KR20120063076A - 질염의 예방 또는 치료에 효과가 있는 항균제 조성물과 이를 포함하는 여성용 청결제 조성물 - Google Patents

질염의 예방 또는 치료에 효과가 있는 항균제 조성물과 이를 포함하는 여성용 청결제 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연 추출 항균제 조성물과 이를 이용한 질염의 예방 또는 치료에 효과가 있는 여성용 청결제 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백 추출물로 혼합된 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 질염 발생의 원인균에 항균효과를 나타내는 천연 조성물과 이를 포함하는 약제용, 화장료용, 세정제용 또는 물티슈용 여성용 청결결제 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백 성분의 생약추출물은 자연으로부터 추출된 친환경 생약추출물로서 인체의 적용에 있어서 부작용 및 독성이 없어 부담없이 적용가능하다. 한편 본 발명은 항균 및 항진균 효과가 우수하며, 특히 질염의 원인이 되는 진균류인 칸디다알비칸스(Candida albicans)와 일반세균인 가드네렐라 바지날리스(Gardnerella Vaginalis)에 우수한 항균활성을 나타내어 질염예방 및 치료용으로 사용되기에 적합하다. 또한, 여러 제형으로 제조될 수 있는 제형 우수성이 뛰어나 환자의 취향과 편리성에 따른 제품화가 가능하다.

Description

질염의 예방 또는 치료에 효과가 있는 항균제 조성물과 이를 포함하는 여성용 청결제 조성물 {Antibacterial and antifungal composition and Ladies genital area cleanser composition comprising antibacterial and antifungal composition for preventing and treating vaginitis}
본 발명은 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물과 이를 이용한 여성용 청결제 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 질염의 원인이 되는 진균류인 칸디다알비칸스(Candida albicans)와 일반세균인 가드네렐라 바지날리스(Gardnerella Vaginalis)에 항균활성이 우수한 천연 추출 항균제 조성물과 상기 천연 추출 항균제 조성물을 포함하여 제조되는 여성용 청결제 조성물에 관한 것이다.
여성의 질은 외음부와 자궁의 연결 통로로 여성의 몸에서 가장 습기가 많고 따뜻한 곳이다. 따라서 질염의 주원인인 세균이나 곰팡이가 서식하기 적합한 환경이므로 그로 인한 질환이 발생할 가능성이 크다. 정상적인 조건에서는 질 내부에 많은 유산균이 서식하면서 질 내부를 약산성으로 만들어 병원균이나 곰팡이가 증식하는 것을 억제하지만, 항생제 장기복용이나 피임약 장기복용, 탐폰이나 루프사용 또는 임신이나 출산, 수유, 폐경 등으로 여성 호르몬의 균형 변화 등의 이유로 질 내부의 균형이 깨어질 때 질 내에서 정상적인 조건에서는 성장이 통상적으로 억제되는 기회감염성 병원체의 증식이 일어나 질염이 발병할 수 있다. 질염은 세균성 질염(bacterial vaginosis), 칸디다성 질염(Candida vaginitis), 트리코모나스 질염(Trichomonas vaginitis), 위축성 질염 (Atrophic vaginitis)등이 보고되어 있다.
가장 흔한 질환은 세균성 질염(Bacterial vaginosis)으로, 가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis)에 의해 발병한다. 이 질염은 질 내 산도의 불균형으로 질 내에 서식하는 유산균이 줄어드는 반면 1%미만으로 존재하던 혐기성 세균이 과증식 하여 발생한다. 정상 질 세균총의 변화를 일으키는 유발인자에 관해서는 알려져 있지 않으나, 잦은 성교나 질 세척으로 질의 반복되는 알칼리성화가 그 역할을 하는 것으로 추정되고 있다. 정상적으로 있어야 할 과산화수소를 생성하는 유산균이 소실되면 정상 질 세균총의 재생은 어려워지기 때문에 세균성 질염의 재발이 자주 일어난다. 또한 세균성 질염을 가진 여성은 골반내 감염 (Pelvic inflammatory disease, PID), 유산 후 PID, 자궁 절제술 후 질정염(postoperative cuff cellulitis), 비정상 자궁경부 세포진 등 심각한 후유증의 빈도가 높아지며 임산부는 조기 양막파수, 조기진통, 조산, 융모양막염(chorioamnionitis), 제왕절개술 후 자궁내막염 등의 위험이 있다.
세균성 질염과 함께 흔한 질환인 칸디다성 질염 (Candida vaginitis)은 진균인 칸디다 알비칸스 (Candida albicans)균이 습한 음부에 서식하면서 염증을 일으키는 질환으로서, 약 75%의 여성이 살아가는 동안 한 번 이상 질과 외음부의 칸디다성 질염을 겪으며 45%의 여성이 1년에 2회 이상의 재발을 겪는 흔한 질환이다. 건강한 사람의 구강, 장, 질 등에 정상적으로 보유하고 있는 칸디다(주로 Candida albicans)가 임신이나 경구용 피임약 장기 복용 등으로 여성 호르몬의 상태가 비정상적일 때, 감기나 당뇨병, 에이즈의 이유로 면역성이 극도로 쇠약할 때 감염을 유발하게 된다. 비만, 항생제의 알레르기나 관절염 등의 치료제로 쓰이는 부신 피질 호르몬의 복용 등에 의해서도 발병할 수 있다. 항생제의 투여로 인한 발병의 경우 항생제가 질 내의 유익한 유산균을 죽임으로써 발생하는데 이런 경우 재발의 가능성도 크다. 너무 꼭 끼는 거들이나 바지 등을 입어 통풍이 안 되거나 목욕 후 외음부의 물기를 잘 닦지 않아 젖은 팬티를 입은 경우, 생리 중 패드를 자주 갈지 않는 경우에도 잘 발생한다. 질에 칸디다 알비칸스가 서식하고 있는 여성의 50%만이 증상이 있는데 주증상은 냉이 많아지고 피부에 염증 반응이 생겨서 가려운 것이며, 병의 종류와 정도 또는 2차 세균 감염 등에 따라서 피부가 벗겨지거나 고름이 나오는 등 차이가 있다. 특징적 증상으로는 짙고 하얀 분비물이 나오며, 외음부는 매우 신경이 예민하여 아프거나 때로 부종과 염증이 생기기도 한다. 작열감, 성교통, 부종, 외음부 통증 등이 있고 임상 소견으로는 외음부 및 질의 홍반, 울혈, 표피박리, 소포, 농포, 등을 볼 수 있다.
