KR100683233B1

KR100683233B1 - 붉은 쌀 발효산물을 함유한 조성물, 발효공정 및 이들을 위한 모나스쿠스 균주

Info

Publication number: KR100683233B1
Application number: KR1020007004921A
Authority: KR
Inventors: 마오리앙 장; 치-찌우 펭; 유-팡 조우
Original assignee: 페킹 유니버시티
Priority date: 1997-11-06
Filing date: 1998-11-06
Publication date: 2007-02-20
Also published as: DE69838988D1; EP1044009A4; US6046022A; WO1999023996A2; WO1999023996A3; EP1044009A2; AU1170999A; CA2309100A1; ATE383164T1; ES2299217T3; US6632428B1; US20030194413A1; DE69838988T2; DK1044009T3; CA2309100C; EP1044009B1; EP1044009B8; JP2003521217A; PT1044009E; BR9815272A

Abstract

본 발명은 심장 혈관질환, 뇌 혈관질환, 당뇨병, 고혈압, 비만, 허약한 호흡, 만성두통, 가슴 통증 및 압박, 팔다리 종기 및 팽창, 식욕부진 및 과잉 가래와 같은, 지방 혈전증 및 관련 장애 및 증후의 치료 또는 예방을 위한 천연 환자식 보조물 및 의약품으로써 사용될 수 있는 방법 및 조성물을 제공한다. 상기 방법 및 조성물은 인간의 혈청 콜레스테롤 및 혈청 트리글리세리드 수치 모두를 낮추는데 효과적이어서, 심장혈관의 건강을 유지하기 위해서 사용될 수 있다. 본 발명은 또한 목적하는 생물학적 활성을 갖는 발효산물을 생산하는 특별한 모나스쿠스 균주를 포함한다.

Description

붉은 쌀 발효산물을 함유한 조성물, 발효공정 및 이들을 위한 모나스쿠스 균주{COMPOSITIONS CONTAINING RED RICE FERMENTATION PRODUCTS, FERMENTATION PROCESSES AND MONASCUS STRAINS THEREFOR}

본 발명은 쌀의 발효 분야 및 지방과다혈증을 치료하는 분야에 관한 것이다. 보다 상세하게, 본 발명은 붉은 쌀 발효 산물 및 방법, 및 높은 콜레스테롤 수치와 다른 질환을 치료하기 위한 상기 산물의 이용에 관한 것이다.

본 발명은 섭생식 보충물 및/또는 치료 약제로써 사용될 수 있는 붉은 쌀 발효산물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 예를 들면, 상기 조성물은 포유동물에 있어서 혈청 콜레스테롤 및 트리글리세리드(triglycerides)를 낮추기 위해 사용될 수 있다. 또한, 본 발명은 상기 붉은 쌀 발효산물을 사용하여 심장혈관의 질환 및 다른 질환을 치료하기 위한 방법에 관한 것이다. 그 이외에, 본 발명은 소정의 생물학적 활성을 지닌 발효산물을 생산하는 특별한 모나스쿠스 균주(Monascus strains)에 관한 것이다.

고대 중국의 붉은 쌀

붉은 쌀은 주로 방부제 및 착색제로 음식에 이용되거나, 염색산업에 이용되는 것으로 알려져 있다. 붉은 쌀(훙츄 또는 홍쿠로 중국에서 알려짐)은 수 백년 동 안 중국에서 쌀 와인 제조 및 음식 방부제로 알려져 왔고 사용되어져 왔다. 그 이외에, 붉은 쌀은 고대 중국의 의약품 또는 특별한 고대 중국 처방 원료로 알려져 왔다.

붉은 쌀은 한 왕조 무렵에 처음으로 사용되었다. 탕 왕조 후 우다이 시대에 살았던 타오 구는 큉 이 루(Qing Yi Lu)에 "고기와 함께 요리된 붉은 효모 쌀)"을 기록했다. 붉은 쌀을 만드는 방법은 원래 티엔 경 카이 우 및 펜 챠오 캉 무(T'ien Kyng K'ai Wu and Pen Ts'ao Kang Mu)에 기록되어 있었고, 붉은 쌀의 의약적 적용은 밍(Ming) 왕조(1368-1644)동안 공표된 고대 중국 약전인 펜 챠오 캉 무(Pen Ts'ao Kang Mu)에 구체적으로 기술되어있다. 펜 챠오 캉 무(Pen Ts'ao Kang Mu)에서, 붉은 쌀은 부드럽고 독성이 없으며, 소화불량 및 설사치료에 유용하다고 기술되어 있다. 붉은 쌀은 또한 혈액순환을 향상시키고 비장 및 위의 건강을 촉진하는데 유용하다고 기술되어 있다. 그 이외에, 소화불량, 설사, 심장질환 및 복통과 같은 것을 치료하기 위해 붉은 쌀을 사용하는 몇몇 처방전이 상기 고대에 기술되었다. 중화인민공화국의 약전에 있는 전통 중국 의약 표준 및 베이징, 네이몽골, 샤동주, 지앙수주 및 후난주 등의 전통 중국 위약 표준에 따르면, 붉은 쌀은 전통 중국 의약으로 사용되어짐이 명시되어있다. 또한, 식품첨가제 및 식품화학과 같은 중국 대학의 교과서에 따르면, 붉은 쌀은 음식 및 음료의 첨가제로써 생각되어지고, 발효된 두부, 맥주, 고기와 같은 품목의 생산을 위한 식품 제조 산업에 널리 사용되어왔다.

1911년 발행된 펜 챠오 캉 무(Pen Ts'ao Kang Mu)의 생략된 영문번역에서, 붉은 쌀은 발효에 유용하고, 여성의 난산 및 아이의 소화불량상태의 치료에 의약적 가치를 가지고 있다고 기술되어있다(스튜어트,M.D.,"중국 약물학-채소 왕국", 233쪽 내지 234쪽, 중국공화국, 타이뻬이, 남쪽 물질 센터 법인에 의해 1979년 재발행). 펜 챠오 캉 무(Pen Ts'ao Kang Mu)에 기술된 것처럼 붉은 쌀은 그후에 모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트(Monascus purpureus Went)로 알려진 균류로 인식되었다(참조,B.E.,1936, 펜 챠오 캉 무의 중국 의약 식물, 제3판, 페킹 내셔널 히스토리 불리틴 발행; 클라인,G., 1932, 한트부르크 플란제나날리스 Ⅱ, 1422쪽 내지 1423쪽, 빈, 베르라크 본 줄리스 스프링어).

붉은 쌀의 제조는 밍 왕조, 성 잉-힝(Sung Ying-Hsing)에 의한 티엔 쿵 카이 우(T'ien Kung K'ai Wu) 의 다른 발행물에서 알 수 있는데, 상기 발행물은 서기 1637년에 발행되었다(펜실베니아 주립대학 출판물 1966, 이-투 젠선 및 쉬오우-츄안 선에 의해 번역된 상기 고대 저서,"티엔 쿵 카이 우-17세기 중국 기술"의 영문번역 291쪽 내지 294쪽). 붉은 쌀은 상기 생선 또는 고기의 맛과 색을 보존하는 데 유용하다고 상기 발행물에 기술되어있다. 상기 제조과정은 붉은 와인 반죽을 사용했고, 시작재료로 끈끈하지 않은 쌀을 요리했다. 또한 요리된 쌀의 표면에 곰팡이를 자라게 하여 붉은 쌀을 제조하는 방법은 보더만(Voderman)에 의해 기록되었다(1894, Analecta ob Cromatologisch Gebied.Ⅱ.Geneesh. Fylschrift voor Ned. Indie,35,No 5).

현대에도 여전히, 붉은 쌀, 모나스쿠스종(Monascus species)의 발효산물, 붉은 쌀은 전통 중국 의약, 아시아 및 북아메리카의 아시안 지역에서 와인제조와 식 품착색에 사용된다. 모나스코루빈(monascorubin) 및 모나신(monascin)과 같은 모나스쿠스 퍼퍼레우스(Monascus purpureus)의 붉은 색소 및 노랑 색소는 정제되었고 광범위하게 연구되었다( Fielding 등.,1961,J Chem Soc,4579-4589). 또한, 모나스쿠스 퍼푸레우스의 착색에 대한 효과와 배양조건이 연구되어왔다(Broder 등, 1980, J Food Sci, 45:567-469). 항균 활동, 특히 바실루스종(Bacillus species)에 대한 항균 활동은 또한 모나스쿠스 퍼푸레우스 추출물(Monascus purpureus extract)에서 검출되었다(웡,1977,식물 생리학,60:578-581). 전통방법에 의한 붉은 쌀은 가치가 없는 것처럼 보여져왔다. 그래서 점차로 의약 적용에 이용되지 않게 되었다. 전통의 붉은 쌀은 혈액지질을 감소시키는 효능이 없어서 콜레스테롤 저하 약제로서 결코 사용되지 못했다.

지방과다혈증 및 섭생/의약 중재

지질 및 지단백질은 흡수, 물질대사 및 분포 조직들사이에 지방-유도된 대사산물을 운반하는데 필수적인 역할을 한다(펠릭 등.,1975, N Eng J Med,293:1078-1084). 일반적으로 콜레스테롤을 함유하는 혈액 지질 상승은 섭생으로부터 유발되기 쉽다. 유전적 소인 및 하부 작용과 연결된 고칼로리 섭생 고지방의 상호작용은 미국인구의 상당부분에 심장병, 고혈압, 하이퍼트리글리세리데미아(hypertriglyceridemia) 및 당뇨병을 일으킬 수 있다.

고 혈청 콜레스테롤은 관상동맥 질병의 주요한 위험인자이다. 콜레스테롤은 아테로마성 동맥경화 병소의 주요한 성분이다. 낮아진 HDL 콜레스테롤 수치하에 하이퍼트리글리세리데미아(hypertriglyceridemia)를 포함하는, 다른 관련 지질의 비 정상은 심장혈관질환의 위험에 영향을 미친다고 알려져 왔다. 상승된 트리글리세리드 수치와 낮아진 HDL 수치 사이에는 반비례관계가 있다.

혈액순환에서 콜레스테롤 수치는 혈액순환에서 apoB-100 입자의 생성 및 제거사이의 균형으로부터 원인이 된다. 콜레스테롤은 20개 이상의 효소반응시리즈를 통해 아세틸-CoA로부터 합성된다. 상기 생합성 경로는 HMG-CoA 환원효소(hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase)의 활성에 의해 주로 조절되는데, 상기 효소는 촉매작용을 하여 HMG-CoA를 메발로네이트(mevalonate)로 환원시킨다. 대부분의 콜레스테롤 순환은 간에서 내생적으로 합성되고, 섭생 콜레스테롤로부터 유도되는 것이 아니기 때문에, 콜레스테롤의 생합성에 관련된 효소의 억제제(inhibitors)는 콜레스테롤 과다혈증을 치료하기 위한 약품으로써 연구되었다(그룬디,NEW Eng J Med(1988)319:24-33).

