JPS62134083A - 鉄含有微生物及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） この発明は鉄分を高濃度で蓄積し、鉄分の補給に使用し
て極めて有用な鉄剤となる微生物菌体１こ係わるもので
ある。

食生活の変化に伴い、１１血症の人が増加の傾向にある
といわれており、この対策には天然よりの補給、即ち日
常の食事からの鉄補給が望ましいが、通常、鉄分が比較
的多いといわれている動物性又は植物性食品においても
、鉄の含量は可食部１００ｇ当り、０．１へ、ＩＯＢと
少ないため、鉄剤による補給を余儀なくされている。従
来の鉄剤は胃腸障害の軽減と、吸収改善の目的で徐放製
剤化されているものが多く、それらは有機高分子化合物
（例えばデキストラン、カルボキシメチルセルロース、
メチルアクリレート・メタクリル酸共重合体、カルボキ
シビニル重合体など）に無代の鉄塩が分散されている。

しかし有様高分子化合物は不消化性であり、また無代の
鉄塩は吸収があまり良くないため多量の投与を必要とし
く例えば金属鉄として１００へＪｌ　５０ＩｎＩ？／日
）、その結果、おう吐や下痢などを伴うことが多く、老
人の場合には、不消化性の有機高分子化合物が胃に長時
間滞留する好ましくない例もある。

本発明者等は１−記のような問題点を解決するための検
討を市ね、微生物菌体に鉄分をＭ積させる研究を行ない
、高濃度に鉄化合物を添加し、かつマグネジ・クム化合
物を制限した培地中Ｖ全生物を培養することにより、著
しく多量の鉄分が微生物画体に蓄積するという知見を得
て、本発明を完成した。

本発明は鉄分を高？農度で′Ｍ積している微生物菌体を
提供することを第１の目的とし、第２の目的は、か・る
微生物菌体を工業的有利に製造する方法を提供すること
にある。しかしてＬ記ｔ５１の目的は、本発明の第１の
発明に従い、少くとも炭素源及び窒素源を含有する培地
において、鉄化合物を添加して微生物を培養することに
より得られた、鉄を金属鉄として乾燥菌体１００Ｆｉ当
り１００＋ｎｇ以上含有する微生物菌体により達成され
、］−記第２の目的は本発明の第２の発明に従い、少く
とも炭素源及び窒素源を含有し、かつ鉄化合物を添加し
た培地において、培地中のマグネシウムの濃度を謂属マ
グネシウムとしてＪ　Ｏ＋ｎｇ／　ｌ以下にして微生物
を培養し、鉄を高濃度で含有する微生物を製造する方法
によって達成される。

以下、本発明の詳細な説明する。

本発明における微生物としては食しても害のない微生物
が使用され、例えばサツカロミセス属等の酵母、その他
乳酸菌、枯草菌などが好適であり、特に酵母が好ましい
。

本発明の培地に用いられる炭素源は、糖類、右磯酸、油
脂、詣肋酸なと、微生物により資化されるものならば、
如何なるものでもよい。窒素源としては、肉エキス、ペ
プトン、イーストエキス、その他の蛋白質、それらの加
水分解物、アミノ酸等の有機含窒素化合物、アンモニア
、アンモニウム塩、硝酸塩等の黒磯含窒素化合物など、
従来全生物の培養に用いられた窒素源はいずれも使用で
きる。

鉄分を高２農度で含有する本発明の微生物を製造するた
めには、微生物の培地はマグネシウム分の含有量を金属
マグネシウムとしてｌ　Ｏ＋Ｉ１ｇ／　ｌ　以下にする
必要がある。即も、培地中のマグネシウム量が１０ｍｇ
／ｌ以下とすることによって、生成微生物にｒｔ積され
る鉄分の含有量が者しく増大する。

