KR102133074B1

KR102133074B1 - 여드름 원인 세균에 대한 특이적 항균 활성을 가지는 오이풀 냉수추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102133074B1
Application number: KR1020170083420A
Authority: KR
Inventors: 최창원; 오성; 김성대; 노한별
Original assignee: 배재대학교 산학협력단
Priority date: 2017-06-30
Filing date: 2017-06-30
Publication date: 2020-07-10
Also published as: KR20190003010A

Abstract

본 발명은 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes) 특이적 항균 활성을 가지는 오이풀(Sanguisorba officinalis L.)의 뿌리(지유) 부분를 냉수(cold water)로 추출한 후 추출물 및 이의 에틸아세테이트(ethyl acetate) 분획물을 포함하는 화장료 조성물이다.

Description

여드름 원인 세균에 대한 특이적 항균 활성을 가지는 오이풀 냉수추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 화장료 조성물{A cosmetic composition containing cold water extract or its ethyl acetate fraction from Sanguisorba officinalis having specific anti-microbial activity against acne-inducing bacterium}

본 발명은 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes) 특이적 항균 활성을 가지는 오이풀(Sanguisorba officinalis L.)의 뿌리(지유) 부분를 냉수(cold water)로 추출한 후 추출물 또는 이의 에틸아세테이트(ethyl acetate) 분획물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

여드름(Acne vulgaris)은 피부의 탈피지 샘 단위(pilosebaceous unit)에 가장 흔하게 발생하는 염증성 질환으로서, 특히 사춘기 남성의 얼굴에 가장 흔하게 발생하고 간혹 등, 가슴 혹은 어깨에도 나타난다. 주원인은 피지선의 확장 및 면포(comedone) 형성과 함께 지나친 피지 (sebum)의 생산을 유도하는 남성호르몬 (androgen)의 효과에 기인한다. 다른 주원인은 비정상적 모낭 상피의 박리(피부 각질) 및 프로피오니박테리움 애크니스의 증식 때문이다.

프로피오니박테리움 애크니스는 탈피지샘 단위에서 공생균으로 살아가는 혐기성(anaerobic), 그람양성(Gram positive), 간균(bacillus)이다. 비정상적 모낭 상피의 박리는 모낭에서 혐기성 조건을 일으켜 프로피오니박테리움 애크니스의 증식을 촉진한다. 또한, 프로피오니박테리움 애크니스는 지방분해효소(lipase) 및 주화성 인자를 분비하여 지나치게 분비된 피지 트리글리세리드(triglyceride)의 글리세롤 성분을 유리 지방산(free fatty acids)으로 물질대사 시킨다. 이러한 여분의 유리 지방산은 모낭 주위에 염증성 백혈구 생성을 촉진시킨다. 반면에 프로피오니박테리움 애크니스의 증식을 억제하면 면포의 파열을 최소화하여 여드름의 발달을 억제할 수 있다.

여드름 치료에 테트라사이클린(tetracycline), 에리쓰로마이신(erythromycin) 및 클린다마이신(clindamycin)과 같은 여러 가지 경구용 혹은 경피용 항생제가 사용되어 왔다. 이러한 광범위 스펙트럼을 가진 항생제의 장기간 사용은 캔디다 알비칸스(Candida albicans)의 과대성장 및 항생제 내성을 일으킬 수 있다. 또한, 항여드름 치료제로 알려진 과산화벤조일(benzoyl peroxide), 아젤라산(azelaic acid) 및 레티노산(retinoic acid)과 같은 경피용 화학제는 피부자극 및 접촉성피부염과 같은 부작용을 갖는 문제점이 있다.

상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 최근에 국제적으로 많은 항균성 식물이 보고되어 왔다. 그중에 일부는 여드름 치료에 대체 약물로 활용될 수 있다. 식물을 포함하여 현재 보고된 단일 식물의 표적 조직으로부터 획득한 추출물에서 프로피오니박테리움 애크니스에 대해 뚜렷한 항균활성을 나타낸 대다수의 추출물은 메탄올(특허문헌 0001, 0002, 0003 및 비특허문헌 0001, 0002, 0003, 0004), 에탄올(특허문헌 0004, 0005, 0006, 0007, 0008 및 비특허문헌 0005, 0006, 0007, 0008, 0009, 0010, 0011), 열수(특허문헌0009, 0010 및 비특허문헌 0012), 인산완충용액(특허문헌 0011), 아세톤(비특허문헌 0013), 기타 유기용매(비특허문헌 0014, 0015) 및 수증기증류법(특허문헌 0012 및 비특허문헌 0016)를 이용하였다.

