KR20040096525A

KR20040096525A - 헬리코박터 파이로리 접착 저해제

Info

Publication number: KR20040096525A
Application number: KR10-2004-7010902A
Authority: KR
Inventors: 히라모또시게루; 모리시따요시로; 기무라노부따께; 고다마요시까쯔
Original assignee: 닛신 파마 가부시키가이샤; 겐 코오포레이션
Priority date: 2002-01-28
Filing date: 2003-01-27
Publication date: 2004-11-16
Also published as: TWI343813B; CN1638787A; JPWO2003063886A1; EP1498134A1; US20050096262A1; TW200302733A; CA2474620A1; JP4474581B2; CN1638787B; KR100702885B1; WO2003063886A1

Abstract

본 발명은, 소화성 궤양의 발생에 관여하는 헬리코박터 파이로리 (Helicobacter pylori) 를 위 내로부터 배제할 수 있는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제 및 그 제조 방법, 그리고 이것을 함유하는 헬리코박터 파이로리에 관련되는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약 및 식품에 관한 것이다. 본 발명의 헬리코박터 파이로리 접착 저해제는, 헬리코박터 파이로리에 대하여 우수한 제균 작용을 가지고, 또 안전성이 높으며, 이것을 함유하는 의약 조성물 및 식품은 상기 질환의 예방 또는 치료에 매우 유용하다.

Description

헬리코박터 파이로리 접착 저해제 {HELICOBACTER PYLORI ADHESION INHIBITOR}

헬리코박터 파이로리는 한쪽 끝에 몇개의 편모 (flagella) 를 갖는 나선형의 그램 음성 간균 (桿菌, bacillus) 으로, 인간의 위 점막에 생식하는 균이다. 이 균은, 1983 년 오스트레일리아의 Marshall, B. J. 와 Warren, J. R. 에 의해 위염, 위궤양 환자의 위 생검 재료로부터 높은 비율로 검출되는 것이 보고되어, 그 이후, 역학적 연구로부터 위염, 위궤양, 십이지장궤양의 원인균이며, 또한 위암 등의 질환과 관련이 있다는 보고가 잇따라 나오고 있다.

따라서, 현재 소화성 궤양의 근본적 치료에는 헬리코박터 파이로리의 제균 (除菌) 이 불가결한 것으로 생각되고 있으며, 그 제균 요법으로서 다음에 설명하는 바와 같이 항생 물질과 위산 분비 억제제의 병용 요법이 널리 제창되어 있다.

헬리코박터 파이로리가 일단 위 점막에 정착하면, 감염에 대한 면역 응답이 강함 (항체값이 높음) 에도 불구하고 제균되지 않고 위 안에 계속해서 생식한다. 이 때문에 항생 물질에 의한 치료에 의해 완전하게 제균되지 않는 한, 투약을 중지하면 약 1 개월 이내에 치료 전의 감염 상태로 되돌아간다. 더구나 위 안은 염산에 의해 pH 가 매우 낮게 유지되어 있기 때문에, 많은 항생 물질이 불활성화된다. 이러한 이유에서, 헬리코박터 파이로리의 제균에는, 위산 분비를 강력하게 억제하는 프로톤 펌프 억제제 (proton pump inhibitor) 와 제균약 (항생 물질) 이 병용되는 형태로 사용되고 있다. 또한 현재의 상태에서는 헬리코박터 파이로리의 제균에는, 아목시실린 (amoxicillin), 클라리트로마이신 (clarithromycin) 및 란소프라졸 (lansoprazole) 등의 3 제 병용 요법이 일본에서의 표준적인 치료법으로 되어 있다. 그러나, 항생 물질의 장기간 투여는, 그 부작용에 추가하여 내성균의 증가라고 하는 매우 중대한 문제가 우려된다.

제균을 목적이라고 한 항생 물질의 투여에 의한 부작용 및 내성균의 증가 등의 문제를 해결하는 수단으로서 현재 경구 백신 (vaccine) 에 의한 면역 요법의 접근이 보이지만, 실험시의 복잡한 조건이 장해가 되어 새로운 예방, 치료법의 확립을 목표로 한 연구는 거의 진전되지 않았다. 또한 백신은 어디까지나 예방을 주체로 하는 것으로, 일단 헬리코박터 파이로리가 감염된 환자에 대해서는 효과를 기대할 수 없다.

일반적으로 세균의 감염이 성립하기 위해서는 세균이 숙주 세포에 접착하여, 거기서 증식함으로써 정착하는 것이 감염의 첫걸음이 된다. 세균의 숙주 세포에 대한 접착에는, 접착 인자 (adhesin) 의 숙주 세포 표면의 수용체 (receptor) 에 대한 결합이 필요하다. 일본국 공개특허공보 평10-287585호는, 헬리코박터 파이로리의 접착 기구에 관해서 그때까지 해명되어 있지 않았던 접착 인자가 이 균이 생성하는 우레아제이며, 이 우레아제에 대한 계란 난황 항체가 헬리코박터 파이로리의 위 내 증식을 현저하게 억제하는 것을 개시하고 있다.

또한 일본 특허 제3255161호는, 우유로부터 유지방 및 카제인을 제거하여 얻어진 유청 유래의 뮤신이 헬리코박터 파이로리의 소화관에 대한 정착을 저해할 수 있는 것을 개시하고 있다.

그러나, 헬리코박터 파이로리의 접착 인자인 우레아제가 위 점막에 접착하는 것을, 각종 당과 단백질의 갈변 반응 생성물에 의해 저해할 수 있다는 것은 알려져 있지 않다.

본 발명은, 소화성 궤양의 발생에 관여하는 헬리코박터 파이로리 (Helicobacter pylori) 를 위 내로부터 배제할 수 있는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제 (adhesion inhibitor), 및 그 제조 방법, 그리고 이것을 함유하는 헬리코박터 파이로리에 관련되는 소화성 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약 및 식품에 관한 것이다.

본 발명의 과제는, 소화성 궤양의 발생에 관여하는 헬리코박터 파이로리의 위 점막에 대한 접착을 효과적으로 저해할 수 있고, 또한 종래의 항생 물질의 사용에 따르는 부작용이나 내성균 증가 등과 같은 결점을 갖지 않는 안정성이 높은 헬리코박터 파이로리 접착 저해제를 제공하는 것이다.

본 발명자들은, 우레아제의 위 점막에 대한 부착을 저지할 수 있는 물질을 여러가지로 검토한 결과, 당과 단백질의 갈변 반응 생성물이 접착 인자인 우레아제의 위 점막에 대한 접착을 효과적으로 저지할 수 있는 것을 발견하여 본 발명을 완성시켰다.

즉, 본 발명은, 당과 단백질의 갈변 반응 생성물을 유효 성분으로 하는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제에 관한 것이다. 여기서, 단백질은 경구 섭취할 수 있는 임의의 단백질이고, 당은 경구 섭취할 수 있는 임의의 환원당을 포함한다.