한 부류의 화합물은 콜레스테롤 생합성 경로에서의 중요 효소, HMG-CoA 환원효소에 대한 천연 기질(HMG-CoA)과 경쟁함으로써 콜레스테롤 생합성을 억제한다. 처음에 발견된 상기 하이포콜레스테롤레믹 화합물(hypocholesterolemic compound)은 컴팩틴(compactin)으로, 아키라엔도(Akira Endo)에 의해 페니실리엄 시트리넘(Penicillium citrinum)의 배양물로부터 분리되었다(Endo 등., J Antibiotics(1975)29:1346-1348, 또한 미국 특허 제3,983,140호, 제4,049,495호 및 제4,137,322호참조). 상기 화합물의 하이포콜레스테롤레믹 활성(hypocholesterolemic activity)은 여러 동물종에서 증명된다(츄지타 등., Atherosclerosis(1979)32:307-313). 그후로 컴팩틴과 구조적으로 관련된 하이포콜레스테롤레믹 화합물(hypocholesterolemic compound)은 모나스쿠스 루버(Monascus ruber)의 발효산물에서 엔도(Endo)에 의해, 그리고 아스퍼길루스 테레우스(Apergillus terreus)의 배양으로부터 다른 그룹에 의해 독립적으로 발견되었다(상기 활성화합물은 모나콜린 K의 이름을 따서 지었다 : 엔도, J Antibiotics(1979)32:852-854;엔도, Antibiotics(1980)33:334-336; 독일특허 DE 3051175,3051099 및 3006216;영국특허 GB 2046737 및 2055100)). 활성화합물은 또한 메비놀린(mevinolin), 로바스타틴(lovastatin) 또는 메바코르(Mevacor)의 이름을 따서 지었고(토베르트 등., J Clin Invest(1982)69:913-919), 1987년이래 미국에서 처방약품으로 이용해왔다. 이런 활성 화합물의 유효성 및 장기간의 악영향이 재검토되었다(토베르트, Am J Cardiol,62:28J-34J). 상기 분리된 활성 화합물, 아스퍼길루스(Aspergillus)로부터의 생산방법 및 그의 유도체가 미국 특허번호 제 4,231,938호, 제4,342,767호, 제4,294,926호, 제4,319,039호, 제4,294,926호, 제4,294,846호 및 제4,420,491호에 기록되어 있다.

비록 모나콜린 K 또는 메비놀린이 콜레스테롤 과다혈증을 치료하는데 성공적으로 사용됐으나, 상기 화합물은 트리글리세리드(triglycerides)의 혈청수치에 거의 영향을 미치지 못한다. 하이퍼트리그리세리데미아(hypertriglyceridemia), 특히 타입 Ⅳ 및 Ⅴ 지방과다혈증(hyperlipidemia)을 치료하기 위해 사용되어졌던 다른 지질 조절 약제는 니코티닉 산( 예로 니아신(niacin)), 섬유 산 유도체(예로 젬피브로질(gemfibrozil) 및 클로피브리트(clofibrate))를 포함한다. 그러나, 상기 약제의 사용은 그들의 부작용(예를 들면 니아신의 과다복용은 위의 흥분, 하이퍼루리세미아(hyperuricemia), 과혈당증(hyperglycemia) 및 가려움증을 일으키고, 젬피브로질은 악성종양, 갈블라더 병(gallbladder diseases) 및 복통을 일으키므로 제한된다.

또한, 신장쇠약을 일으킬 수 있는 근육의 염증 및 횡문근융해(rhabdomyolysis)의 위험은 모나콜린 K가 젬피브로질, 클로피브레이트, 또는 니아신과 결합할 때 증가한다. 상기 결합은 위험이 확실한 특별한 상황에서 주의깊은 감독하에만 사용된다(머크 매뉴얼, 1992,16판, 1044쪽 내지 1046쪽). 고농도의 혈청 트리글리세리드는 다양한 질병의 위험인자로 알려져 있고 합병증을 유발할 수 있다. 따라서, 트리글리세리드(triglycerides)뿐 아니라 콜레스테롤 양자의 혈청 수치를 감소시키는 조성물의 개발이 필요하다. 규칙적인 운동, 적당한 영양, 체중감소 프로그램은 혈액 지질의 상승과 연관된 심장질환과 같은 보통의 만성 질환 가능성을 예방하거나 줄일 수 있다(Pi-Sunyer, Am J Clin Nutr(1991) 53:1595S-1603S). 최상의 건강을 유지하고 질병의 진행을 감소 및 전환하는데 미치는 섭생의 역할은 많은 보고서의 주제이고 대중의 관심사였다. 섭생을 전환하거나 전환하지 않고 사용될 수 있는, 혼합된 지방 과다혈증의 치료에 이용하기 위해 효과적인 섭생 보충물의 개발은 많은 이로움이 될 것이다.

발명의 요약

본 발명은 인간의 혈청 콜레스테롤 및 트리글리세리드 수치 모두를 낮추기 위해 섭생 보충물 또는 치료 약제로서 사용될 수 있는 적어도 하나의 모나스쿠스 균주(Monascus strain)의 발효산물에 관한 것이다. 본 발명은 부분적으로 소정의 붉은 쌀 산물, 예를 들면 소정 균주 또는 모나스쿠스의 균주 혼합물의 발효산물이 포유동물 특히 인간에 있어서 혈청 콜레스테롤 수치 및 혈청 트리글리세리드 수치를 낮추는데 효과가 있다는 놀랄만한 발견에 기초한다. 모나콜린 K 및 메비놀린은 혈청 트리글리세리드 수치를 낮추는데 효과적이지 못하다고 알려졌기 때문에, 붉은 쌀 산물의 이로운 효과는 발효에 있어서 다른 성분과 관련될 것이다.

본 발명의 다양한 실시예에서, 붉은 쌀은 심장혈관질환, 당뇨병, 지방간 상태, 발작, 뇌혈전증, 저혈압, 고혈압 및 비만에 제한되지 않고 다양한 질환을 치료 또는 예방하기 위해, 콜레스테롤 및 트리글리세리드와 같은 지질의 순환 수치를 조절하기 위해, 천연 섭생 보충물 또는 약제로서 이용될 수 있다. 그 외에 본 발명은 붉은 쌀 발효 산물의 유효량을 인간에게 투여하는 것을 포함하는 상기 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 붉은 쌀 발효 산물의 유효량을 투여하는 것을 포함하는 인간의 심장혈관 건강을 향상 또는 유지시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 붉은 쌀 발효 산물의 유효량을 인간에게 투여하는 것을 포함하는 혈청 콜레스테롤 및 혈청 트리글리세리드 수치를 정상 수치로 감소시키는 방법을 제공한다. 붉은 쌀은 또한 심장혈관 조직의 질환과 관련된 다양한 질병이나 증후를 치료 또는 예방하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명에 따르면, 붉은 쌀은 다양한 복용형식 및 제제화로 제조될 수 있다. 또한 전통적인 발효 공정에 기초한 붉은 쌀의 제조 방법이 개시된다.

본 명세서에서 사용된 "붉은 쌀 균류" 또는 "모나스쿠스(Monascus)" 는 고등 생물을 지칭하고, 반면에 "붉은 쌀", "붉은 쌀 산물", "붉은 쌀 추출물" 및 그와 유사한 것은 적어도 하나의 모나스쿠스의 발효로부터 생기는 산물을 지칭한다. 그 외에 후자의 용어는 아래에서 설명된 것과 같이 전통적 및 향상된 붉은 쌀 산물을 포함한다. 보다 상세하게, 본 명세서에서 사용되는 "붉은 쌀 산물"은 발효산물, 예를 들면 모나스쿠스 균류의 하나 또는 혼합물의 발효물을 지칭한다. "로바스타틴-제조(lovastatin- producing)" 모나스쿠스 균주(예로 균주 0272)는 적어도 0.05, 바람직하게는 적어도 2의 로바스타틴 함량을 갖는 산물을 생산하기 위해 발효될 수 있는 것이다.

상기 붉은 쌀 산물은 하기 표에 있는 적어도 하나의 모나스쿠스 균류의 발효산물이다.

붉은 쌀은 모나스쿠스 균류의 하나 또는 혼합물의 발효산물인데, 주로 모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트(Monascus purpureus Went)로 이루어져 있고, 적은 부분에 있어서 다른 모나스쿠스 종, 예를 들면 모나스쿠스 루버 반 틱헴(Monascus ruber van Tieghem), 모나스쿠스 풀리기노서스 사토(Monascus Fuliginosus Sato), 모나스쿠스 필로서스 사토(Monascus Pilosus Sato) 및 모나스쿠스 알비두스 사토(Monascus albidus Sato)로 이루어져 있다. 또한 다음의 붉은 쌀은 모나스쿠스 균류의 균주의 발효산물일 수 있다.

균주	기탁번호
모나스쿠스 알비두스 사토	AS 3.570
	AS 3.4440
	CGMCC 제 0317번
모나스쿠스 필로서스 사토(Monascus Pilosus Sato)	AS 3.4444
	AS 3.4633
	AS 3.4646
	AS 3.4647
모나스쿠스 푸비게루스 사토 (Monascus pubigerus Sato)	AS 3.4445
모나스쿠스 루버 반 틱헴(Monascus ruber van Tieghem)	AS 3.549
	CGMCC 제 0315번
	CGMCC 제 0316번
모나스쿠스 팍시 린겔샤임 (Monascus paxii Lingelsheim)	AS 3.4453
모나스쿠스 풀리기노서스 사토(Monascus Fuliginosus Sato)	AS 3.569
	AS 3.1098
	AS 3.2091
	AS 3.2093
	AS 3.2134
	IFFI 05035
모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트(Monascus purpureus Went)	CGMCC 제 0272번

모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트 ATCC 30141, AS 3.562, AS 3.991, AS 3.4446[ATCC 16365], AS 3.4642[NRRL 2897], AS 3.4643[NRRL 96], AS 3.4633, AS 3.4645, AS 3.4651; 모나스쿠스 루버 반 틱헴 AS 3.549, IFFI 050007, IFFI 05008, IFFI 05010, IPPI 05011; 및 모나스쿠스 안카 IFFI 05038( 베이징 1992, 중국기계출판부, 미생물의 배양물 수집을 위한 중국 회의, 1992, 배양물의 중국 카날로그에서 제공된 참조번호). 본 발명의 향상된 붉은 쌀은 모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트 돌연변이 균주 M4027, 4028 및 M4184로 이루어져 있다.

본 명세서에서 사용되는 "전통적인 붉은 쌀" 은 전통적으로 붉은 쌀을 제조하는 데 사용되어져 왔던 모나스쿠스 균류의 혼합물을 사용하여 발효시킨 붉은 쌀 산물을 지칭한다. "전통적인 붉은 쌀"은 일반적으로 약0.005 중량이하의 로바스타 틴을 포함한다. 본 발명에 따라, "향상된 붉은 쌀"은 모나스쿠스 종의 하나 또는 그이상의 천연 또는 돌연변이 균주를 사용하여 발효시킴으로써 생산되고, 상기 균주는 개선된 생물학적 또는 영양학적 특성, 예를 들면 전통적인 붉은 쌀보다 높은 하이포콜레스테롤레믹 및 하이포트리글리세리데믹 활성을 갖는 발효물을 생산한다. 본 발명의 향상된 붉은 쌀은 모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트 돌연변이 균주 CGMCC 제 0272번을 포함한다. 본 발명의 목적을 달성하기 위해 여러 가지 다른 균주가 사용될 수 있다. 향상된 붉은 쌀은 본 명세서에서 쑤에치캉(Xuezhikang)으로 간혹 지칭된다.

일반적으로, 본 발명의 붉은 쌀 산물은 조금 쓰나 부드럽고 맛있는 맛을 지닌 붉은-자주빛 분말이다. 유사하게, 붉은 쌀 산물은 좋은 향기가 난다. 빛과 향기는 발효과정, 사용된 균주 및 진행단계에 따라 다양하다. 본 발명의 붉은 쌀 산물은 적어도 0.05 중량의 로바스타틴, 보다 바람직하게는 적어도 약 2.0 중량의 로바스타틴을 포함한다.

본 명세서에서 "효과적인 치료" 는 특별한 증후의 감소, 또는 특별한 실험테스트가 정상수치로 변화하는 것을 의미한다. 바람직하게, 증후는 적어도 30-70까지 감소하고, 실험테스트는 정상수치로 적어도 10변화한다. 보다 바람직하게, 증후는 70까지 감소하고, 실험테스트는 정상수치로 적어도 20변화한다. 가장 바람직하게, 치료는 증후가 90까지 감소되고 및/또는 실험 변수가 정상수치로 회복된다면 효과적이다.

