KR101790095B1 - 신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도 - Google Patents

신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR101790095B1
KR101790095B1 KR1020160077703A KR20160077703A KR101790095B1 KR 101790095 B1 KR101790095 B1 KR 101790095B1 KR 1020160077703 A KR1020160077703 A KR 1020160077703A KR 20160077703 A KR20160077703 A KR 20160077703A KR 101790095 B1 KR101790095 B1 KR 101790095B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
bacteriophage
bordetella bronchiseptica
brp
bor
composition
Prior art date
Application number
KR1020160077703A
Other languages
English (en)
Inventor
윤성준
전수연
백형록
손지수
박석황
김병국
강상현
Original Assignee
주식회사 인트론바이오테크놀로지
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 인트론바이오테크놀로지 filed Critical 주식회사 인트론바이오테크놀로지
Priority to KR1020160077703A priority Critical patent/KR101790095B1/ko
Priority to US16/312,376 priority patent/US10894068B2/en
Priority to CN201780038359.XA priority patent/CN109477075B/zh
Priority to PCT/KR2017/006117 priority patent/WO2017222229A1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101790095B1 publication Critical patent/KR101790095B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2795/00—Bacteriophages
    • C12N2795/00011—Details
    • C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
    • C12N2795/10211—Podoviridae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2795/00—Bacteriophages
    • C12N2795/00011—Details
    • C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
    • C12N2795/10211—Podoviridae
    • C12N2795/10221—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2795/00—Bacteriophages
    • C12N2795/00011—Details
    • C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
    • C12N2795/10211—Podoviridae
    • C12N2795/10232—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2795/00—Bacteriophages
    • C12N2795/00011—Details
    • C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
    • C12N2795/10211—Podoviridae
    • C12N2795/10234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

본 발명은 보데텔라 브론치셉티카 균을 특이적으로 사멸시킬 수 있는 능력을 갖고 서열번호 1로 표시되는 유전체를 갖는 것을 특징으로 하는 자연으로부터 분리한 포도비리대 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP), 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 방지 및 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도{Novel Bordetella bronchiseptica bacteriophage Bor-BRP-1 and its use for preventing proliferation of Bordetella bronchiseptica}
본 발명은 보데텔라 브론치셉티카 균에 감염하여 보데텔라 브론치셉티카 균을 사멸시킬 수 있는 자연으로부터 분리한 박테리오파지 및 이를 유효성분으로 포함한 조성물을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 방지 및 처치하는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 보데텔라 브론치셉티카 균을 특이적으로 사멸시킬 수 있는 능력을 갖는 서열번호 1로 표시되는 유전체를 갖는 것을 특징으로 하는 자연으로부터 분리한 포도비리대 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP), 및 상기 박테리오파지를 유효성분으로 포함하는 조성물을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 및 감염 후 처치 방법에 관한 것이다.
보데텔라 균은 프로테오박테리아(Proteobacteria) 문에 속하는 그람음성 균이다. 보데텔라 균은 돼지의 비강 내 집락을 형성하여 기갑개골에 감염하여 위축성 비염(atrophic rhinitis)을 일으키는 병원균이다. 돼지의 위축성 비염은 비갑개의 위축, 비곡, 안면이상 및 비출혈 등의 증상을 나타내는 만성 호흡기 질병으로 원인균은 보데텔라 브론치셉티카(Bordetella bronchiseptica)이다. 보데텔라 브론치셉티카 균은 돼지 외에 개, 고양이, 토끼 등에서도 검출되고 있다. 또한 사람에게도 감염성 질환을 유발할 수 있다.
통상적으로 보데텔라 브론치셉티카 감염 질환의 예방 및 치료를 위해서 실시하고 있는 방법은 백신 및 항생제를 이용하는 방법인데, 항생제를 이용한 치료는 내성균의 증가로 그 효과가 계속 떨어지고 있으며, 동물에의 항생제 사용에 대한 규제 강화로 항생제 외의 다른 효과적인 방법의 개발이 요구되고 있는 실정이다.
최근 세균성 질환의 대처 방안으로 박테리오파지(Bacteriophage)의 활용이 크게 주목을 받고 있다. 특히 자연친화적 방식의 선호로 인하여 박테리오파지에 대한 관심은 어느 때보다 높다고 할 수 있다. 박테리오파지는 세균에 감염하는 아주 작은 미생물로서 보통 파지(Phage)라고 줄여서 부르기도 한다. 박테리오파지는 박테리아에 감염(Infection)한 후 박테리아 세포 내부에서 증식을 하고, 증식 후 자손 박테리오파지들이 박테리아 밖으로 나올 때 숙주인 박테리아의 세포벽을 파괴하는 방식으로 박테리아를 사멸시키는 능력을 갖고 있다. 박테리오파지의 박테리아 감염 방식은 매우 특이성이 높아서 특정 박테리아에 감염할 수 있는 박테리오파지의 종류는 일부로 한정된다. 즉, 특정 박테리오파지는 특정 범주의 박테리아에만 감염할 수 있고 이로 인하여 특정 박테리오파지는 특정 박테리아만을 사멸시키며 다른 박테리아에는 영향을 주지 않는다. 이러한 박테리오파지의 세균 특이성은 목적으로 하는 세균에 대해서만 항균효과를 제공하고 환경이나 동물 내의 상재균들에는 영향을 초래하지 않는다. 통상적으로 세균 처치에 널리 활용되던 기존의 항생제들은 여러 종류의 세균들에 대하여 동시에 영향을 끼쳤다. 이로 인하여 환경 오염이나 동물의 정상 세균총 교란 등의 문제를 초래하였다. 이와는 달리 박테리오파지는 특정 세균에 대해서만 작동하므로 박테리오파지 사용에 의해서 체내 정상균총 교란 등이 발생하지 않는다. 따라서 박테리오파지 사용이 항생제 사용에 비교하여 매우 안전하다고 할 수 있고, 그 만큼 사용에 의한 부작용 초래 가능성이 상대적으로 크게 낮다.
박테리오파지는 1915년 영국의 세균학자 Twort가 포도상구균(Micrococcus) 집락이 어떤 것에 의해 투명하게 녹는 현상에 대한 연구를 수행하면서 발견되었다. 또한, 1917년에는 프랑스의 세균학자 d'Herelle이 이질환자 변의 여과액 중에 적리균(Shigella dysenteriae)을 녹이는 작용을 가진 것이 있다는 것을 발견하고 이에 대한 연구를 통해 독립적으로 박테리오파지를 발견하였으며, 세균을 잡아먹는다는 뜻에서 박테리오파지라고 명명하였다. 이후 이질균, 장티푸스균, 콜레라균 등 여러 병원성 박테리아에 대한 박테리오파지가 계속적으로 발견되었다.
박테리아를 사멸시킬 수 있는 특별한 능력으로 인하여 박테리오파지는 발견 이후 박테리아 감염에 대응하는 효과적 방안으로 기대를 모았으며 관련하여 많은 연구들이 있었다. 그러나 Fleming에 의해 페니실린이 발견된 이후, 항생제의 보급이 일반화되면서 박테리오파지에 대한 연구는 일부 동유럽 국가들 및 구소련에 한정되어서만 명맥이 유지되었다. 그런데 2000년 이후에 항생제 내성균의 증가로 인하여 기존 항생제의 한계성이 나타나고, 기존 항생제의 대체 물질로의 개발 가능성이 부각되면서 다시 박테리오파지가 항-박테리아제로 주목을 받고 있다. 특히 최근 항생제 사용에 대한 정부 차원의 규제가 전 세계적으로 강화됨에 따라 박테리오파지에 대한 관심이 더욱 높아지고 있으며 산업적 활용 사례도 점차 증가하고 있다.
앞에서 설명했듯이 박테리오파지는 세균에 대한 특이성이 매우 높다. 이러한 특이성으로 인하여 박테리오파지는 동일 종(Species)에 속하는 세균들이라 할지라도 그 일부 주(Strain)에 대해서만 항균효과를 발휘하는 경우가 많다. 또한 대상 세균 주에 따라 발휘되는 박테리오파지의 항균력 세기 자체도 다를 수 있다. 이러한 이유로 특정 종류의 세균에 대하여 효과적 제어법을 확보하려면 다양한 종류의 유용 박테리오파지들의 확보가 필요하다. 보데텔라 브론치셉티카 균에 대응하여 효과적인 박테리오파지 활용법을 개발하기 위해서도 당연히 보데텔라 브론치셉티카 균에 대하여 항균효과를 제공할 수 있는 여러 종류의 다양한 박테리오파지들의 확보가 필요하고, 더 나아가 확보한 다양한 유용 박테리오파지들 중에서 항균력의 세기나 항균범위 측면에서 비교우위에 있는 박테리오파지의 선발 활용도 필요하다.
이에, 본 발명자들은 보데텔라 브론치셉티카 균을 선택적으로 사멸시킬 수 있는 자연으로부터 분리된 박테리오파지를 이용하여 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 방지 또는 처치하는 데에 활용될 수 있는 조성물을 개발하고, 또 이 조성물을 이용하여 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 방지 또는 처치하는 방법을 개발하고자 노력한 끝에, 이에 적합한 박테리오파지를 자연으로부터 분리하고 이 분리된 박테리오파지를 타 박테리오파지와 구별하여 특정 지을 수 있도록 유전체(Genome)의 유전자 서열을 확보한 후 상기 박테리오파지를 유효성분으로 한 조성물을 개발한 다음 이 조성물이 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 및 처치에 효과적으로 활용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명의 목적은 보데텔라 브론치셉티카 균을 특이적으로 사멸시킬 수 있는 능력을 갖고 서열번호 1로 표시되는 유전체를 갖는 것을 특징으로 하는 자연으로부터 분리한 포도비리대(Podoviridae) 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP)을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 보데텔라 브론치셉티카 균에 감염하여 보데텔라 브론치셉티카 균을 사멸시킬 수 있는 박테리오파지 Bor-BRP-1을 유효성분으로 포함하는 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 방지하는 데에 활용 가능한 조성물 및 이 조성물을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 보데텔라 브론치셉티카 균에 감염하여 보데텔라 브론치셉티카 균을 사멸시킬 수 있는 박테리오파지 Bor-BRP-1을 유효성분으로 포함하는 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 처치하는 데에 활용 가능한 조성물 및 이 조성물을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 처치 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물들을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 및 처치 목적의 소독제를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물들을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 및 처치를 통한 사양 효과 제공 목적의 사료첨가제를 제공하는 것이다.
본 발명은 보데텔라 브론치셉티카 균을 특이적으로 사멸시킬 수 있는 능력을 갖고 서열번호 1로 표시되는 유전체를 갖는 것을 특징으로 하는 자연으로부터 분리한 포도비리대 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP), 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 및 처치 방법을 제공한다.
박테리오파지 Bor-BRP-1은 본 발명자들에 의해 분리된 후 2014년 11월 7일자로 한국생명공학연구원 미생물자원센터에 기탁되었다(수탁번호 KCTC 12705BP).
또한, 본 발명은 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 방지 또는 처치하는 데에 활용될 수 있는 박테리오파지 Bor-BRP-1을 유효성분으로 포함하는 소독제 및 사료첨가제를 제공한다.
본 발명의 조성물에 포함되는 박테리오파지 Bor-BRP-1은 보데텔라 브론치셉티카 균을 효과적으로 사멸시키므로 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환의 예방(감염 방지)이나 치료(감염 처치)에 효과를 나타낸다. 따라서 본 발명의 조성물은 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환에 대한 예방 및 치료 목적으로 활용될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 “방지” 또는 “예방”이라는 용어는 (ⅰ) 보데텔라 브론치셉티카 균 감염의 방지; 및 (ⅱ) 보데텔라 브론치셉티카 균 감염에 의한 질병으로의 발전을 억제하는 것을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 “처치” 또는 “치료”라는 용어는 (ⅰ) 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발된 질환의 억제; 및 (ⅱ) 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발된 질환의 병적 상태를 경감시키는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서의 “분리”, “분리한” 또는 “분리된”은 자연 상태로부터 여러 실험 기법을 활용하여 박테리오파지를 분리하는 것과 타 박테리오파지와 구별하여 특정 지을 수 있는 특징들을 확보하는 일을 지칭하며, 이에 더하여 생물공학기술로 박테리오파지를 산업적으로 활용할 수 있게끔 증식시키는 것도 포함한다.
본 발명의 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산칼슘, 알지네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로오스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물에는 박테리오파지 Bor-BRP-1이 유효성분으로 포함된다. 이때 포함되는 박테리오파지 Bor-BRP-1은 1× 101 pfu/㎖ 내지 1× 1030 pfu/㎖ 또는 1× 101 pfu/g 내지 1× 1030 pfu/g로 포함되며, 바람직하게는 1× 104 pfu/㎖ 내지 1× 1015 pfu/㎖ 또는 1× 104 pfu/g 내지 1× 1015 pfu/g로 포함된다.
본 발명의 조성물은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화 됨으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수도 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질 중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캡슐제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수도 있다.
본 발명의 조성물은 활용 방식에 따라, 이에 국한되지 않지만, 소독제 및 사료첨가제로 구현될 수 있다.
이러한 활용 목적에서의 효율성을 높이기 위하여 다른 세균종에 대하여 항균활성을 제공할 수 있는 박테리오파지들이 본 발명의 조성물에 추가될 수 있다. 또한, 보데텔라 브론치셉티카 균에 대하여 항균활성을 갖는 다른 종류의 박테리오파지들도 추가될 수 있다. 보데텔라 브론치셉티카 균에 대하여 항균활성을 갖는 박테리오파지라 하더라도 항균력의 세기나 항균범위 측면에서 서로 간에 차이가 있으므로 이들의 적절한 조합은 그 효과를 극대화 할 수 있다.
본 발명의 박테리오파지 Bor-BRP-1을 유효성분으로 포함하는 조성물을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 및 처치 방법은 기존의 항생제 등의 화학물질에 기반을 둔 방식에 비하여 보데텔라 브론치셉티카 균에 대한 특이성이 매우 높다는 장점을 제공할 수 있다. 이는 다른 유용한 상재균에는 영향을 주지 않으면서도 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 또는 처치 목적으로 사용할 수 있음을 의미하며, 이의 사용에 따른 부작용이 매우 적다는 것을 의미한다. 통상적으로 항생제 등의 화학물질을 사용하면 일반 상재균들도 피해를 함께 입게 되어 결과적으로 동물의 면역력 저하 등을 초래시켜 사용에 따른 다양한 부작용이 나타난다. 또한, 본 발명은 자연계에 이미 존재하는 박테리오파지를 분리하여 조성물의 유효성분으로 사용하기 때문에 매우 자연 친화적이라는 장점 또한 제공할 수 있다. 한편, 박테리오파지는 항균활성을 발휘할 수 있는 세균종이 같다 하더라도 항균효과 발휘에 있어 항균력의 세기나 항균범위[보데텔라 브론치셉티카 균에 속하는 여러 세균 주(Strain)의 측면에서 개별 세균 주에 대하여 박테리오파지의 항균활성이 발휘되는 범위. 통상적으로 박테리오파지는 같은 세균 종(Species)에 속하는 일부 세균 주(Strain)에 대하여 항균활성을 발휘할 수 있음. 즉, 같은 세균 종에 속한다 하더라도 개별 세균 주에 따라 박테리오파지에 대한 감수성에서 차이가 있을 수 있음] 측면에서 차이가 있으므로 본 발명은 보데텔라 브론치셉티카 균에 대한 항균력을 갖는 타 박테리오파지에 비교하여 차별적 항균효과를 제공할 수 있다. 이는 산업현장 활용 시에 그 효과에 있어 큰 차이를 제공한다.
도 1은 박테리오파지 Bor-BRP-1의 전자현미경 사진이다.
도 2는 박테리오파지 Bor-BRP-1의 보데텔라 브론치셉티카 균에 대한 사멸능을 보여주는 실험 결과이다. 투명한 부분은 시험대상 박테리아가 용균되어 결과적으로 형성된 용균반이다.
이하, 실시예에 의거하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하지만, 이들 실시예는 본 발명의 예시일 뿐이며 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 보데텔라 브론치셉티카 균을 사멸시킬 수 있는 박테리오파지의 분리
보데텔라 브론치셉티카 균을 사멸시킬 수 있는 박테리오파지의 분리에는 자연 환경으로부터 확보된 시료들을 이용하였다. 한편, 박테리오파지 분리에 사용된 보데텔라 브론치셉티카 균주들은 본 발명자들에 의해 미리 분리되어 보데텔라 브론치셉티카로 동정(identification)된 것들이다.
박테리오파지 분리 과정을 상세히 설명하면, 보데텔라 브론치셉티카 균을 1/1000 비율로 접종한 TSB(Tryptic Soy Broth) 배지(카제인 다이제스트, 17 g/L; 소이빈 다이제스트, 3 g/L; 덱스트로스, 2.5 g/L; NaCl, 5 g/L; 디포타슘 포스페이트, 2.5 g/L)에 수집된 시료를 함께 첨가한 다음 37℃에서 3-4시간동안 진탕배양 하였다. 배양 후, 8,000 rpm에서 20분간 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수된 상등액에 보데텔라 브론치셉티카 균을 1/1000 비율로 접종한 다음 37℃에서 3-4시간동안 또 다시 진탕배양 하였다. 박테리오파지가 시료에 포함되어 있었을 경우에는 박테리오파지의 수(Titer)가 충분히 증가될 수 있도록 이러한 과정을 총 5회 반복 실시하였다. 5회 반복 실시 후에 배양액을 8,000 rpm에서 20분간 원심분리 하였다. 원심분리 후, 회수된 상등액에 대하여 0.45 ㎛의 필터를 이용하여 여과를 실시해 주었다. 이렇게 하여 얻어진 여과액을 사용한 통상의 점적 실험(Spot assay)을 통하여 보데텔라 브론치셉티카 균을 사멸시킬 수 있는 박테리오파지가 있는지를 조사하였다.
