JPWO2019192978A5

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Info

Publication number: JPWO2019192978A5
Application number: JP2020554068A
Authority: JP
Publication date: 2022-03-31

Claims

液体サンプル中の標的ペプチドを検出するためのラテラルフローアッセイ装置であって、
（ａ）固体支持体、
（ｂ）前記固体支持体の第１の端部でサンプルを最初に受容し、任意に前処理するためのサンプルパッド、
（ｃ）前記固体支持体の第２の端部の吸収パッド、
（ｄ）乾燥状態で粒子と前記標的ペプチドとの可動性コンジュゲートを含むコンジュゲートパッドであって、前記粒子にコンジュゲートされた標的ペプチドはビオチン化され、該粒子はその表面にビオチン結合タンパク質を含み、
（ｅ）以下を含む標的ペプチド反応膜
（ｉ）前記標的ペプチドに対する固定化された第１の捕捉試薬を含む捕捉領域、および
（ｉｉ）任意に、粒子対照コンジュゲートに対する固定化された第２の捕捉試薬を含む対照領域
を含み、
前記サンプルパッド、コンジュゲートパッド、反応膜および吸収パッドは前記固体支持体に取り付けられて、前記サンプルパッドから前記コンジュゲートパッドを介した前記反応膜への毛細管流動を可能にし、
前記標的ペプチドによる粒子の充填は、前記粒子の最大充填容量の約２０％～約５５％である、前記ラテラルフローアッセイ装置。
前記装置がストリップ装置、特に免疫クロマトグラフィーストリップ装置である、請求項１に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記粒子が、金コロイドナノ粒子、着色ラテックスビーズ、磁性粒子、カーボンナノ粒子、セレンナノ粒子、銀ナノ粒子および量子ドットからなる群から選択される、請求項１または２に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記粒子が金コロイドナノ粒子である、請求項３に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記粒子が実質的に球形であり、直径が１０～１００ｎｍ、有利には２０～６０ｎｍ、最も有利には４０ｎｍである、請求項１～４のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記ビオチン結合タンパク質が、アビジン、ストレプトアビジンおよび脱グリコシル化アビジンからなる群から選択される、請求項１～５のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記脱グリコシル化アビジンがニュートラアビジンである、請求項６に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記標的ペプチドによる前記粒子の充填が、前記粒子の最大充填容量の約２０％～約３５％である、請求項１～７のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記粒子がその表面上にウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）をさらに含む、請求項１～８のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記液体サンプルが、尿、血漿血清、全血、汗および唾液からなる群から選択される体液であり、典型的には尿である、請求項１～９のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
前記標的ペプチドがＣ末端架橋テロペプチドＩＩ型コラーゲン（ＣＴＸ－ＩＩ）である、請求項１～１０のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
液体サンプル中の標的ペプチドの検出、有利には定量的検出のための方法であって、
（ａ）請求項１～１１のいずれか一項に記載の装置のサンプルパッドに前記液体サンプルを適用して、前記サンプルパッドからコンジュゲートパッドを介して反応膜へのサンプルの流れを可能にする工程、
（ｂ）捕捉領域においてコンジュゲートの存在または量を検出する工程、および
（ｃ）任意に、対照領域において対照コンジュゲートの存在または量を検出する工程
を含み、
前記捕捉領域におけるコンジュゲートの存在もしくは不存在または検出量は、それぞれ前記液体サンプル中の標的ペプチドの不存在もしくは存在または量を示す、前記方法。
液体サンプル中の標的ペプチドの定量化のための、請求項１～１１のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
疾患または健康状態の診断または予後診断のための、請求項１～１１のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
対象、典型的には変形性関節症を有する対象における軟骨劣化を判断するための、請求項１～１１のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置。
疾患または健康状態を診断または予後診断するための指標を提供する方法であって、
（ａ）請求項１～１１のいずれか一項に記載の装置のサンプルパッドに液体サンプルまたは希釈液体サンプルを適用して、前記サンプルパッドからコンジュゲートパッドを介して反応膜へのサンプルの流れを可能にする工程、
（ｂ）捕捉領域においてコンジュゲートの存在または量を検出する工程、および
（ｃ）任意に、対照領域において対照コンジュゲートの存在または量を検出する工程
を含み、
前記捕捉領域におけるコンジュゲートの存在もしくは不存在または検出量は、それぞれ前記液体サンプル中の標的ペプチドの不存在もしくは存在または量を示し、
前記液体サンプル中の標的ペプチドの不存在もしくは存在または量を、前記疾患または健康状態の診断または予後診断の指標として提供する、前記方法。
前記疾患が変形性関節症であり、前記標的ペプチドがＣＴＸ－ＩＩである、請求項１６に記載の方法。
追加の工程、
（ｄ）所定の閾値を超えるＣＴＸ－ＩＩの存在がサンプル中に検出された場合、またはサンプル中のＣＴＸ－ＩＩの量が前記サンプルにおける所定の閾値を超える場合、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容可能な塩もしくは誘導体、例えばヒランＧ－Ｆ２０を含む関節内補充薬を前記対象に処方する工程
を含む、請求項１７に記載の方法。
追加の工程、
（ｄ）所定の閾値を超えるＣＴＸ－ＩＩの存在がサンプル中に検出された場合、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容可能な塩もしくは誘導体、例えばヒランＧ－Ｆ２０を含む関節内補充薬を前記対象に投与する工程
を含む、請求項１７に記載の方法。
対象における変形性関節症等の軟骨疾患に関連する疼痛の治療における使用のための、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容可能な塩もしくは誘導体、例えばヒランＧ－Ｆ２０を含む関節内補充薬であって、前記対象の尿サンプル中のＣＴＸ－ＩＩの濃度が請求項１～１１のいずれか一項に記載のラテラルフローアッセイ装置を使用して測定され、前記尿サンプル中のＣＴＸ－ＩＩの濃度に応じて、関節内補充薬が前記対象に投与される、前記関節内補充薬。