KR102261271B1 - 유황재배 양파, 유황재배 마늘 및 진생베리 추출물로 구성되는 면역 기능 증진 식품 첨가 조성물 제조방법 및 이를 이용한 면역증진 반찬의 제조방법 - Google Patents

유황재배 양파, 유황재배 마늘 및 진생베리 추출물로 구성되는 면역 기능 증진 식품 첨가 조성물 제조방법 및 이를 이용한 면역증진 반찬의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 발효에 의해 제독된 유황을 토양 및 옆면 살포하여 재배한 유황재배 양파 및 유황재배 마늘과, 진생베리 추출물의 면역활성을 확인하고, 상기 추출물을 포함하는 영유아, 어린이 및 노약자 기호에 적합한 위한 고단백 식품을 제조하는 수비드공법에 따른 제조방법에 관한 것으로서, 구체적으로 본 발명은 유황재배 양파 추출물 30-35중량%, 진생베리 추출물 30-35중량% 및 유황재배 마늘추출물 30-40중량% 로 구성된 면역기능 증진용 식품 첨가 조성물 및 이를 이용한 반찬의 수비드 공법에 따른 제조방법에 대한 것이다.

Description

유황재배 양파, 유황재배 마늘 및 진생베리 추출물로 구성되는 면역 기능 증진 식품 첨가 조성물 제조방법 및 이를 이용한 면역증진 반찬의 제조방법{PREPARING METHOD OF FOOD ADDITIVE COMPOSITION FOR IMMUNE ENHANCING CONTAINING EXTRACTS OF SULFUR ONIONS, SULFUR GARLICS AND GINSENGBERRIES, AND FOOD MAKING METHOD USING THE COMPOSITOIN}
본 발명은 발효에 의해 제독된 유황을 토양 및 옆면 살포하여 재배한 유황재배 양파 및 유황재배 마늘과, 진생베리 추출물의 면역활성을 확인하고, 상기 추출물을 포함하는 영유아, 어린이 및 노약자 기호에 적합한 위한 고단백 식품을 제조하는 수비드공법에 따른 제조방법에 관한 것이다.
유황은 질소, 인산, 가리, 칼슘, 마그네슘과 함께 식물의 6대 원소로서, 식물생장에 인산질과 비슷한 양이 필요하다. 유황이 결핍시에는 작물의 산출량, 품질, 단백질 함량등이 저하되며, 식물의 질소이용률이 현저히 감소되어 식물 생육에 필요한 단백질 합성, 특히 황 함유 아미노산인 메치오닌, 시스틴, 시스테인의 합성이 억제된다. 또한 유황결핍 작물은 일반적으로 키가 작고 줄기가 가늘며 부러지기 쉽고, 새잎은 노란색을 띤 초록색으로 변하며 엽록체 형성도 저해된다. 따라서 식물에서 유황은 식물의 내병성 증대는 물론, 식물의 유용 물질의 생합성을 촉진시키는데, 특히 황 함유 아미노산의 합성 촉진, 비타민 및 단백질 합성량 증가, 식물 호르몬 생성과 에너지 대사를 촉진하는 순 기능이 있다.
양파(Allium cepa L.)는, 플라보노이드(quercetin, kaempferel, rutim) 및 그 배당체 물질들과 유기 황 화합물(thiosulfinates, allyl disulfide, diallyl sulfide)등 생물학적 활성 분자들의 함량이 높아, 항산화, 항고혈압, 항동맥경화, 항균작용 등의 생리활성들이 지속적으로 보고되고 있다. 이러한 양파의 기능성으로, 양파는 만성질환 예방을 위한 바이오 식품소재로도 관심을 받고 있다. 양파의 독특한 향미성분들은 S-(1-propenyl)-L-cystein sulfoxide의 효소적 분해로 형성된 황 화합물질들이 주를 이루고 있다. 이와 같이, 양파의 기능성과 관능성의 상당 부분이 황(sulfur)으로부터 유래됨을 알 수 있다.