상기 점적 실험은 다음과 같이 실시하였다. TSB 배지에 보데텔라 브론치셉티카 균을 1/1000 비율로 접종한 다음 37℃에서 한밤동안 진탕배양 하였다. 이렇게 하여 준비된 보데텔라 브론치셉티카 균의 배양액 3 ㎖(OD600이 1.5)을 TSA(Tryptic Soy Agar) 평판배지(카제인 다이제스트, 15 g/L; 소이빈 다이제스트, 5 g/L; NaCl, 5 g/L; 아가, 15 g/L)에 도말(Spreading)하였다. 도말한 평판 배지를 클린벤치(Clean bench)에서 약 30분 정도 방치하여 도말액이 건조되게 하였다. 건조 후 앞에서 준비한 여과액 10 μl를 보데텔라 브론치셉티카 균이 도말된 평판 배지 위에 점적한 다음 이를 30분 정도 방치하여 건조시켰다. 건조 후 점적한 평판 배지를 37℃에서 하루 동안 정치 배양한 다음 여과액이 떨어진 위치에 투명환(Clear zone)이 생성되는가를 조사하였다. 투명환이 생성되는 여과액의 경우가 보데텔라 브론치셉티카 균을 사멸 시킬 수 있는 박테리오파지가 포함되어 있다고 판단할 수 있다. 이러한 조사를 통하여 보데텔라 브론치셉티카 균에 대한 사멸능을 가진 박테리오파지를 포함한 여과액을 확보할 수 있었다.
보데텔라 브론치셉티카 균에 대한 사멸능을 가진 박테리오파지의 존재가 확인된 여과액을 이용하여 순수 박테리오파지의 분리를 실시하였다. 순수 박테리오파지의 분리에는 통상의 용균반 분석(Plaque assay)을 이용하였다. 이를 자세히 설명하면, 용균반 분석에서 형성된 용균반 하나를 멸균된 팁을 이용하여 회수한 다음 이를 보데텔라 브론치셉티카 균 배양액에 첨가해 주어 4-5 시간 동안 37℃에서 함께 배양하였다. 배양 후 8,000 rpm에서 20분간 원심분리하여 상등액을 얻었다. 얻어진 상등액에 50분의 1의 부피로 보데텔라 브론치셉티카 균 배양액을 첨가해 준 다음 다시 37℃에서 4-5 시간 배양해 주었다. 박테리오파지의 수를 증가시키기 위하여 이러한 과정을 최소 5회 이상 실시한 다음 최종적으로 8,000 rpm에서 20분간 원심분리하여 상등액을 얻었다. 얻어진 상등액을 사용하여 다시 용균반 분석을 실시하였다. 통상 순수 박테리오파지의 분리가 상기 과정의 1회만으로는 달성되지 않기 때문에 이때 형성된 용균반을 이용하여 앞 단계를 전체적으로 다시 반복하였다. 이와 같은 과정을 최소 5회 이상 반복 실시하여 순수한 박테리오파지를 포함한 용액을 확보하였다. 통상적으로 순수 박테리오파지의 분리는 형성된 용균반의 크기 및 모양이 모두 유사하게 될 때까지 반복 수행하였다. 그리고 최종적으로는 전자현미경 분석을 통하여 박테리오파지의 순수 분리 여부를 확인하였다. 전자현미경 분석에서 순수 분리가 확인될 때까지 앞에 기술한 과정을 반복하였다. 전자현미경 분석은 통상의 방법에 따라 실시하였다. 이를 간단히 설명하면 다음과 같다. 순수한 박테리오파지를 포함한 용액을 구리 격자(Copper grid)에 묻히고 2% 우라닐 아세테이트(Uranyl acetate)로 역염색법(Negative staining)과 건조를 수행한 후 투과전자현미경을 통하여 그 형태를 관찰하였다. 순수 분리한 박테리오파지의 전자현미경 사진이 도 1에 제시되어 있다. 형태적 특징으로 판단할 때 신규 확보된 박테리오파지는 포도비리대(Podoviridae) 박테리오파지에 속함을 확인할 수 있었다.
이런 방식으로 확인된 순수 박테리오파지를 포함한 용액은 다음의 정제 과정을 거쳤다. 순수 박테리오파지를 포함한 용액에 용액 전체 부피의 50분의 1의 부피로 보데텔라 브론치셉티카 균 배양액을 첨가해 준 다음 다시 4-5 시간 배양하였다. 배양 후 8,000 rpm에서 20분간 원심분리하여 상등액을 얻었다. 충분한 수의 박테리오파지가 포함된 액을 얻기 위해 이러한 과정을 총 5회 반복 수행하였다. 최종 원심분리로 얻어진 상등액을 0.45 μm의 필터를 이용하여 여과한 다음 통상의 폴리에틸렌 글리콜(Polyethylene Glycol; PEG) 침전 과정을 실시하였다. 구체적으로, 여과액 100 ㎖에 10% PEG 8000/0.5 M NaCl이 되게 PEG와 NaCl을 첨가한 다음 4℃에서 2-3시간 동안 정치한 후, 8,000 rpm에서 30분간 원심분리하여 박테리오파지 침전물을 얻었다. 이렇게 얻어진 박테리오파지 침전물을 완충액(Buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO4, 0.1% Gelatin, pH 8.0) 5 ㎖로 부유시켰다. 이를 박테리오파지 부유액 또는 박테리오파지 액이라 지칭한다.
상기한 과정을 통하여 정제된 순수 박테리오파지를 확보할 수 있었고, 이 박테리오파지를 박테리오파지 Bor-BRP-1로 명명한 뒤, 2014년 11월 7일자로 한국생명공학연구원 미생물자원센터(수탁번호 KCTC 12705BP)에 기탁하였다.
실시예 2: 박테리오파지 Bor - BRP -1의 유전체 분리 및 서열 분석
박테리오파지 Bor-BRP-1의 유전체를 다음과 같이 분리하였다. 유전체 분리에는 실시예 1에서와 같은 방법으로 얻어진 박테리오파지 부유액을 이용하였다. 먼저 부유액에 포함되어 있을 수 있는 보데텔라 브론치셉티카 균의 DNA와 RNA를 제거하기 위해, 박테리오파지 부유액 10 ㎖에 DNase I과 RNase A를 각각 200 U씩 첨가한 다음 37℃에서 30분간 방치하였다. 30분 방치 후에 DNase I과 RNase A의 활성을 제거하기 위해, 0.5 M 에틸렌디아민테트라아세트산(Ethylenediaminetetraacetic acid; EDTA) 500 μl를 첨가한 다음 다시 10분간 정치시켰다. 그리고 이를 추가로 10분간 65℃에 정치시킨 다음 박테리오파지 외벽을 와해시키기 위해 proteinase K(20 ㎎/㎖) 100 μl를 첨가한 후 37℃에서 20분간 반응시켰다. 그 후 10% 도데실 황산 나트륨염(Sodium dodecyl sulfate; SDS) 500 μl를 첨가한 다음 다시 65℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 1 시간 반응 후, 이 반응액에 25:24:1의 구성비를 갖는 페놀(Phenol) : 클로로포름(Chloroform) : 이소아밀알코올(Isoamylalcohol)의 혼합액 10 ㎖을 첨가해 준 후 잘 섞어 주었다. 그리고는 이것을 13,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 층이 분리되게 한 다음 분리된 층들 중에서 위층을 취하여 여기에 1.5 부피비의 이소프로필 알코올(Isopropyl alcohol)을 첨가한 다음 13,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 유전체를 침전시켰다. 침전물을 회수한 후 침전물에 70% 에탄올(Ethanol)을 첨가한 다음 다시 13,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 침전물의 세척을 실시하였다. 세척된 침전물을 회수하고 진공 건조 시킨 다음 100 μl의 물에 녹였다. 상기 과정을 반복하여 박테리오파지 Bor-BRP-1의 유전체를 다량 확보하였다.
이렇게 얻어진 유전체를 이용하여 서울대학교 농생명과학공동기기원(National Instrumentation Center for Environmental Management)에서 illumina Mi-Seq 기기를 이용하여 차세대 염기서열 분석(Next generation sequencing analysis)을 수행하여 박테리오파지 Bor-BRP-1의 유전체 서열 정보를 확보하였다. 최종적으로 분석된 박테리오파지 Bor-BRP-1 유전체는 49,601 bp의 크기를 가지며, 전체 유전체 서열은 서열번호 1로 제시되어 있다.
확보된 박테리오파지 Bor-BRP-1의 유전체 서열을 기반으로 Web상의 BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)를 이용하여 기존에 알려진 박테리오파지 유전체 서열과의 상동성(Similarity)을 조사해 보았다. BLAST 조사 결과, 50% 이상의 상동성을 가진 박테리오파지 서열은 확인할 수 없었다.
이러한 사실에 근거하여 박테리오파지 Bor-BRP-1은 기존에 보고된 바 없는 신규한 박테리오파지라고 판단할 수 있었다. 이러한 사실과 함께 통상적으로 박테리오파지의 종류가 다르면 제공할 수 있는 항균력의 세기 및 항균범위가 다르다는 사실로부터 박테리오파지 Bor-BRP-1은 기존에 보고된 다른 박테리오파지들과는 다른 항균효과를 제공해 줄 수 있다고 판단하였다.
실시예 3: 박테리오파지 Bor - BRP -1의 보데텔라 브론치셉티카 균에 대한 사멸능 조사
분리된 박테리오파지 Bor-BRP-1의 보데텔라 브론치셉티카 균에 대한 사멸능을 조사하였다. 사멸능 조사는 실시예 1에서 제시한 점적 실험을 통하여 투명환 생성 여부를 조사하는 방식으로 수행하였다. 사멸능 조사에 사용되어진 보데텔라 브론치셉티카 균은 본 발명자들에 의해 분리되어 보데텔라 브론치셉티카 균으로 동정된 것들로 총 10주이었다. 박테리오파지 Bor-BRP-1은 실험에 대상이 된 보데텔라 브론치셉티카 균 10주 중에 총 9주에 대하여 사멸능을 갖고 있었다. 대표적 실험 결과가 도 2에 제시되어 있다. 한편, 박테리오파지 Bor-BRP-1의 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 엔테로코쿠스 패칼리스(Enterococcus faecalis), 엔테로코쿠스 패슘(Enterococcus faecium), 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 스트렙토코쿠스 우베리스(Streptococcus uberis) 및 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa)에 대한 사멸능 조사도 별도 실험으로 실시하였는데, 그 결과로 박테리오파지 Bor-BRP-1은 이들 균종들에 대해서는 사멸능을 갖고 있지 않았다.
이상의 결과로 박테리오파지 Bor-BRP-1은 보데텔라 브론치셉티카 균에 대하여 특이적인 사멸능을 가지며, 다수의 보데텔라 브론치셉티카 균에 대하여 항균 효과를 발휘할 수 있음을 확인할 수 있었다. 이는 박테리오파지 Bor-BRP-1이 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 방지 및 처치 목적의 조성물의 유효성분으로 활용 가능함을 의미한다.
실시예 4: 박테리오파지 Bor - BRP -1의 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 예방에 대한 실험예
9 ㎖의 TSB 배지를 담은 하나의 튜브에 1× 108 pfu/㎖ 수준의 박테리오파지 Bor-BRP-1 액 100 μl를 넣어주고, 다른 하나의 9 ㎖의 TSB 배지를 담은 튜브에는 동량의 TSB 배지만을 추가로 첨가하였다. 그 다음에 각 튜브에 600 nm에서 흡광도가 약 0.5 정도가 되도록 보데텔라 브론치셉티카 균의 배양액을 넣어 주었다. 보데텔라 브론치셉티카 균을 첨가한 후 튜브들을 37℃의 배양기에 옮겨 진탕배양하면서 보데텔라 브론치셉티카 균의 성장 상태를 관찰하였다. 표 1에 제시된 바와 같이, 박테리오파지 Bor-BRP-1 액을 첨가해 준 튜브에서는 보데텔라 브론치셉티카 균의 성장 억제가 관찰된 반면에 박테리오파지 액을 첨가하지 않은 튜브에서는 보데텔라 브론치셉티카 균의 성장 억제가 관찰되지 않았다.
보데텔라 브론치셉티카 균의 성장 억제
구분 OD600 흡광도 값
배양 0분 배양후 60분 배양후 120분
박테리오파지 액 미첨가 0.501 0.776 1.001
박테리오파지 액 첨가 0.501 0.308 0.246
이 결과로부터 본 발명의 박테리오파지 Bor-BRP-1이 보데텔라 브론치셉티카 균의 성장을 저해할 뿐만 아니라 사멸까지 시키는 능력이 있음을 확인할 수 있었고, 이로부터 박테리오파지 Bor-BRP-1이 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염을 방지하는 목적의 조성물의 유효성분으로 활용될 수 있다고 결론지을 수 있었다.
실시예 5: 박테리오파지 Bor - BRP -1을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 예방 동물실험
이유자돈을 이용하여 박테리오파지 Bor-BRP-1의 보데텔라 브론치셉티카 균 감염 예방 효과를 조사하였다. 생후 25일령의 이유자돈 4마리를 한 그룹으로 하여 총 2 그룹으로 나눈 후 실험사육돈방(1.1m × 1.0m)에서 분리 사육하면서 실험을 실시하였다. 보온시설 하에 주위환경을 통제하였고 돈방의 온도와 습도는 일정하게 유지시켰으며 돈방 바닥의 청소를 매일 실시하였다. 시험 개시일로부터 시험 종료일까지 실험군(박테리오파지 투여군)의 돼지들에게는 1× 108 pfu/g의 박테리오파지 Bor-BRP-1을 포함하고 있는 사료를 통상적인 사료 급이 방식에 따라 급이하였다. 반면에 대조군(박테리오파지 미투여군)의 돼지들에게는 박테리오파지 Bor-BRP-1이 포함되지 않은 동일 조성의 사료를 동일한 방식으로 급이하였다. 시험개시일로부터 7일째가 되는 날부터 2일간 급이하는 사료에 1× 108 cfu/g 수준으로 보데텔라 브론치셉티카 균을 포함시켜 하루 2회씩 급이하여 보데텔라 브론치셉티카 균 감염을 유도하였다. 시험 개시일로부터 9일째가 되는 날부터는 매일 모든 시험동물들을 대상으로 코 분비물에서의 보데텔라 브론치셉티카 균 검출 정도를 조사하였다. 이는 다음과 같이 수행하였다. 코 분비물(비강 내부 면봉 채취물; nasal swab) 시료를 혈액 아가 플레이트(Blood agar plate)에 도말한 후 37℃에서 18-24시간 배양한 다음에 형성된 콜로니(Colony) 중에 보데텔라 브론치셉티카 균으로 추정되는 콜로니를 선별하였다. 이렇게 선별된 콜로니들을 각각 시료로 하여 보데텔라 브론치셉티카 균 특이 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction: PCR)을 수행하여 최종적으로 보데텔라 브론치셉티카 균을 확인하였다. 균 검출 결과는 표 2와 같았다.
보데텔라 브론치셉티카 균 검출 결과 (평균치)
플레이트 당 검출된 보데텔라 브론치셉티카 균의 콜로니 수
날짜 D9 D10 D11 D12 D13 D14
대조군(박테리오파지 미투여) 14 15 15 16 17 20
실험군(박테리오파지 투여) 3 3 1 0 0 0
이 결과로부터 본 발명의 박테리오파지 Bor-BRP-1이 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 억제에 매우 효과적이라는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 6: 박테리오파지 Bor - BRP -1을 이용한 보데텔라 브론치셉티카 균의 감염 질환 치료예
박테리오파지 Bor-BRP-1의 보데텔라 브론치셉티카 균에 의한 질환이 유발된 동물에서의 치료 효과를 조사하였다. 생후 25일령의 이유자돈 4마리를 한 그룹으로 하여 총 두 그룹으로 나눈 후 실험사육돈방(1.1m × 1.0m)에서 분리 사육하면서 실험을 실시하였다. 보온시설 하에 주위환경을 통제하였고 돈방의 온도와 습도는 일정하게 유지시켰으며 돈방 바닥의 청소를 매일 실시하였다. 실험 개시일로부터 4일째 되는 날에 모든 돼지들에게 보데텔라 브론치셉티카 균액(109 CFU/ml) 5 ml을 비강에 분무 투여하였다. 비강 투여에 사용한 보데텔라 브론치셉티카 균액은 다음과 같이 준비한 것이다. 보데텔라 브론치셉티카를 TSB 배지를 이용하여 37℃에서 18시간 배양한 후 균체만을 회수한 다음에 이를 생리식염수(pH 7.2)로 현탁하여 균체의 농도가 109 CFU/ml가 되게끔 조정하였다. 보데텔라 브론치셉티카 균 강제감염 다음날부터 실험군(박테리오파지 액 투여군)의 돼지들에게는 매일 2회씩 109 PFU의 박테리오파지 Bor-BRP-1을 보데텔라 브론치셉티카 액 투여와 같은 방식으로 비강 투여하였다. 대조군(박테리오파지 액의 미 투여군)의 돼지들은 어떠한 처치도 하지 않았다. 사료와 음수는 대조군과 실험군 모두 동일하게 급이하였다. 보데텔라 브론치셉티카 균의 강제감염 후부터 3일째가 되는 날(실험 개시 7일째)부터는 매일 모든 시험동물들을 대상으로 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 위축성 비염의 발생 상태를 조사하였다. 보데텔라 브론치셉티카에 의해 유발되는 위축성 비염에 대한 조사는 비강 분비물의 양을 조사하는 방식으로 실시하였다. 비강 분비물의 양은 시험자의 관찰에 따라 정상 수준을 ‘0’, 다소 많은 경우를 ‘1’, 심한 경우를 ‘2’로 지표화하여 나타내었다. 그 결과는 표 3과 같았다.
