KR101523389B1 - 화장료에 사용하기 위한 해조류 추출물 및 생발효물 - Google Patents

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Abstract

해조류인 사르코디오테카, 특히 사르코디오테카 가우디차우디(Sarcodiotheca gaudichaudii)의 추출물이 화장료 조성물에 사용하기 위해 기재된다. 예를 들면 S. 가우디차우디와 같은 사르코디오테카의 생발효가 또한 기재된다. 상기 해조류 생발효물은 노화-방지 화장료 응용을 위한 피부 보호 활성 성분으로 유용하며, 콘드루스 크리스푸스와 같은 홍조류의 추출물과 조합되어 사용될 경우 특히 유용하다.
해조, 사르코디오테카, 생발효, 화장료, 노화-방지, 홍조류

Description

화장료에 사용하기 위한 해조류 추출물 및 생발효물 {Marine Extracts and Biofermentations for Use in Cosmetics}
본 발명은 해조류인 사르코디오테카, 더욱 특별하게는 사르코디오테카 가우디차우디(Sarcodiotheca gaudichaudii)의 추출물, 및 그의 화장료 조성물 중 피부 보호 활성물로서의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 노화-방지 화장료 응용을 위한 피부 보호 활성물로 유용하며, 콘드루스 크리스푸스(Chondrus crispus)와 같은 홍조류의 추출물과 조합되어 사용될 경우 특히 유용한, S. 가우디차우디와 같은 사르코디오테카의 생발효물에 관한 것이다.
피부의 세포외 매트릭스("ECM")는 노화 과정에서 극히 중요하다. ECM은 피부 세포 부착에 필요한 3-차원 골격 및 적절한 피부결을 제공할 뿐만 아니라, ECM은 또한 조직 복구와 같은 결정적인 기능을 수행하도록 세포를 자극하는 피부 세포에 신호 전달을 위한 도관으로서도 기능한다. ECM이 손상될 경우, 환경 노출 또는 통상의 노화 과정을 통해 피부는, 콜라겐이나 엘라스틴 같은 매트릭스 내 섬유성 단백질의 손상된 구조적 일체성에 부분적으로 기인하여 잔주름과 같은 원치않는 노화된 외관을 나타내게 된다. 즉, 피부 내에 존재하는 섬유성 단백질에 대한 손상을 감소시키거나 그렇지 않으면 상기 단백질을 더 많이 생성하도록 자극하는 활성 성분, 및 그러한 활성 성분을 포함하는 화장료를 개발하는 것이 바람직하다. 예를 들면, 인체 백혈구 엘라스타아제는 활성화된 백혈구 세포에 의해 분비되는 세린 프로테아제이며, 다수의 ECM 단백질 성분, 특히 자외선 또는 기타 자극에 노출된 피부에서 엘라스틴에 광범위한 손상을 일으킬 수 있다. 즉, ECM에 대한 손상으로부터 보호하기 위해 상기 프로테아제에 저해 효과를 갖는 화장료가 유리할 것이다.
ECM에 유익이 되거나 또는 피부에 노화 또는 환경 손상의 징후를 지연, 최소화 또는 없애도록 의도된 다수의 화합물이 화장료 분야에 기재되어 있다. 그러나, 점점 더 많은 수의 소비자가 인지된 "천연" 유래의 제품을 요구하기 시작하였으므로, 식물 등을 기재로 하는 새로이 개발된 피부 보호 활성물을 이용하는 화장료 배합물을 조제하는 것이 계속 요구된다.
해조류와 같은 바다 식물은 탈수 (고 염도), 태양 복사선 및 고압과 같은 바다의 극한 환경 조건에 대하여 보호하고 방어하기 위한 메카니즘 및 화학작용을 진보시켜 왔으며, 다양한 바다 환경에서 생존할 수 있게 적응되어 왔다. 조류는 현미경적인 단세포 생물체로부터 길이 100 미터가 넘는 켈프 해조까지의 범위를 가질 수 있고, 색에 따라 분류된다 - 청조류, 홍조류, 녹조류 및 갈조류. 이들 해조의 다수는 역사적으로 존재해 왔고, 의료용 처방, 일상의 음식물 또는 다이어트용 보조식품 또는 화장료의 부분으로 건강 및 미용을 위해 계속 사용되어왔다.
