KR101206288B1 - 아스코르빈산 유도체, 그 제조방법, 연관된 중간물 및 그 유도체의 화장품으로의 응용 - Google Patents

아스코르빈산 유도체, 그 제조방법, 연관된 중간물 및 그 유도체의 화장품으로의 응용 Download PDF

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Abstract

본 발명은 일종의 아스코르빈산 유도체인 3-O-글리코실기-L-아스코르빈산, 그 제조방법, 연관된 중간물 및 그 유도체의 화장품으로의 응용에 관한 것이다. 이 유도체는 비타민C 전구체로서, 2-O-α-D-글루코피라노실 아스코르빈산(AA-2G)보다 더 좋은 생리작용을 가지고 있을 뿐만 아니라 안정성이 더 좋으며 화장품, 약품, 식품과 사료 등 분야에 사용 가능하며, 특히 미백제로서 화장품에 사용 가능하다. 그 제조방법은 먼저 아스코르빈산의 5,6-위치의 두 히드록실기를 보호하고, 다시 그와 1-할로겐 아실기당을 결합시켜 중간물 3-O-(아실기글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산을 얻은 다음에, 탈이소프로필화, 탈 아실화를 행하여 목표물을 얻는 것이다.

Description

아스코르빈산 유도체, 그 제조방법, 연관된 중간물 및 그 유도체의 화장품으로의 응용{Ascorbic acid derivates, their preparation methods, intermediates and uses in cosmetics}
본 발명은 아스코르빈산 유도체, 그 제조방법, 연관된 중간물 및 그 유도체의 화장품으로의 응용에 관한 것이다. 특히, 3-O-글리코실기-L-아스코르빈산, 그 제조방법, 연관된 중간물 및 그 유도체의 화장품으로의 응용에 관한 것이다.
L-아스코르빈산, 즉 비타민C(VC로 약칭)는 사람과 동물 체내의 매우 많은 생리활동에 참여한다. 아스코르빈산을 합성하는 효소 결핍으로 인해 비타민C는 사람 혹은 동물 체내에서 자체로 합성이 불가능하므로 반드시 식물로부터 공급되어야 하므로 사람 혹은 동물의 필수영양원소에 속하고 인류의 건강과 동물의 생장과정에 있어서 대체할 수 없는 중요한 작용을 한다. 임상에서 아스코르빈산은 주로 괴혈병의 방지와 전염성 질병의 방지, 외상과 골절 유합의 촉진에 사용될 뿐 아니라 보조약물로서의 치료 및 보건약품에 사용된다. L-아스코르빈산이 결핍되면 괴혈병에 걸릴수 있고, 모세혈관파열을 초래하여 피부가 약해지고 잇몸이 느슨해지고 출혈하며, 골격이 취약해져서 골절되기 쉬워질 수 있다. 임상응용 외에 VC 자체의 화학구조와 생리 활성에 의해 신맛 조미료, 환원제/노화방지제, 표백제와 안정제 등으로 사용 가능하며 화장품, 식품, 약품과 사료에 사용된다. 예를 들면 화장품에 있어서 환원제, 자외선 흡수제와 멜라닌색소 생성억제제로 사용된다. 실제 동물의 성장에 있어서 VC는 콜라겐 합성, 물고기와 새우의 괴혈병 방지, 어린 개체의 생존율 제고, 동물 및 가금의 스트레스 해소, 물고기 골격의 이상 출혈과 미란 방지 등 기능을 가지고 있다.
수용성 비타민으로서, VC는 수용액 속에서 극히 불안정하여 열이나 공기 중의 산소 및 기타 산화제에 의해 산화되기 쉽다. 특히 빛, 미량의 중금속 원소(예를 들면 Fe2+, Cu2+)와 형광물질 등은 VC의 산화분해를 더욱 촉진하여 생성된 탈수소 아스코르빈산이 신속히, 비가역적으로, 굴론산(gulonic acid) 혹은 기타 산화물로 더욱 산화되거나 분해되어 VC의 활성을 잃어 버린다. 중성 pH, 열, 빛과 중금속에 노출되면 급속하게 분해된다. 이 때문에 아스코르빈산의 응용은 매우 크게 제한을 받게 되었다. 이 때문에 어떻게 하면 아스코르빈산의 안정성을 제고하는가 하는 것이 현재 국내외 학자들이 관심을 갖는 문제이다. 20세기 70년대 이래 사람들은 줄곧 아스코르빈산의 각종 유도체에 대한 연구에 종사하였는 바, 불안정한 단점을 극복할 수 있고, 또 보다 효과적으로 아스코르빈산의 생리적 기능을 발휘할 수 있는 새로운 아스코르빈산 유도체를 찾아낼 것을 희망하였다.
아스코르빈산의 유도체는 아스코르빈산의 염 유도체, 에스테르 유도체와 당류 유도체로 나눌수 있다. 아스코르빈산의 당류 유도체는 일종의 중요한 아스코르빈산 유도체로서 현재 국내외에서 다량의 문헌에 여러 가지 아스코르빈산 유도체를 보고하고 있다. 사람들은 상이한 생물화학 합성경로 혹은 유기합성 등의 방법을 통하여 각각 아스코르빈산의 2-、3-、5- 및 6-위치의 히드록실기에 대해 화학적 가공을 행하여 여러가지 아스코르빈산 유도체를 합성하였다. 이런 아스코르빈산 유도체는 통상의 아스코르빈산이 쉽게 산화되는 단점을 극복하였을 뿐만 아니라 인체 및 동물에 더욱 효과적으로 흡수되고 이용될 수 있다.
6-O-α-글루코피라노실아스코르빈산(AA-6G)은 사람들이 가장 먼저 발견한 아스코르빈산 유도체이다. 일찍이 1971년에 Suzuki등이 아스페르길루스나이제(Aspergillus niger)가 생성한 α-글루코시다아제(α-glucosidase)를 이용하여 말토스의 글리코실기를 아스코르빈산에 이전하였는데 글리코실기의 구체적인 위치가 최근에 이르러서야 확정되였다. 아스코르빈산과 서로 비교해 보면 AA-6G는 비교적 강한 안정성을 가지고 있을 뿐만 아니라 환원성을 가지고 있다.
그리고 다른 유형의 5-O-α-D-글루코피라노실아스코르빈산(AA-5G)은 식품품질 개선제와 자외선 흡수제로 사용 가능하다. 임상에서는 감염되기 쉬운 질병, 예를 들면 바이러스성 질병, 세균성 질병과 악성종류의 예방이나 치료에 사용된다. 화장품 업종에서 피부회복제와 미백제로 사용 가능하다.