본 발명은 또한 수용액 중에서 당과 단백질을 갈변 반응시키는 공정을 포함하는, 헬리코박터 파이로리 접착 저해제의 제조 방법에 관한 것이다.

또한, 본 발명은, 수용액 중에서 당과 단백질을 함유하는 식품에 갈변 반응을 일으키는 공정을 포함하는, 헬리코박터 파이로리 접착 저해제의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명에 있어서, 갈변 반응은 당과 단백질의 혼합물의 5% 수용액에 있어서의 파장 405㎚ 의 흡광도가 0.01 이상이 될 때까지 실시한다. 여기서, 식품은 당과 단백질을 함유하는 것이면 특별히 한정되지 않지만, 바람직하게는 생우유, 우유분말 (전지분유), 탈지분유, 유청 및 연유 (condensed milk) 등이다.

본 발명은, 당과 단백질의 갈변 반응 생성물과 위산 분비 억제제로 이루어지는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제에 관한 것이다. 본 발명은 또한 당과 단백질의 갈변 반응 생성물과 헬리코박터 파이로리에 대하여 제균 작용을 갖는 다른 물질로 이루어지는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제에 관한 것이다. 또한 본 발명은, 당과 단백질의 갈변 반응 생성물, 위산 분비 억제제 및 헬리코박터 파이로리에 대하여 제균 작용을 갖는 다른 물질로 이루어지는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제에 관한 것이다. 또, 본 발명에 있어서 「제균 작용」이란, 생체 내 (in vivo) 및/또는 시험관 내 (in vitro) 에 있어서, 헬리코박터 파이로리에 대한 접착 저해, 증식 억제 혹은 방지, 살균 등의 작용을 의미한다.

본 발명은 또한, 상기 서술한 헬리코박터 파이로리 접착 저해제를 함유하는, 헬리코박터 파이로리가 관여하는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약 조성물에 관한 것이다. 그리고, 본 발명은, 상기 서술한 헬리코박터 파이로리 접착 저해제를 함유하는, 헬리코박터 파이로리가 관여하는 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품에 관한 것이다.

이하에 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 헬리코박터 파이로리 접착 저해제의 유효 성분은, 당과 단백질의 갈변 반응 생성물, 즉 아미노-카르보닐 반응의 생성물이다. 갈변 반응은, 각종 당과 각종 단백질을 혼합하여 수용액 중에서 가열 처리함으로써 수행시킬 수 있다.

본 발명에서의 단백질은, 경구 섭취할 수 있는 임의의 단백질, 예를 들면 밀, 보리, 쌀, 옥수수, 대두, 팥 유래의 식물성 단백질 또는 우유, 란(卵), 생선, 고기 유래의 동물성 단백질이면 어느 것이나 상관없지만, 이들로 한정되지 않는다. 구체적으로는, 우유에 함유되는 카제인, β-락토글로불린, α-락토알부민, 소혈청 알부민, 면역 글로불린, 락토페린 등이나, 밀에 함유되는 글루테닌, 알부민 등이나, 옥수수에 함유되는 제인 (zein), 알에 함유되는 오발부민 (ovalbumin), 오보트랜스페린 (ovotransferrin), 오보뮤코이드 (ovomucoid), 오보뮤신 (ovomucin), 리소자임 등, 생선이나 고기에 함유되는 미오신, 액틴 등을 들 수 있다. 이들 각종 단백질은, 통상적인 방법에 의해 정제한 것을 사용해도 되고, 또 시판되는 것을 그대로 사용할 수도 있다. 이들 단백질은 단독으로 사용할 수도 있고 또는 2 종 이상을 조합하여 사용할 수도 있다. 혹은, 이들 단백질을 함유하는 식품 소재, 예를 들면 우유 유래의 단백질을 함유하는 생우유, 우유분말, 탈지분유, 유청이나 연유 등을 단백질의 혼합물로서 그대로 사용해도 된다.

갈변 반응 생성물의 제조에 사용하는 당으로는, D-글루코오스, D-프룩토오스, D-만노오스, D-갈락토오스, D-크실로오스, L-아라비노오스, D-리보오스 및 유당 등 각종 환원당을 들 수 있다. 이들 당은 정제품을 사용해도 되지만, 탈지분유나 유청 등을 사용하는 경우에는 전술한 바와 같이 단백질을 함유하고 있기 때문에, 우유 유래 단백질을 별도로 혼합하지 않고 갈변 반응을 실시하면 된다.

당과 단백질의 질량비의 비율은 임의로 정할 수 있지만, 통상은 1:100∼10:1 의 범위이고, 바람직하게는 1:9∼1:1 의 범위다.

본 발명에 있어서 갈변 반응 생성물은, 당과 단백질을 혼합하여 수용액 중에서 갈변 반응시키는 대신에, 당 및 단백질을 함유하는 식품, 바람직하게는 당 및 단백질을 상기의 질량비로 함유하는 식품, 예를 들면 생우유, 분유, 탈지분유, 유청 및 연유 등을 그대로 수용액 중에서 가열 처리 등에 의해 갈변 반응을 일으켜 얻을 수도 있다.

탈지분유는, 카제인을 주체로 하는 각종 우유 단백질, 및 유당 등의 당을 함유하고 있다. 탈지분유는, 통상적인 방법에 의해 생우유로부터 원심 분리에 의해 지방분을 분리 제거하여 생긴 탈지유를 분말화함으로써 얻을 수 있지만, 시판되는 탈지분유를 사용해도 된다.

유청은, 탈지유로부터 카제인을 제거한 것으로, 유당 등의 당, 및 β-락토글로불린, α-락토알부민, 혈청 알부민, 면역 글로불린, 락토페린 등의 유청 단백질을 함유하고 있다. 본 발명에 있어서 사용하는 유청으로는, 통상적인 방법에 의해 우유즙으로부터 조제해도 되고, 시판되는 유청 (농축액, 분말 등) 을 그대로 사용해도 된다.

본 발명에 있어서, 갈변 반응은 중성 수용액 또는 알칼리 수용액 중에서 실시하는 것이 바람직하다. 알칼리 수용액으로는, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산수소나트륨 (중조), 탄산나트륨, 인산수소 2 나트륨 등의 각종 알칼리 수용액을 사용할 수 있다. 첨가하는 알칼리 농도는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면 0.05∼0.5N 수산화나트륨을 사용할 수 있다. 수용액의 양은, 당과 단백질의 혼합물, 또는 당과 단백질을 함유하는 식품을 충분히 균일하게 현탁할 수 있는 양이면 되고, 예를 들면 1∼100 배량, 바람직하게는 5∼20 배량으로 한다.

