 또는 혈청 알부민(예컨대 인간 혈청 알부민) 또는 혈청 면역글로불린(예컨대 IgG)에 결합할 수 있는 나노바디
로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물 또는 구조물.
양태 G-17: 양태 G-12 내지 G-16 중 임의의 양태에 있어서, 화합물 또는 구조물에 증가된 반감기를 제공하는 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 혈청 알부민(예컨대 인간 혈청 알부민) 또는 혈청 면역글로불린(예컨대 IgG)에 결합할 수 있는 나노바디
인 화합물 또는 구조물.
양태 G-18: 양태 G-11 내지 G-17 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체, 또는 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드 그 자체에 비해, 적어도 1.5배, 바람직하게는 적어도 2배, 예컨대 적어도 5배, 예를 들어 적어도 10배, 또는 20배 초과 더 큰 혈청 반감기를 가지는 화합물 또는 구조물.
양태 G-19: 양태 G-11 내지 G-18 중 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체, 또는 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드 그 자체의 각각에 비해, 1시간 초과, 바람직하게는 2시간 초과, 더욱 바람직하게는 6시간 초과, 예컨대 12시간 초과, 또는 심지어 24, 48 또는 72시간 초과 증가된 혈청 반감기를 가지는 화합물 또는 구조물.
양태 G-20: 양태 G-11 내지 G-19 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 약 12시간, 바람직하게는 적어도 24시간, 더욱 바람직하게는 적어도 48시간, 더욱 더 바람직하게는 적어도 72시간 이상; 예를 들어, 적어도 5일(예컨대 약 5 내지 10일), 바람직하게는 적어도 9일(예컨대 약 9 내지 14일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 10일(예컨대 약 10 내지 15일), 또는 적어도 약 11일(예컨대 약 11 내지 16일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 12일(예컨대 약 12 내지 18일 이상), 또는 14일 초과(예컨대 약 14 내지 19일)의 인간에서의 혈청 반감기를 가지는 화합물 또는 구조물.
양태 M-1: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 핵산 또는 이를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현에 의해 수득될 수 있도록 하는 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물을 코딩하는 핵산 또는 뉴클레오티드 서열.
양태 M-2: 양태 M-1에 있어서, 유전적 구조물의 형태인 핵산 또는 뉴클레오티드 서열.
양태 M-3: E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 다가 폴리펩티드를 코딩하는 유전적 구조물의 제조를 위한, 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물을 코딩하는, 양태 M-1에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열의 용도.
양태 M-4: 유전적 구조물이 다가(예컨대 이가) 구조물을 코딩하는, 양태 M-2에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열의 용도.
양태 N-1: 적당한 환경 하에서 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 핵산 또는 이를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현에 의해 수득될 수 있도록 하는 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물을 발현할 수 있고; 양태 M-1 또는 M-2에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 숙주 또는 숙주 세포.
양태 O-1: 적어도 하나의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 또는 양태 M-1 또는 M-2에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 조성물.
양태 O-2: 양태 O-1에 있어서, 약학적 조성물인 조성물.
양태 O-3: 양태 O-1 또는 O-2에 있어서, 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제 및/또는 보조제를 추가로 포함하고, 1개 이상의 추가의 약학적으로 활성인 폴리펩티드 및/또는 화합물을 임의적으로 포함하는 약학적 조성물인 조성물.
양태 P-1: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 핵산 또는 이를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현에 의해 수득될 수 있도록 하는 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 생성시키기 위한 방법으로서, 적어도
a) 적당한 숙주 세포 또는 숙주 유기체 또는 또 다른 적당한 발현 시스템에서 양태 M-1 또는 M-2에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 발현시키는 단계; 및 임의적으로 후속되는
b) 이에 수득되는, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 핵산 또는 이를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현에 의해 수득될 수 있도록 하는 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물을 단리 및/또는 정제하는 단계
를 포함하는 방법.
양태 P-2: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 핵산 또는 이를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현에 의해 수득될 수 있도록 하는 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 생성시키기 위한 방법으로서, 적어도
a) 상기 숙주 또는 숙주 세포가 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 핵산 또는 이를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현에 의해 수득될 수 있도록 하는 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 발현 및/또는 생성시키도록 하는 조건 하에서 양태 N-1에 따른 숙주 또는 숙주 세포를 배양 및/또는 유지시키는 단계; 및 임의적으로 후속되는
b) 이에 수득되는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 핵산 또는 이를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 발현에 의해 수득될 수 있도록 하는 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 배양 및/또는 유지시키는 단계
를 포함하는 방법.
양태 P-3: 적어도 2개 이상의 일가 아미노산 서열 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물 및 예를 들어 하나 이상의 링커를 연결하는 단계를 포함하는, 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 이가 또는 삼가 폴리펩티드의 제조 방법.
양태 P-4: 양태 P-3에 있어서,
a) 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물 (및 예를 들어 하나 이상의 링커 및 자체 공지된 유전적 구조물의 1개 이상의 추가 요소를 코딩하는 핵산)을 코딩하는 양태 M-1에 따른 2개 이상의 핵산 서열을 연결하여, 양태 M-2에 따른 유전적 구조물을 수득하는 단계;
b) 적당한 숙주 세포 또는 숙주 유기체 또는 또 다른 적당한 발현 시스템에서 a)에서 수득된 유전적 구조물을 발현하는 단계, 및 임의적으로 후속되는
c) 이에 수득되는 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 단리 및/또는 정제하는 단계
를 포함하는 방법.
양태 Q-1: hRSV의 단백질 F에 대해 유도된 아미노산 서열을 선별(screening)하는 방법으로서, 적어도
a. 아미노산 서열을 코딩하는 핵산 서열의 세트, 집합체 또는 라이브러리를 제공하는 단계;
b. 바이러스의 단백질의 외피에 결합할 수 있고/있거나 이에 대한 친화도를 가지는, 즉 교차-차단되거나 본 발명의 나노바디
, 예를 들어 서열 번호 60-76, 138-141 및 146-157 중 하나(표 A-4), 또는 본 발명의 적어도 하나의 나노바디
를 포함하는 폴리펩티드 또는 구조물, 예를 들어 서열 번호 77-99, 142-145 및 158-165 중 적어도 1개(표 A-5 참조)를 포함하는 폴리펩티드 또는 구조물을 교차-차단하는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산에 대한 핵산 서열의 상기 세트, 집합체 또는 라이브러리를 선별하는 단계; 및
c. 상기 핵산 서열을 단리한 후, 상기 아미노산 서열을 발현하는 단계
를 포함하는 방법.
양태 R-1: 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, hRSV 감염의 예방 및/또는 치료 방법.
양태 R-2: 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및 천식 중 적어도 하나의 예방 및/또는 치료 방법.
양태 R-3: 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 해당 치료가 필요한 대상에게 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물에 의해 예방 및/또는 치료될 수 있는 적어도 하나의 질환 또는 장애의 예방 및/또는 치료 방법.
양태 R-4: 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 면역요법을 위한 방법.
양태 R-5: hRSV 감염의 예방 및/또는 치료를 위한 약학적 조성물의 제조; 및/또는 양태 R-1 내지 R-4에 따른 방법들 중 하나 이상에서의 사용을 위한, 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물의 용도.
양태 R-6: 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및 천식 중 적어도 하나의 예방 및/또는 치료를 위한, 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물.
양태 S-1: 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 및/또는 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드의 부분 또는 단편.
양태 S-2: 양태 S-1에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원성 II에 특이적으로 결합할 수 있고/있거나, hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 부분 또는 단편.
양태 S-3: 양태 S-1 내지 S-2 중 임의의 양태에 있어서, 1000 nM 내지 1 nM 이하, 바람직하게는 100 nM 내지 1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 10 nM 내지 1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 부분 또는 단편.
양태 S-4: 양태 S-2 내지 S-4 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 부분 또는 단편.
양태 S-5: 양태 S-2 내지 S-4 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 부분 또는 단편.
양태 S-6: 양태 S-1 내지 S-5 중 임의의 양태에 따른 하나 이상의 부분 또는 단편을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결된, 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위를 임의적으로 추가로 포함하는 화합물 또는 구조물.
양태 S-7: 양태 S-6에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 아미노산 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 S-8: 양태 S-6 또는 S-7 중 임의의 양태에 있어서, 상기 하나 이상의 링커가 존재하는 경우, 이는 1개 이상의 아미노산 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 S-9: 양태 S-1 내지 S-5 중 임의의 양태에 따른 부분 또는 단편, 또는 양태 S-6 내지 S-8 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물을 코딩하는 핵산 또는 뉴클레오티드 서열.
양태 S-10: 양태 S-1 내지 S-5 중 임의의 양태에 따른 적어도 하나의 부분 또는 단편, 양태 S-6 내지 S-8 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 S-9에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 조성물.
양태 T-1: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 또는 양태 8-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
의 유도체.
양태 T-2: 양태 T-1에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합할 수 있고/있거나 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 유도체.
양태 T-3: 양태 T-1 내지 T-2 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s-1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 유도체.
양태 T-4: 양태 T-2 내지 T-3 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 유도체.
양태 T-5: 양태 T-2 내지 T-4 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 유도체.
양태 T-6: 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물 또는 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드의 유도체.
양태 T-7: 양태 T-6에 있어서, hRSV의 단백질 F 상의 항원 부위 II에 특이적으로 결합할 수 있고/있거나 hRSV의 단백질 F에의 결합을 위해 시나지스
와 경쟁하는 유도체.
양태 T-8: 양태 T-6 내지 T-7 중 임의의 양태에 있어서, 100 nM 내지 0.1 nM 이하, 바람직하게는 10 nM 내지 0.1 nM 이하, 더욱 바람직하게는 1 nM 내지 0.1 nM 이하의 해리 상수(KD)로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 유도체.
양태 T-9: 양태 T-6 내지 T-8 중 임의의 양태에 있어서, 104 M-1s-1 내지 약 107 M-1s-1, 바람직하게는 105 M-1s- 1내지 107 M-1s-1, 더욱 바람직하게는 약 106 M-1s-1 이상의 Kon 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 유도체.
양태 T-10: 양태 T-6 내지 T-9 중 임의의 양태에 있어서, 10-2 s-1 (t1 /2=0.69 s) 내지 10-4 s-1(t1 /2가 다수일인 근비가역성 복합체가 제공됨), 바람직하게는 10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만, 더욱 바람직하게는 5×10-3 s-1 내지 10-4 s-1, 또는 그 미만의 koff 속도로 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합할 수 있는 유도체.
양태 T-11: 양태 T-6 내지 T-10 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, RSV 균주 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 10 pM 내지 1000 pM, 바람직하게는 10 pM 내지 250 pM, 더욱 바람직하게는 50 pM 내지 200 pM 이하의 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 유도체.
양태 T-12: 양태 T-6 내지 T-11 중 임의의 양태에 있어서, 예를 들어, hRSV 롱 상에서의 마이크로중화 검정(예컨대 예를 들어 실시예 6에 기재됨)으로 측정할 때 시나지스
로 수득된 IC50값에 비해, 적어도 동일한, 바람직하게는 더 양호한, 적어도 10배 더 양호한, 바람직하게는 20배 더 양호한, 더욱 더 바람직하게는 50배 더 양호한, 더욱 더 바람직하게는 60, 70, 80배 또는 그 이상 더 양호한 IC50 값으로 hRSV를 중화할 수 있는 유도체.
양태 T-13: 양태 T-1 내지 T-12 중 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체, 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물 그 자체, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물 각각의 반감기보다, 적어도 1.5배, 바람직하게는 적어도 2배, 예컨대 적어도 5배, 예를 들어 적어도 10배, 또는 20배 이상 더 큰 혈청 반감기를 가지는 유도체.
양태 T-14: 양태 T-1 내지 T-13 중 임의의 양태에 있어서, 상응하는 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열 그 자체, 또는 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
그 자체, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드 그 자체, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물 그 자체, 또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물 각각에 비해, 1시간 그 자체, 바람직하게는 2시간 그 자체, 더욱 바람직하게는 6시간 그 자체, 예컨대 12시간 그 자체, 또는 심지어 24, 48 또는 72시간 그 자체 초과 더 증가된 큰 반감기를 가지는 유도체.
양태 T-15: 양태 T-1 내지 T-14 중 임의의 양태에 있어서, 적어도 약 12시간, 바람직하게는 적어도 24시간, 더욱 바람직하게는 적어도 48시간, 더욱 더 바람직하게는 적어도 72시간 이상; 예를 들어, 적어도 5일(예컨대 약 5 내지 10일), 바람직하게는 적어도 9일(예컨대 약 9 내지 14일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 10일(예컨대 약 10 내지 15일), 또는 적어도 약 11일(예컨대 약 11 내지 16일), 더욱 바람직하게는 적어도 약 12일(예컨대 약 12 내지 18일 이상), 또는 14일 초과(예컨대 약 14 내지 19일)의 인간에서의 혈청 반감기를 가지는 유도체.
양태 T-16: 양태 T-1 내지 T-15 중 임의의 양태에 있어서, 페그화된 유도체인 유도체.
양태 T-17: 양태 T-1 내지 T-16 중 임의의 양태에 따른 하나 이상의 유도체를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 하나 이상의 링커를 통해 연결된, 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위를 임의적으로 추가로 포함하는 화합물 또는 구조물.
양태 T-18: 양태 T-17에 있어서, 상기 하나 이상의 다른 기, 잔기, 부분구조 또는 결합 단위가 아미노산 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 T-19: 양태 T-17 또는 T-18 중 임의의 양태에 있어서, 상기 하나 이상의 링커가 존재하는 경우, 이는 1개 이상의 아미노산 서열인 화합물 또는 구조물.
양태 T-20: 양태 T-1 내지 T-16 중 임의의 양태에 따른 유도체, 또는 양태 T-17 내지 T-19 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물을 코딩하는 핵산 또는 뉴클레오티드 서열.
양태 T-21: 양태 T-1 내지 T-16 중 임의의 양태에 따른 적어도 하나의 유도체, 양태 T-17 내지 T-19 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 또는 양태 T-20에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 조성물.
양태 U-1: 유효량의 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 양태 O-1 내지 O-3 중 임의의 양태에 따른 조성물을 투여하는 방법으로서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 이를 포함하는 조성물을 폐 조직에 투여하는 단계를 포함하는 방법.
양태 U-2: 양태 U-1에 있어서, 흡입기, 비강내 전달 장치 또는 에어로졸을 사용함으로써 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 이를 포함하는 조성물을 투여하는 방법.
양태 U-3: 양태 U-1 또는 U-2 중 임의의 양태에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 이를 포함하는 조성물의 적어도 5%, 바람직하게는 적어도 10%, 20%, 30%, 40%, 더욱 바람직하게는 적어도 50%, 60%, 70%, 및 더욱 더 바람직하게는 적어도 80% 이상이 폐 조직 내에서 적어도 24시간, 바람직하게는 적어도 48시간, 더욱 바람직하게는 적어도 72시간 동안 안정한 방법.
