CZ111899A3 - Farmaceutický prostředek - Google Patents

Abstract

Farmaceutický prostředek pro perorální nebo parenterální podání u člověka k léčení nebo prevenci chorob, při nichž dochází ke zvýšené koncentraci lipidů a lipoproteinů v krevnímséru obsahujejako svou účinnou složku produkt fermentace červených kvasinek, zejména čeledi Monascus, s výhodou se užije směs kmenů Monascus purpureus Went s alespoňjednímdalšímkmenemMonascus.

Description

Farmaceutický prostředek

Oblast techniky

Vynález se týká farmaceutického prostředku s obsahem fermentačních produktů červených kvasinek pro použití k léčebným účelům nebo jako potravinové doplňky. Prostředky je možno užít ke snížení koncentrace cholesterolu v krevním oběhu, léčení srdečních a cévních onemocnění a podobně. Prostředky s výhodnou obsahují fermentační produkty červených kvasinek Monascus.

Dosavadní stav techniky

Červené kvasinky (známé v Číně jako Hung-ch'u nebo Honggu) jsou známy již několik staletí a užívány v Číně k výrobě rýžového vína a ke konservaci potravin. Mimoto jsou tyto kvasinky již několik set let uváděny v předpisech starého čínského lékařství. Nejčastějším použitím je však konservace potravin a jejich barvení, kvasinky se užívají i v průmyslu barviv.

Červené kvasinky jsou směsí několika čeledí hub Monascus, zejména Monascus purpureus (Went, 1895, Ann. Sci.

Nat. Bot. Ser. 8:1:1, Young, 1930, Trans. Wisc. Acad. Sci.

Art. Lett., 25:227-244). Rod Monascus byl poprvé popsán v roce 1884 v publikaci van Tieghem, Bull. Soc. Bot. France, 31:226. V západním světě byly tyto organismy z počátku známy pouze jako organismy, kontaminující obiloviny, škroby a siláže.

Ve starém čínském lékopise, Pen Ts'ao Kang Mu z doby dynastie Ming, 1368 až 1644 se uvádí podrobné možnosti použití červených kvasinek v lékařství. Červené kvasinky jsou popsány jako mírné, nejedovaté a vhodné k léčení zažívacích

-2• ·· potíží a průjmů. Rovněž se popisuje použití červených kvasinek pro zlepšení prokrvení a k léčení onemocnění sleziny a žaludku. Další možností použití jsou onemocnění zažívací soustavy, jako zažívací potíže a průjem a bolesti srdce a břicha.

Ve zkráceném anglickém překladu uvedeného čínského lékopisu z roku 1911 se popisuje, že červené kvasinky jsou použitelné při fermentacích a také v případě poporodních obtíží u žen a zažívacích potíží u dětí (Stuart M.D., Chinese

Materia Medica-Vegetable Kingdom, str. 233-234, znovu vydáno

1979 Southern Materials Center lne., Taipei, Činaksá Republika) . Červené kvasinky, popsané v Pen Ts',ao Kang Mu byly později označeny jako čeleď Monascuc purpureus Went (Read B.E., 1936, Chinese Medicinal Plants from the Pen Ts'ao Kang Mu, 3.

vydání, Peking National History Bulletin a Klein G., 1932,

Handbuch der Pflanzenanalyse II, str. 1422-1423, Vídeň, Julius Springer Verlag).

Zpracování červených kvasinek je popsáno v další publikaci z doby dynastie Míng, T'ien Kung K'ai Wu, sepsané Sung

Ying Hsingem v roce 1637 (str. 291 až 294 anglického překladu: T'ien Kung K'ai Wu - Chinese technology in the seventeenth century, přeložili E-tu zen Sun a Shiou-Chuan Sun, The Pennsylvania State University Press, 1966). Červené kvasinky se popisují jako použitelné pro uchování barvy a chuti ryb a masa. Při výrobě kvasinek se jako výchozí látky užívají rmut z červeného vína a vařená rýže. Výroba kvasinek pěstováním na povrchu vařené rýže byla popsána také v publikaci Voderman, 1894, Analecta ob Cromatologisch Gebied. II., Geneesh. Fydschrift voor Ned. Indie, 35. č.5.

-3• · * · · · · · ······ • · · · · · · · ··· ···· ·· ·· ·· ··

V současné době jsou červené kvasinky čeledi Monascus stále ještě užívány v tradičním čínském lékařství, k výrobě vína a k barvení potravin v Asii i v asijských komunitách v severní Americe. Červené a žluté pigmenty Monascus purpureus, jako monascorubin a monascin byly čištěny a podrobně studovány (Fielding a další, 1961, J. Chem. Soc. 4579-4589). Podmínky pěstování a jejich vliv na pigmentací Monascus purpureus byly rovněž sledovány (Broder a další, 1980, J. Food Sci., 45:567-569). V extraktu Monascus purpureus byla prokázána také antibakteriální účinnost, zvláště proti čeledi Bacillus (Wong, 1977, Plant. Physiol. 60:578-581).

Až dosud však nebylo důkladně studováno výjimečně široké spektrum příznivých léčivých a výživných účinků u červených kvasinek obecně a u některých čeledí zvláště.

Lipidy a lipoproteiny hrají zásadní úlohu při transportu tukových metabolitů mezi orgány pro vstřebávání, metabolismus a distribuci (Felig a další, 1975, N. Engl. J. Med. 293:1078-1084). Náchylnost ke zvýšené koncentraci lipidů v krevním oběhu včetně cholesterolu v závislosti na přijímané potravě je obecná. V případě spojení genetické predisposice, stravy s vysokým obsahem tuku a nedostatku pohybu může dojít ke vzniku srdečních onemocnění, zvýšeného krevního tlaku, hypertriglyceridemie a cukrovky u významného podílu obyvatel Spojených států amerických.

Vysoký obsah cholesterolu v krevním séru je hlavním risikovým faktorem pro onemocnění koronárních cév. Cholesterol je hlavní složkou atherosklerotického plátu. Další abnormality včetně hypertriglyceridemie, zvláště při nižší koncentraci HDL cholesterolu (je mezi nimi reciproční vztah) k vyš30 Šímu risiku přispívají.

• · ·» ·* ·· • ·

-4Koncentrace cholesterolu v krevním oběhu je důsledkem rovnováhy mezi produkcí částic apoB-100 a jejich odstraňováním z oběhu. Cholesterol je synthetizován z acetyl-CoA řadou více než 20 enzymatických reakcí. Biosyntéza je převážně ří5 zena účinností HMG-CoA-reduktázy (reduktázy hydroxymethylglutarylkoenzymu A), která katalyzuje redukci HMG-CoA na mevalonát. Vzhledem k tomu, že většina cholesterolu v krevním oběhu je endogenně synthetizována v játrech a nepochází tedy z potravy, byly zkoumány inhibitory enzymů, účastnících se bio10 syntézy cholesterolu jako látky pro léčení hypercholesterolemie (Grundy 1988, New Eng. J. Med., 319:24-33.

Některé látky vyvolávají inhibici syntézy cholesterolu kompeticí s přírodním substrátem, HMG-CoA (hydroxymethylglutarylkoenzymem A),pro klíčový enzym při bio15 syntéze cholesterolu, HMG-CoA-reduktázu. První zjištěnou hypocholesterolemickou sloučeninou z této skupiny byl compactin, izolovaný z kultury Penicillium citrinum (Endo a další, 1975, J. Antibiotics, 29:1346-1348 a také US 3983140, US 4049495 a US 4137322). Hypocholesterolemická účinnost uvedené látky byla prokázána na různých pokusných zvířatech (Tsujita a další, 1979, Atherosclerosis, 32:307-313). Pak byla nezávisle nalezena další hypocholesterolemická sloučenina, příbuzná compactinu, ve fermentačních produktech Monascus ruber a byla pojmenována monacolin K (Endo, 1979, J. Antibiotics,

32:852-854, Endo, 1980, J. Antibiotics 33: 334- 336 a tajé DE

3051175, DE 3051099, DE 3006216, GB 2046737 a GB 2055100), další látka byla izolována z kultur Aspergillus terreus. Účinná látka byla rovněž označována jako mevinolin, lovastatinnebo Mevacor” (Tobert a další, 1982, J. Clin. Invest.

69:913-919) a užívá se jako léčivo v USA od roku 1987.

-5Účinnost a dlouhodobé nepříznivé účinky této látky byly shrnuty v publikaci Tobert, Am. J. Cardiol., 62:28J-34J. Účinná látka, její deriváty a způsob výroby z Aspergillus jsou popsány v US patentových spisech 4231938, 4342767, 4294926,

4319039, 4294926, 4294846 a 4420491.

Přestože byly monacolin K nebo mevinolin s úspěchem užity k léčení hypercholesterolemie, nemá tato látka žádný vliv nebo má jen malý vliv na koncentraci triglyceridú v krevním séru. Dalšími látkami, které byly užity k úpravě kon10 centrace lipidů, zvláště hyperlipidemie typu IV a V, byly kyselina nikotinová (např. niacin), deriváty fibrové kyseliny (např. gemfibrozil a clofibrat). Použití těchto látek je však omezeno vzhledem k jejich vedlejším účinkům. Například vysoké dávky niacinu mohou dráždit žaludeční sliznici, vyvolat hype15 rurikemii, hyperglykemií a pruritus, gemfibrozil může vyvolat zhoubné bujení, onemocnění žlučníku a bolesti břicha. Mimoto se risiko myositidy a rhabdomyolyzy, která může vést k selhání ledvin zvyšuje při kombinaci monacolinu K s gembibrozilem, clofibratem nebo niacinem. Takové kombinyce je možno užít pouze pod pečlivým dohledem ve zvláštních situacích, opravňujících k takovému risiku (The Merck Manual, 1922, 16. vydání, str. 1044-1046). Vzhledem k tomu, že je známo, že vysoká koncentrace triglyceridú v krevním séru je risikovým faktorem pro celou řadu chorobných stavů, existuje stále potřeba na25 lézt prostředky, které snižují koncentraci cholesterolu i triglyceridú v krevním séru.

