KR101737924B1 - （２ｓ，３ｒ）―ｎ―２―（（３―피리디닐（메틸）―１―아자비시클로［２．２．２］옥트―３―일―３，５―디플루오로벤즈아미드의 제조 및 치료적 적용 - Google Patents

（２ｓ，３ｒ）―ｎ―２―（（３―피리디닐（메틸）―１―아자비시클로［２．２．２］옥트―３―일―３，５―디플루오로벤즈아미드의 제조 및 치료적 적용 Download PDF

Info

Publication number
KR101737924B1
KR101737924B1 KR1020117019595A KR20117019595A KR101737924B1 KR 101737924 B1 KR101737924 B1 KR 101737924B1 KR 1020117019595 A KR1020117019595 A KR 1020117019595A KR 20117019595 A KR20117019595 A KR 20117019595A KR 101737924 B1 KR101737924 B1 KR 101737924B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
azabicyclo
methyl
pyridinyl
oct
difluorobenzamide
Prior art date
Application number
KR1020117019595A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20110106464A (ko
Inventor
머로우안 벤체리프
니콜라이 페도로브
테리 하우저
크리스턴 조단
샤론 레이 레치워스
아나톨리 마주로프
줄리오 에이. 무노즈
제이슨 스피크
다니엘 요하네스
Original Assignee
카탈리스트 바이오사이언시즈, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41719329&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR101737924(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 카탈리스트 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 filed Critical 카탈리스트 바이오사이언시즈, 인코포레이티드
Publication of KR20110106464A publication Critical patent/KR20110106464A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101737924B1 publication Critical patent/KR101737924B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems
    • C07D453/04—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems having a quinolyl-4, a substituted quinolyl-4 or a alkylenedioxy-quinolyl-4 radical linked through only one carbon atom, attached in position 2, e.g. quinine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/08—Bridged systems

Abstract

본 발명은 신경원성 니코틴 아세틸콜린 수용체(neuronal nicotinic acetylcholine receptor)에 결합하고 그의 활성을 조절하는 화합물, 상기 화합물을 제조하는 방법, 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 중추신경계(CNS)의 기능장애와 연관된 상태 및 질환을 포함한, 다양한 상태 및 질환을 치료하기 위해 상기 화합물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