‘할랄(Halal)’ 시장은 국제시장 규모 중 가장 큰 시장 또한 성장하는 시장으로 주목받는 시장으로서, 무슬림들의 생활 수칙이며 이를 영위하기 위하여 필요한 상품이 할랄시장이다. 화장품의 경우 할랄 기준을 충족시키기 위해서는 식물체에서 유효 성분을 추출, 농축시키기 위하여 광범위하게 사용하는 에탄올(ethanol)을 전혀 사용할 수 없고 다가 알코올류 역시 동물 유래의 성분은 사용할 수 없다.

또한 발효 과정에서 사용하는 균주 역시 까다로운 기준에 따라 선택해서 사용해야 하며 발효 과정에서 생성되는 에탄올 역시 장애 요인이 될 수 있다. 따라서 다른 추출법과 비교하여 쉽게 유효성분을 추출할 수 있는 장점이 있는 냉수 및 열수를 이용한 추출방식이 유일한 대안이다.

장미과(Rosacease)에 속한 다년생 식물인 오이풀(S. officinalis L.)은 국내를 포함한 극동 아시아 지역에 널리 분포하고 있다. 오이풀의 뿌리는 한방에서 지유(地楡)라는 생약재로 사용되고 있다(비특허문헌 0017).

지유는 한방에서 주로 지혈과 상처부위의 치료에 사용되어왔으며, 피부염, 점막염, 습진, 화상에 외용하는 것으로 알려져 있다(비특허문헌 0018). 지유에는 ziguglycoside I, II와 pomolic acid등이 함유되어 있고, 가지에는 quercetin과 kaempferol의 배당체와 ursolic acid 등 triterpenoid계 saponin 이 함유되어 있으며, 잎에는 vitamin C, 꽃에는 chrysanthemin, cyanin 등의 약리성분이 함유되어 있다 (비특허문헌 0019).

상기와 같은 약리성분에 근거하여 오이풀로부터 면역억제 활성, 항돌연변이효과, 신경세포 손상 억제효과, 항산화효과, 과민성 알레르기 예방, 항암, 항균효과, 지혈작용 등의 연구가 보고되어 왔다(비특허문헌 0017, 0020, 0021, 0022; 0023, 0024, 0025, 0026, 0027).

오이풀 추출물에 대한 특허로는 충치를 유발하는 Streptococcus mutans 억제 구강청정제 조성물(특허문헌 0013), 패혈증을 유발하는 VHSV 및 IHNV에 대한 항바이러스 활성 조성물(특허문헌 0014), 피부부호 효과 화장료 조성물(특허문헌 0015), 당뇨 예방 및 개선용 조성물(특허문헌 0016), 리스테리 또는 살모넬라 유발 패혈증 예방 및 개선용 조성물(특허문헌 0017) 등이 있다.

대한민국 공개특허공보 제10-2015-0000723호, 2015.01.05. 공개 대한민국 등록특허공보 제10-1507889호, 2015.04.07. 공고 대한민국 공개특허공보 제10-2008-0044948호, 2008.05.22. 공개 대한민국 공개특허공보 특2002-0003313호, 2002.01.12. 공개 대한민국 공개특허공보 특2000-0019981호, 2000.04.15. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2012-0086123호, 2012.08.22. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2014-00992233호, 2014.08.11. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2004-0081533호, 2004.09.22. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-0700911호, 2007.03.28. 공고 대한민국 등록특허공보 제10-0700912호, 2007.03.28. 공고 대한민국 공개특허공보 제10-2007-0110589호, 2007.11.20. 공개 대한민국 공개특허공보 특2003-0016818호, 2003.03.03. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2013-0113018호, 2013.10.15. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2016-0150177호, 2016.12.29. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2009-0117199호, 2009.11.12. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2016-0102638호, 2016.08.31. 공개 대한민국 공개특허공보 제10-2017-0055104호, 2017.05.19. 공개

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본 발명의 목적은 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes) 특이적 항균 활성을 가지는 지유(오이풀의 뿌리)의 냉수 추출물 및 이의 에틸아세테이트(ethyl acetate) 분획물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes) 특이적 항균 활성을 가지는 지유(오이풀의 뿌리) 냉수 추출물 또는 이의 에틸아세테이트(ethyl acetate) 분획물을 포함하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

상기에 기술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 지유의 냉수 추출물 또는 이의 분획물은 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes) 특이적 항균 활성을 가지므로, 여드름의 예방 또는 개선에 효과가 있다. 따라서 이를 이용하여 화장료 조성물, 더 자세하게는 화장료, 비누 및 세정제 조성물 등으로 제품화 할 수 있다.