Pravidelné cvičení a zdravá výživa s udržováním žádoucí tělesné hmotnosti může zabránit nebo snížit výskyt běžných chronických onemocnění, například srdečních chorob, spo30 jených se zvýšenou koncentrací lipidů v krvi (1991,

-β* ·· · · ·· · · ·· ··· · · ♦· · · ·· « • · · · · · ···· • · · · · · · A ····«· • · · · · « · » ······· « · · » · « « «

Pi-Sunyer, Am. J. Clin. Nutr., 53:1595S-1603S). Úloze výživy při udržování zdraví nebo při zpomalení progrese onemocnění nebo nežádoucího stavu se věnuje velká pozornost. Účinný doplněk potravy pro použití při smíšené hyperlipidemii by byl významným přínosem pro zdravotní stav populace zlepšením výsledků, dosažitelných pouze úpravou stravy.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří prostředek, který obsahuje fermentační produkty alespoň jedné čeledi Monascus a může být použit jako farmaceutický prostředek nebo doplněk výživy ke snížení koncentrace cholesterolu i triglyceridů v krevním séru člověka.

Vynález je zčásti založen na překvapujícím zjištění, že červené kvasinky, to znamená produkty fermentace určitých kmenů nebo směsí kmenů Monascus snižují u savců a zvláště u člověka nejen hladinu cholesterolu, nýbrž také koncentraci triglyceridů v krevním séru. Protože je známo, že monacolin K nebo mevinolin nesnižují účinně koncentraci triglyceridů, musí být příznivý účinek produktů červených kvasinek spojen s jinými složkami fermentačních produktů.

Podle různých provedení vynálezu je možno produkty červených kvasinek použít jako přírodní potravinový doplněk nebo jako léčivo pro léčení nebo prevenci řady onemocnění, například srdečních a cévních chorob, cukrovky, steatosy jater, mozkové mrtvice, thrombosy mozkových cév, sníženého nebo zvýšeného krevního tlaku a obesity a k úpravě koncentrace lipidů, například triglyceridů nebo cholesterolu v oběhu. Podává se účinné množství fermentačního produktu červených kvasinek.

• · • · · · » · · · » · · · • · · · · · · · · ·

-ΊPodle vynálezu je možno červené kvasinky zpracovat na různé lékové formy a různé typy prostředků. Jsou uvedeny také způsoby pěstování červených kvasinek na bázi tradičních fermentačních postupů.

Podle jednoho z možných provedení se vynález týká prodtředků, obsahujících fermentační produkt alespoň jedné čeledi Monascus. Tyto prostředky jsou vhodné pro snižování koncentrace cholesterolu i triglyceridů v krevním oběhu savců a zvláště člověka. Mimoto je tyto prostředky možno použít k udržení normální hladiny cholesterolu a triglyceridů v krevním séru přes vnitřní (stárnutí) a vnější (stress) faktory, které tyto koncentrace nepříznivě ovlivňují.

Prostředky podle vynálezu jsou zčásti založeny na zjištění, že fermentační produkty čeledí Monascus mají hypercholesterolemické vlastnosti a současně zcela neočekávaně i schopnost snižovat hladinu triglyceridů v krvi. Protože je známo, že monacolin K je v tomto směru málo účinný, musí být příznivý účinek fermentačních produktů vyvolán jinými složkami těchto produktů. VYužití uvedených fermentačních produktů tedy představuje jedinečnou přírodní alternativu při volbě hypocholesterolemických látek.

Pojem červené kvasinky nebo Monascus je v průběhu přihlášky používán pro příslušný organismus. Pojem produkt červených kvasinek, fermentační produkt a podobně je užíván pro produkty fermentace alespoň jednoho Monascus, obvykle se však užívají fermentační produkty směsí červených kvasinek. Uvedené pojmy také zahrnují tradiční a zdokonalené produkty červených kvasinek, tak jak budou dále v průběhu popisu a příkladové části přihlášky popsány.

« · • · • · • 9

-8Produkty fermentace jsou podle vynálezu odvozeny od nejméně jednoho z následujících rodů Monascus: Monascus albidus, Monascus anka, Monascus araneous, Monascus aurantiacus, Monascus bakeri Dangerd, Monascus fuliginosus, Monascus kaoliang, Monascus major, Monascus paxii, Monascus pilosus, Monascus pubigerus, Monascus purpureus, Monascus ruber, Monascus rubiginosus, Monascus rubropunctatus a Monascus serorubescens.

Podle výhodného provedení vynálezu se užívá fermentační produkt směsi Monascus, obsahující převážně Monascus purpureus Went a v menším množství produkty jiných čeledí Monascus, například s výhodou Monascus ruber van Tieghem, Monascus fuliginosus Sáto, Monascus pilosus Sáto a Monascus albidus Sáto. Podle zvláště výhodného provedení jde o fermentační produkty alespoň jednoho z následujících kmenů Monascus: Monascus purpureus Went ATCC 30141, AS 3.562, AS 3.991, AS 3.4446, (ATCC 16365), AS 3.4642 (NRRL 2897), AS 3.4643 (NRRL 2896), AS 3.4644, AS 3.4645, AS 3. 4651, Monascus ruber van Tieghem AS 3.549, IFFI 05007, IFFI 05008, IFFI 05010,

IFFI 05011 a Monascus anka IFFI 05038 (čísla odpovídají číslům podle China Catalogue of Cultures, 1992, China Comittee for Culture Collection of Microorganisms, China Machine Press, Beijing 1992) a Monascus purpureus Went, mutovaný kmen M4027, 4028 a M4184.

Pod pojmem tradiční červené kvasinky se rozumí směs Monascus, tradičně užívaná k získávání fermentačních produktů těchto organismů. Zlepšené produkty lze získat z přírodních nebo mutovaných kmenů Monascus, při jejichž fermentaci vznikají produkty se zlepšenými biologickými nebi výživnými vlastnostmi, například vyšším hypocholesterolemickým a hypo-9• 9 • 9

triglyceridemickým účinkem. Získané produkty jsou obvykle purpurově červené prášky s poněkud nahořklou, avšak mírnou a příjemnou chutí. Také vůně produktů je příjemná. Barva a/nebo vůně se mohou měnit v závislosti na fermentačním postupu, použitých kmenech a způsobu zpracování.Podle vynálezu je možno získat tradiční nebo zlepšené produkty červených kvasinek tradiční fermentací nebo modifikací těchto postupů. Podle nejstaršího popsaného postupu (Sung, 1637, T'ien Kung K'ai Wu, str. 291 až 294, anglický překlad Suna a dalších, The Pennsylvania State Press, 1966) je možno produkty červených kvasinek připravit fermentací promyté a vařené neklihovité rýže při použití rmutu červeného vína, přírodní šťávy rostliny Polygonům a vody se síranem hlinitodraselným. Rýže se fermentuje na volném vzduchu 7 dnů na bambusových deskách při vysoké čistotě. Rýže mění svou barvu ud bílé až do černé, pak hnědé, hnědočervené až žluté, která je výsledným produktem fermentace. Je také možno podrobit rýži fermentaci v jamách, vyhloubených v půdě a vyložených bambusovými rohožemi. Po přikrytí jámy trvá fermentace nejméně jeden rok, a to až čtyři roky.

Podle vynálezu byl tradiční způsob zlepšen použitím moderních fermentačních n postupů a zařízení pro lepší řízení teploty, pH, tlaku a dalších poarametrů fermentace, přičemž mimo jiné dochází ke zkrácení doby fermentace. Je například možno postupovat tak, že se k rýži přidá živné prostředí, obsahující 2 % výluhu z fazolí, 4% cukru a 0,5 % kvasinek (40 až 80 ml na 100 g) a směs se sterilizuje teplem při pH 3 až 8. Pak se přidá Monascus purpureus Went, kmen M4184, který se pěstuje 9 dnů při teplotě 15 až 35 °C. Po ukončení fermentace se prostředí slije a odloží a pevný podíl se sterilizuje

-10teplem, například parou pod vysokým tlakem, suší se a drtí na prášek. Tento prášek je pak možno přímo použít do různých typů prostředků podle vynálezu.

Sušené a rozdrcené práškové červené kvasinky je možno popřípadě dále zpracovávat, například extrahovat organickými rozpouštědly, například 75% ethanolem k odstranění škrobu a/nebo agaru. Po odpaření dosucha je možno extrakt použít v různých prostředcích, Izolace a čištění specifických složek však podle vynálezu není žádoucí.

Podle různých provedení vynálezu je možno použít červené kvasinky jako přírodní doplnš výživy nebo jako farmaceutický prostředek k udržení zdraví nebo k léčení různých chorob, například onemocnění srdce a cév, cukrovky, mozkové mrtvice, zvýšeného krevního tlaku a obesity a k úpravě koncentrace lipidů a lipoproteinů, jako glycerolu a triglyceridů v krevním oběhu. Červené kvasinky je možno použít také k léčení nebo prevenci různých příznaků uvedených onemocnění i v souvislosti se stárnutím a dalšími vnitřními i vnějšími faktory.