Description

（２Ｓ，３Ｒ）―Ｎ―２―（（３―피리디닐（메틸）―１―아자비시클로［２．２．２］옥트―３―일―３，５―디플루오로벤즈아미드의 제조 및 치료적 적용{Preparation and therapeutic applications of (2S,3R)-N-2-((3-pyridinyl)methyl)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl)-3,5-difluorobenzamide}
본 발명은 신경원성 니코틴 아세틸콜린 수용체(neuronal nicotinic acetylcholine receptor)에 결합하고 그의 활성을 조절하는 화합물, 상기 화합물을 제조하는 방법, 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 중추신경계(CNS)의 기능장애와 연관된 상태 및 질환을 포함한, 다양한 상태 및 질환을 치료하기 위해 상기 화합물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
니코틴 아세틸콜린 수용체(nAChR)로도 알려진, 신경원성 니코틴 수용체(NNR)를 표적으로 하는 화합물의 치료적 효능이 여러 연구의 주제가 되고 있다 (예를 들면, Breining et al., Ann . Rep . Med . Chem . 40: 3 (2005), Hogg and Bertrand, Curr. Drug Targets : CNS Neurol . Disord . 3: 123 (2004), Suto and Zacharias, Expert Opin . Ther . Targets 8: 61 (2004), Dani et al., Bioorg . Med . Chem . Lett. 14: 1837 (2004), Bencherif and Schmitt, Curr . Drug Targets : CNS Neurol . Disord. 1: 349 (2002) 참조). NNR 리간드가 치료제로 제안된 적응증들은 하기를 포함한다: 알쯔하이머병, 주의력 결핍 질환 및 정신분열증을 포함한 인지 장애 (Newhouse et al., Curr . Opin . Pharmacol . 4: 36 (2004), Levin and Rezvani, Curr. Drug Targets : CNS Neurol . Disord . 1: 423 (2002), Graham et al., Curr . Drug Targets : CNS Neurol . Disord . 1: 387 (2002), Ripoll et al., Curr . Med . Res. Opin . 20(7): 1057 (2004), and McEvoy and Allen, Curr . Drug Targets : CNS Neurol. Disord . 1: 433 (2002)); 통증 및 염증 (Decker et al., Curr . Top . Med . Chem. 4(3): 369 (2004), Vincler, Expert Opin . Invest . Drugs 14(10): 1191 (2005), Jain, Curr . Opin . Inv . Drugs 5: 76 (2004), Miao et al., Neuroscience 123: 777 (2004)); 우울증 및 불안 (Shytle et al., Mol . Psychiatry 7: 525 (2002), Damaj et al., Mol . Pharmacol . 66: 675 (2004), Shytle et al., Depress . Anxiety 16: 89 (2002)); 신경퇴행 (O'Neill et al., Curr . Drug Targets : CNS Neurol. Disord . 1: 399 (2002), Takata et al., J. Pharmacol . Exp . Ther . 306: 772 (2003), Marrero et al., J. Pharmacol . Exp . Ther . 309: 16 (2004)); 파킨슨병 (Jonnala and Buccafusco, J. Neurosci . Res . 66: 565 (2001)); 중독 (Dwoskin and Crooks, Biochem . Pharmacol . 63: 89 (2002), Coe et al., Bioorg . Med . Chem . Lett. 15(22): 4889 (2005)); 비만증 (Li et al., Curr . Top . Med . Chem . 3: 899 (2003)); 및 뚜렛 증후군 (Sacco et al., J. Psychopharmacol . 18(4): 457 (2004), Young et al., Clin . Ther . 23(4): 532 (2001)).
중추신경계 및 말초신경계 모두에서 nAChR 서브타입의 이질적인 분포가 존재한다. 예를 들면, 척추동물 뇌에서 우세한 nAChR 서브타입은 α4β2, α7, 및 α3β2이고, 자율신경절에서 우세한 nAChR 서브타입은 α3β4이며, 신경근육 접합부에서 우세한 nAChR 서브타입은 α1β1δγ 및 α1β1δε이다 (Dwoskin et al., Exp . Opin. Ther . Patents 10: 1561 (2000) 및 Holliday et al. J. Med . Chem . 40(26), 4169 (1997) 참조).
일부 니코틴 화합물의 한계는 그들이 복수의 nAChR 서브타입으로의 비특이적 결합에 의해 유발되는 다양한 바람직하지 않은 부작용과 연관된다는 것이다. 예를 들면, 근육 및 신경절 nAChR 서브타입으로의 결합 및 그의 자극은 특정한 니코틴 결합 화합물의 치료제로서의 유용성을 제한할 수 있는 부작용을 초래할 수 있다.
본 발명의 화합물은 α7 nAChR 서브타입에 대한 높은 정도의 특이적 결합 및 α4β2 서브타입 및 신경절 및 근육 nAChR 서브타입에 대한 낮은 친화도를 보인다. 따라서, 이 화합물들은 비-특이적 nAChR 서브타입 결합에 의해 유발되는 부작용을 생성하지 않으면서, 그와 같은 치료를 필요로 하는 환자에서 α7 nAChR의 치료 조절제로 작용할 수 있다.
발명의 요약
본 발명은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (식 I) 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
Figure 112011065525818-pct00001
식 I
본 발명의 화합물은 α7 서브타입의 NNR에 높은 친화도로 결합하고 α4β2 NNR 서브타입 및 신경절 및 근육 nAChR 서브타입 대비 이 서브타입에 대한 선택성을 보인다.
본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물은 니코틴 콜린성 신경전달(nicotinic cholinergic neurotransmission)의 기능장애 또는 니코틴 콜린성 뉴런의 퇴행을 특징으로 하는 질환을 포함한, 다양한 상태 또는 장애를 치료 또는 예방하기 위해 이용될 수 있다.
본 발명은 CNS 질환 및 기능장애, 염증, 박테리아 감염 및/또는 바이러스 감염과 연관된 염증 반응, 통증, 대사 증후군, 자가면역 질환, 또는 본 명세서에서 보다 상세하게 설명되는 기타 질환과 같은 장애 및 기능장애를 치료 또는 예방하는 방법을 포함한다. 본 발명은 신생혈관형성(neovascularization)을 조절하는 방법을 포함한다. 상기 방법은 개체에게 본 발명의 화합물의 염을 포함한, 본 발명의 화합물, 또는 그와 같은 화합물을 포함하는 약제학적 조성물의 치료적 유효량(therapeutically effective amount)을 투여하는 단계를 포함한다.
또한, 본 발명은 진단제로서 및 본 명세서에 기재된 바와 같이 수용체 결합 연구에서 유용성을 갖는 화합물을 포함한다.
본 발명의 전술된 양태 및 기타 양태가 하기의 상세한 설명 및 실시예에서 보다 상세하게 설명된다.
정의
하기의 정의는 정의된 용어를 명확하게 하기 위한 것이나, 한정하는 것은 아니다. 본 명세서에서 사용된 특정 용어가 구체적으로 정의되지 않은 경우, 그와 같은 용어는 불명확한 것으로 간주해서는 안 된다. 오히려, 용어들은 그들의 일반적으로 인정된 의미 내에서 사용된다.
본 명세서에서 사용된 용어 "화합물(compound)"은 문맥에 따라, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 유리 염기 형태, 또는 대안적으로 그의 염 형태를 의미하기 위해 사용될 수 있고, 이는 용이하게 자명할 것이다. 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자는 차이를 구별할 수 있을 것이다.
지칭의 용이를 위해, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (식 I) 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염은 또한 화합물 A로 지칭된다. 또한, 비교 목적을 위해, 구조적 유사체(structural analog)가 이용된다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-4-플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염은 화합물 B로 지칭된다. 화합물 B는 참조에 의해 본 명세서에 포함된, WO 04/76449에서 공개된 라세미 혼합물의 단일 이성질체이다.
본 명세서에서 사용된, 구 "약제학적으로 허용가능한(pharmaceutically acceptable)"은 조성물의 다른 성분들과 조화될 수 있고 약제학적 조성물의 피투여자(recipient)에게 유해하지 않은 담체, 희석제, 부형제, 또는 본 발명의 화합물의 염 형태를 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "약제학적 조성물(pharmaceutical composition)"은 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 또는 부형제와 선택적으로 혼합된 본 발명의 화합물을 의미한다. 약제학적 조성물은 바람직하게는, 제조 및 상업화 목적을 위해 적합하도록 하기 위해 환경적 조건에 대한 어느 정도의 안정성을 보인다.
본 명세서에서 사용된 용어 "유효량(effective amount)", "치료량(therapeutic amount)", 또는 "유효 투여량(effective dose)"은 원하는 약리학적 또는 치료적 효과를 유발하여, 질환의 유효한 예방 또는 치료를 가져오기에 충분한 본 발명의 화합물의 양을 의미한다. 질환의 예방은 질환의 진행, 및 질환과 연관된 증상의 발생을 지연시키거나 또는 예방하는 것에 의해 발현될 수 있다. 질환의 치료는 증상의 경감 또는 제거, 질환의 진행의 억제 또는 역전, 및 환자의 삶의 질(well being)에 대한 기타 기여에 의해 발현될 수 있다.
하기에서 도 1, 2, 3, 및 4를 참조하여 보다 상세하게 검토되는 바와 같이, 투여 후 18시간까지 관찰되는 효과를 포함한, 통계적으로 유의성 있는 효과는 최저 0.03 μM/kg의 식 I의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 투여량으로 관찰된다. 환자의 상태, 질환의 증상의 중증도, 및 약제학적 조성물이 투여되는 방식과 같은 인자들에 따라, 유효 투여량이 변할 수 있다. 따라서, 본 명세서에서 사용된, 유효 투여량은 100 mg 미만, 바람직하게는, 50 mg 미만, 보다 바람직하게는, 10 mg 미만, 및 가장 바람직하게는, 1 mg 미만일 수 있다. 이 유효 투여량은 통상적으로 단일 투여량, 또는 24시간에 걸쳐 투여되는 하나 이상의 투여량으로 투여되는 양을 나타낸다.
화합물
본 발명의 일 양태는 화합물 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (식 I) 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
Figure 112011065525818-pct00002
식 I
일 구체예에서, 상기 화합물은 (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2R,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, 및 (2S,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드 중 하나 이상을 실질적으로 포함하지 않는다.
일 구체예에서, 상기 화합물은 산 부가염이고, 상기 산은 염산, 메탄술폰산, 말레산, 인산, 1-히드록시-2-나프토산(1-hydroxy-2-naphthoic acid), 말론산, L-타르타르산, 푸마르산, 시트르산, L-말산, R-만델산, S-만델산, 숙신산, 4-아세트아미도벤조산, 아디프산, 갈락타르산, 디-p-톨루오일-D-타르타르산, 옥살산, D-글루쿠론산, 4-히드록시벤조산, 4-메톡시벤조산, (1S)-(+)-10-캄포르술폰산, (1R,3S)-(+)-캄포르산, 및 p-톨루엔술폰산, 또는 그의 수화물 또는 용매화물로부터 선택된다. 또 다른 구체예에서, 산 대 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 몰비는 1:2 또는 1:1이다.
본 발명의 또 다른 구체예는 하기로부터 선택된 화합물을 포함한다:
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-히드로클로라이드 또는 그의 수화물 또는 용매화물;
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-포스페이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물;
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-4-히드록시벤조에이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물; 및
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 헤미-4-히드록시벤조에이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물.
본 발명의 또 다른 구체예는 중량 기준으로 25% 미만, 바람직하게는 15% 미만, 바람직하게는 5% 미만, 바람직하게는 2% 미만, 바람직하게는 1% 미만의 개별적으로 또는 조합된, (2R,3R)-, (2S,3S)-, 또는 (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드를 포함하는 화합물 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 실질적으로 결정질인, 화합물 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (식 I) 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 하기 피크의 ±0.5 도 2θ내에서 하나 이상의 피크를 포함하는 x-선 회절 패턴을 특징으로 하는 화합물 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 히드로클로라이드의 다형성 형태를 포함한다:
Figure 112011065525818-pct00003
본 발명의 또 다른 양태는 도 9와 실질적으로 일치하는 x-선 분말 회절 패턴을 특징으로 하는 화합물 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 히드로클로라이드의 다형성 형태이다.
본 발명의 또 다른 양태는 α7-매개 질환 또는 기능장애의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서, 본 발명의 화합물의 용도를 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 본 발명의 화합물의 치료적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, α7-매개 질환 또는 기능장애를 치료 또는 예방하는 방법을 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 α7-매개 질환 또는 기능장애의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 포함한다.
일 양태에서, 상기 질환 또는 기능장애는 하기로 구성된 군으로부터 선택된다:
i) 급성 통증, 신경(neurologic) 통증, 염증성 통증, 신경병성(neuropathic) 통증, 만성 통증, 중증의 만성 통증, 수술후 통증, 암과 연관된 통증, 협심증, 신산통 또는 담석산통(renal or biliary colic), 월경, 편두통 및 통풍, 관절염, 류마티스성 질환, 건초염 및 혈관염, 삼차신경통 또는 포진성 신경통, 당뇨성 신경병성 통증(diabetic neuropathy pain), 작열통, 요통, 구심로 차단 증후군(deafferentation syndromes), 및 상완 신경총 적출(brachial plexus avulsion) 중 하나 이상을 포함하는 통증;
ii) 대사 증후군, 체중 증가, 타입 I 당뇨병, 타입 II 당뇨병 또는 당뇨성 신경병증;
iii) 건선, 천식, 죽상동맥경화증, 특발성 폐섬유화증, 만성 및 급성 염증, 내독소혈증, 통풍, 급성 가성통풍, 급성 통풍 관절염, 관절염, 류마티스 관절염, 골관절염, 동종이식 거부(allograft rejection), 만성 이식 거부(chronic transplant rejection), 단핵세포-포식세포 의존성 폐손상(mononuclear-phagocyte dependent lung injury), 아토피 피부염, 만성 폐색성 폐질환, 성인 호흡 곤란 증후군(adult respiratory distress syndrome), 겸상 적혈구병의 급성 흉부 증후군(acute chest syndrome in sickle cell disease), 염증성 장 질환, 크론씨 병(Crohn's disease), 궤양성 대장염, 급성 담관염, 아프타 구내염(aphteous stomatitis), 낭염(pouchitis), 사구체 신염, 루푸스 신장염, 혈전증, 및 이식편 대 숙주 반응 중 하나 이상을 포함하는 염증; 및
iv) 연령-관련 기억력 장애(age-associated memory impairment, AAMI), 경증 인지 장애(mild cognitive impairment, MCI), 초로성 치매(pre-senile dementia), 조발성 알쯔하이머병(early onset Alzheimer's disease), 노인성 치매, 알쯔하이머형 치매(dementia of the Alzheimer's type), 경증 내지 중등증의 알쯔하이머형 치매(mild to moderate dementia of the Alzheimer's type), 루이 소체 치매(Lewy body dementia), 혈관성 치매(vascular dementia), 알쯔하이머병, 뇌졸중, AIDS 치매복합증(AIDS dementia complex), 주의력 결핍 장애, 주의력 결핍 과다행동 장애, 난독증, 정신분열증, 정신분열형 장애(schizophreniform disorder), 정신분열정동 장애(schizoaffective disorder), 정신분열증의 인지기능 결핍(cognitive deficits in schizophrenia), 및 정신분열증의 인지기능 장애(cognitive dysfunction in schizophrenia) 중 하나 이상을 포함하는 인지 장애(cognition).
본 발명의 또 다른 양태는 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 본 발명의 화합물의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 아세틸콜린-유도 전류(acetylcholine-induced current)를 증가시키는 방법을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예는 실시예 중 하나를 참조한, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예는 활성 치료 물질로서 사용하기 위한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 투여를 통해 NNR의 조절을 필요로 하는 개체에서 NNR을 조절하는 방법을 포함한다.
본 발명의 범위는 양태 및 구체예의 조합을 포함한다.
달리 명시되지 않으면, 본 명세서에서 기술된 구조는 또한 하나 이상의 동위원소로 강화된 원소(isotopically enriched atom)의 존재만 상이한 화합물을 포함하도록 의도된다. 예를 들면, 수소 원자의 중수소 또는 삼중수소에 의한 치환, 또는 탄소 원자의 13C 또는 14C에 의한 치환, 또는 질소 원자의 15N에 의한 치환, 또는 산소 원자의 17O 또는 18O에 의한 치환을 제외하고는 본 명세서에 기재된 구조를 갖는 화합물은 본 발명의 범위 내에 속한다. 그와 같은 동위원소로 표지된 화합물은 연구 또는 진단 도구로서 유용하다.
본 발명은 염의 용매화물과 같은, 그들의 조합을 포함한, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 염 또는 용매화물을 포함한다. 본 발명의 화합물은 용매화된 형태, 예를 들면 수화된 형태, 및 비용매화(unsolvated) 형태로 존재할 수 있고, 본 발명은 모든 그와 같은 형태를 포괄한다.
절대적인 것은 아니나, 일반적으로, 본 발명의 염은 약제학적으로 허용가능한 염이다. 용어 "약제학적으로 허용가능한 염" 내에 포괄되는 염은 본 발명의 화합물의 무독성 염을 의미한다.
적합한 약제학적으로 허용가능한 염의 예는 클로라이드, 브로마이드, 술페이트, 포스페이트, 및 니트레이트와 같은 무기산 부가염; 아세테이트, 갈락타레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 락테이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타르트레이트, 시트레이트, 말리에이트(maleate), 푸마레이트, 메탄술포네이트, p-톨루엔술포네이트, 및 아스코르베이트와 같은 유기산 부가염; 아스파르테이트 및 글루타메이트와 같은 산성 아미노산에 의한 염; 소디움 염 및 포다슘 염과 같은 알칼리 금속염; 마그네슘 염 및 칼슘염과 같은 알칼리 토금속 염; 암모늄 염; 트리메틸아민 염, 트리에틸아민 염, 피리딘 염, 피콜린 염, 디시클로헥실아민 염, 및 N,N'-디벤질에틸렌디아민 염과 같은 유기 염기성 염(organic basic salt); 및 라이신 염 및 아르기닌 염과 같은 염기성 아미노산에 의한 염을 포함한다. 상기 염은 일부 경우에 수화물, 또는 에탄올 용매화물과 같은 용매화물일 수 있다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 발명은 본 명세서에서 구체적으로 식별된, 특정 화합물을 포함한다. 본 발명의 화합물은 공지된 표준 합성 방법을 포함한, 다양한 방법에 의해 제조될 수 있다. 예시적인 일반적 합성 방법이 하기에 기재되고, 본 발명의 특정 화합물이 실시예에서 제조된다.
하기에 기재된 모든 실시예에서, 민감성 또는 반응성 작용기(sensitive or reactive group)에 대한 보호기가 합성 화학의 일반적 원칙에 따라 필요한 경우 이용된다. 보호기는 유기 합성의 표준 방법에 따라 다루어진다 (예를 들면, T. W. Green and P. G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis , 3 rd Edition, John Wiley & Sons, New York (1999) 참조). 이 기들은 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 용이하게 자명한 방법을 이용하여 화합물 합성의 편리한 단계에서 제거된다. 방법 및 반응 조건 및 실행 순서는 본 발명의 화합물의 제조와 조화될 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물의 제조방법과 함께, 그의 제조에서 중간체로서 유용한 화합물의 합성을 제공한다.
본 발명의 화합물은 용이하게 입수가능한 출발 물질 및 시약을 이용하여 하기 방법에 따라 제조될 수 있다. 이 반응에서, 그 자체로 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 알려져 있으나, 보다 상세하게 기재되지 않은 변형이 이용될 수 있다.
염 형태
본 발명의 일 양태는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 신규한 염 형태에 관한 것이다.
유리 염기 형태인 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 제한된 수 용해도를 갖는 고체이다. 그러나, 상기 유리 염기는 결정화도(crystallinity), 수용해도, 및 화학적 분해에 대한 안정성과 같은, 약제학적 조성물을 제조를 위해 유리한 물리적 특성을 갖는 특정한 산 부가염을 생성하기 위해 무기산 및 유기산과 반응할 것이다. 일반적으로, 이 염 형태는 약제학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다. 적합한 약제학적으로 허용가능한 염의 예는 클로라이드, 브로마이드, 술페이트, 포스페이트, 및 니트레이트와 같은 무기산 부가염; 아세테이트, 갈락타레이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 락테이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타르트레이트, 시트레이트, 말리에이트(maleate), 푸마레이트, 메탄술포네이트, p-톨루엔술포네이트, 및 아스코르베이트와 같은 유기산 부가염; 아스파르테이트 및 글루타메이트와 같은 산성 아미노산에 의한 염; 소디움 염 및 포다슘 염과 같은 알칼리 금속염; 마그네슘 염 및 칼슘염과 같은 알칼리 토금속 염; 암모늄 염; 트리메틸아민 염, 트리에틸아민 염, 피리딘 염, 피콜린 염, 디시클로헥실아민 염, 및 N,N'-디벤질에틸렌디아민 염과 같은 유기 염기성 염(organic basic salt); 및 라이신 염 및 아르기닌 염과 같은 염기성 아미노산에 의한 염을 포함한다. 상기 염은 일부 경우에 수화물, 또는 에탄올 용매화물과 같은 용매화물일 수 있다.
본 발명의 일 양태는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 산 부가염에 관한 것이고, 상기에서 산은 염산, 메탄 술폰산, 말레산, 인산, 1-히드록시-2-나프토산(1-hydroxy-2-naphthoic acid), 말론산, L-타르타르산, 푸마르산, 시트르산, L-말산, R-만델산, S-만델산, 숙신산, 4-아세트아미도벤조산, 아디프산, 갈락타르산, 디-p-톨루오일-D-타르타르산, 옥살산, D-글루쿠론산, 4-히드록시벤조산, 4-메톡시벤조산, (1S)-(+)-10-캄포르술폰산, (1R,3S)-(+)-캄포르산, 및 p-톨루엔술폰산으로부터 선택된다. 본 발명은 또한 이 염 형태의 수화물 및 용매화물을 포함한다.
본 발명에 포함된 염의 화학량론(stoichiometry)은 다양할 수 있다. 예를 들면, 산 대 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 몰 비는 1:2 또는 1:1인 것이 통상적이나, 다른 비, 예를 들면, 3:1, 1:3, 2:3, 3:2 및 2:1도 가능하다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 염은 1:2의 산 대 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 화학양론(stoichiometry)을 갖는다. 또 다른 구체예에서, 상기 염은 1:1의 산 대 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 화학양론을 갖는다.
본 명세서에서 기재된 바와 같이, 본 명세서에 기재된 염이 형성되는 방식에 따라, 상기 염은 염 형성 동안 존재하는 용매를 차단하는 결정 구조를 가질 수 있다. 따라서, 상기 염은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 대비 용매의 다양한 화학양론을 갖는 수화물 및 기타 용매화물로 나타날 수 있다.
본 발명의 또 다른 구체예는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-히드로클로라이드 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-포스페이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-4-히드록시벤조에이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 포함한다.
본 발명의 또 다른 구체예는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 헤미-4-히드록시벤조에이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 상기 염의 제조를 위한 방법을 포함한다. 염이 형성되는 정확한 조건은 경험적으로 결정될 수 있다. 염은 제어된 조건 하에서 결정화에 의해 수득될 수 있다.
본 발명의 일 구체예는 개별적으로 또는 조합된, 중량 기준으로 25% 미만, 바람직하게는 15% 미만, 보다 바람직하게는 5% 미만, 훨씬 더 바람직하게는 2% 미만, 및 가장 바람직하게는 1% 미만의 (2R,3R)-, (2S,3S)-, 또는 (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드를 포함하는, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 포함한다.
상기 염 형태를 제조하는 방법은 다양할 수 있다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 염 형태의 제조는 통상적으로 하기 단계를 포함한다:
(i) 실질적으로 순수한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 유리 염기 또는 적당한 용매 중의 상기 유리 염기의 용액을 순수한 형태, 또는 적절한 용매 중의 산의 용액인 전술된 산 중 하나, 통상적으로, 상기 산의 0.5 내지 1 당량과 혼합하는 단계;
(ii)(a) 수득된 염 용액을 필요한 경우, 냉각시켜 침전을 유발하는 단계, 또는
(ii)(b) 적절한 반-용매(anti-solvent)를 첨가하여 침전을 유발하는 단계, 또는
(ii)(c) 제1 용매를 증발시키고 새로운 용매를 첨가하고 단계 (ii)(a) 또는 단계 (ii)(b)를 반복하는 단계; 및
(iii) 여과시키고 염을 수집하는 단계.
이용되는 화학량론, 용매 혼합(solvent mix), 용질 농도, 및 온도는 다양할 수 있다. 상기 염 형태를 제조하거나 또는 재결정화시키기 위해 이용될 수 있는 대표적인 용매는 에탄올, 메탄올, 프로판올, 이소프로필 알코올, 이소프로필 아세테이트, 아세톤, 에틸 아세테이트, 톨루엔, 물, 메틸 에틸 케톤, 메틸 이소부틸 케톤, 터트-부틸 메틸 에테르, 테트라히드로퓨란, 디클로로메탄, n-헵탄, 및 아세토니트릴을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
이와 같은 여러 염들은 약제학적 제제의 제조에서 유망하기에 충분한 안정성을 보인다. 그와 같은 안정성은 다양한 방식으로 입증될 수 있다. 대기 중 수분을 수득하고 방출하는 성향은 동적 증기 흡착(dynamic vapor sorption, DVS)에 의해 평가될 수 있다.
일반적 합성 방법
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 합성은 반응식(scheme) 1에 예시된 바와 같이 O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,1-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU)에 의해 매개되는 (2S,3R)-3-아미노-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥탄(그와 같은 합성에 대해 참조에 의해 본 명세서에 포함된, PCT/US08/71872에 기재된 바에 따라 수득됨)과 3,5-디플루오로벤조산의 커플링에 의해 달성된다.
Figure 112011065525818-pct00004
반응식 1
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 합성은 카르복시산을 활성화시키는 다른 작용제의 이용에 의해 유사하게 달성될 수 있다. 예를 들면, N,N'-디시클로헥실카르보디이미드(DCC), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (BOP), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (PyBOP), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBPyU), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU), O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU), 및 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBt)을 포함한 (1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드) (EDCI), 및 예를 들면, Kiso and Yajima, Peptides, pp 39-91, Academic Press, San Diego, CA (1995)에 기재된 것들과 같은 활성화제의 이용이 본 발명이 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 잘 알려져 있다.
