JPS6196994A - ステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法 - Google Patents
ステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法Info
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- JPS6196994A JPS6196994A JP21606784A JP21606784A JPS6196994A JP S6196994 A JPS6196994 A JP S6196994A JP 21606784 A JP21606784 A JP 21606784A JP 21606784 A JP21606784 A JP 21606784A JP S6196994 A JPS6196994 A JP S6196994A
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/256—Polyterpene radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/04—Plant cells or tissues
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明はステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方
法に関するものであり、植物組織培養、生物学、農学、
園芸学、薬学等に応用される。
法に関するものであり、植物組織培養、生物学、農学、
園芸学、薬学等に応用される。
（従来の技術と問題点）
ステビア（５ｔｅｖｉａ Ｒｅｄａｎｄｉａｎａ Ｂｅ
ｒｔｏｎｉ ）は南米パラグアイ原産の多年生草本であ
り、主として葉にステビオサイド（５ｔｅｖｉｏｓｉｄ
ｅ ）レバンディオサイドＡ （Ｒｅｂａｎｄｉｏｓｉ
ｄｅ Ａ ）等の高甘味を有するジテルペン配糖体を含
有し、近年砂糖に代わる天然せ味料として注目されてい
る。
ｒｔｏｎｉ ）は南米パラグアイ原産の多年生草本であ
り、主として葉にステビオサイド（５ｔｅｖｉｏｓｉｄ
ｅ ）レバンディオサイドＡ （Ｒｅｂａｎｄｉｏｓｉ
ｄｅ Ａ ）等の高甘味を有するジテルペン配糖体を含
有し、近年砂糖に代わる天然せ味料として注目されてい
る。
ステビアは自家不和合性が強く、種子繁殖で増産するこ
とは非常に能率が悪い上に、甘味配糖体量が個体により
５〜２０％と大きく変異している。
とは非常に能率が悪い上に、甘味配糖体量が個体により
５〜２０％と大きく変異している。
そのため甘味配糖体含量が高くて均一なステビアを大量
に得ることが希望されている。しかし、現在まで組織培
養法によっても甘味配糖体は得られていない。
に得ることが希望されている。しかし、現在まで組織培
養法によっても甘味配糖体は得られていない。
そこで我々はステビアの茎および茎頂を用い植物的に安
定したものを得る目的で培養実験を行い多重原基（ｍｕ
ｌｔｉｐｌｅ ５ｈｏｏｔ ）を作ることに成功した（
生薬学雑誌３８１２ （１９８４））Ｏ更にこの多重
原基を鉢栽培することによって、ある程度配糖体含有量
の安定したステビアの苗を得ることはできた。しかし、
多重原基は試験管内で成長が盛んであるため、１ケ月以
内に新たな培地に移植してはならないし、保存に比較的
大型の容器を必要とするし、長期保存、たとえば凍結保
存は無理である。
定したものを得る目的で培養実験を行い多重原基（ｍｕ
ｌｔｉｐｌｅ ５ｈｏｏｔ ）を作ることに成功した（
生薬学雑誌３８１２ （１９８４））Ｏ更にこの多重
原基を鉢栽培することによって、ある程度配糖体含有量
の安定したステビアの苗を得ることはできた。しかし、