양태 U-4: 양태 U-1 내지 U-3 중 임의의 양태에서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 이를 포함하는 조성물을 순수 형태로, 즉 액체 또는 건조 분말일 때 적용하는 방법.
양태 U-5: 양태 U-1 내지 U-3 중 임의의 양태에서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 이를 포함하는 조성물을 적어도 1개의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및 폐 전달에 적당한 담체를 포함하는 조성물 또는 제형으로서 폐 조직에 투여하는 방법.
양태 U-6: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및 폐 전달에 적당한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
양태 U-7: 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물의 폐 전달에 적당하고/하거나, 상기 성분들을 포함하는 조성물에 사용하기에 적당한 약학적 장치.
양태 U-8: 양태 U-7에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물을 포함하는 액체(예를 들어, 미세 고체 입자 또는 소적의 현탁액)용 흡입기인 약학적 장치.
양태 U-9: 양태 U-7에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물을 포함하는 에어로졸인 약학적 장치.
양태 U-10: 양태 U-7에 있어서, 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물을 포함하는 건조 분말 흡입기인 약학적 장치.
양태 U-11: 해당 필요가 있는 대상의 폐 조직에 약학적으로 활성인 양의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, hRSV 감염의 예방 및/또는 치료 방법.
양태 U-12: 해당 필요가 있는 대상의 폐 조직에 약학적으로 활성인 양의 양태 A-1 내지 A-29, C-1 내지 C-38 및 W-1 내지 W-38 중 임의의 양태에 따른 아미노산 서열, 양태 B-1 내지 B-18, D-1 내지 D-38 및 X-1 내지 X-38 중 임의의 양태에 따른 나노바디
, 양태 E-1 내지 E-271 중 임의의 양태에 따른 폴리펩티드, 양태 G-1 내지 G-20 중 임의의 양태에 따른 화합물 또는 구조물, 및/또는 양태 F-1 내지 F-4 중 임의의 양태에 따른 일가 구조물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및 천식의 예방 및/또는 치료 방법.
양태 V-1: 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, hRSV 감염의 예방 및/또는 치료 방법.
양태 V-2: hRSV의 결합 및/또는 중화를 위한, 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물의 용도.
양태 V-3: hRSV의 상이한 균주의 결합 및/또는 중화를 위한, 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물의 용도.
양태 V-4: 바이러스의 하나 이상의 도피 돌연변이체의 결합 및/또는 중화를 위한, 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물의 용도.
양태 V-5: 양태 V-1 내지 V-4 중 임의의 양태에 있어서, 다가 폴리펩티드가 이가인 방법 또는 용도.
양태 V-6: 양태 V-1 내지 V-4 중 임의의 양태에 있어서, 다가 폴리펩티드가 삼가인 방법 또는 용도.
양태 V-7: 양태 V-1 내지 V-4 중 임의의 양태에 있어서, 상기 다가 폴리펩티드가 양태 U-1 내지 U-5 및/또는 U-11 내지 U-12의 방법 중 임의의 방법에 따라 투여되는 방법 또는 용도.
양태 V-8: 해당 치료가 필요한 대상에게 약학적으로 활성인 양의 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 폴리펩티드 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, hRSV 바이러스에 의한 감염의 예방 및/또는 치료 방법.
양태 V-9: 양태 V-8에 있어서, 다가 화합물 또는 구조물이 표 A-5(서열 번호 77-99, 138-141 및 146-157)로부터 선택되는 방법.
양태 V-10: 양태 V-8 또는 V-9 중 임의의 양태에 있어서, 하나 이상의 RSV 도피 돌연변이체에 의한 감염을 치료하는 방법.
양태 V-11: 양태 V-10에 있어서, 도피 돌연변이체가 항원 부위 II에 대해 특이적인 도피 돌연변이체인 방법.
양태 V-12: RSV의 하나 이상의 상이한 도피 돌연변이체의 결합 및/또는 중화를 위한, 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 화합물 또는 구조물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물의 용도.
양태 V-13: 양태 V-12에 있어서, 도피 돌연변이체가 항원 부위 II에 대해 특이적인 도피 돌연변이체인 용도.
양태 V-14: 양태 V-8 또는 V-9 중 임의의 양태에 있어서, hRSV의 하나 이상의 균주에 의한 감염을 치료하는 방법.
양태 V-15: 양태 V-14에 있어서, RSV 균주가 롱인 방법.
양태 V-16: 양태 V-14에 있어서, RSV 균주가 A-2인 방법.
양태 V-17: 양태 V-14에 있어서, RSV 균주가 B-1인 방법.
양태 V-18: 양태 V-14에 있어서, 다가 폴리펩티드가 RSV 균주 롱 및 A-2에 결합하고/하거나 이를 중화하는 방법.
양태 V-19: 양태 V-14에 있어서, 다가 폴리펩티드가 RSV 균주 롱 및 B-1에 결합하고/하거나 이를 중화하는 방법.
양태 V-20: 양태 V-14에 있어서, 다가 폴리펩티드가 RSV 균주 B-1 및 A-2에 결합하고/하거나 이를 중화하는 방법.
양태 V-21: 양태 V-14에 있어서, 다가 폴리펩티드가 RSV 균주 롱, A-2 및 B-1에 결합하고/하거나 이를 중화하는 방법.
양태 V-22: hRSV의 상이한 균주의 결합 및/또는 중화를 위한, 양태 E-7 내지 E-261 중 임의의 양태에 따른 다가 화합물 또는 구조물, 및/또는 이를 포함하는 약학적 조성물의 용도.
양태 V-23: 양태 V-22에 있어서, RSV의 균주가 롱 및 A-2인 용도.
양태 V-24: 양태 V-22에 있어서, RSV의 균주가 롱 및 B-1인 용도.
양태 V-25: 양태 V-22에 있어서, RSV의 균주가 A-1 및 B-1인 용도.
양태 V-26: 양태 V-22에 있어서, RSV의 균주가 롱, A-2 및 B-1인 용도.
[
실시예
]
실시예
1: 면역화
2마리의 라마(156 및 157)를 hRSV FTM -(막 앵커가 없는 형태의 융합 단백질, 70 kDa; 문헌 [Corrall T. et al. 2007, BMC Biotechnol. 7: 17])로 6회 부스트하여, 표준 프로토콜에 따라 면역화하였다. 부스트 6 후 7일째 및 부스트 6 후 10일째에 상기 동물들로부터 혈액을 수집하였다.
2마리의 라마(212 및 213)를 1 mg의 RNA-불활성화 RSV 균주 롱 A(하이테스트(Hytest), 터쿠 핀랜드(Turku Finland); #8RSV79)로 목에 근육내 면역화한 후, 격주 섭생법(regime)으로 0.5 mg RSV로 4회 부스트하였다. 2마리의 라마(206 및 207)를 1 mg의 RNA-불활성화 RSV 균주 롱 A로 근육내 면역화하고, 2주 후 0.25 mg의 RSV로 부스트한 후, 격주 섭생법으로 50 μg의 재조합 hRSV FTM-NN(막 앵커가 없는 형태의 융합 단백질, 70 kDa: 문헌[Corral et al. 2007; BMC Biotechnol. 7: 17])로 3회 부스트하였다. 모든 면역화를 위해, 항원을 보조제로서 스티뮨(Stimune)을 가지는 오일-PBS 유화액으로서 제조하였다. 4차 면역화 후 4일째 및 10일째에 상기 동물들로부터 혈액을 수집하였고, 한편 4차 면역화 후에 4일째에 림프절 검시를 취하였다. 나노클론(Nanoclone) 절차를 위해, 라마 206 및 207로부터 최종 부스트 후 11일째에 100 mL의 혈액을 수집하였다.
실시예
2: 라이브러리 구성
제조업자의 지시서에 따라 피콜-하이파크(Ficoll-Hypaque)를 이용하여 혈액 샘플로부터 말초혈 단핵 세포를 제조하였다. 그 다음, 상기 세포 및 림프절 바우 세포(bow cell)로부터 총 RNA를 추출하여, RT-PCR용 출발 물질로 사용하여, 나노바디
코딩 유전자 단편을 증폭하였다. 이 단편을, LacZ 프로모터, 콜리파지 pIII 단백질 코딩 서열, 암피실린 또는 카르베니실린에 대한 내성 유전자, 다중클로닝 부위 및 진3(gen3) 리더 서열을 포함하는 pUC119로부터 유래된 파지미드 벡터 내로 클로닝하였다. 나노바디
코딩 서열과 골격을 이루어, 벡터는 C-말단 c-myc 태그 및 (His)6 태그에 대해 코딩하였다. 표준 방법에 따라 파지를 제조하여, 추가 사용을 위해 4℃에서 저장하였고, 이로써 파지 라이브러리 156, 157, 206, 207, 212 및 213을 제조하였다.
실시예
3:
hRSV
의 F-단백질에 대한
나노바디
선택
RSV의 융합 단백질을 인식하는 나노바디
를 동정하기 위해, FTM-NN(막 앵커가 없는 형태의 롱 융합 단백질, 70 kDa; 문헌[Corral T. et al. 2007, BMC Biotechnol. 7: 17]) 상에서의 선택을 위해 라이브러리 156, 157, 206, 207, 212 및 213을 사용하였다. FTM-단백질(25 ng/웰)을 눈크 맥시소프(Nunc Maxisorp) ELISA 플레이트에 고정화하였다. 대조군에 0 μg/ml FTM-을 포함시켰다. 제1 및 제2 라운드의 선택에서, 트립신 및 시나지스
(팔리비주맙(Palivizumab), 메드이뮨(MedImmnune), 문헌[Zhao and Sullender 2005, J. Virol. 79: 3962]에 기재된 인간화 단클론 항체)를 이용하여, 결합된 파지를 FTM-으로부터 용출하였다. 레미케이드(Remicade)(인플릭시맙(Infliximab), 항-TNF; 센토코르(Centocor))를 시나지스
에 대한 대조군으로 사용하였다. RSV 상의 시나지스
결합 부위에 특이적으로 결합하는 나노바디
를 동정하기 위해, 100 몰 과량의 시나지스
를 사용하였다. 시나지스
로 용출된, 제1 라운드 선택으로부터의 산출물을 2회 라운드 선택을 위해 사용하였다.
또한, 불활성화 hRSV 균주 롱(하이테스트 #8RSV79)을 이용하여 선택을 행하였다. 0 μg/ml 항원을 가지는 대조군 다음에, FTM-NN 단백질(25 ng/웰) 또는 RSV(5 내지 50 μg/웰)을 눈크 맥시소프 ELISA 플레이트에 고정화하였다. 1회 라운드의 선택에서, 트립신, 시나지스
(팔리비주맙, 문헌[Zhao and Sullender 2005, J. Virol. 79: 396]에 기재된 인간화 단클론 항체), 또는 101F Fab(제WO 06/050280호, 인간화 단클론 항체)를 이용하여, 결합된 파지를 FTM-NN로부터 용출하였다. 시나지스
또는 101F Fab로 용출된 1회 라운드 선택으로부터의 산출물을, 용출을 위한 뉴맥스 Fab(모타비주맙(Motavizumab) 또는 MEDI-524, 팔리비주맙으로부터 유래된 제3세대 인간화 단클론 항체 산물; 제WO 06/050166호), 시나지스
또는 101 F Fab을 이용하여, 2회 라운드 선택을 위해 사용하였다. 레미케이드(인플릭시맙, 항-TNF, 제WO 09/068625호 참조)를 시나지스
에 대한 대조군으로 사용하였고, 한편 옴니타르그(Omnitarg) Fab(항-Her2; 인-하우스 생산)는 뉴맥스 Fab 및 101F Fab에 대한 대조군으로 작용하였다. RSV F-단백질 상의 항원 부위 II 또는 IV-VI 에피토프에 특이적으로 결합하는 나노바디
를 동정하기 위해, 100몰 과량의 시나지스
, 뉴맥스 Fab 또는 101F Fab를 사용하였다. 항원 부위 IV-VI에 대해 특이적인 나노바디
를 수득하기 위해, 2개의 비오티닐화 펩티드, 즉 첫 번째로는 101F 결합 에피토프(문헌[Wu et al. 2007, J. Gen. Virol. 88: 2719-2723])를 포함하는 F-단백질(롱)(압젠트(Abgent), 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재)의 잔기 422-436을 포함하는 펩티드, 및 두 번째로는 Mab19(HWSISKPQ-PEG4-K-비오틴)(문헌[Chargelegue et al. 1998, J. Virol. 72: 2040-2056])의 에피토프의 펩티드 모방체를 이용하여, 제2 라운드 선택을 수행하였다.
두 라운드 선택 모두의 산출물을 풍부 인자(enrichment factor)(대조군 대비 용출액 내 존재하는 파지)에 대해 분석하였다. 이 매개변수에 기초하여, 추가 분석을 위해 최량의 선택을 선택하였다. 개별 콜로니를 선택하여 96 딥 웰 플레이트(1 mL 체적)에서 성장시키고, 나노바디
발현을 위해 IPTG를 첨가하여 유도하였다. 주변세포질 추출물(체적: ~80 μl)을 표준 방법에 따라 제조하였다.
RSV 중화 검정으로 선택된 클론을 시험하기 위해, 10 ml 배양액으로부터의 주변세포질 추출물을, IMAC 파이팁스(IMAC PhyTips)(파이넥서스 인코포레이티드(Phynexus Inc.), 미국 캘리포니아주 산호세 소재)를 이용함으로써 부분 정제하였다. 여기에서, 800 μl의 주변세포질 추출물을 고정화 금속 친화도 크로마토그래피 수지로 예비충전한 파이팁스 200+ 칼럼에 로딩한 후, 30 μl의 0.1 M 글리신-HCl/0.15M NaCl(pH 3) 중 His-태깅 나노바디
를 용출하였고, 그 후 용출액을 5 μl의 0.5 M 트리스-HCl(pH 8.5)로 중화하였다.
실시예
4: 나노클론 기술을 이용한
RSV
의
F
TM
-
NN
에의
나노바디
선택
제조업자의 지시서에 따라 피콜-하이파크를 이용하여 혈액 샘플로부터 말초혈 단핵 세포(PBMC)를 제조하였다. 자체 표면에 중쇄 항체를 발현하는 항원 특이적 B-세포를 FACS 분류를 통해 PBMC로부터 단리하였다(나노클론 기술의 설명에 대해, 제WO 06/079372호를 참조한다). 이에 대해, FTM-NN 단백질을 알렉사 플루오르(Alexa Fluor) 488 염료(인비트로젠(Invitrogen), 미국 캘리포니아주 캐리스배드 소재; cat. nr. A20000)로 표지화한 후, 탈염하여, 제조업자의 지시서에 따라 잔류 비접합 알렉사 플루오르 488 염료를 제거하였다.