Jako příklady kardiovaskulárních onemocnění je v této souvislosti možno uvést infarkt myokardu, onemocnění koronárních cév, atherosklerosu, arteriosklerosu a podobně. To zahrnuje i léčení cerebrovaskulárních chorob, jako mrtvice, ztráty paměti po mrtvici a mozkové thrombosy.

Součást podstaty vynálezu tedy tvoří také prostředek, obsahující účinné množství červených kvasinek, například 2 až 4 gramy denně pro použití k léčení a prevenci hyperlipidemických onemocnění, onemocnění srdce a cév, včetně mozkových cév, hypertense, hypotense, cukrovky, steatosy jater, obesity a kombinací těchto chorob.

-11··

Vynález rovněž zahrnuje prostředek s obsahem účinného množství červených kvasinek pro použití k úpravě koncentrace lipidů a lipoproteinů v krvi u člověka tak, aby koncentrace těchto látek byly udržovány na normální úrovni. V jednom provedení vynálezu je prostředek upraven pro použití k léčení nebo prevenci hypertriglyceridemie. Ve výhodném provedení je prostředek určen k současnému snížení koncentrace cholesterolu i triglyceridů v krevní séru.

Součást podstaty vynálezu tvoří také prostředek, obsahující účinné množství zlepšeného produktu a určený k léčení asthenického dýchání, nedostatečnosti dýchacích cest, lethargie, obluzení, chronických bolestí hlavy, bolestí na hrudníku, bušení srdce, ztráty chuti k jídlu, otoků končetin a přílišného vykašlávání.

Pod pojmem účinné množství se rozumí množství, dostatečné k vyvolání léčebného nebo preventivního účinku v případě uvedených onemocnění nebo v případě hladiny lipidů nebo lipoproteinů v krevním séru.

Prostředky podle vynálezu je tedy možno použít k léčení a prevenci různých onemocnění nebo jejich příznaků u člověka.

Podle jednoho z možných provedení se prostředky uží-. vají k léčení hyperlipidemických chorob, kardiovaskulárních onemocnění, cerebrovaskulárních chorob, hypertense (dědičně podmíněné i získané) hypotense angíny pactoris mrtvice cukrovky, steatosy jater, obesity nebo kombinace těchto chorob. Podává se účinné množství červených Ivasiken nebo prostředku s jejich obsahem.

Podle dalšího provedení se prostředky užívají k prevenci hyperlipidemických onemocnění, kardiovaskulárních a

-129 99 cerebrovaskulárních chorob, hypertense, hypotense, angíny pectoris, mrtvice, cukrovky steatosy jater, obesity nebo kombinací těchto chorob. Podává se opět účinné množství červených kvasinek nebo prostředku s jejich obsahem. V jednom z výhodných provedení se prostředky užívají k léčení nebo prevenci hypertriglyceridemie a s ní spojených onemocnění, jako jsou hyperuríkemíe, pankreatitis a cukrovka u člověka. Jako příklad svrchu uvedených kardiovaskulárních onemocnění je možno uvést infarkt myokardu, onemocnění koronárních cév, atherosklerosu, arteriosklerosu, z cerebrovaskulárních onemocnění může jít například o mrtvici, mozkovou thrombosu nebo ztrátu paměti po mrtvici.

Prostředky podle vynálezu lze rovněž použít k úpravě koncentrace lipidů a lipoproteínů v krvi člověka s cílem zajistit normální koncentraci těchto látek. Podává se účinné množství červených kvasinek nebo prostředku s jejich obsahem. Ve výhodném provedení se prostředky užívají k úpravě koncentrace cholesterolu i koncentrace triglyceridů. Tato léčba je vhodná zvláště pro geriatrické nemocné a pro ženy po menopause.

Prostředky podle vynálezu lze využít také v případech dušnosti, asthenického dýchání, lethargie, obluzenosti, chronických bolestí hlavy, ztráty chuti k jídlu, otoků končetin, bolestí břicha, přílišného vykašlávání a kombinace těchto chorobných stavů. Podává se opět účinné množství červených kvasinek nebo farmaceutického prostředku s jejich obsahem.

Dávky tradičních nebo zlepšených produktů při léčbě a prevenci různých chorob nebo při úpravě hladiny lipidů a lipoproteinů v krvi se budou měnit v závislosti na léčeném stavu a na jeho závažnosti. Dávka a intervaly mezi jednotlivými ··

-13• · ··

dávkami se rovněž budou měnit v závislosti na věku, hmotnosti a reakci nemocného na léčení. Obvykle se bude celková denní dávka červených kvasinek v případě svrchu uvedených indikací pohybovat v rozmezí 0,1 g až 5 g perorálně v jediné dávce nebo rozděleně. Výhodná denní dávka je v rozmezí 0,3 až 4 g a zvláště 1,2 až 2,5 g. Je například možno podávat denně perorálně dvě kapsle, z nichž každá obsahuje 0,6 g červených kvasinek. Léčení má trvat alespoň 4 týdny. Může být vhodné i použití dávek mimo uvedené rozmezí, konečnou dávku určí vždy odborník. Ošetřující lékař také určí úpravu, přerušení nebo ukončení léčení v závislosti na dosažených výsledcích.

V této souvislosti je nutno znovu uvést, že vynález zahrnuje nové použití tradičních červených kvasinek a také nové produkty fermentace červených kvasinek a jejich použití.

Svrchu uvedené prostředky je možno užít také jako doplněk výživy. Při tomto použití dochází k udržení normální koncentrace cholesterolu a triglyceridů v krevním séru navzdory nepříznivým vlivům, jako jsou stárnutí, stress, nedostatek pohybu a nedostatečná výživa. Dochází rovněž ke snížení pravděpodobnosti vzniku svrchu uvedených onemocnění. Konečně lze tímto způsobem zabránit vzniku nežádoucího při- bývání na váze a obesity. Prostředky jsou zvláště vhodné pro geriatrické nemocné a ženy po menopause. Také v případě použití jako doplněk výživy by mělo jít o podávání nejméně 4 týdny, je však možno doporučit trvalé podávání. Denní dávka je v rozmezí 0,1 až 5,0 g, s výhodoul až 4 g a zvláště výhodně v rozmezí 1,2 až 2,4 g.

Farmaceutické prostředky nebo potravinové doplňky podle vynálezu obsahují červené kvasinky nebo extrakt z

-14těchto kvasinek jako svou účinnou složku, mimoto mohou obsahovat farmaceutický nosič a popřípadě jiné složky.

Z dalších složek, které je možno zařadit do farmaceutických nebo dietních prostředků lze uvést vitamin,y aminokyseliny, soli kovů a látky pro úpravu chuti. Pro perorální podání mohou být červené kvasinky přidávány přímo do potravin, takže denní dávka bude přijímána s běžným jídlem. K přidávání do potravin je možno využít jakéhokoliv běžného postupu.

Prostředky podle vynálezu, určené pro perorální podání mohou mít formu jednotlivých dávek, jako kapslí, oplatek nebo tablet s předem určeným množstvím účinného produktu, může také jít o prášky nebo granuláty, roztoky nebo suspenze ve vodné nebo nevodné kapalině nebo o emulse typu olej ve vodě nebo voda v oleji. Obecně se tyto prostředky získají tak, že se homogenně promísí účinná složka s kapalným nosičem, jemně práškovým pevným nosičem nebo směsí těchto látek a pak se popřípadě směs zpracuje na požadovanou formu.

Prostředky podle vynálezu mohou popřípadě obsahovat pojivá, jako předem gelatinizovaný kukuřičný škrob, polyvinylpyrrolidon nebo hydroxypropylmethylcellulosu, dále plniva, jako laktosu, pentosan, mikrokrystalickou cellulosu nebo hydrogenfosforečnan vápenatý, kluzné látky, jako stearan hořečnatý, mastek nebo oxid křemičitý, desintegrační prostředky, jako bramborový škrob nebo sodnou sůl glykolátu škrobu nebo smášedla, jako laurylsíran sodný. Tablety nebo kapsle mohou být povlékány obvyklým způsobem.

Kapalné prostředky, určené pro perorální podávání mohou mít například formu roztoků, sirupů nebo suspenzí nebo

♦·· · φ φ · ' >

• φ «φφφ

-15«Φ mohou být dodávány jako suché produkty, určené pro rekonstituci ve vodě nebo v jiném vhodném nosném prostředí těsně před použitím. Kapalné prostředky tohoto typu je možno připravit běžnými postupy při použití běžných přísad, jako suspenzních činidel (např. sorbitolový sirup, deriváty celulosy nebo hydrogenované jedlé oleje), emulgátorů (např. lecithin nebo akacie), nevodných nosných prostředí (např. mandlový olej, estery typu olejů, ethalakohol nebo frakcionované rostlinné oleje) a konservačních prostředků (např. Methyl- nebo propylp-hydroxybenzoáty nebo kyselina sorbová). Prostředky mohou rovněž napodobovat určité potraviny nebo obsahovat pufry, látky pro úpravu chuti, barviva a sladidla běžného typu.

Pro podání účinného množství prostředku podle vynálezu je možno využít jakoukoliv dávkovou formu. Může jít například o tablety, kapsle, disperse, suspense, roztoky, kapsle a podobně. Vzhledem ke snadnosti podávání jsou tablety a kapsle nej výhodnější lékovou formou pro perorální podání. Vhodné nosiče pro tyto formy již byly svrchu uvedeny. Mimoto je také možno použít formy s řízeným uvolňováním účinné látky. Nejvýhodnější lékovou formou pro perorální podání však jsou kapsle.