갈변 반응은, 당과 단백질의 혼합물의 5% 수용액에 있어서의 405㎚ 의 흡광도가 0.01, 바람직하게는 0.1 이상이 될 때까지 실시한다. 405㎚ 의 흡광도가 0.01 이상인 것은 갈변 반응이 진행되고 있음을 의미한다. 흡광도는, 예를 들면 5% 수용액 100㎕ 를 마이크로플레이트 리더 (microplate reader) 에 의해 측정한다.

갈변 반응의 조건으로는, 중성 수용액 중에서 실시하는 경우, 반응 온도는 100℃ 이상, 특히 120℃ 이상이 바람직하고, 반응 시간은 통상 20 분 이상이며, 바람직하게는 30 분∼10 시간이다. 또한 알칼리 수용액 중에서 갈변 반응을 실시하는 경우, 반응 온도는 실온에서부터 100℃, 특히 40∼90℃ 가 바람직하고, 반응 시간은 통상 1∼20 시간, 바람직하게는 2∼8 시간이다.

얻어진 갈변 반응 생성물은 그대로 섭취시켜도 되지만, 관용되는 수단, 예를 들면 한외 여과, 이온 교환 수지 등을 이용하여 미반응 당의 제거, 탈염을 실시해도 된다. 또한 등전점 침전, 염석, 유기용매 침전 등, 단백질의 선택적 침전에 사용되는 통상적인 수단에 의해 갈변 반응 생성물을 침전시켜도 된다. 갈변 반응 생성물은 제제화나 식품 등에 대한 첨가를 용이하게 하기 위해, 관용되는 수단, 예를 들면 동결 건조 또는 분무 건조 등의 수단에 의해 건조시키는 것이 바람직하다. 갈변 반응을 중성 수용액 중에서 실시한 경우에는 그대로 건조시켜도 되지만, 상기 서술한 수단에 의해 미반응 당의 제거, 탈염 후에 건조시켜 분말화하는 것이 바람직하다. 갈변 반응을 알칼리 수용액 중에서 실시한 경우에는, 반응 용액을 산 (무기산 및/또는 유기산) 에 의해 중화시켜도 된다. 또한 중화 후 그대로 건조시켜도 되지만, 상기 서술한 수단에 의해 미반응 당의 제거, 탈염 후에 건조시켜 분말화해도 된다.

본 발명의 갈변 반응 생성물은 헬리코박터 파이로리의 접착 인자인 우레아제에 우선적으로 결합함으로써, 위 점막의 수용체에 대한 접착을 저지할 수 있다. 이 때문에 본 발명의 갈변 반응 생성물은, 헬리코박터 파이로리에 대하여 우수한 제균 작용을 가지고 있어, 헬리코박터 파이로리가 관여하는 질환, 예를 들면 소화성 궤양 등의 예방 및 개선에 유용하다. 또 원료가 되는 당 및 단백질은 식품 또는 식품 소재에 유래하는 등 경구 섭취가 가능한 것이고, 갈변 반응도 또한 식품의 가열 조리의 과정에서 항상 일어나는 반응으로서, 본 발명의 갈변 반응 생성물은 매우 안전성이 높아 부작용 등의 우려가 없다. 따라서, 본 발명의 갈변 반응 생성물을 함유하는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제는, 의약이나 식품에 배합하여 헬리코박터 파이로리에 관여하는 질환의 예방 및 개선을 위해 사용할 수 있다.

본 발명의 갈변 반응 생성물로 이루어지는 접착 저해제는, 갈변 반응 생성물을 그대로, 혹은 적당하게 담체나 부형제 (증량제, 결합제 등) 와 함께 통상적인 임의의 제제화 방법에 의해 제조할 수 있다. 필요에 따라서, 기타 첨가제나 약제, 예를 들면 제산제 (탄산수소나트륨, 탄산마그네슘, 침강 탄산칼슘, 합성 히드로탈사이트 (Hydrotalcite) 등), 위 점막 보호제 (합성 규산알루미늄, 수크랄페이트 (sucralfate), 구리 클로로필린나트륨 등) 이나 소화 효소 (바이오디아스타아제 (biodiastase), 리파아제 등) 를 첨가해도 된다. 본 발명의 접착 저해제의 투여는 경구에 의해 실시하고, 투여량은 성인에 대하여 1 일당 갈변 반응 생성물로서 통상 0.01∼10.0g (건조물 중량), 바람직하게는 0.5∼5.0g 이다.

본 발명의 갈변 반응 생성물로 이루어지는 접착 저해제는 위산 분비 억제제를 병용함으로써 한층 더 그 효과를 높일 수 있다. 사용할 수 있는 위산 분비 억제제로는, 예를 들면 파모티딘 (famotidine), 니자티딘(nizatidine), 록사티딘(roxatidine), 라니티딘(ranitidine), 시메티딘 등의 H₂블록커나, 오메프라졸(omeprazole), 란소프라졸, 라베프라졸나트륨 (sodium rabeprazole) 등의 프로톤 펌프 억제제가 있지만, 이들로 한정되지 않는다. 위산 분비 억제제의 투여량은 그 약제에 따라 다르지만, 통상 성인에 대하여 1 일당 10∼50mg, 바람직하게는 20∼30mg 이다.

또한 본 발명의 접착 저해제는, 헬리코박터 파이로리에 대하여 제균 작용을 갖는 다른 물질과 조합시킴으로써 헬리코박터 파이로리의 제균 작용을 더욱 향상시킬 수 있다. 이러한 다른 물질로는, 예를 들면 각종 항생 물질, 폴리페놀, 헬리코박터 파이로리에 대한 항체, 헬리코박터 파이로리의 접착 인자인 우레아제에 결합할 수 있는 다당류 및 당 단백질 등이 포함된다. 또한, 본 발명의 접착 저해제는, 비스무트 제제 등의 위 질환 치료약, 메트로니자졸 등의 구충약과 조합시켜도 된다.

이러한 폴리페놀의 예로는, 카테킨, 갤로카테킨 (gallocatechin), 갤로카테킨 갈레이트 (gallocatechin gallate), 에피카테킨 (epicatechin), 에피카테킨 갈레이트 (epicatechin gallate), 에피갤로카테킨, 에피갤로카테킨 갈레이트, 유리형 테아플라빈 (theaflavin), 테아플라빈모노 갈레이트, 테아플라빈 갈레이트, 라즈베라트롤, 프로안토시아니딘, 케르세틴 (quercetin), 안토시아닌, 술포라판 (Sulforaphane), 이소플라본 등을 들 수 있다. 본 발명의 접착 저해제는, 이들 폴리페놀을 혼합해도 되고, 이들 폴리페놀을 함유하는 차, 카카오, 과일 등의 식품 소재 또는 이들의 추출물에 본 발명의 접착 저해제를 배합해도 된다.