라마의 예비면역(백그라운드 대조군) 및 면역 PBMC를, 형광 염료 접합 IgG1(통상의 중쇄+경쇄 면역글로불린), IgG2- 및 IgG3(중쇄 면역글로불린 계열) 특이적 마우스 단클론 항체, 형광 표지 DH59B 항체(CD172a)(VMRD Inc. 미국 워싱턴주 풀먼 소재; Cat No. DH59B; 문헌[Davis et al. 1987, Vet. Immunol. Immunopathol. 15: 337-376]) 및 알렉사 488 표지 항원으로 염색하였다. TOPRO3을 생/사멸 세포 구분 염료로서 포함시켰다. IgG1+ B-림프구, 단핵구, 호중구 및 사멸 세포를 내보내고, 이에 따라 분류로부터 거부하였다. 항원-특이적(A488+) IgG2- 또는 IgG3 양성 B 세포는 RT-PCR 완충액을 포함한 별도의 PCR 플레이트 웰 내로 개별 분류된 단일 세포였다.
라마 206에 대해, 총량의 IgG2/IgG3 양성 생 세포의 1.9% 항원 양성 세포를 수득하였고(예비 면역 참조 샘플 내 1.0%), 라마 207에 대해서는 4.2% 양성 세포를 수득하였다(예비 면역 참조 샘플 내 0.7%). 중쇄 가변 영역 유전자를 단일-세포 RT-PCR 및 네스팅된 PCR에 의해 이들 B-세포로부터 직접 증폭시켰다. 후속하여, PCR 산물을, LacZ 프로모터, 암피실린 또는 카르베니실린에 대한 내성 유전자, 다중클로닝 부위 및 gen3 리더 서열을 포함하는 pUC119로부터 유도된 TOPO-적응화 발현 벡터 내로 클로닝하였다. 나노바디
코딩 서열과 골격을 이루어, 벡터는 C-말단 c-myc 태그 및 (His)6 태그에 대해 코딩하였다. 클로닝된 구조물을 고산출 전기영동을 통해 TOP10 에쉐리키아 콜라이(Escherichia coli) 세포에서 형질전환하였다. 단일 클론을 96 딥 웰 플레이트(1 ml 체적)에서 성장시켜, 나노바디
발현을 위해 IPTG를 첨가하여 유도하였다. 주변세포질 추출물(체적: ~80 μl)을 삼투압 쇼크를 통해 제조하여, 결합 ELISA로 FTM-에의 결합에 대해 분석하였다.
간단히 말해, 2 μg/ml의 FTM-를 맥시소프(Maxisorp) 마이크로티터 플레이트(눈크)에 직접 고정화하였다. PBS 중 4% 마블(Marvel)을 이용하여 자유 결합 부위를 차단하였다. 그 다음, 100 μl 2% 마블 PBST 중 상이한 클론의 나노바디
를 함유하는 10 μl의 주변세포질 추출물이 고정화 항원에 결합하도록 하였다. 인큐베이션 및 세정 단계 후, (주변세포질 분획에 대해) 토끼-항-VHH 2차 항체를 이용하여 나노바디
를 나타냈다. 세정 단계 후, 주변세포질 분획 내 나노바디
를 HRP-접합 염소-항-토끼 항체로 검출하였다. 나노바디
를 주입하지 않은 대조군과 대비하여, OD 값에 기초하여 결합 특이성을 결정하였다.
총체적으로, 52개의 클로닝된 VHH로부터 8 양성 FTM-NN 결합물질(라마 206로부터 4개, 라마 207로부터 4개)을 수득하였다.
실시예
5: 항원 부위
II
또는
IV
-
VI
에 결합하는
나노바디
에 대한 선별
단일 나노바디
를 함유하는 주변세포질 추출물을, 알파 스크린(Alphascreen)
검정(퍼킨 엘머; 미국 메사츄세츠주 왈탐 소재)(문헌[Garcia-Barreno et al. 1989, J. Virol. 63: 925-932; Lopeze et al. 1998, J. Virol. 72: 6922-6928])을 이용하여, 항원 부위 II 또는 IV-VI에의 결합에 대해 분석하였다. 이 설정에서, FTM-NN은 시나지스
및 101F의 Fab에 의해 동시에 결합되며, 이는 각각의 항원 부위 II 및 IV-VI의 결합을 간섭하는 나노바디
가 검출되도록 한다. 여기에서, 주변세포질 추출물을 FTM-NN 단백질(0.3 nM)에 첨가하여, 15분 동안 인큐베이션하였다. 후속하여, 비오티닐화 Fab 시나지스
(0.3 nM) 및 Fab 101F 접합 어셉터 비드(10 μg/ml)를 첨가하여, 이 혼합물을 1시간 동안 인큐베이션하였다. 마지막으로, 스트렙타비딘으로 코팅된 도너 비드(10 μg/ml)를 첨가하였고, 1시간 인큐베이션 후에, 플레이트를 엔비젼(Envision) 마이크로플레이트 리더로 판독하였다. 주변세포질 추출물을 25배 희석하였고, 이는 최종 농도 40 nM에 대략 상응한다. 시나지스
의 공지 경쟁물질, 맵스 18B2(아르젠(Argene), 프랑스 바리헤스 소재; 18042 N1902) 및 2F7(압캄(Abcam), 영국 캠브리지 소재; ab43812)의 적정에 의해 검정을 입증화하였다. 또한, 시나지스
Fab, 뉴맥스(뉴맥스) Fab 및 101F Fab를 분석하였고, 이 때 뉴맥스 Fab가 최저 IC50 값(8.6 E-11 M)을 가졌고, 그 후 시나지스
Fab (5.97 E-10 M) 및 101F Fab (1.12 E-9 M)가 이어진다. 주변세포질 추출물(1/25배 희석)의 선별을 위해, 뉴맥스 Fab (40 nM) 및 101F Fab (40 nM) 모두가 양성 대조군으로 사용되었고, 한편 이와 관련이 없는 주변세포질 추출물은 음성 대조군으로 작용하였다. 음성 대조군 대비 75% 초과로 알파스크린
에서 FTM -NN 단백질에의 결합을 간섭하는 클론을 히트(hit)로서 동정하였다. 총 6마리의 라마로부터 유래된 1856개 클론 중에서 총 341개 히트를 동정하였으나, 이들 대부분은 라마 206 및 207로부터의 것이었다. 또한, 나노클론 선택으로부터 수득된 8개의 클론 중, 3개 클론이 경쟁을 나타냈다.
경쟁물질의 바른 항원 부위(II 또는 IV-VI)를, FTM-NN 단백질(1 μg/ml)에의 결합에 대한, 비오티닐화 시나지스
Fab(2 nM) 또는 비오티닐화 101F Fab(3 nM)를 이용한 경쟁 ELISA에 의해 디콘볼루션(deconvolution)하였다. 간략히 말해, FTM -NN 단백질을 맥시소프 마이크로티터 플레이트(눈크)에 고정화하고, PBS 중 4% 마블을 이용하여 자유 결합 부위를 차단하였다. 주변세포질 추출물을 1/10으로 희석하고, 비오티닐화 Fab과 혼합한 후, 고정화된 FTM-NN 단백질에 결합시켰다. 다른 바이러스 코트 단백질에 대해 선택된 대조군 주변세포질 분획을 포함시켰다. 경쟁 항체를 나노바디
의 존재 또는 부재 하에 고정화 항원에 결합시켰다. 인큐베이션 및 세척 단계 후, 엑스트라비딘(Extravidin)-HRP 접합 2차 항체(시그마-알드리히(Sigma-Aldrich), 미국 미주리주 세인트루이스 소재; Cat. No. E2886)를 통해 검출을 행하였다. 나노바디
를 투입하지 않은 대조군과 대비하여, OD 값에 기초하여 결합 특이성을 결정하였다.
모든 히트를 서열 분석하고, 그것의 CDR3 서열에 따라 계열로 분류하였다(PCT 출원 제PCT/EP2009/056975호(발명의 명칭: "Amino acid sequences directed against envelope proteins of a virus and polypeptides comprising the same for the treatment of viral diseases" Ablynx N.V. 2009년 6월 5일 출원)의 표 C-4 및 A-4 참조).
실시예
6:
RSV
중화
나노바디
에 대한
선별
6개 모두의 hRSV 라이브러리로부터 163개의 특유의 서열(160개는 파지 라이브러리로부터 동정되고, 3개는 나노클론으로부터 동정됨)을 부분 정제 단백질로서 마이크로중화 검정으로 RSV 롱 중화능에 대해 분석하였다. Hep2 세포를, 페니실린 및 스트렙토마이신(각기 100 U/ml 및 100 μg/ml)으로 보충된 10% 우태 혈청(FCS)을 포함하는 DMEM 배지 중 96-웰 플레이트 내에 1.5×104 세포/웰의 농도로 파종하고, 5% CO2 대기 중 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. 사용한 바이러스 스톡을 hRSV 균주 롱, 롱 LM-2 및 롱 M2(상호 혼용됨)로 지칭되고, F 단백질의 서열이 P1256S 또는 M22643에 상응하는 ATCC VR-26으로부터 유래된 바이러스 스톡이다. 바이러스 스톡은 ATCC 스톡으로부터 수회 계대된 것이다. F-단백질의 서열은 P12568과 동일한 것으로 확인되었다(실시예 9 참조). 표준량의 hRSV 균주 롱 LM-2를, 37℃에서 30분 동안 총 체적이 50 μl인 고정 체적의 파이팁스(Phytips) 정제 나노바디
(20 μl)의 일련의 희석액과 함께 예비-인큐베이션하였다. Hep2 세포의 배지를 프리믹스로 교체하여, 2시간 동안 감염되도록 하였고, 그 후 0.1 ml의 검정 배지를 부가하였다. 2.5% 우태 혈청, 및 페니실린 및 스트렙토마이신(각기 100 U/ml 및 100 μg/ml)으로 보충된 DMEM 배지 중에서 검정을 수행하였다. 세포를 5% CO2 대기 중에서 37℃에서 추가 72시간 동안 인큐베이션한 후, 세포를 PBS 중 0.05% 트윈(Tween)-20으로 2회 세정하고, PBS 단독으로 1회 세정한 후, 세포를 4℃에서 20분 동안 PBS(100 μl/웰) 중 80% 냉 아세톤(시그마-알드리히, 미국 미주리주 세인트루이스 소재)으로 고정화하고, 완전히 건조되도록 하였다. 그 다음, 세포 표면 상의 F-단백질의 존재를 ELISA형 검정으로 검출하였다. 이에 더해, 고정된 Hep2 세포를 실온에서 1시간 동안 PBS 중 2% 소 혈청 알부민(BSA) 용액으로 블록킹한 후, 시나지스
(2 μg/ml)와 함께 1시간 동안 인큐베이션하였다. 검출을 위해, 염소 항-인간 IgG, Fcγ 단편 특이적-HRP(잭슨 이뮤노리서치(Jackson immunoResearch), 미국 펜실베니아주 웨스트그로브 소재)를 사용한 후, ELISA를 표준 절차에 따라 전개하였다.
선별에서 양성 대조군으로 포함되었던, 사전 동정된 RSV 중화 나노바디
191D3(서열 번호 9) 및 192C4(서열 번호 11)에 부가하여, 5개의 항원 부위 II 클론은 강한 RSV 롱 중화 활성을 나타냈다: 1E4(207D1으로도 지칭됨; 서열 번호 1), 7B2(서열 번호 2), NC23(서열 번호 3), 및 동일 계열의 15H8(서열 번호 4) 및 NC41(서열 번호 5)의 2 구성원(표 A-1). 항원 부위 IV-VI 특정 나노바디
중 어느 것도 hRSV 롱 LM-2 균주에 대한 매우 약한 중화 활성 이상의 활성을 나타내지 않았다.
실시예
7:
hRSV
나노바디
의 생산
선별에서 양성 대조군으로서 포함된, 사전 동정된 RSV 중화 나노바디
191D3(서열 번호 9) 및 191E4(서열 번호 10)에 부가하여, 상기 선별로부터 선택되는 5개의 신규 중화 나노바디
(1E4, 7B2, 15H8, NC23 및 NC41)뿐만 아니라, 항원 부위 IV-VI 나노바디
(15B3, 서열 번호 7)를 발현시켜, 정제하고, 추가 특징분석하였다. 이에 더해, 코딩 서열을 LacZ 프로모터, 카나마이신에 대한 내성 유전자, 다중클로닝 부위 및 OmpA 시그널 펩티드 서열을 포함하는 pUC119로부터 유래된 발현 벡터 내에 재클로닝하였다. 나노바디
코딩 서열과 골격을 이루어, 벡터는 C-말단 c-myc 태그 및 (His)6 태그에 대해 코딩하였다.
배양액 체적 1 L에서 c-myc, His6-태깅 단백질로서 E. 콜라이 TG-1 세포 내에 발현이 일어났다. 1 mM IPTG 첨가에 의해 발현을 유도하였고, 이를 37℃에서 3시간 동안 계속하였다. 세포 배양액을 회전시킨 후, 펠렛의 동결-해동 및 dPBS 중의 재현탁에 의해 주변세포질 추출물을 제조하였다. 이 추출물을 히스트렙(Histrap) FF 조질(crude) 칼럼(GE 헬쓰케어(GE healthcare), 스웨덴 웁살라 소재)을 이용하여 고정화 금속 친화도 크로마토그래피(IMAC)를 위한 출발 물질로 사용하였다. 나노바디
를, 250 mM 이미다졸을 이용하여 칼럼으로 용출한 후, dPBS로 탈염하였다.
실시예
8:
hRSV
나노바디
의 특징분석
ELISA
에서의 F-단백질에의 결합
정제된 모든 나노바디
는 FTM-NN 단백질 및 hRSV에의 결합 ELISA에서 F-단백질에 결합하는 것으로 나타났다. hRSV 결합에 대한 결과가 표 B-1에 나와 있다. 간략히 말해, 1 μg/ml의 FTM-NN 또는 5 μg/ml hRSV(하이테스트, 핀란드 터쿠 소재)를 맥시소프 마이크로티터 플레이트에 직접 고정화하였다. 자유 결합 부위를 1% 카제인으로 차단하였다. 정제된 나노바디
의 일련의 희석액들을 1시간 동안 항원에 결합하도록 하였다. 나노바디
결합을 토끼-항-VHH 2차 항체를 이용하여 나타냈고, HRP-접합 염소-항-토끼 항체를 이용하여 최종 검출을 행하였다. 비관련 나노바디
대조군과 대비하여, OD 값에 기초하여 결합 특이성을 결정하였다.
비아코어에서의
F-단백질에의 결합
정제된 나노바디
의 정확한 결합 친화도를 결정하기 위해, FTM-NN 단백질에 대한 표면 플라즈몬 공명 분석을 이용하여 동역학 분석을 수행하였다. 센서칩(Sensorchip) CM5의 예비인큐베이션을 위해, 10 μg/ml의 hRSV FTM- 단백질을 120초 동안 방치하였다. 아민 커플링에 의한 고정화를 위해, 활성화에 EDC/NHS를 사용하였고, 탈활성화를 위해 에탄올아민 HCl을 사용하였다(비아코어, 아민 커플링 키트). 100 nM 시나지스
를 첨가한 후, 100 nM의 나노바디
를 첨가하였다. 비아코어 T100 소프트웨어 v1.1을 이용하여 1:1 상호작용 모델(랭뮤어(Langmuir) 결합 모델)을 피팅함으로써 오프(off) 속도의 평가를 수행하였다. off 속도 및 친화도 상수가 표 B-1에 나와 있다.