놀랍게도, 해조류인 사르코디오테카 속에서 유래된 추출물 및 생발효물이 화장료에 피부 보호 활성물로 사용되어 피부에 도포될 경우, 예를 들면 엘라스타아제를 저해하고/하거나 콜라겐 생성을 자극함으로써 노화-방지 효과를 제공한다는 것 이 발견되었다.
즉, 본 발명은 피부의 상태를 개선하고/하거나 노화-방지 효과를 제공하기 위해 화장료 조성물에 사용하기 위한 해조류 추출물, 특히 사르코디오테카의 추출물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 피부의 상태를 개선하고/하거나 노화-방지 효과를 제공하기 위해, 선택적으로 다른 홍조류의 추출물 또는 인체 성장 인자와 혼합하여 화장료 조성물에 사용하기 위한 사르코디오테카의 생발효체 (여기에서 "생발효물"이라고도 함)에 관한 것이다.
본 발명은 또한 기재된 해조류 추출물 및 생발효물의, 피부 내 콜라겐 생성을 자극하고/하거나 인체 백혈구 엘라스타아제를 저해하기 위한 화장료로서의 용도에 관한 것이다.
뿐만 아니라, 본 발명은 기재된 해조류 추출물 및 생발효물의, 피부에 산화방지제 효과를 제공하기 위한 화장료로서의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 본 발명의 해조류 추출물 및/또는 생발효물의 안전한 유효량을 포함하는 겔, 로션 또는 크림과 같은 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 상기 및 여타 특성 및 장점은 본 개시를 읽어보면 당업자에게 분명해질 것이다.
여기에 사용된 모든 백분율 및 비는 달리 명시되지 않는 한 전체 조성물의 중량 기준이고, 모든 온도는 달리 명시되지 않는 한 섭씨 온도이다.
여기에 사용된 "안전한 유효량"이라는 용어는 여기에 기재된 것과 같은 긍정적인 유익을 유도하기에는 충분하지만 당업자가 판단하기에 심각한 부작용은 피할 만큼 충분히 낮은 화합물 또는 조성물의 양을 의미한다.
여기에 사용된 "슬러리"라는 용어는 식물성 물질의 수중 현탁액을 의미한다.
여기에서 사용된 바와 같이, 피부의 상태를 개선하는 것은 육안으로 또는 촉감으로 감지될 수 있는 피부의 불규칙함을 경감시키고 최소화하고/하거나 방지하는 것을 포함하며, 그러한 불규칙함은 잔주름, 매끈하지 않음 또는 거침, 피부 탄력의 소실, 처짐, 콜라겐 붕괴, 변형으로부터 피부 반동의 소실, 및 좋지 않은 혈색을 비제한적으로 포함한다.
사르코디오테카 속의 해조류 추출물은 피부에 도포 시, 특히 산화방지제, 엘라스타아제 저해제, 및/또는 콜라겐 자극제로 작용함으로써 노화-방지 유익을 제공한다는 것이 예기치않게 발견되었다. 이들 바다 식물들은 예를 들면 미국 및 캐나다의 동부 및 서부 해안을 따라서 발견될 수 있지만, 또한 영국, 칠레, 페루 및 어느 해안을 따라서도 발견될 수 있으며, 다음 종을 포함한다: S. 카라바에아 (S. caribaea), S. 푸르카타 (S. furcata), S. 디바리카타 (S. divaricata), S. 가우디차우디 (S. gaudichaudii) 및 S. 에롱가타 (S. elongata).
하나의 특히 바람직한 종은 사르코디오테카 가우디차우디이다. S. 가우디차우디는 원통형의 취약한 잎모양을 갖는 흐느적거리는 홍조류의 중대형 종이다. 색상은 밀짚 황색에서 연분홍, 진한 적색 또는 적갈색에 이르기까지 변할 수 있다. 이는 하부의 조간대 해안 및 상부의 부분 조수 풀(upper subtidal pool), 주로 자갈돌 및 모래-진흙 서식지 내의 조개 위에서 주로 발견될 수 있다. "실모양 홍조류"라고 통상적으로 알려진 S. 가우디차우디는 필리핀에서 달콤한 디저트로 종종 만들어진다.