Tablety je možno připravit například lisováním nebo odlitím, popřípadě ve směsi s dalšími pomocnými látkami. Lisované tablety se získají slisováním volně sypného produktu, například prášku nebo garnulátu, popřípadě ve směsi s pojivém, kluznou látkou, inertním ředidlem, smáčedlem nebo dispergačním činidlem. S výhodou je lékovou formou kapsle, obsahující 0,3 g práškových červených kvasinek.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, v nichž jsou uvedeny klinické zkoušky,

-1699 9

9 9 9

9 9

9 9 9 9 9

9 9

9999 99 «

99 • * · · • · · · ··♦ 999

9 • · 99 použité ke sledování účinnosti a bezpečnosti podávání červených kvasinek a jejich výsledky. Je zřejmé, že by bylo možno uskutečnit ještě řadu modifikací, rovněž spadajících do rozsahu vynálezu.

Farmakologické a toxikologické zkoušky prostředků podle vynálezu byly prováděny na pokusných živočišných modelech. Bylo prokázáno, že červené kvasinky dramaticky snižují celkový cholesterol (TC) u endogenně hyperlipidemických králíků, významně snižují TC v séru i triglyceridy (TG) u exogenně hyperlipidemických králíků, brání tvorbě arteriosklerotických plátů a ukládání tuků v játrech u hyperlipidemických králíků a snižují TC a TG v krevním séru u hyperlipidemických křepelek.

Při sledování akutní toxicity nebylo možno stanovit hodnotu LD₅₀.Nejvyšší tolerovaná dávka červených kvasinek u myší je více než 16 g/kg, což je 533-násobek dávek, užívaných při léčebném podávání. Mimoto v jiných pokusech bylo myším nuceně podáváno velké množství červených kvasinek po dobu 4 měsíců. Nedošlo k uhynutí ani ke vzniku žádných nežádoucích příznaků. Hematologické hodnoty, rozbor moči ani pathologicko anatomické sledováníneprokázaly žádné rozdíly mezi pokusnými a kontrolními skupinami zvířat.

V následujících příkladech je posána metodologie a výsledky dvou klinických pokusů na člověku v Číně. Byla sledována bezpečnost podávání červených kvasinek a jejich účinnost na svrchu uvedené chorobné stavy i na úpravu hladiny lipidů a lipoproteínů k krevním séru zkoumaných osob. Byly také ověřovány údaje, popisované v tradičním čínském lékařství.

• 4 4« • · · ·

4 44 * · · 4 4 • · · · »4 44 ·· »r * «4 4 • · · 4 •»4 444 • 4 ·· 44

-17Příkladv provedení vynálezu

Příklad 1: Klinický pokus I

Do tohoto klinického pokusu bylo zařazeno 446 nemocných s hyperlipidemií, trpících rovněž hypofunkcí a poruchami sleziny a přílišným vykašláváním podle tradičního čínského lékařství. Nemocní byli náhodně rozděleni do dvou skupin. Jedné skupině 324 nemocných byly podávány tablety Xuezhikang a druhé kontrolní skupině byly podávány tablety Jiaogulan.

Kapsle Xuezhikang obsahovaly 0,3 g červených kvasinek, kapsle Jiaogulan obsahovaly látku, regulující koncentraci lipidů (Gynostemma pentaphyllum) rostlinného původu na bázi tradičního čínského lékařství.

Kriteria pro výběr nemocných

Všem nemocným s primární hyperlipidemií přestaly být dva až čtyři týdny před začátkem pokusu podávány látky, upravující koncentraci lipidů a nemocní obdrželi stravovací instrukce. Byly odebrány vzorky séra a provedeny laboratorní zkoušky. Do pokusu byli zařazeni pouze nemocní, kteří splnili následující kriteria: celkový cholesterol v séru (TC) vyšší než 230 mg/dl (5,95 mmol/1), koncentrace triglyceridů (TG) vyšší než 200 mg/dl (2,26 mmol/1). Komplex lipoproteinu s cholesterolem s vysokou hustotou (HDL-C) byl u mužů nižší než 40 mg/dl (1,04 mmol/1) a u žen nižší než 45 mg/dl (1,16 mmol/1). Všichni nemocní měli porušenou funkci sleziny a podle tradičního čínského lékařství trpěli přílišným vykašláváním. Mimoto měli ještě další příznaky: slabost končetin, asthenické dýchání, bolest a tlak na hrudníku, ztrátu chuti k jídlu, napětí v žaludeční krajině, bílé nebo purpurové skvrny • · ·

9

-18na jazyku, bílý nebo slizovitý povlak na jazyku, napjatý nebo slabý puls.

Z pokusu byli vyloučeni nemocní s následujícími poruchami nebo onemocněními: infarkt myokardu, cerebrovaskulární onemocnění, závažný chirurgický zákrok nebo poranění v posledních šesti měsících, nefritický syndrom, hypothyreoidismus, akutní a/nebo chronické hepatobiliární poruchy, cukrovka, dna, alergické reakce a psychosy.

Celkový počet nemocných zařazených do pokusu byl 446. V pokusné skuzpině bylo 188 můžu a 126 žen, poměr můžu k ženám byl 1,38 : 1 aprůměrný věk byl 56,0 +/- 9 let. V kontrolní skupině bylo 73 mužů a 45 žen. Podíl mužů a žen byl 1,49 : 1, průměrný věk nemocných byl 56,5 +/- 9,1 let.

Pokusné skupině byly podávány dvě tablety Xuezhikang denně perorálně, dvakrát denně po dobu 8 týdnů. Kontrolní skupině byly podávány tři tablety Jiaogulan dvakrát denně perorálně rovněž 8 týdnů. Žádný z nemocných nezměnil svůj životní styl ani zvyky.

Po čtyřech a osmi týdnech od začátku pokusu byla stanovena hmotnost, krevní tlak, srdeční frekvence, ekg a běžné fysikální vyšetření. Z laboratorních zkoušek byly stanoveny: množství dusíku v krvi, pocházející z močoviny (BLTN), kreatinin, transamináza kyseliny glutaminpyrohroznové v séru (SGPT, ALT), množství glukosy a kreatininkináza (CK).

Ke stanovení lipidů a lipoproteinů v séru byly odebrány vzorky žilní krve nemocným, kteří byli vyzváni, aby 12 hodin před odběrem nic nejedli, nepili alkoholické nápoje a jako poslední jídlo nepožili potraviny s vysokým obsahem tuku. Sérum bylo okamžitě odděleno a uloženo do analyzy při -20 • ·

-19°C. Bylo určeno TC, TG a HDL-C a hodnota LDL-C byla vypočítána ze vzorce LDL-C = TC-HDL-C-(TG/2,2).

Účinnost byla vyhodnocena podle kriterii, uvedených v publikaci Clinical trial management: hyperlipidemia treat5 ment using new Chinese materii medica Ministerstva zdravotnictví Čínské republiky následujícím způsobem:

1. Vyléčení: Všechny příznaky vymizely nebo byl souhrn příznaků omezen o více než 90 % a všechny výsledky laboratorních zkoušek se vrátily k normálním hodnotám.

2. Dobrá účinnost: Příznaky byly významně zlepšeny, clkový souhrn příznaků byl omezen o 70 až 89 %. Koncentrace lipidů a lipoproteinů se nevrátila k normálním hodnotám avšak zlepšila se alespoň jedním z následujících způsobů: 1) snížení TC o alespoň 20 %, 2) snížení TG o alespoň 40 %, 3) sníže15 ní (TC-HDL-C)/HDL-C o alespoň 20 %, 4) zvýšení HDL-C o více než 10 mg/dl.

3) . Zlepšení: Příznaky se zmírnily o 30 až 69 %. Došlo ke snížení koncentrace lipidů a lipoproteinů alespoň v jednom z následujících ukazatelů: 1) snížení TC o 10 až 20 %,

2) snížení TG o 20 až 40 %, 3) snížení (TC-HDL-C/HDL-C o alespoň 10 % avšak méně než 20 %,'4) zvýšení HDL-C o více než 4 mg/dl(0,14 mmol/1), avšak o méně než 10 mg/dl.

4) Bez účinku: Souhrn příznaků se zmírnil o méně než 30 % a výaledky laboratorních zkoušek neodpovídaly svrchu uvedeným podmínkám.

Všechny údaje byly statisticky zpracovány. Byl užit Studentův test pro naměřené údaje,Chi² pro výpočty výsledků, Riditova zkouška a U graf pro procentuální analýzu. Výsledky jsou uvedeny v následujících tabulkách:

• · • · • ·

T—( ctí λ:

i—I n

ctí

E-i

Srovnání účinnosti

^ri 1 c		Cl m C\	50,8
>tn 0- CD rH N	c	302	62
4-> 'Ctí (C		79.7	31.1
Celkov účinno		258	CO ΓΟ
Neúčinné	<w>	8*9	49.2 1
c	22	60
Zlepšení	«¥>	13.5	19.7
c	44	24
Účinnost i	oď	27.5	20,5
c	89	25
Vyléčení	<#f>	52.2	10,7
c	169	13
Počet případů		324	122
	Pokusná	Pokusná skupina	Kontrol. skupina