도 1은 지유의 냉수추출물(CWE)로부터 활성 분획 분리과정의 흐름도이다.
도 2는 지유 냉수추출물(CWE) 및 냉수추출물의 에틸아세테이트 분획물(CWE-EA)의 여드름균(Propionibacterium acnes)에 대한 항균활성을 분석한 원판 평판배지 확산법(paper disc agar diffusion method)이다. 그림 (A)는 CWE 10 mg/disk 처리구(1), 무처리구(2), 증류수처리구(3)의 여드름균에 대한 억제환을 관찰한 사진이다. 그림 (B)는 증류수처리구(1) 및 CWE 1 mg/disk 처리구(2), 3 mg/disk 처리구(3), 5 mg/disk 처리구(4)의 여드름균에 대한 억제환을 관찰한 사진이다. 그림 (C)는 증류수처리구(1) 및 CWE-EA 1 mg/disk 처리구(2), 3 mg/disk 처리구(3), 5 mg/disk 처리구(4)의 여드름균에 대한 억제환을 관찰한 사진이다.
도 3은 지유의 냉수추출물(CWE)의 n-헥산(n-hexane), 에틸아세테이트(ethyl acetate), n-부탄올(n-butanol) 및 물 분획물을 원판 평판배지 확산법(paper disc agar diffusion method)에 의해 여드름균 억제를 비교 결과이다.
도 4는 지유의 냉수추출물(CWE)의 여드름균(Propionibacterium acnes)에 대한 최소억제농도(MIC) 및 최소살균농도(MBC)를 확인하기 위하여 고체배지에 콜로니 형성 유무를 확인한 결과이다.
도 5는 지유의 냉수추출물(CWE)의 에틸아세테이트(ethyl acetate) 분획물을 silica gel 60 glass plate에 점지하고 혼합용매 ethyl acetate, n-hexane, chloroform, acetic acid(40:30:30:2, v/v/v/v) 로 전개하고 UV 파장 254 nm (A), 366 nm (B) 및 황산 스프레이 발색법 (C)으로 분석한 것이다.
도 6은 지유의 냉수추출물(CWE)의 에틸아세테이트(ethyl acetate) 분획물을 TLC에서 전개한 후 획득하여 HPLC로 분석한 것이다. (1) 분리되지 않은 혼합 화합물, (2) caffeic acid, (3) ferulic acid, (4) quercetin, (5) kaempferol 이다.

본 발명의 일실시예는 오이풀 (Sanguisorba officinalis)의 냉수추출물을 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

오이풀은 장미과에 속하는 여러해살이풀이다. 한국, 일본, 유럽, 중국 만주 등지에 분포한다. 잎을 따서 부비면 오이냄새가 나서 오이풀이라 부른다. 한방에서는 오이풀의 뿌리를 지유라는 약재로 사용하고 있다. 오이풀 뿌리에는 17%타닌과 2.5%의 사포닌, Sanguisorbigenin이라는 배당체가 들어있고, 줄기와 잎에는 qurcetin과 Kaemferol 배당체, Ursolic acid 등 Triterpene류 물질이 들어있다. 지유(오이풀의 뿌리)는 한방에서는 몸의 열을 내려주고 출혈을 그치게 하는 효능이 있고, 해독작용이 있는 것으로 알려져 있다. 지유(오이풀의 뿌리)같은 경우 화상치료, 지혈작용, 구토억제 작용, 항균 작용 등에 효과가 있다.