"콜레스테롤 과다혈증(hypercholesterolemia)"은 혈액에서 콜레스테롤 수치 가 올라가는 상태를 의미한다.

"치료적으로 효과적인 양" 또는 "치료 양"은 질병을 치료 또는 예방는데, 또는 혈청 지질 및 지단백질의 수치를 조절하는데 충분한 특별한 약제의 양을 의미한다.

"섭생 보충물"은 포유동물, 일반적으로 인간의 하루 음식 섭취량에 첨가되는 첨가 요소를 의미한다.

본 명세서에서 정의되지 않았지만 사용되는 모든 기술적 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 이해하는 것과 동일한 의미를 가진다. 비록 본 명세서에서 기술된 것과 유사하거나 동일한 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 테스트에서 사용될 수 있으나, 적당한 방법 및 물질을 이하 설명한다. 본 명세서에서 언급된 모든 공개자료, 특허출원, 특허 및 다른 참조문헌은 참조자료로서 전체가 포함되어 있다. 일치하지 않는 경우, 정의를 포함하여 본 명세서는 조절할 것이다. 그 이외에 물질, 방법 및 실시예는 단지 본 발명을 설명하는 것이고, 본 발명을 제한되도록 하는 것은 아니다.

다음의 상세한 설명 및 특허청구범위로부터 다른 특징 및 이점이 명백하게 될 것이다.

본 발명은 적어도 하나의 모나스쿠스 종의 발효 산물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 포유동물, 특히 인간의 혈청 콜레스테롤 및 혈청 트리글리세리드의 수치를 낮추는데 유용하다. 그 외에, 상기 조성물은 혈청 콜레스테롤 및 트리글리세리드의 수치에 영향을 미치는 내부(예로 나이) 및 외부(예로 스트레스)의 요인에도 불구하고, 건강 레벨을 유지하기 위해 상기 혈청 콜레스테롤 및 트리글리세리드의 수치를 조절하는데 유용하다. 본 발명의 조성물 및 방법은 모나스쿠스 종의 발효물을 하이포콜레스테롤레믹 특성 및 예측하지 못한 혈청 트리글리세리드 수치를 낮추는 능력을 나타낸 발견에 부분적으로 기초한다. 모나콜린 K은 혈청 트리글리세리드 수치를 낮추는데 충분히 효과적이지 않기 때문에, 붉은 쌀 산물의 이로운 효과는 발효물의 다른 성분들과 관련이 있음에 틀림없다. 붉은 쌀 산물이 혈청 트리글리세리드 수치를 낮추는 능력으로 인해, 당업계는 처방 하이포콜레스테롤레믹 화합물 의 사용에 독특하고 천연의 방법을 제공받았다.

본 발명에 의하면, 전통적인 또는 향상된 붉은 쌀은 전통적인 발효 공정에 의해 또는 전통적인 공정의 수정에 의해서 얻어질 수 있다. 최초의 보고된 방법(펜실베니아주 출판부 1996, Sun 등에 의한 영역 번역물, 291-294 페이지, 티엔 쿵 카이우)에 따르면, 붉은 쌀은 붉은 와인 으깬것, 폴리고넘 풀(Polygonum grass)의 천연즙 및 백반수(alum water)를 사용하여 씻어서 요리된 점착성이 없는 쌀의 발효에 의해 제조될 수 있다. 상기 쌀은 매우 깨끗한 조건하에 대나무상자에서 7일 동안 공기중에서 발효된다. 상기 쌀은 색이 흰색에서 검정색, 검정색에서 갈색, 갈색에서 붉은색 및 그후 붉은색에서 노란색으로 변한다. 그런 다음 붉은 쌀로 수확된다. 다른 전통적인 방법에 따르면, 점착성이 없는 쌀은 완전히 덮개가 씌여진 대나무 매트에 의해 일렬로 땅속 구멍에서 발효될 수 있다. 일년 또는 그 이상, 4년까지 땅속에서 발효가 진행될 수 있다.

본 발명과 관련하여, 상기 전통적인 방법은 발효 시간을 줄이는 온도, pH, 압력 및 다른 발효 요인을 보다 정확히 조절하기 위해 현대 발효 기술과 장비를 이용함으로써 향상되어 특히 발효시간을 감소시킨다. 향상된 붉은 쌀 제조의 중요한 특징은 상기 붉은 쌀이 지방 과다혈증 및 관련 심장 혈관 질환을 예방 또는 치료할 수 있은 활성 성분을 포함한다는 것이다. 상기 제조방법은 다음과 같다.

전통적인 배양물 유체의 제조

모든 배지 제조에서 쌀 또는 다른 곡식은 탄소 공급원으로 사용된다. 상기 탄소 공급원으로 쌀(광택이 나고 낟알이 길며 점착성이 없는 쌀, 광택이 나고 낟알이 길며 점착성이 없는 쌀, 광택이 나고 점착성이 있는 쌀, 붉은 쌀 및 검정 쌀), 수수, 보리, 밀, 옥수수가 가능하다. 그 이외에 설탕 및 설탕을 포함하는 물질이 사용될 수 있다. 글리세린(glycerine) 및 글리세리드(glyceride)와 같은 유기화합물이 배지 제조에 사용될 수 있다. 광택이 나고 낟알이 굵으며 둥근-곡식의 점착성이 없는 쌀 각 100g에 배양 배지 30-80ml가 첨가된다. 상기 배양물 배지의 중요한 특징은 탄소의 공급원이 곡식, 설탕 및 유기화합물로 이루어진 군에서 선택되고, 질소의 공급원이 콩(예로 콩 분말, 압축한 콩 깻묵), 또는 땅콩 분말(예로 압축한 땅콩 깻묵), 펩톤(pepton), 쌀 추출 분말, 진한 소고기주스, 누에 번데기 분말, 또는 무기염(예로 NH₄NO₃ 등)으로 이루어진 군에서 선택되고, 3가 인의 공급원은 무기염(예로 KH₂PO₄, K₂HPO₄등)등으로 첨가될 수 있다. 또는 다른 무기염(예로 MgSO₂, FeCl₂)이 첨가될 수 있다. 본 발명의 한정이 아닌 실시예로써, 본 발명의 배지 제조 가 하기에 기재되어 있다.

배지 1 : 액체 균주

2-7글리세린(또는 엿기름이나 감자주스)

2-6설탕

0-3펩톤

0.5-3효모추출 분말

0-3진한 소고기 주스(선택)

2-4거품방지제(예로 콩기름 또는 땅콩기름)

물

배지 2 : 고체 균주

0-5감자주스

0-6설탕

0-1.5효모추출물 또는 펩톤

쌀 100g 당 30-80 ml 물

배지 3:

2-4감자주스

2-6설탕

0.5-3효모추출 분말(펩톤 또는 진한 소고기 주스)

물

대략 혼합물 40-80ml가 쌀 각 100g에 첨가되고, pH는 3-8로 유지되고, 121℃에서 증기로 살균된다.

일반적으로, pH는 3.0-5.0으로 맞춰지고, 혼합물은 증기로 살균된다(121℃). 혼합물은 40℃로 냉각되고, 쌀은 본 발명의 모나스쿠스 균주에 접종된다. 예를 들면, 모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트 균주 CGMCC 제 0272번 이 첨가되고, 9일동안 15-35℃에서 배양된다. 쌀 혼합물은 바람직하게는 15-35℃에서, 가장 바람직하게는 20-28℃에서, 4일 이상동안, 가장 바람직하게는 9일 이상동안, 붉은 쌀의 형성이 주목될 때까지 발효된다. 당업자에게 잘 알려진 다수의 발효방법중 하나가 이용될 수 있다. 예를 들면, 발효기구로써 어렌마이어 프라스크(Erlenmeyer flask), 접시, 공기가 통하는 발효침대가 사용될 수 있다. 발효공정의 끝에 고체 찌꺼기는 열(예로 고압증기)로 살균되는 반면, 발효수프는 빠져나가서 버려진다. 예를 들면, 발효산물은 69-121℃에서 살균되고 건조된다. 상기 건조된 산물은 분말로 만들어질 수 있다. 캡슐, 정제, 분말 및 현탁물 생산을 위한 표준 메쉬(mesh) 크기는 당업계에 자명하다. 예로써, 본 발명의 향상된 붉은 쌀은 대략 60-80℃의 온도에서 진공하에 80 메쉬로 가루로 만들어질 수 있고, 상기 분말 산물이 회수된다. 상기 산물은 본 발명에서 제공된 다양한 조성물 및 제제로 직접 이용될 수 있다. 예를 들면, 상기 산물은 캡슐에 채워질 수 있다. 선택적으로, 상기 80 메쉬 가루 산물은 200 메쉬로 좀 더 가루로 만들어질 수 있다. 200 메쉬 분말은 그후 표준 방법론을 사용하여 정제로 제제될 수 있다. 선택적으로, 붉은 쌀의 액체 또는 시럽 제제화물은 전통적인 방법으로 제조될 수 있다.

선택적으로, 건조되어 부숴진 붉은 쌀 분말은 더욱 처리될 수 있고, 녹말 및 한천을 제거하기 위해 알콜(예로, 알콜(75-90에탄올). 다만 이것으로 제한하는 것은 아니다)과 같은 유기용액으로 추출될 수 있다. 건조까지 증발 시킨후 상기 추출물은 본 발명에 의해 제공된 다양한 조성물 및 제제화물로 이용될 수 있다. 또한 상기 추출된 산물은 진공하에서 더욱 농축되고, 건조될 때까지 증발(60-80℃, 0.06-0.08 MPa)될 수 있다. 상기 방법은 예외적으로 매우 낮은 비용으로 유용한 보충물을 제공한다.

본 발명에 따라, "향상된 붉은 쌀"은 모나스쿠스 종의 하나 또는 그이상의 천연 또는 돌연변이 균주를 사용하여 발효시킴으로써 생산되고, 상기 균주는 향상된 생물학적 또는 영양학적 특성, 예를 들면 전통적인 붉은 쌀보다 높은 하이포콜레스테롤레믹 및 하이포트리글리세리데믹 활성을 갖는 발효물을 생산한다. 본 발명의 향상된 붉은 쌀은 모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트 돌연변이 균주 M4027, 4028 및 M4184를 포함한다. 본 발명의 목적을 달성하기 위해 상기 표에 기록된 것처럼 여러 가지 다른 균주가 사용될 수 있다( 중국 미생물 모집회,중국 미생물 균주 색인, 1999).

붉은 쌀의 로바스타틴(lovastatin)은 주위온도에서 75에탄올 10ml를 사용하여 추출될 수 있다. 상기 추출물(2ml)은 30분 동안 75에탄올 하에서 1ml 0.06M 수 산화나트륨으로 처리되고, 그후 1ml 0.06N H₃PO₄(75에탄올 존재 하에)로 처리된다. 그리고 상기 혼합물은 존재하는 로바스타틴의 양을 정량화하기 위해 C18 HPLC 칼럼(150×4.60 mm)에 적용되고 0.02 N H₃PO₄(70MeOH 존재 하에)로 전개된다.

붉은 쌀은 병을 예방하고(건강유지), 심장혈관 질환, 당뇨병, 발작, 고혈압 및 비만을 포함한 다양한 질병을 치료 또는 예방(건강)하고, 콜레스테롤 및 트리글리세리드와 같은 지질 및 지단백질의 순환 수치를 조절하기 위해 천연 섭생 보충물 또는 의약품으로 사용될 수 있다. 또는 붉은 쌀은 또한 상기 언급된 질병 및 나이, 다른 내부 및 외부요인으로 인한 심장혈관의 건강 부족과 관련된 여러 가지 증후를 치료하거나 예방하기 위해 사용될 수 있다.