Koncentrace lipidů ·, a llpoproteinu v séru po léčení-

Změna v	A°	* * n CS 1	* * Γ 1	-36.5**	-14.6**	* * CO « Ch r-t	8.6**	-28.5**	* * co 1	·* * CS -· Tř m 1	* * CP • o rH 1
O £.	rd	CO	CP	CO	n			cn	co	KD	CS
Ό	•	•	•			•	•		tn
a o		oj	co		CS	>	cn	CO	CS		•
o	CP	co	H					’Τ		o	o 1
H C Ή Ό Ό S>>	£	1	1		1			t	l
to -P o
rrť co
> ctí	<w>	•K * fO •	* * σι	* * •s· •	* tn •	* * co	* tn	* * tn •	* *	* r*	* * •
C >o		o* H	t	CS CS	CP 1	rH	OJ 03	tn 1	OJ	co »
E		I						1	1
N
o £	rH	Ťř	03	cn	tn			tn			<P
du O	Ό	«	•	•	*	CS	co	•	OS		cn
o		r-	ΓΊ	\D	r-	•	•	KD	t		•
r-l d	CP		i—(	CD	OJ		w	cn 1		o
Ρ Ό Ό '>>	e	1	1	1	1					I
co +0
O ce;
	ca -H	O	TT • tn	tn • tn	s *	•	o •	2.4	rs « CP	'tf	rH 0*
Ή >>	rd	n	CS		w			tn	«tr
d -p	d Ό	+1	-H	+1	r-	+1	+1	+1	+1	+1 CP CO	+1 CP r~
O O ><D o d E 5* > t«3 s	tn • cn	CS • co	o • có	+1 CP co	CP tn	H • tn	CS * CS	m • r~-
Op o	d	r-	co	CP	Ol	n	cn	CO	tn
Pu ď	cu	OJ	CS	CS				1-t	H
op
Ό				cn	CS I	H	tn tn	s·	CS		rs
Počet přípa		tn CS	o\	co H	OJ H	OJ cn	03 rM	OJ cn	OJ rM
					's—i		'Ή		<Η		^ri
		'Ctí	d	'Ctí	d	'Ctí	d	'Ctí	d	'Ctí	d
cd		C	r-l	d	t-4	d	rH	d	rH	d	r—|
£		to	O	co	o	co	o	<0	o	to	o
		P	Su	P	Su	P	Su	P	d	P	d
ÍX		1tí	•P	1tí	-P	1tí	-P	1tí	•P	1tí	-P
p		0	c	0	d	0	d	0	d	o	d
1tí		Pu	0	Pu	0	PL.	0	Pu	o	Pu	o
ta				ítí		ití		ití
										□
d						u		o		1	u
-P		o		o			I		dl	1
CD				►d		td		a	td
§		E-l		E-*		a		a		X	a
cd						X		•d		1	X
d										O
ctí										&»
Pu

• -ιω + > + <d ° ° OJ o o >>v v > a. cu p .. ..

4)...-. E ,-t tn ctí o o d · ·

P O O - V — cu α

-f- »· ..

+

-22• · · · «· · · · · • · · · · · · · · • · · · · · · · · · · · · ť·· · · ·· ··

V tabulce I je shrnuto celkové skoré účinnosti, které je pro pokusnou skupinu daleko vyšší než pro skupinu kontrolní (Chi² = 9,7 a p je menší než 0,001).

Procento nemocných, udávajících vymizení chorobných příznaků podle tradičního čínského lékařství je v pokusné skupinědaleko vyšší než ve skupině kontrolní (p je menší'než 0,05 až 0,001). Šlo zejména o následující příznaky: stav jazyka (bělavé nebo purpurové skvrny na jazyku nebo silný slizový povlak), puls (napjatý nebo slabý), pocit tlaku na hrudi, ztráta chuti k jídlu, pocit plynatosti a otoky. .

Pokud jde o koncentraci lipidů a lipoproteinů v séru, je účinnost při snižování koncentrace celkového cholesterolu a triglyceridů v séru vyšší než u kontrolní skupiny. Hodnocení úpravy koncentrace HDL-C a atherosklerotický index byly rovněž výhodnější v pokusné skupině než ve skupině kontrolní (p je menší než 0,001).

Z tabulky 2 je zřejmé, že jak v pokusné, tak v kontrolní skupině došlo ke značným žádoucím změnám v koncentraci TC, TG, (TC-HDL-C)/HDL-C a také HDL-C. Účinnost tablet Xuezhikang byla přitom vyšší než účinnost Jiaogulan.

Bylo rovněž pozorováno, že čím vyšší byla počáteční koncentrace TC a TG v séru, tím vyšší bylo její snížení po podání tablet Xuezhikang. V případě koncentrace HDL-C bylo dosaženo většího zvýšení u nemocných s nižšími počátečními koncentracemi této látky.

• · • ·

CO

Ctí Λί t—ι η

ctí

ΕΗ co • · ·· ·· ··· ··I • · · · · <

• * · · ·· · · μ· ιη o

-3·

CO in

Μ

ΓCM co in cn οο

0C η

η» ρ

co »

CN •Μ'

ΓΜ

CN «

r* n

vo

H

CM oč

Μ·

CS

CM

CM tn co

ÍM

Ο

Μ· σ>

σ» co •

C*

Ρ

CM co «3· τΗ ιη

Γ

CM

C0

Ο

CM

CM

C0 ιη

Ρ οο >Φ

Ρ

Ο

C

Ό

Ο χ:

σ* σι ο

ο η

I ο

co

CM ο

η

CM

V

Ρ	00	cn	rH	D
•	•.	•	•	•
C	σ	r4	VO	Φ
CM	C0	(Ν	C0	(Ν
η	=>	=9	=»	=»
00	ιη	CN	σ»	τΗ
•	•	•	«	··
Ρ	CN	ΛΟ		(Ν
C0	ττ	rM	ιη	CN
CM		=>	=>
00	ιη	σ\	χο	η
•	•	•	•	•
Γ	ο	ο	ο	CO
C0	CM	τ-4	η	Ρ
Ρ	=»	=>	w

Ο >

«3 ft >>>>ω ρρ >

ο ο c c Ό Ό Ο Ο £3 'Ή '«Η β β

Ρ

Ο

Ο •

Ο

V ft φ φ >ω>Ν '>>Ή > β Cd Cfl •κ *

ft

Ή
>β	'β
ft	β Ή β
	β Cd Ρ
Ρ	>Φ Ο Ο
φ	ε χ β
>ϋ	»3 ϋ 3
ο	β '>ι Ο
ft	ft > X

ο. ο Φ >

•Η C Ή Ό Ό ψ>>

Μ -Ρ >0) ο ε

Ctí θ’ Cd

Ctí c

Ο £ ft Ο Φ C Ό '>>

Ρ >φ ε ctí

C tó CO Ν 'Ctí'Ctí β β φ φ

β β

ο ’ · ο

V ft *

-25Pokud jde o účinek Xuezhikang na apolipoprotein A-I (apoA-I) a apolipoprotein B (apoB), byly koncentrace apoA-I v séru zvýšeny po ukončení léčby u obou skuppin. Statisticky významného zvýšení apoA-I bylo dosaženo po čtyřech týdnech léčení. Koncentrace apoB byla naopak u obou skupin poněkud snížena, rozdíl však nebyl statisticky významný. V případě pokusné skupiny bylo dosaženo příznivějších výsledků než v případě skupiny kontrolní.

Bylo rovněž možno prokázat významné změny v sedimentaci a koncentraci draslíku u obou skupin po léčení (p je menší než 0,05 až 0,01). U léčené skupiny však bylo možno prokázat lepší výsledky než u skupiny kontrolní (p je menší než 0,05 až 0,01).

U všech 446 nemocných byly před provedením testu a po něm stanoveny následující hodnoty: koncentrace dusíku, pocházejícího z močoviny v krevním séru (BUN), kreatinin, transamináza kyseliny glutaminpyrohroznové v séru (SGPT, ALT), glukosa v séru a kreatininkináza v séru, mimoto byla provedena běžná laboratorní vyšetření krve a moči. Po ukončení teatu nebylo možno prokázat žádné klinicky významné změny.

Několik nemocých si stěžovalo na pocit pálení v žaludku (6 osob, 1,8 %), pocit plnosti žaludku (tři nemocní,

0,9 %) a obluzení (jeden nemocný, 0,3 %). Všichni test ukončili a všechny uvedené příznaky vymizely bez léčení. U dvou nemocných, jimž byly podávány tablety Xuezhikang se vyvinula gastritis a podávání tablet bylo přerušeno. Všechny výsledky prokazují, že tablety Xuezhikang s obsahem červených kvasinek jsou bezpešným prostředkem k léčení a prevenci uvedených onemocnění.

-26• · · · · • ·

Diskuse

V průběhu uvedených klinických zkoušek byla jako positivní kontrola užitá látke pro úpravu koncentrace lipidů v krvi podle tradičního čínského lékařství. Mezi oběma skupinami nebyly žádné rozdíly (p je menší než 0,05) ve věku, pohlaví, průběhu choroby ani koncentrace lipidů a lipoproteinů v séru. Účinnost ve skupině, jíž byly podávány tablety Xuezhikang byla daleko vyšší než u kontrolní skupiny (p je menší než 0,001). Ve srovnání s výchozími hodnotami se u skupiny, jíž byly podávány tablety Xuezhikang zvýšila koncentrace lipoproteincholesterolu s vysokou hustotou o 19,6 %, celkový cholesterol se snížil o 23 %, celkové triglyceridy se snížily o 36,5 %, lipoproteincholesterol s nízkou hustotou o 28,5 % a atherosklerotický index o 34,2 %. Bylo rovněž pozorováno, že čím vyšší je odchylka koncentrace lipidů a lipoproteinů od normální hodnoty, tím vyšší účinek je možno očekávat při léčení tabletami Xuezhikang. Tyto tablety také snižují koncentraci apolipoproteinu B a zpomalují sedimentaci.