多重原基は試験管内で成長が盛んであるため、１ケ月以
内に新たな培地に移植してはならないし、保存に比較的
大型の容器を必要とするし、長期保存、たとえば凍結保
存は無理である。
（問題点を解決するための手段）
上記問題点のあるステビアにおいて、甘味配糖体含量が
高くて均一な植物体を大量に得ることを目標として、苗
条原基の誘導を行った。苗条原基は遺伝的に極めて安定
し、かつ増殖率が高く、また植物体への転換すなわち苗
化が容易に起こる分裂細胞集塊である。すなわち苗条原
基は一種の栄養体生殖であり、種子にとって代わるもの
である。
高くて均一な植物体を大量に得ることを目標として、苗
条原基の誘導を行った。苗条原基は遺伝的に極めて安定
し、かつ増殖率が高く、また植物体への転換すなわち苗
化が容易に起こる分裂細胞集塊である。すなわち苗条原
基は一種の栄養体生殖であり、種子にとって代わるもの
である。
また種子繁殖の困難なもの、種子繁殖で起きる遺伝的諸
現象の問題点を解決する新技術である。また、この方法
によるとウィルスフリー苗が育成でき長期保存も可能と
なる。
現象の問題点を解決する新技術である。また、この方法
によるとウィルスフリー苗が育成でき長期保存も可能と
なる。
従って、本発明は多年生の甘味配糖体含有植物ステビア
（５ｔｅｖｉａ ｒｅｂａｎｄ土ａｎａ ＢＥＲＴＯ
ＮＩ ）の茎頂を回転培養して苗条原基を誘導すると共
に大量増殖させる甘味配糖体の生産方法にある。この方
法をさらに詳しく説明する。
（５ｔｅｖｉａ ｒｅｂａｎｄ土ａｎａ ＢＥＲＴＯ
ＮＩ ）の茎頂を回転培養して苗条原基を誘導すると共
に大量増殖させる甘味配糖体の生産方法にある。この方
法をさらに詳しく説明する。
ステビアの茎から切りとった茎頂を滅菌し、滅菌水で洗
浄した後、葉原基１〜２枚を付けた茎頂部を摘出し、無
機塩類組成物および植物生長ホルモンを含む人工液体培
地に移植する。約２．０００〜１ ｏ、ｏ ｏ ｏルク
スの照明度、１５〜３０°Ｃの温度および１分間に０．
５〜１０回転の回転数にて回転培養し、苗条原基を誘導
する。人工液体培地の無機塩類組成物としては、既知の
ムラシゲ−スクーグ（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−３ｋｏｏｇ
） およＵ ｊｆ ：ｙ ｔ： −り（ｇａｍｂｏ
ｒｇ ）のＢ５等の培地に含まれる組成物をそのまま、
または若干変更して用いることができる。植物生長ホル
モンとしては、インドール酢酸、ナフタレン酢酸、ｚｓ
’ｂ−ジクロルフェノキシ酢酸等のオーキシン類および
カイネチン、ベンジルアミノプリン等のサイトカイニン
類を用いることができる。苗条原基の培養には強い光が
必要であり、連続した２、０００〜１０，０００ルクス
の照明度が適” 当である。照明度がこの範囲外にある
と、苗条原基の生長が悪い。培養温度は１５〜８０°Ｃ
の恒温が適当である。これより低い温度では増殖の進行
が遅れ、ま′た温度が高すぎると生長が悪く安定しなく
なる。さらに、培養は静置培養よりも回転培養が良く、
特に１分間に０．５〜１０回転のゆるやかな回転数で良
い結果が得られる。静置培養では生長が遅く苗条原基の
組織が出来難く、また回転数が大きすぎると良い結果が
得られない。
浄した後、葉原基１〜２枚を付けた茎頂部を摘出し、無
機塩類組成物および植物生長ホルモンを含む人工液体培
地に移植する。約２．０００〜１ ｏ、ｏ ｏ ｏルク
スの照明度、１５〜３０°Ｃの温度および１分間に０．
５〜１０回転の回転数にて回転培養し、苗条原基を誘導
する。人工液体培地の無機塩類組成物としては、既知の
ムラシゲ−スクーグ（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−３ｋｏｏｇ
