KR102010404B1 - 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품 - Google Patents

피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품 Download PDF

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Abstract

본 발명은 코코넛 오일; 참께 오일; 포도씨 오일; 및 오미자씨 오일;을 일정 배합비로 조성되어 피부 재생 기능을 갖는 제1조성물과,
스피루리나추출물과 황금추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 보습기능을 갖는 제1혼합조성물; 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항산화 기능을 갖는 제2혼합조성물; 연뿌리 추출물과 익모초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 피부보호 및 주름개선 기능을 갖는 제3혼합조성물; 토복령 추출물과 승마꽃 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 미백 기능을 갖는 제4혼합조성물; 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항노화 기능을 갖는 제5혼합조성물;의 혼합으로 조성되는 제2조성물이 혼합조성되어, 피부재생, 보습, 항산화, 피부보호 및 주름개선, 미백, 항노화의 복합 기능을 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품에 관한 것이다.

Description

피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품{COSMETICS COMPOSITION HAVING IMPROVEMENT EFFECT OF SKIN REPRODUCTION AND COSMETICS INCLUDING THE SAME}
본 발명은 코코넛 오일; 참께 오일; 포도씨 오일; 및 오미자씨 오일;을 일정 배합비로 조성되어 피부 재생 기능을 갖는 제1조성물과,
스피루리나추출물과 황금추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 보습기능을 갖는 제1혼합조성물; 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항산화 기능을 갖는 제2혼합조성물; 연뿌리 추출물과 익모초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 피부보호 및 주름개선 기능을 갖는 제3혼합조성물; 토복령 추출물과 승마꽃 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 미백 기능을 갖는 제4혼합조성물; 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항노화 기능을 갖는 제5혼합조성물;의 혼합으로 조성되는 제2조성물이 혼합조성되어, 피부재생, 보습, 항산화, 피부보호 및 주름개선, 미백, 항노화의 복합 기능을 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품에 관한 것이다.
대기 중의 미세먼지, 중금속, 자외선, 배기가스, 전자파, 화학 산화제 및 미생물, 염증 반응 등 다양한 요인에 의해 세포 내 ROS의 생성이 증가하면 항산화 시스템의 균형이 깨져 산화스트레스를 야기하게 된다.
산화스트레스는 세포 차원의 산화적 손상을 입히므로 피부 질환 뿐 아니라 각종 질환을 유발하게 되는데, 피부에서 ROS 과잉 생성으로 인한 산화적 손상의 결과는 멜라닌 생성, 주름 생성, 염증의 만성화 및 악화, 상처 치유의 지연 등의 문제로 나타난다.
특히 피부는 화학적, 기계적, 생물학적 자극에 직접적으로 노출되어 인체를 보호하는 방어막 기능을 하는 기관이므로 면역반응과 관련된 염증반응이 빈번하게 일어난다. 흔히 피부에 발생하는 생활성 손상은 표피층이나 진피층 상부에 상처를 입는 경우가 일반적이며, 자연적으로 치유된다. 그러나 지혈, 염증 및 재생단계의 상처 치유과정에 관련된 세포의 생리학적 기능이 원활하지 못한 경우, 피부질환의 악화 뿐 아니라 노화를 촉진시켜 피부에서의 미용적·병리적 문제를 유발한다.
본 발명은 외부 환경스트레스 요인에 의해 손상된 피부의 재생 및 보습, 항산화, 피부보호 및 주름개선, 미백, 항노화 기능을 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품에 관한 것으로서,
본 발명과 관련하여, 대한민국 등록특허 10-1768870(등록일자 2017.08.10) '백미 추출물의 지표성분인 시나프산 또는 이를 함유하는 백미 추출물을 함유하는 피부재생용 화장료 조성물 및 상처 치료용 약학 조성물'; 대한민국 등록특허 10-1047769(등록일자 2013.10.14) '임모르뗄꽃 및 로얄젤리의 발효추출물을 함유하는 피부 재생 촉진용 화장료 조성물'; 대한민국 등록특허 10-1636846(등록일자 2016.06.30) '피부 세포 증식 및 항산화 효과가 증가한 보툴리눔 톡신-인간상피세포성장인자 융합단백질 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 재생 및 주름 개선용 화장료 조성물'; 대한민국 등록특허 10-1267321(등록일자 2013.05.20)'지렁이 점액 및 머드를 유효성분으로 포함하는 피부재생 및 피부주름개선용 화장료 조성물'; 대한민국 등록특허 10-1550578(등록일자 2015.09.01) '산국 에센셜 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 재생용 화장료 및 피부 외용제 조성물'; 대한민국 등록특허 10-1319990(등록일자 2013.10.14) '천문동 및 마카 복합발효추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 및 자극완화용 화장료조성물';에 대한 기술이 개시된 바 있다.
이와 같이 개시되어 있는 종래 화장료 조성물 및 화장품에 대한 기술들은 피부재생, 보습, 항산화, 피부보호 및 주름개선, 미백, 항노화의 복합 기능을 제시하기에 부적합하다는 단점이 있었다.
대한민국 등록특허 10-1768870(등록일자 2017.08.10) 대한민국 등록특허 10-1047769(등록일자 2013.10.14) 대한민국 등록특허 10-1636846(등록일자 2016.06.30) 대한민국 등록특허 10-1267321(등록일자 2013.05.20) 대한민국 등록특허 10-1550578(등록일자 2015.09.01) 대한민국 등록특허 10-1319990(등록일자 2013.10.14)
본 발명은 코코넛 오일; 참께 오일; 포도씨 오일; 및 오미자씨 오일;을 일정 배합비로 조성되어 피부 재생 기능을 갖는 제1조성물과,
스피루리나추출물과 황금추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 보습기능을 갖는 제1혼합조성물; 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항산화 기능을 갖는 제2혼합조성물; 연뿌리 추출물과 익모초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 피부보호 및 주름개선 기능을 갖는 제3혼합조성물; 토복령 추출물과 승마꽃 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 미백 기능을 갖는 제4혼합조성물; 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항노화 기능을 갖는 제5혼합조성물;의 혼합으로 조성되는 제2조성물이 혼합조성되어, 피부재생, 보습, 항산화, 피부보호 및 주름개선, 미백, 항노화의 복합 기능을 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품을 제공하고자 하는 것을 발명의 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 코코넛 오일 5.0 ~ 50.0 wt%와, 참께 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 포도씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 오미자씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%의 혼합으로 조성된 100.0 wt%의 제1조성물(A) 10.0 ~ 50.0 wt%;
스피루리나와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 인큐베이터에서 20 ~ 30 ℃, 130 ~ 160 rpm의 조건으로 50 ~ 80 시간 동안 진탕 추출하고, 추출한 추출물을 원심분리기에서 7,000 ~ 9,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 스피루리나추출물과,
황금과 메탄올을 1 : 4 ~ 6 중량비로 혼합한 후, 65 ~ 75℃에서 20 ~ 30 시간 동안 환류추출하고, 추출물을 4 ~ 6 분 동안 3,500 ~ 4,500 rpm으로 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하여 수득한 황금추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제1혼합조성물(b1) 0.5 ~ 60.0 wt%;
아마씨 분말과 에탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 아마씨 추출물과,
비타민나무잎과 에탄올을 1 : 15 ~ 25 중량비로 혼합한 후, 상온에서 22 ~ 26 시간 동안 침지하여 상징액과 침전물을 분리하고, 동일한 과정을 3회 반복하여 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 비타민나무잎 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제2혼합조성물(b2) 0.5 ~ 60.0 wt%;
건조 연뿌리 분말과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 연뿌리 추출물과,
익모초와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 100 ℃, 100 ~ 140 rpm의 조건으로 1 ~ 5 시간 동안 진탕 추출하고, 수득한 추출물을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 익모초 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제3혼합조성물(b3) 0.5 ~ 60.0 wt%;
토복령과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 토복령 추출물과,
승마꽃과 70 % 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 23 ~ 28 ℃, 80 ~ 150 rpm으로 40 ~ 55 시간 동안 진탕추출하고, 수득한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 승마꽃 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제4혼합조성물(b4) 0.5 ~ 60.0 wt%;
아카시아(Robiniapseudoacacia) 꽃을 건조 후 분쇄한 분말과 정세수를 1 : 35 ~ 45 중량비로 혼합한 후, 85 ~ 99 ℃에서 5 ~ 7 시간동안 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 아카시아 꽃 추출물과,
만병초와 에탄올을 1 : 20 ~ 22 중량비로 혼합한 후, 상온에서 7 ~ 8 일 동안 침지시키고, 그 상층액을 분리 여과하는 과정을 3 회에 걸쳐 반복 수행하고, 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 만병초 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제5혼합조성물(b5) 0.5 ~ 60.0 wt%;의 혼합으로 조성된 100.0 wt%의 제2조성물(B) 50.0 ~ 90.0 wt%의 혼합으로 조성되는, 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물을 제공한다.