비강 분비물 조사 결과 (평균치)
비강 분비물 양
날짜 D7 D8 D9 D10 D11 D12 D13 D14
대조군(박테리오파지 미투여) 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.5 1.75 1.75
실험군(박테리오파지 투여) 0.25 0.25 0 0 0 0 0 0
이 결과로부터 본 발명의 박테리오파지 Bor-BRP-1이 보데텔라 브론치셉티카 균을 원인으로 하는 감염 질환의 치료에도 매우 효과적이라는 것을 확인할 수 있었다.
실시예 7: 사료첨가제 및 사료의 제조
박테리오파지 Bor-BRP-1 액을 이용하여 사료첨가제 1 g 당 1× 108 pfu의 박테리오파지 Bor-BRP-1이 포함되도록 사료첨가제를 제조하였다. 사료첨가제의 제조 방법은 박테리오파지 액에 말토덱스트린을 첨가(50%, w/v)한 다음에 동결건조시켜 제조하였다. 최종적으로 고운 가루 형태로 분쇄하였다. 상기 제조 과정 중의 건조 과정에는 감압 건조, 가온 건조, 상온 건조도 대체 가능하다. 대조 실험을 위해, 박테리오파지가 포함되지 않은 사료첨가제도 박테리오파지 액 대신에 박테리오파지 액의 제조 시에 사용한 완충액(Buffer; 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgSO4, 0.1% Gelatin, pH 8.0)을 사용하는 방식으로 제조하였다.
이렇게 제조된 2종의 사료첨가제 각각을 중량비로 1,000배의 양돈용 사료와 혼합하여 최종 2종의 사료를 제조하였다.
실시예 8: 소독제의 제조
소독제는 다음과 같이 제조하였다. 박테리오파지 Bor-BRP-1 액을 이용하여 소독제 1 ml 당 1× 108 pfu의 박테리오파지 Bor-BRP-1이 포함되도록 소독제를 제조하였다. 소독제의 제조 방법은 박테리오파지 액 제조 시에 사용하는 완충액 1 ml당 1× 108 pfu의 박테리오파지 Bor-BRP-1이 포함되도록 상기 박테리오파지 Bor-BRP-1 액을 첨가하여 잘 혼합해 주는 방식으로 제조하였다. 대조 실험을 위해, 박테리오파지가 포함되지 않은 소독제로는 박테리오파지 액의 제조 시에 사용한 완충액 자체를 그대로 사용하였다.
이렇게 제조된 2종의 소독제는 부피비로 1,000배의 물로 희석하여 최종적인 소독제로 사용하였다.
실시예 9: 돼지 사육에서의 사양 효과 확인
실시예 7 및 실시예 8에서 제조한 사료와 소독제를 이용하여 돼지 사육 시의 사양 결과 개선 여부에 대하여 조사해 보았다. 특히 본 조사는 증체 정도 조사 방식으로 수행하였다. 총 40 마리의 자돈을 20 마리씩 한 그룹으로 총 2개 그룹(사료로 급이한 그룹-A; 소독 처리한 그룹-B)으로 나누어 2주간 시험을 실시하였다. 각 그룹은 다시 10마리씩으로 구성되는 소그룹으로 나누어지며 각 소그룹은 박테리오파지 Bor-BRP-1이 적용된 소그룹 (소그룹-①) 및 박테리오파지가 적용되지 않은 소그룹 (소그룹-②)으로 나누었다. 본 시험에 대상이 된 자돈은 20일령의 이유 자돈이었으며, 각 시험 소그룹의 자돈은 일정 간격을 두고 위치한 격리된 각각의 분방에서 사육되었다. 각 소그룹은 다음의 표 4와 같이 구분되고 지칭되었다.
돼지 사양 시험에서의 소그룹 구분 및 표시
적용 소그룹 구분 및 표시
박테리오파지 Bor-BRP-1 적용 박테리오파지가 적용되지 않음
사료로 급이한 그룹 A-① A-②
소독 처리한 그룹 B-① B-②
사료 급이의 경우에는 실시예 7에서 제조한 사료를 표 4의 구분에 따라 통상적인 사료 급이 방식을 따라 급이하였으며, 소독 처리의 경우에는 일주일에 3회씩 기존 소독과 번갈아 가면서 실시하였다. 본 발명의 소독제를 분무하는 날은 통상의 소독제를 이용한 소독은 실시하지 않았다. 시험 결과, 박테리오파지 Bor-BRP-1을 적용한 그룹이 박테리오파지 Bor-BRP-1을 적용하지 않은 그룹에 대비하여 증체 정도가 유의적으로 우수하였다(표 5 참조). 참고로, 실시예 5에서와 같이 코 분비물에서의 보데텔라 브론치셉티카 균 분리율도 조사하였는데, 박테리오파지 Bor-BRP-1을 적용하지 않은 그룹의 일부 동물들의 비강 분비물에서는 보데텔라 브론치셉티카 균이 검출되었다. 반면에 박테리오파지 Bor-BRP-1을 적용한 그룹의 모든 동물들에서는 시험기간 동안 보데텔라 브론치셉티카 균이 검출되지 않았다.
돼지 사양 시험 결과
구분 증체 정도 참고사항
A-① 107%
A-② 100% - 본 그룹의 평균 증체 정도를 기준 (100%)으로 하였음
- 일부 개체에서 보데텔라 브론치셉티카 균이 발견됨
B-① 106%
B-② 98% - 일부 개체에서 보데텔라 브론치셉티카 균이 발견됨
이상의 결과로 본 발명에 따라 제조된 사료의 급이 및 소독제의 처리가 동물 사육에서의 사양 결과 개선에 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 이로부터 본 발명의 조성물의 적용이 동물의 사양 결과 개선에 효과적이라는 결론을 내릴 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
KCTC KCTC12705BP 20141107
<110> iNtRON Biotechnology, Co. Ltd. <120> Novel Bordetella bronchiseptica bacteriophage Bor-BRP-1 and its use for preventing proliferation of Bordetella bronchiseptica <130> KP090466 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 49601 <212> DNA <213> Bacteriophage Bor-BRP-1 <400> 1 cagattttcc ccccaccccc gcctacctgc ctgcccatcc gacgacctgc aacgttataa 60 cattccatct cacagaggaa aagcatacct taccccctgt gtcccccata tctttatatg 120 gtgtttctac ccccaagccg gtgggcttct atggtgttag ggaaggggtg ccaagaaccc 180 cactgacata tcaagcactt acctaccccc atccccccat aatcccccat ctcattacag 240 cctctctaag cctctcttta caccatcaag ctacctaccc attaccccat tcccgttcgt 300 tcgttgtagg ccgttctgac gcgttctagg cctattccta caccccaagt acacccccat 360 tcccatcccg ttacacattt ttaccatttc cgtaccttaa ggaactgatt tcgtgctatc 420 gtagaggtgt tgtcttaacc cttatgtccc cttttattgg agtctttcat gccttcctct 480 cccattcaaa tgacacgtga cgagttacag gtcgcattgt tatccctggc tatggacatg 540 tgcattgatt atccccagcc cattctccgc gcctgggcga cttcttttgc tgaaagtgct 600 taccatcgtt tcgacctgga tctccacgaa atgacggcct tgattgagga catcgttaac 660 aacgtggatt aatattgtga agccaaccat gtctaaactc gacctgaccc cagccaaccc 720 cgatgtggtc tttttgaaaa acgaccccac caacgaagct attcccgcag acaccctctt 780 ccgcattatc gctaacagca acctgtccaa ctcggcgcgg aacgccgcca agctgtacct 840 ggaagcacgt gacctaacat ggatggcgct gtacaaggca gctaaaggta agtagttctg 900 ttacaatctt ttacatcttt tactggcacg ttacatttat ttgtgttgta atagccctgt 960 atcccgctct ttaaaactag tgacgtatcg ccctggtagc gcccctttca tgggtgcgtt 1020 cccctatgtc tataggtacg tcgcttgtta caacttccca atgtgaggaa ccaaccatgc 1080 aaaccgctac gctccgctgg tacgaaaagg gcagtactca aggaaagtca cagacattca 1140 accaaatgca actgtcggct ggcttcctgg acgctgctgt cgataacctg ctgtttgaca 1200 acatcgcgtt ttcggtaacg tatcaaccca ccaacccgca gaccagcctg cctcttgctg 1260 actgcgagtg ctaactcagg tacaaccgat agggtattcc ccgagtatcc tatctggtgc 1320 tacttggcac taacttcgcc taacttcggg caaaatctgt taactcttag gagaatatca 1380 tggcccgcaa ctctaacgcc gccattgctg tcaacccgct ggctaacctg gaagcccgcg 1440 ccaccaccga atcggctacc gccccggtcg aaaaggccct gaaagtaggt aagccgatca 1500 cgggtcagta cctgtacgag caatttgttc tgcctaacaa gcaagaactg acgaagatgc 1560 aaatgatccg tcagtgggcc gatccgaaga ctggtctggc cgtgtctgtc ctggacaccg 1620 cgctgaaaga catggtggaa ctggcttccc agcagggtga cgcccccaag aaaaccgcgc 1680 aaaaccatgc ttccaccctg cgtagtgtgt acggtgcctt gaagttcgcc aacgatgcgt 1740 tcactgccgc tggctatgtg gatggcgaga ctggttacca gtccgcccgt gtcctggcca 1800 agaaagccct ggccgatgct ggcatgcact ggaccggtgc acgggtcaag tccacggaag 1860 agaagcaacg cgaggccgac aacaaagccc acgcgaaggc catcgagaaa gcgaaggaag 1920 agaacccgca ggcgcacgac gagtcctacg gcgattggat gcagcgcgtc ctgatcgagg 1980 ccgaccggat caaggatcag gtgaccctcg aacaacacgt tgagaatgtc aaggcgcttg 2040 ccaaacgggt ccgcgacctg tgcggggaaa gcctgacaga cgtgttggcg tacatcacca 2100 cggaacaatt ccccacgtcc ccgacggatg atgggggttc ttccgaataa aagactatca 2160 acttctttta acccgcccca aaaggcgggt tttttattgt ctcatcaatt ctattgtcat 2220 gtttaggatt gtgactatga gtaagaacga tatttatccg gagtcccaca ctgacgcatg 2280 ccgtgctcaa tatcgcttga acatgttgcg tcgttacagc tcacaccgca ccaaagtatt 2340 tattaaacga cgtatgagtc ggatgaccgc aagggaattg cttgtagctt tagaagaagt 2400 acgacgcgcg cgttacttgt ccgccgtggt ggagaatgtg aaatgaaaca aagtaaagaa 2460 aatagcacgt ctatgtcggt tatagtcatt ttgaaagagg ctcgtaacat tttgaagtct 2520 cctgataatt ggacacaagg gacgtttgcc cgcgatcatg agggccaact gtctgatccc 2580 catgatccag ccgcaactaa attttgcata ttgggtgccg tagaaaaggc aggtgctgac 2640 ttgggggttc gagacagttt gacagaacta gcgctcgaat atgttgattg ggcagcgccg 2700 gggtgggaag tcgttaagta caatgaccat cccgctacta cccacccgga cattttgtgt 2760 gtcctggatg aagctattga aatggccgcc gacgagaaaa actggtttta ttaaactaat 2820 aggagtctaa cgaatgcccc atccaccaca cattcagaca ttcttgttgt tttggatcag 2880 gcgatcgagc tagcaaagac tcgttgtacg aactaaagtt tcttcttgtt acaacttcct 2940 aacgtaagga atttaaatca tggatcttga cctgaacaaa ccgcttcgtt ttaaattcaa 3000 caaaaaaccg tgcactcttt tgcatgtgtt gacgcacccc tggaatcctc tgcgtgcaca 3060 tgtggtgcta cataaaataa ccggcccaaa cttccgggat gtagtcgaaa ttgtttccga 3120 aaaggttctt gaaaatattc ctgaaagcct gtggatgaat atttataagg atcatgggtc 3180 aatttggcat tccactaaag aaattgccga gaaggcacgc ggtactgatt ctacttggct 3240 gggggtacta gaataccccc aagacggatc tccggctatc tttcacccaa aaaaataaac 3300 taggtctatc gactttttaa aagggcttcc aatgaaacgc cgcgcgaccg acaaaatcaa 3360 aagtaattcc ccattttctt acgtagtggt atttgttttt acgattgggt tggtcgtgtt 3420 ggctggtcat attgctcttt ggttggtctc ttttaattaa cacacggaga aactactatg 3480 aagttttctc atattaaaat gatgttggca agttttgtat tgctagcatc gatgataagg 3540 cccgctgatt ctggagaatt ggacaccttt tctcgtgaaa aggtacagct atgcggggaa 3600 ctgttggaag atttcgagac cttgtacacg ttttatcata tgggtcttga agaagttctt 3660 gctgacgaga ttgtggcaaa gaacccggag tacactcctc atgcacagtt tgtattgggg 3720 gtagctgtca aggtgatata ccattccccg gaaatcgatt atcccacctg gattttgggt 3780 actcaggccg catgtttcag aatcgccggg ccggctgctg atcctcgcat ggattttcgc 3840 ccttattaca atcatcaaag gaagcatatc taatgacggc cgaaacactt acctggagtg 3900 tccgaaataa tgagaggcct gtggtcgggg aaagggatct gagtattaga tacgttcatc 3960 cagaaaaacc gaatacttcc atgcccgttt tgaacatgac gtgtaaactt tcctttcagt 4020 gttgtgctat gagggagatt gccgggttta atttgatgct accaaaaaca gcagacagga 4080 aacgatttct gctaccgccc cctgaaattg tacaggaata cgtggccctt tttaacccac 4140 cttatcaagc ccttggtatt attgccgata atcaaaacgt tggaaaatat aacactctag 4200 cggttgagca gttttggaaa ctgttgtttt gctatgaaaa tatcaaacaa acctataaca 4260 aagtacattc aggaaatgtt ctgaatgtga ttttagcgga tttcgcagcg atgcaggaag 4320 cctggaaacc ccaaggtgtg tctttcttaa aatatacgga gatttataat gaatccatgg 4380 acggtaaccg ttgaaaaatc tgagcaggat ttgcaagggt ttatggtagt aaaactcttc 4440 catcgtaggg gggttgttct taacatgcac ataactccgt ggactttcca ctgttgtgcg 4500 tgttcaagta tcgctggttt tgatgtctgg tttcctgcgg aatacgactc ggacacaaaa 4560 aaacgccggt ctattattcc tcctccggaa atcatggcac atttttgccg agccctggcg 4620 cgggttttgg aaccccaatc tgcattgggt attatctctt cccaccaaaa aaacaagttg 4680 gttttgtccc acggtaaaac caaagacgct aacgaggaag ttaagaacga cgttttcgca 4740 aaagattttt gggatttgat tctttcccca acttatctaa gggacactat cccatcccgg 4800 gcagacggaa ccccgttgtc gttcgttctt atcaacggtc ctgacctagt ggcatcgtgg 4860 tcaagaaaag gtcgtggaaa atacagggct tatcaggagt tttataatgc ttaccaagaa 4920 aattaagtct cggcaaattc agcaagctga cggcagcgtg gtgtatccta ttttcgataa 4980 ctattttgac tatttcactg gtccgggttg ggaaaattgg tcccgttatc gaatcgtccg 5040 taagaatgtg attcacgtgg cgggtgttaa acatccagtg gcgcgtatcc ttgccctaac 5100 acgctaagga aggtgcatga aaaaatcaaa caaacctgaa tctcgttttt atttcccgga 5160 gcctatcgta aaagaaatct ctcctcctaa catggatccc gtgtatcctg aaatgaatta 5220 cgcggaagtt gctgcaatca ttaaagatgc agaaaaagcg gggtatggta agggggcgct 5280 cattgttaaa tatgctcctt cgtacattag tggtaatgta ttcggctggg gtatggtcgt 5340 gcggttgaac catacggtcc ctcataaagg gatgccatat cgaggacccc ttattgccgt 5400 gttccccatg tcggccagcg tcgcaactgg tccgcgtgag gaatatttgt ggccagatga 5460 agtgtacttg attgacactg ccccgacgga agaggaacaa aaggaagtaa cctctgatat 5520 gaaattgctt caggaggaaa aagagaacgc gaagaaagct cgtcttacaa aattcccaat 5580 cctaggaaac tgtaacagtt aaggatatat catgcgttat actgttatta aatgtccccc 5640 cggttatttg caaaatcaac cgaacgctca agaacaagca attgatgcac aactaaatcg 5700 gacccggcga aaccccgtac ctgccgctca ggttgtacta gatgactggg ccagggcggt 5760 tggtagtcgg gaagttggcg ggaccccttc tcctccagtt gtgagacaga tgtttaacac 5820 gttggaagaa gctgtcgtat atgctcagat gcaggcgcaa cagttgcgag aagcccatat 5880 ggttctcgta gcccatacgg taatcgaacc attagtaacg gaaactgttc tcgtgacgaa 5940 acggtttacg gaaactggtg aacttcttat cacaggataa tttatatggc acgtaattct 6000 aaatttgtta tgggttaccc gaaaaatacc attggtactg gtaaccagcg tagcgccccg 6060 tttgacgatt tgtttgatac gattgcggca acacccgaaa atattcggca acgtgccgtg 6120 gatgtattgg tggtgtgggg tggtgctgac atttcgccga tcatttatca agcacagccc 6180 agtcgtatgg cgggaacttc tagccttact gaactgagtt atcgggaccg agaagagatc 6240 gctgttgtcg aagcagctat cgagatgggg atacctattc tcggtatttg tcgcggggcg 6300 caactggcat gcgcaatgtc tgggggtctt ttggtccagc acgttgatgg acatgggggt 6360 gatcacctta tcaccactga cgacggacgg caactggtca gcagttctgt gcaccatcaa 6420 atgatgtggc ctttcttgct tgacaacaag gtctatcgac ttcttgcttg gtcgtctgag 6480 cctcagtcca gtatctatgt ttttgacgac gtgcacgtgc gcaagacggt tgacatagag 6540 ccggaaatta tctggttccc taagaccaaa gccctggcta ttcagggaca ccccgaattt 6600 atgtcacgag attctgaatt tgtggtatat tgtaaagaac tgatccagaa atacatcttt 6660 ccttgtgtgt ggagtgatca tgaatttgaa tgaaatccag gcgaaagcaa atgaattttt 6720 gactgatgaa cttaaagtaa aatttttaaa tgtatattat gagaagtggc atcgggtgtt 6780 tcgtgatact actgctgact tttctccagc actgttgact gtgaggatcc ggaacacgac 6840 ttacacaggt ttagaacaat atagtgtgga acttcgttat ggagaagacc tttttcgtga 6900 cctgcttcgg tttcgactac agggatatcc gtcctgctgt ggtttaacca tgtttcacac 6960 atttttttgt gagaccattg tacttccgaa atgtcctgaa ttttttaaag ctcttatgaa 7020 cttgtgcttt acccttgatc gtaaaaacga cacaggtttc gcaaatcgac gtattgagct 7080 agtcatggta actgaccaca acaccgcgac cctcaaactt