しかして従来、微生物の培養では、その増殖を盛んにす
るため、硫酸マグネシウムのようなマグネシウム化合物
を添加している。例えばマグネシウム分を、金属マグネ
シウムとして培地中に０．１へ、０．２ｇ／ｌ含有させ
ている。本発明では上述のように、培地中のマグネシウ
ム量を制限するが、培地構成分の中には例えばポリペプ
トンやイーストエキスのようにマグネシウムを含有する
物質があるので、予め培地構成分におけるマグネシウム
含有＋花を測定し、もしマグネシウムの量が制限値を越
えて多量存在する場合には、培地のｈ！構成分種類、配
合量を選別し直して本発明の制限値内にする必要がある
。一方、培地構成分から由来するマグネシウム分が制限
値内で少ないときは、制限値を越えない範囲で硫酸マグ
ネシウムのようなマグネシウム化合物を添加してもよい
。

次に本発明の微生物を得るために培地には鉄の物は培養
の初期から添加しておくことが望ましい。

添加する鉄化合物としては酪酸鉄、７マル酸鉄のような
有機鉄でも、又は塩化第１鉄、硫酸第１鉄アンモニウム
、臭化第１鉄のような無磯鉄でもよいが、後者の方が経
済的である。培地中の鉄化合物の添加量は、金属鉄とし
て計算し培地に用いた炭素源の重量の０．５重量％以上
とするのがよい。

醗酵は例えば振とう培ｇ１等の好気的条件下で進行する
。培養温度、培地ｐＨ等の培養条件は、使用する微生物
について通常用いられている条件でよ（、通常、培養温
度は１５−＝−３５℃、ｌ）　Ｉ−（は３〜９の範囲で
よい。培養時間は、培地の１組成、培養方法にもよるが
、２４〜４８時間程度であり、通常は２４時間で充分て
・ある。

このようにして得られる微生物菌体の重量当りの鉄のＭ
積置は、培地にす３けるマグネシウム分が少ない程、多
くなる傾向にあるが、マグネシウム分が少くなるほど、
菌体生成＋ｉ１．６減少するので、商業的な実施に肖っ
ては両者の兼ね今いで選定すス 上記のようにして培養を行なった後は、通常の方法で菌
体を集め、要すれば水又はエチレンノアミンチトラ酢酸
のノナトリウム塩（以下、ＥＤＴＡ塩と略称する）の水
溶液で洗浄し、圧縮又は乾燥して製品とする。

菌体の含有する鉄の定量は、菌体を水、更に１０＋＋＋
ＭのＥｌ’）ＴＡ塩塩水液液洗浄し、これを強熱下、注
意して灰化し、これをｆ３Ｎ−ＨＣＩで抽出後、オルト
７エナントロリンを発色剤として用いる松原法［日本血
液学会誌、旦、４３４（昭和３６年）］により測定した
。

上記の培養で得られる本発明の鉄含有微生物菌体は、そ
の湿潤型取の約３０倍量の水、更に同量く、菌体とは分
離し難い、有機鉄化合物としで蓄積されているのではな
いかと推測される。そして本発明の微生物菌体に含有さ
れる鉄分の量（金属鉄に換算して）は従来の乾燥パン酵
母において、その１００ｇ当りの鉄含有量が約２０１程
度であるのにス・すし、＋ｉλ燥菌体１００）ｒ当り１
００〜７５０ｍ１？　と著しく高い。

（実施例） 次に本発明の詳細な説明するが、本発明はこれらの例に
制限されるものではない。

実施例１ グルコース２０ｇ／ｌ、ポリペプトン２０ｇ／Ｉ、イー
ストエキス１０Ｉ？／ｌ　を含む培地（この培地中には
、ポリペプトン及びイーストエキス中に含まれるマグネ
シウムに由来し、金属マグネシウムとしてＧ　＋ｔｇ／
　Ｉのマグネシウム分が含まれている）５０ｍ１を５０
０＋ｎｌ容の三角７ラスフに入れ、加熱殺菌後、パン酵
母［オリエンタル酸＠（株）製１を植菌し、３０℃で２
４時間培養を行った。このようにして前培を液を調製す
る。一方向組成の培地して０．１重電％になるように加
えて（この硫酸第１鉄アンモニウム添加量は培地の炭素
源に討しては金属鉄として０．７重量％になる。）調製
した培地５５ｍ１　を含む５００［Ｑｌ容の三角フラス
コに、前記前培養液を２％の割合で植菌し、３０°Ｃで
２４　［１：’ｌ−ｒｌｌ’ｌ、振とう培養で本培養を
行なった。本培養後、培１！液を４℃で遠心分離に付し
て菌体を分離し、この菌体を２０ｍ１のイオン交換処理
水で３回洗浄し、更に１０＋ｏＭのＥＤＴＡ塩水溶液２
０＋ｎｌで３回洗浄し、本発明の鉄含有微生物菌体を得
た。