시나지스
와의
경쟁
FTM-NN에 결합하기 위해 시나지스
Mab 또는 비오티닐화 시나지스
Fab와 경쟁하는 정제된 나노바디
의 능력을, 본질적으로 실시예 5에 기재된 절차에 따라 경쟁 ELISA로 결정하였다. 도 1은, 정제된 나노바디
가 FTM-NN에 결합하기 위해 비오티닐화 시나지스
Fab와 경쟁하는 경쟁 ELISA의 한 대표적 예를 보여준다. EC50 값이 표 B-1에 요약되어 있다.
실시예
9: 구분된
hRSV
균주의
시험관내
마이크로중화
상이한 A형 및 B형 RSV 균주의 중화에 있어 정제된 나노바디
의 강도를 시험관내 마이크로중화 검정에 의해 시험하였다(실시예 6 참조). RSV 롱 LM-2 (등록 번호 P12568; ATCC VR-26), RSV A-2 (ATCC VR-1540; 로트 nr. 3199840) 및 RSV B-1(ATCC VR-1580; 로트 nr. 5271356)의 바이러스 스톡을 Hep2 세포 내로 제작한 후, 마이크로중화 검정에 사용하기 위한 최적 감염 용량을 결정하기 위해 적정하였다. 상이한 정제된 나노바디
의 중화 강도의 결과가 표 B-1에 나와 있다. 시나지스
에피토프를 인식하는 6개의 모든 나노바디
가 A형 균주 롱 및 A-2를 효율적으로 중화할 수 있는 반면, 이들은 B-1 군주로의 감염을 중화하지 못했거나 농도 >1 μM에서 중화하였다. 101F 경쟁물질 15B3 및 191E4는 μM 단위의 농도로 투여될 때에 B-1 균주에 대해서만 매우 약한 중화 강도를 나타냈다.
상이한 RSV 균주의 각각의 F-단백질의 서열을 역전사효소 PCR 및 이에 후속하는 서열 분석에 의해 입증하였다. 간략히, RNeasy 미니 키트(키아젠(Qiagen), 네덜란드 벤로 소재)를 이용하여, 총 RNA를 RSV-감염 Hep2 세포로부터 단리한 후, 수퍼스크립트(Superscript) III 역전사효소 키트(인비트로젠, 미국 캘리포니아주 칼스버드 소재)를 이용하여 상보 DNA를 제조하였다. RSV A 균주의 F-단백질을 증폭시키고, 문헌[Kimura et al. 2004 (Antiviral Research 61: 165-171)]에 기재된 프라이머를 이용하여 시퀀싱하였다. RSV B-1 균주 F-단백질의 증폭을 위해, 하기 프라이머를 사용하였다: FB1_outer_for: cttagcagaaaaccgtga(서열 번호 13); FB1_outer_rev: tgggttgatttgggattg(서열 번호 14); FB1_seq_1123-for: ggactgatagaggatggta(서열 번호 15); FB1_seq_1526-rev: gctgacttcacttggtaa(서열 번호 16). RSV B-1 균주의 서열은 부가적 점 돌연변이체 Ser540Leu를 가지는 등록 nr P13843에 상응하였다. RSV 롱 M2 균주에 대한 서열은 보고된 서열(등록 nr M22643)에 완전히 상응하였다. 균주 RSV A-2에 대한 서열은 등록 M11486에 상응하였다. 표 A-2도 참조한다.
실시예
10: 다가
hRSV
나노바디
의 구성, 생산 및 특징분석
상이한 길이 및 조성의 Gly-Ser 링커에 의해 연결된 다가 나노바디
구조물을, 특이적 제한 부위를 포함하는 프라이머들의 상이한 세트를 이용하여, 분리된 PCR 반응(N-말단에 대해서는 1, 중간에 대해서는 1(삼가의 경우) 및 C-말단 나노바디
서브유닛에 대해서는 1)에 의해 발생시켰다. 유사하게, Ala-Ala-Ala 링커에 의해 연결된 다가 구조물을 발생시켰다. 모든 구조물들을 LacZ 프로모터, 카나마이신에 대한 내성 유전자, 다중클로닝 부위 및 OmpA 시그널 펩티드 서열을 포함하는 pUC119로부터 유래된 발현 벡터 내로 클로닝하였다. 나노바디
코딩 서열과 골격을 이루어, 벡터는 C-말단 c-myc 태그 및 (His)6 태그에 대해 코딩하였다. 35 Gly-Ser-링커가 다가 구조물 내에 존재하는 경우, 발현 벡터를 LacZ 프로모터, 카나마이신에 대한 내성 유전자 및 OmpA 시그널 펩티드 서열을 포함하는 pUC119에 대해 유도된 발현 벡터를 사용하였다. 시그널 펩티드의 다운스트림에 바로, 나노바디
삽입을 위해 다중클로닝 부위가 존재하였고, 그에 이어 35Gly-Ser 링커 코딩 DNA 서열 및 제2 나노바디
서열의 클로닝을 위한 제2 다중클로닝 부위가 존재하였다. 생성되는 나노바디
-35Gly-Ser-나노바디
코딩 서열과 골격을 이루어, 벡터는 C-말단 c-myc 태그 및 (His)6 태그에 대해 코딩하였다. 표 B-2은 RSV-특이적 나노바디
를 이용하여 발생된 다가 구조물들을 열거하고 있다. 다가 구조물의 서열이 표 A-3에 나와 있다.
다가 RSV 나노바디
구조물을 발현시키고, 정제하여, 추가 특징분석하였다. E. 콜라이 TG1 세포에서 생산한 후, 본질적으로 실시예 7에 기재된 바와 같이, IMAC에 의해 His-태그를 통해 주변세포질 분획으로부터 정제하고, 탈염하였다. 특정 삼가 구조물(예를 들어 RSV401, RSV404, RSV405)에 대해서는, P. 파스토리스에서 생산한 후, 배지 분획으로부터 정제하였다. 최종 단계로서 모든 삼가 나노바디
를 겔 여과하여, 가능한 이가 및 일가 분해 산물을 제거하였다.
정제된 다가 나노바디
의 hRSV F-단백질에의 결합을 FTM-단백질 및 hRSV 모두에 대해 ELISA로 확인하였다(실시예 5 참조). 대부분의 나노바디
에 대해, 이가 및 삼가 구조물로의 포맷팅은 명백하나 제한된(10배 이하의 증가) 결합력 효과를 초래하였고, 단 일가 상응부로서 유사한 EC50 값을 나타낸 7B2 및 NC23의 다가물은 제외된다(도 2에서 7B2에 대해 나와 있는 바와 같음).
실시예
11:
hRSV
를 중화하는 이가 및 삼가 구조물의 강도
상이한 RSV 균주들에 대한 RSV 중화 검정으로 나노바디
구조물의 강도를 평가하였다(실시예 6 및 9 참조). 이가 나노바디
결합 항원 부위 II는 그것의 일가 상응부에 비해 롱의 중화에서 100배 내지 1000배의 현저한 강도 증가(즉, 친화도의 증가보다 훨씬 큼)를 나타냈고, 이 때 IC50 값은 50 내지 380 pM의 범위 내로서, 뉴맥스 Fab보다 양호하거나 유사하였다. 그러나, RSV B-1 균주에 있어, 강도 증가는 훨씬 덜 강하였고, 이가 구조물 중 어느 것도 시나지스
보다 더 강하지 않았다. 놀랍게도, 이는 도 3에 나와 있는 바와 같이, 삼가 구조물의 발생에 의해 해소될 수 있었다. 3개의 나노바디
결합 항원 부위 II를 가지는 삼가 구조물은 그것의 일가 상응부보다 RSV B-1 균주에서 적어도 1000배 더 강한 중화물질이었다.
실시예
12: 일가
나노바디
의, 롱 균주의 도피 돌연변이와의 반응성
문헌[Lopez et al. 1998(J. Virol. 72: 6922-6928)]에 기재되어 있고 항원 부위 II에 대해 특이적이거나(R47F/4, R47F/7, RAK13/4, R7C2/11, R7C2/1) 또는 IV-VI에 대해 특이적이거나(R7.936/1, R7.936/4, R7.936/6, R7.432/1), 혹은 양자 모두의 조합에 대해 특이적인(RRA3) 다수의 도피 돌연변이들을 선택하여, 항원 부위 II 또는 IV-VI에 결합하지 않은 것으로 미리 동정된 나노바디
191C7(서열 번호 8)을 포함한, 10개의 일가 나노바디
와의 반응성에 대해 시험하였다.
이 검정은 문헌[Lopez et al. 1998 (J. Virol. 72: 6922-6928)]에 따라 수행하였다. 간략히 말해, 각 나노바디
를 상이한 도피 돌연변이로 감염된 HEp-2 세포의 항원 추출물을 이용하여 0.2 μg/ml의 ELISA로 시험하였다. 흡광도 결과를 기준 바이러스 균주(롱 야생형)뿐만 아니라, 대조군 나노바디
191C7에서의 반응성에 대해 정규화하였다. 결과가 표 B-3에 나와 있다.
>75%의 반응성은 안이 채워진 검정 사각형으로 나타내고, 짙은 해치 사각형은 75 내지 50%의 반응성에 상응하고, 밝은 해치 사각형은 25 내지 50%의 반응성에 상응하며, 25% 미만의 반응성은 블랭크 사각형으로 나타낸다. 일반적으로, 사전에 항원 부위 II 결합물질로 이미 동정된 나노바디
(192C4, 191D3, 191F2, NC23, 15H8, 7B2 및 NC41)는 항원 부위 II에서의 전형적 돌연변이에 대해 민감한 것으로 나타난 반면, 항원 부위 IV-VI 결합물질로서 이미 동정된 다른 나노바디
는 실제로 상기 부위에서의 돌연변이에 민감하였다.
실시예
13: 다가
나노바디
의 롱 균주의 도피 돌연변이와의 반응성
후속하여, 다수의 다가 구조물들을 제한된 패널의 도피 바이러스에서 분석하여, 결합을 평가하였다. 이 검정은 문헌[Lopez et al. 1998 (J. Virol. 72: 6922-6928)]에 따라 수행하였다. 간략히 말해, 각 나노바디
를, 상이한 도피 돌연변이로 감염된 HEp-2 세포의 항원 추출물을 이용하여, 일가 나노바디
에서는 0.1 μg/ml로, 또한 이가 및 삼가 나노바디
에서는 0.05 μg/ml로 시험하였다. 흡광도 결과를 기준 바이러스 균주(롱 야생형) 및 대조군 나노바디
(191E4; 본 특정 검정에서는 서열 번호 10)에의 반응성에 대해 정규화하였다. 결과가 표 B-4에 나와 있다.
>75%의 반응성은 안이 채워진 검정 사각형으로 나타내고, 짙은 해치 사각형은 75 내지 50%의 반응성에 상응하며, 밝은 해치 사각형은 25 내지 50%의 반응성에 상응하며, 25% 미만의 반응성은 블랭크 사각형으로 나타낸다. 명료하게, 다가 구조물은 일가 상응부, 돌연변이체 바이러스 R7C2/11에 비해 향상된 결합을 나타냈다. 또한, 이중파라토픽(biparatopic) 구조물 RSV403은 돌연변이체 중 어느 것에도 민감하지 않았다.
실시예
14: 다가
나노바디
에 의한 롱 균주의 도피 돌연변이체의 중화
실시예 12 및 13에서, 전형적 항원 부위 II 및/또는 IV-VI RSV 도피 돌연변이체에의 일가 나노바디
의 결합이 기재되었다. 상기 항원 부위를 특이적으로 인식하는 나노바디
의 결합은 거의 소실되었거나 유의하게 감소되었다. 이가 또는 삼가 구조물로의 상기 나노바디
의 포맷팅은 부분적으로 결합 활성을 복원하였으나, 3개 모든 도피 돌연변이체 바이러스들에 대해 그런 것은 아니었다. 도피 돌연변이체 R7C2/1(항원 부위 II에서의 돌연변이체 K272E)에의 결합은 항원 부위로만 구성된 임의의 이가 또는 삼가 구조물에 대해 25%의 수준 미만으로 유지되었다. 항원 부위 IV-VI에 결합하고 있는 나노바디
15B3 및 191E4는, 75% 이상의 수준으로 상기 돌연변이체에 결합할 수 있는 유일의 나노바디
(자체 그대로 또는 이중파라토픽 구조물)이었다.
데이터의 보다 상세한 분석은, R7C2/1에의 결합은 나노바디
의 원자가가 증가될 때 약간 증가하였음을 가리킨다. 7B2 구조물의 결합은 일가, 이가(RSV106) 및 삼가(RSV400) 포맷에 대해 각기 0, 4.4 및 13%이었다. 그러한 낮은 잔류 결합 수준은 RSV를 중화하는 강도의 매우 큰 손실을 초래할 것으로 예상된다.
나노바디
의 중화 강도를 실시예 13에 기재된 바대로 동일의 선택된 세트의 도피 돌연변이체에 대해 평가하였다. 이러한 목적을 위해, 일가 나노바디
7B2, 15H8 및 NC41을 각각의 삼가 상응부들, RSV400, RSV404 및 RSV407과 비교하였다. 중요하게도, 실시예 13에서, 유일하게 RSV400만을 이들 도피 돌연변이체에의 결합에 대해 평가하였다. 또한, 이중파라토픽 삼가 분자 RSV403(7B2-15B3-7B2)를 그것의 중화 용량에 대해 평가하였다.
hRSV 마이크로중화 검정을 본질적으로 실시예 6에 기재된 바대로 수행하였다. 간략히 말해, Hep2 세포를 페니실린 및 스트렙토마이신(각기 100 U/ml 및 100 μg/ml)으로 보충된 10% 우태 혈청(FCS)을 포함하는 DMEM 배지에서 96-웰 플레이트 내로 1.5×104 세포/웰의 농도로 파종하고, 5% CO2 대기에서 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. 상이한 바이러스의 바이러스 스톡을 Hep2 세포 내로 제작한 후, 마이크로중화 검정에 사용하기 위한 최적 용량을 결정하기 위해 적정하였다. 표준량의 특정 hRSV 균주를 50 μl의 총 체적으로 일련의 정제된 나노바디
의 희석액과 함께 37℃에서 30분 동안 예비인큐베이션하였다. Hep2 세포의 배지를 프리믹스와 교체하여, 2시간 동안 감염되도록 하였고, 그 후 0.1 ml의 검정 배지를 첨가하였다. 2.5% 우태 혈청, 및 페니실린 및 스트렙토마이신(각기 100 U/ml 및 100 μg/ml)으로 보충된 DMEM 배지 중에서 검정을 수행하였다. 세포를 5% CO2 대기 중에서 37℃에서 추가 72시간 동안 인큐베이션한 후, 세포를 PBS 중 0.05% 트윈-20으로 2회 세정하고, PBS 단독으로 1회 세정한 후, 세포를 4℃에서 20분 동안 PBS(100 μl/웰) 중 80 % 냉 아세톤(시그마-알드리히, 미국 미주리주 세인트루이스 소재)으로 고정화하고, 완전히 건조시켰다. 그 다음, 세포 표면 상의 F-단백질의 존재를 ELISA형 검정으로 검출하였다. 이에, 고정된 Hep2 세포를 실온에서 1시간 동안 PBS 중 5% 돼지 혈청 알부민 용액으로 블록킹한 후, 항-F-단백질 다클론성 토끼 혈청(문헌[Corral et al. 2007, BMC Biotechnol. 7: 17]) 또는 시나지스
(2 μg/ml)와 함께 1시간 동안 인큐베이션하였다. 검출을 위해, 염소 항-토끼-HRP 접합 항체 또는 염소 항-인간 IgG, Fcγ 단편 특이적-HRP(잭슨 이뮤노리서치, 미국 펜실베니아주 웨스트그로브 소재)를 사용한 후, ELISA를 표준 절차에 따라 전개하였다.