마늘의 주요 약리성분은 알린(allin), 알리신(allicin) 등의 황화합물, 게르마늄, 셀레늄 등의 항암미네랄 등이며, 유기황화합물 중에 주가 되는 S-alk(en)yl cysteine sulfoxides가 0.6-1.9% 들어있으며 γ-glutamylcysteine 0.5-1.6%, S-alk(en)yl cysteine 0.001-0.003%, scordinios 0.003% 들어있다. 마늘 황함유 물질이 들어있는 갈릭오일(garlic oil)은 혈중 중성지방, 콜레스테롤 및 혈전농도를 저하시켜 심혈관질환을 개선시키며, 이들 물질은 노화억제, 기억학습 장애개선, 치매예방효과도 보고되었다. 최근에는 갈릭오일, 알리신, 게르마늄, 셀레늄등이 위암, 직장암, 간암에 대한 항암작용이 보고되었고 당뇨등 대사증후군에도 개선작용이 밝혀졌다. 이와 같이 마늘의 핵심 생리활성물질은 알리신으로서, 그 함유량은 산지에 따라 차이가 많으며 보통 0.2~1% 수준이다. 따라서 알리신 고함유 마늘의 재배 기술은 마늘을 이용한 식품, 의약품 소재로서의 활용 가치를 높이는데 중요한 요소로 지적되고 있다.
본 발명에서는 파종전의 토양에 식이유황을 5~6kg/990m2, 1회 처리하고, 마늘 정식 후 10일 이내에 발효 제독유황(방선균 함유)을 1kg/990m2 양으로 1회 옆면 시비 후, 15일 단위로 1kg/990m2의 유황을 총 8회 더 옆면살포하여 알린과 알리신 함량이 증가된 유황마늘을 재배하였다. 유황양파 및 유황고구마잎 재배는 파종전의 토양에 식이유황을 4kg/990m2, 1회 처리하고, 양파와 고구마 정식 후 10일 이내에 발효 제독유황(방선균 함유)을 1kg/990m2 양으로 1회 옆면 시비 후, 1개월 단위로 1kg/990m2의 유황을 총 3회 더 옆면살포하여 유황양파 및 고구마잎을를 재배하였다.
진공저온 조리법(sous-vide)의 수비드(Sous Vide)는 프랑스어로 ‘진공’의 뜻을 가지고 있으며, 호기성 세균과의 접촉을 최소화하기 위하여 플라스틱 파우치를 이용하여 밀봉 및 가압 상태에서 일정한 저온(50℃ 이하)으로 음식을 조리하는 방법이다. 진공저온 조리법(sous-vide)은 플라스틱 파우치 안에 식재료를 넣고 진공 밀폐 시킨 후 저온(50℃ 이하)에서 장시간 조리하는 방법으로 다양한 식재료 조리에 적용되고 있으며, 시중에는 진공저온 조리법을 적용한 제품이 출시되고 있다. 현재 진공저온 조리법을 적용한 다양한 가공식품이 시중에서 판매되고 있으나, 국내에서는 육류에 진공저온 조리법을 적용한 제품이 대부분이며 특히 닭을 이용한 제품의 종류가 가장 다양하다.
최근 국내의 닭고기 전문기업 ㈜하림은 진공저온 조리법으로 가공한 닭가슴살을 출시하였다. 이 제품은 친환경 인증을 받은 농가에서 키운 프리미엄 닭가슴살에 국내산 천일염, 스페인산 엑스트라버진 올리브유, 바질 등 허브를 추가한 뒤 진공포장 상태로 저온 가열하여 제조한 것으로, 육즙 손실이 거의 없어서 퍽퍽하지 않고 닭고기 특유의 냄새가 나지 않으며, 별도의 가열 단계를 거치지 않고 포장을 바로 뜯어서 먹을 수 있는 장점이 있다.
