KR101352282B1 - 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물의 제조 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물의 제조 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 파쇄한 녹용에 정제수를 첨가하고 가열하여 추출하는 단계; 상기 단계에서 수득한 추출물에 단백질 분해효소를 첨가하여 효소분해물을 제조하는 단계; 및 상기 효소분해물을 고압균질화 처리하는 단계를 포함하는 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에 따르면 녹용 추출시 단백질 분해효소를 처리함으로써 녹용 내에 있는 고분자 단백질들의 추출을 용이하게 하여 추출수율이 증가하고, 이를 고압균질화 처리함으로써 녹용 내 강글리오사이드의 구성성분인 시알산을 효과적으로 분리시켜 녹용 추출물 내 시알산 함량을 증가시키므로, 상기 제조 방법은 시알산 함량이 높은 녹용 추출물을 제조하는데 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 녹용으로부터 시알산(sialic acid) 함량이 증가된 녹용 추출물을 제조하는 방법에 관한 것으로서, 녹용에 단백질 분해효소를 처리하고 고압균질화 하여 시알산의 함량을 높인 녹용 추출물을 제조하는 방법에 관한 것이다.
녹용(Cervi Parvum Corun, Antler)은 보통 사슴의 뿔을 말하며, 자라기 시작한 지 2개월 이내의 아직 골질화되지 않아 만져 보면 약간 물렁할 정도로 조직이 연하고 털이 골고루 덮여 있는 수컷의 뿔을 말한다. 가을이 되면 물렁거리던 뿔이 단단하게 각질화되는데, 이는 발정기에 암컷을 차지하기 위한 싸움을 위한 것으로 이렇게 각질화된 뿔을 녹각이라고 하며, 녹용에 비해 효능이 떨어진다. 또한 이들의 채취시기를 놓쳐 칼슘화된 후 단단해져서 저절로 떨어진 것을 낙각이라 한다.
녹용 내에는 시알산, 헥소스(hexose), 펜토스(pentose), 헥소사민(hexosamine) 및 유로닉산(uronic acid)과 유리 아미노산 및 무기질과 동물조직에 널리 분포되어 있는 특수 지방산의 일종인 프로스타글란딘류와 당지질의 일종인 강글리오사이드(ganglioside)가 존재하는 것으로 보고된 바 있다. 특히, 복잡한 당지질의 하나인 강글리오사이드는 수 개의 당 단위가 결합된 극성의 머리 부분을 가지고 있으며 한 개 이상의 시알산을 포함하고 있다.
상기 시알산은 뉴라민산(neuraminic acid)의 아실 유도체의 총칭으로 현재 동물계에 20여종 이상이 알려져 있으며, 바이러스에 대한 리셉터 작용, 독소의 중화, 세포와 분자의 면역학적 인식 부위, 세포접착 또는 암의 전이 등 중요한 생리작기능에 관여하고 있는 산성당으로 보고되어 있다. 대사과정에서 일시적으로 유리형으로 존재할 뿐, 대부분 당쇄의 비환원 말단에 글리코시드로 결합되어 올리고당의 형태로 존재한다.
동의보감 등의 문헌에 의하면 녹용은 강장작용, 보혈작용, 강정작용, 진통작용, 조혈작용, 생장발육촉진작용, 심부전증 치료작용 및 기능항진작용 등이 있는 것으로 기록되어 있으며, 이 밖에도 피로회복, 신체 활력 증강 및 신장의 이뇨기능 강화 효과 등 많은 효능을 갖고 있는 것으로 알려져 있다.
전통 한방에서 사용하는 녹용의 복용 방법으로는, 녹용을 여러 종류의 생약제들과 혼합, 분쇄한 후 물을 용매로 하여 가열 추출하여 그 여액을 복용하는 방법과, 생약제들을 분쇄하여 가루로 만든 뒤 환으로 해서 복용하는 방법이 주로 이용되고 있다. 상기 두 방법은 각기 장단점이 있는데, 추출하여 복용하는 경우 녹용의 유용성분은 흡수하기 쉬운 반면에 추출박에 포함되어 있는 유용성분은 버리게 된다. 또한, 녹용을 추출, 농축하여 사용할 경우 고형분 함량 20% 이상의 경우 겔화되는 문제점이 있어 제품에 응용하기가 어렵다. 환제형의 경우에는 녹용 자체를 섭취한다는 이점이 있으나 체내에서 유효성분의 완전한 흡수가 어렵다는 문제점이 있다.
