KR102127479B1 - 폴리아민 고함유 효모 및 이를 포함하는 음식품 조성물 - Google Patents
폴리아민 고함유 효모 및 이를 포함하는 음식품 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은, 협회7호 효모와 비교하여, 류신합성효소, 아코니트산합성효소, S-아데노실-L-메티오닌합성효소, 아스파라긴산/글루타민산수송단백 중 어느 1개 또는 그 이상의 아미노산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 아미노산이 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이되어 있거나, 혹은 제3 염색체에 코드되어 있는 LEU1유전자, 제10 염색체에 코드되어 있는 ACO2유전자, 제12 염색체에 코드되어 있는 SAM1유전자, 제16 염색체에 코드되어 있는 AGC1유전자 중 어느 1개 또는 그 이상의 염기산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 염기가 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이되어 있고, 또한 폴리아민을 고함유하고 있는, 효모변이체를 제공한다.
Description
본 발명은 폴리아민 고함유 효모, 특히 스페르미딘 고함유 효모 및 이를 포함하는 음식품 조성물에 관한 것이다.
기능성 식품분야에서는 세포를 활성화할 수 있는 것이 요구되고 있다. 그 중에서 폴리아민이라 불리는 제1급 아미노기를 2개 이상 갖는 직쇄상의 생체내 지방족 탄화수소가 높은 효과를 갖는, 함유물이 식품으로서 제공되고 있다. 대표적인 폴리아민으로서, 푸트레신, 스페르미딘 및 스페르민을 들 수 있다. 폴리아민의 생리작용으로는, (1)세포증식작용, (2)세포분화촉진작용, (3)면역필수인자, (4)항알레르기작용, (5)단백질합성촉진작용, (6)핵산과의 상호작용에 의한 구조의 안정화, (7)효소활성조절작용 등이 알려져 있다. 최근에는, 경구섭취한 폴리아민에 의해 수명이 연장된다고 보고도 행해졌다.
공업적으로 이용할 수 있는 폴리아민 또는 폴리아민 조성물의 제조방법으로는, 효모균체 또는 효모배양액을 산성 조건하에서 처리하여 조제하는 방법(특허문헌 1)이 개시되어 있다. 또한, 식물소재로부터의 폴리아민 조성물의 조제방법으로는, 식물소재를 산성 조건하에 처리하여 추출하는 방법(특허문헌 2), 식물소재에 식염, 염화마그네슘, 염화칼슘 등의 염용액을 첨가하여 폴리아민추출물을 제조하는 방법(특허문헌 3)이 검토되어 왔다. 실제로 폴리아민을 고함유하는 식품으로서 쌀추출물, 대두추출물, 효모추출물이 존재한다. 이들의 폴리아민 고함유 식품은 세포를 활성화시키는 것을 알고 있으나, 추가로 세포를 활성화시키는 식품이 요구되고 있다. 또한, 효모의 배양액에 시약인 폴리아민을 혼합함으로써, 폴리아민 고함유 효모를 얻는 방법(특허문헌 4)도 알려져 있으나, 효모 자신에게 폴리아민을 생산시키는 것이 아니고, 식품으로서 인정되지 않은 폴리아민의 순품을 외부로부터 도입한다는 수법을 취하고 있는 점에서, 이러한 효모를 식품으로서 제공하는 것은 인정되지 않는다는 문제가 있었다. 또한, 효모를 배양할 때에 스트레스(에탄올첨가, 식염첨가 등에 의한 침투압)를 가함으로써 균체 내에 포함되는 폴리아민을 고농도로 하는 것도 가능하기는 하나(비특허문헌 1), 스트레스에 의해 효모의 증식이 저해되므로, 생산성이 극단으로 낮다는 문제가 있다.
폴리아민 중에서도 스페르미딘과 스페르민은 체내 이용률이 높고, 기능성의 점에서 우수하다. 특히, 스페르미딘은 그 허용일일섭취량이 스페르민보다도 높고, 보다 대량으로 섭취하기에 바람직하다(비특허문헌 2).
일본농예화학회 1995년도 대회강연요지집 p.129
Food Chem Toxcol, 35(3)337-348(1997)
본 발명은, 보다 세포를 활성화하는 폴리아민 고함유 효모, 특히 스페르미딘 고함유 효모 및 이를 포함하는 음식품 조성물의 제공을 과제로 한다.
종래는, 폴리아민 고함유의 식물소재로부터 산 등으로 폴리아민을 추출하고, 농축함으로써, 엑기스로서 폴리아민 고함유 식품을 얻는다는 수법이 이용되어 왔다. 본 발명자는 예의 그 문제해결을 검토해온 결과, 예상외로, 외부로부터 시약인 폴리아민을 효모내에 도입하지 않고, 게다가 고농도식염 등의 스트레스를 주는 일 없이 폴리아민을 고함유하는 변이효모를 만들어내는 것에 성공하고, 본 발명을 완성시키기에 이르렀다. 본 발명에 따른 효모는 균체 내에 폴리아민을 고함유하고 있으므로, 폴리아민의 추출·농축을 경유하지 않고도 폴리아민은 효모세포 내에 고농도로 쌓이게 된다.
즉, 본 발명은, 이하의 발명을 포함한다.
[1]
협회7호 효모와 비교하여,
류신합성효소, 아코니트산합성효소, S-아데노실-L-메티오닌합성효소, 아스파라긴산/글루타민산수송단백 중 어느 1개 또는 그 이상의 아미노산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 아미노산이 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이되어 있거나, 혹은
제3 염색체에 코드되어 있는 LEU1유전자, 제10 염색체에 코드되어 있는 ACO2유전자, 제12 염색체에 코드되어 있는 SAM1유전자, 제16 염색체에 코드되어 있는 AGC1유전자 중 어느 1개 또는 그 이상의 염기산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 염기가 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이되어 있고,
또한 폴리아민을 고함유하고 있는, 효모변이체.
[2]
협회7호 효모에 있어서의, LEU1유전자의 266번째의 C, ACO2유전자의 1964번째의 T, SAM1유전자의 1130번째의 C, AGC1유전자의 744번째의 A에 대응하는 위치에 있는 염기 중 어느 1개 또는 그 이상이 일염기치환되어 있는, [1]에 기재된 효모변이체.