또한 상기 화장료 조성물을 화장품 전체 중량에 대해 0.1 ~ 50.0 wt%로 첨가하여 제조한 기능성 화장품을 제공한다.
본 발명에 따른 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품은 다음의 효과를 갖는다.
첫째. 코코넛 오일; 참께 오일; 포도씨 오일; 및 오미자씨 오일;이 일정 배합비로 조성된 제1조성물과,
스피루리나추출물과 황금추출물이 동 중량비로 배합 조성되는 제1혼합조성물; 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물이 동 중량비로 배합 조성되는 제2혼합조성물; 연뿌리 추출물과 익모초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되는 제3혼합조성물; 토복령 추출물과 승마꽃 추출물이 동 중량비로 배합 조성되는 제4혼합조성물; 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되는 제5혼합조성물;이 일정 배합비로 조성된 제2조성물이 혼합되어 화장료 조성물 및 화장품을 이룸에 따라, 피부재생, 보습, 항산화, 피부보호 및 주름개선, 미백, 항노화의 복합 기능을 제공한다.
둘째. 천연 추출물을 이용하여 피부자극이 없고 피부에 안정적이다.
셋째. 산초 추출물; 이끼 추출물; 백두옹 추출물; 자몽씨 추출물의 혼합으로 조성되는 보존기능성조성물을 화장료 조성물에 부가적으로 첨가함으로써, 항균, 항산화 기능성이 뛰어난 보존기능성조성물에 의한 세균 감염 등의 차단으로 인해 보다 청결하고 안전한 사용이 가능하며 보존기간을 연장할 수 있다는 장점을 갖는다.
이하, 상기의 기술 구성에 대한 구체적인 내용에 대해 살펴보도록 한다.
상기한 바와 같이 본 발명에 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물은,
코코넛 오일 5.0 ~ 50.0 wt%와, 참께 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 포도씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 오미자씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%의 혼합으로 조성된 100.0 wt%의 제1조성물(A) 10.0 ~ 50.0 wt%;
스피루리나와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 인큐베이터에서 20 ~ 30 ℃, 130 ~ 160 rpm의 조건으로 50 ~ 80 시간 동안 진탕 추출하고, 추출한 추출물을 원심분리기에서 7,000 ~ 9,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 스피루리나추출물과,
황금과 메탄올을 1 : 4 ~ 6 중량비로 혼합한 후, 65 ~ 75℃에서 20 ~ 30 시간 동안 환류추출하고, 추출물을 4 ~ 6 분 동안 3,500 ~ 4,500 rpm으로 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하여 수득한 황금추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제1혼합조성물(b1) 0.5 ~ 60.0 wt%;
아마씨 분말과 에탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 아마씨 추출물과,
비타민나무잎과 에탄올을 1 : 15 ~ 25 중량비로 혼합한 후, 상온에서 22 ~ 26 시간 동안 침지하여 상징액과 침전물을 분리하고, 동일한 과정을 3회 반복하여 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 비타민나무잎 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제2혼합조성물(b2) 0.5 ~ 60.0 wt%;
건조 연뿌리 분말과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 연뿌리 추출물과,
익모초와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 100 ℃, 100 ~ 140 rpm의 조건으로 1 ~ 5 시간 동안 진탕 추출하고, 수득한 추출물을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 익모초 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제3혼합조성물(b3) 0.5 ~ 60.0 wt%;
토복령과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 토복령 추출물과,
승마꽃과 70 % 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 23 ~ 28 ℃, 80 ~ 150 rpm으로 40 ~ 55 시간 동안 진탕추출하고, 수득한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 승마꽃 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제4혼합조성물(b4) 0.5 ~ 60.0 wt%;
아카시아(Robiniapseudoacacia) 꽃을 건조 후 분쇄한 분말과 정세수를 1 : 35 ~ 45 중량비로 혼합한 후, 85 ~ 99 ℃에서 5 ~ 7 시간동안 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 아카시아 꽃 추출물과,
만병초와 에탄올을 1 : 20 ~ 22 중량비로 혼합한 후, 상온에서 7 ~ 8 일 동안 침지시키고, 그 상층액을 분리 여과하는 과정을 3 회에 걸쳐 반복 수행하고, 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 만병초 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제5혼합조성물(b5) 0.5 ~ 60.0 wt%;의 혼합으로 조성된 100.0 wt%의 제2조성물(B) 50.0 ~ 90.0 wt%의 혼합으로 조성된다.
< 제1조성물 >
상기 제1조성물은 코코넛 오일 5.0 ~ 50.0 wt%와, 참께 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 포도씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 오미자씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%의 혼합으로 조성되는 것으로서, 구체적인 배합예는 다음의 표 1과 같다.
배합예 1 배합예 2 배합예 3 배합예 4
코코넛 오일 5.0 wt% 50.0 wt% 25.0 wt% 20.0 wt%
참께 오일 20.0 wt% 5.0 wt% 50.0 wt% 25.0 wt%
포도씨 오일 25.0 wt% 20.0 wt% 5.0 wt% 50.0 wt%
오미자씨 오일 50.0 wt% 25.0 wt% 20.0 wt% 5.0 wt%
합 계 100.0 wt% 100.0 wt% 100.0 wt% 100.0 wt%
코코넛은 일반적으로‘코코넛 팜’또는‘코코넛’으로 불린다. 코코넛오일은 정제 코코넛 오일과 버진 코코넛 오일로 구분될 수 있다. 상기 정제 코코넛 오일은 코코넛에서 추출한 과육을 햇빛에 말린 코프라(copra)를 열을 가한 후 압착하여 기름을 짜내고 정재, 표백, 탈취의 공정을 거처 생산한 오일이다.
상기 버진 코코넛 오일은 신선한 야자열매의 과육을 간 후 가열이나 화학물질의 사용 없이 기계식 압착으로 코코넛 밀크 상태의 혼합액을 생산하여 이를 정치 또는 원심 분리하여 오일을 얻는 방식이다.
상기 오일의 분리 방법에는 여러 가지가 있으나 대표적인 두 가지 방식은 먼저 압착으로 얻어낸 신선한 코코넛 밀크를 정치, 발효하여 오일을 추출해 내거나 고속 원심 분리기로 추출한다. 이후 잔류 섬유질 등의 제거를 위해 필터를 사용하여 여과시키면 최종 생산품이 나오게 되는데, 이를 버진 코코넛 오일이라 부른다.
참깨의 영명은 Sesame이고 학명은 Sesamum orientale 또는 Sesamum indicum L.이다. 참깨과(Pedaliaceae) 참깨속(Sesamum)의 1년생 초본식물로 2-3cm의 타원형 삭과 안에, 노란색, 검은색 등의 씨가 맺힌다. 기름은 식용, 식용 가공품인 마가린, 공업원료인 비누, 화장품 또는 약용으로 쓴다.
참깨의 리그난 화합물이 자체적으로 가진 항산화 효과 외에도 참기름에 다량 함유된 항산화 비타민인 γ-tocopherol의 항산화 활성을 상승시키며, 폐경기 여성의 성호르몬 활성화와 혈액지질 개선, 항고혈압 효과, 신장에서의 항산화 효과, 지방간 완화 작용 등 다양한 생리활성을 가진다는 연구 보고가 있다.
참깨의 영양학적 성분을 살펴보면 지질 49 ~ 55 %, 단백질 18 ~ 20 % 당질 15 ~ 17 % 정도를 함유하고 있으며, 그 밖의 지용성 유효성분으로 토코페롤(tocopherol)과 리그난(lignan) 화합물이 있다.
포도씨는 10 ~ 20%의 비교적 높은 지방을 함유하고 있어 최근 이를 압착하여 식용유지로 사용하고 있다. 포도씨유는 불포화 지방산의 함량이 높으며 리놀레인산의 함량이 가장 높다. 리놀레인산은 항당뇨, 동맥경화증의 예방, 항염증 효과가 있음이 알려져 있다. 포도씨유는 인체에 유익한 지방산과 항산화 작용에 탁월한 비타민 E, 그리고 LDL-콜레스테롤의 함량을 낮추는 식물성스테롤의 함량이 높다.
오미자는 목련과 (Magnoliaceae)에 속하는 낙엽성 목본식물로 감미(甘美), 산미(酸美), 신미(辛美), 고미(苦美), 함미(鹹美)의 다섯가지의 맛이 난다. 동의보감에서는 오미자가 체내의 비생리적 작용을 조절하는 역할과 심장,간장,허로,소갈에 효능이 있으며 폐와 신장을 보호하는 기능이 있다고 기록되어 있다.
오미자 추출물의 미백 및 주름개선의 항염증 효과, 오미자씨 오일의 항산화능, 콜라겐 합성능, 항균효과 및 피부재생 효과 등 오미자 추출물의 약리활성에 대한 연구는 지속적으로 이루어지고 있다.
< 제2조성물 >
상기 제2조성물은 스피루리나추출물과 황금추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 보습기능을 갖는 제1혼합조성물 0.5 ~ 60.0 wt%; 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항산화 기능을 갖는 제2혼합조성물 0.5 ~ 60.0 wt%; 연뿌리 추출물과 익모초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 피부보호 및 주름개선 기능을 갖는 제3혼합조성물 0.5 ~ 60.0 wt%; 토복령 추출물과 승마꽃 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 미백 기능을 갖는 제4혼합조성물 0.5 ~ 60.0 wt%; 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항노화 기능을 갖는 제5혼합조성물 0.5 ~ 60.0 wt%; 혼합으로 조성되는 것으로서, 구체적인 배합예는 다음의 표 2와 같다.
배합예 1 배합예 2 배합예 3 배합예 4 배합예 5
제1혼합조성물 10.0 wt% 25.0 wt% 15.0 wt% 30.0 wt% 20.0 wt%
제2혼합조성물 20.0 wt% 10.0 wt% 25.0 wt% 15.0 wt% 20.0 wt%
제3혼합조성물 30.0 wt% 20.0 wt% 10.0 wt% 25.0 wt% 20.0 wt%
제4혼합조성물 15.0 wt% 30.0 wt% 20.0 wt% 10.0 wt% 20.0 wt%
제5혼합조성물 25.0 wt% 15.0 wt% 30.0 wt% 20.0 wt% 20.0 wt%
합 계 100.0 wt% 100.0 wt% 100.0 wt% 100.0 wt% 100.0 wt%
1. 제1혼합조성물
상기 제1혼합조성물은 스피루리나추출물과 황금추출물을 1:1 중량비로 혼합하여 조성된다.
스피루리나(Spirulinaplatensis)는 지구상에서 가장 오래된 조류(algae)의 하나로 약 35억년 전에 탄생한 최초의 광합성 생명체이다.
구성성분으로는 60 ~ 70 %의 단백질, 6 ~ 9 %의 지질, 탄수화물 15 ~ 20 %의탄수화물 및 다량의 비타민, 무기질, 섬유질을 함유하고 있다. 지질 성분 중에는 free-fatty acid가 70 ~ 80 %로 많은 부분을 차지하며 리놀레산(linoleic acid), 감마리놀렌산(γ-linolenic acid) 등으로 구성하고 있다.
탄수화물로는 포도당, 람노스, 만노스, 자일로스 등이 있고, 색소성분으로는 등황색의 카로티노이드, 녹색의 클로로필, 청색의 피코시아닌 등을 가지고 있다. 또한 비타민 B12와 항산화제 역할을 하는 페놀산(phenolicacid), 토코페롤(tocopherols), 베타 카로틴(β-carotene)을 다량 함유하고 있다.
상기 스피루리나 추출물은 스피루리나와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 인큐베이터에서 20 ~ 30 ℃, 130 ~ 160 rpm의 조건으로 50 ~ 80 시간 동안 진탕 추출하고, 추출한 추출물을 원심분리기에서 7,000 ~ 9,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는, 스피루리나 1,000 g을 증류수 25 L에 첨가하여, 인큐베이터에서 25 ℃, 150 rpm의 조건으로 70 시간 동안 진탕추출한다. 추출한 추출물을 원심분리기에서 8,500 rpm으로 20 분간 원심분리한다. 상층액을 취하여 필터 페이퍼(Whatman No.2)로 여과한 후, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
황금(Scutellaria baicalensis)은 식물분류학상 속씨식물계 쌍떡잎식물강 꿀풀목 꿀풀과 골무꽃속에 속하는 여러해살이 풀이다. 자금, 조금, 편금 등으로 불리며 맛은 쓰고, 성질은 차갑고 무독성이다. 주로 뿌리를 약용한다. 황금은 강력한 약리작용을 발휘하는 작물로 알려져 있으며, 항염증, 항암 및 진정 효과를 위한 대체의학의 재료로 활용되어 왔다.
황금추출물은 황금과 메탄올을 1 : 4 ~ 6 중량비로 혼합한 후, 65 ~ 75℃에서 20 ~ 30 시간 동안 환류추출하고, 추출물을 4 ~ 6 분 동안 3,500 ~ 4,500 rpm으로 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 황금추출물의 구체적인 예로는, 건조시킨 황금을 미분쇄한 후, 황금 미분말 1,000 g과 70 % 에탄올 5 L를 혼합하여, 72 ℃에서 15 시간 동안 환류추출한다.
추출물을 3,500 rpm으로 10 분간 원심분리한 후, 상층액을 얻어 필터페이퍼(Whatman No 3. filterpaper)로 여과한다. 여과된 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 62 ℃, 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
2. 제2혼합조성물
상기 제2혼합조성물은 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물을 1:1 중량비로 혼합하여 조성된다.
아마씨 학명은 Linum usitatissimum이고, 아마과(Linaceae) 식물의 종자이다. 아마씨에는 비타민과 필수아미노산이 대량 함유되어 있다. 하지만 대표적으로 풍부하게 함유되어 있는 유익한 성분을 세가지만 꼽자면 오메가-3 지방산, 리그난(Lignan), 식이섬유가 있다.
리그난은 항산력을 갖고 있어 인체에서 아주 유용한 항산화 생리활성 작용들을 한다. 항암, 항분열, 항독성이 우수하고 이미 형성된 종양을 강력하게 억제하는 기능을 가졌다.
상기 아마씨 추출물은 아마씨 분말과 에탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 아마씨 추출물의 구체적인 예로는,
건조 후 분쇄한 아마씨 가루 1,000 g을 95 % 에탄올 10 L에 침지한 후, 62 ℃로 3 시간 동안 가열한다. 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 후, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 62 ℃, 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
비타민나무(Hippophae rhamnoides L.)는 중국, 몽골 등이 원산지인 보리수과 (Elaeagnacease)에 속하는 낙엽성 관목이다. 비타민나무의 잎과 열매에는 비타민과 아미노산 등이 포함되어있으며, 면역강화, 항염작용 등의 효과가 있는 것으로 보고 되고 있다. 열매에는 폴리페놀류, 토코페롤, 카로티노이드, 플라보노이드 등이 함유되어 있고, 잎에는 quercetin, gallic acid, tannin 등의 생리활성물질이 함유되어 있는 것으로 알려졌다.
상기 비타민나무잎 추출물은 비타민나무잎과 에탄올을 1 : 15 ~ 25 중량비로 혼합한 후, 상온에서 22 ~ 26 시간 동안 침지하여 상징액과 침전물을 분리하고, 동일한 과정을 3회 반복하여 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 비타민나무잎 추출물의 구체적인 예로는,
비타민나무잎 1,000 g을 50 % 에탄올 10 L에 첨가하여 상온에서 25 시간 동안 침지시킨 후, 상층액과 침전물을 분리한다. 동일 과정을 3회 반복하여 추출한 여액을 모두 혼합한 후, 그 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 62 ℃, 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
3. 제3혼합조성물
상기 제3혼합조성물은 연뿌리 추출물과 익모초 추출물을 1:1 중량비로 혼합하여 조성된다.
연뿌리는 인도, 중국, 한국, 일본, 시베리아 지역의 연못이나 늪지에서 자라는 수련과의 다년생 수초로 비대경을 식용하는 구근류이다. 뿌리를 비롯한 연잎, 연꽃, 연자육이 식용 및 약용으로 널리 쓰여지고 있다.
연뿌리는 수분 80 ~ 85 %, 탄수화물 12 ~ 15 %를 포함하고, 단백질, 지방 등이 미량 포함되어 있다. 또한 아스파라긴(asparagine) 약 2%를 비롯하여 알기닌(arginine), 티로신(tyrosine), 트리코네린(trigonelline) 등의 아미노산을 함유하고 있으며, 인지질인 레시틴을 많이 함유하고 있어 물과 기름이 잘 섞이게 하는 유화력을 가지고 있다.
상기 연뿌리 추출물은 건조 연뿌리 분말과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는, 물로 세척한 연뿌리를 건조한 후 마쇄하여 분말로 제조한다. 연뿌리 분말 1,000 g을 50 % 에탄올 1 L에 침지시켜 23 ℃에서 20 시간 동안 추출한다. 추출한 추출물을 필터 페이퍼(Whatman No.2)로 여과한 후, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
익모초(Leonurus japonicus H.)는 꿀풀과(Labiatae)에 속하는 2년생 초본이다. 주성분으로는 전초에 alkaloid로서 leonurine, leonuridine, stachynose, stachydrine, flavonoid로서 rutin 외에 protocatechol, benzoic acid 를 비롯해 비타민 A 와 지방유등의 성분이 함유된 것으로 밝혀져있다.
본초강목에서도 익모초즙은 혈액을 활성화시킬 뿐만 아니라 체내 유독한 피를 제거해주며, 아울러 경맥(硬脈) 즉, 혈압이 높아서 긴장정도가 센 맥박을 조절하고 해독작용을 함으로 산후어혈이 계속 나올 때, 어혈로 인해 어지럽고 고열이 나며 통증이 심할 때, 자궁출혈과, 혈뇨, 혈변, 치질, 대.소변 불통(不通)등을 치료하는데 이용한다고 되어 있다.
상기 익모초 추출물은 익모초와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 100 ℃, 100 ~ 140 rpm의 조건으로 1 ~ 5 시간 동안 진탕 추출하고, 수득한 추출물을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는, 건조 익모초 분말 1,000 g을 증류수 15 L에 첨가하여 100℃에서 2 시간 동안 진탕한 후 3,000 rpm에서 15 분간 원심분리하여 찌꺼기를 제거한 상층액을 수득한다. 상기 상층액을 필터 페이퍼(Whatman No.2)로 여과한 후, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
4. 제4혼합조성물
상기 제4혼합조성물은 토복령 추출물과 승마꽃 추출물을 1:1 중량비로 혼합하여 조성된다.
토복령(Smilacis glabrae Rhizoma, SG)은 청미래덩굴의 근경을 지칭하는 생약이다. 청미래덩굴(Smilax china L.)은 덩굴성 관목으로서, 근경은 옆으로 뻗어있다.
토복령은 본초강목에 수재되어 있으며, 해독약으로 만성피부질환, 임질, 이뇨, 매독성피부질환의 치료약물로 사용되어 왔다. 토복령의 주성분으로는 parillin, smilacin 등의 saponin이 보고되어 있으며 뿌리에서 분리된 배당체 ophiopogonin과 점액성 물질이 많이 포함되어 있어 인체의 면역 증진과 각종 세균의 감염으로부터 장기를 보호하는데 중요한 역할을 한다.
상기 토복령 추출물은 토복령과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는, 토복령(Smilacis glabrae Rhizoma, SG)을 음건하고 분쇄한 토복령 분말 1,000 g을 95 % 에탄올 8 L에 침지시켜 65 ℃에서 5 시간 동안 추출한다. 수득한 추출물을 필터 페이퍼(Whatman No.2)로 여과한 후, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압 농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
승마(Cimicifugae Rhizoma)는 미나리아재비과(Ranunculaceae)에 속하는 승마(Cimicifuga heracleifolia Komarov) 또는 동속식물의 뿌리줄기를 말하며, 여름과 가을에 채취하여 수염뿌리를 제거하고 햇볕에 쬐어 말린 것을 쓰며 우리나라에서 자생한다. 다양한 종류의 9,19-cyclolanostane 배당체가 승마에서 발견되었으며 Acetylshengmanol xyloside와 cimicifugoside H-1도 승마에서 발견된 배당체다. 그 외에 cimicifugin, khellol, amminol, caffeic acid, ferulic acid 등의 화합물이 알려져 있다.
상기 승마 추출물은 승마꽃과 70 % 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 23 ~ 28 ℃, 80 ~ 150 rpm으로 40 ~ 55 시간 동안 진탕추출하고, 수득한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는, 분쇄한 승마 분말 1,000 g을 20 L의 70 % 에탄올에 첨가하여 26 ℃, 120 rpm으로 50 시간 동안 진탕추출한다. 수득한 추출물을 필터 페이퍼(Whatman No.2)로 여과한 후, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
5. 제5혼합조성물
상기 제5혼합조성물은 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물을 1:1 중량비로 혼합하여 조성된다.
아카시아 꽃잎의 수분 함유량은 86.60 %이며, 건조시켰을 경우 조단백질(crude protein)은 24.55 %, 조회분(crude ash)은 8.51 %, 총 당분(total sugar)은 30.97 %, 아스코르빈산(ascorbic acid)은 약 16 %, 탄닌산(tannic acid)은 약 15 %로 당, 단백질 및 아스코르빈산 함량이 비교적 높은 것으로 알려져 있다.
상기 아카시아 꽃 추출물은 아카시아(Robiniapseudoacacia) 꽃을 건조 후 분쇄한 분말과 정세수를 1 : 35 ~ 45 중량비로 혼합한 후, 85 ~ 99 ℃에서 5 ~ 7 시간동안 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는, 건조시킨 아카시아 꽃 1,000 g을 잘게 자른 후 50 % 에탄올 10 L와 혼합하여 25 ℃에서 4 시간 단위로 3 회 반복 추출하고, 수득한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한다. 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
만병초(Rhododendron brachycarpum D.Don)는 진달래과 식물로 별칭으로는 천상초(天上草), 뚝갈나무, 풍엽, 석암엽 등 여러 이름으로 불리고 있다. 만병초는 민간에서는 위, 장의 민무늬근 경련에 의해 생기는 요배산통(腰背疝痛), 동통, 관절통, 신장의 기능이 약해져 생기는 신허요통(腎虛腰痛), 음위, 월경불순, 불임증 등의 치료, 신경통, 고혈압, 강장제, 이뇨제로 효과가 있다고 알려져 있다. 또한 만병초 잎의 성분으로 Flavonoids 중 quercetin, avicularin, quercitrin, hyperin이 분리가 보고되었다.
상기 만병초 추출물은 만병초와 에탄올을 1 : 20 ~ 22 중량비로 혼합한 후, 상온에서 7 ~ 8 일 동안 침지시키고, 그 상층액을 분리 여과하는 과정을 3 회에 걸쳐 반복 수행하고, 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 만병초 추출물의 구체적인 예로는,
만병초 1,000 g을 90% 에탄올 10 L와 혼합한 후, 상온에서 7 ~ 8일 동안 침지시키고, 그 상층액을 분리 여과하는 과정을 3회에 걸쳐 반복 수행한다. 그 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 62 ℃, 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
본 발명에 따른 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물은 코코넛 오일 50.0 wt%, 참께 오일 5.0 wt%, 포도씨 오일 20.0 wt%, 오미자씨 오일 25.0 wt%의 혼합으로 조성된 제1조성물 20.0 wt%와,
스피루리나추출물과 황금추출물이 동 중량비로 배합 조성된 제1혼합조성물 20.0 wt%; 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물이 동 중량비로 배합 조성된 제2혼합조성물 20.0 wt%; 연뿌리 추출물과 익모초 추출물이 동 중량비로 배합 조성된 제3혼합조성물 20.0 wt%; 토복령 추출물과 승마꽃 추출물이 동 중량비로 배합 조성된 제4혼합조성물 20.0 wt%; 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물이 동 중량비로 배합 조성된 제5혼합조성물 20.0 wt%;을 포함하여 이루어진 제2조성물 80.0 wt%의 혼합으로 조성된다.
실시예 2에 따른 화장료 조성물은 실시예 1의 화장료 조성물 전체 중량에 대해 잘피(Zostera marina) 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 첨가하여 피부재생 기능을 더 향상시키도록 조성된다.
즉 실시예 1의 화장료 조성물 90.0 ~ 99.9 wt%와 잘피(Zostera marina) 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%의 혼합으로 조성된다. 구체적으로는, 실시예 1의 화장료 조성물 95.0 wt%와 잘피(Zostera marina) 추출물 5.0 wt%의 혼합으로 조성된다.
상기 잘피(Zostera marina) 추출물은 잘피(Zostera marina) 뿌리, 잎, 줄기를 나누어 분쇄한 후 혼합한 잘피(Zostera marina) 분말과 70 % 에탄올을 1 : 10 ~ 20 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지 추출하고, 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는,
잘피(Zostera marina) 뿌리, 잎, 줄기를 나누어 분쇄한 후 혼합한 잘피(Zostera marina) 분말과 70 % 에탄올을 1 : 15 중량비로 혼합한 후, 상온에서 25 시간 동안 침지 추출하고, 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 잘피(Zostera marina)는 바다 식물 가운데 유일하게 뿌리로 영양을 흡수하고 햇볕을 받아 꽃을 피우는 해초이다. 해조류(algae, seaweed)와는 달리 뿌리, 지하경, 잎과 꽃의 구분이 명확하며, 초지(meadow)를 형성하는 것으로 알려져 있다. 항산화 효능, 항염증 효능과 미백효능이 있다고 알려진바 있다
실시예 3에 따른 화장료 조성물은 실시예 1의 화장료 조성물 전체 중량에 대해 구절초 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 첨가하여 피부재생 기능을 더 향상시키도록 조성된다.
즉 실시예 1의 화장료 조성물 90.0 ~ 99.9 wt%와 구절초 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%의 혼합으로 조성된다. 구체적으로는, 실시예 1의 화장료 조성물 95.0 wt%와 구절초 추출물 5.0 wt%의 혼합으로 조성된다.
상기 구절초 추출물은 건조 후 분쇄한 분말과 95 % 에탄올을 1 : 8 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지 추출하고, 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는,
건조 후 분쇄한 구절초 분말과 95 % 에탄올을 1 : 10 중량비로 혼합한 후, 상온에서 25 시간 동안 침지 추출하고, 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 구절초 (Chrysanthemum zawadskii var. latilobum K)는 우리나라를 비롯해 일본, 만주, 중국 등지의 고원이나 들판에 자생하며 국화과 (Compositae)에 속하는 여러해살이 풀로 전초의 생약명은 선모초(仙母草) 혹은 구절초(九折草)라 불린다.
현재까지 연구된 구절초 성분은 flavonoid계 화합물인 lianrin, sesquiterpene lactone계 화합물인 angeloylcumambrin B, cumambrin A, caroenoid계 화합물인 16개의 xanthophylls, sterol화합물인 campesterol[20], monoterpene계 화합물인 camphor과 borneol 그리고 정유성분 등이 보고된 바 있다.
실시예 4에 따른 화장료 조성물은 실시예 1의 화장료 조성물 전체 중량에 대해 백년초 손바닥선인장 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 첨가하여 피부재생 기능을 더 향상시키도록 조성된다.
즉 실시예 1의 화장료 조성물 90.0 ~ 99.9 wt%와 백년초 손바닥선인장 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%의 혼합으로 조성된다. 구체적으로는, 실시예 1의 화장료 조성물 95.0 wt%와 백년초 손바닥선인장 추출물 5.0 wt%의 혼합으로 조성된다.
실시예 5에 따른 화장료 조성물은 실시예 1의 화장료 조성물 전체 중량에 대해 노근 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 첨가하여 피부재생 기능을 더 향상시키도록 조성된다.
즉 실시예 1의 화장료 조성물 90.0 ~ 99.9 wt%와 노근 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%의 혼합으로 조성된다. 구체적으로는, 실시예 1의 화장료 조성물 95.0 wt%와 노근 추출물 5.0 wt%의 혼합으로 조성된다.
상기 노근 추출물은 노근 분말과 94 % 에탄올을 10 ~ 20 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침출시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
더욱 구체적으로는,
노근 분말과 94 % 에탄올을 15 중량비로 혼합한 후, 상온에서 25시간 동안 침출시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 3,000 rpm으로 10 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 노근(Phragmitis Rhizoma)은 키가 큰 여러해살이 풀인 갈대 Phragmitis communis Trin.(벼과 Gramineae)의 근경(根莖)이다. 약리학적 효능은 해열작용, 진액 생성, 구토 억제, 항암작용, 해독작용 등이 있으며, 특히 벼과에 속한 노근과 율무 그리고 백모근에는 coixol의 성분이 다량 함유되어 있어 항염 작용, 과산화물을 제거하는 항산화작용, 배란유발 작용, 항알러지 작용, 항히스타민 작용, 항경련제 작용, 진정제, 해열제, 진통제, 혈당을 낮추는 효과가 있는 것으로 보고된 바 있다.
실시예 6에 따른 화장료 조성물은 실시예 1의 화장료 조성물 전체 중량에 대해 보존기능성조성물 0.01 ~ 3.0 wt%를 더 첨가하여 보존 기간 연장 효과를 갖도록 조성된다.
상기 보존기능성조성물은 산초 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%, 이끼 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%, 백두옹 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%, 자몽씨 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%의 혼합으로 조성되는 것으로서, 구체적인 배합예로는, 산초 추출물 25.0 wt%, 이끼 추출물 25.0 wt%, 백두옹 추출물 25.0 wt%, 자몽씨 추출물 25.0 wt%의 혼합으로 조성된다.
실시예 6에 따른 화장료 조성물의 구체적인 배합비는 실시예 1의 화장료 조성물 98.0 wt%와 상기 보존기능성조성물 2.0 wt%의 배합비로 이루어진다.
상기 보존기능성조성물은 산초 추출물, 이끼 추출물, 백두옹 추출물, 자몽씨 추출물의 혼합으로 조성된 천연방부제로서 화장료 조성물 및 화장품의 보존기간을 연장 기능을 갖는다.
산초나무 (Zanthoxylum schinfolium)는 우리나라 전역의 표고 1,000m 이하 산야에 자생하는 수종으로서 그 열매는 식용유 자원과 여러 가지 조미료로 이용되며 종실유는 물레씨아 등 기구의 윤활유로도 사용된다.
산초는 산초나무의 열매로서, 열매 껍질에 정유가 2 ~ 4 % 함유 되어있고 주성분은 디펜텐(㎗-리모넨), 시트로넬랄, ℓ-β-펠란드렌, 게라니올, 시트로넬롤 등으로 이루어 졌다. 열매에는 성련독인 크산톡신, 마비성분인 크산톡신산, 스테롤로 캄페스테롤, 스티그마스테롤, β-시토스테롤이 함유되어 있다.
상기 산초 추출물은 산초와 메탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 상온에서 22 ~ 26 시간 동안 교반하면서 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 산초 추출물의 구체적인 예로는, 산초 1,000 g와 메탄올(methanol) 10 L을 혼합하여 상온에서 24 시간 동안 교반하면서 추출한다. 추출물을 Filter paper No. 2로 여과하고, 62 ℃, 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
이끼는 항균 및 항산화 효과가 우수한 것으로 보고되어 있으며, 이끼류를 물에 넣을 경우 이끼류의 체내물질 대상에 의해 주변의 물의 산도가 높아져 세균의 활성이 줄어들고 물의 변질을 방지할 수 있다.
선태류에는 이끼류(선류, moss, Musci), 우산이끼류(태류, liverwort, Hepaticae), 그리고 뿔이끼류(각태류, hornwort, Anthocerotae)가 있다. 이러한 이끼류는 미생물 번식을 억제하고 항산화 작용에 의해 천연 보존제로서의 활용 가치가 높다.
상기 이끼 추출물은 이끼를 수세한 후 55 ~ 65 ℃에서 열풍건조 후 분쇄하고, 분쇄한 이끼와 100 % 메탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 냉각관이 부착된 환류냉각장치에서 58 ~ 62 ℃에서 5 ~ 7 시간 동안 환류냉각추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 이끼 추출물의 구체적인 예로는, 솔이끼, 큰깃털이끼, 털깃털 이끼를 동 중량비율로 혼합한 이끼혼합물을 수세하여 탈수한 다음 62 ℃에서 6 시간 동안 열풍 건조하여 분쇄한다. 분쇄한 건시료 1,000 g과 100 % 메탄올 10 L을 냉각관이 부착된 환류냉각장치에 담아 혼합한 후 58 ℃에서 7 시간 동안 환류냉각 추출한다.
추출물은 5 ㎛ 기공크기를 갖는 필터페이퍼(pore size filter paper)로 여과하고, 62 ℃, 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
백두옹(P ulsatilla k oreana N akai et M ori)은 미나리제재과 (ranunculaceae)에 속하는 다년초로서 우리나라 각지에 야생하며 중국 동북에도 분포한다. 이 생약은 통상적으로 치통, 해열, 수종에 응용되었고, 소염, 수렴, 지혈,이질, 청열해독, 음낭대하, 항균, 진정, 항암 등에 사용되어왔다. 예로부터 우리 민간에서는 이 물질을 소염, 진통, 해열, 해독의 목적으로 많이 사용되었고 항균효과가 있음이 보고되어왔다.
상기 백두옹 추출물은 백두옹을 수세하여 동결건조기로 건조한 후 파우더(powder) 형태로 가공하고, 파우더 형태의 백두옹과 증류수를 1 : 10 ~ 12 배의 중량비율로 혼합한 후 75 ~ 85 ℃에서 2 ~ 4 시간 동안 환류추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
상기 백두옹 추출물의 구체적인 예로는, 파우더(powder) 형태의 백두옹 1,000 g을 증류수 10 L와 혼합하여 혼합물을 조성한 후, 상기 혼합물을 80 ℃에서 3 시간 동안 환류추출한다. 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한다.
여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 62 ℃, 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 1 L의 추출물을 수득한다.
자몽은 쥐손이풀목 운향과 상록교목으로 즙이 많으며 조금 신맛이 강하다. 자몽씨추출물은 천연 항균물질로서 주된 성분은 아스코르빈산, palmitic acid, 글루코오즈, 나린진 그리코 토코페롤 등이 존재하며 곰팡이 균주의 성장과 mycotoxin 생합성을 저해한다.
상기 자몽씨 추출물은 상기 자몽씨와 에탄올을 1 : 5 ~ 10 중량비로 혼합한 후, 60 ~ 62 ℃의 온도 조건에서 2 ~ 3 시간 동안 환류냉각추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 10,000×g에서 20 ~ 40 분간 원심분리하여 취한 상층액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
구체적인 예로는, 자몽씨와 에탄올을 1 : 8 중량비로 혼합한 후, 60 ℃의 온도 조건에서 2 시간 동안 환류냉각추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 10,000×g에서 30 분간 원심분리하여 취한 상층액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.2 mPA의 조건에서 5 시간 동안 감압농축하여 수득한 것을 사용한다.
1. 정제수(D.I Water) 703.15 g, 카보폴(Carbopol) 2.0 g, 글리세린(Glycerine) 50.0 g + 크산탄 검(Xanthan gum) 0.05 g, 알라토인(Allantoin) 2.0g, 베타인(Betaine) 5.0 g, 알지닌(L-Arginine) 1.0 g, 트레할로스(Trehalose) 30.0 g, 아데노신(Adenosine) 0.4 g을 혼합하여 수상을 만든다.
2. 리포이드(Lipoid S75-3) 5.0 g, 글리세롤 모노 스테아레이트-105(GMS 105) 5.0 g, 밀납(Bees Wax) 5.0 g, 세트아르 알코올(Cetearyl Alcohol) 10.0 g, 시어버터(Shea butter) 10.0 g, 페녹시에탄올(Phenoxyethanol) 10.0 g, 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드(MCT) 50.0 g, 트윈 60(Tween#60) 15.0 g, 포도씨오일(Grape Seed Oil) 15.0 g, 감편도유(Sweet Almond Oil) 25.0 g, 메틸파라하이드록시벤조에이트(Methyl Parahydroxy Benzoate) 1.0 g을 모두 가열로 녹여 유상을 만든다.
3. 상기 유상을 상기 수상과 혼합하여 혼합물을 조성한다.
4. 상기 혼합물의 온도가 38 ℃ 이하로 떨어지면 실시예 1의 화장료 조성물 50 g, 사이클로메치콘(DC345) 5.0 g, 향료 0.4 g을 넣어 교반하여 로션을 완성한다.
비교예 1은 정제수(D.I Water)의 양을 753.15 g으로 하고, 본 발명에 따른 화장료 조성물을 사용하지 않고 로션을 완성한 것이다.
본 실시예는 상기 실시예 7과 동일한 과정을 거쳐 로션을 제조하되, 다만 화장료 조성물을 사용함에 있어, 실시예 2의 화장료 조성물 50.0 g을 사용하여 로션을 제조한다.
본 실시예는 상기 실시예 7과 동일한 과정을 거쳐 로션을 제조하되, 다만 화장료 조성물을 사용함에 있어, 실시예 3의 화장료 조성물 50.0 g을 사용하여 로션을 제조한다.
본 실시예는 상기 실시예 7과 동일한 과정을 거쳐 로션을 제조하되, 다만 화장료 조성물을 사용함에 있어, 실시예 4의 화장료 조성물 50.0 g을 사용하여 로션을 제조한다.
본 실시예는 상기 실시예 7과 동일한 과정을 거쳐 로션을 제조하되, 다만 화장료 조성물을 사용함에 있어, 실시예 5의 화장료 조성물 50.0 g을 사용하여 로션을 제조한다.
본 실시예는 상기 실시예 7과 동일한 과정을 거쳐 로션을 제조하되, 다만 화장료 조성물을 사용함에 있어, 실시예 6의 화장료 조성물 50.0 g을 사용하여 로션을 제조한다.
[시험예 1]
< 항산화 측정 >
상기 실시예 7 내지 12에 따른 로션의 항산화 효과를 측정하고자 한다.
50 % 디메틸설폭사이드(DMSO)에 실시예 7 내지 12 및 비교예 1의 로션 시료를 희석한 후, 각각의 로션 시료 80 ㎕를 취한 후, 상기 화장품 시료에 10mM DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)용액 280 ㎕를 넣고 15 초간 vortexing한 후, 증류수를 1 mL 첨가 후, 40 ℃에서 35 분간 방치하고 517 nm에서 비교예 대비 흡광도를 측정하였다.
40 ℃에서의 항산화 활성을 측정한 결과,
실시예 7은 50.71 %, 실시예 8은 51.48 %, 실시예 9는 53.41 %, 실시예 10은 56.84 %, 실시예 11은 57.12 %, 실시예 12는 58.01 %로 측정되었다. 비교예 1은 11.29 %로 측정되었다.
상기 실시예 7 내지 실시예 12에 따른 화장료 조성물의 항산화 효과는 실시예 12 > 실시예 11 > 실시예 10 > 실시예 9 > 실시예 8 > 실시예 7의 순서로 확인되었다. 상기 실시예 7 내지 실시예 12는 배합 구성에 따라 다소의 항산화 활성의 차이를 보이고 있기는 하나 비교예 1에 비해 높은 항산화 효과를 가지고 있음을 확인할 수 있다.
[시험예 2]
< 항균 측정 >
실시예 7 내지 실시예 12의 로션의 항균 효과를 측정하고자 한다.
병균성 균주 Staphylococcus aureus KCCM 11335, Escherichia Coli, Pseudomonas aeruginosa KCCM 11802, Candida albicans KCCM 11282, Aspagillusniger KCCM 60143에 대하여 항균시험을 하였다.
그람 양성균 Staphylococcus aureus (S. aureus, KCCM 11335), 그람 음성균 Pseudomonas aeroginosa (P. aeroginosa, KCCM 11802)와 Escherichia coli(E. coli, KCCM 40271), 효모류의 Candida albicans (C.albicans KCCM 11282), 곰팡이균인 Aspergillus niger (A. niger KCCM 60143)를 배양하되, 세균은 37 ℃, 진균은 26 ℃, 250 rpm으로 조절된 쉐이킹 인큐베이터(shaking incubator)에서 배양하였다.
이와 같이 배양한 병균성 균주를 실시예 7 내지 실시예 12의 화장품에 접종하여 1 일, 3 일 및 7 일에 각각 생균수를 측정하였으며, 그 측정결과 실시예 7 내지 실시예 12 모두에서 생균수가 검출되지 않았다.
[시험예 3]
< 주름 개선 효과 측정 >
1. Elastase 저해율 측정
Elastase와 N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide의 반응으로 활성이 증가하게 되는데 50 % 활성이 감소하는 농도를 IC50(㎍/㎖)로 저해 정도를 측정하였다.
기질 1.0 mM N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide 200 ㎕에 실시예 1 내지 실시예 6의 화장료 조성물 각각을 500 ㎍/㎖로 희석시킨 시료용액 20 ㎕와 2.5U Elastase 10 ㎕를 첨가하여 25 ℃에서 10 min동안 반응 한 후 ELISA reader로 410 nm에서 흡광도를 측정하였다. Elastase 저해율은 다음과 같이 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타낸다.
저해율(%) = {1 - (시료첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도)} ×100
측정결과 무첨가구인 대조구(Ursolic acid 사용)의 저해율은 40.25 %이고, 실시예 1의 저해율은 54.01 %, 실시예 2의 저해율은 56.24 %, 실시예 3의 저해율은 55.55 %, 실시예 4의 저해율은 55.27 %, 실시예 5의 저해율은 57.87 %, 실시예 6의 저해율은 56.71 %로 확인되었다.
2. Collagenase 저해율 측정
Collagen을 분해하는 Collagenase의 작용을 이용하여 활성정도를 평가하는 것으로 50 % 활성이 감소하는 농도를 IC50(㎍/㎖)로 저해 정도를 측정하였다.
Collagen을 20 mM Tris-HCl(pH 7.5)와 5 mM CaCl2의 buffer 용액에 녹여 3 ㎍/㎖의 기질액을 만든다. Buffer 200 ㎕, 기질액 20 ㎕, 실시예 1 내지 실시예 8의 주름개선 화장료 조성물 각각을 500 ㎍/㎖로 희석시킨 시료용액 20 ㎕를 첨가한 후 Collagenase를 첨가하여 37 ℃에서 1시간 반응 시킨다. 2 % ninhydrin reagent 100 ㎕를 더하여 20 분간 반응 한 후 ELISA reader로 570 nm에서 흡광도를 측정하였다.
측정결과 실시예 1의 저해율은 76.18 %, 실시예 2의 저해율은 76.87 %, 실시예 3의 저해율은 79.21 %, 실시예 4의 저해율은 78.24 %, 실시예 5의 저해율은 77.45 %, 실시예 6의 저해율은 79.56 %로 확인되었다.
실시예 1 내지 실시예 6의 화장료 조성물의 Elastase 저해율와 Collagenase 저해율 결과를 통해 주름개선 효과가 있음을 확인하였으며, 이로써 상기 화장료 조성물을 포함하는 화장품의 주름개선 효과를 예측할 수 있다.
[시험예 4]
< 미백 효과 측정 >
피부의 기저 층에 존재하는 멜라노사이트는 자외선의 자극을 받은 타이로신으로부터 멜라닌을 합성하여 피부를 보호한다. 그러나 지나친 멜라닌의 생성은 미적으로나 피부건강상 문제를 야기할 수 있으므로 피부를 자외선으로부터 보호하거나 멜라닌의 생성억제가 필요하다.
미백화장품의 미백효능을 검사하기 위하여, 피부질환이 없는 20 ~ 40세 여성 12명을 피시험자로 선정하여 티로시나아제 활성(tyrosinase activity) 저해율 측정, 멜라닌(melanin) 생성 억제 측정을 수행하였다.
1. 티로시나아제 활성(tyrosinase activity) 저해율 측정
티로시나아제(Tyrosinase)는 피부의 색소 성분인 멜라닌(melanin)의 생합성에 관여하는 유일한 효소이다. 티로시나아제 활성(tyrosinase activity)의 저해율을 구하는 공식은 다음과 같다.
티로시나아제 활성(tyrosinase activity) 저해율(%)
= 100 - [(b-b')/(a-a')] × 100
a: 공시료액의 반응 후의 흡광도
b: 시료액의 반응 후의 흡광도
a', b': 티로시나아제(Tyrosinase) 대신 완충액으로 대체하여 측정한 흡광도
96 well plate에 0.02 M Sodium phosphate buffer(pH 6.5) 0.5 ㎖와 10 mM L-DOPA 기질액 0.2 ㎖와 실시예 1 내지 6 중 선택되는 화장료 조성물 0.1 ㎖를 개별적으로 첨가하여 조성된 혼합액에 mushroom tyrosinase(110 Unit/mL) 0.2 ㎖를 첨가하고 37 ℃ 에서 2 분간 반응시킨 후 475 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.
비교예인 대조군으로는 알부틴(albutin)을 사용하였다.
티로시나아제 저해효과를 확인하기 위하여, 실시예 1 내지 실시예 6에 따른 화장료 조성물을 대신하여 미백제로 의약외 품 및 화장품에 쓰이는 알부틴(albutin)(비교예)과 실시예 1 내지 실시예 6에 따른 화장료 조성물의 미백활성을 비교하였다.
비교예인 0.1% 알부틴(albutin)의 미백활성이 68.53 %로 측정되었다.
실시예 1의 미백활성은 65.13 %; 실시예 2의 미백활성은 65.75 %; 실시예 3의 미백활성은 64.24 %; 실시예 4의 미백활성은 64.27 %; 실시예 5의 미백활성은 64.49 %;실시예 6의 미백활성은 63.54 %;를 보여 미백제로 의약외 품 및 화장품에 사용되는 알부틴(albutin)과 거의 유사한 높은 활성을 나타내었다.
따라서 이를 통해 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 6에 따른 화장료 조성물의 미백효과 크다는 것을 알 수 있다.
2. 멜라닌(Melanin) 생성 억제
B16 melanoma 세포를 6 well plate에 3 ㎖로 분주한 후 10 % FBS이 함유된 phenol red-free DMEM 용액에서 12시간 동안 배양하였다.
실시예 1 내지 실시예 6에 따른 화장료 조성물을 각각 36 ℃에서 12 분간 배양하여 전처치한 후, 1 uM의 MSH를 처치하여 37 ℃에서 48 시간 동안 배양하였다.
배양이 끝나고 난 후 1 %(w/v) Triton X-100을 함유한 10 mM sodium phoshate buffer(pH 6.8)를 100 uL 가하고 5 분간 shaking한 후 에펜도르프 튜브(eppendorf tube)로 옮긴다.
이를 3,000 rpm에서 5 분간 원심분리하여 얻은 cell pellet에 1 N NaOH 100 uL와 증류수 200 uL를 가하고 60 ℃에서 1 시간 배양하여 멜라닌을 완전히 녹인 후 96 well plate에 200 uL를 옮기고 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.
Microplate Reader(Infinite 200, Tecan Group Ltd.,Switzerland)를 이용하여 490㎚ 파장의 흡광도를 측정 비교하였다.
억제능(Inhibition)(%) = [1-(A1/A0)]×100
A0 : 무첨가구의 흡광도 (control)
A1 : 시료첨가구의 흡광도
실험결과 실시예 1의 억제능은 64.12 %; 실시예 2의 억제능은 63.28 %; 실시예 3의 억제능은 65.41 %; 실시예 4의 억제능은 65.87 %; 실시예 5의 억제능은 64.12 %; 실시예 6의 억제능은 65.47 %;로 보여 우수한 억제능을 보임을 확인할 수 있었다.
상기 티로시나아제 활성(tyrosinase activity) 저해율 측정 결과와 멜라닌(Melanin) 생성 억제 결과를 통해 본 발명에 따른 화장료 조성물을 화장품에 적용할 경우 미백효과가 클 것이라는 것을 예상할 수 있다.
[시험예 5]
< 항노화 측정 >
상기 실시예 1 내지 6에 따른 화장료 조성물의 항노화 효과를 측정하고자 한다.
피부 노화 중 광노화에 의한 피부 노화는 자외선 노출에 의해 불규칙한 색소 침착, 피부 처짐, 혈관 확장증, 탄력 감소, 수포생성 및 깊고 굵은 주름이 생기며 피부가 매우 거칠고 건조해지면서 발생한다. 특히 피부 내 콜라겐 양이 줄어들고 탄력섬유가 변성되어 주름살이 생기게 된다.
자외선의 작용으로 인해 피부는 과산화물 음이온(superoxide anion), 과산화물(peroxide), 일중항 산소(singlet oxygen) 등을 포함하는 유해한 활성산소(reactive oxygen species, ROS)를 과잉 생성하게 되고 자외선 노출에 의해 항산화 효소와 글루타치온, 비타민 E, 비타민 C 및 유비퀴놀과 같은 저 분자량의 항산화제는 감소한다. 그리고 산화적 스트레스는 지질과산화, 단백질산화, 간질 성분을 파괴시키는 단백질 분해효소의 활성화, 탄력섬유인 콜라겐과 엘라스틴의 파괴, 세포 성분의 손상등을 야기시키고 광노화를 촉진시킨다.
상기 활성산소(reactive oxygen species, ROS)는 세포호흡 과정에서 산소 분자가 불완전 환원되었을 때 생성되는 중간산물로서 자유 라디칼(free radical)을 갖는 산소를 말한다. ROS는 산소의 정상적인 대사 작용에 의해서 자연스럽게 생기며 세포신호와 항상성에 중요한 역할을 한다. ROS의 농도는 자외선이나 높은 열에 노출되는 것처럼 환경적인 스트레스로 인하여 극적으로 증가할 수 있다.
ROS의 증가로 산화적 스트레스가 생겨 피부의 광노화, 색소 침착 등 질병의 원인이 된다.
상기 실시예 1 내지 6에 따른 화장료 조성물의 항광노화 효과를 알아보기 위하여 사람 각질형성 세포주인 HaCaT cell(ATCC, Manassas, VA, USA)을 이용하여 실험을 진행하였다.
HaCaT 세포에 정상배지(비교예 1)를 넣거나, 실시예 1 내지 6에 따른 화장료 조성물 100μg/ml을 각각 주입한 배지에서 24시간 동안 배양 후, UVB 80 mJ/㎠을 조사한 후 Multi-ModeMicroplateReader로 측정하였다.
HaCaT 세포에 UVB 80 mJ/㎠를 조사한 비교예 1과 비교한 결과,
실시예 1에 따른 화장료 조성물로 처리한 경우 ROS는 77.3 %가 감소하였고,
실시예 2에 따른 화장료 조성물로 처리한 경우 ROS는 77.6 %,
실시예 3에 따른 화장료 조성물로 처리한 경우 ROS는 76.3 %,
실시예 4에 따른 화장료 조성물로 처리한 경우 ROS는 76.6 %,
실시예 5에 따른 화장료 조성물로 처리한 경우 ROS는 77.9 %,
실시예 6에 따른 화장료 조성물로 처리한 경우 ROS는 79.0 %로 각각 감소 폭을 보였다. 이와 같은 결과를 통해 본 발명에 따른 화장료 조성물의 활성산소 억제 효과를 확인할 수 있었으며, 이를 통해 제조된 화장품의 항노화효과를 예측할 수 있다.
[시험예 6]
상기 실시예 7 내지 12에 따라 제조된 로션의 피부 재생 효과에 대해 살펴보도록 한다.
< 피부 재생 효과 >
실험용 6 마리의 쥐 꼬리에 2 * 2 mm 크기로 가각 상처를 유발 한 후, 상기 실시예 7 내지 12에 따라 제조된 로션을 도포한 후 3일 단위로 9일간 관찰하였다.
피부 재생 결과는 Scion image software를 이용하여 쥐꼬리 상처 영역의 피부재생 효과를 백분율로 나타내었다.
상기 실시예 7 내지 12에 따라 제조된 로션 실험용 6 마리의 쥐 꼬리의 상처 부위에 도포한 3일 후 측정 결과 평균 20.25±0.96 %의 피부 재생이 있었으며, 6일차에는 60.21±1.70 %, 9일차에는 85.42±2.05 %의 피부재생 효과를 확인할 수 있었다. 이로써 본 발명의 실시예 7 내지 12에 따라 제조된 로션의 피부재생 효과를 확인할 수 있었다.
본 발명에 따른 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물 및 이를 이용한 화장품은 코코넛 오일; 참께 오일; 포도씨 오일; 및 오미자씨 오일;을 일정 배합비로 조성되어 피부 재생 기능을 갖는 제1조성물과, 스피루리나추출물과 황금추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 보습기능을 갖는 제1혼합조성물; 아마씨 추출물과 비타민나무잎 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항산화 기능을 갖는 제2혼합조성물; 연뿌리 추출물과 익모초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 피부보호 및 주름개선 기능을 갖는 제3혼합조성물; 토복령 추출물과 승마꽃 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 미백 기능을 갖는 제4혼합조성물; 아카시아 꽃 추출물과 만병초 추출물이 동 중량비로 배합 조성되어 항노화 기능을 갖는 제5혼합조성물;의 혼합으로 조성되는 제2조성물이 혼합조성되어, 피부재생, 보습, 항산화, 피부보호 및 주름개선, 미백, 항노화의 복합 기능을 제공하고 또한 외부 환경스트레스 요인에 의해 손상된 피부의 재생 효과가 뛰어나 산업상 이용가능성이 크다.

Claims (7)

  1. 코코넛 오일 5.0 ~ 50.0 wt%와, 참께 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 포도씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%, 오미자씨 오일 5.0 ~ 50.0 wt%를 포함하는 100.0 wt%의 제1조성물(A) 10.0 ~ 50.0 wt%;
    스피루리나와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 인큐베이터에서 20 ~ 30 ℃, 130 ~ 160 rpm의 조건으로 50 ~ 80 시간 동안 진탕 추출하고, 추출한 추출물을 원심분리기에서 7,000 ~ 9,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 스피루리나추출물과,
    황금과 메탄올을 1 : 4 ~ 6 중량비로 혼합한 후, 65 ~ 75℃에서 20 ~ 30 시간 동안 환류추출하고, 추출물을 4 ~ 6 분 동안 3,500 ~ 4,500 rpm으로 원심분리하여 수득한 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하여 수득한 황금추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제1혼합조성물(b1) 0.5 ~ 60.0 wt%;
    아마씨 분말과 에탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 아마씨 추출물과,
    비타민나무잎과 에탄올을 1 : 15 ~ 25 중량비로 혼합한 후, 상온에서 22 ~ 26 시간 동안 침지하여 상징액과 침전물을 분리하고, 동일한 과정을 3회 반복하여 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 58 ~ 63 ℃에서 5 ~ 7시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 비타민나무잎 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제2혼합조성물(b2) 0.5 ~ 60.0 wt%;
    건조 연뿌리 분말과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 연뿌리 추출물과,
    익모초와 증류수를 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 100 ℃, 100 ~ 140 rpm의 조건으로 1 ~ 5 시간 동안 진탕 추출하고, 수득한 추출물을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 익모초 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제3혼합조성물(b3) 0.5 ~ 60.0 wt%;
    토복령과 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 50 ~ 80 ℃에서 2 ~ 10 시간 동안 침지시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 토복령 추출물과,
    승마꽃과 70 % 에탄올을 1 : 5 ~ 30 중량비로 혼합한 후, 23 ~ 28 ℃, 80 ~ 150 rpm으로 40 ~ 55 시간 동안 진탕추출하고, 수득한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 승마꽃 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제4혼합조성물(b4) 0.5 ~ 60.0 wt%;
    아카시아(Robiniapseudoacacia) 꽃을 건조 후 분쇄한 분말과 정세수를 1 : 35 ~ 45 중량비로 혼합한 후, 85 ~ 99 ℃에서 5 ~ 7 시간동안 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 아카시아 꽃 추출물과,
    만병초와 에탄올을 1 : 20 ~ 22 중량비로 혼합한 후, 상온에서 7 ~ 8 일 동안 침지시키고, 그 상층액을 분리 여과하는 과정을 3 회에 걸쳐 반복 수행하고, 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 만병초 추출물을 동 중량비로 배합 조성한 제5혼합조성물(b5) 0.5 ~ 60.0 wt%;를 포함하는 100.0 wt%의 제2조성물(B) 50.0 ~ 90.0 wt%를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서,
    제2조성물(B)은
    잘피(Zostera marina) 뿌리, 잎, 줄기를 나누어 분쇄한 후 혼합한 잘피(Zostera marina) 분말과 70 % 에탄올을 1 : 10 ~ 20 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지 추출하고, 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 잘피(Zostera marina) 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물.
  3. 청구항 1에 있어서,
    제2조성물(B)은
    구절초를 건조 후 분쇄한 분말과 95 % 에탄올을 1 : 8 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침지 추출하고, 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 구절초 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서,
    제2조성물(B)은
    손바닥 선인장(Opuntiahumifusa) 줄기 추출물은 손바닥 선인장(Opuntiahumifusa) 줄기를 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 건조하여 분쇄한 분쇄물과 80 % 에탄올을 1 : 2 ~ 5 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침출시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 백년초 손바닥선인장 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물.
  5. 청구항 1에 있어서,
    제2조성물(B)은
    노근을 건조한 후 분쇄한 노근 분말과 94 % 에탄올을 10 ~ 20 중량비로 혼합한 후, 상온에서 20 ~ 30 시간 동안 침출시켜 추출하고, 추출한 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여액을 원심분리기에서 2,000 ~ 4,000 rpm으로 10 ~ 30 분 동안 원심분리한 후, 상층액을 여과한 여액을 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하여 수득한 노근 추출물 0.1 ~ 10.0 wt%를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물.
  6. 청구항 1에 있어서,
    제2조성물(B)은
    산초와 메탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 혼합물을 상온에서 22 ~ 26 시간 동안 교반하면서 추출하고, 추출물을 여과하고, 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄한 분말형태인 산초 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%와,
    이끼를 수세한 후 55 ~ 65 ℃에서 열풍건조 후 분쇄하고, 분쇄한 이끼와 100% 메탄올을 1 : 10 ~ 15 중량비로 혼합한 후, 냉각관이 부착된 환류냉각장치에서 58 ~ 62 ℃에서 5 ~ 7 시간 동안 환류냉각추출하고, 추출물을 여과하고, 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄한 분말형태 이끼 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%와,
    백두옹을 수세하여 동결건조기로 건조한 후 파우더(powder) 형태로 가공하고, 파우더 형태의 백두옹과 증류수를 1 : 10 ~ 12 배의 중량비율로 혼합한 후 75 ~ 85 ℃에서 2 ~ 4 시간 동안 환류추출하고, 추출물을 필터페이퍼(filter paper)로 여과하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄한 분말형태인 백두옹 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%와,
    자몽씨와 에탄올을 1 : 5 ~ 10 중량비로 혼합한 후, 60 ~ 62℃의 온도 조건에서 2 ~ 3 시간 동안 환류냉각시킨 다음 10,000×g에서 20 ~ 40 분간 원심분리하고, 여과한 추출물을 감압농축기(vacuum rotation evaporator)로 0.1 ~ 0.3 mPA의 조건에서 5 ~ 7 시간 동안 감압농축하고, 동결건조기(Freeze dryer)를 이용하여 2 ~ 4 일 동안 건조시킨 후, 균질기를 이용하여 30 ~ 50 mesh로 분쇄한 분말형태인 자몽씨 추출물 0.01 ~ 50.0 wt%를 포함하는 100.0 wt%의 보존기능성조성물 0.01 ~ 3 wt%를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물.
  7. 청구항 1 내지 청구항 6 중 선택되는 어느 1의 화장료 조성물이 화장품 전체 중량에 포함되도록 0.1 ~ 50.0 wt%를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 재생 효과를 갖는 화장품.


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