BRPI0717551A2 - Composição cosmética, ingrediente ativo cosmético, uso de um extrato de sarcodiotheca, e, método de tratamento cosmético - Google Patents
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Description
"COMPOSIÇÃO COSMÉTICA, INGREDIENTE ATIVO COSMÉTICO, USO DE UM EXTRATO DE SARCODIOTHECA, E, MÉTODO DE TRATAMENTO COSMÉTICO" CAMPO TÉCNICO A presente invenção refere-se a um extrato de algas marinhas,
Sarcodiotheca, e mais particularmente a Sarcodiotheca gaudichaudii, e a seus usos como um ingrediente ativo para o cuidado da pele em composições cosméticas. A invenção também se refere a uma biofermentação de Sarcodiotheca, tal que, por exemplo, S. gaudichaudii, útil como um ingrediente ativo para aplicações cosméticas contra o envelhecimento, e particularmente útil quando usado em combinação com um extrato de algas vermelhas, tal que Chondrus crispus. TÉCNICA ANTECEDENTE
A matriz extracelular ("ECM") da pele é extremamente importante no processo de envelhecimento. Não apenas a ECM provê um esqueleto tridimensional requerido para a ligação à pele e a orientação apropriada da pele, mas a ECM também funciona como o conduto de distribuição para os sinais às células da pele que estimulam as células para desempenhar funções críticas, tais que a reparação do tecido. Quando a ECM é danificada através da exposição ambiental ou do processo de envelhecimento normal, a pele desenvolve uma aparência envelhecida indesejável, tal que a formação de rugas, que é devida, em parte, ao comprometimento da integridade estrutural de proteínas fibrosas no interior da matriz, tais que o colágeno ou a elastina. Deste modo, é desejável desenvolver ingredientes ativos, e cosméticos que compreendam tais ingredientes ativos, de um modo a reduzir o dano às proteínas fibrosas existentes no interior da pele ou, de um modo alternativo, estimular a produção de mais destas proteínas. Por exemplo, a elastase de leucócito humana é uma serina protease, liberada pelas células sangüíneas brancas ativadas e é capaz de causar um dano extensivo a muitos dos componentes de proteína da ECM, de um modo particular à elastina, na pele exposta à luz UV ou a outros estímulos irritantes. Deste modo seria vantajoso que um cosmético apresentasse um efeito inibitório sobre esta protease, de um modo a proteger contra o dano à ECM.
Numerosos compostos foram descritos no campo cosmético como sendo benéficos à ECM ou de um outro modo dirigidos a retardar, minimizar ou eliminar os sinais do envelhecimento ou do dano ambiental à pele. No entanto, como um número cada vez mais crescente de consumidores começa a demandar produtos que possuam uma origem "natural " perceptível, existe uma necessidade contínua de que sejam formulados compostos cosméticos que utilizem ingredientes ativos para o cuidado da pele recentemente desenvolvidos, baseados em plantas e os similares.
Plantas marinhas, tais que algas, desenvolveram mecanismos e químicas para a proteção e a defesa contra as condições ambientais extremas do mar, tais que dessecação (alta salinidade), radiação solar e alta pressão, e se adaptaram para que se tornassem capazes de sobreviver em diversos ambientes marinhos. As algas podem estar em uma faixa a partir de organismos unicelulares microscópicos a até plantas marinhas que excedem a 100 metros de comprimento, e que são classificadas de acordo com a cor — azuis, vermelhas, verdes e marrons. Muitas destas algas tanto foram historicamente como continuam a ser utilizadas para a saúde e para o embelezamento como uma parte de remédios medicinais, dietas diárias, ou suplementos dietéticos, ou cosméticos. De um modo surpreendente, foi verificado que os extratos e
biofermentos que se originam a partir do gênero de plantas marinhas Sarcodiotheca proporcionam benefícios contra o envelhecimento, quando usados através da inibição de elastase e/ou estimulação da produção de colágeno. Deste modo, a presente invenção refere-se a extratos marinhos, em particular a extratos de Sarcodiotheca, para o uso em composições cosméticas, de um modo a aperfeiçoar a condição da pele e/ou a prover efeitos contra o envelhecimento.
A presente invenção também se refere a biofermentações (aqui
também referidas como a "biofermentos") de Sarcodiotheca para o uso em composições cosméticas, de um modo a aperfeiçoar a condição da pele e/ou a prover efeitos contra o envelhecimento, opcionalmente misturadas com extratos de outras algas vermelhas ou com o fator de crescimento humano. A presente invenção refere-se ainda ao uso cosmético dos
extratos marinhos descritos e a biofermentos, de um modo a estimular a produção de colágeno e/ou inibir a elastase de leucócito humano na pele.
De um modo adicional, a presente invenção refere-se ao uso cosmético dos extratos marinhos descritos e de biofermentos, de um modo a prover um efeito antioxidante na pele.
A presente invenção refere-se também a composições cosméticas, tais que géis, loções ou cremes, que compreendem quantidades seguras e efetivas dos extratos marinhos e/ou os biofermentos da presente invenção.