진공저온 조리법을 이용한 식품의 제조방법에 관한 선행 특허로는, '소고기 보신탕 및 그 제조방법'(한국등록특허 제10-1195656호)은 소고기사태와 물, 소금 등을 수비드 조리하여 소고기 보신탕의 육수를 제조하는 기술을 포함하고 있다. '고등어를 포함하는 가공식품 및 이의 제조방법'(한국공개특허 제2015-0098404호)은 원료인 고등어를 냉장 해동한 후에 진공 포장하여 수비드 조리법으로 조리하는 기술 구성을 가지고 있다. 조리된 고등어는 급속 냉각되어 가공식품으로 제조된다. '닭가슴살의 저온진공 조리방법'(한국등록특허 제10-1542144호)은 닭가슴살의 원료육을 저온진공 조리하여 단백질 및 지질의 산패를 억제하여 유통기한을 증진시킬 수 있는 기술에 대한 것이다. '풍미가 우수한 오리탕의 제조방법'(한국등록특허 제10-1566901호)은 수비드 머신을 이용하여 오리탕을 제조하는 기술의 구성이 포함되어 있어서 오리고기의 육질의 탄력과 풍미가 개선되고 보존성이 증가하는 오리탕을 제조할 수 있는 효과가 있다.
현재까지, 면역증진 소재를 이용하여 진공저온조리법으로 기능성을 갖춘 이유식 또는 영유아용 건강식품을 제조하는 기술은 없었다.
한국등록특허 제10-1195656호 한국공개특허 제2015-0098404호 한국등록특허 제10-1542144호 한국등록특허 제10-1566901호
본 발명은 유황재배 양파, 유황재배 마늘 및 진생베리의 면역기능 활성에 최적의 추출물을 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 면역기능 증진 활성을 갖는 유황재배 양파, 유황재배 마늘 및 진생베리 추출물로 이루어진 최적 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
나아가, 본 발명은 상기 본 발명의 조성물을 이용하여 면역기능 증진 고단백 식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 상기 목적을 달성하기 위해,
유황재배 양파 추출물 30-35중량%, 진생베리 추출물 30-35중량% 및 유황재배 마늘추출물 30-40중량% 로 구성된 면역기능 증진용 식품 첨가 조성물을 제공한다.
바람직하게는, 상기 유황재배 양파 추출물은 추출용매로 물 또는 95% 에탄올을 사용하여 중량대비 4-6배 부피의 용매를 가한 후 40-120℃의 온도에서 6-10회 환류추출한 다음 여과 및 감압농축하여 제조하고, 상기 진생베리 추출물은 추출용매로 물 또는 95% 에탄올을 사용하여 중량대비 8-12배 부피의 용매를 가한 후 70-120℃의 온도에서 10-14회 환류추출한 다음 여과 및 감압농축하여 제조하며, 상기 유황재배 마늘 추출물은 추출용매로 물 또는 70% 에탄올을 사용하여 중량대비 8-12배 부피의 용매를 가한 후 분쇄한 액을 20-40℃의 온도에서 12-48시간 진탕추출한 다음 여과 및 감압농축하여 제조한다.
또한, 본 발명의 고단백 식품의 바람직한 구체예는 소고기, 돼지고기 또는 닭고기 재료 총 중량 대비 청구항 1의 식품 첨가 조성물을 0.09-0.54중량% 첨가하여 조리되는 식품이다.
상기 고단백 식품의 바람직한 구체예는, 고기 재료를 6-10cm 길이로 절단한 후 15 내지 20시간 동안 물에 담가 혈을 제거한 후, 65-90℃의 온도의 물에 4-6시간 동안 진공상태로 익혀낸 후 재료 길이 4-5cm, 두께 6-8mm로 절단한 후 청구항 1의 조성물과 양념을 투입하여 양념이 재료에 배어들도록 하는 것을 포함하는 방법으로 제조된다.
본 발명의 식품 첨가 조성물은 각종 반찬의 조리에 첨가되어 식품의 면역기능성을 부여하고 특히 영유아 및 노약자에게 필수적인 면역기능성 고단백질 반찬을 제조하는데 효과가 있다.
도1은 비장세포 증식활성에 대한 본 발명의 조성물의 영향을 보여주는 결과 그래프이고,
도2는 림프구 비율에 대한 본 발명의 조성물의 영향을 보여주는 결과이며,
도3은 면역글로불린에 대한 본 발명 조성물의 영향을 보여주는 결과 그래프이며,
도4는 대식세포 식작용 활성도에 대한 본 발명 조성물의 영향을 보여주는 결과 그래프이며,
도5는 자연살해 세포 활성에 대한 본 발명 조성물의 영향을 보여주는 결과 그래프이며,
도6은 사이토카인 유전자 활성에 대한 본 발명 조성물의 영향을 보여주는 결과 그래프이며,
도7은 본 발명 조성물을 이용한 소고기 장조림의 수비드법에 따른 조리공정을 나타낸 모식도이며,
도8은 본 발명 조성물을 이용한 돼지고기 장조림의 수비드법에 따른 조리공정을 나타낸 모식도이고,
도9는 본 발명 조성물을 이용한 닭고기 장조림의 수비드법에 따른 조리공정도를 나타낸 모식도이다.