상기 오이풀의 냉수추출물은 1℃ 내지 20℃에서 12시간 내지 36시간 추출할 수 있으며, 바람직하게는 2℃ 내지 15℃에서 18시간 내지 30시간 추출할 수 있으며, 가장 바람직하게는 3℃ 내지 10℃에서 24시간 동안 추출할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 여드름균인 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes)를 억제하는 것을 특징으로 할 수 있고, 가장 바람직하게는 KCTC3314 일 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 오이풀 (Sanguisorba officinalis)은 오이풀의 꽃, 잎, 줄기, 열매, 종자, 뿌리 및 전초를 포함하는 군으로부터 선택된 1 종 이상의 부위추출물인 것을 특징으로 할수 있고, 바람직하게는 오이풀의 뿌리 일 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이를 포함하는 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형을 갖는 것을 특징으로 할 수있으며, 바람직하게는 비누 또는 계면 활성제 함유 클렌징일 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 오이풀 (Sanguisorba officinalis)의 냉수추출물은 1000 ㎍/mL 내지 1500 ㎍/mL 농도로 포함되는 것을 특징으로 할 수 있고, 바람직하게는 1250㎍/mL일 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 오이풀 (Sanguisorba officinalis)의 냉수추출물부터 에틸아세테이트로 분획하여 획득한 에틸아세테이트 분획물을 포함하는 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 에틸아세테이트 분획물는 하이드록시시나믹 산(hydroxycinnamic acids) 및 플라보놀 (flavonols)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 유효성분을 포함하는 것을 특징으로 할 수 있다.

본 발명에 있어서, 에틸아세테이트 분획물은 100 ㎍/mL 내지 200 ㎍/mL 농도로 포함하는 것을 특징으로 할 수 있으며, 바람직하게는 156 ㎍/mL으로 할 수 있다.

이하, 실시예에 따라서 본 발명을 보다 구체적으로 설명하지만, 본 발명이 이하의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

지유의 냉수추출물 및 분획물

1. 지유의 냉수추출물(CWE) 제조

오이풀 뿌리(지유)를 증류수로 세척하고 건조시킨 후 분쇄기로 잘게 분쇄하였다. 분쇄물 시료(50g)를 10배 중량의 4℃의 물을 가하고 24 시간 동안 추출한 후 와트만 종이 여과지(Whatman No. 2)로 여과한 후 그 여액을 65±2℃ 감압 농축하고 초저온냉동고에서 동결한 후 냉동건조기(freeze dryer)로 동결 건조하여 최종 추출물 0.2916g을 수득하였다. 지유 건물로부터 냉수 추출을 통한 수확량은 하기 표 1과 같다.

지유로부터 냉수 추출을 통한 수확량

지유 건물중	냉수추출물(CWE)의 동결건조 수확량
50 g	0.2916 g

2. 냉수추출물의 분획물(CWE fraction) 제조

냉수추출물에 일정량의 물을 첨가한 후, 분액여두를 이용하여 극성이 다른 추출용매인 n-헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물을 차례대로 혼합하여 각 분획을 추출하였다. 먼저 분액여두에 n-헥산을 증류수와 동량으로 넣고, 잘 혼합한 후 수층과 추출용매의 두 층으로 나뉘도록 방치하였다. 추출용매를 분리하고 남은 여액을 다시 같은 방법으로 에틸아세테이트와 부탄올을 차례대로 넣어 각각 추출하였다. 이때 추출용매는 남은 여액과 같은 양으로 첨가하였다. 추출 및 분획 공정의 개략도를 [도 1]에 나타내었다. 실험결과, 순차적 분획물은 지유의 냉수추출물 50 g을 증류수 500 mL에 현탁시킨 후에 n-헥산(500 mL), 에틸아세테이트 (500 mL), n-부탄올 (500 mL) 그리고 증류수로 순차적으로 분획하여 분획물을 얻었다.

식물 추출물 및 분획물의 항균 활성 실험

그람음성균(2종) 및 그람양성균(3종)에 대한 항균 활성 측정은 원판 확산법(paper disk diffusion method), 최소억제농도(minimum inhibitoryconcentration, MIC) 및 최소살균농도(minimum bactericidal concentration, MBC)를 사용하여 평가하였다.