ggggaagatg tctttgagaa 7140 cgattccaaa tacgaacatt ttcgtttcaa ggtcccagct cagtgggaag attctgtagc 7200 gaaaaaagaa cttaaattta tattcgatcc ctttttccgg tacttcacag acgtagccga 7260 ggaggtccac acatccctct ttttcaacta caactccggt cgtattctgg caaagattgt 7320 cgcctctgta gactcatact tttttaaaat ggactgagaa tagctatgaa tatcaccaca 7380 ttgggttgcg accctgaagt tttcctggcc gacgaagccg gctacatggt gtcgagtatc 7440 ggcctgattg gaggatcgaa agatcatccc cgccccatcg atgaggaagg taacgcggta 7500 caagaggaca atgtagcggt ggaatttaat accccgcctt gtcaaacggt tgaggatttc 7560 cgtaaacaca tcaaaaagaa cttgacttac ttggaaagtc tttgtaacac tatgggcttg 7620 aaacttgcta ttcaagcaag cgctgttttt gatgatgttg aattgcaaac tccgggtgcc 7680 cagacgtttg ggtgcgaacc ggatttcaat gcatacactg ggaaagaaaa cccacgtccc 7740 acggccaaca atccgaatct gcgctcggca gggggccaca tccacgttgg tacggacgag 7800 tccattgaca agaatctttt gattcaatgg atggatgtgt atgtcggagc acagttgttg 7860 cgttttgata cagattccga acgtcgggaa ctttatggta aggcaggtgc gtgtcgttat 7920 aagtcttatg gcgttgagta ccgcactcct tccaatgtct ggatcaaatc cgatgacctg 7980 attcaatttg tgtgggatca aactgacaaa gcgcttggcc gcgccaaagc aggggatcgt 8040 atcccggaag atttgcaagt agtggtacaa caatgtatca acacgagcga tctttctttg 8100 ctggaagtga ttgaaaagga acttggcaaa tgagtatgac atcggctcaa atcatccaag 8160 aattgtctcg gaaatacacg ggaacatacg tattcacgga tgttaacaac acggaaatgc 8220 tggcgtacat cgacagtatt aaggtagttg gtagcgaaaa caaagcagcc ggagagtgta 8280 ttcttcaaac acaagctcac ggtaaacttc gctatatcct gccgtcgtcg cagcgtttga 8340 agattcgtat cccgaaagcc ggtgtgttcc aacacgagac caacgccgtg ttgtgtgccc 8400 gttttccggc ccgacaatgg cggcggggca tctctgaagg aaacacatct ttcctggatt 8460 tggcattgct ggttgctaac ggaggtattt ccaacggccc agcacctaat cttcccctaa 8520 cgtttgaccg tatcctcgca tcttttgaac gaaaaacttt ttcagttcaa gatgctttgt 8580 ctatgttgtt gagtaatagg tatactagcg ttgcccttcc aggagattgg gcgctagttc 8640 aaagtcccgt tgctggggga cttccttctt ttatcttgat gtatcgtctc cttatggtgg 8700 gtattgtttc ggctaaaaaa caattgctgc acacgtatct gcctacgtac caacaagctg 8760 ctacggagct tttgaatgac tactaaaaaa cccacatcaa tagaacggac attggatcta 8820 gatccaatgc ctgttgtgga aactgtatcg gacattcccg caccccttat ccttatcgac 8880 agcgatgatt tggttggact ggaaatcgaa gttgagagtg caacgaccac ccggtgtcca 8940 aaaccctggt ttgcaaagga agatggttcc ctacggaatg gaggtatgga atatattacc 9000 gcccccatcc aagcacgaga taccccgaaa gcactggcat ggttgtacac taaagtgatc 9060 ggaccggaat gttctttcag catgcgtaca tcggtacacg tacacctaaa cgtccgagat 9120 ttcacccacg aacaagtgcg taacttggtc gctttgtaca tggtttttga acctgccttt 9180 tttaattttg ttggtcgcgg ccgctggaag aatatttttt gtgttccgtt gaatgagtgt 9240 aatgatcctg ttatgcacct gacgcgggcg cgttattgga cagcttggaa taagtatact 9300 gcgttgaatc tccgtcgttt ggcagacttg ggcacagtag aattccgcca catgcccgga 9360 acacgggacg ttgagaaact agttcagtgg gtgggtatta tcacgaagct gaagcactat 9420 gttcgtgaaa ctcctaccag tgttttgcgg aaagccatta acaccatgtc cggttatttc 9480 gattacaatc ggtactctca tgaagtgttt ggggaatttg cagagtgttt gcaaatctct 9540 gacccgggtg tgcattaccc atgctcgctg aatgctcgtg ctgtattttt ggggacgaca 9600 ccttctggta atttgatgga aaacggaagt cctctccatc tcttcctaaa acaacgtcgc 9660 gtttaactta aaggattaaa attatgtgtg gtatcgttgg tatgatcacc aagcgtcagt 9720 acggatttac ttctgctgat caagatttgt ttcgtcgact gttggttctt gatggagaat 9780 atcgaggcct tgatgcaact ggtgtgtatc aagtccaaaa gaatcgacaa gtgttccttg 9840 ctaaaagtgc tactcaacca caggtgtttt tccattcgtc ggcttggacg gatttcaatc 9900 gacgcatgct ttcctcttct cggattgtag tggggcataa ccggaaagct actgttggtg 9960 caaagaccag tgaaaatgca cacccgtttc acgaggacaa catcatcctc gttcataacg 10020 ggacgttgca tggtcacaaa gaactagcag aaaccgatgt agacagtcac gcagtttgtc 10080 aagcatttgc aaagggtgaa gcagaaaaga ttcttccgac cattaatggt gcctttgctt 10140 tcgtttggta tgacatcaac aaggagcgtt tgtttgctgt ccgtaatgac gagcgccccc 10200 ttaccattac tgaaactccg gacaacattg tcattgcttc tgaagcgtgg atggctgtgg 10260 caatgttgcg gcgcgcggaa gtcaagcaag aaaatattaa ggtaactctc cttcagccgg 10320 gggaaatcta tgaattcaat ccggacgatg gtacgtacac cactaagaaa attgatcttc 10380 ccaaacatgt accgaacacg acggcttttg cccggggttt cctaggccaa gaggtgtcaa 10440 cgtacacccc gcctcgtgtg aacacccagt cggtaaaacg tcctcctcat ataactacgg 10500 ggaatgttct taaaattcat ccggacttga aaaagaaatt tccggagaaa agaaccatct 10560 tggtcaagat ttcttccatg cgtaaggtag gtcctgcaac tactccagcg tggcaagtaa 10620 cgggtaaatg tattgagccg ggaatgcctg atgtggatat taccggatca atctacggac 10680 tgaatcccaa ccaactacag gagtggtaca atgaacctgt ggtcgctact gtgacacatg 10740 taaccgagca tcttgctggt cctgttgttc acgtaaagaa ttttcaacaa gacattgttg 10800 tgactacttt tggtggagat attggatatt cagaatggga ttacgtatcg tcgaattgta 10860 agtgcagtaa atgtaatgct gagatagatt ttggagactc tgccacaact cttgtaaaac 10920 gacttgagat cggggttaat acccgttatc atgttgagtg cacggcgtgc ttggaaaaac 10980 aaactactaa cgaacaaacg gagaatacta atgagaaacg tggtcatctt gccctacaaa 11040 atgggaagcc ggtcggcacg agcgctgggc gaggcactga cgcaatcatt gcgctaccgg 11100 gttctacgac tcttcaatga tcccgcaagg tctcgttacc gtcctcgccg agcaggtcta 11160 attattaact ggggtgcatc gcgcaacaat cttcccttgt ttaataacta ccgggtgttg 11220 aatcagtttg ataacgtgcg ggcagcaggt aacaaacttg ctacttttaa catcttgtca 11280 caagatccca acatcaggat ccccctgtac acgcaggaca tcgatgtcgc acggtcttgg 11340 tgccaggaag gtaagcaagt agtgtgtcgt caaaccctaa ccggacatag cggccaaggg 11400 attgtgatag caactacccc ggaagagttg gtacgagcac cgttgtatac tcaatacgtg 11460 aagaagcgta aagagtttcg ggtgcatgta gtaggaggta acgtcattga tgtacagcaa 11520 aaacgtagga ggactgacta cgatggagaa ctcgatcctt atgtacgatc gtttcatcga 11580 ggttgggttt tttgcaggga aggtattgag gaacccactg acctgcgaga aatggcagta 11640 aggtctatca acaggctagg gcttgatttt ggtgccgtgg atattgtttg gaatagttac 11700 cataaccagt gccacgtgct cgaagtcaac acggccccag ggttggaagg tacaacgata 11760 acttcgtaca gagatgcatt tgaagtattt tttcggacgt agataccatg actaaacgtt 11820 atagcgaaag cggagaagtg tggctagaag aagttacttc ggaagatggg atcaccacga 11880 cccatattgg attctccgaa gagtttttga atcgcctacg acaagaatgt tatcacgtca 11940 ttcttcgccc cactgtcgag gttgaggtag gccagcctct cttttccgta gagacagtag 12000 atgaggtttt ctccattctt tctcctgctt ctggaaccat tacggagcat aaccacaaca 12060 ttcagaattt cccggaacga ctttttgtag attctccagt agtaactctt aaaaaaggaa 12120 gtgcaaaaaa agtagttccc cctccattcg gcctgccttc cagtaatggc gcgttctggt 12180 gatgcaccat tcaatttccg tataactata accaaaagga atagaaacta tgcgctgttt 12240 gtcttgtaat tgtcgtttga ctacacaaga aagtactcga aaagccgtta acacgggcga 12300 gtacattgac ctgtgcaata cgtgttttgg cacaattgca gatgaggtag cttatgttga 12360 aggttctggt gcgagcgatc aggatttggg tgatgaatat gatggagaat cggactcttc 12420 cgaagatcgt tgggaaagta acttgtaaat tttgtggggc tgtttttact cgtctagagt 12480 acctgcaaaa taattgcaat tgtattaatg aggattgtat gagtcgtcgt caacgccgaa 12540 agcaaaagcg agaagcacaa ctcctaaagg agcaagaacg caaaacacag cgcttggaaa 12600 ctaccacagc tgtcattgag tgtcaagaaa ccattactcc gtttgatggt atggcctata 12660 aaccccaagg ggaaagtcag ctgtatgttg acgtcccatt cacggtggag cggcatatta 12720 aagtaaaacg aattcctatt taacgggact attatgggga tttttgttcg acatgagcca 12780 tgtcctaagt gtggttcccg tgataatctg gcacgatact tagacggaag tggaacctgc 12840 ttcggttgtc gttactatat tccccctaat ttggatgcta tacatggggg gaacgttgta 12900 aaacaaccac acattaaaga ctgttccccc cttccggatg attttaatcg tgattttcca 12960 ccggagatat tgacatggtg taataaatat ggtatactag tgtctgagct tatctttcgt 13020 gatgtgggtt gtagtgttaa atggaaccag cttttgttta cctttaaaca agaggataaa 13080 gttgttcttt ggcaagcccg gaactttaca aaaggacgta ctaagtactt tacatccgga 13140 gaaaaggaca acatccttcc catctatcca gctaaggaaa gtaaagtacc cggaactctt 13200 gtgttggtag aggattgcat ttcaagcatc aaaatagccc gccagtgcga ttctatgcct 13260 ctcctagggg catcccttaa ccgtaaccgt ttaaacgctc tacggccgtt ttatgaccgt 13320 ctggtgctat ggttggatgc agacaagtta aacacagctt taaaaatagc aatgactgcg 13380 tctttactag ggtttgaaac taaacctgtg tacaccgcag aagatccaaa agagtacgaa 13440 gatggtttta tcctaaactc aattcaggaa aaggaaacgt gaaatgacca acattatcgt 13500 caacatcaac atcgacgact acctgggcga agaggaaaag cgccagatcg cccgcgacga 13560 gggatatata gggggattat tttaatgatt actaggatta ccgaggaaaa cctgtgaaac 13620 tctctattat acctttagaa cggccgtcag gacttgtgga gtatgtgcgc gagctactag 13680 cacgatgtga atctggtgag gtaattgctg tcagtgtggt ggcggaacac cgaggcggta 13740 cgtattcttt ggaaggatca gaagtggcta gtcgcactca aacagcggga atgctgttgg 13800 actgtgccat ggcccgactt gctcgggatg attgaggtaa aggaataaaa atgcgtgata 13860 aaacactgat gttgtgtgaa agaattctta tgtggtgttg tcttaccacg atgtttggtg 13920 ttgtattagt accactaatc acaggacttt atattttgtt tgacacgatg taaaaagtat 13980 gatataataa tatgtatata tattaataaa taataatata taaataatat attatataat 14040 taattaaata atataattat aaaggagtat atactatttt acctgaattg tcaataatta 14100 aattactttg tgtttataca gagtatgaaa aatacaacac ctcgttagat acctcggtgt 14160 tgccaaaaga gattcaggga atataccggg tgttggatca ccatcataaa tccaaccccg 14220 gtgttgatct tagtgtagac gatctttcta atctcttttt tggaactaat ccaaaagacc 14280 gagaattcta tatcggtgta ttcaataacc tacgggaatt gactacgtcc gcagcatcca 14340 cccaagaact catcaagggt gttaaaacta ataagctgtt gcgcgacttg tcgcttatgg 14400 cttatgaggt agctgaagga agagcaccac aacaaaaact ccaaacactg ctgactgagc 14460 tacaatcccc tcctgacgaa acagattccg aagatgtgga atttgtaact tcggatctta 14520 cgcagctgat caacaagaca tatgctactc caggacttcg gtggcgcttg aatacgttga 14580 atcggatctt gggttcgttg cgtccaggta acttcgggtt tatcttcgca cgacccgagt 14640 gcttcacacc cgacactgaa gtcctaacac ccaatggttg gatcggtgtt gcagatgtta 14700 ctctcgatac ggagatatcg gcagttaccc cgaacctgca tctaaagttc gagaagccct 14760 ctctcgtcac caaacgggat gatttcgacc atgtgtatcg gatttacaat cgaaaggcac 14820 agatggacgt agttgtctct ccagggcata ggatggtgta cacgaaagaa aatctgtggt 14880 acgaagaaac agcggaggat gttaagtatt ttcaaggtat gaaatcccac acctcgacaa 14940 ggggtgttgg acgtatttcg aaattgacct cgcaagaacg tatcggtatc gccttccaag 15000 ctgacggccg tgcacgtgtg tacgaaactc atgggcatgc accccatcag tacggatacg 15060 agttgacgtt tacttctgag cgtaagattc aacgtatgcg ggaactacta acacaaagcc 15120 cagatatcca atctacggaa tggcaggatg ctcgtgggta cactggattt tatcttaaga 15180 caaatattgc ttgggataaa gacttctcgt gggtgtctct tggagacaag tcttttgttt 15240 ggtgtaggga attcgcagag gagttgaaac tatgggatgg tagtgaacgt tccactaccc 15300 gctggaaata ctctaacgga aataaaactg ctgtggacaa agcgcaggct gttgtggcct 15360 tgtctggcta taactcctac ctgtccgtgg tcaaagacaa acgggggtat ccgaattgct 15420 atgagctaca tatccgcagt aactacaccc cgatagatgg gcagagtgtt cgcaaagaga 15480 agttacctaa cagcgaaagc ctgtactgtt tcacggtatc tactggcatg ttgttgatcc 15540 gtcgtaacgg taaggtattg gtgtgtggta acactgggaa aacaactttc ctagtatctg 15600 aagaaacttt tatggcagag caattgcccg atgacgccgg accaatcatt catttgaaca 15660 atgaagaagt tggggataac gtaatgctcc gagcttatca ggctgctgct aatgccacga 15720 tggtggaatt gatccatgac cctgatcgat atgctcgcat ctttcaagag cgtacgaagg 15780 gtaaactttt gatggtggat cgcccttcca ttcatcgggc atttgtagag aagttgtgtg 15840 cgaagtacaa accaagtttg ctggttatcg accaaattga caagatcgtt gggtttgatt 15900 ctgatcgtga ggatttgaaa ctaggatcta tttatcggtg ggcacgagaa ctagcgaaga 15960 agtattgccc tgtgattggg gtgtgtcagg cagatgggac tggtgagaat gtacgttggc 16020 ttaacatggg gcacgtagct aatgctaaga cggccaaaca agctgaggca gatttcatca 16080 taggaattgg taagatccat gatcttggat acgaacgtat tcggtacatt aacgtatcta 16140 aaaataaact cgtgggggac catgactctg atccatccgc ccgccatgcc caaaaagaag 16200 ttctaattaa tgccgatcgt gcacggtatg aggatatcaa ttaatgagta aagtacgtaa 16260 atatactgct gtgattacgt ccactgttga gatgtgtgtc tacggaatca acgctgtaga 16320 tgcgctggct attgcgaatg aacttgctcg ggacacgctg ggattggatg aacacgagat 16380 tgacaaaatt gtgatcaaag agggacttga agatgaagaa tcgaactaat gtatttcatg 16440 tagtgcggta catctttgat gagtacactg atacgattga agatattcag atcgtaggta 16500 catatcgaac