JPS62118256A - 診断薬用担体粒子 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は免疫反応性物質、核酸などの被検査物質と特異
的に結合する物質（以下、これを「検査物質」という）
を担持するのに好適な診断薬用担体粒子に関する。

〔従来の技術〕

抗体または抗原などの検査物質を担体に担持させ、特異
的反応によって対応する抗原または抗体などの被検査物
質を検出測定することは、臨床検査の重要な手段のひと
つとなっている。

例えば、検査物質を担持させた担体粒子の分散液（以下
、これを「感作ラテツクス」という）を用いて特異的反
応を行ない、これによる感作ラテックスの状態変化、す
なわち感作ラテツクスの凝集状態、沈降状態あるいは分
散状態などを観測することにより、対応する被検査物質
の存在を診断することができる。

これらの方法において、検査物質を担持させるための担
体粒子に要求される特性としては、（イ）担体表面にお
ける官能特性、電荷量などの諸条件（以下、単に「表面
特性」という）がコントロールされており、非特異的反
応、非特異的凝集などを起こさず安定なこと、（ロ）適
正な粒径範囲で高い単分散性を有すること、（ハ）診断
感度が高いことなどがある。　。

このような目的に使用される担体粒子としては、例えば
ポリスチレン、スチレン−アクリル酸共重合体、スチレ
ン−メタクリル酸共重合体などの重合体の微粒子（以下
、これを「重合体粒子」という）が知られている。しか
し、従来用いられているこれらの重合体粒子においては
、その表面特性例えば電荷量が必ずしも適正でなく、そ
のため非特異的反応、非特異的凝集などを生じやすい、
また逆に、安定すぎるために凝集反応を起こさない、す
なわち感度が低いなどの問題を有する。

〔発明が解決しようとする問題点〕

本発明は、上述のような従来技術の問題点を解決し、担
体粒子の表面特性がコントロールされていて優れた安定
性を有し、非特異的反応、非特異的凝集が生じにくく、
かつ適正な粒径範囲で高い単分散性を有する感度の高い
診断薬用担体粒子を提供することを目的とする。

〔問題点を解決するための手段〕

上記問題点は、芳香族ビニル系単量体とα、β−不飽和
カルボン酸とを含み、かつ前記α、β−不飽和カルボン
酸の割合が単量体全体に対して０．０１重量％以上０．
３重量％未満である単量体の重合体よりなる表面を有す
ることを特徴とする診断薬用担体粒子によって解決され
る。

本発明において用いられる単量体は１、芳香族ビニル系
単量体を主体とし、さらにα、β−不飽和カルボン酸お
よび必要に応じて用いられる他の単量体より構成される
。そして、単量体におけるα。

β−不飽和カルボン酸の割合は、単量体全体に対して０
．０１重量％以上０．３重量％未満、好ましくは０．０
２〜０．２重量％である。α、β−不飽和カルボン酸の
割合が０．０１重量％未満では、安定性が劣り、感作ラ
テツクスが非特異的に凝集す°ることがある。

また、α、β−不飽和カルボン酸の割合が０．３重量％
以上では、抗原または抗体を感作した場合、感作される
量が少なかったり、経時的に抗原またけ抗体の脱着が起
こり、感度が低くなることがある。

前記α、β−不飽和カルボン酸としては、例えば（メタ
）アクリル酸、イタコン酸、マレイン酸、フマール酸な
どを挙げることができるが、特に、メタクリル酸が好ま
しい。これらの単量体は、１種単独でまたは２種以上を
混合して使用することができる。

前記芳香族ビニル系ｉｆ体とは、スチレンおよびその誘
導体を意味し、具体的にはスチレン、クロルスチレン、
α−メチルスチレン、ジビニルベンゼン、ビニルトルエ
ンなどのスチレン糸車Ｍ体を例示することができる。こ
れらの単量体は、１種単独でまたは２種以上を混合して
使用することができる。