도 4a-c에 나와 있는 바와 같이, 일가 나노바디
는 항원 부위 II 도피 돌연변이체 바이러스 R7C2/11 및 R7C2/1에 대한 중화 잠재능을 거의 가지지 않았다. R7.936/4 항원 부위 IV-VI 변형체를 중화하는 강도는, 야생형 롱 균주를 중화하는 강도에 필적하였다. 이 데이터는 실시예 12의 결합 데이터 및 실시예 5에서의 이들 나노바디
에 대해 기재된 바와 같은 에피토프 매핑과 일치한다.
그러나, 삼가 나노바디
구조물은 3개 모든 도피 돌연변이체를 강하게 중화하고 있었다(도 4D-G). 최대 억제가 약 20 nM과 같이 낮은 농도에서 관찰된 반면, 이러한 수준의 억제는 2 μM 이하의 농도의 일가 나노바디
에 대해서는 관찰되지 않았다. 실시예 13이 중화 강도의 매우 높은 손실을 초래할 것으로 예상되는 삼가 분자 RSV400에 대한 결합 활성의 매우 유의한 손실을 나타낸 바, R7C2/11의 중화에 거의 동등한 K7C2/1의 강한 중화가 가장 놀랍다. 항원 부위 II도 인식하는 이가 IgG 시나지스
팔리비주맙은 약 0.2 μM의 농도에서 유의하게 R7C2/1 또는 R7C2/11의 복제를 블록킹할 수 없었다. 이 농도에서 IC50가 도달되지 않은 반면, R7.936/4 및 야생형 롱 바이러스는 수 nM(데이터는 나와 있지 않음)의 IC50으로 중화되었다.
실시예
15:
NC41
삼가물의
강도에 대한 링커 길이의 영향 분석
NC41의 삼가체의 링커 길이의 영향을 결정하기 위해, 3Ala, 9GS, 15GS 내지 20GS 링커에 이르는 링커들을 가지는 상이한 구조물(각기 RSV4G8, RSV409, RSV407 및 RSV410)을 발생시켰다. 4개 모두의 NC41 삼가체는 RSV B-1 및 롱 균주 모두를 완전히 중화할 수 있었다(도 5). 모든 구조물이 동등하게 강하기 때문에, RSV 롱의 중화에 있어 링커 길의 영향은 관찰되지 않았다. 이와 대조적으로, 9GS 및 3AIa 링커를 가지는 구조물은 B-1 균주에 대해 증가된 IC50 값을 가졌고, 이는 최대 강도를 위해 15GS의 최소 링커 길이가 필요하다는 것을 가리킨다. 이는, 이가 NC41 구조물이 이미 롱에 대한 매우 강한 중화물질인 반면, B-1 균주에서는 이가 및 삼가 NC41 간의 강도 차이가 더욱 크다는 관찰에 의해 설명될 수 있다(실시예 11 참조). RSV408 및 RSV409에서, 중간 나노바디
의 접근성은 덜 최적일 수 있다.
실시예
16:
나노바디
NC41
의 인간화
나노바디
NC41의 서열을 인간 배선 VH3-23에 배열하여, 나노바디
서열의 추가 인간화에 적당한 잔기를 선택하도록 하였다. 또한, 컴퓨터 이용 분석을 행하여, 번역후 변형, 예컨대 Asp 이성화를 가능히 행하기 쉬운 잔기를 동정하고, 화학 안정성을 향상시킬 수 있는 돌연변이를 동정하였다. 나노바디
의 안정성 및 강도에 대해 필수적인 것으로 알려진 CDR 영역 및 소위 인증 잔기를 변형에 대해 배제하였다.
NC41에 있어, 총 11개 위치를 상응하는 인간 잔기에 대한 돌연변이를 위해 선택하였다: 4개의 돌연변이가 동시에 도입되었고(Val5Leu, Ala14Pro, Glu44Gly, Gln108Leu), 이 때 상기 잔기들은 나노바디
기능에 극적인 영향을 미치는 것으로 예상되지 않는다(다른 나노바디
로부터의 데이터에 기초함). 이 기본적 변형체에서, 인간 상응부에 대한 돌연변이가 허용되었는지의 여부가 알려지지 않은 것들 중 7개의 잔기(Ser19Arg, Ile20Leu, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln)를 라이브러리 접근법을 이용하여 돌연변이화하였고, 이로써 각 위치에 야생형 또는 상응하는 인간 아미노산이 허용되었다. 퇴화된 코돈 사용을 포함하는 중첩 올리고뉴클레오티드 서열을 이용하여 유전자 어셈블리에 의해 이론적 다양성 지수가 128인 생성 라이브러리를 발생시킨 후, LacZ 프로모터, 카나마이신에 대한 내성 유전자, 다중클로닝 부위 및 OmpA 리더 서열을 포함하는 pUC119로부터 유래된 발현 벡터 내에 클로닝하였다. 나노바디
코딩 서열과 골격을 이루어, 벡터는 C-말단 c-myc 태그 및 (His)6 태그에 대해 코딩하였다. 나노바디
를 E. 콜라이의 주변세포질에서 생산하였다(실시예 7 참조). 라이브러리 다양성을 서열 분석에 의해 확인하였다.
368개의 개별 NC41 변형체 및 야생형 NC41로부터의 주변세포질 추출물을 생성시켜, 기능 선별 캐스케이드를 수행하여, 강도 및 안정성 모두의 측면에서, 최량의 인간화 NC41 변형체를 동정하였다. 제1 단계에서, 인간화 NC41 변형체의 RSV 롱에의 RSV 결합을 ELISA로 결정하였다(하이테스트, 핀랜드 터쿠 소재; #8RSV79)(실시예 8 참조). 또한, 양성 결합물질을, RSV B-1 균주로 감염된 Hep2 세포에의 결합에 대해 분석하였다.
여기에서, Hep2 세포를 96-웰 플레이트에 파종하여, 본질적으로 중화 검정에 대해 기재된 절차에 따라 RSV B-1 균주로 감염시켰다(실시예 6 참조). 3일 후, 세포를 빙냉 아세톤으로 고정하고, 플레이트를 다른 희석율의 주변세포질 추출물을 이용한 ELISA 검정에 사용하였다. Hep2-B1 감염 세포에의 나노바디
의 결합을, 항-VHH 토끼 다클론성 항체를 이용한 후, 염소 항-토끼-HRP 접합 항체를 이용하여 검출하였고, 그 후 표준 절차에 따라 ELISA를 전개하였다.
부가적으로, 도입된 돌연변이가 온도 안정성에 영향을 미치는지를 확인하기 위해, 모든 결합물질의 주변세포질 추출물을 야생형 NC41의 융점보다 5℃ 더 높은 74℃로 2시간 동안 가열하였다. 가열 전후의 RSV 롱에의 결합을 ELISA로 분석하였고, 가열 전 vs. 후의 결합 시그널의 비를 온도 안정성에 대한 척도로 취하였다.
마지막으로, 변형체의 동역학 오프 속도를 실시예 8에 기재된 바와 같이, FTM-NN 단백질에 대한 비아코어 검정으로 결정하였다.
모든 결합물질을 시퀀싱하여, RSV의 F-단백질에의 결합 능력에 따라 순위를 정하였다. 가장 강한 결합 물질의 서열을 결정하기 위해, Gln108(인간 잔기)에 대한 명확한 우세가 모든 계열에서 관찰되었다. 이에 반해, Ile20Leu 돌연변이가 실제 수준보다 더 낮게 나타났고, 다른 모든 위치들에서는 야생형 또는 인간 서열에 대한 명확한 우세는 없었으며, 이 때 변형체는 야생형 NC41에 비해 10개 이하의 돌연변이를 포함하였다. 특히, 한 변형체에서, CDR2 영역 내의 부가적 점 돌연변이(Gly54Asp)가 관찰되었다. 이 변형체, NC41 변형체 6는 모든 변형체 및 야생형 NC41의 가장 낮은 오프 속도를 나타냈고, 이는 친화도 증가를 초래하였다.
서열 및 기능 데이터에 기초하여, 18개의 변형체(표 A-4)를 정제된 단백질로서 추가 특징분석하기 위해 선택하였다(도 6 및 7). 모든 변형체들을 생성시키고, 정제하였고, RSV 롱 및 B-1의 중화에 대한 강도를 마이크로중화 검정으로 결정하였다. 대부분의 변형체가 야생형 NC41과 매우 유사한 활성을 나타낸 반면, 수개의 변형체가 롱(2배) 및 B-1(6배)에 대해 증가된 강도를 나타냈고, 가장 강한 중화물질은 MC41 변형체 6, 8, 9 17, 및 18이었다. 특히, 변형체 18은 모든 11개의 위치들에서 최대로 인간화되었고, 이 때 CDR2 영역에 Asp54가 부가적으로 도입되었다. 변형체 10 및 11은 NC41보다 B-1 균주를 중화하는 데 더욱 강하나, 롱 균주에서는 그러하지 않다.
NC41 변형체의 선택 패널을 위해, 동역학 결합 매개변수를 실시예 8에 기재된 바와 같이 FTM-NN 단백질에서의 비아코어로 결정하였다(표 B-5). NC41 및 인간화 NC41 변형체 6, 8 및 17에 대해서는 계산 데이터에서의 어떠한 유의적 차이도 관찰되지 않았다. 모든 NC41 변형체의 온(on) 속도가 기기의 검출 한도에 있으나, 오프 속도는 v06<v17<NC41<v08로 순위 결정될 수 있다는 것을 주지해야 한다. CDR2(위치 54)에서 Gly의 Asp 돌연변이에 대한 영향은 v17 및 v18을 비교할 때 명확하게 입증될 수 있는데, 이는 이 최대 인간화 변형체들에서의 유일한 차이이다. 표 B-5에 나와 있는 바와 같이 NC41 야생형과 대비하여 두 가지 독립적 검정으로 롱 균주 및 B-1 균주 모두에 대해 중화를 시험하였다. 양 검정 모두에서 NC41v18은 양 바이러스 모두에서 NC41보다 더 강하였고, 양 검정 모두에서 NC41v18은 롱 균주에서 NC41vl7보다 더 강하였다. 제2 검정에서 B-1균주에 대해 NC41v18의 향상된 중화가 또한 관찰되었다.
모든 NC41 변형체를 열-유도 언폴딩에 적용하여, 단백질의 안정성에 대한 도입 돌연변이의 영향을 평가하였다. 이에, 단백질의 언폴딩 시에 노출되게 되는 Trp 잔기에 결합하는 염료인 사이프로 오렌지(Sypro Orange)의 존재 하에서의 단계적 온도 증가에 의해 융점(Tm)을 결정하였다. 모든 변형체들은 변형체 18에 대해 9℃까지의, 야생형 NC41의 Tm(69℃) 대비, 증가된 Tm을 가지는 것으로 나타났다.
실시예
17: 발현을 위한
N41
의 추가 서열 최적화
피키아 사스토리스에서의 발현을 최적화하기 위한 목적으로, 나노바디
NC41의 서열을 추가 분석하였다. 마이크로중화 검정에서 강도 손실없이 허용되는 것으로 나타난 인간화 위치를 조합함으로써, NC41 변형체 19-26를 고안하였다(실시예 16). 4개의 돌연변이가 동시 도입된 반면(Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu), 3개의 돌연변이는 개별적으로 또한 가능한 각 조합으로 조사하였다(Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln)(표 A-4 참조). 모든 구조물을 발현 벡터 내에 클로닝하였고, 피키아 파스토리스 균주 XL-33 내로 도입하였고, 그 후, 피키아 게놈 내 도입 수를 정량적 실시간 PCR에 의해 평가하였다. 각 구조물로부터, 1-2개의 카피를 가지는 하나의 클론 및 4개 이상의 카피를 가지는 하나의 클론을 소규모 생산을 위해 선택하였고, 야생형 대비 NC41 변형체의 발현 수율을 SDS-PAGE 겔에서의 겔 전기영동에 의해 평가하였다. NC41 변형체 20, 22, 24, 25 및 26은 이미 낮은 카피 수의 야생형 NC41과 유사한 발현 수준으로, 최고의 발현을 나타냈다.
NC41 변형체 22 및 26을 Myc-His-태깅 나노바디의 생산 및 정제를 위해 E. 콜라이용 발현 벡터에 리클로닝하였다(실시예 7 참조). RSV 롱의 중화를 위한 양 변형체의 강도를 실시예 6에 기재된 바와 같이 마이크로중화 검정으로 시험하였다. 양 변형체 모두 야생형 NC41로서 동등하게 강하였다(v22 및 v26의 IC50는 각기 126 및 310 nM임).
실시예
18: 화학 안정성을 위한
RSV407
의 서열 최적화
본 발명의 나노바디 및 폴리펩티드의 생성 중, 아미노 말단 상의 파이로글루타메이트(pGlu)를 (RP-HPLC을 통해) 관찰하였다. 발효 후에 15% 초과의 pGlu의 수준을 검출하였고, pGlu의 수준은 안정성 연구 중에 저장 시에 꾸준히 증가하고 있었다. 그러므로, N-말단 글루타메이트(E)를 아스파르테이트(D)로 변경시켰다. 이는 N-말단의 pGlu 번역후 변형의 가능성을 제거하였고, 이에 따라 산물 안정성이 증가되었다.
서열 최적화 나노바디
변형체의 아미노산 서열이 각기 표 A-5에 나와 있다(RSV434; 서열 번호 142). 이 나노바디
의 생산을 위해, 피키아 발현 시스템을 X-33을 숙주 균주로 사용하여 인비트로젠으로부터 상업적으로 이용가능한 시스템에 기초하여 개발하였다. 본 시스템은 나노바디
의 생산을 유도하기 위해 AOX1 프로모터를 이용하고, 나노바디
를 배지 내에 분비하도록 하기 위한 알파 메이팅 분비 펩티드를 사용한다.