본 발명에 사용된 사르코디오테카는 자연산이거나 재배된 것일 수 있다. 공업적 화장료 응용을 위해, 재배된 사르코디오테카를 사용하는 것이 바람직한데, 그 이유는 재배를 통해 수산양식이 확대되고 바다 환경 조건이 변화함에 따라 그 공급이 제한되는 위험이 감소되기 때문이다. 하나의 특히 바람직한 재배의 방법은 수경-방식의 재배이다. 모든 해조류와 마찬가지로 사르코디오테카는 뿌리가 없으므로, 식물 뿌리가 자양분 수용액 중에 잠기는 진정한 수경 재배는 사용될 수 없다. 그러나, 종래 수경법의 적응이 조류의 성장에 적합하며, 그에 의하면 조류의 성장은 종자로부터 출발하며, 이를 그 후 해수가 펌프주입되는 대형 탱크 내에서 주의깊게 유지시킨다. 상기 해수는 그것이 탱크에 도달할 때 어느 정도 정제될 수 있도록 여과할 수 있고, 정제의 정도는 여과 방법 및 재료에 의존한다. 비료 또는 다른 형태의 자양분이 물에 첨가될 수 있고, 그 자양분 수준은 모니터링되어, 종래의 수경 재배된 육상 식물의 경우와 같이 주의깊게 조절된 성장 환경을 조성할 수 있다. 상기 조절된 성장 환경의 하나의 특별한 유익은 천연 유래의 유전적 변종의 성장 및 공급을 유지하는 능력이다. 뿐만 아니라, 이러한 수경 방식의 환경에서의 성장 도중 영양 조건을 조절함으로써 (예를 들면, 자양분의 종류 및 시간에 따른 수준의 맞춤), 수득되는 해조류 식물을 특별한 최종 용도에 대하여, 임의의 생체활성 및 그의 조절된 선택의 향상을 포함하여, 적정화하는 것이 가능하다. 더 나아가서, 조절된 성장 환경은 화장료와 같은 공업적 응용을 위해 매우 바람직한 일관된 품질을 갖는 해조류의 생산을 가능하게 한다. 이러한 방식으로 재배된 해조류는 아카디안 시플랜츠 사(Acadian Seaplants Ltd, Dartmouth, Nova Scotia, Canada)와 같은 공급원으로부터 시판된다.
수확된 후에, 사르코디오테카 식물의 추출물이 당업자에게 공지된 임의의 추출 방법을 통해 제조될 수 있다. 특히 바람직한 추출물은 탈수된 전체 식물로부터의 수성 추출물이다. 임의의 주어진 추출 공정에 사용된 사르코디오테카의 양은 사용된 방법 및 비용에 근거하여 변할 것이지만, 바람직하게는 약 1% 내지 약 20%의 범위이다.
사르코디오테카 추출물은 엘라스타아제의 저해 및 콜라겐의 자극과 같은 피부 위에서의 노화-방지 효과를 생성하도록 국소적으로 적용된다. 뿐만 아니라, 사르코디오테카 추출물은 산화방지 효과를 제공하기 위해서도 사용될 수 있다. 본 발명의 추출물은 임의의 형태의 화장료 조성물에 사용될 수 있다. 추출물의 양은 수득하고자 원하는 유익 및 조성물의 유형(예, 크림, 겔 또는 로션)을 위한 안전한 유효량이어야 하지만, 바람직하게는 사용되는 추출물의 양은 0.1% 내지 3% 사이의 범위이다.
사르코디오테카를 효모의 생 배양물과 함께 발효하여 생발효물을 생성하는 경우, 특히 엘라스타아제의 저해 및/또는 콜라겐의 자극에 대한 사르코디오테카의 능력이 실질적으로 향상되었음이 예기치않게 발견되었다. 전술한 추출물이 사용될 수 있지만, 하나의 특히 바람직한 구현예에서는, 건조 사르코디오테카에 물을 가하여 식물 펄프 및 물의 슬러리를 생성한 다음, 이를 효모의 생 배양물에 가한다. 하나의 특히 바람직한 구현예에서, 사카로미세스 세라비지아에 (Saccharomyces cerevisiae)가 효모 배양을 위해 사용된다. 사카로미세스 세레비지아에는 공지의 쉽게 입수가능한 발아 효모종이며 가장 일반적인 유형의 발효의 배후가 되는 미생물이다. 본 발명의 목적을 위해, S. 세레비지아에는 당업자에게 공지된 임의의 공지 방법에 의해 배양될 수 있다. 콘드루스 크리스푸스(Chondrus crispus)와 같은 여타 홍조류의 유사한 발효는 사르코디오테카의 발효에 의해 나타난 상기 향상된 저해 및/또는 자극 성질을 나타내지 않았음이 주목된다.
하나의 바람직한 구현예에서 사르코디오테카의 생발효물은 증가된 콜라겐 합성 및 엘라스타아제 저해를 위해 화장료 조성물 중 0.01% 내지 약 5% 사이로 사용된다.
하나의 특히 바람직한 구현예에서, 홍조류의 추출물을 사르코디오테카 생발효물과 혼합하고 보존하여 더욱 강력한 노화-방지 효과를 제공하는 화장료 활성 성분으로서 유용한 배합물을 형성한다. 하나의 바람직한 홍조류 종은 아일랜드 이끼 또는 카라긴 이끼라고 일반적으로 지칭되기도 하며 종종 카라긴(carrageen)의 원천으로 화장품 및 식품 공업에 사용되는 콘드루스 크리스푸스이다. 하나의 바람직한 구현예에서, 상기 생발효물 및 홍조류 추출물은 20:80 비로 배합된다. 또 다른 구현예에서, 상기 홍조류 추출물 및 생발효물은 하나의 활성 성분으로 배합되지 않고, 최종 화장료 배합물의 조성물 내에 조합되어 사용되어 향상된 노화-방지 효과를 제공한다.
TGF-β1(변형 성장 인자 β-1)은 ECM의 생성을 자극하는 것으로 알려진 성장 인자인데, 본 발명의 사르코디오테카 생발효물이 피부에서 내생적인 TGF-β1의 활성에 유익한 상승 작용을 가질 수 있음이 예기치않게 발견되었다.
앞에서 명시한 바와 같이, 본 발명의 추출물 및 생발효물은 화장료 조성물의 활성 성분으로 특히 유용하다. 상기 화장료 조성물은 당업자에 의해 통상의 방식으로 가공될 수 있고 화장료의 용도에 적합하다. 특히, 상기 조성물은 바람직하게는, 잔주름진, 굵게 패인, 거친, 건조한, 푸석한, 노화된 및/또는 UV-손상된 피부에 그 외관 및 촉감을 개선하기 위해 적용되기 적합할 뿐 아니라 피부의 노화를 방지 또는 지연시키기 위해 건강한 피부에 적용하기에도 적합하다.
본 발명의 화장료 조성물은 화장료 분야에 사용되는 각종 첨가제를 더 포함할 수 있다. CTFA 화장료 성분 핸드북은 당업자에 의해 일반적으로 사용되는 광범하게 다양한 비제한적인 화장료 성분을 기재하고 있으며, 이는 본 발명의 화장료 조성물에 사용하기 적합하다. 이들 성분 부류의 예는 마모제, 유화제, 흡수제, 겔화제, 기포억제제, 완충제, 착색제, 막 형성제, pH 조절제, 습윤제, 증점제 및 안료를 포함한다. 여드름-방지 활성성분(예를 들면, 살리실산 또는 벤조일 퍼옥시드), 잔주름-방지 활성성분 (예를 들면, 레티노이드 또는 β-히드록시 산), 산화방지제 (예를 들면, 아스코르브산 및 그의 유도체 또는 차 추출물), 킬레이트제 (예를 들면, 푸릴디옥심), 소염제 (예를 들면, 코르티코스테로이드), 슬리밍제 (예를 들면, 카페인), 피부 미백제 (예를 들면, 오디 추출물 또는 코지산), 또는 햇빛차단제(예를 들면, PARSOL이라는 상품명 하에 시판되는 것들)가 조성물에 의해 제공되도록 의도되는 원하는 전체적 유익에 근거하여 본 발명의 화장료 조성물에 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 화장료 조성물을 제공하기 위해 당 분야에 공지된 통상의 방법에 의해 일반적으로 제조된다. 상기 방법은 성분을 하나 이상의 단계에서, 가열, 냉각, 진공의 적용 등의 존재 또는 부재 하에 비교적 균일한 상태로 혼합하는 것을 전형적으로 수반한다. 상기 조성물은 겔, 크림, 로션 또는 씻어-내는 형태의 제품과 같은 임의의 통상적인 형태일 수 있다.
화장료 조성물을 위한 임의의 주어진 조성물에 있어서 본 발명에 따르는 추출물 또는 생발효물의 양에 대한 상한 및 하한은 상기 화장료 조성물의 원하는 효과, 조성물 중의 다른 성분, 조성물의 유형, 비용 및 실용성에 근거한다. 그러나, 상기 추출물 또는 생발효물은 바람직하게는 최종 중량 기준으로 약 0.1% 내지 약 5% 사이, 더욱 바람직하게는 약 1% 내지 3% 사이의 양으로 포함된다.