Estas e outras características e vantagens da presente invenção
tornar-se-ão evidentes àqueles versados na técnica, a partir de uma leitura da presente exposição.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Todos os percentuais e razões aqui suados estão em peso da composição total, a não ser que designados de um outro modo, e todas as temperaturas estão em graus Celsius, a não ser que designado de um outro modo.
O termo "quantidade segura e eficaz", tal como aqui usado, compreende uma quantidade de um composto ou composição, suficiente para induzir um benefício positivo, tal que aqui descrito, mas suficientemente baixa para evitar efeitos colaterais, a critério daquele habilitado na técnica.
O termo " suspensão", tal como aqui usado, compreende uma suspensão de material de planta em água.
Como aqui usado, aperfeiçoar a condição da pele inclui
diminuir, minimizar e/ou prevenir irregularidades da pele, que podem ser detectadas de um modo visual ou através do tato, tais irregularidades incluindo, mas não limitadas a, rugas, irregularidades ou rugosidades, perda da elasticidade da pele, caimento, ruptura de colágeno, perda de pele em recuo devido à deformação, e amarelamento.
Foi verificado, de um modo inesperado, que os extratos de planta marinha do gênero Sarcodiotheca proporcionam benefícios contra o envelhecimento quando aplicados à pele, de um modo particular através da ação como um antioxidante, um agente de inibição de elastase, e/ou um agente de estimulação do colágeno. Estas plantas marinhas podem ser encontradas, por exemplo, a longo de ambas as costas oriental e ocidental dos Estados Unidos e do Canadá, mas também ao longo das costas da Inglaterra, Chile, Peru, e em outros locais, que incluem as seguintes espécies: S. caríbaea, S. furcata, S. divaricata, S. gaudichaudii, e S. elongata. Uma outra espécie particularmente preferida é a Sacrodiotheca
gaudichaudii. S. gaudichaudii é uma espécie média a grande de algas vermelhas flácidas, com frondes cilíndricas, frágeis. A cor pode variar de amarelo palha a rosa pálido, vermelho profundo ou castanho avermelhado. Ela pode ser encontrada em reservatórios de marés intermediários inferiores e de submarés superiores, principalmente sobre pedras pequenas e conchas no interior de habitais arenosos- lamacentos.
A Sacrodiotheca usada na presente invenção pode ser de ocorrência natural ou cultivada. Para aplicações cosméticas industriais, é preferido o uso de Sareodiotheea, pois o cultivo reduz o risco de que os suprimentos se tornem limitados à medida em que a aquacultura se expande e as condições do ambiente marinho são alteradas. Um método de cultivo particularmente preferido é um cultivo do tipo hidropônico. A Sacrodiotheca, tal como todas as outras plantas marinhas, carece de raízes, de tal modo que o cultivo hidropônico efetivo, no qual as raízes das plantas são imersas em uma solução de nutriente aquosa, não podem ser utilizados. No entanto, uma adaptação de plantas hidropônicas tradicionais é adequada ao crescimento de algas, de um modo tal que o crescimento das algas é iniciado a partir de materiais marinhos, que são então cuidadosamente mantidos em tanques grandes, ao interior dos quais a água marinha é bombeada. Esta água marinha pode ser filtrada, de um modo tal que ela possa estar algo purificada quando ela alcança os tanques, a quantidade de purificação dependendo do método de filtração e dos materiais. O fertilizante ou outras formas de nutrientes podem ser adicionados à água, e os níveis de nutrientes podem ser monitorados, resultando em um ambiente de crescimento cuidadosamente controlado, tal que no caso de plantas terrestres eu são desenvolvidas de um modo hidropônico tradicional. Um benefício particular deste ambiente de crescimento controlado é a capacidade de que o crescimento seja sustentado e o suprimento de variantes genéticas de ocorrência natural. De um modo adicional, através do ajuste das condições de nutriente (por exemplo, através do ajuste dos tipos e níveis de nutriente ao longo do tempo), durante o crescimento neste ambiente de tipo hidropônico, é possível otimizar as plantas de algas marinhas resultantes para usos finais particulares, incluindo aumento de qualquer bioatividade e a seleção controlada das mesmas. Além disso, o ambiente de crescimento controlado permite a produção de algas marinhas tendo uma qualidade consistente, o que é altamente desejável para aplicações industriais, tal que no caso de cosméticos.
As algas marinhas cultivadas deste modo estão disponíveis comercialmente a partir de fornecedores, tais que Acadian Seaplants Ltd. de Dartmouth, Nova Escócia, Canadá.
Uma vez coletados, os extratos das plantas Sacrodiotheca podem ser produzidos através de qualquer método de extração conhecido daqueles versados na técnica. Extratos particularmente preferidos são extratos aquosos de plantas inteiras, desidratadas. A quantidade de Sareodiotheea utilizada em qualquer determinado processo de extração irá variar, com base na metodologia e custo usados, mas de modo preferido em faixas de a partir de cerca de 1 % a cerca de 20%.