서열 최적화 RSV434를 RP-HPLC, SE-HPLC을 통해 발현 수준에 대해 분석하여, RSV 중화에 대해 모 분자(RSV407)와 비교하였다.
R5V407과 대비한 유의적인 발현 수준 차이가 없었고, 낮은 카피수 및 높은 카피 수의 클론은 1 g/L 초과의 투명화 배지(세포 불포함)를 생성시키고 있었다.
1 ml의 샘플을 1 ml MEP 하이퍼셀(Hypercel) 칼럼에 포획하고, 용출하며, SE-HPLC 및 RP-HPLC을 통해 분석하였다. SE-HPLC 분석은 단량체성 물질을 나타낸 반면, RP-HPLC 분석은 예상된 바와 같이 피크후 pGlu의 부재를 명료히 나타냈다.
RSV434를 배지로부터 추가 정제한 후, MEP 하이퍼셀(HyperCell)에 포획하여, 음이온 교환 크로마토그래피를 통해 정제하였다.
hRSV 마이크로중화 검정을 본질적으로 실시예 6에 기재된 바와 같이 수행하였다. 도 9는 RSV 롱 및 B-1 균주 모두에서의 중화, 및 이의 서열 최적화 변형체 RSV434를 나타낸다.
실시예
19: 인간화 및/또는 서열 최적화
NC41
나노바디
의 다가 구조물의 제조
실시예 16의 NC41 인간화 변형체를 15GS 링커를 이용하여 삼가 구조물로서 포맷팅하였다(서열이 표 A-5에 나와 있다). 실시예 10에 기재된 바와 같이 삼가체를 생성시켜 정제하였다. 도 8a는 상응하는 일가 나노바디
를 가지는 2개의 삼가 인간화 NC41 변형체의 RSV 롱 및 B-1 균주에서의 중화를 나타낸다. 도 8b는 삼가 NC41 변형체의 RSV 롱 및 B-1 균주에서의 중화를 나타낸다. 삼가 NC41 변형체에 의한 RSV 롱 및 B-1 균주의 중화에 대한 IC50 값이 표 B-7에 나와 있다. 모 NC41 삼가체 (RSV407)와 유사하게, 인간화 SMC41 변형체의 삼가체는 시나지스
보다 롱의 60배 더 강한 중화물질이었다. B-1 균주에서, 삼가체는 시나지스보다 더 강한 중화물질이나, 여기에서 또한 RSV427>RSV426>RSV414의 순서로, 모 NC41 RSV407의 삼가체에 비해 약간 증진되었다. 이에 따라, B-1에 대한 일가 변형체의 증가된 강도는 약간 향상된 삼가체를 초래한 것으로 보였다.
실시예 17 및 18에 나와 있는 추가 서열 최적화에 기초하여, 다수의 부가적 삼가 구조물(표 B-6)을 생성시켰다. 모든 구조물을 피키아 파스토리스 발현 벡터에서 클로닝하여, 피키아로 형질전환하여, 발현 수준, 안정성 및 강도를 시험하기 위해 발현시켰다. 소규모 진탕 플라스크 발현 및 발효 모두에서, RSV440 (변형체 26) 및 RSV441(변형체 22)는 높은 발현 수준을 나타냈다.
실시예
20: 다가 구조물의
시험관내
효능
31 RSV/A 및 30 RSV/B 임상 단리물에 대한 플라크 감소 검정으로 나노바디 RSV434 및 시나지스의 중화 용량을 평가하였다. 항-RSV 화합물뿐만 아니라 시나지스도 40 μg/ml의 단일 농도로 시험하였다.
시나지스 및 RSV434 모두는 PBS 대조군에 비해 적어도 100배 바이러스 역가가 감소된 균주의 각각 87% 및 97%로 효율적으로 수행하였다(표 B-8). 또한, RSV434는 시나지스에 비해 더욱 큰 중화 용량을 나타냈다. 대부분의 RSV 균주(84%)가 RSV434에 의해 완전히 억제된 반면, 유의적으로 더 적은 균주(20%)가 시나지스에 의해 완전히 억제되었다(표 B-8).
실시예
21: 다가 구조물의
생체내
효능
코튼 래트(cotton rat) 모델은 RSV의 황금 표준 모델이다. 이 모델에서, 코는 래트를 RSV/Tracy 균주로 감염시키고(0일째), 감염 후 4일째에 바이러스 역가 및 바이러스 RNA를 폐 세척액 및 비강 세정액에서 평가하였다. 예방 셋업에서, 유의적이고 용량 의존적인 바이러스 부하 감소가, RSV 감염 24시간 전인 RSV407의 비강내 투여 시에 관찰되었다(도 10).
또한, 감염된 코튼 래트를 감염 24h 또는 48h 후 나노바디로 처리한 치료법을 탐색하였고, 이로써 RSV 감염 인간의 상황을 모의하였다. 양 경우 모두에서, 바이러스 복제의 유의적 억제가 관찰되었다(표 B-9 및 도 11).
지금까지 수행된 모든 연구들에서, 나노바디는 폐 전달을 위한 모방체로서 비강내 전달되었다. 이 투여 경로를 이용하여, 투여 직후 취한 기관지 세척액에 대한 ELISA 평가에 따르면 나노바디의 9 내지 41%가 폐에서 이용가능하였다.
폐 세척액 내 잔류 나노바디의 간섭 가능성을 해결하고자 하는 시도로, 바이러스 검출을 접종 7일후까지 연기하였다. 스프라그 도우리(Sprague Dawley) 래트에서 수행한 한 별도의 한 약물동력학 연구에 의해, 폐 내 나노바디의 반감기가 약 10.8으로 평가되었다. 최종 투여 후 5 내지 6일째인 7일에는, 나노바디가 폐로부터 충분히 소거되어, 검정에서 더 이상 간섭하지 않는다. 양성 대조군 동물의 바이러스 부하는 10E5에서 10E2 pfu/ml로 급락하였다. 그럼에도 불구하고, RSV407로 처리함으로써 여전히 약 0.6 로그의 감소를 나타낼 가능성이 있었다(표 B-9).
한 별법으로서, 정량적 PCR을 전개하여, 바이러스 RNA를 검출하였다. 예방 및 치료 실험 모두에서, RSV RNA의 유의적 감소가 관찰되었다(표 B-9).
실시예
22:
RSV
도피 돌연변이의 생성
F-단백질과의 임계적 접촉 잔기를 동정하기 위해, RSV 롱 도피 돌연변이체의 생성을, 대략 각기 IC90 농도의 나노바디의 존재 하에 RSV 롱을 배양한 후에 분석하였다. 일가 NC41 (5 μg/ml) 및 이의 삼가 RSV407(2.5 ng/ml) 모두를 사용하였고, 이뿐만 아니라 이중특이적 삼가 RSV413(NC41-15B3-NC41)도 사용하여, 2개의 상이한 에피토프를 인식하는 구조물이 바이러스 도피 개시의 시간 틀에 영향을 미치는지의 여부를 입증하였다. 나노바디의 존재 하에 Hep2 세포 상에서 롱을 12 계대로 연속 인큐베이션한 후, 일가 NC41을 이용한 조건에서는 바이러스 돌출(out growth)이 관찰되었으나, 놀랍게도 삼가 나노바디를 이용한 조건에서는 그러하지 않았다. 반복 라운드에 대해 단일 바이러스 스톡을 플라크로부터 정제하였고, 그 후 잠재적 도피 변형체의 F-단백질의 서열을 결정할 수 있었다. NC41, N262Y의 돌연변이를 가지는 NC41/13, 및 돌연변이 N276Y를 포함한 NC41/17에 대해, 2개의 구분된 도피 변형체를 동정하였다.
[표 A-1]
[표 A-2]
[표 A-3]
[표 A-4]
[표 A-5]
[표 A-6]
[표 A-7]
[표 B-1]
[표 B-2]
[표 B-3]
[표 B-4]
[표 B-5]
[표 B-6]
[표 B-7]
[표 B-8]
[표 B-9]
SEQUENCE LISTING
<110> Ablynx N.V.
<120> Improved amino acid sequences directed against human respiratory
syncytial virus (hRSV) and polypeptides comprising the same for
the prevention and/or treatment of respiratory tract infections
<130> P09-011-PCT-1
<150> US 61/184,396
<151> 2009-06-05
<150> US 61/265,014
<151> 2009-11-30
<160> 169
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 128
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 1
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr
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Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Pro Gly Ala Tyr Tyr Tyr Thr
100 105 110
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Leu Thr Ser Thr Asn Pro Gly Ser Tyr Ile Tyr Ile Trp
100 105 110
Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
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<211> 127
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 3
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Ile
20 25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Ser Arg Gly Arg Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asp Ala Ala Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Val Asp Thr Ala Ser Trp Asn Ser Gly Ser Phe Ile Tyr Asp Trp
100 105 110
Ala Tyr Asp His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 4
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ser Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Val Leu Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Phe Arg Gly Asp Ser Ala Ile Gly Ala Pro Ser Val
50 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Gly Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Val Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Ala Gly Thr Pro Leu Asn Pro Gly Ala Tyr Ile Tyr Asp Trp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 5
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ile Ser Cys Ala Ala Ser Gly Gly Ser Leu Ser Asn Tyr
20 25 30
Val Leu Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Trp Arg Gly Asp Ile Thr Ile Gly Pro Pro Asn Val
50 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Gly Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Ala Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Ala Gly Thr Pro Leu Asn Pro Gly Ala Tyr Ile Tyr Asp Trp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 6
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Trp Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Gly Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Asp Gln Ser Gly Glu Ser Thr Ala Tyr Gly Ala Ser Ala
50 55 60
Ser Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val His
65 70 75 80
Leu Leu Met Asn Ser Leu Gln Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Ala Asp Gly Val Leu Ala Thr Thr Leu Asn Trp Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 126
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Leu Asp Tyr Tyr
20 25 30
Ala Leu Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ser Cys Ile Ser Ser Ser Asp His Ser Thr Thr Tyr Thr Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Trp Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Gly Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Pro Ala Leu Gly Cys Tyr Ser Gly Ser Tyr Tyr Pro Arg
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 8
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ser Gly Val Ile Asn
20 25 30
Ala Met Ala Trp His Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala His Ile Ser Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Gly Asp Phe Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys His
85 90 95
Val Pro Trp Met Asp Tyr Asn Arg Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
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<211> 128
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 9
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr
85 90 95
Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala
100 105 110
Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 10
<211> 127
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 10
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Pro Thr Phe Ser Ala Asp
20 25 30
Thr Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Thr Ile Pro Trp Ser Gly Gly Ile Ala Tyr Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Met Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Asp
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Ser Arg Ile Tyr Ile Tyr Ser Asp Ser Leu Ser Glu Arg
100 105 110
Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 11
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe
35 40 45
Val Ala Ala Val Thr Arg Trp Ser Gly Ala Arg Thr Val Tyr Ala Asp
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr
65 70 75 80
Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Thr Cys Ala Ala Asp Ser Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Val Tyr Tyr
100 105 110
Ser Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125
Ser
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<211> 128
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 12
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Pro Ile
20 25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Val Val Thr Arg Trp Ser Gly Ala Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr
85 90 95
Cys Ala Ala Asp Ser Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Ile Tyr Tyr Thr
100 105 110
Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
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<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Primer sequence
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cttagcagaa aaccgtga 18
<210> 14
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Primer sequence
<400> 14
tgggttgatt tgggattg 18
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<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Primer sequence
<400> 15
ggactgatag aggatggta 19
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<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Primer sequence
<400> 16
gctgacttca cttggtaa 18
<210> 17
<211> 271
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 17
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr
85 90 95
Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala
100 105 110
Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
130 135 140
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly Ser
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr Gly
165 170 175
Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ala
180 185 190
Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val
195 200 205
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val Tyr
210 215 220
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr Cys
225 230 235 240
Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala Trp
245 250 255
Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
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<211> 280
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 18
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly Ser
1 5 10 15
Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr Gly
20 25 30
Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ala
35 40 45
Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr Cys
85 90 95
Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala Trp
100 105 110
Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly
145 150 155 160
Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala
165 170 175
Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala
180 185 190
Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly
195 200 205
Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
210 215 220
Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys
225 230 235 240
Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg
245 250 255
Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
260 265 270
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
275 280
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 19
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr
85 90 95
Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala
100 105 110
Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
145 150 155 160
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
165 170 175
Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Tyr
180 185 190
Ser Arg Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg
195 200 205
Glu Phe Val Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr
210 215 220
Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu
225 230 235 240
Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala
245 250 255
Val Tyr Thr Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Tyr
260 265 270
Tyr Tyr Ala Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr
275 280 285
Val Ser Ser
290
<210> 20
<211> 265
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 20
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr
85 90 95
Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn Arg Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala
100 105 110
Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser
130 135 140
Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu
145 150 155 160
Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Arg Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln
165 170 175
Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ala Ala Val Ser Arg Leu Ser
180 185 190
Gly Pro Arg Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Thr Cys Ala Ala Glu Leu Thr Asn
225 230 235 240
Arg Asn Ser Gly Ala Tyr Tyr Tyr Ala Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly
245 250 255
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 21
<211> 263
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 21
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Leu Thr Ser Thr Asn Pro Gly Ser Tyr Ile Tyr Ile Trp
100 105 110
Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala
145 150 155 160
Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala
165 170 175
Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ala Ala Ile Ser Trp Ser Asp Gly
180 185 190
Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
195 200 205
Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro
210 215 220
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Thr Ser Thr Asn
225 230 235 240
Pro Gly Ser Tyr Ile Tyr Ile Trp Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
245 250 255
Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 22
<211> 269
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nanobody sequence
<400> 22
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Leu Thr Ser Thr Asn Pro Gly Ser Tyr Ile Tyr Ile Trp
100 105 110
Ala Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val
130 135 140
Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp Ser Leu
145 150 155 160
Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met
165 170 175
Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ala Ala
180 185 190
Ile Ser Trp Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly
195 200 205
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Asp Leu Thr Ser Thr Asn Pro Gly Ser Tyr Ile Tyr Ile Trp Ala Tyr
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Ala Ala Ile Ser Phe Arg Gly Asp Ser Ala Ile Gly Ala Pro Ser Val
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Gly Arg Ser Phe Ser Asn Tyr Val Leu Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro
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Ala Ile Gly Ala Pro Ser Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp
195 200 205
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210 215 220
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Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
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Ser Leu Ser Ile Ser Cys Ala Ala Ser Gly Gly Ser Leu Ser Asn Tyr
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
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210 215 220
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225 230 235 240
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245 250 255
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Ala Ala Ser Gly Gly Ser Leu Ser Asn Tyr Val Leu Gly Trp Phe Arg
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Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Gly Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
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<213> respiratory syncytial virus
<400> 167
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485 490 495
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<211> 574
<212> PRT
<213> respiratory syncytial virus
<400> 168
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195 200 205
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Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile
420 425 430
Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp
435 440 445
Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly
450 455 460
Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro
465 470 475 480
Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn
485 490 495
Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu
500 505 510
Leu His Asn Val Asn Ala Gly Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr
515 520 525
Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Ile Leu Leu Ser Leu Ile Ala Val
530 535 540
Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Arg Ser Thr Pro Val Thr Leu Ser
545 550 555 560
Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Asn
565 570
<210> 169
<211> 574
<212> PRT
<213> respiratory syncytial virus
<400> 169
Met Glu Leu Leu Ile His Arg Ser Ser Ala Ile Phe Leu Thr Leu Ala
1 5 10 15
Val Asn Ala Leu Tyr Leu Thr Ser Ser Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe
20 25 30
Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Arg Gly Tyr Phe Ser Ala Leu
35 40 45
Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile
50 55 60
Lys Glu Thr Lys Cys Asn Gly Thr Asp Thr Lys Val Lys Leu Ile Lys
65 70 75 80
Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu
85 90 95
Met Gln Asn Thr Pro Ala Ala Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Ala Pro
100 105 110
Gln Tyr Met Asn Tyr Thr Ile Asn Thr Thr Lys Asn Leu Asn Val Ser
115 120 125
Ile Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val
130 135 140
Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Ile Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu
145 150 155 160
Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Asn Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys
165 170 175
Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val
180 185 190
Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asn Asn Arg Leu Leu Pro Ile Val Asn
195 200 205
Gln Gln Ser Cys Arg Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln
210 215 220
Gln Met Asn Ser Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn
225 230 235 240
Ala Gly Val Thr Thr Pro Leu Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu
245 250 255
Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys
260 265 270
Leu Met Ser Ser Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile
275 280 285
Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro
290 295 300
Ile Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro
305 310 315 320
Leu Cys Thr Thr Asn Ile Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg
325 330 335
Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe
340 345 350
Pro Gln Ala Asp Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp
355 360 365
Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Ser Leu Cys Asn Thr
370 375 380
Asp Ile Phe Asn Ser Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr
385 390 395 400
Asp Ile Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys
405 410 415
Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile
420 425 430
Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp
435 440 445
Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Leu Glu Gly
450 455 460
Lys Asn Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Tyr Tyr Asp Pro
465 470 475 480
Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn
485 490 495
Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Arg Ser Asp Glu Leu
500 505 510
Leu His Asn Val Asn Thr Gly Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr
515 520 525
Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Val Leu Leu Leu Leu Ile Ala Ile
530 535 540
Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Lys Asn Thr Pro Val Thr Leu Ser
545 550 555 560
Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Lys
565 570
Claims (30)
- 하기 a)-b)로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열 및/또는 나노바디?:
a) 서열 번호 138-141 및 154-157;
b) 서열 번호 138-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열로서, 다만
i) 아미노산 서열이 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열이 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열이 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가지는 것인 아미노산 서열. - 제1항에 있어서, 하기 a)-b)로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열 및/또는 나노바디?:
a) 서열 번호 140-141 및 154-157;
b) 서열 번호 140-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열로서, 다만
i) 아미노산 서열이 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 아미노산 서열이 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열이 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가지는 것인 아미노산 서열. - 제1항 또는 제2항에 있어서, 하기 a)-b)로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 아미노산 서열 및/또는 나노바디?:
a) 서열 번호 140-141 및 154-157;
b) 서열 번호 140-141 및 154-157 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 아미노산 서열로서, 다만
i) 아미노산 서열이 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 아미노산 서열이 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 아미노산 서열이 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가지는 것인 아미노산 서열. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54D로부터 선택된 1개 이상의 아미노산 잔기가 돌연변이화되고, 위치 1의 글루탐산이 아스파르트산으로 변경된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디?.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 하기의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 5를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 아미노산 서열 및/또는 나노바디?:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln. - 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 1개 이상의 나노바디?를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되고, 임의적으로 1개 이상의 펩티드계 링커를 통해 연결된, 1개 이상의 다른 아미노산 결합 단위를 임의적으로 추가로 포함하는 폴리펩티드.