） およＵ ｊｆ ：ｙ ｔ： −り（ｇａｍｂｏ
ｒｇ ）のＢ５等の培地に含まれる組成物をそのまま、
または若干変更して用いることができる。植物生長ホル
モンとしては、インドール酢酸、ナフタレン酢酸、ｚｓ
’ｂ−ジクロルフェノキシ酢酸等のオーキシン類および
カイネチン、ベンジルアミノプリン等のサイトカイニン
類を用いることができる。苗条原基の培養には強い光が
必要であり、連続した２、０００〜１０，０００ルクス
の照明度が適” 当である。照明度がこの範囲外にある
と、苗条原基の生長が悪い。培養温度は１５〜８０°Ｃ
の恒温が適当である。これより低い温度では増殖の進行
が遅れ、ま′た温度が高すぎると生長が悪く安定しなく
なる。さらに、培養は静置培養よりも回転培養が良く、
特に１分間に０．５〜１０回転のゆるやかな回転数で良
い結果が得られる。静置培養では生長が遅く苗条原基の
組織が出来難く、また回転数が大きすぎると良い結果が
得られない。
誘導した苗条原基は、最初は淡緑色で小球状形をなして
いるが次第に大きさ、数が増え、暗緑色の球状集塊とな
る。この段階の苗条原基を滅菌ニクロム線付俸で数個の
小片に分割し、前記のような成分を含む、新しい最適培
地に移してやると新しい苗条原基が以前と同様に誘導さ
れてくる。最初の苗条原基は茎頂ドームから誘導される
が、以後の苗条原基は苗条原基から形成される。苗条原
基のドーム状先端部からやや下った部位の最外層のある
細胞がそれまでの分裂は並層軸のみであったものが、垂
層、斜層、並層などの種々の分裂軸で分裂し始める。こ
の細胞分裂によって生じた細胞はその数を増して約６０
個となり小形の苗条原基となる。この小形の苗条原基は
最外側の細胞が内外２層となった大形の苗条原基となる
。苗条原基集塊は、すべて基部側に小量のカルスを付着
させている。
いるが次第に大きさ、数が増え、暗緑色の球状集塊とな
る。この段階の苗条原基を滅菌ニクロム線付俸で数個の
小片に分割し、前記のような成分を含む、新しい最適培
地に移してやると新しい苗条原基が以前と同様に誘導さ
れてくる。最初の苗条原基は茎頂ドームから誘導される
が、以後の苗条原基は苗条原基から形成される。苗条原
基のドーム状先端部からやや下った部位の最外層のある
細胞がそれまでの分裂は並層軸のみであったものが、垂
層、斜層、並層などの種々の分裂軸で分裂し始める。こ
の細胞分裂によって生じた細胞はその数を増して約６０
個となり小形の苗条原基となる。この小形の苗条原基は
最外側の細胞が内外２層となった大形の苗条原基となる
。苗条原基集塊は、すべて基部側に小量のカルスを付着
させている。
誘導した苗条原基の染色体数は一次、二次苗条原基あわ
せて１００個の細胞を検討したが基原植物と同様２ｎ−
２２で安定であり、核型も変化が見られなかった。
せて１００個の細胞を検討したが基原植物と同様２ｎ−
２２で安定であり、核型も変化が見られなかった。
このようにして得られた苗条原基は大量増殖させて酸化
用の静地培地に移植することができる。
用の静地培地に移植することができる。
すると、やがて先端に葉原基を形成し、茎葉をもつ植物
体に生長する。最終的にはこの植物体を野外栽培するこ
とができる。
体に生長する。最終的にはこの植物体を野外栽培するこ
とができる。
以下、本発明を実施例につき詳細に説明する。
（実施例）
ステビアの茎から茎頂を切りとり、外側の展開した葉を
除き、長さ約１ ｃ＋ｎに調整する。この茎頂部分をオ
スパン０．１％５分間、ビューラックス６％５分間、７
０％エタノール２〜８秒間に浸す。
除き、長さ約１ ｃ＋ｎに調整する。この茎頂部分をオ
スパン０．１％５分間、ビューラックス６％５分間、７
０％エタノール２〜８秒間に浸す。
その後、滅醒水で２回洗浄し、この滅菌茎頂部から葉原
基１〜２枚を付けた茎頂を摘出し植え付は切片とした。
基１〜２枚を付けた茎頂を摘出し植え付は切片とした。
