KR100669132B1

KR100669132B1 - 표면 개질을 생성하는 신규 방법

Info

Publication number: KR100669132B1
Application number: KR1020017002986A
Authority: KR
Inventors: 스콜란데르엘리사베쓰
Original assignee: 카르메다 아베
Priority date: 1998-09-09
Filing date: 1999-09-08
Publication date: 2007-01-17
Also published as: CA2342991A1; PT1112097E; JP2003507082A; EP1112097B1; WO2000013718A1; NO984143L; CA2342991C; NO984143D0; AU5765299A; ATE243538T1; KR20010088799A; BR9913516B1; DE69909104T2; BR9913516A; JP4152075B2; US6461665B1; EP1112097A1; DE69909104D1; ES2203177T3; AU757913B2

Abstract

본 발명은 항혈전형성 활성이 개선된 표면 개질을 생성하는 방법에 관한 것으로서, 이것은 고온에서, 높은 pH에서, 또는 아민, 알콜, 티올, 부동화된 아미노기, 히드록실기 또는 티올기와 같은 친핵성 촉매와의 접촉으로 헤파린을 처리한 후, 상기 헤파린을 개질시키고자 하는 표면에 부착시킴으로써 개선된다.

Description

표면 개질을 생성하는 신규 방법{NEW PROCESS FOR PREPARING SURFACE MODIFICATION SUBSTANCES}

본 발명은 체액 또는 체조직, 또는 이로부터 유래된 성분들과 접촉하는 표면에 대한 개선된 비혈전형성 표면 개질의 생성 방법에 관한 것이다.

도뇨관, 혈액 산소공급기, 스텐트 등과 같은 의료 장치의 표면을 체내에 넣거나 또는 체액과 접촉시키면, 다수의 상이한 반응들이 개시되어 결국, 이들 중 일부는 장치 표면에 혈액을 응고시킨다. 이와 같은 심각한 역효과를 방지하기 위해서는, 의료 장비를 체내에 넣거나 또는 체액과 접촉시키기 전에 널리 공지된 항응고제 화합물인 헤파린을 환자의 체내에 장기 투여하여 혈전형성 방지 효과를 확보할 수 있다.

트롬빈은 수개의 응고 인자들 중 하나이며, 이들 응고 인자 모두는 함께 작용하여 혈액과 접촉하는 외부물(non-self) 표면에 혈전을 형성시킨다. 항트롬빈은 가장 탁월한 응고 억제제이다. 이것은 트롬빈과 다른 응고 인자들의 작용을 억제하므로 혈액 응고를 제한하거나 또는 한정한다. 헤파린은 항트롬빈이 응고 인자를 억제하는 속도를 급격히 증가시킨다.

그러나, 다량의 헤파린으로 전신 치료를 하면 종종 다량의 출혈을 유발시키는 심각한 부작용을 수반한다. 헤파린 요법의 드물지만 심각한 또 다른 합병증은 출혈과 동맥 혈전증 둘 다로 발전될 수 있는 헤파린 유도성 혈소판 감소증이라 불리우는 알레르기 반응의 발생이다. 헤파린 치료는 또한 혈장 농도의 모니터링과 그에 따른 용량 조절을 필요로 하기도 한다. 프로타민에 의한 헤파린 역전 현상(heparin reversal)은 또 다른 합병증이다.

따라서, 환자의 전신 헤파린화가 필요 없는 경우에서 해결책을 찾아 왔다. 즉, 헤파린의 항응고 성질을 이용한 표면 개질 단계를 통해 해결될 수 있을거라고 유추되었다. 따라서, 헤파린 층을 의료 장비 표면에 부착시킴으로써 표면에 혈전이 형성되지 않게 하는 다른 기술들이 발전되어 왔다.

헤파린은 다당류 단위 상에 음으로 하전된 설페이트기를 갖는 다당류 화합물이다. 따라서, 헤파린을 다가 양이온 표면에 이온 결합시키려는 시도가 있었지만, 헤파린이 표면에서 유출됨에 따라 이들 표면 개질은 안정성이 떨어져 기능이 상실되었다.