한편, 특허문헌 1 (한국공개특허 2003-0073134호; 녹용 추출물 및 그 추출방법)는 세절한 녹용에 물을 가하고 가열, 감압 추출한 후 여액을 농축, 분무 건조시켜 분말화하는 녹용 추출 방법에 관하여 개시하고 있는데, 전통한방에서 사용하는 열수 추출법을 일부 개선하고 복용이 용이하도록 추출액을 분말화 하고 있으나, 추출박에 포함된 상당량의 유효성분이 이용되지 못하고 폐기되는 문제점이 있다.
특허문헌 2 (한국공개특허 2005-0090041; 녹용 또는 녹각으로부터 유효성분을 추출하는 방법)은 녹용 또는 녹각 분쇄물을 온수추출, 단백질 가수분해효소를 이용한 추출 및 염산분해 추출법에 의하여 순차적으로 추출하여 녹용 또는 녹각의 유효성분을 고수율로 추출하는 방법에 관한 것이지만, 이러한 방법은 공정이 여러 단계로 진행되어 복잡하고 시간이 많이 소요되며, 강산의 사용으로 인체에 유용한 생리활성 물질들이 파괴되는 문제점이 있다.
특허문헌 3 (한국 특허등록 제1039887호; 녹용 발효에 활성을 갖는 코디셉스 속의 균주 및 이를 이용한 녹용 발효추출물의 제조방법)는 녹용 발효에 활성을 갖는 코디셉스 밀리타리스(Cordyceps militaris) KCTC 11455BP 및 상기 균주를 이용한 녹용 발효추출물의 제조방법에 관한 것으로 상기 선행기술에 시알산을 높은 함량으로 함유되는 녹용 발효추출물의 제조가 가능하다는 내용을 나타내고 있다.
특허문헌 4 (한국 공개특허공보 2011-0009521호; 녹용 발효에 활성을 갖는 바실러스 속의 균주 및 이를 이용한 녹용 발효추출물의 제조방법)는 녹용 발효에 활성을 갖는 바실러스 속의 균주인 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) KCTC 11454BP를 이용한 녹용 발효추출물의 제조방법으로 시알산을 높은 함량으로 함유하는 녹용 발효추출물을 제시하고 있다.
특허문헌 5 (한국특허등록 제1000886호; 녹용엑기스의 제조방법)는 녹용과 물을 정해진 비율로 첨가하여 혼합하고, 녹용과 물의 혼합물이 들어 있는 항아리를 고압중탕기내에 배치한 상태에서 고온, 고압의 조건에서 정해진 시간 동안 수분증발 없이 중탕(中湯)으로 달여냄으로써 고순도의 녹용엑기스를 추출하는 방법에 관한 것이다.
그러나, 이들 종래기술은 녹용 함량을 높이기 위하여 열처리, 효소분해, 염산분해 등의 공정을 거쳐 녹용 추출물을 얻지만, 유효성분의 함량을 높이거나 분리하기 위한 구체적인 기술은 제시하지 못하고 있다. 따라서, 상기와 같은 종래 녹용 추출물 제조 방법의 문제점을 개선하면서 녹용의 유효성분이 높은 함량으로 포함된 녹용 추출물을 제조하는 새로운 방법의 개발이 요구되고 있다.
본 발명의 목적은 상기와 같은 종래 녹용 추출물 제조 방법상의 문제점을 개선하기 위한 것으로서, 녹용에 단백질 분해효소를 이용한 효소반응을 통해 추출 수율을 높이고 고압균질화 처리하여 녹용에 포함된 고함량의 시알산을 분리하여 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물의 제조 방법을 제공하기 위한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
녹용에 정제수를 첨가하고 가열하여 추출물을 얻는 단계;
상기 추출물에 단백질 분해효소를 첨가하여 효소분해물을 얻는 단계; 및
상기 효소분해물을 고압균질화 처리하는 단계를 포함하는 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물의 제조 방법을 제공한다.