検討培地の調整はムラシゲ・スクーグ培地およびガンボ
ーグのＢ５培地を用い、スクロース３０’ｌ／ｌ （３
％ ）を添加した。培地は０．ＩＮＫＯＨおよび０．Ｉ
ＮＨＯｌによりｐＨ５，７〜５．８に調整した。
ーグのＢ５培地を用い、スクロース３０’ｌ／ｌ （３
％ ）を添加した。培地は０．ＩＮＫＯＨおよび０．Ｉ
ＮＨＯｌによりｐＨ５，７〜５．８に調整した。
それぞれの培地を２７ Ｘ ２００ ｍＫ試験管に約２
５ｍ−１’つ分注した。次いでオートクレーブ中（１２
０℃、１，２ｋｇ／ＣＦ１１” ） １５分間で滅菌し
た。添加ホルモンとしてα−ナフタレン酢＃（ＮＡＡ）
と６−ベンジルアミノプリン（ＢＡＰ）溶液を、第１表
に示すように調整してｐＥＩ調整前に加えた。
５ｍ−１’つ分注した。次いでオートクレーブ中（１２
０℃、１，２ｋｇ／ＣＦ１１” ） １５分間で滅菌し
た。添加ホルモンとしてα−ナフタレン酢＃（ＮＡＡ）
と６−ベンジルアミノプリン（ＢＡＰ）溶液を、第１表
に示すように調整してｐＥＩ調整前に加えた。
（表中、１〜２０の数字は培地番号を示１−）○培養条
件は約２，０００〜１０，０００ルクス、２４時間照明
、１５〜３０℃、回転培養器で１分間に０．５〜１０回
転で検討を行った。約２ケ月後にガンボーグのＢ５培地
で約１０，０００ルクス、２２±２℃、回転速度２ ｒ
ｐｍの条件で、第１表における培地番号Ｂ５−１８（Ｂ
ｉＦ３鳴う、ＮＡＡ Ｏ，２へり）およびＢ５−１９（
ＢＡＰ２η、ＮＡＡ ２η）において苗条原基を誘導す
ることができた。
件は約２，０００〜１０，０００ルクス、２４時間照明
、１５〜３０℃、回転培養器で１分間に０．５〜１０回
転で検討を行った。約２ケ月後にガンボーグのＢ５培地
で約１０，０００ルクス、２２±２℃、回転速度２ ｒ
ｐｍの条件で、第１表における培地番号Ｂ５−１８（Ｂ
ｉＦ３鳴う、ＮＡＡ Ｏ，２へり）およびＢ５−１９（
ＢＡＰ２η、ＮＡＡ ２η）において苗条原基を誘導す
ることができた。
続いて第２表の培地条件にて２チスク四−スおよび３チ
スクロースで最適培地条件を詳しく検討したところ、ガ
ンボーグのＢ５培地で８ｅ１６スクロースにおける培地
番号Ｂ ５−１８ （ＢＡＰ ２ Ｖｚ 。
スクロースで最適培地条件を詳しく検討したところ、ガ
ンボーグのＢ５培地で８ｅ１６スクロースにおける培地
番号Ｂ ５−１８ （ＢＡＰ ２ Ｖｚ 。
ＮＡＡ Ｏ，２ｍ９／ｌ ） オＪ： Ｕ ２％スクｏ
−スニオケ；５培地番号Ｂ ５−１８６ （ＢＡＰ ２
ｍ？４、ＮＡＡ Ｏ，６ｍＶｉ ）が最適条件と判明し
た。
−スニオケ；５培地番号Ｂ ５−１８６ （ＢＡＰ ２
ｍ？４、ＮＡＡ Ｏ，６ｍＶｉ ）が最適条件と判明し
た。
第 ２ 表
誘導した苗条原基は、前記成分を含む新しい最適培地に
移して上述した方法で細胞分裂によって増殖させた。
移して上述した方法で細胞分裂によって増殖させた。
また、この苗条原基の苗化について、寒天０．９チを添
加し２チスクロースを添加し添加ホルモンとして第１表
に示すように調整した溶液を加えたガンボーグのＢ５静
地培地で検討した。その結果培地番号Ｂ ５−６ （Ｂ
ＡＰ Ｏ，０２’９／ｌ 、 ＮＡＡ ０ｍ９／ｌ）培
地が最適条件と判明した。各苗条原基は１〜２週間のう
ちにそれぞれ先端に緑色の葉原基を形成し、次第に茎葉
をもつ小植物体へと生長する。この植物体を滅菌バーミ
ュキュライト中に育てながら、徐々に野外の環境へと馴
化させ、最終的には野外栽培へ移行させた。
加し２チスクロースを添加し添加ホルモンとして第１表
に示すように調整した溶液を加えたガンボーグのＢ５静
地培地で検討した。その結果培地番号Ｂ ５−６ （Ｂ
ＡＰ Ｏ，０２’９／ｌ 、 ＮＡＡ ０ｍ９／ｌ）培
地が最適条件と判明した。各苗条原基は１〜２週間のう
ちにそれぞれ先端に緑色の葉原基を形成し、次第に茎葉