여기에 기재된 화장료 조성물은 노화의 징후가 있는 피부를 처리하기 위한 화장료적 처리 방법의 부분으로 특히 유용한데, 여기에서 상기 조성물은 상기 피부의 상태를 개선할 필요가 있는 시간 동안 상기 처리가 필요한 피부에 적용된다. 상기 시간은 상기 화장료 조성물의 효능에 근거하여 변할 것이지만, 상기 화장료 조성물은 피부에 1일 적어도 1회 적용되는 것이 바람직하다.
이하의 실시예는 본 발명을 더욱 설명하고 예시하는 것이며 본 발명의 제한으로 여겨져서는 아니된다.
실시예 1
아카디안 시플랜트 리미티드(Acadian Seaplant Limited, Nova Scotia, Canada)로부터 3 종의 사르코디오테카 조류 균주(모두 사르코디오테카 가우디차우디 또는 그 변종)의 건조 시료를 입수하고, 수도물로 헹구어 실온에서 건조시켰다. 조류 시료의 추출물을 100% 물 및 50% 부틸렌 글리콜 수용액을 부형제로 하여 12.5% w/w로 만들었다. 이들 추출물은 시료를 부형제에 잘게 찢어넣고 실온에서 혼합하면서 2 시간 동안 추출함으로써 제조되었다. 다음, 상기 추출물을 왓트만 (Whatman) #1 여과지(세공 크기 ~11μm)를 이용하여 진공-여과하고, 수득되는 추출물을 4℃에서 보관하였다. 이들 추출물을, 본 명세서의 다른 실시예들 중에서, 3종의 조류 균주 중 어떤 것이 사용되었는지에 근거하여 사르코디오테카 추출물 A, B 및 C라 한다.
실시예 2: 사르코디오테카 생발효물
5% w/w 탈수된 사르코디오테카 가우디차우디의 수중 슬러리를 제조하였다. 상기 슬러리를 사카로미세스 세레비지아에의 생 배양물에 가하고 실온에서 2일 동안 항온처리하여 발효를 완료하였다.
실시예 3: 콘드루스/사르코디오테카 생발효물
콘드루스 크리스푸스의 5% w/w 추출물을 조류의 건조 시료로부터 제조하였다. 실시예 2에 따라 사르코디오테카 생발효물을 제조하고 희석시켰다. 콘드루스 추출물 및 사르코디오테카 생발효물을 80:20 비로 혼합하고 0.1 내지 0.3 μm 필터로 여과하였다.
실시예 4: 산화방지제 시험
실시예 1의 추출물을 시험 시료의 주어진 양이 과량의 ABTS(2,2'-아지노비스-(3-에틸벤조티아졸린-6-술폰산))의 라디칼 양이온을 제거하는 정도를 측정하는 ABTS 총 산화방지제 능력 시험을 이용하여 시험하였다. 임의의 불용성 물질을 시험 전 여과(0.2 μm 세공 크기) 및/또는 원심분리에 의해 시료로부터 제거하였다. 시험이 완료된 후, 상기 능력을 표준 산화방지제 트롤록스(Trolox)(α-토코페롤의 수용성 유사물)의 당량으로 나타내지도록 계산을 수행하였다. 상기 시험은 시험 시료의 "총 산화방지제 능력"을 측정하는 표준 방법이다.
시험은 고정된 양의 ABTS*+를 함유하는 반응 혼합물 내에 다양한 농도의 상기 추출물 분액을 혼합함으로써 수행되었다. 20 분의 반응 시간의 마지막에, 남아있는 제거되지 않은 ABTS*+를 그의 734 nm에서의 흡광도를 측정함으로써 결정하였다. 트롤록스는 각 분석에서, 시험 시료의 산화방지제 능력을 그의 "트롤록스 당량"으로 나타내기 위한 표준 시료로 포함되었다. 구체적으로, 각각의 미지 시료의 산화방지제 능력은 20 μM 트롤록스에 대해 등가인 농도(% v/v)로 나타내어진다. 추출물의 트롤록스 당량이 하기 표 1에 제시된다. 표 1에서 가장 낮은 당량 농도를 갖는 시료가 가장 큰 제거 능력을 갖는다. 표 1의 당량 농도는 종말점에서의 총 제거 능력을 나타낸다 (열역학적 변수).