이하에서는 본 발명을 바람직한 실시예로 설명하나 본 발명의 보호범위는 하기 실시예에 한정되지 아니한다.
실시예 1: 유황재배 양파 추출물, 유황재배 마늘 추출물 및 진생베리 추출물의 제조
유황재배 양파를 16조각으로 절단하여 원료를 준비하였다. 원료 중량 대비 5배 부피의 물을 가한 후 80℃에서 8시간 환류 추출한 다음 여과 및 감압 농축한 액을 동결건조하였다.
유황재배 마늘 총 중량 대비 70% 에탄올을 10배 부피로 가한 후 분쇄한 액을 30℃에서 24시간 진탕추출 한 다음, 여과 및 감압 농축한 액을 동결건조 하였다.
진생베리 건조분말 중량 대비 물을 10배 부피로 가한 후, 95℃에서 12시간 환류추출한 다음 여과 및 감압 농축한 액을 동결건조 하였다.
실험예 1: 유황재배 양파와 일반 양파 추출물의 물성 비교
유황재배 양파와 일반양파의 추출물을 상기 실시예 1에서와 같은 방법으로 추출하여 제조하되, 추출조건을 하기 표 1과 같이 달리 하여 추출한 후 동결건조하기 전 농축된 액을 사용하여 수율, pH, 총 플라보노이드, 총 트리설피네이트(μg 알리신/ml) 농도를 분석한 결과로 유황재배 양파와 일반양파의 물서을 비교하였다(표1)
Figure 112019077671529-pat00001
실험예 2: 유황재배 마늘과 일반 마늘의 유효성분의 함량 비교
유황재배 마늘과 일반 마늘 추출물을 상기 실시예 1의 방법으로 추출하여 각 추출액내 알린과 알리신의 함량을 비교하였다. 그 결과는 하기 표2에 나타낸 바와 같다(표2).
Figure 112019077671529-pat00002
실시예 2: 본 발명의 면역활성을 갖는 식품첨가조성물의 제조
하기 표3과 같은 배합비율로 본 발명의 식품 첨가 조성물 A와 B를 제조하였다.
Figure 112019077671529-pat00003
실험예 3: 유황양파, 유황마늘 및 진생베리 추출액의 면역활성
1) 조성물의 적응면역 반응에 대한 활성 조사(In vivo 동물실험)
조성물의 적응면역 활성을 확인하기 위하여 In vivo 동물실험을 수행하였다. 본 실험에서는 5주령 C57/BL6 수컷 마우스를 1주 적응기간 후 실험에 사용하였다. 사육실의 온도는 22±2℃, 명암은 12시간 주기를 유지하며 사육하였다. 실험군은 Placebo (생리식염수), 조성물 A의 250 mg/kg 투입군(A250), 조성물 A의 500 mg/kg 투입군(A500), 조성물 B의 250 mg/kg 투입군(B250), 조성물 B의 500 mg/kg 투입군(B500), 양성 대조군으로서 홍삼추출물 500 mg/kg 투입군(H500)으로 각 실험군 당 7마리로 설정하였다. 56일간 주 6일 시료를 매일 같은 시간 경구투여하고 Placebo군은 동량의 생리식염수를 투여하였다. 희생 후 혈액 및 조직 샘플을 채취 후 실험에 사용하였다. 모든 실험 결과는 통계 프로그램인 GraphPad InStat을 이용하여 평균과 표준편차를 구하였다. 통계 처리는 one-way analysis of variance(ANOVA)에 의해 수행하였고 p <0.05 수준에서 Student’s t-test에 의해 유의차를 검증하였다.