헬리코박터 파이로리에 대한 항체로는, 전체 균체에 대한 항체 및 균 표면 분자에 대한 항체를 들 수 있지만, 입수의 용이함ㆍ제균 작용의 향상 등의 면에서 균 표면 분자에 대한 계란 항체, 특히 헬리코박터 파이로리의 접착에 관여하는 우레아제, 편모에 대한 계란 항체 (일본국 공개특허공보 평10-28758호) 가 바람직하다.

헬리코박터 파이로리의 우레아제에 결합할 수 있는 당 단백질의 예로는, 포유 동물의 소화관 유래의 뮤신, 유청 유래의 뮤신, 계란 난백 유래 뮤신 등의 뮤신, 이들 뮤신을 구성하는 당 단백질을 들 수 있다. 상기 우레아제에 결합할 수 있는 다당류의 예로는, 황산덱스트란 (Antimicrobiol Agents and Chemotherapy, Vol. 44, No.9, pp.2492-2497, 2000), 푸코다인 (Gastroenteroligy, Vol. 119, pp.358-367, 2000 년) 등을 들 수 있다. 또 이 우레아제의 활성을 억제하는 것으로서 프로폴리스 추출물이 있고, 특히 초임계 추출법에 의해 추출한 프로폴리스가 유효하다는 것이 보고되어 있다 (Medical Nutrition, 2003 년 1 월 1 일 호).

또한 항생 물질로는, 페니실린계, 세펨계, 마크로라이드 (Macrolide) 계, 뉴퀴놀론계, 테트라사이클린계의 항생 물질을 들 수 있고, 특히 아목시실린 및 클라리트로마이신이 바람직하다. 항생 물질의 투여량은 그 약제에 따라 다르지만, 보통은 성인에 대하여 1 일당 100∼5000mg, 바람직하게는 500∼3000mg 이다.

본 발명의 갈변 반응 생성물을 함유하는 접착 저해제는 식품에 함유시킴으로써 섭취가 더욱 용이해진다. 본 발명의 갈변 반응 생성물을 식품에 배합할 때의 배합량은 보통 0.5∼10질량％ 정도, 바람직하게는 1.0∼3.0질량％ 이다. 이러한 식품, 예를 들면 건강 식품 및 기능성 식품으로는, 미립, 정제, 과립제, 캡슐제, 유동식 등의 각종 의약형태, 또한 스프류, 쥬스류, 차 음료, 우유 음료, 코코아 음료, 젤리형 음료 등의 액상 식품, 푸딩, 요구르트 등의 반고형 식품, 빵, 과자, 우동 등의 면류, 쿠키, 초콜릿, 캔디, 센베이 (Japanese cracker) 등의 과자,밥에 뿌려 먹는 조미 분말, 버터, 잼 등의 스프레드류 등과 같은 형태를 들 수 있다. 헬리코박터 파이로리에 대하여 제균 작용을 갖는 폴리페놀, 다당류 또는 당 단백질을 많이 함유하는 식품 소재를 사용하는 식품이 바람직하다. 구체적으로는 폴리페놀을 함유하는 과일, 차, 카카오를 사용하는 쥬스류, 차 음료, 코코아 음료, 초콜릿 등, 다당류 또는 당 단백질을 함유하는 우유 음료, 우유 발효 음료 등을 들 수 있다.

또한 특정 보건용 식품으로는 특별히 형태가 한정되지 않지만, 과자류, 분말 스프류, 음료 등과 같이 계속적으로 섭취할 수 있는 것이 바람직하다. 환자용 식품 (저나트륨 식품, 저칼로리 식품, 저단백질 식품) 등으로서, 스프, 음료, 유동식 등의 의료용 식품으로 할 수 있다.

또한 식품에는 각종 식품 첨가물, 예를 들면 각종 영양소, 각종 비타민, 미네랄, 식물 섬유, 다가 불포화 지방산, 분산제 및 유화제 등의 안정제, 감미료, 맛을 내는 성분, 향미료 (flavor) 등을 배합할 수 있다. 또한 액상 식품은 처음부터 액상 식품으로서 조제해도 되지만, 분말 또는 페이스트 형상으로 조제한 후, 소정량의 수성 액체에 용해하는 것이어도 된다.

다음으로 본 발명을 하기의 실시예에 더욱 구체적으로 설명하지만, 이것에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.

실시예 1 카제인과 유당의 알칼리 수용액에서의 갈변 반응

50㎖ 용적의 스피츠관 중의 0.2N NaOH 수용액 10㎖ 에 하기 표와 같은 양의유당과 카제인을 첨가하고, 시험관 믹서로 균일한 현탁액으로 될 때까지 진탕하였다. 50℃ 의 수욕에서 4 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. 0.2N HCl 을 반응액의 pH 가 7.0 이 될 때까지 첨가하였다. 중화한 반응액을 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예	유당	카제인
1-1	100㎎	900㎎
1-2	300㎎	700㎎
1-3	400㎎	600㎎
1-4	500㎎	500㎎

실시예 2 카제인나트륨과 유당의 수용액에서의 갈변 반응

50㎖ 용적의 스피츠관 중의 증류수 10㎖ 에 유당 400mg 과 카제인나트륨 600mg 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 용해시켰다. 고압 멸균기에서, 120℃, 20 분간 갈변 반응을 실시하였다. 그 다음에, 반응 용액을 동결 건조시켜, 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 3 β-락토글로불린과 유당의 갈변 반응

15㎖ 용적 스피츠관 중의 0.2N NaOH 수용액 1.0㎖ 에 유당 40mg 과 β-락토글로불린 60mg 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 용해시켰다. 50℃ 의 수욕에서 4 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. 0.2N HCl 을 반응액의 pH 가 7.0 으로 될 때까지 첨가하였다. 중화한 반응액을 Sephadex G-25 (Amersham-Pharmacia) 를 사용한 겔 여과에 의해 탈염하고, 이어서 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 4 α-락토알부민과 유당의 갈변 반응

15㎖ 용적 스피츠관 중의 0.2N NaOH 수용액 1.0㎖ 에 유당 40mg 과 α-락토알부민 60mg 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 용해시켰다. 50℃ 의 수욕에서 4 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. 실시예 3 과 동일한 방법으로 중화하여 탈염하고, 이어서 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 5 탈지분유의 갈변 반응

우유 분말 (쿄프로 E-22, 쿄우도우유업 제조) 1.0g 을 0.2N NaOH 수용액 10㎖ 에 첨가하였다. 교반하여 균일한 현탁액으로 한 후, 50℃ 의 수욕에서 4 시간 방치하여, 갈변 반응을 실시하였다. 반응액을 실시예 3 과 동일한 방법으로 중화하고, 이어서 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 6 유청의 갈변 반응