をもつ小植物体へと生長する。この植物体を滅菌バーミ
ュキュライト中に育てながら、徐々に野外の環境へと馴
化させ、最終的には野外栽培へ移行させた。
苗条原基及び苗化させた植物中には、既に甘味配糖体５
ｔｅｖｉｏｓｉｄｅ 、 ｒｅｂａｎｄｉｏｓｉｄｅ
Ａ等が含有されていた。このことはそれぞれのメタノー
ルエキスを薄層クロマトグラフで検討し確認した。
ｔｅｖｉｏｓｉｄｅ 、 ｒｅｂａｎｄｉｏｓｉｄｅ
Ａ等が含有されていた。このことはそれぞれのメタノー
ルエキスを薄層クロマトグラフで検討し確認した。
苗条原基の増殖速度は約７日のうちに数的に４倍であっ
た。
た。
（発明の効果）
本方法によれば、苗条原基によって自家不和合性の強い
ステビアを多年にわたって、遺伝的に安定に栄養体増殖
することができる。また、この苗条原基によってステビ
アを大量増殖でき、培養細胞において有用甘味物質の大
量生産が可能となる。
ステビアを多年にわたって、遺伝的に安定に栄養体増殖
することができる。また、この苗条原基によってステビ
アを大量増殖でき、培養細胞において有用甘味物質の大
量生産が可能となる。
また、この方法によるとウィルスフリー苗が育成でき、
長期保存も可能となる。このようにして、成分含有量お
よび植物形態的に均一な植物を作ることによって栽培労
力および時間を軽減短縮し、コストを大幅に引下げるこ
とができる。
長期保存も可能となる。このようにして、成分含有量お
よび植物形態的に均一な植物を作ることによって栽培労
力および時間を軽減短縮し、コストを大幅に引下げるこ
とができる。
さらに本方法によれば、甘味剤を大量に生産できるだけ
でなく、ステビアを含む自家不和合性の多年生植物に広
く適用できる。
でなく、ステビアを含む自家不和合性の多年生植物に広
く適用できる。
手続補正書
昭和５９年１１月２７日
１、事件の表示
昭和５９年 特 許 願第２１６０６７号２、発明の名
称 ステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法３、補
正をする者 事件との関係 特許出願人 広島大学長 ５゜ ６、補正の対象明！ａ四の「特許請求の範囲」 「発明
の詳細な説明コの欄７、補正の内容（別紙の通ｒ）） １、明細書の特許請求の範囲を次のように訂正する。
称 ステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法３、補
正をする者 事件との関係 特許出願人 広島大学長 ５゜ ６、補正の対象明！ａ四の「特許請求の範囲」 「発明
の詳細な説明コの欄７、補正の内容（別紙の通ｒ）） １、明細書の特許請求の範囲を次のように訂正する。
［２特許請求の範囲
Ｌ 多年生の甘味配糖体含有値物ステビア（Ｓｔｅｖｉ
ａ ｒｅｂａｕｄｉａｎａ ＢＥＲＴＯＮＩ ）の茎頂
部を摘出し、これを無機塩類組成物および植物生長ホル
モンを含む人工培地に移植し、２，０００〜ｌ Ｏ，０
００ルクスの照明度、１５〜３０“Ｃの温度および１分
間０．５〜１０回転の回転数にて回転培養し、苗条原基
を誘導すると共に増殖２せて甘味配糖体を得ることを特
徴とするステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方
法。
ａ ｒｅｂａｕｄｉａｎａ ＢＥＲＴＯＮＩ ）の茎頂
部を摘出し、これを無機塩類組成物および植物生長ホル
モンを含む人工培地に移植し、２，０００〜ｌ Ｏ，０
００ルクスの照明度、１５〜３０“Ｃの温度および１分
間０．５〜１０回転の回転数にて回転培養し、苗条原基
を誘導すると共に増殖２せて甘味配糖体を得ることを特
徴とするステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方
法。
ム 無機塩類組成物としてガンボーグのＢ５培地を用い
、植物生長ホルモンとして６ペンシルアミノプリンおよ
びα−ナフタレン酢酸を用いる特許請求の範囲第１項記
載の生産方法。
、植物生長ホルモンとして６ペンシルアミノプリンおよ
びα−ナフタレン酢酸を用いる特許請求の範囲第１項記
載の生産方法。
＆ 回転培養な湿度２２±２℃、照明度１０．０００ル
クス、回転数１分間２回転にて行う特許請求の範囲第２
項記載の生産方法。
クス、回転数１分間２回転にて行う特許請求の範囲第２
項記載の生産方法。
表 人工培地に６−ベンジルアミノプリン２ｒｎ９／ｌ
、α−ナフタレン酢酸０．２ｍｇ／ｌおよび８％スクロ
ースを含む特許請求の範囲第３項記載の生産方法。
、α−ナフタレン酢酸０．２ｍｇ／ｌおよび８％スクロ
ースを含む特許請求の範囲第３項記載の生産方法。
４ 人工培地に６−ベンジルアミ／プリン２■／１％α
−ナフタレン酢酸肌６ ｒｒｕｉ／ １および２％スク
ロースを含む特許請求の範囲第３項記載の生産方法。Ｊ ２明細書第２頁１６行ｒ Ｒｅｄａｎｄｉａｎａ Ｊを
「Ｒｅｂａｕｄｉａｎａ Ｊに同頁１８行「レバンデイ
オ」を「レバウデイオ」に同頁１９行「Ｒｅｂａｎｄｉ
ｏｓｉｄｅＡ」を「Ｒｅｂａｕｄｉｏｓｉｄｅ Ａ Ｊ
にそれぞれ訂正する。
−ナフタレン酢酸肌６ ｒｒｕｉ／ １および２％スク
ロースを含む特許請求の範囲第３項記載の生産方法。Ｊ ２明細書第２頁１６行ｒ Ｒｅｄａｎｄｉａｎａ Ｊを
「Ｒｅｂａｕｄｉａｎａ Ｊに同頁１８行「レバンデイ
オ」を「レバウデイオ」に同頁１９行「Ｒｅｂａｎｄｉ
ｏｓｉｄｅＡ」を「Ｒｅｂａｕｄｉｏｓｉｄｅ Ａ Ｊ
にそれぞれ訂正する。
３同第３頁１６行「移植しては」を「移植しなくては」
に訂正する。
に訂正する。
４、同第４頁１２行「ｒｅｂａｎｄｉａｎａ Ｊをｒ
ｒｅｂａｕｄｉａｎａＪに訂正する。
ｒｅｂａｕｄｉａｎａＪに訂正する。
５、同第５頁５行「ｇａｍｂｏｒｇ Ｊをｒ Ｇａｍｂ
ｏｒｇ Ｊに訂正する。
ｏｒｇ Ｊに訂正する。
６、同第７頁２０行ｒ Ｈｅ／ Ｊ ｅ ｒＦｃｌＪに
訂正する。
訂正する。
７、同第１０頁１６行ｒ ｒｅｂａｎｄｉｏｓｉｄｅＪ
Ｔｔ ｒ ｒｅｂａｕｄｉｏｓｉｄｅ」に訂正する。
Ｔｔ ｒ ｒｅｂａｕｄｉｏｓｉｄｅ」に訂正する。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、多年生の甘味配糖体含有植物ステビア（Ｓｔｅ−ｖ
ｉａ ｒｅｂａｎｄｉａｎａ ＢＥＲＴＯＮＩ）の茎頂
部を摘出し、これを無機塩類組成物および植物生長ホル
モンを含む人工培地に移植し、２，０００〜１０，００
０ルクスの照明度、１５〜３０℃の温度および１分間０
．５〜１０回転の回転数にて回転培養し、苗条原基を誘
導すると共に増殖させて甘味配糖体を得ることを特徴と
するステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法。 ２、無機塩類組成物としてガンボーグのＢ５培地を用い
、植物生長ホルモンとして６−ベンジルアミノプリンお
よびα−ナフタレン酢酸を用いる特許請求の範囲第１項
記載の生産方法。 ３、回転培養を温度２２±２℃、照明度１０，０００ル
クス、回転数１分間２回転にて行う特許請求の範囲第２
項記載の生産方法。 ４、人工培地に６−ベンジルアミノプリン２ｍｇ／ｌ、
α−ナフタレン酢酸０．２ｍｇ／ｌおよび３％スクロー
スを含む特許請求の範囲第３項記載の生産方法。 ５、人工培地に６−ベンジルアミノプリン２ｍｇ／ｌ、
α−ナフタレン酢酸０．６ｍｇ／ｌおよび２％スクロー
スを含む特許請求の範囲第３項記載の生産方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21606784A JPS6196994A (ja) | 1984-10-17 | 1984-10-17 | ステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法 |