(1)동물의 무게 및 장기 무게 변화
1차 림프기관인 흉선은 세포성 면역에 있어서 중요한 기관으로 림프구(lymphocyte)의 성숙과 T세포의 생성과 성숙을 담당한다. 비장은 2차 림프기관으로써 항체가 모이는 기관이며 혈관 속 면역반응에 중요한 역할을 수행한다. 이러한 흉선과 비장의 무게는 비특이적인 면역과 특이적 면역 반응에서 중요한 지표로서 인식되고 있다. 마우스의 체중 변화는 실험 시작 후 주1회 실험동물 체중계를 이용하여 각 군별 마우스의 체중을 측정하였다. 흉선과 비장의 무게는 희생 시 적출하여 생리식염수에 세척한 후 물기를 제거하여 무게를 측정하였다. 비장과 흉선의 무게는 체중을 보정하기 위하여 나눈 후 비장지수 (spleen index)와 흉선지수 (thymus index)로 나타내었다. 실험 결과, 아래 표 4와 같이 조성물 B 250 mg/kg 투입군에서 체중이 유의적으로 증가하였고, 비장과 흉선의 무게에 대한 유의적인 증가는 나타나지 않았다(표 4).
Figure 112019077671529-pat00004
(2)비장세포 증식활성
비활성 상태의 림프구 (non-activated lymphocyte)의 경우, 각종 항원이나 mitogen, 사이토카인 등 여러 종류의 자극에 의해 활성화되는 단계에서 세포증식이 일어나게 되어 새로운 면역 조절제를 탐색하는 방법으로 광범위하게 사용되고 있다. 조성물 A, B의 비장세포 증식활성을 알아보기 위하여 비장으로부터 분리된 비장세포에 T cell mitogen인 Concanavalin A와 B cell mitogen인 LPS을 처리하여 측정하였다. 실험 결과, mitogen을 처리하지 않은 실험에서 모든 군의 비장세포 증식활성이 증가하였다. Con A 처리 실험에서는 A, B 모두 500 mg/kg 군에서 유의적으로 증가하였고, LPS 처리 실험에서는 모든 군의 증식활성이 증가하였다(도 1).
(3) 림프구의 아집단 비율에 대한 시료의 영향조사
림프구는 면역계를 구성하는 주요 세포로 크게 T cell과 B cell, NK cell 등이 있다. T helper cell은 다른 면역 세포들을 활성화시키는 기능을 담당하며, Cytotoxic T cell은 감염된 세포, 손상된 세포 등을 직접 제거에 관여하며, B cell은 항체의 생산을 담당하는 세포임. 이들 림프구 아집단의 비율은 다양한 기전을 통해 조절되며 각 조성물 A, B의 처리에 따른 림프구 아집단의 변화를 측정하기 위하여 림프구 표면 표지자인 CD3 (Total T cell 표지자), CD4 (T helper cell 표지자), CD8 (Cytotoxic T cell 표지자), CD45 (B 림프구 표지자), CD49 (NK 림프구 표지자), CD68 (Macrophage cell 표지자)의 항체를 반응시킨 후 유세포분석 (Fluorescence-activated cell sorting)을 실시하였다. 실험 결과, A 250 mg/kg군은 모든 비율이 증가하였고, A 500 mg/kg군은 macrophage를 제외한 모든 비율이 증가하였다. B 250 mg/kg군의 경우 B cell과 NK cell의 비율이 증가하였고, B 500 mg/kg군의 경우 Total T cell, T helper cell, Cytotoxic T cell, B cell의 비율이 증가하였다(표 5 및 도 2).
Figure 112019077671529-pat00005
(4) 면역글로불린에 대한 시료의 영향조사
면역글로불린은 세균, 바이러스와 같은 외부의 물질 (항원)과 결합하는 단백질로 이들을 무력화하는 역할을 한다. IgG는 가장 많은 비율을 차지하는 항체로 혈액과 조직에서 발견된다. IgA는 주로 점막면역에 관여를 함. IgM은 항원에 노출되면 가장 먼저 만들어지는 항체이다. 면역글로불린의 활성은 면역기능 평가에 중요한 지표로서 사용된다. 조성물 A, B의 면역글로불린 활성을 조사하기 위하여 마우스에서 얻은 혈액을 미리 플레이트에 코팅된 IgG, IgA, IgM와 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 실험 결과, A 250 mg/kg, A 500 mg/kg군은 IgA 항체가 유의적으로 증가하였고, B 250 mg/kg군은 IgG, IgA 항체가 증가하였으며, B 500 mg/kg군은 모든 항체가 유의적으로 증가하였다(도 3).
2) 본 발명 조성물의 선천성 면역반응에 대한 활성 조사(In vivo 동물실험)
조성물의 선천성 면역 활성을 확인하기 위하여 In vivo 실험을 수행하였다. 본 실험에서는 5주령 C57/BL6 수컷 마우스를 1주 적응기간 후 실험에 사용하였다. 사육실의 온도는 22±2℃, 명암은 12시간 주기를 유지하며 사육하였다. 실험군은 Placebo (생리식염수), 조성물 A 250 mg/kg, 조성물 A 500 mg/kg, 조성물 B 250 mg/kg, 조성물 B 500 mg/kg, 양성 대조군으로서 홍삼추출물 500 mg/kg으로 각 실험군 당 7마리로 설정하였다. 56일간 주 6일 시료를 매일 같은 시간 경구투여하고 Placebo군은 동량의 생리식염수를 투여하였다. 희생 후 혈액 및 조직 샘플을 채취 후 실험에 사용하였다. 모든 실험 결과는 통계 프로그램인 GraphPad InStat을 이용하여 평균과 표준편차를 구하였다. 통계 처리는 one-way analysis of variance(ANOVA)에 의해 수행하였고 p <0.05 수준에서 Student’s t-test에 의해 유의차를 검증하였다.
(1) 대식세포 식작용 (phagocytosis) 활성도 조사
선천적인 면역체계로는 항원의 침입을 차단하는 피부, 점액조직, 산성의 위산, 혈액에 존재하는 보체 (complement) 등이 있음. 세포로는 식균 작용을 담당하는 대식세포가 대표적이며 이들 세포로부터 TNF-α와 같은 사이토카인을 생성하거나 기능을 활성화시키는 기작을 통해 생체 내 암세포에 대한 면역력을 증강시키게 된다. 조성물 A, B의 대식세포 탐식능을 조사하기 위하여 실험동물을 희생한 후 복강에 PBS을 5ml 주사하고 복부부분을 마사지하여 얻은 복강대식세포를 96well cell culture plate에 phenol red free RPMI1640 media + 10% FBS 조건으로 CO2 incubator 24시간 배양 후 시료 처리하였다. 다음날 FITC로 표식된 E.coli particle과 함께 24시간 배양한 다음, 대식세포 내부에 포집된 particle의 양을 형광측정기를 이용하여 측정하였다. 실험 결과, 모든 군에서 유의적으로 복강대식세포 탐식능이 증가하였다(도 4).
(2) 자연살해(NK) 세포 활성
자연살해세포는 주로 혈액에 존재하며 내재면역을 담당하는 세포로 암 또는 바이러스 감염 질환에서 생체의 초기 면역방어에 매우 중요하다. 감염세포 혹은 암세포 등의 비자기 (non-self) 세포를 살해하는 세포성 면역활성을 가지고 있어 표적물질과 접촉하게 되면 활성화되어 표적세포를 파괴한다. 조성물 A, B의 비장 내 자연살해세포 활성을 알아보기 위하여 비장으로부터 분리된 비장세포의 타겟이 되는 인체 만성 백혈병 세포주인 K562 cell과 24시간 동시배양 후 얻은 상층액으로 LDH를 측정하였다. 실험 결과, A 500 mg/kg군을 제외한 모든 군에서 유의적으로 비장의 자연살해세포 활성이 증가하였다(도 5).
(3) 사이토카인 유전자 발현 활성
INF-γ (Interferon gamma)는 바이러스나 세균의 침입에 대해 반응하는 사이토카인으로 면역력을 증가와 관련이 있다. IL-6는 선천면역, 적응면역 모두 작용하는 사이토카인으로 T 림프구, 대식세포 등 다양한 세포에서 분비되어 면역반응을 촉진시킨다. INF-γ, IL-6 유전자의 발현 증가는 면역조절에 있어서 중요한 marker로 알려져 있다. 조성물 A, B의 면역조절유전자 활성을 조사하기 위하여 적출한 비장을 RNA extract solution을 이용하여 순수한 total RNA로 분리 후 cDNA를 제작하여 realtime PCR을 실시하였다. 실험 결과, 모든 군에서 비장의 INF-γ, IL-6 유전자의 발현이 유의적으로 증가하였다(도 6).