[3]
LEU1유전자의 266번째의 C에 대응하는 염기가 A, 제10 염색체에 코드되어 있는 ACO2유전자의 1964번째의 T에 대응하는 염기가 C, 제12 염색체에 코드되어 있는 SAM1유전자의 1130번째의 C에 대응하는 염기가 G, 제16 염색체에 코드되어 있는 AGC1유전자의 744번째의 A에 대응하는 염기가 T인, [2]에 기재된 효모변이체.
[4]
사카로미세스(Saccharomyces)에 속하는 효모인, [1]~[3] 중 어느 하나에 기재된 효모변이체.
[5]
폴리아민의 함유량이 푸트레신, 스페르미딘 및 스페르민의 총량인, [1]~[4] 중 어느 하나에 기재된 효모변이체.
[6]
[1]~[5] 중 어느 하나에 기재된 효모변이체와 결정성 다당류를 함유하는 음식품 조성물.
[7]
효모변이체와 결정성 다당류의 중량비가 1:0.1~1인, [6]에 기재된 조성물.
[8]
결정성 다당류가 시클로덱스트린 및/또는 난소화성 덱스트린인, [6] 또는 [7]에 기재된 조성물.
[9]
협회7호 효모와 비교하여,
류신합성효소, 아코니트산합성효소, S-아데노실-L-메티오닌합성효소, 아스파라긴산/글루타민산수송단백 중 어느 1개 또는 그 이상의 아미노산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 아미노산이 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합에 대하여 변이시키거나, 혹은
제3 염색체에 코드되어 있는 LEU1유전자, 제10 염색체에 코드되어 있는 ACO2유전자, 제12 염색체에 코드되어 있는 SAM1유전자, 제16 염색체에 코드되어 있는 AGC1유전자 중 어느 1개 또는 그 이상의 염기산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 염기가 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이시키는 공정을 포함하는,
폴리아민을 고함유하고 있는 효모변이체의 제조방법.
얻어진 변이주의 게놈을 Illumina HiSeq를 이용하여 해석하고, 야생주의 배열과 비교한 결과, 폴리아민의 합성에 관한 4개의 유전자의 호모변이가 확인되었다. 제3 염색체에 코드되어 있는 류신합성유전자LEU1의 266번째의 C가 A로, 제10 염색체에 코드되어 있는 아코니트산합성유전자ACO2의 1964번째의 T가 C로, 제12 염색체에 코드되어 있는 S-아데노실-L-메티오닌합성유전자SAM1의 1130번째의 C가 G로, 제16 염색체에 코드되어 있는 아스파라긴산/글루타민산수송유전자AGC1의 744번째의 A가 T로 변이되어 있었다. 폴리아민합성유전자로서, 제16번 염색체에 코드되어 있는 아르기나아제유전자CAR1, 제11번 염색체에 코드되어 있는 오르니틴탈탄산유전자SPE1, 제16번 염색체에 코드되어 있는 스페르미딘합성유전자SPE3, 제12번 염색체에 코드되어 있는 스페르민합성유전자SPE4가 알려져 있으나, 이외에도, 이들 이외의 유전자의 변이에 의해 폴리아민 고생산주가 얻어지는 것을 알 수 있었다. 게다가, 본 발명에 따른 폴리아민 고생산주는 유전자변형에 의해 생산된 것이 아니므로, 식품으로서 호적한 것이라고 생각된다.
따라서, 본 발명에 따르면, 세포활성화에 효과적인 폴리아민 고함유 효모, 특히 스페르미딘 고함유 효모 및 이것을 포함하는 음식품을 제공할 수 있다. 본 발명에 따른 효모는, 효모내에 폴리아민을 함유함으로써, 동일한 폴리아민함량의 종래의 쌀추출물, 대두추출물, 효모추출물로부터 세포의 활성화의 효과를 발휘시킬 수 있다. 추가로 부차적인 효과로서, 본 발명에서 얻어지는 폴리아민 고함유 효모는 결정성 다당류와 조합한 경우, 스페르미딘을 포함한 폴리아민의 열안정이 우수한 것이 명백해졌다. 이 때문에, 본 발명의 효모를 결정성 다당류와 조합함으로써, 가열조리하기 쉬운 폴리아민 고함유 음식품을 제공하는 것이 가능해진다.
도 1은, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 LEU1유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 2a는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 ACO2유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 2b는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 ACO2유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 3은, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 SAM1유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 4a는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 AGC1유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 4b는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 AGC1유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 2a는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 ACO2유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 2b는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 ACO2유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 3은, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 SAM1유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 4a는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 AGC1유전자의 염기배열을 나타낸다.
도 4b는, 야생형(협회7호 효모)과 비교하여 본원발명에 따른 효모의 AGC1유전자의 염기배열을 나타낸다.
(폴리아민 고함유 효모)
일태양에 있어서, 본 발명은, 협회7호 효모와 비교하여, 류신합성효소, 아코니트산합성효소, S-아데노실-L-메티오닌합성효소, 아스파라긴산/글루타민산수송단백 중의 1개 또는 그 이상의 아미노산배열에 있어서, 100개 이하, 바람직하게는 20개 이하, 보다 바람직하게는 1개 또는 수개, 예를 들어 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 아미노산이 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이되어 있거나, 혹은
제3 염색체에 코드되어 있는 LEU1유전자, 제10 염색체에 코드되어 있는 ACO2유전자, 제12 염색체에 코드되어 있는 SAM1유전자, 제16 염색체에 코드되어 있는 AGC1유전자 중 어느 1개 또는 그 이상의 염기산배열에 있어서, 1개 또는 수개, 예를 들어 2개, 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개의 염기가 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이되어 있고,
또한 폴리아민을 고함유하고 있는 효모변이체(이하, 「변이효모」, 「변이체」, 「폴리아민 고함유 효모」라고도 한다)를 제공한다.
보다 구체적으로는, 본 발명에 따른 효모변이체는 폴리아민을 효모 1g(건조중량)당 1.5mg 이상, 바람직하게는 2.0mg 이상, 보다 바람직하게는 3.0mg, 보다 더욱 바람직하게는 10mg 이상 함유할 수 있다.