상기 방법에 있어서, 상기 녹용은 사슴으로부터 직접 채취하거나 시판되는 것을 사용할 수 있다. 녹용은 생녹용, 열건조녹용, 동결건조녹용을 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 녹용을 깨끗하게 세척하고 물기를 제거한 후 냉동시킨 다음 파쇄하여 파쇄된 녹용 형태로 준비할 수 있다. 녹용의 파쇄 방법은 절단, 슬라이스 또는 분쇄 등의 방법을 사용할 수 있다.
상기와 같이 준비한 파쇄된 녹용은 열수추출 방식에 의하여 녹용 추출물을 열처리하게 된다. 녹용을 열처리하기 위하여, 파쇄한 녹용에 녹용 중량의 5 내지 15배수, 바람직하게는 10배수의 정제수를 첨가하여 95 내지 105℃, 바람직하게는 100℃에서, 1 내지 10시간, 바람직하게는 1 내지 3시간 동안 가열할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
상기와 같이 가열하여 수득한 추출물에 첨가하는 단백질 분해효소는 단백질 또는 펩티드(peptide)에서 펩티드 결합의 가수분해를 촉매하는 효소로서, 단백질 분해 활성을 갖는 효소라면 모두 사용가능하며, 세균으로부터 얻어진 프로테아제인 것이 바람직하고, 상기 세균으로부터 얻어진 프로테아제는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 리케니포르미스(Bacilus licheniformis) 또는 리조퍼스 속(Rhizopus sp.)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 세균으로부터 얻어진 프로테아제인 것이 더욱 바람직하며, 바실러스 서브틸리스로부터 얻어진 프로테아제인 것이 가장 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단백질 분해효소는 녹용 중량에 대해 0.1 내지 5 중량%로 첨가하여 3 내지 15시간 동안 30 내지 65℃에서 반응시키는 것이 바람직하고, 1 내지 5 중량%로 첨가하여 5시간 내지 15시간 동안 40 내지 60℃에서 반응시키는 것이 더욱 바람직하며, 1 중량%로 첨가하여 5시간 동안 55℃에서 반응시키는 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 상기 고압균질화는 고압균질기를 이용하여 수행할 수 있으며, 500 내지 1,500 bar 압력으로 1 내지 5회 실시하는 것이 바람직하고, 1,000 bar 압력으로 3회 실시하는 것이 더욱 바람직하다. 녹용 추출물을 고압균질화함으로써 녹용에 포함된 강글리오사이드의 구성성분인 시알산이 높은 함량으로 추출물내에 함유될 수 있다.
상기 방법은 추가적으로 상기 고압균질화 단계 이후에 녹용 추출물을 활성탄소 충진탑에 통과시켜 정제함으로써, 녹용의 색깔과 냄새를 제거하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 파쇄된 녹용에 녹용 중량에 대해 5 내지 15배수, 바람직하게는 10배수의 물을 첨가하여 가열하여 추출물을 얻는다. 상기 가열하여 수득한 추출물에 대해 단백질 분해효소인 바실러스 서브틸러스 유래 프로테아제를 녹용 중량에 대해 1 내지 5 중량%로 첨가하여 5시간 내지 15시간 동안 55℃에서 효소 반응을 유도한다. 그런 다음, 상기 효소반응물을 고압균질기를 사용하여 500 내지 1,000 bar 압력으로 고압균질화 하고, 고압균질화 횟수는 1 내지 5회, 바람직하게는 3회 실시한다(도 1 참조).
본 발명의 다른 바람직한 구현예에 따르면, 상기와 같이 제조된 녹용 추출물은 활성탄소가 충전된 활성탄소 충진탑에 통액시켜 정제함으로써 탈색 및 탈취된 정제된 녹용 추출물을 수득할 수 있다. 현재 녹용을 이용한 추출물을 제조할 때, 녹용의 단일 추출 및 농축 또는 분말화할 시, 관능적인 면에서 녹용 특유의 비린 냄새로 인해 제품 제형에서 액상과 같은 제품에는 사용하기가 힘든 문제점을 가지고 있었다. 상기 정제 단계를 통해 녹용 추출물의 냄새, 색깔 및 불순물을 제거함으로써 이를 건강기능식품 또는 화장품의 유효성분으로서 효과적으로 활용할 수 있다.
상기 방법에 의해서 제조된 녹용 추출물은 단백질 분해효소의 처리에 있어서, 상기와 같은 효소처리량 및 효소반응시간을 적용함에 따라 추출수율 및 추출물 내 유용성분의 함량이 증가하는데, 단백질 분해효소를 녹용 중량에 대해 1 또는 5 중량%의 처리량으로 5 내지 15시간 동안 처리한 경우 추출수율이 40% 이상이고(표 1 참조), 녹용 추출물 내 콜라겐 또는 시알산 함량이 현저하게 증가한다(표 2 및 3 참조). 녹용 추출물의 추출수율 및 시알산 함량 증가를 고려하면, 효소처리량은 녹용 중량에 대해 1 중량%이고, 효소반응시간은 5시간인 것이 가장 바람직하다.
상기 단백질 분해효소가 처리된 효소분해물은 고압균질화 처리에 의하여 시알산 함량이 특이적으로 증가하는데, 1,000 bar 압력에서 3회 이상 고압균질화를 반복 실시함으로써 시알산 함량이 특이적으로 현저히 증가한다(표 4 및 5 참조). 더불어, 상기와 같이 제조된 본 발명의 녹용 추출물은 단백질 분해효소 처리, 고압균질화 처리 및 활성탄소탑 처리의 일련의 과정에 의하여, 고압균질화 및 활성탄소탑 미처리군에 비해 우수한 관능적 특성을 나타낸다(표 6 참조).
따라서, 녹용의 가열 처리, 단백질 분해효소 처리 및 고압균질화 처리를 통해 녹용 추출물을 제조함에 따라, 추출수율 및 시알산의 함량이 증가하고 관능적으로 우수한 녹용 추출물을 수득하였으므로, 상기와 같은 일련의 제조 방법은 시알산 함량이 특이적으로 증가된 녹용 추출물을 제조하는데 유용하게 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된, 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물을 제공한다.
상기 녹용 추출물은 상기와 같은 제조 방법에 의해 제조됨에 따라 추출물 내 시알산 함량은 0.15 내지 0.35 중량%인 것이 바람직하고, 0.2 내지 0.3 중량%인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 제조 방법에 의해 제조된 녹용 추출물은 추출물 제조시 녹용에 단백질 분해효소를 처리함으로써 추출수율 및 유용성분 함량이 높아지고, 고압균질화 처리에 따라 시알산 함량이 특이적으로 증가한다.
따라서, 본 발명에서 제조된 녹용 추출물은 수율이 높을 뿐만 아니라 유효 시알산 함량이 높아 시알산을 다량 포함하는 녹용 추출물로서 유용하게 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 녹용 추출물의 제조 방법은 녹용 추출물을 제조하는데 복잡한 공정, 유효 생리활성 성분의 파괴 및 낮은 관능적 특성을 나타내는 종래의 문제점을 극복하고, 단백질 분해효소를 사용함으로써 녹용 추출물의 수율 및 유용성분의 추출을 증가시키며, 효소분해물을 고압균질화 처리함으로써 시알산이 특이적으로 높은 녹용 추출물을 제조할 수 있다.
도 1은 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물의 제조 공정도를 나타내는 도면이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<
실시예
1> 녹용의 효소처리 조건의 확립 및 녹용 추출물의 제조
<1-1> 효소반응시간 및 효소처리량에 따른 추출 수율 확인
시중(경동시장)에서 구입한 녹용을 파쇄한 후 파쇄된 녹용 100 g에 물 1,000 ㎖를 넣고 100℃에서 1시간 동안 열처리하여 살균하였다. 상기의 살균된 녹용 수용액에 단백질 가수분해효소인 세균 프로테아제를 함유하는 바실러스 서브틸러스를 0.1, 0.5, 1 및 5 g을 각각 넣고 55℃에서 1, 3, 5, 10 또는 15시간 반응시켰다. 이후, 각각의 반응액을 50 ㎖ 채취하여 각각의 효소 반응액에 여과보조제인 퍼라이트 10 g을 투입하고 감압여과하여 여과액의 고형분을 측정함으로써 반응시간 및 효소처리량에 따른 추출 수율을 측정하였다.
그 결과, 하기 표 1에서와 같이, 효소처리량이 늘어날수록 추출수율이 증가하는 경향을 나타내었으나, 추출수율은 42~43% 까지 늘어나고 더 이상 증가하지 않는 것으로 나타났다. 또한, 효소처리량을 1 g 이상으로 하였을 때 모두 5시간 만에 40% 이상의 추출수율이 나타났으며 그 이후 추출수율은 증가하지 않는 것으로 나타났다.
| 효소반응시간 및 효소처리량에 따른 원물대비 추출수율 비교 | |||||
| 효소 처리량(g) |
효소반응시간 | ||||
| 1시간 | 3시간 | 5시간 | 10시간 | 15시간 | |
| 0.1 | 11.4% | 13.1% | 15.3% | 20.9% | 21.1% |
| 0.5 | 12.1% | 16.7% | 20.4% | 35.4% | 41.6% |
| 1 | 16.3% | 24.7% | 42.1% | 43.6% | 42.4% |
| 5 | 22.1% | 36.4% | 43.1% | 42.9% | 43.8% |
<1-2> 효소반응시간 및 효소처리량에 따른 녹용 추출물 중 콜라겐 함량 확인
상기 실시예 <1-1>에서 제조한 각각의 녹용 추출물에서 유용성분인 콜라겐의 함량을 측정하기 위하여, 하이드록시프롤린(hydroxyproline) 함량을 측정하여 산출하였다. 구체적으로, 각각의 녹용 추출물 시료를 취하여 6M-HCl로 130℃에서 6시간 동안 가열하여 가수분해하고, NaOH를 이용하여 희석하고, 증류수를 이용하여 적절히 희석하고, 가수분해용액을 이용하여 클로라민-T(chloramine-T) 용액을 첨가하여 일정시간 반응시킨 후, 발색시약인 4-디메틸아미노 벤즈알데하이드(4-dimethylamino benzaldehyde)를 넣어 반응시켰다. 발색시약과 반응시킨 액을 550 ㎚에서 흡광도를 측정한 후, 상기 흡광도를 하이드록시프롤린 표준곡선에서 얻은 검량선에 대입하여 농도를 측정하였다.
그 결과, 효소처리시간이 늘어날수록 추출물 중에 콜라겐 함량이 높아지는 것을 알 수 있었으나, 효소처리량을 1 g 이상으로 하였을 때는 5시간 만에 추출물 중에 콜라겐 함량이 8% 이상으로 나타났으며 그 이후에는 함량의 차이가 없는 것으로 나타났다(표 2).
| 효소반응시간 및 효소처리량에 따른 추출물 중 콜라겐 함량 | |||||
| 효소 처리량 (g) |
효소반응시간 | ||||
| 1시간 | 3시간 | 5시간 | 10시간 | 15시간 | |
| 0.1 | 1.21% | 1.42% | 2.49% | 3.67% | 3.83% |
| 0.5 | 1.34% | 1.31% | 2.41% | 6.42% | 8.16% |
| 1 | 1.93% | 5.27% | 8.11% | 8.21% | 8.19% |
| 5 | 2.34% | 6.16% | 8.21% | 8.23% | 8.29% |
<1-3> 효소반응시간 및 효소처리량에 따른 녹용 추출물 중 시알산 함량 확인
상기 실시예 <1-1>에서 제조한 각각의 녹용 추출물에서 또 다른 유용성분인 시알산의 함량을 측정하기 위하여, 시알산 레이블링 키트(sialic acid fluorescence labeling kit; Takara BIO INC.)를 사용하여 시알산에 형광물질을 붙여 고성능 액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC) 분석을 실시하였다.