유청 (SIMPLESSE 100, CPKelco 사 제조) 1.0g 을 0.2N NaOH 수용액 10㎖ 에 첨가하였다. 교반에 의해 균일한 현탁액으로 한 후, 50℃ 의 수욕에서 4 시간 방치하여, 갈변 반응을 실시하였다. 반응액을 실시예 3 과 동일한 방법으로 중화하고, 이어서 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 7 카제인나트륨과 포도당의 갈변 반응

증류수 100㎖ 에 포도당 4g 과 카제인나트륨 6g 을 첨가하고, 고형물이 용해될 때까지 교반하였다. 고압 멸균기에서, 하기 표에 나타내는 반응 온도 및 반응 시간으로 갈변 반응을 실시하였다. Sephadex G-25 (Amersham-Pharmacia 사 제조) 를 이용한 겔 여과에 의해 저분자 구분을 제거한 후, 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예	반응 온도	반응 시간
7-1	110℃	30 분간
7-2	120℃	10 분간
7-3	120℃	40 분간

실시예 8 카제인나트륨과 유당의 탄산수소나트륨을 사용한 갈변 반응

1.5㎖ 용적 마이크로튜브 중의 증류수 1㎖ 에 카제인나트륨 60mg 과 유당 40mg 과 탄산수소나트륨 42mg 을 첨가하고, 교반에 의해 용해시켰다. 히트 블록으로 90℃, 5 시간 갈변 반응을 실시하였다. Sephadex G-25 (Amersham-Pharmacia) 를 사용한 겔 여과에 의해 탈염한 후, 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 9 대두 단백질의 갈변 반응

50㎖ 용적 스피츠관 중의 0.2N NaOH 수용액 10.0㎖ 에, 유당 400mg 과 대두 단백질 분말 600mg (와코쥰야꾸 제조) 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 현탁하였다. 40℃ 의 수욕에서 5 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. 0.6N HCl 을 반응액의 pH 가 7.0 이 될 때까지 첨가하였다. 중화한 반응액을 동결 건조시켜, 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 10 밀 알부민의 갈변 반응

50㎖ 용적 스피츠관 중의 0.2N NaOH 수용액 10.0㎖ 에 유당 400mg 과 밀 알부민 600mg (니신파마 제조) 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 용해시켰다. 40℃ 의 수욕에서 5 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. 반응액을 실시예 9 와 동일하게 중화하고, 이어서 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 11 난(卵) 알부민의 갈변 반응

50㎖ 용적 스피츠관 중의 0.2N NaOH 수용액 10.0㎖ 에, 유당 400mg 과 난 유래 알부민 600mg (와코쥰야꾸 제조) 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 용해시켰다. 40℃ 의 수욕에서 5 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. 반응액을 실시예 9 와 동일한 방법으로 중화하고, 이어서 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 12 제인과 유당의 갈변 반응

50㎖ 용적 스피츠관 중의 0.2N NaOH 수용액 10.0㎖ 에 유당 400mg 과 제인 600mg (와코쥰야꾸 제조) 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 현탁하였다. 40℃ 의 수욕에서 5 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. 반응액을 실시예 9 와 동일한 방법으로 중화하고, 이어서 동결 건조시켜 갈색의 분말을 얻었다.

실시예 13 카제인과 크실로오스의 인산수소 2 나트륨을 사용한 갈변 반응

에펜도르프(Eppendorf) 튜브 중의 0.1㏖/L 인산수소 2 나트륨 수용액 1.0㎖ 에 크실로오스 40mg 과 카제인 60mg 을 첨가하고, 시험관 믹서로 진탕하여 현탁하였다. 85℃ 의 히트 블록에 의해 2 시간 가온하여, 갈변 반응을 실시하였다. Sephadex G-25 (Amersham-Pharmacia 사 제조) 를 사용한 겔 여과에 의해 저분자 분획을 제거한 후, 동결 건조시켜, 갈색의 분말을 얻었다.

시험예 1 갈변 반응의 진전 측정

갈변 반응의 진전을 405㎚ 에서의 흡광도에 의해 측정하였다.

실시예 1∼13 에서 제조한 갈변 반응 생성물 50mg 을 증류수 1㎖ 에 용해하였다. 10,000G 에서 15 분간 원심 분리하여, 상청 100㎕ 를 96 웰 플레이트 (NUNC immunoplate, 주문 번호 442404) 에 주입하였다. 마이크로플레이트 리더 (Molecular Device 사 Versa Max) 에 의해 650㎚ 의 흡광도를 대조 파장으로 했을 때의 405㎚ 의 흡광도를 측정하였다. 표 3 에 나타낸 바와 같이, 실시예의 갈변 반응 생성물이 0.1 이상의 흡광도를 나타내고 있고, 모든 실시예에 있어서 갈변 반응이 충분히 진전되었던 것이 확인되었다.

실시예	흡광도 (405㎚, 대조 파장 650㎚)
1-1	0.363
1-2	0.956
1-3	1.017
1-4	1.03
2	0.128
3	1.761
4	1.911
5	1.431
6	1.302
7-1	0.164
7-2	0.582
7-3	1.219
8	1.893
9	0.601
10	0.561
11	0.455
12	0.347
13	0.807

시험예 2 헬리코박터 파이로리 접착 저해 활성의 측정

실시예 1∼13 의 갈변 반응 생성물에 대해서, 헬리코박터 파이로리의 접착 인자인 우레아제의 위 점막에 대한 접착 저해 효과를 다음과 같은 방법으로 시험관 내 실험계에 있어서 조사하였다. 또, 헬리코박터 파이로리의 접착 인자인 우레아제가 위 점막 뮤신과 특이적인 결합을 함으로써 파이로리균이 숙주인 위에 정착한다. 따라서, 이 헬리코박터 파이로리의 우레아제와 위 뮤신의 접착을 보다저농도에서 저해하는 것이, 보다 강한 헬리코박터 파이로리 접착 저해 활성을 갖는 것이다.

(실험 재료 및 방법)

본 접착 저해 시험에 사용하는 우레아제 및 돼지 위 뮤신의 제조는, 다음과 같이 실시하였다.

(1) 우레아제의 제조

헬리코박터 파이로리 #130 주 (도카이대학 의학부 감염증학교실로부터 입수) 의 브루셀라 브로오즈 (brucella brose) 배양균액 (3.5 ×10⁸CFU/㎖) 을 12,000×G 로 20 분간 원심한 후, 펠릿을 정제수에 용해하고, 볼텍스 믹서로 60 초간 처리하였다. 다시 원심하여, 우레아제를 함유하는 추출 상청액을 얻었다. 정제는 다음에 나타낸 방법에 의해 실시하였다.

