JPS606698A - 新規な３−（４′−アミノブチルアミノ）プロピルアミノブレオマイシン誘導体及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規アミノプロピルアミノプレオマイシン誘導
体に関する。プレオマイシン＆１１９６６年本発明者の
一人である梅沢らにより発見された制癌性抗生物質で（
梅沢ら：ジャーナル・オプ・アンチビオチフス、２００
頁１９６６年）放線菌ストレプトミセス・ノく−チシラ
スによシ生産される１原子の２価の銅を容易にキレート
する塩基性水溶性糖ペプチドで、通常の培養法では１６
種の含銅体力−生産され、単離されている。（例えば、
梅沢ら：ジャーナル・オブ・アンチビオチフス１９Ａ、
２１０頁。

・１９６６年）。これらプレオマイシンのうチ、Ａ１゜
Ａ２．Ａ５．Ｂ２．デメチルＡ２等は、その混合物の脱
銅体（以下「プレオマイシン・コンプレックス」という
。）が現在すでに癌治療の臨床面で広（使用されておシ
、とくに偏平上皮癌を中心に、皮膚癌、頭頚部癌、肺癌
、悪性リンパ腫などに優れた成績をあげている。

咬だ、米国特許第３９２２２６２号及び米国特許第ＲＩ
ｅ３０４５１号には種々のプレオマイシン類が開示され
ている。

しかしながら、プレオマイシン類は使用法によっては肺
毒性などの副作用を生じるため、使用法等がいちじるし
く制限される。

そこで本発明者らはプレオマイシン類の肺毒性などの副
作用をへらすために種々研究の結果アミノブチルアミノ
プロビルアミノプレオマイシン（以下！ｉ　Ｂ　Ｌ　Ｍ
　Ａ５４と略す）のアミノ基を修飾することによｆ）　
Ｉ３ＬＭＡｓの肺毒性が著しるしく減することを見いだ
し本発明を完成した。

本発明の新規アミノプロピルアミノプレオマイシン誘導
体は含銅体及び脱銅体の双方を含み一般式〔■〕 （ＤＸ）　ＮＨ（ＣＨ２）３　Ａ−（Ｃ１”１２）４　
Ｂ　ＣＤ〔式中（ＢＸ）は次式 で表わせる（含銅体の場合はキレート銅を省略）プレオ
マイシン酸のカルボキシル基から水酸基を除いた残基な
示し、Ａは式 で示される基（ここでＲユは（１）水素原子、（２１Ｃ
１〜ＣｔＯのアルキル、　（３）フェニル、シクロアル
キルで１つ以上置換されていても、よいアルキル基（こ
れらの置換基はさらに）・ロゲン原子、低級アルキル、
低級アルコキシ、ベンジルオキシから選ばれる１種又は
２種以上で置換していてもよい馬は低級アルキル、ベン
ジルを示しＢは式で示される基（ここでＲ，３，Ｒ４は
それぞれ（１）水素原子、（２）　Ｃ１〜ＣｔＯのアル
キル、（３）フェニル、シクロアルキルで１つ以上置換
されていてもよいアルキル（これらの置換基はさらに）
・ロゲン原子、低級アルキル、低級、アルコキシ、ベン
ジルオキシから選ばれる１種又は２種以上で置換してい
てもよい））を示す。但し、Ｒ，３，Ｒ４のどちらか少
なくとも一方は水素原子以外の基である。〕で表わされ
る。

上記において、低級アルキルとしては、例えばメチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブ
チル等が、ハロゲンとしては、例えばフッ素、塩素、臭
素等が、シクロアルキルとしては、例えばシクロペンチ
ル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル
、シクロデカニル、シクロウンデカニル等が、低級アル
コキシとしては、例えばメトキシ、エト本発明化合物の
うち代表的なものとしては例えば第−表の化合物があげ
られる。

第１表 なお化合物老中のＪＢＬＭＪは「プレオマイシン」の語
を示す。

上記一般式〔Ｉ〕で示される本発明化合物は次のように
製造することができる。

一般式（ｎ） （ＢＸ）−ＮＨ−（ＣＨ２）３−に−（”Ｒ２）４　Ｎ
Ｈｚ　［［［］〔式中（ＢＸ）は前記と同じであり、Ｘ
は式２ で示される基（ここでＷｌは水素原子、低級アルキル、
Ｒ２は前記と同じ。）を示す〕で表わせるアミノプロピ
ルアミノプレオマイシンに、一般式〔叩 Ｒ５−Ｃｏ−Ｒ６（几 〔式中Ｒ５，Ｒ，はそれぞれ（１）水素原子、（２）　
Ｃａ−Ｃ９のアルキル、　（３１シクロアルキル、（４
）ハロゲン原子、低級アルキル、低級アルコキシ、ベン
ジルオキシ、の１種又は２種以上で置換されていてもよ
いフェニルを示す。〕で示されるカルボニル化合物を還
元的に縮合することにょシ、前記一般式〔Ｉ〕の化合物
を得ることが出来る。