변이효모는 사카로미세스(Saccharomyces)속에 속하는 효모, 바람직하게는 사카로미세스·세레비제(Saccharomyces cerevisiae)를 당업자에게 공지의 방법으로 변이시킴으로써 얻을 수 있다. 보다 구체적으로는, 일본양조협회의 7호주(이하, 간단히 「협회7호주」라고도 한다)에 대하여 자외선조사함으로써 본 발명의 변이체가 얻어진다. 다른 효모로부터 출발해도 되고, 일본특허 제5974891호 공보에 기재되어 있는 사카로미세스·세레비제IFO2346에 대하여 자외선조사함으로써 본 발명의 변이체가 얻어진다.
혹은, 폴리아민을 고함유하는 효모를 제작하기 위해, 폴리아민을 합성축적하는 능력이 높은 다른 주로부터 출발해도 된다. 폴리아민을 대량으로 포함하는 배지에서 효모를 배양하거나, 또는 스트레스(에탄올첨가, 식염첨가 등에 의한 침투압)를 가함으로써 균체 내에 포함되는 폴리아민을 고농도로 하는 것도 가능하기는 하나, 이러한 변이체는, 이러한 조작을 거치지 않고도 폴리아민을 대량으로 생산하고, 균체 내에 축적할 수 있는 기능을 갖는 점에서 통상의 효모와는 상이하다. 에탄올이나 식염 등에 의한 침투압 스트레스를 부여하면서 배양한 경우는, 스트레스의 영향에 의해, 효모의 증식이 저해되므로, 생산성이 극단으로 낮다. 그러나, 이러한 변이체의 경우, 비스트레스하에서의 배양에 있어서도 스페르미딘 고함유 효모 등의 폴리아민 고함유 효모가 얻어지므로, 생산성이 우수하다.
폴리아민 고함유 효모를 얻기 위해 실시예에서 사용한 협회7호주는 청주효모의 1종(사카로미세스·세레비제)이며, NBRC(NITE Biological Resource Center)에 있어서 101557하에 등록되어 있다.
본 발명의 폴리아민 고함유 효모는, 협회7호주와 같은 출발재료로서의 효모균을, 효모엑기스를 포함하는 배지에서 배양하고, 배양 후에 집균하고, 가열살균한 다음에 분무건조를 가함으로써 얻어진다. 혹은, 본 발명의 폴리아민 고함유 효모는, 자외선조사 등의 당업자에게 공지의 수법으로 변이처리한 효모균을, 효모엑기스를 포함하는 배지에서 배양하고, 배양 후에 집균하고, 가열살균한 다음에 분무건조를 가함으로써 얻어진다. 배지 중의 효모엑기스의 농도는 0.1% 이상 10% 이하인 것이 바람직하다.
변이처리방법은, 특별히 한정되지 않고, 공지의 방법을 사용할 수 있다. 예를 들어, 에틸메탄설폰산, N-메틸-N-니트로-N-니트로소구아니딘, 아질산, 아크리딘계 색소 등에서의 화학처리; 자외선조사; 방사선조사 등의 방법을 들 수 있다.
변이개소는, 류신합성효소, 아코니트산합성효소, S-아데노실-L-메티오닌합성효소, 아스파라긴산/글루타민산수송단백 중 어느 1개 이상의 아미노산배열 또는 염기배열이 폴리아민을 고함유하도록 변이하고 있는 한 특별히 한정되지 않는다. 보다 구체적으로는, 협회7호 효모의 유전자배열와 비교하여, 제3 염색체에 코드되어 있는 LEU1유전자의 266번째의 C가 A로, 제10 염색체에 코드되어 있는 ACO2유전자의 1964번째의 T가 C로, 제12 염색체에 코드되어 있는 SAM1유전자의 1130번째의 C가 G로, 제16 염색체에 코드되어 있는 AGC1유전자의 744번째의 A가 T로 치환되어 있는 것이 바람직하다. 이러한 점변이의 도입은 공지의 유전자 공학적 수법 등에 의해 행할 수도 있다.
본 명세서에 있어서의 「점변이」란, 본 발명에 있어서는 협회7호주의 염기배열와 비교하여, 대응하는 염기배열 상에 보이는 일염기치환을 말한다. 점변이에는, 통상, 퓨린간 또는 피리미딘간의 치환인 트랜지션변이, 또는 퓨린과 피리미딘간의 치환인 트랜스버전변이가 있으나, 본 발명에 있어서는, 변이효모에 폴리아민을 고함유시키는 것이면 어떠한 변이여도 된다. 점변이는, 공지의 생물학적 수법, 예를 들어, 원하는 변이를 도입할 수 있도록 설계된 프라이머를 이용한 PCR이나, 변이를 도입하고자 하는 어느 하나측의 좌위에 상동하는 도너(예를 들어 일쇄올리고뉴클레오티드나 플라스미드)를 이용한 게놈편집기술(CRISPR/Cas9) 등에 따라 도입할 수 있다.
폴리아민이란 아미노기가 복수결합한 직쇄지방족 탄화수소의 총칭이며, 그 예로서, 푸트레신, 스페르미딘, 스페르민, 1,3-디아미노프로판, 카다베린, 칼딘, 호모스페르미딘, 아미노프로필카다베린, 테레민, 테르모스페르민, 카나발민, 아미노펜틸노르스페르미딘, N,N-비스(아미노프로필)카다베린, 호모스페르민, 칼도펜타민, 호모칼도펜타민, 칼도헥사민, 호모칼도헥사민스페르미딘 등을 들 수 있다. 특별히 언급하지 않는 한, 본 명세서에서 사용하는 경우의 「폴리아민」이란, 세포활성화능력이 높은 푸트레신, 스페르미딘 및 스페르민으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 또는 복수의 화합물을 의미한다.
폴리아민량은, 분무건조한 효모로부터 추출한 푸트레신, 스페르미딘 및 스페르민의 양을 합계함으로써 측정할 수 있다. 건조효모는, 효모를 포함하는 배지로부터 여과나 원심분리기에 의해 균체를 취출하고, 건조함으로써 얻어진다. 배지성분을 제거하기 위해 세정을 행해도 된다. 한편, 효모의 건조에는 스프레이드라이, 감압건조, 동결건조 등을 사용할 수 있고, 당업자는 목적에 맞추어 적당히 건조방법을 선택할 수 있다.
(폴리아민 고함유 효모를 포함하는 조성물)
다른 태양에 있어서, 본 발명은 폴리아민 고함유 효모, 특히 스페르미딘 고함유 효모를 포함하는 조성물로서, 특히 세포를 활성화하는 조성물을 제공한다. 폴리아민에 열안정성 등의 기능을 부여하는 관점에서, 조성물 중에는 효모 이외에 결정성 다당류가 포함되어 있어도 된다. 결정성 다당이란 천연으로 결정성의 고체로서 존재하는 다당을 의미하고, 그 예로서, 전분, 덱스트린, 글리코겐 및 셀룰로오스가 있다. 결정성 다당류 이외의 통상의 당류를 조성물과 병용한 경우, 당류가 사탕상으로 변화하여 굳어져 버려, 조성물의 취급이 곤란해진다.
환상 구조를 갖는 덱스트린인 시클로덱스트린은, 결정성 다당류로서 호적하게 사용될 수 있다. 시클로덱스트린에는 알파, 베타, 감마형이 있으며, 어느 것이나 결정성 다당류로서 사용가능하다. 이들 중에서도, 알파시클로덱스트린, 감마시클로덱스트린이 바람직하다. 다른 덱스트린, 예를 들어 난소화성 덱스트린도 본 발명의 조성물에 사용할 수 있다.
폴리아민 고함유 건조효모와 결정성 다당류의 중량비는 1:0.1~3인 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 폴리아민 고함유 효모와 결정성 다당류의 중량비 1:0.1~1이다. 결정성 다당류가 이보다 적으면 효모의 안정성이 떨어진다. 또한, 이 범위보다 높은 경우, 조성물당 폴리아민, 특히 스페르미딘의 함유량이 지나치게 낮아져, 인체 내 등에서 스페르미딘 등의 원하는 기능을 발휘하기 위해서는 대량으로 조성물을 섭취할 필요가 있다.
폴리아민 고함유 효모와 결정성 다당류를 조합함으로써, 효모를 안정되게 하여 취급하기 쉽게 할 수 있다. 효모와 결정성 다당류의 혼합은 건식, 습식 어느 쪽을 취해도 상관없다. 습식으로 행하는 경우, 당류를 멸균처리하여 효모와 혼합한 후에 건조하여 만드는 것이 가능해진다. 또한, 건조효모로서 혼합하지 않고, 미건조의 효모로서 혼합한 후에 건조하여 조성물을 만드는 것이 가능하다.
한정하는 것을 의도하는 것은 아니나, 결정성 다당류를 포함하는 조성물은, 예를 들어, 효모를 4일간 배양 후, 원심분리로 집균·농축하고, 그것에 γ-시클로덱스트린을 첨가한 후에, 60℃에서 1시간 가열하고, 이것을 분무건조함으로써 얻어진다.
본 발명의 조성물은 여러 가지 용도로 사용하는 것이 상정된다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은, 여러 가지 일반음식품뿐만 아니라, 영양강화가 필요한 개체, 특히 세포의 활성을 필요로 하는 개체가 섭취가능하도록, 기능성이 표시되어 있는 음식품, 예를 들어 특정 보건용 음식품, 영양기능 음식품, 기능성 표피 음식품, 보건기능 음식품, 특별용도 음식품, 영양보조 음식품, 건강보조 음식품, 서플리먼트, 미용용 음식품, 기타 건강용 음식품, 혹은 의약품, 의약용부외품, 화장품에 포함할 수 있다.
유효성분으로서의 변이효모는, 그대로의 상태로 조성물에 포함되는 것도 있고, 파쇄하여 분말상으로 한 것을 조성물에 첨가해도 된다. 조성물에는 다른 생리활성성분이나 부형제 등의 첨가제를 첨가할 수도 있다.
조성물의 형태도 특별히 한정되지 않고, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 젤리상 등으로 할 수 있다. 특정 형태에 대하여 추가로 가공해도 되고, 예를 들어, 압축타정함으로써 얻어진 정제상의 조성물의 표면을 피복하거나 할 수도 있다. 또한, 분체를 과립상으로 조립하는 것이나, 분체나 조립한 과립을 담아 캡슐화할 수도 있다.
본 발명의 조성물은 정제 또는 분말 형태의 식품으로서 사용할 수 있다. 또한, 주스나 유제품 등의 음식품이나 서플리먼트와 같은 영양보조식품에 영양강화의 목적으로 첨가할 수 있다. 그 형태는 액체, 정제, 분말, 캡슐 등의 상용의 형태여도 된다. 다른 태양으로서, 본 발명의 조성물은 음식품 그 자체가 아니어도, 음식품에 첨가되는 조미료로서 사용할 수도 있다. 조성물 중에는 효모가 50~100% 포함되어 있는 것이 바람직하다.
(폴리아민 고함유 효모의 제조방법)
다른 태양에 있어서, 본 발명은 폴리아민 고함유 효모를 제조하는 방법을 제공한다. 폴리아민 고함유 효모의 제조방법은, 협회7호 효모와 비교하여,
류신합성효소, 아코니트산합성효소, S-아데노실-L-메티오닌합성효소, 아스파라긴산/글루타민산수송단백 중 어느 1개 또는 그 이상의 아미노산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 아미노산이 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합에 대하여 변이시키거나, 혹은
제3 염색체에 코드되어 있는 LEU1유전자, 제10 염색체에 코드되어 있는 ACO2유전자, 제12 염색체에 코드되어 있는 SAM1유전자, 제16 염색체에 코드되어 있는 AGC1유전자 중 어느 1개 또는 그 이상의 염기산배열에 있어서, 1개 또는 수개의 염기가 치환, 결실, 삽입 혹은 부가, 또는 이들 중 2개 이상의 조합으로 변이시키는 공정을 포함한다. 해당 방법은 추가로, 효모에 폴리아민을 고함유시키는 임의의 공정을 포함해도 된다.
이하, 실시예에 의해 본 발명을 더욱 상세히 설명하나, 본 발명은 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
폴리아민함유량을 구하는 법:
샘플 10~100mg에, 5%의 과염소산 및 2ppm의 1,7-디아미노헵탄을 용해한 수용액을 4ml 첨가하여 현탁하고, 50℃에서 10분~1시간 유지함으로써, 분체 중의 폴리아민을 추출하였다. 그 후, 추출물을 원심분리하고, 얻어진 상청 0.1ml에 대하여, 2%의 과염소산 및 2ppm의 1,7-디아미노헵탄을 용해한 수용액을 0.4ml 첨가한 후, 18% 탄산나트륨수용액 0.25ml에 혼합하였다. 혼합물을 추가로 1% 단실클로라이드 0.5ml와 혼합하고, 45℃에서 1시간 유지하였다. 이것에 10% 프롤린수용액을 0.25ml 첨가하고, 다시 45℃에서 10분 유지하였다. 그 후, 혼합물에 톨루엔을 2ml 첨가하고, 격하게 혼합한 후, 톨루엔층을 1ml 취득하였다. 다시 톨루엔층을 질소취입에 의해 건고하고, 아세토니트릴 0.5ml에 재용해한 것을 액체크로마토그래피에 의해 분석하였다. 검량선은, 1,7-디아미노헵탄의 농도를 2ppm으로 고정한 다음에, 스페르미딘, 스페르민, 푸트레신의 각 폴리아민에 대하여 0.125~8ppm의 희석계열을 작성하여, 그 액체크로마토그래피 분석값(피크면적값)으로부터 작성하였다. 특별히 언급하지 않는 한, 상기의 시약은 와코순약제인 것을 사용하였다.
액체크로마토그래피조건:
장치: 시마즈제작소, 고속액체크로마토그래피, LC-20A
칼럼: YMC-Pack ODS-TMS(5μm), 150x4.6mm I.D.
측정온도: 40℃
검출: 형광검출기 여기 365nm에 있어서의, 510nm 형광
용리액: 아세토니트릴:물=72:28
용출속도: 1.5mL/min
(변이주의 취득)
변이 전의 친주로서, 효모는 사카로미세스(협회7호주)를 사용하였다. 친주를 Bacto제 효모엑기스 1%, Bacto제 펩톤 2%, 글루코오스 2%를 포함하는 액체배지에서 30℃에서 16시간 진탕배양한 후, 배양액에 45W의 자외선을 조사하였다. 그 후, 배양액을 50mM인산칼륨버퍼(pH7)로 1~10만배 희석하고, Bacto제 효모엑기스 1%, Bacto제 펩톤 2%, 글루코오스 2%, 아가로오스 2%를 포함하는 한천배지에 도포하였다. 한천배지를 30℃에서 2일간 정치하고, 출현한 콜로니 중에서 폴리아민 고생산주를 산출하였다.
이 고생산주의 게놈을 다카라바이오사제 GenTLE군(등록상표)으로 추출하였다. 그 후, Illumina HiSeq를 이용하여 고생산주의 게놈해석을 행하고, 야생주의 배열과 비교한 결과, 폴리아민의 합성에 관한 4개의 유전자의 호모변이가 확인되었다. 즉, 제3 염색체에 코드되어 있는 류신합성유전자LEU1의 266번째의 C가 A로, 제10 염색체에 코드되어 있는 아코니트산합성유전자ACO2의 1964번째의 T가 C로, 제12 염색체에 코드되어 있는 S-아데노실-L-메티오닌합성유전자SAM1의 1130번째의 C가 G로, 제16 염색체에 코드되어 있는 아스파라긴산/글루타민산수송유전자AGC1의 744번째의 A가 T로 변이되어 있는 것을 알 수 있었다. 류신합성유전자LEU1, 아코니트산합성유전자ACO2, S-아데노실-L-메티오닌합성유전자SAM1, 아스파라긴산/글루타민산수송유전자AGC1에 대하여, 본 발명에 따른 염기배열을 배열번호1, 3, 5, 7에, 야생형인 것을 배열번호2, 4, 6, 8에 나타낸다.
폴리아민합성유전자로서, 제16번 염색체에 코드되어 있는 아르기나아제유전자CAR1, 제11번 염색체에 코드되어 있는 오르니틴탈탄산유전자SPE1, 제16번 염색체에 코드되어 있는 스페르미딘합성유전자SPE3, 제12번 염색체에 코드되어 있는 스페르민합성유전자SPE4가 알려져 있으나, 고생산주에 있어서는 어떤 폴리아민합성유전자도 변이되지 않았다.
(실시예 1)
상기 폴리아민고생산의 변이효모균주를 배양하였다. 배양은 수크로오스 50g/L, 황산암모늄 3g/L, 인산2수소칼륨 4g/L, 인산수소2칼륨 2g/L, 황산마그네슘·7수화물 0.4g/L, 박토효모엑기스 10g/L, 비오틴 0.002g/L, 염화칼슘·2수화물 0.4g/L, 염화망간·4수화물 0.01g/L, 황산아연·7수화물 0.02g/L, 구연산철·n수화물 0.06g/L, 붕산 0.002g/L, 몰리브덴산암모늄·4수화물 0.001g/L, 요오드화칼륨 0.001g/L, 황산구리·5수화물 0.001g/L, 염화코발트·6수화물 0.001g/L, 식염 0.05g/L의 조성의 배지에서 행하였다. 배양온도 30℃에서 교반하면서 4일간 변이효모를 배양하였다. 배양액을 원심분리하여 균체를 농축하고, 다시 수세하였다. 이것을 60℃에서 1시간 가열처리하고, 스프레이드라이하였다. 스프레이드라이는 뷰히제 미니스프레이드라이어 b-290을 사용하였다. 출구온도 85~90℃에서 건조효모를 얻었다. 건조효모에는 푸트레신 0.72mg/g, 스페르미딘 3.62mg/g, 스페르민 0.38mg/g(합계 4.72mg/g)이 포함되어 있었다.
(참고예)
일본특허 제5974891호 공보 단락 0014에 기재된 방법으로, S-아데노실메티오닌(SAMe)함유 효모를 얻었다. 푸트레신은 검출되지 않고, 스페르미딘은 0.29mg/g, 스페르민은 0.16mg/g(합계 0.45mg/g)이었다.
(비교예 1)
사카로미세스(협회7호주)를 실시예 1과 동일한 조건으로 배양 등 함으로써 비교예 1의 건조효모를 얻었다. 푸트레신은 비검출, 스페르미딘의 함유량은 0.51mg/g, 스페르민의 함유량은 0.45mg/g(합계 0.96mg/g)이었다.
(실시예 2)
결정성 다당류의 효과를 확인하기 위해, 상기의 실시예 및 비교예에 더하여, 스프레이드라이공정 전에 γ-시클로덱스트린을 첨가한 샘플을 조제하였다.
실시예 1에서 얻은 변이효모(푸트레신 0.72mg/g, 스페르미딘 3.62mg/g, 스페르민 0.38mg/g이며, 합계 4.72mg/g)의 배양액을 원심분리하여 균체를 농축하고, 다시 수세하였다. 배양액에 있어서의 균체량(균농도×브로스액량):시클로덱스트린중량의 비율이 7:3이 되도록, 이 균체와 γ-시클로덱스트린을 배지 중에서 혼합하였다. 얻어진 혼합물을 60℃에서 1시간 처리하였다. 이 시점에서의 폴리아민함량은, 건조고형분당, 푸트레신 0.55mg/g, 스페르미딘 2.63mg/g, 스페르민 0.29mg/g이며, 합계 3.47mg/g이었다. 시클로덱스트린을 넣은 만큼, 단위중량당의 폴리아민함량은 낮아져 있으나, 효모균 중의 폴리아민은 제거되지 않았다. 그 후, 뷰히제 미니스프레이드라이어 b-290을 이용하여 효모를 스프레이드라이하였다. 출구온도 85~90℃에서 건조효모를 얻었다. 이 건조효모는, 건조효모에 더하여, 시클로덱스트린을 30중량% 함유하는 분말상의 조성물이다(이후, 건조효모 또는 그 분말상의 조성물을 효모분체라고도 한다). 폴리아민함유량은 푸트레신이 0.55mg/g, 스페르미딘이 2.63mg/g, 스페르민 0.29mg/g(합계 3.47mg/g)이었다. 스프레이드라이 전후에서 폴리아민함량은 감소되어 있지 않았다.
(실시예 3)
실시예 1의 변이효모를 실시예 1과 동일한 조건으로 배양하였다. 제조한 효모(푸트레신 1.07mg/g, 스페르미딘 4.24mg/g, 스페르민 0.36mg/g이며, 합계 5.66mg/g)를 포함하는 배양액을 원심분리하여 균체를 농축하고, 다시 수세하였다. 이 균체에 α-시클로덱스트린이 50중량%가 되도록 α-시클로덱스트린을 포함하는 수용액을 첨가하였다. 이것을 60℃에서 1시간 처리하였다. 이 시점에서의 폴리아민함량은, 건조고형분당, 푸트레신이 0.58mg/g, 스페르미딘이 2.18mg/g, 스페르민이 0.18mg/g이며, 합계 2.93mg/g이었다. 시클로덱스트린을 넣은 만큼, 단위중량당의 폴리아민함량은 낮아져 있으나, 효모균 중의 폴리아민은 제거되지 않았다. 계속해서 효모를 스프레이드라이하였다. 스프레이드라이는 뷰히제 미니스프레이드라이어 b-290을 사용하였다. 출구온도 95~100℃에서 건조효모분체를 얻었다. 건조분체 중의 폴리아민함유량은, 푸트레신이 0.63mg/g, 스페르미딘이 2.26mg/g, 스페르민이 0.19mg/g(합계 3.08mg/g)이었다. 스프레이드라이 전후에서 폴리아민함량은 감소되어 있지 않았다.
(실시예 4)
균체농축 전의 실시예 2의 효모배양액과 비교예 1의 효모배양액을 2:3의 비율로 혼합하고, 이것을 60℃에서 1시간 처리하였다. 그 후, 효모배양액을 진공건조함으로써 건조효모를 얻었다. 그 결과, 푸트레신의 함유량이 0.29mg/g, 스페르미딘의 함유량이 1.75mg/g, 스페르민의 함유량이 0.42mg/g(합계 2.46mg/g)인 효모분체가 얻어졌다.
세포활성화 시험
96웰플레이트의 웰에 Hela세포를 2000개씩, 100ul의 DMEM·10% 소태아혈청혼합배지에 현탁한 상태로 뿌렸다. 다음에, 실시예 1에 기재된 효모분체, 실시예 2에 기재된 효모분체, 실시예 4에 기재된 효모분체, 참고예에 기재된 효모분체, 비교예 1에 기재된 효모분체, 대두추출물(비교예 2), 쌀배아엑기스(비교예 3), 효모엑기스(비교예 4)를, 각각 물에 10000mg/L의 농도로 현탁하고, 오토클레이브 멸균하였다. 각 액체를 잘 현탁하고, 웰에 6.3ul 첨가하였다. 이 조작에 의해, 각 샘플의 농도는 600mg/L가 되었다. 또한, 멸균수를 다른 웰에 6.3ul 넣은 것을 컨트롤로 하였다. 96웰플레이트를, 37℃에서 5% 이산화탄소조건으로 20시간 정치하였다. 그 후, 배지를 폐기하고, 다시 각 웰을 DMEM배지 100ul로 세정하였다. 그 후 새롭게 각 웰에 DMEM과, 도진화학연구소제의 cell counting kit 8액을 10:1의 체적비로 혼합한 액을 100ul 넣고, 37℃에서 40분간 정치하였다. 마지막으로 Perkin Elmer ARVO X3을 이용하여 각 웰의 450nm 흡광도를 측정하였다. 세포의 증식을, 컨트롤과의 흡광도의 비로 평가하였다.
[표 1]
본 발명에서 얻어진 스페르미딘 고함유 효모는 세포증식활성이 비교예 2~4에 비해 특히 높고, 컨트롤에 비해 1.6~1.7배가 되어 있었다. 폴리아민이 효모 내에 있음으로써, 세포활성능이 높아지는 것으로 생각된다. 폴리아민은 어떠한 형태이건 생체내에서의 작용은 동일하다고 생각되어 왔으나, 놀랍게도, 제공되는 식품의 형태에 따라 효과의 크기가 상이하고, 특히 폴리아민 고함유 효모의 형태로 제공되는 것이 바람직한 것이 나타났다.
150℃ 가열시험
실시예 1, 실시예 2에 기재된 효모분체, 대두추출물분체(비교예 2), 쌀배아엑기스분체(비교예 3), 효모엑기스분체(비교예 4)를 20mg씩 덮개부착된 유리시험관에 봉입하고, 150℃의 알루미블록히터 상에서 0~60분 정치한 후, 그 폴리아민함량을 측정하였다.
[표 2]
상단의 숫자는 폴리아민함량[mg/g], 하단의 숫자는 가열 전과의 비[%]이다.
동일한 가열시험을 상기 효모분체에 행하고, 각 분체의 스페르미딘함량을 측정하였다. 결과를 표 3에 나타낸다.
[표 3]
상단의 숫자는 스페르미딘 함량[mg/g], 하단의 숫자는 가열 전과의 비[%]이다.
본 발명의 조성물(스페르미딘 고함유 효모)은 종래의 폴리아민함유 식품에 비해, 150℃의 가열 후에도 폴리아민이 감소되기 어려운 것이 나타났다. 마찬가지로, 스페르미딘 단체에 대해서도 그 양이 감소되기 어려운 것이 나타났다. 본 발명에 의해, 폴리아민이 효모 내에 들어있음으로써 안정화된다고 생각된다. 본 발명의 조성물(스페르미딘 고함유 효모)은 150℃ 부근에서의 가열에도 폴리아민이 분해되기 어려워, 가열조리하기 쉬운 폴리아민식품이다. 또한, 시클로덱스트린을 첨가한 것은, 무첨가의 경우에 비하면 열안정성이 우수하였다. 시클로덱스트린에 의해 효모 중의 폴리아민이 안정화된 것으로 생각된다.
취기테스트
실시예 1에서 얻은 건조효모에 대하여, α-시클로덱스트린을 효모:α-시클로덱스트린의 중량비가 1:1이 되도록 첨가하여 분말 그대로 혼합하였다(실시예 5). 완성된 식품은 50% α-시클로덱스트린함유 효모이다.
상기 식품 1g을 250ml의 덮개부착된 유리제 용기에 넣고 밀봉하고, 1시간 실온에 둔 후, 덮개를 덮어 용기 내의 효모취를 맡았다. 그 결과를 표 4에 나타낸다.
[표 4]
본 발명의 변이효모와 시클로덱스트린을 병용함으로써 효모취가 개선되었다. 시클로덱스트린은 폴리아민의 안정성을 높이고, 열안정성을 늘려, 가공·조리를 용이하게 하는 효과와 함께 효모취도 개선할 수 있다.
산업상 이용가능성
본 발명의 변이효모는, 종래의 효모와 비교하여 균체 내에 폴리아민, 특히 스페르미딘을 대량으로 함유하고 있으므로, 스페르미딘에 의한 세포활성화가 의도되는 음식품에 호적하게 배합하는 것이 의도된다. 또한, 본 발명의 변이효모는, 결정성 다당류와 병용함으로써 열안정성이 증대할 뿐만 아니라, 그 취기도 감소된다는 효과를 나타낸다.
SEQUENCE LISTING
<110> MITSUBISHI GAS CHEMICAL COMPANY, INC.
<120> Yeast with high content of polyamines, and food and drinkcomposition comprising the same
<130> 2016-074
<150> JP 2017-053205
<151> 2017-03-17
<160> 8
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1095
<212> DNA
<213> Saccharomyces cerevisiae
<400> 1
atgtctgccc ctaagaagat cgtcgttttg ccaggtgacc acgttggtca agaaatcaca 60
gccgaagcca ttaaggttct taaagctatt tctgatgttc gttccaatgt caagttcgat 120
ttcgaaaatc atttaattgg tggtgctgct atcgatgcta caggtgttcc acttccagat 180
gaggcgctgg aagcctccaa gaaggctgat gccgttttgt taggtgctgt gggtggtcct 240
aaatggggta ccggtagtgt tagacatgaa caaggtttac taaaaatccg taaagaactt 300
caattgtacg ccaacttaag accatgtaac tttgcatccg actctctttt agacttatct 360
ccaatcaagc cacaatttgc taaaggtact gacttcgttg ttgtcagaga attagtggga 420
ggtatttact ttggtaagag aaaggaagac gatggtgatg gtgtcgcttg ggatagtgaa 480
caatacaccg ttccagaagt gcaaagaatc acaagaatgg ccgctttcat ggccctacaa 540
catgagccac cattgcctat ttggtccttg gataaagcta atgttttggc ctcttcaaga 600
ttatggagaa aaactgtgga ggaaaccatc aagaacgaat tccctacatt gaaggttcaa 660
catcaattga ttgattctgc cgccatgatc ctagttaaga acccaaccca cctaaatggt 720
attataatca ccagcaacat gtttggtgat atcatctccg atgaagcctc cgttatccca 780
ggttccttgg gtttgttgcc atctgcgtcc ttggcctctt tgccagacaa gaacaccgca 840
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<211> 1095
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gacttatccg caattgaacc tcacgttaat ggtccattta caccagacct ttcaacccca 1080
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tccgctgcgg gcgtctggtt gaaatataaa ggccatctag aaaacatttc ttacaataca 1860
ttgattggtg cacaaaacaa agaaaccggt gaagtcaaca aggcttatga ccttgacgga 1920
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gtgatagcgg aacataacta tggtgaaggt tccgcaagag agcatgctgc tttgtcacca 2040
agatttttag gcggagagat tcttttagtt aagtcttttg caagaattca tgagacaaac 2100
ttgaagaaac aaggtgtgtt gccattgact tttgccaacg aatctgacta tgataaaata 2160
tcaagcggag atgttttaga aacgttgaac ctagttgaca tgattgctaa ggatggtaat 2220
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gcaaaacata ctatgtctaa agatcaaatc gattttttca aagctggttc agcaatcaat 2340
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<211> 2370
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gaccaaggta tcatgtttgg ttacgccaca gatgaaactc cagagggttt gcctttgact 420
attcttttgg ctcataaact aaacatggcc atggctgacg cgagaagaga tggctcttta 480
gcgtggttga gaccagacac caagactcaa gtcaccgtcg aatacaagga tgaccacggt 540
agatgggttc cacaaagaat cgacaccgtc gtcgtctccg ctcaacatgc tgacgaaatc 600
acgaccgagg acttaagagc gcaactaaag tccgagatca ttgaaaaagt catcccaaga 660
gacatgttgg acgaaaacac caaatacttt atccaacctt ccggtagatt cgtcatcggt 720
ggtcctcaag gtgacgctgg tttgaccggt agaaagatca tcgtcgacgc ttacggtggt 780
gcctcatccg tcggtggtgg tgccttctcc ggtaaggact actctaaggt tgatcgttct 840
gccgcttatg ccgctagatg ggttgccaag tccctagttg ccgctggttt atgtaagaga 900
gttcaagttc aattttctta tgccatcggt attgcggaac cattgtcctt gcacgttgac 960
acctatggta ctgcgaccaa gtctgacgaa gaaattatcg acattatcag caagaacttt 1020
gacttgagac ctggtgtatt ggtcaaggag ttggacttag ctagaccaat ctacttgcca 1080
accgcttctt atggccattt cacaaaccaa gaatacccat gggaaaagcc taagactttg 1140
aagttctaa 1149 <210> 7
<211> 2709
<212> DNA
<213> Saccharomyces cerevisiae
<400> 7
atggagcaaa tcaattcgaa cagtagaaaa aagaagcaac aattggaagt attcaaatat 60
tttgcaagtg tccttacaaa agaggacaag cctattagta tcagtaatgg tatgttagat 120
atgccgacag tgaactccag taaactcaca gcaggaaatg ggaaacctga cacggagaag 180
cttacaggag aactaatttt aacatacgac gatttcattg aactgatatc tagctcaaag 240
actatttatt cgaagtttac ggaccattcg ttcaatttga accagatacc caagaacgtt 300
ttcgggtgta ttttcttcgc tattgatgaa caaaacaagg gatatctgac gcttaatgat 360
tggttttatt ttaataattt attagaatat gataattatc atctcattat tctatatgag 420
ttctttagga aatttgatgt agagaatttg aaggcaaaac aaaaaaaaga gcttggtagt 480
tcgtcgttta atttaaaggc tgcagatgat cgaattaagt caattaatta tggtaacaga 540
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acctatcttc taaggttatt ttactctcac agggtgtctg cagatatatt ttcctccttg 900
aatctatcaa acaccgaatt actaaaagcg gacaataatt ccattccgta caatgtattc 960
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gttactgaaa ataatttgaa tgagcaggat attagggaac aaatagttac taaaaatgac 1080
tttatgacag ttttaaacgc ccagtataac aaagtaaaca atatcattga gttctctcct 1140
tcccaaatca acctactatt ttctatcgtc gcaaattcaa aggaaaacag aagattaaga 1200
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gattttttta tccataatga gtatttgcat ggagtaagca gatccagaaa aaatttagaa 1320
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gcaacgatgc gttctgactt aacaattgaa gatttcatga aaattttgaa cccaaattac 1500
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aattactact tttatccaat tttcgattcg ttgtacaatt tctccttggg ttctattgcg 1620
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caaagatctt tagcccaata caaaaactca attgattgtt tgttgaagat tatatcccgc 1740
gaaggaataa aaggtctcta ctctggctta gggccacaat taataggagt tgctcctgaa 1800
aaggcgataa aattgactgt caatgatttt atgagaaaca ggttgactga taaaaacggc 1860
aagctaagcc tttttcctga aattatttct ggcgcttcag ctggtgcatg tcaagttata 1920
tttactaatc cgttagagat tgtaaaaatt aggctacagg tccaatccga ctatgttggt 1980
gaaaacatac aacaagccaa tgaaactgcc actcaaatag tcaaaaaatt aggactgagg 2040
ggcttgtaca atggtgtagc cgcatgttta atgagagatg ttccattctc tgctatttat 2100
tttcccactt atgcacattt aaaaaaagat ctctttgatt ttgatccaaa tgataaaaca 2160
aagaggaatc gattaaaaac atgggagctt ttaactgccg gtgccattgc tggtatgcca 2220
gctgccttct tgactactcc ttttgatgtt ataaaaacaa ggctccagat agatcctcga 2280
aaaggtgaga caaagtataa cggtatattt catgctatcc gaactatctt aaaggaagag 2340
agctttagaa gctttttcaa aggtggtgga gcccgtgtcc taagaagttc tccccaattt 2400
gggttcactc tggccgccta tgaattattc aagggcttta ttccctcccc cgataacaaa 2460
ttaaaaagca gagagggtag gaagagattt tgtatcgatg acgacgcagg caatgaagag 2520
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aacgggtga 2709
Claims (9)
- LEU2유전자의 266번째 C에 대응하는 염기가 A, ACO2유전자의 1954번째 T에 대응하는 염기가 C, SAM1유전자의 1130번째 C에 대응하는 염기가 G, 및 AGC1유전자의 744번째 A에 대응하는 염기가 T로 치환되고, 또한 상기 4개의 변이를 갖지 않는 변이 전의 친주에 비해 폴리아민을 고함유하는 사카로미세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae)의 변이체.
- 제1항에 기재된 사카로미세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae)의 변이체와 결정성 다당류를 함유하는 음식품 조성물.
- 제2항에 있어서,
사카로미세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae)의 변이체와 결정성 다당류의 중량비가 1:0.1~1인, 음식품 조성물.
- 제2항 또는 제3항에 있어서,
결정성 다당류가 시클로덱스트린 및 난소화성 덱스트린 중 적어도 하나인, 음식품 조성물.
- LEU2유전자의 266번째 C에 대응하는 염기를 A, ACO2유전자의 1954번째 T에 대응하는 염기를 C, SAM1유전자의 1130번째 C에 대응하는 염기를 G, 및 AGC1유전자의 744번째 A에 대응하는 염기를 T로 치환하는 공정을 포함하는,
상기 4개의 변이를 갖지 않는 변이 전의 친주에 비해 폴리아민을 고함유하는 사카로미세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae)의 변이체의 제조방법.
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