치료 방법
본 발명의 화합물은 선택적으로 α7 NNR에 결합하고 그의 활성을 조절하는 능력을 갖는다. 결과적으로 이 화합물은 다른 종류의 니코틴 화합물이 치료제로서 제안되었거나 또는 치료제로서 유용한 것으로 입증된 것인 다양한 상태 또는 질환, 예를 들면, CNS 질환, 염증, 박테리아 및/또는 바이러스 감염과 연관된 염증 반응, 통증, 대사 증후군, 자가면역 질환 또는 본 명세서에서 상세하게 기술되는 기타 질환의 예방 또는 치료를 위해 이용될 수 있다. 상기 화합물은 또한 신생혈관 형성(neovascularization)의 조절 및 수용체 결합 연구(인 비트로 및 인 비보)에서 진단제로서 이용될 수 있다. 그와 같은 치료제 및 기타 교시가 예를 들면, Williams et al., Drug News Perspec . 7(4): 205 (1994), Arneric et al., CNS Drug Rev . 1(1): 1-26 (1995), Arneric et al., Exp . Opin . Invest . Drugs 5(1): 79-100 (1996), Bencherif et al., J. Pharmacol . Exp . Ther . 279: 1413 (1996), Lippiello et al., J. Pharmacol . Exp . Ther . 279: 1422 (1996), Damaj et al., J. Pharmacol. Exp . Ther . 291: 390 (1999); Chiari et al., Anesthesiology 91: 1447 (1999), Lavand'homme and Eisenbach, Anesthesiology 91: 1455 (1999), Holladay et al., J. Med. Chem. 40(28): 4169-94 (1997), Bannon et al., Science 279: 77 (1998), Bencherif 등에 의한, PCT WO 94/08992, PCT WO 96/31475, PCT WO 96/40682, 및 미국특허 제5,583,140호, Dull 등에 의한 미국특허 제5,597,919호, Smith 등에 의한 미국특허 제5,604,231호 및 Cosford 등에 의한 미국특허 제5,852,041호, 및 본 명세서에서 앞서 기재된 참조문헌들에 설명된다.
CNS 질환
본 발명의 화합물 및 그들의 약제학적 조성물은 신경퇴행성 질환, 신경정신 질환(neuropsychiatric disorder), 신경 질환(neurologic disorder), 및 중독을 포함한, 다양한 CNS 질환의 치료 또는 예방에서 유용하다. 상기 화합물 및 그들의 약제학적 조성물은 노화 관련 및 기타 인지 기능 결핍 및 기능 장애(cognitive deficits and dysfunctions, age-related and otherwise); 감염체 또는 대사 장애(metabolic disturbance)에 의한 것들을 포함한 주의력 장애(attentional disorder) 및 치매를 치료 또는 예방하고; 신경보호(neuroprotection)를 제공하며; 경련 및 다발성 뇌경색(multiple cerebral infarct)을 치료하고; 기분 장애, 강박(compulsion) 및 중독 행위를 치료하며; 진통을 제공하고; 사이토카인 및 핵 인자 카파 B에 의해 매개되는 것과 같은 염증을 제어하고; 염증성 질환을 치료하며; 통증 완화를 제공하고; 및 박테리아 감염, 진균 감염, 및 바이러스 감염을 치료하기 위한 항감염제로서 감염증을 치료하기 위해 이용될 수 있다. 본 발명의 화합물 및 약제학적 조성물이 치료 또는 예방을 위해 이용될 수 있는 것인 질환, 질병 및 상태는 하기를 포함한다: 연령-관련 기억력 장애(age-associated memory impairment, AAMI), 경증 인지 장애(mild cognitive impairment, MCI), 연령-관련 인지 저하(age-related cognitive decline, ARCD), 초로성 치매(pre-senile dementia), 조발성 알쯔하이머병(early onset Alzheimer's disease), 노인성 치매, 알쯔하이머형 치매(dementia of the Alzheimer's type), 알쯔하이머병, 비치매성 인지 장애(cognitive impairment no dementia, CIND), 루이 소체 치매(Lewy body dementia), HIV-치매, AIDS 치매 복합증(AIDS dementia complex), 혈관성 치매(vascular dementia), 다운 증후군(Down syndrome), 두부 외상(head trauma), 외상성 뇌손상(traumatic brain injury, TBI), 권투선수 치매(dementia pugilistica), 크로이츠펠트-야콥병(Creutzfeld-Jacob Disease) 및 프리온 질병, 뇌졸중, 허혈, 주의력 결핍 장애, 주의력 결핍 과다행동 장애, 난독증, 정신분열증, 정신분열형 장애(schizophreniform disorder), 정신분열정동 장애(schizoaffective disorder), 정신분열증의 인지기능 장애(cognitive dysfunction in schizophrenia), 정신분열증의 인지기능 결핍(cognitive deficits in schizophrenia), 파킨슨병, 뇌염후 파킨슨증(postencephalitic parkinsonism), 파킨슨증-괌 치매(parkinsonism-dementia of Gaum), 파킨슨형 전측두엽 치매(frontotemporal dementia Parkinson's Type, FTDP)를 포함한 파킨슨증(Parkinsonism), 피크병(Pick's disease), 니만-피크병(Niemann-Pick's Disease), 헌팅턴병, 헌팅턴 무도병(Huntington's chorea), 지연성 운동장애(tardive dyskinesia), 운동과잉(hyperkinesia), 진행성 핵상마비(progressive supranuclear palsy), 진행성 핵상 부전마비(progressive supranuclear paresis), 하지불안 증후군(restless leg syndrome), 크로이츠펠트-야콥병, 다발성 경화증, 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS), 운동 뉴런병(motor neuron diseases, MND), 다계통 위축(multiple system atrophy, MSA), 피질기저 변성(corticobasal degeneration), 길렝-바레 증후군(Guillain-Barre Syndrome, GBS), 및 만성 염증성 탈수초성 다발성 신경병증(chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy, CIDP), 간질, 상염색체 우성 야간 전두엽 간질(autosomal dominant nocturnal frontal lobe epilepsy), 조증, 불안증, 우울증, 월경전 불쾌감(premenstrual dysphoria), 공황 장애, 거식증(bulimia), 식욕부진, 기면증, 주간수면과다증(excessive daytime sleepiness), 양극성 장애, 범불안 장애(generalized anxiety disorder), 강박 장애(obsessive compulsive disorder), 분노 폭발(rage outburst), 적대적 반항 장애(oppositional defiant disorder), 뚜렛 증후군(Tourette's syndrome), 자폐증, 약물 및 알코올 중독, 담배 중독, 비만증, 악액질, 건선, 루푸스, 급성 담관염, 아프타성 구내염(aphthous stomatitis), 궤양, 천식, 궤양성 대장염, 염증성 장 증후군, 크론씨병, 경직성 근긴장이상증, 설사, 변비, 낭염, 바이러스성 폐렴, 관절염(류마티스 관절염 및 골관절염 포함), 내독소혈증, 패혈증, 특발성 폐 섬유증, 급성 통증, 만성 통증, 신경병증, 요실금, 당뇨병 및 종양(neoplaisa).
인지기능 저하 또는 기능장애는 정신병적 장애, 정신분열형 장애, 정신분열정동 장애, 망상 장애, 단기 정신병적 장애(brief psychotic disorder), 공유 정신병적 장애(shared psychotic disorder), 및 전신 의학적 상태에 의한 정신병적 장애(psychotic disorders due to a general medical conditions)를 포함하나, 이에 한정되지 않는, 정신분열증 및 기타 정신병 장애(psychotic disorder)와 같은 정신 질환 또는 상태, 경증 인지 장애, 초로성 치매, 알쯔하이머병, 노인성 치매, 알쯔하이머형 치매, 연령-관련 기억력 장애, 루이 소체 치매, 혈관성 치매, AIDS 치매 복합증, 난독증, 파킨슨병을 포함한 파킨슨증, 파킨슨병의 인지 장애 및 치매, 다발성 경화증의 인지 장애, 외상성 뇌손상에 의해 유발된 인지 장애, 기타 전신 의학적 상태에 의한 치매(dementias due to other general medical conditions)를, 포함하나, 이에 한정되지 않는, 치매 및 기타 인지 장애, 광장공포증이 없는 공황 장애(panic disorder without agoraphobia), 광장공포증이 있는 공황 장애(panic disorder with agoraphobia), 공황 장애의 과거력이 없는 광장공포증(agoraphobia without history of panic disorder), 특정 공포증(specific phobia), 사회 공포증, 강박장애, 외상후 스트레스 장애, 급성 스트레스 장애, 범불안 장애 및 전신 의학적 상태에 의한 범불안 장애를 포함하나, 이에 한정되지 않는 불안 장애, 주요 우울 장애(major depressive disorder), 기분저하 장애(dysthymic disorder), 양극성 우울증(bipolar depression), 양극성 조증(bipolar mania), 제I형 양극성 장애(bipolar I disorder), 조증성, 우울증성, 또는 혼재성 삽화와 연관된 우울증(depression associated with manic, depressive or mixed episodes), 제II형 양극성 장애(bipolar Il disorder), 순환성 기분 장애(cyclothymic disorder), 및 전신 의학적 상태에 의한 기분 장애를 포함하나, 이에 한정되지 않는 기분 장애, 수면이상 장애(dyssomnia disorder), 일차성 불면증, 일차성 수면과다증, 기면증, 사건수면 장애(parasomnia disorder), 악몽 장애(nightmare disorder), 야경 장애(sleep terror disorder) 및 몽유 장애(sleepwalking disorder)를 포함하나, 이에 한정되지 않는 수면 장애, 정신 지체, 학습 장애, 운동 능력 장애(motor skills disorder), 의사소통 장애(communication disorder), 전반적 발달장애(pervasive developmental disorder), 주의력-결핍 및 파괴적 행동 장애(attention-deficit and disruptive behavior disorder), 주의력 결핍 장애, 주의력 결핍 과다행동 장애, 유아기, 아동기 또는 성인기의 급식 및 섭식 장애(feeding and eating disorders of infancy, childhood, or adults), 틱 장애(tic disorder), 배출성 장애(elimination disorders), 물질 의존, 물질 남용, 물질 중독, 물질 금단, 알코올-관련 장애, 암페타민 또는 암페타민-유사-관련 장애, 카페인-관련 장애, 칸나비스-관련 장애(cannabis-related disorders), 코카인-관련 장애, 환각제-관련 장애, 흡입제-관련 장애, 니코틴-관련 장애, 오피오이드-관련 장애, 펜시클리딘(phencyclidine) 또는 펜클리시딘-유사-관련 장애, 및 진정제-, 최면제- 또는 항불안제-관련 장애(sedative-, hypnotic-or anxiolytic-related disorders)를 포함하나, 이에 한정되지않는 물질-관련 장애, 강박성 인격 장애(obsessive-compulsive personality disorder) 및 충동-조절 장애(impulse-control disorder)를 포함하나, 이에 한정되지 않는 인격 장애와 연관될 수 있다.
인지 능력(cognitive performance)은 검증된 인지 척도, 예를 들면, 알쯔하이머병 평가 척도의 인지 서브척도(cognitive subscale of the Alzheimer's Disease Assessment Scale, ADAS-cog)로 평가될 수 있다. 인지의 개선에서 본 발명의 화합물의 효과의 하나의 척도는 그와 같은 척도에 따라 환자의 변화 정도를 측정하는 것을 포함할 수 있다.
전술된 상태 및 질환은 예를 들면, American Psychiatric Association: Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Fourth Edition, Text Revision, Washington, DC, American Psychiatric Association, 2000에서 보다 상세하게 검토된다. 이 매뉴얼은 또한 물질 사용, 남용, 및 의존과 연관된 증상 및 진단 특성들에 대한 보다 세부사항에 대해 참조될 수 있다.
염증
신경계, 주로 미주 신경을 통한 신경계는 대식세포 종양 괴사 인자(TNF)의 분비를 억제하는 것에 의해 선천적 면역 반응의 크기(magnitude)를 조절하는 것으로 알려져 있다. 이 생리학적 메카니즘은 "콜린성 항염증 경로(cholinergic antiinflammatory pathway)"로 알려져 있다(예를 들면, Tracey, "The inflammatory reflex," Nature 420: 853-9 (2002) 참조). 과다한 염증 및 종양 괴사 인자 합성은 다양한 질환에서 이환율 및 심지어 사망률을 유발한다. 이 질환들은 내독소혈증, 류마티스 관절염, 골관절염, 건선, 천식, 죽상동맥경화증, 특발성 폐 섬유증, 및 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본 명세서에 기재된 화합물을 투여하는 것에 의해 치료될 수 있는 염증성 상태는 만성 및 급성 염증, 건선, 내독소혈증, 통풍, 급성 가성통풍, 급성 통풍 관절염, 관절염, 류마티스 관절염, 골관절염, 동종이식 거부(allograft rejection), 만성 이식 거부(chronic transplant rejection), 천식, 죽상동맥경화증, 단핵세포-포식세포 의존성 폐손상(mononuclear-phagocyte dependent lung injury), 특발성 폐 섬유증, 아토피 피부염, 만성 폐색성 폐질환, 성인 호흡 곤란 증후군(adult respiratory distress syndrome), 겸상 적혈구병의 급성 흉부 증후군(acute chest syndrome in sickle cell disease), 염증성 장 질환, 크론씨 병(Crohn's disease), 궤양성 대장염, 급성 담관염, 아프타 구내염(aphteous stomatitis), 낭염(pouchitis), 사구체 신염, 루푸스 신장염, 혈전증, 및 이식편 대 숙주 반응을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
박테리아 및/또는 바이러스 감염과 연관된 염증 반응
다수의 박테리아 및/또는 바이러스 감염은 독소의 형성, 및 박테리아 또는 바이러스 및/또는 독소에 대한 신체의 자연적인 반응에 의해 유발되는 부작용과 연관된다. 감염에 대한 신체의 반응은 종종 상당한 양의 TNF 및/또는 기타 사이토카인의 생성을 포함한다. 이 사이토카인의 과다발현은 (박테리아가 패혈증을 유발하는 경우) 패혈 쇼크, 내독소 쇼크, 요로성 패혈증, 및 독성 쇼크 증후군(toxic shock syndrome)과 같은 상당한 손상을 초래할 수 있다.
사이토카인 발현은 NNR에 의해 매개되며, 이 수용체들의 효능제 또는 부분 효능제(partial agonist)의 투여에 의해 억제될 수 있다. 따라서, 이 수용체들의 효능제 또는 부분 효능제인 본 명세서에 기재된 화합물은 박테리아 감염, 및 바이러스 및 진균 감염과 연관된 염증 반응을 최소화하기 위해 이용될 수 있다. 그와 같은 박테리아 감염의 예는 탄저병, 보툴리눔 독소증, 및 패혈증을 포함한다. 이 화합물 중 일부는 또한 항미생물 특성을 가질 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 항생제, 항바이러스제 및 항진균제와 같은, 박테리아 감염, 바이러스 감염 및 진균 감염을 관리하기 위한 기존의 치료제와 조합되어 보조 치료법(adjunct therapy)으로 이용될 수 있다. 항독소는 또한 감염체에 의해 생성되는 독소에 결합하고, 결합된 독소가 염증 반응을 생성하지 않고, 신체를 통과할 수 있도록 하기 위해 이용될 수 있다. 항독소의 예는 예를 들면, Bundle 등에 의한 미국특허 제6,310,043호에 개시된다. 박테리아 독소 및 기타 독소에 대해 효과적인 기타 작용제가 효과적일 수 있고, 그들의 치료 효과는 본 명세서에 기재된 화합물과의 병용-투여에 의해 보완될 수 있다.
통증
본 발명의 화합물은 급성 통증, 신경 통증, 염증성 통증, 신경병성 통증 및 만성 통증을 포함한 통증을 치료 및/또는 예방하기 위해 투여될 수 있다. 본 명세서에 기재된 화합물의 진통 활성은 미국공개특허출원 20010056084 A1 (Allgeier et al)에 기재된 바와 같이 수행되는, 지속적 염증성 통증 및 신경병성 통증의 모델(예를 들면, 염증성 통증의 완전 프로인트 아쥬반트(complete Freund's adjuvant) 랫트 모델에서의 기계적 통각과민 및 신경병성 통증의 마우스 부분적 좌골신경 결찰 모델의 기계적 통각과민)에서 입증될 수 있다.
진통 효과는 다양한 발생 또는 병인의 통증, 특히, 염증성 통증 및 연관된 통각과민, 신경병성 통증 및 연관된 통각과민, 만성 통증(예를 들면, 중증의 만성 통증, 수술후 통증 및 암, 협심증, 신산통 또는 담석산통(renal or biliary colic), 월경, 편두통 및 통풍과 연관된 통증)을 치료하기에 적합하다. 염증성 통증은 관절염 및 류마티스성 질환, 건초염 및 혈관염을 포함한, 다양한 발생 원인을 가질 수 있다. 신경병성 통증은 삼차신경통 또는 포진성 신경통, 당뇨성 신경병성 통증(diabetic neuropathy pain), 작열통, 요통 및 상완 신경총 적출(brachial plexus avulsion)과 같은 구심로 차단 증후군을 포함한다.
신생혈관 형성( Neovascularization )
α7-NNR은 신생혈관 형성과 연관된다. 예를 들면, α7-NNR의 길항제(또는 특정 투여량의 부분 효능제(partial agonist))를 투여하는 것에 의한 신생혈관 형성의 억제는 바람직하지 않은 신생혈관 형성 또는 혈관형성을 특징으로 하는 상태를 치료 또는 예방할 수 있다. 그와 같은 상태는 염증성 혈관형성(inflammatory angiogenesis) 및/또는 허혈-유도 혈관형성을 특징으로 하는 상태를 포함할 수 있다. 종양 성장과 연관된 신생혈관 형성도 α7-NNR의 길항제 또는 부분 효능제로 작용하는 본 명세서에 기재된 화합물을 투여하는 것에 의해 억제될 수 있다.
α7-NNR 특이적 활성의 특이적 길항 작용은 염증, 허혈, 및 종양에 대한 혈관형성 반응을 감소시킨다. 본 명세서에 기재된 화합물의 평가를 위한 적합한 동물 모델 시스템에 대한 안내는 예를 들면, Heeschen, C. et al ., "A novel angiogenic pathway mediated by non-neuronal nicotinic acetylcholine receptors," J. Clin . Invest. 110(4):527-36 (2002)에서 찾을 수 있다.
본 명세서에 기재된 화합물을 이용하여 치료될 수 있는 대표적인 종양 종류는 NSCLC, 난소암, 췌장암, 유방암종, 대장암종, 직장암종, 폐암종, 인두암종, 하인두암종(hypopharynx carcinoma), 식도암종, 위암종, 췌장 암종(pancreas carcinoma), 간암종, 담낭암종, 담관암종, 소장암종, 요로암종, 신장암종, 방광암종, 요로상피암종, 여성 생식기 암종, 자궁경부암종, 자궁암종, 난소암종, 융모막암종, 임신성 영양모세포 질환(gestational trophoblastic disease), 남성 생식기 암종, 전립선 암종, 정낭 암종(seminal vesicles carcinoma), 정소 암종, 생식세포종, 내분비선 암종, 갑상선 암종, 부신 암종, 뇌하수체 암종, 피부 종양, 혈관종, 흑색종, 육종, 골 및 연조직 육종(bone and soft tissue sarcoma), 카포시 육종(Kaposi's sarcoma), 뇌종양, 신경 종양, 안구 종양, 수막 종양(tumors of the meninges), 성상세포종(astrocytoma), 신경아교종, 교모세포종, 망막모세포종, 신경종, 신경모세포종, 슈반세포종(Schwannoma), 수막종, 조혈성 암(hematopoietic malignancy)으로부터 유발된 고형 종양(예를 들면, 백혈병, 녹색종, 형질세포종 및 균상식육종(mycosis fungoides)의 플라크 및 종양 및 피부 T-세포 림프종/벽혈병), 및 림프종으로부터 유발된 고형 종양을 포함한다.
본 발명의 화합물은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 알려진 바와 같은, 시스-플라틴, 아드리아마이신, 다우노마이신, 등과 같은 항신생물성 항종양제(antineoplastic antitumor agent) 및/또는 항-VEGF(vascular endothelial growth factor) 작용제와의 병용-투여를 포함한, 항암 치료제의 다른 형태와 함께 투여될 수 있다.
상기 화합물은 또한 그들이 종양 부위에 표적화되는 방식으로 투여될 수 있다. 예를 들면, 상기 화합물은 미소구체(microsphere), 미세입자 또는 상기 미세입자를 종양으로 유도하는 다양한 항체에 접합된 리포좀으로 투여될 수 있다. 또한, 상기 화합물은 동맥 및 정맥을 통과하나, 종양을 둘러싼 모세혈관상(capillary bed)에 박혀서 종양에 국소적으로 투여하기에 적합한 크기의 미소구체, 미세입자 또는 리포좀에 존재할 수 있다. 그와 같은 약물 전달 장치가 본 발명이 속하는 기술 분야에서 알려져 있다.
기타 질환
CNS 질환, 염증, 바람직하지 않은 신생혈관형성, 및 통증의 치료 외에, 본 발명의 화합물은 또한 NNR이 역할을 수행하는 것인 특정한 기타 상태, 질병 및 질환을 예방 또는 치료하기 위해 이용될 수 있다. 예는 루푸스와 같은 자가면역 질환, 사이토카인 분비 관련 질환, 감염에 따른 악액질(cachexia secondary to infection)(예를 들면, AIDS, AIDS 관련 복합증 및 종양에서 일어나는 것과 같은 악액질), 비만증, 천포창(pemphitis), 요실금, 망막 질환, 감염성 질환, 근무력증, 이튼-램버트 증후군(Eaton-Lambert syndrome), 고혈압, 골다공증, 혈관수축, 혈관확장, 심장성 부정맥, 제I형 당뇨병, 제II형 당뇨병, 거식증, 및 공개 PCT 출원 WO 98/25619에 개시된 적응증을 포함한다. 본 발명의 화합물은 또한 간질의 증상을 보이는 경련과 같은 경련을 치료하고, 매독 및 크로이츠펠트-야콥병과 같은 상태를 치료하기 위해 투여될 수 있다.
진단적 용도
본 발명의 화합물은 특히 적합한 표지를 포함하도록 변형된 경우, 프로브와 같은 진단 조성물에서 이용될 수 있다. 프로브는 예를 들면, 특정한 수용체, 특히, α7 수용체 서브타입의 상대적 갯수 및/또는 기능을 결정하기 위해 이용될 수 있다. 이 목적을 위해, 본 발명의 화합물은 가장 바람직하게는 11C, 18F, 76Br, 123I 또는 125I와 같은 방사성 동위원소 모이어티로 표지된다.
투여된 화합물은 사용된 표지에 적합한 공지된 검출 방법을 이용하여 검출될 수 있다. 검출 방법의 예는 PET(position emission topography) 및 SPECT(single-photon emission computed tomography)이다. 전술된 방사성표지는 PET (예를 들면, 11C, 18F 또는 76Br) 및 SPECT (예를 들면, 123I) 이미징에서 유용하고, 11C은 약 20.4분의 반감기를 가지며, 18F은 약 109분, 123I은 약 13시간 및 76Br은 약 16시간의 반감기를 갖는다. 높은 비활성(specific activity)이 비-포화 농도에서 선택된 수용체 서브타입을 가시화하기 위해 요구된다. 투여된 투여량은 일반적으로 독성 범위 미만이고, 높은 콘트라스트 이미지를 제공한다. 본 발명의 화합물은 무-독성 수준에서 투여될 수 있을 것으로 기대된다. 투여량의 결정은 방사성표지 이미징 분야의 당업자에게 알려진 방식으로 수행된다. 예를 들면, London 등에 의한 미국특허 제5,969,144호를 참조한다.
상기 화합물은 공지된 기법을 이용하여 투여될 수 있다. 예를 들면, London 등에 의한 미국특허 제5,969,144호를 참조한다. 화합물은 진단 조성물의 제제화에서 유용한 종류의 성분들과 같은, 기타 성분들을 내포하는 조성물로 투여될 수 있다. 본 발명의 수행에서 유용한 화합물은 가장 바람직하게는 고순도의 형태로 이용된다. 예를 들면, Elmalch 등에 의한 미국특허 제5,853,696호를 참조한다.
화합물이 개체(예를 들면, 인간 개체)에게 투여된 후, 개체 중 상기 화합물의 존재는 선택된 NNR 서브타입의 존재, 양, 및 기능(functionality)을 표시하기 위해 적합한 기법에 의해 영상화되고 정량될 수 있다. 사람 외에, 상기 화합물은 또한, 마우스, 랫트, 개, 및 원숭이와 같은, 동물에게 투여될 수 있다. SPECT 및 PET 이미징은 적합한 기법 및 장치를 이용하여 수행될 수 있다. 예를 들면, Villemagne et al ., In: Arneric et al . (Eds.) Neuronal Nicotinic Receptors : Pharmacology and Therapeutic Opportunities , 235-250 (1998) 및 Elmalch 등에 의한 미국특허 제5,853,696호를 참조한다.
방사성표지된 화합물은 높은 친화도로 선택적 NNR 서브타입(예를 들면, α7)에 결합하고 바람직하게는 다른 니코틴 콜린성 수용체 서브타입(예를 들면, α4β2 근육 및 신경절과 연관된 수용체 서브타입)으로의 매우 낮은 수준의 비특이적 결합을 보인다. 따라서, 다양한 CNS 질환 및 질병과 연관된 진단을 위해, 상기 화합물은 개체의 신체 내에서, 특히, 뇌 내에서 니코틴 콜린성 수용체 서브타입의 비침습적 이미징을 위한 작용제로서 이용될 수 있다.
일 양태에서, 진단 조성물은 인간 환자와 같은 개체에서 질병을 진단하는 방법에서 이용될 수 있다. 상기 방법은 환자에게 본 명세서에 기재된 바와 같은 검출가능하게 표지된 화합물을 투여하는 단계, 및 상기 화합물의 선택된 NNR 서브타입(예를 들면, α7 수용체 서브타입)으로의 결합을 검출하는 단계를 포함한다. PET 및 SPECT와 같은 진단 도구를 이용하는 기술 분야의 당업자는 중추신경계 및 자율신경계의 기능장애와 연관된 상태 및 질환을 포함한, 다양한 상태 및 질환을 진단하기 위해 본 명세서에 기재된 방사성표지 화합물을 이용할 수 있다. 그와 같은 질환은 알쯔하이머병, 파킨슨병, 및 정신분열증을 포함한, 다양한 CNS 질병 및 질환을 포함한다. 이들 및 평가될 수 있는 기타 대표적인 질병 및 질환은 Bencherif 등에 의한 미국특허 제5,952,339호에 개시된 것들을 포함한다.
또 다른 양태에서, 진단 조성물은 인간 환자와 같은, 개체의 선택적 니코틴 수용체 서브타입을 모니터링하는 방법에서 이용될 수 있다. 상기 방법은 환자에게 본 명세서에 기재된 검출가능하게 표지된 화합물을 투여하는 단계 및 선택된 니코틴 수용체 서브타입, 즉, α7 수용체 서브타입으로의 상기 화합물의 결합을 검출하는 단계를 포함한다.
수용체 결합
본 발명의 화합물은 NNR 서브타입, 특히, α7 수용체 서브타입에 결합하는 화합물의 결합 분석에서 기준 리간드(reference ligand)로서 이용될 수 있다. 이 목적을 위해, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 3H, 또는 14C와 같은 방사성 동위원소 모이어티로 표지된다. 그와 같은 결합 분석의 예가 하기에 상세하게 설명된다.
약제학적 조성물
본 발명의 화합물을 벌크 활성 화합물의 형태로 투여할 수 있으나, 약제학적 조성물 또는 제제의 형태로 투여하는 것이 바람직하다. 따라서, 본 발명의 일 양태는 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 본 발명의 또 다른 양태는 본 발명의 화합물과 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 또는 부형제를 혼합하는 단계를 포함하는, 약제학적 조성물을 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명의 화합물이 투여되는 방식은 다양할 수 있다. 본 발명의 화합물은 바람직하게는 경구로 투여된다. 바람직한 경구 투여용 약제학적 조성물은 정제, 캡슐, 캐플릿(caplet), 시럽, 용액, 및 현탁액을 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물은 지연 방출 정제(time-release tablet) 및 캡슐 제제와 같은 변형된 방출 투여 제형으로 제공될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 또한 주사를 통해, 즉, 정맥내로, 근육내로, 피하로, 복강내로, 동맥내로, 경막내로, 및 뇌혈관내로(intracerebroventricularly) 투여될 수 있다. 정맥내 투여가 바람직한 주사 방법이다. 주사를 위한 담체는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 잘 알려져 있고, 5% 덱스트로오스 용액, 염수, 및 인산염 완충 염수(phosphate buffered saline)를 포함한다.
상기 제제는 또한 다른 수단, 예를 들면, 직장 투여를 이용하여 투여될 수 있다. 직장 투여를 위해 유용한 제제, 예를 들면, 좌제가 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 잘 알려져 있다. 상기 화합물은 또한 흡입에 의해, 예를 들면, 에어로졸의 제형으로 투여되거나; 예를 들면, 로션 형태로 국소로; 예를 들면, 경피 패치를 이용하여(예를 들면, Novartis 및 Alza Corporation으로부터 구입할 수 있는 기술을 이용하는 것에 의해) 경피로, 분말 주입(powder injection), 또는 경구(buccal), 설하 또는 비강내 흡수에 의해 투여될 수 있다.
약제학적 조성물은 단일 투여 제형, 또는 복수의 투여 제형 또는 서브유닛 투여 제형으로 제제화될 수 있다.
본 명세서에 기재된 약제학적 조성물의 투여는 간헐적일 수 있거나, 또는 점진적, 연속적, 일정한 또는 제어된 속도일 수 있다. 약제학적 조성물은 항온 동물, 예를 들면, 마우스, 랫트, 토끼, 개, 돼지, 또는 원숭이와 같은 포유동물에게 투여될 수 있으나, 유리하게는 사람에게 투여된다. 또한, 상기 약제학적 조성물이 투여되는 1일 중 시간 및 1일 투여 횟수는 변할 수 있다.
본 발명의 화합물은 다양한 질환 및 상태의 치료에서 이용될 수 있고, 따라서, 이 질환들의 치료 또는 예방에서 유용한 다양한 다른 적합한 치료제와 조합되어 이용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 구체예는 다른 치료제와 조합된 본 발명의 화합물의 투여를 포함한다. 예를 들면, 본 발명의 화합물은 다른 NNR 리간드(예를 들면, 바레니클린), 항산화제(예를 들면, 자유 라디칼 제거제(free radical scavenging agent)), 항박테리아제(예를 들면, 페니실린 항생제), 항바이러스제(예를 들면, 지도부딘 및 아시클로비르와 같은 뉴클레오시드 유사체), 항응고제(예를 들면, 와파린), 항염증제(예를 들면, NSAID), 해열제, 진통제, 마취제(예를 들면, 수술에서 사용되는 마취제), 아세틸콜린에스테라아제 억제제(예를 들면, 도네페질 및 갈란타민), 항정신병제(예를 들면, 할로페리돌, 클로자핀, 올란자핀, 및 퀘티아핀), 면역-억제제(예를 들면, 사이클로스포린 및 메토트렉세이트), 신경보호제(neuroprotective agent), 스테로이드(예를 들면, 스테로이드 호르몬), 코르티코스테로이드(예를 들면, 덱사메타손, 프레드니손, 및 히드로코르티손), 비타민, 미네랄, 뉴트라슈티컬(nutraceutical), 항우울제(예를 들면, 이미프라민, 플루옥세틴, 파록세틴, 에스시탈로프람, 세르트랄린, 벤라팍신, 및 둘록세틴), 항불안제(예를 들면, 알프라졸람 및 부스피론), 항경련제(예를 들면, 페니토인 및 가바펜틴), 혈관확장제(예를 들면, 프라조신 및 실데나필), 기분안정제(예를 들면, 발프로에이트 및 아리피프라졸), 항암제(예를 들면, 항-증식제), 항고혈압제(예를 들면, 아테놀롤, 클로니딘, 암로피딘, 베라파밀, 및 올메사르탄), 설사제, 변 연화제(stool softener), 이뇨제(예를 들면, 푸로세미드), 항연축제(예를 들면, 디시클로민), 항이상운동제(anti-dyskinetic agent), 및 항-궤양제(예를 들면, 에소메프라졸)와 조합되어 이용될 수 있다. 약제학적 활성제의 그와 같은 조합은 함께 또는 별개로 투여될 수 있고, 별개로 투여되는 경우, 투여는 동시에 또는 임의의 순서로 순차적으로 이루어질 수 있다. 화합물 또는 작용제의 양 및 투여의 상대적 시기는 원하는 치료 효과를 달성하도록 선택될 것이다. 본 발명의 화합물과 다른 치료제의 조합의 투여는 (1) 상기 두 화합물을 포함하는 단일(unitary) 약제학적 조성물; 또는 (2) 각각 상기 두 화합물 중 하나를 포함하는 것인 각각의 별개 조성물로 동시에 투여될 수 있다. 대안적으로, 상기 조합은 하나의 치료제가 먼저 투여되고, 그 후, 나머지 치료제가 투여되는 것인 순차적 방식으로 별개로 투여될 수 있다. 그와 같은 순차적 투여는 시간적으로 근접하거나 또는 시간적으로 큰 간격을 가질 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 개체에게 본 발명의 화합물, 및 화학요법제, 방사선 치료제, 유전자 치료제 또는 면역요법제를 포함한 하나 이상의 다른 치료제의 치료적 또는 예방적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 조합 요법(combination therapy)을 포함한다.