- 제6항에 있어서, 다가 폴리펩티드인 폴리펩티드.
- 제7항에 있어서, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디?를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 이가 또는 삼가 폴리펩티드인 다가 폴리펩티드.
- 제8항에 있어서, 하기 a)-b)의 폴리펩티드들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 142-145 및 162-165;
b) 서열 번호 142-145 및 162-165 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드로서, 다만
i) 상기 폴리펩티드 내에 포함되는 제1 아미노산 서열 또는 나노바디?가 위치 1의 아스파르트산(Asp, D)을 가지고;
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드가 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드가 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가지는 것인 폴리펩티드. - 제8항 또는 제9항에 있어서, 하기 a)-b)의 폴리펩티드들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 144-145 및 162-165;
b) 서열 번호 144-145 및 162-165 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드로서, 다만
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디?가 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 아미노산 서열과 대비하여, 폴리펩티드가 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드가 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가지는 것인 폴리펩티드. - 제8항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 하기 a)-b)의 폴리펩티드들로부터 선택되는, hRSV의 단백질 F에 대해 유도되고/되거나 hRSV의 단백질 F에 특이적으로 결합하는 삼가 폴리펩티드:
a) 서열 번호 144-145 및 162-165;
b) 서열 번호 144-145 및 162-165 중 하나와 3개 이하, 바람직하게는 2개 이하, 더욱 바람직하게는 1개 이하의 아미노산 차이를 가지는 폴리펩티드로서, 다만
i) 상기 폴리펩티드 내 포함되는 아미노산 서열 또는 나노바디?가 위치 14의 프롤린(Pro, P), 위치 19의 아르기닌(Arg, R), 위치 20의 루이신(Leu, L) 및 위치 108의 루이신(Leu, L)을 가지고; 부가적으로 위치 83의 아르기닌(Arg, R), 위치 85의 글루탐산(Glu, E) 및/또는 위치 105의 글루타민(Gln, Q)을 가지고(상기 위치는 카밧 번호매김에 따라 결정됨);
ii) 3, 2 또는 1개의 아미노산 차이를 가지지 않는 폴리펩티드와 대비하여, 폴리펩티드가 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 친화도(상기 친화도는 표면 플라즈몬 공명에 의해 측정됨)로 hRSV의 단백질 F에 결합하고/하거나, 폴리펩티드가 동일하거나, 대략 동일하거나, 보다 높은 강도(본원에 정의된 바와 같음)를 가지는 것인 폴리펩티드. - 제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 제1 글루탐산이 아스파르트산으로 변경되고, 임의적으로 서열 번호 53의 부분을 형성하는 1개 이상(바람직하게는 2개, 더욱 바람직하게는 3개 모두)의 나노바디?/나노바디?들에서, 하기의 것들로부터 선택되는 1개 이상(예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개)의 아미노산 잔기가 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드: Val5Leu, Ala14Pro, Ser19R, Ile20Leu, Glu44Gly, Ala74Ser, Gly78Leu, Ala83Arg, Asp85Glu, Arg105Gln, Gln108Leu 및 Gly54Asp.
- 제8항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 서열 번호 53의 부분을 형성하는 1개 이상의 나노바디?에서, 하기 아미노산 잔기(들)가 돌연변이화된 서열 번호 53을 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드:
- Glu1Asp;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu 및 Gln108Leu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Ala83Arg;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Asp85Glu;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg 및 Arg105Gln;
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Asp85Glu 및 Arg105Gln; 또는
- Glu1Asp, Ala14Pro, Ser19Arg, Ile20Leu, Gln108Leu, Ala83Arg, Asp85Glu 및 Arg105Gln. - 제8항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 서열 번호 142-145 및 162-165 중 하나를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 삼가 폴리펩티드.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 1개의 아미노산 서열 및/또는 1개의 나노바디?를 포함하거나 이로 본질적으로 구성되는 일가 구조물.
- 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 다가 폴리펩티드, 예컨대 이가 또는 삼가 폴리펩티드를 제조함에 있어서의, 제15항에 따른 일가 구조물의 용도.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물을 코딩하는 핵산 또는 뉴클레오티드 서열.
- 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 다가 폴리펩티드를 코딩하는 유전적 구조물의 제조를 위한, 제15항에 따른 일가 구조물을 코딩하는 제17항에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열의 용도.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물을 발현하거나, 또는 적당한 환경 하에서 발현할 수 있고/있거나; 제17항에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 숙주 또는 숙주 세포.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 또는 제17항에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 조성물.
- 제20항에 있어서, 약학적 조성물인 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 또는 제20항 또는 제21항에 따른 조성물의 생산 방법으로서, 적어도
a) 적당한 숙주 세포 또는 숙주 유기체, 또는 또 다른 적당한 발현 시스템 내에서, 제17항에 따른 핵산 또는 뉴클레오티드 서열을 발현하는 단계, 또는
제19항에 따른 숙주 또는 숙주 세포를, 그 숙주 또는 숙주 세포가 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 또는 제20항 또는 제21항에 따른 조성물을 발현하고/생산하도록 하는 조건 하에서 배양하고/하거나 유지시키는 단계, 및 임의적으로 후속하여
b) 이에 따라 수득된, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물을 단리 및/또는 정제하는 단계
를 포함하는 방법. - 제15항에 따른 2개 이상의 일가 아미노산 서열 또는 일가 구조물과 예를 들어 하나 이상의 링커를 연결하는 단계를 적어도 포함하는, 제7항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 이가 또는 삼가 폴리펩티드의 제조 방법.
- hRSV 감염의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 이를 필요로 하는 대상에게 약학적으로 활성인 양의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 및/또는 제20항 또는 제21항에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 예방 및/또는 치료 방법
- 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및 천식 중 하나 이상의 예방 및/또는 치료 방법으로서, 이를 필요로 하는 대상에게 약학적으로 활성인 양의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 1개 이상의 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 및/또는 제20항 또는 제21항에 따른 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 예방 및/또는 치료 방법.
- hRSV 감염의 예방 및/또는 치료를 위한 약학적 조성물의 제조; 및/또는 제24항 또는 제25항에 따른 하나 이상의 방법에서의 사용을 위한, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 및/또는 제20항 또는 제21항에 따른 조성물의 용도.
- 호흡기 질환, 상기도 감염, 하기도 감염, 기관지염 (폐 내 소기도의 감염), 폐렴, 호흡곤란, 기침, (재발성) 천명음 및 천식 중 하나 이상의 예방 및/또는 치료를 위한, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 및/또는 제20항 또는 제21항에 따른 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물, 및 폐 전달에 적당한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물의 폐 전달에 적당하고/하거나; 상기를 포함하는 조성물의 사용에 적당한 약학적 장치.
- 제29항에 있어서, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 아미노산 서열 및/또는 나노바디?, 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드, 또는 제15항에 따른 일가 구조물을 포함하는, 액체(예를 들어, 액적 또는 고체 미입자의 현탁액)용 흡입기, 에어로졸 또는 건조 분말 흡입기인 약학적 장치.