2-O-α-D-글루코피라노실아스코르빈산(AA-2G)은 일본 린겐(林原) 생물화학연구소와 오카야마대학 약학계에서 공동으로 발견하였고 이미 이러한 비타민C 유도체를 대량적으로 합성하는 방법을 확정하였다. 이러한 화합물은 2-위치에 포도당이 가리워져 있어 산화반응이 일어나지 않고 수용액 속에서 특히 안정하며 그 자체에 직접적인 환원성이 없다. AA-2G가 세포 속에 들어갈 때 세포막에서 α-글루코시다아제가 가수분해하여 생성되는 VC가 체내로 이동하고 체내에서 VC의 여러 가지 생리기능을 발휘하는 것이다. AA-2G는 생체변환(biotransformation)으로 합성 가능하며 안전하고 무독하여 안정제, 품질개량제, 생리활성제, 자외선흡수제, 화학과 의약원료로 사용 가능하며 식품, 음료, 의약공업에 사용된다. 현재, AA-2G는 다만 생체변환으로만 제조되며 사용되는 효소 유형은 글리코실기 트랜스퍼라제로서 주요하게 α-글루코시다아제, α-싸이클로덱스트린글루카노 트란스퍼라제와 α-디아스타제가 있다.
AA-2G에 대한 연구를 깊이 함에 따라 일본 산도꾸리(三得利) 회사가 그 β-이성질체인 2-O-β-D-글루코피라노실아스코르빈산에 대한 연구를 진행하고 화학합성 방법을 통해 그것을 얻었다（J.Agric.Food Chem. 2004, 52, 2092-2096）.
AA-2G의 기초상에서 그 분자에 대해 화학적 가공을 더 거쳐서 얻은 다른 유형의 유도체는 6-O-아실-2-O-α-D-글루코피라노실 아스코르빈산이다. 이것은 막의 투과 성능을 제고할 수 있고 아스코르빈산 유도체의 효과적인 이동 운송을 촉진할 수 있다. 이러한 유형의 유도체로는 6-부타노일-AA-2G, 6-헥사노일-AA-2G, 6-옥틴-AA-2G, 6-데카노일-AA-2G, 6-라우로일-AA-2G, 6-미리스토일-AA-2G, 6-헥사데카노일-AA-2G와 6-옥타데카노일-AA-2G이 있다. 연구에 의하여 아실기의 사슬이 길면 길수록 그 분자의 열안정성이 강하고 산소유리기를 제거하는 능력이 커진다는 것이 밝혀졌다. 다른 유도체에 비하여 이 유형의 유도체가 산소 유리기를 제거하는 작용이 훨씬 더 우세하다.
상술한 여러 가지 아스코르빈산 당류의 유도체의 구조식은 다음과 같다.
Figure 112010018143293-pct00001

식 중에서, X는 α-형 글루코시드，Y는 β-형 글루코시드를 표시한다. 비타민C의 유도체로서 상기 화합물을 비타민C와 서로 비교하여 보면 일정한 VC 활성을 유지하고 있을 뿐만 아니라 안정성도 모두 제고되었다.
3-O-위치를 대체한 아스코르빈산 당류 유도체에 대해 현재 소량의 연구만 하였을 뿐이고 유도체의 당에 대한 연구가 단당류에만 한정되였으며 이미 알려진 기타 아스코르빈산 당류 유도체와 서로 비교하여 보면 그 안정성에 뚜렷한 개선이 없고 생리활성도 우월성을 가지고 있지 않다. 아직 기타 3-O-글리코실기에 의해 대체된 아스코르빈산 유도체에 관한 보도가 없다.
본 발명은 일종의 새로운 아스코르빈산 유도체를 제공하고, 더욱 구체적으로 말하면, 더 좋은 안정성, 더 긴 반감기와 더 효과적인 활성을 가진 아스코르빈산 유도체 3-O-글리코실기-L-아스코르빈산을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 일종의 3-O-글리코실기-L-아스코르빈산의 합성방법을 제공하는 것을 또 다른 목적으로 한다.
본 발명은 일종의 중간물 3-O-(아세틸 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산을 제공하여 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산의 제조에 사용하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산의 화장품으로의 용도를 제공함에 있다.
본 명세서에 있어서 전문 용어 "비타민C 전구체"는 그 자체가 미약한 비타민C 활성을 나타내거나 혹은 비타민C의 활성이 없지만 사람 혹은 동물 체내 혹은 신체 표면에서 비타민C 화합물의 분해 생성이 가능한 화합물 및 이런 화합물을 포함한 혼합물을 가리키는 것이다.
본 발명이 채택한 기술방안은 아래와 같다.
일종의 아스코르빈산 유도체가 아래의 식과 같은 구조를 가진다.
Figure 112010018143293-pct00002
식 중, Sugar는 [올리고]당, 혹은 그 생물학적으로 수용가능한 염이나 에스테르를 표시한다.
화학 구조상에서, 당은 다알콜의 알데히드 유도체 혹은 케톤 유도체이며, 폴리히드록시알데히드, 폴리히드록시케톤과 그들의 유도체인 것이다. 서술한 올리고당은 2～10 단당분자가 축합하여 생긴 것인데 가수분해한 다음 단당분자를 얻을 수 있다. 제일 흔히 볼수 있는 올리고당은 이탄당, 즉, 두 분자의 단당이 축합하여 물을 잃고 생긴 당인데, 예를 들면 말토스, 이소말토오스, 락토오스, 겐티오비오스, 메리비오스, 세로비오스, 키토비오스, N-아세틸락토사민 등이다. 삼당 혹은 사당(세분자 혹은 사분자의 단당이 축합하여 물을 잃고 이루어진 것) 등, 예를 들면 말토트리오스, 인삼 삼당류 혹은 아카보즈 등 또는 기타의 올리고당을 사용할 수도 있다.
서술한 아스코르빈산 유도체 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 비타민C의 전구체로서 2-O-α-D-글루코피라노실 아스코르빈산(AA-2G)보다 우월한 생리작용을 가지고 있을 뿐만 아니라 글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)보다 더 좋은 안정성을 가지고 있으며, 특히 수용액 혹은 그 혼합물의 처방에서 다른 비타민C 전구체, 예를 들면 AA-2G 등과 마찬가지로 화장품, 준약품, 약품, 식품과 사료 등 분야에 사용 가능하다.