도 1은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 투여량 대비 신규 물체 인식(novel object recognition, NOR)을 도시한다. 0.1 mg/kg의 투여량에서 통계적으로 유의성 있는 효과를 관찰하였다.
도 2는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 투여 후 신규 물체 인식(NOR)을 위한 최소 유효량(minimum effective dose)의 결정을 위해 이용된 데이터를 도시한다. 0.03 mg/kg의 투여량에서 통계적으로 유의성 있는 효과를 관찰하였다.
도 3은 0.1 mg/kg (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 3차 투여 후 시간 대비 신규한 물체 인식(NOR)을 도시한다. 투여 후 6시간까지 투여량에 대한 통계적으로 유의성 있는 효과를 관찰하였다.
도 4는 0.3 mg/kg (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 3차 투여 후 시간 대비 신규한 물체 인식(NOR)을 도시한다. 투여 후 18시간까지 투여량에 대한 통계적으로 유의성 있는 효과를 관찰하였다.
도 5는 α7 니코틴 수용체와 화합물 A 및 화합물 B 각각에 대한 투여량 반응을 도시한다.
도 6은 아세틸콜린(Ach)과 화합물 A 및 화합물 B 각각의 병용-투여에 대한 전기생리학적 반응을 도시한다.
도 7A, 7B, 및 7C는 니코틴 α7 수용체의 활성화에 대해, 화합물 A와 Ach의 상호작용에 대한 전기생리학적 반응을 도시한다.
도 8A, 8B, 및 8C는 니코틴 α7 수용체의 활성화에 대해, 화합물 B와 Ach의 상호작용에 대한 전기생리학적 반응을 도시한다.
도 9는 화합물 A 모노-히드로클로라이드 염에 대한 x-선 회절 패턴이다.
도 10은 화합물 A 모노-히드로클로라이드 염에 대한 결정 구조이다.
도 11은 화합물 A 헤미-갈락타레이트 염에 대한 x-선 회절 패턴이다.
도 12는 화합물 A에 대한 염 스크리닝으로부터의 염에 대한 6개의 상이한 x-선 회절 패턴의 오버레이(overlay)를 예시한다.
도 13은 CFA-유도 열 통각과민에서 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 평가 결과를 보여준다. 테스트 물질, 모르핀과 비히클을 각각 CFA 주사 후 24시간 경과시 8 마리의 SD 랫트의 군에 피하로 투여했다. 열 통각과민을 CFA 주사전(pre-CFA), 처리 전, 및 SC 주사 1시간 후에 수행했다. 일원 ANOVA(one-way ANOVA) 및 뒤이은 Dunnett 검정을 처리군과 비히클 대조군을 비교하기 위해 적용했다. 차이는 *P<0.05 수준에서 유의성 있는 것으로 간주한다.
도 14는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 비히클 처리군 대비 1mg/kg 및 10mg/kg의 투여량에서 당뇨성 신경병증 통증을 경감시키는데 효과적이라는 것을 나타내는, 본 프레이 평가(Von Frey assessment)의 결과를 보여준다.
도 15는 비만 대조군 대비 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드-처리 비만("db-테스트 대상(Test Article)") 마우스에서 유의성있게 더 낮은 체중 증가 비교를 보여준다. 두드러지게, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 함께 MLA가 병용 투여된 동물들은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 단독으로 투여된 비만 마우스에 의해 보여진 감소된 체중 증가를 보이지 못했다.
도 16은 평균 사료 섭취량이 비만 대조군 대비 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드-처리 비만 마우스("db-테스트 대상")에서 훨씬 더 낮았다는 것을 보여준다. 여윈(lean) 마우스의 사료 섭취량은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 ("Db-테스트 대상")에 의해 영향받지 않았다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 함께 MLA가 병용 투여된 동물들은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 단독으로 투여된 비만 마우스에 의해 보여진 감소된 1일 평균 사료 섭취량을 보이지 못했다.
도 17은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 비만 마우스("db-테스트 대상")에서 공복 혈장 글루코오스(fasting plasma glucose) 수준을 유의성 있게 억제했다는 것을 보여준다. 그러나, 이 효과는 MLA와의 병용 투여에 의해 역전되지 않았다.
도 18은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 비만 마우스("db-테스트 대상")에서 글리코실화 HbA1c 수준을 유의성있게 억제했다는 것을 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 글리코실화 HbA1c의 감소는 MLA의 병용-투여에 의해 약화되었다.
도 19는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 비만 마우스("db-테스트 대상")에서 염증촉진성(proinflammatory) 사이토카인 TNF 알파를 유의성있게 감소시켰다는 것을 보여준다. 이 효과는 알파7 길항제 MLA의 병용-투여에 의해 억제되었다.
도 20은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 비히클-처리 대조군("db") 대비 비만 마우스("db-테트스 대상")에서 훨씬 더 낮은 트리글리세리드(triglyceride) 수준을 초래했다는 것을 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 트리글리세리드의 감소는 MLA의 병용-투여에 의해 약화되지 않았다.
도 21은 오브알부민-감작화 마우스(ovalbumin-sensitized mice)에서 메타콜린 부하(challenge)에 대한 Penh 반응의 % 변화에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 비히클을 21일차부터 25일차까지 6일 연속으로 OVA 부하 30분 전에 피하로 1일 2회(bid) 투여하거나 또는 1일 1회(qd) 기관내로 투여했고, 마지막 투여는 26일차에 MCh 유발(provocation) 30분 전에 수행했다. Penh 값을 결정했다. 일원 ANOVA 및 뒤이은 Dunnett 검정을 OVA 면역화 비히클과 다른 처리군 간의 비교를 위해 적용했다. OVA-비히클 대조군 대비 *P<0.05.
도 22는 오브알부민 감작화 마우스에서 백혈구 수 및 감별 세포수(differential cell count)에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 비히클을 21일차부터 25일차까지 6일 연속으로 OVA 부하 30분 전에 피하로 1일 2회 투여하거나 또는 1일 1회 기관내로 투여했고, 마지막 투여는 26일차에 기관지 폐포 세척액(bronchoalveolar lavage fluid) 수집 30분 전에 수행했다. 총 백혈구수 및 감별 세포수를 결정했다. 일원 ANOVA 및 뒤이은 Dunnett 검정을 OVA 면역화 비히클과 다른 처리군 간의 비교를 위해 적용했다. OVA-비히클 대조군 대비 *P<0.05.
도 23은 오브알부민 감작화 마우스에서 % 백혈구 수 및 감별 세포수에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 비히클을 21일차부터 25일차까지 6일 연속으로 및 OVA 부하 30분 전에 피하로 1일 2회 투여하거나 또는 1일 1회 기관내로 투여했고, 마지막 투여는 26일차에 기관지 폐포 세척액 수집 30분 전에 수행했다 총 백혈구수 및 감별 세포수를 결정했다. 일원 ANOVA 및 뒤이은 Dunnett 검정을 OVA 면역화 비히클과 다른 처리군 간의 비교를 위해 적용했다. OVA-비히클 대조군 대비 *P<0.05.
하기의 실시예는 본 발명을 예시하기 위해 제공되며, 본 발명을 한정하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 이 실시예들에서, 모든 부분(part) 및 백분율은 달리 명시되지 않으면 중량 기준이다.
핵 자기 공명( Nuclear Magnetic Resonance , NMR ) 분광계
자동-샘플러가 장착되고 DRX400 콘솔(console)에 의해 제어되는 Varian Unity 300 MHz 장치 또는 Bruker 400MHz 장치에서 NMR 스펙트럼을 수집하였다. 표준 Bruker 부하 실험을 이용하여 Topspin v 1.3 (patch level 8)으로 운영되는 ICONNMR v4.0.4 (build 1)를 이용하여 자동화된 실험을 수득하였다. 비-루틴 분광분석(non-routine spectroscopy)의 경우, 데이터는 Topspin 단독의 이용을 통해 수득하였다.
용융점( Melting Point )
분당 약 5℃의 가열 속도에 해당하는 설정에서 Fisher-Johns 핫 스테이지(hot stage) 용융점 장치를 이용하였다.
시차 주사 열량측정법( Differential Scanning Calorimetry , DSC )
50 포지션 자동-샘플러를 갖춘 Mettler DSC 823e 상에서 DSC 데이터를 수집하였다. 상기 장치를 인증된 인듐(certified indium)을 이용하여 에너지 및 온도에 대해 보정하였다. 통상적으로, 핀-홀형 알루미늄 팬(pin-holed aluminium pan) 중의 0.5 내지 1.5 mg의 각 시료를 10℃/분으로 25℃부터 300℃까지 가열하였다. 시료에 대해 50 mL/분으로 질소 퍼징(purge)을 유지시켰다. stare v 9.10 소프트웨어 패키지를 이용하여 장치 제어 및 데이터 분석을 수행했다.
X-선 분말 회절( XRPD )
방법 1
Cu Kα 방사선 (40kV, 40mA), θ-θ 고니오미터(goniometer), 수광 슬릿(receiving slit)과 V20의 확산(divergence), 흑연 2차 분광기(graphite secondary monochromator) 및 신틸레이션 카운터(scintillation counter)를 이용하여 Siemens D5000 회절계(diffractometer)에서 X-선 분말 회절 패턴을 수집했다. 인증된 Corundum 표준 (NIST 1976)을 이용하여 장치의 성능을 체크했다. 데이터 수집을 위해 이용된 소프트웨어는 Diffrac Plus XRD Commander v2.3.1이었고 Diffrac Plus EVA v 11,0.0.2 또는 v 13.0.0.2를 이용하여 데이터를 분석하고 제시하였다.
수용된 분말을 이용한 편평한 플레이트 표본(flat plate specimen)으로서 주변 조건에서 시료를 운영했다. 시료의 약 30 mg을 연마한 제로백그라운드(polished, zerobackground) (510) 실리콘 웨이퍼 내에 형성된 구멍(cavity)에 조심스럽게 충진시켰다. 시료를 분석 동안 그 자체의 면(plane)에서 회전시켰다. 데이터 수집의 세부사항은 하기와 같다:
- 각 범위(Angular range): 2 내지 42°2θ
- 스텝 크기(Step size): 0.05°2θ 또는 or 0.1°2θ
- 수집 시간: 4 s.step-1
방법 2
Cu Kα 방사선 (40 kV, 40 mA), 자동화된 XYZ 스테이지(stage), 자동-샘플 포지셔닝을 위한 레이저 비디오 현미경 및 HiStar 2-차원 면적 검출기(2-dimensional area detector)를 이용하여 Bruker AXS C2 GADDS 회절계 상에서 X-선 분말 회절 패턴을 수집했다. X-선 광학(X-ray optics)은 0.3 mm의 핀홀 콜리메이터(pinhole collimater)와 결합된 단일 Gobel 다층 거울(multilayer mirror)로 구성된다.
빔 확산(beam divergence), 즉, 시료 상의 X-선 빔의 유효 크기는 약 4 mm였다. 3.2°내지 29.7°의 유효한 2θ 범위를 생성하는 20 cm의 시료-검출기 거리로 q-q 연속 스캔 모드를 채택했다. 통상적으로, 시료를 120초 동안 X-선 빔에 노출시켰다. 데이터 수집을 위해 이용된 소프트웨어는 WNT 4.1.16용 GADDS였고, 데이터를 Diffrac Plus EVA v 9.0.0.2 또는 v 13.0.0.2를 이용하여 분석하고 제시했다.
주변 조건에서 운영된 시료를 분쇄(grinding) 없이 수용된 데로 분말로 이용하여 편평한 플레이트 표본으로 제조하였다. 약 1 내지 2 mg의 시료를 유리 슬라이드 상에서 가볍게 눌러서 편평한 표면을 수득했다. 주변 조건에서 수득된 시료를 열전도 화합물(heatconducting compound)과 함께 실리콘 웨이퍼 상에 고정했다. 그 후, 시료를 약 10℃.min- 1으로 적절한 온도까지 가열하고 뒤이어 데이터 수집을 개시하기 전에 약 1분 동안 등온으로 유지시켰다.
단결정 X-선 회절( Single Crystal X- Ray Diffraction , SCXD )
Oxford Cryosystems Cryostream 냉각 장치가 장착된 Bruker AXS 1K SMART CCD 회절계 상에서 데이터를 수집했다. SHELXS 또는 SHELXD 프로그램을 이용하여 구조를 해석하고 Bruker AXS SHELXTL 세트(suite)의 일부인 SHELXL 프로그램으로 개선시켰다. 달리 기재되지 않으면, 탄소에 결합된 수소 원자를 기하학적으로 배치하고 라이딩 동위원소 변위(riding isotropic displacement) 파라미터로 개선될 수 있게 하였다. 헤테로원자에 결합된 수소 원자를 차이 퓨리에 합성(difference Fourier synthesis)에 배치하고 동위원소 변위 파라미터로 자유롭게 개선될 수 있게 하였다.
실시예 1. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 합성
실온에서, N,N-디메틸포름아미드 (DMF, 2 ml) 중 (2S,3R)-3-아미노-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥탄 (20 mg, 0.092 mmol, 그와 같은 합성에 대해 참조에 의해 본 명세서에 포함된 PCT WO 09/018505에 기재된 바와 같이 제조됨), o-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N,1-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU, 41.7 mg, 0.110 mmol) 및 3,5-디플루오로벤조산 (17.4 mg, 0.110 mmol)의 현탁액에 트리에틸아민(28 mg, 0.28 mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고 에틸 아세테이트 (200 ml)로 희석하고 20% 탄산칼륨 수용액으로 세척했다. 잔류물을 용리액 메탄올:트리에틸아민=300:1을 이용한 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제했다. 용매를 제거하여 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (30 mg, 76%)를 생성했다. HPLC에 의한 순도: 100% (214 nm), 98.2% (254 nm); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 8.48 (d, j = 2.0 Hz, 1H), 8.36 (dd, j = 1.7 Hz, j = 4.9 Hz, 1H), 7.56-7.60 (m, 1H), 7.14-7.20 (m, 1H), 7.05-7.14 (m, 2H), 6.87-6.96 (m, 1H), 6.23 (d, j = 7.8 Hz, 1H), 3.88-3.96 (m, 1H), 3.02-3.13 (m, 1H), 2.82-3.00 (m, 4H), 2.65-2.82 (m, 2H), 1.97-2.05 (m, 1H), 1.58-1.84 (m, 3H), 1.43-1.55 (m, 1H); ESI-MS 358.1(MH)+.
실시예 2. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 푸마레이트의 합성
25℃에서 3,5-디플루오로벤조산 (9.36 g, 59.2 mmol), 클로로포름 (200 mL) 및 트리에틸아민 (16.34 g, 161.5 mmol)의 용액에 HBTU (22.5 g, 59.2 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 45분 동안 40-42℃까지 가열하여 백색 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 10℃까지 냉각시키고 클로로포름(50 ml) 중의 (2S,3R)-3-아미노-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥탄 (11.7 g, 53.8 mmoles) 용액을 15 내지 20분에 걸쳐 첨가하고 1.5 시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 40-42℃까지 가열하고 추가적인 3,5-디플루오로벤조산 (2.0 g, 13 mmol) 및 HBTU (4 g, 11 mmol)를 첨가하고, 뒤이어 40-42℃에서 2시간 동안 교반하고 주변 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (200 mL)로 신속하게 퀀칭(quench) 시키고, 교반 하에, 수성층의 pH를 10 중량%의 수산화나트륨 수용액으로 pH=10-11로 조정했다. 층을 분리하고 유기층을 물 (100 mL)로 2회 세척하였다. 용매를 진공에서 제거하여 22.9 g의 점성의 오렌지색 고체를 수득했다. 조 오일(crude oil) 중 생성물의 강도를 기준 표준(reference standard) 대비 정량적 HPLC에 의해 66.0 중량%로 결정하였다; 이는 15.1g(78%)의 수율에 해당한다. 상기 오일을 메틸 에틸 케톤 (50 mL)에 용해시키고 뒤이어 진공에서 증류시켰다: 이 과정을 총 3회 반복했다. 오버헤드 교반기, 온도 프로브, 적하 깔때기(dropping funnel) 및 응축기(condenser)가 장착된 500 mL의 3-목, 둥근-바닥 플라스크(three-necked, round-bottomed flask)에 푸마르산 (4.9 g, 42 mmol) 및 메틸 에틸 케톤 (150 mL)을 충진시켰다. 현탁액을 78℃까지 가열하여 산을 완전히 용해시켰다. 메틸 에틸 케톤(50 ml) 중 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로 벤즈아미드의 용액을 내부 온도를 75℃ 이상으로 유지하면서 서서히 첨가하였다. 첨가를 완료한 후, 현탁액을 78℃에서 30 내지 45분 동안 교반하고 열원을 껐다. 상기 현탁액을 밤새 교반하고 여과시키고 케이크를 진공에서 50℃에서 16시간 동안 건조시켜 연한 황색의 결정질 고체로서 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 푸마레이트를 수득했다(HPLC에 의한 순도 99.6 %), mp 208-210℃. 수율: 두 단계에 대해 65%. 1H NMR (D2O, 400 MHz): δ 8.30 (d, J = 5.6 Hz, 1H); 8.06 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 7.48 (dd, J = 8.7 Hz, J = 5.6 Hz, 1 H); 6.97-7.06 (m, 1H); 6.75-6.85 (m, 2 H); 6.49 (s, 2H); 4.15 (d, J = 7.5 Hz, 1H); 3.69-3.81 (m, 1H); 3.40-3.59 (m, 2H); 3.17-3.40 (m, 4 H); 2.03-2.18 (m, 2H); 1.91-2.03 (m, 2 H), 1.78-1.91 (m, 1H).
실시예 3. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-히드로클로라이드의 합성
절차 A: 10 mL의 이소프로필 아세테이트 중 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 용액 250 mg (0.7 mmol)에 염산 수용액 (37% (w/w) 65㎕, 0.78 mmol)을 첨가했다. 상기 용액을 50℃까지 가열하고 4시간의 기간에 걸쳐 0℃까지 냉각시켰다. 모노-히드로클로라이드 시료는 0℃에서 검과 백색 분말의 혼합물이었다. 그 후, 상기 시료를 20℃까지 가열하고 다시 0℃까지 냉각시켰다 (냉각 램프 5℃/분). 결과적으로 수득된 고체를 수집하고 진공 하에 25℃에서 24시간 동안 건조시켰다. mp (DSC) = 274.8℃.
절차 B: 농축 염산 (37% (w/w) 0.54 mL, 6.6 mmol)을 얼음조에서 냉각시키면서 테트라히드로퓨란(THF, ~4 mL)에 점적하고 5 mL 부피까지 THF로 희석했다. 이 용액을 아세톤 (20 mL) 중 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (96.8% 순도의 2.43 g, 6.58 mmol)의 따뜻한 용액(45-50℃)에 (5분의 기간에 걸쳐) 점적하였다. 고체가 침전되기 시작했다. 혼합물을 비등점 근처에서 15분 동안 가열하고, 주변 온도까지 냉각시키고 16시간 동안 방치했다. 고체를 질소 하에 흡인 여과에 의해 수집하고, 아세톤으로 세척하고 진공 오븐 (85℃, 3 h)에서 건조시켰다. 이에 의해 LCMS에 의해 93% 순수한 2.26 g의 물질을 수득했다. 전체 시료를 고온(비등점 부근)의 2-프로판올(25 mL)에서 10분 동안 소화시켰다. 혼합물을 주변 온도까지 냉각시키고 3시간 동안 방치시켰다. 고체를 질소 하에 흡인 여과로 수집하고 진공 오븐 (85℃, 2.5 h)에서 건조시켰다. 결과적으로 수득된 백색 결정은 HPLC에 의해 순도가 99%보다 높았고 2.03 g (78.4% 수율)이었으며, 273-276℃에서 용융되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.45 (broad s, 1H), 8.66 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.24 (m, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.10-3.35 (m, 4H), 2.06 (m, 3H), 1.90 (m, 1H), 1.69 (m, 1H). 원소 분석: C20H21ON3F2 . HCl에 대한 계산값 (C, 60.99%; H, 5.63%, N, 10.67%); 관찰값 (C, 60.94%, 60.91%; H, 5.64%, 5.66%; N, 10.63%, 10.67%).
실시예 4. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-포스페이트의 합성
5 mL의 이소프로필 알코올 중 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 250 mg (0.7 mmol)의 용액에 THF 용액 중 1 M 인산 780 ㎕ (0.78 mmol, 1.1 eq)를 첨가했다. 상기 용액을 50℃까지 가열하고 4시간에 걸쳐 0℃까지 냉각시켰다. 0℃에서 백색의 비유동성(immobile) 슬러리가 형성되고, 시료를 실온까지 가온시킨 후에도 유지되었다. 용매를 증발시킨 후 결정질 물질이 형성되었고 이를 수집하고 진공 하에 25℃에서 24시간 동안 거조시켰다. mp (DSC) = 219.2℃.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (s, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.24 (m, 3H), 5.04 (br s), 3.84 (m, 1H), 2.70-3.35 (m, 7H), 1.60-1.90 (m, 4H), 1.40 (m, 1H).
실시예 5. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-4-히드록시벤조에이트의 합성
5 mL의 이소프로필 알코올 중 250 mg (0.70 mmol)의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 용액에 THF 중 1M 4-히드록시벤조산 용액 780 ㎕ (0.78 mmol, 1.1 eq)를 첨가했다. 상기 용액을 50℃까지 가열하고 4시간에 걸쳐 0℃까지 냉각시켰다. 모노-4-히드록시벤조에이트를 검으로서 수득하였다. 헤미-4-히드록시벤조에이트를 접종하고 검과 용액의 증발된 혼합물(출발 부피의 1/4만이 남음)을 50℃와 실온 사이에서 48시간(4-시간 사이클)의 숙성(maturation)시킨 후 결정을 수득하였다. 그 후, 질소 하에 용매의 증발에 의해 고체를 분리하였다. 결과적으로 수득된 고체를 수집하고 진공 하에 25℃에서 24시간 동안 건조시켰다. mp (DSC) = 144.0℃.
실시예 6. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 헤미-4-히드록시벤조에이트의 합성
3.5 mL의 이소프로필 알코올 중 71.5 mg (0.20 mmol)의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 용액에 THF 중 1M 4-히드록시벤조산 용액 100 ㎕ (0.1 mmol, 0.5 eq)에 첨가했다. 이소프로필 아세테이트를 증발시켜 고체로서 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-4-히드록시벤조에이트를 수득하고 이를 수집하여 진공 하에 25℃에서 24시간 동안 건조시켰다. mp(DSC) = 106.0℃. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.23 (br s), 8.43 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.61 (m, 1H), 7.41 (m, 3H), 7.22 (m, 1H), 6.80 (d, 1H), 3.66 (m, 1H), 2.70-3.20 (m, 7H), 1.50-1.90 (m, 4H), 1.20 (m, 1H).
실시예 7. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 일수화물의 합성
물(5 mL) 중 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (993 mg, 2.80 mmol)의 용액에 클로로포름 (15 mL)을 첨가했다. 수성층의 pH를 10 중량% 수산화나트륨으로 pH를 10 내지 11로 조정했다. 이상 혼합물(biphasic mixture)을 강하게 진탕시키고, 층들이 분리될 수 있게 했다. 클로로포름층을 분리하고, 수성층을 다시 한번 클로로포름(9 mL)으로 추출했다. 합쳐진 클로로포름층을 물(7 mL)로 1회 세척하고, 무수 황산마그네슘 층(bed of anhydrous magnesium sulfate)을 통해 여과시키고 진공에서 농축하여 폼(foam)을 형성하는 경향을 갖는 무색의 투명한 오일을 수득했다. 수득된 물질을 메틸 터트-부틸 에테르(MTBE, 10-15 mL)로 처리하고, 뒤이어 진공에서 용매 증류를 수행했다; 이 과정을 1회 더 반복했다. 상기 물질을 MTBE (10-15 mL)에 용해시키고 백색 비연(white cloudness)이 나타날 때까지 헵탄을 첨가했다. 이 시점에, 50-55℃에서 주변 압력에서 휘발성 물질의 느린 증류를 개시하고 추가적인 고체 물질을 분리시켰다. 증류를 중단하고물질을 여과에 의해 수집하고 소량의 헵탄으로 세척했다. 상기 물질을 진공/질소 블리딩(nitrogen bleed) 하에 55℃에서 60시간 동안 및 70-85℃에서 40시간 동안 건조시켜 400 mg의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 일수화물을 백색의 부서지기 쉬운 고체(white brittle solid)로서 수득했다: αD 26.6℃ = 40°;원자 분석, 계산: C (63.99); H (6.18); N (11.19), H2O (4.8 weight %), 관찰: C (64.23); H (6.27); N (11.18); H2O (4.48). 1H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8.46 (d, J = 2 Hz, 1H); 8.35 (dd, J = 4.8 Hz, J = 2 Hz, 1 H); 7.56-7.61 (m, 1H); 7.08-7.19 (m, 3H); 6.87-6.95 (m, 1H), 6.32 (d, J = 8.1 Hz, 1H); 3.89-3.95 (m, 1H); 3.00-3.12 (m, 1H), 2.84-2.99 (m, 4H); 2.68-2.84 (m, 2H); 1.98-2.04 (m, 1H); 1.83 (s, 2H); 1.58-1.79 (m, 3H); 1.44-1.54 (m, 1H). 240℃에서 분해됨.
실시예 8. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 헤미-갈락타레이트의 합성
70-72℃에서 절대 에탄올 (10 mL) 중 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (357 mg, 1.00 mmol)의 교반된 용액에 갈락타르산(순수)(105 mg, 0.50 mmol)을 소량씩 첨가했다. 산의 첨가를 완료한 후 추가적인 15분 동안 가열을 지속했다. 용액을 서서히 주변 온도까지 냉각시켰다. 2시간 동안 정치시킨 후, 고체를 진공 여과에 의해 수집하고, 에탄올로 세척하고, 질소 콘(nitrogen cone) 하에서 30분 동안 건조시켰다. 결과적으로 수득된 물질을 진공 오븐에서 75℃에서 3시간 동안 건조시켜 잔류 에탄올을 제거했다. XRPD 분석의 결과가 도 11에 도시된다.
실시예 9. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 염 스크리닝
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 유리 염기의 스톡 용액을 하기와 같이 제조하였다:
- 20 mg/ml in IPA 중 20 mg/ml, i-ProAc 중 25mg/ml - 반대-이온 1-12
- i-ProAc 중 25mg/ml - 반대-이온 13-20
각 바이알에 주변 조건에서 2 ml의 유리 염기 스톡 용액을 충전시켰다 (40-50 mg 유리 염기/바이알). 각 바이알에 주변 조건에서 1.1 또는 2.2 당량의 적절한 부피의 스톡 산 용액(달리 기재되지 않으면, THF 중 1M)을 첨가했다. 불용성 산을 고체로서 첨가했다. 모든 시료를 50℃까지 가온시키고 그 후, 10시간에 걸쳐 0℃까지 냉각시켰다. 검 및 오일을 포함한, 모든 무정형 고체를 숙성 (2일에 걸쳐, 4시간 사이클로 주변 온도 - 50℃)에 배치하고 뒤이어 XRPD 재-분석을 수행했다. 숙성 후 무정형으로 남아있는 시료들에 2 ml의 메틸 에틸 케톤을 첨가하고 시료를 3일 동안 더 숙성시켰다. 투명한 용액을 연속적으로 약 1/2 부피까지 증발시키고 그 후 50℃에서 1/4 부피까지 증발시켰다. 남은 용액을 5℃까지 더 냉각시키고 그 후, 진공 하에서 용매를 완전히 제거했다. 모든 남은 고체를 XRPD에 의해 분석하고 독특한 XRPD 패턴을 갖는 결정질 시료를 1HNMR/이온 크로마토그래피, 40℃/75%RH에서 1주 동안의 고체 상태 안정성 및 수성 용해도(목표 25℃에서 10 mg/ml, 완충되지 않음)에 대해 더 분석하였다.
산 선택 연구를 위해 선택된 산성 반대 이온(acidic counter-ion)
Figure 112011065525818-pct00005
Figure 112011065525818-pct00006
Figure 112011065525818-pct00007
Figure 112011065525818-pct00008
Figure 112011065525818-pct00009