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2009254501B2 (en) | 2008-06-05 | 2014-07-31 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against envelope proteins of a virus and polypeptides comprising the same for the treatment of viral diseases |
| MX340541B (es) | 2009-06-05 | 2016-07-13 | Alblynx Nv | Secuencias de aminoacidos mejoradas dirigidas contra virus sincitial respiratorio humano y polipeptidos que comprenden las mismas para la prevencion y/o tratamiento de infecciones del tracto respiratorio. |
| EP2507262A1 (en) | 2009-11-30 | 2012-10-10 | Ablynx N.V. | Improved amino acid sequences directed against human respiratory syncytial virus (hrsv) and polypeptides comprising the same for the prevention and/or treatment of respiratory tract infections |
| US8962807B2 (en) | 2009-12-14 | 2015-02-24 | Ablynx N.V. | Single variable domain antibodies against OX40L, constructs and therapeutic use |
| EP2533761B1 (en) | 2010-02-11 | 2019-03-27 | Ablynx N.V. | Methods and compositions for the preparation of aerosols |
| WO2012056000A1 (en) | 2010-10-29 | 2012-05-03 | Ablynx Nv | Method for the production of immunoglobulin single variable domains |
| EP3590950A1 (en) | 2011-05-09 | 2020-01-08 | Ablynx NV | Method for the production of immunoglobulin single varible domains |
| US11339208B1 (en) | 2012-05-31 | 2022-05-24 | United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force | Camelidae single-domain antibodies against Yersinia pestis and methods of use |
| PL2968520T3 (pl) | 2013-03-14 | 2022-01-03 | Macrogenics, Inc. | Dwuspecyficzne cząsteczki, które są immunoreaktywne wobec immunologicznych komórek efektorowych wykazujących ekspresję receptora aktywującego |
| CN105636936B (zh) | 2013-08-21 | 2022-04-05 | 詹森生物制药有限公司 | 抗病毒化合物 |
| SG11201700851WA (en) * | 2014-08-05 | 2017-03-30 | Alios Biopharma Inc | Combination therapy for treating a paramyxovirus |
| CA2963991A1 (en) | 2014-09-29 | 2016-04-07 | Duke University | Bispecific molecules comprising an hiv-1 envelope targeting arm |
| SG11201702688UA (en) * | 2014-10-10 | 2017-04-27 | Ablynx Nv | Methods of treating rsv infections |
| HUE044199T2 (hu) | 2014-10-10 | 2019-10-28 | Ablynx Nv | Inhalációs készülék légúti betegségek aeroszolos terápiájában való alkalmazásra |
| MA41614A (fr) | 2015-02-25 | 2018-01-02 | Alios Biopharma Inc | Composés antiviraux |
| EP3313432A1 (en) * | 2015-06-18 | 2018-05-02 | VIB vzw | Immunoglobulin single variable domain antibody against rsv prefusion f protein |
| EP3124042A1 (en) * | 2015-07-28 | 2017-02-01 | VIB, vzw | Immunoglobulin single variable domain antibody against rsv prefusion f protein |
| CN109311968A (zh) | 2016-05-02 | 2019-02-05 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 治疗rsv感染 |
| WO2017220645A1 (en) | 2016-06-23 | 2017-12-28 | Ablynx N.V. | Improved pharmacokinetic assays for immunoglobulin single variable domains |
| CN106279410B (zh) * | 2016-09-29 | 2019-08-20 | 华南理工大学 | 一种二型登革热病毒ns1蛋白多价纳米抗体及制备方法 |
| US11479600B2 (en) | 2016-10-21 | 2022-10-25 | Adimab, Llc | Anti-respiratory syncytial virus antibodies, and methods of their generation and use |
| AU2017345786B2 (en) | 2016-10-21 | 2024-08-01 | Adimab, Llc | Anti-respiratory syncytial virus antibodies, and methods of their generation and use |
| BR112019008063A2 (pt) | 2016-10-21 | 2019-07-02 | Adimab Llc | anticorpos contra o vírus sincicial anti-respiratório e métodos de sua geração e uso |
| WO2018099968A1 (en) | 2016-11-29 | 2018-06-07 | Ablynx N.V. | Treatment of infection by respiratory syncytial virus (rsv) |
| US11725045B2 (en) | 2017-10-13 | 2023-08-15 | Mapp Biopharmaceutical, Inc. | Anti-respiratory syncytial virus antibodies, methods of their generation and use |
| JP7123607B2 (ja) * | 2018-04-09 | 2022-08-23 | シャープ株式会社 | ユーザ装置、制御装置、及び通信制御方法 |
| KR20210150509A (ko) | 2019-04-10 | 2021-12-10 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | Ret에 결합하는 인간 항체 및 그것의 사용 방법 |
| CN111748571B (zh) * | 2019-10-11 | 2022-05-03 | 浙江禾霖生物科技有限公司 | 一种将枯草芽孢杆菌工程化为生产纳米抗体的多功能稳定平台的方法 |
| IL293282A (en) | 2019-11-25 | 2022-07-01 | Mabloc Llc | Yellow fever antiviral antibodies and methods of making and using them |
| US20210230248A1 (en) * | 2020-01-25 | 2021-07-29 | Jun Chen | Multivalent pharmacophores for high avidity and overexpressed-target specific binding and uses thereof |
| WO2024133935A1 (en) | 2022-12-23 | 2024-06-27 | Ablynx Nv | Protein-based conjugation carriers |
| WO2024170756A1 (en) | 2023-02-17 | 2024-08-22 | Ablynx N.V. | Polypeptides binding to the neonatal fc receptor |
| CN116693673B (zh) * | 2023-07-26 | 2023-10-20 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 广谱抗SARS和SARS-CoV-2的纳米抗体、多价纳米抗体及其应用 |
Family Cites Families (102)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1120945A (en) | 1964-08-11 | 1968-07-24 | Fisons Pharmaceuticals Ltd | Applicator in combination with a pressurised aerosol dispensing container |
| WO1990004788A1 (en) | 1988-10-28 | 1990-05-03 | Genentech, Inc. | Method for identifying active domains and amino acid residues in polypeptides and hormone variants |
| DE68913658T3 (de) | 1988-11-11 | 2005-07-21 | Stratagene, La Jolla | Klonierung von Immunglobulin Sequenzen aus den variablen Domänen |
| US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
| US5399346A (en) | 1989-06-14 | 1995-03-21 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Gene therapy |
| SE509359C2 (sv) | 1989-08-01 | 1999-01-18 | Cemu Bioteknik Ab | Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel |
| GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
| WO1991015581A1 (en) | 1990-04-05 | 1991-10-17 | Roberto Crea | Walk-through mutagenesis |
| WO1993006213A1 (en) | 1991-09-23 | 1993-04-01 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
| CA2137558A1 (en) | 1992-07-17 | 1994-02-03 | Wayne A. Marasco | Method of intracellular binding of target molecules |
| WO1994004678A1 (en) | 1992-08-21 | 1994-03-03 | Casterman Cecile | Immunoglobulins devoid of light chains |
| DE69434447T2 (de) | 1993-06-07 | 2006-05-18 | Vical, Inc., San Diego | Für die gentherapie verwendbare plasmide |
| ATE198490T1 (de) | 1993-06-09 | 2001-01-15 | Unilever Nv | Verfahren zur herstellung von fusionsproteinen, die scfv fragmente enthalten, in transformierten schimmelpilzen |
| US6091639A (en) | 1993-08-27 | 2000-07-18 | Kabushiki Kaisha Toshiba | Non-volatile semiconductor memory device and data programming method |
| ATE400651T1 (de) | 1993-09-10 | 2008-07-15 | Univ Columbia | Verwendung von grünem fluoreszenzprotein |
| WO1995021191A1 (en) | 1994-02-04 | 1995-08-10 | William Ward | Bioluminescent indicator based upon the expression of a gene for a modified green-fluorescent protein |
| JPH10501681A (ja) | 1994-02-22 | 1998-02-17 | ダナ−ファーバー キャンサー インスティチュート | 核酸送達システムならびにその合成および使用方法 |
| US5625048A (en) | 1994-11-10 | 1997-04-29 | The Regents Of The University Of California | Modified green fluorescent proteins |
| EP0739981A1 (en) | 1995-04-25 | 1996-10-30 | Vrije Universiteit Brussel | Variable fragments of immunoglobulins - use for therapeutic or veterinary purposes |
| US5693492A (en) | 1995-05-05 | 1997-12-02 | Merck & Co., Inc. | DNA encoding glutamate gated chloride channels |
| US5811524A (en) * | 1995-06-07 | 1998-09-22 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof |
| CA2225460A1 (en) | 1995-06-23 | 1997-01-09 | Winston Campbell Patterson | Transcriptional regulation of genes encoding vascular endothelial growth factor receptors |
| EP0851874B1 (en) | 1995-09-22 | 1999-09-15 | Novo Nordisk A/S | Novel variants of green fluorescent protein, gfp |
| US6027881A (en) | 1996-05-08 | 2000-02-22 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Mutant Aequorea victoria fluorescent proteins having increased cellular fluorescence |
| US6020182A (en) * | 1996-07-12 | 2000-02-01 | Connaught Laboratories Limited | Subunit respiratory syncytial virus vaccine preparation |
| US6124128A (en) | 1996-08-16 | 2000-09-26 | The Regents Of The University Of California | Long wavelength engineered fluorescent proteins |
| CA2270288A1 (en) * | 1996-11-01 | 1998-05-14 | Smithkline Beecham Corporation | Human monoclonal antibodies |
| WO1998021355A1 (en) | 1996-11-15 | 1998-05-22 | Life Technologies, Inc. | Mutants of green fluorescent protein |
| WO1998022141A2 (en) | 1996-11-19 | 1998-05-28 | Sangstat Medical Corporation | Enhanced effects for hapten conjugated therapeutics |
| US7122636B1 (en) | 1997-02-21 | 2006-10-17 | Genentech, Inc. | Antibody fragment-polymer conjugates and uses of same |
| US6329516B1 (en) | 1997-04-28 | 2001-12-11 | Fmc Corporation | Lepidopteran GABA-gated chloride channels |
| FR2766826B1 (fr) | 1997-08-04 | 2001-05-18 | Pasteur Institut | Vecteurs derives d'anticorps pour le transfert de substances dans les cellules |
| EP1469883A2 (en) | 1998-02-19 | 2004-10-27 | Xcyte Therapies, Inc. | Compositions and methods for regulating lymphocyte activation |
| GB9824632D0 (en) | 1998-11-10 | 1999-01-06 | Celltech Therapeutics Ltd | Biological compounds |
| AU779162B2 (en) | 1999-02-05 | 2005-01-06 | Rijksuniversiteit Leiden | Method of modulating metabolite biosynthesis in recombinant cells |
| OA11862A (en) | 1999-04-22 | 2006-03-02 | Unilever Nv | Inhibition of viral infection using monovalent antigen-binding proteins. |
| CO5280147A1 (es) | 1999-05-18 | 2003-05-30 | Smithkline Beecham Corp | Anticuerpo humano monoclonal |
| IL147920A0 (en) | 1999-08-02 | 2002-08-14 | Keygene Nv | Method for generating cgmmv resistant plants, genetic constructs, and the obtained cgmmv-resistant plants |
| GB9922124D0 (en) | 1999-09-17 | 1999-11-17 | Pfizer Ltd | Phosphodiesterase enzymes |
| US6849425B1 (en) | 1999-10-14 | 2005-02-01 | Ixsys, Inc. | Methods of optimizing antibody variable region binding affinity |
| DE19955408A1 (de) | 1999-11-18 | 2001-05-23 | Bayer Ag | GABA-B-Rezeptoren |
| PT1240337E (pt) | 1999-12-24 | 2007-01-31 | Genentech Inc | Métodos e composições para prolongar as meias-vidas de eliminação de compostos bioactivos |
| US6741957B1 (en) | 2000-07-21 | 2004-05-25 | Daimlerchrysler Corporation | Analytical tire model for vehicle durability and ride comfort analysis |
| US6818216B2 (en) | 2000-11-28 | 2004-11-16 | Medimmune, Inc. | Anti-RSV antibodies |
| US7054297B1 (en) | 2000-12-28 | 2006-05-30 | Cisco Technology, Inc. | Distribution of packets to high data rate communications devices using multicast protocols |
| CA2433877C (en) | 2001-01-17 | 2014-11-18 | Genecraft, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
| US7829084B2 (en) | 2001-01-17 | 2010-11-09 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding constructs and methods for use thereof |
| EP1377306A1 (en) | 2001-03-09 | 2004-01-07 | Dyax Corp. | Serum albumin binding moieties |
| DE60237282D1 (de) | 2001-06-28 | 2010-09-23 | Domantis Ltd | Doppelspezifischer ligand und dessen verwendung |
| US20060073141A1 (en) | 2001-06-28 | 2006-04-06 | Domantis Limited | Compositions and methods for treating inflammatory disorders |
| AU2002355477B2 (en) | 2001-08-03 | 2008-09-25 | Medical Research Council | Method of identifying a consensus sequence for intracellular antibodies |
| FR2829940A1 (fr) | 2001-09-27 | 2003-03-28 | Synt Em | Compositions pour la vectorisation d'anticorps a travers la barriere hematoencephalique et leur utilisation pour le diagnostic ou le traitement des maladies du systeme nerveux central |
| KR100599789B1 (ko) | 2001-12-03 | 2006-07-12 | 삼성에스디아이 주식회사 | 방열효율이 향상된 플라즈마 디스플레이 장치 및 그 제조방법 |
| WO2003050531A2 (en) | 2001-12-11 | 2003-06-19 | Algonomics N.V. | Method for displaying loops from immunoglobulin domains in different contexts |
| JP2005516939A (ja) | 2001-12-18 | 2005-06-09 | イノジェネティックス・ナムローゼ・フェンノートシャップ | 診断及び治療用途の精製ｃ型肝炎ウイルス外被タンパク質 |
| KR100708398B1 (ko) | 2002-03-22 | 2007-04-18 | (주) 에이프로젠 | 인간화 항체 및 이의 제조방법 |
| US7132100B2 (en) * | 2002-06-14 | 2006-11-07 | Medimmune, Inc. | Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations |
| DK1517921T3 (da) * | 2002-06-28 | 2006-10-09 | Domantis Ltd | Immunglobulin-enkeltvariable antigen-bindende domæner og dobbeltspecifikke konstruktioner deraf |
| US7004940B2 (en) | 2002-10-10 | 2006-02-28 | Ethicon, Inc. | Devices for performing thermal ablation having movable ultrasound transducers |
| BRPI0315666B8 (pt) | 2002-10-23 | 2021-05-25 | Ludwig Inst For Cancer Res Ltd | dna de a34 e a33 do tipo 3, proteínas, seus anticorpos e métodos de tratamento usando os mesmos |
| BRPI0316092B8 (pt) | 2002-11-08 | 2021-05-25 | Ablynx Nv | anticorpos de domínio único direcionados contra o fator de necrose tumoral alfa e usos para os mesmos |
| EP2336179A1 (en) | 2002-11-08 | 2011-06-22 | Ablynx N.V. | Stabilized single domain antibodies |
| GB0230203D0 (en) | 2002-12-27 | 2003-02-05 | Domantis Ltd | Fc fusion |
| EP1578842B1 (en) | 2002-12-31 | 2009-10-07 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Hydrolytically stable maleimide-terminated polymers |
| EP2390270A1 (en) | 2003-01-10 | 2011-11-30 | Ablynx N.V. | Therapeutic polypeptides, homologues thereof, fragments thereof and for use in modulating platelet-mediated aggregation |
| EP2395016A3 (en) | 2003-05-30 | 2012-12-19 | Merus B.V. | Design and use of paired variable regions of specific binding molecules |
| US7070786B2 (en) | 2003-06-06 | 2006-07-04 | Centocor, Inc. | RSV proteins, antibodies, compositions, methods and uses |
| US20050136428A1 (en) | 2003-06-27 | 2005-06-23 | Roberto Crea | Look-through mutagenesis |
| PT1639011E (pt) | 2003-06-30 | 2009-01-20 | Domantis Ltd | Anticorpos (dab) de domínio único peguilados |
| WO2005001690A2 (de) | 2003-06-30 | 2005-01-06 | Siemens Aktiengesellschaft | Verfahren zur überwachung des programmlaufs in einem mikro-computer |
| AU2003264053A1 (en) | 2003-08-12 | 2005-03-10 | William M. Yarbrough | Treatment for acne vulgaris and method of use |
| EP1512696A1 (en) | 2003-08-14 | 2005-03-09 | Diatos | Amino acid sequences facilitating penetration of a substance of interest into cells and/or cell nuclei |
| DK1737971T3 (da) | 2004-01-20 | 2017-11-13 | Merus Nv | Blandinger af bindingsproteiner |
| US20050288491A1 (en) | 2004-02-17 | 2005-12-29 | Wilson David S | Super-humanized antibodies against respiratory syncytial virus |
| US7207410B2 (en) | 2004-04-29 | 2007-04-24 | Daimlerchrysler Corporation | Apparatus and method for enhanced impact sensing |
| KR101699142B1 (ko) | 2004-06-18 | 2017-01-23 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 신규 항원-결합 폴리펩티드 및 이의 용도 |
| ES2372503T3 (es) | 2004-07-06 | 2012-01-20 | Bioren, Inc. | Mutagénesis revisada para desarrollar polipéptidos alterados con propiedades potenciadas. |
| US7180370B2 (en) | 2004-09-01 | 2007-02-20 | Micron Technology, Inc. | CMOS amplifiers with frequency compensating capacitors |
| US7563443B2 (en) | 2004-09-17 | 2009-07-21 | Domantis Limited | Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof |
| WO2006034292A2 (en) | 2004-09-21 | 2006-03-30 | Medimmune, Inc. | Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus |
| CA2583017A1 (en) | 2004-10-13 | 2006-04-20 | Ablynx N.V. | Single domain camelide anti-amyloid beta antibodies and polypeptides comprising the same for the treatment and diagnosis of degenerative neural diseases such as alzheimer's disease |
| TW200636064A (en) * | 2004-10-28 | 2006-10-16 | Centocor Inc | Anti-respiratory syncytial virus antibodies, antigens and uses thereof |
| US20060115485A1 (en) | 2004-10-29 | 2006-06-01 | Medimmune, Inc. | Methods of preventing and treating RSV infections and related conditions |
| WO2006059108A2 (en) * | 2004-12-02 | 2006-06-08 | Domantis Limited | ANTI-IL-IRl SINGLE DOMAIN ANTIBODIES AND THERAPEUTIC USES |
| JP5011277B2 (ja) | 2005-04-06 | 2012-08-29 | アイビーシー・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド | ホモダイマー、ホモテトラマーまたはダイマーのダイマーのからなる安定に連結された複合体を発生させるための方法および使用 |
| AU2006234847A1 (en) | 2005-04-08 | 2006-10-19 | Medimmune, Llc | Antibodies against mammalian metapneumovirus |
| MX342271B (es) | 2005-05-18 | 2016-09-21 | Ablynx Nv | Nanobodiestm (nanocuerpos) mejorados contra el factor alfa de necrosis del tumor. |
| CA2666599A1 (en) | 2006-08-18 | 2008-02-21 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against il-6r and polypeptides comprising the same for the treatment of diseases and disorders associated with il-6-mediated signalling |
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