이에, 본 발명자들은 헤파린이 표면상 기에 공유 결합된 다른 표면 개질을 생성하였다.

선행 기술

의료 장비에 혈전이 형성되지 않게 하는 가장 성공적인 방법들 중 하나는 헤파린 조각을 의료 장비의 표면 개질면에 공유 결합시킴으로써 이루어진다. 일반적 방법 및 이것의 개량 방법은 유럽 특허 즉, EP-B-0086186, EP-B-0086187 및 EP-B-0495820에 기술되어 있다.

이들 특허들은 먼저 아질산 산화 반응을 통해 헤파린 다당류 사슬을 선택적으로 분해하여 말단 알데히드기를 형성시키는 것에 의한 표면 개질된 기질의 제조 방법을 기술한다. 그 다음, 의료 장비 표면에 아미노기를 갖는 하나 이상의 표면 개질 층을 도입한 후, 다당류 사슬의 알데히드기를 표면 개질 층상의 1차 아미노기와 반응시킨다. 이후, 예를 들어 수소화시아노붕소로 중간체 쉬프 염기(Schiff's bases)를 안정한 2차 아민 결합으로 환원시킨다.

이 기술은 의료 장비용의 안정하고 명확한 항혈전형성 표면 개질을 생성하는 것을 가능하게 하였다.

예를 들면, EP-A-0200295(미국 특허 제4,600,652호, 미국 특허 제6,642,242호)에 기술된 바와 같이 유사하거나 또는 더 나은 결과를 얻기 위한 다른 표면 개질에 관하여는 많이 공지되어 있다. 이들 특허는 아질산 또는 과요오드산염으로 산화 반응을 진행시킴으로써 알데히드기를 함유하도록 개질된 헤파린이 공유 결합될 수 있는 폴리우레탄 우레아 층을 갖는 기재에 바탕을 둔다.

유사한 기술이 EP-A-0404515에 기술되어 있으며, 여기서는 기재 표면을 아민이 풍부한 플루오르화된 폴리우레탄 우레아로 코팅한 후, 알데히드 활성 헤파린과 같은 항혈전형성제를 부동화시킨다.

언급할 수 있는 다른 항혈전형성 표면 개질에 관하여는 EP-B-0309473에 기술되어 있다. 헤파린이 부착되는 리소자임 층 또는 이것의 유도체 층으로 코팅을 하여 장비 표면을 개질시킨다.

그러나, 항혈전형성 제품을 생성하는 또 다른 표면 개질 형성에 관하여는 미국 특허 제4,326,532호에 기술되어 있다. 이 경우, 항혈전형성 표면의 층상 구조는 중합체 기재, 상기 중합체 기재에 결합된 키토산, 및 상기 키토산 코팅에 결합된 항혈전형성제를 포함한다. 일본 특허 공개 제04-92673호는 헤파린을 결합시키는 데 키토산 층을 사용하는 항혈전형성 혈액 여과기에 관한 것이다.

EP-A-0481160에는 의료 제품 코팅에 유용한 항혈전형성 물질이 기술되어 있는데, 이들 물질은 가공 콜라겐에 결합된 항응고제를 포함한다.

항혈전형성 표면을 제조하는 다른 방법은 WO97/07843에 기술되어 있는데, 여기서는 1개의 헤파린 분자 당 2개 이상의 당류 단위와 반응하지 않도록 충분한 양의 과요오드산염과 헤파린을 혼합한 후, 이 혼합물을 아미노기를 함유함으로써 표면이 개질된 의료 장비의 표면 개질 기재에 첨가한다.

항혈전형성 표면을 제조하는 이러한 일련의 선행 기술 방법들은 결코 완전하지는 않은데, 이것은 환자에게 성공적으로 사용하기 위해 필요한 성질, 즉 충분하고 장시간 지속적으로 높은 항혈전형성 활성, 코팅의 안정성 및 코팅하고자 하는 기재 성질의 비역전환성(非逆轉換性)을 나타내는, 코팅된 의료 제품을 제조하기가 어렵다는 것을 명확히 나타내는 것이다.

따라서, 의료 제품들을 안정하고 신뢰할 수 있으며 재생가능한 방식으로, 그리고 강하고 지속적인 항혈전형성 효과를 갖도록 비혈전형성 코팅할 수 있는 항혈전형성 코팅을 개선할 필요성이 당기술 분야에 여전히 남아 있다.

본 발명의 주목적은 표면 부동화된 헤파린의 항혈전형성 활성을 향상시키는 것이다. 이 목적과 다른 목적들은 청구의 범위에 정의된 본 발명에 의해 달성된다.

따라서, 본 발명자들은 의외로 공지된 표면 개질로 인한 항혈전형성 활성을 간단하고 저렴한 방법을 통해 더 개선시키는 것이 가능하다는 것을 발견하였다. 이것은 본 발명에 따라 처리된 헤파린을 표면에 부착시키면 헤파린의 생물활성이 보다 높아진다는 사실을 바탕으로 개선되었음을 파악할 수 있다.

본 발명은 항혈전형성 활성이 개선된 표면 개질을 생성하는 방법에 관한 것으로서, 이것은 고온 또는 높은 pH에서, 또는 친핵성 촉매(예, 아민, 알콜, 티올, 부동화된 아미노기, 히드록실기 또는 티올기)와의 접촉으로 헤파린을 처리한 후, 상기 헤파린을 개질시킬 표면에 부착시킴으로써 개선될 수 있다.

언급한 선행 기술에 나타난 바와 같이, 헤파린이 결합되거나 또는 부착될 수 있는 활성기를 수반하는 표면 개질층을 생성시키는 여러가지 방법들이 다수 공지되어 있다. 그리고, 본 발명에 따라 제조되고 항혈전형성 성질들이 뛰어난 헤파린을 헤파린이 결합될 수 있는 층들을 제조하는 임의의 선행 방법과 연계하여 사용할 수 있다.

표면이 개질될 임의의 의료 장비는, 헤파린이 결합될 수 있는 작용기를 갖는 또 다른 층을 표면에 도입하지 않고서 활성 작용기를 상기 표면에서 직접 이용할 수 있는 재료(들)로 제조할 수 있다. 본 발명에 의해 제조되고 탁월한 항혈전형성 성질을 갖는 헤파린 역시 그러한 재료들과 결합되어 사용할 수 있다.

본 발명의 방법은 보다 일반적으로, 작용기를 갖는 여러 재료들을 포함하거나, 또는 예를 들면, 알데히드, 카르복실산 또는 아미노기를 함유하도록 임의 처리된 헤파린이 바람직하게는 공유 결합에 의해 표면에 결합될 수 있는 이용 가능한 기들을 제조하기 위해 표면을 처리하는 다른 선행 기술 방법들을 포함하는 것으로 기술될 수 있다.

따라서, 비혈전형성 활성이 개선된 표면 개질을 생성하는 이러한 방법은 적어도, (A) 비혈전형성성으로 만들고자 하는 표면의 작용기와, (B) 상보적 작용기를 함유하도록 개질된 헤파린을 반응시켜 공유 결합을 형성시키는 단계를 포함하는데, 상기 헤파린은 상기 (A)와 (B)를 반응시키기 전에,

(i) 40℃ 내지 용매의 비점 온도 범위에서 가열하는 단계,

(ii) pH 8∼14 범위의 높은 pH에서 처리하는 단계, 및

(iii) 친핵성 촉매로 처리하는 단계
의 군 중에서 선택되는 단계를 수행하여 활성화시킴으로써, 표면 결합시 그 활성이 증가하게 된다.

상기 단계들 중 일부를 조합하여 상기 표면 결합된 헤파린의 활성과 동일하게 만들거나 또는 더 강화시킬 수 있다. 이에 따르면, 단계 (i)는 단계 (ii) 또는 (iii)과 조합되는 것이 유리할 수 있다.

