JPH10245344A - ウレアーゼ活性阻害剤の製造方法 - Google Patents
ウレアーゼ活性阻害剤の製造方法Info
- Publication number
- JPH10245344A JPH10245344A JP9049141A JP4914197A JPH10245344A JP H10245344 A JPH10245344 A JP H10245344A JP 9049141 A JP9049141 A JP 9049141A JP 4914197 A JP4914197 A JP 4914197A JP H10245344 A JPH10245344 A JP H10245344A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- solution
- urease
- activity
- precipitates
- pylori
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 ピロリ菌が産生するウレアーゼの活性に対
し、大きい阻害作用を有し、しかも長期にわたって安全
に投与しうる薬剤を提供する。 【解決手段】 ケイヒの水抽出液を濃縮後、清澄液を分
離し、これを０℃〜１０℃の温度に維持し、生成する沈
殿を捕集し、乾燥する。
し、大きい阻害作用を有し、しかも長期にわたって安全
に投与しうる薬剤を提供する。 【解決手段】 ケイヒの水抽出液を濃縮後、清澄液を分
離し、これを０℃〜１０℃の温度に維持し、生成する沈
殿を捕集し、乾燥する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ウレアーゼ特にヘ
リコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ
ｐｙｌｏｒｉ）によって産生されるウレアーゼの活性を
効率よく阻害しうるウレアーゼ活性阻害剤の製造方法に
関するものである。
リコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ
ｐｙｌｏｒｉ）によって産生されるウレアーゼの活性を
効率よく阻害しうるウレアーゼ活性阻害剤の製造方法に
関するものである。
【０００２】
【従来の技術】１９８３年に胃炎又は胃潰瘍患者の胃粘
膜生検組織から、カンピロバクター・ピロリ（Ｃａｍｐ
ｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）が高率に検出され
ることが報告［「ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）」第１２
７３〜１２７５ページ（１９８３年）］されて以来、胃
炎あるいは胃・十二指腸潰瘍の発症に、この菌が関与し
ていることが次第に明らかにされてきた。この菌は、そ
の後、カンピロバクター属の他の菌とは別属に属するこ
とが証明され、ヘリコバクター・ピロリ（以下、単に
「ピロリ菌」ということがある）と改名され、胃炎ある
いは胃・十二指腸潰瘍疾患との関連性が深いことが、臨
床的にも明らかになってきた。
膜生検組織から、カンピロバクター・ピロリ（Ｃａｍｐ
ｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）が高率に検出され
ることが報告［「ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）」第１２
７３〜１２７５ページ（１９８３年）］されて以来、胃
炎あるいは胃・十二指腸潰瘍の発症に、この菌が関与し
ていることが次第に明らかにされてきた。この菌は、そ
の後、カンピロバクター属の他の菌とは別属に属するこ
とが証明され、ヘリコバクター・ピロリ（以下、単に
「ピロリ菌」ということがある）と改名され、胃炎ある
いは胃・十二指腸潰瘍疾患との関連性が深いことが、臨
床的にも明らかになってきた。
【０００３】このピロリ菌は、胃粘膜、特に胃の出口で
ある幽門部に好んで感染するグラム陰性のらせん状桿菌
であり、鞭毛をもつ微好気性菌である。ピロリ菌自体は
酸には弱いが、他の菌とは異なりウレアーゼを体表面に
もつことから、宿主由来の胃内の尿素をアンモニアに分
解して胃酸を中和するため、胃の中での生育が可能とな
る。
ある幽門部に好んで感染するグラム陰性のらせん状桿菌
であり、鞭毛をもつ微好気性菌である。ピロリ菌自体は