tgttcaacgg gcagatgaaa ttgcagatca atatcgtcaa caggtagaag 16560 atggggatat ccccgagtgt tttgattttg gagtacagat cagcactttt tacgatgaat 16620 gaaaatattc ttgtaattga cactgaagta actacgtcta ataaaggaaa tccttatgac 16680 aaaacaaaca agttggtctg ctactcttgg tggtataaag gcgtcgctga tgcggctttg 16740 gactctccgg aatcccgcga atacttgcgg acccttcttg gtgaatcaac tcatgtggtt 16800 ctgtttaacg ctaagtttga tcttgcctgg cttcgtcggg tgggcctttt tcgggatggc 16860 catgtgcctt tgggtattta tgatgtacaa cttgctgagt ttatcctgtc cgatcagcga 16920 tcacgatacc cctccctcga acaagcagca gtaaaatatg aactaggcca caagattgac 16980 gtagtaaaag aagagtattg ggataaggga attaatacgg atcaaatccc atgggaggat 17040 gttttgcgtc cgtatgcaat tcaagatgct cttttaactt atgaggtcta tcgacaacag 17100 cagaaatatc ttgttggtca gcaacgccgc cttttcaatt tgcaatgcat ggacattcct 17160 gtgctacttg acatggaatg gaatggcttg aaatgggatt ttgaaggggc agaaattcgc 17220 cgcaaagaac tagaacaaga acaagcggag attcttgaaa acctcaataa gatttatcct 17280 gatgttccca ttaattttgg tagcactgac cagctgtctg cttttcttta tgggggtgtg 17340 gtcaaagaaa cccgacgaga acatgtagga ttctataaga cagggaaaca agcgggacaa 17400 cccaaatatt ccaacaagga aattttacac acgttgccac agatgtttaa accattgcct 17460 aattctgaaa tgaaaaaaca gggtgtgttt agtacgtctg aagatacgtt gaaaaaactg 17520 cgtggaaaga aaaagatcat cgagagtttg ctacgtcttg cagcagttga aaaactactc 17580 agtggttatt tcattggtat acctaaactt tataatgaaa tgaattggga ggattctatt 17640 ttgcacgggc aactaaacca agtggtggct caaacaggtc gtctgagtgc ggttaaacca 17700 aaccagcaaa acatggcccc cgaagcacag aattatctcg tcacgaggtt ttaacatgag 17760 accctttcaa ggggttcttt tggaatcccc caagattgaa cgaaatcagg aactagcttt 17820 gtttttagct gaatgtattc gtaaagacca ggggtttgcg tacattgata ctgccacact 17880 gtctgagtat ttccagtcta agttgagaga gtttgatgcc cgttttacgt tgagggaatt 17940 taatgttaat tcaagttgac gccagccagg tagaatggcg ggtgtgtctt gaactgtccg 18000 gggataagac aggattgcag gagattctgg aaggtcagga tacccacgca ctaaaccaag 18060 ttgcgttctc tcttcccgaa agagtaattg ccaaaatctt cttgtttaga actatctttc 18120 gaggaagtgg ctacgctttt gcaatggacc cggcttttag tcacgtgtcc tctagcccta 18180 aattctggga tgagatgaat gaaaagttct acgccaaata cgacggggtg aacaaatggc 18240 accatagcat ggcagatacg gtactgcgtg ggggacgtat tgttactccg ttcggacgcg 18300 ggtggacctt tgagttgaag cggggctgga atggggaatt gaaacttcca tggacagtgt 18360 tctccaatta ccccgtacag ggcacaggag ccgatcttat gaccttggca agggtatcct 18420 ttgcccgacg gttaaaagct ctccaatggc ctgtattgct tatctcgacg gtacacgaca 18480 gcatcgtggt ggattgccct gacgagtatg tccatcgagt tgcggaactt ttctacgcgg 18540 tgtttgatga tttgcggcca aacattaaac gggtgtttaa atatgattgg acagtgccct 18600 tggattgtga ggttaagttt gggccgacca tgaacaacat gaaaaaacta ttacgccatg 18660 acttgacttc ggcataatgg tatgatatac tattagtata gactgctact ttagctcagt 18720 tggtagagca tttcacttgt aatgaagagg tcgtgggttc gattcctaca agtagcacca 18780 atattccccc tggtggtgaa atgggtagac acgagggact taaaatcctt tgccgcgagg 18840 cgtgccggtt cgagtccggc ctaggggacc actattattt aaggaaaata aattgcaaat 18900 tcagatcgtt agcgtgcaag agcagcaaaa gactacttcg ggtggtaagg cgtactctct 18960 gctggaggta gcctacaaga acctgaatac gggtaaggtt gagggtaaga acattatgcc 19020 gtggggttcg caacaaagtg tgtttgaagt ccttcggacg gctactgccg gcgaggtgtt 19080 tgaagtaact cctgtgaaga atgatcgagg ttattgggaa tggaattccg caatgaaaac 19140 tactgcaggt gcgtcggcca gtccggcaaa cggtgtgtct ggtgctggtc gaaatacttc 19200 tccgaaatcg acgtatgaaa ctccagaaga acgggcagct cgtcaagtgt atatcgttcg 19260 tcagtctagc atctccagtg ctattgctct gttggctcat gctaataagt ctgcattgga 19320 tgtgggtgca gtactggatg ctgctaagca gcttgaacaa tatgttttcg gtgtgaatat 19380 cgaacctatt cgtgataacg ttccggaagc aggtttggca ggcatggatg atgacatccc 19440 ttattgatac cacggatgta gctgacgtga ttacccgcct gcgaaagcgg gcggagattc 19500 gtaatcaaat cacttctcga agatccgttc aagagggtaa gattgatcgc ctaagcgaac 19560 agcttttaga agctgctgat ctaattgaaa aactaatatg cctagtaaat cagaaaaaca 19620 aaagaaacta atggctgctg cggcacacag tcccgccttt gcccgaaagg taggagtgcc 19680 tcaaaaagta gctaaggaat ttaatcaggc tgataagggc cgtaagatcc ggaaaggttc 19740 ccaacgggga cgataaataa aaaattaaac aacctaaagg tttaatatga actggtggaa 19800 agtgacgtac gtagcggaca acaatccgtc tcactacact gtgcttgcga atactcggga 19860 agatgctatg ctgtctgttg agacacagct agctgaagat ggacacaaag agtttcatgt 19920 aatcaacgct tgggcaacta cgtcagaatg aaagccttaa ttgatgggga tattgtggcc 19980 caccgagttg ggtacgcatc gaacaatgag cctttggata ttaatatcct tcgtgtggat 20040 gtaatgcttc gagaaattct tcaagaaaca ggagcagatc agtaccaaat ctttctttct 20100 ggcggccata acttccgtta tgatgtttat ccagagtaca aggccacacg agtaaaacaa 20160 gagcgcccgg tgtttctcca agaaattcga gagtacatgg tgactgagtg gaattccact 20220 gtttgcgatg gaattgaagc ggatgatgcg cttggtatcg cccaaatgaa agcgcacttg 20280 gaagaacaac aggatagtgt tatctgttcc attgacaaag acttgttgca gattccagga 20340 aatcattata attttgtcaa gaaagaatgg agcgaagtca ctgaatggga cggtatcaag 20400 tttttctacg aacagttgct cgtcggagac agggccgaca atatcaatgg tatcgacgga 20460 atcggtccta aaaaggcaca gaaagctctt caatggtgtg aaagtgaagt agagttgttc 20520 cgcacagttc aagatttgta taacgacgat gttcgtctat tgatgaatgg tcgtgttctc 20580 cgtatccaac aacaggacgg agaggcttta tgggaatttc ctacgtggga cgaagaacaa 20640 gaacaagaca atctctctat ccttataaat ccaagctaga agtagagaca caagcgctca 20700 ttccaaaagt tccttacgaa caagataaga taacttatgt taaggaacac acttacaacc 20760 cggactggac tctccggaag aatgtatact tggaagccaa aggacgattc acgtccgctg 20820 atcgagccaa acatctagct atcaaaaaac aacatccaga agtaacggtg tactttctat 20880 ttgagcgtcc gttcaacact ctgtctcgtc gtagccaaac tacttatgca gattggtgtg 20940 ataagaatgg gtatgagtgg actacgttgg agaaaggtat accccgacac tggctaaaac 21000 cccgggggaa aaatgaaaat taatcgtagt gtagaacgtg aagatgggac gtacgtgttc 21060 cagggtgtgc tggaaggtcc agagttgaat ctcgttgtgg aaacaggact caatctgctc 21120 atccaacaag gactctttcc tttcattgtt gatgatgagg aaatttctgg caatcccttt 21180 gactactcta agatcatgcc tacaccggaa aacaaacaat aatgacaaaa caccttgtaa 21240 ttcctgatgt acagtttcga ccgggagatg acacagagtt tctgagttgt attggacgct 21300 tcattgtgac gaagaaacct gatacattga tttgtattgg tgatttcgcg gacatgccca 21360 gcctatcctc gtatgatgtg ggtaagaagt cttttgaagg ccgtcgttac aaacatgatg 21420 tcgaagcaac acatgcagct atgtctgctt tgctttctcc tgtgtgggaa tacaaccaac 21480 aacaacgtcg taacgggaaa aagcaataca aacctaatat gattttgaca ttggggaatc 21540 atgaaaaccg tattaacaaa gctgtcgaaa atgacgcaaa acttgaggga gttctttcaa 21600 tcgatgacct ggggtatgag ggatttggtt ggactgtaca cccgtttttg gaagtcgttg 21660 ttgtggatgg agtggcttat agtcattact tcgtttctgg ggctatgggc cgtccttgca 21720 ctactgcggc tgctcagcta aacaagaaac accaatcgtg tattgcaggc caccaacaag 21780 gattgcaaat ccatatgggt agtcgagcag atggtacgca agtgacaagt attattgcag 21840 gctcttgttt ggcaccctat cataaagtac tgactgcgga tcttcgttat atcccgttga 21900 atgatgttca agtgggggat aagctagtta gctttgatga aaatcttggg gaacattcta 21960 agcgttcgcg gcgatacaaa acaggtactg ttactcacaa acgtatttcc tacggcgaac 22020 tgttcgatgt cactctctct tcgggtaaag tttttagaac caccaaggac catcgttggc 22080 ttaccaacaa ttgtatggga gtgcgtaagt ggactgaaac ccagaaaatg aaacttggta 22140 agaacggtac caaggttaac cggctgtttg atgagtggag tgaggatctt actaaagatg 22200 ctggttggtt ggcagggatg tacgatggtg aggggagtct gtcccccagg aaaactaccg 22260 gtggaaatag cacccaactc gccatttcgc aatcgttgac acacaatccg gcgctgtgtg 22320 aggagcttat ccgcctccac gcagaacgtg gtttccattt gagtactttt aaacagcctg 22380 agggtgggac cgctcagtgg cggattaaag gaggtcagtc ggaaattgcc cgattcttgg 22440 gaaccatccg cccatcgagg atgctttcga aattcaagcc agaacttcta ggtaccctta 22500 cttctaagac tccctccgaa ttagagtaca ttgtttctgt agaaccagtc ggagttggtc 22560 cctatgtaga aattgaaatt gatgcagcca ctatggttgt ggaaggttac ggacatcaca 22620 attgttatga acatgacgaa gattacatgg gtccacaggg aaataaacac tggcgtggaa 22680 ttatgatgct acacgacgtg cacgacggtg cttttgatcc aatgtttgtt tctctaaaat 22740 atctgcggaa aaaatacgat gcttaatgaa cacgatattc gtgatatgat gttaaatcag 22800 ggactccttc ctctacaaga aaagacctcg ctacgcaccg ccgatcaaga aaggggtgcg 22860 aaatacgata ctctaaagcc ccgcatggat cttctggatc cgtcgtggct tgaaggaact 22920 gcccgggtgt tgacgtttgg tgcacagaag tacgctgcta ataactggcg aaaagggatt 22980 gaaatttccc gtttggtggc agcgggtatg cggcatattg cagcgtttaa taaaggggaa 23040 aataacgatc cagaaagtgg acttgggcat ttgtaccatg cttcttgctg tctgatgttc 23100 gcagcatgga tggtggaaaa tcatcccgac ctggatgatc gttataaagg ggacactctt 23160 taagatgtta tacgaacctt atgtggaaac gaacagtggc aagaaactta cgttcttgga 23220 tcctaagcct aatgatatca atattgctga tatcgcgtgg gctttatctc agctctgccg 23280 attcaatggc cattgctcgt cgttctatac cgtcgctgag cactccgtgg ccgtggcgaa 23340 gctccttcct ccggagcttg ccctcgcggg cttgcttcat gatgcagctg aggcgtacct 23400 aggggatatc ccgtctccta tcaaacagtt catgcccgag tttaaacaga ttgaagatcg 23460 tctacaagac gtgatcttta agaaattcgg ggtgactgat gcccttgaac gatacgatga 23520 aataaaacaa gcagaccttc agcaattata tactgaggcc cactatctcc ttccctcaaa 23580 gggccacgag tggaatgtat ggagccagtc taagcaagaa tggtttgttg ataaaggggt 23640 gaaaccgatg ggactttccc gtgtacaagc tatgaattta tttattcaca cctttcttaa 23700 atatacagat acaagcagtc taaaaaaggc tgcttaaagt agtaaaggat gagacatgaa 23760 agaagaatac accctggagg aagtcaaaga acgtatccgc caccaattag atgagacctt 23820 cttactggat attttaggac tcgacattga ggatctagta gatatcctgg aagattatat 23880 tcttgaacac tatgaaaagg taatggaaca tctggatgac taagaagcat tctggcaaca 23940 tccgcgaggg ggatatcaag aaccacgatc cctctcgcaa actgcgtatt aaagaagcac 24000 aagaagcaga agctaaacgt gagcttgagg aatatttcat tcggaaatgg aaccaagcgg 24060 aagaagaggg atattgttgt acgccttggg acagtaaata atgcaactaa atttggagcg 24120 ggataatctc tttgacgagc acggactagc tcggcttcgg gattcttata tgttggaaac 24180 ggagaatagt ccgcaagaac gttacgcagc agttgccacc gcctttggta cggacgatgc 24240 tcatgcatcc cgcttgtatg agtacagttc taaacattgg ctgagtttca gcaccccgat 24300 cctgtccttt gggcggagta aacggggtct gcctatttcc tgtttcttga attacattcc 24360 ggatacatcg gaagggctgg tggacaccct aagtgaaact aactggctct cgatgtttgg 24420 agggggtgtc ggagtccatg ttaagactcg tgcagcagat gagaagtctg tgggggtgat 24480 gccccatcta aaagtgtacg acgcttctag tctcgcatat cggcaaggac gtacccgtcg 24540 tgggtcttat gccatgtatc tggatattaa tcaccctgac attctccgct tcttggaaat 24600 caggaaaccc acgggggatc ctaatatccg gtgtttgaat ctacaccacg ggattaatat 24660 ctccgatgcg ttcatggaac ttattgaacg ctgtatgctt gatccaactg ctaaggactt 24720 ctggcccttg attgatcctc acagtgggca tattgtggaa gtagtttcgg ctaaggaact 24780 ttggcaacgg attctggaga ttcggagtca gactggtgaa ccttatttgc acttcattga 24840 caccgctaat aaagcgctgc ccgctttcct aaaggataag gggttgacta ttaacggttc 24900 caacctgtgt gctgagatag aacttcccac gaacgaagag cgtacagcgg tgtgttgtct 24960 ttcatcgttg aatctagagt actacgatga gtataaaaat gatccacaat tctttaacga 25020 tgtgttagag atgttggata atgtgattca gtattttatt gagaacgctc ctgacgaaat 25080 ccaccgagca agatatagcg ccagtatgga acgttctgtt ggggtgggtc ttatgggatt 25140 ccactctttc cttcaaggga agggagttcc ttttgaaagt gctatagcca agtcatacaa 25200 tttgaacatc attaaaaatg tgcgtactcg tttggactcc gcaaaccgac gattgggaac 25260 tattcgtgga gaagcacccg acgctgtagg cacgggactt cggtgttctc atgtaatggc 25320 aatagccccc actgcctctt cgagtattat tctgggcaat acttcgccta gtattgaacc 25380 tttccgagcg aatgcttatc gtcaggacac cctgtcagga tctttcctga ataagaataa 25440 acaccttgat aaaatcctaa aggaacgcct ttccaatgac aagtacgaag ctacgtggct 25500 ttctatcatc tctaacgacg gttctgtcca gcaccttgat gttctttctg acctggaaaa 25560 ggaagttttc aaaactgctc ccgaaataga tcaacgatgg gtgattgaac acgctgctga 25620 tcgggcacca tacatcgatc aaggacagtc agtaaatctg ttcttccgcc ctgatgtaaa 25680 tattaaatac ctacactctg ttcatttcct tgcctggaag aaaggtgtga aagcactgta 25740 ctatttgcgg agtgacaagc tacgtaaagc cgacaaggtt ggagtacaaa tcgaacggca 25800 gatcattgaa gaattggata tgaaagctat tgcagaaggt gaggagtgtt tggcatgtca 25860 