실시예 3: 수비드공법을 이용한 면역증진 반찬의 제조
본 발명의 조성물을 이용하여 영유아에게 적합한 조림류 반찬을 제조하였다(도7, 도8 및 도10: 제조과정 모식도 참조).
원재료를 선정하여 영유아 식품소재 적합성을 우선 하기 표와 같이 조사하였다(표6).
Figure 112019077671529-pat00006
면역증진 식품 첨가 조성물의 재료와 원료를 하기 표와 같이 선정하였다(표7).
Figure 112019077671529-pat00007
그 다음, 원재료인 육류 종류별로 진공저온조리의 조건을 하기 표와 같이 특정한 후 각각의 조건하에서 진공저온 상태로 육류를 조리하였다(표8).
Figure 112019077671529-pat00008
조리 후 하기 표 9, 표10, 표11과 같은 배합비율로 본 발명의 조성물(각 추출물별 배합비율로 나누어 표시하였다)과 주원료인 각 고기류와 장조림용 소스를 배합하였다.
Figure 112019077671529-pat00009
Figure 112019077671529-pat00010
Figure 112019077671529-pat00011
실험예4: 제조된 반찬(장조림)의 관능평가
실시예 3에서 제조된 장조림의 고기 종류별로 관능평가를 실시하였다. 성인남녀 30명에게 블라인드 테스트 후 외관(appearance), 향(flavor), 수분량(moisture amount), 씹힘성(gumminess), 전체적인 기호도(overall preference)의 5가지 항목을 기초로 하여 별의 개수(★ : 매우나쁘다, ★★ : 나쁘다, ★★★ : 보통이다, ★★★★ : 좋다, ★★★★★ : 매우 좋다)를 이용하여 선호도에 따라 표시하도록 하였다. 그 결과는 하기 표 12, 표13, 표14에 나타내었다.
Figure 112019077671529-pat00012
Figure 112019077671529-pat00013
Figure 112019077671529-pat00014
결과, 가장 바람직한 배합비율은 소고기 ⓐ, 돼지고기 ⓐ, 닭고기 ⓐ의 배합이었다.

Claims (6)

  1. 유황재배 양파 재료 중량대비 5배 부피의 정제수를 가한 후 80℃의 온도에서 8시간 환류추출한 다음 여과 및 감압농축하여 제조된 유황재배 양파 추출물 30-35중량%;
    진생베리 건조분말 중량 대비 정제수 10배 부피를 가한 후 95℃의 온도에서 12시간 환류추출한 다음 여과 및 감압 농축하여 제조한 진생베리 추출물 30-35중량%; 및
    유황재배 마늘 재료 총 중량대비 10배 부피의 70% 에탄올을 가한 후 분쇄한 액을 30℃의 온도에서 24시간 진탕추출한 다음 여과 및 감압농축하여 제조한 유황재배 마늘추출물 30-40중량% 을 혼합하는 것을 특징으로 하는 면역기능 증진용 식품 첨가 조성물의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 소고기, 돼지고기 또는 닭고기 재료 총 중량 대비 청구항 1의 식품 첨가 조성물을 0.09-0.54중량% 혼합하는 것을 특징으로 하는 어린이용 반찬 제조방법.
  6. 삭제
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KR101845388B1 (ko) * 2016-04-04 2018-04-05 함양군 흑양파 추출물 및 산양삼 열매 농축액을 함유하는 음료 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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너무 맛있는 수비드 사태 장조림 만들기. 네이버 블로그. [online], 2017.08.01., [2020.12.23. 검색], 인터넷: <URL: https://jb162story.blog.me/221064140335> 1부.*
태안 유황마늘 재배단지 조성. 연합뉴스. [online], 2010.10.12., [2020.12.23. 검색], 인터넷: <URL: https://news.naver.com/main/tool/print.nhn?oid=001&aid=0004702173> 1부.*

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