Os extratos de Sareodiotheea são utilizados em composições cosméticas, aplicadas de um modo tópico para produzir os efeitos contra o envelhecimento da pele, tais que a inibição da elastase e a estimulação do colágeno. De um modo adicional, os extratos de Sareodiotheea podem ser utilizados de um modo a prover um efeito antioxidante. Os extratos da presente invenção pode ser utilizados em qualquer forma de composição cosmética, ou na composição cosmética. A quantidade do extrato deve ser uma quantidade segura e efetiva para que o benefício desejado seja alcançado e o tipo de composição (por exemplo, creme, gel ou loção), mas de um modo preferido a quantidade de extrato utilizada está em uma faixa de entre 0,1 % e 3 %.
Verificou-se, de um modo inesperado, que se Saerodiotheea
fosse fermentado com uma cultura viva de levedura de um modo a produzir um biofermento, a potência de Saerodiotheea, em particular para a inibição de elastase e/ou a estimulação de colágeno, foi substancialmente aumentada. Embora o extrato acima descrito possa ser usado, em uma modalidade particularmente preferida, a água é adicionada a Saerodiotheea seca, de um modo a produzir uma suspensão de polpa de planta e água, que é então adicionada a uma cultura viva de levedura. Em uma modalidade particularmente preferida, Saccharomyees eerevisiae é usado para a cultura de levedura. Saccharomyees eerevisiae é uma espécie bem conhecida e prontamente disponível de levedura em botão e o microorganismo por trás do tipo mais comum de fermentações. Para os propósitos da presente invenção, S. cerevisiae pode ser cultivado através de quaisquer métodos convencionais para aqueles versados na técnica. É observado que fermentações similares de outras algas vermelhas, tais que Chondus crispus, não demonstram estas propriedades de inibição e/ou de estimulação aumentadas, demonstradas pelas fermentações de Sarcodiotheca.
Em uma modalidade preferida, o biofermento de Sareodiotheea é utilizado entre 0,01% a cerca de 5% em uma formulação cosmética para a síntese de colágeno aumentada e a inibição de elastase.
Em uma modalidade particularmente preferida, um extrato de algas vermelhas é misturado com o biofermento de Saerodiotheea e preservado, de um modo a formar uma mistura útil como um ingrediente ativo cosmético, proporcionando efeitos contra o envelhecimento ainda mais potentes. Uma espécie de alga vermelha preferida é Chondrus crispus, também comumente referida como a musgo irlandês ou a musgo de carragenano e muitas vezes utilizada nas indústrias de alimentos e de cosméticos como uma fonte de carragenano. Em uma modalidade preferida, o biofermento e o extrato de algas vermelhas são misturados em uma razão de 20: 80. Em ainda uma outra modalidade, o extrato de algas vermelhas e o biofermento não são misturados como um ingrediente ativo, mas são usados em combinação dentro da formulação de um produto cosmético final, de um modo a proporcionar efeitos contra o envelhecimento aumentados.
TGF- β 1 (fator de crescimento de transformação beta-1) é um fator de crescimento, conhecido como estimulando a produção de ECM, tendo sido inesperadamente verificado que o biofermento de Saerodiotheea da presente invenção pode proporcionar um efeito sinérgico benéfico sobre a atividade de TGF- βΐ endógeno na pele.
Como especificado previamente, os extratos e os biofermentos da presente invenção são particularmente úteis como ingredientes ativos em composições cosméticas. Estas composições cosméticas podem ser processadas de um modo convencional por aquele versado na técnica, e são adequadas para o uso cosmético. De um modo particular, as composições são, de um modo preferido, adequadas para a aplicação à pele enrugada, marcada, rugosa, seca, flocosa, envelhecida e/ou pele que tenha sofrido dano por UV, de um modo a melhorar a aparência e tato da mesma, assim como para a aplicação à pele saudável, de um modo a prevenir ou retardar a deterioração da pele.
As composições cosméticas da presente invenção podem ainda
compreender vários aditivos utilizados no campo cosmético. O CTFA Cosmetic Ingredient Handbook descreve uma ampla variedade de ingredientes cosméticos não- limitativos comumente usados por aqueles versados na técnica, e que são adequados para o uso nas composições cosméticas da presente invenção. Exemplos destas classes de ingrediente incluíram: abrasivos, emulsificantes, absorventes, agentes de geleificação, agentes de supressão de espuma, agentes de tamponamento, colorantes, formadores de filme, agentes de ajuste do pH, umectantes, espessantes e
r
pigmentos. E ainda reconhecido que os ingredientes ativos cosméticos adicionais, tais que os ingredientes ativos antiacne (por exemplo, o ácido salicílico ou peróxido de benzoíla), ingredientes ativos anti- rugas (por exemplos os retinóides ou os ácidos beta-hidróxi), antioxidantes (por exemplo, o ácido ascórbico e os seus derivados ou extratos de chá), agentes de quelação (por exemplo, íurildioxima), agentes antiinflamatórios (por exemplo corticoesteróides), agentes e emagrecimento (por exemplo, cafeína), agentes para o clareamento da pele, (por exemplo, extrato de amora ou ácido cójico), ou filtros solares (por exemplo, aqueles comercialmente disponíveis sob a marca PARSOL), podem ser utilizados nas composições cosméticas da presente invenção, com base nos benefícios totais desejados, intencionados a serem conferidos pela composição.
As composições da presente invenção são, de um modo geral, preparadas através de métodos convencionais, conhecidos na técnica para a produção de composições cosméticas. Tais métodos envolvem, de um modo típico, a mistura de ingredientes em um ou mais estágios até um estado relativamente uniforme, com ou sem aquecimento, resfriamento, aplicação de vácuo, ou os similares. As composições podem ser apresentadas em qualquer forma convencional, tal que como um gel, creme, loção, ou um produto do tipo para retirada com a lavagem. Os limites inferiores e superiores para a quantidade de um
extrato ou biofermento de acordo cm a presente invenção em qualquer determinada formulação para uma composição cosmética são baseados tanto no efeito desejado das composições cosméticas, nos outros componentes da formulação, no tipo de composição, custo e praticidade. No entanto, o extrato ou biofermento é, de um modo preferido, incluído em uma quantidade de entre cerca de 0,1 % e cerca de 5%, com base no peso final, de um modo mais preferido entre cerca de 1 % e de 3%.
As composições cosméticas aqui descritas são, de um modo particular, úteis como uma parte do método de tratamento cosmético para o tratamento da pele que apresente sinais de envelhecimento, em que tais composições são aplicadas à pele, que esteja em necessidade de um tal tratamento, durante a duração de um período de tempo necessário para que a condição de uma tal pele seja aperfeiçoada. Embora uma tal duração de tempo deva variar com base na eficácia de uma tal composição cosmética, é preferido que a composição cosmética seja aplicada à pele pelo menos uma vez ao dia.
Os exemplos que se seguem descrevem e ilustram de um modo adicional a presente invenção e não devem ser construídos como limitações da presente invenção. EXEMPLO 1
Amostras secas de três cepas de algas Sarcodiotheca (todas Sarcodiotheca gaudiehaudii ou variantes da mesma) foram recebidas a partir de Acadian Seaplants Limited de Nova Escócia, Canadá, e foram enxaguadas com água de bica e deixadas secar em temperatura ambiente. Extrações das amostras de algas foram efetuadas em 12,5 % p/p, tanto em 100% de água como em 50% de butileno glicol em água como veículos. Estes extratos foram preparados através da trituração da amostra no veículo e extração em temperatura ambiente, durante 2 horas, com misturação. Os extratos foram então filtrados a vácuo usando um papel Whatman # 1 (tamanho de poro ~ 11 μηι) e os extratos resultantes foram armazenados a 4°C. Estes extratos são referidos em outros exemplos aqui como extratos de Sarcodiotheca A, B e C, com base nos quais, as três cepas de algas foram utilizadas.
EXEMPLO 2: Biofermento de Sareodiotheea Uma suspensão de 5% p/p de Sareodiotheea gaudiehaudii em
água foi preparada. A suspensão foi adicionada a uma cultura viva de Saccharomyees eerevisiae e incubadas, em temperatura ambiente, durante dois dias, de um modo a completar a fermentação.
EXEMPLO 3: Biofermento de Chondrus /Sareodiotheea Um extrato de 5% p/p de Chondrus erispus foi preparado a
partir de amostras secadas das algas. Um biofermento de Sareodiotheea foi preparado de acordo com o Exemplo 2, e diluído. O extrato de Chondus e o biofermento de Sareodiotheea foram misturados em uma razão de 80: 20 e filtrados através de um filtro de 0,1 -0,3 μηι. EXEMPLO 4: Testes de Antioxidante
Os extratos do Exemplo 1 foram testados usando o Teste de Capacidade Antioxidante Total ABTS, que mede a extensão em que uma determinada quantidade de uma amostra de teste varre um excesso de cátion de radical de ABTS ácido (2,2'-azinobis-(3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico)). Quaisquer materiais insolúveis foram removidos a partir das amostras através de filtração (tamanho de poro 0, 2 μπι) e/ou centrifugação antes dos testes. Após os testes serem completados, foi então efetuado um cálculo, de modo a expressar esta capacidade em termos da quantidade equivalente do antioxidante padrão Trolox (um análogo de α-tocoferol). Este teste é um método padrão para determinar a "capacidade antioxidante total" de uma amostra de teste.
O teste foi executado através da mistura de alíquotas dos extratos em concentrações variáveis em misturas de reação contendo uma quantidade fixa de ABTS"+. No final de um período de reação de 20 minutos, o ABTS*+ não- varrido remanescente foi determinado através da absorção a 734 nm. Trolox é incluído como uma amostra em cada ensaio em um padrão com o propósito de expressar a capacidade antioxidante da amostra de teste em termos de seu "equivalente de Trolox". De um modo específico, a capacidade antioxidante de cada desconhecido é expressa em termos de concentração (% v/v), que seja equivalente a 20 μΜ de Trolox. As equivalências de Trolox dos extratos são apresentadas na Tabela 1 abaixo. As amostras com as concentrações equivalentes mais baixas na Tabela 1 possuem a maior capacidade de varredura. As concentrações equivalentes na Tabela 1 representam a capacidade de varredura total no ponto final (um parâmetro termodinâmico).
TABELA 1: % v/v de concentrações das amostras de teste de extrato de algas marinhas, que são equivalentes a 200 μΜ de Trolox em termos de Capacidade de Varredura Radical de ABTS:
Amostra Extrato de Agua 50 % de Extrato de BG Extrato de Sarcodiotheca A 0,75 1,45 Extrato de Sarcodiotheca B 0,78 1,20 Extrato de Sarcodiotheea C 1,23 1,86
EXEMPLO 5: Teste de Inibição de Elastase de Leucócito
Os extratos de Sarcodiotheca do Exemplo 1 foram testados em um teste de inibição de elastase de leucócito humano. Quaisquer materiais insolúveis foram removidos a partir dos extratos através de filtração (tamanho de poro 0,2 μιτι) e/ou centrifugação antes dos teste. A atividade positiva no teste demonstra a atividade contra o envelhecimento para o extrato. O teste foi executado seguindo-se a taxa de clivagem (aumento de densidade óptica) de um substrato de peptídeo cromogênico através de elastase de leucócito humano, na presença de concentrações variáveis das amostras de teste. Os dados são apresentados como valor de IC50 para cada uma das amostras. A IC50 é a concentração da amostra de teste, que inibe a elastase de leucócito humano em 50%. Uma potência maior é indicada por um valor de IC50 mais baixo. Os resultados destes testes são apresentados na Tabela 2 como os valores de IC50 calculados.
TABELA 2: Valores de IC 50 para a inibição de elastase de Leucócito
Amostra f Extrato de Agua 50 % de Extrato de BG Extrato de Sarcodiotheca A 0,076 >5 Extrato de Sarcodiotheea B 0,018 0,9 Extrato de Sareodiotheea C 0,007 0,9
EXEMPLO 6: Teste de Estimulação de Colágeno Amostras do extrato de Sarcodiotheca do Exemplol foram
testadas em um teste de estimulação de colágeno do tipo 1. Quaisquer materiais insolúveis foram removidos a partir das amostras por filtração (tamanho de poro 0,2 μηι) e/ou centrifugação antes dos testes. Amostras secadas de três cepas de Chondus crispus foram recebidas a partir de Acadian Seaplants Limited de Nova Escócia, Canadá, e os extratos de Chondrus aquosos foram preparados, para fins comparativos, usando a mesma metodologia d extração que para os extratos de Sareodiotheea (por exemplo, 12,5 % p/p em 100% de água) do Exemplo 1. Células de fibroblastro dérmico humano foram desenvolvidas até a confluência em placas de multirreservatórios e então estimuladas com concentrações variáveis, tanto dos extratos de Sareodiotheea, como de Chondrus. Após a incubação durante 3 dias, a quantidade de colágeno do tipo 1, que foi secretada ao interior do meio de crescimento foi medida através de ELISA. A quantidade de colágeno presente sob cada condição de teste é expressada como um percentual daquela detectada no meio a partir de células não- estimuladas. Os resultados destes testes para os extratos aquosos são apresentados na Tabela 3 abaixo. As concentrações tóxicas das amostras são indicadas pelo símbolo " —" na Tabela abaixo.
TABELA 3: Estimulação de colágeno através de extratos aquosos de Sarcodiotheca e Chondrus
Amostras de a Algas Produção de Colágeno expressa como % de controle não - substituído +/SE Concentração de Teste (% v/v) 0,01 0,03 0,1 0,3 1,0 3,0 Extrato A de Sarcodiotheca N/A N/A 215+/- 14 283+/-19 256+/-15 — Extrato B de Sareodiotheca 189+/-30 226+/-31 250+/-28 209+/-20 — — Extrato C de Sareodiotheca 210+/-22 272+/-16 260+/-24 — — — Extrato A de Chondrus N/A 131+/-13 162+/-25 215+/-27 265+/-25 259+/-33 Extrato B de Chondrus N/A N/A 142+/-14 181+/-14 231+/-20 229+/-12 Extrato C de Chondrus N/A 155+/-10 227+/-19 276+/-19 312+/-11 274+/-12
As amostras foram testadas em reservatórios de um modo
tríplice e foi calculado +/- SE médio (erro padrão da média). Em todos os casos (exceto 0,03 % v/v de extrato A de Chondrus), os valores ρ para as concentrações não- tóxicas foram inferiores a 0,01, indicando uma estimulação significativa da síntese de colágeno.
EXEMPLO 7: Extratos de Algas, Combinações de Extrato de Algas /Extrato de Levedura & Fermentos de Algas/Levedura As amostras que se seguem foram testadas para as duas
atividades contra o envelhecimento, a inibição de elastase e a estimulação de produção de colágeno, como os extratos dos Exemplos 5 e 6 acima.
1. 5% p/p de extratos de algas de Sareodiotheea e de Chondrus
2. 20% de 5% de extratos de plantas marinhas + 80% de extrato de levedura (Sarccharomyces eerevisiae)
3. 20% de 5% de suspensão de plantas marinhas + 80% de levedura viva (Sarccharomyees eervieal) incubada durante 2 dias.
Os extratos foram preparados usando métodos de extração convencionais a partir de amostras de algas marinhas, Chondrus e Sareodiotheea, e a levedura, Sarccharomyees eerevisiae. Uma cultura de Sarccharomyees eervisiae foi também preparada usando métodos convencionais. Após a extração e a incubação, as amostras foram filtradas usando papel de filtro Whatman de 1 mícron e além disso clarificadas usando filtração de 0,8 e 0,2 mícrons. Os filtrados foram testados quanto à inibição e elastase e estimulação de colágeno, de acordo com as metodologias discutidas nos Exemplos 5 e 6.
Inibição de Elastase de Leucócito Os resultados estão sumariados na Tabela 4 abaixo. TABELA 4: Valores de IC 50 para a inibição de elastase de Leucócito:
Amostra de algas 5% p/p de extrato 20% de 5% de extrato + 80% de extrato de levedura 20% de 5% de extrato + 80% de levedura viva Chondrus 2,8-5 5,4 15-20 Sareodiotheea 0,8-1,0 8,0 0,45-0,9
De um modo geral, os extratos de Chondrus apresentaram
baixa atividade inibitória de elastase e não houve benefício a partir da fermentação ou quando usados em combinação com o extrato de levedura. No entanto, para Sareodiotheea, houve um aumento substancial na atividade inibitória de elastase para o extrato mediante fermentação com a levedura viva. A fermentação aumentou a atividade do extrato de Sareodiotheea em até 20 vezes. Em contraste, quando diluído com 80% de extrato de levedura, a atividade foi muito baixa, indicando que o caldo de levedura (extrato de levedura morta) não apresentou atividade inibitória de elastase. Teste de Estimulação de Coláfieno
Os resultados estão sumariados nas Tabelas 5 abaixo.
Amostra de Algas Produção de Colágeno expressa como % de controle não estimulado +/- Concentrações de Teste de SE (% v/v) 0,01 0,03 0,1 0,3 1,0 3,0 5% p/p de extrato de 118+/-18 108+/-13 98+/-8 199+/-16 229+/-9 65+/-4 Sarcodiotheca 20% de 94+/-6 108+/-13 106+/-15 104+/-8 127+/-15 132+/-16 Sarcodiotheea de 5% de extrato +80% de extrato de levedura 20% de 180+/-40 198+/-45 238+/-57 198+/-61 352+/-75 237+/-51 Sareodiotheca de5% de suspensão +80% de cultura de levedura viva 5% de extrato de 108+/-14 119+/-9 141+/-19 195+/-16 176+/-18 155+/-9 Chondrus 20% de Chondrus 136+/-20 123+/-16 97+/-6 149+/-19 150+/-17 133+/-9 de5% de extrato +80% de extrato de levedura 20% de Chondrus 116+/-15 127+/-18 224+/-12 181+/-22 — — de5% de suspensão +80% de levedura viva
Dentre as amostras de Chondrus, o fermento (suspensão +
levedura viva) apresentou atividade de estimulação de colágeno modesta e 5% p/p do extrato e o extrato diluído com extrato de levedura apresentaram uma atividade bastante reduzida. Dentre as amostras de Sarcodiotheca, o fermento (suspensão + levedura viva) apresentaram uma atividade muito boa de estimulação de colágeno. Por exemplo, 1 % deste fermento aumentou a síntese de colágeno em tanto quanto 350 % do controle. O extrato diluído com extrato de levedura não apresentou atividade. Em resumo, como no caso da atividade de inibição de elastase, a atividade de Sareodiotheea foi aumentada através do processo de fermentação, enquanto que o processo de fermentação falhou em aumentar a atividade do extrato de Chondrus. EXEMPLO 8: Mistura do Biofermento Sarcodiotheca com o Extrato de Chondrus
Um biofermento de Chondus /Sarcodiotheea foi preparado
como se segue:
Um extrato de O, 67% p/p de Chondrus crispus foi preparado a
partir de amostras secas das algas. Uma suspensão de 0,056% p/p de Sareodiotheea gaudiehaudii desidratada em foi preparada. A suspensão foi adicionada a uma cultura viva de Saccharomyees eerevisiae e incubada, em temperatura ambiente, durante dois dias, até que a fermentação fosse completada. O extrato de Chondus e o biofermento de Sareodiotheea foram misturados em uma razão de 80:20 e filtrados através de um filtro de 0,1 - 0,3 μιη e adicionalmente diluídos.
Teste de Inibição de Elastase de Leucócito
O teste foi executado conforme descrito no Exemplo 5 para concentrações variáveis do biofermento de Chondus/Sareodiotheea. Os resultados são apresentados na Tabela 6 abaixo.
TABELA 6: Inibição de Elastase de Leucócito
Biofermento de Chondus Sarcodiotheca Inibição de elastase de leucócito humano (% v/v) (% de inibição) 0 0 2 24 4 41 6 50 8 54 58 60
Testes de Estimulação de Colágeno
Os testes foram executados tal como descrito no Exemplo 6. O
ensaio utilizou 2 amostras: uma havia sido armazenada continuamente a 4°C, e tinha uma alíquota que havia sido mudada para 40°C durante a semana precedente à estimulação da célula por 3 dias. A Tabela 7 (as barras de erro são um SE) abaixo mostram o conteúdo de colágeno, como percentuais de culturas de controle não tratadas, para as amostras a 4°C e a 40°C. TABELA 7: Estimulação de Colágeno Biofermento de ChondusISarcodiotheca (% v/v) Amostras armazenadas a 4°C Amostras armazenadas a 40°C 0,3 198+/-40 222+/-18 1,0 225+/-36 260+/-35 3,0 148+/-16 245+/-28
Amostras adicionais em todas as concentrações foram
armazenadas a 40°C durante as 6 semanas precedentes à estimulação da célula por 3 dias. Os resultados de estimulação das células são apresentados na Figura 3. Foi verificado que a eficácia de IH 2837 para a estimulação de colágeno aumentou ainda mais quando o armazenamento a 40°C foi estendido para 6 semanas.