B16F10 쥐 멜라닌 색소 종양세포를 이용하여 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산, 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)에 대한 멜라닌 색소 침착방지(미백효과)에 대해 평가를 수행하였다. 알부틴과 고지산(kojic acid)을 양성대조군으로서, MTT 실험을 기초로 5.0 mM, 2.5 mM 및 1.0 mM 고, 중, 저 세가지 농도를 선택하여 각각 B16F10 쥐 멜라닌 색소 종양세포계 타이로시나아제의 활성 및 멜라닌 색소 함량(원액염색법)에 대한 영향을 연구하고, 여러가지 샘플의 멜라닌 색소 합성에 대한 영향을 비교하였다. 채택한 시험방법은 아래와 같은 방법을 포함한다.
A．MTT 시험: 세포배양을 통하여 여러가지 샘플의 B16F10 쥐 멜라닌 색소 종양세포 증식에 대한 영향을 관찰.
B．타이로시나아제의 활성 측정 시험: 세포배양을 통하여 멜라닌 색소의 생성에 영향을 주는 중요한 물질인 타이로시나아제의 활성에 대한 여러가지 샘플의 영향을 관찰.
C．멜라닌 색소 함량의 영향: 원액염색법을 통하여 시스템 내의 멜라닌 색소 함량에 대한 영향에 대한 여러가지 샘플의 정성분석.
D．멜라닌 색소 함량의 정량분석.
시험결과는 아래와 같이 나타낸다.
1) 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)(VC유도체1)과 고지산은 마찬가지로 농도≥5.0 mM인 경우 B16F10 세포증식에 대해 현저한 억제작용이 있다. 농도＜5.0 mM인 경우 B16F10 세포증식에 뚜렷한 영향이 없다. 3-O-락토오스-L-아스코르빈산과 알부틴은 마찬가지로 농도≥10.0 mM인 경우 B16F10 세포증식에 대해 현저한 억제작용이 있다. 농도＜10.0 mM인 경우 B16F10 세포증식에 뚜렷한 영향이 없다.
2) 3-O-락토오스-L-아스코르빈산(VC유도체2)은 5.0 mM, 2.5 mM와 1.0 mM 고, 중, 저 세 가지 농도인 경우 타이로시나아제의 활성에 대해 모두 뚜렷한 억제작용이 있으며 알부틴과의 3가지 농도 조합 사이에 모두 통계학적 차이가 없다. 고지산과의 고농도 조합 사이에 모두 통계학적 차이는 없지만 중, 저 농도 조합은 타이로시나아제의 활성에 대한 억제력이 고지산보다 약하다. 같은 농도 조합 사이에 3-O-락토오스-L-아스코르빈산, 고지산과 알부틴이 멜라닌 색소 합성을 억제하는 활성은 통계학적 차이가 없다.
3) 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)이 타이로시나아제의 활성에 대해 일정한 억제작용이 있지만 3-O-락토오스-L-아스코르빈산과 서로 비해보면 비교적 뚜렷하게 약하며 멜라닌 색소 합성에 대한 억제작용도 비교적 약하다.
3-O-락토오스-L-아스코르빈산에 대해 안정성에 관한 연구를 행하였는바 시험결과는 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)보다 더 좋은 안정성을 가지고 있으며 특히 수용액 혹은 처방에 있어서 더 우수하게 나타난다는 것을 밝혔다. 3-O-락토오스-L-아스코르빈산과 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G) 두 가지 비타민C 안정성 대비시험에서 두 가지 물질을 각각 10 %， 5 % 및 1.0 %의 수용액으로 배합제조하고 각각 0 ℃, 25 ℃, 45 ℃ 조건 하에서 3개월간 항온한 다음 다시 함량분석(HPLC，고효과 액체 크로마토그래피)을 행하였다. 결과 0 ℃에서 두 가지 아스코르빈산 유도체의 함량은 거의 변화가 없었고 색상도 모두 무색이었다. 하지만 25 ℃와 45 ℃ 조건하에서 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)은 모두 뚜렷한 황색으로 변하였을 뿐만 아니라 함량도 낮아졌다. 3-O-락토오스-L-아스코르빈산은 상당히 좋은 안정성을 나타내여 용액이 여전히 무색이고 함량변화도 아주 작았다. 3-O-락토오스-L-아스코르빈산의 시험결과는 표1과 같다.
0 ℃ 결과에서 두 가지 아스코르빈산 유도체의 함량은 거의 변화가 없었고 색상도 모두 무색이었다. 하지만 25 ℃와 45 ℃ 조건하에서 2-O-α-D-글루코피라노실아스코르빈산(AA-2G)은 모두 뚜렷한 황색으로 변하였을 뿐만 아니라 함량도 낮아졌다. 3-O-락토오스-L-아스코르빈산은 상당히 좋은 안정성을 나타내여 용액이 여전히 무색이고 함량변화도 아주 작았다. 3-O-락토오스-L-아스코르빈산의 시험결과는 표1과 같다. 표1에 3-O-락토오스-L-아스코르빈산의 안정성시험 결과를 나타내었다.
농도%
온도℃		 1% 5% 10%
함량(HPLC) 색깔 함량(HPLC) 색깔 함량(HPLC) 색깔
0 98 무색 98 무색 98 무색
25 98 무색 98 무색 98 무색
45 96 희미한 색 96 희미한 색 94 희미한 색
설명: 3-O-락토오스-L-아스코르빈산의 초기 함량은 98 %(HPLC)이다.
식Ⅰ에 표시한 구조의 아스코르빈산 유도체와 3-O-락토오스-L-아스코르빈산은 서로 같은 기본구조와 비슷한 성질을 가지고 있다. 비타민C 전구체로서 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 2-O-α-D-글루코피라노실아스코르빈산(AA-2G)에 비해 더욱 우월한 생리작용과 더 좋은 안정성을 가지고 있다.
3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 일종의 새로운 비타민C 전구체로서 2-O-α-D-글루코피라노실아스코르빈산(AA-2G)에 비해 더 우월한 성능, 예를 들면 상기 멜라닌 색소 침착방지(미백효과) 기능을 나타내고 있기 때문에 화장품에 사용 가능하다.
3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 이미 알려진 미백제와 마찬가지로 여러가지 혼합물을 생성할 수 있기에 각종 화장품 혹은 피부보호용품, 예를 들면 선탠 제품, 광노화방지 제품, 주름방지 화장품 등에 사용된다. 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 또 매우 효과적으로 피부 탄성을 유지하고 자외선으로 인한 피부손상을 억제할 수 있다. 제품 조제의 수요에 근거하여, 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 물 혹은 및/또는 여러가지 유기용제 속에 사용 가능하고, 여러가지 보조제를 함께 첨가하여 제품을 제조할 수 있는 바, 계면활성제, 증점제, PH조절제, 방부제, 유연제, 방향제 및/또는 향료 등이 그 예이다. 또한 액체 산물 혹은 연고 형태의 물질로 제조할 수 있다.