1. 대상 균주 및 배양조건

본 발명에 사용된 그람양성균인 프로피오니박테리움 애크니스(생물자원센터; KCTC3314)는 brain-heart infusion(BHI) 배지에서 혐기적 조건으로 2일 이상 배양하였으며, 리스테리아 모노사이토젠스(Listeria monocytogenes)와 포도상구균(Staphylococccus aureus)은 BHI 배지에서 호기적 조건으로 액체 배양하였다. 본 발명에 사용된 그람음성균인 대장균(Escherichia coli)과 비브리오장염균(Vibrio parahaemolyticus)는 Luria-Bertani(LB) 배지에서 액체배양하였다. 접종된 각 균주는 37℃, 200 rpm 조건에서 1~2일간 vernight) 진탕배양한 후 각 균의 성장과 용균은 Biochrom Libra S22 분광광도계(spectrophotometer)를 이용하여 O.D. 600nm에서 측정하였다.

2. 원판 평판배지 확산법(paper disc agar diffusion method)

배양한 균주를 일정한 농도(optical density 600 nm에서 흡광값 0.5)로 조절한 것을 멸균된 면봉을 이용하여 BHI 한천플레이트(agar plate) 혹은 LB 한천플레이트에 균일하게 도말하였다. 플레이트를 건조시킨 후, paper disc(Φ 6 mm, Adventec. USA)를 균주를 접종한 플레이트 표면위에 올려놓고 냉수추출물액 각각을 1, 3, 5 혹은 10 mg/disk씩 흡수시켰다. 시료가 처리된 플레이트를 48 시간 동안 37℃ 조건에서 배양한 후 디스크 주위의 생육 억제환(inhibition zone)의 크기로 항균 활성을 측정하였다. 이때 대조군으로는 항생제인 4종(ampicillin, kanamycin, spectinomycin, timentin)을 사용하였고, 처리 농도는 20 ?g/disc이다. 실험결과, 지유의 냉수추출물물 10 mg/disk 처리구에서 강력한 항여드름균 활성이 확인되었다 [도 2A 및 표 2]. 농도별 처리구에서도 1 mg/disk 처리구까지 우수한 항여드름균 활성이 확인되었다 [도 2B]. 그러나 다른 4종 박테리아에 대해서는 항균 활성이 전혀 관찰되지 않았다. 이 결과를 통해 지유의 냉수추출물은 프로피오니박테리움 애크니스에 대해 특이적 항균활성을 가지는 것으로 나타났으나, 다른 박테리아에 대해서는 항균활성이 없는 것으로 나타났다.

그람양성균 프로피오니박테리움 애크니스에 대한 항균 활성

시료(10 mg/disc)	생육억제환 크기(cm)
냉수추출물(CWE)	3.2 x 3.0
ampicillin	―
kanamycin	3.1 x 3.0
spectinomycin	―
timentin	―

또한, 지유의 냉수추출물로부터 획득한 에틸아세이트 분획물에서 우수한 항여드름균 활성이 관찰되었으나, 헥산, 부탄올 및 증류수 분획물에서는 미약하거나 관찰되지 않았다 [도 3]. 에틸아세이트 분획물의 농도별 처리 결과 1 mg/disk 처리구까지 우수한 항여드름균 활성이 확인되었다 [도 2C].

3. 여드름균에 대한 지유 냉수추출물(CWE) 및 에틸아세트 분획물(CWE-EA)의 최소억제농도(MIC) 및 최소살균농도(MBC)

프로피오니박테리움 애크니스를 BHI broth 배지를 함유한 시험관에서 24 시간 동안 37℃ 조건에서 배양하였다. 여기에 냉수추출물 및 에틸아세트 분획물을 2배 연속 희석법(two-fold dilution)으로 희석하여 시험관에 첨가하였다. 균희석액 및 시료를 접종한 시험관에서 48 시간 배양한 후 균의 가시적 생장을 저해하는 최소 농도를 MIC로 결정하였다. 하기 [표 3]에 나타낸 바와 같이, 프로피오니박테리움 애크니스에 대한 냉수추출물 및 에틸아세테이트 분획물의 MIC 값은 1250 μg/mL 및 156 μg/mL로 측정되었다. MIC로 선택된 농도보다 그 이상의 농도에 해당하는 시험관의 배양액 100 μL 씩 고체배지에 도말하여 균을 배양한 후 plate 상에서 관찰되는 콜로니(colony) 수를 직접 계수하였다. 이때 확인되어지는 콜로니 수가 100% 사멸되어지는 효과를 나타내는 추출물 처리농도를 MBC로 결정하고 하기 [표 3] 및 [도 4]와 같이 결정하였다. 하기 [표 3]에 나타낸 바와 같이, 프로피오니박테리움 애크니스에 대한 냉수추출물 및 에틸아세테이트 분획물의 MBC 값은 2500 μg/mL 및 312 μg/mL로 측정되었다.