酸には弱いが、他の菌とは異なりウレアーゼを体表面に
もつことから、宿主由来の胃内の尿素をアンモニアに分
解して胃酸を中和するため、胃の中での生育が可能とな
る。
【０００４】このようなピロリ菌について、ＮＩＨ（Ｎ
ａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａ
ｌｔｈ）は、１９９４年２月に「ヘリコバクター・ピロ
リ陽性の消化性潰瘍症例は、初回あるいは再発にかかわ
らず除菌すべきである」と勧告声明を出しており、ま
た、ＷＨＯ（Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉ
ｚａｔｉｏｎ）は、１９９４年に、ヘリコバクター・ピ
ロリは高率に発がんを誘発するものと認定している。
ａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａ
ｌｔｈ）は、１９９４年２月に「ヘリコバクター・ピロ
リ陽性の消化性潰瘍症例は、初回あるいは再発にかかわ
らず除菌すべきである」と勧告声明を出しており、ま
た、ＷＨＯ（Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉ
ｚａｔｉｏｎ）は、１９９４年に、ヘリコバクター・ピ
ロリは高率に発がんを誘発するものと認定している。
【０００５】ピロリ菌が胃内に定着・増殖し、病原性を
発揮する機構としては、ピロリ菌は、他の大腸菌と同じ
ように経口的に胃に到達し、鞭毛を使って粘液層を泳い
で胃粘膜層に至り、接着（癒着）し、ここで自ら産生す
るウレアーゼによって、宿主由来の尿素を分解し、アン
モニアを生成して胃酸を中和し、好ましい生活環境を整
備して増殖を開始するが、この際ピロリ菌が合成するア
ンモニアは、胃の粘膜の表面を覆う粘液を剥がして、粘
膜をむき出しの状態にするため、粘膜は胃酸にさらされ
て、炎症が起こるためであると一般に考えられている。
発揮する機構としては、ピロリ菌は、他の大腸菌と同じ
ように経口的に胃に到達し、鞭毛を使って粘液層を泳い
で胃粘膜層に至り、接着（癒着）し、ここで自ら産生す
るウレアーゼによって、宿主由来の尿素を分解し、アン
モニアを生成して胃酸を中和し、好ましい生活環境を整
備して増殖を開始するが、この際ピロリ菌が合成するア
ンモニアは、胃の粘膜の表面を覆う粘液を剥がして、粘
膜をむき出しの状態にするため、粘膜は胃酸にさらされ
て、炎症が起こるためであると一般に考えられている。
【０００６】そして、ピロリ菌が、このようにして粘膜
に住みつくと、インターロイキン（生理活性物質）を生
じ、その結果、リンパ球が増え、好中球（いずれも白血
球の仲間）に作用して活性化をもたらす。好中球の活性
化によって次亜塩素酸を生じ、この次亜塩素酸がアンモ
ニアと反応して、細胞に傷害を与える作用が強いモノク
ロラミンを生成する。このようにして炎症を起すことに
なるが、この際、ストレスなどによって胃酸の分泌が過
剰になると、粘膜はさらに傷付けられ、炎症が潰瘍に進
んでいくと考えられている。
に住みつくと、インターロイキン（生理活性物質）を生
じ、その結果、リンパ球が増え、好中球（いずれも白血
球の仲間）に作用して活性化をもたらす。好中球の活性
化によって次亜塩素酸を生じ、この次亜塩素酸がアンモ
ニアと反応して、細胞に傷害を与える作用が強いモノク
ロラミンを生成する。このようにして炎症を起すことに
なるが、この際、ストレスなどによって胃酸の分泌が過
剰になると、粘膜はさらに傷付けられ、炎症が潰瘍に進
んでいくと考えられている。
【０００７】ところで、これまでこのようにして起こる
胃炎或は胃・十二指腸潰瘍の予防及び治療に、抗ヘリコ
バクター・ピロリ活性を有する抗生物質などを利用しよ
うとする試みが、種々行われてきた。例えば、ペニシリ
ン、アンピシリンなどのβラクタム剤、エリスロマイシ
ン、クラリスロマイシンなどのマクロライド剤、ストレ
プトマイシン等のアミノグリコシド剤、あるいはテトラ
サイクリン剤等の抗生物質、及びビスマス製剤のような
ピロリ菌に対して強い抗菌作用を示すものを投与するこ
とや、また、最近では、Ｈ2受容体拮抗剤、プロトンポ
ンプ阻害剤などの抗消化性潰瘍剤において、ピロリ菌に
対する抗菌活性を併せもつ薬剤の開発も行われている。
胃炎或は胃・十二指腸潰瘍の予防及び治療に、抗ヘリコ
バクター・ピロリ活性を有する抗生物質などを利用しよ
うとする試みが、種々行われてきた。例えば、ペニシリ