芳香族ビニル系単量体の割合は、単量体全体に対して好
ましくは５０〜９９．９９重量％である。

本発明において用いることのできる、芳香族ビニル系単
量体およびα、β−不飽和カルボン酸以外の単量体とし
ては、例えば（メタ）アクリル酸メチル、（メタ）アク
リル酸エチル、（メタ）アクリル酸−ｎ−ブチル、（メ
タ）アクリル酸−２−ヒドロキシエチル、（メタ）アク
リル酸グリシジル、エチレングリコール−ジー（メタ）
アクリル酸エステル、（メタ）アクリル酸トリブロモフ
ェニル、（メタ）アクリロニトリル、（メタ）アクロレ
イン、（メタ）アクリルアミド、Ｎ−メチロール−（メ
タ）アクリルアミド、メチレンビス（メタ）アクリルア
ミド、ブタジェン、イソプレン、酢酸ビニル、ビニルピ
リジン、Ｎ−ビニルピロリドン、塩化ビニル、塩化ビニ
リデン、臭化ビニルなどのα、β−不飽和カルポン酸の
エステル類もしくはアミド類、α、β−不飽和二トリル
化合物、ハロゲン化ビニル化合物、共役ジエン化合物、
低級脂肪酸ビニルエステル類などを挙げることができる
。これらの１ｉｌｆｆｉ体は、１種単独でまたは２種以
上を混合して使用することができる。

なお、上記単量体の表記における「（メタ）」は、アク
リル酸化合物とメタクリル酸化合物の両者を含むことを
意味する。

これらの単量体は、得られる担体粒子に要求される表面
特性、比重などによって適宜選択される。

本発明の担体粒子を得るための重合方法としては、乳化
重合法を挙げることができ、夾雑物が少ないこと、単分
散性の高い粒子を得ることができることなどから、乳化
剤を使用しないいわゆるソープフリー乳化重合法が好ま
しい。

乳化重合法においては、単量体の添加方法、単量体の種
類および量、重合開始剤の種類および量などを調整する
ことにより、例えば０．０２〜２．０μｍの範囲で粒径
のコントロールされた単分散性の高い担体粒子を得るこ
とができる。

また、本発明の担体粒子を得るための乳化重合法におい
て、乳化剤を用いる場合は、単量体１００重量部に対し
、好ましくは１重量部以下、特に好ましくは０．５重量
部以下用いられる。乳化剤としては通常使用されている
ものを用いることができ、ドデシルベンゼンスルホン酸
ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ジアルキルスル
ホコハク酸ナトリウム、ナフタレンスルホン酸のホルマ
リン縮合物などのアニオン系界面活性剤を例示すること
ができ、更にポリオキシエチレンノニルフェノールエー
テル、ポリエチレングリコールモノステアレート、ソル
ビタンモノステアレートなどのノニオン系界面活性剤を
例示することもできる。

また、単量体の重合系への添加方法は特に制限されず、
−活力式、分割方式あるいは連続方式のいずれであって
もよい。

重合開始剤としては、過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウ
ム、過硫酸アンモニウム、過酸化水素などの水溶性重合
開始剤および前記開始剤と重亜硫酸ナトリウム、チオ硫
酸ナトリウム、塩化第一鉄などを組み合わせたレドック
ス開始剤が用いられる。

また、重合開始剤は、通常、単量体１００重量部に対し
、０．１〜１重量重量部加えられる。重合温度は、重合
開始剤によって異なるが、通常１０〜９０℃、好ましく
は３０〜８０℃であり、重合に要する時間は通常、２〜
５０時間程度である。

本発明の担体粒子を得るための上記乳化重合法では、重
合系にシード粒子を存在させることが好ましい。

以下、このシード粒子を用いた重合法（以下、単に「シ
ード重合法」という）について述べる。

シード重合法は、具体的には、シード粒子が分散された
水性分散体に単量体を加え、重合開始剤により重合を行
う。このように、重合系を構成する分散体にシード粒子
を存在させることにより、表面特性がコントロールされ
単分散性がより優れた所定の粒径を有する担体粒子を高
い生産効率で得ることができる。

前記シード粒子としては、スチレン重合体、スチレン−
メタクリル酸共重合体、スチレン−ブタジェン共重合体
などのスチレン系共重合体、（メタ）アクリルエステル
系重合体、酢酸ビニル重合体などの重合体“を例示する
ことができる。これらのシード粒子は、通常、水性分散
体の状態で使用される。また、シード粒子として、架橋
された重合体、さらには表面を親油化処理された無機物
の水性分散体も使用することができる。

シード粒子の粒径は、得ようとする担体粒子の粒径など
によって適宜選択されるが、通常、０．０５〜１０μｍ
、好ましくは０．１〜１．５μｍの範囲とされる。また
、シード粒子の粒径は、最終的に得られる）旦体粒子の
粒径を均一なものとするために均一であることが好まし
い。なお、得られる担体粒子の粒度分布はシード粒子よ
り、均一になるのが一般的である。

また、シード粒子の使用量は、得ようとする重合体粒子
の粒径によって規定されるが、例えば単量体１００重量
部に対し、３〜１０，０００重量部である。

このシード重合法においては、単量体の全部もしくは一
部を反応系に添加する前にあらかしめ工ｉ【量体を水に
分散させて水性分１１シ体としておいてもよい。

以上述べた方法などによって得られる重合体粒子を担体
粒子として使用するうえにおいて必要とされる粒径は、
通常、０．１〜２０μｍ、好ましくは０．１〜１０μｍ
、特に好ましくは０．１５〜５μｍとされる。

本発明の担体粒子に担持される検査物質の例としては、
Ｂ型肝炎表面抗原（Ｉ（Ｂ、抗原）、抗■■Ｂ、抗体、
人絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ抗原）、抗ＨＣＧ抗体
、イムノグロブリンＧ、マイコプラズマ抗原、核酸、核
タン白、エストロゲン。

抗エストロゲン抗体などが挙げられる。

〔実施例〕

以下、本発明の実施例について述べるが、本発明はこれ
らに限定されるものではない。以下の記載において「部
」および「％」はおのおの重量部および重■％を表わす
。

実施例１ 冷却器、温度調節器、撹拌装置を備えた１１の４０フラ
スコに水３００部を入れ、毎分２００回転でかきまぜな
がら、次に過硫酸カリウム０．５部を水５０部に溶解し
て加え、温度が７０℃になってから、スチレン９９．８
部およびメタクリル酸０．２部の混合単量体を、５時間
かけて連続的に添加し、引き続き４時間重合を続け、重
合体粒子（担体粒子）を得た。以上の重合における重合
転化率は９５％、凝集物の生成量は１．５部、生成重合
体粒子の平均粒径は０．６９μｍで、標準偏差は０．０
１μｍであった。

実施例２〜９ シード粒子として第１表に示す重合体粒子（日本合成ゴ
ム■製）および実施例１で得られた重合体粒子（これを
第２表中において「実施例１」と表す）を使用した。

第１表 これらの重合体粒子の水性分散体の固形分濃度を１０％
に調整し、その６６７部を実施例１と同様の装置に入れ
、毎分２００回転でかきまぜながら８０℃に昇温した。

次に過硫酸カリウムの３％水溶液ＩＯ部を加えた後、第
２表に示す単量体組成物を一括して加え、８時間重合を
行い、第２表に示す８種の重合体粒子（１８体粒子）を
得た。これらを実施例２〜９とする。

比較例１〜３ シード粒子として実施例１で得られた重合体粒子を使用
し、単量体として、スチレンのみ３３．３部、スチレン
／メタクリル酸＝　９９．６５１０．３５　（重量比）
の混合ｔｔｕｉｔ体３３．体部３．３部スチレン／メタ
クリル酸−９９／ｌ（重量比）の混合単量体３３．３部
を用いた以外は実施例２と同様に操作し、第３表に示す
３種の重合体粒子（担体粒子）を得た。

これらを比較例１〜比較例３とする。

第３表 実施例１〜９ならびに比較例１〜３で得た担体粒子に、
熱会合ヒ）−ｒ−グロブリンを怒作し、リウマチ因子の
診断（ＲＡテスト）を行った。実施例９で得た担体粒子
を用いた感作ラテツクスはマイクロタイクー法でテスト
を行い、その他はスライドテスト法でテストを行った。

なお、前記感作ラテツクスは、４０℃の恒温槽中に２週
間保持しＲＡテストを行ったが、比較例１で得られた担
体粒子を用いた感作ラテツクスは凝集が進んでおり、Ｒ
Ａテストを行うことができなかった。結果を第４表に示
す。

第４表 （備考） なし：ＰＨ７のリン酸塩緩衝液のみをテスト＋＋＋：３
分以内に強い凝集発生 一：３分以内に強い凝集発生せず ＋＋〜±：＋＋＋と−の中間の凝集状態以上の結果より
明らかなように、本発明の実施例においては、非特異的
反応、非特異的ａ集を生ずることなく、しかも感度の高
いことが確認された。これに対し、比較例１においては
メタクリル酸を含まないために非特異的凝集を生じやす
く、また、比較例２および３においては、メタクリル酸
の割合が過大であるため、感度が不−８シあった。

〔発明の効果〕

本発明によれば、表面特性がコントロールされていて優
れた安定性を存し、非特異的反応、非特異的凝集が生じ
に＜＜、かつ適正な粒径範囲で高い単分散性を有する感
度の高い診断薬用担体粒子を提供することができる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １）芳香族ビニル系単量体とα，β−不飽和カルボン酸
   とを含み、かつ前記α，β−不飽和カルボン酸の割合が
   単量体全体に対して０．０１重量％以上０．３重量％未
   満である単量体の重合体よりなる表面を有することを特
   徴とする診断薬用担体粒子。