CN109311968A - 治疗rsv感染 - Google Patents
治疗rsv感染 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109311968A CN109311968A CN201780027276.0A CN201780027276A CN109311968A CN 109311968 A CN109311968 A CN 109311968A CN 201780027276 A CN201780027276 A CN 201780027276A CN 109311968 A CN109311968 A CN 109311968A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polypeptide
- atomizer
- months
- rsv
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 206010061603 Respiratory syncytial virus infection Diseases 0.000 title claims abstract description 154
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 319
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 313
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 313
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 188
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 115
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 115
- 206010024971 Lower respiratory tract infections Diseases 0.000 claims description 80
- 229940124630 bronchodilator Drugs 0.000 claims description 69
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 67
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 58
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 57
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 claims description 49
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 34
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 31
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 24
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims description 22
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 21
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 18
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 claims description 16
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 16
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 14
- NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N albuterol Chemical group CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=C1 NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229960002052 salbutamol Drugs 0.000 claims description 12
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 12
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 8
- XWTYSIMOBUGWOL-UHFFFAOYSA-N (+-)-Terbutaline Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC(O)=CC(O)=C1 XWTYSIMOBUGWOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000812 cholinergic antagonist Substances 0.000 claims description 7
- 229960000195 terbutaline Drugs 0.000 claims description 7
- 241000711920 Human orthopneumovirus Species 0.000 claims description 6
- 229960002848 formoterol Drugs 0.000 claims description 6
- BPZSYCZIITTYBL-UHFFFAOYSA-N formoterol Chemical group C1=CC(OC)=CC=C1CC(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(NC=O)=C1 BPZSYCZIITTYBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- YREYLAVBNPACJM-UHFFFAOYSA-N 2-(tert-butylamino)-1-(2-chlorophenyl)ethanol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=CC=C1Cl YREYLAVBNPACJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- LSLYOANBFKQKPT-DIFFPNOSSA-N 5-[(1r)-1-hydroxy-2-[[(2r)-1-(4-hydroxyphenyl)propan-2-yl]amino]ethyl]benzene-1,3-diol Chemical compound C([C@@H](C)NC[C@H](O)C=1C=C(O)C=C(O)C=1)C1=CC=C(O)C=C1 LSLYOANBFKQKPT-DIFFPNOSSA-N 0.000 claims description 5
- VQDBNKDJNJQRDG-UHFFFAOYSA-N Pirbuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=N1 VQDBNKDJNJQRDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960001022 fenoterol Drugs 0.000 claims description 5
- 229960005414 pirbuterol Drugs 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 claims description 5
- 229960000859 tulobuterol Drugs 0.000 claims description 5
- LERNTVKEWCAPOY-VOGVJGKGSA-N C[N+]1(C)[C@H]2C[C@H](C[C@@H]1[C@H]1O[C@@H]21)OC(=O)C(O)(c1cccs1)c1cccs1 Chemical group C[N+]1(C)[C@H]2C[C@H](C[C@@H]1[C@H]1O[C@@H]21)OC(=O)C(O)(c1cccs1)c1cccs1 LERNTVKEWCAPOY-VOGVJGKGSA-N 0.000 claims description 4
- 229960001609 oxitropium bromide Drugs 0.000 claims description 4
- LCELQERNWLBPSY-KHSTUMNDSA-M oxitropium bromide Chemical compound [Br-].C1([C@@H](CO)C(=O)O[C@H]2C[C@@H]3[N+]([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)(C)CC)=CC=CC=C1 LCELQERNWLBPSY-KHSTUMNDSA-M 0.000 claims description 4
- 229960000257 tiotropium bromide Drugs 0.000 claims description 4
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 18
- UZIQYAYUUNMDMU-UHFFFAOYSA-N N.[Br+] Chemical compound N.[Br+] UZIQYAYUUNMDMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims 1
- 229940030966 pyrrole Drugs 0.000 claims 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 abstract description 58
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract description 23
- 238000011160 research Methods 0.000 description 121
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 59
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 55
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 47
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 38
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 35
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 34
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 34
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 33
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 30
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 29
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 29
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 27
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 27
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 27
- 239000003570 air Substances 0.000 description 25
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 25
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 24
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 24
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 23
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 23
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 21
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 21
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 21
- 201000004813 Bronchopneumonia Diseases 0.000 description 20
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 18
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 18
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 18
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 18
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 16
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 16
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 15
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 15
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 15
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 description 14
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 13
- 230000008859 change Effects 0.000 description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 13
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 12
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 11
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 11
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 10
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 229940071648 metered dose inhaler Drugs 0.000 description 10
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 10
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 10
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 9
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 9
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 9
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 9
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 9
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 9
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 8
- 210000003123 bronchiole Anatomy 0.000 description 8
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 8
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 7
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 6
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 6
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 6
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 6
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 6
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 6
- 239000002585 base Substances 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 238000012552 review Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 5
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 5
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 5
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 5
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 5
- 206010038687 Respiratory distress Diseases 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000000168 bronchodilator agent Substances 0.000 description 5
- -1 carrier Substances 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 5
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 5
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 5
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 5
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 5
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 5
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 5
- 229940127211 short-acting beta 2 agonist Drugs 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 4
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 4
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 4
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 4
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 4
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 4
- 230000007958 sleep Effects 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N urea group Chemical group NC(=O)N XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical group OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100032341 PCNA-interacting partner Human genes 0.000 description 3
- 101710196737 PCNA-interacting partner Proteins 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GIIZNNXWQWCKIB-UHFFFAOYSA-N Serevent Chemical compound C1=C(O)C(CO)=CC(C(O)CNCCCCCCOCCCCC=2C=CC=CC=2)=C1 GIIZNNXWQWCKIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 238000012382 advanced drug delivery Methods 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 208000037883 airway inflammation Diseases 0.000 description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 3
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 108700023453 human respiratory syncytial virus F Proteins 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 3
- 238000012004 kinetic exclusion assay Methods 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 230000005868 ontogenesis Effects 0.000 description 3
- 230000032633 organ maturation Effects 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 3
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 3
- 229960004017 salmeterol Drugs 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 3
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 3
- KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N (-)-ephedrine Chemical compound CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 2
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 101000926057 Human herpesvirus 2 (strain G) Envelope glycoprotein C Proteins 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 241000144300 Peromyscus gossypinus Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical compound C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010044302 Tracheitis Diseases 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000002555 auscultation Methods 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000007596 consolidation process Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000004980 dosimetry Methods 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- MMXKVMNBHPAILY-UHFFFAOYSA-N ethyl laurate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC MMXKVMNBHPAILY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 239000010408 film Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 229960001888 ipratropium Drugs 0.000 description 2
- OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N ipratropium Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)[N@@+]2(C)C(C)C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 OEXHQOGQTVQTAT-JRNQLAHRSA-N 0.000 description 2
- 229960001361 ipratropium bromide Drugs 0.000 description 2
- KEWHKYJURDBRMN-ZEODDXGYSA-M ipratropium bromide hydrate Chemical compound O.[Br-].O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)[N@@+]2(C)C(C)C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 KEWHKYJURDBRMN-ZEODDXGYSA-M 0.000 description 2
- 238000001459 lithography Methods 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 2
- 238000013439 planning Methods 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 2
- 238000012383 pulmonary drug delivery Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N theobromine Chemical compound CN1C(=O)NC(=O)C2=C1N=CN2C YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N theophylline Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 230000036325 urinary excretion Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000017613 viral reproduction Effects 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N (S)-amphetamine Chemical compound C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GNENVASJJIUNER-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tricyclohexyloxy-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinane Chemical compound C1CCCCC1OB1OB(OC2CCCCC2)OB(OC2CCCCC2)O1 GNENVASJJIUNER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RNAMYOYQYRYFQY-UHFFFAOYSA-N 2-(4,4-difluoropiperidin-1-yl)-6-methoxy-n-(1-propan-2-ylpiperidin-4-yl)-7-(3-pyrrolidin-1-ylpropoxy)quinazolin-4-amine Chemical compound N1=C(N2CCC(F)(F)CC2)N=C2C=C(OCCCN3CCCC3)C(OC)=CC2=C1NC1CCN(C(C)C)CC1 RNAMYOYQYRYFQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006448 Bronchiolitis Diseases 0.000 description 1