실시예 10. 염산염의 결정 구조
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-히드로클로라이드의 메탄올 용액을 실온 내지 50℃에서 숙성시켜 염산염의 결정을 수득했다. 단결정 구조 데이터가 하기의 표에 표시된다. 시료가 벌크를 대표하는 것으로 표시하였다.
모노 히드로클로라이드 염의 단결정 구조
Figure 112011065525818-pct00010
구조 해석(structure solution)은 직접적인 방법, F 2에 대한 풀-매트릭스 최소 자승 개선(full-matrix least-squares refinement on F 2)에 의해 수득했고, 가중치 부여(weighting)는 w -1=σ2(F o 2) + (0.0435P)2 + (0.1500P)이고, 상기에서 P =(F o 2+2F c 2)/3, 이방성 변위 파라미터(anisotropic displacement parameter)이고, 경험적 흡수 보정(empirical absorption corrections)을 적용하고, 절대적 구조 파라미터 = -0.04(3)이다.　모든 데이터에 대해 최종 wR 2 ={∑[w(F o 2-F c 2)2]/∑[w(F o 2)2]1/2}= 0.0636이고, 3684개 반사(reflection)의 F 값에 대한 통상적인 R 1 = 0.0231이고, 모든 데이터 및 252개 파라미터에 대해 F o > 4σ( F o ), S = 1.004이다. 최종 △/σ(max) 0.001, △/σ(mean), 0.000이다.　+0.195와 -0.136 eÅ-3 사이의 최종 차이 맵(final difference map).
절대적 구조 파라미터의 값은 키랄 센터의 배열의 결정을 가능하게 했다. 이 배열이 도 10에 표시된다.
실시예 11. 생물학적 분석법
CNS nAChR α4β2 NNR 서브타입에서의 방사성리간드 결합
랫트 피질로부터의 막 제조: 150 내지 250 g의 랫트 (암컷, Sprague-Dawley)를 12시간 명/암 사이클 상에서 유지시키고, 물과 PMI Nutrition International, Inc.에 의해 공급된 사료에 대한 자유로운 접근을 허용했다. 동물을 70% CO2로 마취시키고, 참수시켰다. 뇌를 제거하고, 얼음처럼 차가운(ice-cole) 플랫폼 상에 배치했다. 대뇌 피질을 제거하고, 20 부피(중량:부피)의 얼음처럼 차가운 제조 완충액(preparative buffer) (137 mM NaCl, 10.7 mM KCl, 5.8 mM KH2PO4, 8 mM Na2HPO4, 20 mM HEPES (유리 산), 5 mM 요오도아세트아미드, 1.6 mM EDTA, pH 7.4) 중에 넣고; 메탄올에 100 μM의 최종 농도까지 용해시킨, PMSF를 첨가하고, 현탁액을 Polytron에 의해 균질화시켰다. 균질액(homogenate)을 4℃에서 18,000 x g로 20분 동안 원심분리시키고, 결과적으로 수득된 펠렛을 20 부피의 얼음처럼 차가운 물에 재현탁시켰다. 얼음에서 60분의 인큐베이션 후, 4℃에서 18,000 x g로 20분 동안 원심분리하여 새로운 펠렛을 수집하였다. 최종 펠렛을 10 부피의 완충액에 재-현탁시키고 -20℃에서 보관했다.
SH - EP1 /인간 α4β2 클론 세포로부터의 막의 제조: 40개의 150 mm 배양 접시로부터의 세포 펠렛을 모으고, 20 밀리리터의 얼음처럼 차가운 제조 완충액 중에서 Polytron (Kinematica GmbH, Switzerland)으로 균질화시켰다. 균질액을 4℃에서 48,000 g로 20분 동안 원심분리시켰다. 결과적으로 수득된 펠렛을 20 mL의 얼음처럼 차가운 제조 완충액에 재-현탁시키고 -20℃에 보관했다.
분석 당일에, 동결된 막을 해동시키고, 48,000 x g로 20분 동안 스핀(spin)시켰다. 상층액을 경사분리(decant)시키고 버렸다. 펠렛을 둘벡코 인산염 완충 염수(Dulbecco's phosphate buffered saline)(PBS, Life Technologies) pH 7.4에 재현탁시키고, Polytron으로 6초 동안 균질화시켰다. 우혈청 알부민을 표준으로 이용한, Pierce BCA Protein Assay Kit(Pierce Chemical Company, Rockford, IL)를 이용하여 단백질 농도를 결정했다.
막 제조물(인간의 경우, 약 50 ㎍ 및 랫트 α4β2의 경우, 200-300 ㎍ 단백질)을 경쟁 화합물(0.01 nM 내지 100 μM) 및 5 nM [3H]니코틴의 존재 하에 얼음 상에서 2 내지 3시간 동안 PBS (각각 50 ㎕ 및 100 ㎕) 중에서 인큐베이션시켰다. 비-특이적 결합을 감소시키기 위해 0.33% 폴리에틸렌이민(w/v)에 미리 적신 GF/B 필터를 이용하여 다중-매니폴드 조직 수집기(multi-manifold tissue harvester)(Brandel, Gaithersburg, MD) 상에서의 신속 여과에 의해 인큐베이션을 종료시켰다. 조직을 PBS, pH 7.4에서 3회 세정했다. 신틸레이션 용액(Scintillation fluid)을 세척된 조직을 포함하는 필터에 첨가하고 평형화시켰다. 그 후, 액체 신틸레이션 카운팅(liquid scintillation counting)(2200CA 트리-Carb LSC, Packard Instruments, 50% 효율 또는 Wallac Trilux 1450 MicroBeta, 40% 효율, Perkin Elmer)에 의해 막에 결합된 방사성활성을 측정하기 위해 필터를 카운팅하였다.
데이터는 분당 붕해(disintegration per minute, DPM)로 표현했다. 각 분석 내에서, 각 점은 2 내지 3개의 반복 재현값(replicate)을 가졌다. 각 점에 대한 반복 재현값의 평균을 구하고, 약물 농도의 로그 값 대비 그래프로 작성했다. 결합의 50% 억제를 가져오는 화합물의 농도인 IC50은 최소자승 비-선형 회귀(least square non-linear regression)에 의해 결정하였다. Ki 값은 하기의 Cheng-Prussof 식 (1973)을 이용하여 계산했다:
Ki = IC50/ (1 + N/Kd)
식 중에서, N은 [3H]니코틴의 농도이고, Kd는 니코틴의 친화도(3 nM, 별개의 실험에서 결정됨)이다.
α7 NNR 서브타입
150 내지 250 g의 랫트 (암컷, Sprague-Dawley)를 12시간 명/암 사이클 상에서 유지시키고, 물과 PMI Nutrition International, Inc.에 의해 공급된 사료에 대한 자유로운 접근을 허용했다. 동물을 70% CO2로 마취시키고, 참수시켰다. 뇌를 제거하고, 얼음처럼 차가운 플랫폼상에 배치했다. 해마를 제거하고, 10 부피(중량:부피)의 얼음처럼 차가운 제조 완충액 (137 mM NaCl, 10.7 mM KCl, 5.8 mM KH2PO4, 8 mM Na2HPO4, 20 mM HEPES (유리 산), 5 mM 요오도아세트아미드, 1.6 mM EDTA, pH 7.4) 중에 넣고; 메탄올에 100 μM의 최종 농도까지 용해시킨, PMSF를 첨가하고, 현탁액을 Polytron에 의해 균질화시켰다. 균질액을 4℃에서 18,000 x g로 20분 동안 원심분리시키고, 결과적으로 수득된 펠렛을 10 부피의 얼음처럼 차가운 물에 재현탁시켰다. 얼음에서 60분의 인큐베이션 후, 4℃에서 18,000 x g로 20분 동안 원심분리하여 새로운 펠렛을 수집하였다. 최종 펠렛을 10 부피의 완충액에 재-현탁시키고 -20℃에서 보관했다.
분석 당일에, 조직을 해동시키고, 18,000 x g로 20분 동안 원심분리하고, 얼음처럼 차가운 PBS (Dulbecco's Phosphate Buffered Saline, 138 mM NaCl, 2.67 mM KCl, 1.47 mM KH2PO4, 8.1 mM Na2HPO4, 0.9 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, Invitrogen/Gibco, pH 7.4)에 약 2 mg 단백질/mL의 최종 농도까지 현탁시켰다. 우혈청 알부민을 표준으로 이용하여, Lowry 등(J. Biol. Chem. 193: 265 (1951))의 방법에 의해 단백질을 측정했다.
[3H]MLA의 결합은 그와 같은 방법에 대해 참조에 의해 본 명세서에 포함된, Davies 등(Davies et al., Neuropharmacol. 38: 679 (1999))의 방법의 변형을 이용하여 측정했다. [3H]MLA (비활성(specific activity) = 25-35 Ci/mmol)은 Tocris로부터 수득했다. 21℃에서의 2시간의 인큐베이션을 이용하여 [3H]MLA의 결합을 결정했다. 48-웰 마이크로-타이터(micro-titre) 플레이트에서 인큐베이션을 수행하고 300 ㎕의 최종 인큐베이션 부피 중 웰 당 약 200 ㎍의 단백질을 포함시켰다. 인큐베이션 완충액은 PBS였고, [3H]MLA의 최종 농도는 5 nM이었다. 결합 반응은 주변 온도에서 Brandel Tissue Harvester를 이용하여, 유리 섬유 필터(GF/B, Brandel) 상에서 결합된 리간드를 포함하는 단백질의 여과에 의해 완료시켰다. 비-특이적 결합을 감소시키기 위해, 필터를 0.33 % 폴리에틸렌이민을 함유한 탈이온수에 적셨다. 각 필터를 주변 온도에서 PBS (3 x 1 mL)로 세척했다. 비-특이적 결합은 선택된 웰 중에 50 μM 비-방사성 MLA의 함유에 의해 결정했다.
테스트 화합물에 의한 [3H]MLA 결합의 억제는 선택된 웰에 테스트 화합물의 7개의 상이한 농도를 포함시키는 것에 의해 결정했다. 각 농도를 3배수로 재현했다. IC50 값은 특이적 [3H]MLA 결합의 50 퍼센트를 억제한 화합물의 농도로 추정되었다. nM로 보고된, 억제 상수 (Ki 값)는 Cheng 등(Cheng et al., Biochem. Pharmacol. 22: 3099-3108 (1973))의 방법을 이용하여 IC50 값으로부터 계산했다.
선택성 대 말초 nAChR
인간 근육 nAChR 서브타입에서의 상호작용
근육형 nAChR의 활성화는 배아 횡문근육종(rhabdomyosarcoma)으로부터 유래된, 인간 클론계(human clonal line) TE671/RD에서 수립되었다 (Stratton et al., Carcinogen 10: 899 (1989)). 이 세포들은 근육형 nAChR에 유사한, 약리학적(Lukas, J. Pharmacol. Exp. Ther. 251: 175 (1989)), 전기생리학적(Oswald et al., Neuroscl. Lett. 96: 207 (1989)), 및 분자생물학적 프로파일 (Luther et al., J. Neurosci. 9: 1082 (1989))을 갖는 수용체를 발현한다.
TE671/RD 세포들은 통상적인 프로토콜에 따라 증식 성장기(proliferative growth phase)에서 유지시켰다 (Bencherif et al., Mol. Cell. Neurosci. 2: 52 (1991) and Bencherif et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 257: 946 (1991)). 세포들을 10% 말 혈청 (Gibco/BRL), 5% 우태혈청 (HyClone, Logan UT), 1 mM 소디움 피루베이트, 4 mM L-글루타민, 및 50,000 유닛의 페니실린-스트렙토마이신(Irvine Scientific)을 포함하는, 둘벡코 변형 이글 배지(Dulbecco's modified Eagle's medium) (Gibco/BRL)에서 배양했다. 세포들이 80% 컨플루언시(confluent)에 도달했을 때, 12 웰 폴리스티렌 플레이트(Costar)에 플레이팅했다. 세포들이 100% 컨플루언시에 도달했을 때, 실험을 수행했다.
니코틴 아세틸콜린 수용체(Nicotinic acetylcholine receptor, nAChR) 기능은 Lukas 등(Lukas et al., Anal. Biochem. 175: 212 (1988))에 의해 기술된 방법에 따라 86Rb+ 방출(efflux)을 이용하여 분석하였다. 실험 당일에, 성장 배지를 웰로부터 조심스럽게 제거하고 86루비듐 클로라이드 (106 μCi/mL)를 함유한 성장 배지를 각 웰에 첨가하였다. 세포를 최소 3시간 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 부하기(loading phase) 후에, 과량의 86Rb+를 제거하고, 세포들을 교란시키지 않도록 주의하면서, 표지-불포함 둘벡코 인산염 완충 염수(138 mM NaCl, 2.67 mM KCl, 1.47 mM KH2PO4, 8.1 mM Na2HPO4, 0.9 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, Invitrogen/Gibco, pH. 7.4)로 2회 세척했다. 다음, 세포들을 100 μM의 테스트 화합물, 100 μM의 L-니코틴 (Acros Organics) 또는 완충액 단독에 4분 동안 노출시켰다. 노출기 후에, 방출된 86Rb+를 함유한 상층액을 제거하고 신틸레이션 바이알로 옮겼다. 신틸레이션 용액을 첨가하고 방출된 방사성을 액체 신틸레이션 카운팅에 의해 측정하였다.
각 분석 내에서, 각 점은 2회의 반복 재현값(repliate)을 가졌고, 이들을 평균했다. 86Rb+ 방출량을 양성 대조군 (100 μM L-니코틴) 및 음성 대조군(완충액 단독)에 비교하여 대조군의 L-니코틴 방출 대비 퍼센트 방출을 결정했다.
적합한 경우, 테스트 화합물의 투여량-반응 곡선을 결정하였다. 개별적인 화합물에 의한 최대 활성화 (Emax)를 L-니코틴에 의해 유도된 최대 활성화의 백분율로 결정하였다. 특정 이온 흐름(flux)의 최대 활성화의 50%를 가져오는 화합물 농도(EC50)도 결정하였다.
랫트 신경절 nAChR 서브타입에서의 상호작용
랫트 신경절 nAChR의 활성화를 랫트 부신 수질의 종양으로부터 유래된, 신경릉(neural crest) 기원의 크롬친화성세포종 클론 계통 PC12 상에 수립했다. 이 세포들은 신경절-유사 nAChR을 발현한다 (Whiting et al., Nature 327: 515 (1987); Lukas, J. Pharmacol . Exp . Ther . 251: 175 (1989); Whiting et al., Mol . Brain Res. 10: 61 (1990) 참조).
랫트 PC12 세포들을 통상적인 프로토콜에 따라 증식 성장기(proliferative growth phase)에서 유지시켰다 (Bencherif et al., Mol . Cell . Neurosci . 2: 52 (1991) and Bencherif et al., J. Pharmacol . Exp . Ther . 257: 946 (1991)). 세포들을 10% 말 혈청 (Gibco/BRL), 5% 우태혈청 (HyClone, Logan UT), 1 mM 소디움 피루베이트, 4 mM L-글루타민, 및 50,000 유닛의 페니실린-스트렙토마이신(Irvine Scientific)을 포함하는, 둘벡코 변형 이글 배지(Dulbecco's modified Eagle's medium) (Gibco/BRL)에서 배양했다. 세포들이 80% 컨플루언시에 도달했을 때, 12 웰 폴리스티렌 플레이트(Costar)에 플레이팅했다. 세포들이 80% 컨플루언시에 도달했을 때, 실험을 수행했다.
니코틴 아세틸콜린 수용체(nAChR) 기능은 Lukas 등(Lukas et al., Anal. Biochem. 175: 212 (1988))에 의해 기술된 방법에 따라 86Rb+ 방출을 이용하여 분석하였다. 실험 당일에, 성장 배지를 웰로부터 조심스럽게 제거하고 86루비듐 클로라이드 (106 μCi/mL)를 함유한 성장 배지를 각 웰에 첨가하였다. 세포를 최소 3시간 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 부하기 후에, 과량의 86Rb+를 제거하고, 세포들을 교란시키지 않도록 주의하면서, 표지-불포함 둘벡코 인산염 완충 염수(138 mM NaCl, 2.67 mM KCl, 1.47 mM KH2PO4, 8.1 mM Na2HPO4, 0.9 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, Invitrogen/Gibco, pH. 7.4)로 2회 세척했다. 다음, 세포들을 100 μM의 테스트 화합물, 100 μM의 L-니코틴 (Acros Organics) 또는 완충액 단독에 4분 동안 노출시켰다. 노출기 후에, 방출된 86Rb+를 함유한 상층액을 제거하고 신틸레이션 바이알로 옮겼다. 신틸레이션 용액을 첨가하고 방출된 방사성을 액체 신틸레이션 카운팅에 의해 측정하였다.
각 분석 내에서, 각 점은 2회의 반복 재현값을 가졌고, 이들을 평균했다. 86Rb+ 방출량을 양성 대조군 (100 μM L-니코틴) 및 음성 대조군(완충액 단독)에 비교하여 대조군의 L-니코틴 방출 대비 퍼센트 방출을 결정했다.
적합한 경우, 테스트 화합물의 투여량-반응 곡선을 결정하였다. 개별적인 화합물에 의한 최대 활성화 (Emax)를 L-니코틴에 의해 유도된 최대 활성화의 백분율로 결정하였다. 특정 이온 흐름의 최대 활성화의 50%를 초래하는 화합물 농도(EC50)도 정의하였다.
신규 물체 인식( Novel Object Recognition )
3회 시도 신규 물체 인식 테스트(three-trial novel object recognition test)를 이용하여 기억력을 평가하였다. 제1일(탐색적 시도(exploratory trial))에, 랫트를 6분 동안 개방 영역(open arena)(44.5 x 44.5 x 30.5 cm)을 탐색할 수 있게 했다. 제2일 (획득(acquisition) 시도)에, 랫트를 3분 동안 두 개의 동일한 물체(모두 물체 A)의 존재 하에 3분 동안 동일한 영역을 탐색할 수 있게 했다. 제3일(유지 또는 회상(recall) 시도)에, 두 개의 상이한 물체, 익숙한 물체 A와 신규 물체 B의 존재 하에 동일한 동물을 3분 동안 영역을 재탐색할 수 있게 하는 것에 의해, 성과를 평가하였다. 24시간의 시도간 간격(inter-trial interval)을 3회의 NOR 시도 간에 배치했다. 인식 기억력(recognition memory)은 회상 시도기(recall trial) 동안 신규 물체(물체 B) 대 익숙한 물체(물체 A)를 탐색하는데 소요된 시간을 비교하는 것에 의해 평가했다. 인식 지수(recognition index)는 각 동물에 대해 평가하고, 비 ((시간 B/시간 A + 시간 B) x 100)로 표현했다.
생물학적 데이터의 요약
인 비트로 약리학
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 인 비트로 일차 약리학 데이터의 요약이 표 4에 제시되고 하기에서 상세하게 검토된다.
일차 약리학 및 선택성: (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 랫트 해마 막에 있는 랫트 원형의(native) α7 수용체로의 [3H]메틸카코니틴 (MLA) 결합을 100 nM의 Ki로 억제했다.
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 1470 nM의 Ki로 [3H]-니코틴의 인간 재조합 α4β2 니코틴 수용체로의 결합을 억제하고 4120 nM의 Ki로 [3H]에피바티딘의 랫트의 원형 α4β2 수용체로의 결합을 억제했다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 또한 인간의 원형 신경절-타입 니코틴 수용체(α3β4일 수 있음)에 대한 감소된 친화도를 보이고, 48 μM의 Ki 로 [3H]에피바티딘의 SH-SY5Y 막 중의 수용체로의 결합을 억제했고, 인간의 원형 근육-타입 수용체(α1βγδ일 수 있음)에 대한 감소된 친화도를 보이고 136 μM의 Ki 로 [3H]에피바티딘의 TF-671 막 중 수용체로의 결합을 억제했다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 19 μM의 Ki 로 [3H]에피바티딘의 SH-EP1 막 중의 인간 재조합 α4β4 수용체로의 결합을 억제했다.
표 4. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 인 비트로 약리학의 요약
표적 친화도 및 활성화
랫트 해마 (α7) Ki 0.1 μM
랫트 피질 결합 Ki 4.12 μM
인간 재조합 ( SH - EP 1) α4β2 결합 Ki 1.47 μM
인간 신경절 ( SH - SY5Y ), K i 48 μM
인간 ( TE671 / RD ) 근육, K i 136 μM
인간 재조합 ( SH - EP1 ) α4β4, Ki 19 μM
인 비보 약리학
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 인 비보 약리학 데이터의 요약이 표 5에 제시되고, 하기에서 상세하게 검토된다.
표 5
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)
-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염에 대한
NOR 결과의 요약
신규 물체 인식 모델 (NOR) 결과
최소 유효량 (MED)
효과의 지속시간		 MED= 0.084 μmol/kg
지속시간 6 h (0.1mg/kg)
지속시간 18 h (0.3mg/kg)
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 정상 랫트에서 경구 투여 후 신규 객체 인식(novel object recognition, NOR)에 의해 평가된 바와 같이 장기 시각적 삽화적(episodic)/선언적 기억력을 향상시켰다. 본 연구의 결과가 도 1에 제시된다. 획득 시도 24시간 후 비히클-처리군의 인식 지수는 54±1%였고, 이는 이 군이 이 지연 후에 익숙한 물체를 인식하지 못한다는 것을 보여준다. 대조적으로, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드로 처리된 동물은 0.84 μmol/kg 투여량 수준에서 70±4%의 인식 지수 및 0.28 μmol/kg 투여량 수준에서 74±3%를 보였다.
후속 NOR 연구(도 2)에서, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 최소 효과 투여량(minimum effect dose, MED) 수준은 0.084 μmol/kg였고, 이는 랫트가 테스트된 모든 투여량 수준에서 익숙한 물체를 인식할 수 있었다는 것을 시사한다. "회상 단독(recall only)" 세션; 부분 그룹(subset)의 동물들에게는 1일차(즉, 탐색 세션) 및 2일차(즉, 획득 세션)에 물을 경구로 투여하고, 그 후, 3일차(즉, 회상 세션)에 0.28 μmol/kg (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드를 경구로 투여했다. 단일 경구 투여 후에도, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 이 투여량 수준에서 인지-촉진(pro-cognitive) 효과를 보였다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 대조군보다 유의성 있게 높은 인식 지수를 보였고, 이는 급성 투여 후, 익숙한 물체의 인식을 나타냈다. 65%에서의 점선은 생물학적 인지 강화 효과에 대한 본 발명자들의 기준을 나타낸다. *P < 0.05.
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드를 정상 랫트에서 NOR 작업에서 효과의 지속기간에 대해 평가했다. 본 연구의 결과는 도 3에 제시된다. 회상 시도에서 투여 후 0.5시간차 및 24시간차에 비히클-처리군의 인식 지수는 각각 51±1% 및 53±4%였고, 이는 이 군이 이 지연 후에 익숙한 물체를 인식하지 못한다는 것을 보여준다. 대조적으로,(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (0.28 μmol/kg: 경구)로 처리된 동물은 0.5시간차에 68±4%, 2시간차에 71±2% 및 6시간차에 62±2%의 인식 지수를 보여서, 랫트가 투여 후 6시간까지 익숙한 물체를 인식할 수 있다는 것을 시사했다.
또한, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (0.84 μmol/kg: 경구)로 처리된 동물은 0.5시간차에 59±2%, 2시간차에 63±2%, 6시간차에 68±3%, 및 18시간차에 68±3%의 인식 지수를 보여서, 랫트가 이 투여량 수준의 투여 후 18시간까지 익숙한 물체를 인식할 수 있다는 것을 시사했다(도 4). 65%에서의 점선은 생물학적 인지 강화 효과에 대한 본 발명자들의 기준을 나타낸다. (*P < 0.05).
전기생리학(electrophysiology)
화합물 A, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드, 및 화합물 B, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-4-플루오로벤즈아미드는 α7 NNR에서 모두 부분 효능제(partial agonist)이다. 그러나, 소위 험프 전류(hump current)를 유도하는 능력에 있어서, 상기 두 화합물 간에 현저한 차이가 존재한다. 험프 전류는 효능제 제거 후 내생 ACh와의 동시-적용(co-application) 동안 관찰되는 꼬리 전류(tail current)로 정의된다. 본 명세서에서 입증된 바와 같이, 화합물 A는 이 신경전달이 약화되는 것인, 정신병적 장애와 같은 상태에서 α7 기능을 조절하기 위한 개선된 프로파일 및 보다 큰 능력을 제공한다.
α7 니코틴 ACh 수용체와 화합물 A 및 B의 투여량-반응을 분석하였다. 화합물 B 및 화합물 A는 α7 니코틴 수용체에서 부분 효능제이다 (EC50 = 664 nM, 1.6 μM 및 EMAX = 46.6%, 54.4%). 도 5에 표시된 바와 같이, EC50 및 EMAX는 이 리간드들 간에 유사하다.
그러나, ACh와 화합물의 동시-적용은 도 6에 표시된 바와 같이, 이 두 리간드 간의 상당한 차이를 밝혔다. 화합물 B는 아마도 경쟁적 억제 때문에, ACh에 의해 생성되는 전류를 억제했고, 화합물 A는 ACh-유도 전류를 증가했다. 이 증가에 대한 하나의 가설은 화합물 A의 오르토스테릭 조절(orthosteric modulation) 능력이다.
또한, 도 7 및 도 8에 도시된 바와 같이, Ach가 나노몰 농도의 화합물 B 또는 화합물 A와 함께 적용되는 경우, 상당한 차이를 발견했다.
도 7A는 니코틴 α7 수용체의 활성화에 관해, 리간드 (Compound A, 200 nM)의 아세틸콜린 (100 μM)과의 상호작용을 측정하기 위해 Dynaflow 칩을 부하(load)하는 실험적 설계를 나타낸다. 채널은 하기와 같이 표시되었다: 대조군 용액 (채널 #2), 리간드 자체의 적용 (채널 #3), 아세틸콜린 자체의 적용 (채널 #1), 및 아세틸콜린과 리간드의 혼합물의 적용 (채널 #4).
도 7B는 상이한 적용 순서로 수득된 대표적인 전류 곡선을 보여준다:
곡선 1, 도 7B: 상기 곡선 위의 막대는 ACh 적용의 시간을 나타낸다. 상기 곡선은 70 μM ACh의 1초 적용에 의해 유도된 전류를 나타낸다. 상기 곡선은 ACh의 1초 적용 동안 채널 #2부터 채널 #1로의 셀(cell)의 이동 및 다시 채널 2로의 셀의 복귀로부터의 결과를 보여준다(세척(washout)). ACh의 적용은 세척 후 신속한 회복과 함께 견실한 전류의 활성화를 가져왔다.
곡선 4, 도 7B: 곡선 4는 리간드 및 ACh/리간드 혼합물의 적용 후 측정의 완료시 곡선 1의 반복을 나타낸다(회복).
곡선 2, 도 7B: 하향/상향(down/up) 화살표는 적용 시간을 나타낸다. 곡선 2는 200 nM의 화합물 A의 5초 적용을 나타낸다. 상기 곡선은 5초 동안 채널 #2로부터 채널 #3으로의 셀의 이동 결과를 보여준다. 200 nM 농도의 화합물 A 단독은 견실한 거대 전류(macro current)를 생성하지 않는다.
곡선 3, 도 7B: 곡선 3은 ACh와 화합물 A의 적용의 상호작용을 나타낸다. 곡선 3은 셀의 채널 #2부터 #3으로의 이동 (2 초), 채널 #4로의 이동 (1 초) 및 채널 #3으로의 이동 (2 초) 및 채널 #2로의 이동 (세척)의 결과를 보여준다. ACh의 적용 후 화합물 A의 적용 때문에, 현저한 "험프(hump)" 전류가 생성된다. 이 전류는 곡선 1과 4의 비교에서 볼 수 있는, ACh, 또는 곡선 2에서 볼 수 있는, 화합물 A에 의한 α7 수용체 단독의 활성화의 결과가 아니다. 오히려 곡선 3은 ACh와 화합물 A의 적용의 상호작용의 예를 보여준다.
도 7C는 화합물 A의 상이한 농도(100 - 500 nM 범위)로 수득된 험프 전류의 절대값의 평균 (n=4)을 나타낸다. 본 발명자들은 약 500 nM의 EMAX를 갖는 농도 의존적 전류의 증가 (EC50 = 120 nM)를 관찰했다.
유사하게, 도 8A, 8B, 및 8C는 화합물 B에 대해 수득된 결과를 나타낸다. 도 7A-C와 도 8A-C의 비교시, 화합물 B에 비해 화합물 A를 ACh와 동시-적용하는 경우, 상당한 차이를 관찰할 수 있다. 화합물 A는 ACh-유도 전류를 강화한다.
포르말린 테스트
급성 통증의 가장 임상적DLS 예측 스크리닝 모델 중 하나는 마우스에서의 포르말린 테스트이다 (LeBars et al., 2001). 최초에, Dubuisson 및 Dennis (1977)에 의해 기술된 이 패러다임에서, 희석된 포르말린 용액을 개체(랫트 또는 마우스)의 뒷발의 발바닥 면에 주사하고, 통각(nociceptive) 거동을 측정한다: 예를 들면, 주사된 발의 핥기(licking) 및 물기(biting). 반응의 두 단계가 관찰된다. 먼저, 주사 직후에 개시되어 5 내지 10분간 지속되는 초기 단계, 및 뒤이은 주사 후 15 내지 60분 동안 지속될 수 있는 후기(late phase). 통각 반응은 초기의 직접 화학적 자극 및 보다 후기의 염증/지속적 통증에 기인된다 (Dubuisson and Dennis, 1977). 후기 단계의 반응은 또한 초기 단계 동안 구심성 신경자극 연발(afferent barrage)에 의한 척수의 정보 처리의 변화에 의존적이다 (Coderre et al., 1990). 이 테스트의 장점은 테스트의 두 단계에서 약물의 진통 효과를 변화시킬 가능성을 연구하기 위해 동일한 분석에서 두 개의 상이한 종류의 자극을 이용한다는 것이다 (Tjolsen and Hole, 1997).
개체(약 20 내지 25 그램의 성체 수컷 CD-1 마우스(Charles River, Raleigh, NC))를 그들의 홈 케이지에서 꺼내고 체중을 측정하고, 20 내지 30분의 순응(acclimation)기 동안 투명한 Plexiglas™ 관찰 박스에 배치했다. 그 후, 마우스를 관찰 챔버로부터 꺼내고 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (0.9% 염수 중 히드로클로라이드염) (1, 3 또는 10 mg/kg s.c. (유리 염기 기준으로 계산됨)), 모르핀 (5mg/kg; s.c.) 또는 0.9% 염수 비히클을 1 mL/kg의 용량으로 피하에 투여했다. 그 후, 마우스를 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 및 모르핀에 대한 30분의 미리 정해진 예비처리 시간 동안 상기 챔버로 복귀시켰다.
테스트 화합물 예비처리 시간 후에, 동물에 포르말린 용액 (10% 인산염 완충 포르말린 용액 (Sigma): 증류수의 1:4 희석으로부터 유래된 2.5%)을 주사했다. 개체의 지정된 발을 가볍게 쥐고, 포르말린 용액을 배면의 중간에서 발의 피내로 주사했다. 일단 주사한 후, 개체를 즉시 관찰 챔버 내로 복귀시키고, 단계(phase) I의 개시를 표시하기 위해 타이머를 작동시켰다. 각 개체를 40분의 전체 세션 동안 비디오로 촬영했다. 테이프를 평가(scoring)할 때, 40-분 세션 동안 5-분 간격으로 1분 동안 각 개체를 관찰했다. 1분 간격 동안 핥기에 소요된 시간을 기록하고, 발 선호(paw favoring)의 존재 또는 부재를 표시했다.
데이터 분석을 위해, 테스트의 단계 I은 포르말린 주사 후 0 내지 5분으로 정의하고, 단계 II는 포르말린 주사 후 20 내지 40분으로 정의하였다. 상기 시간 동안 1분 간격 동안 핥기에 소요된 시간을 기록하고 평균±S.E.M.으로 그래프를 작성했다. 테스트 군 전체의 비교를 위해, 처리를 종속 변수로 하고, 세션의 각 단계에 대한 일원 분산 분석(ANOVA)을 수행했다. 특정한 그룹 차이를 결정하기 위해 적합한 경우, 사후 분석을 수행했다.
결과는 단계 I의 핥기에 소요된 시간을 감소시키는데 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 통계적으로 유의성 있는 투여량은 없었으나, 10 mg/kg (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 포르말린 테스트의 단계 II에서 발을 핥는데 소용된 시간을 감소시키는데 유의했다는 것을 보여준다 (P<0.05). 양성 대조군 모르핀 (5 mg/kg; s.c.)은 테스트의 두 단계 모두에서 효과가 있었다. 이 데이터는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 화학적으로 유도된 염증성/지속성 통증에 대해 진통 잠재력(analgesic potential)을 갖는다는 것을 나타낸다.
단계 I(포르말린 적용 후 0 내지 5분) 및 단계 II(20 내지 40분)에 대한 전체 시간 동안 각 동물이 평가된 것인 최초의 비디오테이프의 뒤이은 분석은 데이터에 대한 유사한 경향을 밝혔으나, 단계 I 또는 단계 II에서 영향받은 발을 핥는데 소요된 시간의 감소에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과의 통계적 유의성을 달성하지 못했다.
하기를 참조한다: Coderre TJ , Vaccarino AL , Melzack R (1990), Central nervous system plasticity in the tonic pain response to subcutaneous formalin injection, Brain Res. 535:155-158; Dubuisson D and Dennis SG (1977), The formalin test: A quantitative study of the analgesic effects of morphine, meperidine, and brain stem stimulation in rats and cats, Pain 4: 161-174; Malmberg AB and Bannon AW (2002), Unit 8.9: Models of nociception: hot-plate, tail-flick, and formalin tests in rodents, Current Protocols in Neuroscience; and Tjolsen A and Hole K (1997), Animal models of analgesia, In: Handbook of Experimental Pharmacology Volume 130: The Pharmacology of Pain (Eds. A. Dickenson and J.-M. Besson), Springer Verlag, New York pp. 1-20.
완전 프로인트 아쥬반트 ( Complete Freund's Adjuvant , CFA )-유도 열 통각과민
랫트에서 완전 프로인트 아쥬반트(CFA)의 주사는 일반적으로 단일-관절염(mono-arthritis)(골관절염) 및 기타 염증성 상태의 치료에서 약물로 사용할 잠재력을 갖는 화합물을 평가하기 위해 이용된다. 통각과민의 징후는 24시간 내에 일어난다 (Schaible and Grubb, 1993).
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드를 Walker 및 동료들(2003)에 의해 기술된 방법과 유사한 방법을 이용하여 랫트에서 CFA-유도 열 통각과민의 가능한 진통 효과에 대해 평가하였다. 요약하면, 수용된 180±20 g 체중의 성체 수컷 Sprague-Dawley 랫트 (BioLasco, Taiwan)를 그룹당 n=8의 처리군에 무작위로 배정했다. 각 동물에 실험 테스트 전 24시간에 우측 뒷발에 CFA (DIFCO, 264010; 0.1% 용액)의 족저내(subplantar) 주사를 적용했다. 30℃로 설정된 온도 조절 유리 바닥을 갖는 발/꼬리 자극 진통 측정기(Paw/Tail stimulator analgesia meter) (IITC Model-336G, IITC, USA)를 이용하여 열 통각과민을 테스트하였다. 개체를 상승된 유리 바닥 위의 플라스틱 박스에 배치하고, 상기 유리 바닥 아래에 위치한 광 빔을 우측 뒷발의 발바닥에 비추었다. 동물이 열 자극으로부터 발을 회피하는데 걸리는 시간이 자동으로 기록되었다. 광의 강도는 (CFA-적용 전) 12 내지 14초로부터 평균 그룹 기준(baseline) 잠복기를 유발하도록 조정하고 20초의 컷-오프 잠복기를 부여했다. 발 회피(paw withdrawl)의 잠복기를 각 랫트에 대해 수득하고 열 통증 역치(heat pain threshold)로 정의하였다.
CFA 주사 후 24시간 경과시, 회피의 잠복기가 기준의 75% 미만인 경우에만 개체를 (열 통각과민의 명확한 존재로) 예비-선택하였다. 테스크 물질인 모르핀과 비히클을 0시간차에 피하(s.c.) 주사에 의해 투여하였다. 열 통각과민의 처리-후 수준을 처리 60분 후에 측정했다. 테스트 물질 처리 군과 비히클 대조군을 비교하기 위해, Dunnett 검정 후 일원 분산분석(one-way ANOVA)을 적용했다. P<0.05 수준에서 활성은 유의성 있는 것으로 간주하였다.
전반적으로, 0.1, 1 또는 10 mg/kg의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 피하(s.c.) 투여는 비히클(0.9% 염수) 대조군 대비 랫트에서 CFA-유도 열 통각과민에 대한 투여 1시간 후 유의성 있는 진통 효과와 연관되지 않았다. 대조적으로, 동시에 수행된 기준 표준 모르핀 (3 mg/kg s.c.)은 투여 1시간 후 유의성 있는 진통 활성을 생성했다. 도 13을 참조한다. 하기를 참조한다: Schaible H-G and Grubb BD (1993), Afferent and spinal mechanisms of joint pain, Pain 55: 5-54; and Walker KM, Urban L, Medhurst SJ, Patel S, Panesar M, Fox AJ and Mcintyre P (2003), The VR1 antagonist capsazepine reverses mechanical hyperalgesia in models of inflammatory and neuropathic pain, JPET 304: 56-62.
스트렙토조토신 ( STZ )-유도 당뇨병성 신경병증( 이질통에 의해 입증됨)
당뇨병의 주요한 합병증인 말초 신경병증은 종종 자발통(spontaneous pain) 또는 정상적으로 무독성인 자극과의 접촉으로부터의 통증의 인식을 종종 초래한다. 그와 같은 신경병성 통증은 당뇨병 환자의 20 내지 24%, 또는 전세계적으로 약 3천만명이 경험하고 있다 (Schmader, 2002). 랫트의 스트렙토조토신(STZ)-유도 당뇨병 모델은 말초 신경병증에 대한 치료 잠재력을 제공하는 테스트 화합물의 효능을 평가하고 그들의 추정적인 작용 메커니즘을 이해하기 위한 수단을 제공한다. 이 모델에서, 췌장 β 및 α-세포에 비가역적 손상을 유발하는 것에 의해 임상적 당뇨병을 모사하는 항생제인 STZ의 단일 주사는 만성 고혈당증, 신경 장애 및 통증 민감도를 초래한다. 현재의 연구는 통증의 평가인 기계적 이질통에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 조사하기 위해, 당뇨성 신경병증의 STZ 랫트 모델을 이용한다.
당뇨병은 각 랫트의 미정맥에 시트레이트 완충액(pH=6)에 용해된 스트렙토조토신(60 mg/kg)의 0.5 ml 주사에 의해 유도되었다. 당뇨병의 발병은 연구 3일차에 모든 동물의 혈액 글루코오스 수준(BGL)을 측정하는 것에 의해 확인하였다 (BGL> 300 mg/dL). 연구 14일차에 BGL을 다시 측정하고 연구 21일차에 촉각 이질통(tactile allodynia)을 보이는 동물만 BGL에 대해 다시 테스트하였다. 연구 14일차에 촉각 이질통을 보이지 않은 동물들은 연구 16일차에 BGL을 측정했다. 이 동물들을 연구 23일차에 BGL에 대해 다시 테스트하였다.
(2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (0.1, 1 또는 10 mg/kg p.o.)를 연구 14일차 또는 연구 16일차부터 시작하여 1일 1회씩 물 중 히드로클로라이드 염의 용액으로서 투여하고 이를 각각 연구 21일차 또는 연구 23일차까지 지속했다. 대조군 물질 가바펜틴 (0.9% 염수 중 용액, 150 mg/kg i.p.)은 이질통 테스트 일자에만 투여했다. 테스트 물질, 비히클, 또는 대조군 물질 투여는 연구 14일차 이질통의 평가에 근거했다. 연구 14일차에 이질통이 존재하지 않는 경우, 해당 동물을 연구 16일차에 다시 평가했다. 연구 14일차 및 21일차 또는 16일차 및 23일차에, 테스트 물질 투여 30분 후에 통증 반응을 측정했다.
이질통 평가를 위해, Chaplan 등 (1994)의 방법에 따라, 본 프레이 필라멘트(Von Frey filament)를 사용했다. 요약하면, 랫트를 울타리 내에 넣고 금속 메쉬 표면 상에 배치하였으나, 자유롭게 움직일 수 있게 했다. 환경적 교란을 줄이기 위해, 랫트의 캐빈을 적색 셀로판으로 덮었다. 탐색적 행동의 중단 후에 테스트를 시작했다.
설치류는 발이 예상치않게 접촉된 경우, 발 회피 반사를 보인다. 주어진 길이 및 직경의 본 프레이 섬유의 끝을 직각으로 피부에 누르는 경우, 연구자가 상기 섬유가 굽어질 때까지 프로브를 지속적으로 진행시키는 한, 적용의 힘이 증가된다. 섬유가 굽어진 후, 프로브가 진행되어, 추가적인 힘의 적용 없이, 섬유가 더 굽어지게 되었다. 동물은 발을 회피하는 것에 의해 감각(sensation)을 나타낼 것이다. 최초에 선택된 필라멘트에 대한 발 회피 반응의 부재시, 보다 강한 자극을 제공했다; 발 회피의 경우, 다음에 보다 약한 자극을 선택했다. 이 방식으로, 결과적으로 수득된 양성 반응과 음성 반응의 패턴을 이용하여 발 회피 역치를 결정했다.
일련의 본 프레이 모노필라멘트는 실제 힘의 개략적인 로그 크기(logarithmic scale)와 인지된 강도의 선형적 크기(linear scale)를 제공한다. 하기에 힘(g)과 그의 상응하는 모노필라멘트의 크기를 보여주는 표가 표시된다.
Figure 112011065525818-pct00011
모든 정규 분포된 데이터를 평균±SEM, 및 동물의 개별 값 및 뒤이은 스튜던트 T-검정 (소프트웨어: Microsoft® Excel)으로 표시한다. p 값 < 0.05은 유의성 있는 차이를 나타내는 것으로 간주된다. 이질통 데이터의 비-정규 분포 때문에, 이 데이터의 기술은 부정확한 속성 및 편중 분포(skewed distribution)를 나타내기 위해 평균(±SEM) 및 중앙값(median)으로 제공된다.
본 프레이 데이터는 각각의 뒷 다리를 회피하기 위해 필요한 최소의 힘(minimum force)(g)으로 제시된다. 통증 역치의 감소가 STZ 주사 후 14/16일차에 기록되었다. 이 감소는 본 프레이 필라멘트에 대한 동물의 감수성의 증가로 표현하였다. STZ 주사 전 기준시점에 비히클 처리 동물의 평균 및 그룹 중앙값 회피력(withdrawal force)은 57.57±2.43 (그룹 중앙값=60g)이었다. 연구 14/16일차에, 중앙값 발 회피력은 훨씬 더 낮아서 (20.5 - 22.14±2.36 g; 기준 대비 p <0.01; 중앙값 = 20.5g)이었고, 이는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 처리 전 촉각 이질통을 나타냈다. 연구 종료시(연구 21/23일차), 처리 후 촉각 이질통이 여전히 관찰되었다 (20.46±3.31 g; 기준 대비 p <0.01; 중앙값 = 8g).
전체적으로, 1 mg/kg (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 처리는 예비처리 (p<0.01) 또는 비히클 대조군 (p<0.05) 대비 연구 14/16일차에 그의 투여 30분 후에 이질통을 억제했다. 10 mg/kg 투여량의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 처리는 예비처리 대비 연구 14/16일차에 투여 30분 후 이질통을 억제했다 (p=0.012). 1 mg/kg 투여량의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 처리는 예비처리 대비 연구 21/23일차에 투여 30분 후 이질통을 억제했다 (p=0.012). 10 mg/kg 투여량의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 처리(Group 11M)는 비히클 대조군 대비 연구 21/23일차에 투여 30분 후 이질통을 억제했다 (p<0.05). 양성 대조군, 가바펜틴에 의한 처리는 예비처리 (연구 14/16일차 및 21/23일차; p<0.01) 또는 비히클 대조군 (연구 21/23일차; p<0.01) 대비, 모든 처리 일에 촉각 이질통을 유의성 있게 역전시켰다. 연구 종료 시(연구 21/23일차), 혈청 중의 인슐린 수준을 분석했다. 인슐린 수준의 유의성 있는 차이는 관찰되지 않았다. 모든 투여량의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드를 연구 14일차 또는 16일차에 개시하여 각각 연구 21일차 또는 23일차까지 매일 투여했다. 테스트 물질 주사(test article injection) 투여 전(TI 주사 전) 및 투여 30분 후(TI 주사 후) 통증 테스트를 수행했다. 연구 14일차 또는 16일차 및 21일차 또는 23일차에 통증 테스트 2시간 전에 양성 대조군, 가바펜틴을 투여했다. 양성 대조군, 가바펜틴에 의한 처리는 예비 처리 및 비히클 대비 모든 처리 일에 유의성있게 촉각 이질통을 역전시켰다: 연구 14/16일차에, 각각 처리 전 및 후에, 22.77±3.77 g (중앙값=15 g) vs. 45.62±4.24 g (중앙값=60 g), p<0.01; 연구 21/23일차에, 각각 처리 전 및 후에, 28.23±4.91 g (중앙값=20.5 g) vs. 50.88±4.12 g (중앙값=60 g), p<0.01; 연구 14/16일차에, 비히클군에서, 45.62±4.24 g (중앙값=60 g) vs. 26.61±4.41 g (중앙값=15 g), p<0.01; 연구 21/23일차에, 비히클군에서, 50.88±4.12 g (중앙값=60 g) vs. 20.46±3.31 g (중앙값=10 g), p<0.01.
종료 일에 본 프레이 테스트 직후에, 혈액을 채취했다. 연구의 종료시, 동물을 케타민/자일라진 용액(IP)으로 안락사시켰다. 약 0.5-0.7 ml의 혈액을 항응고제(K3 EDTA)를 포함하는 튜브에 심장천자를 통해 수집했다. 혈액 시료를 얼음에서 냉각시킨 상태로 유지하고, 채취 30분 내에 원심분리시켰다. 혈장을 수득하기 위해, 혈액을 3000 rpm으로 10분 동안 원심분리시켰다. 혈장을 표지된 튜브로 옮기고 바로 세운 상태로 약 -20℃에서 동결시켜 사용(shipment) 전까지 보관했다. 각 시료를 화합물 번호와 동물 번호로 표지했다.
연구 동안 모든 동물들은 체중이 증가했다. 그룹 간에 체중 증가의 유의성 있는 차이는 없었다.
평균 혈액 글루코오스 수준이 모든 동물에서 증가했다. 기준(baseline)은108.86±1.03 mg/dl였고, 연구 3일차에 390.99±6.47 mg/dl까지 증가했다. 그룹 간에 통계적으로 유의성 있는 차이가 관찰되지 않았다. 또한 연구 14일차의 이질통에 대한 결과에 근거하여 연구 14/16일차 및 연구 21/23일차에 높은 글루코오스 수준이 측정되었다. 연구의 종료시(연구 21일차 및 23일차), 평균 글루코오스 수준은 403.86±8.45 mg/dl였다.
연구 종료시, 혈청 중의 인슐린 수준을 분석했다. 연구 종료시 비히클 대조군에서 인슐린 수준은 0.79±0.41 ㎍/l였다. 처리 간에 인슐린 수준의 유의성 있는 차이는 관찰되지 않았다.
본 프레이 평가의 결과는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드가 비히클 처리군 대비 1 mg/kg 및 10 mg/kg의 투여량에서 당뇨성 신경병증 통증을 경감시키는데 효과적이라는 것을 나타낸다. 도 14를 참조한다.
하기를 참조한다: Chaplan SR, Bach FW, Pogrel JW, Chung JM, Yaksh TL (1994), Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw, J. Neurosci. Methods 53: 55-63; Schumader KE (2002), Epidemiology and impact on quality of life of postherpetic neuralgia and painful diabetic neuropathy, Clinical Journal of Pain 18: 350-354; and Sommer C (2003). Painful neuropathies, Curr . Opin . Neurol . 16: 623-628.
타입 2 당뇨병의 마우스 모델
타입 2 당뇨병의 정립된 모델인 db/db 마우스는 비만 표현형을 발현하고 또한 공통적으로 고혈당증, 고지질혈증 및 고인슐린혈증을 포함한 대사 증상을 발현하는 렙틴(leptin)-결핍 돌연변이체이다(Halaas et al., 1995 and Lee et al., 1996). 당뇨병의 이 실험 동물 모델을 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 체질량 및 여러 추가적인 대사 파라미터에 대한 효과를 결정하도록 설계된 연구에서 이용하였다.
이 연구에서, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드를 약 3주령부터 시작하여 7-주 연구 동안 지속해서 1일 1회 1.0 mg/kg으로 경구로(급식을 통해) 반복적으로 투여했다. 비당뇨성 이형접합체 한배자손(littermate) 마우스 (db/+; "Db"로 표시함)를 대조군으로 이용했다. 체중 및 사료 섭취량을 주당 2회 측정했다. α7 길항제 메틸리카코니틴(methyllycaconitine, MLA)도 db/db ("db" 로 표시됨) 또는 db/+ 마우스의 선택된 코호트에 1일 3 mg/kg으로 급식을 통해 동시에 투여했다. 7-주 투여 계획의 종료시, 총 증가율(전체 체중 증가) 및 평균 1일 사료 섭취량을 계산했다. 또한, 밤새 절식시킨 마우스에서 글루코오스 수준을 평가했다. 또한, 종양 괴사 인자-α(TNF-α), 트리글리세리드 및 글리코실화 헤모글로빈(HbA1c)의 측정을 위해 밤새 절식시킨 마우스로부터의 혈액 시료 분석물을 수집했다. 모든 데이터는 평균±SEM으로 표현했다. 조사된 각 파라미터에 대해, 모든 그룹 간의 차이는 사후 Neuman-Keuls 다중 비교 검정과 함께 일원 ANOVA에 의해 비교했다.
전체적으로, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 비만 db/db 마우스로의 7주 동안의 일별(daily) 투여는 비히클로 처리된 대조군 비만 db/db 마우스 대비 측정된 모든 파라미터에서 유의성 있는 감소를 초래했다. 총 체중 증가, 평균 1일 사료 섭취량, 글리코실화 HbA1c 수준 및 TNF-α의 혈장 농도의 경우, MLA의 병용-투여는 그 효과를 약화시켰다. 혈장 글루코오스 및 트리글리세리드의 감소는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 MLA의 병용-투여에 의해 유의성 있게 약화되지 않았으나, 그 역전을 향한 경향이 있었다.
도 15에 도시된 바와 같이, 처리의 7주의 종료시, 3주령과 10주령 사이에, 비히클 대조군-처리된 비만 그룹("db")에서 총 체중 증가는 마른(lean) 비히클 대조군 동물("Db")의 경우보다 유의성있게 더 컸다. 비교하면, 체중 증가는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드-처리된 비만 ("db-테스트 대상(Test Article)") 마우스에서 유의성 있게 더 낮았다. 현저하게, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로 벤즈아미드와 MLA를 병용-투여받은 동물들은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드만 투여받은 비만 랫트에 의해 보여진 감소된 체중 증가를 보이지 못했다.
도 16에 도시된 바와 같이, 비히클 대조군-처리된 비만 그룹("db")에서 1일 사료 섭취량은 마른 비히클 대조군 동물("Db")의 경우보다 유의성 있게 더 컸다. 평균 사료 섭취량은 비만 대조군 대비 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드-처리된 비만 ("db-테스트 대상") 마우스에서 유의성 있게 더 낮았다. 마른 마우스의 사료 섭취량은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 ("db-테스트 대상")에 의해 영향받지 않았다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 MLA를 병용-투여받은 동물들은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드만 투여받은 비만 랫트에 의해 보여진 감소된 1일 평균 사료 섭취량을 보이지 못했다.
도 17에 도시된 바와 같이, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 비만 마우스("db-테스트 대상")에서 공복 혈장 글루코오스 수준을 유의성 있게 억제하지 않았다. 그러나, 이 효과는 MLA와의 병용-투여에 의해 역전되지 않았다.
도 18에 도시된 바와 같이, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 비만 마우스("db-테스트 대상")에서 글리코실화 HbA1c 수준을 유의성 있게 억제했다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 글리코실화 HbA1c의 감소는 MLA와의 병용-투여에 의해 약화되었다.
도 19에 도시된 바와 같이, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 비만 마우스("db-테스트 대상")에서 염증촉진성 사이토카인 TNF 알파를 유의성 있게 억제했다. 이 효과는 알파7 길항제 MLA의 병용-투여에 의해 억제되었다.
도 20에 도시된 바와 같이, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 비히클-처리된 대조군("db") 대비 비만 마우스 ("db-테스트 대상")에서 유의성 있게 더 낮은 트리글리세리드 수준을 초래했다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드에 의한 트리글리세리드 수준의 감소는 MLA의 병용-투여에 의해 약화되지 않았다.
폐, 기도 과민성, Penh 측정
Hamelmann 등의 방법을 이용하여, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드를 마우스에서 기도 과민성의 가능한 억제에 대해 평가했다. 요약하면, 그룹당 12마리의 오브알부민 (OVA)-감작된 동물을 21일차, 23일차, 및 25일차에 25분 동안 에어로졸화된 5% OVA의 비강 흡입에 의해 부하시켰다. 마우스를 21일차부터 26일차까지 1일 2회 피하로(s.c.), 또는 21일차, 23일차 및 25일차에 오브알부민 에어로졸 부하(challenge) 30분 전에 1일 1회 기관내로(i.t.) 비히클 또는 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드로 처리하고, 26일차에 메타콜린 부하 또는 BALF(bronchoalveolar lavage fluid) 수집을 수행했다. 기준 표준인 덱사메타손을 21일차, 23일차, 및 25일차에 OVA 부하 60분 전에 1일 1회 및 26일차에 메타콜린 유발(provocatioon) 또는 BALF 수집 60분 전에 1일 1회 경구로(p.o.) 3 mg/kg을 투여했다. 강화된 휴지의 증가(Penh)가 기도 폐쇄의 지표로 작용하는 것인 전신 체적변동기록(whole body plethysmography)을 이용하여 기도 반응의 비침습적 측정을 수행했다. 흡입된 메타콜린에 대한 반응을 측정하고 개별적인 기준값의 백분율로 계산하였다. 비쌍대 스튜던트 t-검정(unpaired Student's t-test)을 이용하여 비히클 대조군과 샴(sham) 그룹 간의 비교를 수행했다; 비히클 대조군과 처리군 간의 비교를 위해 일원 ANOVA 및 Dunnett의 사후 분석을 적용했다. 통계적 유의성은 P<0.05에서 간주된다.
도 21은 오브알부민-감작화 마우스(ovalbumin-sensitized mice)에서 메타콜린 부하(challenge)에 대한 Penh 반응의 % 변화에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 보여준다. 메타콜린(10 및 30 mg/mL)에 대한 Penh 반응은 샴 대조군 대비 OVA-감작화 동물에서 유의성 있게 강화되었다. 3 mg/kg PO의 덱사메타손은 비히클-처리 OVA 동물 대비, 절대값 및 % 값 모두에서, Penh 값의 메타콜린 (10 및 30 mg/mL)-유도 증가의 유의성 있는 억제를 유발하여, 기도 과민성에 대한 효능을 나타냈다. 1일 2회 피하로(s.c.) 투여된 0.1, 1, 및 10 mg/kg (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 Penh 값의 메타콜린-유도 증가의 유의성 있는 억제를 유발했다; 10 mg/kg IT도 유의성 있는 억제와 연관되었다.
오브알부민 감작화 마우스에서 백혈구 수/및 감별 세포수(differential cell count) 및 % 백혈구 수/감별 세포 수에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과가 각각 도 Y 및 Z에 예시된다. 총 WBC, 호중구, 림프구, 단핵구 및 호산구의 유의성 있는 증가가 샴 대조군 대비 OVA-감작화 동물의 BALF에서 주목되었고, 이는 덱사메타손에 의해 유의성 있게 억제되었다. 피하로 투여된 10 mg/kg은 아니나, 0.1 및 1 mg/kg의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 BALF에서 총 WBC 및 호산구를 유의성 있게 감소시켰다; 피하로 투여된 10 mg/kg의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드는 단핵구를 감소시켰다; 림프구는 0.1 및 1 mg/kg SC 및 10 mg/kg IT에서 감소되었다.
이 결과는 덱사메타손 대비 1일 2회 피하로 투여된 0.1, 1 및 10 mg/kg 및 기관내로(i.t.) 투여된 10 mg/kg의 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 복수 투여는 OVA 감작화 마우스 모델에서 기도 과민성에 대한 유의성 있는 보호를 제공하고(마우스에서 전신 체적변동기록을 이용한 메타콜린 부하에 대한 감소된 Penh 반응에 의해 입증됨) BALF 중 호산구와 백혈구 수의 유의성 있는 감소와 연관된다(그러나, 일관성있는 투여량-반응 관계는 없음)는 것을 보여준다.
도 21은 오브알부민-감작화 마우스(ovalbumin-sensitized mice)에서 메타콜린 부하(challenge)에 대한 Penh 반응의 % 변화에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 비히클을 21일차부터 25일차까지 6일 연속으로 OVA 부하 30분 전에 피하로 1일 2회(bid) 투여하거나 또는 1일 1회 기관내로 투여했고, 마지막 투여는 26일차에 MCh 유발(provocation) 30분 전에 수행했다. Penh 값을 결정했다. 일원 ANOVA 및 뒤이은 Dunnett 검정을 OVA 면역화 비히클과 다른 처리군 간의 비교를 위해 적용했다. OVA-비히클 대조군 대비 *P<0.05.
도 22는 오브알부민 감작화 마우스에서 백혈구 수 및 감별 세포수(differential cell count)에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 비히클을 21일차부터 25일차까지 6일 연속으로 OVA 부하 30분 전에 피하로 1일 2회 투여하거나 또는 1일 1회 기관내로 투여했고, 마지막 투여는 26일차에 기관지 폐포 세척액(bronchoalveolar lavage fluid) 수집 30분 전에 수행했다. 총 백혈구수 및 감별 세포수를 결정했다. 일원 ANOVA 및 뒤이은 Dunnett 검정을 OVA 면역화 비히클과 다른 처리군 간의 비교를 위해 적용했다. OVA-비히클 대조군 대비 *P<0.05.
도 23은 오브알부민 감작화 마우스에서 % 백혈구 수 및 감별 세포수에 대한 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 효과를 보여준다. (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드와 비히클을 21일차부터 25일차까지 6일 연속으로 OVA 부하 30분 전에 피하로 1일 2회 투여하거나 또는 1일 1회 기관내로 투여했고, 마지막 투여는 26일차에 기관지 폐포 세척액 수집 30분 전에 수행했다. 총 백혈구수 및 감별 세포수를 결정했다. 일원 ANOVA 및 뒤이은 Dunnett 검정을 OVA 면역화 비히클과 다른 처리군 간의 비교를 위해 적용했다. OVA-비히클 대조군 대비 *P<0.05.
하기를 참조한다: Hamelmann E, Schwarze J, Takeda K, Oshiba A, Larsen GL, Irvin CG, and Gelfand EW, Noninvasive measurement of airway responsiveness in allergic mice using barometric plethysmography, Am J Respir Crit Care Med, 156:766-75,1997.
본 명세서에 기재된 실험을 위한 테스트 화합물은 유리 형태 또는 염 형태로 이용하였다. 달리 특정되지 않으면, 인 비보 테스트를 위해 제공된 화합물은 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 염산염이고, 투여량은 유리 염기 형태를 가정하여 주어진다.
관찰된 특이적 약리학적 반응은 선택된 특정한 활성 화합물에 따라 또는 약제학적 담체의 존재 여부에 따라서, 및 이용된 제제의 종류 및 투여 방식에 따라 변할 수 있고, 결과에 있어서, 그와 같은 기대되는 변화 또는 차이가 본 발명의 실시에 따라 고려된다.
본 발명의 특정한 구체예가 본 명세서에서 예시되고 보다 상세하게 설명되나 본 발명은 그에 한정되지 않는다. 전술된 상세한 설명은 본 발명의 예시로서 제공되며 한정을 구성하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 변형은 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 자명할 것이며, 본 발명의 원칙을 벗어나지 않는 모든 변형은 첨부된 청구항의 범위 내에 포함되는 것으로 의도된다.