ン、アンピシリンなどのβラクタム剤、エリスロマイシ
ン、クラリスロマイシンなどのマクロライド剤、ストレ
プトマイシン等のアミノグリコシド剤、あるいはテトラ
サイクリン剤等の抗生物質、及びビスマス製剤のような
ピロリ菌に対して強い抗菌作用を示すものを投与するこ
とや、また、最近では、Ｈ2受容体拮抗剤、プロトンポ
ンプ阻害剤などの抗消化性潰瘍剤において、ピロリ菌に
対する抗菌活性を併せもつ薬剤の開発も行われている。
【０００８】しかしながら、従来の抗生物質などの投与
では、長期投与時の安全性が問題とされており、また、
再発のおそれがある上、耐性菌が発生するおそれもあ
る。従来の薬剤の中でも臨床的に応用されてきているも
のもあるが、その評価が一定せず、安全で長期投与が可
能である有効な薬剤は、これまで見出されていないのが
実情であり、このような状況から、有効で安全な胃炎或
は胃・十二指腸潰瘍の予防及び治療に有効で安全な薬剤
の出現が望まれていた。他方、ウレアーゼ活性阻害剤と
しては、例えばヒドロキサム酸及びその変異体やジスル
フィド、アスコルビン酸などが知られているが、まだ、
実用に供しうるほどの高い活性を示すものは知られてい
ない。
では、長期投与時の安全性が問題とされており、また、
再発のおそれがある上、耐性菌が発生するおそれもあ
る。従来の薬剤の中でも臨床的に応用されてきているも
のもあるが、その評価が一定せず、安全で長期投与が可
能である有効な薬剤は、これまで見出されていないのが
実情であり、このような状況から、有効で安全な胃炎或
は胃・十二指腸潰瘍の予防及び治療に有効で安全な薬剤
の出現が望まれていた。他方、ウレアーゼ活性阻害剤と
しては、例えばヒドロキサム酸及びその変異体やジスル
フィド、アスコルビン酸などが知られているが、まだ、
実用に供しうるほどの高い活性を示すものは知られてい
ない。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、このような
事情のもとで、ピロリ菌が産生するウレアーゼの活性阻
害作用を有し、しかも安全で長期投与が可能であって、
胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍などの予防及び治療剤とし
て有効な薬剤を提供することを目的としてなされたもの
である。
事情のもとで、ピロリ菌が産生するウレアーゼの活性阻
害作用を有し、しかも安全で長期投与が可能であって、
胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍などの予防及び治療剤とし
て有効な薬剤を提供することを目的としてなされたもの
である。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、安全で長
期投与が可能なピロリ菌のウレアーゼ活性阻害剤を開発
すべく鋭意研究を重ねた結果、従来よりシナモンとして
食品の香辛料などに多用され、また神経性胃炎治療剤と
して著名な安中散を始めとし、種々の漢方薬の成分とし
て用いられているケイヒの抽出物が、ピロリ菌の産生す
るウレアーゼの活性阻害作用を有することを見出し、こ
れを新規なウレアーゼ活性阻害剤として提案したが（特
願平８−３３６８６０号）、さらに研究を重ねた結果、
ケイヒから非常に簡単な手段で、しかも高活性のウレア
ーゼ活性阻害作用を有する物質を製造しうることを見出
し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。
期投与が可能なピロリ菌のウレアーゼ活性阻害剤を開発
すべく鋭意研究を重ねた結果、従来よりシナモンとして
食品の香辛料などに多用され、また神経性胃炎治療剤と
して著名な安中散を始めとし、種々の漢方薬の成分とし
て用いられているケイヒの抽出物が、ピロリ菌の産生す
るウレアーゼの活性阻害作用を有することを見出し、こ
れを新規なウレアーゼ活性阻害剤として提案したが（特
願平８−３３６８６０号）、さらに研究を重ねた結果、
ケイヒから非常に簡単な手段で、しかも高活性のウレア
ーゼ活性阻害作用を有する物質を製造しうることを見出
し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。
【００１１】すなわち、本発明は、ケイヒの水抽出液を
濃縮後、清澄液を分離し、これを０℃〜１０℃の温度に
維持し、この間に生成する沈殿を捕集し、乾燥すること
を特徴とするウレアーゼ活性阻害剤の製造方法を提供す
るものである。
濃縮後、清澄液を分離し、これを０℃〜１０℃の温度に
維持し、この間に生成する沈殿を捕集し、乾燥すること
を特徴とするウレアーゼ活性阻害剤の製造方法を提供す
るものである。
【００１２】本発明方法において、原料として用いるケ
イヒの水抽出液は、ケイヒの粉砕物に水を加えて抽出し
た水エキスであるが、この抽出方法としては、特に制限
はなく、ケイヒ中の水溶性成分をほとんど完全に水中に
移行させうる方法であればどのような方法を用いてもよ
い。
イヒの水抽出液は、ケイヒの粉砕物に水を加えて抽出し
た水エキスであるが、この抽出方法としては、特に制限
はなく、ケイヒ中の水溶性成分をほとんど完全に水中に
移行させうる方法であればどのような方法を用いてもよ
い。
【００１３】通常は、ケイヒ粉砕物に、水を加え、必要
に応じ４０〜８０℃、好ましくは５０〜６０℃の温度に
加温しながら、もはや新たな抽出分が認められなくなる
まで抽出する。この際、水の量があまり少ないと抽出が
不十分になるし、また水の量があまり多いと、後続の濃
縮行程に長時間を要することになるので、通常はケイヒ
粉砕物に対し重量に基づき５〜２０倍、好ましくは８〜
１２倍の範囲で選ばれる。また、抽出温度は、高いほど
抽出効率がよくなるが、あまり高いと有効成分が破壊さ
れるおそれがあるので、上記の範囲内で選ぶのが好まし
い。このようにして抽出処理が行われたのち、ろ過又は
遠心分離により固形分を除き、本発明の原料として用い
る。
に応じ４０〜８０℃、好ましくは５０〜６０℃の温度に
加温しながら、もはや新たな抽出分が認められなくなる
まで抽出する。この際、水の量があまり少ないと抽出が
不十分になるし、また水の量があまり多いと、後続の濃
縮行程に長時間を要することになるので、通常はケイヒ
粉砕物に対し重量に基づき５〜２０倍、好ましくは８〜
１２倍の範囲で選ばれる。また、抽出温度は、高いほど
抽出効率がよくなるが、あまり高いと有効成分が破壊さ
れるおそれがあるので、上記の範囲内で選ぶのが好まし
い。このようにして抽出処理が行われたのち、ろ過又は
遠心分離により固形分を除き、本発明の原料として用い
る。
【００１４】このようにして調製された水抽出液は、次
にその容量が少なくとも１／５、好ましくは１／７ない
し１／１５になるまで濃縮される。この際、沈殿や白濁
を生じることがあるので、これを適当な手段で処理し、
清澄液のみを分離する。この際の固形分の分取は、ろ
過、遠心分離、傾しゃなどを用いて行われる。
にその容量が少なくとも１／５、好ましくは１／７ない
し１／１５になるまで濃縮される。この際、沈殿や白濁
を生じることがあるので、これを適当な手段で処理し、
清澄液のみを分離する。この際の固形分の分取は、ろ
過、遠心分離、傾しゃなどを用いて行われる。
【００１５】次に、この清澄液を０℃〜１０℃に維持
し、静置すると次第に沈殿が形成されてくる。この際必
要ならば、積極的に冷却し、沈殿生成を促進してもよ
い。このようにして、もはや沈殿の新しい生成が認めら
れなくなったならば、この沈殿を捕集する。この静置時
間は通常２４〜７２時間の範囲である。沈殿の捕集は、
ろ過、遠心分離のいずれでもよい。このときに分けられ
たろ液部分には、まだウレアーゼ活性を阻害する物質が
含まれているので、さらにウレアーゼ活性阻害剤の原料
として用いられる。
し、静置すると次第に沈殿が形成されてくる。この際必
要ならば、積極的に冷却し、沈殿生成を促進してもよ
い。このようにして、もはや沈殿の新しい生成が認めら
れなくなったならば、この沈殿を捕集する。この静置時
間は通常２４〜７２時間の範囲である。沈殿の捕集は、
ろ過、遠心分離のいずれでもよい。このときに分けられ
たろ液部分には、まだウレアーゼ活性を阻害する物質が
含まれているので、さらにウレアーゼ活性阻害剤の原料
として用いられる。
【００１６】上記のようにして得た沈殿を乾燥すれば、
非常に高いウレアーゼ活性阻害作用を示す物質が得られ
る。この乾燥は、自然乾燥、温風乾燥でもよいが、活性
成分が破壊されるのを防ぐために凍結乾燥によるのが好
ましい。
非常に高いウレアーゼ活性阻害作用を示す物質が得られ
る。この乾燥は、自然乾燥、温風乾燥でもよいが、活性
成分が破壊されるのを防ぐために凍結乾燥によるのが好
ましい。
【００１７】このようにして得られる本発明のウレアー
ゼ活性阻害剤は、公知のウレアーゼ活性阻害剤であるア
スコルビン酸の約５倍の活性を有する。この本発明のウ
レアーゼ活性阻害剤はそのままで、あるいは、希釈又は
濃縮若しくは凍結乾燥したのち、粉末状又はペースト状
に調製し、所望により適宜製剤化して、胃炎、胃潰瘍又
は十二指腸潰瘍の予防剤及び治療剤として用いることが
できる。
ゼ活性阻害剤は、公知のウレアーゼ活性阻害剤であるア
スコルビン酸の約５倍の活性を有する。この本発明のウ
レアーゼ活性阻害剤はそのままで、あるいは、希釈又は
濃縮若しくは凍結乾燥したのち、粉末状又はペースト状
に調製し、所望により適宜製剤化して、胃炎、胃潰瘍又
は十二指腸潰瘍の予防剤及び治療剤として用いることが
できる。
【００１８】また、製剤中のウレアーゼ活性阻害剤の含
有量は、乾燥重量として、通常０．０００１〜５０重量
％、好ましくは０．００１〜３０重量％の範囲である。
製剤の剤形については特に制限はなく、例えば錠剤、カ
プセル剤、丸剤、顆粒剤、液剤など、いずれであっても
よい。さらに、この剤形に応じて、賦形剤などの添加剤
を適宜用いることができる。また、本発明のウレアーゼ
活性阻害剤には、所望により、制酸剤や胃粘膜修復剤な
どの他の有効成分を配合してもよい。
有量は、乾燥重量として、通常０．０００１〜５０重量
％、好ましくは０．００１〜３０重量％の範囲である。
製剤の剤形については特に制限はなく、例えば錠剤、カ
プセル剤、丸剤、顆粒剤、液剤など、いずれであっても
よい。さらに、この剤形に応じて、賦形剤などの添加剤
を適宜用いることができる。また、本発明のウレアーゼ
活性阻害剤には、所望により、制酸剤や胃粘膜修復剤な
どの他の有効成分を配合してもよい。
【００１９】さらに、本発明のウレアーゼ活性阻害剤
は、例えば常法に従って液体や固形の食品の形に調製す
ることができ、一般によく知られている他の食品素材、
香料なども適宜併用することができる。このような他の
食品素材としては、従来食品分野において慣用されてい
るもの、例えば小麦粉、デンプン、タンパク質やその分
解物、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラルなどが挙げら
れる。
は、例えば常法に従って液体や固形の食品の形に調製す
ることができ、一般によく知られている他の食品素材、
香料なども適宜併用することができる。このような他の
食品素材としては、従来食品分野において慣用されてい
るもの、例えば小麦粉、デンプン、タンパク質やその分
解物、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラルなどが挙げら
れる。
【００２０】
【発明の効果】本発明のウレアーゼ活性阻害剤は、ピロ
リ菌が産生するウレアーゼの活性に対し、強い阻害作用
を有し、しかも安全で長期投与が可能であって、胃炎、
胃潰瘍、十二指腸潰瘍などの予防及び治療剤として有効
である。また、本発明のウレアーゼ活性阻害剤は、医薬
品の形態及び食品の形態のいずれの形態としても提供す
ることができる。
リ菌が産生するウレアーゼの活性に対し、強い阻害作用
を有し、しかも安全で長期投与が可能であって、胃炎、
胃潰瘍、十二指腸潰瘍などの予防及び治療剤として有効
である。また、本発明のウレアーゼ活性阻害剤は、医薬
品の形態及び食品の形態のいずれの形態としても提供す
ることができる。
【００２１】
【実施例】次に、本発明を実施例及び試験例によりさら
に詳細に説明するが、本発明は、これらの例によってな
んら限定されるものではない。
に詳細に説明するが、本発明は、これらの例によってな
んら限定されるものではない。
【００２２】実施例 広南ケイヒ粉末５．０ｋｇを水５０リットル中に投入
し、６０℃において３．５時間抽出処理を行ったのち、
遠心分離機にかけて、固形物と抽出液とに分けた。次い
で、この抽出液を全量が約４．２リットルになるまで濃
縮したのち、傾しゃにより清澄液を分離する。この清澄
液を約４℃において２４時間静置すると、微細な沈殿が
生成するので、これを遠心分離して捕集し、次いで凍結
乾燥することにより、かっ色粉末状のウレアーゼ活性阻
害剤１０．７１ｇを得た。
し、６０℃において３．５時間抽出処理を行ったのち、
遠心分離機にかけて、固形物と抽出液とに分けた。次い
で、この抽出液を全量が約４．２リットルになるまで濃
縮したのち、傾しゃにより清澄液を分離する。この清澄
液を約４℃において２４時間静置すると、微細な沈殿が
生成するので、これを遠心分離して捕集し、次いで凍結
乾燥することにより、かっ色粉末状のウレアーゼ活性阻
害剤１０．７１ｇを得た。
【００２３】試験例 実施例で得たウレアーゼ活性阻害剤のウレアーゼ活性阻
害測定試験を、ピロリ菌由来のウレアーゼと構造的に類
似し、一般的にピロリ菌由来のウレアーゼの活性阻害測
定に使用されているナタ豆（ジャックビーン）由来のウ
レアーゼを用い、以下の方法によって行った。13Ｃ−標
識尿素（９９原子％13Ｃ、トレーサーテクノロジー社
製）１ｍｇを、外径５ｍｍのＮＭＲチューブ内に入れ、
１／１５モル／リットル濃度のリン酸ナトリウム緩衝液
（ｐＨ７）５８０μｌを加えて13Ｃ−尿素を溶解し、13
Ｃ−ＮＭＲ測定を行って13Ｃ−尿素のシグナルを確認し
たのち、ＮＭＲチューブを１０分間氷冷した。13Ｃ−Ｎ
ＭＲのリファレンスとしてＴＳＰ（３‐トリメチルシリ
ルプロピオン酸ナトリウム−ｄ4）を用い、ＴＳＰのシ
グナルを０ｐｐｍとした。
害測定試験を、ピロリ菌由来のウレアーゼと構造的に類
似し、一般的にピロリ菌由来のウレアーゼの活性阻害測
定に使用されているナタ豆（ジャックビーン）由来のウ
レアーゼを用い、以下の方法によって行った。13Ｃ−標
識尿素（９９原子％13Ｃ、トレーサーテクノロジー社
製）１ｍｇを、外径５ｍｍのＮＭＲチューブ内に入れ、
１／１５モル／リットル濃度のリン酸ナトリウム緩衝液
（ｐＨ７）５８０μｌを加えて13Ｃ−尿素を溶解し、13
Ｃ−ＮＭＲ測定を行って13Ｃ−尿素のシグナルを確認し
たのち、ＮＭＲチューブを１０分間氷冷した。13Ｃ−Ｎ
ＭＲのリファレンスとしてＴＳＰ（３‐トリメチルシリ
ルプロピオン酸ナトリウム−ｄ4）を用い、ＴＳＰのシ
グナルを０ｐｐｍとした。
【００２４】一方、ウレアーゼ［ナタ豆由来、和光純薬
（株）製］３０ｍｇを１／１５モル／リットル濃度のリ
ン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）２０ｍｌ中に含有する
ウレアーゼ溶液を１０分間氷冷したのち、このウレアー
ゼ溶液２０μｌを上記のＮＭＲチューブ内に加えて、た
だちに13Ｃ−ＮＭＲ測定を開始し、１分後から１３分後
まで１分毎に積算回数１９回（測定時間１分間）として
ＮＭＲスペクトルを測定した。
（株）製］３０ｍｇを１／１５モル／リットル濃度のリ
ン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）２０ｍｌ中に含有する
ウレアーゼ溶液を１０分間氷冷したのち、このウレアー
ゼ溶液２０μｌを上記のＮＭＲチューブ内に加えて、た
だちに13Ｃ−ＮＭＲ測定を開始し、１分後から１３分後
まで１分毎に積算回数１９回（測定時間１分間）として
ＮＭＲスペクトルを測定した。
【００２５】これにより、尿素のシグナルは時間の経過
とともに減少し、一方、二酸化炭素のシグナルが経時的
に増加していく様子が確認できた。なお、測定終了後の
反応液のｐＨは８であった。また、測定後のＮＭＲチュ
ーブの内部から気体を抜き取り、ＧＣ−ＭＳ測定を行っ
たところ、13Ｃ−標識二酸化炭素（ｍ／ｚ：４５）の存
在が確認できた。
とともに減少し、一方、二酸化炭素のシグナルが経時的
に増加していく様子が確認できた。なお、測定終了後の
反応液のｐＨは８であった。また、測定後のＮＭＲチュ
ーブの内部から気体を抜き取り、ＧＣ−ＭＳ測定を行っ
たところ、13Ｃ−標識二酸化炭素（ｍ／ｚ：４５）の存
在が確認できた。
【００２６】上記方法により、ＮＭＲチューブにウレア
ーゼ溶液、被検薬物として実施例で得たウレアーゼ活性
阻害剤０．２５ｍｇ及び13Ｃ−標識尿素１ｍｇを加え、
13Ｃ−ＮＭＲ測定を行い、13Ｃ−標識尿素の消失時間
を、被検薬物を加えていない状態でのそれをコントロー
ルとして比較検討した。この際の13Ｃ−標識尿素の分解
を１分後から１３分後まで経時的に観測したＮＭＲスペ
クトルを図１に示す。この図において１６５．２ｐｐｍ
のシグナルは尿素由来のものであり、１６２．６ｐｐｍ
のシグナルは13Ｃ−尿素から生成した13Ｃ−二酸化炭素
由来のものである。この図から明らかなように13Ｃ−尿
素の消失時間は１３分であった。次にウレアーゼ活性阻
害剤の量を０．５ｍｇに増加し、同様の試験を行ったと
ころ13Ｃ−尿素の消失時間は、２０分であった。
ーゼ溶液、被検薬物として実施例で得たウレアーゼ活性
阻害剤０．２５ｍｇ及び13Ｃ−標識尿素１ｍｇを加え、
13Ｃ−ＮＭＲ測定を行い、13Ｃ−標識尿素の消失時間
を、被検薬物を加えていない状態でのそれをコントロー
ルとして比較検討した。この際の13Ｃ−標識尿素の分解
を１分後から１３分後まで経時的に観測したＮＭＲスペ
クトルを図１に示す。この図において１６５．２ｐｐｍ
のシグナルは尿素由来のものであり、１６２．６ｐｐｍ
のシグナルは13Ｃ−尿素から生成した13Ｃ−二酸化炭素
由来のものである。この図から明らかなように13Ｃ−尿
素の消失時間は１３分であった。次にウレアーゼ活性阻
害剤の量を０．５ｍｇに増加し、同様の試験を行ったと
ころ13Ｃ−尿素の消失時間は、２０分であった。
【００２７】次に、５０％阻害濃度（μｇ／６００μ
ｌ）について、公知のウレアーゼ活性阻害物質であるア
スコルビン酸に対する相対比を求めたところ、実施例で
得たウレアーゼ活性阻害剤の阻害力は、アスコルビン酸
の約５倍であった。
ｌ）について、公知のウレアーゼ活性阻害物質であるア
スコルビン酸に対する相対比を求めたところ、実施例で
得たウレアーゼ活性阻害剤の阻害力は、アスコルビン酸
の約５倍であった。
【図１】 本発明のウレアーゼ活性阻害剤の存在下、ウ
レアーゼによる13Ｃ−標識尿素の分解の経時変化を示す
Ｃ−ＮＭＲスペクトル図。
レアーゼによる13Ｃ−標識尿素の分解の経時変化を示す
Ｃ−ＮＭＲスペクトル図。
Claims (2)
- 【請求項１】 ケイヒの水抽出液を濃縮後、清澄液を分
離し、これを０℃〜１０℃の温度に維持し、この間に生
成する沈殿を捕集し、乾燥することを特徴とするウレア
ーゼ活性阻害剤の製造方法。 - 【請求項２】 水抽出液を容量が少なくとも１／５にな
るまで濃縮する請求項１記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9049141A JPH10245344A (ja) | 1997-03-04 | 1997-03-04 | ウレアーゼ活性阻害剤の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9049141A JPH10245344A (ja) | 1997-03-04 | 1997-03-04 | ウレアーゼ活性阻害剤の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10245344A true JPH10245344A (ja) | 1998-09-14 |
Family
ID=12822816
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9049141A Pending JPH10245344A (ja) | 1997-03-04 | 1997-03-04 | ウレアーゼ活性阻害剤の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10245344A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001213794A (ja) * | 2000-01-31 | 2001-08-07 | Ota Isan:Kk | 消臭剤及び消臭用食品 |
| WO2003063886A1 (fr) * | 2002-01-28 | 2003-08-07 | Nisshin Pharma Inc. | Inhibiteur d'adhesion d'helicobacter pylori |
-
1997
- 1997-03-04 JP JP9049141A patent/JPH10245344A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001213794A (ja) * | 2000-01-31 | 2001-08-07 | Ota Isan:Kk | 消臭剤及び消臭用食品 |
| WO2003063886A1 (fr) * | 2002-01-28 | 2003-08-07 | Nisshin Pharma Inc. | Inhibiteur d'adhesion d'helicobacter pylori |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sandoval-Chacon et al. | Antiinflammatory actions of cat's claw: the role of NF-kB | |
| JP2755550B2 (ja) | ヘリコバクター・ピロリに起因する胃性消化不良を治療するためのリファキシミンを含有する医薬製剤 | |
| KR960016582B1 (ko) | 위장장해의 치료 및 예방용 약제학적 조성물 | |
| Chittajallu et al. | Effect of Helicobacter pylori on serum pepsinogen I and plasma gastrin in duodenal ulcer patients | |
| JP3547782B2 (ja) | 抗ヘリコバクター・ピロリ活性剤 | |
| JP2012501974A (ja) | 癌の処置のための方法および組成物 | |
| EP1112074B1 (en) | Taurolidine and/or taurultam against infectious ulcer or gastritis | |
| JP2011503237A (ja) | Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｂａｒｂａｔａｄ．ｄｏｎの精製抽出物を作製するためのプロセス | |
| JP2003522105A (ja) | ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）関連疾患治療用医薬組成物 | |
| JP2016535091A (ja) | ハマナツメ抽出物及びハマナツメ抽出物の用途 | |
| US4384001A (en) | Treatment of tumors with thiazolidine-4-carboxylic acid | |
| CN101380463A (zh) | 组合物及其治疗用途 | |
| JPH10245344A (ja) | ウレアーゼ活性阻害剤の製造方法 | |
| US20170128513A1 (en) | Cinnamomum burmanii extract, extraction process and its use as proton pump down-regulator, enzyme inhibitor, and mucoprotector | |
| JP2003026597A (ja) | 抗骨粗鬆症作用を発揮する骨量増進組成物 | |
| WO1994005273A1 (en) | Gastrointestinal compositions containing dimethylsulfone and dimethylsulfoxide | |
| JPH10175877A (ja) | ヘリコバクター・ピロリのウレアーゼ活性阻害剤 | |
| KR20100044433A (ko) | 구절초 추출물 또는 분획물을 유효성분으로 함유하는 위장관 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
| JP2004115536A (ja) | 抗ヘリコバクター・ピロリ活性剤 | |
| JP3547783B2 (ja) | 胃炎、胃・十二指腸潰瘍の予防及び治療剤 | |
| KR100645887B1 (ko) | 산약 및 적석지를 함유하는 소화성 궤양 치료용 조성물 | |
| JP2008515765A (ja) | 新規なケリドニン誘導体、その生成法、および医薬品を生成するためのその使用 | |
| JP3974213B2 (ja) | 骨疾患治療剤 | |
| RU2192867C2 (ru) | Способ лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки | |
| US20130203798A1 (en) | Diagnosis and treatment of functional dyspepsia and irritable bowel syndrome |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20040113 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20071206 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20080327 |