본 발명은 또 일종의 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산의 합성방법을 제공하였는 바 간단히 말하면 아스코르빈산의 5,6-위치의 두 히드록실기를 보호하고, 다시 그것을 1-할로겐 아실기당(acylsaccharide)과 결합시킨 다음에, 탈이소프로필화, 탈아실화를 행하여 산물을 얻는 것이다. 그 방안은 다음과 같다.
일종의 아래 식Ⅰ에 표시한 구조의 아스코르빈산 유도체의 제조방법은 아래의 절차를 포함한다.
A）1-할로겐 아실기당의 제조: 당을 원료로 하고 원료 당 중의 모든 히드록실기를 아실화하고 다시 할로겐화하여 1-할로겐 아실기당을 얻는다.
B) 중간물의 제조: 알칼리성 조건하에서 1-할로겐 아실기당과 5,6-O-이소프로필-L-아스코르빈산을 축합반응시켜 중간물 3-O-(아실기 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산을 얻는다.
C）보호기의 탈리: B）에서 얻은 중간물을 각각 산성과 알칼리성 조건하에서 가수분해시켜 보호기인 이소프로필과 아실기를 탈리하고 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 얻는다.
아래에 본 발명의 방법에 대해 상세히 서술한다. 본 방법의 구체적인 반응과정은 아래와 같다.
Figure 112010018143293-pct00003

당（2）를 원료로 하고 완전히 아실화한 다음 다시 할로겐화하여 1-할로겐아실기당（3）을 제조하였다. 원료당（2）은 올리고당이며, 이탄당, 예를 들면 말토스, 이소말토오스, 락토오스, 겐티오비오스, 메리비오스, 세로비오스, 키토비오스, N-아세틸-락토사민을 사용할 수 있다. 삼당 혹은 사당, 예를 들면 말토트리오스, 인삼 삼당류 혹은 아카보즈 등 또는 기타의 올리고당을 사용할 수도 있다. 그 중의 할로겐은 불소, 염소 혹은 브롬을 사용할 수 있다. 아실화를 행하는 보호기는 아세틸기, 프로피오닐, 벤조일 혹은 벤질 등 흔히 볼 수 있는 유리기이다. 예를 들면, 원료 당（2）의 히드록실기를 전부 아세틸화한 후 다시 브롬화하여 1-브로모 아세틸당（3）을 제조하였다（MartorsM.B.，Preparationofacetorome-sugars，Nature，1950，165，369）.
절차 B）에서 서술한 5,6-O-이소프로필-L-아스코르빈산（7）은 종래 기술방법으로 제조 가능하다. 예를 들면, L-아스코르빈산（6）을 원료로 하고 산을 촉매로 하여 L-아스코르빈산과 아세톤이 축합반응을 하면 5,6-O-이소프로필-L-아스코르빈산（7）을 얻었다（ChenHLee，PaulASeib，et a1．Chemical synethesis of several phosphoric esters of L-ascorbicacid，CarbohydrRes，1978．67(1)，127-135）. 그 반응과정은 하기 식에 나타낸 바와 같다.
Figure 112010018143293-pct00004
5,6-O-이소프로필-L-아스코르빈산（7）중의 2-, 3-위치의 두 히드록실기가 노출되어, 3-히드록실기가 일정한 산성을 나타내는바 알칼리가 존재하는 경우 1-할로겐아실기당과 결합하여 글루코사이드를 생성하고 중간물 3-O-(아실기글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（4）를 얻었다. 반응온도는 0～100 ℃이고 용제는 메틸알콜, 에틸알콜, 이소프로필알콜, 아세톤이나 DMF를 선택하여 사용할 수 있다. 반응에서 생기는 산은 알칼리로 흡수하는 바 무기 알칼리, 예를 들면 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산수소나트륨, 탄산수소칼륨 등 혹은 유기 알칼리, 예를 들면 피리딘, 트리에틸아민 등을 사용할 수 있다. 놀랍게도, 본 발명의 공정과 중간물을 사용함으로써, 이러한 단계의 결과물이 단일하고 모두 3-O-(아실기글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산이고 2-O-산물이 없기 때문에 정제하지 않고 직접 절차C）보호기 탈리를 행할 수 있었다.
중간물 3-O-(아실기 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산(4)을 각각 산성과 알칼리성 조건하에서 가수분해시켜 보호기인 이소프로필과 아실기를 탈리하면 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산(1)을 얻는다. 먼저 산을 촉매로 이소프로필을 탈리하여 3-O-(아실기 글루코실기)-L-아스코르빈산(5)을 얻고 다시 알칼리성 조건하에서 3-O-(아실기 글루코실기)-L-아스코르빈산의 보호기인 아실기를 탈리하여 목표산물을 얻을 수 있다. 또는 보호기를 제거하는 절차를 바꾸어 알칼리성 조건하에서 먼저 중간물을 가수분해시켜 아실기를 탈리한 다음 산을 촉매로 하여 이스프로필을 탈리하면 마찬가지로 목표산물을 얻을 수 있다.
3-O-(아실기글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（4）혹은 3-O-글루코실기-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（8）은 산 촉매 이용 조건하에서 이소프로필을 탈리할 수 있다. 산은 염산, 황산, 인산, P-톨루엔설폰산, 포름산, 초산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산 등을 사용할 수 있으며, 용제는 메틸알콜, 에틸알콜, 아세톤이나 그들의 수용액 또는 물을 사용할 수도 있다. 반응온도는 0～100 ℃이다.
보호기 아실기의 탈리，3-O-(아실기 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（4）혹은 3-O-(이실기 글루코실기)-L-아스코르빈산（5）을 알칼리성 조건하에서 가수분해할 수 있다. 가수분해에 쓰이는 염기는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산칼륨, 탄산나트륨, 탄산수소칼륨, 탄산수소나트륨 등의 수용액이나 금속알콜레이트, 예를 들면 나트륨메틸알콜레이트, 나트륨에틸알콜레이트 등을 사용할 수 있다. 용제는 물, 알콜이나 알콜의 수용액, 예를 들면 메틸알콜, 에틸알콜이나 그들의 수용액을 사용할 수 있으며, 이것으로 원료, 예를 들면 3-O-(아실기 글루코실기)-L-아스코르빈산을 용해한다. 반응온도는 0～100 ℃이다. 반응용액은 염산, 황산이나 양이온교환 수지로 중화할 수 있다. 염산이나 황산을 사용할 때 생성되는 염을 제거할 필요가 있지만, 양이온교환 수지를 쓰는 경우에는 나트륨과 칼륨염의 흡착으로 인해 탈염절차가 필요하지 않다.