Figure 112009024936108-pct00001
실시예 5: 백혈구 엘라스타아제 저해 시험
실시예 1의 사르코디오테카 추출물을 인체 백혈구 엘라스타아제 저해 시험에서 시험하였다. 임의의 불용성 물질을 시험 전 여과 (0.2 μm 세공 크기) 및/또는 원심분리에 의해 상기 추출물로부터 제거하였다. 시험에서 양성 활성은 추출물의 노화-방지 활성을 나타낸다. 시험은 다양한 농도의 시험 시료의 존재 하에 인체 백혈구 엘라스타아제에 의해 발색성 펩티드 기질의 절단 속도(광학 밀도 증가)를 따라서 수행된다. 상기 데이터는 각 시료에 대한 IC50 값으로 나타낸다. IC50은 인체 백혈구 엘라스타아제를 50% 만큼 저해하는 시험 시료의 농도이다. IC50 값이 낮을수록 더욱 강력한 것으로 나타난다. 이들 시험의 결과를 계산된 IC50 값으로 표 2에 나타낸다.
Figure 112009024936108-pct00002
실시예 6: 콜라겐 자극 시험
실시예 1의 사르코디오테카 추출물 시료를 유형 1 콜라겐 자극 시험으로 시험하였다. 임의의 불용성 물질을 시험 전 여과 (0.2 μm 세공 크기) 및/또는 원심분리에 의해 상기 시료로부터 제거하였다.
3 가지 콘드루스 크리스푸스 균주의 건조 시료는 아카디안 시플랜츠 리미티드(Nova Scotia, Canada)로부터 입수하였고, 수성 콘드루스 추출물은 실시예 1의 사르코디오테카 추출물(예, 100%의 물에서 12.5% w/w)의 경우와 동일한 추출 방법을 사용하여 비교 목적으로 제조되었다. 인체 피부 섬유아세포를 다수-웰 플레이트에서 합류되도록 성장시킨 다음 다양한 농도의 사르코디오테카 및 콘드루스 추출물로 자극하였다. 3 일 동안 항온처리 후, 상기 성장 배지 내로 분비된 유형 1 콜라겐의 양을 ELISA로 측정하였다. 각 시험 조건 하에 존재하는 콜라겐의 양을 자극되지 않은 세포로부터의 배지에서 검출된 양의 백분율로 표시한다. 수성 추출물의 상기 시험의 결과를 하기 표 3에 나타낸다. 시료의 독성 농도는 하기 표에서 기호 "---"로 나타낸다.
Figure 112009024936108-pct00003
시료를 3개조의 웰에서 시험하고 평균 ± SE (평균의 표준 오차)를 계산하였다. 모든 경우 (0.03% v/v 콘드루스 추출물 A 제외) 비-독성 농도의 경우 p 값은 0.01 미만으로 콜라겐 합성에 대한 상당한 자극을 나타냈다.
실시예 7: 조류 추출물, 조류 추출물/효모 추출물 조합 & 조류/효모 발효물
하기 시료를 상기 실시예 5 및 6의 추출물과 같이 엘라스타아제 저해 및 콜라겐 생성 자극의 2 가지 노화-방지 활성에 대하여 시험하였다.
1. 사르코디오테카 및 콘드루스 조류의 5% w/w 수성 추출물
2. 5% 해조류 추출물 20% + 효모 추출물 (사카로미세스 세레비지아에) 80%
3. 2일 동안 항온처리된 5% 해조류 슬러리 20% + 생 이스트 80% (사카로미세스 세르비칼)
추출물은 해조류인 콘드루스 및 사르코디오테카, 및 효모인 사카로미세스 세레비지아에의 시료로부터 통상의 추출 방법을 이용하여 제조되었다. 사카로미세스 세레비지아에의 배양물도 통상의 방법을 이용하여 제조되었다. 추출 및 항온처리 후, 시료를 왓트만 1 마이크로미터 여과지를 이용하여 여과한 다음 0.8 및 0.2 마이크로미터 여과를 이용하여 더 맑게 하였다. 상기 여액을 실시예 5 및 6에 기재된 방법에 따라 엘라스타아제 저해 및 콜라겐 자극에 대하여 시험하였다.
백혈구 엘라스타아제의 저해
결과를 하기 표 4에 요약한다.