EXEMPLO 9: Biofermento de Sarcodiotheca Fator de
Crescimento
A produção de colágeno por um biofermento de
Sarcodiotheea da presente invenção e por TGF- βΐ, isoladamente e em combinação, foi testada. O biofermento de Sareodiotheea foi preparado como aqui descrito. Fibroblastros dérmicos humanos normais foram desenvolvidos durante 3 dias, na presença destes dois efetores. Os níveis de colágeno tipo I solúvel foram medidos no meio do sobrenadante através de ensaio imunossorvente ligado por enzima (ELISA). Os meios foram coletados em vários períodos de tempo, seguindo-se à iniciação da estimulação. Os resultados são apresentados na Tabela 8, em que pode ser observado que os níveis de colágeno aumentaram sob todas as condições, mas os níveis nas culturas tratadas pelo biofermento Sareodiotheca acrescido de TGF-βΙ foram superiores à soma de seus efeitos individuais. Este é um efeito sinérgico, que apresenta que o biofermento Sareodiotheea é capaz de acentuar o efeito benéfico de um fator de crescimento endógeno natural.
25 TABELA 8
Amostra 6 h (média) 24 h (média) 48 h (média) 72 h (média) 1 % de biofermento Sarco 54 95 159 294 ng/ml de TGF-bl 61 117 208 491 ng/ml de TGF-bl 62 116 259 553 1 % de biofermento Sarco +10 ng/ml de TGF-bl 55 114 397 1023 1% de biofermento Sarco + 5 ng/ml de TGF-bl 55 113 338 1043 não tratado 62 99 115 123
EXEMPLO 10: Composições Cosméticas
Os exemplos que se seguem ilustram as composições para o cuidado da pele de acordo com a presente invenção. As composições podem ser processadas de um modo convencional, e são adequadas para o uso cosmético.
Este exemplo ilustra um creme contra o envelhecimento de acordo com a presente invenção.
Ingredientes % p/p Fermento de Sarcodiotheca 2,0 Butileno glicol 3,0 EDTA Dissódico 0,05 Penulan TR2* 0,1 Carbowax PEG 400** 5,0 Montanov 68**** 5,0 Oleo Mineral 5,0 Protachem CER*** 5,0 Mistura de Conservante 1,5 Agua até 100
*de Noveon; ** de Dow Chemicals; *** de Protameen; **** de Seppic.
Este exemplo ilustra um creme óleo- em- água de acordo com a presente invenção.
Ingredientes % p/p Chondrus/Sarcodiotheca 2,0 Biofermento Óleo Mineral 4,0 l,3-dimetil-2- imidazolidinona 1,0 Alfol® 16RD* 4 Trietanolamina 0,75 Butan-1,3-diol 3 Goma Xantano 0,3 Perfume qs Hidróxi tolueno butilado 0,01 Agua até 100
* Alfol 16 RD é álcool cetílico e é uma marca registrada de Condea Vista Co. Este exemplo ilustra uma composição de loção/gel de enxágüe facial de acordo com a invenção.
Ingredientes % p/p Biofermento de Sarcodiotheca 2,0 Antioxidante (vitamina C) 2 Butileno glicol 5,0 Conservante 1,0 Simulgel EPG 2,5 Biowax 754 líquido 5,0 Glicerina 6,0 Perfume qs Carbopol 980 0,5 Agua até 100
Este exemplo ilustra uma composição para um creme contra o envelhecimento de acordo com a invenção:
Ingredientes % p/p Butileno Glieol (1) 5,00 Glicerina (2) 3,00 Biofermento de Sarcodiotheca 1, 50 Metacrilato de polimetila (Microma 100, Ikeda) 2,00 Álcool Cetearilieo e Polissorbato 60 e Estearato de PEG-150 e Esteareth -20 4,50 Heptanoato de estearila 4,50 Rieinoleato de cetila 4,50 Poliisobuteno hidrogenado 3,00 Isononanoato de isononila 1,30 Cera de abelhas sintética (Synthetic Beeswax # 122 P, Koster Keunen) 1,75 Copolímero de Taurato de Acriloildimetil sódico Acrilato de Hidroxietila e Esqualano e Polissorbato 60 1,00 Ciclometicona (DC 345, Dow Corning) 1,00 Dimeticona (DC 200/100, Dow Corning) 0,2 Ascorbato de tetraexildecila 0,25 Conservante (Fenoxietanol (e) Clorfenesina (e) Glicerina (e) Metil parabeno (e) Ácido Benzóico 1,20 Agua Deionizada 1,5 Ascorbil Glicosídeo 0, 25 Agua Deionizada até 100
Este exemplo ilustra uma loção alcoólica de acordo com a
invenção.