- 101100180402 Caenorhabditis elegans jun-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 241001269238 Data Species 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001379910 Ephemera danica Species 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HUYWAWARQUIQLE-UHFFFAOYSA-N Isoetharine Chemical compound CC(C)NC(CC)C(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 HUYWAWARQUIQLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229940121948 Muscarinic receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 241001503699 Muscovy duck parvovirus Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- RCEAADKTGXTDOA-UHFFFAOYSA-N OS(O)(=O)=O.CCCCCCCCCCCC[Na] Chemical compound OS(O)(=O)=O.CCCCCCCCCCCC[Na] RCEAADKTGXTDOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000131316 Panax pseudoginseng Species 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000711904 Pneumoviridae Species 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 206010042566 Superinfection Diseases 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N THC Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046722 Thrombospondin 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 229940118555 Viral entry inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910021502 aluminium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002821 alveolar epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002588 alveolar type II cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940025084 amphetamine Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 1
- 208000008784 apnea Diseases 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000009267 bronchiectasis Diseases 0.000 description 1
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 1
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008131 children development Effects 0.000 description 1
- 210000000215 ciliated epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003109 clavicle Anatomy 0.000 description 1
- 229960001117 clenbuterol Drugs 0.000 description 1
- STJMRWALKKWQGH-UHFFFAOYSA-N clenbuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC(Cl)=C(N)C(Cl)=C1 STJMRWALKKWQGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000013039 cover film Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N d-ephedrine Natural products CNC(C)C(O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000005034 decoration Methods 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000533 dornase alfa Drugs 0.000 description 1
- 108010067396 dornase alfa Proteins 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229960004242 dronabinol Drugs 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 229960002179 ephedrine Drugs 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002637 fluid replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 108700002314 gontivimab Proteins 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000087 hemolymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 238000013115 immunohistochemical detection Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000003601 intercostal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 208000030500 lower respiratory tract disease Diseases 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- LMOINURANNBYCM-UHFFFAOYSA-N metaproterenol Chemical compound CC(C)NCC(O)C1=CC(O)=CC(O)=C1 LMOINURANNBYCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001252 methamphetamine Drugs 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- SYHGEUNFJIGTRX-UHFFFAOYSA-N methylenedioxypyrovalerone Chemical compound C=1C=C2OCOC2=CC=1C(=O)C(CCC)N1CCCC1 SYHGEUNFJIGTRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000010352 nasal breathing Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002261 nucleate cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960002657 orciprenaline Drugs 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 229960000797 oxitropium Drugs 0.000 description 1
- NVOYVOBDTVTBDX-PMEUIYRNSA-N oxitropium Chemical compound CC[N+]1(C)[C@H]2C[C@@H](C[C@@H]1[C@H]1O[C@@H]21)OC(=O)[C@H](CO)C1=CC=CC=C1 NVOYVOBDTVTBDX-PMEUIYRNSA-N 0.000 description 1
- 229960000402 palivizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008249 pharmaceutical aerosol Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 108010054442 polyalanine Proteins 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 208000010707 pulmonary consolidation Diseases 0.000 description 1
- 238000002106 pulse oximetry Methods 0.000 description 1
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 210000003019 respiratory muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229960001634 ritodrine Drugs 0.000 description 1
- IOVGROKTTNBUGK-SJCJKPOMSA-N ritodrine Chemical compound N([C@@H](C)[C@H](O)C=1C=CC(O)=CC=1)CCC1=CC=C(O)C=C1 IOVGROKTTNBUGK-SJCJKPOMSA-N 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000013391 scatchard analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000010206 sensitivity analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 229940125387 short-acting bronchodilator Drugs 0.000 description 1
- 229920006268 silicone film Polymers 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960004559 theobromine Drugs 0.000 description 1
- 229960000278 theophylline Drugs 0.000 description 1
- 229930192474 thiophene Natural products 0.000 description 1
- 229940110309 tiotropium Drugs 0.000 description 1
- LERNTVKEWCAPOY-DZZGSBJMSA-N tiotropium Chemical compound O([C@H]1C[C@@H]2[N+]([C@H](C1)[C@@H]1[C@H]2O1)(C)C)C(=O)C(O)(C=1SC=CC=1)C1=CC=CS1 LERNTVKEWCAPOY-DZZGSBJMSA-N 0.000 description 1
- 108091007466 transmembrane glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 239000005723 virus inoculator Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1027—Paramyxoviridae, e.g. respiratory syncytial virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
- A61K2039/541—Mucosal route
- A61K2039/544—Mucosal route to the airways
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/35—Valency
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/626—Diabody or triabody
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
提供了用于治疗年幼儿童中的RSV感染的方法。更具体地，提供了这样的方法，其中结合h RSV的F蛋白并中和RSV感染的多肽以特定剂量方案施用于年幼儿童的肺。
Description
发明领域
本发明提供了治疗年幼儿童RSV感染的方法。更具体地，本发明提供中和RSV的免疫球蛋白单可变结构域的特定剂量方案用于对年幼儿童进行肺部施用。
发明背景
呼吸道合胞病毒(RSV)是婴儿和年幼儿童严重呼吸道感染的复现原因，并在冬季引起年度流行病。RSV通常在进入点(沿着鼻腔和气道排列的纤毛上皮细胞)引起其原发感染(Black 2003,Respir.Care 48:209-31；discussion 231-3)。原发感染通常是有症状的，临床症状从轻度上呼吸道疾病到更严重的下呼吸道感染(LRTI)，包括支气管肺炎和细支气管炎(Aliyu,等.2010,Bayero Journal of Pure and Applied Sciences 3:147-155)，这主要发生在婴儿中。
跨膜糖蛋白F和G是RSV的主要表面抗原。附着蛋白(G)介导与细胞受体的结合，而F蛋白促进与细胞膜的融合，从而允许渗透到宿主细胞中(Lopez等.J Virol.1998,72:6922-8)。基于G蛋白的抗原性和遗传变异性，已经鉴定了2种RSV血清型(A和B)以及几种亚型。
与G蛋白相反，F蛋白在RSV血清型A和B之间高度保守(89％氨基酸同一性)，因此被认为是开发病毒进入抑制剂的主要靶标。糖蛋白F还诱导感染细胞与相邻未感染细胞的融合。这种标志性特征导致多核细胞形成(上皮细胞合胞体)的出现，其允许复制的病毒核糖核酸(RNA)的细胞间传递，赋予针对宿主免疫应答的额外保护(Black 2003)。
RSV感染给医疗保健基础设施带来了沉重的负担，并且仍然存在对治疗选择的高度医疗需求，特别是因为没有可用于预防RSV感染的疫苗。
市场上唯一可用的药物产品是针对病毒糖蛋白F的人源化单克隆抗体((帕利珠单抗))，其预防性地用于处于患上严重hRSV感染的高风险中的儿童。的限制使用至少部分是由于该产品的高成本。由于没有足够的药物可用于治疗RSV感染，因此住院婴儿的护理标准大多是支持性的(例如，根据需要补充流体/喂养，观察和呼吸支持)。显然需要用于预防和/或治疗hRSV感染的改进的和/或更便宜的预防剂和/或治疗剂。
本公开的SEQ ID NO:65-85是针对人呼吸道合胞病毒的融合蛋白的免疫球蛋白单可变结构域。SEQ ID NO:65-85由通过柔性接头重组连接的3个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域组成。
SEQ ID NO:65-85在体外和体内被广泛表征(参见例如WO 2010/139808；其内容通过引用整体并入)。抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域特异性地和有效地结合呼吸道合胞病毒(RSV)F蛋白。在HEp2细胞中的体外微中和研究表明，这些抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域抑制病毒生命周期中的早期事件，阻止细胞外病毒感染未遭遇病毒的细胞。在RSV感染的棉鼠和羔羊中证实了SEQ ID NO:65-85的功效。
由于SEQ ID NO:65-85旨在中和和抑制RSV，因此通过气溶胶装置在呼吸道中直接递送和沉积被认为是优选和最合适的施用途径。在WO2011/098552中已经广泛描述了作为雾化器溶液的免疫球蛋白单可变结构域(包括SEQ ID NO:65-85)的制剂。
发明概述
已经在成人志愿者的三个I期临床研究中进一步评估了吸入SEQ ID NO:71的安全性，耐受性和药代动力学(PK)参数。这些研究表明，吸入和静脉内(i.v.)输注SEQ ID NO:71通常是良好耐受的。然而，不可能从成人到儿童，或从年龄较大的儿童到年幼儿童外推功效，因为RSV引起的下呼吸道疾病在这些人群中很少发生。
为了解决对RSV感染的有效预防和/或治疗的这种长期但未满足的需求，特别是在儿童等高风险人群中，本发明提供了用于儿科患者的生物学肺部施用的剂量方案。更具体地，本发明提供了用于向年幼儿童(例如婴儿和学步儿(toddler))肺部施用免疫球蛋白单可变结构域的剂量方案。
如上所述，对于RSV中和药物，不可能从成人到儿童，或从年龄较大的儿童到年幼儿童外推功效，因为RSV引起的下呼吸道疾病很少发生在这些人群中。因此，剂量确定只能基于建模方法。
儿科人群的剂量测定传统上使用与体重，身高或年龄相关的函数从成人剂量进行扩展。某些治疗剂(例如(dornase alfa))以固定剂量给予包括婴儿在内的所有年龄。与这些通常的剂量确定不同，在本发明中，还设计了建模方法，其还考虑了生长和发育过程，例如器官成熟，血流变化，身体组成和消除机制的个体发育，包括药物的递送和沉积以及其自发育中的肺泡腔的吸收。
本发明意外地确定了用于对年幼儿童进行生物学肺部给药的剂量方案主要由儿童及其成熟器官的生理学差异驱动。更具体地，发明人确定，与成人肺中的递送，分布和吸收相比，本发明中的剂量确定主要由发育中的儿童肺中药物的肺部递送，分布和吸收的差异引导。因此，RSV感染儿童中驱动全身和局部PK的首要重要参数表现为肺泡吸收空间中的药物量。基于本发明的建模方法，估计在使用0.024mg/kg体重的沉积剂量的情况下在肺泡空间中达到获得临床上有意义的RSV活性降低的目标浓度(9μg/ml)。由于肺泡表面积和随之的肺泡容量与体重成比例，因此对于体重标准化剂量肺泡浓度实际上不依赖于年龄。
基于上述设计的模型和观察结果，本发明提供了一种用于向儿科受试者肺部施用RSV中和免疫球蛋白单可变结构域的剂量方案，该剂量方案导致在下呼吸道中观察到抗病毒活性的局部药物浓度。
因此，本发明涉及治疗年幼儿童RSV感染的方法，所述方法包括给患有RSV感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天0.020-0.040mg/kg，优选每天0.020-0.035mg/kg(如例如每天0.024mg/kg)的沉积剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及用于治疗年幼儿童的RSV感染的多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天0.020-0.040mg/kg，优选每天0.020-0.035mg/kg(如例如每天0.024mg/kg)的沉积剂量施用给患有RSV感染的儿童。在该多肽的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该多肽的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及治疗年幼儿童RSV感染的方法，所述方法包括给患有RSV感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天0.20-0.40mg/kg，优选每天0.20-0.35mg/kg(如例如每天0.24mg/kg)的吸入剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及用于治疗年幼儿童的RSV感染的多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天0.20-0.40mg/kg，优选每天0.20-0.35mg/kg(如例如每天0.24mg/kg)的吸入剂量施用给患有RSV感染的儿童。在该多肽的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该多肽的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及治疗年幼儿童RSV感染的方法，所述方法包括给患有RSV感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天1.00-2.00mg/kg，优选每天1.00-1.75mg/kg(如例如每天1.20mg/kg)的标称剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及用于治疗年幼儿童的RSV感染的多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天1.00-2.00mg/kg，优选每天1.00-1.75mg/kg(如例如每天1.20mg/kg)的标称剂量施用给患有RSV感染的儿童。在该多肽的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该多肽的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
RSV感染包括上呼吸道的RSV感染，下呼吸道的RSV感染，包括细支气管炎和支气管肺炎，以及与RSV感染相关的疾病和/或障碍，如呼吸道疾病，上呼吸道感染，下呼吸道感染，细支气管炎(肺部小气道炎症)，肺炎，呼吸困难，咳嗽，(复发性)喘鸣和(恶化的)哮喘或与hRSV相关的COPD(慢性阻塞性肺病)。在一个方面，RSV感染是RSV下呼吸道感染。因此，本发明涉及治疗年幼儿童RSV下呼吸道感染的方法，所述方法包括给患有RSV下呼吸道感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给儿童：每天0.020-0.040mg/kg，优选每天0.020-0.035mg/kg(如例如每天0.024mg/kg)的沉积剂量；每天0.20-0.40mg/kg，优选每天0.20-0.35mg/kg(如例如每天0.24mg/kg)的吸入剂量；每天1.00-2.00mg/kg，优选每天1.00-1.75mg/kg(如例如每天1.20mg/kg)的标称剂量。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及用于治疗年幼儿童的RSV下呼吸道感染的多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给患有RSV下呼吸道感染的儿童：每天0.020-0.040mg/kg，优选每天0.020-0.035mg/kg(如例如每天0.024mg/kg)的沉积剂量；每天0.20-0.40mg/kg，优选每天0.20-0.35mg/kg(如例如每天0.24mg/kg)的吸入剂量；每天1.00-2.00mg/kg，优选每天1.00-1.75mg/kg(如例如每天1.20mg/kg)的标称剂量。在该多肽的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该多肽的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
在一个方面，年幼儿童的年龄小于5个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄小于36个月。
在一个方面，年幼儿童年龄为28天至小于5个月。
在一个方面，年幼儿童年龄为28天至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为1个月至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为3个月至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为5个月至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童年龄为28天至小于36个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为1个月至小于36个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为3个月至小于36个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为5个月至小于36个月。
在一个方面，年幼儿童是婴儿。
在一个方面，年幼儿童是学步儿。
在一个方面，年幼儿童被诊断患有RSV下呼吸道感染，但在其他方面是健康的。
在一个方面，年幼儿童因RSV下呼吸道感染住院。
所述多肽(也称为“本发明的多肽”)包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成。在一个方面，本发明的多肽以5×10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白。在一个方面，本发明的多肽以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV。在一个优选的方面，本发明的多肽以5×10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白并以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV。在该多肽的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该多肽的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
优选的本发明多肽包括至少一个(优选两个，最优选三个)抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，其包含具有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的CDR1，具有SEQ ID NO:49-50之一的氨基酸序列的CDR2，以及具有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的CDR3，优选具有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的CDR1，具有SEQ ID NO:49的氨基酸序列的CDR2，以及具有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的CDR3。在一个方面，本发明的优选多肽包括至少一个(优选两个，最优选三个)抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，其选自SEQ ID NO:1-34的氨基酸序列之一，优选SEQ ID NO:1-2之一。在一个方面，本发明的多肽选自SEQ ID NO:65-85的氨基酸序列之一，优选SEQ IDNO:71。
在一个方面，多肽每天施用连续2至5天，或更长，如每天施用连续2天，连续3天，连续4天，连续5天或更长，如例如连续3天。
本发明的多肽可以作为单一疗法或与另一种治疗剂组合施用。在一个方面，本发明的多肽作为单一疗法施用。在一个方面，本发明的多肽作为组合疗法施用。
因此，本发明还提供了一种治疗年幼儿童RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括通过吸入给患有RSV感染的儿童同时，单独或顺序施用抗RSV多肽和支气管扩张剂，所述抗RSV多肽以5x10-10M或更低的KD结合RSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和RSV，并且包含三个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天0.020-0.040mg/kg，每天0.020-0.035mg/kg或每天0.024mg/kg的沉积剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及用于在治疗年幼儿童RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法中使用的抗RSV多肽和支气管扩张剂，所述抗RSV多肽以5x10-10M或更低的KD结合RSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和RSV，并且包含三个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中通过吸入给患有RSV感染的儿童同时，单独或顺序施用所述多肽和所述支气管扩张剂，并且其中所述多肽通过吸入以每天0.020-0.040mg/kg，每天0.020-0.035mg/kg或每天0.024mg/kg的沉积剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