이와 같은 여성 질환을 예방하기 위하여 청결제(질세정제), 외음부 세정제를 사용하는 경우가 많다. 질염을 예방하기 위해 일반적으로 사용되고 있는 국부용 세정제로는 지방산류 또는 증류된 라우릴알코올 (lauryl alcohol) 등을 설폰화 하고 완화제, 점증제, 영양제, 기포제, 유기 살균제 등을 합성한 투명 또는 로숀 (lotion) 타입의 것이 출하된 바 있다. 또한 세정력을 지닌 계면 활성제 및 의약품으로서의 포비돈-요오드를 주성분으로 하는 것도 있다. 상기한 화학적 합성에 의한 소독제인 포비돈-요오드는 칸디다성 질염, 트리코모나스 질염 및 기타 질 감염증의 예방 및 치료에 효능이 있는 것으로 알려져 있으나, 요오드 등의 과민 증상이나 점막 손상에 의한 소양감, 작열감, 피부 궤양, 접촉성 피부염 등을 일으킬 우려가 있으며 질내 무기 요오드 또는 혈중 총 요오드수치가 상승하여 갑상선 기능 저하증을 유발할 수 있는 것으로 알려져 있다. 상기한 바와 같은 의약품으로서의 소독제의 사용에 의한 부작용을 해소하기 위한 종래의 기술로서는, 건강한 여성의 경우 질내 유익 미생물에 의한 젖산 분비에 의해 질 내 산도가 pH3.2로 유지되며 이러한 낮은 산도에서는 대부분의 유해균이 증식 억제 내지 사멸한다는 점에 기초하여, 젖산을 주성분으로 하며 우유에서 추출한 락토세럼 (lactoserum)을 첨가한 pH3.5의 완충 용액 제제가 제안되어 있으나, 이것은 여성용 청결제라고 하기 보다는 질내 pH를 정상 상태로 유지시키는 질내 적정 산도 유지제 이며, 근본적인 치료와 예방을 기대하기 힘들다. 또한 질염의 일반적인 치료제로서 Polyene계 약물에는 nyststin, amphotericinB가 있다. Azole계 약물에는 ketoconazole, miconazole과 같은 imidazole계 약물과 itraconazole, fluconazole과 같은triazole계 약물이 있다.
상기와 같은 항생제가 적절한 항생제라 할지라도, 충분치 못 한 양을 투여했을 경우에는 병균은 죽지 않고 내성으로 인하여 오히려 차후 치료에 더 큰 어려움을 낳는다. 또 한 세정제로 사용되는 물리화학적 질 세정제는 장기간 사용시 세정효과가 저하되고 잡균은 제거되는 대신 진균이 증가하며, 악취 및 불쾌한 냄새 제거 효과가 저해되는 등 한계가 존재하였다. 상기와 같은 많은 방법들이 개발이 되어 있더라도 재발이 잘 일어나는 문제점이 있다.
한편, 질염 예방 및 치료제의 결점을 보완하고자, 생약재를 이용하여 제조된 생리대 도포용 조성물 (대한민국 공개특허공보 특 2001-0014909) 및 생리대 패드 (대한민국 공개특허공보 특 2002-0062474), 한천을 이용한 국부세척용 세제(대한민국 등록특허 특 1979-0001672)가 개시되어 있으며, 여성 국부세정용 조성물과 관련하여 점막부위에 세정 제거가 용이하며 안전한 여성용 청결제 조성물 (대한민국 특허 출원 제10-2004-0072503호), 죽염 및 복합 생약 추출물을 포함하는 여성용 청결제 조성물(대한민국 특허 출원 제 10-20040085458호), 석류피 추출물을 함유한 질 세정제 조성물 및 그 제조방법(대한민국 특허 출원 제10-2004-0085204호), 질염 예방 및 치료에 유용한 유효성분의 추출방법 및 이를 이용하여 추출된 추출물을 함유하는 세정제 조성물 (대한민국 공개 특허 제 10-2003-004587호),프로폴리스 함유 여성용 청결제 조성물 및 그 제조방법 (대한민국 특허 출원 제10-1999-0037078), 고삼, 애엽, 작약 및 홍삼을 포함하는 여성 국부세정용 한방 조성물 (대한민국 특허 출원 제10-2009-0023172)이 개시되어 있다. 상기와 같은 종래의 조성물 이외에도 다양한 종류의 여성 국부 세정용 조성물이 개시되어 있다. 상술한 바와 같이 질 세정 및 이상증상을 치료하기 위한 방법으로서 여러 가지 약물이 제시되고 있으나 사용의 부위가 외부 물질에 대한 가장 민감한 점막부위임을 염두한 자극성이 없는 약물의 제시는 아직 미흡한 실정이다. 따라서 자극성과 부작용이 없는 천연추출물을 이용한 조성물에 대한 지속적인 요구를 충족시키기 위한 새로운 기술의 개발이 필요한 현실이다.
본 발명은 상기 문제점을 해결하기 위한 것으로, 우리의 민간요법 또는 한방전통 의학에 기반을 두는 천연추출물을 이용하여, 질염 원인균에 대해 우수한 살균력을 보일 뿐만 아니라, 안정성이 높으며, 질염 원인균을 살균하는 기능 외에 질 내의 pH를 유지하여 질 내의 유산균을 보존시키는 기능을 하는 천연추출물로 구성된 항균 및 항진균 효과를 갖는 항균제 조성물을 제공하는 데 있다. 또한 인체 친화적인 자연추출물을 이용하여, 부작용이 따르는 기존의 화학 약품과 달리, 부작용 및 자극성이 없고 질염 환자의 병변을 경감시키고 지속적으로 발생하는 요인을 예방함으로써 증상의 예방, 치료에 우수할 뿐더러, 그 효과의 우수성을 제품화하는 과정 또는 본 발명의 항균제 조성물을 포함하는 여러가지 제형을 갖는 세정제 등의 여성용 청결제 조성물에 적용할 때, 그 제형 가공의 편리성과 적용시에 효과 저하성이 전혀 없어 다양한 형태의 제형 제조 및 이에 맞게 적용, 사용되도록 제품화하여 질염 환자가 편리하게 여러 가지 제형을 사용가능할 수 있는 조성물을 제공함에 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 부작용 및 독성이 적은 천연추출물을 포함하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 항균제 조성물을 제공한다. 더욱 상세하게는, 생약재로서 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황백, 황금 및 황련의 생약추출물의 혼합물을 포함하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 항균제 조성물을 제공한다.
또한, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기 항균제 조성물을 유효성분으로 포함하는 여성용 청결제 조성물을 제공한다.
상기 여성용 청결제 조성물은 세정제용, 약제용, 화장료용, 물티슈용으로 적용되는 것일 수 있다.
이하 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명에 있어서, 추출물의 원료 생약재들의 약리효과를 살펴보면 다음과 같다.
고삼(Sohora Root)은 콩과에 속하는 산기슭이나 양지바른 들의 풀밭, 평원, 길가, 모래땅, 햇볕이 잘 드는 황토땅에서 자라는 여러해살이풀로서, 주피를 거의 벗긴 뿌리이다. 고삼은 피부 가려움증을 진정시켜주며, <동의보감>에는 열독풍으로 피부와 살에 헌데가 생기고 적라로 눈썹이 빠지는 것을 치료한다. 심한 열을 내리고 잠만 자려는 것을 낫게 하며 눈을 밝게 하고 눈물을 멎게 한다. 간담의 기를 보하고 잠복된 열로 생긴 이질과 오줌이 황색이면서 적색인 것을 낫게 한다. 치통과 악창과 음부에 생긴 악창을 낫게 한다고 기록되어있다.
부인과 질환에 많이 사용하는 단삼(Salvia Miltiorrhiza Root)은 단삼 (Salvia miltiorrhiza Bunge (꿀풀과 Labiatae))의 뿌리이며, 근경이 짧고 거칠며 정단에는 보통 줄기가 붙었던 자국이 남아 있다. 단삼의 물 추출액(1:3)은 여러가지 피부진균에 억제 작용이 있으며 동의치료에서 강장약, 통경약, 아픔멎이약, 항염증약, 피멎이약으로 월경불순, 배아픔, 폐경, 산후 배아픔, 류머트즘에 쓴다. 주로 부인병 치료약으로 뿌리만을 가루내어 먹어도 사물탕과 같은 치료 효과가 있다고 한다.
사상자(Cnidi Fructus)는 벌사상자 (Cnidium monieri(L). Cuss) 또는 사상자 (Torilis japonica Decandolle)의 과실이다. 본초강목에는 여성의 생식기가 붓고 아픈 것, 생식기 주변이 습하고 가려운 증상을 치료한다고 기록되어있으며, 음부 소양감, 피부소양증, 여성의 대하에 효과가 있다고 알려져 있다.
지부자 (Kochiae fructus)는 댑싸리 (Kochia scoparia Schrader)의 성숙한 열매이다. 지부자는 임질과 부인들의 대하 등을 다스리고 습열로 인한 피부 질환에도 응용되는데, 소양증이나 습진 등을 다스린다고 알려져 있다.
황금(Scutellaria Root)은 속썩은 풀 (Scutellaria baicalensis Georgi)의 주피를 벗긴 뿌리이다. 해열, 이뇨, 지사, 이담 및 소염제로 사용이 되며, 항균력이 매우 뛰어나다. 동의치료에서는 염증약, 열내림약으로 충혈, 염증과 열이 있는 질병, 배아픔, 설사, 호흡기 감염과 기침, 습열성 황달, 염증성 결막염에 사용한다.
황련(Coptidis Rhizoma)은 황련(Coptis japonica Makino) 또는 기타 동속식물 (미나리아재비과 Ranunculaceae)의 뿌리를 거의 제거한 뿌리줄기이다. 한국본초도감에는 각종 염증에 쓰이며, 피부염 치료에 유용하다고 기록되어있으며, 동의치료에서는 쓴맛건위약, 진정약, 염증약으로 충혈 및 염증성 질병, 가슴 두근거림과 정신불안, 배아픔, 설사, 이질,출혈 증상에 쓴다.
황백(Phellodendron Bark)은 황벽나무 Phellodendron amurense Ruprecht 또는 기타 동속식물 (운향과 Rutaceae)의 주피를 벗긴 수피이다. 항균작용이 있으며, 습기와 열기를 없애주는 약으로, 본초강목에는 여성의 붕루와 대하를 치료하고, 음부의 피부조직이 부스럼으로 침식되는 증상을 치료한다고 기록되어있으며, 민간에서는 습진, 선병, 만성 피부사사균증, 입안 점막염, 화상, 베인 상처에도 쓴다.
본 발명에 있어서, 상기 생약추출물의 혼합물은 동일한 방법으로 추출한 고삼추출물, 단삼추출물, 사상자추출물, 지부자추출물, 황금추출물, 황련추출물 및 황백추출물을 혼합한 것일 수 있고, 또한 상기 생약재인 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백으로 구성된 혼합물을 일괄하여 추출한 것일 수 있는데, 각각의 추출물을 혼합한 경우에는 각각의 추출물의 각 성분이 제조되는 과정에서보다 순수한 추출물일 수 있으며, 일괄하여 추출하는 경우에는 여러 성분이 함께 추출되는 과정에서 미세한 효과의 차이가 있을 수 있다.
한편, 상기 생약추출물의 혼합물은 고삼추출물: 단삼추출물: 사상자추출물: 지부자추출물: 황금추출물 : 황련추출물 : 황백추출물이 1.0 ~ 4.0 : 20 ~ 40 : 1.0 ~ 4.0 : 1.0 ~ 4.0 : 40 ~ 60 : 5.0 ~ 15 : 1.0 ~ 4.0 의 중량비로 구성되어 혼합되는 것이 바람직하다. 또한, 상기 생약추출물의 혼합물은 고삼 : 단삼 : 사상자 : 지부자 : 황금 : 황련 : 황백이 1.0 ~ 4.0 : 20 ~ 40 : 1.0 ~ 4.0 : 1.0 ~ 4.0 : 40 ~ 60 : 5.0 ~ 15 : 1.0 ~ 4.0 의 중량비로 구성되게 혼합하여 추출하는 것이 바람직하다. 이때, 생약의 각 성분비는 전체적인 균형적인 비율로서 유사한 범위로 사용되는 것이 바람직하며, 이 수치의 범위 내에서 우수한 항균 및 항 진균 효과를 가질 수 있다.
본 발명의 추출용매는 정제수, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올로 구성된 군으로부터 선택되는 1종을 단독으로 또는 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다. 이때, 추출온도는 10~80℃가 바람직하며, 1시간 내지 24시간 동안 추출할 수 있다. 상기 추출온도 및 추출시간을 벗어나면 추출 효율이 떨어지거나 성분의 변화가 생길 수 있다.
본 발명의 생약재는 통상의 생약재 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있으며, 구체적으로 냉침추출법, 온침추출법 또는 열 추출법 등일 수 있으며, 통상의 추출기기 또는 초음파분쇄 추출기 등을 이용할 수 있다.
상기 제조된 추출물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과,농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일예로 회전 증발기를 이용하여 감압농축할 수 있으며, 상기 건조는 일예로 동결건조법으로 수행할 수 있다.
또한, 상기 생약재 추출물은 상기 수득되는 추출물을 농축 및 동결건조를 통하여 수분을 완전히 제거시킨 것일 수 있으며, 상기 수분을 완전히 제거시킨 생약재 추출물은 분말형태로 사용할 수 있다.
한편, 본 발명의 일예로 상기 천연 추출 항균제 조성물은 1) 생약재로서 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백을 각각 세척 및 건조하는 세척건조단계; 2) 상기 생약재 각 성분 1중량부에 대해, 25 ~ 35 %농도 알코올류 5 ~ 10 중량부로 구성되는 추출용매에 침지하여, 10~80℃에서 1 ~ 24시간 동안 환류냉각하여 추출물을 수득하는 추출단계; 3) 수득한 고삼 추출물 1.0 내지 4.0 : 단삼 추출물 20 내지 40 : 사상자 추출물 1.0 내지 4.0 : 지부자 추출물 1.0 내지 4.0 : 황금 추출물 40 내지 60 : 황련 추출물 5.0 내지 15 : 황백 추출물 1.0 내지 4.0 의 중량비(w/w)로 구성하여 혼합하는 혼합단계; 4) 상기 혼합단계 후의 추출물을 원심분리하여 불용성물질을 제거하고 상층액만 취한 후 감압 여과하고, 감압농축장치를 이용하여 10~80℃에서 농축하는 농축단계;를 포함하여 제조된 천연 추출 항진균 조성물일 수 있다.
이때, 상기 2)단계에서의 환류냉각 시간은 바람직하게는 2 ~ 12 시간이 바람직하며, 4 ~ 8 시간인 것이 더욱 바람직하고, 상기 알코올류는 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올 로 이루어진 그룹에서 선택된 1종을 단독으로 또는 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 4) 의 농축단계 후, -20℃ 부터 단계적으로 30℃ 까지 24~48시간 동안 동결건조하여 건조분말을 수득하는 분말화 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 천연 추출 항균제 조성물의 제조방법일 수 있다.
아울러, 추출에 있어서 상기의 생약재 추출과 같이 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백을 각각 동일한 방법으로 추출한 후 각각의 추출물을 혼합하여 본 발명의 천연 추출 항균제 조성물을 제조할 수 있고 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백으로 구성된 혼합물을 일시에 추출하여 본 발명의 천연 추출 항균제 조성물을 제조할 수도 있다. 이때 상기 생약재의 혼합비율은 고삼 : 단삼 : 사상자 : 지부자 : 황금 : 황련 : 황백이 1.0 ~ 4.0 : 20 ~ 40 : 1.0 ~ 4.0 : 1.0 ~ 4.0 : 40 ~ 60 : 5.0 ~ 15 : 1.0 ~ 4.0 의 중량비로 구성되게 혼합하여 추출하는 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서 항균제 조성물이란 상기 생약재 추출물의 혼합물이 항균제 조성물 전체 중량에 대하여 70~100중량%로 포함된 항균 및 항진균 효과를 갖는 조성물이다. 바람직하게는 질염의 원인이 되는 진균류인 칸디다알비칸스(Candida albicans)와 일반세균인 가드네렐라 바지날리스(Gardnerella Vaginalis)에 항균활성이 우수한 조성물을 의미할 수 있으며 세균 및 진균의 발육과 생활 기능을 저지 또는 억제할 수 있는 물질을 의미한다.
본 발명에 의한 항균제 조성물은 그 사용에 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면 질염 예방 또는 치료를 위한 여성용 청결제 조성물 등에 사용될 수 있다. 또한, 상기 여성용 청결제 조성물은 세정제용, 약제용, 화장료용, 물티슈용 등으로 사용될 수 있다.
아울러, 상기 세정제용은 스프레이형, 액상형, 젤형, 분말, 고형의 비누,폼타입등으로 제형화 된 것일 수 있고, 상기 화장료용은 임의로 제형을 선택할 수 있되 종래의 일반적 화장료 제형인 로션, 화장수, 크림, 에센스, 에어로졸, 파우더, 오일 또는 미스트 등으로 제조된 것일 수 있다.
또한, 상기 약제용은 경구투여를 위한 고형제제로서 정제, 환제,산제, 과립제, 캡슐제 등으로 제형화된 것일 수 있고, 비경구투여를 위한 형태로서 크림, 연고, 로션, 드레싱용액, 분무제, 기타 도포제 등으로 제형화된 것일 수 있다.
이때, 상기 질염은 칸디다성 질염인 것으로서, 칸디다성 질염의 원인균이 칸디다 알비칸스 (Candida albicans)인 것일 수 있으며, 또한 세균성 질염인 것으로서, 세균성 질염의 원인균인 가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis)인 것일 수 있다.
상기 본 발명에 의한 항균제 조성물은 여성용 청결제 조성물에 사용되는 경우 여성용 청결제 조성물 전체 중량에 대하여 1중량% 내지 20중량% 포함되는 것이 바람직하다. 그 함량이 1중량% 미만일 경우에는 실질적인 항균 및 항진균 효과를 기대하기 어렵다는 문제점이 있으며, 상기 20중량%를 초과하는 경우 제형에 맞는 제품의 제조에 어려움이 있다는 점에서 수치 한정의 의의가 있다.
또한, 본 발명에 있어서, 화장료용 여성 청결제 조성물은 상기한 생약추출물 외에도 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 피부 외용제에 일반적으로 사용하는 각종 성분, 예를 들면 수용성 성분, 분말성분, 유분, 계면활성제, 보습제, 점도 조절제, 방부제, 산화방지제, 향료, 색소 등을 배합하는 것이 가능하다.
그리고, 본 발명에 있어서, 화장료용 여성 청결제 조성물은 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 점증제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 및 향료로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.
한편, 본 발명은, 상기 천연추출 항균제 조성물 0.1 내지 20 중량%; 계면활성제 0.1 ~ 0.2 중량%; 알카리금속벤조에이트 0.01 ~ 0.02중량%; 및, 잔량 정제수를 포함하는 질염의 예방 또는 치료를 위한 스프레이형 세정제 조성물을 제공할 수 있다.
그리고, 본 발명은, 상기 천연추출 항균제 조성물 0.1 내지 20 중량%; 디메치콘코폴리올 5 ~ 15 중량%; 사이클로메치콘 5 ~ 15 중량%; 우레아 10 ~ 30 중량%; 글리세린 10 ~ 30 중량%; 트리에탄올아민 0.01 ~ 0.03 중량%; 방부제 0.01~ 2중량%; 및, 잔량 정제수를 포함하는 질염의 예방 또는 치료를 위한 젤형 세정제 조성물을 제공할 수 있다. 이때, 상기 젤형은 비누 등의 세정제일 수 있으며, 젤형의 제형으로서의 세정제 조성물의 일체의 형태로 적용될 수 있다.
또한, 본 발명은, 상기 천연추출 항균제 조성물 0.1 내지 20 중량%; 소듐라우릴설페이트 1 ~ 3 중량%; 우레아 0.5 ~ 1.5 중량%; L-멘톨 0.2 ~ 0.7 중량%; 폴리옥시에칠렌노닐페닐에텔 0.6 ~ 1 중량%; 에탄올 10 ~ 20 중량%; EDTA 0.02 ~ 0.08 중량%; 방부제 0.01~2중량%; 및, 잔량 정제수를 포함하는 질염 예방 또는 치료를 위한 액상형 세정제 조성물을 제공할 수 있다. 이때, 상기 액상형은 액상비누 등의 세정제일 수 있으며, 액상형의 제형으로서의 세정제 조성물의 일체의 형태로 적용될 수 있다.
아울러, 액상형 제형을 부직포 또는 펄프에 도포하여 물티슈 형태로 적용할 수 있다.
또한, 본 발명은, 상기 천연추출 항균제 조성물 0.1 내지 20 중량 %; 왁스 10 내지15 중량%; 글린세린, 지방산 에스테르 5 내지 10 중량%; 인산 알루미늄 0.1 내지 1중량%; 인산 제 2철 0.1 내지 1 중량% ; 소르비톨 10 내지 30 중량 ; 전량 정제수를 포함하는 비누 등의 세정제일 수 있다.
더불어, 본 발명은 천연 추출 항균제 조성물로서 항균 및 항진균을 위한 약제학적 조성물, 항균 및 항진균 기능을 포함하는 화장료 조성물, 항균 및 항진균 작용을 하는 피부 세정제, 항균 및 항진균 작용을 하는 소독제용으로 사용될 수 있으며, 상기 천연 추출 항균제 조성물을 포함하는 약제학적 약품, 화장품, 세정제, 소독제, 물티슈 등을 제공할 수 있다.
또한 본 발명은 상기 생약추출물을 포함하는 항균제 조성물에 기호성 식품 성분을 첨가하여 통상적으로 알려진 방법에 의하여 각종 건강기능식품을 제조할 수 있고, 또한 일반적인 식품제형으로 제형화 될 수 있으며, 첨가성분은 제형에 따라 당업자가 적의하게 선택하여 배합할 수 있다.
본 발명은, 종래의 기술과 대비하여, 종래의 먹는 질염약의 경우 간 독성이나 소화장애, 질염 원인균에 대한 내성을 초래할 수 있고, 바르는 연고의 경우에는 피부자극으로 인하여 접촉성 피부염이 발생하는 경우가 있으나, 본 발명의 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백 성분들의 생약추출물은 자연으로부터 추출된 친환경 생약추출물로서 인체의 적용에 있어서 피부의 점막에 대한 자극 등과 같은 부작용 및 독성이 없어 위험부담 없이 적용가능하다.
더욱이, 본 발명은 항균활성이 매우 우수하여 칸디다성 질염과 세균성질염의 병변을 경감시키고 지속적으로 발생하는 요인을 예방함으로써 상기 질염의 예방, 치료에 우수한 효과를 발휘하며, 그 효과의 우수성을 제품화하는 과정 또는 본 발명의 조성물을 포함하는 여러 가지의 제형을 갖는 화장품, 약품, 세정제, 물티슈 등에 적용할 때, 그 제형 가공의 편리성과 적용시의 효과 저하성이 전혀 없어 다양한 형태의 제형 제조 및 이에 맞게 적용, 사용되도록 제품화가 가능하다. 따라서, 칸디다성 질염 및 세균성 질염의 예방 또는 치료를 위해 편리하게 여러 가지 제형으로 사용할 수 있다. 즉, 본 발명은 질염의 예방 및 치료용 청결제로서 기능성 측면, 제품 사용화 측면 및 상품성 측면에서 탁월한 효과를 발휘할 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 본 발명의 조성물에 의한 칸디다 알비칸스 (Candida albicans)에 대한 항균활성을 페이퍼디스크를 이용한 평판배지 확산법으로 측정한 사진이다.
도 2는 본 발명의 조성물에 의한 가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis)에 대한 항균활성을 페이퍼디스크를 이용한 평판배지 확산법으로 측정한 사진이다.
도 3은 본 발명의 조성물에 의한 칸디다 알비칸스 (Candida albicans)에 대한 항균활성을 액체배지감수성실험법을 이용하여 측정한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 조성물에 의한 가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis)에 대한 항균활성을 액체배지감수성실험법을 이용하여 측정한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 조성물에의한 칸디다알비칸스(Candida abicans),락토바실러스 애시도필러스 (Lactobacillus acidphilus)의 생존율 측정 그래프이다.
도 6은 본 발명의 조성물에의한 가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis), 락토바실러스 애시도필러스 (Lactobacillus acidophilus)의 생존율 측정 그래프이다.
도 7은 본 발명의 조성물에 의한 세포독성 측정결과를 나타낸 도이다.
이하, 본 발명의 기술분야에 속한 통상의 지식을 가진자(이하 '당업자'라고 한다.)가 용이하게 실시 가능하도록 실시예를 포함하여 상세히 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용을 상술(詳述)한다.
본 발명은 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황금, 황련 및 황백을 혼합한 생약추출물로 구성된 항균 및 항진균 효과가 있는 천연 추출 항균제 조성물을 제공한다.
<실시예1> 천연 추출 항균제 조성물의 제조
고삼10g, 사상자10g, 지부자10g, 황백10g,황련40g 단삼160g 황금160g을 각각 세척한 후 전체 생약재 중량의 10배수의 30% 에탄올에 침지시킨 다음, 5시간 환류 냉각한 후, 여과지 (11㎛ paper fillter)로 여과한 후, 0.45㎛ 필터를 이용하여 제균처리를 수행하였으며 추출한 액을 감압 농축한 후 건조시켜 본 발명의 천연 추출 항균제 조성물 8.9 g을 얻었다.
<시험예 1 : 디스크 확산법(Disc-diffusion method)에 의한 항균활성 측정>
상기 실시예1 에서 제조한 천연 추출 항균제 조성물의 항균활성을 확인하기 위하여 디스크 확산법을 이용하였다.
1. 칸디다알비칸스에 대한 항균력 평가
전 배양된 칸디다 알비칸스 (Candida albicans)를 디스크 확산법 측정용 평판배지(Sabouraud Dextrose Agar . Difco.USA)에 100 ㎕씩 분주하여 도말한 후, 추출물을 멸균된 페이퍼 디스크에 5mg/disc의 농도로 시료를 점적한 후 배지 위에 올려놓았다. 이에 대한 대조군으로 항진균제인 이트라코나졸 (Itraconazol)을 페이퍼디스크에 100㎍/disk의 농도로 시료를 점적한 후 배지 위에 올려놓았다. 이 평판배지를 28℃에서 48시간 동안 배양한 후 생육저지환(Clean Zone)의 크기를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 하기 표1에서 보는 바와 같이 본 발명의 항균제 조성물이 대조군인 이트라코나졸(항진균제, 특허 10-0592066)에 비해 강한 생육저지효과를 나타내었다.
2. 가드네렐라 바지날리스에 대한 항균력 평가
전 배양된 가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis)를 디스크 확산법 측정용 평판배지(Reinforced clostridial medium. Difco.USA)에 100 ㎕씩 분주하여 도말한 후, 추출물을 멸균된 페이퍼 디스크에 5mg/disc의 농도로 시료를 점적한 후 배지 위에 올려놓았다. 이에 대한 대조군으로 항생제인 앰피실린(Ampicillin) 을 페이퍼디스크에 10㎍/disk의 농도로 시료를 점적한 후 배지 위에 올려놓았다. 이 평판배지를 37℃에서 48시간 동안 배양한 후 생육저지환(Clean Zone)의 크기를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다. 하기 표1에서 보는 바와 같이 본 발명의 항균제 조성물이 강한 생육저지효과를 나타내었다.
생육저지환 크기 ( mm )
균주 혼합추출물(항균제조성물) 대조군
칸디다 알비칸스 26 30
가드네렐라 바지날리스 29 31
<시험예 2 : 액체 배지감수성실험을 이용한 천연 추출 항균제 조성물의 최소저지 농도 (MIC) 측정>
상기 실시예1 에서 제조한 천연 추출 항균제 조성물의 항균활성을 확인하기 위하여 액체배지감수성실험(Broth Microdilution Susceptibility Tests)법을 이용하여 항균활성 및 미생물을 50% 억제하는데 필요한 농도인 IC50(half maximal Inhibitory Concentration) 값을 측정하였다.
1.칸디다 알비칸스에 대한 항균력 평가
칸디다 알비칸스 (Candida albicans)의 세포수를 2×105 cells/ml이 되도록 Sabouraud Dextrose 배지로 희석한 후 96-well에 serial dilution 방법에 의해 농도별 처리를 하였다. 그 후, 28℃에서 24 시간 배양하고 Microplate reader (BIO-RAD)를 사용하여 570nm 파장에서 그 흡광도를 측정하여 IC50값을 결정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
2. 가드네렐라 바지날리스에 대한 항균력 평가
가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis)의 세포수를 2×105 cells/ml이 되도록 Sabouraud Dextrose 배지로 희석한 후 96-well에 serial dilution 방법에 의해 농도별 처리를 하였다. 그 후, 37℃에서 24 시간 배양하고 Microplate reader (BIO-RAD)를 사용하여 570nm 파장에서 그 흡광도를 측정하여 IC50값을 결정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
균주 IC50 (mg/ml) value
칸디다알비칸스 (Candida albicans) 29.4
가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis) 19.1
<시험예 3 : 천연 추출 항균제 조성물의 미생물에 대한 영향 측정>
상기 실시예1에서 제조한 천연 추출 항균제 조성물이 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus)와 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 가드네렐라 바지날리스 (Gardnerella vaginalis)에 미치는 영향을 알아보기 위하여 시험을 실시하였다.
시험예 2 와 같은 방법으로 시행하였다. 본 방법은 배지내의 탁도증가여부를 통하여 미생물 증식여부를 확인 할 수 있는데 이를 통하여 본 발명의 천연 추출 항균제 조성물에 대한 미생물의 생존율을 구할 수 있었다.그 결과를 표3과 표4에 나타내었다. 이 결과로 보아, 본 발명의 천연 추출 항균제 조성물은 락토바실러스 애시도필러스에 대해 영향을 크게 미치지 않지만, 칸디다 알비칸스와 가드네렐라 바지날리스의 생장을 저해하는 것을 알 수 있다.
농도 (mg/ml) 5 10 20 50 100
락토바실러스 애시도필러스의 생존율 (%) 100 100 89.7 86.8 85.9
칸디다 알비칸스의
생존율 (%)		 43.01 12.39 1.64 0.83 0
농도 (mg/ml) 10 20 30 40 50 100
락토바실러스 애시도필러스의 생존율 (%) 100 89.7 89.8 88.6 86.8 85.9
가드네렐라 바지날리스
생존율 (%)		 77 39.6 10.3 1.1 0 0
<시험예 4 : 천연 추출 항균제 조성물에 대한 세포 독성 실험>
섬유아세포(Human Diploid Fibroblast)를 세포를 96wellplate에 5105cells/㎕의 농도로 희석하여 100㎕ 씩 접종한 후 24시간 배양하였다.배양 후 배지를 모두 제거하고,무 혈청 배지를 넣은 well에 각각 90㎕씩 넣었다. 최종 농도가 각각 100,200,300,400,500,1000㎍/㎕가 되도록 희석한 시료를 10㎕씩 각 well에 처리한 후 배양한다. 24시간 배양 후, PhosphateBufferedSaline(PBS)를 이용하여 5㎎/㎖의 농도로 녹여져 있는 MTT시약을 20㎕씩 넣어주고 4시간 배양하였다. MTT 시약과 시료가 포함된 배지를 모두 제거하고 각 well에 100㎕ acid isopropanol(0.04N HCliniso-propanol)을 첨가하여 30분간 교반하고, ELISA reader를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 배양 후 36시간, 48시간 후에도 같은 방법으로 측정하였다. 천연 추출 항균제 조성물 각각의 농도에서 섬유아세포의 cell viability를 측정한 결과를 표 3에 나타내었다. 이 결과로 보아, 본 발명의 천연 추출 항균제 조성물은 섬유아세포에 대한 세포독성이 없음을 확인할 수 있다.
농도 (μg/ml) 100 200 300 400 500 1000
Cellviability
(% of control)		 24시간 후 101.3 99.4 100.3 99 100.8 99.2
36시간 후 101.2 101.7 99.8 100.2 98.5 98.2
48시간 후 101.3 101.6 101.1 99.8 99.2 98.4
<실시예 2. 질염 예방 또는 치료를 위한 에어로졸 스프레이 제형의 여성용 청결제 조성물 제조>
본 발명의 천연 추출 항균제 조성물을 포함하여 질염의 예방 또는 치료를 위한 여성용 청결제 조성물을 에어로졸 스프레이 제형으로 제조하기 위해 아래의 성분에 의해 에어로졸 스프레이를 제조하였다.
<배합성분 함량(중량％)>
천연 추출 항진균 조성물 20％
계면활성제 0.15%
알칼리금속벤조에이트 0.015%
정제수 잔량
합 계 100
<실시예 3. 질염 예방 또는 치료를 위한 여성용 청결제 조성물 제조 - 젤형의 제형 중 크림의 제조>
본 발명의 천연 추출 항균제 조성물을 포함하여 질염의 치료 및 예방을 위한 여성용 청결제 조성물을 제조하기 위해 아래의 성분에 의해 크림을 제조하였다.
성분 함량(중량%)
천연 추출 항진균 조성물 20％
디메치콘코폴리올 10.0％
사이클로메치콘 10.0％
우레아 20.0％
글리세린 20.0％
트리에탄올아민 0.02％
방부제 1.0%
정제수 잔량
<실시예 4. 질염 예방 또는 치료를 여성용 청결제 조성물 제조 - 액상형 제형 중 물티슈의 제조>
본 발명의 천연 추출 항균제 조성물을 포함하여 질염의 치료 및 예방을 위한 여성용 청결제 조성물을 제조하기 위해 아래의 성분에 의해 액상형의 조성물을 제조하였다.