Figure 112009024936108-pct00004
일반적으로, 콘드루스 추출물은 낮은 엘라스타아제 저해 활성을 보였고 발효로부터 또는 효모 추출물과 조합되어 사용될 시 유익이 없었다. 그러나, 사르코디오테카의 경우, 생 이스트와 함께 발효시킨 추출물의 경우 엘라스타아제 저해 활성에 실질적인 증가가 있었다. 발효는 사르코디오테카 추출물의 활성을 20 배까지 증가시켰다. 반대로, 80% 효모 추출물로 희석한 경우, 활성은 매우 낮아, 효모 배양액(죽은 효모 추출물)은 엘라스타아제 저해 활성이 없음을 나타냈다.
콜라겐 자극 시험
결과를 하기 표 5에 요약한다.
Figure 112009024936108-pct00005
콘드루스 시료들 중에서, 발효물(슬러리 + 생 이스트)은 적당한 콜라겐 자극 활성을 나타냈고, 5% w/w 추출물 및 효모 추출물로 희석된 추출물은 매우 최소의 활성을 나타냈다. 사르코디오테카 시료들 중, 발효물(슬러리 + 생 이스트)은 매우 양호한 콜라겐 자극 활성을 나타냈다. 예를 들어, 1%의 상기 발효물은 대조군의 350%만큼이나 콜라겐 합성을 증가시켰다. 효모 추출물로 희석된 추출물은 활성을 나타내지 않았다. 요약하면, 엘라스타아제 저해 활성의 경우에서와 같이, 사르코디오테카 활성은 발효 공정에 의해 향상된 한편, 발효 공정은 콘드루스 추출물의 활성을 향상시키지 못하였다.
실시예 8: 사르코디오테카 생발효물과 콘드루스 추출물의 배합물
콘드루스/사르코디오테카 생발효물을 다음과 같이 제조하였다: 콘드루스 크리스푸스의 0.67% w/w 추출물을 조류의 건조 시료로부터 제조하였다. 0.056% w/w 탈수된 사르코디오테카 가우디차우디의 수중 슬러리를 제조하였다. 상기 슬러리를 사카로미세스 세레비지아에의 생 배양물에 가하고 실온에서 2일 동안 항온처리하여 발효를 완료시켰다. 콘드루스 추출물 및 사르코디오테카 생발효물을 80:20 비로 혼합하고 0.1-0.3 μm 필터로 여과한 다음 더 희석하였다.
백혈구 엘라스타아제 저해 시험
다양한 농도의 콘드루스/사르코디오테카 생발효물에 대하여 실시예 5에 기재된 것과 같이 시험을 수행하였다. 결과를 하기 표 6에 나타낸다.
Figure 112009024936108-pct00006
콜라겐 자극 시험
실시예 6에 기재된 것과 같이 시험을 수행하였다. 분석은 2 개의 시료를 사용하였다: 하나는 4℃에 연속적으로 보관된 것이고, 하나의 분액은 3-일 세포 자극에 앞서 1주 동안 40℃로 변경된 것이었다. 하기 표 7(오차 막대가 1 SE임)은 4℃ 및 40℃ 시료의 경우 처리되지 않은 대조 배양물의 백분율로서의 콜라겐 함량을 보여준다.
Figure 112009024936108-pct00007
모든 농도에서의 추가 시료는 3-일 세포 자극에 앞서 6 주 동안 40℃에서 보관되었다. 세포 자극의 결과를 도 3에 나타낸다. 콜라겐 자극에 대한 IH2837의 효능은 40℃에서의 보관이 6 주 동안 지속된 경우 더욱 증가한 것으로 밝혀졌다.
실시예 9: 사르코디오테카 생발효물 및 성장 인자
단독으로 및 조합된, 본 발명의 사르코디오테카 생발효물에 의한, 및 TGF-β1에 의한, 콜라겐 생성을 시험하였다. 사르코디오테카 생발효물은 여기에 기재된 것과 같이 제조되었다. 정상의 인체 피부 섬유아세포를 상기 두 작동자(effector)의 존재 하에 3일 동안 성장시켰다. 상청액 배지에서 용해성 유형 I 콜라겐의 수준을 효소 면역측정법(ELISA)에 의해 측정하였다. 자극의 개시 후 여러 시점에 배지를 수거하였다. 결과를 표 8에 나타내는데, 여기에서, 모든 조건 하에 콜라겐 수준이 증가하였으나, 사르코디오테카 생발효물과 TGF-β1을 합한 것으로 처리된 배양물에서의 수준이 그들 개별적인 효과의 합보다 컸음을 알 수 있다. 이는 사르코디오테카 생발효물이 천연의 내생적인 성장 인자의 유익한 효과를 현저하게 할 수 있음을 보여주는 상승 작용이다.