Claims (21)

  1. 화합물 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 (식 I) 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염.
    Figure 112016102619752-pct00038
    식 I
  2. 제1항에 있어서, (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2R,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, 및 (2S,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드 중 하나 이상을 포함하지 않는 것인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, 산 부가염이고, 상기 산은 염산, 메탄술폰산, 말레산, 인산, 1-히드록시-2-나프토산(1-hydroxy-2-naphthoic acid), 말론산, L-타르타르산, 푸마르산, 시트르산, L-말산, R-만델산, S-만델산, 숙신산, 4-아세트아미도벤조산, 아디프산, 갈락타르산, 디-p-톨루오일-D-타르타르산, 옥살산, D-글루쿠론산, 4-히드록시벤조산, 4-메톡시벤조산, (1S)-(+)-10-캄포르술폰산, (1R,3S)-(+)-캄포르산, 및 p-톨루엔술폰산, 또는 그의 수화물 또는 용매화물로부터 선택되는 것인 화합물.
  4. 제3항에 있어서, 산 대 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드의 몰비는 1:2 또는 1:1인 것인 화합물.
  5. 하기로부터 선택된 화합물:
    (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-히드로클로라이드 또는 그의 수화물 또는 용매화물;
    (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-포스페이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물;
    (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 모노-4-히드록시벤조에이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물; 및
    (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 헤미-4-히드록시벤조에이트 또는 그의 수화물 또는 용매화물.
  6. 중량 기준으로 25% 미만의 (2R,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2S,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그 혼합물을 포함하는, 화합물, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  7. 제6항에 있어서, 중량 기준으로 15% 미만의 (2R,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2S,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그 혼합물을 포함하는, 화합물, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  8. 제6항에 있어서, 중량 기준으로 5% 미만의 (2R,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2S,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그 혼합물을 포함하는, 화합물, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  9. 제6항에 있어서, 중량 기준으로 2% 미만의 (2R,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2S,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그 혼합물을 포함하는, 화합물, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  10. 제6항에 있어서, 중량 기준으로 1% 미만의 (2R,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2S,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드, (2R,3S)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일)-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그 혼합물을 포함하는, 화합물, (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  11. 삭제
  12. 하기 피크의 ±0.5도 2θ 내에 하나 이상의 피크를 포함하는 x-선 회절 패턴을 특징으로 하는 화합물 (2S,3R)-N-2-((3-피리디닐)메틸)-1-아자비시클로[2.2.2]옥트-3-일-3,5-디플루오로벤즈아미드 히드로클로라이드의 결정 형태:
    Figure 112016102619752-pct00039
  13. 삭제
  14. 삭제
  15. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항 또는 제12항의 화합물의 치료적 유효량을 포함하는, α7-매개 질환 또는 기능장애를 치료 또는 예방하기 위한 약학 조성물로서, 상기 α7-매개 질환 또는 기능장애는 하기로 구성된 군으로부터 선택된 질병 또는 기능장애인 약학 조성물:
    i) 급성 통증, 신경(neurologic) 통증, 염증성 통증, 신경병성(neuropathic) 통증, 만성 통증, 중증의 만성 통증, 수술후 통증, 암과 연관된 통증, 협심증, 신산통 또는 담석산통(renal or biliary colic), 월경, 편두통 및 통풍, 관절염, 류마티스성 질환, 건초염, 혈관염, 삼차신경통 또는 포진성 신경통, 당뇨성 신경병성 통증(diabetic neuropathy pain), 작열통, 요통, 구심로 차단 증후군(deafferentation syndromes), 및 상완 신경총 적출(brachial plexus avulsion) 중 하나 이상을 포함하는 통증;
    ii) 대사 증후군, 체중 증가, 타입 I 당뇨병, 타입 II 당뇨병, 또는 당뇨성 신경병증;
    iii) 건선, 천식, 죽상동맥경화증, 특발성 폐섬유화증, 만성 및 급성 염증, 내독소혈증, 통풍, 급성 가성통풍, 급성 통풍 관절염, 관절염, 류마티스 관절염, 골관절염, 동종이식 거부(allograft rejection), 만성 이식 거부(chronic transplant rejection), 천식, 단핵세포-포식세포 의존성 폐손상(mononuclear-phagocyte dependent lung injury), 아토피 피부염, 만성 폐색성 폐질환, 성인 호흡 곤란 증후군(adult respiratory distress syndrome), 겸상 적혈구병의 급성 흉부 증후군(acute chest syndrome in sickle cell disease), 염증성 장 질환, 크론씨 병(Crohn's disease), 궤양성 대장염, 급성 담관염, 아프타 구내염(aphteous stomatitis), 낭염(pouchitis), 사구체 신염, 루푸스 신장염, 혈전증, 및 이식편 대 숙주 반응 중 하나 이상을 포함하는 염증; 및
    iv) 연령-관련 기억력 장애(age-associated memory impairment, AAMI), 경증 인지 장애(mild cognitive impairment, MCI), 초로성 치매(pre-senile dementia), 조발성 알쯔하이머병(early onset Alzheimer's disease), 노인성 치매, 알쯔하이머형 치매(dementia of the Alzheimer's type), 경증 내지 중등증의 알쯔하이머형 치매(mild to moderate dementia of the Alzheimer's type), 루이 소체 치매(Lewy body dementia), 혈관성 치매(vascular dementia), 알쯔하이머병, 뇌졸중, AIDS 치매복합증(AIDS dementia complex), 주의력 결핍 장애, 주의력 결핍 과다행동 장애, 난독증, 정신분열증, 정신분열형 장애(schizophreniform disorder), 정신분열정동 장애(schizoaffective disorder), 정신분열증의 인지기능 결핍(cognitive deficits in schizophrenia), 및 정신분열증의 인지기능 장애(cognitive dysfunction in schizophrenia) 중 하나 이상을 포함하는 인지 장애(cognition).
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항 또는 제12항의 화합물의 치료적 유효량을 포함하는, 질병 또는 기능장애를 치료 또는 예방하기 위한 약학 조성물로서, 상기 질병 또는 기능장애는 하기로 구성된 군으로부터 선택된 질병 또는 기능장애인 약학 조성물:
    i) 급성 통증, 신경 통증, 염증성 통증, 신경병성 통증, 만성 통증, 중증의 만성 통증, 수술후 통증, 암과 연관된 통증, 협심증, 신산통 또는 담석산통, 월경, 편두통, 통풍, 관절염, 류마티스성 질환, 건초염, 혈관염, 삼차신경통 또는 포진성 신경통, 당뇨성 신경병성 통증, 작열통, 요통, 구심로 차단 증후군, 및 상완 신경총 적출 중 하나 이상을 포함하는 통증;
    ii) 대사 증후군, 체중 증가, 타입 I 당뇨병, 타입 II 당뇨병, 또는 당뇨성 신경병증;
    iii) 건선, 천식, 죽상동맥경화증, 특발성 폐섬유화증, 만성 및 급성 염증, 내독소혈증, 통풍, 급성 가성통풍, 급성 통풍 관절염, 관절염, 류마티스 관절염, 골관절염, 동종이식 거부, 만성 이식 거부, 천식, 단핵세포-포식세포 의존성 폐손상, 아토피 피부염, 만성 폐색성 폐질환, 성인 호흡 곤란 증후군, 겸상 적혈구병의 급성 흉부 증후군, 염증성 장 질환, 크론씨 병, 궤양성 대장염, 급성 담관염, 아프타 구내염, 낭염, 사구체 신염, 루푸스 신장염, 혈전증, 및 이식편 대 숙주 반응 중 하나 이상을 포함하는 염증; 및
    iv) 연령-관련 기억력 장애, 경증 인지 장애, 초로성 치매, 조발성 알쯔하이머병, 노인성 치매, 알쯔하이머형 치매, 경증 내지 중등증의 알쯔하이머형 치매, 루이 소체 치매, 혈관성 치매, 알쯔하이머병, 뇌졸중, AIDS 치매복합증, 주의력 결핍 장애, 주의력 결핍 과다행동 장애, 난독증, 정신분열증, 정신분열형 장애, 정신분열정동 장애, 정신분열증의 인지기능 결핍, 및 정신분열증의 인지기능 장애 중 하나 이상을 포함하는 인지 장애.
  20. 삭제
  21. 삭제
KR1020117019595A 2009-01-26 2010-01-25 （２ｓ，３ｒ）―ｎ―２―（（３―피리디닐（메틸）―１―아자비시클로［２．２．２］옥트―３―일―３，５―디플루오로벤즈아미드의 제조 및 치료적 적용 KR101737924B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14726009P 2009-01-26 2009-01-26
US61/147,260 2009-01-26
PCT/US2010/021926 WO2010085724A1 (en) 2009-01-26 2010-01-25 Preparation and therapeutic applications of (2s,3r)-n-2-((3-pyridinyl)methyl)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl)-3,5-difluorobenzamide

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20110106464A KR20110106464A (ko) 2011-09-28
KR101737924B1 true KR101737924B1 (ko) 2017-05-19

Family

ID=41719329

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020117019595A KR101737924B1 (ko) 2009-01-26 2010-01-25 （２ｓ，３ｒ）―ｎ―２―（（３―피리디닐（메틸）―１―아자비시클로［２．２．２］옥트―３―일―３，５―디플루오로벤즈아미드의 제조 및 치료적 적용

Country Status (32)

Country Link
US (4) US8476296B2 (ko)
EP (1) EP2389378B1 (ko)
JP (1) JP5600122B2 (ko)
KR (1) KR101737924B1 (ko)
CN (1) CN102292335B (ko)
AR (1) AR075152A1 (ko)
AU (1) AU2010206638B2 (ko)
BR (1) BRPI1006053A2 (ko)
CA (1) CA2749123C (ko)
CL (1) CL2010000059A1 (ko)
CO (1) CO6501143A2 (ko)
DK (1) DK2389378T3 (ko)
EA (1) EA201170976A1 (ko)
EC (1) ECSP11011220A (ko)
ES (1) ES2503465T3 (ko)
HK (1) HK1164319A1 (ko)
HR (1) HRP20140756T1 (ko)
IL (1) IL213620A0 (ko)
MX (1) MX2011007791A (ko)
MY (1) MY152387A (ko)
NZ (1) NZ593484A (ko)
PE (1) PE20120005A1 (ko)
PL (1) PL2389378T3 (ko)
PT (1) PT2389378E (ko)
RS (1) RS53521B1 (ko)
SG (1) SG172156A1 (ko)
SI (1) SI2389378T1 (ko)
SM (1) SMT201400152B (ko)
TW (1) TW201031664A (ko)
UA (1) UA105204C2 (ko)
WO (1) WO2010085724A1 (ko)
ZA (1) ZA201105126B (ko)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2647373A1 (en) * 2008-05-12 2013-10-09 Targacept, Inc. Methods for preventing the development of retinopathy by the oral administration of exo-S-mecamylamine.
TW201031664A (en) * 2009-01-26 2010-09-01 Targacept Inc Preparation and therapeutic applications of (2S,3R)-N-2-((3-pyridinyl)methyl)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl)-3,5-difluorobenzamide
JO3250B1 (ar) 2009-09-22 2018-09-16 Novartis Ag إستعمال منشطات مستقبل نيكوتينيك أسيتيل كولين ألفا 7
US20130231290A1 (en) * 2010-11-18 2013-09-05 Dignity Health Methods of diagnosing and treating neurodegenerative diseases
CA2825142A1 (en) 2011-01-27 2012-08-02 Novartis Ag Use of nicotinic acetylcholine receptor alpha 7 activators
EP2685977A1 (en) 2011-03-18 2014-01-22 Novartis AG COMBINATIONS OF ALPHA 7 NICOTINIC ACETYLCHOLINE RECEPTOR ACTIVATORS AND mGluR5 ANTAGONISTS FOR USE IN DOPAMINE INDUCED DYSKINESIA IN PARKINSON'S DISEASE
BR112014007485B1 (pt) * 2011-10-20 2022-05-31 Novartis Ag Métodos para prever responsividade terapêutica de um indivíduo a tratamento com um ativador do receptor de acetilcolina nicotínico alfa 7, e usos do referido ativador
JP6114951B2 (ja) * 2012-12-11 2017-04-19 ノバルティス アーゲー アルファ７ニコチン性アセチルコリン受容体アクチベーターによる処置に対する応答性を予測するバイオマーカー
EP2945637B1 (en) 2013-01-15 2021-03-10 Novartis AG Use of alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor agonists
KR101879921B1 (ko) 2013-01-15 2018-07-18 노파르티스 아게 기면증의 치료를 위한 알파 7 니코틴성 아세틸콜린 수용체 작용물질의 용도
US20150313884A1 (en) 2013-01-15 2015-11-05 Novartis Ag Use of alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor agonists
CA2898080C (en) 2013-01-15 2018-01-09 Novartis Ag Use of alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor agonists
US9724340B2 (en) 2015-07-31 2017-08-08 Attenua, Inc. Antitussive compositions and methods

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040002513A1 (en) 1998-12-11 2004-01-01 Mazurov Anatoly A. 3-Substituted-2(arylalkyl)-1-azabicycloalkanes and methods of use thereof