완충액 (20mM 인산염, pH6.8, 1mM EDTA, 1mM 2-메르캅토에탄올 및 10％ PEG 300) 으로 평형화한 DEAE-세파셀 칼럼에 상기 추출액을 적용하여. 0.5㎖/분의 유속으로 겔에 흡착시켰다. 용출은 0∼0.5M KCl 의 농도 구배에 의해 실시하였다. 각 분획액에 대해서 우레아제 활성을 모니터하였다. 우레아제 활성의 피크가 인정된 분획을 풀(pool)하여, 농축하였다. 다음으로 완충액 (20mM 인산염, pH6.8, 150mM NaCl) 으로 평형화한 세파크릴 S-300 칼럼에 상기 농축액을 적용하여 용출하였다. 각 분획액의 우레아제 활성을 측정하고, 우레아제 활성의 피크를 각각 풀하여 SDS-PAGE 로 분석한 결과, 우레아제 A (32kDa) 와 우레아제 B (60kDa)의 단백질로 이루어지는 것을 확인하였다. 우레아제는, 사용할 때까지 소(小) 분류하여 -80℃ 에서 보존하였다.

(2) 돼지 위 뮤신의 조제

약 2 개월된 건강한 돼지를 도살하여 위(胃)부를 적출하고, 내부에 0.1M 인산염＋0.15M NaCl＋5mM N-에틸말레이미드 (NEM) ＋1mM 페닐메틸술포닐플루오라이드 (PMSF)＋1mM EDTA 함유 PBS (pH7.4) 를 첨가하여 세정하였다. 위를 절개하고, 점막을 깎아내어 상기의 완충액에 부유시켰다. 이 점막 부유액을 빙냉하면서 폴리트론 호모게나이저를 사용하여 균일하게 하였다. 이것을 15,000×G 로 원심하여 상청을 얻었다. 이 상청을 25,000×G 로 다시 원심하고, 상청을 회수하여 증류수로 투석한 후, 동결 건조시켜 조(粗)정제 위 뮤신을 얻었다. 이어서, 이 건조 조정제 위 뮤신을 PBS (pH6.8) (6M 염산구아니딘 및 프로테아제 억제제 (5mM NEM, 1mM PMSF, 1mM EDTA) 를 함유한다) 에 용해하고, 이것을 염화세슘 밀도 구배 (1.5g/㎖) 에 중층하여, 34,000×g 에서 48 시간 원심하였다. 시알산 함유 분획의 검출은 니트로셀룰로오스막 블로팅과 과(過)요오드산 시프 시약 (Schiff's reagent) 에 의한 염색에 의해 실시하였다. 발색시킨 분획을 풀하고, 다시 염화세슘 밀도 구배에 중층하여 원심하였다. 염색 양성 분획을 풀하여, 동결 건조시켰다. 이어서, 0.1M 인산 완충액 (0.1M NaCl 함유, pH6.8) 으로 평형화한 세파로스 CL-4B 칼럼을 통과시켜 겔 여과하고, 분획하였다. PAS 염색 양성에서, 단백질 농도가 높은 분획을 풀하고, PBS (pH6.8) 로 투석하여, 정제 돼지 위 뮤신을 얻었다. 이것을 사용할 때까지 -80℃ 로 보존했다 (정제 돼지 위 뮤신). 또, 정제 돼지 위 뮤신은 SDS-PAGE 의 결과, 66kD 의 당 단백질인 것을 인정하였다.

또, 돼지 정제 위 뮤신은, 통상적인 방법에 따라 비오틴화하여, 분석에 사용하였다.

(3) 헬리코박터 파이로리 우레아제 접착 저해 시험

96 웰 마이크로플레이트의 각각의 웰에 미리 5㎍/㎖ 의 농도로 제조한 헬리코박터 파이로리 우레아제의 0.05M 탄산나트륨 완충 용액을 50㎕ 씩 첨가하고, 4℃ 에서 하룻밤 정치하여, 웰에 우레아제를 흡착시켰다. 각 웰을 0.05% 트윈 20 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH7.0) 150㎕ 로 3 회 세정 후, 3% 소혈청 알부민 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH7.0) 150㎕ 을 첨가하였다. 37℃, 1 시간 정치함으로써 블로킹하였다. 용액을 제거한 후, 0.05% 트윈 20 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH7.0) 150㎕ 로 3 회 세정하였다.

2.5㎍/㎖ 의 비오틴화 돼지 위 뮤신과 시험 샘플의 일정 농도를 함유하는 0.05% 트윈 20 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH4.0) 50㎕ 를 각각의 웰에 첨가하고, 37℃ 에서 1 시간 정치하여, 우레아제에 비오틴화 돼지 위 뮤신을 접착시켰다. 웰로부터 용액을 제거하고, 0.05% 트윈 20 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH4.0) 150㎕ 로 3 회 세정 후, 65℃ 에서 10 분간 정치하여 단백질을 고정하였다. 0.05% 트윈 20 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH7.0) 150㎕ 로 3 회 세정 후, 퍼옥시다아제 표지 스트렙타비딘의 0.05% 트윈 20 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH7.0) 50㎕ 를 첨가하여, 실온에서 1 시간 정치하였다. 0.05% 트윈 20 함유 인산 완충 생리 식염수 (pH7.0) 150㎕ 로 5 회 세정 후, 오르토-페닐렌디아민 2 염산 및 H₂O₂를 함유하는 기질 용액 (pH4.5) 50㎕ 을 각 웰에 첨가하여 퍼옥시다아제 반응을 실시하였다. 실온에서 5 분간 반응시킨 후, 2N 황산 50㎕ 을 첨가하여 효소 반응을 정지시켰다. 각 웰의 490㎚ 의 흡광도를 측정하였다.

접착 저해 활성은, 다음의 계산식에 의해 산출하였다.

접착 저해 활성(%) = [1-(샘플 첨가 웰의 흡광도/샘플 무첨가 웰의 흡광도)]×100

(4) 결과

실시예 1∼13 의 갈변 반응 생성물의 100㎍/㎖ 의 농도에서의 접착 저해 활성을 측정한 결과, 모든 생성물이 파이로리균 헬리코박터 파이로리의 우레아제와 돼지 위 뮤신의 결합을 강하게 저해하는 것이 분명해졌다. 이들 결과를 표 4 에 나타낸다.

갈변 반응 생성물의 결합 저해 활성
실시예	결합 저해 활성 (%)
1-1	70
1-2	78
1-3	84
1-4	81
2	60
3	72
4	66
5	82
6	69
7-1	50
7-2	52
7-3	43
8	66
9	63
10	38
11	62
12	16
13	48

시험예 3 헬리코박터 파이로리 제균 생체 내 실험

(방법)

실험 동물로서 헬리코박터 파이로리 감염에 대하여 고감수성의 NS:Hr/ICR 계 헤어리스 마우스 (재단법인 동물번식 연구소, 수탁 번호 IAR-NHI-9701; ATCC#72024) (Clin. Diagn. Lab. Immunol. 5; 578-582, 1998) 를 사용하였다. NSP 335 주 (1×10⁹CFU/마우스) 를 마우스에 경구 섭취시켜 1 주일간 사육한 후, 마우스용 사료에 실시예 5 의 갈변 반응 생성물 또는 실시예 8 의 갈변 반응 생성물을 섞어 사료로 만들어, 10 주간 공급하였다. 공시(供試) 마우스수는 각 군 모두 6 마리로 하였다. 10 주간 후에 각 군의 마우스를 도살하고 위를 적출하여 내용물을 제거한 후, 호모게나이저로 현탁액을 제조하였다. 현탁액을 헬리코박터 파이로리 검출용 시료로 하였다.