得られた菌体は乾燥体として０．６２ｇであった。

このものの鉄濃度を上記松原法によって測定した結果、
鉄含有量は乾燥菌体１００ｇ当り、３３４丁０８であっ
た。

実施例２ 本培養の培地を、グルコース２０ｇ／Ｉ、硫酸アンモニ
ウム５Ｉ！／ｌ、りん酸２水素カリウム０．８５ｇ／ｌ
、りん酸水素２カリウム０．１５ｇ／ｌ、塩化ナトリウ
ム０．１８／ｌ、塩化カルシウム（２水和物）０．１ｇ
／Ｉ、ビオチン２０μｆ口／１、パントテン酸カルシウ
ム２　ｔｎｇ／　ｌ　１葉酸２μｇ／ｌ、イノシトール
１　（Ｉ　Ｂ／　ｌ、ナイアシン４００μｓ／Ｉ、ｐ−
ｊｉｌＸ４００μＦｌ／Ｌ　’）ボ７ラビン２００ｕｇ
／Ｉ、チアミン塩酸塩４００μＦＩ／Ｉ、イーストエキ
ス５ｇ／！よりなる培地（この培地にはイーストエキス
中に含まれているマグネシウムに由来し、金属マグネシ
ウムとして１　、５１１１１１？／　ｌのマグネシウム
分が含まれている）に変乏て杼なう以外は、全べて実施
例１と同じ操作により、鉄含有微生物菌体をこのものの
鉄含有量はパン酵＠乾燥菌体１００ｇ当り・　７７２　
Ｂであった。

実施例３ 本培養用の培地を、グルコース２ｏぢ／Ｉ、ポリペプト
ン１０８／１、イーストエキス５ｇ／ｌ、Ｅｌｌ　Ｐｉ
第１鉄アンモニウム１ｇ／ｌからなる培地（これにはポ
リペプトン及びイーストエキス中に含まれるマグネシウ
ム分に由来し、金属マグネシウムとして３　ｍｇ／　ｌ
のマグネシウムが含まれている）に変える以外は全べて
実施例１と同操作で培養を行った。かくして得られた乾
燥１ｗ体の電は（１、７４５Ｒ体１００Ｉ？当り４５７
１１１Ｒであった。

実施例４ 実施例３で用いた本培養培地に、新たに硫酸マグネシウ
ムを加え、マグネシウムとしての終濃度を８　ＩｎＨ／
　ｌ　にした培地を使用する（実施例３で用いた培地は
ポリペプトン及びイーストエキス中に含有されるマグネ
シウムに白米し、培地中に３■／１のマグネシウムが含
まれているので、このマグネシウムを含め、培地中のマ
グネシウム分がいうこと。後記の比較例においてもマグ
ネシウムとしての終濃度とは同意義である）。それ以外
は実施例３と同操作で培養を行った。かくして得られた
乾燥菌体の量は０．５８ｇであり、その鉄含有量はパン
酵母乾燥菌体１００ｇ当り１６９＋ｎｇであった。

比較例１ 実施例３で用いた本培養培地に硫酸マグネシウムを加え
、マグネシウムとしての終濃度を１５Ｂ／１にした培地
を使用する以外は、実施例３と同操作を行った。その結
果得られた乾燥菌体の量はｆ）　、６０　ｇであり、そ
の鉄含有量は乾燥菌体１００ｇ当り８８丁Ｂて゛あった
。

比較例２ 実施例３で用いた本培養培地に硫酸マグネシウムを加え
、マグネシウムとしての終濃度を３０ｍｇ／１１こした
培地を使用する以外は実施例３と同操作を行った。その
結果得られた乾燥菌体の量は０．６２ｇであり、その鉄
含有量は乾燥菌体］、　ＯＯｇ当り７１ｍｇであった。

ムを加えマグネシウムとしての終濃度を５０＋ｎｇ／ｌ
にした培地を使用する以外は、実施例３と同様の操作を
行った。その結果得られた乾燥菌体の晴は０．５９ｇ″
Ｃ″あり、その鉄含有量は乾燥菌体１００ｇ当り８９＋
ＩＩｇであった。

比較例４ 実施例３で用いた本培養培地に硫酸マグネジツムを加え
、マグネシウムとしての終濃度を１ｏ。

ｍ＋？／ｌにした培地を使用する以外は、実施例３と同
様の繰作を行った。その結果、得られた乾燥菌体の量は
Ｏ，６１ｇであり、その鉄含有量は乾燥菌体１００ｇ当
り６９＋ｎｇであった。

比較例５ 実施例３で用いた本培養培地に硫酸マグネシウムを加え
、マグネシウムとしての終濃度を２００ｍｇ／ｌ　にし
た培地を使用する以外は、実施例３と同様の繰作を行っ
た。得られた乾燥菌体の量は０．６０ｇであり、その鉄
含有量は乾燥菌体１００ｇ当り８１Ｂであった・ 実施例５ 乾燥菌体の量は０．７２ｇであり、その鉄含有量は酒酔
は乾燥菌体１００Ｂ当り、３６２１Ｄであった。

実施例６ 微’ｌ＝−物として、ビール酵（！１ＩＦＯ１１６７を
使ヘフトン５ｇ／ｌ、イーストエキス３ｇ／ｌ、マルツ
エキス３ｇ／ｌよりなる培地（この培地はポリペプトン
及びイーストエキス中に含まれるマグネシウム分に白米
して、１．７１１１ｇ／ｌのマグネシウムを含有する）
に変えて灯なう以外は、すべて実施例１と同様の操作を
行った。その結果、得られた乾燥菌体の量は０．２２ｇ
であり、その鉄含有量は、ビール酵母乾燥菌体１００ｇ
当り４３３１０ｇであった。

実施例７ 微生物として、バチラス　ズブチリス　ＩＡＭ１０７６
を使用し、前培養培地を、トリプトン１０ｇ／ｌ、イー
ストエキス５ｇ／ｌ、食塩１０ｇ／ｌ、グルコース１８
／１よりなる培地に変えて行なう以外は全べて実施例１
と同様の繰作を行った。その結果、得られた菌体の鉄含
有量は乾燥菌体１００ｇ当り３６０＋ｎｇであった。

（発明の効果） 従来の徐放性鉄剤が不消化性の有磯高分子化合明にあっ
ては、可消化性の天然菌体を保持体としでいるので、消
化と共に鉄が徐々に放出され、胃腸障害等の副作用が防
止できる。また鉄分は有機鉄の形で存在するものと推測
され、従来の鉄則より吸収が良い。また微、生物として
酵母菌、納立菌、乳酸菌などを用いるときは菌体自身が
各種ビタミン、ミネラル、蛋白質、糖類等を含んでおり
、徐放と相俟って鉄の吸収は一層改善されると考えられ
、本発明の高濃度で鉄を含有する微生物菌体は貧血症の
人に極めて有効と考えられる。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）少くとも炭素源及び窒素源を含有する培地におい
   て、鉄化合物を添加して微生物を培養することにより得
   られた、鉄を金属鉄として乾燥菌体１００ｇ当り１００
   ｍｇ以上含有する微生物菌体。
2. （２）少くとも炭素源及び窒素源を含有し、かつ鉄化合
   物を添加した培地において、培地中のマグネシウムの濃
   度を金属マグネシウムとして１０ｍｇ／ｌ以下にして微
   生物を培養し、鉄を高濃度で含有する微生物を製造する
   方法。