이상의 절차를 통하여 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 함유한 유기용액 혹은 수용액을 얻을 수 있으며 이 용액을 감압하에 동결 건조(lyophilize)하거나 감압증류하여 용제를 제거한 후 목표 화합물을 얻을 수 있다.
본 발명에 의해 얻어진 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은, 비타민C 전구체로서 기타 아스코르빈산류 유도체, 예를 들면 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)보다 더 좋은 생리작용을 가지고 있을 뿐만 아니라 기타 아스코르빈산류 유도체, 예를 들면 2-O-α-D-글루코피라노실-L-아스코르빈산(AA-2G)보다 더 좋은 안정성을 가지고 있다. 그리고 기타 아스코르빈산 유도체와는 달리 강한 산성이 없기에 피부에 대한 자극이 작고, 효과가 길고 안정하며, 체내외에서 천천히 비타민C를 방출하는 장점을 가지고 있다. 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 화장품, 약품, 식품과 사료 등 분야에 사용 가능하며,특히 미백제로서 화장품에 사용 가능하다.
본 발명의 화학적으로 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 합성하는 방법에 근거하여 사용하는 원료 당을 변화시켜 여러 가지 3-O-글루코실기로 대체된 아스코르빈산을 얻을 수 있을 뿐만 아니라 그 제조방법에 사용되는 원료가 얻기 쉽고 방법이 간단하며 수율이 높다.
아래에 실시예를 통하여 본 발명에 대해 보다 상세히 설명하기로 한다. 본 발명의 보호범위는 설명한 실시예의 제한을 받지 않는다.
구체적인 실시방식：
실시예 1
1-브로모 7-O-아세틸기 락토오스（3a）의 제조
온도계, 적하깔때기를 설치한 삼구 플라스크 안에 무수초산 180 mL를 넣고 얼음욕으로 0 ℃까지 냉각한 다음 과염소산 0.6 mL를 천천히 떨어뜨려 넣으면서 내부온도를 0～5 ℃로 제어하고 과염소산을 전부 떨어뜨려 넣은후 얼음욕을 치워버렸다. 실온에서 무수락토오스 50.0 g을 여러 번에 나누어 넣고 내부 온도를 33 ℃로 제어하였다. 전부 넣은 후 반응액을 10 ℃까지 냉각시키고 적색 인(phosphorus) 7.5 g을 투여하여 교반, 분산되기를 기다렸다. 그런 다음 브롬 14.5 mL를 반응액 속에 떨어뜨려 넣으면서 내부온도를 20 ℃ 이하로 제어하고 브롬을 전부 떨어뜨려 넣은 후 실온에서 2.0 시간 동안 교반하고 얼음물에 부어 넣었다. 클로로포름으로 여러번 추출하고 유기상을 합친 후 무수황산마그네슘으로 건조시키고 농축된 황색 유상물을 무수에틸에테르 75.0 mL에 용해시킨 다음 냉장고 속에 넣고 하루밤 동안 냉장시켜 대량의 백색 결정체를 석출시켰다. 흡인 여과, 건조 후 백색 분말상 고체 81.0 g을 었었는 바 그 m.p.가 123.0～124.5 ℃이고，수율이 81.0 %였다.
실시예 2
5.6-O-이소프로필 -L-아스코르빈산（7）의 제조
건조한 1L 삼구 플라스크 안에 아스코르빈산 91.0 g, 아세톤 450 ml을 넣고 얼음염욕에서 -5 ℃까지 냉각시킨 후 농축 황산 200.0 g을 천천히 떨어뜨려 넣으며 내부온도를 0～5 ℃로 유지하였다. 약 2.5 시간 만에 농축 황산을 전부 떨어뜨려 넣은 다음 계속 5.0 분 동안 교반하였다가 얼음 욕을 치워 자연스레 실온까지 온도를 높여 연속 45 분 동안 반응시킨 후 반응액이 무색으로부터 담황색으로 변하였다. 그런 다음에 흡인여과하고 잔류물을 pH가 중성을 나타낼 때까지 소량의 아세톤으로 여러번 세척하고 여과잔류물을 1～2 시간 동안 진공건조（50 ℃）하여 백색분말상고체 89.5 g을 얻었은 바 그 m.p.：215～217 ℃이고 수율이 80.2 %였다.
실시예 3
3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-(5,6-O-이소프로필)--L-아스코르빈산（4a）의 제조
건조한 1L 원형 플라스크 안에 1-브로모 7-O-아세틸기 락토오스(3a) 79.0 g, 5,6-O-이소프로필-L-아스코르빈산(7), 아세톤 500 ml을 넣고 교반 분산 후, 다시 탄산칼륨 28.0 g과 TEBAC 1.0 g을 넣고 50 ℃에서 가열하면서 하루밤 지난 후 흡인여과를 수행하고, 용제를 회수하여 얻은 담황색 유상물을 다시 초산에틸 200 mL에 용해시켜 포화식염수 20 ml로 여러번 세척한 후 무수황산나트륨으로 건조, 회수하여 초산에틸을 회수하고 잔류물을 오일 펌프로 1 시간 동안 진공건조하여 담황색의 포말상물 57.0 g을 얻었는 바 융점이 52.5～54.0 ℃이고 수율이 60.2 %였다.
1HNMR(CDCl3, 400M)δ: 1.21(6H, -CH3), 2.03-2.21(21H, -CH3), 3.98(2H, -CH2-), 4.32(2H, -CH2-), 4.37(2H, -CH2-), 4.45(1H, -CH-), 4.47(1H, -CH-), 4.49(1H, -CH-), 4.50(1H, -CH-), 4.52(1H, -CH-), 4.54(1H, -CH-), 4.61(1H, -CH-), 4.65(1H, -CH-), 4.68(1H, -CH-), 5.91(1H, -CH-)，5.58(1H, -CH-), 5.73(1H, -CH-);
MS (ESI, m/z) : [M-H]-： 834.2
실시예 4
3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-L-아스코르빈산（5a）의 제조
500 mL 원형 플라스크 안에 3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（4a）31.0 g, 빙초산 180 mL와 물 180 mL를 넣고 교반 용해하고 가온하여 유욕온도를 50～60 ℃로 유지하고 1.5 시간 동안 교반하였다. TLC를 이용하여 원료포인트를 검측하여 없음을 확인한 다음 용제를 회수하고 잔류물을 초산에틸 250 mL에 용해하여 포화식염수로 여러번 세척한 후 무수황산나트륨으로 유기상을 건조, 농축하여 담황색의 유상물을 얻고 실온에서 1.0 시간 동안 진공건조하여 황색 포말상 고체 25.0 g을 얻고 컬럼 크로마토그래피 방법으로 백색 포말상물 22.1 g을 얻었고, 수율이 70.0 %였다.