因此，另一方面，本发明还提供了一种治疗年幼儿童RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括通过吸入给患有RSV感染的儿童同时，单独或顺序施用抗RSV多肽和支气管扩张剂，所述抗RSV多肽以5x10-10M或更低的KD结合RSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和RSV，并且包含三个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天0.20-0.40mg/kg，每天0.20-0.35mg/kg或每天0.24mg/kg的吸入剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及用于在治疗年幼儿童RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法中使用的抗RSV多肽和支气管扩张剂，所述抗RSV多肽以5x10-10M或更低的KD结合RSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和RSV，并且包含三个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中通过吸入给患有RSV感染的儿童同时，单独或顺序施用所述多肽和所述支气管扩张剂，并且其中所述多肽通过吸入以每天0.20-0.40mg/kg，每天0.20-0.35mg/kg或每天0.24mg/kg的吸入剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
因此，另一方面，本发明还提供了一种治疗年幼儿童RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括通过吸入给患有RSV下呼吸道感染的儿童同时，单独或顺序施用抗RSV多肽和支气管扩张剂，所述抗RSV多肽以5x10-10M或更低的KD结合RSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和RSV，并且包含三个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽通过吸入以每天1.00-2.00mg/kg，每天1.00-1.75mg/kg或每天1.20mg/kg的标称剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
本发明还涉及用于在治疗年幼儿童RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法中使用的抗RSV多肽和支气管扩张剂，所述抗RSV多肽以5x10-10M或更低的KD结合RSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和RSV，并且包含三个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中通过吸入给患有RSV感染的儿童同时，单独或顺序施用所述多肽和所述支气管扩张剂，并且其中所述多肽通过吸入以每天1.00-2.00mg/kg，每天1.00-1.75mg/kg或每天1.20mg/kg的标称剂量施用给儿童。在该方法的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该方法的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
所述支气管扩张剂优选属于β2-拟似物(beta2-mimetics)类或抗胆碱能药类。在一个方面，支气管扩张剂是长效β2拟似物，如例如福莫特罗(formoterol)或其溶剂化物，沙美特罗(salmeterol)或其盐，或其混合物。另一方面，支气管扩张剂是短效β2拟似物，如例如沙丁胺醇(salbutamol)，特布他林(terbutaline)，吡布特罗(pirbuterol)，非诺特罗(fenoterol)，妥洛特罗(tulobuterol)，levosabutamol或其混合物。另一方面，支气管扩张剂是抗胆碱能药，如例如噻托溴铵(tiotropium)，氧托溴铵(oxitropium)，异丙托溴铵(ipratropium bromide)或其混合物。
本发明还涉及吸入装置，如雾化器，其包含0.150-0.400mL或0.150-0.500mL的包含浓度为50mg/mL的本发明多肽的组合物。在一个方面，雾化器是振动网式雾化器。在一个方面，雾化器具有固定的空气或氧气流动。本发明还涉及这样的雾化器，其包含0.150-0.400mL或0.150-0.500mL的包含浓度为50mg/mL的本发明多肽的组合物，其用于本发明的方法。本发明的示例性雾化器包含0.150-0.400mL或0.150-0.500mL的50mg/mL的组合物，所述组合物包含多肽，基本上由其组成或由其组成，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成。在该雾化器的某些方面，KD可以通过免疫测定来测量。备选地，或另外地，在该雾化器的某些方面，可以在微中和测定中测量IC90。
附图说明
图1是描绘本发明中使用的建模策略的概述的示意图。标称剂量：雾化器中填充的SEQ ID NO:71的量；递送剂量：由振动网式雾化器产生的气溶胶颗粒中的并且在吸入用面罩中可获得的SEQ ID NO:71的量；吸入剂量：上呼吸道处可获得的气溶胶颗粒中的SEQ IDNO:71的量(即，吸入的剂量)；沉积剂量：沉积在下呼吸道中的气溶胶颗粒中的SEQ ID NO:71的量；全身剂量：通过下呼吸道的肺泡衬里液(lining fluid)吸收并释放到循环中的SEQID NO:71的量。
图2是本发明的肺部施用模型中肺器官的图示。与标准PK-模型相比的模型结构的扩展由粗体框标记，代表肺泡衬里液(ALF室)。
图3是描绘PBPK模型构建和缩放步骤的示意图。IP：肺内；IV：静脉内；物理化学数据：SEQ ID NO:71的表征。
图4是描绘沉积在呼吸道的不同区域中的吸入剂量的分数的图，其用用于安静鼻吸入的MPPD工具计算。年龄特异性肺模型：3个月，21个月，23个月和28个月。
图5是这样的图，其描绘与正常呼吸的结果相比，用MPPD工具计算的针对不同的窘迫呼吸情景的沉积在肺泡空间中的吸入剂量的年龄相关分数。
图6A-6B是一对图，其提供(图6A)大鼠单剂量IV施用(剂量5mg/kg)后SEQ ID NO:71的实验与模拟血浆浓度-时间曲线的比较。符号：实验数据，线：模拟；(图6B)在狗中多次IV施用(递增剂量为3mg/kg，10mg/kg和30mg/kg)。符号：实验数据；线：模拟。
图7是系列图，其提供大鼠肺部施用(表B-1：研究1)后SEQ ID NO:71的实验与模拟血浆浓度-时间曲线的比较。符号：实验数据；线：模拟。
图8是系列图，其提供在大鼠肺部施用(表B-1：研究1)后BALF中SEQ ID NO:71的实验量与肺泡吸收室中SEQ ID NO:71的模拟量的比较。符号：实验数据(来自右肺的实验BALF数据根据肺叶的重量按比例缩放至整个肺)；线：模拟。
图9是系列图，其提供大鼠肺部施用(表B-1：研究4)后第1天和第14天SEQ ID NO:71的实验与模拟血浆浓度-时间曲线的比较。符号：实验数据；线：模拟。
图10是系列图，其提供在大鼠肺部施用(表B-1：研究4)后BALF中SEQ ID NO:71的实验量与肺泡吸收室中的模拟量的比较(在第1天和第14天)。符号：实验数据；线：模拟。
图11A-11C是系列图，其提供以(图11A)70mg；(图11B)140mg；(图11C)210mg肺部施用SEQ ID NO:71(表B-1：研究5)后单个个体的实验与模拟血浆浓度-时间曲线的比较。符号：实验数据；线：模拟。
图12是这样的图，其提供IV施用(表B-1：研究6)后的SEQ ID NO:71的个体实验血浆浓度-时间曲线与从大鼠缩放的人模型的模拟结果的比较。符号：实验数据；线：模拟。灰色线标志着LLOQ。
图13是这样的图，其提供IV施用(表B-1：研究6)后排泄到尿液中的实验个体累积剂量分数与从大鼠缩放的人模型的模拟结果的比较。符号：实验数据；线：模拟。
图14A-14B是一对图，其提供来自第二临床研究的单剂量吸入(图14A)和多剂量吸入(图14B)(表B-1：研究6)后SEQ ID NO:71的个体实验血浆(圆圈)和ALF(正方形)浓度-时间曲线与从大鼠缩放的人模型的模拟结果(线)的比较。
图15是这样的图，其提供IV施用(表B-1：研究6)后的SEQ ID NO:71的个体实验血浆浓度-时间曲线与精细人IV模型(流体动力学半径：2.46nm；肾清除率：5％的GFR和额外的血浆清除过程)的模拟结果的比较。符号：实验数据；线：模拟。灰色线标记LLOQ。
图16是这样的图，其提供IV施用(表B-1：研究6)后排泄到尿液中的实验个体累积分数与精细人IV模型(流体动力学半径：2.46nm；肾清除率：5％的GFR和额外的血浆清除过程)的模拟结果的比较。符号：实验数据；线：模拟。
图17A-17B是一对图，其提供来自第二临床研究(表B-1：研究6)的单剂量吸入(图17A)和多剂量吸入(图17B)后SEQ ID NO:71的个体实验血浆(圆圈)和ALF(正方形)浓度-时间曲线与精细人吸入模型(流体动力学半径：2.46nm，肾清除率：5％的GFR，额外的血浆清除过程，并且肺泡厚度的替代值：0.2μm)的模拟结果(线)的比较。
图18A-18B是一对图，其提供IV施用(表B-1：研究6)后SEQ ID NO:71的个体实验血浆浓度-时间曲线(图18A)和累积尿排泄(图18B)与群体模拟的结果的比较。阴影区：群体模拟的第5-95百分位数，实线：群体模拟的中位数；圆圈：个体实验数据。
图19A-19B是一对图，其提供对于第二临床研究(表B-1：研究6)，对于单剂量肺部应用，SEQ ID NO:71的个体实验血浆(图19A)和ALF(图19B)浓度-时间曲线与群体模拟结果的比较。阴影区：群体模拟的第5-95百分位数；实线：群体模拟的中位数；空心圆圈：个体实验数据；实心符号(图19A-血浆曲线)：实验数据的中位数，第5和第95百分位数(仅在所有个体(n＝23)的数据可用时显示)。
图20A-20B是一对图，其提供对于第二临床研究(表B-1：研究6)，对于多剂量肺部应用，SEQ ID NO:71的个体实验血浆(图20A)和ALF(图20B)浓度-时间曲线与群体模拟结果的比较。阴影区：群体模拟的第5-95百分位数；实线：群体模拟的中位数；空心圆圈：个体实验数据；实心符号(图20A-血浆曲线)：实验数据的中位数，第5和第95百分位数(仅在所有个体(n＝15)的数据可用时显示)。
图21A-21B是一对图，其提供对于第一人体研究(表B-1：研究5)，单剂量吸入(图21A)和多剂量吸入(图21B)的SEQ ID NO:71的个体实验血浆浓度-时间曲线与群体模拟的结果的比较。阴影区：群体模拟的第5-95百分位数；实线：群体模拟的中位数；空心圆圈：个体实验数据；实心符号：实验数据的中位数，第5和第95百分位数(仅在所有个体的数据可用时显示，在单剂量情况下n＝18，在多剂量情况下n＝12)。
图22A-22B是提供0-1周龄儿童的ALF浓度-时间曲线的一对图。施用方案：0-24-48-72-96h。灰线表示目标浓度为9μg/ml。图22A：线性浓度标度；图22B：对数浓度标度。
图23A-23B是一对图，其提供汇集群体(5-24月龄儿童)的血浆浓度-时间曲线。施用方案：0-24-48h。图23A：线性浓度标度；图23B：对数浓度标度。
图24A-24B是一对图，其提供汇集的群体(5-24个月龄儿童)的ALF浓度-时间曲线。施用方案：0-24-48h。图24A：线性浓度标度；图24B：对数浓度标度。用虚线表示9微克/mL的目标浓度。
图25A-25B是一对图，其提供汇集群体(5-24月龄儿童)的血浆浓度-时间曲线。施用方案：0-24h。图25A：线性浓度标度；图25B：对数浓度标度。
图26A-26B是一对图，其提供汇集的群体(5-24个月龄儿童)的ALF浓度-时间曲线。施用方案：0-24h。图26A：线性浓度标度；图26B：对数浓度标度。用虚线表示9微克/mL的目标浓度。
图27A-27B是一对图，其提供汇集群体(5-24月龄儿童)的血浆浓度-时间曲线。施用方案：单剂量。图27A：线性浓度标度；图27B：对数浓度标度。
图28A-28B是一对图，其提供汇集的群体(5-24个月龄儿童)的ALF浓度-时间曲线。施用方案：单剂量。图28A：线性浓度标度；图28B：对数浓度标度。用虚线表示9微克/mL的目标浓度。
图29是描绘在hRSV感染的新生羊羔的肺中的病毒抗原检测的图。在感染后第6天，右尖端叶，左尖端叶，左中叶和左尾叶的每个肺叶取2个肺片。通过免疫组织化学检测病毒抗原，并计算每个视野中受影响的支气管/细支气管或肺泡的数量。对于三个研究中所有动物，结果表示为所有受评估的叶的平均值±SEM。
图30A-30B是描绘实施例2中描述的分析结果的一对图。图30A.病毒性病变的总体肺部检查Rt Cr：右尖端叶；Rt Mid：右中叶；Rt Cd：右尾叶；Acc：附叶；Lt Cr：左尖端叶；LtMid：左中叶；Lt Cd：左尾叶。对于来自3项组合的研究的所有动物，结果表示为每剂量水平和每叶的平均值±SEM。图30B.hRSV感染的新生羊羔的组织学肺实变评分。对羔羊的肺进行病变评分。实变评分是典型hRSV病变的总体评分。这意味着将若干特征分组为一个总体评分。对于来自3项组合的研究的所有动物，结果表示为平均值±SEM。
图31是描绘临床综合评分的图。基于表B-4中所示的标准确定临床综合评分。对于来自3项组合的研究的所有动物，结果表示为每剂量水平的平均值±SEM。
图32是这样的图，其描绘在hRSV感染的新生羔羊中通过吸入连续三或五天每日施用后上皮肺衬里液中的SEQ ID NO:71浓度。ELF中的SEQ ID NO:71浓度来自BALF中测量的浓度，其在基于尿素校正方法的针对稀释的标准化后(值经RBC校正)在死后取样。在最后一次剂量后24小时对BALF进行取样。组合的所有三项研究的结果显示为平均值±SD。阴影线表示目标浓度。
图33显示了优选的吸入装置的横截面侧视图。(100)吸入装置；(101)气溶胶发生器；(102)振动网；(103)贮存器；(104)气体入口；(105)面罩；(106)套管；(107)气溶胶入口；(108)患者接触表面；(109)阀门(单向呼气或双向吸气/呼气阀)；(110)流动通道；(111)侧开口；(113)管配件；(114)盖子；(118)基础单元；(119)混合通道单元。
图34显示了实施例12中描述的临床研究的研究设计的概述。缩写：DMC＝数据监测委员会，N＝受试者人数。
图35显示了实施例12中描述的临床研究中使用的治疗方案和研究期。缩写：LRTI＝下呼吸道感染，PLC＝安慰剂，RSV＝呼吸道合胞病毒。
图36A-36B是一对图，其显示研究群体(部分A，B和C)中病毒载量随时间的变化(第1，2和3天的鼻拭子；给药后6小时)。研究群体(开放标签，导入组和双盲，随机治疗组)由30名用SEQ ID NO:71治疗的受试者(不包括4名具有未确认RSV感染的受试者和1名没有结果的受试者)和15名安慰剂治疗的受试者(不包括1名具有未确认RSV感染的受试者)组成。图36A：随着时间的推移培养的病毒载量；图36B：通过qRT-PCR随时间的病毒载量。
图37A-37B是一对图(Kaplan-Meier Plot-随时间变得不可检测的概率)，其显示抗病毒效应，表示为至不可检测的病毒滴度的时间，即从治疗开始的时间直到在连续2次鼻拭子中首次检测不到病毒滴度的时间。研究群体(开放标签，导入组和双盲，随机治疗组)由30名用SEQ ID NO:71治疗的受试者(不包括4名具有未确认RSV感染的受试者和1名没有结果的受试者)和15名安慰剂治疗的受试者(不包括1名具有未确认RSV感染的受试者)组成。研究群体还排除了在基线和第一次剂量后时间点都具有不可检测结果的受试者，即在第一次剂量之前已经不可检测的受试者。图37A：通过噬斑测定法测定的至病毒不可检测的时间；图37B：通过qRT-PCR测量的至病毒不可检测的时间。
图38显示了用SEQ ID NO:71治疗的受试者和用安慰剂治疗的受试者的总体严重程度评分。总体严重程度评分是一种临床评分系统(最多20分)，可以根据7种不同的项目对患有呼吸道感染的婴儿进行分类：喂养不耐受，医疗干预程度，呼吸困难，呼吸频率，呼吸暂停，一般情况和发烧(见表B-7)，如Justicia-Grande等.2015(Leipzig:33rd AnnualMeeting of the European Society for Paediatric Infectious Diseases)和Cebey-López等.2016(PLoS ONE 11(2):e0146599)所述。研究群体(双盲，随机治疗组)由26名用SEQID NO:71治疗的受试者(不包括4名具有未确认RSV感染的受试者)和15名安慰剂治疗的受试者(不包括1名具有未确认RSV感染的受试者)组成。p值＝0.0092，基于纵向分析就总体严重程度评分比较SEQ ID NO:71和安慰剂，针对基线评分和时间调整。
图39显示Cox模型以关于从开始治疗时到培养物中病毒第一次不可检测(在连续2个时间点不可检测)时比较SEQ ID NO:71和安慰剂。
详述
定义
除非另有说明或另外定义，否则所使用的所有术语具有其在本领域中的通常含义，这对于本领域技术人员来说是清楚的。例如参考标准手册，例如Sambrook等,"Molecular Cloning:A Laboratory Manual"(2nd.Ed.),Vols.1-3,Cold Spring HarborLaboratory Press(1989)；F.Ausubel等,eds.,"Current protocols in molecularbiology",Green Publishing and Wiley Interscience,New York(1987)；Lewin,“GenesII”,John Wiley&Sons,New York,N.Y.,(1985)；Old等,“Principles of GeneManipulation:An Introduction to Genetic Engineering”,2nd edition,Universityof California Press,Berkeley,CA(1981)；Roitt等,“Immunology”(6th.Ed.),Mosby/Elsevier,Edinburgh(2001)；Roitt等,Roitt’s Essential Immunology,10thEd.Blackwell Publishing,UK(2001)；and Janeway等,“Immunobiology”(6th Ed.),Garland Science Publishing/Churchill Livingstone,New York(2005)，以及本文引用的一般背景技术。
除非另外指出，否则本领域技术人员将会清楚，没有详细描述的所有方法、步骤、技术和操作都可以以本身已知的方式执行并且已经被执行。再次参考例如本文提及的标准手册和一般背景技术以及其中引用的其他参考文献；以及例如以下综述Presta 2006(Adv.Drug Deliv.Rev.58(5-6):640-56),Levin和Weiss 2006(Mol.Biosyst.2(1):49-57),Irving等.2001(J.Immunol.Methods 248(1-2):31-45),Schmitz等.2000(Placenta21 Suppl.A:S106-12),Gonzales等.2005(Tumour Biol.26(1):31-43)，其描述了用于蛋白质工程的技术，例如亲和力成熟和用于改善蛋白质如免疫球蛋白的特异性和其他所需性质的其他技术。
例如与已经从中获得其的反应介质或培养介质相比，当核酸序列或氨基酸序列与至少一种与其通常在所述来源或介质中结合的其它组分(例如另一种核酸，另一种蛋白质/多肽，另一种生物组分或大分子或至少一种污染物、杂质或次要组分)已经分离时，所述核酸序列或氨基酸序列被认为是“(处于)基本上分离的(形式)”。具体而言，当核酸序列或氨基酸序列已经纯化至少2倍，特别是至少10倍，更特别是至少100倍和多达1000倍或更多时，认为是“基本上分离的”。“处于基本上分离的形式”的核酸序列或氨基酸序列优选基本上是均相的，如使用合适的技术如合适的色谱技术如聚丙烯酰胺凝胶电泳测定的。
当核苷酸序列或氨基酸序列分别被称为“包含”另一核苷酸序列或氨基酸序列或“基本上由另一核苷酸序列或氨基酸序列组成”时，这可意味着后提及的核苷酸序列或氨基酸序列序列分别已经被并入到先提及的核苷酸序列或氨基酸序列中，但更通常地这通常意味着先提及的核苷酸序列或氨基酸序列分别在其序列内包含一段具有与后提及的序列分别相同的核苷酸序列或氨基酸序列的核苷酸或氨基酸残基，而不管实际上如何生成或获得先提及的序列(其可以例如通过任何合适的方法)。通过非限制性实例，当说本发明的多肽包含免疫球蛋白单可变结构域时，这可意味着所述免疫球蛋白单可变结构域序列已被并入本发明多肽的序列中，但更通常地这通常意味着本发明的多肽在其序列内包含免疫球蛋白单可变结构域的序列，而不管本发明的所述多肽是如何产生或获得的。而且，当核酸或核苷酸序列被认为包含另一核苷酸序列时，先提及的核酸或核苷酸序列优选是这样的，即当其表达产物(例如多肽)表达时，由后提及的核苷酸序列编码的氨基酸序列形成所述表达产物的一部分(换句话说，后提及的核苷酸序列与先提及的更大的核酸或核苷酸序列在相同的阅读框中)。
“基本上由...组成”是指本发明方法中使用的免疫球蛋白单可变结构域与本发明的多肽完全相同或者对应于本发明的具有有限数量的氨基酸残基的多肽，例如在免疫球蛋白单可变结构域的氨基端、羧基端或氨基端和羧基端添加1-20个氨基酸残基，例如1-10个氨基酸残基，优选1-6个氨基酸残基，例如1、2、3、4、5或6个氨基酸残基。
此外，如本文中使用的术语“序列”(例如在术语如“免疫球蛋白序列”，“可变结构域序列”，“免疫球蛋白单可变结构域序列”，“VHH序列”或“蛋白质序列”中)通常应该被理解为包括相关氨基酸序列以及编码其的核酸序列或核苷酸序列，除非上下文需要更有限的解释。
可以(特异性地)结合特定抗原决定簇，表位，抗原或蛋白质(或其至少一部分，片段或表位)或对其具有亲和力和/或具有特异性的氨基酸序列(如免疫球蛋白单可变结构域，抗体，本发明多肽，或通常抗原结合蛋白或多肽或其片段)被称作“抗”或“针对”所述抗原决定簇，表位，抗原或蛋白质。
亲和力表示分子相互作用的强度或稳定性。亲和力通常由KD或解离常数给出，其具有mol/升(或M)的单位。亲和力也可以表示为缔合常数KA，其等于1/KD并且具有(mol/升)-1(或M-1)的单位。在本说明书中，两个分子(如本发明的免疫球蛋白单可变结构域或多肽和hRSV的F蛋白)之间相互作用的稳定性将主要以它们相互作用的KD值表示；本领域技术人员清楚的是，鉴于关系KA＝1/KD，通过其KD值指定分子相互作用的强度也可用于计算相应的KA值。KD值也表征了热力学意义上的分子相互作用的强度，因为它通过众所周知的关系DG＝RT.ln(KD)(等效地，DG＝-RT.ln(KA))与结合自由能(DG)有关，其中R等于气体常数，T等于绝对温度，并且ln表示自然对数。
被认为是有意义的(例如特异性的)生物相互作用的KD通常在10-10M(0.1nM)至10- 5M(10000nM)的范围内。相互作用越强，其KD越低。
KD也可以表示为复合物的解离速率常数(表示为koff)与其缔合速率(表示为kon)的比率(因此KD＝koff/kon和KA＝kon/koff)。解离速率koff具有单位s-1(其中s是秒的SI单位表示法)。缔合速率kon具有单位M-1s-1。缔合速率可在102M-1s-1至约107M-1s-1之间变化，接近双分子相互作用的扩散限制的缔合速率常数。通过关系t1/2＝ln(2)/koff，解离速率与给定分子相互作用的半衰期有关。解离速率可以在10-6s-1(接近不可逆复合物的多天t1/2)到1s-1(t1/2＝0.69s)之间变化。
可以以本身已知的任何合适方式确定抗原结合蛋白与抗原或抗原决定簇的特异性结合，包括例如Scatchard分析和/或竞争性结合测定，例如放射免疫测定(RIA)，酶免疫测定(EIA)和夹心竞争测定，以及本领域本身已知的其不同变化形式；以及本文提到的其他技术。
两个分子之间的分子相互作用的亲和力可以通过本身已知的不同技术测量，如众所周知的表面等离子体共振(SPR)生物传感器技术(参见例如Ober等.2001,Intern.Immunology 13:1551-1559)，其中一个分子固定在生物传感器芯片上，另一个分子在流动条件下通过所述固定的分子，产生kon，koff测量值，从而产生KD(或KA)值。这可以例如使用众所周知的Biacore仪器(Pharmacia Biosensor AB,Uppsala,Sweden)进行。动力学排除测定(KinExA)(Drake等.2004,Analytical Biochemistry 328:35-43)测量溶液中的结合事件而不标记结合配偶体，并且是基于动力学排除复合物的解离。
GYROLABTM免疫测定系统为自动化生物分析和快速样品周转提供了一个平台(Fraley等.2013,Bioanalysis 5:1765-74)。
本领域技术人员还将清楚，如果测量过程以某种方式(例如由于与一个分子在生物传感器上的包被相关的假象)影响隐含分子的固有结合亲和力，则测量的KD可以对应于表观KD。此外，如果一个分子含有另一个分子的多于一个识别位点，则可以测量表观KD。在这种情况下，测量的亲和力可受两个分子相互作用的亲合力影响。
可用于评估亲和力的另一种方法是Friguet等.1985(J.Immunol.Methods 77:305-19)的2步ELISA(酶联免疫吸附测定)程序。该方法建立溶液相结合平衡测量并避免与分子之一在载体(如塑料)上的吸附有关的可能的假象。
然而，KD的精确测量可以是相当劳力密集的，因此，通常确定表观KD值以评估两个分子的结合强度。应当注意，只要所有测量以一致的方式进行(例如保持测定条件不变)，表观KD测量可以用作真实KD的近似值，因此在本文件中KD和表观KD应该被视为具有同等重要性或相关性。
如本文所用，术语“病毒的感染性”是指活体受试者在暴露于所述病毒时实际上被所述病毒感染的比例。
如本文所用，“病毒的中和”是指通过中和化合物与病毒粒子的结合，如使用合适的体外，细胞或体内测定(如进一步提及的那些)测量的病毒的感染性(如本文所定义)的调节和/或减少和/或预防和/或抑制。
术语“剂量”是指施用于受试者的本发明多肽的量。
“填充剂量”是指填充在雾化器中的本发明多肽的总量。本发明中使用的填充剂量的单位是“mg(毫克)”。
“标称剂量”是指填充在雾化器中的本发明多肽的体重标准化(即每千克受试者)量。本发明中用于标称剂量的单位是“mg/kg(毫克/千克)”。可以基于治疗组合物中的本发明多肽的填充容量和浓度容易地确定标称剂量。
“填充容量”是指填充在雾化器中的治疗组合物的体积。在本发明中用于填充容量的单位是“mL(毫升)”。
“标称填充容量”是指填充在雾化器中的治疗组合物的体重标准化(即每kg受试者)体积。在本发明中用于标称填充容量的单位是“mL/kg(毫升/千克)”。
“递送剂量”是指由振动网式雾化器产生的并且可在面罩中用于吸入的气溶胶颗粒中本发明多肽的体重标准化(即每kg受试者)量。本发明中用于递送剂量的单位是“mg/kg(毫克/千克)”。
“吸入剂量”是指在上呼吸道可获得的气溶胶颗粒中本发明多肽的体重标准化(即每kg受试者)量(即，吸入的剂量)。本发明中用于吸入剂量的单位是“mg/kg(毫克/千克)”。吸入剂量可以按标称剂量的百分比(％)计算，并取决于雾化器的特性。吸入剂量通常在填充剂量的10％至20％或更多之间变化。
例如，可以使用年幼儿童的上呼吸道的气道模型来确定吸入剂量。这种模型是例如Sophia解剖婴儿鼻喉(SAINT)模型(Janssens等.2001,J.Aerosol Med.14:433-41)。SAINT模型是9月龄儿童上呼吸道的解剖学上正确的铸型/表示，使用立体光刻技术建造并用于研究年幼儿童中的气溶胶沉积。可以接近地模拟适用于本发明方法的施用条件。例如，用FOX-Flamingo振动网式雾化器(Activaero，现在的Vectura Group plc，Wiltshire，UK)施用显示，从填充到雾化器中的总剂量，预计将吸入约20％。
“沉积剂量”是指在下呼吸道中沉积的气溶胶颗粒中本发明多肽的体重标准化(即每kg受试者)量。本发明中用于沉积剂量的单位是“mg/kg(毫克/千克)”。沉积剂量可以从吸入剂量计算，并且取决于吸入颗粒的特征和患有RSV感染的年幼儿童的呼吸模式。受RSV感染的儿童的呼吸模式例如描述于Amirav等.2002(J.Nucl.Med.43:487-91),Amirav等.2012(Arch.Dis.Child 97:497-501),Chua等.1994(Eur.Respir.J.7:2185-91),Fok等.1996(Pediatr.Pulmonol.21:301-9),Wildhaber等.1999(J.Pediatr.135:28-33),Totapally等.2002(Crit.Care 6:160-5),Mundt等.2012(Pediatr.2012:721295)。
沉积剂量最好使用建模确定，考虑肺形态(特定年龄)，颗粒特性(大小和密度)，以及呼吸模式(频率，容量)。考虑这些参数的模型例如是多径粒子剂量测定(MPPD)。MPPD工具是由NIH信息技术中心(NIH Centre for Information Technology，CIT，美国)和国家公共卫生与环境研究所(National Institute of Public Health and the Environment，RIVM，荷兰)开发的年龄特定对称肺模型，可用于计算呼吸道中气溶胶的沉积。它允许描述头部，气管支气管和肺泡区域的平均区域沉积，以及不同儿科年龄组和不同大小的颗粒的每个气道产生的平均沉积。总体而言，区域沉积取决于肺形态(其是年龄特异的)，颗粒特性(大小和密度分布)和呼吸模式(频率，容量)。对于受RSV感染的儿童安静的鼻吸入和2.63微米的颗粒MAD(质量中值直径)，据计算沉积在肺泡空间中的分数为吸入剂量的约10％。
“全身剂量”是指通过下呼吸道的肺泡衬里液吸收并释放到循环中的本发明多肽的量。通过测量体循环中本发明多肽的浓度可以容易地确定全身剂量。
本发明中使用的“体循环”是心血管系统的一部分，其将含氧血液从心脏带到身体，并使脱氧血液返回心脏。
术语“给药”是指施用本发明的多肽。除非明确指出不同，否则在本发明的上下文中，术语“给药”是指肺部施用本发明的多肽。
儿童通常是出生和青春期之间或儿童发育阶段的人受试者。在本发明的上下文中，“年幼儿童”是指小于24个月或小于36个月(3岁)的儿童。“婴儿”是人非常年幼的后代。该术语通常被认为是婴孩的同义词。术语“婴儿”通常适用于1个月至12个月之间的年幼儿童。当人类孩子学会走路时，可以使用术语“学步儿”来代替。“学步儿”是年龄在1到3岁之间的儿童。在本发明的上下文中，“学步儿”是1岁至小于24个月或1岁至小于36个月(3岁)的儿童。
“儿科学”是医学的一个分支，涉及婴儿和儿童的医疗保健。
出于本发明的目的，“呼吸道”与“呼吸系统”，“气道组织”或“气道”等同。呼吸系统包括2个不同的区域：导气区和呼吸区，气道和血管隔室位于其中(参见例如“PulmonaryDrug Delivery”,由Karoline Bechtold-Peters和Henrik Luessen编辑,2007,ISBN 978-3-87193-322-6 16-28页))。导气区由鼻，咽，喉，气管，支气管和细支气管组成。这些结构形成了空气进出肺部的连续通道。呼吸区位于肺部深处，由呼吸性细支气管，肺泡管和肺泡组成。这些薄壁结构允许吸入的氧气扩散到肺毛细血管中交换二氧化碳。在解剖学上，这些相同的结构通常分为上呼吸道和下呼吸道。上呼吸结构位于头部和颈部，由鼻，咽和喉组成。下呼吸道结构位于胸膛或胸腔中，包括气管，支气管和肺(即细支气管，肺泡管和肺泡)。因此，下呼吸道是指从气管到肺部的气道部分。
“肺泡”是具有空腔形式的解剖结构。在肺实质中发现，肺泡是呼吸树的末端，其从肺泡囊或肺泡管露出，这两者也是与血液进行气体交换的部位。肺泡膜是气体交换表面。富含二氧化碳的血液从身体的其他部分泵入肺泡血管，在这里通过扩散，其释放出二氧化碳并吸收氧气。
“肺泡衬里液(alveolar lining fluid，ALF)”形成薄的液体层，覆盖肺泡的粘膜，小气道和大气道。它构成了肺与外界之间的第一道屏障。在本发明的上下文中，该术语涉及更深的肺部。
支气管肺泡灌洗(BAL)是一种医疗程序，其中支气管镜通过口腔或鼻子进入肺部，并且将液体喷射到肺的一小部分中，然后收集用于检查。BAL是最常见的采样肺泡衬里液(ALF)成分的方式。
本发明中使用的“吸入施用”，“肺部施用”，“吸入递送”和“肺部递送”是指将本发明的多肽施用至呼吸道。在本发明中，在该递送方法中，本发明的多肽存在于通过(用雾化器)雾化本发明的多肽获得的气溶胶中。
吸入装置是用于通过肺部将药物输送到体内的医疗装置。
这里使用的气溶胶是指分散在气体中的细颗粒形式的液体悬浮液(即含有微小颗粒的细雾或喷雾)。如本文所用，术语“颗粒”是指液体，例如液滴。用于将本发明的多肽递送至肺部的药物气溶胶可以通过口腔和/或通过鼻子吸入。在肺部递送中，小于约5或6微米的颗粒的产生被认为是实现沉积为精细颗粒级分(FPF)必要的(即在呼吸性细支气管和肺泡区域沉积)(O’Callaghan和Barry,1997,Thorax 52:S31–S44)。气溶胶中的颗粒尺寸可表示为体积中值直径(VMD)。“体积中值直径”定义为气溶胶的几何粒径，其中50％的气溶胶体积大于该值，50％小于该值。“质量中值空气动力学直径(MMAD)”和“质量中值直径(MAD或MMD)”定义为几何平均(空气动力学)直径，其中按重量计50％的颗粒将小于该值，50％将大于该值。当气溶胶颗粒的密度为1g/cm3时，VMD和MMAD，MAD或MMD是等同的。
本发明中使用的术语“雾化”是指通过雾化器(如本文进一步定义)将液体转化为雾或细雾。
“气溶胶发生器”是能够从液体制剂(例如用于吸入的药物组合物)产生气溶胶的装置或装置组件。同义地，可以使用术语“雾化器”或“雾化装置”。
除非另有说明，否则“气体”是指适于吸入的任何气体或气体混合物。
“侧面的”或“侧面地”意味着远离装置或装置组件的中间，中心或中心轴。
受试者或患者的“潮气量”是肺容量，表示当不施加额外努力时在正常吸气和呼气之间移位的空气的正常体积。
如本文所用，术语“受试者”和“患者”可互换使用。如本文所用，术语“受试者”是指人。
本文所用的短语“药学上可接受的”是指由美国联邦或州政府的管理机构批准，或在美国药典，欧洲药典或其他公认的药典中列出用于动物更特别是人。在这个意义上，其应该与制剂的其他成分相容并且不会在受试者中引起不可接受的有害作用。其是指在合理的医学判断范围内适用于与人和动物组织接触而没有过多毒性，刺激，过敏反应或其他问题或并发症的与合理的利益/风险比相称的化合物，材料，组合物和/或剂型。
如本文所用，术语“药学活性量”是指治疗剂(例如本发明的多肽)的量，其足以降低一种或多种疾病和/或病症的严重程度和/或持续时间。
本发明的多肽
本发明的多肽可以是非天然存在的。因此，可以设计，制造，合成和/或重组本发明的多肽以产生非天然存在的序列。
免疫球蛋白单可变结构域
除非另有说明，否则术语“免疫球蛋白序列”-无论在本文中是指重链抗体还是常规的4链抗体-均用作通用术语，以包括全长抗体、其各个链以及其所有部分、结构域或片段(包括但不限于抗原结合结构域或片段，分别如VHH结构域或VH/VL结构域)。此外，如本文中使用的术语“序列”(例如在术语如“免疫球蛋白序列”，“抗体序列”，“可变结构域序列”，“VHH序列”或“蛋白质序列”中)通常应该被理解为包括相关氨基酸序列以及编码其的核酸或核苷酸序列，除非上下文需要更有限的解释。
与“单可变结构域”可互换使用的术语“免疫球蛋白单可变结构域”定义其中抗原结合位点存在于单个免疫球蛋白结构域上并由其形成的分子。这设定了与“常规”免疫球蛋白或其片段不同的免疫球蛋白单可变结构域，其中两个免疫球蛋白结构域，特别是两个可变结构域相互作用形成抗原结合位点。通常，在常规免疫球蛋白中，重链可变结构域(VH)和轻链可变结构域(VL)相互作用形成抗原结合位点。在这种情况下，VH和VL的互补决定区(CDR)都将有助于抗原结合位点，即总共6个CDR将参与抗原结合位点的形成。
相反，免疫球蛋白单可变结构域的结合位点由单个VH或VL结构域形成。因此，免疫球蛋白单可变结构域的抗原结合位点由不超过三个CDR形成。
因此，术语“免疫球蛋白单可变结构域”和“单可变结构域”不包含常规免疫球蛋白或其片段(其需要至少两个可变结构域的相互作用以形成抗原结合位点)。然而，这些术语确实包含这样的常规免疫球蛋白的片段，其中抗原结合位点由单个可变结构域形成。
通常，单个可变结构域将是基本上由4个框架区(分别为FR1至FR4)和3个互补决定区(分别为CDR1至CDR3)组成的氨基酸序列。这种单可变结构域和片段最优选使得它们包含免疫球蛋白折叠或能够在合适的条件下形成免疫球蛋白折叠。如此，单可变结构域可以例如包含轻链可变结构域序列(例如VL序列)或其合适的片段；或重链可变结构域序列(例如，VH序列或VHH序列)或其合适的片段；只要其能够形成单抗原结合单元即可(即基本上由单可变结构域组成的功能性抗原结合单元，使得单抗原结合结构域不需要例如像以下可变结构域的情况那样与另一个可变结构域相互作用以形成功能性抗原结合单元，所述可变结构域存在于例如常规抗体和scFv片段中，其需要与另一可变结构域相互作用-例如通过VH/VL相互作用-以形成功能性抗原结合结构域)。
在本发明的一个实施方案中，免疫球蛋白单可变结构域是轻链可变结构域序列(例如VL序列)或重链可变结构域序列(例如VH序列)；更具体而言，免疫球蛋白单可变结构域可以是衍生自常规四链抗体的重链可变结构域序列或是衍生自重链抗体的重链可变结构域序列。
例如，单可变结构域或免疫球蛋白单可变结构域(或适合用作免疫球蛋白单可变结构域的氨基酸)可以是(单)结构域抗体(或适合用作(单)结构域抗体的氨基酸)，“dAb”或dAb(或适合用作dAb的氨基酸)或纳米抗体(如本文所定义，并且包括但不限于VHH)；其他单个可变结构域或其任何一个的任何合适的片段。
对于(单)结构域抗体的一般描述，还参考本文引用的现有技术，以及EP 0368684。对于术语“dAb”，例如参考Ward等1989(Nature 341:544-546),参考Holt等2003(TrendsBiotechnol.21:484-490)；以及例如WO 04/068820，WO 06/030220，WO 06/003388，WO 06/059108，WO 07/049017，WO 07/085815和Domantis Ltd的其他公开的专利申请。还应该注意的是，单可变结构域可以来自某些鲨鱼物种(例如所谓的“IgNAR结构域”，参见例如WO 05/118629)，尽管这在本发明的上下文中较不优选，因为它们不是哺乳动物来源的。
特别地，免疫球蛋白单可变结构域可以是(如本文所定义的)或其合适的片段。[注意：和是AblynxN.V.的注册商标]关于纳米抗体的一般描述，参考下文的进一步描述以及本文引用的现有技术，如例如，描述于WO 08/020079(第16页)中。
关于VHH和纳米抗体的进一步描述，参考Muyldermans 2001的综述文章(Reviewsin Molecular Biotechnology 74:277-302)以及以下作为一般背景技术提及的专利申请：Vrije Universiteit Brussel的WO 94/04678、WO 95/04079和WO 96/34103；Unilever的WO94/25591、WO 99/37681、WO 00/40968、WO 00/43507、WO 00/65057、WO 01/40310、WO 01/44301、EP 1134231和WO 02/48193；Vlaams Instituut voor Biotechnologie(VIB)的WO97/49805、WO 01/21817、WO 03/035694、WO 03/054016和WO 03/055527；Algonomics N.V.和Ablynx N.V.的WO 03/050531；加拿大国家研究委员会(National Research Council ofCanada)的WO 01/90190；抗体研究所(Institute of Antibodies)的WO 03/025020(＝EP1433793)以及Ablynx N.V.的WO 04/041867、WO 04/041862、WO 04/041865、WO 04/041863、WO 04/062551、WO 05/044858、WO 06/40153、WO 06/079372、WO 06/122786、WO 06/122787和WO 06/122825以及Ablynx NV的进一步公开的专利申请。还参考了这些申请中提到的另外的现有技术，特别是国际申请WO 06/040153的第41-43页上提及的参考文献列表，该列表和参考文献通过引用并入本文。如在这些参考文献中所描述的，纳米抗体(特别是VHH序列和部分人源化的纳米抗体)特别可以通过在一个或多个框架序列中存在一个或多个“标志残基”来表征。纳米抗体的进一步描述，包括纳米抗体的人源化和/或骆驼化，以及其他修饰、部分或片段、衍生物或“纳米抗体融合物”、多价构建体(包括接头序列的一些非限制性实例)和增加纳米抗体的半衰期的不同修饰以及它们的制备可以在WO 08/101985和WO 08/142164中找到。
因此，在本发明的含义中，术语“免疫球蛋白单可变结构域”或“单可变结构域”包含衍生自非人来源的多肽，优选骆驼科，优选骆驼科重链抗体。如前所述，它们可以是人源化的。而且，该术语包括来源于非骆驼科动物来源的多肽，例如小鼠或人，其已经被“骆驼化”，如描述于Davies和Riechmann 1994(FEBS 339:285-290),1995(Biotechonol.13:475-479)和1996(Prot.Eng.9:531-537)和Riechmann和Muyldermans 1999(J.Immunol.Methods231:25-38)中的。
术语“免疫球蛋白单可变结构域”包括不同来源的免疫球蛋白序列，包括小鼠，大鼠，兔，驴，人和骆驼科动物免疫球蛋白序列。它还包括完全人源，人源化或嵌合免疫球蛋白序列。例如，它包括骆驼科动物免疫球蛋白序列和人源化骆驼科动物免疫球蛋白序列，或骆驼化免疫球蛋白单可变结构域，例如Ward等1989(参见例如WO 94/04678和Davies和Riechmann 1994,1995和1996)所述的骆驼化dAb以及骆驼化VH。
此外，此类免疫球蛋白单可变结构域可以以任何合适的方式和从任何合适的来源衍生，并且可以例如是天然存在的VHH序列(即来自合适的骆驼科物种)或合成或半合成氨基酸序列，包括但不限于部分或完全“人源化”的VHH，“骆驼化”的免疫球蛋白序列(特别是骆驼化的VH)，以及通过亲和力成熟等技术获得的纳米抗体和/或VHH(例如，从合成的，随机的或天然存在的免疫球蛋白序列开始，如VHH序列)，CDR移植(grafting)、镶饰(veneering)、组合来自不同免疫球蛋白序列的片段，使用重叠引物的PCR组装，以及用于本领域技术人员公知的工程化免疫球蛋白序列的类似技术；或任何前述的任何合适的组合。
免疫球蛋白单可变结构域中氨基酸残基的总数可以在110-120的范围内，优选112-115，最优选113(尽管基于本文以及WO 08/020079，WO 06/040153中以及其中引用的其他免疫球蛋白单可变结构域相关参考文献中给出的免疫球蛋白单可变结构域序列的实例，清楚的是氨基酸残基的确切数量也将取决于免疫球蛋白单可变结构域中存在的特定CDR的长度)。
免疫球蛋白单可变结构域的氨基酸序列和结构可以被认为-但不限于-由在本领域和在下文中分别称为“框架区1”或“FR1”；“框架区2”或“FR2”；“框架区3”或“FR3”；“框架区4”或“FR4”的四个框架区或“FR”组成；这些框架区由在本领域和在下文中分别称为“互补决定区1”或“CDR1”；“互补决定区2”或“CDR2”；和“互补决定区3”或“CDR3”的三个互补决定区或“CDR”中断。
如在WO 08/020079(通过引用并入本文)的第58和59页中的段落q)中进一步描述的，如在Riechmann和Muyldermans 2000的文章(J.Immunol.Methods 240:185-195；参见例如该公开的图2)中应用于骆驼科动物的VHH结构域，根据Kabat等(“Sequence of proteinsof immunological interest”,US Public Health Services,NIH Bethesda,MD,Publication No.91)给出的VH结构域的一般编号对免疫球蛋白单可变结构域的氨基酸残基进行编号，并且因此免疫球蛋白单可变结构域的FR1包含位置1-30的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的CDR1包含位置31-35的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的FR2包含位置36-49的氨基酸，免疫球蛋白单可变结构域的CDR2包含位置50-65的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的FR3包含位置66-94的氨基酸残基，免疫球蛋白单可变结构域的CDR3包含位置95-102的氨基酸残基，以及免疫球蛋白单可变结构域的FR4包含位置103-113的氨基酸残基。
在本发明的方法中，免疫球蛋白单可变结构域结合hRSV的F蛋白，因此也称为“抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域”或“本发明的抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域”。更特别地，抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域可以结合hRSV的蛋白F，其亲和力(适当地测量和/或表达为KD值(实际或表观)，KA值(实际或表观)，kon速率和/或koff速率)优选是使得：
-其以1000nM至1nM或更低，优选100nM至1nM或更低，更优选15nM至1nM或甚至10nM至1nM或更低的解离常数(KD)结合hRSV的蛋白F；和/或
-其以104M-1s-1至约107M-1s-1，优选105M-1s-1至107M-1s-1，更优选约106M-1s-1或更高的kon速率结合hRSV的蛋白F；和/或
-其以10-2s-1(t1/2＝0.69s)至10-4s-1(提供具有多天的t1/2的几乎不可逆的复合物)，优选10-3s-1至10-4s-1或更低的koff速率结合hRSV的蛋白F。
在某些方面，亲和力通过表面等离子体共振确定，如通过Biacore，或通过KinExA(参见上文)。
在一个方面，免疫球蛋白单可变结构域能够中和hRSV。确定分子中和能力的测定包括例如Anderson等(1985,J.Clin.Microbiol.22:1050-1052；1988,J.Virol.62:4232-4238)描述的微量中和测定法，或如例如WO2010/139808中所述的该测定的改进，或者例如Johnson等(1997,J.Inf.Dis.176:1215-1224)描述的噬斑减少测定法及其改进。例如，在hRSV Long的微量中和测定中(如在WO2010/139808；第375页，实施例6中描述)，抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域的IC 50值可以为100nM至1000nM，优选为100nM至500nM或更低。
优选的抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域的CDR1，CDR2和CDR3序列的组合显示在表A-1中。在一个优选的方面，抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域具有CDR1(其是SEQ ID NO:46)，CDR2(其选自SEQ ID NO:49和50)，以及CDR3(其为SEQ ID NO:61)。最优选CDR1是SEQID NO:46，CDR2是SEQ ID NO:49，并且CDR3是SEQ ID NO:61。表A-1还显示了CDR序列的优选组合(即在同一线上显示的CDR序列)以及用于免疫球蛋白单可变结构域的CDR序列和框架序列的优选组合(即在同一线上显示的CDR序列和框架序列)。
不受限制，用于本发明多肽的有利的免疫球蛋白单可变结构域描述于WO 2010/139808中。优选地，抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域选自表A-2中的SEQ ID NO:1-34中的任一个，最优选选自表A-2中的SEQ ID NO:1-2中的任一个。
本发明的多肽
用于本发明方法的免疫球蛋白单可变结构域可以形成多肽(在本文中称为“本发明的多肽”)的一部分，所述多肽可以包含特异性结合hRSV的F蛋白的一个或多个免疫球蛋白单可变结构域或(基本上)由其组成并且所述多肽可任选地进一步包含一个或多个其他氨基酸序列(全部任选地通过一个或多个合适的接头连接)。术语“免疫球蛋白单可变结构域”也可包括本发明的此类多肽。例如但不限于，一个或多个免疫球蛋白单可变结构域可用作这种多肽中的结合单元，所述多肽可任选地含有一个或多个可用作结合单元的其他氨基酸序列，以分别提供单价，多价或多特异性的本发明的多肽(对于含有一个或多个VHH结构域的多价和多特异性多肽及其制备，也参考Conrath等2001(J.Biol.Chem.276:7346-7350)以及例如WO 96/34103，WO 99/23221和WO 2010/115998)。
优选地，本发明的多肽包括含有三个或更多个如上所述的单可变结构域形式的抗原结合单元的构建体。例如，可以连接三个或更多个结合hRSV的免疫球蛋白单可变结构域(在本文中也称为“抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域”)以形成三价或多价构建体。优选地，本发明的多肽由三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域组成。
在上述多肽中，三个或更多个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域可以彼此直接连接和/或通过一个或多个合适的接头或间隔子连接。适用于多价多肽的间隔子或接头对技术人员而言是清楚的，并且通常可以是本领域中用于连接氨基酸序列的任何接头或间隔子。优选地，所述接头或间隔子适用于构建意在用于药物用途的蛋白或多肽。
一些特别优选的间隔子包括本领域用于连接抗体片段或抗体结构域的间隔子和接头。这些包括上面引用的一般背景技术中提及的接头，以及例如本领域中用于构建双抗体或ScFv片段的接头(然而，在这方面，应该指出的是，尽管在双抗体和ScFv片段中，所使用的接头序列应该具有允许相关的VH和VL结构域一起形成完整的抗原结合位点的长度、一定程度的柔性和其它性质，对用于本发明多肽中的接头的长度或柔性没有特别的限制，因为每个免疫球蛋白单可变结构域本身形成完整的抗原结合位点)。
例如，接头可以是合适的氨基酸序列，特别是1至50，优选1至30，例如1至20或1至10个氨基酸残基的氨基酸序列。广泛使用的肽接头包含Gly-Ser重复序列，例如，(Gly)4-Ser重复一次，两次，三次，四次，五次，六次或更多次，或例如类型(glyxsery)z，如例如WO99/42077中所述的(gly4ser)3或(gly3ser2)3，或铰链样区域，如天然存在的重链抗体或类似序列的铰链区(如WO 94/04678中所述)。一些其他特别优选的接头是聚丙氨酸(例如AAA)，以及表A-4中提到的接头。
其他合适的接头通常包含有机化合物或聚合物，特别是适用于药物用蛋白质的那些。例如，聚(乙二醇)部分已被用于连接抗体结构域，参见例如WO 04/081026。
在一个方面，本发明的多肽结合hRSV的F蛋白。更特别地，本发明的多肽能结合hRSV的蛋白F，其亲和力(适当地测量和/或表达为KD值(实际或表观)，KA值(实际或表观)，kon速率和/或koff速率)优选是使得：
-其以100nM至0.1nM或更低，优选10nM至0.1nM或更低，更优选1nM至0.1nM或更低，如例如5x10-10M(0.5nM)或更低的解离常数(KD)结合hRSV的蛋白F；
-其以104M-1s-1至约107M-1s-1，优选105M-1s-1至107M-1s-1，更优选约106M-1s-1或更高的kon速率结合hRSV的蛋白F；和/或
-其以10-2s-1(t1/2＝0.69s)至10-4s-1(提供具有多天的t1/2的几乎不可逆的复合物)，优选10-3s-1至10-4s-1，更优选5x10-3s-1至10-4s-1或更低的koff速率结合hRSV的蛋白F。
在某些方面，亲和力通过表面等离子体共振确定，如通过Biacore，或通过KinExA(参见上文)。
在一个方面，本发明的多肽能够中和hRSV。确定分子中和能力的测定包括例如Anderson等(1985,J.Clin.Microbiol.22:1050-1052；1988,J.Virol.62:4232-4238)描述的微量中和测定法，或如例如WO 2010/139808中所述的该测定的改进，或者例如Johnson等(1997,J.Inf.Dis.176:1215-1224)描述的噬斑减少测定法及其改进。例如，在hRSV Long的微量中和测定中(例如在WO 2010/139808；第375页，实施例6中描述)，本发明的多肽可具有10pM至1000pM，优选10pM至250pM，更优选50pM至200pM或更低的IC50值。本发明的多肽可具有1nM至100nM，优选1nM至10nM，更优选1nM至5nM或更低，如例如2nM或更低，或90ng/mL或更低的IC90值。
在优选的方面，本发明的多肽结合hRSV的F蛋白，其亲和力(如在此描述的适当地测量和/或表达为KD值(实际或表观))优选是使得：-其以100nM至0.1nM或更低，优选10nM至0.1nM或更低，更优选1nM至0.1nM或更低，如例如5x10-10M(0.5nM)或更低的解离常数(KD)结合hRSV的蛋白F；此外，本发明的多肽能够中和hRSV，IC50值为10pM至1000pM，优选为10pM至250pM，更优选为50pM至200pM或更低，或IC90值为1nM至100nM，优选1nM至10nM，更优选1nM至5nM或更低，如例如2nM或更低，或90ng/mL或更低。在一个方面，本发明的多肽以5×10-10M(0.5nM)或更低的亲和力结合hRSV的F蛋白，并以90ng/mL或更低的IC90值中和hRSV。
在具体方面，本发明的多价(例如三价)多肽可包含至少三个选自SEQ ID NO:1-34(表A-2)中任一个的抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域或基本上由其组成。不受限制，用于本发明方法的有利的多肽描述于WO 2010/139808中。优选地，本发明的多肽选自SEQ ID NO:65-85(表A-2)中任一个，优选SEQ ID NO:71。
SEQ ID NO:71是由三个衍生自仅有重链的美洲驼抗体的抗hRSV免疫球蛋白可变结构域组成的三价多肽。三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域中的每一个都与hRSV的F蛋白结合。
本发明的多肽可以通过包括以下步骤的方法产生：
a)在合适的宿主细胞或宿主生物体或其他合适的表达系统中表达核酸或核苷酸序列，或编码本发明多肽的遗传构建体；
任选地继之以：
b)分离和/或纯化由此获得的本发明的多肽。
用于产生本发明的多肽的方法可以包括以下步骤：
a)在宿主或宿主细胞表达和/或产生至少一种本发明多肽的条件下培养和/或维持所述宿主或宿主细胞，
任选地继之以：
b)分离和/或纯化由此获得的本发明的多肽。
根据本发明的一个优选但非限制性实施方案，本发明的多肽在细菌细胞中产生，特别是适于大规模药物生产的细菌细胞。
根据本发明的另一个优选但非限制性实施方案，本发明的多肽在酵母细胞中产生，特别是适合于大规模药物生产的酵母细胞。
根据本发明的另一个优选但非限制性的实施方案，本发明的多肽在哺乳动物细胞中产生，特别是在人细胞中或在人细胞系的细胞中产生，更特别是在适合于大规模药物生产的人细胞或人细胞系的细胞中。
对于工业规模的生产，用于(工业)生产免疫球蛋白单可变结构域或含有免疫球蛋白单可变结构域的蛋白质治疗剂的优选异源宿主包括适合于大规模表达/生产/发酵特别是大规模药物表达/生产/发酵的大肠杆菌，巴斯德毕赤酵母，酿酒酵母菌株。这种菌株的合适实例对于技术人员来说是清楚的。此类菌株和生产/表达系统也可从Biovitrum(Uppsala，Sweden)等公司获得。
备选地，哺乳动物细胞系，特别是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞，可用于大规模表达/生产/发酵，并且特别是用于大规模药物表达/生产/发酵。同样，这些表达/生产系统也可由上面提到的一些公司提供。
随后，然后可以使用本身已知的蛋白质分离和/或纯化技术，如(制备型)色谱和/或电泳技术，差异沉淀技术，亲和技术(例如使用与本发明的多肽融合的特异性、可切割的氨基酸序列)和/或制备型免疫学技术(即使用针对待分离的氨基酸序列的抗体)，可以从宿主细胞/宿主生物和/或从培养所述宿主细胞或宿主生物的培养基中分离本发明的多肽。
本发明的方法
本发明提供了用于向年幼儿童肺部施用本发明多肽的方法和给药方案。因此，这些方法和给药方案可用于这些年幼儿童中RSV感染的治疗(如本文所定义)。
RSV感染包括轻度上呼吸道疾病，以及更严重的下呼吸道感染(LRTI)。RSV下呼吸道感染可包括细支气管炎和支气管肺炎，可能表现出典型的临床体征和症状，如呼吸急促，喘鸣，咳嗽，喘鸣音，附肌的使用和/或鼻腔扩张。
RSV感染还可包括与RSV感染相关的疾病和/或病症。与hRSV感染相关的此类疾病和/或病症的实例对于技术人员是清楚的，并且例如包括以下疾病和/或病症：呼吸道疾病，上呼吸道感染，下呼吸道感染，细支气管炎(肺部小气道炎症)，肺炎，呼吸困难，咳嗽，(复发的)喘鸣和哮喘(恶化)或与hRSV相关的COPD(慢性阻塞性肺疾病)。
因此，本发明还提供了用于治疗呼吸道疾病，上呼吸道感染，下呼吸道感染，细支气管炎(肺部小气道炎症)，肺炎，呼吸困难，咳嗽，(复发的)喘鸣和/或哮喘(恶化)或与hRSV相关的COPD(慢性阻塞性肺病)的方法和给药方案。
在本发明的上下文中，术语“治疗”不仅包括治疗疾病，还通常包括减缓或逆转疾病的进展，减缓与疾病相关的一种或多种症状的发作，减少和/或减轻与疾病相关的一种或多种症状，降低疾病和/或与其相关的任何症状的严重程度和/或持续时间和/或预防疾病和/或与其相关的任何症状的严重程度的进一步增加，预防、减少或逆转由疾病引起的任何生理损伤，以及通常对正在治疗的患者有益的任何药理学作用。
本发明的方法提供了将本发明的多肽递送至受试者的呼吸道，更具体地，递送至下呼吸道。用于将药物递送至呼吸道和/或通过吸入递送药物的方法是本领域技术人员已知的，并且例如描述于手册“Drug Delivery:Principles and Applications”(2005),Binghe Wang,Teruna Siahaan和Richard Soltero(Eds.Wiley Interscience(JohnWiley&Sons))，“Pharmacology PreTestTM Self-Assessment and Review”(11th Ed.),Rosenfeld G.C.,Loose-Mitchell D.S.；以及“Pharmacology”(3rd Edition),LippincottWilliams&Wilkins,New York；Shlafer M.McGraw-Hill Medical Publishing Division,New York；Yang K.Y.,Graff L.R.,Caughey A.B.Blueprints Pharmacology,BlackwellPublishing。在本发明的方法中，本发明的多肽以可吸入的形式递送。更具体地，可吸入形式是通过雾化(用雾化器)本发明的多肽而获得的气溶胶。
要治疗的受试者是人，更特别是年幼儿童。如本领域技术人员所清楚的，待治疗的受试者特别是患有RSV感染的年幼儿童。例如，受试者可以是患有RSV感染的年幼儿童，如患有RSV下呼吸道感染。
在一个方面，受试者是年龄小于5个月，小于24个月或小于36个月(3岁)的年幼儿童。在一个方面，受试者是以下年龄的年幼儿童：28天至小于5个月(如例如28天至4个月)，28天至小于24个月(如例如28天至23个月)，1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)，3个月至小于24个月(如例如3个月至23个月)，5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)，28天至小于36个月(如例如28天至35个月)，1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，3个月至小于36个月(如例如3个月至35个月)或5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)。在一个方面，受试者是婴儿。在一个方面，受试者是学步儿。
在一个方面，受试者是被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)的年幼儿童。在一个方面，受试者是年龄小于5个月，小于24个月或小于36个月(3岁)的年幼儿童，其被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)。在一个方面，受试者是以下年龄的年幼儿童：28天至小于5个月(如例如28天至4个月)，28天至小于24个月(如例如28天至23个月)，1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)，3个月至小于24个月(如例如3个月至23个月)，5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)，28天至小于36个月(如例如28天至35个月)，1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，3个月至小于36个月(如例如3个月至35个月)或5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)，其被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)。在一个方面，受试者是被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)的婴儿。在一个方面，受试者是被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)的学步儿。