gtgaagaaac ttaagctccg tgacgagcgc atggctttta aaccgttcac ctatccgtgg 25920 gcatacgaat cgtggctccg tcacgagcag atgcactggc tgtttactga agtacctctg 25980 atcgaggata tcaaagaatg gaataccgtt ctaacagagc aagagcgaac tttccttaca 26040 cagattttcc ggttctttac ccaagctgat gtggatgtgg caggaggtta tgttaataac 26100 tttctacctc tctttcccca gcccgagatt cgtatgatgc ttcttgggtt cgcaggacga 26160 gaggcgatcc atatcgctgc ttacagtcat ttgattgaat ccctaggcat gcctgacacg 26220 gtgtacaacg aattccttca atacaaggct atggcggaga agcacgagta cattaaatcc 26280 tttgaaagta aaaacgacag gcacatcgca caacaactag ccctgttcag tgcctttacc 26340 gaagggttgc agttgttcag ttcttttatt atgttgttga atttcccccg tcataaaaag 26400 atgcggggaa tgggacagat tattacgtgg agtattgtag atgagtctga gcacgtcgat 26460 agcatgattc ggctgttccg gactttcatc gaagagaatc gacatatctg gaaagacgat 26520 cttaagaagg agttgtacga catcgctcga acgatggtag agctggaaga tcagtttatc 26580 gatctagctt ttgggacagg cggagtcgaa ggacttaccg ctgaggatgt gaagacatac 26640 attcgctata tttgcgatcg ccgtcttatt tcgatgggat tgaaagggat gtacaagatt 26700 aaaaagaacc cgcttccgtg ggtagatgaa atgattaatg caccaattca aggcaacttc 26760 tttgagacac gtgttactga ttatggtaag ggtgccttga gtggtacgtg ggccgacgta 26820 tgggcataaa ggacataaaa atgaaagcac gccagtttag ttttgacttc aacgccatct 26880 ttggcggcat ggttggattt gagtttctcc ctggggaata ttttgagcag gaaggctggg 26940 gttttgtggt ggatctgctt ttcttccgct tctccgtaat ctgtgagcac gtggagattt 27000 aagtatgtac aacacggtgg atgtaacggt agcttttgat gtgcatcctg agcaagtctt 27060 tgctttggat atggctcttg atgctcttgt aaaggctttt gaaggtcgtg ttactcttcg 27120 agagtctttc cgttattaca atccgacggc aaaagaaaag ccccccgagg atatccccga 27180 ggagcttatg tcgagttaac cgtcccgcat catgtcagat aaacgggtgg cccgggattt 27240 aacctgggtc gcccatttac tatttaacat gcccttagca gcacctgcgt aatctccttt 27300 ttgcatcatt gccaaggtgt tcttaaacga cagaagacct tgcagtccaa gattaaacct 27360 catattgacc aagacccgtt gacgggcatc agtcatctct ctccaccacg gtaacgcttt 27420 atcgaggtcg gccacacatt ccgcgatatc attacttaaa agataattga tttcgtcgtc 27480 tcgtaatctt cccccttttc gtttgtcaat aaggcgaccc acaccaatcg tccagtagcc 27540 taggctatcc tggtacgcat tcggtattac tccctcatcc ctccgtagtt cttgaattaa 27600 tttattcttg tccacgcatt tcccttattc gttcatactt ccttgcacta ccaatgttat 27660 tgatggtgtc tggcatttgg cgacggaata catcctgctc acgttgtgtc agagaacgct 27720 tcaacccttg ctgaagataa ttagctacct cttccggacc catccaacga cttaaggttt 27780 gaacaacctc tcgtcgtgtt tcaggatcgt cttgtcgaac agcagtcaca tacgaatcta 27840 atagaactgc cttagcttct gtgattgcgc gctcacgttg agaagcagtg tatgccctct 27900 ccttagtagt catttcttgc atgcttgtgg caccaaggaa acgtatagcc ttttcataat 27960 cggaacggcg atacataccc ttatcagtgt cacgtgggtt taacgacata cctccaggac 28020 tggtgaagcc aggatacaat ccttccatag cacccttacc gtgtggggga aggttctcat 28080 aaagcgcccc cgcccatttc tcagggttgg tgggatctat aagagcttgg gcagtagccc 28140 caagtgtttt gccaatatcc gaggcaaacg gagcagccat ttcagctatt ccttcaccac 28200 cgcctaattg accttgagac agagagccgt gcatgttagc acctaccaat ttagagaaca 28260 ggccgtagtt agcccaatca ctaaagttgt ttaacatctt gccctttaga tcggtgtctg 28320 cccatttagg gccaagcatc ggtttaatca gcttgtcgaa agcctccaat cccgattcca 28380 ccccatacat acccaggttg cctcctaaga agtactgcac tcccagcatc atagctagtg 28440 gtgcaacctt actaggacgg ccttctttga taccttcctt ggcagtcttg gcgtagttga 28500 taacttggtg gtactggttg ttcaagaacg tctttagagt acctgctgca cgtcctgtta 28560 aacccccttt ctccatccac atcggttgtt caaacttccg ataatccacc atcacacggt 28620 tcaccatagc ctctgctgtt cggtagagag tttcccccct caacccagac tcatacaaat 28680 ggttaattgc cccaatgtat gaaaaggttc gaccaaattc ctcagccttg acctggttaa 28740 tgtttgccag tttctgagcc tgacggcctg cttctgattg accaatattc cgaatatcgt 28800 ccagaacgtt gatcgacaga ataccatttt ccttagcata atccaaagcc tctttcatct 28860 ccggacgttg ctttttacca gaccacaggt taaacgcatc caacacggtg tttgcatatg 28920 tagtcacagg attgaattta aacccggctg cttgcatatc cagatgagct ggtgccataa 28980 agagcggttg tactaactgc acaaacatag ccttggggtt tagcaaacct agattcttgg 29040 tgtaaaaata tccacgagct aagtttaacc ctgccatagc ttgttcacga tctattccaa 29100 acccacgaga gatcgctgtt tcaatattct taatatcctt ttgagtacca aaccctaaag 29160 cattcttaga atattcccga gcgtagttca cgttgttagg ttgagtttgc tgtaattctg 29220 gatcactcag taatgcttta actttagctg ctgcttcttg ttgagcagcc cacttataag 29280 tgttcttcat gtactgaatc tgactgttca acaactcgat agcgttttgt ttgtcagagc 29340 gctggggctt atcaccaata aatccccgca cgtttccctt cgcttccgca tggaaaggca 29400 tacccaatga gaactgtcct tggtttgcaa tatgttcttc gtaaatcgaa cgtaactctt 29460 gcaccctaga atcattctca tccagcagtt ttaacatttc cagataaccg gcttccagtt 29520 gatctacctt agtatctcgt ttgaaagagg gttcgacttc ttggaacacc aaatccgggt 29580 ggtttttttg taacgcttgt tgagcagatt ttaatgcccg ttgactcggc tcacgcaaat 29640 accacaccaa gtttccttca gcgtcgcgca cttccatttt gtaattacca cgccaccgag 29700 atgccatgta gtaatcatgc atagaaatag gctctaatcc agctgcttca cgacctttgt 29760 taaaagcgac acccgcctca ttcagggaag tacgtaattt tgtatacgct tcctgagcag 29820 ccggagtcat acgagaaact tcacccgggg ttaattcccg gttaaacatc tcattcttta 29880 gtacgttggc taagttttcc cggtcactcc gagacaattt agctagagac ttctccacag 29940 gaattacctg ggtattccag gctttacggg cggtattctc cgctgcattc caataggtgt 30000 ataccccctt gaccaatgaa gaacggcgcg tctgagaggc tagattcgcg ccagaagacc 30060 cataggttgc caaggcattt ccggaaccat ctcgttctcc tttagctaga ttcacccaat 30120 attccggagg ttggtcctca aagatgcgca tttgcatctc tttgtttaac ccaggaatat 30180 tttcagtaac agtttctaca ggaggtttgt ttcttcctgc agggggttca gtaaccaccg 30240 gttcggctac agcagctgtt tcaatattct ctaaccccgg aacatccttt atagcttccc 30300 gtaatggttg aggaaattcc atttgaggtt gtggtgccca atccgaagtt tggactagtt 30360 ccccgatggg attaccatat tgatcatagc cagtaggttg ttggctatat cgaccatagg 30420 gatcaccggg ggcctctaag cggggttgag acacgtctag gggctgttct gcagtgaaca 30480 tatccccctg tgctaacgga tcaataaccc gctcacggcc ttgtagagcg tctgtaacac 30540 ccccacctac atcgtaagga ttgacggttt caaacatatc caactgcgta cccggaggtg 30600 tcattggatc gggttccgga taacgaactg tgaccggccc atctgttgat tcgatcatgg 30660 ccggttctac ccgaggctgt tggggcatag gggtgtcccg taaagccgga tccactcgct 30720 cagcaatccc acgtaatccc cggccagcta acctagcacc aggaataggt aaagccattg 30780 atagaccctc tgccgcaaga agctcagcag gaccccctcc caacgcttcg acaccagact 30840 ccaaaccctc ttgagcaagc tcgaaaggtt tcatgaggta ctgatacgat tggttggtac 30900 ggggatcttc taatcccatc ttgttagcca acgcggctac tgtggaagaa ggacttaaag 30960 aggccattgt ttcttgcatc tctttccgtt ctttttccgg gtcccctccc atcgccacat 31020 caagctgggc tttcatccaa gtaggaatag cggtgagggc acctgaagcg atgtcggcag 31080 cacccaacag agtgccacca acgttcttcc cgaaatcagc agcatagtca agtaaaccgg 31140 gactttcttc ggctagttca aagccttccg gaatttcctc aaacccttcc ggaagggaat 31200 tatctacaag ctcgaaccca tccgggacga gttcaaaacc ttcaggaagt ttagttgcca 31260 ttatttttta gctctcacag ttcgcccgtc aggaagcctg tacatgccat cacccaatgc 31320 ttgtgtgcct tggggtaatt tggacaggtt cggatcttga cgagattggg gttgttgtcc 31380 agtggaggga agtccttgaa gtcctgcagg tcccgctcca tatacatctt gttgtacaat 31440 attaccacta ggatcaagag tcattccagg cttcgccccg gcaatacgag actcaatatt 31500 gagccgtcgc atcagttccg aggattctcg gtactcttcc ttcagaacag gatcttgagt 31560 ttgacgggca agttcaccat agtaaacaga cgctttctca aatcccattt tagaagctac 31620 ggtagcggga tcattttgag cacgagtacg atcgtatttg cctgcttcaa ttcgacgctc 31680 ttccatctga cgttgcgcct ccaactgcat ctgaagccgc gccattgccg aagcatctcc 31740 cataccttga cgacctgtgg ctgcagcctg ggaaagttgt tcgcgttcca tcgaagccgc 31800 atctttctct tgctgtagtt gaagagcgcg cagttgttca ccagtttgaa ggagaatcga 31860 tgtacccact tgcttcaaag cgttgggtaa catctctgga gtctcctgca tcaattgttg 31920 gaacagggga tgagctgcta attccggaga ttgcgacgcc agtttctgca tcacaggtaa 31980 tcgttgatcc acacgaactc gacctaaaac atctccgagc tgttgtgcat attgtccaat 32040 ttggttgtaa tcttttaatt cattatcttt aatctgagat cctaacttcg atttctcagc 32100 tgccatacga tgcggggaca gttcttgagc ctcttgaagt tcaagcatcc ccttttgttg 32160 agctaatcta ttagcttgtt gttgttgctg ttgattaaag agattagcaa gactggtttc 32220 atgggccatg tctgcagcac gttgggtgtt gtacccctgc atcatttgcc ctaaaccgcc 32280 ctgcatcccg aacaattcaa aaggattagc cattagaaaa gccccgctaa accacgaata 32340 cctttagaca atgcccccac cgaaccgagt ccttggccga tcatgccggc atagttagga 32400 cgatacgttt gaggacgtaa ccgtgcattc gcagcaccta attgttgaat atacgacgga 32460 ctggacatga cattagcttg gttctgtgtg agcagagcag ctaattcagt ttcacgacca 32520 ccatagttag aacgccgtcc acgcgccgca tctcgacgga ccatgttttg cattgcttgt 32580 ttcgcaaaag cactgtccgg agaatacagt tgtcgtagag tgttaacgtt atcttggtac 32640 ccacgctgca tagcttgctg gttacggtag tcagcttgaa tcatatcttg catatcacgc 32700 atttgctgat aattctgata tgcctgaaca cccccaagaa tacctttact taagttattg 32760 aatgtgtcaa atttatccga attcaggaaa tcactgacac ctccgaataa acttccgaga 32820 ttcattttat ttgctcctgt tgaggattta ggcatgatac cggtgccttg aagagtactg 32880 ggagattgtt cccctagaaa atctcctaga gcatcatcag tgtcagaaag tacaggggag 32940 tatccaggag atacaccacc catttctaag ttctgtgtga tgttaccagt agggacagag 33000 ttcagaccgg tgatctgatt aatatcagta ccaccttggg ataaggcaga catatctcct 33060 aggaaatctc cgccaggggt aaacgaatcc gagaccccca taagatcgct aagaccgcca 33120 ccttctaagc cagacatgtc cccaagggca gaaccaccct gtacaaagtc cggagaaact 33180 ccaataccac ccacagagct taaaccaccg gtggcatcac caacgccttg gaacacagat 33240 ccccaatctc ctgtcatgcc cccgacatca ccaagagcag caccagatag agccccagaa 33300 ccacctaaag ccgatgaggt atccgctgct cccgaaagca tactcccgaa gtcaccaaac 33360 ttacctgctg ccccaagaga agataaacca gctccaagcc agtcaccctc tgcgacgttc 33420 tgtacagcat ttgcagctaa ggcgggtaac tgccacgggc caggaactac agaagcaaca 33480 ctcagaatag agcctaaatc accgtgggct actccggtag ctacatcacc aagagtgtca 33540 ccaacaaaat taacaccctc ttctaaccaa ccaccaacgt ctccaagagc gtctccgaca 33600 ctttcaaagg cacttgagac cccctttacg acgcttttaa caactttaga aacgccaccc 33660 atatttaaag ttccttatta aagactgtac ccacagtttt gtaaccagag cgttctagaa 33720 aggtaataat tgttccagct ttaataccgc tgttatgatt aaattcaatg ctatgtgccc 33780 cctgttcttg tgcccactgt tcaaattctc gaacagcgcg ggcgaaccaa gaacctccac 33840 gatgttctgg taaaatataa taaattaacg catctgcttt aagggtgtat gagaatatta 33900 aagagtccac atacccaatg aagataccca caatctttcc ttcgtcgtcg aatttaaacc 33960 ggaagaaaaa tccaggagag ccataggctt tcatgagacg tttggctacc attgtgctat 34020 caaattcgat atgctgataa cggccttcct ggtgtaaatg acgaagcaag tcaacaattt 34080 ggactaattc ttcaaaagtg atttcagtag atatcatatg tagtatagtc ctgtaatata 34140 gattgttgat gtgtctgctg tccatgaagg aagataaatt cttccaggac taaccgacat 34200 atatccattc ccaatcgtgt cattaacgct actgaccgta catgcgcctg ggcgagaaac 34260 agctccaaaa ggtatgggga agtacgtagt acctcttaca ctcgtagtat ctgttgcgga 34320 tgtaagtaca atggttgccg aatacgtcac cacatcattg attcgagcat atgttcctga 34380 ggctgtaata gaaccaccgt taacagtcaa tcctgtaaac acaggagtga acacgctaga 34440 attataaaag aacgaggcaa tagagttata ctgagcttgg gttagatgat atcgctcact 34500 agtagtacca ccctgcatat tttgtaaatc gttatgctgc cgtgtttgga tatctgttaa 34560 attcgatcca gacttatcaa gagagttcca cgaaatagtg cttaccccct ggatgaagtt 34620 ttgtagttga cgataccagt caacccaaac atagtcccca ggctttgcac tgactggata 34680 cgggggtaag tttaatgcca ttagttcact ccaatattat aagtaagttc aaatccatcc 34740 aatctcaaag gagcgttgtc cgtaaattca aacttaaatg accgccgccg gaaataacca 34800 caatttacaa tacccggacg ttgtagccca aatgagattg tacgaggatt tgaataagtg 34860 gtgtagtcat tatctgacca cgatactttt atagtacttg atgtactggg tgtgtcccca 34920 accattacta accggtttaa aaactttcgg ttcatggtgt caaaatcgat aggtagtgta 34980 gtccacacac attgaattgg agtgttatta gcatcctggt tcaacgtgtc atttaaacga 35040 tacaaggctg tttctgtgac aatgtacgaa taaccttggt tgttgtccag agctaacttc 35100 ccaggccaat taccaccatt ccatgtccat tgatgccata atttttcccg ggtatcatat 35160 aaccaagtac tattagaaag acacaataca taaaactggt gacccatcgt