Family Cites Families (143)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4187521A (en) 1978-05-04 1980-02-05 Basf Aktiengesellschaft DC erase head
US4203990A (en) 1979-04-30 1980-05-20 G. D. Searle & Co. Anti-diarrheal 2-substituted quinuclidines
FR2493854B1 (fr) 1980-11-13 1985-10-11 Naphtachimie Sa Compositions de polyethylene ameliorees pour extrusion notamment pour extrusion-soufflage
DE58906678D1 (de) 1988-07-28 1994-02-24 Ciba Geigy Kupfer- und Nickeldihalogenidkomplexe, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung.
US4922901A (en) 1988-09-08 1990-05-08 R. J. Reynolds Tobacco Company Drug delivery articles utilizing electrical energy
WO1990005525A1 (en) * 1988-11-23 1990-05-31 Pfizer Inc. Quinuclidine derivatives as substance p antagonists
EP0402056A3 (en) 1989-06-06 1991-09-04 Beecham Group p.l.c. Azabicyclic compounds, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
EP0412798A3 (en) 1989-08-08 1992-07-01 Merck Sharp & Dohme Ltd. Substituted pyridines, their preparation, formulations and use in dementia
IN173570B (ko) 1989-11-23 1994-06-04 Pfizer
DK40890D0 (da) 1990-02-16 1990-02-16 Ferrosan As Substituerede urinstofforbindelser, deres fremstilling og anvendelse
EP0492903A1 (en) 1990-12-21 1992-07-01 MERCK SHARP &amp; DOHME LTD. Substituted pyrazines, pyrimidines and pyridazines for use in the treatment of glaucoma
ES2153357T3 (es) 1991-03-01 2001-03-01 Univ Florida Uso de analogos nicotinicos para el tratamiento de enfermedades degenerativas del sistema nervioso.
JPH0788356B2 (ja) * 1991-06-21 1995-09-27 ファイザー・インコーポレーテッド アザノルボルナン誘導体
JP2553020B2 (ja) * 1991-11-07 1996-11-13 吉富製薬株式会社 キヌクリジン化合物およびその医薬用途
US5212188A (en) 1992-03-02 1993-05-18 R. J. Reynolds Tabacco Company Method for treatment of neurodegenerative diseases
US5276043A (en) 1992-04-10 1994-01-04 R. J. Reynolds Tobacco Company Method for treatment of neurodegenerative diseases
US5977144A (en) 1992-08-31 1999-11-02 University Of Florida Methods of use and compositions for benzylidene- and cinnamylidene-anabaseines
WO1994005288A1 (en) 1992-08-31 1994-03-17 University Of Florida Anabaseine derivatives useful in the treatment of degenerative diseases of the nervous system
IL107184A (en) 1992-10-09 1997-08-14 Abbott Lab Heterocyclic ether compounds that enhance cognitive function
US5852041A (en) 1993-04-07 1998-12-22 Sibia Neurosciences, Inc. Substituted pyridines useful as modulators of acethylcholine receptors
AU698101B2 (en) 1993-06-01 1998-10-22 Cortex Pharmaceuticals, Inc. Alkaline and acid phosphatase inhibitors in treatment of neurological disorders
AU7474794A (en) 1993-07-22 1995-02-20 E.I. Du Pont De Nemours And Company Arthropodicidal azacyclic heterocycles
US5493026A (en) 1993-10-25 1996-02-20 Organix, Inc. Substituted 2-carboxyalkyl-3-(fluorophenyl)-8-(3-halopropen-2-yl) nortropanes and their use as imaging for agents for neurodegenerative disorders
JP3269125B2 (ja) 1994-01-28 2002-03-25 東レ株式会社 アトピー性皮膚炎治療薬
PT777671E (pt) 1994-08-24 2000-08-31 Astrazeneca Ab Compostos espiro-azabiciclicos uteis em terapia
US5510355A (en) 1994-09-06 1996-04-23 Bencherif; Merouane Depolarizing skeletal muscle relaxants
US5998404A (en) 1994-10-24 1999-12-07 Eli Lilly And Company Heterocyclic compounds and their use
US5604231A (en) 1995-01-06 1997-02-18 Smith; Carr J. Pharmaceutical compositions for prevention and treatment of ulcerative colitis
US5616707A (en) 1995-01-06 1997-04-01 Crooks; Peter A. Compounds which are useful for prevention and treatment of central nervous system disorders
US5824692A (en) 1995-01-06 1998-10-20 Lippiello; Patrick Michael Pharmaceutical compositions for prevention and treatment of central nervous system disorders
US5597919A (en) 1995-01-06 1997-01-28 Dull; Gary M. Pyrimidinyl or Pyridinyl alkenyl amine compounds
AU4712696A (en) 1995-02-17 1996-09-04 Novo Nordisk A/S The use of heterocyclic compounds
US5585388A (en) 1995-04-07 1996-12-17 Sibia Neurosciences, Inc. Substituted pyridines useful as modulators of acetylcholine receptors
US5583140A (en) 1995-05-17 1996-12-10 Bencherif; Merouane Pharmaceutical compositions for the treatment of central nervous system disorders
IL118279A (en) 1995-06-07 2006-10-05 Abbott Lab Compounds 3 - Pyridyloxy (or Thio) Alkyl Heterocyclic Pharmaceutical Compositions Containing Them and Their Uses for Preparing Drugs to Control Synaptic Chemical Transmission
TW438587B (en) 1995-06-20 2001-06-07 Takeda Chemical Industries Ltd A pharmaceutical composition for prophylaxis and treatment of diabetes
US6022868A (en) 1995-06-29 2000-02-08 Novo Nordisk Als Substituted azacyclic or azabicyclic compounds
EP0853621A1 (en) 1995-09-22 1998-07-22 Novo Nordisk A/S Novel substituted azacyclic or azabicyclic compounds
WO1997014473A1 (en) 1995-10-18 1997-04-24 Novartis Ag Thermopile powered transdermal drug delivery device
US5712270A (en) 1995-11-06 1998-01-27 American Home Products Corporation 2-arylamidothiazole derivatives with CNS activity
US5616716A (en) 1996-01-06 1997-04-01 Dull; Gary M. (3-(5-ethoxypyridin)yl)-alkenyl 1 amine compounds
US6096728A (en) 1996-02-09 2000-08-01 Amgen Inc. Composition and method for treating inflammatory diseases
SE9600683D0 (sv) 1996-02-23 1996-02-23 Astra Ab Azabicyclic esters of carbamic acids useful in therapy
US6166048A (en) 1999-04-20 2000-12-26 Targacept, Inc. Pharmaceutical compositions for inhibition of cytokine production and secretion
US5663356A (en) 1996-04-23 1997-09-02 Ruecroft; Graham Method for preparation of aryl substituted alefinic secondary amino compounds
US5726189A (en) 1996-05-03 1998-03-10 The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Method for imaging nicotinic acetylcholinergic receptors in the brain using radiolabeled pyridyl-7-azabicyclo 2.2.1!heptanes
FR2756826B1 (fr) 1996-12-05 1999-01-08 Adir Nouveaux derives tetrahydropyridiniques substitues, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
ZA9711092B (en) 1996-12-11 1999-07-22 Smithkline Beecham Corp Novel compounds.
US5811442A (en) 1997-02-21 1998-09-22 Bencherif; Merouane Pharmaceutical compositions for the treatment of conditions associated with decreased blood flow
US5861423A (en) 1997-02-21 1999-01-19 Caldwell; William Scott Pharmaceutical compositions incorporating aryl substituted olefinic amine compounds
BR9809697A (pt) 1997-05-30 2000-07-11 Neurosearch As Composto, uso, e processo para a preparação do mesmo, composição farmacêutica, e, processo para tratar uma doença de um corpo de animal vivo, incluindo um humano
US6525065B1 (en) 1997-06-30 2003-02-25 Targacept, Inc. Pharmaceutical compositions and methods for effecting dopamine release
DE69822300T2 (de) 1997-06-30 2005-03-10 Targacept, Inc. 3-pyridyl-1-azabicycloalkan-derivate zur behandlung von zns-erkrankungen
AR013184A1 (es) 1997-07-18 2000-12-13 Astrazeneca Ab Aminas heterociclicas espiroazobiciclicas, composicion farmaceutica, uso de dichas aminas para preparar medicamentos y metodo de tratamiento o profilaxis
JP2003512290A (ja) 1997-09-10 2003-04-02 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド 家畜抗菌剤としての８ａ−アザライド
ATE240331T1 (de) 1998-04-02 2003-05-15 Targacept Inc Azatricyclo(3.3.1.1)decanderivate und diese enthaltende phrmazeutische zubereitungen
US5952339A (en) 1998-04-02 1999-09-14 Bencherif; Merouane Pharmaceutical compositions and methods of using nicotinic antagonists for treating a condition or disorder characterized by alteration in normal neurotransmitter release
WO1999062505A2 (en) 1998-06-01 1999-12-09 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Method for treating neurodegenerative disorders
US6310043B1 (en) 1998-08-07 2001-10-30 Governors Of The University Of Alberta Treatment of bacterial infections
GB9821503D0 (en) 1998-10-02 1998-11-25 Novartis Ag Organic compounds
FR2786770B1 (fr) 1998-12-04 2001-01-19 Synthelabo Derives de 1,4-diazabicyclo[3.2.2.]nonane, leur preparation et leur application en therapeutique
FR2786769B1 (fr) 1998-12-04 2002-10-25 Synthelabo Derives de 2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptane, leur preparation et leur application en therapeutique
US6432975B1 (en) * 1998-12-11 2002-08-13 Targacept, Inc. Pharmaceutical compositions and methods for use
US6734215B2 (en) 1998-12-16 2004-05-11 University Of South Florida Exo-S-mecamylamine formulation and use in treatment
SE9900100D0 (sv) 1999-01-15 1999-01-15 Astra Ab New compounds
FR2790474B1 (fr) 1999-03-05 2001-04-06 Synthelabo Derives de pyridopyranoazepines, leur preparation et leur application en therapeutique
FR2791678B1 (fr) 1999-03-30 2001-05-04 Synthelabo Derives de 1,4-diazabicyclo [3.2.2] nonane-4-carboxylates et -carboxamides, leur preparation et leur application en therapeutique
ATE261448T1 (de) 1999-05-04 2004-03-15 Neurosearch As Heteroaryl diazabicycloalkene, deren herstellung und verwendung
SE9904176D0 (sv) 1999-11-18 1999-11-18 Astra Ab New use
SE0000540D0 (sv) 2000-02-18 2000-02-18 Astrazeneca Ab New compounds
GB0010955D0 (en) 2000-05-05 2000-06-28 Novartis Ag Organic compounds
US6610713B2 (en) 2000-05-23 2003-08-26 North Shore - Long Island Jewish Research Institute Inhibition of inflammatory cytokine production by cholinergic agonists and vagus nerve stimulation
US6916828B2 (en) 2000-06-27 2005-07-12 Laboratorios S.A.L.V.A.T., S.A. Carbamates derivatived from arylakylamines
CA2410945A1 (en) 2000-07-04 2002-01-10 Neurosearch A/S Aryl and heteroaryl diazabicycloalkanes, their preparation and use
US6624167B1 (en) 2000-08-04 2003-09-23 Targacept, Inc. Pharmaceutical compositions and methods for use
US6492385B2 (en) 2000-08-18 2002-12-10 Pharmacia & Upjohn Company Quinuclidine-substituted heteroaryl moieties for treatment of disease
US6492386B2 (en) 2000-08-18 2002-12-10 Pharmacia & Upjohn Company Quinuclidine-substituted aryl compounds for treatment of disease
AU2001282873A1 (en) 2000-08-18 2002-03-04 Pharmacia And Upjohn Company Quinuclidine-substituted aryl compounds for treatment of disease
AU2001282874A1 (en) 2000-08-18 2002-03-04 Pharmacia And Upjohn Company Quinuclidine-substituted aryl moieties for treatment of disease (nicotinic acetylcholine receptor ligands)
WO2002016355A2 (en) 2000-08-21 2002-02-28 Pharmacia & Upjohn Company Quinuclidine-substituted heteroaryl moieties for treatment of disease (nicotinic) acetylcholine receptor ligands
US6599916B2 (en) 2000-08-21 2003-07-29 Pharmacia & Upjohn Company Quinuclidine-substituted heteroaryl moieties for treatment of disease
AU2001282875A1 (en) 2000-08-21 2002-03-04 Pharmacia And Upjohn Company Quinuclidine-substituted heteroaryl moieties for treatment of disease
ATE385497T1 (de) 2000-12-01 2008-02-15 Neurosearch As 3-substituierte quinuclidin-derivate und deren verwendung als nikotinischen agonisten
PL362989A1 (en) 2000-12-22 2004-11-15 Almirall Prodesfarma Ag Quinuclidine carbamate derivatives and their use as m3 antagonists
US20020086871A1 (en) 2000-12-29 2002-07-04 O'neill Brian Thomas Pharmaceutical composition for the treatment of CNS and other disorders
WO2002057275A1 (en) 2001-01-17 2002-07-25 University Of Kentucky Research Foundation Boron-containing nicotine analogs for use in the treatment of cns pathologies
US6479172B2 (en) 2001-01-26 2002-11-12 Xerox Corporation Electroluminescent (EL) devices
PE20021019A1 (es) * 2001-04-19 2002-11-13 Upjohn Co Grupos azabiciclicos sustituidos
MXPA03010996A (es) 2001-06-01 2004-02-27 Aztrazeneca Ab Nuevo ligando para receptores nicotinicos de acetilcolina utiles en terapia.
US6569865B2 (en) 2001-06-01 2003-05-27 Astrazeneca Ab Spiro 1-azabicyclo[2.2.2]octane-3,2′(3′h)-furo[2,3-b]pyridine
AR036040A1 (es) 2001-06-12 2004-08-04 Upjohn Co Compuestos de heteroarilo multiciclicos sustituidos con quinuclidinas y composiciones farmaceuticas que los contienen
EP1419161A1 (en) 2001-08-24 2004-05-19 PHARMACIA &amp; UPJOHN COMPANY Substituted-heteroaryl-7-aza 2.2.1]bicycloheptanes for the treatment of disease
US20030069296A1 (en) 2001-08-24 2003-04-10 Wishka Donn G. Substituted-aryl 7-aza[2.2.1]bicycloheptanes for the treatment of disease
BR0212477A (pt) 2001-09-12 2004-08-24 Upjohn Co 7-aza[2.2.1] bicicloheptanos substituìdos para o tratamento de doenças
GEP20063814B (en) 2001-10-02 2006-05-10 Upjohn Co Azabicyclic-Substituted Fused-Heteroaryl Compounds for Treatment of DiseaseAzabicyclic-Substituted Fused-Heteroaryl Compounds for Treatment of Disease
EP1453828A2 (en) 2001-10-16 2004-09-08 AstraZeneca AB Azabicyclic compounds for the treatment of fibromyalgia syndrome
US6849620B2 (en) 2001-10-26 2005-02-01 Pfizer Inc N-(azabicyclo moieties)-substituted hetero-bicyclic aromatic compounds for the treatment of disease
BR0214016A (pt) 2001-11-09 2004-10-13 Upjohn Co Compostos azabicìclico-fenil-fundido heterocìclicos e seu uso como ligandos alfa 7 nachr
JP2005523288A (ja) 2002-02-19 2005-08-04 ファルマシア・アンド・アップジョン・カンパニー・エルエルシー 疾病治療用の縮合した二環式−ｎ−架橋−複素環式芳香族カルボキサミド
WO2003070731A2 (en) 2002-02-19 2003-08-28 Pharmacia & Upjohn Company Azabicyclic compounds for the treatment of disease
CA2475773A1 (en) 2002-02-20 2003-09-04 Pharmacia & Upjohn Company Azabicyclic compounds with alfa7 nicotinic acetylcholine receptor activity
DE10211415A1 (de) 2002-03-15 2003-09-25 Bayer Ag Bicyclische N-Biarylamide
BR0309342A (pt) 2002-04-18 2005-02-15 Astrazeneca Ab Composto, composição farmacêutica, uso de um composto, e, método de tratamento ou profilaxia de doenças ou condições humanas
AU2003225456B2 (en) 2002-04-18 2009-02-05 Astrazeneca Ab Furyl compounds
JP4523775B2 (ja) 2002-04-18 2010-08-11 アストラゼネカ・アクチエボラーグ 複素環化合物
JP2005537297A (ja) 2002-08-01 2005-12-08 ファルマシア・アンド・アップジョン・カンパニー・エルエルシー アルファ−７ｎａｃｈｒ活性を有する１ｈ−ピラゾールおよび１ｈ−ピロール−アザビシクロ化合物
SE0202430D0 (sv) 2002-08-14 2002-08-14 Astrazeneca Ab New Compounds
SE0202465D0 (sv) 2002-08-14 2002-08-14 Astrazeneca Ab New compounds
WO2004016608A1 (en) 2002-08-14 2004-02-26 Neurosearch A/S Novel quinuclidine derivatives and their use
WO2004019943A1 (en) 2002-08-30 2004-03-11 Memory Pharmaceuticals Corporation Anabaseine derivatives useful in the treatment of neurodegenerative diseases
RU2391341C2 (ru) 2002-09-25 2010-06-10 Мемори Фармасьютиклз Корпорейшн Индазолы, бензотиазолы, бензоизотиазолы, их получение и применение
EP1562959A2 (en) 2002-11-01 2005-08-17 Pharmacia & Upjohn Company LLC Compounds having both alpha7 nachr agonist and 5ht antagonist activity for treatment of cns diseases
AU2003269413A1 (en) 2002-11-01 2004-05-25 Pharmacia & Upjohn Company Llc Nicotinic acetylcholine agonists in the treatment of glaucoma and retinal neuropathy
DK1949901T3 (da) 2002-12-06 2014-05-19 The Feinstein Inst Medical Res Fremgangsmåde til bestemmelse af en cholinerg agonist selektiv for en alfa-7-nikotinsk receptor
EP1572700A1 (en) 2002-12-06 2005-09-14 Pharmacia & Upjohn Company LLC Crystalline fumarate salts of 1-azabicyclo[2.2.2]oct substituted furo[2,3-c]pyridinyl carboxamide and compositions and preparations thereof
EP1572205A2 (en) 2002-12-11 2005-09-14 Pharmacia & Upjohn Company LLC Treatment of diseases with combinations of alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor agonists and other compounds
MXPA05006336A (es) 2002-12-11 2005-08-26 Pharmacia & Up John Company Ll Combinacion para el tratamiento de adhd.
US6917746B2 (en) 2002-12-17 2005-07-12 3M Innovative Properties Company Apparatus and method for creating a fiber optic circuit
US6777617B2 (en) 2002-12-30 2004-08-17 3M Innovative Properties Company Telecommunications terminal
JP2006519208A (ja) 2003-02-27 2006-08-24 ニューロサーチ、アクティーゼルスカブ 新規ジアザビシクロアリール誘導体
BRPI0408815A (pt) 2003-03-28 2006-04-04 Pharmacia & Upjohn Co Llc moduladores alostéricos positivos do receptor nicotìnico da acetilcolina
WO2004099202A1 (en) 2003-05-05 2004-11-18 Pharmacia & Upjohn Company Llc Quinuclidines substituted bentodioxine carboxamides for the treatment of neurodegenerative diseases
EP1654264A1 (en) 2003-07-08 2006-05-10 AstraZeneca AB Spiro [1-azabicyclo [2.2.2]octane-3,5'-oxazolidin-2'-one] derivatives with affinity to the alpha7 nicotinic acetylcholine receptor
CA2538705A1 (en) 2003-09-25 2005-04-07 Astrazeneca Ab Ligands
EP1678183A1 (en) 2003-10-21 2006-07-12 AstraZeneca AB Spirofuropyridine aryl derivatives
US20050137398A1 (en) 2003-12-22 2005-06-23 Jianguo Ji 3-Quinuclidinyl heteroatom bridged biaryl derivatives
US20050137217A1 (en) 2003-12-22 2005-06-23 Jianguo Ji Spirocyclic quinuclidinic ether derivatives
US20050245531A1 (en) 2003-12-22 2005-11-03 Abbott Laboratories Fused bicycloheterocycle substituted quinuclidine derivatives
US20050137203A1 (en) 2003-12-22 2005-06-23 Jianguo Ji 3-quinuclidinyl amino-substituted biaryl derivatives
US7160876B2 (en) 2003-12-22 2007-01-09 Abbott Laboratories Fused bicycloheterocycle substituted quinuclidine derivatives
US7309699B2 (en) 2003-12-22 2007-12-18 Abbott Laboratories 3-Quinuclidinyl amino-substituted biaryl derivatives
CA2567977A1 (en) 2004-04-22 2006-01-05 Memory Pharmaceutical Corporation Indoles, 1h-indazoles, 1,2-benzisoxazoles, 1,2-benzoisothiazoles, and preparation and uses thereof
US7632831B2 (en) 2004-05-07 2009-12-15 Memory Pharmaceuticals Corporation 1H-indazoles, benzothiazoles, 1,2-benzoisoxazoles, 1,2-benzoisothiazoles, and chromones and preparation and uses thereof
AU2005317280A1 (en) 2004-12-15 2006-06-22 Astrazeneca Ab Nicotinic acetylcholine receptor ligands
MX2007007328A (es) 2004-12-22 2007-07-25 Memory Pharm Corp Ligandos del receptor alfa-7 nicotinico y preparacion y sus usos.
EP1891036A4 (en) 2005-06-07 2010-08-04 Univ Florida SELECTIVE LIGANDS OF THE ALPHA 7 NICOTINIC RECEPTOR
AU2006283453A1 (en) 2005-08-22 2007-03-01 Targacept, Inc. Heteroaryl-substituted diazatricycloalkanes, methods for its preparation and use thereof
CN101312968A (zh) 2005-09-23 2008-11-26 记忆药物公司 吲唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、苯并异噁唑、吡唑并吡啶、异噻唑并吡啶及其制备和用途
DE102007022728B4 (de) 2007-05-11 2010-08-05 Faurecia Autositze Gmbh Rückenlehne eines Kraftfahrzeugsitzes
SA08290475B1 (ar) 2007-08-02 2013-06-22 Targacept Inc (2s، 3r)-n-(2-((3-بيردينيل)ميثيل)-1-آزا بيسيكلو[2، 2، 2]أوكت-3-يل)بنزو فيوران-2-كربوكساميد، وصور أملاحه الجديدة وطرق استخدامه
EP2647373A1 (en) * 2008-05-12 2013-10-09 Targacept, Inc. Methods for preventing the development of retinopathy by the oral administration of exo-S-mecamylamine.
TW201031664A (en) * 2009-01-26 2010-09-01 Targacept Inc Preparation and therapeutic applications of (2S,3R)-N-2-((3-pyridinyl)methyl)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl)-3,5-difluorobenzamide
JO3250B1 (ar) 2009-09-22 2018-09-16 Novartis Ag إستعمال منشطات مستقبل نيكوتينيك أسيتيل كولين ألفا 7

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040002513A1 (en) 1998-12-11 2004-01-01 Mazurov Anatoly A. 3-Substituted-2(arylalkyl)-1-azabicycloalkanes and methods of use thereof
US20080138287A1 (en) * 1998-12-11 2008-06-12 Mazurov Anatoly A 3-substituted-2(arylalkyl)-1- azabicycloalkanes and methods of use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
US20150105421A1 (en) 2015-04-16
US20110257224A1 (en) 2011-10-20
US9173876B2 (en) 2015-11-03
ECSP11011220A (es) 2011-09-30
HK1164319A1 (en) 2012-09-21
US8476296B2 (en) 2013-07-02
SI2389378T1 (sl) 2014-10-30
SMT201400152B (it) 2015-01-15
PT2389378E (pt) 2014-09-17
IL213620A0 (en) 2011-07-31
WO2010085724A1 (en) 2010-07-29
AU2010206638A1 (en) 2011-07-07
CA2749123A1 (en) 2010-07-29
MX2011007791A (es) 2011-09-29
MY152387A (en) 2014-09-15
CA2749123C (en) 2017-12-05
CN102292335A (zh) 2011-12-21
EP2389378B1 (en) 2014-06-25
US20170119746A1 (en) 2017-05-04
NZ593484A (en) 2013-06-28
BRPI1006053A2 (pt) 2016-05-10
CN102292335B (zh) 2014-05-14
PL2389378T3 (pl) 2014-11-28
US20140163065A1 (en) 2014-06-12
AR075152A1 (es) 2011-03-09
US8901151B2 (en) 2014-12-02
JP2012515797A (ja) 2012-07-12
ZA201105126B (en) 2012-03-28
EA201170976A1 (ru) 2012-02-28
EP2389378A1 (en) 2011-11-30
RS53521B1 (en) 2015-02-27
CO6501143A2 (es) 2012-08-15
SG172156A1 (en) 2011-07-28
UA105204C2 (en) 2014-04-25
TW201031664A (en) 2010-09-01
AU2010206638B2 (en) 2012-09-06
CL2010000059A1 (es) 2011-02-11
ES2503465T3 (es) 2014-10-06
JP5600122B2 (ja) 2014-10-01
PE20120005A1 (es) 2012-01-29
DK2389378T3 (da) 2014-07-07
KR20110106464A (ko) 2011-09-28
HRP20140756T1 (hr) 2014-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101737924B1 (ko) （２ｓ，３ｒ）―ｎ―２―（（３―피리디닐（메틸）―１―아자비시클로［２．２．２］옥트―３―일―３，５―디플루오로벤즈아미드의 제조 및 치료적 적용
US20110312961A1 (en) 2,5-Disubstituted Morpholine Orexin REceptor Antagonists
EP2465501B1 (en) Method for the preparation of (2S,3R)-N-(2-((3-pyridinyl)methyl)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl)benzofuran-2-carboxamide
WO2011071758A1 (en) 3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptanes as neuronal nicotinic acetylcholine receptor ligands
JP5615836B2 (ja) （ｒ）−３−（（ｅ）−２−（ピロリジン−３−イル）ビニル）−５−（テトラヒドロピラン−４−イルオキシ）ピリジン、その塩、その合成およびニコチン性アセチルコリン受容体のリガンドとしてのその使用
AU2012238322A1 (en) Preparation and therapeutic applications of (2S,3R)-N-2-((3-pyridinyl)methyl)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl)-3,5-difluorobenzamide
WO2012125518A1 (en) Salt forms of 3 - cyclopropylcarbonyl - 3, 6 - diazabicyclo [3.1.1] heptane

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right