在一个方面，受试者是被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但其他方面是健康的年幼儿童。在一个方面，受试者是年龄小于5个月，小于24个月或小于36个月(3岁)的年幼儿童，其被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但其他方面是健康的。在一个方面，受试者是以下年龄的年幼儿童：28天至小于5个月(如例如28天至4个月)，28天至小于24个月(如例如28天至23个月)，1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)，3个月至小于24个月(如例如3个月至23个月)，5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)，28天至小于36个月(如例如28天至35个月)，1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，3个月至小于36个月(如例如3个月至35个月)或5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)，其被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但其他方面是健康的。在一个方面，受试者是被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但其他方面是健康的婴儿。在一个方面，受试者是被诊断患有RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)但其他方面是健康的学步儿。
在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院的年幼儿童。在一个方面，受试者是年龄小于5个月，小于24个月或小于36个月(3岁)的年幼儿童，其因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院。在一个方面，受试者是以下年龄的年幼儿童：28天至小于5个月(如例如28天至4个月)，28天至小于24个月(如例如28天至23个月)，1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)，3个月至小于24个月(如例如3个月至23个月)，5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)，28天至小于36个月(如例如28天至35个月)，1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，3个月至小于36个月(如例如3个月至35个月)或5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)，其因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院。在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院的婴儿。在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院的学步儿。
在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染的年幼儿童。在一个方面，受试者是年龄小于5个月，小于24个月或小于36个月(3岁)的年幼儿童，其因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染。在一个方面，受试者是以下年龄的年幼儿童：28天至小于5个月(如例如28天至4个月)，28天至小于24个月(如例如28天至23个月)，1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)，3个月至小于24个月(如例如3个月至23个月)，5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)，28天至小于36个月(如例如28天至35个月)，1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，3个月至小于36个月(如例如3个月至35个月)或5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)，其因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染。在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染的婴儿。在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染的学步儿。
在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染但其他方面是健康的年幼儿童。在一个方面，受试者是年龄小于5个月，小于24个月或小于36个月(3岁)的年幼儿童，其因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染但其他方面是健康的。在一个方面，受试者是以下年龄的年幼儿童：28天至小于5个月(如例如28天至4个月)，28天至小于24个月(如例如28天至23个月)，1个月至小于24个月(如例如1个月至23个月)，3个月至小于24个月(如例如3个月至23个月)，5个月至小于24个月(如例如5个月至23个月)，28天至小于36个月(如例如28天至35个月)，1个月至小于36个月(如例如1个月至35个月)，3个月至小于36个月(如例如3个月至35个月)或5个月至小于36个月(如例如5个月至35个月)，其因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染但其他方面是健康的。在一个方面，受试者是因感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染但其他方面是健康的婴儿。在一个方面，受试者是因RSV感染(例如RSV下呼吸道感染，如细支气管炎或支气管肺炎)住院并被诊断患有RSV感染但其他方面是健康的学步儿。
在本发明的方法中，本发明的多肽(例如SEQ ID NO:71)以所选择的给药方案通过吸入施用给患有RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的受试者，使得治疗发生。
可以通过测量治疗期间病毒载量的减少来评估本发明多肽的活性。病毒载量可以是例如在年幼儿童的鼻粘液中确定。粘液可以从鼻子中取出，例如用吸鼻器吸鼻，橡皮球注射器或鼻拭子。病毒载量可通过本领域已知的任何方法测定，例如，聚合酶链反应或培养。
因此，在本发明的方法中，本发明的多肽(如SEQ ID NO:71)以所选择的给药方案通过吸入施用给患有RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的受试者，使得病毒载量减少。在一个方面，在给药后6小时，通过PFU测定法测量，平均鼻病毒载量减少1.000log 10PFU/ml(与例如安慰剂中约0.5log 10PFU/ml相比)。另一方面，在通过吸入向患有RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的受试者施用本发明的多肽(如SEQ ID NO:71)后，到病毒不可检测的中位时间(即从治疗开始到连续2次鼻拭子中第一次病毒滴度不可检测的时间)减少50％。
本发明多肽的活性还可以通过测量血清中的某些生物标志物如IL-8和KL-6来评估。
白细胞介素-8(IL-8)是宿主对损伤和感染的反应的重要介质。血清中的IL-8水平可以通过本身已知的任何方法使用本领域技术人员已知的技术测量，如例如，以下可商购的测定：人IL-8ELISA试剂盒(Life Technologies；Cat#KHC0081)，人IL-8ELISA试剂盒(Thermo Fisher Scientific Inc.；Cat#EH2IL8,EH2IL82,EH2IL85)或Alpha LISA IL8免疫测定研究试剂盒(PerkinElmer Inc.；Cat#AL224C,AL224F)。
Kerbs von Lungren 6抗原(KL-6)是在肺泡II型细胞表面表达的高分子量糖蛋白。在以肺泡上皮细胞损伤为特征的各种间质性肺病中，KL-6的血清水平升高。血清KL-6与RSV细支气管炎的严重程度相关，并且有人提出它可能是RSV细支气管炎严重程度的有用生物标志物(Kawasaki等.2009,J.Med.Virol.81:2104-8)。血清中的KL-6水平可以通过本身已知的任何方法使用本领域技术人员已知的技术测量，如例如，以下可商购的测定：KL-6人ELISA(BioVendor；Cat#RSCYK243882R)，Krebs Von den Lungen 6免疫测定试剂盒(BIOTREND Chemikalien GmbH；Cat#E05k0061)，或KL-6ELISA试剂盒(Biorbyt；Cat#orb153677)。
可以进行以下评估以评估本发明多肽的临床活性：心率和外周毛细血管O2饱和度(SpO2)水平；喂养(喂养支持的类型，喂养的充足性)，特别注意喂养期间的水合作用和呼吸舒适度；呼吸频率；喘鸣(在呼气/吸气期间)；肺部听诊时的喘鸣音/爆裂声；白天咳嗽；夜间咳嗽(所致的睡眠干扰)；(呼吸肌)收缩(锁骨上，肋间和肋下)；一般状况(活动，刺激，对环境的兴趣和反应能力)；以及住院持续时间。
基于临床活动参数，可以计算另外的评分，例如临床反应，呼吸窘迫评估仪(RDAI)评分和呼吸评估变化评分(RACS)。呼吸窘迫评估仪(RDAI)评分是基于喘鸣和收缩的17分评分。RDAI评分是行评分的总和，总计0到17；分数越高表示疾病越严重。呼吸评估变化评分(RACS)是RDAI评分变化与呼吸频率变化的标准化评分之和。
总体严重程度评分(GSS)是一种临床评分系统(最多20分)，其允许基于7种不同项目对患有呼吸道感染的婴儿分类：喂养不耐受，医疗干预程度，呼吸困难，呼吸频率，呼吸暂停，一般情况和发烧，每个评分从0到3，发烧除外(评分从0到2)；导致最大总分为20，得分越高表明疾病严重程度越高(如表B-7和表B-10中进一步描述的)。该总体评分考虑了与评估婴儿RSV LRTI严重程度相关的所有不同临床参数，并且具有比单个项目更全面的优点。对于GSS评估，也可参考Justicia-Grande等.2015(Leipzig:33rd Annual Meeting of theEuropean Society for Paediatric Infectious Diseases)和Cebey-López等.2016(PLoSONE 11(2):e0146599)。
在一个方面，在本发明的方法中，本发明的多肽(如SEQ ID NO:71)以所选择的给药方案通过吸入施用给患有RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的受试者，使得剂量后一天总体严重程度评分显着降低(优选p<0.05，更优选p<0.01)(与安慰剂对照受试者相比)。
本发明的多肽抑制病毒生命周期中的早期事件，通过抑制病毒粒子与靶细胞的融合来防止细胞外病毒感染未接触病毒的细胞。本发明的方法和给药方案用于抑制病毒生命周期中的这些早期事件，并通过抑制病毒粒子与靶细胞的融合来防止细胞外病毒感染未接触病毒的细胞。
在中和测定中(在例如Hep-2细胞培养物中，如本文进一步描述的)，将90ng/mL的体外浓度确定为本发明的多肽达到其最大抑制性抗病毒效果的90％的浓度(IC90)。随后，体外确定的IC90乘以100，以解决未知和难以评估的变量，因为(i)Hep-2细胞培养物中RSV的复制速率可能不完全反映体内情况，(ii)各种临床菌株的感染性和复制率可能有很大差异，并且(iii)尽管已经评估了许多(n＝6)临床病毒株对本发明多肽抑制作用的敏感性，但它们可能不代表全部临床菌株。
得到的值(9微克/mL或更高)被认为是下呼吸道中所需的导致RSV感染性的有临床意义的降低的本发明多肽的目标浓度。计算出该浓度足以使RSV感染的婴儿中在峰值病毒滴度下可获得的所有目标完全饱和，并且还受到在RSV感染的新生羊羔和棉鼠中的非临床研究中显示功效的局部目标浓度的支持。因此，本发明涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以9微克/mL(其中该值应理解为任选地包括±0.5微克/mL的范围)或更高的目标浓度施用给儿童。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以9微克/mL(其中该值应理解为任选地包括±0.5微克/mL的范围)或更高的目标浓度施用给患有RSV感染的儿童。
在本发明中，开发了儿科模型(参见图1)以提供关于适当给药方案的指导，并预测本发明多肽的局部和全身PK指数，以及它们的相关变异性。主要目标是确保浓度值(C谷值)高于下呼吸道中估计的目标浓度(9μg/mL)，同时考虑生长和发育过程，如器官成熟，血流变化，身体组成和消除机制的个体发育。通过多步骤缩放开发儿科模型，最初使用非临床数据，随后使用成人中本发明多肽的预测和测量的临床PK参数，随后通过缩放(i)解剖学和生理学参数(ii)清除过程，和(iii)吸收过程外推至儿童。
所开发的儿科模型用于估计在整个治疗期间达到并维持等于或高于95％的个体中的估计目标浓度的局部浓度所需的剂量。基于该儿科模型的模拟，在一次施用后需要存在于下呼吸道中的沉积剂量是每千克体重0.024mg本发明的多肽。因此，本发明涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给儿童：每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量，更具体地每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量，如例如每天0.024mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.002mg/kg的范围)。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给患有RSV感染的儿童：每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量，更具体地每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量，如例如每天0.024mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.002mg/kg的范围)。
进一步的模拟显示RSV感染的婴儿和学步儿的代表性呼吸模式导致在下呼吸道中沉积本发明多肽的吸入量的约10％(7-13％，取决于年龄和粒径)。相应地，在一次施用后，需要吸入0.24mg/kg的剂量(吸入剂量)以在下呼吸道中达到0.024mg/kg的沉积剂量。因此，本发明涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给儿童：每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量，更具体地每天0.20-0.35或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量，如例如每天0.24mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.02mg/kg的范围)。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给患有RSV感染的儿童：每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量，更具体地每天0.20-0.45或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量，如例如每天0.24mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.02mg/kg的范围)。
用Sophia解剖婴儿鼻喉(SAINT)模型(Janssens等.2001,Journal of aerosolmedicine:the official journal of the International Society for Aerosols inMedicine 14:433-41)进行气溶胶沉积研究，其中该多肽用振动网式雾化器进行施用，更具体地说是具有2L/min恒定流量的额外空气或O2的振动网式雾化器，如例如FOX-Flamingo振动网式雾化器(Activaero，现在是Vectura Group plc，Wiltshire，UK)。结果显示，从填充到雾化器中的总剂量，预计约20％被吸入。填充在雾化器中确保吸入剂量为0.24mg/kg的标称剂量因此为1.2mg/kg。因此，本发明还涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给儿童：每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量，更具体地每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量，如例如每天1.20mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.06mg/kg的范围)。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以如下剂量施用给患有RSV感染的儿童：每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量，更具体地每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量，如例如每天1.20mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.06mg/kg的范围)。
在一个方面，多肽每天施用连续2至5天，或更多，如每天施用连续2天，连续3天，连续4天，连续5天或更长，优选连续3天。
上述剂量方案在本文中也称为“选定的给药方案”或“选定的剂量”。
在优选的方面，在本发明的上述方法中使用的本发明的多肽是SEQ ID NO:71。
因此，本发明涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用SEQ ID NO:71，其中SEQ ID NO:71通过吸入以9微克/mL(其中该值应理解为任选地包括±0.5微克/mL的范围)或更高的目标浓度施用给儿童。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的SEQ ID NO:71，其中SEQID NO:71通过吸入以9微克/mL(其中该值应理解为任选地包括±0.5微克/mL的范围)或更高的目标浓度施用给患有RSV感染的儿童。
因此，本发明涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用SEQ ID NO:71，其中SEQ ID NO:71通过吸入以如下剂量施用给儿童：每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量，更具体地每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量，如例如每天0.024mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.002mg/kg的范围)。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的SEQ ID NO:71，其中SEQID NO:71通过吸入以如下剂量施用给患有RSV感染的儿童：每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量，更具体地每天0.020-0.035mg/kg的沉积剂量，如例如每天0.024mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.002mg/kg的范围)。
因此，本发明还涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用SEQ ID NO:71，其中SEQ ID NO:71通过吸入以如下剂量施用给儿童：每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量，更具体地每天0.20-0.35或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量，如例如每天0.24mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.02mg/kg的范围)。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的SEQ ID NO:71，其中SEQ ID NO:71通过吸入以如下剂量施用给患有RSV感染的儿童：每天0.20-0.40mg/kg的吸入剂量，更具体地每天0.20-0.35或0.20-0.45mg/kg的吸入剂量，如例如每天0.24mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.02mg/kg的范围)。
因此，本发明还涉及在年幼儿童中治疗RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的方法，所述方法包括向患有RSV感染的儿童施用SEQ ID NO:71，其中SEQ ID NO:71通过吸入以如下剂量施用给儿童：每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量，更具体地每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量，如例如每天1.20mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.06mg/kg的范围)。本发明还涉及用于治疗年幼儿童中RSV感染(如RSV下呼吸道感染)的SEQ ID NO:71，其中SEQ IDNO:71通过吸入以如下剂量施用给患有RSV感染的儿童：每天1.00-2.00mg/kg的标称剂量，更具体地每天1.00-1.75mg/kg的标称剂量，如例如每天1.20mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.06mg/kg的范围)。
在一个方面，SEQ ID NO:71的多肽每天施用连续2至5天，或更多，如每天施用连续2天，连续3天，连续4天，连续5天或更长，如例如连续3天。
药物组合物和制剂
本发明进一步涉及组合物(在本文中也称为“本发明的组合物”或“本发明的制剂”)，其包含一定浓度的本发明的多肽，以及任选地一种或多种本身已知的这些组合物的另外组分。通常，对于药物用途，本发明的多肽可以配制成制剂或组合物(也称为“本发明的药物组合物”或“本发明的药物制剂”)，其包含一定浓度的本发明的多肽和至少一种药学上可接受的载体，稀释剂或赋形剂和/或佐剂，和任选的一种或多种其他药物活性成分。
本发明的多肽可以以本身已知的任何合适的方式配制和施用，例如参考标准手册，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences 1990(18th Ed.,Mack PublishingCompany,USA),Remington 2005(the Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott Williams and Wilkins)；或Handbook of Therapeutic Antibodies(S.Dubel,Ed.),Wiley,Weinheim,2007(参见例如第252-255页)。
由于本发明的多肽和/或包含其的组合物通过吸入(即呼吸道)施用，所以制剂优选为适于吸入施用的形式。在这方面，药物组合物将包含本发明的多肽和至少一种适于通过吸入施用给受试者的载体，稀释剂或赋形剂，以及任选的一种或多种其他活性成分。
本文所用的术语“赋形剂”是指通常用作药物的稀释剂，载体，防腐剂，粘合剂或稳定剂的惰性物质，其赋予制剂有益的物理性质，例如增加的蛋白质稳定性，增加的蛋白质溶解度，和/或降低的粘度。赋形剂的实例包括但不限于蛋白质(例如血清白蛋白)，氨基酸(例如天冬氨酸，谷氨酸，赖氨酸，精氨酸，甘氨酸)，表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠(SDS)，聚山梨醇酯例如Tween 20和Tween 80，泊洛沙姆如普郎尼克类，和其他非离子表面活性剂如聚(乙二醇)(PEG))，糖类(例如葡萄糖，蔗糖，麦芽糖和海藻糖)，多元醇(例如甘露醇和山梨糖醇)，脂肪酸和磷脂(例如，烷基磺酸酯和辛酸酯)。关于赋形剂的其他信息，参见Remington's Pharmaceutical Sciences(Joseph P.Remington,18th ed.,MackPublishing Co.,Easton,PA)，其全部内容并入本文。
如本文所用的短语“适于通过吸入施用的载体”是指药学上可接受的材料，组合物或载体，如液体或固体填充剂，稀释剂，赋形剂或溶剂，其参与例如在呼吸道中携带或运输药剂(例如预防性药剂或治疗性药剂)。在与制剂的其他成分相容并且对患者无害的意义上，每种载体必须是“可接受的”。
包含在本发明组合物中的载体优选是含水载体，如例如蒸馏水，水或注射用水(WFI)。组合物可以通过药学上可接受的任何缓冲剂缓冲。用于本发明组合物的优选缓冲剂包括(但不限于)PBS，磷酸盐缓冲剂，TrisHCl，组氨酸缓冲剂和柠檬酸盐缓冲剂，如例如，组氨酸pH 6.0-6.5，磷酸盐缓冲剂pH 7.0，TrisHCl pH 7.5和柠檬酸盐缓冲剂/磷酸盐缓冲剂pH 6.5，特别是磷酸盐(NaH2PO4/Na2HPO4)缓冲剂pH 7.0。其他药学上可接受的载体也可用于本申请的制剂中。可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油，山梨糖醇，甘露醇和聚乙二醇；酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；无热原水；等渗盐水；林格溶液(Ringer's solution)；乙醇；磷酸盐缓冲液；和药物制剂中使用的其他无毒相容物质。
如在工作实施例中所证明的，50mg/mL的浓度已用于肺部施用本发明的多肽。因此，预计也可以使用具有这些浓度附近的值的其他浓度(并且也在这些值之外，即，高于或低于这些值)。例如，可以使用25，30，35，40，45，55，60，65，70，75mg/mL的浓度。本领域技术人员清楚的是，鉴于本发明中确定的特定标称剂量(mg/kg)，填充在雾化器中的药物组合物的体积(填充容量)将取决于药物组合物中本发明的多肽的浓度。
在本发明的方法中，在雾化器中填充的确保RSV感染性的临床意义上降低的标称剂量被确定为每天1.00-2.00mg/kg，更具体地每天1.00-1.75mg/kg，如例如每天1.20mg/kg(其中该值应理解为任选地包括±0.06mg/kg的范围)。取决于年幼儿童的体重，应当装入雾化器中的药物组合物的体积(在特定浓度下，例如50mg/mL本发明的多肽)(也称为“填充容量”)会有所不同。与其他吸入产品一致，本发明多肽的施用剂量(以及因此包含特定浓度的本发明多肽的药物组合物的填充容量)可以在(窄)体重类别情况下标准化(参见例如表B-2和表B-6，药物组合物为50mg/mL)。
吸入装置-雾化器
本发明还涉及适于通过吸入本发明多肽进行递送并且适用于包含本发明多肽的组合物的用途的药物装置。因此，本发明涉及包含选定剂量的本发明多肽的装置。
各种吸入系统例如是在综述(“Pulmonary Drug Delivery”,Bechtold-Peters和Luessen编辑,同上)中的第129至148页描述。在本发明的方法中，该装置是包含本发明多肽的液体(例如细固体颗粒或液滴的悬浮液)的吸入器。优选地，该装置是气溶胶递送系统或包含本发明多肽的雾化器。
用于本发明方法的气溶胶递送系统可包括容器，该容器包含本发明的组合物和与其连接的气溶胶发生器。气溶胶发生器被构造和布置成产生本发明组合物的气溶胶。
在一个优选的方面，气溶胶递送系统是雾化器。雾化器产生含有药物的液滴雾用于吸入。如本发明中所用，“雾化”是指将液体转化为细喷雾。雾化器将药物与压缩空气混合以产生细雾，患者通过面罩或口罩呼吸细雾。
优选使用振动网式雾化器。振动网式雾化器分为被动和主动振动网式装置(Newman 2005,J.Appl.Ther.Res.5:29-33)。被动振动网式装置(例如OmronNE-U22雾化器)采用具有多达6000微米尺寸孔的多孔板。连接到换能器喇叭的振动压电晶体在位于其前方的多孔板中引起“被动”振动，导致流体通过孔挤出并产生气溶胶。主动振动网装置(例如Pro雾化器)可以采用“微泵”系统，该系统包括气溶胶发生器，该气溶胶发生器由具有多达1000个圆顶形孔的板和振动元件组成，振动元件在施加电流时收缩和膨胀。这导致网向上和向下移动几微米，挤出流体并产生气溶胶。振动网式雾化器的其他实例包括Akita2Apixneb(Activaero,现在是Vectura Group plc,Wiltshire,UK)，(PARI GmbH,Germany；还参见US 5,586,550)，(Aerogen,Inc.,Sunnyvale,California；还参见US 5,586,550；US 5,938,117；US 6,014,970；US 6,085,740；US 6,205,999)，或FOX-Flamingo振动网式雾化器(Activaero，现在是Vectura Group plc,Wiltshire,UK)，均适用于儿科用途。适用于儿科用途的优选雾化器描述于WO 2016/055656中。
在优选的方面，使用连续流动雾化器。考虑到患有细支气管炎的年幼婴儿可能需要额外的氧气或空气供应，建议保持2L/min的连续氧气或空气供应通过递送系统。