Celkově výsledky prokazují, že červené kvasinky jsou bezpečným a účinným prostředkem pro úpravu koncentrace lipidů a lipoproteinů v krevním séru. Je také možno je užít k léčení onemocnění koronárních tepen a cerebrovaskulárního onemocnění, vyvolaného hyperlipidemií a/nebo atherosklerosou vzhledem k tomu, že tyto kvasinky nejen podstatně snižují koncentraci TC, TG a atherosklerotický index, nýbrž také významně zvyšují koncentraci apolipoproteinu A-I v krevním séru u člověka.

Příklad 2: Klinický pokus II

-27• · ··«· ···· • · · · ·· ·· ····« • · « · · · · · ··· ·♦·· ·· «» «· ··

Do tohoto klinického pokusu bylo zařazeno 84 nemocných s hyperlipidemií a 56 nemocných, u nichž byla také diagnostikována atherosklerosa. Tito nemocní byli rozděleni do dvou skupin: pokusné skupiny, jíž byly podávány kapsle Xuezhikang a kontrolní skupiny, jíž byly podávány tablety Jíaogulan.

Kriteria pro výběr nemocných

U všech nemocných byla prokázána hyperlipidemie podle kriterií, uvedených v publikaci Clinical trial management: hyperlipidemia treatment using new Chinese materia medica ministerstva zdravotnictví Čínské republiky. Po úpravě stravy po dobu dva až čtyři týdny byla nemocným se vzýšenou hladinou lipidů a lipoproteinu po dobu dvou týdnů jednou týdně před pokusem odebrána krev. Do pokusu byli zařazeni jen ti nemocní, kteří splnili následující kriteria: celkový cholesterol v séru (TC) vyšší než 230 mg/dl (5,95 mmol/1), triglyceridy (TG) vyšší než 200 mg/dl (vyšší než 2,26 mmol/1). Lipoproteincholesterol s vysokou hustotou (HDL-C) byl u.mužů nižší než 40 mg/dl (1,04 mmol/1) a u žen nižší než 45 mg/dl (1,16 mmol/1).

Do pokusu byli zařazeni také nemocní se sníženou funkcí sleziny, trpící ztuhlostí končetin, asthenickým dýcháním, bolstí nebo tlakem na hrudníku, ztrátou chuti k jídlu, pocitem plynatosti nebo otoku v žaludeční krajině, bílými nebo purpurovými svrnami na jazyku, bílým nebo slízovitým povlakem jazyka a napjatým nebo slabým pulsem. Hodnocení klinických příznaků

Závažnost příznaků byla podle tradičního čínského lékařství hodnocena podle následující stupnice:

-2810 • · · · · · · · • · · · · · · · ♦ t • 9 9 9 9 9 9 9 9

99 99 99 9 99 999

9 9 9 9 9 9

9 999 99 99 99 9 9

Asthenické dýchání

	0	nevyskytuje	se	(-)	bez athenického dýchání
	2	lehké		( + )	asthenické dýchání při tělesné
					námaze
	3	střední		(++)	závažnější asthenické dýchání
					při námaze
	4	závažné		(+++)asthenické dýchání v klidu
Ztuhlost	končetin
	0	nevyskytuj e	se	(-)	bez ztuhlosti
	2	lehká		( + )	občasná ztuhlost
	3	střední		(++)	častá ztuhlost
	4	závažná		(+++:	)závažná trvalá ztuhlost
Bolest	a	tlak na hrudníku
	0	nevyskytuje	se	(-)	bez bolesti a tlaku
	2	lehká		( + )	občasná bolest a tlak
	3	střední		(++)	častá střední bolest a tlak
	4	závažná		(+++)závažná bolest a tlak v klidu
Ztráta	chuti k jídlu
	0	nevyskytuj e	se	(-)	normální chuť k j ídlu
	2	lehká		( + )	snížení o 1/4 až 1/3
	• 3	střední		(++)	snížení o 1/3 až 1/2
	4	závažná		(+++)snížení o více než 1/2
Pocit	plynatosti a napětí	v břiše
	0	nevyskytuj e	se	(-)	příznak se nevyskytuje
	2	lehký		( + )	příznak se občas vyskytuje
	3	střední		(++)	příznak se vyskytuje často
	4	závažný		(+++)příznak se vyskytuje velmi

často ve značné intensitě ·· 00 0·

000 0 0 00 0

0 · · 00

0 0 0 0 0 0

0 0 0 0 0

0000000 00 00

-290 0 0

0 0 •00 000 (-) (+)

Vzhled jazyka

O normální 1 abnormální

Puls normální 1 abnormální

Hodnocení příznaků:

lehké: méně nebo rovno 12 střední: 12 až 20 závažné: více než 20.

Do pokusu byli zařazení nemocní, kteří splnili uvede15 ná kriteria tradičního čínského lékařství a nemocní s primární hyperlipidemií.

Z pokusu byli vyloučení nemocní, u nichž byla prokázána následující onemocnění:

a: infarkt myokardu, cerebrovaskulární onemocnění, závažné poranění nebo chirurgický zákrok v posledním půl roce před provedením pokusu, b: nefritický syndrom, hypothyreoidismus, akutní nebo chronické hepatobiliární poruchy,cukrovka, dna, c: familiární hypercholesterolemie (monogenová hyper25 cholesterolemie) d: sekundární hyperlipidemie, vyvolaná působením léků, jako jsou fenothiazin, beta-adrenergní blokátory, kortikosteroidny nebo perorální antikoncepční prostředky, • ♦

-3010 e: nemocní, kteří užívali v posledních čtyřech týdnech jiné modulátory koncentrace lipidů, nemocní, jimž je podáván heparin a nemocní, léčení hormonem štítné žlázy, f: těhotné a kojící ženy, g: nemocní s poruchami dalších orgánů, h: psychotičtí nemocní.

Celkový počet nemocných, zařazených do pokusu byl 116, 84 nemocných v pokusné a 32 nemocných v kontrolní skupině. Mezi oběma skupinami nebyly žádné rozdíly v distribuci podle věku, pohlaví a příznaků choroby.

Pokus byl prováděn tak, že pokusné skupině (84 případů) byly podávány dvakrát denně dvě kapsle Xuezhikang, obsahující červené kvasinky podle vynálezu. Kontrolní skupině (32 případů) byly podávány dvakrát denně tři tablety Jiagulan ( výrobce ShanXi, Chinese materia medica, šerže 940730). Pokus trval osm týdnů.

Před zahájením léčení bylystanoveny koncentrace lipidů a lipoproteinů v séru a byly vyhodnoceny další příznaky. Totéž hodnocení bylo provedeno po čtyřech a po osmi týdnech. Kontrolní zkoušky na bezpečnost podávání byly provedeny před zahájením pokusu a po jeho ukončení.Vzorky žilní krve byly odebírány nemocným před snídaní, přičemž poslední jídlo neobsahovalo alkohol ani vysoké množství tuků.

Byly stanoveny následující hodnoty: dusík v krvi a moči (BUN), kreatinin, transamináza kyseliny glutaminpyrohroznové v séru (SGPT, ALT), glukosa v séru a kreatininkináza (CK). K průkazu účinnosti byl měřen celkový cholesterol v séru (TC), celkové triglyceridy v séru (TG) a množství lipoproteincholesterolu s vysokou hustotou. Byly zaznamenávány také obvykle sledovyné klinické parametry, jako hmotnost, ·Μ 9

-31·♦ · 9 9 9 9 9 • 9 9 · · 9 9 · • 9 99 9999 •9 9 9 · * 9«* 99«

9 9 9 · ·

99·9 ·9 9« krevní tlak, srdeční frekvence a rytmus a byla zaznamenána případná hepatosplenomegalie.

Účinnost

Účinnost byla vyhodnocena podle kriterií, uvedených v 5 publikaci Clinical trial management: hyperlipidemia treatment using new Chinese materii medica Ministerstva zdravotnictví Čínské republiky následujícím způsobem:

1. Vyléčení: Všechny příznaky vymizely nebo byl souhrn příznaků omezen o více než 90 % a všechny výsledky laboratorních zkoušek se vrátily k normálním hodnotám.

2. Dobrá účinnost: Příznaky byly významně zlepšeny, clkový souhrn příznaků byl omezen o 70 až 89 %. Koncentrace lipidů a lipoproteinů se nevrátila k normálním hodnotám avšak zlepšila se alespoň jedním z následujících způsobů: 1) sníže15 ní TC o alespoň 20 %, 2) snížení TG o alespoň 40 %, 3) snížení (TC-HDL-C)/HDL-C o alespoň 20 %, 4) zvýšení HDL-C o více než 10 mg/dl.

3) . Zlepšení: Příznaky se zmírnily o 30 až 69 %. Došlo ke snížení koncentrace lipidů a lipoproteinů alespoň v jednom z následujících ukazatelů: 1) snížení TC o 10 až 20 %,

2) snížení TG o 20 až 40 %, 3) snížení (TC-HDL-C/HDL-C o alespoň 10 % avšak méně než 20 %, 4) zvýšení HDL-C o více než 4 mg/dl(0,14 mmol/1), avšak o méně než 10 mg/dl.

4) Bez účinku: Souhrn příznaků se zmírnil o méně než

30 % a výaledky laboratorních zkoušek neodpovídaly svrchu uvedeným podmínkám.

Všechny údaje byly statisticky zpracovány. Byl užit Studentův test pro naměřené údaje,Chi² pro výpočty výsledků a Ríditova zkouška.

-32V následující tabulce 5 je uvedeno srovnání celkové účinnosti pro obě dvě skupiny.

r:

Tabulka 5: Účinnost

Skupina	Počet	Vyléčení	Účinnost	Zlepšení	Neúčinné
Pokusná	84	39	25	13	7
kontrolní	32	3	6	4	19

Riditova analysa: u = Srovnání: Chi² = 0,0,

5,18, p je menší než 0,01 p je větší než 0,05.

Skoré celkové účinnosti u pokusné skupiny bylo dálko vyšší než skoré u skupiny kontrolní (Chi² = 22,95, p je menší než 0,01).

V následující tabulce 6 je uvedeno srovnání účinnosti podle standardního hodnocení tradičního čínského lékařství.

Z tabulky je zřejmé, že procento nemocných, uvádějících úplné vymizení příznaků podle tradičního čínského lékařství bylo v pokusné skupině daleko vyšší než ve skupině kontrolní (p je menší než 0,05), zvláště pokud jde o bolest a tlak na hrudníku, ztrátu chuti k jídlu, plynatost a napětí v žaludeční oblasti a purpurové svrny na jazyku44 4 ·

4 • 4

4

44« 4444

I’

444 ·« 44 » 4* 4 » 4 44 » 4 4 4

I 4 4 4

4 • 4

*P<0.05 vs kontrola

-34V následující tabulce 7 jsou uvedeny hodnoty pro cel kový cholesterol.

♦ ·· ·· 9· ·· ·· ···· 9 9 9 ♦ ···· • · 4» 9 · · · · · · « 9 9 9 99 « « 999 999

9 9 9 9 · 9 ·

999 9999 99 9· 99 ··

	T a	bulka	7
Skupina	Počet abnorm.	Vyléčeno	Snížení	Snížení	Snížení
	případů		nad 20%	10-20%	pod 10 %
Pokusná	75	53	9	5	9
Kontrolní	28	4	0	2	22
Riditova	analysa: u = 5,	47, p je	větší než	0,05

Poměr účinnosti: Chi²=39,96, p je menší než 0,001.

Celkové skoré vyléčení a snížení cholesterolu v séru bylo u pokusné skupiny vyšší než u kontrolní.

Změny celkových triglyceridů v séru jsou uvedeny v následující tabulce 8.

Tabulka

Skupina Počet abnorm.

případů

Pokusná 35

Kontrolní 13

Vyléčeno Snížení Snížení Snížení nad 20% 10-20 % pod 10 %

2 5 9

2 1 4

Riditova analysa: u = 0,53, p je větší než 0,05,

Poměr účinnosti: Chi² = 0,007, p je menší než 0,05

Nebylo možno prokázat statisticky významné rozdíly mezi účinností na koncentraci celkových triglyceridů v krevním séru v obou skupinách.

Změny koncentrace lipoproteincholesterolu s vysokou hustotou v krevním séru jednotlivých skupin jsou uvedeny v následující tabulce 9.

-35»♦ ** 99 ** ·· * · · ♦ · · « · » ♦ · · ·♦ 9 9 9 9 * · · · · · 999 999 > · 9 9 9 9 9

9 99 9· · φ ··

Snížení Snížení Snížení nad 20 % 10-20 % pod 10 ‘ 3 9

6

Tabulka

Skupina Počet abnorm. Vyléčeno případů 4 4

Pokusná 24 11

Kontrolní 10 3

Riditova analysa: u=l,03, p je větší než 0,05 Poměr účinnosti: Chi² = 1,15, p je menší než 0,05

V obou skupinách bylo možno pozorovat srovnatelnou účinnost.

V tabulce 10 jsou uvedeny změny atherosklerotického indexu (TC-HDL-C)/HDL-C.

Tabulka

Skupina Počet abnorm. Vyléčeno Snížení Snížení Snížení případů 4 4 nad 20 % 10-20 % pod 10 %

Pokusná 56 44 6 33

Kontrolní 14 3 1 2 8

Riditova analysa: u = 3,84, p je větší než 0,01

Poměr účinnosti Ch² = 23,41, p je menší než 0,01

Z tabulky 10 je zřejmé, že i když u. obou skupin došlo ke zlepšení, bylo zlepšení v pokusné skupině daleko vyšší.

V tabulce 11 je uveden účinek Xuezhikang na úpravu lipidů a lipoproteinů v séru (X+/-S).

Z tabulky je zřejmé, že Xuezhikang zlepšuje TC, TG, (TC - HDL-C)/HDL-C, v kontrolní skupině však došlo pouze k významnému zlepšení TG. Účinek Xuezhikang na TC a LDL-C je vyšší než účinek u kontrolní skupiny.

V tabulce 12 je shrnut účinek Xuezhikang na koncentraci lipidů a lipoproteinů v séru při různých počátečních koncentracích těchto látek.

r-1

Ctí

Λί rp &

ctí

Η ·· .· * · * · • · ·.

» · · · • · · « ·· ··

rH Ό σ> Ε. 0 I XI ο XI

ιΡ • CO χΡ + Ρ» χρ Γ- Η

141.4+477.6***

>*» cn • cn cn

<#> rH • rH =>

126.8+39.6***

% ·«. cn • σι χρ

<Ν> • Ρ» CM =»

ΙΟ • ιη η + cn ΧΡ CO fp

171.6+42.3

<x> cnš

168+45.5

4.11 »2.5%

Ρ CD 0 ' >Ο Ή 0 >β ,

ΧΡ CO

CM Π

*

co

K

«κ

cn

l

cn

•

•K

oV>

co

οΥ>

•

•

«X»

»

<w>

□ γΗ

*3*

σ>

=♦»»

<n

00

<0

cn

cn

CM Ό

t

co cn

1 Ό

+1

+1

CM

•

*

•

+1

+1

O O

+1

cn xp

X

η

tn

•

rH

0-

cn

cn

cn

• ·

cn

• ·

α cn

•

T3*

γΗ

+1

νο

γΗ

•

«

o o

•

CM CO

χ ε

tn m

cn cn

<=

rH • OJ

¢=

ιη cn

in cn

s»

co cn

<s=

«ςρ

<9 ’0 >Ο Ή 0

xp CM

•

O H

*

«Κ

*

CO

Ol

*

rH

-n·

rH

γΉ

•

·.

JP

κ

cH>

•

<#(>

Ό

Ό

H

co • cn cn

0J

co Ρ* <η

ο\

Ol

•

cw>

co

cn e_

co +1 fp •

OJ rH -H rn

rH « rH rH

Γ~ +1 ιη •

ο • οι η

0* +1 rH •

o +1 co

> vo • · Γ* OJ

co +1 r- •

1 * \O CM

ο

•

0*

Tř

co

s»

o

o

ο

0\

-O

OJ

£<

co

t

OJ

OJ

cn

OJ

OJ

<9 0 >Ο Μ-ί

in

cn

Ο )Ρ 0 0

cn

r4

rH

<n

Τ'·

cn

rp Ό tn Ε υ

xp cn +1 cn • cn P-

• in cn +1 cn • cn in

* * * in cn

Λ® Ρ~ CO • cn r4 =»

• cn cn Ή 0* • V0 ιΗ

* * * Μ Ρ> ιη

Λ» fp σι • ο CM =»

in CM +1 xp » in Ό CM

• cn cn -H vo • CM

A° CM Γ' ·' » > OJ

00 in cn +1 in Ό CM

<w> in cm • * o o

Ε-»

oj

CM

CM

CM

,-Ρ · <9 0

KO

CO

>Ο Ή 0 >Ρ 0 0

P>

CM

£

>>

»3

X

>>

®3

'•E

c

C

'Ή

β

β

Ή

N

Ό

Ό

N

Ό

Ό

β

O

O

'>>

ctí CU

£

+>

-Ρ

£

P

•P

£1 >Ρ

O

o

ο ><υ

xp

00

•n·

co

0 6

>

> «

ctí

>.ctí

r—1.

β

β

o

*Η

W

0

3

•P

3

β

o

o

ω

0

ctí

-Ρ

Ο ο

χ:

Ή

Ν

Ο χ:

ο '>>

>

ω >

·*. · τ-ι ω ο > ο ν ιη

Ο * · * Ο V ·— 0 τΡ

Ο Xο ιη • ο ο ν ο ν 04 * =«= * •Ή Ή β β (U φ >ω >ν '>1Ή > ζ

μ. ta ου rH

CÚ

H

X) ctí in cn

V <N tj· tn

CM co co cn tn o

•

M*

CM cn cn •

o

M*

9* • 9 9 9

9

9

9

99» 9999 ct

CO co

CM

9 9

9 9 9

9 99

9 9 9 9

9 9 9

99

999 '9 «-Η

Ό ϋ*ί e

σ

Ot g

σ σ>

tn

I tn cn tn aT

A o

o cn

Λ o

o cn l

o cn

CM

O cn

CM

O o

cn

Λ

O

O cn

O cn

CM

O cn

CM

V p

P a>

p ctí

Ct rr

Ct

CO tn tn tn r·!

o

CM

Ct

3· to

T-t

O to co

Ό ctí

O.

>p

q.

-p

0) >o o

Ph. cl,.

o n· to tn cn r*

CM n

tO

Γ rf

CM cn m* cn pCM cn co to

CM

CM

Ct r-i

-ctí—

-p o

c

Ό

O

Jp

Ή P

N ><V o ε £«p O P >> a >· cn

M* tn tn ct tn •

o to cn «τ to «

CM

O

CM

M·

CO

M· cn tO in

CM

Γ'

CM to

CM

CM

M·

Γ~ r-i co to

CM rco to

CM to r-t

Ot ctí

C >CD >>

ε c ν π 'Cti -p c .

P xř )£> ε op ^3. P

CL, >

to «3*

CO m

• n* tn

CO

CO tn tn

CM rH tn •

Ct to

H

CO cn ct rH i“t to co

H

H •

Ό

H tn co

Ct cn cn ct tn o

• tn r-i cn ot

M·

CM r-i cn cm in co o

CM

CO o

• to tn ctí ><D op ε c

Ν Ό . '>5 'Ctí P c

P 00 ><D ε

•P3S.

P

ÍP >

cd rH o

P

-P c

o to >

r-i

O o

• o

v

CP *

o •

o v

cu *

* • ·· ·· ·· ·· • •9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 99 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 999 999

9 9 9 9 9 9 ·

Z tabulky 12 je zřejmé, že čím vyšší je počáteční koncentrace TC a TG v séru, tím vyššího snížení je možno dosáhnout při podávání Xuezhikang.

Diskuse

Z výsledků je zřejmé, že skoré vyléčení a skoré účinnosti bylo 46 % (38/64) a 29,8 % (25/84) u skupiny, jíž byly podávány kapsle Xuezhikang a 9,4 % (3/32) a 18,8 % (6/32) u kontrolní skupiny. Celkové skoré účinnosti 72 % pro pokusnou skupinu ja daleko vyšší než pro skupinu kontrolní (28,2 %, p je menší než 0,001).

Statisticky významné rozdíly mezi oběma skupinami jsou při tlepšení TC, LDL-C a (TC- HDL-C)/HDL-C, rozdíl však nebylo možno prokázat v případě TG a HDL-C, i když výsledky při použití Xuezhikang byly lepší.

Po uvedené době léčení nebylo možno prokázat změny v následujících ukazatelích: transamináza kyseliny glutaminpyrohroznové v séru (SGPT),dusík v krvi a moči (BUN), kreatinin, glukosa v séru, ekg a rutinní hodnoty v krvi a moči. Ve třech případech došlo ke zvýšení kreatinkinázy (CK) na 252,

260 a 466 jednotek/1 oproti normální hodnotě 200 j/1 v pokusné skupině a v jednom případě (256 j/1) v kontrolní skupině.

V žádném z těchto případů nebyly přítomny žádné klinické příznaky. Je zřejmé, že červené kvasinky podle vynálezu jsou bezpečným prostředkem pro úpravu hladiny lipidů v krevním séru.

Je zřejmé, že by bylo možno navrhnout ještě řadu modifikací a změn, rovněž spadajících do rozsahu vynálezu.

Claims (36)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Farmaceutický prostředek nebo doplněk výživy pro perorální nebo parenterální podání u člověka, vyznač u-j í c í se t í m, že jako svou účinnou složku obsahuje produkt fermentace červených kvasinek.
2. 2. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že prostředkem pro perorální podání je kapsle, tableta, nebo oplatka.
3. 3. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že prostředkem pro perorální nebo parenterální podání je suspenze, roztok nebo jiný vhodný kapalný systém.
4. 4. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále obsahuje pomocné složky nebo nosič.
5. 5. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jeden vitamínový doplněk nebo látku pro úpravu chuti.
6. 6. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje přibližně 600 mg fermentačního produktu červených kvasinek v jednotlivé dávce.
7. 7. Prostředek podle nároku 1 nebo 6, vyznačuj ící se t í m, že obsahuje fermentační produkt, získaný z fermentace alespoň jedné čeledi Monascus.
8. 8. Prostředek podle nároku 1 nebo 6, vyznačuj ící se t í m, že obsahuje fermentační produkt, získaný ze směsi Monascus purpureus Went a alespoň jednoho jiného kmene Monascus.

   • · 4
9. 9. Prostředek podle nároku 1 nebo 6, vyznačuj ící se t í m, že obsahuje fermentační produkt, získaný fermentací Monascus purpureus Went, kmen M4027, M4028 nebo M4184.
10. 10. Fermentační produkt červených kvasinek, vhodný pro perorální podání u člověka, získatelný způsobem, při němž se

    a)podrobí fermentaci alespoň jedna čeleď Monascus purpureus Went a neklíhovitá rýže, načež se b) živné prostředí slije a c)získaný produkt se sterilizuje parou.
11. 11. Fermentační produkt získatelný způsobem podle nároku 10, při němž se produkt dále suší.
12. 12. Farmaceutický prostředek nebo doplněk výživy v jednotkové formě, vhodný pro perorální nebo parenterální podání u člověka, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství produktu fermentace červených kvasinek.
13. 13. Prostředek podle nároku 12, vyznačující se tím, že prostředkem pro perorální podání je kapsle, tableta nebo oplatka.
14. 14. Prostředek podle nároku 12, vyznačující se tím, že prostředkem pro perorální nebo parenterální podání je suspenze, roztok nebo jiný vhodný kapalný systém.
15. 15. Prostředek podle nároku 12, vyznačující se t í m, že dále obsahuje pomocné látky nebo nosič.
16. 16. Prostředek podle nároku 12, vyznačující se tím, že dále obsahuje nejméně jeden vitaminový doplněk nebo látku pro úpravu chuti.

    • 0 • 0

    0 0 0 0 0

    0 0 0000 0 0 *00 0 • 0 0 • 0 0 0

    0 0 0

    00 0
17. 17. Prostředek v pevné formě, s obsahem jednotlivé dávky, vhodný pro perorální podání u člověka, vyznačuj ící se t í m, že obsahuje přibližně 300 mg plného fermentačního prostředí Monascus purpureus Went.
18. 18. Prostředek v pevné formě, s obsahem jednotlivé dávky, vhodný pro perorální podání u člověka, vyznačuj ící se t í m, že obsahuje přibližně 600 mg plného fermentačního prostředí.Monascus purpureus Went.
19. 19. Prostředek podle nároků 12, 17 nebo 18, vyznačující se tím, že produkt fermentace červených kvasinek pochází z fermentace nejméně jedné čeledi Monascus.
20. 20. Prostředek podle nároků 12, 17 nebo 18, vyznačující se tím, že produkt fermentace červených kvasinek pochází z fermentace směsi Monascus purpureus Went a alespoň jednoho dalšího kmene Monascus.
21. 21. Prostředek podle nároku 12, 17 nebo 18, vyznačující se tím, že produkt fermentace červených kvasinek pochází z fermentace Monascus purpureus Went, kmene M4027, M4028 nebo M4184.
22. 22. Použití fermentačního produktu červených kvasinek, pocházejícího z jednoho nebo většího počtu kmenů Monascus purpureus Went ze skupiny M4027, M4028 a M4184 pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení nebo prevenci poruch kardiovaskulárního systému u člověka.
23. 23. Použití podle nároku 22, při němž je kardiovaskulární poruchou infarkt myokardu, onemocnění koronárních cév, vysoký nebo nízký krevní tlak nebo arterioskleróza.

    ·· · • · · • · « • 9 9

    9 9 9
24. 24. Použití fermentačního produktu červených kvasinek, pocházející z jednoho nebo většího počtu kmenů Monascus purpureus Went ze skupiny M4027, M4028 a M4184 pro výrobu farmaceutického prostředku, určeného pro léčení nebo prevenci moz kové mrtvice, mozkové trombózy nebo ztráty paměti v důsledku mozkové mrtvice u člověka.
25. 25. Použití fermentačního produktu červených kvasinek pro výrobu farmaceutického prostředku, určeného pro léčení nebo prevenci steatózy jater u člověka.
26. 26. Použití podle nároku 25, při němž fermentační produkt červených kvasinek pochází z fermentace nejméně jedné čeledí Monascus.
27. 27. Použití fermentačního produktu červených kvasinek z jednoho nebo většího počtu kmenů Monascus purpureus Went ze skupiny M4027, M4028 a M4184 pro výrobu farmaceutického prostředku pro zlepšení nebo udržení zdravotního stavu kardiovaskulárního systému u člověka.
28. 28. Použití fermentačního produktu červených kvasinek pro výrobu farmaceutického prostředku, určeného pro léčení nebo prevencí cukrovky u člověka.
29. 29. Použití podle nároku 28, při němž fermentační produkt červených kvasinek pochází z fermentace nejméně jedné čeledi Monascus.
30. 30. Použití fermentačního produktu červených kvasinek pro výrobu farmaceutického prostředku, určeného pro léčení nebo prevenci obezity u člověka.

    • · · • · · • · · · • · ···· • · · ·· ·
31. 31. Použití podle nároku 30, při němž fermentační produkt červených kvasinek pochází z fermentace nejméně jedné čeledí Monascus.
32. 32. Použití fermentačního produktu červených kvasinek z jednoho nebo většího počtu kmenů Monascus purpureus Went ze skupiny M4027, M4028 a M4184 pro výrobu farmaceutického prostředku, určeného pro snížení koncentrace cholesterolu a triglyceridů na normální úroveň u člověka.
33. 33. Použití podle některého z nároků 25, 26, 28, 29, 30 nebo 31, při němž se fermentační produkt červených kvasinek získá z fermentace směsi Monascus purpureus Went, Monascus ruber van Tieghem, Monascus fuliginosus Sáto, Monascus pilosus Sáto a Monascus albidus Sáto.
34. 34. Použití fermentačního produktu červených kvasinek podle některého z nároků 25, 28 nebo 30, při němž se fermentační produkt červených kvasinek získá z fermentace jednoho nebo většího počtu kmenů Monascus purpureus Went ze skupiny M4027, M4028 a M4184.
35. 35. Použití fermentačního produktu červených kvasinek podle některého z nároků 22, 24, 25, 27, 28 nebo 30, při němž se účinné množství produktu pohybuje v rozmezí 1 až 4 g denně.
36. 36. Použití fermentačního produktu červených kvasinek podle některého z nároků 22, 24, 25, 27, 28 nebo 30, při němž se účinné množství produktu pohybuje v rozmezí 300 až 600 mg denně.