상기 용어 "친핵성 촉매"란, 헤파린과 상기 단계에 사용되는 친핵성 촉매 사이에 실제적으로 화학 반응이 일어나지 않음을 나타내는 데 사용된다. 본 발명에 의한 "친핵성 촉매"로서 사용 가능한 화합물의 예로는 아민(예, 아세트산 암모늄(NH₄Ac)) 또는 다른 질소 함유 화합물(예, 아미노산 및 지방족 또는 고리 유기 화합물), 히드록실 함유 화합물(예, 알콜), 설프히드릴 함유 화합물(예, 티올)을 들 수 있다. 본 발명에 의한 다른 가능한 친핵성 촉매는 아미노, 히드록실 또는 설프히드릴기를 갖는 중합체 화합물들로서, 예를 들면 폴리에틸렌이민이다. 본 발명의 다른 가능한 친핵성 촉매들의 예로는, 당업자에게 널리 공지된 바와 같이 이온 교환 기재 또는 치환된 크로마토그래피 겔상에서 발견되는 것과 같은 부동화된 아미노기, 히드록실기 또는 티올을 포함한다. 유리 아민 또는 표면 부동화된 아민과 같은 질소 함유 친핵성 촉매를 사용하는 것이 가장 바람직하다.

상기 (B)의 상보적 작용기는 (A)로 언급된 작용기들과 관련된 것을 의미하는데, 이들 두 부류의 작용기는 반응을 하여 공유 결합을 형성할 수 있어야만 한다. 공유 결합을 형성하는 기들의 한 예가 아미노기와 알데히드기인데, 이 경우 상기 반응 후에는 이렇게 형성된 쉬프 염기를 안정화시키는 추가의 단계가 수행되어야 한다. 당업자라면 공유 결합을 형성할 수 있는 다른 작용기 쌍을 알고 있을 것이다.

기재 표면에 작용기가 없는 의료 기재상에 표면 개질을 생성하는 본 발명의 방법은 하기 단계 (a) 내지 (c)로 더 상세히 기술할 수 있다:

(a) 개질시키고자 하는 표면을 처리하여 상기 표면상에 작용기를 포함하는 층을 형성시키는 단계,

(b) 선행 기술에 의해 상보적 작용기를 포함하도록 개질된 헤파린을 하기 단계 (i) 내지 (iii)의 군 중에서 선택되는 추가 단계에서 처리하여 표면 결합시 상기 헤파린의 활성을 강화시키는 단계:

(i) 40℃ 내지 용매의 비점 온도 범위에서 가열하는 단계,

(ii) pH 8∼14의 높은 pH에서 처리하는 단계, 및

(iii) 친핵성 촉매로 처리하는 단계,

(c) 단계 (a)에서 얻은 층과, 단계 (b)에 의해 개질된 헤파린을 반응시켜서 헤파린을 공유 결합으로 표면에 부동화시키는 단계.

폴리우레탄우레아와 같은 중합체 화합물, 폴리아민(예, 폴리에틸렌이민), 키토산 또는 기타 다당류 또는 반응성 작용기를 포함하는 중합체와 같은 상이한 화합물들을 사용하여 상기 단계 (a)의 층을 형성할 수 있다. 대안적으로, 예를 들어 2개의 반대 하전을 띠는 중합체 화합물의 여러 층을 사용하여 특정 두께 또는 특정 구조의 층을 만드는 것이 가능하다. 이 경우, 최종 층은 헤파린의 상보적 작용기와 반응할 수 있는 유리 활성기를 보유해야 한다. 중합체는 제1 층에서 임의 가교결합될 수 있다.

기재 표면을 개질시킬 수 있는 방법들에 관한 다른 예들은 다른 선행 기술 문헌으로부터 확인할 수 있으며, 그러한 표면 개질을 생성하기 위한 상세한 작업 지침으로서는 그러한 특허 및 다른 간행물에 포함된 설명과 실시예를 참조한다.

본 발명의 방법으로 개질된 헤파린을 사용하는 데 가장 유리한 기재는 산소공급기, 혈액 여과기, 혈액 펌프, 도뇨관, 튜브, 삽입물(예, 스텐트), 혈관 그래프트 및 심장판과 같은 의료 장비이다.

따라서, 당업자에게 공지된 바와 같이, 처리되는 표면은 중합체, 유리, 금속, 천연 섬유 재료, 세라믹 또는 목적 용도에 적합한 성질을 갖는 임의의 다른 재료일 수 있다.

가장 바람직한 방법에서, 상기 방법의 제1 부분은 EP-B-0086186, EP-B-0086187, EP-B-0495820 또는 WO97/07834에 기술된 바와 같이 수행하고, 일반적으로 하기 단계들 (a) 내지 (f)를 포함한다:

(a) 아미노기를 함유하는 중합체 층을 개질시킬 표면에 첨가하는 단계,

(b) 상기 단계 (a)의 층을 2 작용성 가교 결합제로 임의 가교 결합시키는 단계,

(c) 단계 (b)의 층에 음이온 중합체 층을 첨가하는 단계,

(d) 상기 단계들 (a), (b) 및 (c)를 1회 이상 임의 반복하는 단계,

(e) 최종 단계 (a)를 수행하는 단계, 및

(f) 알데히드기를 함유하도록 아질산 또는 과요오드산염 산화 반응을 통해 헤파린을 개질시키는 단계.

추가로, 본 방법은 선행 기술에 비해 신규하고 명백하게 상이한 하기 단계(g)에 특징이 있다:

(g) 하기 단계 (i) 내지 (iii)의 군 중에서 선택되는 추가 단계에서 알데히드 헤파린을 수용액중에서 처리하여 표면 결합시, 헤파린의 활성을 강화시키는 단계:

(i) 40℃ 내지 용매의 비점의 범위에서 가열하는 단계,

(ii) pH 8∼14의 높은 pH에서 처리하는 단계,

(iii) 친핵성 촉매로 처리하는 단계.

이후, 상기 방법은 상기 기재된 선행 기술에 의해 기술되는 바와 같이 우선적으로 (h) 상기 단계 (a) 또는 (e)에서 얻은 층과, 상기 단계 (g)에서 얻은 추가 처리된 알데히드 헤파린을 반응시키는 단계로 이어진다.

본 발명에 따라 제조된 표면 개질 기재 또한 본 발명에 포함된다.

단계 (i), (ii) 및 (iii)은 임의의 용매 중에서 수행될 수 있지만, 수용액에서 수행하는 것이 가장 바람직하다. 그러나, 특별한 환경에서는 유기 용매를 사용하는 것이 적당할 수 있으며, 필요에 따라서는 착물 형성제와 함께 사용하거나, 또는 수용액 및 유기 용액의 혼합물을 사용하는 것이 적당할 수 있다.

가열 단계 (i)에 필요한 시간은 임계 요소가 아니다. 아마도, 달성할 수 있는 활성화는 시간과 온도의 조합에 따라 좌우될 것이다. 따라서, 한 실시 형태에서 온도는 40∼80℃ 범위이며, 보다 바람직하게는 50∼70℃이다. 또 다른 실시 형태에서는 60℃로 유지된다.

단계 (ii)는 pH 8∼14, 보다 바람직하게는 pH 8∼12에서 수행된다. pH 9∼11의 범위를 적용하는 것이 더 적당하다.

장점

본 발명을 통해 다음의 장점들을 달성할 수 있다:

개선된 비혈전형성 활성, 및 이것에 의한 결과로서

- 소량의 부동화된 헤파린으로 충분한 비혈전형성 특성을 얻을 수 있다. 이것은 특히 다량의 헤파린을 부동화시키는 어려움과 연관된 재료 및 장비에 특히 중요하다.

- 동량의 부동화된 헤파린으로 더 큰 비혈전형성 특성을 얻을 수 있다. 이것은 강한 혈전 형성 자극을 갖는 분야, 예를 들면 저혈류 증상, 및 관강이 협소한 도뇨관 및 혈관 그래프트와 같은 경우, 또는 그렇지 않으면 환자의 전신 헤파린화를 추가로 요구하는 경우에 특히 중요하다.

본 발명은 하기 실시예들로 더 자세히 설명된다.

실시예 1

본질적으로 EP B-0086186에 기술된 바와 같이 약전 등급의 헤파린을 아질산으로 처리하였다. 산화 반응 후, 반응 용액을 4개(각 60 ml)로 분리하고, 이들을 다음 단계들 중 하나로 처리하였다:

1. 4 M NaOH로 pH 7까지 중화시킴.

2. 2 M HCl로 pH 2.5까지 맞추고 이를 40℃에서 1시간 동안 유지시킨 후, 4 M NaOH로 pH 7까지 중화시킴.

3. 4 M NaOH로 pH 10까지 맞추고 이를 40℃에서 1시간 동안 유지시킨 후, 4 M HCl로 pH 7까지 중화시킴.

4. 4 M NaOH로 pH 7까지 중화시킴. 0.1 M의 NH₄Ac중 용액을 제조하고 이를 40℃에서 1시간 동안 유지시킨 후, NH₄Ac를 증발로 제거하여 잔류물을 60 ml 물에 용해시켜서 pH를 7로 맞춤.

이 헤파린 제제에 대해 항응고제 활성을 분석하였다(항트롬빈 매개 트롬빈 억제).

아질산 처리 후의 헤파린 제제	헤파린 활성, IU/mg
1. pH 7	121
2. pH 2.5	125
3. pH 10	116
4. pH 7, NH₄Ac	123

폴리에틸렌 튜브(내경 2 mm)를 EP 0086186에 따라 본질적으로 헤파린화시켜 항트롬빈 결합에 대해 분석하였다.

아질산 처리 후의 헤파린 제제	헤파린화된 표면의 AT 결합, pmol/cm²
1. pH 7	35
2. pH 2.5	36
3. pH 10	109
4. pH 7, NH₄Ac	59

결론

- 선행 기술에 따라 pH 7에서 처리된 아질산 산화 헤파린과 비교할 때, 본 발명에 따라 pH 10의 알칼리 환경에서 아질산 산화 헤파린을 처리하면, 표면에 부동화된 후의 헤파린 활성이 크게 증가하였다(3배 이상). 부동화 전, 헤파린의 활성은 영향을 받지 않았다.

- 부동화 전에 아세트산 암모늄(NH₄Ac)으로 아질산 산화 헤파린을 처리하면 활성이 다소 증가하지만, 낮은 pH에서 처리하면 어떠한 영향도 없다.

실시예 2

본질적으로 EP B-0086186에 기술된 바와 같이 약전 등급의 헤파린을 아질산으로 처리한 후, 4 M NaOH로 pH 7까지 중화시켜 동결 건조하였다.

다음 처리법들 중 하나로 처리한 아질산 산화 헤파린 용액으로 폴리에틸렌 튜브를 헤파린화하였다:

1. 전처리하지 않음.

2. 사용하기 전에 물에 용해시켜 50℃에서 16시간을 유지시킴.

3. 사용하기 전에 물에 용해시켜 아민화된 표면(아민화된 튜브) 상에 50℃에서 16시간 동안 순환시킴.

본질적으로 EP B-0086186에 기술된 바와 같이 헤파린화를 수행하였다. 튜브의 헤파린화된 부분을 항트롬빈 결합에 대해 분석하였다.

아질산 처리 후의 헤파린 제제	헤파린화된 표면의 AT-결합, pmol/cm²
1. 비처리	48
2. 50℃에서 16시간 동안 유지함	94
3. pH 10 및 50℃에서 유지함	109
4. 아민화된 표면 상에 50℃에서 16시간 동안 순환시킴	122

결론

- 실시예 1에서 관찰된 효과 이외에, 장시간의 가열 또는 표면 부동화된 친핵체(예, 아미노기)와의 접촉에 의한 아질산 산화 헤파린의 처리는, 표면에 부동화되면 헤파린 활성을 크게 증가시켰다.

실시예 3

본 실시예에서, 당업자에게 널리 공지된 2 가지 상이한 방법들을 사용한 헤파린의 산화 반응은, 본 발명에 의해 활성화된 헤파린을 사용하면 놀랍게도 상기 2가지 방법 모두 AT 흡착율이 증가하였다.

내경이 3 mm인 PVC 튜브를 하기 방법 (a) 내지 (d) 중 어느 하나의 방법으로 헤파린화하였다:

(a) EP B-0086186에 따라 제조된 아질산 산화 헤파린으로 헤파린화시킨 후, 더 처리하지 않거나,

(b) EP B-0086186에 따라 제조된 아질산 산화 헤파린으로 헤파린화시킨 후, 알칼리 처리(pH 10, 40℃에서 1시간 동안)를 하거나,

(c) PCT WO97/07384에 따라 제조된 과요오드산염 산화 헤파린으로 헤파린화시킨 후, 더 처리하지 않거나 또는,

(d) PCT WO97/07384에 따라 제조된 과요오드산염 산화 헤파린으로 헤파린화시킨 후, 알칼리 처리(pH 10, 40℃에서 1시간 동안)를 하였다.

	알칼리 미처리	알칼리 처리
	AT 흡착율, pmol/cm²	AT 흡착율, pmol/cm²
아질산 산화 헤파린	46	105
과요오드산염 산화 헤파린	44	78

Claims

최소한 (A) 비혈전형성성으로 만들고자 하는 표면의 작용기와, (B) 상보적 작용기(complementary functional group)를 함유하도록 개질된 헤파린을 반응시켜 공유 결합을 형성시키는 단계를 포함하여 비혈전형성 활성이 개선된 표면 개질을 생성하는 방법에 있어서, (A)와 (B)를 반응시키기 전에,

(i) 40℃ 내지 용매의 비점 범위에서 가열하는 단계,

(ii) pH 9∼14 범위의 높은 pH에서 처리하는 단계, 및

(iii) 1종 이상의 친핵성 촉매로 처리하는 단계

의 군 중에서 선택되는 단계를 수행하여 상기 헤파린을 활성화시켜 표면 결합시 헤파린의 활성을 강화시키는 것을 특징으로 하는, 비혈전형성 활성이 개선된 표면 개질의 생성 방법.
제1항에 있어서, 상기 개질시키고자 하는 표면을 하나 이상의 단계에서 처리하여 표면에 작용기를 포함하는 층을 형성시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 pH 범위는 9∼11인 것을 특징으로 하는 방법.
제3항에 있어서, 상기 pH는 10인 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 친핵성 촉매는 아세트산 암모늄인 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 친핵성 촉매는 부동화된 아미노기를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제2항에 있어서,

(A)의 경우,

(a) 개질시키고자 하는 표면에 아미노기를 포함하는 중합체 층을 가하는 단계,

(b) 상기 단계 (a)의 층을 2 작용성 가교 결합제로 가교 결합시키는 단계,

(c) 상기 단계 (b)의 층에 음이온성 중합체 층을 가하는 단계,

(d) 상기 단계 (a), 단계 (b) 및 단계 (c)를 1회 이상 임의 반복하는 단계,

(e) 최종 단계 (a)를 수행하는 단계

에 의해 수행되어, 상기 표면에 작용기를 함유하는 층을 형성시키는 과정;

(B)의 경우,

(f) 아질산 또는 과요오드산염 산화 반응을 통해 헤파린을 개질시켜 알데히드기를 함유하도록 하는 단계,

(g) 추가 단계로 알데히드 함유 헤파린을 활성화시켜 표면 결합시 헤파린의 활성을 증가시키는 단계로서, 상기 활성화 단계 (g)는

(i) 40℃ 내지 용매의 비점 범위에서 가열하는 단계,

(ii) pH 9∼14 범위의 높은 pH에서 처리하는 단계, 및

(iii) 1종 이상의 친핵성 촉매로 처리하는 단계

의 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 것인 단계

에 의해 수행되어, 헤파린을 개질시키는 과정; 및 최종적으로

(h) 상기 단계 (a) 또는 단계 (e)에서 얻은 층과, 상기 단계 (g)에서 얻은 추가 처리된 알데히드 헤파린을 반응시키는 단계에 의해 수행되어, 상기 (A)와 (B)를 반응시키는 과정

을 포함하는 방법.
제2항 내지 제7항 중 어느 하나의 항에 의해 생성된 표면 개질 기재.