헬리코박터 파이로리의 검출은, 현탁액을 헬리코박터 파이로리 검출용 배지(포어메디아 헬로코박터 분리 배지, 에이켄가가꾸) 에 접종하고, 가스팩법으로 37℃, 3 일간 배양하여 콜로니수를 계측함으로써 실시하였다. 갈변 반응 생성물을 첨가하지 않는 사료를 공급한 군을 대조군으로 하고, 대조군의 평균 콜로니수를 100 으로 하여 산출하였다. 얻어진 결과를 하기 표 5 에 나타낸다.

헬리코박터 파이로리의 제균 효과
갈변 반응 생성물	0.025% 혼합 사료	0.25% 혼합 사료	2.5% 혼합 사료
실시예 5	11	4	12
실시예 8	48	18	10

이상의 결과로부터, 본 발명의 갈변 반응 생성물을 투여함으로써 마우스 위 내의 헬리코박터 파이로리의 균수가 대폭 감소하였다. 또한 실시예 5 및 8 의 갈변 반응 생성물 투여군에 있어서, 헬리코박터 파이로리가 검출되지 않았던 마우스도 확인하였다. 이들 결과로부터, 본 발명의 갈변 반응 생성물은 헬리코박터 파이로리에 대하여 우수한 제균 작용을 갖는 것이 분명해졌다.

시험예 4 헬리코박터 파이로리 제균 생체 내 실험

이하에, 본 발명의 갈변 반응 생성물과 위산 분비 억제제, 헬리코박터 파이로리에 대하여 제균 작용을 갖는 각종 물질의 조합의 효과를 시험하였다.

시험예 3 과 동일하게, 실시예 5 의 갈변 반응 생성물 (0.25% 혼합 사료), 파모티딘 (0.01% 혼합 사료), 헬리코박터 파이로리의 우레아제에 대한 계란 항체 (0.25% 혼합 사료), 우유청 유래의 뮤신 (0.25% 혼합 사료), 카제인나트륨 (0.25% 혼합 사료), 카테킨 (0.25% 혼합 사료), 푸코이단 (Fucoidan: 0.25% 혼합 사료), 오메프라졸 (0.01% 혼합 사료), 클라리트로마이신 (0.1% 혼합 사료), 아목시실린(0.1% 혼합 사료), 텍스트란황산 (0.25% 혼합 사료), 프로폴리스 추출물 (0.25% 혼합 사료), 혹은 초임계 추출 프로폴리스 (0.25% 혼합 사료) 단독, 또는 갈변 반응 생성물과 이들 중 어느 하나를 조합시켜서 헬리코박터 파이로리 감염 마우스에 공급하였다. 10 주일 후, 마우스 위 내의 헬리코박터 파이로리를 검출하였다. 그 결과, 모든 단독 투여예에 있어서 본 발명의 갈변 반응 생성물만인 예와 비교하여 제균률이 향상되었다. 이들 결과를 하기 표 6 에 나타낸다.

시험시료	제균 작용
갈변 반응 생성물	＋＋
파모티딘	-
계란 항체	＋＋
우유청 유래 뮤신	＋＋
카제인나트륨	＋
카테킨	＋
푸코이단	＋
오메프라졸	-
클라리트로마이신	＋＋
아목시실린	＋＋
덱스트란황산	＋＋
프로폴리스	±
초임계 추출 프로폴리스	＋
갈변 반응 생성물＋파모티딘	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋계란 항체	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋우유청 유래 뮤신	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋카제인나트륨	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋카테킨	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋푸코이단	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋오메프라졸	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋클라리트로마이신	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋아목시실린	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋덱스트란황산	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋프로폴리스	＋＋＋
갈변 반응 생성물＋초임계 추출 프로폴리스	＋＋＋

이하에, 본 발명의 갈변 반응 생성물을 함유하는 의약의 제제예 및 식품의 배합예를 나타낸다.

실시예 14 건조 스프

하기 배합으로 다음과 같이 건조 스프를 제조하였다.

고기 엑기스, 양파 엑기스, 당근 페이스트, 다시마 엑기스, 식염, 조미료를 첨가하여 교반기로 교반 후, 유화제를 첨가하여 다시 교반하였다. 다음으로, 갈변 반응 생성물, 잘 푼 계란을 첨가하여 혼합하였다. 마지막으로 향신료를 첨가하여 교반 혼합한 후 동결 건조시켜, 건조 스프를 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 23계란 26고기 엑기스 5양파 엑기스 17당근 페이스트 21다시마 엑기스 1유화제 1식염 2향신료 (레드 페퍼) 2조미료 (아미노산 등) 2

전량 100 (질량%)

실시예 15 세립제

하기 배합으로 습식 조립(造粒)법에 의해 조립하여 미세입자를 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 45유당 (부형제) 35옥수수 전분 15폴리비닐피롤리돈 PVP(K-30) 5

전량 100 (질량%)

실시예 16 의료용 식품 유동식

하기 배합으로 의료용 식품 유동식 (200㎖/팩) 을 제조하였다.

소량의 물에 미네랄류, 인산나트륨, 인산칼륨을 첨가하여 교반한 후, 갈변 반응 생성물, 말토덱스트린, 카제인나트륨, 유화제, 유단백질, 소량의 물을 첨가하여, 50℃ 정도까지 가온하고 교반하였다. 현탁 후, 실온까지 냉각하고, 식물오일, 비타민류, 향료, 안정제, 잔량의 물을 첨가하여 갈변 반응 생성물이 함유된 의료용 유동식을 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 3.6말토덱스트린 38.0카제인나트륨 13.0식물오일 12.0비타민류 1.0미네랄류 1.5유화제 0.2유단백질 10.3인산나트륨 1.8인산칼륨 1.2향료 0.5안정제 (카라기닌) 1.5물 잔량

전량 100 (질량%)

실시예 17 정제(錠劑)

통상적인 습식 과립 압축법에 의해 정제를 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 40.0D-만니톨 20.0유당 20.0결정 셀룰로오스 10.0히드록시프로필셀룰로오스 5.0시트르산 5.0

전량 100 (질량%)

실시예 18 차 음료

이하의 배합에 의해, 다음과 같은 방법으로 차 음료 (녹차 음료 및 우롱차 음료) 를 제조하였다.