본 명세서에서 사용된 것처럼 심장혈관질환의 예는 심근경색증(myocardial infarction), 관상동맥 심장 질환, 아테로마성 동맥경화증, 동맥경화를 포함하다. 다만 상기로 제한되는 것은 아니다. 본 발명은 발작, 발작으로 인한 기억상실 및 뇌혈전증과 같은 혈관질환의 치료 또는 예방을 포함한다.

본 발명은 또한 지방 과다혈전, 심장혈관질환, 혈관질환, 고혈압, 저혈압, 당뇨병, 지방간 상태, 비만 또는 그들의 합병을 치료하거나 예방하기 위해 인간에게 유용한, 붉은 쌀 산물의 유효한 양으로, 예를 들면 하루에 2-4 그램을 포함하는 조성물을 포함한다.

본 발명은 그 이외에 건강한 정상 수치내의 지방 또는 지단백질 수치를 유지하기 위해 치료가 요구되는 사람에게 혈청 지방 및 지단백질의 수치를 조절하기 에 유용한, 붉은 쌀 산물의 유효량을 포함하는 조성물을 포함한다. 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 하이퍼트리글리세리데미아의 치료 또는 예방에 유용하게 적용될 수 있다. 더 바람직한 구체예에서, 상기 조성물은 인간의 혈청 콜레스테롤 및 혈청 트리글리세리드 수치를 감소시키는데 유용하다.

본 발명은 그 이외에 다음의 증후중의 어느 하나 (호흡곤란; 쇠약한 호흡; 무기력; 현기증; 만성두통; 가슴통증 및 압박; 두통; 식용부진; 팔다리의 종기; 압박 및 팽창)의 치료에 유용한, 향상된 붉은 쌀 산물의 유효량을 포함하는 조성물을 포함한다.

향상된 붉은 쌀의 기능.

본 발명의 향상된 붉은 쌀 및 그의 제조는 스타디노이드 화합물(statinoid compounds), 예를 들면 하이드록시-산 로바스타틴(hydroxy-acid Lovastatin) 및 락톤 로바스타틴(lactone Lovastatin)을 포함한다.

이론에 의하지 않고, 적당한 발효조건하에서 배양될 때 상술된 모나스쿠스 균주는 증가된 스타티노이드 화합물의 함량을 갖는다. 스타티노이드 화합물의 증가는 동시에 고밀도 지단백질 콜레스테롤을 증가시키는 반면, 혈청 콜레스테롤 및 혈청 트리글리데리드를 감소시키다.

본 발명의 붉은 쌀은 아테로마성 동맥경화증, 관상동맥 심장질환, 심근경색증, 당뇨병, 고혈압 및 뇌색전증과 같은 다른 관련 심장혈관 질환 및 지방 과다혈전을 치료하는데 사용될 수 있다.

치료방법

본 발명은 다양한 질병, 질환 및 증후로 고생하는 사람을 치료하기 위한 방법을 제공한다. 사람의 질병치료 이외에, 본 방법 발명은 또한 상기 질병, 질환 또는 증후에 민감한 사람의 예방치료도 제공할 수 있다.

본 발명은 붉은 쌀 산물의 유효량을 사람에게 투여하는 것을 포함하는, 지방 과다혈전, 심장혈관질환, 혈관질환, 고혈압(유전 및 비유전), 저혈압, 편도선, 발작, 당뇨병, 지방간 상태, 비만 또는 그들의 합병의 치료방법, 또는 상기 산물을 포함하는 조성물을 포함한다.

또한 본 발명은 붉은 쌀 산물의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 지방 과다 혈전, 심장혈관질환, 혈관질환, 고혈압, 저혈압, 편도서, 발작, 당뇨병, 지방간 침전과 같은 지방간 상태, 비만 또는 그들의 합병을 예방하기 위한 방법을 포함한다. 본 발명의 방법은 사람에 있어서 당뇨병과 같은 관련질병 및 하이퍼트리글리세리데미아를 치료하거나 예방하기 위해 바람직하게사용된다.

본 명세서에서 사용된 것처럼, 심장혈관질환의 예는 심근경색증, 관상동맥 심장 질환, 아테로마성 동맥경화증, 동맥경화 및 발작, 발작으로 인한 기억상실 및 뇌혈전증을 포함하여 혈관 질환 또는 상태를 포함한다.

본 발명은 또한 붉은 쌀 산물의 유효량 또는 상기 산물을 포함하는 조성물을 사람에게 투여하는 단계를 포함하는, 지질 또는 지단백질을 낮추기 위한 치료가 요구되는 사람에게 건강한 정상 수치 내로 혈청 지질 및 지단백질의 조절을 위한 방법을 제공한다.

바람직한 구체예에서, 본 발명의 방법은 노인 또는 폐경 여성의 치료에 특히 유용하다.

또한 본 발명은 붉은 쌀 산물의 유효량 또는 상기 산물을 포함하는 조성물을 사람에게 투여하는 단계를 포함하는, 호흡곤란, 쇠약한 호흡, 무기력, 현기증, 만성두통, 식용부진, 팔다리의 종기, 압박 및 팽창 및 복부팽창 또는 그들의 합병으로 고생하는 사람을 치료하는 방법을 제공한다.

질병의 치료 또는 예방의 경우 및 혈청 지방과 지단백질 수치조절의 경우에 전통적인 붉은 쌀 또는 향상된 붉은 쌀의 예방 또는 치료 투여량은 치료되는 상태이 심각성 및 조건에 따라 다양하다. 투여량 및 투여횟수는 나이, 몸무게 및 환자의 반응에 따라 다르다. 일반적으로, 본 명세서에서 기술된 조건하에서 붉은 쌀의 총 하루 투여량의 범위는 한번에 또는 분할하여 구강으로 약 0.1g 내지 5g 이다. 예를 들어 바람직한 하루 구강 투여량이 비록 대부분 약 1.2g 내지 2.5g이어야 함에도 불구하고, 약0.3g 내지 약 5g 이어야 한다. 예를 들면, 각각 0.6g의 붉은 쌀을 포함하는 두 개의 캡슐은 바람직한 양을 얻기 위해 하루에 두 번 구강으로 투여된다. 치료과정은 적어도 4주 걸린다. 당업자에게 명백한 경우에는 상기 범위를 벗어나는 양을 사용할 수 있다. 그 외에 영약학자, 영양사, 임상의학자 또는 외과의사는 각각의 환자의 반응에 따라 치료를 잠시 멈추고, 조정하고, 중단하는 방법과 시기를 알 것이다.

본 발명은 전통적인 붉은 쌀의 새로운 이용, 새로운 붉은 쌀 산물 및 상기 산물을 사용하는 새로운 방법을 포함한다는 것이 주지되어야 한다.

섭생 보충물 이용

상기와 같이 본 발명은 섭생 보충물로서 전통적이고 새로운 또는 향상된 붉은 쌀 산물을 사용하는 방법 및 조성물을 포함한다. 상기와 같이, 붉은 쌀 산물은 비록 나이와 같은 내부요인 및 스트레스, 운동부족, 영양부족과 같은 외부요인에도 불구하고, 개개인에게 혈청 콜레스테롤 및 트리글리세리드의 정상 또는 건강한 수치를 유지하기 위한 수단을 제공한다. 섭생 보충물은 또한 상기 질병의 가능성 또는 경험을 줄이거나 예방하기 위한 수단을 제공한다. 결국, 섭생 보충물은 몸무게 증가나 비만을 방지하기 위해 사용될 수 있다. 결국, 붉은 쌀 산물을 포함하는 섭생 보충물은 특별히 노인 및 폐경 여성에게 유용하다. 섭생 보충물은 적어도 4주동안 매일 투여되어야 하고, 일일 단위로 영구적으로 사용될 수 있다. 하루 투여량은 약 0.1g 내지 약 5.0g이고, 바람직하게는 약 1g 내지 4g; 가장 바람직하게는 하루에 약 1.2g 내지 약 2.4g이다.

제제화

본 발명의 약학적 및 섭생 조성물은 활성 성분으로서 붉은 쌀 산물, 그의 추출물을 포함하고, 또한 약학적으로 허용할 수 있는 담체 또는 운반체 및 선택적으로 다른 성분을 포함한다.

본 발명의 섭생 또는 약학적 조성물에 포함될 수 있는 다른 성분들은 비타민, 아미노산, 금속 염 및 향신료를 포함할 수 있다. 다만 그에 한정되는 것은 아니다. 구강으로 투여하기 위해, 붉은 쌀을 포함하는 조성물은 직접 음식물에 첨가될 수 있어서 치료에 효과적인 양의 붉은 쌀이 보통 식사중에 섭취된다. 천연 또는 가공 음식에 붉은 쌀을 첨가하기 위해 당업자에게 자명한 임의의 방법이 사용될 수 있다.

구강 투여에 적당한 본 발명의 조성물은 캡슐, 카세트, 정제와 같은 개별 단위로 존재할 수 있고, 각각은 분말 또는 환약, 용액 또는 수용액에 현탁, 비수용액, 기름-물 유탁액, 물-기름 액체 유탁액으로써, 미리 결정된 양의 붉은 쌀 산물을 포함한다. 일반적으로, 상기 조성물은 정형적으로 활성 원료에 액체 운반체 또는 미세하게 분리된 고체 운반체 또는 둘다를 혼합함으로써 제조된다. 그런 다음 필요하다면 상기 산물을 바람직한 모양으로 만든다.

본 발명의 조성물은 그 외에 접착제(예를 들면 젤라틴화된 황색 풀, 폴리비닐피롤리돈(polyvinylpyrrolidone) 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로스(hydroxypropyl methylcellulose)) ; 바인더 또는 필터(예를 들면 락토스, 펜토스, 마이크로크리스탈린 셀룰로스(microcrystalline cellulose) 또는 칼슘 수소 인산염(calcium hydrogen phosphate) ; 윤활제(예를 들면 마그네슘 스테아르산염, 탈크(talc) 또는 실리카(silica)) ; 정제 분해 물질(예를 들면 감자풀 또는 나트륨 풀 글리콜레이트(sodium starch glycolate)) ; 또는 젖도록 하는 약제(예를 들면 나트륨 로릴 황산염(sodium lauryl sulphate))를 포함한다. 상기 정제 또는 캡슐은 당업자에게 자명한 방법으로 코팅될 수 있다.

구강 투여를 위한 액체 제조는 예로 용액, 시럽 또는 현탁의 형태를 취할 수 있거나, 또는 사용 전에 물 또는 적당한 운반체로 구성되기 위해 건조된 산물로서 공급될 수 있다. 상기의 액체 제조는 현탁제(예로 소비톨 시럽(sorbitol syrup), 셀룰로스 유도체 또는 수소로 처리된 식용 지방(hydrogenated edible fats)), 유탁 제(예로 레시틴(lecithin) 또는 아카시아(acacia)), 비수용 운반체(아몬드 오일, 오일 에스테르, 에틸 알콜 또는 분별 증류된 채소 오일(fractionated vegetable oils)), 및 방부제(예로 메틸 또는 프로필-피-히드록시벤조에이트(methyl or propyl-p-hydroxybenzoates) 또는 소빅 산(sorbic acid))과 같은 약학적으로 허용할 수 있는 첨가제로 전통적인 방법에 의해 제조될 수 있다. 상기 제조는 완충 염, 향료, 색료 및 적당한 감미료를 포함하는 음식으로 만들어 질 수 있다.

임의의 복용 형태는 환자에게 효과적인 복용량의 붉은 쌀 산물을 제공함으로써 사용될 수 있다. 복용 형태는 정제, 캡슐, 분산, 현탁, 용액, 캡슐 및 그와 유사한 것을 포함한다. 투여가 용이하 때문에, 정제 및 캡슐은 가장 이로운 구강 복용 단위 형태를 대표한다. 이때 상술된것과 같은 고형 약학적 운반체가 사용된다. 상기와 같은 일반적인 복용 형태 이외에, 본 발명의 화합물은 조절완화 수단으로 투여될 수 있다. 그러나 가장 바람직한 구강용 고형 제조는 캡슐이다.

예를 들면, 정제는 하나 이상의 부속 원료로 선택적으로 압축이나 몰딩을 하여 제조될 수 있다. 압축된 정제는 적당한 기계에서 바인더, 윤활제, 불활성 희석제, 표면 활성 또는 확산제와 선택적으로 혼합된 분말 또는 미립자와 같은 자유 흐름 형태로 붉은 쌀을 압축함으로써 얻어질 수 있다. 가장 바람직하게는 상기 조성물은 분말 형태로 0.3g의 붉은 쌀을 포함하는 캡슐이다.

본 발명은 붉은 쌀의 효율성 및 안정성을 시험하기 위해 수행된 인간 임상 시험을 구체적으로 설명한 다음의 실시예에 의해 더욱더 명확히된다. 본 발명의 범위 내에서 조성물 및 방법에 많은 수정이 가해질 수 있다는 것은 당업자에게 자명 하다.

본 발명은 다음의 실시예를 설명할 것이고, 하기 실시예는 청구범위를 한정하는 것은 아니고, 본 발명의 설명을 제공하고자 한다.

실시예1 - 붉은 쌀 배양 제조

(1) 2-4글루코스, 3-5글리세린, 0-3진한 소고기 주스, 0.8-1.6펩톤, 0-3효모 추출 분말, 0.1KH₂PO₄ 및 0.05MgSO_4ㆍ7H₂O 및 물을 포함한 액체 균주 배양물 유체를 제조하였다. 하나는 2글루코스, 3글리세린, 1.5진한 소고기 주스, 0.8펩톤, 3효모 추출 분말, 0.1KH₂PO₄ 및 0.05MgSO_4ㆍ7H₂O 및 물을 포함하고, 두 번째는 4맥아 주스 또는 감자 주스, 8설탕, 1.5효모 추출 분말, 3진한 소고기 주스 및 물을 포함하는 두 개의 배지를 제조하였다. pH는 아세트산을 이용하여 3.5로 맞췄다. 배양물 유체 각 50ml당 100g 의 광택이 나고 낟알이 굵으며 둥근-곡식의 점착성이 없는 쌀을 첨가하였고, 상기 배지를 121℃에서 살균하였다. 상기 혼합물을 40℃이하까지 냉각하였고, 유리 튜브나 접시에 모나스쿠스 퍼퍼레우스 웬트(CGMCC 제 0272번)로 접종하였다. 그리고 30-34℃에서 24-36 시간동안 배양하였다. 발효를 25℃에서 9일 동안 진행하였다. 발효기간이 완료되면, 상기 혼합물을 고온(100-121℃)에서 살균하였고, 80℃에서 진공하에 건조하였고, 60-100메쉬(mesh)로 가루로 만들었다. 그 후 상기 분말을 캡슐에 넣었다. 수득율은 대략 65이다.

(2) 선택적으로, 4맥아 주스 또는 감자 주스, 8글루코스, 3진한 소고기 주스, 3펩톤 및 물(pH 3)을 포함하는 배양물 유체를 사용하였다. 다음 발효에서, 결 과산물은 75-95에탄올을 사용하여 추출하였고, 붉은 쌀을 건조하고 미처리 쌀과 완전히 혼합하였다. 콩 분말(10g) 및 배양물 유체(50ml)를 각각 100g 혼합물에 첨가하였고, 상기 조성물을 살균하였다. 상기 혼합물을 30-40℃로 냉각한 후 10-20ml 액체 모나스쿠스 균주(CGMCC 제 0272번)로 접종하였고, 30-34℃에서 3-4일 동안 및 23-25℃에서 15일 이상 동안 발효하였다. 상기 혼합물을 100-121℃에서 살균하였고, 진공하에 건조하였다. 상기 붉은 쌀 산물을 가루로 만들었고, 정제를 생산하였다.

(3) 4맥아 주스, 6맥아 설탕, 1효모 추출 분말, 6펩톤 및 물(pH 3)을 사용하는 다른 배양을 제조하였다. 콩 분말(15g) 및 배양물 유체(50ml)를 각각 100g 의 광택이 나고 낟알이 굵으며 둥근-곡식의 점착성이 없는 쌀에 첨가하였다. 상기 혼합물을 121℃에서 살균한 후에 모나스쿠스 루버 AS 3.549(20ml)로 접종하였다. 25℃에서 9일 이상동안 발효시켰다. 살균후에 80℃에서 상기 혼합물을 건조시켰다.

붉은 쌀을 알콜(75) 추출을 사용하여 두 번 응축시켰다. 진공하에서 증발시킨 후, 상기 응축된 물질을 얻었고 알콜을 회수하였다. 상기 응축된 결과물질은 대략 붉은 쌀 1g 당 25mg 의 로바스타틴(lovastatin)을 포함하였고, 캡슐 또는 정제 생산에 원료물질로 사용되었다.

(4) 4엿기름 주스, 대략 8설탕, 2효모 추출 분말, 5진한 소고기 주스 및 물(pH 3)을 포함하는 다른 배양 유체를 제조하였다. 각 100g의 쌀에 배양물 유체(50ml)를 첨가하였고, 121℃에서 상기혼합물을 증기로 살균하였다. 40℃이하로 냉각한 후에, 상기 혼합물을 모나스쿠스 알비더스(CGMCC 제 0317번)로 접종하였 고, 그후 25℃에서 12시간 이상동안 발효시켰다. 상기 혼합물을 살균한 후 건조시켰다. 이 붉은 쌀 제조물을 200메쉬로 가루로 만들었고, 알약 제조를 위해 알콜을 이용하여 알갱이로 만들었다.

(5) 3감자 주스, 대략 6설탕, 1.5효모 추출 분말, 4펩톤 및 물(pH 3)을 이용하는 배양물 유체를 또한 제조하였다. 각 100g의 쌀에 콩 분말(10g) 및 배양 유체(80ml)를 첨가하였고, 121℃에서 상기혼합물을 증기로 살균하였다. 40℃이하로 냉각한 후에, 상기 혼합물을 모나스쿠스 필로서스 사토(AS 3.4444)로 접종하였고, 그후 30-34℃에서 3-4일 동안 배양하였고, 그후 100-121℃에서 10일 이상 동안 배양한 후 건조시켰다.

이 붉은 쌀 제조물을 알콜(75) 추출을 사용하여 응축시켰다. 적은 양의 분해가능한 풀을 알약 제조에 첨가하였다.

(6) 3감자 주스, 5설탕, 6진한 소고기 주스 및 물(pH 3)을 이용하는 배양물 유체를 또한 제조하였다. 각 100g의 쌀에 대한 배양물 유체(80ml)에 10-20땅콩 분말를 첨가하였고, 121℃에서 상기혼합물을 증기로 살균하였다. 40℃이하로 냉각한 후에, 상기 혼합물을 모나스쿠스 루버 반 틱하임(CGMCC 제 0315번)으로 접종하였고, 그후 30-34℃에서 3일 동안 배양하였다. 상기 혼합물을 100-121℃에서 증기로 살균한 후 건조시켰다.

(7) 3옥수수 주스 또는 3감자 주tm, 6설탕, 1.5효모 추출 분말, 4.5펩톤 및 물(pH 3)을 포함하는 배지를 또한 제조하였다. 각 100g의 수수에 5-20의 콩 깻묵 분말 및 80ml의 배양물 유체를 첨가하였다. 121℃에서 상기혼합물을 증기로 살균하 였고, 40℃이하로 냉각한 후에, 모나스쿠스 필로서스(AS 3.4633)로 접종하였고, 그후 25℃에서 18일 이상 동안 배양하였다. 상기 혼합물을 121℃에서 살균하고 60-80℃에서 진공하에 건조시켰다.

(8) 4감자 주스, 7설탕, 8펩톤 및 물(pH 3)을 포함하는 배지를 제조하였다. 각 100g의 쌀에 60ml의 배양 유체를 첨가하였고, 121℃에서 상기 혼합물을 증기로 살균하였다. 40℃이하로 냉각한 후에, 상기 혼합물을 모나스쿠스 퍼비게구스 사토(AS 3.4445)로 주입하였고, 그후 30-34℃에서 3일 이상 동안 배양하였다. 온도를 25℃까지 낮췄고, 9일 이상 동안 배양시켰다. 상기 혼합물을 121℃에서 살균하였고, 80℃에서 건조시켰다.

(9) 5콩 우유, 5글루코스, 2효모 추출 분말, 5콩 펩톤 및 물(pH 3)을 포함하는 배지를 제조하였다. 각 100g의 쌀에 80ml의 배양 유체를 첨가하였고, 121℃에서 상기혼합물을 증기로 살균하였고, 40℃이하로 냉각한 후에, 모나스쿠스 필로서스 사토(AS 3.4646)로 주입하였고, 그후 30-34℃에서 3일 동안 배양하였다. 온도를 23-25℃까지 낮췄고, 9일 이상동안 배양하였다. 상기 혼합물을 121℃에서 증기로 살균하였고, 80℃에서 건조시켰다.

(10) 4감자 주스, 4설탕, 3효모 추출 분말 및 물(pH 3)을 포함하는 배지를 제조하였다. 각 100g의 쌀에 5g의 누에번데기 분말 및 60ml의 배양 유체를 첨가하였고, 121℃에서 상기혼합물을 증기로 살균하였고, 40℃이하로 냉각한 후에, 모나스쿠스 풀리기노서스 사토(AS 3.569)로 접종하였고, 그후 30-34℃에서 3일 동안 배양하였다. 온도를 23-25℃까지 낮췄고, 9일 이상동안 배양하였다. 상기 혼합물을 121℃에서 살균하였고, 60-80℃에서 진공하에 건조시켰다.

(11) 3엿기름 주스, 5설탕, 6진한 소고기 주스 및 물(pH 3)을 포함하는 배지를 제조하였다. 각 100g의 쌀에 80ml의 배양 유체를 첨가하였고, 121℃에서 상기혼합물을 증기로 살균하였다. 40℃이하로 냉각한 후에, 모나스쿠스 풀리기노서스 사토(AS 3.1098)로 접종하였고, 그후 30-34℃에서 3일 동안 배양하였다. 온도를 23-25℃까지 낮췄고, 9일 이상동안 계속 배양하였다. 상기 혼합물을 121℃에서 증기로 살균하였고, 80℃에서 건조시켰다.

(12) 대규모의 발효를 위해서 다음의 과정을 사용하였다.

① 쌀을 적심 : 쌀(500kg)을 바구니의 여러 층에 놓았다. 물에서 쓰레기를 청소하였고, 물속에서 16-24시간 동안 쌀을 담가두었다. 쌀을 물로부터 건져 말렸다(물의 함유량은 대략 22-24이다).

② 쌀을 찜 : 건조된 쌀을 찜통에 넣고 50-70분 동안 쪘다. 찐 쌀을 대나무 매트 또는 바구니에 펼쳐놓고 흩어놓고, 40℃이하로 냉각시켰다. 상기 쌀을 대략 20kg의 고체 모나스쿠스 균주 및 2.5-3kg의 아세트산으로 접종시킨 후 저었다.

③ 발효 : 처음 3일 동안, 상기 쌀을 하루에 여러 번 뒤집었다. 온도를 30℃ 와 34℃사이로 조절하였다. 3일 후에, 온도를 23-25℃로 낮췄다. 상기 발효 혼합물의 습도에 따라 알맞은 양의 물(아세트산을 이용하여 pH를 3.5에 맞춤)을 첨가하는 동안, 상기 쌀을 매일 여러 번 뒤집었다. 상기 혼합물을 15일 이상동안 발효시켰다.

④ 보존 : 발효과정 후에, 상기 혼합물을 살균했고, 건조시키고 보존하였다.

대규모의 발효 방법은 다른 성분을 개개의 양으로 첨가함으로써 상기 모든 배지 및 제조 공정을 이용하여 사용되었다. 발효공정에서 통풍이 사용될 수 있으나 회수 공기는 살균되어야 한다는 것을 알아야 한다.

실시예 - 약리학 및 독물학

본 발명의 붉은 쌀의 약리학적 및 독물학적 연구를 동물 모델로 실험하였다. 내생적인 지방과다혈증 토끼의 혈청 전체 콜레스테롤(TC)을 급격하게 감소시키고, 외인적인 지방과다혈증 토끼의 전체 트리글리세리드(TG) 및 TC를 상당히 감소시키고, 지방 과다혈증 토끼안에 동맥 경화 반점 및 지방간의 형성을 억제하고, 지방과다혈증 메추라기의 혈청 TC 및 TG를 감소시키는 것이 붉은 쌀에서 보여졌다.

정확한 독성 연구에서, LD₅₀값은 결정될 수 없다. 쥐에 붉은 쌀의 최대 내성량은 16g/kg이상인데, 그것은 임상시험에서 사용되는 양의 533배이다. 또한, 다른 실험에서, 4개월 동안 붉은 쌀을 먹여 쥐를 길렀다; 상기 약으로 인해 어떤 쥐도 죽지 않았고, 독성 증후를 보이지 않았다. 혈액 연구 지수, 주요한 내장 지수, 혈액 생물학 지수, 일상적인 소변분석 및 병리학 조사는 실험 그룹과 대조와의 차이를 보여주지 않았다.

실시예 - 인간 임상 연구Ⅰ

다음의 두 실시예는 중국에서 수행된 두 가지 인간 임상 시험의 방법 및 결과를 포함한다. 상기 시험은 인간의 순환 혈청 지방 수치 및 지단백질 수치를 조절하는데, 전통적인 중국 의약에 따라 증후를 해결하는데, 붉은 쌀 산물의 안정성을 확립하는데 있어서, 붉은 쌀 산물의 효율성을 결정하는 것이 목적이다.

첫 번째 임의의 인간 임상 시험에서, 전통적인 중국 의약에서 기능질환 및 비장 질환라고 진단 받았던 446명의 지방과다혈증 환자를 두 가지 치료 그룹으로 나누었다.

첫 번째 그룹(324명)은 0.3g의 붉은 쌀 산물을 포함한 쑤에치캉 캡슐을 받았다. 두 번째 그룹(122명)은 대조그룹으로서 전통적인 중국 약초 의약에 기초한 지방-조절 약품(기노스테마 펜타필룸 : gynostemma pentaphyllum)을 포함하는 지아오굴란(Jiaogulan) 정제를 받았다.

원발성 지방과다혈증을 가진 모든 환자들은 시험이 시작되기 2-4주 전에 혈청 지방 조절기 사용을 멈췄고, 섭생 지시를 받았다. 혈청 샘풀을 취해서 본 시험의 적격성을 결정하기 위해 실험 테스트를 수행했다. 다음에 해당되는 환자만을 시험하였다 : 전체 혈청 콜레스테롤(TC)>230mg/dl(5.95mmol/L) 및 트리글리세리드(TG)>200mg/dl(>2.26mmol/L/L). 고밀도 지단백질 콜레스테롤(HDL-C)은 또한 참조로써 고려되었다 ; 남성<40mg/dl(1.04mmol/L), 여성<45mg/dl(1.16mmol/L). 모든 환자들은 중국 전통 의약에 의해 가래가 많이 나오고, 비장의 기능이 약한 것으로 진단되었다. 또한 상기 환자들은 팔다리 허약, 허약한 호흡, 가슴통증 및 압박, 식욕부진, 위의 팽창 및 종기, 혀의 엷거나 자주빛 점, 혀에 두껍고-하얗거나 두껍고-끈적한 백태, 긴장-불안정 또는 멈춤-약한 맥박 등의 증후를 나타냈다.

다음의 질환 또는 질병을 가진 환자들은 시험에서 배제되었다 : 심근경색증, 뇌혈관 질환, 반년 이내에 심각한 상처 또는 외상, 신장염 증후군, 갑상선 기능 부전, 급성 및/또는 만성적인 간장 담즙 질환, 당뇨병, 통풍병, 일반적인 알레르기 반응, 정신병.

시험한 전체 환자는 446명이었다. 붉은 쌀로 치료한 그룹에서, 남자환자는 188명, 여자환자는 126명이었다. 남성 대 여성의 비율은 1.38 : 1이었고, 평균나이는 56.0 ±9살이었다. 대조그룹에는 남성 73명, 여성 45명이었다. 남성 대 여성의 비율은 1.49 : 1이었고, 평균나이는 56.4 ±9.1살이었다. 두 그룹사이에, 나이, 성별 및 질병의 진행, 혈청지방 및 지단백질 수치를 포함하여 기본적인 변수는 차이가(P>0.05) 없었다.

붉은 쌀 치료를 받은 그룹에 8주 동안 하루에 두 번 구강으로 2개의 쑤에치캉(Xuezhikang) 캡슐을 투여했다. 대조 그룹에는 8주 동안 하루에 두 번 3개의 지아오구란(Jiaogulan) 정제를 투여했다. 모든 환자들은 이전과 같은 생활과 습관을 유지했다.

4주 및 8주에 다음의 테스트를 수행했다 : 몸무게, 혈압 및 심장 리듬을 측정했다. 그 외에 심전도 및 일상적인 신체검사를 수행했다. 실험 테스트에 의해 다음의 변수를 모니터했다 : 혈액 요소 질소(BLTN); 크레아티닌(creatinine); 혈청 글구타믹 피루빅 트랜사미나제(serum glutamic pyruvic transaminase, SGPT, ALT); 혈청 글루코스(serum glucose); 및 크레아티닌 키나제(creatinine kinase, CK).

혈청 지방 및 지단백질 수치를 결정하기 위해, 테스트전 마지막 식사시 지방 성분이 있는 음식 또는 알콜 음료를 먹지 않은 환자들로부터 단식(12시간) 정맥 샘 플을 취했다. 상기 환자로부터 얻은 혈청을 즉시 분리하였고, 분석을 위해 ―20℃로 저장했다. TC, TG 및 HDL-C를 분석하였고, 공식(LDL-C = TC-HDL-C-(TG/2.2))에 따라 LDL-C값을 계산했다.

다음과 같은 중국 복지부에 의한 "임상시험조작 : 새로운 중국 약물학을 사용한 지방과다혈증 치료"에서 정해진 기준에 따라 치료의 효율을 평가했다

1. 치료 : 모든 증후가 제거되었거나, 90이상 까지 전체 증후가 감소하거나 없어졌다. 모든 실험 테스트 변수는 정상으로 돌아갔다.

2. 효과 : 증후가 완연히 완화됐다. 예를 들면, 증후가 70-89까지 감소되었다. 혈청 지방 및 지단백질은 정상으로 오지 않았으나, 다음 중의 하나로 향상되었다 :

1) TC 감소≥20;

2) TG 감소≥40;

3) (TC-HDL-C)/HDL-C감소 ≥20;

4) HDL-C 증가> 10 mg/dl.

3. 향상 : 증후가 완화됐다. 예로 증후가 30-69까지 감소하였다. 혈청 지방 및 지단백질 수치는 정상으로 오지 않았으나, 다음중의 하나로 향상되었다 :

1) 10%로 TC 감소;

2) TG 감소 ≥20, 그러나 <40;

3) (TC-HDL-C)/HDL-C 감소 ≥10, 그러나 <20;

4) HDL-C 증가 > 4 mg/dl(0.14mmol/L 그러나 <10mg/dl).

4. 무효과 : 증후는 30이하로 감소하였다. 그리고, 실험 테스트 변수는 효과 기준에 미치지 못했다.

모든 자료는 통계 분석에 따른다(학생의 티 테스트(Stucent's t test), 키스콰 테스트(Chisquare test), 조직층의 자료에 대한 리딧 분석(Ridit assay) 및 퍼센트 분석에 대한 U 차트가 적절히 사용되었다).

	명수	치료		효과		향상		무효과		전체효과		향상
		명		명		명		명				명
치료된 그룹	324	169	52.2	89	27.5	44	13.5	22	6.8	258	79.7	302	93.2
대조 그룹	122	13	10.7	25	20.5	24	19.7	60	49.2	38	31.1	62	50.8

-효과 비교-

리딧 분석 : u = 10.04, p<0.001

수	그룹	명 수	수단±S 기본mg/dl	4주후 차이 mg/dl 차이	변화	8주후 차이 mg/dl 차이	변화
TC	치료 대조	251 94	273.5±31.3 268.2±25.4	―47.4 ―13.2	―17.3 ―4.9	―62.8 ―18.9	―23 ―7
TG	치료 대조	183 72	296.0±75.5 289±71.7	―66.3 ―27.5	―22.4** ―9.5*	―108 ―42.3	―35.5 ―14.6
HDL-C	치료 대조	121 55	35.9±4.4 35.1±4.0	4.2 1.8	11.8** 5*	7 3	19.6 8.6
LDL-C	치료 대조	324 122	162.2±52.4 157.3±49.2	―36.5 ―9	―22.5 ―5.7	―46.3 ―12.6	―28.5 ―8
TC-HDL-C/HDL-C	치료 대조	324 122	4.69±1.44 4.79±1.71	1.3 0.39	―22.7 ―8.1	1.6 ―0.52	―34.2 ―10.9

- 치료후 혈청 지방 및 지단백질 수치의 비교-

(+)는 증가를 의미하고, (―)는 감소를 의미한다.

*:p,0.01, **:p<0.001 vs 기본.

+:p<0.05; ++:p<0.01; +++:p<0.001 vs 대조.

표 1은 전체적인 효과의 비교를 나타낸다. 붉은 쌀은 받은 그룹(치료받은 그룹)의 성적은 대조 그룹보다 훨씬 높았다(X²=9.7, P<0.001).

전통적인 중국 의약에 의해 진단된 증후가 없어졌다고 보고된 치료받은 그룹의 환자 비율은 대조 그룹보다 훨씬 높았다(p<0.05-0.001). 상기 증후는 다음과 같았다: 혀의 상태(혀에 엷거나 자주빛 반점; 두껍고-끈적한 백태); 맥박(긴장-불안정 또는 멈춤-약함); 가슴의 압박느낌; 식욕부진; 복부팽창 및 종기.

혈청 지방 및 지단백질 수치와 관련하여, 치료된 그룹에서의 전체 혈청 콜레스테롤 및 전체 트리글리세리드 수치의 치료 또는 감소에 대한 효과성적이 대조 그룹에서 보다 더 컸다. 치료된 그룹에서의 아테로마성 동맥경화증 지수감소 성적 및 HDL-C, 수치의 정상화 또는 증가 성적은 대조 그룹보다 훨씬 좋았다(P<0.001).

표 2는 쑤에치캉-치료 및 대조 그룹 모두 TC, TG, (TC-HDL-C)/HDL-C, HDL-C 혈청 수치가 두드러지게 바람직한 변화를 보였다는 것을 나타낸다. 쑤에치캉의 효과는 지아오구란의 효과보다 낫다는 것을 알 수 있다.

혈청에서 TC 및 TG의 기준이 높을수록 쑤에치캉을 사용한 후 TC 및 TG의 감소가 더 효율적이라는 것을 알 수 있었다. HDL-C수치에 있어서, 더 낮은 시작 기준을 갖았던 환자에게서 치료 후에 더 큰 증가가 발견되었다.

	TC(mg/g)	TG(mg/g)	HDL-C(mg/g)
변수	<230 230-300 >300	<230 230-300 >300	>45 35-45 <35
명 수	73 206 45	141 112 71	161 114 49
평균기본 (기본)	187.8 261.8 327.1	134.3 247.6 327.3	56.4 40.1 5.4
차이(4주) 변화	120.5 142.5 169.8 110.9 116.2 121.3	12.7 151.4 189.8 12 120.8 124.1	11.3 14 15.4 12.3 110 117
차이(8주) 변화	130.6 157.9 186.1 116.3 122.1 126.3	115.9 181.4 1149.9 111.8 132.9 140.2	12.1 16.3 17.2 13.7 115.7 122.8
비교			* *

-다른 비정상 수치 혈청 지방 및 지단백질을 가진 환자에 대한 쑤에치캉 캡슐의 효과 -

(↑)은 값의 증가를 가리킨다.

(↓)은 값의 감소를 가리킨다.

*P < 0.01; **P < 0.001 vs 기준

그룹	명 수	시간	apoA-Ⅰ	apoB	apoA-Ⅰ/apoB
치료된 그룹	88	기본	1.22 ±0.19	1.2±0.19	1.05±0.25
		4주	1.32 ±0.13(4) 18.2	1.09 ±0.21(3) 19.2	1.25 ±0.27(5) 119
		8주	1.28 ±0.13 14.9	0.99 ±0.18(3) 118	1.33 ±0.30(3) 126.7
비교 그룹	30	기본	1.19 ±0.16	1.21 ±0.15	1.00 ±0.18
		4주	1.26 ±0.11(1) 15.9	1.15 ±0.17(1) 15	1.11 ±0.14(2) 111.0
		8주	1.26 ±0.09(1) 15.9	1.03 ±0.15(3) 114.9	1.24 ±0.21(3) 124.0

-아포A-Ⅰ 및 아포B에 대한 쑤에치캉의 효과(평균±S)-

(1)P<0.05; (2)P<0.01; (3)P<0.001; vs 기선

(4)P<0.05; (5)P<0.05; vs 대조

a-Ⅰ(apoA-Ⅰ)와 같은 아폴리포프로테인(apolipoprotein) 및 아포-지단백질 B(apoB)에 대한 쑤에치캉의 효과에 관하여, 두 그룹에서 아포A-Ⅰ의 혈청 수치는 치료 후 상승됐다. 통계적 결과에 따르면 4주 치료 후 아포-Ⅰ수치가 상당히 다름을 알 수 있다. 아포B 수치는 두 그룹에서 다소 감소했다. 그러나 상기 감소는 통계학적으로 중요하지 않다. 치료된 그룹은 대조 그룹에 비해 아폴리포프로테인 B(apolipoprotein B) 및 아포A-Ⅰ/아포B가 더 향상되었음을 보여주었다.

유동학과 관련하여, 치료 후 양 그룹에서 혈액 침전 및 K-값에서 중요한 변화가 있었다(P<0.05-0.01). 그러나, 치료된 그룹은 대조 그룹 보다 더 나은 결과를 보였다(P<0.05-0.01).

446명 모든 환자들은 치료 전후로 다음의 실험테스트를 받았다: 혈액 요소 질소(BUN); 크레아틴; 혈청 글루타믹 피루빅 트랜사미나제(SGPT, ALT); 혈청 글루코스; 크레아틴 키나제(CK); 일반적인 혈액 및 소변 검사. 실험의 끝에서 어떠한 임상적으로 중요한 변화를 발견하지 못했다.

몇몇 환자들은 위에서 화끈거림을 경험했고(6명, 1.8), 위의 포만을 경험했고(3명, 0.9), 현기증으로 고생했다(1명, 0.3). 모든 환자들은 이전에 시험을 끝냈고, 모든 증후는 동시에 치료없이 완화됐다. 두 명의 환자는 쑤에치캉을 투여받은 후 위염으로 고생하여 시험을 멈춰야 했다. 상기 결과는 쑤에치캉이 혈청 지방 및 트리글리세리드를 낮추는데 안전하고 유효한 의약이라는 것을 나타내는 것이다.

이 시험에서, 전통 중국 의약에서 알려진 지방 조절 약제는 양성 조절로써 이용되었다. 쑤에치캉-치료 그룹에서 효과 성적은 대조 그룹에서 보다 훨씬 크다(P<0.001). 기선과 비교하여, 쑤에치캉-치료 그룹에서, 고밀도 지단백질 콜레스테롤의 혈청 수치는 19,6까지 올라갔고, 전체 콜레스테롤, 전체 트리글리세리드, 저밀도 지단백질 콜레스테롤 및 아테로마성 동맥 경화 지수는 각각 23, 36.5, 28.5및 34.2까지 줄었다. 지방 및 지단백질 혈청 지수가 정상지수와 차이가 많이 나면 날수록, 쑤에치캉 치료법에 의해서 지방 및 지단백질이 놀랍게 조절될 수 있다. 쑤에치캉은 또한 아폴리포프로테인 B 수치, 혈액 침전 및 혈액 침전 K-값을 줄일 수 있다.

종합해보면, 상기 결과들은 붉은 쌀이 혈청 지방 및 지단백질 수치를 조절하는데 안전하고, 유용한 약제임을 보여준다. 붉은 쌀은 또한 원형질 TC, TG 및 아테로마성 동맥 경화 지수를 줄일 뿐 아니라, a-Ⅰ수치로써 원형질 아폴리포프로테인을 올리기 때문에 지방과다혈증 및 아티로시스(athyrosis)에 의한 관상 동맥 질병 및 뇌혈관 질병에 대한 치료 약제로서 사용될 수 있다.

실시예 - 인간 임상 시험 Ⅱ

이 시험에서, 지방과다혈증을 갖는 환자 84명 및 아테로마성 동맥경화증으로 진단 받은 환자 56명을 두 개의 치료 그룹으로 나누었다: 쑤에치캉 캡슐로 치료하는 그룹 및 지아오구란 정제로 치료하는 대조 그룹.

모든 환자는 중국 복지부에 의한 "임상시험조작 : 새로운 중국 약물학을 사용한 지방과다혈증 치료"에서 정해진 다음의 기준에 따라 지방과다혈증으로 진단됐다. 2-4주 동안 환자식을 지시한 후에, 시험 2주전에 비정상 지방 및 지단백질을 가진 환자로부터 혈액 샘플을 채취했다. 다음의 기준에 해당되는 환자만을 시험에 등록했다: 전체 혈청 콜레스테롤(TC)>230 mg/dl(5.95 mmol/L) 및 트리글리세리드(TG)>200 mg/dl(2.26 mmol/L). 고밀도 지단백질 콜레스테롤(HDL-C)을 또한 참조로써 고려했다: 남성 < 40 mg/dl(1.04 mmol/L); 여성 < 45 mg/dl(1.16 mmol/L)

포함된 증상은 다음과 같다; 팔다리 압박; 허약한 호흡; 가슴 통증 및 압박감; 식욕상실; 위의 팽창 및 종기; 혀의 엷거나 자주빛 점; 혀에 두껍고-하얀 또는 두껍고-끈적한 털; 긴장-불안정 또는 멈춤-약한 맥박.

전통 중국 의약에 의해 인식되는 증후의 심각성은 아래와 같다.

허약한 호흡

0 없음 (-) 허약한 호흡 없음

2 빛 (+) 신체활동으로 허약한 호흡 가짐

3 적당 (++) 신체활동으로 중간의 허약한 호흡 가짐

4 심함 (+++) 휴식할 때 허약한 호흡을 가짐

팔다리 압박

0 없음 (-) 팔다리 압박 없음

2 빛 (+) 때때로 팔다리 압박 있음

3 적당 (++) 매우 자주 팔다리 압박 있음

4 심함 (+++) 심한 팔다리 압박 있음

가슴 압박 및 통증

0 없음 (-) 가슴 압박 및 통증 없음

2 빛 (+) 때때로 가슴 압박 및 통증 있음

3 적당 (++) 매우 자주 가슴 압박 및 통증 있음

4 심함 (+++) 심한 가슴 압박 및 통증 있음

식욕 상실

0 없음 (-) 보통 식욕 부진 있음

2 빛 (+) 1/4-1/3까지 식욕 감소

3 적당 (++) 1/3-1/2까지 식욕 감소

4 심함 (+++) 1/2이상 식욕 감소

복부 팽창 및 종기

0 없음 (-) 이런 신호 없음

2 빛 (+) 때때로 이런 신호 있음

3 적당 (++) 매우 자주 이런 신호 있음

4 심함 (+++) 심한 이런 신호 있음

혀의 모습

0 정상 (-)

1 비정상 (+)

맥박 상태

0 정상 (-)

1 비정상 (+)

증후 심각성

빛 성적 ≤12

적당 성적 12-20

심함 성적 ≥20

상기 증후에 따라 전통 중국 의약에 의해 진단한 환자들 및 기선 지방과다혈증을 가진 환자들을 등록했다.

환자들의 배제 기준은 다음과 같다.

1. 심근경색증(myocardial infarction), 뇌혈관 질병, 지난 반년동안 심각한 상처 또는 외과수술;

2. 신장염 증후군, 갑상선 기능 부전, 예리한 및/또는 만성의 간담즙 질환, 당뇨병, 통풍병;

3. 유전적 혈액 콜레스테롤 과잉(모노지닉(monogenic)-하이퍼코(hypercho)-레스터롤레미아(lesterolemia));

4. 다른 약물에 의한 파생적 지방과다혈증, 예로; 페노시아진(phenothiazine), 베타-아드레네르직 블로킹 약제(beta-adrenergic blocking agents), 코티코스테로이드(corticosteroid), 피임기구;

5. 지난 4주동안 다른 지방 조절기구를 사용했던 환자 및 헤파린을 사용한 환자 또는 갑성선이 있는 환자;

6. 임신중 및 모유를 먹이는 여자;

7. 다른 기관에 질환이 있는 환자; 및

8. 히락시스 증후군(hylaxis syndrome) 및 정신병자.

등록된 전체 환자수는 116명이었다. 치료된 그룹에 84명, 대조 그룹에 32명의 환자가 있었다. 두 그룹사이에 나이, 성별 및 질병 진행에 있어서 차이는 없었다.

두 그룹에서 임의의 단일 맹시험을 수행했다. 치료된 그룹(84명)은 쑤에치캉 캡슐(예로, 본 발명의 붉은 쌀 산물)을 하루에 두 번 복용했다. 대조 그룹(32명)은 하루에 두 번 지아구란 정제(중국 물질 메디카의 샨치공장, 대지번호:940730)3알을 복용했다. 치료과정은 8주였다.

치료에 우선하여 혈청 지방 및 지단백질 수치 및 다른 기준을 측정했고, 치료 후 4주 및 8주에도 측정했다. 안정성 테스트는 치료 전후로 행했다. 단식 정맥 샘플을 선택했다; 마지막 식사로 고지방성분의 음식 또는 알콜을 마신 환자는 제외됐다.

다음의 안정성 시험을 수행했다: 혈액 및 요소 질소(BUN); 크레아티닌(creatinine); 혈청 글루타믹 피루빅 트랜사미나제(serum glutamic pyruvic transaminase, SGPT, ALT); 혈청 글루코스(serum glucose); 및 크레아티닌 키나제(creatinine kinase, CK). 효율을 결정하기 위해 전체 혈청 콜레스테롤(TC), 전체 혈청 트리글리세리드(TG) 및 고밀도 지단백질 콜레스테롤 수치를 측정했다. 몸무게, 고혈압, 심장 박동 및 리듬, 및 헤파토스플레노-팔파션(hepatospleno-palpation)과 같은 다른 관련 임상 신호를 기록했다.