Figure 112009024936108-pct00008
실시예 10: 화장료 조성물
하기 실시예는 본 발명에 따르는 피부 보호 조성물을 예시한다. 조성물은 통상의 방법으로 가공될 수 있고 화장료로서의 용도에 적합하다.
본 실시예는 본 발명에 따르는 노화-방지 크림을 예시한다.
Figure 112009024936108-pct00009
본 실시예는 본 발명에 따르는 수-중-유 크림을 예시한다.
Figure 112009024936108-pct00010
본 실시예는 본 발명에 따르는 세안용 씻어내는 로션/겔 조성물을 예시한다.
Figure 112009024936108-pct00011
본 실시예는 본 발명에 따르는 노화-방지 크림을 위한 조성을 예시한다:
Figure 112009024936108-pct00012
본 실시예는 본 발명에 따르는 알코올성 로션을 예시한다.
Figure 112009024936108-pct00013
본 실시예는 본 발명에 따르는 비-수성 피부 보호 조성물을 예시한다.
Figure 112009024936108-pct00014
본 실시예는 본 발명에 따르는 SPF 15의 햇빛차단 조성물을 예시한다.
Figure 112009024936108-pct00015
본 발명은 여기에 기재된 것을 이용하여 당업자에게 명백한 상이하지만 동등한 방식으로 수정 및 실시될 수 있으므로, 여기에 예시되고 기재된 본 발명의 구체적 구현예는 단지 대표적인 의도임이 이해되어야 한다. 그러므로, 상기 개시된 특정 구현예는 변경 또는 수정될 수 있음이 명백하며, 그러한 모든 변법은 본 발명의 범위 및 정신 내에 있는 것으로 간주된다.

Claims (17)

  1. 사르코디오테카(Sarcodiotheca)의 추출물 및 화장료에 허용가능한 부형제를 포함하는 화장료 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 추출물이 사르코디오테카 가우디차우디(Sarcodiotheca gaudichaudii)의 추출물인 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 조성물이 1 중량% 내지 3 중량%의 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서, 크림, 로션, 겔, 또는 씻어내는 유형의 제품인 화장료 조성물.
  5. 사르코디오테카 식물 펄프 및 물의 슬러리를 생 이스트 배양물과 함께 발효시켜 수득가능한 사르코디오테카의 발효물을 포함하는 화장료 조성물.
  6. 제 5 항에 있어서, 사르코디오테카는 사르코디오테카 가우디차우디인 화장료 조성물.
  7. 제 5 항에 있어서, 상기 슬러리가 1 중량% 내지 5 중량%의 S. 가우디차우디를 함유하는 화장료 조성물.
  8. 제 5 항에 있어서, 효모가 사카로미세스 세레비지아에(Saccharomyces cerevisiae)인 화장료 조성물.
  9. 제 5 항에 있어서, 화장료에 허용가능한 부형제를 추가로 포함하는 화장료 조성물.
  10. 제 9 항에 있어서, 홍조류의 추출물을 더 포함하는 화장료 조성물.
  11. 제 10 항에 있어서, 상기 홍조류가 콘드루스 크리스푸스(Chondrus crispus)인 화장료 조성물.
  12. 슬러리가 사르코디오테카 식물 펄프 및 물을 포함하고 생 이스트 배양물과 함께 배양된 것인, 슬러리로부터 생성된 생발효물;
    콘드루스 크리스푸스의 추출물;
    적어도 1종의 방부제
    의 배합물을 포함하는 화장료 조성물.
  13. 제 12 항에 있어서, 배합물이 20% v/v의 생발효물을 포함하는 화장료 조성물.
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 제 1 항 또는 제 9 항의 화장료 조성물을 필요한 피부에 국소적으로 적용하는 것을 포함하는, 치료용을 제외한, 건강한 사람을 대상으로 미용용으로 노화의 징후를 갖는 피부를 처리하기 위한 화장료 처리의 방법.
  17. 제 16 항에 있어서, 상기 화장료 처리가 산화방지 효과, 엘라스타아제의 저해, 또는 콜라겐 자극으로 이루어진 군에서 선택되는 방법.
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