물 100㎖ 에 대하여, 녹차 3g 을 85℃ 에서 5 분간 추출한 녹차 추출액을 제조하였다. 또는, 물 100㎖ 에 대하여, 우롱차 4g 을 95℃ 에서 5 분간 추출한 우롱차 추출액을 제조하였다. 갈변 반응 생성물과 그 5 배량의 녹차 추출액 또는 우롱차 추출액을 첨가하여 교반하였다. 갈변 반응 생성물을 현탁한 후, 나머지 차 추출액을 첨가하여 갈변 반응 생성물이 함유된 차 음료를 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 1녹차 추출액 99

전량 100 (질량%)

실시예 19 코코아 음료

하기 배합으로 코코아 음료를 제조하였다.

갈변 반응 생성물에 코코아 (모리나가유업 제조) 를 첨가하여 교반하였다. 갈변 반응 생성물의 5 배량의 온수 (80℃ 정도) 를 첨가하여, 교반·현탁하였다. 현탁 후, 남은 온수와 우유를 첨가하여 코코아 음료를 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 5코코아 5우유 20물 70

전량 100 (질량%)

실시예 20 커피 음료

하기 배합으로 커피 음료를 제조하였다.

물 100㎖ 에 대하여 갈은 커피 원두 6g 을 95℃ 에서 1 분간 추출하여 커피 추출액으로 하였다. 갈변 반응 생성물에 대하여, 5 배량의 커피 추출액, 설탕을 첨가한 후, 교반하고 현탁하였다. 남은 커피 추출액과 우유를 첨가하여 갈변 반응 생성물이 함유된 커피 음료를 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 2설탕 1우유 30커피 추출액 67

전량 100 (질량%)

실시예 21 바나나 밀크쉐이크

하기 배합으로 바나나 밀크쉐이크를 제조하였다.

갈변 반응 생성물과 우유와 바나나를 가정용 믹서에 넣어 현탁하였다. 마지막으로 비타민 C 를 첨가하여 갈변 반응 생성물이 함유된 바나나 밀크쉐이크음료를 얻었다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 2비타민 C 0.5우유 40바나나 57.5

전량 100 (질량%)

실시예 22 밥에 뿌려 먹는 조미 분말

하기 배합으로 밥에 뿌려 먹는 조미 분말을 제조하였다.

본 발명의 갈변 반응 생성물 40조미 가다랑이포 25조미 흰깨 20조미 김 10비타민 E 5

전량 100 (질량%)

실시예 23 발효유 음료

본 발명의 갈변 반응 생성물 5g 에 유산균이 함유된 발효유 (야쿠르트사 제조) 25g 을 첨가하여 현탁하였다. 현탁 후, 유산균이 함유된 발효유 70g 을 첨가하여, 갈변 반응 생성물이 함유된 발효유 음료를 얻었다.

실시예 24 우유 음료

본 발명의 갈변 반응 생성물 5g 에 우유 25g 를 첨가하여 현탁하였다. 현탁 후, 우유 70g 을 첨가하여 갈변 반응 생성물이 함유된 우유 음료를 얻었다.

본 발명에 의하면, 헬리코박터 파이로리에 대하여 우수한 제균 작용을 갖고 안전성이 높으며, 부작용 등의 우려가 없는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제가 제공된다. 본 발명의 정착 저해제는, 종래부터 사용되어 온 항생 물질과 같이 내성균의 문제도 발생하지 않고, 위 내의 헬리코박터 파이로리를 특이적으로 제균할수 있다. 이 때문에, 본 발명의 헬리코박터 파이로리 접착 저해제, 그리고 이것을 함유하는 의약 및 식품은, 헬리코박터 파이로리에 관련되는 질환, 예를 들면 소화성 궤양 등의 예방 및 개선에 유용하다.

Claims

당과 단백질의 갈변 반응 생성물을 유효 성분으로 하는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제.
제 1 항에 있어서, 단백질이 밀, 보리, 쌀, 옥수수, 대두, 팥 유래의 식물성 단백질 및 우유, 란(卵), 생선, 고기 유래의 동물성 단백질로 이루어지는 군에서 선택되는 1 종 이상인 헬리코박터 파이로리 접착 저해제.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 당이, D-글루코오스, D-프룩토오스, D-만노오스, D-갈락토오스, D-크실로오스, L-아라비노오스, D-리보오스 및 유당으로 이루어지는 군에서 선택되는 1 종 이상인 헬리코박터 파이로리 접착 저해제.
수용액 중에서, 당과 단백질을 갈변 반응시키는 공정을 포함하는, 헬리코박터 파이로리 접착 저해제의 제조 방법.
수용액 중에서, 당과 단백질을 함유하는 식품에 갈변 반응을 일으키는 공정을 포함하는, 헬리코박터 파이로리 접착 저해제의 제조 방법.
제 4 항 또는 제 5 항에 있어서, 단백질이 밀, 보리, 쌀, 옥수수, 대두, 팥유래의 식물성 단백질 및 우유, 란, 생선, 고기 유래의 동물성 단백질로 이루어지는 군에서 선택되는 1 종 이상인 방법.
제 4 항 또는 제 5 항에 있어서, 당이, D-글루코오스, D-프룩토오스, D-만노오스, D-갈락토오스, D-크실로오스, L-아라비노오스, D-리보오스 및 유당으로 이루어지는 군에서 선택되는 1 종 이상인 방법.
제 5 항에 있어서, 상기 식품이 생우유, 우유분말, 탈지분유, 유청 또는 연유인 방법.
제 4 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 갈변 반응을, 5% 수용액으로 측정하여 405㎚ 의 흡광도가 0.01 이상이 될 때까지 실시하는 방법.
당과 단백질의 갈변 반응 생성물과 위산 분비 억제제로 이루어지는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제.
당과 단백질의 갈변 반응 생성물과 헬리코박터 파이로리에 대하여 제균 작용을 가지는 다른 물질로 이루어지는 헬리코박터 파이로리 접착 저해제.
제 11 항에 있어서, 상기 물질이, 폴리페놀, 항생 물질, 헬리코박터 파이로리에 대한 항체, 헬리코박터 파이로리의 접착 인자인 우레아제에 결합할 수 있는 다당류 및 당 단백질로 이루어지는 군에서 선택되는 1 종 이상인 접착 저해제.
제 1 항 내지 제 3 항 및 제 10 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 기재된 헬리코박터 파이로리 접착 저해제를 함유하는, 헬리코박터 파이로리에 관련되는 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약 조성물.
제 1 항 내지 제 3 항 및 제 10 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 기재된 헬리코박터 파이로리 접착 저해제를 함유하는, 헬리코박터 파이로리에 관련되는 질환의 예방 또는 개선을 위한 식품.