Ingredientes % p/p Biofermento de Chondrus /Sareodiotheca 1,5 1,3- dimetil-2-imidazolidinona 0,01 Etanol 40 Antioxidante 0,1 Perfume qs Agua até 100 Este exemplo ilustra uma composição para o cuidado da pele não- aquosa de acordo com a invenção.
Ingredientes % p/p Biofermento de Chondrus/Sarcodiotheca 1,5 1,3- dimetil-2-imidazolidinona 1 Goma de silicone SE -30 10 Fluido de silicone 345 20 Fluido de silicone 344 50,26 Esqualeno 10 Acido Linoleico 0,01 Colesterol 0,03 Acido 2-hidróxi-n-octanóico 0,7 Oleo Herbal 0,5 Etanol 2
Este exemplo ilustra uma composição de filtro solar com SPF
de acordo com a invenção.
Ingrediente % p/p Polímero cruzado de acrilatos/acrilato de alquila C10-30 (Permulen TR-2, Protameen) 0, 120 Biofermento de Sarcodiotheca 1,0 Butileno Glicol 3,000 Metacrilato de polimetila (Microma 100, Kobo) 1,000 Copolímero de acrilato de hidroxietila/Taurato de Acriloildimetil sódico (e) Esqualano (e) Polissorbato 60 (Simulgel NS, Seppic) 1,250 Metoxicinamato de etilexila 7,500 Salicilato de octila 5,000 Triglicerídeo Cáprico /Caprílico 3,000 Poliisobuteno Hidrogenado 5,000 Tetraisononanoato de pentaeritritila (Pelemol P 49, Phoenix) 0,500 Estearato de Glicol Acetilado (Cetacene, Vevy) 2,000 Álcool Cetearílico (e) Ceteareth -20(Phoenoxol T, Phoenix) 3,000 Octocrileno 4,000 Aleol Cetearílico (e) Coco Glicosídeo 3,000 Butil Metoxidibenzoilmetano 3,000 Dimeticona (Silicone HL88, Barnet) 2, 500 Conservantes (Fenoxietanol (e) Clorfenesina (e) Glicerina (e) Metil parabeno (e) Ácido Benzóico 1,250 Agua Deionizada até 100
Deve ser entendido que as modalidades específicas da
invenção aqui descritas e ilustradas têm a intenção de ser apenas representativas, pois a invenção pode ser modificada e praticada de modos diferentes, mas equivalentes, evidentes para aqueles versados na técnica tendo o benefício dos ensinamentos neste. É portanto evidente que as modalidades particulares acima expostas podem ser alteradas ou modificadas e que todas tais variações são consideradas como estando dentro do escopo e do espírito da invenção.
Claims (17)
1. Composição cosmética, caracterizada pelo fato de que compreende um extrato de Sarcodiotheca e um excipiente cosmeticamente aceitável.
2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o extrato é um extrato de Sareodiotheea gaudiehaudi.
3. Composição cosmética de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição compreende entre cerca de 1 % a cerca de 3 %, em peso, do extrato.
4. Composição cosmética de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição é um creme, uma loção, um gel, ou um produto do tipo para retirada com a lavagem.
5. Ingrediente ativo cosmético, caracterizado pelo fato de que compreende: - uma suspensão compreendendo uma polpa de planta Sareodiotheea e água; e - uma cultura de levedura viva; em que a suspensão e a cultura são combinadas e incubadas até que a fermentação seja completada.
6. Ingrediente ativo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que Sarcodiotheea é Sareodiotheea gaudiehaudii.
7. Ingrediente ativo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que a suspensão contém de cerca de 1 % a 5%, em peso, de S. guadichaudii.
8. Ingrediente ativo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que a levedura é Sarccharomyees eerevisiae.
9. Composição cosmética, caracterizada pelo fato de que compreende o ingrediente ativo como definido em qualquer uma das reivindicações 5 a 8 e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
10.Composição cosmética de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um extrato de algas vermelhas.
11. Composição cosmética de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que as algas vermelhas são Chondus crispus.
12. Ingrediente ativo cosmético, caracterizado pelo fato de que compreende uma mistura de: - um biofermento produzido a partir de uma suspensão, a referida suspensão compreendendo uma polpa de planta Sarcodiotheca e água, fermentada com uma cultura de levedura viva; - um extrato de Chondus crispus\ pelo menos um conservante.
13. Ingrediente ativo da mistura de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que compreende cerca de 20 % v/v do biofermento.
14. Uso de um extrato de Sarcodiotheca, caracterizado pelo fato de ser para melhorar, cosmeticamente, a condição da pele.
15. Uso de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o extrato é um extrato de Sarcodiotheca gaudichaudii.
16. Método de tratamento cosmético para tratar a pele tendo sinais de envelhecimento, caracterizado pelo fato de que compreende aplicar, de um modo tópico, à pele que esteja em necessidade da mesma, uma composição cosmética como definida nas reivindicações 1 a 9.
17. Método de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que o tratamento cosmético é selecionado partir do grupo, que consiste de um efeito antioxidante, inibição de elastase, ou estimulação de colágeno.
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