1HNMR(CDCl3, 400M)δ: 2.11-2.40(21H, -CH3), 3.68(2H, -CH2-), 4.31(2H, -CH2-), 4.43(2H, -CH2-), 4.48(1H, -CH-), 4.53(1H, -CH-), 4.55(1H, -CH-), 4.61(1H, -CH-), 4.64(1H, -CH-)，4.68(1H, -CH-), 4.71(1H, -CH-), 4.75(1H, -CH-), 4.89(1H, -CH-), 5.22(1H, -CH-)，5.38(1H, -CH-), 5.46(1H, -CH-);
MS (ESI, m/z) : [M-H]-： 794.2
실시예 5
3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산（1a）의 제조
실온에서 3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-L-아스코르빈산（5a）25.0 g을 메틸알콜 250 mL에 용해하고, 10 % 탄산칼륨수 용액 250 mL를 천천히 넣은 후 1.5 시간 동안 교반, 양이온교환 수지를 넣어 pH를 6.0～7.0까지 조절, 흡인여과를 수행하고, 다시 여과액을 농축하여 담황색 고체를 얻고 재결정하여 흰색 혹은 흰색에 유사한 고체 6.1 g을 얻었고 수율이 70.2 ％였다.
1HNMR(D2O, 400M)δ: 3.59(2H, -CH2-), 4.07(2H, -CH2-), 4.19(2H, -CH2-), 4.23(1H, -CH-), 4.27(1H, -CH-), 4.29(1H, -CH-), 4.35(1H, -CH-), 4.36(1H, -CH-), 4.41(1H, -CH-), 4.43(1H, -CH-), 4.45(1H, -CH-), 4.95(1H, -CH-), 4.98(1H, d, -CH-)，5.08(1H, -CH-), 5.33(1H, -CH-);
MS (ESI, m/z) : [M-H]-： 500.1
실시예 6
실시예 5에서 얻은 3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산（1a）을 미백크림에 넣어 사용하였다. 1.5부（중량부, 이하 같음）의 라네스-(25)와 2.5부의 글리세린 모노스테아레이트를 에멀전화 시스템으로 하고 4부의 세트아르(cetosteryl)알콜, 5부의 화이트 미네랄 오일(petrolatum)과 5부의 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드를 주요한 유상으로 하여 O/W 미백크림 연고 기제를 제조하고 연고 에멀젼화 후기(대략 45 ℃)에 1～3부의 3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산을 넣으면 되었다.
실시예 7～13
실시예 7～13은 본 발명의 방법에 의하여 별도로 상이한 당을 원료로 하여 상이한 글루코실기를 함유한 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 제조하였다.
1-브로모 아세틸기당（3b-3h）의 제조는 실시예 1의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（4b-4h）의 제조는 실시예 3의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-L-아스코르빈산（5b-5h）의 제조는 실시예 4의 제조방법을 참조하였다.
3-O-글루코실기-L-아스코르빈산（1b-1h）의 제조는 실시예 5의 제조방법을 참조하였다.
얻은 목포 산물과 중간물의 몰 수율은 표2에 나타낸 바와 같다. 표2에 각 산물과 중간물의 몰 수율(%)를 나타내었다.
Figure 112010018143293-pct00005
* 락토오스(2a)는 실시예 3～5의 수율 데이터이다.
얻은 여러가지 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산은 미백 활성물로서 실시예 6의 방법에 따라 3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산을 대체하여 미백크림에 사용하였다.
실시예 14
여러가지 세포를 1x104/구멍에 따라 96 웰 플레이트에 접종하고 37 ℃ 및 5 % CO2 조건하에서 24 시간 부화시킨 후 상층액을 버리고 매 구멍마다 일정한 농도의 배양기 200 μL를 넣되, 매 샘플을 고,중,저 3 가지 농도로 나누고, 매개 농도마다 중복 구멍을 4개 두었다. 대조군에 직접 배양기 200 μL를 넣고 연속 72 시간 부화시킨 후, 매 구멍마다 5 g/L의 MTT 용액 20 μL를 넣고 37 ℃ 및 5 % CO2 조건하에서 4 시간 부화시킨 후 상층액을 버리고 매 구멍마다 DMSO 150 μL를 넣고 10 분 동안 진동한 후 ELIASA의 490 nm 파장(비교파장 620 nm) 조건하에서 매 구멍의 흡광도를 측정하였다. 세포증식율=(검액의 각 농도의 평균흡광도)/(대조조의 평균흡광도)x100 %. 실험결과는 표3에 나타낸 바와 같다. 표3에 부동한 농도의 샘플작용 하에서 MTT 방법으로 검측한 멜라닌 색소세포의 증식율(Mean±SE，%)을 나타내었다.
농도
샘플		 20.0 mM 10.0 mM 5.0 mM 1.0 mM
VC 유도체 1 8.17÷0.46** 43.21÷7.40** 100.98÷14.79 108.66÷8.32
VC 유도체 2 66.67÷5.48* 76.56÷7.67 79.34÷3.99 72.67÷10.59
고지산 43.55÷7.36** 43.23÷2.31** 63.23÷3.66 92.20÷8.28
우르솔산 46.15÷3.41* 76.94÷6.08 102.94÷3.64 113.57÷5.57
데이터 통계는 SPSS11.0 소프트, 일원분산분석(ANOVA)을 이용, 공백 대조군의 멜라닌 색소 세포 증식율은 100 %. *는 p<0.05를 표시하고, **는 p<0.01을 표시하며, p치는 관찰결과가 유효하다고 인정하는 것, 즉, 총체적 대표성을 가진 에러 확율을 표시한다.