그 결과, 시알산의 경우에도 상기 실시예 <1-2>에서 확인한 콜라겐과 마찬가지로 효소처리량을 1 g 이상으로 5시간 이상 처리하였을 때, 시알산 함량이 150 ㎎/g 이상으로 나타났으며, 그 이상 효소처리시간을 늘려도 함량의 변화에 큰 차이가 없는 것으로 나타났다(표 3).
따라서, 추출시간과 효소처리량에 따른 추출수율과 유용성분의 함량을 확인하였을 때, 효소처리량을 1 g으로 하고, 효소처리시간을 5시간으로 하였을 경우 가장 효과적임을 알 수 있었다.
| 효소반응시간 및 효소처리량에 따른 추출물 중 시알산 함량 (㎎/100g) | |||||
| 효소 처리량 |
효소반응시간 | ||||
| 1시간 | 3시간 | 5시간 | 10시간 | 15시간 | |
| 0.1 | 11.1 | 15.8 | 25.4 | 30.1 | 51.8 |
| 0.5 | 9.4 | 29.5 | 58.9 | 84.2 | 127.6 |
| 1 | 54.6 | 96.2 | 162.1 | 157.5 | 158.4 |
| 5 | 89.1 | 126.4 | 159.1 | 153.6 | 165.7 |
<
실시예
2> 효소처리 녹용 추출물에 대한
고압균질화
처리
상기 <실시예 1>에서 확인한 효소반응시간 및 효소처리량에 따른 결과를 토대로 하여 효소처리량을 1%로 하고, 5시간 동안 효소 반응하여 녹용 추출물을 제조한 후, 고압균질기(Microfluidics사, USA)를 이용하여 고압균질화(Micro fluidizer) 하였다. 고압균질화 조건으로는 압력을 500 또는 1,000 bar로 하여 고압균질화 횟수를 각각 0, 1, 3 및 5회로 하였으며, 고압균질화 횟수별 시료를 감압농축 및 동결 건조하여 시료 내의 유용성분인 시알산 및 콜라겐 함량을 상기 실시예 <1-2> 및 <1-3>과 같이 각각 분석하였다. 그런 다음, 고압균질화된 녹용 추출물을 감압농축하여 액상으로 제조하거나 건조시켜 분말화 하였다.
그 결과, 압력을 500 또는 1,000 bar로 하여 고압균질화 횟수별 콜라겐과 시알산의 함량을 비교한 결과, 1,000 bar의 압력에서 고압균질화 하였을 때 시알산의 함량이 특이적으로 높아지는 것으로 나타났으며 고압균질화 횟수는 3회까지는 시알산의 함량이 급격하게 올라갔으나 3회에서 5회로 반복 횟수를 늘린 경우에는 유의적인 차이가 없는 것으로 나타났다. 그러나 콜라겐의 함량은 고압균질화 횟수와 상관없이 함량의 차이가 크게 나타나지 않음을 알 수 있었다(표 4 및 5). 따라서, 시알산 함량이 특이적으로 높은 녹용 추출물을 제조하기 위한 효과적인 고압균질화 방법은 1,000 bar에서 3회 반복하여 처리하는 것임을 확인하였다.