다음과 같은 중국 복지부에 의한 "임상시험조작 : 새로운 중국 약물학을 사용한 지방과다혈증 치료"에서 정해진 기준에 따라 효율을 평가했다

1. 치료 : 모든 증후가 제거되었거나, 90이상까지 전체 증후가 감소했다: 모든 실험 테스트 변수는 정상으로 돌아갔다.

2. 효과 : 증후가 완연히 완화됐다. 예를 들면, 증후가 70-89까지 줄었다. 혈청 지방 및 지단백질은 정상으로 오지 않았으나, 다음중의 하나로 향상되었다 :

1) TC 감소 ≥20;

2) TG 감소 ≥40;

3) (TC-HDL-C)/HDL-C 감소 ≥20;

4) HDL-C 증가 > 10 mg/dl.

1) 10%로 TC 감소;

2) TG 감소 ≥20, 그러나 <40;

3) (TC-HDL-C)/HDL-C 감소 ≥10, 그러나 <20;

4) HDL-C 증가 > 4 mg/dl(0.14m mmol/L).

4. 무효과 : 증후는 30미만으로 감소하였다. 그리고, 실험 테스트 변수는 효과 기준에 미치지 못했다.

모든 자료는 통계 분석에 따른다. 학생의 테스트, 계산자료를 위한 치-스퀘어(Chi-square) 테스트, 리딧 분석이 적절한 때 사용되었다.

표 5는 두 그룹의 전체 효율 성적의 비교를 나타낸다.

그룹	전체 명수	치료	효과	개선	무효과
치료된	84	39	25	13	7
대조	32	3	6	4	19

-일반적 효율-

리딧 분석: u = 5.18, P<0.01

비교 : X² = 0,0 P>0.05

치료된 그룹에서 전체 효과 스코어가 대조 그룹보다 훨씬 컸다(X²-22.95, P<0.01).

표 6은 전통 중국 의약 표준에 의해 정의되는 효율의 비교를 나타낸다.

-효과의 비교-

*p<0.05 vs 대조군

치료된 그룹에서 전통 중국 의약에 의한 진단으로 증후가 없어졌다고 보고한 환자의 비율은 대조 그룹보다 훨씬 높았다(p<0.05). 특히 혀의 자주빛 점 뿐 아니라 가슴의 고통 및 압박감, 식욕 상실, 위의 팽창 및 종기에 있어서 더욱 그러했다.

혈청 전체 콜레스테롤 수치의 변화가 표 7에 있다.

그룹	비정상인 수	치료	감소>20	감소 10-20	감소<10
치료	76	53	9	5	9
대조	28	4	0	2	22

-혈청 전체 콜레스테롤 수치 변화-

리딧 분석 : u = 5.47 P>0.05

효과율 : X²= 39.96, P<0.001, vs 대조군

치료된 그룹에서 전체 혈청 콜레스테롤 수치의 치료 또는 감소 스코어는 대조 그룹보다 크다.

혈청 전체 트리글리세리드 수치 변화가 표 8에 있다.

그룹	비정상인 수	치료	감소>20	감소 10-20	감소<10
치료된	35	20	2	5	9
대조	13	6	2	1	4

-혈청 전체 트리글리세리드 수치 변화-

리딧 분석 : u = 0.53 P>0.05

효과율 : X²= 0.007, P<0.05, 대 대조군

두 그룹에서 혈청 전체 트리글리세리드 수치를 치료 또는 감소하는 스코어의 차이점이 발견되지 못했다.

고밀도 지단백질-콜레스테롤 수치이 변화가 표9에 있다.

그룹	비정상(>4) 인 수	치료>4	감소>20	감소 10-20	감소<10
치료된	24	11	1	3	9
대조	10	3	0	1	6

-HDL-C 수치 변화-

리딧 분석 : u = 1.03 P>0.05

효과율 : X²= 1.15, P<0.05, 대 대조군

HDL-C 수치를 정상화 또는 증가하는데 유사한 효과가 두 그룹에서 발견되었다.

표 10은 (TC-HDL-C)/HDL-C의 비율인 아테로마성 동맥경화 지수의 변화를 나타낸다.

그룹	비정상(>4) 인 수	치료>4	감소>20	감소10-20	감소<10
치료	56	44	6	3	3
대조	14	3	1	2	8

- (TC-HDL-C)/HDL-C의 변화-

리딧 분석 : u = 3.84 P>0.01

효과율 : X²= 23.41, P<0.01, 대 대조군

표 10의 자료는 쑤에치캉-치료 및 대조 그룹 모두 HDL-C 혈청 수치가 두드러지게 향상됐음을 나타낸다. 쑤에치캉의 효과는 대조그룹보다 우수함이 발견됐다.

표 11은 혈청 지방 및 지단백질 수치를 조절하는데 쑤에치캉의 효과를 나타낸다(X+/―S).

그룹	시간	명 수	TC(mg/dl)	명 수	TG(mg/dl)	명 수	HDL-C(mg/dl)	명 수	LDL-C(mg/dl)
치료된 그룹	기본	76	273.9±34.1	35	304.1±86.8	24	35.3±4.8	84	174.7±48.1
	4주 차이		253.9±35.9 35*** ↓13.87		270.3±121.2* 33.8 ↓11.11		39.5±9** 4.2# ↑11.9		141.4+477.6*** 33.3### 119.1
	8주 차이		216.7±33.7 57.3*** ↓20.91		206.5±72*** 97.6 ↓32.09		42.1±7.6*** 6.8 ↑19.6		126.8+39.6*** 49.9### ↓27.4
대조 그룹	기본	28	265.4±25	13	297.1±72.1	10	35.3±3.3	32	164.3+35.6
	4주 차이		272.6±33.3 7.2 ↑2.7		304.8±0.141 7.7 ↑2.6		35.3±3.7 0.02 ↓0.06		171.6±42.3 7.3 ↑4.44
	8주 차이		265±35.8 0.5 ↓0.2		226.7±88.1 70.3 ↓23.67		38.3±7.3 2.98 ↑8.43		168+45.5 4.11 ↑2.5

- 혈청 지방 및 지단백질에 대한 쑤에치캉의 조절 효과(X±S)-

↑는 증가 ***P<0.001; **P<0.01; *P<0.05 대 기본

↓는 감소 ###P<0.05, P<0.05 대 대조

표 11은 쑤에치캉이 TC, TG, (TC-HDL-C)/HDL-C, HDL-C 혈청 수치를 두드러지게 향상시켰으나, 대조 그룹은 단지 TG만 향상시켰음을 나타낸다. 쑤에치캉 치료법은 대조 그룹 보다 더 효과적으로 TC, LDL-C를 조절하였음을 알 수 있다.

표 12는 혈청 지방 및 지단백질의 다른 기본에 대한 쑤에치캉 치료법의 효과를 보여준다.

	TC(mg/g)	TG(mg/g)	HDL-C(mg/dl)
변수 명수 평균기본 (평균)	<230 230-300 >300 8 60 16 192.01 261.8 327.1	230 230-300 >300 49 20 15 134.3 247.6 327.3	>45 35-45 <35 55 17 12 56.4 40.1 5.4
평균(4주) 변화	174.14 226.14 272.56 ↓9.31 ↓12.621 ↓17.62	134.84 202.64 360.59 ↓4.05 ↓16.2 ↓6.87	55.03 43.41 38.82 ↓2.68 ↓7.49 ↓24.05
평균(8주) 변화	156.08 208.21 86.1 ↓18.7 ↓19.53 ↓24.93	119.38 169.51 255.88 ↓15.05 ↓29.9 ↓33.91	57.58 46.89 40.33 ↑1.85 ↑16.11 ↑28.89
비교	* **

-혈청 지방 및 지단백질의 상이한 기본에 대한 쑤에치캉 치료법의 효과 비교.-

**p<0.01; *P<0.001 대 대조군혈청에서 TC 및 TG의 기본이 더 높을수록, 쑤에치캉을 사용한 후 더 많이 감소된다.

상기 결과는 치료 스코어 및 효과 스코어는 쑤에치캉-치료(붉은 쌀 치료)에서는 각각 46.4(38/84), 29.8(25/84)이고, 대조 그룹에서는 9.4(3/32), 18.8(6/32)이다. 치료그룹에서 전체 효과비율(72)은 대조 그룹(28.2, P<0.001)에서 보다 훨씬 크다. TC, LDL-C 및 (TC-HDL-C)/HDL-C을 향상시키는데 상기 두 그룹간의 두드러진 차이점이 있었다.

치료 중 및 치료 후에 임상적으로 다음의 변수에 대한 심각히 의미있는 변화를 관찰하지 못했다: 혈청 글루타믹 피루빅 트랜사미나제(SGPT); 혈액 및 효소 질소(BUN); 크레아티닌; 혈청 글루코스; 카디오일렉트로그램(cardioelectrogram); 및 일반적인 소변, 혈액 검사. 치료그룹에서는 세 경우가, 200IU/L에서 크레아티닌 키나제(CK)(252. 260, 466 IU/L 대 정상 표준)의 증가를 보였고, 대조군에서는 한 경우(256 IU/L)가 기록되었다. 상기 경우들 중 어느 것도 임상적인 증후가 없었다. 상기 결과는 본 발명의 붉은 쌀이 안전하고 수용 가능한 지질-조절 약제라는 것을 보여준다.

다른 실시예

본 발명이 상세한 설명에서 설명되는 반면, 상술한 설명은 본 발명을 설명하는 것이지 그 범위를 제한하는 것이 아님을 알아야 한다. 본 발명의 범위는 추가되는 청구범위에 의해 정의된다. 다른 모습, 이익 및 수정은 다음의 청구범위의 범위 안에 있다.

상기 내용에 포함되어 있음.

Claims

심근 경색증, 관상 심장 질환, 고혈압, 저혈압, 아테로마성 동맥경화증 및 동맥경화증으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 심장혈관질환이나 발작 또는 뇌혈전증을 포함하는 높은 혈청 콜레스테롤 또는 트리글리세리드 수치에 관련된 질병을 치료하기 위한 약학적 조성물로서, 상기 약학적 조성물은 붉은 쌀 발효 산물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하고, 상기 붉은 쌀 발효 산물은 적어도 0.05중량% 로바스타틴을 포함하고 배양 배지에서 모나스쿠스 알비두스 CGMCC No. 0317; 모나스쿠스 루버 반 틱엠 CGMCC No. 0315, CGMCC No. 0316; 모나스쿠스 팍시아이 링겔샤임 AS 3.4453; 모나스쿠스 풀리지노수스 사토 AS 3.569, AS 3.1098, AS 3.2091, AS 3.2093, AS 3.2134, IFFI 05035로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 로바스타틴-생산 모나스쿠스 균주를 배양함으로써 제조되어지는 것인 약학적 조성물.
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제 1 항에 있어서,

상기 붉은 쌀 발효 산물은 쌀을 포함하는 배양 배지에서 상기 로바스타틴-생산 모나스쿠스 균주를 배양하는 단계; 상기 배양 배지를 제거하여 고체 잔여물을 제공하는 단계; 및 상기 고체 잔여물을 살균하여 붉은 쌀 발효 산물을 제공하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조되어지는 것인 약학적 조성물.
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제4항에 있어서,

상기 붉은 쌀 발효 산물을 제조하는 방법이 상기 고체 잔여물을 에탄올 용액으로 추출하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
삭제
제1항, 제4항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 약학적 조성물이 포유동물에서 심장혈관질환을 예방 또는 치료하기 위한 것인 약학적 조성물.
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제1항, 제4항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 약학적 조성물이 발작 또는 뇌혈전증을 예방 또는 치료하기 위한 것인 약학적 조성물.
제1항, 제4항 및 제7항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 약학적 조성물이 인간의 지방간 상태를 예방 또는 치료하기 위한 것인 약학적 조성물.
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