tcgtaggctg 35220 tatgctttgg cattacctag ttgagagcct tcaaaattaa tttgctgttt gacgaaagga 35280 gtggcaatct cttctggttt aaaatccacc atcatccaaa cagaacgttc tccctcacta 35340 gtttgcccca cccagaaaaa cttctggtcg gtttgtaaag cagtttcagg agccgcgcaa 35400 ccaatcgtga ttacagcaga ttcgttacgt aagaaaggag acccgctctc tagggcagcg 35460 tcataaaaca tttcaatgga tgtctgacct agtgctaata aatagttatt ataccgtgca 35520 ataccaataa taatatcagg gtacatttca gcagaagtaa actcccatcc ggtacctaaa 35580 gattcattag gactgttata aatatcagcg gtgtttcgta caaagcccag taaatagccg 35640 tcaatcgatt caaggtatgc tgcaaagtta ctaggccgtc ctgacggagc aggagtcact 35700 gtgttagaac ttaaatccat ttgatacaaa ttggccgaat ccataaaaac taaaagatcc 35760 gcagaagttg tctggaactg tgtaaaacca actcgtccag cagatgttgt taatgtaaac 35820 cgaagtgtaa aagcccctgc tgtgtattcg tatagacgat taccaatgac aaagaacata 35880 cggctaccga tttcgtatcc accacgaact tctcctgtgg catacgtttg aatcaattcg 35940 aggccggggc gtttcctgag atatatataa gtgtcatttg acggcttagt attccaggac 36000 tccccaaaca cattgtaaaa ttcctgatcc tttagggtga acccattacg tggattaggt 36060 tgtgcaaaga atgacaattg tttttgctgg taagagctaa actggggagt attgctgtac 36120 gccattattt atctccttgc cctaaataca tccgactcca atctggggct atgaacaaac 36180 taccttcttc cgtaccatac gacagtgccc ggtcccagaa aagagttgct tcttttgcaa 36240 gagttgcacg atcattggga ggtacaccat actcaggaga aagccgccat gctaattgat 36300 acacaagagc attagtccaa tacgggggaa agtccagagt atctgtatca cttccggcat 36360 cctcgaaagg acgttggtat gtaatatgaa tctcacgatg gagattacta tacgcatccg 36420 gaataggcca aatgaatagg tttccagatt ggtttaacgg ttcatagaag aattgcacag 36480 cagtccctaa agtatattta gaggacagcc aattataatc gtagtgcgtt aatagtgtca 36540 tcggaatatc aataggggac accggattag aggtgtctcg gttatatgcc gatagcactt 36600 tcaatggtgc tggaatggcc acagaaccgc cgataccgaa agagactttc ccattgacaa 36660 aatcggtaca aggtatagta gattcaataa tagcccacag aggcatcccg tccgcctggg 36720 cttccttgat tactgtatcc agtacaaaag ctccgttggt aatctggtag gccgacggag 36780 tttcatcctc cgcgattgct gcgagtttcc ggagggcaga cgtaatgatc tgatcccgag 36840 tcgcatcaaa gaccgacaca ccgctcgttg tcatttatct ccccttattt gatctaatag 36900 taatcgttca accctgtcga atcgttgtcc catttcctgt ttcaactcac gtatatcatc 36960 tttgtgaacg tacttctccc gtgtgtcttg caaatccgct cgaagttcct ccaaacgact 37020 ataaaaggtt ttgagaatcc atcccatggt agccaccaca atgttagaaa ggatcgtaaa 37080 gattgtcatt aaatccatta cgaagcccct ttcacaacgc ccttaacttt ctcatacgta 37140 tgcatcccac cgatacccaa cataccccct aacatcgtca tgatcatttc aaaaggaagt 37200 gtgggcatta caatggcgat actgaacatt tgacctagcc aaaatactag ggggaagaga 37260 ataaactgta gtgctagacc agcaccacac acccatccaa taaacggtcg ccacccagcg 37320 acaagaatac tcgcgtgggc agcttcctgt ttattaatgt ccgcttgcat ttgttgagat 37380 tggagtaaag catcaatctc tttaaaatct ttttgtgttt ggagtttcag taactccatt 37440 tgaatttcgg cttgtttttc cttatcagga attaatctgt ttacgatggc cattaccggg 37500 ccagcaagga tctcaagtaa tgaccccata cccttctcct aaataagttt caccgagtta 37560 ttcctcaata aaaacgtgcg tgccatactg ctggatcagt gtcaaccttc cagcgagtgt 37620 tcagggattc tacccacgac ttccgatgtt ctttgcccgg gggaagtaac caatacgtgt 37680 tgccgtcagc agcatcgata cccatggcct gacagattcg ttgaatccat ttcttttttg 37740 ctttgtctcc acccagttga atccaactaa atgtggcata gtcaatattg tcagtgttct 37800 gatttccggg gactgagtca attttatctc ccatcgccaa aggcatttga gtgacgttta 37860 gatcccagtc gggtacgtta gcaacgaaat cacgaagaga gaggttctcc tcagcacagt 37920 cttggtagta tcgcccgaga tcggcatcca ccagcatcca agagccgtta cgttgtactt 37980 ctacggctac gtgtccgtcg tcaaagttgt taggagactc catagtcaag aacctgacaa 38040 tacgggcatt gaaacccgcc gctatcatcc agtccttcat ccaaggagaa accacaccac 38100 aggtgactcc gaccacacgg ccacgtgctg cgttatccag ttgtgttttg gttagtgcat 38160 tgtctcgtgt actgtgaaca gtcatgtagg caaacacact agccatctca agaggatctg 38220 tgttagtcac agcccgacga ccagaactga tttcacccat ccggaagaac atgtacatac 38280 caggttctgt catatcatac gaaacgtcgt gaatgatata cttaccgggg gcgaggatgg 38340 gtccgtaggg gatcgccacc ccgcccgtag tggtaggtac atcataagcg gtgtcaaaaa 38400 gaaaccgttt tgcgattaca gtcatgcgta cctttaataa ataaactcta gaaaacctgg 38460 ttgtccaggt gccggatttg tcccagcagt gccggcagct cccgaaccat aaccagttcc 38520 gggacctagg ccaacagagt ttgggcgacc gttcacgccg cctaatccaa ataaagagga 38580 acctccgtta gagtttaggt tagacgtgtt ggcatattcg cctaattgtc cattaacagc 38640 ttctgggaag ttaccattgc cacctaaacc accttgcacg ttaagtgtgt tacttgctcc 38700 accgccagca ccgcctgaca aaacataggt tgagaaggta gtgttgccac caggaccacc 38760 cggggtggga gtacctgtgg aaccccccgt gccgccagca ccgatagtgt acgagatacc 38820 tacgccagga gttactgtga gcatgaagtc ttttaccgaa caaccaccgc cacccccagc 38880 cgaacgtccc gtaccactag tgacaccacg gccacctccg cccccgcctc cgcaaccatt 38940 aacacgtata atccgtgtaa aatcgtccgg cacccaagta cccgaaccag aggtaaatat 39000 cactcggtta ttccacatcg gaatgcggta ataacgtgca tcaccaacat cccactcaca 39060 cagtccgatt ccctctacat aaatcaaacc aatgtttgta gtgggagggt tgctggaact 39120 gtagatagga atacgactgt ttaactccgt gtaaatattt tggaatgcca gggcagtggg 39180 tcgtaactca aagaccgagt tagccgggaa ggctacagca gcggtgccct cctgtgctcg 39240 cactaccgta caactgtcgg aagaccgtgc agtgacacgt acaatctcaa tctgtccaaa 39300 agtagggctg accggatcca catcggccat agtggccatg aagaactgcg tgcctgttaa 39360 actggggaaa agaacaccag tacccggtaa aagagtaatg gaggtagtgc ctgtggtgat 39420 actggtcagt agtgtggatg tggcgttgtt agtaaattgt tgttgttcaa gagccgacgt 39480 aggcatatta agctcccgtg aaagaaatgg tccacacgat atttagagtg tcaccagcat 39540 ttttaattac actaatacta ttgctgcggg agaacatcgt gcctccgaca ctggcattaa 39600 acaggccagc ttcagcaata gtgcccgtac cagtacccgg aggaaacact gcagtgtatt 39660 gtacagtagc agcattcgcc accgtagagg tcaaagtaac acgtccgatt tcggataaca 39720 gtgctgtttg cgcggccgcc ggaggagagc cgtcgacacc cactgccatg tccgttagaa 39780 cagtcacagt gcccccactg agcagggtag ccaacatggc acccccaccg ttcgtcataa 39840 ggttcttagc tttcttgtgt tgtgtttgat taccgtcgct atctaccgtc caatactcga 39900 tttcggcgat aactttaatt gtatcttttt gcattataag gttccactat tgagaggtgc 39960 accattaaga acctttgttg atgtgatgta tgcaccaatc gtttcagaaa ctaacacagt 40020 ttctggaatg aaagtaccta caaaatacaa cagttgttct gttacctcga tgttatcagt 40080 taatcctaaa gtcgcttcaa tttgaagaga ctcagaaact tggacaactt cagagctatc 40140 cggtttaatt gaatcagcac ccccgagaac gaagccattt aaaacagcat agtttaaagg 40200 acgttcatgt ggaaggttat actgaccaga agttctggtc ggaatatatc tggtgtaaac 40260 agctatggtg tttaacactt cagatacatc cacaggatca ttaataaaac gatcaaacgt 40320 tttaggaacg aatcgatcag caggccgtgg acgcacaaaa ggcactgaca tgttttctgg 40380 aactgagcgt aggaagtctt gggggtgtcg gggttcccaa cacccaccac agaccattaa 40440 acctgtccac tcttttcgaa tttcagtggc cttgaacttc tctccacatc gatcacaaat 40500 aacgttccac gacccttgta gaagataagt tctcgacata aattatccgt aataaatgta 40560 aacagtaccg cctgtcggag acacaaacat accttctttc gattgtacca tatggctaaa 40620 atcgaaaaat aacggttctg ttccagcatt ctcagcctga aagattactg gtgccgtagc 40680 atcaatacca ttatagacaa ttacactggc tcctttttct aacaacaccg atttaagata 40740 ggttgtccca ttaaataaaa gggtgtctgc tgtcaaaggt ccactagaaa ccgaggagtt 40800 cattgacatg ataccccctt attactggat gaattcgagc gaaacaatcc acggaccacc 40860 tgtagtagag gccgtgcctg tttcagcata cgacatttgc acagtgtaat cggtagtgta 40920 agaattgctg tcaattagcg gaaggcccgc catttgtaca atagttgtcg atgcgccatc 40980 agcaacaaga tccacgacac ccaccgaaat aacagtgttg ttattcatga tttcaatagt 41040 tgcttgtgcc gttgtacccg catccgatga agcagctccc gacaggtata ctcgatacgg 41100 agtagaacct ttcggaaaca ttgctttcac agtatccgta gtatcattac gagtcagttc 41160 tgcaacttta ataagatgct ctttgcccgg aggggtgatc ggggaaatac gtgtcgggta 41220 aagatcagtg gtattaaaac ccattttatt ctcctataaa tgaaaaagaa aggggcacta 41280 aggccccttg ggtttaagcg ccctgagacc cgaacagacc gcgaggatcc gaccagccaa 41340 acgaataacg gctatcggcc ttgaacttcg cgttcgacgt gtcgaaatcg ttatcctgtt 41400 ggaaacgatc cggacgacgt tcaaagtact tcataccatc cttgacgtta gtacggataa 41460 accaggcatc cggatccgtg aggtagtggt taacatgaac accacccggg aaaatacctt 41520 ctgccttaat agcgttcaga tcgttcaggt ccgtacccac acggccttgc gacttcagga 41580 tacggtcagc ttcccacttg agttgcggag ggataatcag cttatccggc atcgccgcga 41640 tcagcagacc acgatcatct cggaacaggg agatatcaat ccaagcctgt tcaagagccg 41700 cttccgacaa gtcagccggg gtcgccagcg tgttcgacca tgtaccacca gcatagttcg 41760 ggtgagctgc attaagcagc gaagcaccgt caccaccaac gtaagcaccg ttaaaggcac 41820 ggttatacac gtttgcaccg atgatttcct tcgtttgacg aatcgaacga gcgagacctt 41880 gagcacgacg ctggcccacg acatcataca gatcgtcttc catgatttct tcagtgatga 41940 tgaaacccag ggcatagacg atgtgctgat agcgagaagt ccaggtttgg ttctccgaat 42000 cgtaagaaat accagcacct tcaggcttga cttgcgccag accgaacgaa gtgatgccga 42060 catcttcttc aaacgcttta cgagaagtat tcttatcgaa aagtttgtcg aactctacgg 42120 gataatcgtt gtattcctta ccataccaag catttacacc aggccagagg gcctttgcaa 42180 aactggcgga agtgataatg ttagccattc tctagcctcc ttaattaaac accaagcgtg 42240 cccgtaccgg acgccagttg gtggttattg attttaacgc gaacctttgc gttcgccgaa 42300 acttcgttct ccggagattg gacaaaatcc agaatcttca gagtcagcgt agcagtggtt 42360 gcagcagtag agaggtctac agtttcaccc gattgacccg tcgaggtcga accaccagca 42420 tcagcatggt tagcgttttg accgacaaca gtcgccgtaa ccgtacccga cacttgagct 42480 tcatacaccg tcgcgggatc atccgccaca tacacataca ttgccaccga ggcaggacga 42540 tactgaggag tattcaggtt ggtcatgatg tattcaacgt tgaccaccga acccacagcc 42600 gccgcaccga cagcagtttt agtaacagcg cggacgccat tcacatccgc attaccatcc 42660 aacgacacca aatcgccgac gaagatcgcc gtcgcattcg acgccgccac aaaatacttg 42720 gtaagttgac cattccaagc agcaccaagt cccgttttag cgggacggaa accattgaca 42780 cgagatacgt ttgccattag ttttctccaa ttataaattt aaaacaatgg caagtatcca 42840 gtgtattaac ctgttcgttt tgcagattgt ttaatatcac catacttccc atcagagcga 42900 tcttgtaaga ttgcattttc tttttcagac aagagagttt gcttcgctcg ttgatcttct 42960 tcataccaat cctttcggat ccgcatcaag atacctttat caccattacc cacctggaca 43020 gttttagctg taccttcagc agaggcaaca tttaaacgag aaactcccac atcttcattt 43080 ccggtcgcaa tttcccaacc atattcttgg agttgttcta cccgaccgtc cttatcagtc 43140 acaaagcgat attcaaaatt atcatctttg ttttttacag acatgcggtt acgcacacct 43200 accggggtac gtgtcgttcg gcctcttggc gcgcgtgcaa cggtttcttt ttcgttagcc 43260 atgttacttt ccttactgta gatcagtata ttgtttcaaa tattcttctt tcgtcataac 43320 accggtacga ataatcgttt ccatgatgcg acgctcttca gaagacatat tagtttccac 43380 tgccttcgca gcggtgggct tagagccacg tcccgcaacc gccgaggggc gttcacgatt 43440 cgtgtttaca aatttttcag ggaacttctt ctttacttca cgctctagca tttgaagtac 43500 ctcaccagga tcttcaccgc tttgggcgag agtgacacca cgagaatctg cccaatcccg 43560 aagcccctca tcacgctcat accaagtatt ccgacctaac cattcttgaa attcttgacg 43620 gcggtcttgt tgaggtatag cttgttgagt ctgtgcttcg tacaaccgat gttgttcatg 43680 aatgttgtca atttgatcgt taatagtttc agcccgatca aaatcaccgt cctcatgtgc 43740 gcgtctgcgc tcggctttaa gttcattaac agcccgttca tatgcttgtt tacggacttg 43800 ttgcatgtcc ttggcaatca tttgaaattg cttttggttc tgtttaattt gtttactctg 43860 ccgctcaatc ttttcataga acggttgcag agtcataaac agttcagcat ttcggaattt 43920 agccggatca ccttcatatt gatcctgggg cttccacccc aattccatcg ctgctaattc 43980 aacttcagta aacgaaggct cattcgtgga agtatcaatg tccacatttg tgtcttcttg 44040 attctcttgt ttaatttgtt cactcataat tagttccctt tcttaaggat acacacaata 44100 tcttcgtcgt ttagtacttg gtacttttga ccgtcatcta aatccgtgac atattttcca 44160 gcgtattttg caaaagcaac tcggtctcct acggcgcacc acggctctcc accgaagtcc 44220 ttaaatgctg tagggccaat ggccatgact tcacctacgt ctaccgcttc ttttcgacgt 44280 tcgatgtcct gacctgcaat ttcaaaaccc ggaatattta cgttgtatgc cttgtcaacc 44340 tcagtaagat caacaactcg gactacaata cgatgaccac aaggaattac tcccattagt 44400 tttctccttc cactcgaaag tttaagatat cacggagggc cgcgatagcc ccccgcagat 44460 agttatcgtt aacaggatca atacctgctg aatacgacaa agattccata caattttcta 44520 aacgttcaga aagttctcga aacaactctt gagttagttc