| 500 bar에서 균질화 횟수에 따른 유용성분 함량 | ||||
| 기능성분 함량 | 고압균질화 횟수 | |||
| 0 | 1 | 3 | 5 | |
| 콜라겐(%) | 7.12 | 7.19 | 8.23 | 8.16 |
| 시알산(㎎/100g) | 153.1 | 164.5 | 186.8 | 201.2 |
| 1000 bar에서 균질화 횟수에 따른 유용성분 함량 | ||||
| 기능성분 함량 | 고압균질화 횟수 | |||
| 0 | 1 | 3 | 5 | |
| 콜라겐(%) | 7.12 | 8.35 | 9.14 | 8.91 |
| 시알산(mg/100g) | 153.1 | 191.4 | 248.5 | 251.4 |
<
실시예
3> 효소처리 및
고압유화처리
녹용 추출물의 정제 및 관능평가
본 발명의 녹용 추출물을 건강기능식품 또는 화장품에 이용할 수 있도록 냄새와 색깔을 제거하기 위하여, 10~20 메쉬의 입상활성탄소(제일탄소 제품)가 충전된 활성탄소탑에 상기 실시예 2에서 제조한 녹용 추출물을 통액시켜 불순물을 제거하였다. 통액 후 잔류하는 농축액은 세척한 후 농축하여 초기 통액시킨 녹용 추출물과 합하여 사용하였다. 상기와 같이 탈취 및 탈색된 정제된 녹용 추출물을 대상으로 효소처리와 고압균질화 횟수에 따른 관능평가를 실시하여 대조군(고압균질화 및 활성탄소탑 무처리군)과 비교하였다. 평가 방법은 성인 남녀 30명을 선정하여 평가의 취지를 설명하고 색깔, 맛, 이취 및 전체적인 기호성에 대하여 5점 척도법(아주 좋다 5점, 좋다 4점, 보통이다 3점, 나쁘다 2점, 아주 나쁘다 1점)에 따라서 설문 평가한 후, 총 점수를 합산하여 평균하는 방식으로 수행하였다.
그 결과, 하기 표 6에서와 같이, 효소처리 및 고압균질화한 후, 활성탄소탑을 통과시킨 녹용 추출물이 대조군에 비해 전체적인 기호성이 우수한 것으로 나타났다(표 6).
| 구 분 | 균 질 기 | 대조군 | |||||
| 500bar | 1,000bar | ||||||
| 맛 | 4.256 | 4.452 | 4.554 | 4.568 | 4.632 | 4.622 | 2.564 |
| 이취 | 4.325 | 4.256 | 4.364 | 4.238 | 4.548 | 4.365 | 2.456 |
| 색깔 | 4.216 | 4.245 | 4.321 | 4.562 | 4.654 | 4.523 | 2.126 |
| 전체적인 기호성 | 4.365 | 4.354 | 4.368 | 4.346 | 4.564 | 4.652 | 2.246 |
Claims (10)
- 녹용에 정제수를 첨가하고 가열하여 추출물을 얻는 단계;
상기 추출물에 단백질 분해효소를 첨가하여 효소분해물을 얻는 단계; 및
상기 효소분해물을 500 내지 1,000 bar 압력으로 1 내지 5회 고압균질화 처리하는 단계를 포함하는 시알산 함량이 증가된 녹용 추출물의 제조 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 가열은 녹용 중량에 대해 5 내지 15 배수의 정제수를 녹용에 첨가하여 95 내지 105℃에서 1 내지 10시간 동안 실시하는 것을 특징으로 하는 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 단백질 분해효소는 세균으로부터 얻어진 프로테아제인 것을 특징으로 하는 방법. - 청구항 3에 있어서,
상기 세균은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 리케니포르미스(Bacilus licheniformis) 및 리조퍼스속(Rhizopus sp.)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법. - 청구항 1에 있어서,
상기 단백질 분해효소는 녹용 중량에 대해 0.1 내지 5 중량%로 첨가하여 3 내지 15 시간 동안 40 내지 60 ℃에서 효소 반응시키는 것을 특징으로 하는 방법. - 청구항 5에 있어서,
상기 단백질 분해효소는 녹용 중량에 대해 1 내지 5 중량%로 첨가하여 5 내지 15 시간 동안 50 내지 55 ℃에서 효소 반응시키는 것을 특징으로 하는 방법. - 삭제
- 청구항 1에 있어서,
상기 고압균질화 단계 이후에 녹용 추출물을 활성탄소 충진탑에 통과시켜 정제하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법. - 청구항 1 내지 청구항 6 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 0.15 내지 0.35 중량%의 시알산 함량을 갖는 녹용 추출물.
- 삭제
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