KR20100098620A

KR20100098620A - 경피증의 치료 방법

Info

Publication number: KR20100098620A
Application number: KR1020107012340A
Authority: KR
Inventors: 안토니 코일
Original assignee: 메디뮨 엘엘씨
Priority date: 2007-11-05
Filing date: 2008-11-05
Publication date: 2010-09-08
Also published as: HUE025787T2; WO2009061818A1; CN101909444B; AU2008324800A1; SI2219452T1; RU2010122644A; PL2219452T3; EP2219452A1; IL205452A; PT2219452E; AU2008324800B2; RU2530561C2; MX2010004814A; EP2219452A4; ES2557352T3; BRPI0819195A2; HRP20151403T1; DK2219452T3; EP2219452B1; CY1117251T1

Abstract

본 발명은 경화증 및 관련 증상의 치료/경감 방법에 관한 것이다.

Description

경피증의 치료 방법{METHODS OF TREATING SCLERODERMA}

본원은 미국 특허 출원 60/996,175 및 61/100,545에 대해 우선권을 주장하고, 이들 각각은 이의 전문으로 참조문헌으로 본원에 포함된다.

[발명의 분야]

본 발명은 경피증 및 관련 증상을 치료/완화하는 방법을 제공한다.

경피증 또는 전신 경화증(SSC; systemic sclerosis)은 진피 섬유아세포에 의해 세포외 기질에 과량 단백질이 침착됨을 특징으로 하는 진행성 악화 자가면역 질환이고, 진피 섬유증이라고도 불린다. 다양한 피부 질환을 앓는 환자에는 종종 독특한 마커, 예컨대 피부에서 I형 인터페론(IFN) 유도 유전자의 상향 조절 및 토포아이소머라제 I형에 특이적인 혈청 항핵 자가 항체가 존재한다. 만성 바이러스 감염에 대해 IFN 요법을 받는 환자에서 발생하는 경피증에 대한 최근 보고는 IFN이 진피 섬유증에서 역할을 담당한다는 견해를 뒷받침한다. 전신 경화증을 검토하기 위해, 문헌[Varga & Abraham, 2007, J. Clin. Invest., 117: 557-567]을 참조한다.

I형 IFN인, IFNα, IFNβ, IFNθ, IFNκ 및 IFNω는 13개의 기능성 IFNα 유전자, 1개의 IFNβ 유전자, 1개의 IFNθ 유전자, 1개의 IFNκ 유전자 및 1개의 IFNω 유전자로부터 발현되는 사이토카인이다(Theofilopoulos AN, Baccala R, Beutler B, Kono DH. Type I Interferons (α/β) in immunity and autoimmunity. Immunol Rev. 2005년 4월; 204: 9-26). 적어도 28개의 잠재적 IFNα 아형이 있고, α1, α2a, α2b, α4, α5, α6, α7, α8, α1O, α16, α17 및 α21은 이의 일부 목록이다. 몇몇 경우에, 인터페론 알파 아형 α2에 대한 언급은 α2a 및 α2b 둘 다를 포함한다.

모든 인간 I형 인터페론은 2개의 막 관통 단백질인 IFNAR1 및 IFNAR2로 이루어지는 세포 표면 수용체(IFN 알파 수용체, IFNαR)에 결합한다(Uze et al. (1990) Cell 60: 225; Novick et al. (1994) Cell 77: 391). 상기 수용체에 결합하면 Jak 키나아제, Jak1 및 Tyk2의 활성화에 의해 개시되는 세포내 신호 전달 경로가 활성화된다(Stark GR, Kerr IM, Williams BR, Silverman RH, Schreiber RD. Annu Rev Biochem 1998; 67: 227-64). 이후, 상기 키나아제는 신호 전달 및 전사 활성(STAT; signal transducer and activator of transcription) 단백질, STAT1 및 STAT2를 인산화한다. 인산화된 STAT 단백질은 p48과 함께 핵으로 전위하는 전사 인자 복합체, IFN 자극 유전자 인자 3(ISGF3)을 형성한다. 상기 복합체는 IFN 유도 가능한 유전자의 발현을 유도하는 IFN 자극 반응 요소(ISRE)를 활성화한다.

I형 IFN은 특이적 항바이러스 작용 이외에 면역 시스템의 조절에서 중요한 역할을 담당한다(Theofilopoulos AN, Baccala R, Beutler B, Kono DH. Type I Interferons (a/b) in immunity and autoimmunity. Immunol Rev. 2005 Apr; 204: 9-26; 및 Belardelli F, Gresser I. The neglected role of type I interferon in the T-cell response: implications for its clinical use. Immunol Today 1996; 17: 369-72). 단핵구, 대식 세포, DC 및 림프구를 비롯한 다양한 유형의 세포 및 다른 혈액 세포는 염증 촉진(pro-inflammatory) 사이토카인 및 다양한 병원균의 성분에 반응하여 I형 IFN을 생성한다. 또한, 상기 세포는 I형 IFN에 반응하고 면역학적으로 중요한 분자, 예컨대 MHC I형, CD38, 인터류킨(BLyS, IL-6, IL-10 및 IL-15) 및 케모카인(IL-8, MCP-1, MCP-2, MIG, MIP1a, MIP1b 및 IP1O)의 발현을 증대시킨다. 또한, I형 IFN은 수지상, T, B 및 자연 살해(NK; natural killer) 세포를 비롯한 면역 시스템의 중요한 성분에서 다수의 생물학적 기능을 유발한다. 예를 들면, I형 IFN은 DC 성숙, 기억 CD8+T 세포 증식, CD4+T 세포 아폽토시스의 억제, NK 세포 활성화 및 B 세포 분화를 촉진한다(Banchereau J, Pascual V, Palucka AK. Autoimmunity through cytokine-induced dendritic cell activiation. Immunity, Vol. 20, 539-550, 2004년 5월; 및 Taki S. Cytokine & Growth Factor Reviews 13 (2002) 379-391; 및 Mailliard RB, Son YI, Redlinger R, Coates PT, Giermasz A, Morel PA, Storkus WJ, Kalinski P. J Immunol. 2003년 9월 1일; 171 (5): 2366-73).

거의 모든 세포가 바이러스 및 박테리아 성분에 의한 자극에 반응하여 I형 IFN을 생성할 수 있지만, 형질세포양 수지상 세포(pDC) 또는 "자연 IFN 생성 세포"는 다른 세포 유형보다 1,000배 이상까지 I형 IFN을 생성한다. I형 IFN 생성은 단일 가닥 RNA(ssRNA), 박테리아 DNA에서의 메틸화 부족 CpG 또는 자가항원-항체 면역 복합체와 함께 엔도좀 톨 유사 수용체(TLR: Toll-Like Receptor), 예컨대 TLR7 및 TLR9의 자극에 의해 유도될 수 있다.

경피증의 발병에서 I형 인터페론의 역할을 잘 이해하고, 이러한 질환 및 이의 임상 징후에 대한 새로운 치료법을 확인할 필요가 있다.

본원에서의 참조문헌의 인용 또는 논의는 본 발명에 대한 선행 기술을 인정하는 것처럼 해석되어서는 안 된다.

[발명의 개요]

본 발명은 경피증 및 경피증 관련 증상의 치료를 필요로 하는 환자에게 I형 IFN 길항제의 치료학적 유효량을 투여하여 경피증 및 경피증 관련 증상을 치료하는 방법, 및 경피증 및 경피증 관련 증상을 치료하기 위한 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 경피증과 관련된 I형 IFN 유도 가능한 유전자 발현을 억제하는 방법을 제공한다.

[도면의 간단한 설명]

본 발명을 예시하기 위해, 본 발명에서 도면에 몇몇 실시양태를 도시하였다. 그러나, 본 발명은 도면에서 도시된 실시양태의 정확한 배치 및 수단으로 제한되지 않는다.

도 1은 마우스에서 전신 경화증(SSc) 모델 제작, 즉 질환 유도를 도시한 것이고, RAG2-/- 마우스에 부 조직 접합 (miHag) 미스매칭된 전체 비장 세포가 이식되고, 진피 콜라겐 침착 및 자가 항체와 같은 SSc 증상이 시간 경과에 따라 발생한다.

도 2a 및 도 2b는 질환 유도되지 않는 마우스(대조군), 항인터페론 알파 수용체(IFNαR) 항체의 존재하에 질환 유도된 마우스(SSc + αIFNαR) 또는 Ig 이소타입 조절 항체의 존재하에 질환 유도된 마우스(SSc + Ig 이소타입(도 2a) 또는 SSc + Ig 이소타입(도 2b))에서 시간 경과에 따라 측정된 경피증의 임상 징후의 그래프이다. Y축에 피부 점수(도 2a) 및 단백뇨 점수(도 2b)를 기재하였다. 도 2c는 항인터페론 알파 수용체 항체(αIFNAR; 상부 패널)의 존재하에 또는 Ig 이소타입 조절 항체(Ig 조절; 상부 패널)의 존재하에 질환 유도 이후 마우스의 사진을 나타낸 것이다.

도 3a는 질환 유도되지 않은 RAG2-/-마우스(이식 무)(대조군), 항인터페론 알파 수용체 항체의 존재하에 질환 유도된 RAG2-/-마우스(SSc + αIFNαR) 또는 Ig 이소타입 조절 항체의 존재하에 질환 유도된 RAG2-/-마우스(SSc + Ig 이소타입)로부터 얻은 SSc 피부의 조직병리학 분석을 도시한 막대 그래프이다. Y축에 염증(0 = 정상; 1 = 희소한 세포 침윤; 2 = 적당한 침윤; 3 = 광범한 진피 침윤) 및 콜라겐 침착(0 = 정상, 1 = 경증; 2 = 중등도; 3 = 중증)에 대한 가중 점수를 기재하였다. 도 3b는 질환 유도되지 않은 마우스(대조군), 항인터페론 알파 수용체 항체의 존재하에 질환 유도된 마우스(SSc + αIFNαR) 또는 Ig 이소타입 조절 항체의 존재하에 질환 유도된 마우스(SSc + Ig 이소타입)로부터 얻은 피부의 전형적인 H&E(왼쪽 패널) 및 마손 트라크롬(Masson's trichrome)(오른쪽 패널) 염색의 면역조직화학을 도시한 것이다.

도 4a 내지 도 4f는 염소 항마우스 Ig-FITC(녹색) 또는 래트 항마우스 C1q-PE 다중 클론 항체(적색) 중 어느 하나에 의해 염색되고 DAPI(청색) 중에 고정된 피부 절편의 면역조직화학을 도시한 것이다. 동형 이식 대조군 마우스(도 4a 및 도 4d), Ig 이소타입 조절의 존재하에 SSc 유도된 마우스(도 4b 및 도 4e) 및 항IFNαR 항체의 존재하에 SSc 유도된 마우스(도 4c 및 도 4f)로부터 피부 절편은 얻었다.

도 5a는 질환 유도되지 않은 마우스(대조군), 항인터페론 알파 수용체 항체의 존재하에 질환 유도된 마우스(SSc + αIFNαR) 또는 Ig 이소타입 조절 항체의 존재하에 질환 유도된 마우스(SSc + Ig 이소타입)로부터 얻은 혈청을 ELISA에 의해 측정한 혈청 항-Scl-70 및 항-SSA 자가 항체(IgG, IgA, IgM)를 도시한 막대 그래프이다. 도 5b는 질환 유도되지 않은 마우스(GVH 무), 항인터페론 알파 수용체 항체(10 mpk A53)의 존재하에 질환 유도된 마우스 또는 Ig 이소타입 조절 항체(10 mpk 1A7)의 존재하에 질환 유도된 마우스로부터 얻은 혈청에서 항-Scl-70 IgG1(상부), 항-Scl-70 IgG2(중간) 및 항-SSA IgG1(하부)의 양을 도시한 3개의 막대 그래프를 나타낸 것이다. 도 5c는 종자 중심(GC; germinal center)을 확인하기 위해 CD45R/B220(갈색) 및 땅콩 응집소(peanut agglutinin)(적색)에 대해 염색된, 동형 이식 대조군 마우스(a 및 d 패널), Ig 이소타입 조절의 존재하에 SSc 유도된 마우스(b 및 e 패널) 및 항IFNαR 항체의 존재하에 SSc 유도된 마우스(c 및 f 패널)로부터 얻은 비장 절편의 면역조직화학을 도시한 것이다.

도 6a는 이식 2주 후 미스매칭된 이식 수혜자(SSc) 또는 이식되지 않은 RAG2-/- 대조군(대조군)에서 비장 형질세포양 수지상 세포(pDC)(B220+/Gr-1lo/CD11c+/CD11b-)의 수의 유세포 분석 세포 분류(FACS; flow cytometry cell sorting)에 의한 정량 분석을 도시한 막대 그래프이다. 도 6b는 전체 miHag 미스매칭된 비장 세포(전체 비장 세포)로 또는 Gr-1 고갈(즉, pDC 고갈) miHag 미스매칭된 비장 세포(Gr-1(-) 비장 세포)로 이식된 RAG2-/- 마우스에서 피부 점수(왼쪽) 및 단백뇨(오른쪽)의 시간 경과 그래프를 도시한 것이다.

도 7은 SSc 질환 유도되지 않은 마우스(대조군), Ig 이소타입 조절 항체(Ig 조절)의 존재하에 SSc 질환 유도된 마우스 또는 항인터페론 알파 수용체 항체(αIFNαR)의 존재하에 SSc 질환 유도된 마우스의 피부에서 억제 또는 유도된 유전자의 전체 게놈 어레이(WGA) 데이터 분석의 "온도 지도(heatmap)"을 도시한 것이다. 도 3a에 기재된 바대로 결정된 임상 피부 점수를 WGA 분석된 샘플 각각에 대한 행 아래에 기재하였다.

도 8a 내지 도 8d는 GVH-SSc 피부에서 I형 IFN의 일시 발현의 분석과 관련된 일련의 실험을 요약한 것이다. 도 8a는 IFNα2, α5, α9 및 β mRNA 유도의 qPCR 분석을 요약한 것이다. 도 8b 및 도 8c는 IFNγ 및 IFNλ-2의 qPCR 분석을 각각 요약한 것이다(데이터는 2개의 연구를 나타냄, n=4/시점). 도 8d는 GVH-SSc(하부 패널) 및 비-SSc(상부 패널) 진피 상피 세포(40O배 확대)에서 IFNλ-3의 면역조직화학 염색을 도시한 것이다.

도 9a 내지 도 9c는 GVH 유도 SSc 동물 모델로부터 얻은 데이터를 요약한 것이다. 체중 ㎏당 항IFNAR1 쥐과 항체 5A3(빗금 막대) 또는 Ig 조절(칠해진 막대) 10 ㎎으로 1주 2회 치료된 마우스로부터 얻은 피부 샘플에서 Fluidigm(qPCR) 분석을 수행하였고, 비-SSc 피부(칠해지지 않은 막대)와 비교하였다. 도 9a는 2시점에서 4개의 IFN 유도 가능한 유전자(IFI44, MX1, OASL, OAS2)의 발현의 결과를 요약한 것이고, 데이터는 초기 발현은 IFNAR1에 독립적이고 만성 발현은 IFNAR1에 의존적이라는 것을 나타낸다. 도 9b는 피부에서 염증 유전자 발현(MPO, TNFα, IL-6, INOS)이 항IFNAR1 항체 치료에 의해 감소한다는 것을 증명하는 결과를 요약한 것이다. 도 9c는 조직 개형 관련 유전자 발현(KLF10, TIMP, EPGN, MMP9)이 항IFNAR1 항체 치료에 의해 감소한다는 것을 증명하는 결과를 요약한 것이다.

[발명의 상세한 설명]

경피증 치료

본 발명은 I형 IFN 길항제의 투여에 의한 경피증 또는 전신 경화증의 치료 방법 및 경피증 또는 전신 경화증의 증상의 치료 방법을 제공한다.

본 발명의 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체의 "치료학적 유효량" 또는 "치료학적 유효 용량"은 바람직하게는 질환 증상의 중증도를 감소시키거나, 질환 무증상기의 빈도 및 기간을 증가시키거나, 질환 고통으로 인한 손상 또는 신체 장애를 예방한다. 예를 들면 경피증의 경우, 치료학적 유효량 또는 유효 용량은 바람직하게는 경피증 또는 전신 경화증과 관련된 신체 증상, 예를 들면 진피 섬유증, 피부 병변, 탈모증, 염증, 진피 비후, 콜라겐 침착, 단백뇨, 자가 항체 생성 및 보체 침착이 더 악화하는 것을 예방한다. 또한, 치료학적 유효량 또는 유효 용량은 바람직하게는 경피증 또는 전신 경화증의 발병을 예방 또는 지연시키고, 이는 질환의 초기 또는 예비 징후가 존재할 때 바람직할 수 있다. 마찬가지로, 이는 경피증 또는 전신 경화증과 관련된 만성 진행을 지연시키는 것을 포함한다. 경피증 또는 전신 경화증의 진단에 이용되는 실험실 시험으로는 화학, 혈액학, 조직병리학, 혈청학 및 영상의학을 들 수 있다. 따라서, 특정 치료가 경피증 또는 전신 경화증을 치료하기 위한 치료학적 유효 용량인지를 결정하기 위해 상기의 것 중 임의의 것을 관찰하는 임의의 임상 또는 생화학 분석을 이용할 수 있다. 당업자는 피험자의 몸집, 피험자의 증상의 중증도 및 특정 조성물 또는 선택되는 투여 경로와 같은 인자에 기초하여 그 양을 결정할 수 있을 것이다.

본원에서 사용되는 용어 "치료하는"은 경피증 또는 전신 경화증 및 관련 증상의 중증도를 완화, 경감 및/또는 감소시키는 것을 의미한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 진피 섬유증, 피부 병변, 탈모증, 염증, 진피 비후, 콜라겐 침착, 단백뇨, 자가 항체 생산 및 보체 침착을 포함하는 경피증의 증상 중 하나 이상을 치료하는 방법을 제공한다.

경피증의 증상의 중증도, 진행, 치료에 대한 반응 및 다른 임상 측정은 통상적으로 변경 로드난 피부 점수(modified Rodnan skin score), 레이노드 상태 점수(Raynaud's Condition Score), 폐기능 시험의 일부로서 강제폐활량 측정, 우심 카테터 삽입 혈액 동력학, 혈청 크레아틴, 혈압 및 전혈구수 측정 및 혈청 크레아티닌 포스포키나아제 수치 측정을 이용한 환자 평가를 수반한다(예, 문헌[Furst, 2008, Rheumatology, 47: v29-v30] 및 문헌[Furst et al., 2007, J. of Rheumatology, 34: 5, 1194-1200] 참조).

변경 로드난 피부 점수는 환자에서 17곳의 피부 부위로부터 측정하여 총 51점에 대해 각 부위를 0 = 정상 피부, 1 = 두꺼운 피부, 2 = 두꺼운 피부 및 집을 수 없음 및 3 = 두꺼운 피부 및 움직일 수 없음으로 등급 매겨 환자에서 피부 두께를 추산하기 위해 입증된 촉진을 이용한 경피증의 임상 점수 매김이다(문헌[Czirjak et al., 2007, Ann Rheum Dis.; 66 (7): 966-9. Epub 2007년 1월 18일] 및 문헌[Brennan et al., 1992, Br J Rheumatol; 31 (7): 457-60] 참조).

따라서, 몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 변경 로드난 피부 점수에 의해 측정될 때 증상을 개선(즉, 총 변경 피부 점수 값 감소)시키는 방법을 제공한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 환자는 치료 전 변경 로드난 피부 점수가 1 내지 51이고, 치료 후 변경 로드난 피부 점수가 (1 내지 51)-x(여기서, x = 1 내지 51임)이고, 치료 후 변경 로드난 피부 점수가 0 미만이 아닌 방법을 제공한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 환자는 치료 전 변경 로드난 피부 점수가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50 또는 51이고 치료 후 변경 로드난 피부 점수가 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 또는 0인 방법을 제공한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 변경 로드난 피부 점수 값을 적어도 1 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 변경 로드난 피부 점수 값을 적어도 5 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 변경 로드난 피부 점수 값을 적어도 10 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 변경 로드난 피부 점수 값를 적어도 25 만큼 감소시키는 방법을 제공한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 변경 로드난 피부 점수 값을 적어도 1, 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 11, 적어도 12, 적어도 13, 적어도 14, 적어도 15, 적어도 16, 적어도 17, 적어도 18, 적어도 19, 적어도 20, 적어도 21, 적어도 22, 적어도 23, 적어도 24, 적어도 25, 적어도 26, 적어도 27, 적어도 28, 적어도 29, 적어도 30, 적어도 31, 적어도 32, 적어도 33, 적어도 34, 적어도 35, 적어도 36, 적어도 37, 적어도 38, 적어도 39, 적어도 40, 적어도 41, 적어도 42, 적어도 43, 적어도 44, 적어도 45, 적어도 46, 적어도 47, 적어도 48, 적어도 49, 적어도 50 또는 51 만큼 감소시키는 방법을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 레이노드 상태 점수(RCS)에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다. RCS는 0~10의 점수를 이용한 레이노드 현상(Rayaud's Phenomenom) 활성의 1일 자가 평가이고, 수 증가는 경피증 관련 증상의 악화를 나타낸다(예, 문헌[Merkel et al., 2002, Arthritis & Rheumatism, 46: 9, pp 2410-2420] 참조).

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 환자는 치료 전 RCS 점수가 1 내지 10이고, 치료 후 RCS 점수가 (1 내지 10)-x(여기서, x = 1 내지 10임)이고, 치료 후 RCS 점수가 0 미만이 아닌 방법을 제공한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 환자는 치료 전 RCS 점수가 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10이고 치료 후 변경 로드난 피부 점수가 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 또는 0인 방법을 제공한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 1 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 2 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 3 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 5 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 6 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 7 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 8 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 9 만큼 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 10 만큼 감소시키는 방법을 제공한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 RCS 점수 값을 적어도 1, 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9 또는 10 만큼 감소시키는 방법을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 혈청 크레아티닌의 임상 측정에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 혈청 크레아틴 포스포키나아제 수치의 측정에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 폐기능 시험의 일부로서 강제폐활량의 임상 측정에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 우심 카테터 삽입 혈액 동력학에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 혈압 및 전혈구수에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 환자 피부 샘플의 조직병리학 분석에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 이러한 개선은 조직 샘플에서 염증 세포 침윤으로 나타나는 염증, 콜라겐 침착 또는 진피의 전체 비후의 감소로 측정된다. 일 실시양태에서, I형 인터페론 길항제에 의한 치료는 염증을 2배 감소시킨다. 다른 실시양태에서, I형 인터페론 길항제에 의한 치료는 염증을 3배 감소시킨다. 추가 실시양태에서, I형 인터페론 길항제에 의한 치료는 염증을 5배 감소시킨다.

몇몇 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 환자 피부 샘플에 대해 수행되는 qPCR 분석에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 방법을 제공한다. 예를 들면, 발명의 명칭이 "Interferon Alpha-Induced Pharmacodynamic Markers"인 국제 특허 출원 공보 WO/08070137A2를 참조한다.

일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 MPO, TNFα, IL-6 및 INOS(이들로 제한되지는 않음)를 비롯한 염증 유전자 발현을 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 치료 전 환자는 MPO, TNFα, IL-6 및 INOS(이들로 제한되지는 않음)를 비롯한 염증 유전자 발현이 증가하고, 치료 후 환자는 MPO, TNFα, IL-6 및 INOS(이들로 제한되지는 않음)를 비롯한 염증 유전자 발현이 감소하는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 qPCR에 의해 측정될 때 염증 유전자 발현을 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 4배, 적어도 5배 또는 적어도 10배 감소시키는 방법을 제공한다. 다른 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 qPCR에 의해 측정될 때 염증 유전자 발현을 적어도 2%, 적어도 3%, 적어도 4%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 8%, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80% 또는 적어도 90% 감소시키는 방법을 제공한다.

추가 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 KLF10, TIMP, EPGN 및 MMP9(이들로 제한되지는 않음)를 비롯한 조직 개형 관련 유전자 발현을 감소시키는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 치료 전 환자는 KLF10, TIMP, EPGN 및 MMP9(이들로 제한되지는 않음)를 비롯한 조직 개형 관련 유전자 발현이 증가하고, 치료 후 환자는 KLF10, TIMP, EPGN 및 MMP9(이들로 제한되지는 않음)를 비롯한 조직 개형 관련 유전자 발현이 감소하는 방법을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 qPCR에 측정될 때 조직 개형 관련 유전자 발현을 적어도 2배, 적어도 3배, 적어도 4배, 적어도 5배 또는 적어도 10배 감소시키는 방법을 제공한다. 다른 실시양태에서, 본 발명은 I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법으로서, 상기 치료는 qPCR에 의해 측정될 때 조직 개형 관련 유전자 발현을 적어도 2%, 적어도 3%, 적어도 4%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 8%, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80% 또는 적어도 90% 감소시키는 방법을 제공한다.

I형 IFN 활성, 더욱 특히 IFNα 활성 또는 IFNαR 활성에 결합하고 이에 길항하는 치료제를 사용하여 환자를 치료하는 방법, I형 IFN 활성, 더욱 특히 IFNα 활성 또는 IFNαR 활성에 결합하고 이에 길항하는 치료제에 대한 후보자로서 환자를 확인하는 방법, I형 IFN, 더욱 특히 IFNα 수치 또는 IFNαR 활성 증가와 관련된 질환을 앓는 환자를 진단하는 방법, I형 IFN 활성, 더욱 특히 IFNα 활성 또는 IFNαR 활성에 결합하고 이에 길항하는 치료제를 사용하여 치료를 받는 환자의 질환 진행을 관찰하는 방법 및 I형 IFN 매개 질환, 더욱 특히 IFNα 매개 질환 또는 IFNαR 매개 질환을 치료하기 위한 후보 치료제를 확인하는 방법에서 약물 동태학(PD) 마커를 사용할 수 있다.

일 양태에서, 본 발명은 I형 IFN 활성의 길항제를 투여하는 단계를 포함하는 I형 IFN 매개 질환 또는 질병을 앓는 환자를 치료하는 방법으로서, 환자는 I형 IFN 유도 가능한 PD 마커 발현 프로파일을 포함하고, 길항제는 피험자의 I형 IFN 유도 가능한 PD 마커 발현 프로파일을 상쇄시키는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 상기 질환 또는 질병은 경피증 또는 전신 경화증이다.

본 발명은 환자에 있어서 질환 진행을 확인, 진단, 치료 및 관찰하는 방법을 포함한다. 환자로는 I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 질환, 질병 또는 병태를 앓는 임의의 동물을 들 수 있다. 환자는 실험 연구의 결과로서 질환, 질병 또는 병태를 앓을 수 있고, 예를 들면 질환, 질병 또는 병태를 위해 개발된 실험 모델일 수 있다. 대안적으로, 환자는 실험 조작의 부재하에 질환, 질병 또는 병태를 앓을 수 있다. 환자로는 인간, 마우스, 래트, 말, 돼지, 고양이, 개 및 연구에 사용되는 임의의 동물을 들 수 있다.

I형 IFN 유도 가능한 또는 IFNα 유도 가능한 PD 마커 발현 프로파일을 사용하여 및/또는 환자의 I형 IFN 유도 가능한 또는 IFNα 유도 가능한 PD 마커 발현 프로파일을 상쇄시키는 길항제를 사용하여 환자에 있어서 질환 진행을 확인, 진단, 치료 및 관찰하는 방법은 발명의 명칭이 "Interferon Alpha-Induced Pharmacodynamic Markers"인 국제 특허 출원 공보 WO/08070137A2(본원에 참조문헌으로 포함됨)에 개시되어 있다.

I형 IFN 또는 IFNα 또는 IFNαR 활성에 결합하고 이를 차단하는 길항제는 I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 프로파일을 상쇄시킬 수 있다. I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 프로파일을 상쇄시키는 것은 I형 IFN 또는 IFNα에 의해 유도되는 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 5개, 적어도 7개, 적어도 8개, 적어도 10개, 적어도 12개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 35개, 적어도 40개, 적어도 45개 또는 적어도 50개의 유전자를 감소시키는 것이다. I형 IFN 또는 IFNα에 의해 유도되는 유전자는 발명의 명칭이 "Interferon Alpha-Induced Pharmacodynamic Markers"인 국제 특허 출원 공보 WO/08070137A2에서 개시된 유전자의 임의의 군일 수 있다. I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 프로파일을 상쇄시키는 것은 임의의 I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 프로파일에서 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 5개, 적어도 7개, 적어도 8개, 적어도 10개, 적어도 12개, 적어도 15개, 적어도 20개, 적어도 25개, 적어도 30개, 적어도 35개, 적어도 40개, 적어도 45개 또는 적어도 50개의 유전자 중 임의의 유전자를 적어도 2%, 적어도 3%, 적어도 4%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 8%, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80% 또는 적어도 90% 감소시키는 것이다. 대안적으로, I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 프로파일을 상쇄시키는 것은 조절 샘플에서 I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 유전자의 발현 수치의 기껏해야 50%, 기껏해야 45%, 기껏해야 40%, 기껏해야 35%, 기껏해야 30%, 기껏해야 25%, 기껏해야 20%, 기껏해야 15%, 기껏해야 10%, 기껏해야 5%, 기껏해야 4%, 기껏해야 3%, 기껏해야 2% 또는 기껏해야 1%인 I형 IFN 또는 IFNα 유도 가능한 유전자의 발현을 감소시키는 것을 의미한다. I형 IFN 또는 IFNα 활성에 결합하고 이를 조절하는, 더욱 특히 이를 길항하는 제제는 항체와 같은 생물학적 제제이고, 이 제제는 0.3 내지 30 ㎎/㎏, 0.3 내지 10 ㎎/㎏, 0.3 내지 3 ㎎/㎏, 0.3 내지 1 ㎎/㎏, 1 내지 30 ㎎/㎏, 3 내지 30 ㎎/㎏, 5 내지 30 ㎎/㎏, 10 내지 30 ㎎/㎏, 1 내지 10 ㎎/㎏, 3 내지 10 ㎎/㎏ 또는 1 내지 5 ㎎/㎏의 용량에서 I형 IFN 또는 IFNα 프로파일을 상쇄시킬 수 있다.

I형 IFN 또는 IFNα 활성에 결합하고 이를 조절하는, 더욱 특히 이를 길항하는 제제는 추가로 또는 대안적으로 하나 이상의 I형 IFN 또는 IFNα 아형의 발현을 상쇄시킬 수 있다. IFNα 또는 I형 IFN 아형은 1개 초과, 2개 초과, 3개 초과, 4개 초과, 5개 초과, 6개 초과, 7개 초과, 8개 초과, 9개 초과 또는 10개 초과의 IFNα 또는 I형 IFN 아형을 포함할 수 있다. 이러한 아형은 IFNα1, IFNα2, IFNα4, IFNα5, IFNα6, IFNα7, IFNα8, IFNα1O, IFNα14, IFNα17, IFNα21, IFNβ 또는 IFNω를 포함할 수 있다. 이러한 아형은 IFNα1, IFNα2, IFNα8 및 IFNα14 모두를 포함할 수 있다. 대안적으로, 이러한 아형은 IFNα1, IFNα2, IFNα4, IFNα5, IFNα8, IFNα1O, IFNα21을 포함할 수 있다. IFNα 또는 I형 IFN 아형을 상쇄시키는 것은 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 5개, 적어도 7개, 적어도 8개 또는 적어도 10개의 아형 중 임의의 아형을 적어도 2%, 적어도 3%, 적어도 4%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 8%, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80% 또는 적어도 90% 감소시키는 것일 수 있다. IFNα 또는 I형 IFN 아형을 상쇄시키는 것은 조절 샘플에서 IFNα 또는 I형 IFN 아형의 발현 수치의 기껏해야 50%, 기껏해야 45%, 기껏해야 40%, 기껏해야 35%, 기껏해야 30%, 기껏해야 25%, 기껏해야 20%, 기껏해야 15%, 기껏해야 10%, 기껏해야 5%, 기껏해야 4%, 기껏해야 3%, 기껏해야 2% 또는 기껏해야 1%인 IFNα 또는 I형 IFN 아형 유전자의 발현을 감소시키는 것일 수 있다. IFNα 활성 또는 I형 IFN 활성에 결합하고 이를 조절하는, 더욱 특히 이를 길항하는 제제가 항체와 같은 생물학적 제제인 경우, 이 제제는 0.3 내지 30 ㎎/㎏, 0.3 내지 10 ㎎/㎏, 0.3 내지 3 ㎎/㎏, 0.3 내지 1 ㎎/㎏, 1 내지 30 ㎎/㎏, 3 내지 30 ㎎/㎏, 5 내지 30 ㎎/㎏, 10 내지 30 ㎎/㎏, 1 내지 10 ㎎/㎏, 3 내지 10 ㎎/㎏ 또는 1 내지 5 ㎎/㎏의 용량에서 IFNα 또는 I형 IFN 아형을 상쇄시킬 수 있다.

IFNα 활성 또는 I형 IFN 활성에 결합하고 이를 조절하는, 더욱 특히 이를 길항하는 제제는 추가로 또는 대안적으로 IFNα 수용체, IFNAR1 또는 IFNAR2 중 어느 하나 또는 둘 다 또는 TNFα 또는 IFNγ 또는 IFNγ 수용체(IFNGR1, IFNGR2 중 어느 하나 또는 IFNGR1 및 IFNGR2 둘 다)의 발현을 상쇄시킬 수 있다. IFNα 수용체, IFNAR1 또는 IFNAR2 중 어느 하나 또는 둘 다 또는 TNFα 또는 IFNγ 또는 IFNγ 수용체(IFNGR1, IFNGR2 중 어느 하나 또는 IFNGR1 및 IFNGR2 둘 다)의 발현을 상쇄시키는 것은 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 5개 또는 적어도 6개의 유전자 중 임의의 유전자를 적어도 2%, 적어도 3%, 적어도 4%, 적어도 5%, 적어도 7%, 적어도 8%, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80% 또는 적어도 90% 감소시키는 것일 수 있다. IFNα 수용체, IFNAR1 또는 IFNAR2 중 어느 하나 또는 TNFα 또는 IFNγ 또는 IFNγ 수용체(IFNGR1, IFNGR2 중 어느 하나 또는 IFNGR1 및 IFNGR2 둘 다)의 발현을 상쇄시키는 것은 조절 샘플에서 이러한 유전자의 발현 수치의 기껏해야 50%, 기껏해야 45%, 기껏해야 40%, 기껏해야 35%, 기껏해야 30%, 기껏해야 25%, 기껏해야 20%, 기껏해야 15%, 기껏해야 10%, 기껏해야 5%, 기껏해야 4%, 기껏해야 3%, 기껏해야 2% 또는 기껏해야 1% 발현을 감소시키는 것이다. I형 IFN 또는 IFNα 활성에 결합하고 이를 조절하는, 더욱 특히 이를 길항하는 제제가 항체와 같은 생물학적 제제인 경우, 이 제제는 0.3 내지 30 ㎎/㎏, 0.3 내지 10 ㎎/㎏, 0.3 내지 3 ㎎/㎏, 0.3 내지 1 ㎎/㎏, 1 내지 30 ㎎/㎏, 3 내지 30 ㎎/㎏, 5 내지 30 ㎎/㎏, 10 내지 30 ㎎/㎏, 1 내지 10 ㎎/㎏, 3 내지 10 ㎎/㎏ 또는 1 내지 5 ㎎/㎏의 용량에서 IFNα 수용체 IFNAR1 또는 IFNAR2 또는 TNFα 또는 IFNγ 또는 IFNγ 수용체 IFNGR1 또는 IFNGR2의 발현을 상쇄시킬 수 있다.

출원인은 본 발명의 양태 중 몇몇을 기술하기 위해 일련의 비제한적인 실시양태를 제공한다.

1. I형 인터페론(IFN) 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법.

2. I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증 관련 증상 중 하나 이상의 완화의 치료를 필요로 하는 환자에 있어서 경피증 관련 증상 중 하나 이상의 완화 방법.

3. 1 또는 2의 실시양태에 있어서, 상기 길항제는 항체인 방법.

4. 3의 실시양태에 있어서, 상기 항체는 항IFNαR 항체인 방법.

5. 3의 실시양태에 있어서, 상기 항체는 항IFNα 항체인 방법.

6. 1 또는 2의 실시양태에 있어서, 상기 증상은 진피 섬유증, 피부 병변, 탈모증, 염증, 진피 비후, 콜라겐 침착, 단백뇨 및 보체 침착으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.

7. 1 또는 2의 실시양태에 있어서, 대략 0.03 ㎎/㎏ 내지 대략 30 ㎎/㎏ 용량으로 항체를 투여하는 것인 방법.

8. 1 또는 2의 실시양태에 있어서, 상기 치료는 변경된 로드난 피부 점수에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 것인 방법.

9. 1 또는 2의 실시양태에 있어서, 상기 치료는 레이노드 상태 점수(RCS)에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 것인 방법.

10. 1 또는 2의 실시양태에 있어서, 상기 치료는 환자 피부 샘플에 대해 수행되는 qPCR 분석에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 것인 방법.

11. 10의 실시양태에 있어서, 상기 치료는 MPO, TNFα, IL-6 및 INOS로 이루어진 군으로부터 선택되는 염증 유전자의 발현을 감소시키는 것인 방법.

12. 10의 실시양태에 있어서, 상기 치료는 KLF10, TIMP, EPGN 및 MMP9로 이루어진 군으로부터 선택되는 조직 개형 관련 유전자의 발현을 감소시키는 것인 방법.

복용량 및 투여

표준 연구 기술에 의해 경피증/전신 경화증 및 이 질환의 증상의 치료, 예방 또는 관리에서 효과적인 본 발명의 조성물의 양을 결정할 수 있다. 당업자에게 공지된 몇몇 인자를 고려하여 당업자는 (예, 임상 실험을 통해) 바람직한 유효 용량 선택을 결정할 수 있다. 이러한 인자로는 관련 증상, 환자의 체중, 환자의 면역 상태 및 투여되는 약학 조성물의 정확성을 반영하기 위해 당업자에게 공지된 다른 인자를 들 수 있다.

또한, 투여 경로 및 나타내는 경피증 증상의 중증도에 따라 제형에 사용되는 정확한 용량이 달라지고, 의사의 판단 및 각 환자의 상황에 따라 이를 결정해야 한다. 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유도되는 용량-반응 곡선으로부터 유효 용량을 외삽법에 의해 추정할 수 있다.

항체, 융합 단백질 또는 뮤테인의 경우, 환자에게 투여되는 용량은 통상적으로 환자 체중 ㎏당 0.1~100 ㎎이다. 일 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 환자 체중 ㎏당 0.1~20 ㎎이다. 다른 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 환자 체중 ㎏당 1~10 ㎎이다. 다른 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 환자 체중 ㎏당 0.3~30 ㎎이다. 다른 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 환자 체중 ㎏당 0.3~3.0 ㎎이다. 다른 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 환자 체중 ㎏당 0.1 ㎎, 0.3 ㎎, 0.5 ㎎, 1.0 ㎎, 2.0 ㎎, 3.0 ㎎, 4.0 ㎎, 5.0 ㎎, 6.0 ㎎, 7.0 ㎎, 8.0 ㎎, 9.0 ㎎, 10.0 ㎎, 11.0 ㎎, 12.0 ㎎, 13.0 ㎎, 14.0 ㎎, 15.0 ㎎, 16.0 ㎎, 17.0 ㎎, 18.0 ㎎, 19.0 ㎎, 20.0 ㎎ 또는 25 ㎎이다. 특정 실시양태에서, 환자에게 투여되는 용량은 환자 체중 ㎏당 0.1 ㎎, 0.3 ㎎, 1.0 ㎎, 3.0 ㎎, 10 ㎎ 및 30 ㎎으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

특정 실시양태에서, (임의로 약학 조성물의 일부로서 약학적으로 허용되는 담체 중의) 항체의 용량은 약 0.0005, 0.001, 0.05, 0.075, 0.1, 0.25, 0.375, 0.5, 1, 2.5, 5, 10, 20, 37.5 또는 50 ㎎/㎡ 이상 및/또는 약 500, 475, 450, 425, 400, 375, 350, 325, 300, 275, 250, 225, 200, 175, 150, 125, 100, 75, 60, 50, 37.5, 20, 15, 10, 5, 2.5, 1, 0.5, 0.375, 0.1, 0.075 또는 0.01 ㎎/㎡ 미만이다. 몇몇 실시양태에서, 항체의 용량은 약 0.0005 내지 약 200 ㎎/㎡, 약 0.001 내지 150 ㎎/㎡, 약 0.075 내지 125 ㎎/㎡, 약 0.375 내지 100 ㎎/㎡, 약 2.5 내지 75 ㎎/㎡, 약 10 내지 75 ㎎/㎡ 및 약 20 내지 50 ㎎/㎡이다. 관련 실시양태에서, 사용되는 항IFNα 또는 IFNαR의 용량은 환자 체중 ㎏당 적어도 약 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, 14.5, 15, 15.5, 16, 16.5, 17, 17.5, 18, 18.5, 19, 19.5, 20, 20.5 ㎎이다.

특정 실시양태에서, 사용되는 항IFNα 또는 항IFNαR 항체의 용량은 환자 체중 ㎏당 적어도 약 1 내지 약 10, 약 5 내지 약 15, 약 10 내지 약 20 또는 약 15 내지 약 25 ㎎이다. 몇몇 실시양태에서, 사용되는 IFNα 또는 IFNαR 항체의 용량은 환자 체중 ㎏당 적어도 약 1 내지 약 20, 약 3 내지 약 15 또는 약 5 내지 약 10 ㎎이다. 다른 실시양태에서, 사용되는 항IFNα 또는 IFNαR 항체의 용량은 환자 체중 ㎏당 적어도 약 5, 약 6, 약 7, 약 8, 약 9 또는 약 10 ㎎이다. 몇몇 실시양태에서, (임의로 약학 조성물의 일부로서 약학적으로 허용되는 담체 중의) 항체의 단일 용량 단위는 적어도 약 0.5, 약 1, 약 2, 약 4, 약 6, 약 8, 약 10, 약 12, 약 14, 약 16, 약 18, 약 20, 약 22, 약 24, 약 26, 약 28, 약 30, 약 32, 약 34, 약 36, 약 38, 약 40, 약 42, 약 44, 약 46, 약 48, 약 50, 약 52, 약 54, 약 56, 약 58, 약 60, 약 62, 약 64, 약 66, 약 68, 약 70, 약 72, 약 74, 약 76, 약 78, 약 80, 약 82, 약 84, 약 86, 약 88, 약 90, 약 92, 약 94, 약 96, 약 98, 약 100, 약 102, 약 104, 약 106, 약 108, 약 110, 약 112, 약 114, 약 116, 약 118, 약 120, 약 122, 약 124, 약 126, 약 128, 약 130, 약 132, 약 134, 약 136, 약 138, 약 140, 약 142, 약 144, 약 146, 약 148, 약 150, 약 152, 약 154, 약 156, 약 158, 약 160, 약 162, 약 164, 약 166, 약 168, 약 170, 약 172, 약 174, 약 176, 약 178, 약 180, 약 182, 약 184, 약 186, 약 188, 약 190, 약 192, 약 194, 약 196, 약 198, 약 200, 약 204, 약 206, 약 208, 약 210, 약 212, 약 214, 약 216, 약 218, 약 220, 약 222, 약 224, 약 226, 약 228, 약 230, 약 232, 약 234, 약 236, 약 238, 약 240, 약 242, 약 244, 약 246, 약 248 또는 약 250 마이크로그램/㎡일 수 있다. 다른 실시양태에서, 용량은 단일 용량 단위당 약 1 g 이하이다.

인간 환자에 대한 본 발명의 조성물의 투여는 정맥내, 진피내, 경피, 피하, 근육내, (예, 에어로졸을 통한) 흡입, 협측(예, 설하), 국소(즉, 피부 및 점막 표면(기도 표면 포함) 둘 다), 척추강내, 관절내, 흉막강내, 뇌실질내, 동맥내, 복강내, 경구, 림프관내, 비강, 직장 또는 질내 투여(이들로 제한되지는 않음)를 비롯한 임의의 경로에 의한, 국부 카테터를 통한 관류에 의한 또는 직접 병변내 주사에 의한 투여일 수 있다. 일 실시양태에서, 본 발명의 조성물을 소정 기간(예, 0.5 내지 2시간)에 걸쳐 일시적 정맥 주사 또는 지속적 정맥 주사에 의해 투여할 수 있다. 본 발명의 조성물을 연동 방식에 의해 또는 데폿(depot) 형태로 전달할 수 있지만, 임의의 소정의 경우에 가장 적합한 경로는, 당업계에 널리 공지된 바대로, 피험자의 종, 연령, 성별 및 전신 상태, 치료되는 증상의 성질 및 중증도 및/또는 투여하고자 하는 특정 조성물의 성질(즉, 용량, 제제)과 같은 인자에 따라 달라질 것이다. 특정 실시양태에서, 투여 경로는 1주 1회 또는 2회 단회 주입 또는 일정 기간에 걸친 연속 주입을 통한 투여이다. 다른 특정 실시양태에서, 투여 경로는 임의로 1주 1회 또는 2회 피하 주입을 통한 투여이다. 일 실시양태에서, 본 발명의 조성물 및/또는 방법을 외래 환자에 기초하여 투여한다. 다른 실시양태에서, 프리필드(pre-filled) 시린지를 사용하여 본 발명의 조성물 및/또는 방법을 투여한다.

몇몇 실시양태에서, 항IFNα 또는 IFNαR 항체를 포함하는 조성물의 용량을 환자 체중 ㎏당 ㎎의 단위로 측정한다. 다른 실시양태에서, 항IFNα 또는 IFNαR 항체를 포함하는 조성물의 용량을 환자 제지방 체중(즉, 신체 지방 함량을 뺀 체중) ㎏당 ㎎의 단위로 측정한다. 또 다른 실시양태에서, 항IFNα 또는 IFNαR 항체를 포함하는 조성물의 용량을 환자 신체 표면적 ㎡당 ㎎의 단위로 측정한다. 또 다른 실시양태에서, 항IFNα 또는 IFNαR 항체를 포함하는 조성물의 용량을 환자에게 투여되는 용량당 ㎎의 단위로 측정한다. 임의의 용량 측정을 본 발명의 조성물 및 방법과 함께 이용할 수 있고, 용량 단위를 당업계에서의 표준 수단에 의해 전환시킬 수 있다.

연령, 성별, 종 및 피험자의 병증(예, 경피증의 단계), 원하는 정도의 세포 고갈, 치료되는 질환 및/또는 사용되는 특정한 항체 또는 항원 결합 단편을 비롯한 여러 인자에 기초하여 용량을 선택할 수 있다는 것을 당업자는 이해할 것이고, 이를 당업자는 결정할 수 있을 것이다. 예를 들면, 시험관내 시험 시스템 또는 동물 모델(예, 코튼 래트 또는 원숭이) 시험 시스템에서 유도된 용량 반응 곡선으로부터 본 발명의 조성물의 유효량을 외삽법에 의해 추정할 수 있다. 항체의 효과를 평가하기 위한 모델 및 방법은 당업계에 공지되어 있다(Wooldridge et al., Blood, 89 (8): 2994-2998(1997), 이의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨).

본 발명의 방법에서 이용될 수 있는 용량 투여 요법의 예로는 1일 1회, 1주 3회(간헐적), 1주 1회 또는 매 14일 간격을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 몇몇 실시양태에서, 용량 투여 요법은 소정 기간에 걸친 매달 간격 또는 매 6~8주 간격 또는 매주 간격을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 일 실시양태에서, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12주 동안 매주 간격으로 용량 투여를 수행할 수 있다.

당업자는 유지 요법과 비교하여 초기 치료에 대한 용량이 일반적으로 더 높고/높거나 투여 빈도가 더 많다는 것을 이해할 것이다. 상기 용량 모두는 예시이고, 본 발명의 조성물 및 방법과 함께 사용될 수 있지만, 항IFNα 또는 IFNαR 항체가 항염증제와 함께 사용되는 경우 상기 기재된 용량보다 더 낮은 용량이 사용될 수 있다.

몇몇 실시양태에서, 용량 및 전달 속도를 조정할 수 있고/있거나 주입 속도가 본 발명의 조성물 및 방법에 대한 환자의 면역원성 반응에 기초하여 감소할 수 있다. 본 발명의 방법의 다른 양태에 따르면, 환자는 면역원성 반응을 검출하여 이를 최소화하기 위해 또는 본 발명의 조성물 및 방법의 부작용을 최소화하기 위해 본 발명의 조성물 및 방법으로 사전 치료할 수 있다.

I형 인터페론 길항제

본원에서 사용되는 용어 "I형 IFN 길항제"는 인터페론 알파 수용체(IFNαR)를 통한 신호 전달 및/또는 이의 활성화를 차단, 억제, 훼방, 상쇄, 감소 또는 달리 이를 방해 또는 무효화하는 임의의 제제를 의미한다. I형 IFN 길항제는 임의의 I형 IFN과 IFNαR 사이의 상호작용을 방해함으로써 작용할 수 있다. 따라서, I형 IFN 길항제는 I형 IFN에 결합하고 길항하거나 또는 IFNαR에 결합하고 길항함으로써 작용할 수 있다. I형 IFN 길항제는 IFNαR의 IFNαR 1번 사슬 또는 IFNαR의 IFNαR 2번 사슬 중 어느 하나에 결합할 수 있거나 또는 2개의 사슬의 조합으로 생기는 에피토프에 결합할 수 있다. 특정 실시양태에서, I형 IFN 길항제는 미국 특허 출원 공보 2006/0029601, 2006/0020118 및 U.S 특허 6,713,609(이들의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)에 개시된 것과 같은 IFNαR의 IFNαR 1번 사슬에 결합하는 항체이다.

본 발명의 몇몇 실시양태에서, 본 발명은 1형 IFN 리간드 결합을 방해하는 길항제, 예를 들면 가용성 수용체 사슬(예, 가용성 IFNAR1 또는 IFNAR2) 또는 이의 단편 등을 제공한다. 다른 관련 실시양태는 예를 들면 경쟁적, 비경쟁적 또는 불결쟁적 억제 등에 의해 리간드 결합을 방해하는 방식으로 하나 이상의 1형 인터페론에 선택적으로 결합하거나 또는 IFNαR에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 대안적인 실시양태는 IFNαR에 의한 신호 전달을 방해하는 길항제를 제공한다. 다른 추가 실시양태는 1형 인터페론의 하류 효과를 길항하는 길항제를 제공한다.

환자에게 I형 인터페론 길항제를 투여할 수 있거나 또는 제제 또는 치료제의 투여를 위한 후보자로서 환자를 확인할 수 있다. 몇몇 실시양태에서, I형 인터페론 길항제는 I형 IFN, IFNα 또는 IFNαR 활성에 결합하고 이를 차단하는 임의의 분자이다. 길항제는 소형 분자 또는 생물학적 제제일 수 있다. 길항제가 소형 분자인 경우, 이는 합성되거나, 천연 공급원으로부터 확인되고 단리될 수 있다.

I형 인터페론 길항제 항체

본 발명의 몇몇 실시양태에서, 1형 인터페론 길항제는 1형 인터페론 수용체에 결합하여 이의 리간드(즉, 인터페론 알파, 인터페론 베타 또는 인터페론 오메가)의 결합을 차단하는 항IFNαR 항체 및/또는 이의 단편을 포함한다. 대안적으로 또는 추가로, 1형 인터페론 길항제는 1형 인터페론(즉, 인터페론 알파, 인터페론 베타 또는 인터페론 오메가)에 결합하여 이의 수용체(즉, IFNαR)에 대한 결합을 차단하는 항 I형 인터페론 항체 및/또는 이의 단편일 수 있다. 리간드 결합의 항체 매개 억제는 경쟁적, 비경쟁적 또는 불경쟁적 억제를 통해 일어날 수 있다. 대안적으로, 항체 기반 길항제는 1형 인터페론 수용체를 통한 세포간 신호 전달을 방지함으로써 작용할 수 있다.

따라서, 본 발명의 범위 내에 본 발명은 키메라, 영장류화, 베니어화(veneered), 인간화, 탈면역화 및 인간 항IFNαR 및 항 I형 인터페론 항체 및/또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 본 발명의 치료 방법에 사용하기에 적합한 항체 길항제로는 단일 클론 항체, 예를 들면 비인간, 키메라, 영장류화, 인간화, 탈면역화 및/또는 완전 인간 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 들 수 있다. 항체 길항제는 예를 들면 폴리에틸렌 글리콜에 가교결합(즉, PEG화)하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 순환 반감기를 증가시키기 위해 하나 이상의 화학 변형을 더 포함할 수 있다.

일 실시양태에서, 항체는 I형 IFN 또는 IFNα의 임의의 아형(들)에 특이적일 수 있다. 예를 들면, 항체는 IFNα1, IFNα2, IFNα4, IFNα5, IFNα6, IFNα7, IFNα8, IFNα10, IFNα14, IFNα17, IFNα21, IFNβ 또는 IFNω 중 어느 하나에 특이적일 수 있다. 대안적으로, 항체는 IFNα 아형 중 임의의 2개, 임의의 3개, 임의의 4개, 임의의 5개, 임의의 6개, 임의의 7개, 임의의 8개, 임의의 9개, 임의의 10개, 임의의 11개 또는 임의의 12개의 I형 IFN에 특이적일 수 있다. 항체가 하나 이상의 I형 IFN 아형에 특이적인 경우, 항체는 IFNα1, IFNα2, IFNα4, IFNα5, IFNα8, IFNα10 및 IFNα21에 특이적일 수 있거나; IFNα1, IFNα2, IFNα4, IFNα5, IFNα8 및 IFNα10에 특이적일 수 있거나; IFNα1, IFNα2, IFNα4, IFNα5, IFNα8 및 IFNα21에 특이적일 수 있거나; IFNα1, IFNα2, IFNα4, IFNα5, IFNα10 및 IFNα21; 이들 아형의 임의의 조합에 특이적일 수 있다. I형 IFN 또는 IFNα에 특이적인 항체로는 MEDI-545, MEDI-545 이외의 임의의 생물학적 제제 또는 항체, 미국 특허 출원 11/009,410(2004년 12월 10일 출원) 및 11/157,494(2005년 6월 20일 출원)에 기재된 항체, 미국 특허 7,087,726에 기재된 9F3(및 이의 인간화 변이체) 및 다른 항체, NK-2 및 YOK5/19(WO 84/03105), LO-22(미국 특허 4,902,618), 144 BS(미국 특허 4,885,166) 및 EBI-1, EBI-2 및 EBI-3(EP 119476)을 들 수 있다.

일 실시양태에서, 항체 길항제는 MEDI-545이다. MEDI-545는 복수의 인터페론-알파(IFN-a) 아형에 결합하는 완전 인간, 147,000 달톤 IgG1k 단일 클론 항체(Mab)이다. MEDI-545는 100% 인간 단백질 서열로부터 제조되어 완전 인간 단일 클론 항체가 된다. 완전 인간 단일 클론 항체는 더 바람직한 안전성 프로파일을 가지고 인간 신체로부터 덜 신속히 제거될 수 있어 아마도 용량 투여 빈도가 감소할 수 있으므로 단일 클론 항체, 예컨대 키메라 및 인간화 항체의 다른 형태에 대해 이점을 가질 수 있다. MEDI-545는 잠재적 치료제에 대해 가장 바람직한 특성을 갖는 것으로서 기능적 분석에 기초하여 선택되는 IgG4k 항체, 13H5로부터 유래한다. 이후, 13H5는 IgG1 항체 이소타입으로 전환되고, CHO 세포에서 생성되고, MDX-1103(현재 MEDI-545로 불림)의 초기 지칭으로 추가 규명 및 전임상 개발을 위해 선택된다. 또한, 미국 특허 출원 공보 2007/0014724, 발명의 명칭이 "Antibodies with Decreased Deamidation Profiles"인 미국 가출원 60/909,232, 발명의 명칭이 "Antibody Formulation"인 미국 가출원 60/909,117, 발명의 명칭이 "Interferon Alpha-induced Pharmacodynamic Markers"인 국제 특허 출원 공보 WO/08070137A2 및 발명의 명칭이 "Methods of Treating Systemic Lupus Erythematosus"인 국제 특허 출원 WO/08070135 A2(이들의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)를 참조한다. 특정 실시양태에서, 항체는 MEDI-545가 아니다.

본 발명의 항체로는 합성 항체, 단일 클론 항체, 다중 클론 항체, 재조합으로 생성되는 항체, 내부체(intrabody), 다중 특이적 항체(이중 특이적 항체 포함), 인간 항체, 인간화 항체, 키메라 항체, 합성 항체, 단쇄 Fv(scFv)(이중 특이적 scFv 포함), BiTE 분자, 단쇄 항체 Fab 단편, F(ab') 단편, 이황화물 결합 Fv(sdFv) 및 항유전자형(항 Id) 항체 및 상기 것들 중 임의의 것의 에피토프 결합 단편을 들 수 있으나, 이들로 제한되지는 않는다. 특히, 본 발명의 항체는 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적 활성 부분을 포함한다. 또한, 본 발명의 항체는 임의의 이소타입을 가질 수 있다. 일 실시양태에서, 본 발명의 항체는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 이소타입을 갖는다. 본 발명의 항체는 가변 및 불변 구역을 포함하는 전장 항체일 수 있거나 또는 이의 항원 결합 단편, 예컨대 단쇄 항체 또는 Fab 또는 Fab'2 단편일 수 있다.

또한, 본 발명은 세포 독소 또는 방사성 동위원소와 같은 치료제에 연결되는 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 면역 접합체를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 항체 또는 이의 항원 결합 부분 이외의 상이한 결합 특이성을 갖는 제2 작용성 부분에 연결되는 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 이중 특이적 분자를 제공한다.

또한, 본 발명은 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분 또는 면역 접합체 또는 이중 특이적 분자 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 제공한다.

IFNαR에 결합하는 항체는 당업계에 공지되어 있다. 이러한 항체의 비제한적인 예는 예를 들면 미국 특허 출원 공보 2006/0029601(이의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)에서 확인할 수 있다. I형 인터페론에 결합하는 항체는 당업계에 공지되어 있다. 이러한 항체의 비제한적인 예는 예를 들면 미국 가출원 61/006,962(2008년 2월 8일 출원), 61/034,618(2008년 3월 7일 출원) 및 61/049,970(2008년 5월 2일 출원)(이들 각각은 발명의 명칭이 "Anti-IFNAR1 Antibodies with Reduced Fc Ligand Affinity"임)에서 확인할 수 있다. 인터페론α의 복수의 아형에 결합하는 항체는 당업계에 공지되어 있다. 이러한 항체의 비제한적인 예는 예를 들면 미국 특허 7,087,726 및 미국 특허 출원 공보 2007/0014724(이들의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)에서 확인할 수 있다.

몇몇 실시양태에서, 상기 기재된 바대로, 인터페론α의 특이적 아형 또는 아형의 조합의 활성을 변경시키는 것이 바람직할 수 있다.

몇몇 실시양태에서, 항 I형 인터페론, 항인터페론α 항체 또는 항IFNαR 항체의 반감기를 변경시키는 것이 바람직할 수 있다. 일 실시양태에서, 항체의 생체내 반감기를 감소시키는 것이 바람직할 수 있다. 다른 실시양태에서, 항체의 생체내 반감기를 증가시키는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들면, 미국 특허 출원 공보 2006/0198840 A1(이의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)을 참조한다.

항체의 생성, 합성 및 생산에 대해 당업계에 다양한 널리 공지된 방법 중 임의의 방법에 의해, 특히 화학 합성에 의해 또는 재조합 발현 기술에 의해 항체 또는 이의 단편을 생성할 수 있다. 예를 들면, 문헌[Brinkman et al., 1995, J. Immunol. Methods 182: 41-50; Ames et al., 1995, J. Immunol. Methods 184: 177- 186; Kettleborough et al., 1994, Eur. J. Immunol. 24: 952-958; Persic et al., 1997, Gene 187: 9-18; Burton et al., 1994, Advances in Immunology 57: 191-280]; 국제 출원 PCT/GB91/01134; 국제 공보 WO 90/02809, WO 91/10737, WO 92/01047, WO 92/18619, WO 93/11236, WO 95/15982, WO 95/20401, W097/13844; 미국 특허 5,698,426, 5,223,409, 5,403,484, 5,580,717, 5,427,908, 5,750,753, 5,821,047, 5,571,698, 5,427,908, 5,516,637, 5,780,225, 5,658,727, 5,733,743, 5,969,108, 국제 공보 WO 92/22324; 문헌[Mullinax et al., 1992, BioTechniques 12 (6): 864-869; Sawai et al., 1995, AJRI 34: 26-34, Better et al., 1988, Science 240: 1041-1043], 미국 특허 4,444,887, 4,716,111, 국제 공보 WO 98/46645, WO 98/50433, WO 98/24893, W098/16654, WO 96/34096, WO 96/33735, WO 91/1074, 국제 공보 WO 98/24893, WO 96/34096, WO 96/33735, 미국 특허 5,413,923, 5,625,126, 5,633,425, 5,569,825, 5,661,016, 5,545,806, 5,814,318, 5,939,598, 문헌[Morrison, 1985, Science 229: 1202, Oi et al., 1986, BioTechniques 4: 214; Gillie et al., 1989, J. Immunol. Methods 125: 191-202], 미국 특허 5,807,715, 4,816,567, 4,816,397, 6,311,415, 유럽 특허 EP 239,400, 국제 공보 WO 91/09967, 미국 특허 5,225,539, 5,530,101, 5,585,089, 유럽 특허 EP 592,106, EP 519,596, 문헌[Padlan, 1991, Molecular Immunology 28 (4/5):489-498, Studnicka et al., 1994, Protein Engineering 7 (6): 805-814, Roguska et al., 1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 969-973], 미국 특허 5,565,332, 미국 특허 6,407,213, 5,766,886, WO 9317105, 문헌[Tan et al., J. Immunol. 169: 1119-25 (2002), Caldas et al., Protein Eng. 13 (5): 353-60 (2000), Morea et al., Methods 20 (3): 267-79 (2000), Baca et al., J. Biol. Chem. 272 (16): 10678-84 (1997), Roguska et al., Protein Eng. 9 (10): 895-904 (1996), Couto et al., Cancer Res. 55 (23 Supp): 5973s-5977s (1995), Couto et al., Cancer Res. 55 (8): 1717-22 (1995), Sandhu J S, Gene 150 (2): 409-10 (1994) 및 Pedersen et al., J. MoI. Biol. 235 (3): 959-73 (1994), Queen et al.], 미국 특허 5,585,089; 문헌[Riechmann et al., 1988, Nature 332: 323, Kutmejer et al., 1994, BioTechniques 17: 242], 국제 공보 WO 86/05807, 국제 공보 WO 89/01036 및 미국 특허 5,122,464 및 미국 특허 5,807,715(이들 각각은 이의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)를 참조한다.

길항제 폴리펩티드 및 소형 분자

몇몇 실시양태에서, I형 IFN 길항제는 폴리펩티드이다. 특정 실시양태에서, 길항제는 I형 IFN의 단편 또는 IFNαR의 사슬의 하나의 단편일 수 있는 짧은 폴리펩티드 또는 펩티드이다. 예를 들면, IFNAR1 사슬의 펩티드 단편, 특히 IFNAR1 사슬의 세포외 부분의 펩티드 단편을 I형 IFN 길항제로서 사용할 수 있다. 상기 IFNαR 단편 펩티드는 미국 특허 출원 공보 2004/0067888(이의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)에 개시되어 있다. 특정 실시양태에서, 펩티드 길항제는 IFNAR1 사슬의 약 9~12개의 아미노산 잔기 단편이다. IFNαR 사슬로부터 유래한 펩티드 유사체를 사용할 수 있지만, 1형-IFN 길항제로서 작용하는 펩티드의 능력을 보유하는 하나 이상의 아미노산 치환(예, 하나 이상의 보존적 치환) 및/또는 결실 및/또는 삽입을 가질 수 있다.

펩티드를 코딩하는 해당하는 핵산의 생체내 발현을 통해 본 발명의 펩티드를 투여할 수 있다. 따라서, 또 다른 양태에서, 본 발명은 1형-IFN 길항제로 사용하기에 적합한 세포에 피험자/환자에 있어서 본 발명의 펩티드 또는 폴리펩티드를 발현할 수 있는 핵산을 제공한다. 상기 핵산은 인간 세포로 본 발명의 핵산을 전달하기 위한 형태로 포장되는 벡터를 비롯한 바이러스 벡터 또는 비바이러스 벡터일 수 있다. 따라서, 본 발명의 핵산은 바이러스 벡터 요법 예를 들면 재조합 레트로바이러스, 아데노바이러스 또는 약독화 인플루엔자 바이러스에 적합한 형태의 바이러스 벡터를 포함한다. 대안적으로, 본 발명의 핵산은 예를 들면 리포솜 또는 서팩틴 함유 벡터 전달 입자로 포장되는 비바이러스 벡터일 수 있다.

종래 기술을 이용한 합성에 의해 또는 숙주 세포에서 핵산의 발현에 의해 본 발명의 펩티드 또는 폴리펩티드를 제조할 수 있다. 더 긴 서열, 예를 들면 본 발명의 원하는 펩티드 또는 폴리펩티드를 얻기 위해 절단에 적절한 프로테아제 절단 부위를 갖는 융합 폴리펩티드의 분절에 의해 이를 제조할 수 있다.

일 실시양태에서, 조절제는 종종 천연 단백질 또는 천연 단백질의 단편과 같은 단백질이다. 몇몇 실시양태에서, 상기 단백질은 인터페론의 길항제 뮤테인, 예컨대 INFaR을 길항하는 데 작용하는 인터페론 알파의 뮤테인일 수 있다. 따라서, 예를 들면 단백질을 함유하는 세포 추출물 또는 단백질 세포 추출물의 불규칙 또는 지정 소화물을 사용할 수 있다. 이러한 방식으로, 본 발명의 방법에서 선별을 위해 단백질의 라이브러리를 제조할 수 있다. 특정 실시양태는 박테리아, 균류, 바이러스 및 포유동물 단백질의 라이브러리이고, 포유동물 단백질의 라이브러리가 바람직하고, 인간 단백질이 특히 바람직하다. 특히 유용한 시험 화합물은 표적이 속하는 단백질 부류, 예를 들면 효소 또는 리간드 및 수용체에 대한 기질로 지정된다.

몇몇 실시양태에서, 조절제는 약 5개 내지 약 30개의 아미노산, 더욱 특히 약 5개 내지 약 20개의 아미노산, 추가로 특히 약 7개 내지 약 15개의 아미노산의 펩티드이다. 펩티드는 상기 기재된 바대로 천연 단백질의 소화물, 불규칙 펩티드 또는 "편재" 불규칙 펩티드일 수 있다. "불규칙" 또는 본원의 문법 동의어에 의해 핵산 또는 펩티드가 실질적으로 각각 뉴클레오티드 및 아미노산의 불규칙 서열로 이루어진다는 것을 의미한다. 상기 불규칙 펩티드(또는 하기 기재된 핵산)는 대개 화학 합성되므로, 임의의 위치에서 임의의 뉴클레오티드 또는 아미노산을 혼입시킬 수 있다. 합성 공정은 불규칙 단백질 또는 핵산을 생성하여 서열 길이에 걸쳐 가능한 조합의 전부 또는 대부분을 생성시켜 불규칙 후보자 생활성 단백질제의 라이브러리를 형성하도록 설계된다.

일 실시양태에서, 상기 라이브러리는 임의의 위치에서 서열 선호도 또는 서열 일정성이 없이 완전 불규칙하다. 바람직한 실시양태에서, 상기 라이브러리는 편재된다. 즉, 서열 내에 일부 위치는 불변 유지되거나, 제한된 수의 가능성으로부터 선택된다. 바람직한 실시양태에서, 상기 뉴클레오티드 또는 아미노산 잔기는 예를 들면 가교결합을 위한 핵산 결합 도메인의 생성, 시스테인의 생성에 대한 소수성 아미노산, 친수성 잔기, 입체 편재(소형 또는 대형) 잔기, SH-3 도메인에 대한 프롤린, 포스포릴화 부위에 대한 세린, 트레오닌, 티로신 또는 히스티딘 등의 소정 종류에서 불규칙하다.

또한, 본 발명은, 항체 기반 1형 인터페론 길항제 이외에, 1형 인터페론 길항제 및 하나 이상의 소형 분자, 예를 들면 이의 수용체(즉, IFNαR)와의 1형 인터페론의 결합을 방해하는 소형 분자를 포함하는 이의 조성물을 포함한다.

몇몇 실시양태에서, 1형 인터페론 또는 1형 인터페론 수용체에 결합하는 능력에 대해 잠재적 소형 분자 길항제의 조합 라이브러리를 선별할 수 있다. 통상, 일부 바람직한 특성 또는 억제 활성과 같은 바람직한 활성을 갖는 화학 화합물(소위 "중요 화합물")을 확인하고, 중요 화합물의 변이체를 생성하고, 상기 변이체 화합물의 특성 및 활성을 평가하여 유용한 특성을 갖는 새로운 화학 물질을 생성한다. 대개, 이러한 분석에 고속 선별(HTS; high throughput screening) 방법을 이용한다.

바람직한 일 실시양태에서, 고속 선별 방법은 다수의 잠재적 치료 화합물(후보자 화합물)을 포함하는 라이브러리를 제공하는 단계를 포함한다. 이후, 원하는 특성 활성을 나타내는 라이브러리 구성원(특정 화학 종 또는 아부류)을 확인하는 하나 이상의 분석에서 상기 "조합 화학 라이브러리"를 선별한다. 이렇게 확인된 화합물은 통상적인 "중요 화합물"로서 작용할 수 있거나, 잠재적 또는 실제 IBD 치료제로서 그 자체를 사용할 수 있다.

조합 화학 라이브러리는 시약과 같은 다수의 화학 "구성 요소(building block)"를 조합함으로써 화학 합성 또는 생물학적 합성에 의해 생성되는 다양한 화학 화합물의 집합체이다. 예를 들면, 소정 화합물 길이(즉, 폴리펩티드 화합물에서 아미노산의 수)에 대해 모든 가능한 방식으로 아미노산이라 불리는 일련의 화학 구성 요소를 조합함으로써 선형 조합 화학 라이브러리, 예컨대 폴리펩티드(예, 뮤테인) 라이브러리를 형성한다. 수백만 개의 화학 화합물을 이러한 화학 구성 요소의 조합 혼합을 통해 합성할 수 있다(Gallop et al., J. Med. Chem. 37 (9): 1233-1251 (1994)).

조합 화학 라이브러리의 생성 및 선별은 당업자에게 널리 공지되어 있다. 상기 조합 화학 라이브러리로는 펩티드 라이브러리(예, 미국 특허 5,010,175, 문헌[Furka, Pept. Prot. Res. 37: 487-493 (1991), Houghton et al., Nature, 354: 84-88 (1991)], 펩토이드(PCT 공보 WO 91/19735), 코딩된 펩티드(PCT 공보 WO 93/20242), 불규칙 바이오-올리고머(PCT 공보 WO 92/00091), 벤조디아제핀(미국 특허 5,288,514), 디버소머(diversomer), 예컨대 히단토인, 벤조디아제핀 및 디펩티드(Hobbs et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 90: 6909-6913 (1993)), 비닐 위치 폴리펩티드(Hagihara et al., J. Amer. Chem. Soc. 114: 6568 (1992)), Beta-D-글루코스 비계를 갖는 비펩티드 펩티도미메틱(nonpeptidal peptidomimetic)(Hirschmann et al., J. Amer. Chem. Soc. 114: 9217-9218 (1992)), 소형 화합물 라이브러리의 유사한 유기 합성(Chen et al., J. Amer. Chem. Soc. 116: 2661 (1994)), 올리고카르바메이트(Cho, et al., Science 261: 1303 (1993)) 및/또는 펩티딜 포스포네이트(Campbell et al., J. Org. Chem. 59: 658 (1994))를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 일반적으로, 문헌[Gordon et al., J. Med. Chem. 37: 1385 (1994)]을 참조하고, 핵산 라이브러리(예, Strategene, Corp. 참조), 펩티드 핵산 라이브러리(예, 미국 특허 5,539,083 참조), 항체 라이브러리(예, 문헌[Vaughn et al., Nature Biotechnology 14 (3): 309-314 (1996)] 및 PCT/US96/10287 참조), 탄수화물 라이브러리(예, 문헌[Liang et al., Science 274: 1520-1522 (1996)] 및 미국 특허 5,593,853 참조) 및 소형 유기 분자 라이브러리(예, 벤조디아제핀의 경우, 문헌[Baum, C&EN, 1월 18일, page 33 (1993)]; 이소프레노이드의 경우, 미국 특허 5,569,588; 티아졸리디논 및 메타티아자논의 경우, 미국 특허 5,549,974; 피롤리딘의 경우, 미국 특허 5,525,735 및 5,519,134; 모르폴리노 화합물의 경우, 미국 특허 5,506,337; 벤조디아제핀의 경우, 미국 특허 5,288,514; 및 기타 등등 참조)를 참조한다.

조합 라이브러리의 생성을 위한 장치는 상업적으로 입수가능하다(예, 357 MPS, 390 MPS, Advanced Chem Tech, Louisville Ky., Symphony, Rainin, Woburn, Mass., 433A Applied Biosystems, Foster City, Calif, 9050 Plus, Millipore, Bedford, Mass. 참조).

또한, 화학을 위해 다수의 널리 공지된 로봇 시스템이 개발되었다. 상기 시스템은 Takeda Chemical Industries, LTD.(일본 오사카 소재)에 의해 개발된 자동 합성 장치 및 화학자가 수행하는 수동 합성 조작을 모방하는 로봇 팔을 사용하는 많은 로봇 시스템(Zymate II, Zymark Corporation, Hopkinton, Mass.; Orca, Hewlett-Packard, Palo Alto, Calif)과 같은 자동 단말기를 포함한다. 상기 장치는 적절히 변형하여 본 발명에서 사용하기에 적합하다. 또한, 다양한 조합 라이브러리는 그 자체로 상업적으로 입수가능하다(예, ComGenex, Princeton, N.J., Asinex, Moscow, Ru, Tripos, Inc., St. Louis, Mo., ChemStar, Ltd, Moscow, RU, 3D Pharmaceuticals, Exton, Pa., Martek Biosciences, Columbia, Md. 등 참조).

인터페론-수용체 상호작용의 검출을 위해, IFN 매개 신호 전달을 검출하는 분석, 예컨대 배양된 인간 종양 세포주에 세포 증식의 IFN 매개 억제를 이용할 수 있다. 또한, 리포터 유전자 분석, 예를 들면 IFN 민감성 유전자 프로모터로부터 발현되는 리포터 유전자를 이용하는 리포터 유전자 분석을 이용할 수 있다(문헌[ Lallemand et al., J. Leukocyte Biol. 60: 137-146 (1996)]). 적합한 리포터 유전자로는 루시퍼라제 및 녹색 형광 단백질을 코딩하는 유전자를 들 수 있다. 이러한 분석에서, 리포터 유전자 발현은 IFN 활성에 의존하고, IFN 길항제는 IFN 자극 유전자 발현을 선택적으로 억제한다.

특정 폴리펩티드의 존재, 부재, 정량 또는 다른 특성을 평가하기 위한 고속 분석은 당업자에게 널리 공지되어 있다. 유사하게, 결합 분석 및 리포터 유전자 분석은 유사하게 널리 공지되어 있다. 따라서, 예를 들면 미국 특허 5,559,410은 단백질에 대한 고속 선별 방법을 개시하고 있고, 미국 특허 5,585,639는 핵산 결합에 대한 (즉, 어레이에서의) 고속 선별 방법을 개시하고 있으며, 미국 특허 5,576,220 및 5,541,061은 리간드/항체 결합에 대한 고속 선별 방법을 개시하고 있다.

또한, 고속 선별 시스템은 상업적으로 입수가능하다(예, Zymark Corp., Hopkinton, Mass.; Air Technical Industries, Mentor, Ohio; Beckman Instruments, Inc. Fullerton, Calif; Precision Systems, Inc., Natick, Mass. 등 참조). 이러한 시스템은 통상적으로 분석에 적절한 검출기(들)에서 샘플 및 시약 피펫팅, 액체 분산, 정시 항온처리 및 마이크로플레이트의 최종 판독을 비롯한 절차를 자동화한다. 이러한 배치 가능한 시스템은 고속 및 신속 개시 및 고도의 융통성 및 맞춤화를 제공한다. 이러한 시스템의 제조업자는 다양한 고속 시스템에 대한 상세한 프로토콜을 제공한다. 따라서, 예를 들면 Zymark Corp.는 유전자 전사, 리간드 결합 등의 조절을 검출하기 위한 선별 시스템을 기술하는 기술 공보를 제공한다.

병용 요법

몇몇 실시양태에서, I형 IFN 활성, 더욱 특히, IFNα 활성에 결합하고 이를 길항하는 제제 이외의 제2 제제를 환자에게 투여할 수 있다. 제2 제제로는 비스테로이드 항염증 약물, 예컨대 이부프로펜, 나프록센, 설린닥, 디클로페낙, 피록시캄, 케토프로펜, 디플루니살, 나부메톤, 에토돌락 및 옥사프로진, 인도메타신; 항말라리아 약물, 예컨대 히드록시클로로퀸; 코티코스테로이드 호르몬, 예컨대 프레드니솔론, 하이드로코르티손, 메틸프레드니솔론 및 덱사메타손; 메토트렉세이트; 면역억제제, 예컨대 아자티오프린 및 시클로포스파미드; 및 생물학적 제제, 예를 들면 표적 T 세포, 예컨대 알레파셉트 및 에팔리주맙 또는 표적 TNFα, 예컨대 엔브렐, 레미케이드 및 휴미라를 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다.

다른 실시양태에서, 경피증 혈관 질환의 부정적 영향과 상호작용하도록 사용되는 제2 제제를 본 발명의 길항제와 병용하여 사용할 수 있다. 예를 들면, 칼슘 채널 차단제는 피부 및 심장으로 가는 혈류를 돕는 것으로 보고되고 있고, 안지오텐신 전환 효소 억제제(ACE) 차단제는 경피증 신장 위기의 혈관 경련을 역전시키며, 보센탄(새로운 엔도텔린-1 수용체 억제제) 또는 에포프로스테놀(프로스타사이클린)은 폐에서 혈류를 증가시킬 수 있다. 또한, 혈관 경련을 역전시키는 약물(칼슘 채널 차단제, 보센탄, 프로스타시클린 또는 산화 질소)은 모두 질환 과정을 변경시키는 가능성을 갖는다. 치료되지 않은 경피증 혈관 질환의 최종 결과는 혈전 형성 또는 내막 섬유증 진행 중 어느 하나에 의한 혈관 폐색이다. 따라서, 저용량 아스피린 형태의 항혈소판 요법은 본 발명의 길항제에 병용하여 사용할 수 있다. 콜히친, 파라-아미노벤조산(PABA), 디메틸 설폭사이드 및 D-페니실라민(이들로 제한되지는 않음)을 비롯한 항섬유화제는 본 발명의 길항제와 병용하여 사용할 수 있다.

본 발명의 조성물이 하나 이상의 1형 인터페론 길항제, 예를 들면 항 I형 IFN 항체 또는 이의 단편, 항IFNαR 항체 또는 이의 단편, 단백질(펩티드 포함) 및 작은 화학 분자를 포함하는 것이 고안한다.

약학 조성물

본 발명에서 사용되는 항인터페론α 항체를 포함하는 약학 조성물의 비제한적인 예는 발명의 명칭이 "Antibody Formulation"인 미국 특허 출원 60/909,117(이의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)에서 확인할 수 있다. 항 I형 인터페론 항체를 포함하는 약학 조성물의 예는 특허 출원 공보 2006/0029601(이의 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)에서 확인할 수 있다.

일 실시양태에서, 본 발명의 제제는 비경구 투여를 위한 제제이다. 일 실시양태에서, 본 발명의 제제는 주사용 제제이다. 일 실시양태에서, 본 발명의 제제는 정맥내, 피하 또는 근육내 투여를 위한 제제이다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 제제는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체를 포함하는 피하 주입을 위한 제제이다. 특정 실시양태에서, 프리필드 시린지에 의한 피하 투여를 위해 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체를 제제화한다.

일 실시양태에서, 본 발명의 제제는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 또는 이의 단편을 약 20 ㎎/ml 내지 약 40 ㎎/ml 포함하는 정맥내 투여를 위한 제제이다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 제제는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체를 약 20 ㎎/ml 내지 약 40 ㎎/ml 포함하는 정맥내 투여를 위한 제제이다.

일 실시양태에서, 본 발명의 제제는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 또는 이의 단편을 약 70 ㎎/ml 내지 약 250 ㎎/ml 포함하는 피하 투여를 위한 제제이다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 제제는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체를 약 70 ㎎/ml 내지 약 250 ㎎/ml 포함하는 피하 투여를 위한 제제이다.

일 실시양태에서, 본 발명의 제제는 에어로졸 투여를 위한 제제이다.

또한, 본 발명은 적합한 용기 내에 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 제제를 포함하는 인간에게 비경구 투여하기에 적합한 약학 단위 제형을 제공한다. 일 실시양태에서, 본 발명의 약학 단위 제형은 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체를 포함한다. 일 실시양태에서, 본 발명의 약학 단위 제형은 정맥내, 피하 또는 근육내 전달되는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 제제를 포함한다. 다른 실시양태에서, 본 발명의 약학 단위 제형은 에어로졸 전달되는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 제제를 포함한다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 약학 단위 제형은 피하 전달되는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 제제를 포함한다. 다른 실시양태에서, 본 발명의 약학 단위 제형은 에어로졸 전달되는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 제제를 포함한다. 추가 실시양태에서, 본 발명의 약학 단위 제형은 비강 투여되는 항 I형 IFN 또는 항인터페론 알파 또는 항IFNαR 항체 제제를 포함한다. 일 실시양태에서,

본 발명의 제제는 밀봉 용기로 제공된다.

또한, 본 발명은 본 발명의 I형 인터페론 길항제 제제를 포함하는 키트를 제공한다.

약학적으로 허용되는 담체와 함께 항IFNα 또는 IFNαR 항체 조성물을 제제화할 수 있다. 용어 "약학적으로 허용되는"이란 활성 성분의 생물학적 활성의 효과를 방해하지 않는 하나 이상의 비독성 물질을 의미한다. 이러한 제제는 통상 염, 완충제, 보존제, 상용성 담체 및 임의로 다른 치료제를 함유할 수 있다. 또한, 상기 약학적으로 허용되는 제제는 통상 인간에게 투여하기에 적합한 상용성 고체 또는 액체 충전제, 희석제 또는 캡슐화 물질을 함유할 수 있다. 염을 의약에서 사용할 때, 이 염은 약학적으로 허용되어야 하지만, 약학적으로 허용되지 않은 염을 사용하여 이의 약학적으로 허용되는 염을 편리하게 제조할 수 있고 이는 본 발명의 범위로부터 배제되지 않는다. 상기 약리학적으로 및 약학적으로 허용되는 염으로는 염산, 브롬산, 황산, 질산, 인산, 말산, 아세트산, 살리실산, 시트르산, 붕산, 포름산, 말론산, 숙신산 등으로부터 제조되는 염을 들 수 있지만, 이들로 제한되지는 않는다. 또한, 약학적으로 허용되는 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염, 예컨대 나트륨염, 칼륨염 또는 칼슘염으로 제조할 수 있다. 용어 "담체"란 이용을 수월하게 하기 위해 활성 성분과 합해지는 천연 또는 합성의 유기 또는 무기 성분을 의미한다. 또한, 약학 조성물의 성분은 실질적으로 원하는 약학 효능을 손상시키지 않는 상호작용이 없는 방식으로 본 발명의 항체와 함께 및 서로 혼합될 수 있다.

본 발명의 특정 양태에 따르면, 동결건조 제제 또는 수용액 형태로 원하는 정도의 순도를 갖는 항체 또는 면역 접합체를 최적의 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제와 혼합함으로써 항IFNα 또는 IFNαR 항체 조성물을 제조할 수 있다(Remington's Pharmaceuticals Sciences, 16th edition, Osol,. A. Ed. (1999)). 허용되는 담체, 부형제 또는 안정화제는 사용되는 용량 및 농도에서 수혜자에게 비독성이고, 완충액, 예컨대 인산염, 시트르산염 및 다른 유기산; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 항산화제; 보존제(예, 옥타데실디메틸벤질 염화암모늄; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레소르시놀; 시클로헥산올; 3-펜타놀; 및 m-크레솔); 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 모노사카라이드, 디사카라이드 및 글루코스, 만노스 또는 덱스트린을 비롯한 다른 탄수화물; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 당, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 반대 이온을 형성하는 염, 예컨대 나트륨염; 금속 착물(예, Zn 단백질 착물); 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대 TWEEN, PLURONICS™ 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 들 수 있다.

또한, 항IFNα 또는 IFNαR 항체 조성물은 임의로 적합한 보존제, 예컨대 벤잘코늄 클로라이드; 클로로부탄올; 파라벤 및 니메로살을 포함할 수 있다.

편리하게 항IFNα 또는 IFNαR 항체 조성물을 단위 제형으로 제공할 수 있고, 약학 업계에 널리 공지된 방법 중 임의의 방법에 의해 제조할 수 있다. 모든 방법은 활성제를 하나 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 활성 화합물을 액체 담체, 미분된 고체 담체 또는 둘 다와 균일하게 그리고 밀접하게 회합시킨 후, 필요한 경우 생성물을 성형함으로써 항IFNα 또는 IFNαR 항체 조성물을 제조한다.

일 실시양태에서, 상기 조성물은 실질적으로 발열원을 함유하지 않는다.

비경구 투여에 적합한 조성물은 편리하게는 항IFNα 또는 IFNαR의 무균 수성 또는 비수성 제제를 포함하고, 이는 바람직하게는 수혜자의 혈액과 등장성이다. 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 공지된 방법에 따라 이 제제를 제제화한다. 또한, 무균 주사용 제제는 예를 들면 1,3-부탄디올 중의 용액으로서 비독성 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 무균 주사용 용액 또는 현탁액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 통상적으로 무균 고정유를 용매 또는 현탁 매질로서 사용한다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노글리세라이드 또는 디글리세라이드를 포함하는 임의의 블렌드 고정유를 사용할 수 있다. 또한, 지방산, 예컨대 올레산을 주사제의 제조에서 사용할 수 있다. 경구, 피하, 정맥내, 근육내 등 투여에 적합한 담체 제제는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA]에서 확인할 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 다양한 투여 경로에 적합한 담체 제제는 RITUXAN™에 대해 기재된 것과 동일하거나 유사할 수 있다. 문헌[Physicians' Desk Reference (Medical Economics Company, Inc., Montvale, NJ, 2005), pp. 958 960 및 1354 1357]을 참조하고, 이의 전문은 참조문헌으로 본원에 포함된다. 본 발명의 몇몇 실시양태에서, 항IFNα 또는 IFNαR 항체 조성물을 염화나트륨, 시트르산 나트륨 2수화물, 폴리소르베이트 80 및 무균수와 함께 정맥내 투여를 위해 제제화하고, 상기 조성물의 pH를 대략 6.5로 조정한다. 당업자는 정맥내 주사는 신속히 분포되는 항체에서 순환의 완전함으로 인해 유용한 투여 방법을 제공한다는 것을 알 것이다. 그러나, 정맥내 투여는 맥관 구조의 내피 세포 및 내피하 기질을 포함하는 혈관 장벽에 의해 제한된다. 몇몇 실시양태에서, 본 발명의 조성물 및 방법의 항IFNα 또는 IFNαR 항체를 그 자체로 피하 투여한다. 이러한 실시양태에서, 상기 조성물을 약 50 ㎎/mL에서 동결건조 약물로서 또는 액체 완충액(예, PBS 및/또는 시트레이트) 중에 제제화한다.

또한, 본원에 기재된 제제는 치료하고자 하는 특정 적응증에 필요한 활성 화합물, 바람직하게는 서로 부정적으로 영향을 미치지 않는 보체 활성을 갖는 활성 화합물을 하나 이상 함유할 수 있다. 예를 들면, 추가의 면역억제제를 더 제공하는 것이 바람직할 수 있다. 상기 분자는 적합하게는 의도하는 목적에 효과적인 양의 조합으로 존재한다.

또한, 예를 들면 코아세르베이션(coacervation) 기술에 의해 또는 계면 중합에 의해 제조된 마이크로캡슐, 예를 들면 히드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴 마이크로캡슐 및 폴리(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐로, 콜로이드 약물 전달 시스템(예, 리포솜, 알부민 마이크로구체, 마이크로에멀션, 나노입자 및 나노캡슐)으로 또는 마크로에멀션으로 각각 활성 성분을 포획할 수 있다. 이러한 기술 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol,. Ed.(1980)]에 개시되어 있다.

생체내 투여에 사용하기 위한 제제는 통상적으로 무균이다. 이는 용이하게 무균 여과 막을 통한 여과에 의해 달성된다. 일 실시양태에서, 무균은 실질적으로 발열원을 함유하지 않는 것을 의미한다.

서방 제제를 제조할 수 있다. 서방 제제의 적합한 예로는 항IFNα 또는 IFNαR 항체를 포함하는 고체 소수성 중합체의 반투성 기질을 들 수 있고, 이 기질은 성형 물품, 예를 들면 필름 또는 마이크로캡슐 형태이다. 서방 기질의 예로는 폴리에스테르, 하이드로젤(예, 폴리(2-히드록시에틸 메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐알콜)), 폴리락티드(미국 특허 3,773,919), L-글루탐산과 γ 에틸 L 글루타메이트의 공중합체, 비분해성 에틸렌 비닐 아세테이트, 분해성 락트산 글리콜산 공중합체, 예컨대 LUPRON DEPOT™(락트산 글리콜산 공중합체 및 루프롤라이드 아세테이트로 이루어진 주사용 마이크로구체) 및 폴리 D ( ) 3 히드록시부티르산을 들 수 있다. 에틸렌 비닐 아세테이트 및 락트산 글리콜산과 같은 중합체가 100일 이상에 걸쳐 분자를 방출시킬 수 있는 반면, 몇몇 하이드로젤은 더 짧은 기간 동안 단백질을 방출시킨다. 캡슐화 항체가 체내에 오랜 기간 동안 잔류하는 동안, 이는 37℃에서 수분에 노출된 결과 변성 또는 응집하여, 결과적으로 생물학적 활성을 잃어버리고 면역원성을 변경시킬 가능성이 있다. 포함되는 기작에 따라 안정화에 합리적 전략을 유도할 수 있다. 예를 들면, 응집 기작이 티오 이황화물 교환을 통한 분자간 S-S 결합 형성이라는 것이 발견되는 경우, 설프하이드릴 잔기를 개질시키고, 산 용액으로부터 동결건조시키고, 적절한 첨가제를 사용하여 수분 함량을 조절하고, 특정 중합체 기질 조성물을 개발함으로써 안정화를 달성할 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 본 발명의 조성물에서 사용되는 약학적으로 허용되는 담체는 인간 ADCC 또는 CDC에 영향을 미치지 않는다.

또한, 본원에 개시된 항IFNα 또는 IFNαR 항체 조성물은 면역리포솜으로 제제화될 수 있다. "리포솜"은 인간에게 약물(예, 본원에 개시된 항IFNα 또는 IFNαR 항체)을 전달하기에 유용한 다양한 유형의 지질, 인지질 및/또는 계면활성제로 이루어진 소형 소낭이다. 리포솜의 성분은 생물학적 막의 지질 배열과 유사한 2층 형성으로 통상 배열된다. 본 발명의 항체를 함유하는 리포솜을 문헌[Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688 (1985); Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77: 4030 (1980)]; 및 미국 특허 4,485,045 및 4,544,545에 기재된 것과 같은 당업계에 공지된 방법에 의해 제조한다. 순환 시간이 증강된 리포솜은 미국 특허 5,013,556에 개시되어 있다. 포스포파티딜콜린, 콜레스테롤 및 PEG 유도화 포스파티딜에탄올아민(PEG PE)을 포함하는 지질 조성물에 의한 역상 증발 방법에 의해 특히 유용한 리포솜을 생성할 수 있다. 원하는 직경을 갖는 리포솜을 생성하기 위해 한정된 기공 크기의 필터를 통해 리포솜을 압출한다. 이황화물 교환 반응을 통해 문헌[Martin et al., J. Biol. Chem., 257: 286-288 (1982)]에 기재된 리포솜에 본 발명의 항체를 접합시킬 수 있다. 또한, 치료제는 리포솜 내에 포함될 수 있다. 문헌[Gabizon et al., J. National Cancer Inst., (19) 1484 (1989)]을 참조한다.

[실시예]

이하, 본 발명을 하기 실시예를 참조하여 기재한다. 이 실시예는 예시 목적으로만 제공되고, 본 발명은 어떠한 방식으로든 이 실시예에 제한되는 것으로 해석되지 않아야 하고, 오히려 본원에 제공되는 교시내용의 결과로서 증명되는 임의의 변형 및 모든 변형을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

실시예 1. 이식편대 숙주( GVH ) 전신 경화증( SSc ) 마우스 모델의 유도.

진피 섬유증에서 I형 인터페론(IFN)의 역할을 잘 이해하기 위해, 본 발명자들은 하기 기재된 전신 경화증의 쥐과 모델에서 I형 IFN 신호를 차단하기 위해 IFNAR1에 대항하여 지시되는 단일 클론 항체를 사용하였다. 본 발명자들은 IFN 신호 전달이 진피 섬유증을 촉진할 수 있는 잠재적 기작을 확인하기 위해 피부 및 신장에서 임상학, 조직학, 혈청학 및 분자 질환 종점에 대한 항IFNαR의 효과를 조사하였다.

부 조직 접합 항원(miHag)을 공유하지 않는 공통유전자혈통(congenic) 마우스로부터 성숙 B 세포 및 T 세포 결핍 마우스 비장 세포로 이식함으로써 마우스에서 SSc를 유도할 수 있었다. 비장 세포의 단일 세포 현탁액을 6~10주령 암컷 B10.D2-Hc¹H^2dH2-T18^c/nSnJ(B10.D2) 마우스로부터 단리하고, 적혈구를 0.8% 염화암모늄 용액을 사용하여 4분 항온처리하여 용해시켰다. 백혈구를 200xg에서 원심분리하여 펠릿화하고, 인산염 완충 식염수(PBS)로 강하게 세척하고, 30×10⁶개의 세포를 수혜자 숙주 129S6(B6)-Rag2^tmlFwaN12(RAG2-/-) 마우스에 미정맥을 통해 주입하였다. IFN 신호 전달 차단 연구를 위해, 10 ㎎/㎏ 항IFNαR mAb 또는 이소타입 조절 IgG1을 이식 1일 전 시작하여 복강내 경로를 통해 0.1 mL PBS 비히클 중에 주마다 2회 투여하고, 분석을 위해 2주 및 4주에 조직을 수확하였다.

실시예 2. SSc 에서 I형 IFN 신호 전달의 봉쇄.

경피증 임상 점수 및 프레젠테이션.

주마다 2회 1O mpk 항IFNαR mAb에 의한 예방 치료는 SSc 마우스에서 피부 병변을 현저히 감소시켰다(^**p < .001). 피부를 다음과 같이 주마다 점수 매겼다: 0 = 정상; 1 = 병변 < 1c㎡; 2 = 병변 1~2c㎡; 3 = 병변 > 2c㎡. 비늘이 보이는 하지(귀, 꼬리, 발)에는 동물당 최대 총 점수 3.9에 대해 0.3의 점수를 주었다. 3회 반복 실험을 나타내는 결과를 도 2a에 기재하였다.

SSc 유도 단백뇨: 항IFNαR 및 Ig 조절 치료군 둘 다에서는 경증 단백뇨가 관찰되었지만, 동형 이식 수혜자에서는 관찰되지 않았다(도 2b 참조).

SSc의 임상 프레젠테이션: 이식 4주 후 항IFNαR 및 Ig 조절 치료군으로부터 얻은 대표적인 마우스를 도 2c에 나타냈다. 광범 및 중증 병변 및 탈모증은 모든 Ig 조절 치료 동물에서 분명하였지만, 5마리 항IFNαR 치료 동물 중 1마리 항IFNαR 치료 동물만이 중증 손상을 나타냈다.

실시예 3. SSc 피부의 조직병리학 분석.

이식 4주 후 SSc 및 대조군 마우스에서 동일한 배면 위치로부터 피부를 수확하고, 이식되지 않은 RAG2-/- 피부 샘플과 비교하였다. 5 ㎛ H&E 및 마손 트라크롬 염색 절편을 염증(0 = 정상; 1 = 희소한 세포 침윤; 2 = 적당한 침윤; 3 = 광범한 진피 침윤) 및 콜라겐 침착(0 = 정상, 1 = 경증; 2 = 중등도; 3 = 중증)에 대해 점수 매겼다. 염증 및 콜라겐 침착 점수를 합계하여 조직병리학 점수를 얻었고 최대 점수는 6이었다. 항IFNαR 치료는 총 피부 병리 특성을 75%(p < 0.001) 감소시켰다. 3회 반복 실험을 조합하여(n= 20 SSc + 항IFNαR; n = 18 SSc + Ig 조절) 도 3a에 도시된 데이터를 얻었다. 도 3b에서 확인할 수 있는 것처럼 항IFNαR 항체는 SSc 피부에서 염증 및 진피 비후를 감소시켰고, 도 3b는 항IFNαR 및 Ig 조절 치료 SSc 피부의 대표적인 H&E(왼쪽) 및 마손 트라크롬(오른쪽) 염색을 나타낸 것이다.

실시예 4. SSc 진피에서 Ig 및 보체 침착.

5 μM 동결 피부 절편을 아세톤에서 10분 동안 고착시키고 염소 항마우스 Ig-FITC(녹색) 또는 래트 항마우스 C1q-PE 다중 클론 항체(적색)와 함께 30분 동안 항온처리한 후, DAPI(청색) 중에 고정시켰다. 그 결과를 도 4a 내지 도 4f에 기재하였다. 동형 이식 대조군(각각 A 및 D)에서 Ig 및 C1q가 검출되지 않았지만, Ig 조절(B) 및 항IFNαR(C) 진피 섬유아세포 둘 다에서 Ig가 강하게 검출되었다. Ig 조절(E)로 치료된 동물에서 진피 섬유아세포(화살표), 표피 및 다른 진피 구조에서 C1q 침착이 관찰되지만, 항IFNαR 치료 피부(F)에서 C1q 침착이 검출되지 않았다.

실시예 5. SSc 동물에서 자가 항체 생산 및 급 전환( class switching ).

SSc 동물에서 ELISA에 의해 혈청 항-Scl-70 및 항-SSA 자가 항체(IgG, IgA, IgM)가 검출되었지만 대조군에서는 검출되지 않았다; 항IFNαR 치료 혈청에서 총 Ig의 현저한 차이가 관찰되지 않았다. 결과를 도 5a에 기재하였다. 본 발명자들은 항IFNαR 치료 마우스에서 Ig 급 전환이 온전하다는 것을 발견했다. 도 5b에 도시된 결과는 IgG1이 항-Scl-70 및 항-SSA 자가 항체의 주요 급이라는 것을 나타내고, IFN 봉쇄 이후 급 전환에서의 결함이 관찰되지 않았다. 또한, 본 발명자들은 동물 이식 4주 후 SSc에서 비장 구조물을 검사하였다. 결과를 도 5c에 기재하였다. 5 ㎛ 동결 비장 절편을 종자 중심(GC)을 확인하기 위해 CD45R/B220(갈색) 및 땅콩 응집소(적색)에 대해 염색하였다. 대조군 비장에서보다 SSc에서 GC가 더 흔했지만, 항IFNαR과 Ig 대조군 사이의 GC 빈도 또는 크기에서 현저한 차이가 관찰되지 않았다.

실시예 6. 공여자 pDC 는 GVH - SSc 에서 I형 IFN 의 1차 공급원이다.

본 발명자들은 이식 2주 후 미스매칭 이식 수혜자에서 비장 pDC(B220+/Gr-11o/CD11c+/CD11b-) 수의 FACS에 의해 정량 분석을 수행하여 SSc 유도 형질세포양 수지상 세포 팽창을 검사하였다. 결과를 도 6a에 기재하였다. 동형 이식 수혜자에서의 비장 pDC 수는 이식되지 않은 RAG2-/- 대조군(도시되지 않음)과 유사하였다. 공여자 pDC는 pDC 고갈 공여자 비장 세포의 이식편을 생성함으로써 GVH- SSc 모델에서 I형 IFN의 1차 공급원인 것으로 나타났다. 결과를 도 6b에 기재하였다. 래트 항마우스 항GR1 항체(클론 RB68C5)를 사용하여 세포를 30분 동안 표지하여 Gr-1(+) 비장 세포를 제거한 후, 제조업자의 지침에 따라 양 항래트 IgG 접합 자기 비드와 함께 30분 동안 항온처리하였다. FACS에 의해 Gr-H11 세포를 제거한 후, 남아 있는 비장 세포를 RAG2-/- 수혜자(30×10⁶개의 세포/마우스)에 이식하였다. 전체 비장 세포 및 Gr-1(-) 이식 숙주 둘 다 4주 내에 경증 단백뇨가 진행되었고, 전체 비장 세포 이식편만이 숙주 마우스에서 피부 병변을 유도하였다(^**p < 0.01; ^***p < 0.001).

실시예 7. 항IFNαR mAb 치료에 의해 억제되는 피부에서 과발현된 유전자의 온도 지도 프레젠테이션.

전체 게놈 검정(WGA) 데이터 분석에 의하면 308개의 프로브 세트의 발현이 Ig 이소타입 조절 Ab 치료군에서 적어도 2배(p < 0.05) 상향 조절되고, 항IFNαR mAb 치료에 의해 피부에서 적어도 50% 상쇄되는 것으로 밝혀졌다. 결과를 도 7에 기재하였다. 가장 상당한 경로 중에서 세포 접착, MAPK 또는 Jak/Stat를 통한 온콘스타틴 M 신호 전달, CCR3이 피부에서 활성화되었고 IFNαR Ab에 의해 상쇄되었다. Ig 이소타입 조절 Ab 치료군에서 10개의 프로브 세트가 p < 0.05로 적어도 2배 상향 조절되었고, IFNαR Ab에 의해 신장에서 적어도 50% 상쇄되었다. 항IFNαR mAb에 의해 억제된 I형 IFN 유도 가능한 유전자는 RSAD2, Ube216, Ube2S, Nfil3, Lysmd2를 포함하였다. I형 IFN 부류 구성원을 갖는 건강한 인간 공여자 전체 혈액의 생체외 자극에 의해 I형 IFN 유도 유전자를 이미 결정하였다. 항IFNαR mAb 치료에 의해 억제되는 경로 중 세포 접착, 염증, 세포 골격 개형 및 아폽토시스에 포함되는 것이 있었다. 대조로, SSc 신장에서 Ig 조절 치료(도시되지 않음)의 제한 효과와 비교하여 항IFNαR mAb 치료의 제한 효과가 관찰되었다. Affymetrix 마우스 게놈 430v2.0 분석을 사용하여 모든 샘플의 프로필을 작성하였다. SpotFire(http://www.spotfire.com/)를 이용하여 계층적 군집 분석(Hierarchical clustering)을 수행하고, GeneGo, Inc.(미국 마이애미주 세인트 죠셉 소재)로부터 입수한 MetaCore™ 통합 소프트웨어 제품군(integrated software suite)을 이용하여 유전자 발현 데이터의 경로 및 네트워크 분석을 수행하였다.

실시예 8. IFNαR 1 봉쇄 이후 SSc 유전자 발현의 실시간 PCR 정량 분석.

염증 및 조직 개형과 관련된 다양한 유전자의 발현을 측정하기 위해 실시예 1에 기재된 GVH 유도 SSc 마우스 모델을 사용하였다. 이 실험의 결과를 도 9a 내지 도 9c에 요약하였다. 배면 피부 샘플을 즉시 동결시키고 정제된 mRNA의 역전사에 의해 cDNA를 생성하였다. Biomark 48.48 Dynamic Array chip(Fluidigm Corp.)에 IFN 유도 가능한 유전자 IFI44, MX1, OASL 및 OAS2, 염증 유전자 MPO, TNFa, IL-6 및 iNOS 및 개형 유전자 KLF10, TIMP, EPGN 및 MMP에 특이적인 프로브를 평판 배양하고, 유전자 발현에 대해 cDNA를 분석하였다. IFNAR1 차단 mAb 5A3은 4주 시점(IFI44 93%(p < 0.006); MX1 85%(p < 0.0001); OASL 57%(p < 0.02); OAS2 81%(p < 0.0001))에서 4개의 IFN 유도 가능한 유전자 모두의 유도를 현저히 억제하였지만, 2주에 발현에 현저히 영향을 미치지 않았다. 염증 촉진 유전자 유도에서 유사한 결과가 나타났고, 5A3은 MPO, TNFa, IL-6 및 iNOS 발현을 4주에 완전히 상쇄시켰지만, 통계 유의에 달하지 않는 2주에서의 억제에 대한 경향이 또한 관찰되었다. 최종적으로, 5A3 치료는 TGF-β 반응성 유전자인 KLF10의 유도를 2주에 47%(p < 0.06) 및 4주에 91%(p < 0.0001) 감소시켜, 주요한 섬유증 경로의 강력한 억제를 나타냈다. 또한, 상피 세포 미토겐인 EPGN은 시점 둘 다에서 >95%(p < 0.03) 상쇄시켰지만, 기질 항상성 관련 유전자 TIMP 및 MMP9는 4주에 5A3에 의해 현저히 억제되지 않았다(각각 100%(p < 0.05) 및 92%(p < 0.03)). 이 데이터는 함께 IFNAR1 봉쇄가 GVH-SSc에서, 진피 염증을 억제하는 것 이외에, 상피 및 섬유아세포 개형에 극적인 영향을 미친다는 것을 입증하였다.

요약

본 발명자들의 연구는 I형 IFN 신호 전달이 전신 경화증의 쥐과 모델에서 진피 섬유증에 있어서 중요한 역할을 담당한다는 것을 입증하였다. IFNαR을 통한 IFN 신호 전달을 길항하는 것은 피부 염증 및 진피 개형의 발병 및 중증도 둘 다를 현저히 감소시켰지만, 단백뇨 및 경피증 관련 자가 항체 수치는 질환 대조군에서 관찰되는 수치와 동일하였다. 공여자 비장 세포로부터 pDC 포함 Gr-1(+) 개체의 사전 고갈은 숙주 마우스에서 피부 병변을 유도하지 못했지만, 단백뇨에 현저히 영향을 미치지 않는다는 관찰은 본 발명자들의 항체 데이터를 뒷받침하였다.

본 발명의 특정 실시양태가 상세한 설명의 목적을 위해 상기 기재되어 있지만, 당업자는 첨부된 특허청구범위에서 기재된 본 발명을 벗어나는 일 없이 상세한 설명에 다양한 변형을 할 수 있다는 것을 이해할 것이다.

본 명세서에 언급된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은, 각각의 개별 간행물, 특허 또는 특허 출원이 참조문헌으로 본원에 포함되는 것으로 구체적으로 및 개별적으로 표시된 바와 동일한 정도로 본 명세서에 참조문헌으로 본원에 포함된다.

Claims

I형 인터페론(IFN) 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증의 치료를 필요로 하는 환자에서 경피증을 치료하는 방법.
I형 인터페론 길항제의 치료학적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 경피증 관련 증상 중 하나 이상의 완화를 필요로 하는 환자에서 경피증 관련 증상 중 하나 이상을 완화시키는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 길항제는 항체인 방법.
제3항에 있어서, 상기 항체는 항IFNαR 항체인 방법.
제3항에 있어서, 상기 항체는 항IFNα 항체인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 증상은 진피 섬유증, 피부 병변, 탈모증, 염증, 진피 비후, 콜라겐 침착, 단백뇨 및 보체 침착으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 약 0.03 ㎎/㎏ 내지 약 30 ㎎/㎏ 용량으로 항체를 투여하는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 치료는 변경된 로드난 피부 점수(modified Rodnan skin score)에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 치료는 레이노드 상태 점수(RCS; Raynaud's Condition Score)에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 것인 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 치료는 환자 피부 샘플에 대해 수행되는 qPCR 분석에 의해 측정될 때 증상을 개선시키는 것인 방법.
제10항에 있어서, 상기 치료는 MPO, TNFα, IL-6 및 INOS로 이루어진 군으로부터 선택되는 염증 유전자의 발현을 감소시키는 것인 방법.
제10항에 있어서, 상기 치료는 KLF10, TIMP, EPGN 및 MMP9로 이루어진 군으로부터 선택되는 조직 개형 관련 유전자의 발현을 감소시키는 것인 방법.