실시예 15
B16F10 세포를 5x103/구멍에 따라 96 웰 플레이트에 접종하고 37 ℃ 및 5 % CO2 조건하에서 24 시간 부화시킨 후 상층액을 버리고 매 구멍마다 각각 부동한 농도의 여러가지 검액을 포함한 샘플 배양 유리기 100 μL를 넣되, 공백 대조군에는 배양기만 넣고 매조를 4번 중복하였으며, 격일에 한번씩 배양기를 바꾸어 연속 6 일간 부화시킨 다음 Ca2+과 Mg2+ 이온을 함유하지 않은 PBS로 한 번 세척하였다. 그 다음 매 구멍마다 0.5 % Triton-X 용액 100μL 를 넣고 30 분 동안 초음파 진동을 행한 후 매 구멍마다 10 mM/L L-도파민용액 50 μL를 넣고 37 ℃에서 3 시간 방치한 다음, ELIASA의 490 nm 파장(비교파장 620 nm) 조건하에서 매 구멍의 흡광도를 측정하였다. 타이로시나아제의 활성영향율=검액조의 평균흡광도/대조조의 평균흡광도x100 %. 실험결과는 표4에 나타낸 바와 같다. 표4에 부동한 농도의 샘플작용 하에서 B16F10 멜라닌 색소 종양세포 타이로시나아제의 활성(Mean±SE，%)을 나타내었다.
농도
샘플		 5.0 mM 2.5 mM 1.0 mM
VC 유도체 1 69.90÷1.733** 92.40÷0.94 95.99÷2.01
VC 유도체 2 20.68÷1.34** 36.19÷2.98** 51.01÷2.71**
고지산 18.32÷1.12** 23.00÷2.11** 36.74÷3.22**
우르솔산 20.53÷1.02** 38.07÷1.78** 50.02÷4.04**
데이터 통계는 SPSS11.0 소프트, 일원분산분석(ANOVA)을 이용, 공백 대조군의 멜라닌 색소 함량은 100 %. *는 p<0.05를 표시하고, **는 p<0.01을 표시한다.
실시예 16
MTT 시험결과에 근거하여 2x104/구멍에 따라 6 웰 플레이트에 접종하고 37 ℃ 및 5 % CO2 조건하에서 24 시간 부화시킨 후 상층액을 버리고 매 구멍에 부동한 농도의 검액배양기 6.0 mL를 넣고 공백 대조군 안에는 배양기만 넣었으며, 매 조를 4번 중복하고, 격일에 한번씩 배양기를 바꾸고 연속 6 일간 부화시킨 다음 처리하였다. PBS로 두 번 세척한 후 4 % 파라포름알데히드로 15 분 동안 고정하고 PBS로 세척하였으며 0.5 %의 L-도파민으로 37 ℃에서 0.5 시간 동안 부화시키고 현미경 하에서 사진(10x10)을 찍었다.
사진의 대비에서 VC 유도체 2와 공백 대조군을 비교해 보면 염색염착도가 뚜렷하게 낮아졌는바 VC 유도체 2가 타이로시나아제의 활성을 뚜렷하게 억제하여 멜라닌 색소의 생성을 감소시켰음을 나타내었다.
실시예 17
B16F10 세포를 직경 60 mm인 배양기 속에 접종하고 37 ℃ 및 5 % CO2 조건하에서 24 시간 부화시킨 후 상층액을 버리고 각각 부동한 농도의 여러 가지 샘플의 배양기를 넣었다. 대조군에는 배양기만 넣고 매조를 세 번 중복하였으며, 격일에 한 번씩 배양기(基)를 바꾸었으며 연속 6 일간 부화시킨 다음 0.25 % 판크레아틴/EDTA으로써 세포를 소화(digest)시켜 수확하고, PBS로 두 번 세척하고 각각 매조의 세포수를 계산하였으며, 각각 0.2 mL의 DDW를 넣어 세포를 1 분 동안 부유시킨 다음 에틸알콜 500 μL와 에틸에테르 500 μL의 혼합물을 넣고 실온에서 15 분 동안 방치, 원심분리기 안에 넣고 3000 회전/min 속도로 5 분 동안 원심분리하였다. 다시 4 mL DDW로 NaOH을 0.2 mol/L로 희석하고 분광광도계로 475 nm(비교파장 620 nm)의 흡광도를 측정. 멜라닌 색소 함량=[(검액흡광도/세포수의 평균치)]x100 %. 실험결과는 표5에 나타낸 바와 같다.
농도
샘플		 5.0 mM 2.5 mM 1.0 mM
VC 유도체 1 84.19÷1.85 91.11÷1.82 96.37÷3.63
VC 유도체 2 22.24÷1.80** 30.08÷3.77** 51.01÷2.17**
고지산 17.65÷1.42** 24.15÷1.88** 37.20÷4.33**
우르솔산 20.53÷1.02** 36.61÷2.15** 50.12÷1.97**
데이터 통계는 SPSS11.0 소프트, 일원분산분석(ANOVA)을 이용, 공백 대조군의 멜라닌 색소 함량은 100 %. *는 p<0.05를 표시하고, **는 p<0.01을 표시한다.
실시예 18
3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산（1a）의 제조
500 mL 원형 플라스크 안에 3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（4a）11.0 g, 빙초산 90 mL와 물 90 mL를 넣고 교반 용해하고 가온하여 유욕(oil bath) 온도를 50～60 ℃로 유지하면서 1.5 시간 동안 교반, TLC를 이용하여 원료포인트를 검측한 다음 용제를 회수하고 잔류물을 메틸알콜 100 mL에 용해하였다. 천천히 10 % 탄산칼륨수용액 100 mL를 넣고 40 분 동안 교반한 후 양이온교환 수지를 넣어 pH를 6.0～7.0까지 조절, 흡인여과를 수행하고, 다시 여과액을 농축하여 담황색 고체를 얻었다. 그런 다음에 재결정하여 백색고체 2.3 g을 얻었고, 수율이 35.2 %였다.
실시예 19
3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산（1a）의 제조
실온에서 3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산(4a) 11.0 g을 메틸알콜 250 mL에 용해하고, 25 % 탄산칼륨수용액 100 mL를 천천히 넣은 후 1.5 시간 동안 교반, 양이온교환 수지를 넣어 pH를 6.0～7.0까지 조절, 흡인여과를 수행하고, 다시 여과액을 농축하여 담황색 유상물을 얻었고 빙초산 80 mL와 물 80 mL로 교반하여 용해시켰다. 유욕을 가온하여 오일 온도를 50～60 ℃로 유지, 1.5 시간 동안 교반하고 TLC를 이용하여 원료 포인트를 검측하여 원료가 없음을 확인 후 용제를 회수하여 황색 유상물을 얻었다. 실온에서 1.0 시간 동안 진공건조를 행하여 황색 포말상 고체를 얻고 재결정하여 담황색 고체 1.95 g을 얻었고 수율이 29.6 %였다.