ttgccctttc cactcgtcga 44580 tttctgtctt ggttgcgatg attgtgtctc cttagactgt gctaattttt gccgatgtga 44640 ttcgtcattc tgtcgttgac gttgttggtg cttcacttca gcaatagcaa tatttgctcg 44700 atctttacga ttttggattt cagcttgatt acgtgctttc aatcgatcta attgaatctg 44760 atttgctgtc ttgtaggttt ccatctgctg tttgaattct tgatcacgat tagcaagagc 44820 agacttcatg gacaattcag cttgttttaa ttccgacttc tgttgttcag cttgagcctt 44880 tagttggaat tccatcataa caggatcaac ttcgtcttgc ccttgttggg cagcatcagg 44940 agccaccaaa tcttcccagt tcggaatttc tagagcttcc atcagacgta caatcacctt 45000 cataggatca attaatccgg tcgggaggag ttccatgagg gcttgtgcct tgacgagctt 45060 ttccgtttgc gaaatagctg cgggatcagc gccaggacaa acatcgtaac cagaagaatc 45120 aaaatcagtc ggatcaacag tcgcgtcaat aacaccaaca taggtatcgt actctaagaa 45180 aacctcgttc aaccggaaga gtttcttaaa ctcactttcc aacgaacgat aaatacgctt 45240 gtacacggct gtaaagactt tcataccctg ttcaatagtg gccatcgtgg tagttgccgg 45300 ggtgttttgc ccaggcatct ttcctacgaa gatttccgcc acagaagcga gttcctttcc 45360 agattgaatc aaagcaccca tcaactgaaa gagaacgtta gaaggttctt tactcggaat 45420 aggtacgatc tgtttcttca ggtcatctcc ggtgctattt acagcacgcc attcaccagg 45480 ttgaagacgg gtttccccca tccgtaaccg aagtcccttt ccaataaaac ctgtctgaag 45540 gttatttaaa gtaccagcgt cgatgagctg gttgattaaa gtattaacag attcgttcaa 45600 aggaccgagt aggtggccaa acccaatatc ataaaaacca ccatccggat taggaataaa 45660 gccgtatttg gtgtaatact ggattggatt gatttgaata atctcccctt catcgttagt 45720 aatgatggat tgatcatcaa atcgcgcaga gattcgtaaa actttttggc ttcccaggtc 45780 caccgtaaca atgtacggtt ccggataacc atcgtcattt aagtctaaga acgtatgttg 45840 ttctagaatt aaatacgggg tggtctcatc cgccgaagga ggttcttgat tacgtaaaac 45900 ttccttatga gggggcaata aacccacttg aggagcatga agatcgatgt ctaagtatag 45960 tccggctagt tgtttttcac gaactttccg gggagacatc tcaatctgct cagtaatacg 46020 ttcagcatct tccaaacaag atgcccaata attaattaca aggtttttcg gtagaacaag 46080 ggtagaacag ttctttttag tgattggatc aaaataagtc ttcttgaaaa gtgttcccac 46140 aatgggcagc attaacagaa gtttgtccat ctcttcttcc caaccataca tttcgtacat 46200 caactggtac gacatgtagt cagaaatacg ttcagccttg tcctttttag ctccagtggg 46260 gtctttacca ataaccttag ttttaacaat cttcccgtca gaaggaatta gacttggata 46320 tgcacgggca ttgaattgca tcgcagctgt ggaaataagg ggatacttta cgttcgaggc 46380 tttgggccac gggtacacct tttcttccac tacctgagat gctagtttag tccaatcttc 46440 aatctgacgt tcccaaagtt cgcgagagct taaatcatcg ttgtaccctt ggataacatc 46500 ctgggcgatt ttgaccagtt cttgatcatc caaatcttca gcaatattca ctgtttcgat 46560 gaatgcacga agttccgggg gttgttgggg ggcttgttgg tcctcaagag caggagcaaa 46620 tccagccggt acttgaggaa tattccggaa accagctggg tccattgccc ctaactgggt 46680 cggatcaagt ccagcagcca tttgtccgtt agaaagaccg actccttgat tatctcctaa 46740 tgccattctt tagtatcccg ttgttaggga gcgaccatcc gccccttcgt ttgattcgtt 46800 ataatcttcc caaaattcag cctcttcttc ctcagccggg gtaggagcct caatcagaac 46860 atccaacatc atgccaagat acgcaaatgc gtctacttgg tcatcatgct tatcccgagg 46920 aaaccgcata cactcatctt caaaggtttg ataccattcg ccgtctttgt caaatttgac 46980 accattagct ctcatccttg cctggataga gcgagcacgg gcgattttat ccttgttcat 47040 gtgcttcatt gggtgaagat taatataatt attttgcttg atcatctctt cccgcaggaa 47100 ggggcctata gccttactga tctgcatttc ttcaatacca atagcaaccg gattgtatag 47160 tctttgaatt gtaaggagtg tatcgacaat atcacgacca tccaagcggt cccgaataac 47220 gttcttgacg tggattcgtt tgttgtcgtc caccccggca atcacgaata cactgtagtc 47280 agcacgttct ttttcagaaa tagctaagtc agctgtaacg taatagttga gggttttgga 47340 actgtcttct tttgtgatag gcaaaaagtc ttgccgtttg aaataagtat tggcttcatc 47400 aagaggccgg ttaaggtatt cttgggagta gaggtcagtt atcccctgat cggcgaacat 47460 agtgtaaaga tcgtcaaacg tctctttaga catacgctct ggccacagaa tagctgagaa 47520 atcggggttg tgtgcacggt aacgcacaga cttccacgga gttctataat ccgtccaaac 47580 ctttaattcg tcttctttga tgtacttaat ttttttgtta gcacggagtc gttgggtttg 47640 actttccggc ataaaggatt ctaacagaga gtccatatgc aagatcgttc cgaccacccg 47700 gatgatacca tgttgagcaa gcattggaag aagagccgca gagaaccagt tacggaactt 47760 ctcacgacga tccttgttca tgactagttc gtcgttctcc atgtcgtcac agatgacgat 47820 atctggacgt gctccgttcc agttcatccc acgtagcttt tgttctgccc cttttgccat 47880 aatccggaac atatgtccgt cgttacacgc cacgatgatg tccgtttggg aatctttgat 47940 aaaatcaaca tccccccttt cattcaatcg tagatcgaag agcttggcga tatcgggatt 48000 atctgcgatt tcagtacgca tgttacccaa gaacatggca gcctgtcctt ccgtgtccga 48060 tacaataacc atataacgtc gttgtcgaaa caaaagggtg gctaagccat agcccacagt 48120 aacagcagta gtcttggcgt gtccccgggg ggcggcaata gctacaaatt tattctctga 48180 gcaacatagt tcccaccact catagtgaca ttgaggggaa gctgtagccc cgtcaaatcg 48240 gggagcgaaa caagaaccga ccaaccccgc tacgacagag gctgttagtt tcatcgtcct 48300 ttcttactcc gttgggattt catactgcca tccgaattac gggaaaaact gcgattagct 48360 gttttagagg taactcgcgt atttgattta gaattggaac cacccttgct tagggggcgg 48420 atatgatcca gatcctttcc gtcaccctta gaggttcgac cgtcttcatt ggccttccgg 48480 cgtgccatcg tccgaaggga acgattcttc cgttgttccg gtttcgagtt gtaaagctcg 48540 ttctcccgtt tgtaatcccg tttcccgttc ttcatgtaag gcattgtctg gcgtctccgt 48600 gatataaata acatctgtaa cttcgacaga tggtttttca ttcgttaccc gttcagctaa 48660 ggaagcaaac cgttctgcta gttcagcaaa cttggcggta gtgctttgct ctaattcggg 48720 agcctcgact tgtttgttat cgaggacttg tgtcttgtcc accatatcca tggcgacttt 48780 gtgagcatct ttcatactca ccgggactcg aagcatctga cccgatcgag agtcgtactt 48840 ccaatcccca tgttccattc gatcattgat aaccgttaaa gatttctcaa cgattcgctt 48900 taggttcgag gacagcttca tgtcctcttg aactcggagt tccttttcaa gttgtttaaa 48960 ccactctttg gatttccaaa cacgagcagt cacttcagga atttttaacg tagcagcact 49020 aagagctaag tttcctgtga gcaggtacat ctgaacaagt tcaattttct gttcatccga 49080 atagtgatgt tttccttgac ccggtttttt acgggtggta cgaacagcac gacgatgaac 49140 atcagaatct gacagcgcca taatttcctc cttttccact gatggaatta attctaaaat 49200 ttacaccata tactaatatt ataccatata ttatttaaaa agtcaaggaa tatttaattt 49260 taccaccaat tatttataaa tataccaccg agtattaaat acttgacttt tgttttcttt 49320 tatgttataa tatattattt atatattaat atatatatat tatataatat atattattta 49380 tattatatat tattatttat ttatatataa tatatttatt aaaagaagaa agaaagaaag 49440 tatcgtacac ccattaaggg tgtcctcgcg agcctcagcg agcgatgcat gaaagtcaag 49500 aacaatatgc aaaataggca gcaatacact ttatagggta cctaggattc ctaaaactat 49560 acgcagaatg ttaaggtggt tccccccaca atccagccac c 49601

Claims (7)

  1. 보데텔라 브론치셉티카 균을 특이적으로 사멸시킬 수 있는 능력을 갖고 서열번호 1로 표시되는 유전체를 갖는 것을 특징으로 하는, 자연으로부터 분리된 포도비리대 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP).
  2. 제1항의 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP)을 유효성분으로 포함하는, 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환 방지용 또는 처치용 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 조성물은 소독제 또는 사료첨가제 형태로 사용되는 것을 특징으로 하는, 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환 방지용 또는 처치용 조성물.
  4. 제2항에 의한 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP)을 유효성분으로 포함하는 조성물을 환경에 분사하는 단계를 포함하는, 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환을 방지 또는 처치하는 방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 조성물이 소독제 형태인 것을 특징으로 하는, 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환을 방지 또는 처치하는 방법.
  6. 제2항에 의한 박테리오파지 Bor-BRP-1(수탁번호 KCTC 12705BP)을 유효성분으로 포함하는 조성물을 사람을 제외한 동물에 투여하는 단계를 포함하는, 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환을 방지 또는 처치하는 방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 조성물이 사료첨가제 형태인 것을 특징으로 하는, 보데텔라 브론치셉티카 균에 의해 유발되는 질환을 방지 또는 처치하는 방법.
KR1020160077703A 2016-06-22 2016-06-22 신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도 KR101790095B1 (ko)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160077703A KR101790095B1 (ko) 2016-06-22 2016-06-22 신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도
US16/312,376 US10894068B2 (en) 2016-06-22 2017-06-13 Bordetella bronchiseptica bacteriophage Bor-BRP-1, and use thereof for inhibition of proliferation of Bordetella bronchiseptica bacteria
CN201780038359.XA CN109477075B (zh) 2016-06-22 2017-06-13 新型支气管败血鲍特菌噬菌体Bor-BRP-1及其抑制支气管败血鲍特菌增殖的用途
PCT/KR2017/006117 WO2017222229A1 (ko) 2016-06-22 2017-06-13 신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160077703A KR101790095B1 (ko) 2016-06-22 2016-06-22 신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR101790095B1 true KR101790095B1 (ko) 2017-10-25

Family

ID=60299917

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020160077703A KR101790095B1 (ko) 2016-06-22 2016-06-22 신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도

Country Status (4)

Country Link
US (1) US10894068B2 (ko)
KR (1) KR101790095B1 (ko)
CN (1) CN109477075B (ko)
WO (1) WO2017222229A1 (ko)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090127874A (ko) * 2007-02-28 2009-12-14 옴니리틱스 인코퍼레이티드 박테리오파지를 이용한 동물의 외부층 위생처리
KR101725570B1 (ko) * 2012-01-27 2017-04-11 연세대학교 산학협력단 그람 음성균에 대해 세포 사멸능을 갖는 포도비리대 박테리오파지
KR101592175B1 (ko) * 2014-04-29 2016-02-05 주식회사 인트론바이오테크놀로지 스트렙토코커스 파라우베리스 감염을 방지 및 처치하는 방법

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 111 (44), 15786-15791 (2014).
Uncultured virus clone GMF_Contig_24 ribonucleotide reductase gene, partial cds, GenBank: KM520319.1, 2014.11.12.

Also Published As

Publication number Publication date
CN109477075A (zh) 2019-03-15
WO2017222229A1 (ko) 2017-12-28
US20190231831A1 (en) 2019-08-01
US10894068B2 (en) 2021-01-19
CN109477075B (zh) 2022-03-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101761578B1 (ko) 신규한 장병원성 대장균 박테리오파지 Ｅｓｃ-ＣＨＰ-2 및 이의 장병원성 대장균 증식 억제 용도
KR101699245B1 (ko) 신규한 파스튜렐라 멀토시다 박테리오파지 Ｐａｓ-ＭＵＰ-1 및 이의 파스튜렐라 멀토시다 균 증식 억제 용도
US11412760B2 (en) Escherichia coli bacteriophage Esc-COP-7, and use thereof for suppressing proliferation of pathogenic Escherichia coli
KR101609111B1 (ko) 신규한 에드와드시엘라 타르다 박테리오파지 ＥｄＷ-ＴＡＰ-1 및 이의 에드와드시엘라 타르다 균 증식 억제 용도
KR101822812B1 (ko) 신규한 엔테로코쿠스 패슘 박테리오파지 Ent-FAP-4 및 이의 엔테로코쿠스 패슘 증식 억제 용도
KR101756088B1 (ko) 신규한 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Ｖｉｂ-ＰＡＰ-2 및 이의 비브리오 파라헤몰리티쿠스 균 증식 억제 용도
CN110612349B (zh) 新型铜绿假单胞菌噬菌体Pse-AEP-3及其用于抑制铜绿假单胞菌的增殖的用途
EP3584315A1 (en) Novel pseudomonas aeruginosa bacteriophage pse-aep-4 and use thereof for inhibiting proliferation of pseudomonas aeruginosa
CN108179135B (zh) 大肠杆菌噬菌体Esc-COP-7及其致病性大肠杆菌增殖抑制用途
KR101581654B1 (ko) K99형 대장균 감염을 방지 및 처치하는 방법
KR102073086B1 (ko) 신규한 스트렙토코커스 수이스 박테리오파지 Str-SUP-1 및 이의 스트렙토코커스 수이스 균 증식 억제 용도
KR101291052B1 (ko) 살모넬라 티피무륨 감염을 방지 및 처치하는 방법
KR101723466B1 (ko) 신규한 스트렙토코커스 이니에 박테리오파지 Ｓｔｒ-ＩＮＰ-1 및 이의 스트렙토코커스 이니에 균 증식 억제 용도
KR101796642B1 (ko) 대장균 박테리오파지 Ｅｓｃ-ＣＯＰ-9 및 이의 병원성 대장균 증식 억제 용도
KR102041109B1 (ko) 신규한 살모넬라 하이델베르그 박테리오파지 Sal-HEP-1 및 이의 살모넬라 하이델베르그 균 증식 억제 용도
KR101790095B1 (ko) 신규한 보데텔라 브론치셉티카 박테리오파지 Ｂｏｒ-ＢＲＰ-1 및 이의 보데텔라 브론치셉티카 균 증식 억제 용도
KR101915480B1 (ko) 신규한 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-6 및 이의 비브리오 파라헤몰리티쿠스 균 증식 억제 용도
KR101915493B1 (ko) 신규한 비브리오 파라헤몰리티쿠스 박테리오파지 Vib-PAP-8 및 이의 비브리오 파라헤몰리티쿠스 균 증식 억제 용도
KR20180103788A (ko) 신규한 녹농균 박테리오파지 Pse-AEP-3 및 이의 녹농균 증식 억제 용도
US20240041958A1 (en) Compositions and methods for inhibiting the proliferation of enterotoxigenic bacteroides fragilis
US20240050499A1 (en) Compositions and methods for inhibiting the proliferation of enterotoxigenic bacteroides fragilis
US20240050500A1 (en) Compositions and methods for inhibiting the proliferation of enterotoxigenic bacteroides fragilis
KR101816513B1 (ko) 신규한 락토코커스 가르비에 박테리오파지 Lac-GAP-3 및 이의 락토코커스 가르비에 균 증식 억제 용도
KR101790101B1 (ko) 바실러스 안트라시스 박테리오파지 Bac-ANP-1 및 이의 바실러스 안트라시스 증식 억제 용도
KR20180116193A (ko) 대장균 박테리오파지 Ｅｓｃ-ＣＯＰ-7 및 이의 병원성 대장균 증식 억제 용도

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant