JPS6385453A - 血中ハロペリド−ル分析法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （イ）産業上の利用分野 この発明は、ハロペリドール分析法に関する。

さらに詳しくは、ハロペリドールを効率よく分離分析で
きる方法であって、ことに臨床化学分析に有用なハロペ
リドールの分析法に関する。

幹）従来技術 従来、精神分裂病患者などにハロペリドールを投与する
治療が行なわれており、患者の体内ことに血中濃度の９
理を行なうためには、ハロベリド−／ｌ’を分離して定
量することが必要である。

この点に関し、従来よシ、ハロペリドールを含む試料、
ことに患者の血清や血漿試料などを高速液体クロマトグ
ラフィに付してハロペリドールを分離して定量すること
が行なわれておシ。

この際、カラム及び移動相として逆相糸のもの。

例えば固定相としてシリカを担体とする化学結合型のカ
ラムと移動相として緩衝液−メタノール混合溶媒あるい
は緩衝液−アセトニトリル混合溶媒を用いた高速液体ク
ロマトグラフィが汎用されている。

（ハ）発明が解決しようとする問題点 しかしながら、かかる高速液体クロマトグラフィによる
分析においてはハロペリドールの測定は夾雑物こきに蛋
白の影響を受は易く、正確な測定が極めて困難であるた
め、予め血清や血漿を用手法で除蛋白処理する必要があ
った。例えばクロロホルム抽出による処理（星和書店版
［向精神薬の血中濃度測定法ＪＰ３１＝Ｐ３５）を行っ
ていた。この前処理は操作が繁雑であり。

しかも蛋白吸着した各成分の回収率が不安定であるとい
う多くの問題点を有（２ているっこの発明は、かかるｆ
’ｒ：１題点に鑑みなこれたもので、ことに簡便でかつ
自動化に適した前処理方法を用いたハロペリドールの分
析法を提供するものである。

に）問題点を解決しようとする手段及び作用かくしてこ
の発明によれば、血清又は血漿中の抗けいれん薬を高速
液体クロマトグラフィにより分析する方法において、血
清又は血漿を予め前処理用カラムに導入し、これに緩衝
液と有機溶媒との混合溶媒からなる移動相を順次有機溶
媒の濃度を増大させて通過させることにより除蛋白処理
された試料溶液を得、これ全分離カラムに導びいて液体
クロマトグラフィに付すこと全特徴とする血中ハロペリ
ドール分析法が提供されるっ 前処ＭＪ、カラムとしてはテトラメチロールメタントリ
アクリレート糸樹脂からなるカラムが良く５例えば、　
Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ　　５ＰＣ−ＲＰＩ　（島津製作所
社製）の名称で容易に入手可能である。

かかる前処理用カラムは、いわゆるＯＤ８カラムとほぼ
同等の逆相的保持を示すものであるが、蛋白成分は９通
常の逆相クロマトグラフィ用移動相（例えば、リン酸緩
衝液−アセトニトリル混合溶媒やリン酸緩衝液−メタノ
ール混合溶媒等）では有機溶媒の含量、緩衝液のｐＨを
問わずカラムの許容トラップ容量内においては溶出され
ない。従って該前処理用カラムにより蛋白成分がトラッ
プされ、除蛋白処理されたハロペリドールを含む試料溶
液が得られることとなろう しかしながら、最初から上記のような有機溶媒（アセト
ニトリル、メタノ−／Ｉ／）？含んだ移動相を使用して
試料溶液を前処理カラムに導入すれば、試料中の蛋白費
が変性、凝固（２装置配管やカラムがつまる。

そこで１本発明は最初は前処理用移動相として有機溶媒
を含まない水系移動相（例えばリン酸緩衝液）を使用し
、蛋白を前処理カラム外に流し出した後有帥帛媒を含む
移動相を＋１＋いて夾雑成分の除去を行うの１ある。

１だ、前処理カラム、分離カラムいずれも逆相系カラム
を使用する場合、目的成分（ハロベリド−Ｉｖ）溶出位
置の調節は通常有機溶媒含量を変化畑せることによシ行
うのが通常である。

従って前処理カラムで目的成分溶出直前までの成分を有
効に除去し、目的成分のみを分離カラムに導くには有機
溶媒の含量をできるだけ増加させ、目的成分の溶出を早
めるのが好ましい。

しかし、あまり増加させると前述したように前処理カラ
ムの変性凝固の問題が生じる。

そこで１本発明においては、有機溶媒の含量は４　（ｌ
　ｖｏｇ％が好ましい。

有機溶媒の濃度を順次増大させる方法としては、有機溶
媒含量の異なる移動相を複数個設置し、含量が増大する
順番に移動相を切換え使用するのが良い。

なお、除蛋白処理された試料溶液を液体クロマトグラフ
ィに付する条件（分離カラムや移動相）は通常の条件で
よく１例えばいわゆるＯＤＳカラムを用い逆相モードで
行なうのが適している。

なお、この発明の方法は後述する実施例に示すごとく、
前処理用カラムでハロペリドールをトラップするための
流路と９分析用流路と全備え、これら全流路切換バルブ
等で適宜切換え得るように構成した装置を用いて実施す
るのが適している。この際、前処理用カラムへの試料の
導入は２通常、メタノール等の有機溶媒を含１ない同様
な移動相を用いて（］なう。

（ホ）実施例 実施例１ 第１図に示す（１）は、この発明の方法を実施するへロ
ベリドール分析装置の一例を示すものである。図におい
て分析装置（１）は、前処理用溶媒のリン酸緩衝液（２
１、ＩＪン酸緩働液−アセトニトリｌし混合溶媒（２）
′の流路（７）１分離分析用の移動相（４）の流路（８
）、テトラメチロールメタントリアクリレート系樹脂か
らなる前処理用カラム（５）及び前処理用カラム用流路
０３１．並びに分離カラムαＯＩへの分析流路α６１と
から基本構成これ、これらは６方パルプ（６）で切換可
能に連結されている。ｌお１図中、（３）は前処理用カ
ラム（５）の洗浄液、（９）は四方弁、Ｏｌｌけ検出器
、ａ２１Ｙ′ｉレコーダ、酌）１８】ノはプレカラム、
　ｅ７２）け試料注入部、（１４’（１ηはドレインを
それぞれ示す。分析に際し、まずバルブ（６）が破線側
とされ、注入部６のから血清又は血漿が緩衝液（２）に
よってカラム（５）に導入されそこでハロベリド−ｐが
保持される。一定時間（２分間）経ｍｌすれば、バルブ
（９１’ｆｒ　２’側に切換えリン酸緩衝液−アセトニ
トリル混合溶Ｋ　（２ｆを流す。保持されたハロペリド
ールはバルブ（６）を実線側に切換えることにより移動
相（４）により続いて流路Ｑ６１へ移され１分離カラム
ＱＯＩに送られ分離分析に供される。所定時間後バルブ
（６）全再び破線側に切換えバ１ｖ７−（６）の切換と
同時又は所定時間前にバルブ（９）も３側に切換えられ
、これにより蛋白全トラップしたカラム（５）は洗浄さ
れ再びバルブ（９）ｆ：実ｆ−１）□側に切換えて次試
料のスタンバイが、上記分離分析と並行して行なわれる
こととなる。

なお、これらバＩレブの切換のタイミングはシステムコ
ントローラα５１によって自動制御されている。なお、
カラム（５）での蛋白が飽和する場合には、過量の蛋白
はトラップし切れないが、流出液をドレイン圓へ移すよ
う制御する（通常、１分根度までの溶出液が適当）こと
により、蛋白の流路αｅへの持込みを防止できる。

上記装置を用いて、下記の条件下で分析を行なった。

（試料）ハロペリド−ル標品（１μｇ／ｍｅ　）　１０
μｅ注入（分析条件） 前処理用カフ　ム（５）　：　Ｓｈｉｍ　−ｐａｃｋＳ
ＰＣ−ＤＰＩ （内径４．０ｆｌＸ長さ３０１ｍ＋　）リン酸緩衝液＜
２）　：　０．Ｉ　Ｍの硫酸ナトリウムを含む０．１Ｍ
のリン酸ナトリウム緩衝 液（ｐＨ６，８） リン酸緩慟液−アセトニトリル混合溶媒＜２ｒ　ニリン
酸緩慟液（２１７５％。

ア　セ　ト　ニ　ト　リ　ル　２５　％洗浄液（３）　
：　０．１％トリエチルアミン水溶液とアセ　ト　ニ　
ト　リ　ル　（１／１）　　の　混合　液流路（７）の
流ｉｔ　：　］　ｍｅ１分前処理用カラム流度：４０°
Ｃ 分離カラ、Ａ　ＱＱ＋　：　Ｓｈ　ｉｍ　−ｐａｃｋ　
　ＣＬＣ−ＯＤＳ（内径６．０ｍｗ　Ｘ　１５０ｆｌ長
、島津製作所社製） 移動相（４１：　Ｏ，ｌ　Ｍの過塩素酸ナトリウムを含
む０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液 （ｐＨ２，１）とアセトニトリ／Ｉ／（３／２）の混合
液 分離カラム温度：４０°Ｃ 高速液体クロマトグラフ装＠： ＬＣ−６Ａシステム（島津製作所社製）この結果を第２
図に示した。

実施例２ 上記と同じ条件で、ハロペリドールに血清を添加したも
の（１００ｎｇ、／ｍｅ　）　　を分析したクロマトグ
ラム全第３図に、内部標準物質であるクロロハロペリド
ール”ａ　品（］μＦＺ／ｍｅ　）　ｔ４析したクロマ
トグラムを第４図に、ハロベリド−μ。

クロロハロペリドールともに血清に添加したものを分析
したクロマトグラム全各４第５図に示す。

第３図より、血清中のハロペリドールでも充分に本発明
により分析可能であることが、また。

第４図、第５図よりクロロハロペリドールが内部標準物
質として充分使用可能なことがわかる。

特に第５図のクロロハロベリド−／Ｌ／　トハロヘリド
ールのピークの高さの比により検Ｍ゛＃ｊ！　ｋつかつ
て測定′＠を得ねる。

（へ）発明の効果 この発明の方法によれば、繁雑な相手法の除蛋白処環を
行なうことなく血中のハロペリドールの分離分析を行な
うことができる。ことにカラムを用いた連続的な前処理
用方法を用いているため、自動化が容易であり短詩間で
試料を分析できるという利点も備えている。

【図面の簡単な説明】

第１図は、この発明の分析法を実施する装置の一例を示
す構成説明図、第２図〜第５図はそれぞれこの発明の分
析法によ！ｌｌ得られた分析結果の一例を示すクロマト
グラム図である。 （１）・・ハロペリドール分析装置 （２）・・・リン酸緩衝液 （２ｆ・・・リン酸緩衝液−ア七トニトリル混合溶媒（
５）・・・前処理用カラム ００（・・・分離力ラム 第２図 第３回 呵間扮） 第５＠

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、血清又は血漿中のハロペリドールを高速液体クロマ
   トグラフィにより分析する方法において、血清又は血漿
   を予め前処理用カラムに導入し、これに緩衝液と有機溶
   媒との混合溶媒からなる移動相を順次有機溶媒の濃度を
   増大させて通過させることにより除蛋白処理し、該除蛋
   白処理後分離カラムに導いて液体クロマトグラフィに付
   すことを特徴とする血中ハロペリドール分析法。 ２、緩衝液がリン酸緩衝液で、有機溶媒がメタノール又
   はアセトニトリルである特許請求の範囲第１項記載の血
   中ハロペリドール分析法。 ３、有機溶媒の濃度が０〜４０Ｖｏｌ％の範囲で増大す
   る特許請求の範囲第１項記載の血中ハロペリドール分析
   法。 ４、血清又は血漿を内部標準物質とともに前処理カラム
   に導入することを特徴とする特許請求の範囲第１項記載
   の血中ハロペリドール分析法。 ５、内部標準物質がクロロハロペリドールである特許請
   求の範囲第３項記載の血中ハロペリドール分析法。