| DE19853520727 DE3520727A1 (de) | 1984-10-17 | 1985-06-10 | Verfahren zur erzeugung suesser glykoside durch zuechtung von stevia-schoesslingsspitzen |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21606784A JPS6196994A (ja) | 1984-10-17 | 1984-10-17 | ステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6196994A true JPS6196994A (ja) | 1986-05-15 |
Family
ID=16682751
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21606784A Pending JPS6196994A (ja) | 1984-10-17 | 1984-10-17 | ステビアの茎頂培養による甘味配糖体の生産方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6196994A (ja) |
| DE (1) | DE3520727A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103766222A (zh) * | 2014-02-12 | 2014-05-07 | 四川农业大学 | 甜叶菊组织培养方法及其培养基 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5119169A (en) * | 1974-08-05 | 1976-02-16 | Kibun Kk | Tennenkanmiryono seizoho |
| JPS59132823A (ja) * | 1983-01-20 | 1984-07-31 | 広島大学長 | 苗条原基による有用一年生植物の多年生化大量増殖法 |
-
1984
- 1984-10-17 JP JP21606784A patent/JPS6196994A/ja active Pending
-
1985
- 1985-06-10 DE DE19853520727 patent/DE3520727A1/de active Granted
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5119169A (en) * | 1974-08-05 | 1976-02-16 | Kibun Kk | Tennenkanmiryono seizoho |
| JPS59132823A (ja) * | 1983-01-20 | 1984-07-31 | 広島大学長 | 苗条原基による有用一年生植物の多年生化大量増殖法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103766222A (zh) * | 2014-02-12 | 2014-05-07 | 四川农业大学 | 甜叶菊组织培养方法及其培养基 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3520727A1 (de) | 1986-04-17 |
| DE3520727C2 (ja) | 1988-11-17 |
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