실시예 20
3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산（1a）의 제조
실온에서 나트륨메틸알콜레이트（50 %）5.0 g을 메틸알콜 250 mL에 넣고 용해할 때까지 교반한 후, 3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-L-아스코르빈산（5a）25.0 g을 넣고 2.0 시간 동안 교반하였다. 그 다음 양이온교환 수지를 넣어 pH를 6.0～7.0까지 조절, 흡인여과를 수행하고, 여과액을 농축하여 백색고체 10.9 g을 얻었고 수율이 69.6 %였다.
실시예 21～24는 3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산（4a）의 제조에 사용하였다.
실시예 21
실시예 3의 제조방법을 참조하여 탄산나트륨을 알칼리로써 사용하여 담황색의 황색 고체를 얻었다.
실시예 22
실시예 3의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 용제가 메틸알콜이고, 사용한 알칼리가 피리딘인 것이다.
실시예 23
실시예 3의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 용제가 에틸알콜이고, 사용한 알칼리가 트리에틸아민인 것이다.
실시예 24
실시예 3의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 용제가 DMF이고, 사용한 알칼리가 탄산수소나트륨인 것이다.
실시예 25～28은 3-O-(7-O-아세틸-D-락토오스)-L-아스코르빈산（5a）의 제조에 사용하였다.
실시예 25
실시예 4의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 산이 염산이고, 사용한 용제가 메틸알콜인 것이다.
실시예 26
실시예 4의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 산이 초산이고, 사용한 용제가 메틸알콜의 수용액인 것이다.
실시예 27
실시예 4의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 산이 P-톨루엔설폰이고, 사용한 용제가 에틸알콜의 수용액인 것이다.
실시예 28
실시예 4의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 산이 인산이고, 사용한 용제가 아세톤 수용액인 것이다.
실시예 29
3-O-(D-락토오스)-L-아스코르빈산（1a）의 제조
실시예 5의 제조방법을 참조하였으나 다른 점은 사용한 알칼리가 나트륨에틸알콜레이트이고, 사용한 용제가 무수알콜인 것이다.
실시예 30
본 발명의 방법에 의하여 말토트리오스를 함유한 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 제조하였다. 그 중,
1-브로모 아세틸기당의 제조는 실시예 1의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 3의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 4의 제조방법을 참조하였다.
3-O-글루코실기-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 5의 제조방법을 참조하였다.
실시예 31
본 발명의 방법에 의하여 인삼 삼당류를 함유한 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 제조하였다. 그 중 1-브로모 아세틸기당의 제조는 실시예 1의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 3의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 4의 제조방법을 참조하였다.
3-O-글루코실기-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 5의 제조방법을 참조하였다.
실시예 32
본 발명의 방법에 의하여 아카보즈를 함유한 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 제조하였다. 그 중 1-브로모 아세틸 당의 제조는 실시예 1의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 3의 제조방법을 참조하였다.
3-O-(아세틸 글루코실기)-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 4의 제조방법을 참조하였다.
3-O-글루코실기-L-아스코르빈산의 제조는 실시예 5의 제조방법을 참조하였다.

Claims (12)

  1. 하기 식의 구조를 갖는 아스코르빈산 유도체:
    Figure 112012016341619-pct00006

    상기 식에서, Sugar는 올리고당, 혹은 생물학적으로 수용가능한(bio-acceptable) 염을 표시함.
  2. 제1항에 있어서, 상기 올리고당이 이탄당, 삼당 또는 사당인 것을 특징으로 하는 아르코르빈산 유도체.
  3. 제2항에 있어서, 상기 올리고당이 말토스, 이소말토오스, 락토오스, 겐티오비오스, 메리비오스, 세로비오스, 키토비오스 또는 N-아세틸락토사민인 것을 특징으로 하는 아르코르빈산 유도체.
  4. 하기 단계를 포함하는 제1항에 따른 아르코르빈산 유도체의 제조방법:
    A) 당을 원료로 하고 원료 당 중 모든 히드록실기를 아실기화하고 다시 할로겐화하여 1-할로겐 아실기당을 얻는 단계;
    B) 알칼리성 조건하에서 1-할로겐 아실기당과 5,6-O-이소프로필-L-아스코르빈산을 축합반응시켜 중간물 3-O-(아실기 글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산을 얻는 단계; 및
    C）상기 단계 B)에서 얻은 중간물을 각각 산성과 알칼리성 조건하에서 가수분해시켜 보호기인 이소프로필과 아실기를 탈리하고 3-O-글루코실기-L-아스코르빈산을 얻는 단계.
  5. 제4항에 있어서, 상기 원료 당이 말토스, 이소말토오스, 락토오스, 겐티오비오스, 메리비오스, 세로비오스, 키토비오스 혹은 N-아세틸락토사민인 것을 특징으로 하는 제조방법.
  6. 제4항에 있어서, 상기 단계 A)에 있어서 아세틸화한 후 다시 브롬화하여 1-브로모 아세틸기당을 제조하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  7. 제4항에 있어서, 상기 단계 B)에 있어서 서술한 5,6-O-이소프로필-L-아스코르빈산은 산의 촉매로 채택한 조건하에서 L-아스코르빈산과 아세톤을 축합반응시켜 얻는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  8. 제4항에 있어서, 상기 단계 B)에 있어서 반응온도가 0～100 ℃이고 용제를 메틸알콜, 에틸알콜, 이소프로필알콜, 아세톤 혹은 DMF로 하고, 탄산타트륨, 탄산칼륨, 탄산수소나트륨이나 탄산수소칼륨, 혹은 피리딘이나 트리에틸아민을 알칼리로 사용하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  9. 제4항에 있어서, 상기 단계 C)에 있어서 산을 촉매로 한 조건하에서 이소프로필을 탈리하며, 반응온도가 0～100 ℃ 이고, 염산, 황산, 인산, P-톨루엔설폰산, 포름산, 초산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산을 산으로 사용하고, 물, 메틸알콜, 에틸알콜, 아세톤이나 그들의 수용액을 용제로 사용하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  10. 제4항에 있어서, 상기 단계 C)에 있어서 알칼리성 조건하에서 가수분해시켜 아실기를 탈리하며, 반응온도가 0～100 ℃이고, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산칼륨, 탄산나트륨, 탄산수소칼륨이나 탄산수소나트륨, 혹은 나트륨메틸 알콜레이트, 나트륨에틸알콜레이트을 알칼리로 사용하고, 물, 메틸알콜, 에틸알콜이나 그들의 수용액을 용제로 사용하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  11. 제1항에 따른 아스코르빈산 유도체의 중간산물 3-O-(아실기글루코실기)-(5,6-O-이소프로필)-L-아스코르빈산.
  12. 삭제
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