因此，雾化器可以使用或不使用额外的空气或O2流。优选地，在具有额外的空气或O2流，如2L/min的额外空气流或O2流的情况下使用雾化器。
因此，在一个方面，雾化器可以包括(参见图33)：
(a)具有可振动网(102)的气溶胶发生器(101)；
(b)待雾化液体的贮存器(103)，所述贮存器与可振动网流体连接；
(c)气体入口(104)；
(d)面罩(105)，其具有
-外壳(106)，
-气溶胶入口(107)，
-患者接触表面(108)，和
-外壳中的单向呼气阀或双向吸气/呼气阀(109)，其具有在0.5至5毫巴的范围内选择的呼气阻力(exhalation resistance)；和
(e)从气体入口延伸到面罩的气溶胶入口的流动通道(110)，所述流动通道具有
-侧开口(111)，气溶胶发生器通过所述侧开口至少部分地插入流动通道中，
-气体入口和面罩的气溶胶入口之间的恒定流动阻力，流速为1至20L/min。
在一个方面，流动通道的尺寸和形状被配置成在侧开口上游紧邻的位置处以2L/min的流速实现至少4m/s的平均气体速度。
在一个方面，侧开口上游的流动通道的形状被配置成当气体以1至20L/min的流速通过流动通道时实现层流。
在一个方面，气体入口成形为管配件(tube fitting)。
在一个方面，流动通道不具有用于接收气体的另外的入口。
在一个方面，气溶胶发生器定向成使得雾化的气溶胶以与流动通道的纵轴成大约90°的角度喷射到流动通道中。
在一个方面，侧开口和面罩的气溶胶入口之间的流动通道的内部容积不大于30mL。
在一个方面，吸入装置或雾化器包括用于启动和停止气溶胶发生器的操作的开关，其中气溶胶发生器的操作包括可振动网的连续振动。
由于18个月以下的婴儿实际上是专用鼻呼吸，通过口状物(mouthpiece)控制吸入是不可行的，并且界面可能需要特别注意适合不同年龄的面罩类型和尺寸。
吸入装置或雾化器的面罩可以配置成允许患者通过面罩进行呼气。这可以通过具有相当小的呼气阻力的阀来实现。
优选地，面罩的标称内部容积不大于约120mL。如本文所用，标称内部容积被理解为当患者接触表面放置在平坦表面上时从气溶胶入口到患者接触表面由外壳所包围的内部容积。该容积略大于有效内部容积，或所谓的死腔，其是当面对患者面部放置时由面罩包围的体积，因此取决于患者面部的大小和形状。如果患者是学龄儿童，则标称内部容积分别优选不大于约90mL，或甚至不大于约80mL，或不大于约70mL，或不大于约60mL，或不大于约50mL，或不大于约40mL，这取决于患者面部的大小。如果患者是新生儿，目前优选选择标称内部容积不大于约40或50mL的面罩。
进一步优选的是相对于患者的平均潮气量选择面罩的标称内部容积。有利地，标称内部面罩容积小于潮气量。例如，如果患者是在正常呼吸期间具有约80mL的平均潮气量的儿科患者，则标称内部面罩容积应小于此。特别地，相应的容积可以在平均潮气量的约10％至约80％的范围内。在进一步的实施方案中，标称内部面罩容积不大于患者平均潮气量的约60％，或甚至不大于约50％。
在一个实施方案中，面罩可具有双向吸气和呼气阀，其在任一方向上具有不大于3毫巴的阻力，并且其中面罩的标称内部容积不大于约50mL。该实施方案特别适用于小的儿科患者，如新生儿，婴儿和学步儿。在另一个实施方案中，面罩可具有一个或多个吸气阀和一个或多个呼气阀，其中呼气阀的阻力不大于3毫巴，并且其中面罩的标称内部容积不大于约70mL。该实施方案特别适用于学步儿和儿童。
任选地，面罩可包括另外的吸气和/或呼气阀。如果是这样，组合阀的有效呼气压力仍应在规定范围内，即在约0.5至5毫巴。任选地，呼气压力也可分别选自约0.5毫巴至约3毫巴，例如约1毫巴或约2毫巴。设置在面罩中的阀可以具有适于提供呼气阻力的任何结构；例如狭缝阀，鸭嘴阀或薄膜阀，仅举几例。例如，阀可以是具有交叉狭缝和覆盖膜(如硅酮膜)的单向阀。在一个方向上，从交叉狭缝到膜，阀门打开，而在相反方向，膜将被紧紧地压在交叉上，从而阻塞阀。根据将阀插入面罩的方向，它可以用作吸气阀或呼气阀。
吸入装置或雾化器可以连接到气体源，所述气体源以1至5L/min的恒定流速提供气体。由所述气源提供的气体可选自氧气，空气，富氧空气，氧气和氮气的混合物，以及氦气和氧气的混合物。
用于本发明方法的示例性吸入装置和雾化器描述于WO 2016/055655中，其通过引用并入本文。
吸入装置或雾化器装有本发明的药物组合物。因此，本发明还涉及含有包含本发明多肽的药物组合物的吸入装置或雾化器。在优选的方面，吸入装置或雾化器含有包含SEQID NO:71的药物组合物。如上所述，本发明的多肽可以任何合适的浓度存在于雾化器中，例如25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75mg/mL，优选浓度为50mg/mL。
为了确保如本文所述的临床上有意义的RSV降低，本发明的多肽以每天1.00-2.00mg/kg，优选1.00-1.75mg/kg，如例如每天1.20mg/kg的标称剂量施用(其中该值应理解为任选地包括±0.06mg/kg的范围)。取决于年幼儿童的体重，应当装入雾化器中的药物组合物的体积(以50mg/mL本发明的多肽的浓度)(也称为“填充容量”)将如下(也参见表B-2和表B-6)。
上述剂量在本文中也称为“选定的给药方案”。
因此，本发明涉及包含0.100-0.400mL或0.100-0.500mL(如0.100mL，0.130mL，0.150mL，0.200mL，0.250mL，0.300mL，0.350mL，0.400mL，0.500mL)的50mg/mL的本发明多肽(优选SEQ ID NO:71)组合物的吸入装置或雾化器。更具体地，本发明涉及吸入装置或雾化器，其包含0.100-0.400mL或0.100-0.500mL(如0.100mL，0.130mL，0.150mL，0.200mL，0.250mL，0.300mL，0.350mL，0.400mL，0.500mL)的50mg/mL的本发明多肽(优选SEQ ID NO:71)组合物用于治疗年幼儿童中的RSV感染，如RSV下呼吸道感染。
本发明还涉及包含0.025-0.035mL/kg，如0.025-0.033mL/kg(如0.025mL/kg，0.026mL/kg，0.027mL/kg，0.028mL/kg，0.029mL/kg，0.030mL/kg，0.031mL/kg，0.032mL/kg)的50mg/mL的本发明多肽(优选SEQ ID NO:71)组合物的吸入装置或雾化器。更具体地，本发明涉及吸入装置或雾化器，其包含0.100-0.400mL或0.100-0.500mL(如0.100mL，0.130mL，0.150mL，0.200mL，0.250mL，0.300mL，0.350mL，0.400mL，0.500mL)的50mg/mL的本发明多肽(优选SEQ ID NO:71)组合物用于治疗年幼儿童中的RSV感染，如RSV下呼吸道感染。
在一个方面，年幼儿童的年龄小于5个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄小于36个月(3岁)。
在一个方面，年幼儿童的年龄为28天至小于5个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为28天至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为1个月至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为3个月至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为5个月至小于24个月。
在一个方面，年幼儿童的年龄为28天至小于36个月(3年)。
在一个方面，年幼儿童的年龄为1个月至小于36个月(3岁)。
在一个方面，年幼儿童的年龄为3个月至小于36个月(3年)。
在一个方面，年幼儿童的年龄为5个月至小于36个月(3年)。
在一个方面，年幼儿童是婴儿。
在一个方面，年幼儿童是学步儿。
在一个方面，年幼儿童被诊断患有RSV下呼吸道感染，但在其他方面是健康的。
在一个方面，年幼儿童因RSV下呼吸道感染住院。
另外的治疗剂
本发明的多肽可以作为单一疗法施用或与其他药学活性化合物或要素组合施用(所述化合物或要素用于或能用于治疗RSV感染)因此可以获得或不获得协同效应。临床医生将清楚这些化合物和要素的实例，以及用于施用它们的途径，方法和药物制剂或组合物。
当两种或更多种物质或要素用作组合治疗方案的一部分时，它们可以通过相同的施用途径或通过不同的施用途径、基本上同时或在不同时间(例如基本上同时，连续地，或根据交替方案)施用。当物质或要素通过相同的施用途径同时施用时，它们可以作为不同的药物制剂或组合物或组合的药物制剂或组合物的一部分施用，这是本领域技术人员清楚的。
此外，当两种或更多种活性物质或要素用作组合治疗方案的一部分时，每种物质或要素可以与化合物或要素单独使用时所使用的相同的量并且根据相同的方案施用，这种组合使用可以或可以不导致协同效应。然而，当两种或更多种活性物质或要素的组合使用导致协同效应时，还可以减少待施用的一种，多种或所有物质或要素的量，同时仍然实现期望的治疗作用。例如，这可以用于避免，限制或减少与使用一种或多种物质或要素(当它们以其通常的量使用时)相关的任何不希望的副作用，同时仍然获得所期望的药物或治疗效果。
因此，本发明还提供用于肺部施用结合并中和hRSV的本发明多肽的方法和给药方案，其中所述多肽与至少一种另外的治疗剂组合施用。
在不受限制的情况下，可以从RSV感染(如RSV下呼吸道感染)住院期间的标准护理中选择另外的治疗剂，包括(不限于)支气管扩张剂，抗生素(例如在住院期间继发细菌感染[重复感染(surinfection)]的情况下)，肾上腺素，抗胆碱能药，退烧药和/或非甾体抗炎药。
在一个方面，本发明的多肽与支气管扩张剂组合施用。因此，本发明还涉及治疗年幼儿童RSV感染的方法，所述方法包括给患有RSV感染的儿童施用本发明的多肽，其中所述多肽通过吸入以选定的给药方案与支气管扩张剂组合地给予儿童。在本发明的方法中，将本发明的多肽和支气管扩张剂作为组合疗法(成套试剂盒)施用至呼吸道(即通过吸入)。在该方法中，本发明的多肽和支气管扩张剂用作组合治疗方案的一部分。更具体地，该组合疗法的两个部分同时，单独或顺序地施用至呼吸道(即通过吸入)。
有两类主要的支气管扩张剂，即sympaticomimetics(包括短效和长效β2拟似物)，以及抗胆碱能药。短效拟似物包括(但不限于)沙丁胺醇，特布他林，非诺特罗，吡布特罗和妥洛特罗。它们可以用作碱或可接受的药用盐。长效β2拟似物包括(但不限于)福莫特罗和沙美特罗。它们也可以用作碱或可接受的药用盐。抗胆碱能药物包括(但不限于)异丙托铵，氧托溴铵和噻托溴铵。
不受限制，用于本发明方法的另外支气管扩张剂包括Accu Hale，沙丁胺醇，比托特罗，麻黄碱，肾上腺素，新异丙肾上腺素，异丙肾上腺素，奥西那林，吡布特罗，消旋肾上腺素，利托君，特布他林，levosabutamol，levabuterol，克伦特罗，安非他明，甲基苯丙胺，可卡因，茶碱，咖啡因，可可碱，THC和MDPV。
具有很长作用持续时间的支气管扩张剂类分子必须每天仅施用一次(例如噻托溴铵)。长效β2拟似物通常每天施用两次，如福莫特罗和沙美特罗。最后，有短效支气管扩张剂，如沙丁胺醇，特布他林，异丙托铵或氧托铵，必须每天施用4-6次。基于这些信息，可以设计治疗方案以便最好地利用组合治疗。治疗方案可包括同时，单独或顺序施用本发明的多肽和支气管扩张剂。用于施用组合疗法(成套试剂盒)的最常用装置是雾化器，计量剂量吸入器(MDI)和这些的组合。
在一个方面，本发明的多肽和支气管扩张剂同时施用。在该实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂以可吸入的形式混合施用。不受限制，本发明多肽和支气管扩张剂的可吸入形式可以是通过同时雾化(例如用雾化器)本发明的多肽和支气管扩张剂(两者优选存在于(本发明的)相同的组合物中)获得的气溶胶。
另一方面，本发明的多肽和支气管扩张剂单独施用。在该实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂以单独可吸入形式施用。不受限制地，本发明的多肽和/或支气管扩张剂的单独可吸入形式可以是通过雾化(例如用雾化器)本发明的多肽或支气管扩张剂(其单独地存在于(本发明的)组合物中)获得的气溶胶。备选地，本发明多肽和/或支气管扩张剂的单独可吸入形式可以是通过雾化(例如用雾化器)本发明多肽获得的气溶胶和从将溶解或悬浮在挥发性推进剂中的支气管扩张剂分裂成液滴(例如用计量剂量吸入器(MDI))然后快速蒸发这些液滴而获得的单独气溶胶。因此，本发明的多肽和支气管扩张剂用两种不同(类型)的吸入器施用，每种吸入器产生单独的可吸入形式。不受限制，可以提出以下组合：
-用MDI吸入支气管扩张剂并用雾化器吸入本发明的多肽；
-用雾化器吸入支气管扩张剂，并用另一个雾化器吸入本发明的多肽。
另一方面，本发明的多肽和支气管扩张剂是顺序施用的。在该实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂以可吸入的形式单独并顺序地施用。不受限制地，本发明的多肽和/或支气管扩张剂的可吸入形式可以是通过雾化(例如用雾化器)本发明的多肽或支气管扩张剂(其单独地存在于(本发明的)组合物中)获得的气溶胶。备选地，本发明多肽和/或支气管扩张剂的单独可吸入形式可以是通过雾化(例如用雾化器)本发明多肽获得的气溶胶和从将溶解或悬浮在挥发性推进剂中的支气管扩张剂分裂成液滴(例如用计量剂量吸入器(MDI))然后快速蒸发这些液滴获得的单独气溶胶。对于组合疗法的这种顺序施用，本发明的多肽和支气管扩张剂应存在于本发明的两种不同(单独的)组合物中，所述组合物单独地装载进入吸入器装置中，从而能产生这两种单独的、顺序的可吸入形式。在该实施方案中，本发明的多肽和支气管扩张剂可以用两种不同(类型)的吸入器施用。然而，不一定需要使用两种不同的吸入器，因为在一些装置中(如例如在雾化器中)，可以顺序装载单独的组合物。不受限制，可以提出以下组合：
-用MDI吸入支气管扩张剂，然后用雾化器吸入本发明的多肽；
-用雾化器吸入支气管扩张剂，然后用雾化器(可以是相同或不同的)吸入本发明的多肽；
-用雾化器吸入本发明的多肽，然后用MDI吸入支气管扩张剂；
-用雾化器吸入本发明的多肽，然后用雾化器(可以是相同或不同的)吸入支气管扩张剂。
用于顺序施用本发明多肽和支气管扩张剂的优选间隔取决于所用的本发明的多肽和支气管扩张剂(如上所述)，并且可以包括5分钟至24小时或更长时间，如例如5分钟，10分钟，15分钟，20分钟，30分钟，1小时，4小时，6小时，8小时，12小时等。
在一个优选的方面，支气管扩张剂是短效β2-激动剂，如例如沙丁胺醇。
在优选的方面，支气管扩张剂如例如短效β2-激动剂在用雾化器施用本发明的多肽之前用MDI施用。例如，支气管扩张剂短效β2-激动剂可在施用本发明多肽之前10-15分钟施用。例如，在施用本发明多肽之前15分钟，将短效β2-激动剂如沙丁胺醇以200微克的剂量(例如100微克的两次喷射)施用给年幼儿童。
在另外优选的方面，支气管扩张剂在用雾化器施用本发明的多肽之前用雾化器施用。在该优选方面，本发明的多肽和支气管扩张剂可以用相同的雾化器(即，本发明的多肽和支气管扩张剂中的每一种可以存在于顺序加载到雾化器中的单独组合物中)或两种不同的雾化器施用。
在另一个优选的方面，本发明的多肽和支气管扩张剂用雾化器同时施用。在该优选方面，本发明的多肽和支气管扩张剂优选存在于加载到雾化器中的本发明的一种单一组合物中。另外，本发明的多肽和支气管扩张剂存在于都加载到雾化器中的本发明的两种不同组合物中。
实施例
实施例1：开发儿科群体剂量确定模型
使用临床前以及预测和测量的临床数据(表B-1)，在多步骤缩放方法(图3；实施例3-11)中开发了用于患病儿童的基于生理学的药代动力学(PBPK)模型。
剂量选择基于典型的体外微量中和测定产生的IC90值的倍数，以实现功效。如在微量中和测定中确定的，对于最不敏感的原型RSV B 18537株，SEQ ID NO:71的平均IC 90值为～90ng/mL(n＝20)。将该IC90的100倍的值(9μg/ml)作为目标浓度，以针对RSV临床分离株敏感性的可能差异。
由于目标(RSV F蛋白)不在人体中表达，并且不可能从成人到儿童外推功效，因此剂量确定只能基于建模方法。在本方法中，开发了一个模型，其中考虑了年幼儿童的解剖学和生理学，生长和发育过程，例如器官成熟，血流变化，身体组成和消除机制的个体发育，包括呼吸系统的变化(参见图1，以及下面的更详细解释)。
PBPK建模(Barrett等.2012,Clin.Pharmacol.Ther.92:40-9；Khalil和2011,J.Biomed.Biotechnol.Epub 2011 Jun 1)用于桥接儿科和成人药理学。这是通过建立成人的吸入PBPK模型然后将其扩展到儿童来完成的。PBPK模型使用PK-软件(BayerTechnology Services,Leverkusen,Germany；www.pk-sim.com,版本5.1.3用于PBPK模型建立,并且版本5.2.2和5.3.2用于群体模拟)构建。PK-是一种商业上可用的工具，用于实验动物和人的药物PBPK建模。PK-包括用于蛋白质治疗和大分子的通用PBPK模型(图2)。有关PK-中实施的一般PBPK模型结构的详细说明，参见Willmann等(2007,J.Pharmacokinet.Pharmacodyn.34:401-431；2005,1:159-168；2003,Biosilico 1:121-124)。该模型用于构建用于静脉内(IV)施用的PBPK模型和用于肺部施用的基础模型。
为了描述自肺泡空间的吸收，将代表肺泡衬里液(ALF)的另外的隔室插入从PK-输出的标准全身PBPK模型的肺中(图2)。肺泡衬里液含有吸入后在肺泡腔内沉积的剂量。根据肺泡表面积和肺泡衬里液稠度的文献值(Tschumperlin和Margulies 1999,J.Appl.Physiol.,86:2026-33；Patton 1996,Advanced Drug Delivery Reviews 19:3-36；Bastacky等.1995,J.Appl.Physiol.79:1615-28)计算不同物种的ALF隔室的体积。由于吸入水的快速重吸收，在吸入气溶胶后假定ALF隔室的体积是恒定的。
还将连接肺泡空间与肺组织的扩散交换途径(间质)插入模型中。扩散速率通过以下一阶方程计算：
dN/dt＝Palv*Aalv*(Calf–Cint)
其中N：药量
Palv：肺泡通透性(上皮细胞屏障)。将参数值拟合至大鼠吸入后的血浆浓度-时间曲线。
Aalv：来自文献的肺泡表面积。
Calf：ALF中药物的浓度。
Cint：肺间质中药物的浓度。
吸入后，气溶胶颗粒沉积在呼吸道的各个区域。为了估计吸入SEQ ID NO:71后沉积在下呼吸道中的分数，使用结合到PBPK模型中的专用工具，多径粒子剂量测定法(MPPD)V2.11(2002-2009,详述可见于http://www.ara.com/products/mppd.htm)来对不同儿科年龄组的气溶胶沉积进行缩放(scale)。MPPD模型由Applied Research Associates,Inc.和Hamner Institutes for Health Sciences,USA与National Institute of PublicHealth and the Environment(RIVM),荷兰和Ministry of Housing,Spatial Planningand the Environment,荷兰合作开发。其允许描述头部，气管支气管和肺泡区域的平均区域沉积，以及不同儿科年龄组和不同大小的颗粒的每个气道产生的平均沉积。总体而言，区域沉积取决于肺形态(其是年龄特异的)，颗粒特性(大小和密度分布)和呼吸模式(频率，容量)。如此，MPPD工具计算对于不同尺寸的颗粒气溶胶在成人和儿童(年龄：3个月，21个月，23个月和28个月，3岁，8岁，9岁，14岁和18岁)呼吸道中的沉积。使用针对气道或气道分叉内的扩散、沉降和撞击的沉积理论上导出的效率计算沉积。使用经验效率函数确定头部对气溶胶的过滤。
实施例2：SEQ ID NO:71纳米抗体在新生儿羔羊RSV感染模型中的体内功效
新生羊羔RSV感染模型用于评估吸入递送后SEQ ID NO:71的体内功效。总共进行了三项独立的功效研究。简言之，使用PARI LC SPRINTTM雾化器(PARI RespiratoryEquipment,Inc.,Lancaster,PA,USA)通过雾化在第0天用RSV感染2-5日龄的初乳剥夺的羔羊。以16PSI(Philips Respironics Air Compressor,Andover,MA,USA)以4L/min经23分钟时程向每只动物施用含病毒培养基或对照培养基的三个2mL等份，导致每只羔羊的总吸入为约6mL。对于每只羔羊使用相同的病毒接种物剂量(hRSV Memphis 37株，1.27×107FFU/mL，在具有20％w/v蔗糖的培养基中)。SEQ ID NO:71治疗在感染后第1天(在1个研究中)或第3天(在2个研究中)开始，并且每天重复直至感染后第5天。使用基于振动网的Solo System(Aerogen Ltd,Galway,Ireland)通过雾化进行施用。总共测试了3个剂量水平，对应于11mg(低剂量)，36mg(中剂量)和110mg(高剂量)递送的SEQ ID NO:71剂量。
每天监测羔羊的一般健康状况，并记录呼吸频率，心率，体温，血氧饱和度，体重，喘鸣和呼气努力。在接种后第6天收集呼吸组织和支气管肺泡灌洗液(BAL)以定量病毒损害，肺病毒滴度，病毒抗原和肺组织病理学。所有评估均如表B-3和B-4中所述进行。
在RSV感染的载体处理的羔羊中，对于所有进行的研究，病毒RNA和可培养病毒在第6天始终存在于所有肺叶中(表B-5)。此外，肺部检查显示广泛的病毒损害(涉及约12-40％的肺叶)，这与细支气管/肺泡和组织学实变中的病毒抗原表达相平行(图29和30)。在感染后第3天至第4天，第一次检测到感染的临床症状，其中包括增加的呼吸频率和呼气努力，喘鸣和不适，尽管这些症状在各项研究中是不同的。
在用SEQ ID NO:71处理的组中，对羔羊施用三种不同剂量。无论治疗开始的日期，每个剂量水平都强烈降低病毒滴度(表B-5)，病毒抗原表达(图29)，总病毒损害和组织病理学评分(图30)。此外，尽管以不同方式表现出临床症状，但对所有测试剂量都观察到对复合临床评分的积极影响(图31)。
对于所有剂量，来自所有动物的肺上皮衬里液中的平均SEQ ID NO:71浓度接近或高于9μg/mL(图32)。已经将该9μg/mL定义为来自使用RSV-B原型株(18537)的体外中和测定的肺中的目标浓度(IC90×100)。使用Memphis 37株的数据显示它比RSV-B 18537灵敏约6倍。
作为结论，当在新生羊羔中每天递送3或5天时，SEQ ID NO:71治疗对RSV感染诱导的变化发挥有益作用。剂量依赖性不明显。考虑到目标组织(ELF)中达到的浓度均是在处于或高于目标浓度9μg/mL的剂量，这是预期的。该目标浓度在羔羊中传递了全部功效，这可通过对复合临床评分(图31)的积极影响来证明。
实施例3：PBPK模型评估：PBPK IV模型
使用以下信息建立PBPK IV模型：i)关于SEQ ID NO:71的物理化学特征的化合物特异性信息，来自ii)大鼠的初始PK研究(表B-1：研究1)的数据，来自iii)大鼠的毒性研究(表B-1：研究2)和iv)IV施用后狗的心血管安全性药理学研究(表B-1：研究3)的数据。第一级模型构建(IV模型)考虑了分布和清除过程。
通过拟合实验血浆浓度曲线(图6A和B)估算两个参数，SEQ ID NO:71的流体动力学半径和肾清除率(CL)。得到的SEQ ID NO:71的流体动力学半径为2nm，小于3.5nm的预期实验值。2nm的半径与三价多肽的单价单元的半径相匹配。因此，参数鉴定后获得的小的药物半径可以通过多肽的柔性来解释。在大鼠中，获得的最佳结果为肾脏CL为肾小球滤过率(GFR)的58％。
实施例4：PBPK模型评估：大鼠肺部递送
为了解释吸收过程，在第二级模型建立中模拟肺部递送。将如实施例3中所述使用流体动力学药物半径为2nm和肾清除率58％GFR的IV应用模型通过添加如实施例1中所述肺隔室扩展到肺部吸收。该部分是基于实验血浆浓度-时间曲线以及在大鼠中进行的单剂量(表B-1：研究1)和重复剂量(表B-1：研究4)毒性研究中肺中局部药物量建立的。
将肺泡通透性和沉积在肺泡吸收空间中的剂量分数拟合以匹配大鼠肺部施用后的实验血浆浓度-时间曲线(表B-1：研究1)(图7)。实验数据与模拟曲线很好地匹配，产生4.58E-9cm/min的肺泡通透性Palv和0.37％的在肺泡空间中沉积的剂量分数。
使用相同的模型比较ALF吸收室中SEQ ID NO:71的模拟量与支气管肺泡灌洗液(BALF)中实验发现的量(图8)。对于所有剂量，SEQ ID NO:71的计算量与实验值相匹配，其中模拟半衰期仅略大于观察到的半衰期。
对于重复剂量研究(表B-1：研究4)的模拟，使用与上述单剂量研究相同的肺泡通透性值(4.58E-9cm/min)。在调整沉积在肺泡吸收空间中的剂量分数后，在每天一次肺部施用达14天后SEQ ID NO:71的血浆浓度曲线的模拟与第1天和第14天的实验数据(图9)产生极好的匹配。与之前的研究相反，需要假定沉积剂量分数的不同值以获得合理的拟合(15mg/kg为1.8％，50mg/kg为0.93％，150mg/kg为0.47％)。较高的剂量具有较小的肺泡沉积的趋势可以解释不同剂量组的不同血浆PK曲线。
将使用与图9中相同模型的ALF吸收室中的模拟量与在支气管肺泡灌洗液(BALF)中实验发现的量进行比较(图10)。模拟曲线与实验量强烈偏离(一个数量级)。这种差异可以通过BALF数据中气管/支气管的贡献来解释，因为BALF中的实验量包含来自整个呼吸道的贡献，而模拟量仅指肺泡吸收空间中的量。实验与模拟之间的偏差远大于研究1。这可以解释为研究4中较大的药物回收率，可能是由于不同的BALF取样程序(整个肺包括研究4中的气管，研究1中的右肺)。实验BALF数据的累积/半衰期被模拟很好地描述，并且类似于血浆中的累积/半衰期。
实施例5：PBPK模型评估：健康成年人的肺部施用
5.1第一临床研究(表B-1：研究5)
最初在健康男性志愿者的I期研究中评估了SEQ ID NO:71的安全性，耐受性和吸入PK(表B-1：研究5)。I期研究包括44名受试者中的单次递增剂量部分，其中测试了6个剂量水平，范围为2.1mg至210mg。随后，在16名健康男性中开始多剂量部分，其中受试者接受SEQID NO:71，每天两次70mg(每天140mg)和105mg(每天210mg)剂量，持续五天。
5.2模型评估
通过采用来自人PK-数据库的器官体积，器官中的血流和淋巴流等生理参数，将大鼠中的PBPK模型缩放到人。如在大鼠中的所有先前计算中一样，将SEQ ID NO:71的流体动力学半径和肾CL设定为2nm和58％GFR。通过与大鼠中相同的机制描述肺泡吸收。假设ALF稠度和肺泡通透性与大鼠相同，而肺泡表面积缩放至102.2m2(Patton 1996,Advanced Drug Delivery Reviews 19:3-36)。
来自该第一人临床研究的人血浆PK数据(表B-1：研究5)用于评估模型和缩放原理。肺泡空间中的沉积分数必须符合实验数据。然而，该参数的变化(相当于有效剂量的变化)仅导致模拟曲线沿浓度轴的移动，同时保持曲线的形状。因此，模拟对浓度曲线(包括由吸收速率确定的终末半衰期)具有预测特性。
在图11中，SEQ ID NO:71的模拟血浆浓度-时间曲线与肺部施用SEQ ID NO:71后来自单个健康志愿者的实验数据进行比较。对于沉积在肺泡空间中的剂量分数，使用15％的值获得最佳拟合结果。图11显示通过从大鼠模型缩放的PBPK模型非常好地预测健康人志愿者中的吸收率，因此在人类中可以假设与大鼠中相同的肺泡通透性的值。
实施例6：PBPK模型评估：健康成年人中的IV和肺部施用
6.1第二临床研究(表B-1：研究6)
进行另一项I期研究以评估通过吸入施用给健康的成年男性志愿者的SEQ ID NO:71的单一和重复剂量的PK。SEQ ID NO:71的单一i.v.施用也包括在该研究中，以为随后的PK建模和模拟提供额外的信息。四十四名受试者被随机化并且接受治疗：23名受试者用SEQID NO:71单剂量吸入治疗，15名受试者用SEQ ID NO:71多剂量吸入治疗，6名受试者用SEQID NO:71i.v.输注治疗。该研究调查了当通过口吸入或静脉内施用时SEQ ID NO:71的局部(在支气管和肺泡空间中)和/或全身的浓度。
6.2模型评估
用来自IV和肺部施用后第二临床试验(表B-1：研究6)的尿和肺泡衬里液(ALF)数据进一步验证和改进该模型。
将使用第一临床(表B-1：研究5)评估的相同人模型与第二临床研究(表B-1：研究6)的IV施用后的血浆浓度-时间曲线和尿排泄数据进行比较。
使用从大鼠缩放的人模型的模拟在施用后的前12小时非常好地匹配实验IV数据。然而，在施用后24小时的实验数据点被模拟低估，并且后来的时间点似乎也被低估(图12)。
通过实验在尿液中发现的药物量(6-23％)远低于模拟中的药物量(91％)(图13)。因此，模型的肾清除率(GFR的58％)似乎太大。考虑到在该第二临床研究中可获得的尿液数据(表B-1：研究6)，必须降低模型的肾清除率。为了仍然描述血浆浓度时间曲线，必须在模型中引入额外的清除过程。
最初开发的平均人模型也用来自第二临床研究(表B-1：研究6)的吸入数据评估(图14)。使用的原始模型没有任何变化(包括在肺泡空间中沉积剂量的15％)。使用尿素稀释法校正用于比较的实验ALF浓度(Conte等.1995,Antimicrob.Agents Chemother.39:334-8)。
吸入后模拟的血浆浓度-时间曲线与实验数据匹配良好。在初始阶段，实验血浆浓度略微低估。在初始阶段，来自第一临床研究的实验血浆浓度(表B-1：研究5)也略低于来自第二临床研究(表B-1：研究6)的那些。模拟的ALF浓度也与实验数据一致，尽管实验数据略微高估，即平均模型与较高的个体ALF浓度相匹配。
实施例7：PBPK模型细化
7.1模型细化
模型评估后，细化以下模型特征得到：
1.调整流体动力学半径以便更好地描述IV施用后24小时后的时间点的血浆浓度-时间曲线。
2.降低肾清除率以匹配实验中观察到的尿液剂量分数。对于大小约为40kDa的蛋白质，文献(Galaske等.1979,Kidney Int.16:394-403；Maack等.1979,Kidney Int.16:251-70)报道肾清除率<10％，证明肾清除率降低。为了能够仍然描述IV施用后观察到的血浆浓度曲线，在模型中添加了所有血浆隔室内的额外的一级清除过程。额外的清除过程可归因于血浆蛋白酶。IV施用后，将一级速率常数拟合至血浆浓度曲线。
3.对于吸入模型，使用肺泡厚度的替代文献值来更好地描述吸入后的ALF浓度。在最初建立的模型中，如Patton 1996(Advanced Drug Delivery Reviews 19:3-36)的综述中所引用的，使用了0.068μm的肺泡厚度。在细化模型中使用0.2μm的值。Patton同样引用了这个替代值。相同的值被独立报告为大鼠肺泡厚度的面积加权平均值(Dall'Acqua等.J.Biol.Chem.281:23514-24)。使用0.2μm的较大厚度导致肺泡容量增加并因此导致肺泡浓度降低。如果相应地增加肺泡通透性，则总吸收速率和因此全身浓度不会改变。因此，在细化模型中，使用以下缩放的肺泡通透性：4.58E-9cm/min x 0.2/0.068＝1.35E-8cm/min。
用精制模型进行的模拟产生平均血浆和尿液浓度-时间曲线，其非常好地匹配第二临床研究的实验数据(表B-1：研究6)(图15和16)。对于拟合的流体动力学半径，获得2.46nm的值，肾清除率的值为5％的GFR，并且额外的血浆清除率常数的值为0.0142min-1。
使用肺泡厚度的替代文献值，非常好地描述了实验ALF浓度(图17)。对于使用细化模型的模拟，沉积在肺泡空间中的剂量分数另外稍微调整(10.6％)以便更好地描述血浆浓度。
7.2利用细化模型的群体模拟
为了评估细化成人模型的群体模拟，将群体模拟结果与来自第二临床研究(表B-1：研究6)以及第一临床研究(表B-1：研究5)的PK数据进行比较。产生包含欧洲ICRP2002群体的1000个男性个体的群体，其具有在两个研究的范围内均匀分布的人口统计学参数。
SEQ ID NO:71的个体实验血浆浓度-时间曲线和累积尿排泄(表B-1：研究6)相比于图18中显示的IV施用后的群体模拟的结果的比较。
第二人体研究(表B-1：研究6)中单次吸入和多次吸入后的人群模拟与实验血浆和ALF浓度的比较分别显示在图19和图20中。
通过与来自第一人研究(表B-1：研究5)的数据进行比较，还重新评估了使用细化模型的群体模拟(图21)。
对于这两项研究，群体模拟与实验数据相当吻合。
实施例8：成人PBPK模型缩放至健康儿童
随后主要基于文献中可获得的已建立的参数和方程(Edginton等.2006,Clin.Pharmacokinet.45:1013-1034；Rhodin等.2009,Pediatr.Nephrol.24:67-76；Hislop等.1986,Early Hum.Dev.13:1-11)通过缩放(i)解剖学和生理学参数，(ii)清除过程和(iii)吸收过程将细化的成人PBPK模型外推至儿童。
为了估计沉积在肺泡吸收空间中的吸入剂量的分数，使用MPPD工具。MPPD工具中提供3个月，21个月，23个月和28个月的年龄。使用的粒度分布为2.63μm MAD(质量中值直径)，并且几何标准偏差为1.46。安静的鼻吸入用于呼吸参数。对于其他参数，使用MPPD默认设置。计算肺泡腔中吸入剂量的分数约为20％(图4)。
使用具有人体测量和生理参数(例如器官体积，血流量，GFR)的标准可变性的儿科PK-群体。为了估计群体药代动力学，产生了八个年龄组的虚拟高加索人群体，每个群体具有1000个个体并且两性的比例均匀。年龄组是：0-1周，1-2周，2-4周，1-3个月，3-6个月，6-9个月，9-12个月，12-24个月，2-3岁，3-4岁，4-5岁和5-6岁(早产儿除外)。
在群体模拟中三个附加参数是变化的：肺泡通透性，在肺泡空间中沉积的剂量分数和额外的血浆清除过程。对于所有三个参数，假设对数正态分布。对于肺泡通透性(几何平均值：1.35E-8cm/min)，使用1.4的几何标准偏差(从个体拟合到第一成人临床研究(表B-1：研究5)估计)。选择肺泡空间中的剂量以达到肺泡靶浓度。对于所有年龄组，使用几何标准偏差2用于肺泡空间中的剂量分数。每天一次吸入持续5天用作模拟的应用方案(吸入时间：每次吸入3分钟)。对于多剂量方案的每次施用，肺泡空间中剂量分数的值取自独立于其他施用的值的分布。对于额外的血浆清除率，成人群体使用的几何标准偏差为1.1(几何平均值：0.0142min-1)。
根据建模目标，在整个给药间隔期间，对于95％的个体，选择剂量至少达到9μg/mL(100*IC90)。关于剂量，推动PBPK模型中全身和局部PK的首要重要参数似乎是肺泡吸收空间中的药物量。基于PBPK模拟，对于所有年龄组，在肺泡空间中使用0.024mg/kg体重(沉积剂量)的量达到9μg/ml的目标浓度。由于肺泡表面积和肺泡容量与体重成比例，因此对于体重标准化剂量而言肺泡浓度实际上不依赖于年龄。因此，在肺泡吸收空间中0.024mg/kg体重的沉积剂量用于ALF和血浆浓度的所有模拟(图22-28)。
实施例9：成人PBPK模型缩放至患病儿童
然后将成人PBPK模型缩放至患病儿童，以解释与疾病相关的潜在生理差异。由于直接比较RSV感染儿童和健康儿童的文献资料稀少，因此对模型开发过程中适应/拟合的关键参数(沉积在肺泡空间内的分数比例，清除率，肺泡通透性，肺泡空间厚度和流体动力学药物半径)进行了敏感性分析。根据现有的非临床结果，现有文献(Kilani等.2004,Chest126:186-91；Singh等.2007,Am.J.Physiol.Lung Cell Mol.Physiol.293:L436-45；Domachowske和Rosenberg 1999,Clin.Microbiol.Rev.12:298-309；Johnson等.2007,Mod.Pathol.20:108-19))，并且考虑到已经纳入模型的PK指数的变异性的预测，对于RSV感染，不需要对肺泡空间的清除率和/或吸收进行特定改变。
关于沉积在肺泡空间中的分数比例，MPPD计算(考虑反映RSV感染的改变的呼吸模式)用于估计RSV感染儿童中肺泡空间中沉积的吸入剂量的分数比例。在第一种情况下，Totapally等2002(Crit.Care 6:160-5)观察到的一岁以下儿童的呼吸频率和潮气量。在第二种情况下，Mundt等2012(ISRN Pediatr.2012p.721295)采用的模拟毛细支气管炎的影响的呼吸频率和潮气量的相同的相对变化被用于采用相应的MPPD默认值。与正常呼吸的结果相比，由MPPD工具预测的具有窘迫呼吸模式的肺泡空间中沉积的分数比例较低，特别是对于使用Mundt等2012采用的呼吸模式的情景而言(图5)。
模拟显示代表RSV感染的婴儿和学步儿的呼吸模式(年龄范围为5至24个月)导致SEQ ID NO:71的吸入量的约10％(7-13％，取决于年龄和粒径)沉积在下呼吸道中。相应地，在一次施用后，需要吸入0.24mg/kg的剂量(吸入剂量)以在下呼吸道中达到0.024mg/kg的沉积剂量。
实施例10：治疗年幼儿童RSV下呼吸道感染的剂量确定
振动网式雾化器被认为是用于免疫球蛋白单可变结构域如SEQ ID NO:71的雾化的最合适技术(WO 2011/098552)。在进一步描述的研究中(参见实施例12)，使用适于儿科使用的FOX雾化器(Activaero，现在为Vectura Group plc，Wiltshire，UK)施用SEQ ID NO:71(WO 2016/055655)。雾化器总是使用2L/min的额外空气流或O2流，并配有儿科面罩(2种尺寸)。
Sophia解剖婴儿鼻喉(SAINT)模型用于生成专门用于用上述雾化器(Janssens等.2001)施用SEQ ID NO:71的数据。SAINT模型是9月龄儿童上呼吸道的解剖学上正确的铸型/表示，使用立体光刻技术建造并用于研究年幼儿童中的气溶胶沉积。临床模拟了将在临床环境中使用的施用条件，包括代表健康和RSV感染的婴儿和学步儿的呼吸模式。结果显示，从填充到雾化器中的总剂量，预计约20％被吸入。因此，确保吸入剂量为0.24mg/kg的填充在雾化器中的剂量为1.2mg/kg(标称剂量)。
与其他吸入产品一致，SEQ ID NO:71的施用剂量在(窄)体重类别情况下标准化(6个剂量组，增量步长为1或2kg，参见表B-2和表B-6)。这得到了安全边际的支持，并且还考虑了使用(0.01mL)渐进式1mL注射器精确测量并将适当体积填充到雾化器中的可行性。通过额外的PBPK模拟也证实了体重类别的适当性。
考虑到设备规格，对应于基于重量的类别的施用时间可以从45秒(5.0-6.0kg受试者)到120秒(14.1-16.0kg受试者)变化。剩余体积约7μL(与填充容量无关)保留在雾化器的贮存器中，并且已在表B-2中列出的填充容量中考虑。
考虑到设备规格，对应于基于重量的类别的施用时间可以从30秒(3.5-3.9kg受试者)到150秒(16.1-19.0kg受试者)变化。剩余体积约7μL(与填充容量无关)保留在雾化器的贮存器中，并且已在表B-6中列出的填充容量中考虑。
实施例11：群体模拟
如实施例10中所述对六个剂量组进行群体模拟，估计年幼儿童(年龄范围为5至24个月)的血浆和ALF浓度。
模拟是针对不同的施用方案进行的：
三次施用，每天一次(0，24，48h)；
两次施用，每天一次(0和24h)；
单次施用(0小时)；
0，24，48小时施用方案的血浆和ALF浓度时间曲线分别在图23和图24中给出。在第一次吸入后72小时(3×24小时)期间，95％的个体的肺泡浓度大于14μg/ml。这比之前的模拟(9μg/ml)更大，因为六个剂量组中的沉积分数和剂量的几何标准偏差减小(由于这些组内的体重范围，肺泡空间中的剂量可以是略大于0.024mg/kg)。在最后一次施用后仅34小时，第5浓度百分位数降至低于目标浓度9μg/ml。
0-24小时施用方案的血浆和ALF浓度时间曲线分别在图25和图26中给出。对于0-24小时的施用方案，57小时后总群体的肺泡浓度的第5百分位数降至低于9μg/ml。在第一次施用后72小时内的20％的时间内其低于目标浓度9μg/ml。91小时后，总群体的中位肺泡浓度降至低于9μg/ml。
单剂量施用方案的血浆和ALF浓度时间曲线分别在图27和图28中给出。单次给药，31小时后总群体的肺泡浓度的第5百分位数降至低于9μg/ml。在第一次施用后72小时内的57％的时间内，其低于目标浓度9μg/ml。59小时后，总群体的中位肺泡浓度降至低于9μg/ml。在第一次施用后72小时内的18％的时间内，其低于目标浓度9μg/ml。
实施例12：治疗婴儿和学步儿的RSV感染
如上所述，在儿童中，预测肺泡吸收空间中的SEQ ID No:71的量(0.024mg/kg体重)在肺泡靶空间中达到预定义的SEQ ID NO:71浓度(9μg/ml)。这些预测是使用PBPK建模方法进行的，其中验证模型包含来自若干研究和来自若干物种的观察数据。
进行多中心研究以评估因RSV下呼吸道感染而住院并被诊断患有RSV下呼吸道感染的婴儿和学步儿肺部施用SEQ ID NO:71的该剂量方案的安全性和耐受性。另外，评估了SEQ ID NO:71的该剂量方案对SEQ ID NO:71的临床效果，药代动力学(PK)，药效学(PD)和免疫原性的影响。
12.1研究设计
除了标准治疗之外，还进行了对因呼吸道合胞病毒下呼吸道感染而住院并诊断患有呼吸道合胞病毒下呼吸道感染的在其他方面健康的婴儿和学步儿(年龄5个月至小于24个月，年龄3个月至小于24个月，年龄28天至小于24个月，或年龄28天至小于5个月)的多中心研究，以评估通过吸入施用的SEQ ID NO:71的安全性，耐受性和临床活性。在本研究中，欧洲和亚太地区共有21个研究中心征募了受试者。
该研究由3个部分组成：(A)开放标签导入部分，(B)双盲安慰剂对照部分，和(C)年轻受试者中的双盲安慰剂对照扩展组。根据适用的人用药品委员会(Committee forMedicinal Products for Human Use，CHMP)指南，指定了一个独立的数据监测委员会(DMC)来审查研究数据并提出建议。
A部分：研究的开放标签导入部分(第I组，N＝5)：
最初的5名受试者(年龄5个月至小于24个月)被纳入A部分，仅接受活性研究药物(SEQ ID NO:71)。在所有受试者完成研究治疗期后，DMC审查了所有可用数据，并提供了关于启动研究的B部分以及在B部分中包括3个月至小于24个月的受试者的积极建议。
B部分：研究的双盲安慰剂对照部分(第II组，N＝30)：
在DMC的积极建议之后，将30名受试者(年龄3个月至小于24个月)征募在B部分中并以2:1比例随机分配接受SEQ ID NO:71或安慰剂。一旦已经招募了一半受试者(15名受试者完成研究药物治疗期)，所有可用的临床数据由DMC审查。根据DMC的积极建议，B部分剩余部分的符合条件的征募年龄范围扩大至28天至小于24个月。
C部分：扩展组(第III组，N＝18)
一旦B部分的所有受试者完成研究药物治疗期，将另外18名年龄28天至小于5个月的受试者征募在C部分中以在扩展的和临床上高度相关的目标群体中收集额外的数据。C部分的受试者以2:1比例被随机分配接受SEQ ID NO:71或安慰剂。
总共有53名受试者(在RSV诊断试验中被诊断为RSV阳性)在该研究中被随机化(A部分5名受试者，B部分30名受试者和C部分18名受试者)。图34给出了研究设计的概述。受试者的基线特征如表B-9所示。
临床研究的这3个部分使用类似的治疗方案(图35)。在每个研究中心，除标准治疗外，还将SEQ ID NO:71或匹配的安慰剂(仅B部分和C部分)通过FOX-Flamingo振动网式雾化器(Activaero，现在Vectura Group plc，Wiltshire，UK)吸入施用，每天一次连续3天。表B-6中显示了雾化器中填充的适当体积(每体重类别)和适当的雾化时间的概述。雾化器使用固定的2L/min的空气流，或者如果需要，O2(由研究者基于受试者的O2需要决定)。
在施用研究药物之前大约15分钟，施用吸入剂量的短效β2-激动剂沙丁胺醇。通过计量剂量吸入器(具有间隔物)给予两次抽吸(2×100μg)。
每个受试者的计划研究持续时间约为15天。在整个研究中密切监测SEQ ID NO:7的安全性，耐受性和临床活性。PD(病毒载量)，PK(SEQ ID NO:71的全身浓度的评估)和SEQID NO:71的潜在免疫原性(全身性已存在的或治疗引发的抗药物抗体[ADA]的存在)也在研究中探讨。
12.2主要安全评估
通过治疗紧急不良事件(TEAE)，临床实验室测试结果(临床化学和血液学)，体格检查结果(包括肺部听诊)和心率和外周毛细血管O2饱和度(SpO2)评估安全性。
未观察到与SEQ ID NO:71相关的严重不良事件和/或从研究中退出。最常见的不良事件是呼吸系统疾病和感染。这证实了该目标群体中SEQ ID NO:71的安全性和耐受性特征。
12.3药代动力学
评估血清中的SEQ ID NO:71的浓度作为评估局部肺浓度的替代指标。在给药后第3天(最后给药后6小时)在血清样品中检测到SEQ ID NO:71，证实了SEQ ID NO:71在肺部的暴露。
12.4药效学
在通过鼻拭子获得的样品中评估病毒载量，作为探索性PD参数。
通过聚合酶链反应(测量所有病毒RNA，可培养和非活病毒的qRT-PCR)和培养(测量可培养/感染性病毒的噬斑测定)测量病毒载量。尽管通过RSV诊断测试诊断为RSV阳性，但是在研究期间的任何时间，5名受试者未显示通过噬斑或qRT-PCR测定显示RSV感染的证据，并且被假定是来自快速诊断试纸条测试的假阳性。表示为病毒载量随时间的抗病毒作用(第1，2和3天的鼻拭子；给药后6小时)显示在图36中。
第一SEQ ID NO:71剂量在6小时内将平均可培养病毒滴度降低至低于定量限度，对于安慰剂治疗的受试者则不是这种情况(在第一剂量后，对于SEQ ID NO:71，从基线的平均变化为-0.879log10PFUs/mL，对于安慰剂，为-0.434log10PFUs/mL)，尽管SEQ ID NO:71组中的基线值低于安慰剂组。在SEQ ID NO:71治疗的受试者中随后的平均可培养病毒滴度维持在定量限度以下，而对于安慰剂组中的受试者，平均可培养病毒滴度仅在第二剂量后降至定量限度以下。在使用SEQ ID NO:71的情况下，到病毒不可检测的中值时间减少50％(p＝0.014)(表B-8)。
排除没有RSV滴度的5名受试者之外的事后分析证实，与安慰剂组中的受试者相比，SEQ ID NO:71治疗的受试者具有更快的可培养病毒滴度降低(第一剂量后，对于SEQ IDNO:71，从基线的平均变化为-1.000log10PFUs/mL，对于安慰剂，为-0.463log10PFUs/mL)。表示为到病毒滴度(BQL)不可检测的时间的抗病毒效应(即从治疗开始的时间到2个连续鼻拭子中第一次病毒滴度不可检测的时间)如图37和39所示。与安慰剂组相比，SEQ ID NO:71组的到BQL的中值时间较少，这提供了SEQ ID NO:71治疗对感染性病毒的潜在有益效果的证据。
对于测量可培养病毒和非活病毒的RT-qPCR，两个治疗组在研究过程中平均病毒滴度均下降，虽然组间差异不太明显，但与安慰剂对照处理组相比，SEQ ID NO:71治疗组的病毒载量有降低的趋势。
总之，用SEQ ID NO:71治疗对RSV感染的婴儿中的病毒复制具有直接影响。
12.5探索性免疫原性
(在血清中)评估了针对SEQ ID NO:71的已存在的抗体(pre-Ab)或治疗引发的抗药物抗体(ADA)的全身存在。在随访时，在23％的受试者中检测到治疗引发的抗药物抗体，这与由于RSV感染引起的肺部的一般免疫激活一致。与不良事件无关，并且对PK无明显影响。
12.6主要临床活性评估
通过喂养，呼吸频率(超过1分钟间隔)，O2饱和度，喘鸣(呼气/吸气期间)，白天咳嗽，夜间咳嗽(引起的睡眠干扰)和一般状况(活动，刺激，对环境的兴趣和反应能力)来评估临床活性。基于研究期间测量的临床活性参数，计算总体严重程度评分。
12.6.1一般状况
对一般状况的评估包括活动，刺激，对环境的兴趣和反应性。
对于所有参数，两个治疗组中的受试者在整个研究过程中得到改善，在基线至第2天给药前已经有所改善。没有观察到治疗组之间的明显差异。
12.6.2喘鸣
记录在呼气和吸气期间的喘鸣。
在基线时SEQ ID NO:71和安慰剂组之间存在不平衡，其中SEQ ID NO:71组中的受试者在呼气期间(分别为8.8％和25.0％的受试者)和在吸气期(分别为67.6％和81.3％的受试者)不太可能具有“无喘鸣”。在整个研究过程中，这种情况发生逆转；在第1天后的大多数时间点(包括出院)，SEQ ID NO:71组中更高百分比的受试者在呼气或吸气期间没有喘鸣。
如喘鸣反映的，没有迹象表明利用SEQ ID NO:71的雾化导致呼吸窘迫的诱导或增加。
12.6.3呼吸速率
在1分钟的间隔内测量呼吸速率。
尽管在A部分中受试者在基线时呈现较高的呼吸速率(54.5次/分钟)，但在基线时SEQ ID NO:71和安慰剂组的平均呼吸速率相同(每分钟48.7次呼吸)。虽然在两个治疗组的研究过程中呼吸速率下降，但与安慰剂组相比，SEQ ID NO:71组的降低明显更早(即，治疗第2天和第3天)。
如呼吸速率评估反映的，没有迹象表明利用SEQ ID NO:71的雾化导致呼吸窘迫的诱导或增加。
12.6.4氧饱和度
在放置面罩和随后施用研究药物期间和之后，通过脉搏血氧测定法连续测量外周毛细血管氧饱和度。
12.6.5白天咳嗽
根据父母或法定监护人的反馈记录白天咳嗽，如果没有，则根据护理人员的反馈进行记录。
筛选和基线之间的数据(第1天，给药前2小时)波动。严重的白天咳嗽病例不常报道；据报道，不同时间点各治疗组的轻度或中度咳嗽频率相似。在第14天，两个治疗组中的所有受试者没有白天咳嗽或轻微白天咳嗽。
如咳嗽评估反映的，没有迹象表明因利用SEQ ID NO:71的雾化导致呼吸窘迫的诱导或增加。
12.6.6喂养
按照研究者的意见(特别注意喂养期间的水合作用和呼吸舒适性)评估了喂养支持的类型和使得能够出院的充分喂养的(时间和日期)。允许喂养的回顾性评估(例如，基于护士记录)。
在基线时，约40％的受试者正在接受喂养支持(ALX-0171组中40.6％的受试者并且安慰剂组中37.5％的受试者)，最常见的是静脉内提供喂养支持。在第3天(给药前2小时)，两个治疗组均观察到与基线相比对喂养支持需求的减少；这种降低在SEQ ID NO:71组中比安慰剂组更明显(在SEQ ID NO:71组中25.7％的受试者和在安慰剂组中31.3％的受试者仍然需要喂养支持)。
12.6.7夜间咳嗽
在第二天早晨记录夜间咳嗽引起的睡眠干扰，或根据父母或法定监护人-的反馈(如果不可用，则基于护理人员的反馈意见)进行第14天随访或退出访问。
具有夜间咳嗽所致的睡眠干扰的受试者的百分比从筛选夜(SEQ ID NO:71组中81.3％的受试者和安慰剂组中的87.5％)到第3天前一晚(SEQ ID NO:71组中51.4％和安慰剂组中的50.0％)和出院前一晚(SEQ ID NO:71组中的34.3％，安慰剂组中的37.5％)减少。
12.6.8总体严重程度得分
总体严重程度评分(GSS)是一个源自ReSVinet量表[18](其是一个经过验证的临床评分系统，可根据七个不同的项目(喂养不耐受，医疗干预，呼吸困难，呼吸频率，呼吸暂停，一般情况，发烧)对呼吸道感染的婴儿客观分类)。总体严重程度评分(GSS)结合了这些次要终点，并根据7个不同的项目提供呼吸道感染的婴儿客观分类：养不耐受，医疗干预，呼吸困难，呼吸频率，呼吸暂停，一般情况，发烧，每个评分从0到3，除了发烧(评分从0到2)；这导致最大总分为20，分数越高表明疾病严重程度越高(如表B-7和表B-10中所述)。该总体评分考虑了与评估婴儿RSV LRTI严重程度相关的所有不同临床参数，并且具有比单个项目更全面的优点。对于GSS评估，也可参考Justicia-Grande等.2015(Leipzig:33rd AnnualMeeting of the European Society for Paediatric Infectious Diseases)和Cebey-López等.2016(PLoS ONE 11(2):e0146599)。
改进的安全群体(包括在研究的双盲组成部分(B部分和C部分)中征募的并且排除5个没有可检测的RSV的受试者)的平均总体严重程度评分(GSS)提供在表B-11中并且以图形方式呈现在图38中。SEQ ID NO:71组的平均(SD)基线GSS值为7.7(2.42)，相比之下安慰剂组为7.4(3.20)。在两个治疗组中，平均GSS在研究过程中降低，与安慰剂组相比，在第1天SEQ ID NO:71组的改善就已经更明显，表明与安慰剂治疗相比，用SEQ ID NO:71治疗更快恢复。图38实际上显示了在给药后第1天开始的总体严重程度评分中组间的分离，表明在SEQ ID NO:71组中疾病严重程度的更快改善。
基于纵向分析对随时间的平均GSS进行建模并比较SEQ ID NO:71和安慰剂治疗同时针对基线评分和时间进行调整，获得p＝0.0092的p值。
表A-2:抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域的氨基酸序列
表A-2:续
表A-3:本发明优选多肽的氨基酸序列
表A-3:续
表A-3:续
表A-3:续
表A-4:接头的氨基酸序列
表B-1：PBPK建模中使用的临床前和临床研究
表B-3：新生羔羊研究中测量的终点
表B-4：临床综合评分标准
表B-8：到病毒不可检测的中值时间
表B-9：实施例12中描述的研究中受试者的基线特征
表B-10：个体总体严重程度评分项目
a通过活动，刺激和对环境的兴趣进行评估(这三个项目中最差的一个用于赋分)。
表B-11：总体严重程度评分：自基线的绝对变化(改进的安全群体[不包括A部分])
缩写：BL＝基线；CFB＝自基线的变化；h＝小时；N＝治疗组的受试者总数；n＝有数据的受试者数量；PRD＝给药前；PSD＝给药后；SD＝标准偏差。
注意：基线值是研究药物的第一剂量之前的最后一个非缺失值。
a仅有盲治疗(部分B+C)。
Claims (85)
1.治疗年幼儿童RSV感染的方法，所述方法包括给患有RSV感染的儿童施用多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD(如通过免疫测定所测量的)结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90(如通过微量中和测定所测量的)中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量通过吸入施用给所述儿童。
2.用于治疗年幼儿童的RSV感染的多肽，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成，其中所述多肽以每天0.020-0.040mg/kg的沉积剂量通过吸入施用给患有RSV感染的儿童。
3.权利要求1或2的方法或多肽，其中所述沉积剂量为每天0.020-0.035mg/kg。
4.权利要求3的方法或多肽，其中所述沉积剂量为每天0.024mg/kg。
5.权利要求1至4中任一项的方法或多肽，其中吸入剂量为每天0.20-0.40mg/kg。
6.权利要求5的方法或多肽，其中吸入剂量为每天0.20-0.35mg/kg。
7.权利要求6的方法或多肽，其中吸入剂量为每天0.24mg/kg。
8.权利要求1至7中任一项的方法或多肽，其中标称剂量为每天1.00-2.00mg/kg。
9.权利要求8的方法或多肽，其中标称剂量为每天1.00-1.75mg/kg。
10.权利要求9的方法或多肽，其中标称剂量为每天1.20mg/kg。
11.权利要求1-10中任一项的方法或多肽，其中所述多肽每天施用连续2至5天。
12.权利要求11的方法或多肽，其中所述多肽每天施用连续3天。
13.权利要求1至12中任一项的方法或多肽，其中所述RSV感染是RSV下呼吸道感染。
14.权利要求1至13中任一项的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄小于24个月。
15.权利要求14的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄为28天至小于5个月。
16.权利要求14的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄为28天至小于24个月。
17.权利要求14的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄为1个月至小于24个月。
18.权利要求14的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄为3个月至小于24个月。
19.权利要求14的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄为5个月至小于24个月。
20.权利要求1至19中任一项的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄小于36个月。
21.权利要求20的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄为1个月至小于36个月。
22.权利要求20的方法或多肽，其中所述年幼儿童的年龄为5个月至小于36个月。
23.权利要求1至22中任一项的方法或多肽，其中所述年幼儿童是婴儿。
24.权利要求1至22中任一项的方法或多肽，其中所述年幼儿童是学步儿。
25.权利要求1至24中任一项的方法或多肽，其中所述年幼儿童被诊断患有RSV下呼吸道感染，但在其他方面是健康的。
26.权利要求1至25中任一项的方法或多肽，其中所述年幼儿童因RSV下呼吸道感染住院。
27.权利要求1至26中任一项的方法或多肽，其中所述抗RSV免疫球蛋白单可变结构域包含具有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的CDR1，具有SEQ ID NO:49-50之一的氨基酸序列的CDR2，和具有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的CDR3。
28.权利要求27的方法或多肽，其中所述抗RSV免疫球蛋白单可变结构域包含具有SEQID NO:46的氨基酸序列的CDR1，具有SEQ ID NO:49的氨基酸序列的CDR2，和具有SEQ IDNO:61的氨基酸序列的CDR3。
29.权利要求27的方法或多肽，其中所述抗RSV免疫球蛋白单可变结构域选自SEQ IDNO:1-34的氨基酸序列之一。
30.权利要求29的方法或多肽，其中所述抗RSV免疫球蛋白单可变结构域选自SEQ IDNO:1-2的氨基酸序列之一。
31.权利要求29的方法或多肽，其中所述多肽选自SEQ ID NO:65-85的氨基酸序列之一。
32.权利要求29的方法或多肽，其中所述多肽是SEQ ID NO:71。
33.权利要求1至32中任一项的方法或多肽，其中所述多肽作为单一疗法施用。
34.权利要求1至32中任一项的方法或多肽，其中施用至少一种另外的治疗剂。
35.权利要求34的方法或多肽，其中所述另外的治疗剂是支气管扩张剂。
36.权利要求35的方法或多肽，其中所述支气管扩张剂属于β2拟似物类。
37.权利要求29的方法或多肽，其中所述支气管扩张剂属于长效β2拟似物类。
38.权利要求37的方法或多肽，其中所述支气管扩张剂选自福莫特罗或其溶剂化物，沙美特罗或其盐，以及它们的混合物。
39.权利要求36的方法或多肽，其中所述支气管扩张剂属于短效β2拟似物类。
40.权利要求39的方法或多肽，其中所述支气管扩张剂选自沙丁胺醇，特布他林，吡布特罗，非诺特罗，妥洛特罗，levosabutamol及其混合物。
41.权利要求40的方法或多肽，其中沙丁胺醇以200微克的剂量施用。
42.权利要求35的方法或多肽，其中所述支气管扩张剂属于抗胆碱能药类。
43.权利要求42的方法或多肽，其中所述支气管扩张剂选自噻托溴铵，氧托溴铵，异丙托溴铵及其混合物。
44.吸入装置，如雾化器，其包含0.100-0.500mL的50mg/mL多肽的组合物，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成。
44a.权利要求44的雾化器，其包含0.100mL，0.130mL，0.150mL，0.200mL，0.250mL，0.300mL，0.350mL，0.400mL，或0.500mL的50mg/mL多肽的组合物，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成。
44b.权利要求44-x中任一项的雾化器，其包含0.025-0.035mL/kg，如0.025-0.033mL/kg的50mg/mL多肽的组合物，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成。
44c.权利要求44-x中任一项的雾化器，其包含0.025mL/kg，0.026mL/kg，0.027mL/kg，0.028mL/kg，0.029mL/kg，0.030mL/kg，0.031mL/kg，0.032mL/kg，0.033mL/kg，0.034mL/kg，或0.035mL/kg的50mg/mL多肽的组合物，所述多肽以5x10-10M或更低的KD结合hRSV的F蛋白，以90ng/mL或更低的IC90中和hRSV，并且包含三个抗hRSV免疫球蛋白单可变结构域，基本上由其组成或由其组成。
45.权利要求44-x中任一项的雾化器，其中至少一个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域包含具有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的CDR1，具有SEQ ID NO:49-50之一的氨基酸序列的CDR2，和具有SEQ ID NO:61的氨基酸序列的CDR3。
46.权利要求45的雾化器，其中至少一个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域包含具有SEQID NO:46的氨基酸序列的CDR1，具有SEQ ID NO:49的氨基酸序列的CDR2，和具有SEQ IDNO:61的氨基酸序列的CDR3。
47.权利要求46的雾化器，其中所述至少一个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域选自SEQID NO:1-34的氨基酸序列之一。
48.权利要求47的雾化器，其中所述至少一个抗RSV免疫球蛋白单可变结构域选自SEQID NO:1-2的氨基酸序列之一。
49.权利要求46的雾化器，其中所述多肽选自SEQ ID NO:65-85的氨基酸序列之一。
50.权利要求49的雾化器，其中所述多肽是SEQ ID NO:71。
51.权利要求44-50中任一项的雾化器，其是振动网式雾化器。
52.权利要求44-51中任一项的雾化器，其具有固定的空气或氧气流动。
53.权利要求44-52中任一项的雾化器，其用于治疗年幼儿童的RSV感染。
54.权利要求53的雾化器，其中所述RSV感染是RSV下呼吸道感染。
55.权利要求53或54的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄小于24个月。
56.权利要求55的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄为25或28天至小于5个月。
57.权利要求55的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄为28天至小于24个月。
58.权利要求55的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄为1个月至小于24个月。
59.权利要求55的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄为3个月至小于24个月。
60.权利要求55的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄为5个月至小于24个月。
61.权利要求53-57中任一项的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄小于36个月。
62.权利要求61的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄为1个月至小于36个月。
63.权利要求61的雾化器，其中所述年幼儿童的年龄为5个月至小于36个月。
64.权利要求53-63中任一项的雾化器，其中所述年幼儿童是婴儿。
65.权利要求53-63中任一项的雾化器，其中所述年幼儿童是学步儿。
66.权利要求53-65中任一项的雾化器，其中所述年幼儿童被诊断患有RSV下呼吸道感染，但在其他方面是健康的。
67.权利要求53-66中任一项的雾化器，其中所述年幼儿童因RSV下呼吸道感染住院。
68.权利要求44-67中任一项的雾化器，其中所述多肽作为单一疗法施用。
69.权利要求44-67中任一项的雾化器，其中施用至少一种另外的治疗剂。
70.权利要求69的雾化器，其中所述另外的治疗剂是支气管扩张剂。
71.权利要求70的雾化器，其中所述支气管扩张剂属于β2拟似物类。
72.权利要求71的雾化器，其中所述支气管扩张剂属于长效β2拟似物类。
73.权利要求72的雾化器，其中所述支气管扩张剂选自福莫特罗或其溶剂化物，沙美特罗或其盐，以及它们的混合物。
74.权利要求71的雾化器，其中所述支气管扩张剂属于短效β2拟似物类。
75.权利要求74的雾化器，其中所述支气管扩张剂选自沙丁胺醇，特布他林，吡布特罗，非诺特罗，妥洛特罗，levosabutamol及其混合物。
76.权利要求75的雾化器，其中沙丁胺醇以200微克的剂量施用。
77.权利要求70的雾化器，其中所述支气管扩张剂属于抗胆碱能药类。
78.权利要求77的雾化器，其中所述支气管扩张剂选自噻托溴铵，氧托溴铵，异丙托溴铵及其混合物。
79.权利要求44-78中任一项的雾化器，其包括：
(a)具有可振动网的气溶胶发生器；
(b)用于待雾化的液体的贮存器，所述贮存器与所述可振动网流体连接；
(c)气体入口；
(d)面罩，所述面罩具有
-外壳，
-气溶胶入口，
-患者接触表面，和
-外壳中的单向呼气阀或双向吸气/呼气阀，其具有在0.5至5毫巴范围内选择的呼气阻力；和
(e)从气体入口延伸到面罩的气溶胶入口的流动通道，所述流动通道具有
-侧开口，气溶胶发生器通过所述侧开口至少部分地插入所述流动通道中，
-气体入口和面罩的气溶胶入口之间的流速为1至20L/min的恒定流动阻力。
80.权利要求79的雾化器，其中所述流动通道的尺寸和形状被配置成在所述侧开口上游紧邻的位置处以2L/min的流速实现至少4m/s的平均气体速度，和/或其中所述侧开口上游的流动通道的形状被配置成当以1至20L/min的流速引导气体通过所述流动通道时实现层流。
81.权利要求79或80中任一项的雾化器，其中所述气体入口的形状被配置成管配件，并且其中所述流动通道优选地不具有另外的用于接收气体的入口。
82.权利要求79至81中任一项的雾化器，其中所述气溶胶发生器被定向成使得雾化的气溶胶以与所述流动通道的纵轴成大约90°的角度喷射到所述流动通道中，并且其中所述吸入装置优选地包括用于启动和停止所述气溶胶发生器的运行的开关，其中所述气溶胶发生器的运行包括可振动网的连续振动。
83.如权利要求79-82中任一项的雾化器，其中所述面罩具有不大于90mL，或不大于70mL，或不大于约50mL的标称内部容积；或者其中所述标称内部容积小于患者的平均潮气量。
84.权利要求79-83中任一项的雾化器，其中所述面罩具有双向吸气和呼气阀，所述双向吸气和呼气阀在任一方向上具有不大于3毫巴的阻力，并且其中所述面罩的标称内部容积不大于约50mL。
85.权利要求79-84中任一项的雾化器，其中侧开口和面罩的气溶胶入口之间的流动通道的内部容积不大于30mL。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662330481P | 2016-05-02 | 2016-05-02 | |
| US62/330,481 | 2016-05-02 | ||
| US201662358283P | 2016-07-05 | 2016-07-05 | |
| US62/358,283 | 2016-07-05 | ||
| PCT/EP2017/060374 WO2017191108A1 (en) | 2016-05-02 | 2017-05-02 | Treatment of rsv infection |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109311968A true CN109311968A (zh) | 2019-02-05 |
Family
ID=58664702
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201780027276.0A Pending CN109311968A (zh) | 2016-05-02 | 2017-05-02 | 治疗rsv感染 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20190127447A1 (zh) |
| EP (1) | EP3452505A1 (zh) |
| JP (1) | JP2019523213A (zh) |
| CN (1) | CN109311968A (zh) |
| AU (1) | AU2017259876A1 (zh) |
| CA (1) | CA3022697A1 (zh) |
| WO (1) | WO2017191108A1 (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2700650C2 (ru) * | 2014-10-10 | 2019-09-18 | Аблинкс Н.В. | Игаляционное устройство для использования в аэрозольной терапии респираторных заболеваний |
| US11185252B2 (en) * | 2018-10-18 | 2021-11-30 | Koninklijke Philips N.V. | Determining a risk level posed by an air pollutant |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105164155A (zh) * | 2013-04-15 | 2015-12-16 | 克鲁塞尔荷兰公司 | 结合到rsv g蛋白的人类抗体 |
| WO2016055656A1 (en) * | 2014-10-10 | 2016-04-14 | Ablynx N.V. | Methods of treating rsv infections |
Family Cites Families (51)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2052027T5 (es) | 1988-11-11 | 2005-04-16 | Medical Research Council | Clonacion de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina. |
| US5938117A (en) | 1991-04-24 | 1999-08-17 | Aerogen, Inc. | Methods and apparatus for dispensing liquids as an atomized spray |
| DK0656946T4 (da) | 1992-08-21 | 2010-07-26 | Univ Bruxelles | Immunoglobuliner uden lette kæder |
| AU6796094A (en) | 1993-04-29 | 1994-11-21 | Raymond Hamers | Production of antibodies or (functionalized) fragments thereof derived from heavy chain immunoglobulins of (camelidae) |
| FR2708622B1 (fr) | 1993-08-02 | 1997-04-18 | Raymond Hamers | Vecteur recombinant contenant une séquence d'un gène de lipoprotéine de structure pour l'expression de séquences de nucléotides. |
| US6085740A (en) | 1996-02-21 | 2000-07-11 | Aerogen, Inc. | Liquid dispensing apparatus and methods |
| US5586550A (en) | 1995-08-31 | 1996-12-24 | Fluid Propulsion Technologies, Inc. | Apparatus and methods for the delivery of therapeutic liquids to the respiratory system |
| US6014970A (en) | 1998-06-11 | 2000-01-18 | Aerogen, Inc. | Methods and apparatus for storing chemical compounds in a portable inhaler |
| US6205999B1 (en) | 1995-04-05 | 2001-03-27 | Aerogen, Inc. | Methods and apparatus for storing chemical compounds in a portable inhaler |
| EP0739981A1 (en) | 1995-04-25 | 1996-10-30 | Vrije Universiteit Brussel | Variable fragments of immunoglobulins - use for therapeutic or veterinary purposes |
| ES2294799T3 (es) | 1996-06-27 | 2008-04-01 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw. | Moleculas de anticuerpos que interactuan especificamente con el sitio activo o hendidura de una molecula diana. |
| WO1999023221A2 (en) | 1997-10-27 | 1999-05-14 | Unilever Plc | Multivalent antigen-binding proteins |
| AU3596599A (en) | 1998-01-26 | 1999-08-09 | Unilever Plc | Method for producing antibody fragments |
| CA2321199A1 (en) | 1998-02-19 | 1999-08-26 | William A. Brady | Compositions and methods for regulating lymphocyte activation |
| AU3041100A (en) | 1999-01-05 | 2000-07-24 | Unilever Plc | Binding of antibody fragments to solid supports |
| AU2291700A (en) | 1999-01-19 | 2000-08-07 | Unilever Plc | Method for producing antibody fragments |
| AU776824B2 (en) | 1999-04-22 | 2004-09-23 | Unilever Plc | Inhibition of viral infection using monovalent antigen-binding proteins |
| US6479280B1 (en) | 1999-09-24 | 2002-11-12 | Vlaams Interuniversitair Institutuut Voor Biotechnologie Vzw | Recombinant phages capable of entering host cells via specific interaction with an artificial receptor |
| DK1242460T3 (da) | 1999-11-29 | 2006-12-11 | Unilever Nv | Immobilisering af proteiner ved hjælp af et polypeptidsegment |
| ATE440111T1 (de) | 1999-11-29 | 2009-09-15 | Bac Ip B V | Immobilisierte antigenbindende moleküle aus einer domäne |
| EP1134231B1 (en) | 2000-03-14 | 2009-04-15 | Unilever N.V. | Antibody heavy chain variable domains against human dietary lipases, and their uses |
| AU2001268855A1 (en) | 2000-05-26 | 2001-12-03 | National Research Council Of Canada | Single-domain antigen-binding antibody fragments derived from llama antibodies |
| ATE513854T1 (de) | 2000-12-13 | 2011-07-15 | Bac Ip B V | Proteinraster aus variablen domänen der schweren immunoglobulinkette von kamelen |
| US20060073141A1 (en) | 2001-06-28 | 2006-04-06 | Domantis Limited | Compositions and methods for treating inflammatory disorders |
| US7371849B2 (en) | 2001-09-13 | 2008-05-13 | Institute For Antibodies Co., Ltd. | Methods of constructing camel antibody libraries |
| JP2005289809A (ja) | 2001-10-24 | 2005-10-20 | Vlaams Interuniversitair Inst Voor Biotechnologie Vzw (Vib Vzw) | 突然変異重鎖抗体 |
| AU2002351896A1 (en) | 2001-12-11 | 2003-06-23 | Ablynx N.V. | Method for displaying loops from immunoglobulin domains in different contexts |
| EP1456237A2 (en) | 2001-12-21 | 2004-09-15 | Vlaams Interuniversitair Instituut voor Biotechnologie vzw. | Method for cloning of variable domain sequences |
| WO2003055527A2 (en) | 2002-01-03 | 2003-07-10 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw | Immunoconjugates useful for treatment of tumours |
| WO2004041865A2 (en) | 2002-11-08 | 2004-05-21 | Ablynx N.V. | Stabilized single domain antibodies |
| AU2003286003B2 (en) | 2002-11-08 | 2011-05-26 | Ablynx N.V. | Stabilized single domain antibodies |
| JP2006517789A (ja) | 2003-01-10 | 2006-08-03 | アブリンクス エン．ヴェー． | 治療用ポリペプチド、その相同物、その断片、および血小板媒介凝集の調節での使用 |
| US7461263B2 (en) | 2003-01-23 | 2008-12-02 | Unspam, Llc. | Method and apparatus for a non-revealing do-not-contact list system |
| CA2529819A1 (en) | 2003-06-30 | 2004-09-23 | Domantis Limited | Pegylated single domain antibodies |
| ATE485307T1 (de) | 2003-11-07 | 2010-11-15 | Ablynx Nv | Camelidae schwere ketten antikörper vhhs gegen epidermalen wachstumfaktor rezeptor (egfr) und ihre verwendung |
| CA2567655C (en) | 2004-06-02 | 2015-06-30 | Diatech Pty Ltd | Binding moieties based on shark ignar domains |
| US7563443B2 (en) | 2004-09-17 | 2009-07-21 | Domantis Limited | Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof |
| KR20070084170A (ko) | 2004-10-13 | 2007-08-24 | 아블린쓰 엔.브이. | 알쯔하이머병 등의 퇴행성 신경 질환의 치료 및 진단을위한 단일 도메인 카멜리드 항-아밀로이드 베타 항체 및이를 포함하는 폴리펩타이드 |
| AU2005311101B8 (en) | 2004-12-02 | 2011-03-03 | Domantis Limited | Anti-IL-IRI single domain antibodies and therapeutic uses |
| GB0521621D0 (en) | 2005-10-24 | 2005-11-30 | Domantis Ltd | Tumor necrosis factor receptor 1 antagonists for treating respiratory diseases |
| WO2006079372A1 (en) | 2005-01-31 | 2006-08-03 | Ablynx N.V. | Method for generating variable domain sequences of heavy chain antibodies |
| CN103254309B (zh) | 2005-05-18 | 2017-09-26 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 针对肿瘤坏死因子α的改进的纳米体TM |
| CA2960105A1 (en) | 2005-05-20 | 2006-11-23 | Ablynx Nv | Single domain vhh antibodies against von willebrand factor |
| CA2636854A1 (en) | 2006-01-24 | 2007-08-02 | Domantis Limited | Ligands that bind il-4 and/or il-13 |
| US8629244B2 (en) | 2006-08-18 | 2014-01-14 | Ablynx N.V. | Interleukin-6 receptor binding polypeptides |
| CA2678218A1 (en) | 2007-02-21 | 2008-08-28 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against vascular endothelial growth factor and polypeptides comprising the same for the treatment of conditions and diseases characterized by excessive and/or pathological angiogenesis or neovascularization |
| CA2687903C (en) | 2007-05-24 | 2016-09-13 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against rank-l and polypeptides comprising the same for the treatment of bone diseases and disorders |
| JP5647222B2 (ja) | 2009-04-10 | 2014-12-24 | アブリンクス エン．ヴェー． | Ｉｌ−６ｒ関連疾患及び障害の治療のためのｉｌ−６ｒに指向性を有する改善されたアミノ酸配列及びこれを含むポリペプチド |
| DK2438087T3 (en) | 2009-06-05 | 2017-08-28 | Ablynx Nv | TRIVALENT NANOBODY CONSTRUCTIONS AGAINST HUMAN RESPIRATORY SYNCYTIAL VIRUS (HRSV) FOR PREVENTION AND / OR TREATMENT OF AIR INFECTIONS |
| PL3501499T3 (pl) | 2010-02-11 | 2023-01-09 | Ablynx Nv | Sposoby i kompozycje do wytwarzania aerozoli |
| RU2700650C2 (ru) | 2014-10-10 | 2019-09-18 | Аблинкс Н.В. | Игаляционное устройство для использования в аэрозольной терапии респираторных заболеваний |
-
2017
- 2017-05-02 CA CA3022697A patent/CA3022697A1/en not_active Abandoned
- 2017-05-02 CN CN201780027276.0A patent/CN109311968A/zh active Pending
- 2017-05-02 EP EP17720786.7A patent/EP3452505A1/en not_active Withdrawn
- 2017-05-02 WO PCT/EP2017/060374 patent/WO2017191108A1/en unknown
- 2017-05-02 JP JP2018557306A patent/JP2019523213A/ja active Pending
- 2017-05-02 AU AU2017259876A patent/AU2017259876A1/en not_active Abandoned
- 2017-05-02 US US16/092,617 patent/US20190127447A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105164155A (zh) * | 2013-04-15 | 2015-12-16 | 克鲁塞尔荷兰公司 | 结合到rsv g蛋白的人类抗体 |
| WO2016055656A1 (en) * | 2014-10-10 | 2016-04-14 | Ablynx N.V. | Methods of treating rsv infections |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| LAURENT DETALLE,ET AL.: "Generation and Characterization of ALX-0171, a Potent Novel Therapeutic Nanobody for the Treatment of Respiratory Syncytial Virus Infection", 《ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY》 * |
| 张枫等: "呼吸道合胞病毒Ｆ基因及蛋白的相关研究进展", 《病毒学报》 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA3022697A1 (en) | 2017-11-09 |
| WO2017191108A1 (en) | 2017-11-09 |
| US20190127447A1 (en) | 2019-05-02 |
| JP2019523213A (ja) | 2019-08-22 |
| EP3452505A1 (en) | 2019-03-13 |
| AU2017259876A1 (en) | 2018-10-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10561805B2 (en) | Methods of treating RSV infections | |
| Van Heeke et al. | Nanobodies® as inhaled biotherapeutics for lung diseases | |
| US10512739B2 (en) | Inhalation device for use in aerosol therapy of respiratory diseases | |
| CN106132398A (zh) | 免疫球蛋白的雾化 | |
| CN109311968A (zh) | 治疗rsv感染 | |
| Tu et al. | Localized delivery of nanomedicine and antibodies for combating COVID-19 | |
| WO2018099968A1 (en) | Treatment of infection by respiratory syncytial virus (rsv) | |
| US20220025019A1 (en) | Methods and compositions for preventing or treating acute exacerbations with polyclonal immunoglobulin | |
| Cabrera et al. | Influence of mesh nebulizer characteristics on aerosol delivery in non-human primates | |
| US20150168386A1 (en) | Method and system for identifying leaky lung epithelial barrier | |
| CN117919210A (zh) | 一种抗rbd抗体或其抗原结合片段的可吸入组合物 | |
| NZ730120B2 (en) | Inhalation device for use in aerosol therapy of respiratory diseases | |
| Schultz | The evaluation of strategies for producing optimal inhalant therapy in preschool children (2-6 years) with chronic asthma |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20190205 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |