KR20060052860A

KR20060052860A - 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올 골격을 갖는 글리코사이드 및고혈당 개선제

Info

Publication number: KR20060052860A
Application number: KR1020067001515A
Authority: KR
Inventors: 류이치 히구치; 마사노리 이나가키; 히로토시 하야사와; 무네오 야마다; 미유키 다나카; 에리코 미사와; 노리코 와키모토; 유스케 이토
Original assignee: 모리나가 뉴교 가부시키가이샤
Priority date: 2004-03-31
Filing date: 2005-03-30
Publication date: 2006-05-19
Also published as: EP1731527A4; CA2533784C; RU2006108792A; WO2005095436A1; RU2315770C1; KR100743852B1; EP1731527B1; US7534770B2; US20090075913A1; JPWO2005095436A1; CA2533784A1; JP3883563B2; US20080044500A1; US8486462B2; EP1731527A1

Abstract

3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올 또는 동화합물을 함유하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물이며 상기 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 함유하는 조성물을 고혈당 개선제의 유효성분으로 한다.

3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올, 백합과 식물, 추출물, 분획물, 건조 질량, 고혈당 개선제

Description

4-메틸에르고스트-7-엔-3-올 골격을 갖는 글리코사이드 및 고혈당 개선제{Glycoside having 4-methylergost-7-en-3-ol skeleton and drug for ameliorating hyperglycemia}

본 발명은 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올 골격을 갖는 신규 글리코사이드 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올 및 이를 함유하는 조성물 및 이를 함유하는 의약 또는 또는 음식물에 관한 것이다.

4-메틸에르고스트-7-엔-3-올은 식물 속에 존재하는 물질인 것이 공지되어 있다[켐, 팜, 불(Chem. Pharm. Bull.), 제624 내지 626페이지, 1993년]. 그러나, 이러한 화합물에서 선행기술에 관해서는 동화합물에 유사한 구조를 갖는 로페놀(4-메틸콜레스트-7-엔-3-올의 입체 이성체의 하나)의 생합성계에 관한 것 뿐이며[바이오케미카 바이오피지카 악타(Biochemica Biophysica Acta), 제63 내지 88페이지, 2000년], 이들의 화합물의 용도에 관해서는 전혀 미지의 것이다.

백합과 알로에속은 알로에베라(Aloe barbadensis Miller)나 목태도 알로에(Aloe arborescen Miller var. natalensis Berger) 등을 함유하는 식물군이며, 다 양한 효능이 있는 것이 경험적으로 공지되어 있으며 알로에속 식물의 용도에 관한 선행기술에는 면역 개질성 다당류(일본 국제 공개특허공보 2001-520019호), 알로에 추출물의 부탄올 분획 또는 알로인을 함유하는 것을 특징으로 하는 면역 억제 개선제(일본 공개특허공보 제(평)08-208495호), HSP 60 패밀리에 속하는 단백질의 알로인 유도체 함유 합성 억제제(일본 공개특허공보 제(평) 10-120576호, 일본 공개특허공보 제(평) 10-045604호 및 일본 공개특허공보 제(평) 10-036271호), 알로에 잎 껍질 유래의 렉틴 활성 단백질(일본 공개특허공보 제(평)09-059298호) 등이 있다.

알로에속 식물의 혈당치 개선에 관한 선행기술로서는 미국에서의 임상시험[피토메디신(Phytomedicine), 제3권, 제245 내지 248페이지, 1996년]이나, 동물에서의 혈당치 강하작용[피토세라피 리서치(Phytotherapy Research), 제15권, 제157 내지 161페이지, 2001년; 및 피토세라피 리서치(Phytotherapy Research), 제7권, 제37 내지 42페이지, 1993년], 알로에속 식물중의 다당류(일본 공개특허공보 제(소)60-214741호)이 개시되어 있지만, 이들 선행기술에서는 알로에속 식물의 혈당치 강하작용 성분은 다당류 또는 당단백질로 예측되고 있다. 또한, 알로에베라 압착액 및 당해 압착액을 유효성분으로 하는 혈당치 강하제(일본 공개특허공보 2003-286185호)에서는 FT-IR 차트에서 에스테르기 특유의 피크가 활성과 상관되며, 유효성분은 다당류, 아미노산, 말산 등이며 또한, 시판하는 알로에베라 겔 분말, 알로에베라 겔 액 또는 알로에베라 겔 추출액에서는 유효성분이 손상되어 있다고 개시되어 있다. 또한, 이밖에도, 알로에 다당류에서 혈당치 강하작용(미국 특허 제4598069호 명세서), 알로에에 포함되는 7-하이드록시크로몬의 항산화작용(미국 특 허출원 공개 제2003/0207818호 명세서)이 각각 개시되어 있다.

또한, 알로에베라 잎 껍질에는 완하(緩下)작용을 하는 바르발로인이나 알로에에모딘이 함유되어 있으며 종래부터 산업상 바람직하지 않다고 되어 있다.

헤모글로빈 A1c는 글루코스와 헤모글로빈의 결합물이며, 당농도에 의존하여 고혈당의 정도에 따라 증가되며여, 한번 생성된 헤모글로빈 A1c는 적혈구 수명(120일)이 다할 때까지 소멸되지 않으므로 과거의 장기간의 혈당 컨트롤 상태를 반영한다(일본 임상, 통권 제748호, 제1권, 제615 내지 617페이지, 1999년). 헤모글로빈 A1c는 1996년부터 노인건강법의 기본 건강심사의 선택검사에 채용되고 있으며, 1999년의 당뇨병의 신진단 기준에서는 당뇨병의 보조적인 진단 지표로서 채용되고 있는 점으로부터 임상적으로 큰 의의가 있는 지표라고 생각된다(일본 임상, 통권 제808호, 제2권, 제405 내지 409페이지, 2002년).

고혈당의 상태가 지속되면 글루코스 특이적 인슐린 분비 부전과 인슐린 저항성이 확인되며, 고혈당을 보다 악화시키는 요인으로 되고 있다[야자키 요시오·무라마쓰 마사히로 감수, 「당뇨병의 최전선」, 제126 내지 139페이지, 요토사, 1997년]. 고혈당 상태로부터 당뇨병의 발병을 예방하기 위해서는 장기적인 혈당치의 컨트롤이 필요한 점으로부터 헤모글로빈 A1c 값의 상승을 억제하는 것이 필요해진다고 생각된다. 전당뇨병(당뇨병으로서 의심되는 상태)에서, 혈당치의 컨트롤을 실시하기 위해 식사요법이나, 운동이 추진되고 있다. 식후의 혈당치 상승을 억제하기 위한 기능성 식품(특정 보건용 식품)에는 다양한 것이 이미 판매되고 있지만, 모두 일과성의 혈당치 상승 억제효과에 불과하다. 따라서, 장기간에 걸친 혈당치 의 컨트롤까지는 기대할 수 있는 것은 아니며, 현재 헤모글로빈 A1c 저하 작용물질의 개발이 갈망되고 있다.

또한, 현재 당뇨병의 치료약으로서는 α-글루코시다제 억제제, 인슐린 분비 촉진제로서 설포닐우레아 약제나, 인슐린 저항성 개선약으로서 티아졸리딘 유도체 등이 의약품으로서 사용되고 있다. 그러나, 이의 약효는 만족스러운 것이 아니며 또한 급격하게 혈당이 내려감으로써 혼수상태를 일으키는 부작용 등의 문제도 많다.

이상의 상황으로부터, 저혈당을 일으키지 않고 안전하게 섭취할 수 있으며 또한, 헤모글로빈 A1c치를 저하시키는 장기 혈당치 컨트롤 작용을 하는 물질의 발견이 갈망되고 있다.

종래부터 선행기술 문헌에는 혈당치의 상승을 억제하는 효과를 갖는 것으로서 예를 들면, 바나바에 유래하는 성분을 함유하는 혈당치 상승 억제제(일본 공개특허공보 2003-095941호), 보리류 발효물의 농축 엑스트랙트를 유효성분으로 하는 혈당치 상승 억제제(일본 공개특허공보 2002-371003호) 등이 개시되어 있다.

또한, 트리테르펜 글리코사이드를 유효성분으로 하는 기술로서는, 예를 들면, 김네마이노드람에서 추출된 글리코사이드를 유효성분으로 하는 당뇨병의 예방제(일본 공개특허공보 제(평)05-247086호), 바나나에서 추출된 콜로소린산을 유효성분으로서 함유하는 대사 개선방법 및 이를 위한 조성물(일본 공개특허공보 2002-205949호), 리파제 억제제(일본 공개특허공보 제(평)09-040689호), 면역 억제활성을 갖는 트리테르펜 유도체(일본 국제 공개특허공보 제(평) 11-511482호)이 개시되 어 있다.

또한, 라노스탄 골격 또는 3,4-세콜라노스탄 골격을 갖는 화합물에 의한 인슐린 작용 증강활성(일본 공개특허공보 제(평) 10-330266호)에서는 췌장에서 질환에 대한 효과는 불명백하지만, 그 효과는 지방세포의 분화 조절에서 인슐린의 작용을 증강시키는 것으로서 개시되어 있다.

또한, 스테로이드 기본 골격 부분에 이중결합을 함유하지 않는 24-알킬콜레스텐-3온 및 24-알킬콜레스탄-3온으로 이루어진 그룹에서 선택되는 화합물이 혈당강하제로서 개시되어 있다(일본 공개특허공보 2003-048837호).

유사 구조물인 4-메틸스티그마스트-7-엔-3-올 골격을 갖는 글리코사이드로서는 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸스티그마스트-7-엔-3-올이 오이과의 식물인 브리오니아(Bryonia alba)에 함유되어 있는 것이 보고되어 있지만[히미야 프리로드누이프 사에디네니이이(Khimiya Prirodnykh Soedinenii), 제3권, 소련, 1977년], 일반적으로 식경험이 있는 식물이라고는 할 수 없으며 또한 전체 합성의 예도 없다.

발명의 개시

본 발명의 과제는 저혈당을 일으키지 않고 안전하게 섭취할 수 있으며, 또한 헤모글로빈 A1c치를 저하시키는 장기 혈당치 컨트롤 작용을 하는 신규 화합물의 제공이다. 본 발명의 다른 과제는 식경험상 안전하게 섭취할 수 있으며 또한, 입수 용이한 원료로부터, 산업상 바람직하지 않은 성분을 함유하지 않으며 또한, 상기 화합물의 유효량을 함유하는 조성물을 제조하는 방법의 개발이다.

본 발명자등은 상기한 과제를 해결하려고 예의 연구를 한 결과, 알로에베라의 잎 몸체(투명 겔 부분)에서 추출, 정제한 신규 글리코사이드인 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올이 저혈당을 일으키지 않고 안전하게 섭취될 수 있으며 또한, 헤모글로빈 A1c치를 저하시키는 장기 혈당치 컨트롤 작용을 하는 것을 밝혀냈다. 본 발명은 상기한 발견에 근거하여 완성된 것이다.

즉, 본 발명은 화학식 1의 구조를 갖는 화합물(이하, 「본 발명의 화합물」이라고 한다)이다.

또한, 본 발명은 본 발명의 화합물을 건조 질량으로 O.OO1질량% 이상 함유하는 조성물(이하, 「본 발명의 조성물」이라고 한다)를 제공한다. 본 발명의 조성물은 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 것이 바람직하며 백합과 식물이 알로에베라인 것을 특히 바람직한 양태로 하고 있다.

또한, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 조성물을 유효성분으로서 함유하는 고혈당 개선제(이하, 「본 발명의 약제」라고 한다)를 제공한다.

또한, 본 발명은 고혈당 개선제를 함유하는 의약 또는 음식물을 제공한다.

또한, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 조성물을 유효성분으로서 함유하며 고혈당 개선작용을 하는 것을 특징으로 하며, 고혈당 개선을 위해 사용되는 취지의 표시를 부착한 음식물을 제공한다.

이하, 의약 또는 음식물을 총칭하여 「본 발명의 의약 또는 음식물」이라고 하는 경우가 있다.

본 발명은, 또한 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 조성물의 제조방법이며, 청구항 1에 기재된 화합물을 함유하는 백합과 식물 또는 이의 일부 또는 이들의 파쇄물로부터, 동화합물을 함유하는 분획을 유기용매 또는 열수를 사용하여 추출, 농축시키는 것을 특징으로 하는 방법을 제공하며 백합과 식물이 알로에베라인 것을 특히 바람직한 양태로 하고 있다.

본 발명은, 또한 고혈당 개선용의 의약의 제조에서, 본 발명의 화합물 또는 이를 함유하는 조성물의 용도를 제공한다. 본 발명의 용도는 조성물이 상기 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 함유하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 것이 바람직하며 백합과 식물이 알로에베라인 것을 특히 바람직한 양태로 하고 있다.

본 발명은, 또한 고혈당을 개선하는 방법이며, 본 발명의 화합물 또는 이를 함유하는 조성물을 고혈당을 개선하고자 하는 대상에 투여하는 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다. 본 발명 방법은 조성물이 상기 화합물을 건조 질량으로 0.001질 량% 이상 함유하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 것이 바람직하며 백합과 식물이 알로에베라인 것을 특히 바람직한 양태로 하고 있다.

도 1은 본 발명의 글리코사이드의 아글리콘부의 아세틸화체의 GC-MS 스펙트럼(도면을 대신하는 사진이다: 디스플레이 위에 표시한 중간조 화상).

도 2는 본 발명의 글리코사이드의 아글리콘부의 아세틸화체의 ¹³C-NMR 차트(도면을 대신하는 사진이다: 디스플레이 위에 표시한 중간조 화상).

도 3은 본 발명의 화합물을 투여한 마우스의 통상적인 혈당치의 경시적 변화를 도시하는 도면이다.

도 4는 본 발명의 화합물을 투여하는 마우스의 공복시 혈당치의 경시적 변화를 도시하는 도면이다.

발명을 실시하기 위한 최선의 형태

다음에 본 발명의 바람직한 실시 형태에 관해서 상세하게 설명한다. 단, 본 발명은 다음의 바람직한 실시 형태로 한정되지 않으며 본 발명의 범위내에서 자유롭게 변경할 수 있는 것이다.

본 발명의 화합물은 상기 화학식(1)의 구조를 갖는 화합물, 즉 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올이다. 즉, 본 발명의 화합물은 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 3위치의 하이드록실 그룹과, D-글루코스의 1위치의 하이드록실 그룹이 탈수 축합된 구조를 갖고 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 본 발명의 화합물을 건조 질량으로 O.OO1질량% 이상, 바람직하게는 O.01질량% 이상, 보다 바람직하게는 O.1질량% 이상 함유하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물이다. 본 발명의 조성물에 함유되는 본 발명의 화합물의 함유량의 상한은 특별히 제한되지 않지만, 50질량% 또는 70질량% 또는 90질량%를 예시할 수 있다.

본 발명의 화합물 또는 이를 함유하는 조성물은 예를 들면, 백합과 식물에 속하며 본 발명의 화합물을 함유하는 식물 또는 이의 일부 또는 이들의 파쇄물로부터, 동화합물을 함유하는 분획을 유기용매 또는 열수를 사용하여 추출, 농축함으로써 제조할 수 있다.

백합과에 속하는 식물로서는 알로에속 또는 알리움속에 속하는 식물을 들 수 있다. 알로에속 식물로서는 알로에베라, 알로에 페록스 밀러(Aloe ferox Miller, 알로에 아프리카나 밀러(Aloe africana Miller), 목태도 알로에(Aloe arborescen Miller var. natalensis Berger), 알로에 스피카타 베이커(Aloe spicata Baker) 등을 들 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 이를 함유하는 조성물의 제조에서는 상기 식물의 전체를 사용할 수 있지만, 잎 몸체(투명 겔 부분)을 사용하는 것이 바람직하다. 이러한 식물 또는 이의 일부를 바람직하게는 균질기 등을 사용하여 파쇄하여 액상화하며, 유기용매 또는 열수로 추출한다. 유기용매로서는 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 알콜; 아세트산메틸, 에틸 아세테이트, 아세트산프로필, 아세트산부틸 등의 에스테르; 아세톤, 메틸이소부틸케톤 등의 케톤; 디에틸에테르, 석유 에테르 등의 에테르; 헥산, 사이클로헥산, 톨루엔, 벤젠 등의 탄화수소; 사염화탄소, 디클 로로메탄, 클로로포름 등의 할로겐화 탄화수소; 피리딘 등의 헤테로사이클릭 화합물, 에틸렌글리콜 등의 글리콜; 폴리에틸렌글리콜 등의 폴리알콜; 아세토니트릴 등의 니트릴 용매 및 이들 용매의 혼합액 등을 들 수 있다. 또한, 이들 용매는 무수이거나 함수 상태일 수 있다. 이들 용매 중에서는 특히, 에틸 아세테이트/부탄올 혼합액(3:1) 또는 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1)이 바람직하다.

추출방법으로서는 통상적인 식물 성분의 추출에 사용되는 방법을 사용할 수 있다. 통상적으로 신선한 식물 또는 건조 식물 1질량부에 대해 유기용매 1 내지 300질량부를 사용하여, 교반 또는 진탕하면서, 용매의 비점 이하의 온도로 가열 환류시키거나 상온에서 초음파 추출하는 방법을 들 수 있다. 추출액은 여과 또는 원심분리 등의 적당한 방법에 따라 불용물을 분리하여 조추출물을 수득할 수 있다.

조추출물은 각종 크로마토그래피, 예를 들면, 순상 또는 역상의 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제할 수 있다. 순상 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에서는 용출 용매로서 클로로포름/메탄올 혼합액의 그래디언트를 사용하면 클로로포름:메탄올= 5:1정도로 본 발명의 화합물이 용출된다. 또한, 역상 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에서는 용출 용매로서 메탄올/물 혼합액의 그래디언트를 사용하면 95% 정도의 농도의 메탄올로 본 발명의 화합물이 용출된다.

수득된 프랙션은 다시 HPLC 등에 의해 정제할 수 있다.

상기한 바와 같이 수득되는 화합물 또는 이를 함유하는 조성물이 본 발명의 화합물을 함유하는 것은 예를 들면, 다음 실시예에 기재된 방법에 따라 확인할 수 있다. 예를 들면, 아글리콘부에 글루코스가 결합된 글리코사이드인 것은 또한, 아 글리콘부가 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올인 것은 ¹³C-NMR 등에 의해 확인할 수 있다.

본 발명의 화합물은 D-글루코스와, 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 축합시킴으로써 제조할 수 있다. 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올은 식물에서의 추출 및 정제를 실시함으로써 입수할 수 있다. D-글루코스와, 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 축합은 예를 들면, 제4판 실험화학강좌 26, 1992년(제272페이지, 제297페이지 및 제342페이지에 기재)에 기재되어 있는 방법을 조합하여 실시할 수 있다. 즉, D-글루코스를 완전하게 아세틸화한 다음, 아노머 위치를 α-브로마이드로 변환한다. 디에틸에테르 중에서 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 α-브로마이드와 반응시켜 β-글리코실화한 후, 나트륨메톡사이드·메탄올 중에서 아세틸기를 가수분해하여, 목적 화합물을 수득한다.

본 발명의 화합물은 헤모글로빈 A1c의 값을 저하시키는 작용을 하며 그 결과, 장기간 혈당치를 컨트롤할 수 있다. 따라서, 고혈당 개선제의 유효성분으로서 사용할 수 있다.

또한, 종래부터 알로에베라의 잎 껍질에는 완하작용을 하는 바르발로인이나 알로에에모딘이 포함되어 있으며 완하작용를 기대하지 않는 의약 또는 음식물로서는 바람직하지 않다고 생각되고 있다. 한편, 본 발명의 조성물은 바람직한 양태에서는 식경험상 안전하게 섭취할 수 있는 알로에베라의 잎 몸체(투명 겔 부분)에서 추출, 분획함으로써 수득할 수 있으므로 바르발로인 또는 알로에에모딘이 함유되지 않으며 또한, 본 발명의 화합물을 유효량 함유한다. 따라서, 본 발명의 조성물도 고혈당 개선제의 유효성분으로서 적절하다.

본 발명의 화합물 또는 조성물은 그대로 본 발명의 약제 또는 음식물의 유효성분으로서 이용할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 용액이라도 양호하며 통상적인 방법에 따라 동결 건조 또는 분무건조하여 분말로서 보존, 사용할 수도 있다.

본 발명의 약제는 본 발명의 화합물 또는 조성물, 또는 이들을 제제학적으로 허용되는 제제 담체와 조합하여, 경구적 또는 비경구적으로 인간을 포함하는 포유동물에 투여할 수 있다. 또한, 본 발명의 약제에서 본 발명의 화합물은 의약으로 허용되는 염으로 할 수 있다. 의약으로 허용할 수 있는 염으로서, 금속염(무기염)과 유기염의 양쪽이 포함되며, 이들 리스트는 「레밍톤·파마슈티컬·사이언시즈(Remington's Pharmaceutical Sciences), 제17판, 제1418페이지, 1985년」에 기재되어 있는 것이 예시된다. 구체적으로는 염산염, 황산염, 인산염, 2인산염, 브롬화수소산염 및 황산염 등의 무기산염이나, 말산염, 말레산염, 푸마르산염, 타르타르산염, 석신산염, 시트르산염, 아세트산염, 락트산염, 메탄설폰산염, p-톨루엔설폰산염, 파모산염, 살리실산염 및 스테아르산염 등의 유기산염이 비한정적으로 포함된다. 또한, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 알루미늄 등의 금속의 염, 라이신 등의 아미노산과의 염으로 할 수 있다. 또한, 상기 화합물 또는 의약상 허용되는 이의 염의 수화물 등의 용매화물도 본 발명에 포함된다.

본 발명의 약제의 제제 형태는 특별히 한정되지 않으며 치료 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있으며 구체적으로는 정제, 환제, 산제, 액제, 현탁제, 유제, 과립제, 캡슐제, 시럽제, 좌제, 주사 제품, 연고제, 첩부제, 점안제, 점비제 등을 예시할 수 있다. 제제화에 있어서는 제제 담체로서 통상적인 고혈당 개선용 의약에 범용되는 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 안정제, 교미교취제, 희석제, 계면활성제, 주사 제품용 용제 등의 첨가제를 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 효과를 손상하지 않는 한, 본 발명의 화합물 또는 조성물과, 다른 고혈당 개선작용을 하는 약제를 병용할 수 있다.

본 발명의 약제중에 함유되는 본 발명의 화합물 또는 조성물의 양은 특별히 한정되지 않으며 적절하게 선택하면 양호하지만, 예를 들면, 본 발명의 화합물의 양으로서 제제중에 0.001 내지 10질량%, 바람직하게는 0.01 내지 1질량%, 특히 바람직하게는 0.05 내지 1질량%로 하는 것이 양호하다.

본 발명의 약제는 고혈당 상태에 의해 일어나는는 질환, 예를 들면, 당뇨병 및 전당뇨병(당뇨병으로서 의심되는 상태)의 치료 또는 예방에 유용하다. 특히, 고혈당 상태로부터 당뇨병의 발병을 예방하기 위해 사용할 수 있다.

본 발명의 의약은 본 발명의 약제(고혈당 개선제)를 함유하는 것이며 고혈당 상태에 의해 일어나는 질환, 예를 들면, 당뇨병 및 전당뇨병(당뇨병으로서 의심되는 상태)의 치료 또는 예방에 유용하다. 특히, 고혈당 상태로부터 당뇨병의 발병을 예방하기 위해 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 의약은 고혈당 상태에 기인하는 각종 질병·합병증 등의 치료 또는 예방 및 이들 질병·합병증 등의 리스크를 감소할 수 있다.

이러한 고혈당 상태에 기인하는 각종 질병·합병증으로서는 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신장염, 당뇨병성 신경장애, 당뇨병성 괴저, 당뇨병에 기인하는 뇌졸증, 당뇨병에 기인하는 심근경색 등을 예시할 수 있다.

또한, 고혈당 상태란 정상영역 이외의 상태이며, 정상영역이란 일반적으로는 공복시 혈당치 110mg/dl 이하에서 75g 당부하 후에 1시간에서의 혈당치 160mg/dl 이하 및 2시간에서의 혈당치 120mg/dl 이하로 규정하고 있는 상태이다(일본 임상, 통권 제806호, 제1권, 제28 내지 35페이지, 2002년). 또한, 본 발명의 약제는 헤모글로빈 A1c의 값이 건강한 사람의 값보다 높은 상태, 예를 들면, 헤모글로빈 A1c의 값이 5.8% 이상인 환자에 대한 치료에 적합하게 사용된다.

본 발명의 약제 또는 의약의 투여시기는 특별히 한정되지 않으며 대상으로 되는 질환의 치료방법에 따라, 적절하게 투여시기를 선택할 수 있다. 또한, 투여형태는 제제 형태, 환자의 연령, 성별, 기타 조건, 환자의 증상의 정도 등에 따라 결정되는 것이 바람직하다.

본 발명의 약제의 유효성분의 투여량은 용법, 환자의 연령, 성별, 질환의 정도, 기타 조건 등에 따라 적절하게 선택된다. 통상적으로 유효성분으로서 본 발명의 화합물의 양은 바람직하게는 O.01 내지 10mg/kg/일, 보다 바람직하게는 O.1 내지 1mg/kg/일에서의 범위로 되는 양을 목표로 하는 것이 양호하며 또한, 본 발명의 조성물을 사용하는 경우에는 조성물의 건조 중량으로서 바람직하게는 O.1 내지 10OOmg/kg/일, 보다 바람직하게는 1 내지 10Omg/kg/일로 되도록 하는 양을 목표로 하는 것이 양호하다. 어느 경우에도, 1일 1회 또는 복수회로 나누어 투여할 수 있다.

본 발명의 약제 또는 의약, 또는 이들의 유효성분인 본 발명의 화합물 또는 조성물은 음식물(음료 또는 식품)에 함유시킬 수 있다. 음식물로서는 상기 유효성 분의 효과를 손상하지 않고 경구 섭취할 수 있는 것이면 형태나 성상은 특별히 제한되지 않으며 유효성분을 함유시키는 이외에는 통상적인 음식물에 사용되는 원료를 사용하여 통상적인 방법에 따라 제조할 수 있다.

본 발명의 음식물 중에 함유되는 본 발명의 화합물 또는 조성물의 양은 특별히 한정되지 않으며 적절하게 선택하면 양호하지만 예를 들면, 본 발명의 화합물의 양으로서, 음식물 중에 O.0001 내지 1질량%, 바람직하게는 0.001 내지 1질량%, 특히 바람직하게는 0.005 내지 1질량%로 하는 것이 양호하다.

본 발명의 음식물의 용도로서는 고혈당 개선의 효과를 이용하도록 하는 각종 용도를 취할 수 있다. 예를 들면, 혈당치가 걱정되기 시작하는 쪽에 적합한 음식물, 당뇨병 등의 생활 습관병의 위험요인의 감소·제거에 유용한 음식물 등의 용도를 예시할 수 있다.

또한, 본 발명의 음식물에서 「고혈당 개선」이란 고혈당에 기인하여 유도되는 각종 건강에 대한 해를 개선하거나 예방하는 것을 의미하고 있으며 「고혈당 예방」, 「혈당치 상승 억제」, 「혈당치 상승개선」, 「혈당치 상승 예방」, 「고 헤모글로빈 A1c치 개선」 등도, 상기 「고혈당 개선」과 동일한 의미로서, 본 발명에서 예시할 수 있다.

또한, 본 발명의 음식물은 고혈당 상태에 의해 일어나는 질환, 예를 들면, 당뇨병 및 전당뇨병(당뇨병으로서 의심되는 상태)의 예방에 유용하다. 특히, 고혈당 상태로부터 당뇨병의 발병을 예방하기 위해 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 음식물은 고혈당에 기인하는 각종 질병·합병증 등의 예방 및 이들 질병·합병증 등의 리스크를 감소할 수 있다.

본 발명의 음식물은 고혈당 개선을 위해 사용되는 것인 취지의 표시를 부착한 음식물, 예를 들면, 「고혈당 개선용과 표시된 고혈당 개선효과를 갖는 화합물을 함유하는 음식물」 또는 「고혈당 개선용으로 표시된 식물 추출물을 함유하는 음식물」, 「고혈당 개선용으로 기재된 알로에베라 추출물을 함유하는 음식물」 등으로서 판매하는 것이 바람직하다.

또한, 본 발명의 화합물 또는 조성물 등은 고혈당 개선작용을 하는 점으로부터, 고혈당 개선의 표시에는 혈당 상승을 억제하는 의미도 갖는다고 생각된다. 따라서, 본 발명의 음식물은 「혈당 상승 억제용」이라고 표시할 수 있다. 즉, 고혈당 개선용의 표시란 이러한 「혈당 상승 억제용」의 표시일 수 있다.

또한, 상기와 같은 표시를 하기 위해 사용되는 문언은 「고혈당 개선용」 또는 「혈당 상승 억제용」이라는 문언만으로 한정되는 것은 아니며 그 이외의 문언이라도, 고혈당을 개선하거나 혈당치의 상승을 억제하는 효과를 나타내는 문언이면, 본 발명의 범위에 포함되는 것은 말할 필요도 없다. 이러한 문언으로서는 예를 들면, 수요자에 대해 고혈당 개선 또는 혈당치 상승 억제의 효과를 인식시키도록 하는 각종 용도에 근거하는 표시도 할 수 있다. 예를 들면, 「혈당치가 걱정되기 시작하는 쪽에 적합하다」, 「당뇨병 등의 생활 습관병의 위험 요인(리스크)의 감소·제거에 유용하다」 등의 표시를 예시할 수 있다.

「표시」란 수요자에 대하여 용도를 알게 하기 위한 모든 행위를 의미하며, 용도를 상기·유추시킬 수 있도록 하는 표시이면 표시의 목적, 표시의 내용, 표시하는 대상물·매체 등의 여부에 관계없이 모두 본 발명의 「표시」에 해당된다. 그러나, 수요자가 용도를 직접적으로 인식할 수 있도록 하는 표현에 의해 표시하는 것이 바람직하다. 구체적으로는 본 발명의 음식물에 따르는 상품 또는 상품의 포장에 용도를 기재하는 행위, 상품 또는 상품의 포장에 용도를 기재한 것을 양도하며 인도, 양도 또는 인도를 위해 전시하며 수입하는 행위, 상품에 관한 광고, 가격표 또는 거래서류에 용도를 기재하여 전시 또는 반포하거나 이들을 내용으로 하는 정보에 용도를 기재하여 전자기적(인터넷 등) 방법에 따라 제공하는 행위 등을 예시할 수 있다.

한편, 표시로서는 행정 등에 의해 인가된 표시(예: 행정이 정하는 각종 제도에 기초하여 인가를 받아, 이러한 인가에 기초한 형태로 행하는 표시)인 것이 바람직하며 특히 포장, 용기, 카탈로그, 팜플렛, POP 등의 판매현장에서 선전재, 기타 서류 등에서의 표시가 바람직하다.

또한, 예를 들면, 건강식품, 기능성 식품, 경장 영양식품, 특별용도 식품, 영양 기능식품, 의약용 부외품 등으로서 표시를 예시할 수 있으며 기타 후생노동성에 의해 인가되는 표시, 예를 들면, 특정 보건용 식품, 이에 유사한 제도로써 인가되는 표시를 예시할 수 있다. 후자의 예로서는 특정 보건용 식품으로서의 표시, 조건부 특정, 보건용 식품으로서의 표시, 신체의 구조나 기능에 영향을 주는 취지 의 표시, 질병 리스크 감소표시 등을 예시할 수 있으며 상세하게 말하면, 건강증진법 시행규칙(평성 15년 4월 30일 일본국 후생노동성령 제86호)에 정해진 특정 보건용 식품으로서의 표시(특히 보건 용도의 표시) 및 이에 유사한 표시를 전형적인 예로서 열거할 수 있다.

실시예 1

다음에 실시예를 기재하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 다음 실시예로 한정되는 것이 아니다.

[제조예 1]

이하, 알로에베라로부터 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 제조예를 기재한다.

알로에베라로부터, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 다음에 기재된 바와 같이 하여 추출, 정제한다.

알로에베라의 잎 몸체(투명 겔 부분) 100kg을 균질기를 사용하여 액상화하며, 여기에 100L의 에틸 아세테이트/부탄올 혼합액(3:1)을 첨가하여 교반한다.

밤새 방치한 후, 에틸 아세테이트/부탄올 혼합액과 수층을 분액하여, 에틸 아세테이트/부탄올 혼합액을 회수한다. 이러한 에틸 아세테이트/부탄올 혼합액을 감압하에 농축시켜 수득된 에틸 아세테이트/부탄올 혼합액 추출물의 중량은 13.5g이다.

수층 및 에틸 아세테이트/부탄올 혼합액 추출물을 사용하여, 다음 당뇨병 모델 마우스를 사용하는 고혈당 개선작용의 평가를 실시한 바, 에틸 아세테이트/부탄 올 혼합액 추출물에 동작용이 확인되므로 이러한 추출물 중의 성분의 분리, 정제를 시도한다. 우선, 추출물을 박층 크로마토그래피[머크(Merk) 제품, 실리카 겔 60F254 및 RP-18F2543]로 검토한 결과, 클로로포름/메탄올 혼합액을 사용하는 순상(normal phase) 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의한 분리방법이 적절하다고 생각된다. 그래서, 실리카 겔 60(머크 제품)을 400g 충전한 칼럼에 추출물 13g을 1ml의 클로로포름/메탄올 혼합액(1:1)에 용해시킨 용액을 흘려서 칼럼에 흡착시킨 다음, 클로로포름/메탄올 혼합액을 사용하여, 메탄올 농도를 단계적으로 상승시키는 스텝와이즈 그래디언트법(클로로포름:메탄올= 100:1, 25:1,10:1, 5:1 및 1:1의 각 혼합비)으로 용출시키며, 혼합액의 혼합비마다 용출액을 분획한다. 각 프랙션의 용매 제거 후의 조정제물(crude purification product) 수득량은 각각 1.44g, 3.0g, 1.17g, 1.28g, 2.27g이다. 이들 프랙션 중에서 클로로포름:메탄올= 5:1로 용출된 프랙션(조정제물 A)에 활성 성분이 존재하는 것을 모델 동물을 사용하는 방법으로 확인한다. 또한, 박층 크로마토그래피로 분석한 바, 바르발로인 및 알로에에모딘의 존재는 확인되지 않는다.

또한, 조정제물 A에서 활성 성분의 분리정제를 실시하기 위해 이러한 조정제물 A를 박층 크로마토그래피(머크 제품, 실리카 겔 60F254 및 RP-18F2543)를 사용하여 검토한 바, 메탄올을 사용하는 역상 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의한 분리방법이 적절하다고 생각된다. 그래서, 조정제물 A를 1ml의 클로로포름/메탄올 혼합액(1:1)에 용해시켜 코스모실 140[나카라이 테스크(Nacalai Tesque) 제품]를 180g 충전한 칼럼에 흘려서 칼럼에 흡착시킨 다음, 메탄올 85% 용액, 600ml, 메탄 올 95% 용액 600ml, 메탄올 100% 100ml로, 순차적으로 용출한다. 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올은 95% 메탄올의 용출 프랙션에 농축 분리되어 있으며 당해 용매 제거후의 중량은 370mg이다. 이하, 이러한 것을 화합물 1이라고 한다.

화합물 1을 박층 크로마토그래피의 검토를 한 결과, β-시토스테롤글코시드에 매우 근접한 Rf치를 나타내는 점으로부터, 아글리콘부에 당이 1분자 결합되어 있는 글리코사이드인 것이 예측된다. 또한, 화합물 1의 당 조성에 관해 조사하기 위해 화합물 1을 메타노리시스한 다음, TMS 유도체로서, GC-MS를 사용하는 측정을 실시한다. 그 결과, 화합물 1의 당부분의 TMS 유도체를 측정한 경우의 메인 피크는 리텐션 타임 14.28min, 14.61min, 16.34min에 보이며, 표준품 글루코스(나카라이 테스크 제품)의 메인 피크인 14.27min, 14.60min, 16.33min과 거의 일치한다. 또한, 표준품 갈락토스(기시다사 제품) 및 표준품 크실로스(기시다사 제품)의 메인 피크에 해당하는 피크는 보이지 않는다. 따라서 화합물 1에 함유되어 있는 당의 종류는 글루코스인 것이 확인된다.

이상의 결과에서 화합물 1은 아글리콘부에 글루코스가 1분자 결합되어 있는 글리코사이드인 것이 추정된다. 그러나, 화합물 1을 ¹³C-NMR(125MHz, CDCl₃)로써 측정한 결과, 협잡물의 존재가 확인되므로 구조 결정에는 한층 더 정제가 필요하다고 생각된다. 그래서, 화합물 1을 메타노리시스한 후, 아세틸화하여 아글리콘부의 구조 및 아글리콘부와 당의 결합부위의 확인을 실시한다. 다음에 이의 방법을 기 재한다.

50mg의 화합물 1을 5% 염산을 함유하는 메탄올(50ml)에 용해한 다음, 6시간 동안 가열 환류하여 메타노리시스한 후, 건조시켜 잔사를 수득한다(약 30mg). 당해 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(헥산:클로로포름= 9:1)로 정제하여 화합물 2(10mg)을 수득한다. 당해 화합물 2(5mg)에 무수 아세트산·피리딘(각 2방울)을 가하여 70℃에서 30분 동안 가열하여 아세틸화한 후, 반응액의 용매를 증류 제거하여, 화합물 3을 수득한다. 당해 화합물 3을 GC-MS 및 ¹³C-NMR(125MHz, CDCl₃)로써 분석을 한 결과를 각각, 도 1 및 도 2에 도시한다. 측정조건 및 결과는 다음과 같다. 또한, 표준물질로서 사용되는 3-아세톡시-4-메틸에르고스트-7-엔은 알로에에서 추출 정제한 후, ¹³C-NMR에서 구조를 확인한 다음, 아세틸화하여 제조한다.

[GC-MS]

장치: GC-17 A/GCMS5050A(SHIMADZU)

GC 칼럼: NEUTRA BOND-5(GL Scienses)

칼럼온도: 100℃(2분)→ (10℃/분)→ 300℃(28분)

주입온도: 250℃,

캐리어 가스: He(1.3mL/분)

인터페이스 온도: 300℃

MS 모드: EI

이온화 에너지: 70eV

[결과]

표준물질: 3-아세톡시-4-메틸에르고스트-7-엔: tR[min]= 39.4; m/z 456[M]⁺, 441[M-CH₃]⁺, 396[M-AcOH]⁺, 381[M-CH₃-AcOH]⁺

화합물 3: tR[min]= 39.2; m/z 456[M]⁺, 441[M-CH₃]⁺, 396[M-AcOH]⁺, 381[M-CH₃-AcOH]⁺

NMR의 측정 결과로부터 화합물 3은 3-아세톡시-4-메틸에르고스트-7-엔의 문헌치와 일치한다(유가가쿠, 제36권, 제5호, 제301 내지 319페이지, 1987년). 이러한 결과에서 화합물 2는 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올인 것이 판명됐다. 또한, FAB-MS를 사용하는 측정 결과, 화합물 1의 분자량은 576이다.

화합물 2(아글리콘부)와 글루코스를 탈수 축합한 경우, 수득되는 화합물의 분자량은 414(화합물 2)+180(글루코스)-18(물)= 576으로 되며, 화합물 1의 분자량과 일치한다.

이상의 결과에서 화합물 1의 구조는 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올인 것이 명백해진다.

이하 각각의 분자식, 분자량, 화학식을 기재한다.

(화합물 1)

분자식: C₃₅H₆₀O₆

분자량: 576

화학식: 화학식 1

화학식 1

(화합물 2)

분자식: C₂₉H₅₀O

분자량: 414

화학식: 화학식 2

(화합물 4)

분자식: C₃₁H₅₂O₂

분자량: 456

화학식: 화학식 3

[제조예 2]

알로에베라의 잎 몸체(투명 겔 부분)을 가열 건조하여 분쇄한 건조 알로에베 라 분말 0.3g에 60%, 80% 또는 100% 에탄올 60ml를 가한 다음, 60℃에서 1시간 동안 가열 환류시킨다. 추출액을 1500rpm으로 20분 동안 원심분리하고 상등액을 감압하에 농축시켜 완전하게 에탄올을 제거하여 조추출물을 수득한다. 60%, 80% 또는 100% 에탄올을 사용하는 추출에 의해 수득되는 조추출물의 건조 중량은 각각 65mg, 42mg, 18mg이다. 이들 조추출물이 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 함유하는 것을 박층 크로마토그래피로 확인한다.

[제조예 3]

알로에베라의 잎 몸체(투명 겔 부분)을 가열 건조하여, 분쇄한 건조 알로에베라 분말 O.3g에 물 60ml를 가한 다음, 95℃에서 5시간 동안 가열 환류한다. 추출액을 1500rpm에서 20분 동안 원심분리하며, 상등액을 동결 건조하여, 75mg의 조추출물을 수득한다. 이러한 조추출물이 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 함유하는 것을 박층 크로마토그래피로 확인한다.

[제조예 4]

알로에베라의 잎 몸체(투명 겔 부분)을 가열 건조하여, 이것을 분쇄한 다음, 건조하여 제조한 알로에베라 분말 21kg에 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1) 90L를 가한 다음, 실온에서 밤새 침지한 후, 여과하여 여과 잔사에 다시 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1) 90L를 첨가하여, 동일한 조작을 합계 4회 실시한다. 수득된 여액(350L)를 28℃에서 농축시켜 최종적으로 조추출물 784g을 수득한다. 이 중에서 780g의 조추출물에 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1) 2L를 첨가하여, 1시간 동안 교반한 다음, 여과하여 클로로포름/메탄올 혼합액층을 회수한다(A). 여과 잔사는 물 2.5L 및 에틸 아세테이트 2L를 순차적으로 첨가하여 1시간 동안 교반한 다음, 에틸 아세테이트층(B)을 회수하여, 잔류된 수층에 클로로포름 5L를 다시 첨가하며 1시간 동안 교반한 후, 클로로포름층(C)를 회수한다.

회수한 A, B 및 C의 유기용매 추출액을 혼합하여, 23℃에서 농축한 다음, 실리카 겔 칼럼[유리 칼럼: 52mm ×35Omm, 충전제: IR-63/210-W[다이소가부시키가이샤(Daiso Co., Ltd.) 제품]에 첨가한다. 계속해서, 박층 크로마토그래피로 용출물을 모니터링하면서, 헥산/클로로포름 혼합액(1:1)을 10L, 클로로포름을 10L, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1)을 20L, 클로로포름/메탄올 혼합액(5:1)을 20L의 순서로 칼럼에 통액하고, 각 용출 용매의 순서로, 프랙션 1(약 1L), 프랙션 2(약 1.5L), 프랙션 3(약 1.5L), 프랙션 4(약 1.5L)를 회수한다.

이 중에서, 프랙션 3에 목적하는 글리코사이드를 함유한 것을 박층 크로마토그래피로 확인한 다음, 용매를 제거하고 조추출물 131.6g을 수득한다. 이러한 조추출물 130g에 관해 다시 실리카 겔 칼럼[유리 칼럼: 70mm ×500mm, 충전제: SP-60-40/60(다이소가부시키가이샤 제품)]에 첨가하여, 클로로포름/메탄올 혼합액(30:1)을 10L, 클로로포름/메탄올 혼합액(20:1)을 50L, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1)을 10L, 클로로포름/메탄올 혼합액(1:1)을 10L를 각각 용출 용매로서, 압: 10kgfcm^-2, 유속: 4Oml/min의 조건으로 순차적으로 용출시킨다. 용출액은 프랙션 콜렉터에 의해 100ml씩 분획하여, 프랙션 1 내지 8을 회수한다.

회수된 프랙션을 박층 크로마토그래피로 확인한 결과, 프랙션 7에 목적하는 글리코사이드와 협잡물이 존재하고 있는 것이 명백해졌으므로 이러한 프랙션을 농 축시켜, 다시 실리카 겔 칼럼[유리 칼럼: 70mm ×500mm, 충전제: SP-60-40/60(다이소가부시키가이샤 제품)]에 첨가하여, 클로로포름/메탄올 혼합액(20:1)을 10L, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1) 10L를 각각 용출 용매로서, 압: 1Okgfcm^-2, 유속: 40ml/min의 조건으로 순차적으로 용출시킨다. 그 결과, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1)의 용출 분획에 함유될 목적하는 글리코사이드인 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 25.3g을 제조한다.

[시험예 1]

본 시험은 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 고혈당 상태의 개선효과를 평가하기 위해 실시한다.

(1) 시료의 제조

제조예 1에서 제조한 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 시험 시료로 한다.

(2) 시험방법

II형 당뇨병 모델 마우스로서, 6주 나이, 수컷 db/db 마우스[니혼클레어사(Clea Japan, Inc.)에서 구입]을 사용한다. 당해 마우스를 1그룹 7마리로 분류한다. 시험 시료를 DMSO에 용해한 다음, 생리 식염수로써, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 농도를 15μg/ml로 조정한다. 최종 DMSO 농도는 0.2%로 조정한다. 당해 II형 당뇨병 모델 마우스에 1일 1회 존데(sonde)를 사용하여 시험 시료용액을 1ml씩 연일 경구투여한다. 또한, 시험 시료를 함유하지 않은 용액을 음성 시료로 한다. 공복시 혈당치 및 통상적인 혈당치는 안트센스 (Antsense) II[(바이엘-산쿄사(Bayer-Sankyo Co., Ltd.) 제품]로써 경시적으로 측정한다. 공복시 혈당치는 15시간의 절식 후에 측정을 실시한다.