성분 함량(중량%)
천연 추출 항균제 조성물 10％
소듐라우릴설페이트 2.0％
우레아 1.0％
L-멘톨 0.5％
폴리옥시에칠렌노닐페닐에텔 0.8％
에탄올 15％
EDTA 0.05％
방부제 1 %
정제수 잔량
상기와 같은 액상형 조성물을 제조하여 물티슈용 원단(부직포)에 도포하였다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 균등범위 내로서 이용가능한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (12)

  1. 천연 생약재 추출물을 포함하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 항균제 조성물에 있어서, 상기 천연 생약재 추출물은 중량비 기준 고삼 1.0 ~ 4.0 : 단삼 20 ~ 40 : 사상자 1.0 ~ 4.0 : 지부자 1.0 ~ 4.0 : 황금 40 ~ 60 : 황련 5.0 ~ 15 : 황백 1.0 ~ 4.0로 구성하여 혼합된 천연 생약재를 추출용매를 이용하여 추출한 것으로서 항균제 조성물 전체 중량에 대하여 70~100중량%로 포함된 것을 특징으로 하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물.
  2. 천연 생약재 추출물을 포함하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 항균제 조성물에 있어서, 상기 천연 생약재 추출물은 다음 각 생약재를 동일한 방법으로 추출한 것으로서 중량비 기준 고삼 추출물 1.0 ~ 4.0 : 단삼 추출물 20 ~ 40 : 사상자 추출물 1.0 ~ 4.0 : 지부자 추출물 1.0 ~ 4.0 : 황금 추출물 40 ~ 60 : 황련 추출물 : 5.0 ~ 15 : 황백 추출물 1.0 ~ 4.0로 구성하여 혼합된 것이고 항균제 조성물 전체 중량에 대하여 70~100중량%로 포함된 것을 특징으로 하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 천연 생약재 추출물은 정제수, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매로 추출된 것임을 특징으로 하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물.
  4. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 항균 및 항균제 효과는 진균류인 칸디다알비칸스(Candida albicans)와 일반세균인 가드네렐라 바지날리스(Gardnerella Vaginalis)에 항균활성 효과가 있는 것을 특징으로 하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물.
  5. 제 1항 또는 제 2항의 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물을 유효성분으로 포함하는 여성용 청결제 조성물.
  6. 제 5항에 있어서, 상기 항균제 조성물은 여성용 청결제 조성물 전체 중량에 대하여 1~20중량%로 포함되어 있고, 상기 여성용 청결제 조성물은 칸디다성 질염 및 세균성 질염의 예방 또는 치료용으로서 세정제용, 약제용, 화장료용, 또는 물티슈용인 것을 특징으로 하는 여성용 청결제 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 세정제용은 스프레이형, 고형, 액상형, 젤형의 비누이거나 폼타입의 세정제인 것을 특징으로 하는 여성용 청결제 조성물.
  8. 제 6항에 있어서, 상기 화장료용은 로션, 화장수, 크림, 에센스, 파우더, 에어로졸, 오일 또는 미스트로 제형화된 것임을 특징으로 여성용 청결제 조성물.
  9. 1) 생약재로서 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황백, 황금, 황련을 각각 세척 및 건조하는 세척건조단계;
    2) 상기 생약재 각 성분 1중량부에 대해, 25 ~ 35 % 알코올류 5 ~ 10 중량부로 구성되는 추출용매에 침지하여 10~80℃에서 1 ~ 24시간 동안 환류냉각하여 추출물을 수득하는 추출단계;
    3) 상기 수득한 추출물을 고삼 추출물 1.0 ~ 4.0 : 단삼 추출물 20 ~ 40: 사상자 추출물 1.0 ~ 4.0 : 지부자 추출물 1.0 ~ 4.0 : 황금 추출물 40 ~ 60 : 황련 추출물 5.0~ 15 : 황백 추출물 1.0 ~ 4.0의 중량비로 혼합하는 혼합단계;
    4) 상기 혼합단계의 혼합된 추출물을 원심분리하여 불용성물질을 제거하고 상층액만 취한 후 감압 여과하고, 감압농축장치를 이용하여 10~80℃에서 농축하는 농축단계;를 포함하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물의 제조방법.
  10. 1) 생약재로서 고삼, 단삼, 사상자, 지부자, 황백, 황금, 황련을 각각 세척 및 건조하는 세척건조단계;
    2) 상기 세척건조된 생약재를 고삼 1.0 ~ 4.0 : 단삼 20 ~ 40: 사상자 1.0 ~ 4.0 : 지부자 1.0 ~ 4.0 : 황금 40 ~ 60 : 황련 5.0~ 15 : 황백 1.0 ~ 4.0의 중량비로 혼합하는 혼합단계;
    3) 상기 생약재의 혼합물 1중량부에 대해, 25 ~ 35 %농도 알코올류 5 ~ 10 중량부로 구성되는 추출용액에 침지하여, 10~80℃에서 1 ~ 24시간 동안 환류냉각하여 추출물을 수득하는 추출단계;
    4) 상기 혼합단계 후의 추출물을 원심분리하여 불용성물질을 제거하고 상층액만 취한 후 감압 여과하고, 감압농축장치를 이용하여 10~80℃에서 농축하는 농축단계;를 포함하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물의 제조방법.
  11. 제 9항 또는 제 10항에 있어서, 상기 4) 의 농축단계 후, -20℃ 부터 단계적으로 30℃ 까지 36~48 시간 동안 동결건조하여 건조분말을 수득하는 분말화단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물의 제조방법.
  12. 제 9항 또는 제 10항에 있어서, 상기 2)단계에서의 환류냉각은 4 ~ 8 시간 실시하며, 상기 알코올류는 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 메틸알콜, 프로판올, 이소프로필알콜 및 부틸 알코올 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매로 추출된 것임을 특징으로 하는 항균 및 항진균 효과를 갖는 천연 추출 항균제 조성물의 제조방법.

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