지유 냉수추출물과 추출물의 에틸아세테이트 분획물의 프로피오니박테리움 애크니스에 대한 최소억제농도 및 최소살균농도

추출물	MIC(㎍/mL)	MBC(㎍/mL)
냉수추출물(CWE)	1250	2500
에틸아세테이트 분획물(CWE-EA)	156	312

항여드름균 활성을 가진 에틸아세티이트 분획물의 성분 분석

1. 박층 크로마토그래피(Thin layer chromatography; TLC)

항여드름균 활성을 가진 에틸아세티이트 분획물을 silica gel 60 glass plate(20 x 20 cm, Merck, DarDarmstadt, Germany)를 이용하여 에틸아세테이트/헥산/클로로포름/ 초산(40:30:30:2, v/v/v/v) 혼합 용매로 하여 전개하고 UV 램프(254 nm 및 366 nm 파장) 및 황산 스프레이 발색법으로 에틸아세테이드 분획물과 표준물질(caffeic acid, ferulic acid, quercetin, kaempferol)과의 Rf 값을 비교하여 분석하였다. 상기의 방법으로 실험한 결과 표준물질인 caffeic acid, ferulic acid, quercetin, kaempferol Rf 값과 비슷한 band를 확인할 수 있었다 [도 5.]

2. High performance liquid chromatography(HPLC)

에틸아세테이트 분획물을 methanol에 녹이고 여과(0.45 μm filter)하여 HPLC(1260 Infinity Quaternary LCSystem, Agilent Technologies, Waldbronn, Germany)에 ZORBAX Eclipse Plus C18 column(4.6×150 mm, 5 μm, Agilent Technologies, Lawrence, KS, USA)을 사용하여 254 nm에서 분석하였다. Injection volume은 10 μL, 이동상은 용매 A(2% acetic acid in 30% methanol)와 B(2% acetic acid in 50% acetonitrile)를 유속 1mL/min으로 A액과 B액의 비율 100:0(v/v)에서 70분까지 0:100(v/v)의 비율로 농도기울기법으로 분석하였다. 함량 측정은 표품 caffeic acid, ferulic acid, quercetin, kaempferol을 이용하여 작성한 검량선의 회귀식에서 구하였다. 상기의 방법으로 실험한 결과 역상 HPLC 방법으로 청미래의 분획물 중에서 표준물질과의 retention time을 비교하여 2종의 hydroxycinnamic acids(caffeic acid, ferulic acid) 및 2종의 flavonols(quercetin, kaempferol)을 확인하였다 [도 6]. 지유 냉수추출물의 에틸아세테이트 분획물 중 caffeic acid, ferulic acid, quercetin, kaempferol 등을 포함하여 여러 미지 물질이 검출되었으며 그중 ferulic acid 함량이 가장 높았다.

Claims

오이풀 (Sanguisorba officinalis)의 냉수추출물부터 에틸아세테이트로 분획하여 획득한 에틸아세테이트 분획물을 포함하고,
상기 에틸아세테이트 분획물은 100 ㎍/mL 내지 200 ㎍/mL 농도로 포함하는 것을 특징으로 하는,
여드름균인 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes)를 억제하는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물.
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제 1항에 있어서, 상기 오이풀 (Sanguisorba officinalis)은 오이풀의 꽃, 잎, 줄기, 열매, 종자, 뿌리 및 전초를 포함하는 군으로부터 선택된 1 종 이상의 부위추출물인 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이를 포함하는 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물.
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제 1항에 있어서, 상기 에틸아세테이트 분획물는 하이드록시시나믹 산(hydroxycinnamic acids) 및 플라보놀 (flavonols)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 유효성분을 포함하는 것을 특징으로 하는, 여드름 개선용 화장료 조성물.
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오이풀 (Sanguisorba officinalis)의 냉수추출물부터 에틸아세테이트로 분획하여 획득한 에틸아세테이트 분획물을 포함하고,
상기 에틸아세테이트 분획물은 100 ㎍/mL 내지 200 ㎍/mL 농도로 포함하는 것을 특징으로 하는,
여드름균인 프로피오니박테리움 애크니스(Propionibacterium acnes)를 억제하는 것을 특징으로 하는 의약외품.