(3) 고혈당 개선효과

도 3 및 도 4에 통상적인 혈당치 및 공복시 혈당치의 시험 시료 투여기간 중의 경시적 변화를 도시한다. 음성 시료를 투여한 마우스에서는 통상적인 혈당치 및 공복시 혈당치의 어디에서도 급격한 혈당치의 상승이 관찰되지만, 시험 시료를 연속 투여한 마우스에서는 명백하게 혈당치의 상승을 억제하는 효과가 관찰된다.

[시험예 2]

본 시험은 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 헤모글로빈 A1c의 저하작용을 평가하기 위해 실시한다.

(1) 시료의 제조

(2) 시험방법

II형 당뇨병 모델 마우스로서, 6주 나이, 수컷 db/db 마우스(니혼클레어사에서 구입)을 사용한다. 당해 마우스를 1그룹 7마리로 분류한다. 시험 시료를 DMSO에 용해한 다음, 생리 식염수로써, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 농도를 1, 5, 15μg/ml로 조정한다. 최종 DMSO 농도는 0.2%로 조정한다. 당해 II형 당뇨병 모델 마우스에 1일 1회 존데를 사용하여 각 시험 시료용액을 1ml씩 연일 경구투여한다. 또한, 시험 시료를 함유하지 않은 용액을 음성 시료 로 한다. 투여 개시로부터 35일째에 헤모글로빈 A1c를 DCA2000(바이엘-산쿄사 제품)로써 측정한다.

(3) 헤모글로빈 A1c 저하작용

투여 개시로부터 35일째의 헤모글로빈 A1c의 측정 결과를 표 1에 기재한다. 음성 시료를 투여할 때의 헤모글로빈 A1c의 값과 비교하여, 5 또는 15μg의 시험 시료의 연속투여에서는 통계학적으로 유의적인 헤모글로빈 A1c의 저하가 보이며, 장기간의 혈당치 컨트롤 효과가 있는 것으로 나타난다. 또한, 투여기간 중에 부작용의 증상 및 투여후 저혈당 상태를 일으킨 예는 한번도 없으며 체중 및 병리적인 소견으로부터 이상은 확인되지 않는다.

[표 1]

[시험예 3]

본 시험은 알로에베라 유래의 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 함유하는 추출 조정제물 A의 헤모글로빈 A1c의 저하작용 및 투여량의 검토를 실시하기 위해 수행한다.

(1) 시료의 제조

제조예 1에서 제조한 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올 을 함유하는 추출 조정제물 A를 사용한다.

(2) 시험방법

II형 당뇨병 모델 마우스로서 6주 나이, 수컷 db/db 마우스(니혼클레어사에서 구입)을 사용한다. 당해 마우스를 1그룹 7마리로 분류한다. 시험 시료를 DMSO에 용해한 다음, 생리 식염수로써, 추출 조정제물 A의 농도를 25, 100, 200μg/ml로 조정한다. 최종 DMSO 농도는 0.2%로 조정한다. 당해 II형 당뇨병 모델 마우스에 1일 1회 존데를 사용하여 각 시험 시료용액을 1ml씩 연일 경구투여한다. 또한, 시험 시료를 함유하지 않은 용액을 음성 시료로 한다. 투여 개시로부터 35일째에 헤모글로빈 A1c를 DCA2000(바이엘-산쿄사 제품)로써 측정한다.

(3) 혈당치 및 헤모글로빈 A1c치

투여 개시로부터 35일째의 헤모글로빈 A1c의 측정 결과를 표 2에 기재한다. 음성 시험의 헤모글로빈 A1c의 값과 비교하여, 100 또는 200μg의 시험 시료의 연속 투여에서는 헤모글로빈 A1c의 저하가 보이며, 통계학적 유의에 장기간의 혈당치 컨트롤 효과가 있는 것으로 나타난다. 또한, 투여기간 중에 부작용의 증상 및 투여후 저혈당 상태를 일으킨 예는 한번도 없으며 체중 및 병리적인 소견으로부터 이상은 확인되지 않는다.

[표 2]

본 발명의 화합물은 저혈당을 일으키지 않고 안전하게 투여하거나 섭취할 수 있으며 또한, 헤모글로빈 A1c치를 저하시키는 장기 혈당치 컨트롤 작용을 한다. 또한, 본 발명의 조성물은 식경험상 안전하게 섭취할 수 있으며 입수 용이한 식물인 백합과 식물, 예를 들면, 알로에속 또는 알리움속 식물을 사용하여 제조할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 본 발명의 화합물을 유효량 함유하는 것이며 바람직한 양태에서는 의약 또는 음식물로서 바람직하지 않은 성분인 바르발로인 또는 알로에에모딘를 함유하지 않는다.

Claims

화학식 1의 구조를 갖는 화합물.

화학식 1
제1항에 따르는 화합물을 건조 질량으로 O.OO1질량% 이상 함유하는 조성물.
제2항에 있어서, 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 조성물.
제3항에 있어서, 백합과 식물이 알로에베라(Aloe barbadensis Miller)인 조성물.
제1항에 따르는 화합물 또는 제2항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 따르는 조성물을 유효성분으로서 함유하는 고혈당 개선제.
제5항에 따르는 고혈당 개선제를 함유하는 의약
제5항에 따르는 고혈당 개선제를 함유하는 음식물.
제1항에 따르는 화합물 또는 제2항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 따르는 조성물을 유효성분으로서 함유하며 고혈당 개선작용을 하는 것을 특징으로 하며, 고혈당 개선을 위해 사용되는 취지의 표시를 부착한 음식물.
제1항에 따르는 화합물 또는 동화합물을 함유하는 조성물의 제조방법으로서,

제1항에 따르는 화합물을 함유하는 백합과 식물 또는 이의 일부, 또는 이들의 파쇄물로부터, 동화합물을 함유하는 분획을 유기용매 또는 열수를 사용하여 추출, 농축시키는 것을 특징으로 하는 방법.
제9항에 있어서, 백합과 식물이 알로에베라인 방법.
고혈당 개선용 의약을 제조하기 위한, 화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 이를 함유하는 조성물의 용도.

화학식 1
제11항에 있어서, 조성물이 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 함유하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 용도.
제12항에 있어서, 백합과 식물이 알로에베라인 용도.
고혈당 개선방법으로서,

화학식 1의 구조를 갖는 화합물 또는 이를 함유하는 조성물을 고혈당을 개선하고자 하는 대상에 투여하는 것을 특징으로 하는, 고혈당 개선방법.

화학식 1
제14항에 있어서, 조성물이 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 함유하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 방법.
제15항에 있어서, 백합과 식물이 알로에베라인 방법.