縮合に用いる還元剤としては、シアノ水素化ホウ素ナト
リウムなどの水素化ホウ素化合物などがあげられる。ま
たパラジウム炭素などの触媒をもちいて接触還元をおこ
なってもよい。カルボニル化合物は１〜１．５モルを用
いれば、主として鳥が水素の誘導体、３モル以上用いれ
ば几３．几、が同じ誘導体が得られるが、望ましい添加
量はＲ４が水素の誘導体では１．２モル、Ｒａ　、Ｒ４
が同じ誘導体では１０モル、几□、ル、Ｒ３が同り誘導
体では１５モルである。文武Ｃｍ）の化合物としてｒｎ
、Ｐ〜ジベンジルオキシベンズアルデヒドのようにメタ
ノールに溶けにくい化合物をもちいる場合には反応時間
を増加させれば添加量を減じてもよい。

反応は溶媒として、メタノール、水、ジメチルフォルム
アミド、アセトニトリル、それらの混合液が用いられる
。温度は０〜５０’Ｃがよい。

よりくわしくは、几、が水素の誘導体では０℃がら２５
℃、ケトンを用いる場合、Ｒ３，几４が同じ誘導体で特
に立体障害の大きいアルデヒド、又は溶解度の低いアル
デヒドを用いる場合は３５〜５０℃に暖めることが望ま
しい。反応時間は３時間〜７０時間がよい。立体障害の
大きいアルデヒド、又は溶解度の低いアルデヒ１゛を用
いる場合は時間を長くすることが有効である。

以上のようにして得られた誘導体を単離するには、水素
化ホウ素化合物を用いた場合には、塩酸で反応液のｐＨ
を１に合わせ室温で５〜１０分攪拌し過剰の還元剤を分
解したのち中和し、メタノールを減圧で溜去した後、過
剰のアルデヒド、ケトンをエーテル又はブタノールで抽
出除去し、続いて次の脱塩操作を行った。即ち吸着樹脂
たとえば一アンバーライト　ＸＡＤ−２（ローム・アン
ド・ハース社製）を蒸留水を用いて充填したカラムに注
入して、目的物を吸着する。

蒸留水で塩類をあらい流した後、酸性の含水メタノール
、たとえば１１５０規定塩酸水溶液−メタノール（１：
　４　ｖ／ｖ）で溶出し、青色のプレオマイシン誘導体
の分画を集め、必要ならば陰イオン交換樹脂、ダウシッ
クス■４４　（０１１型；ザ・ダウ・ケミカル社製）で
中和したのち、減圧下で濃縮して凍結乾燥すると、誘導
体の青色粗粉末かえられる。

さらに純度をあげるためつぎの操作を行う。

上記の粉末を蒸留水に溶解し、あらかじめｐｉ−１４，
５，１／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平衡化
したＣＭセファデックス’！’　Ｃ−２５（Ｎａ＋型：
ファルマシア、ファインケミカル社製）を充填したカラ
ムに注入し吸着する。上記の緩衝液に連続的に塩化す）
　ＩＪウムを加えることによりナトリウム濃度を１．０
モルまで徐々に上昇させる直線一度勾配法により溶出す
る。もし目的物の分画に不純物の混入が認められれば、
上記のクロマトグラフィーにつづいて吸着樹脂たとえば
アンバーライト■ＸＡＤ−２を用いるクロマトグラフィ
ーをおこなってもよい。樹脂を緩衝液、たとえば４％酢
酸アンモニウム水溶液、を用いて充填したカラムに粗物
質の水溶液を注大して、目的物を吸着する。緩衝液に連
続的にメタノールを加えることによりメタノール濃度を
徐々に上昇させる直線濃度勾配法によシ溶出する。この
時未反応の原料は最も早く、次いでＲ４が水素の誘導体
が溶出し、次いでＲ３，Ｒ，４が、そしてＲ１，Ｒ３，
Ｒ４が同じ誘導体が最後に溶出する性質があるので、紫
外線吸収モニターを用いることによシ分離することが可
能である。もし目的物の分画に不純物の混入が認められ
れば、上記のクロマトグラフィーを再度行い完全除去を
はかればよい。

このようにして得られる目的物の分画のメタノールを減
圧で溶去した後、先援用いたアンバーライ）ＸＡＤ−２
脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥すると、アミノプロピ
ルアミノプレオマイシン誘導体の含銅体が青色の無定形
粉末で得られる。

このようにして得られるアミノプロピルアミノプレオマ
イシン誘導体の含銅体を公知の方法たとえばＥＤ、ＴＡ
を用いる方法（特公昭５２−３１８７５）で脱銅すれば
脱銅体が得られる。

その−例を説明すると、含銅体を蒸留水に溶解し、これ
を蒸留水で充填したアンバーライト０ＸＡＤ−２のカラ
ムに注入し吸着する。樹脂を塩化ナトリウムと５％のエ
チレンジアミン四酢酸・２ナトリウム（以下［ＥＤＴＡ
・２ＮａＪとりう）からなる水溶液でカラムを洗うと、
銅イオンはＥＤＴＡ・２Ｎａによシ運び去られ、アミノ
プロピルアミノプレオマイシン誘導体（脱銅体）が樹り 脂上に残る。塩化ナトリウムで洗いＥ母ＴＡ・２Ｎａを
除去し、さらに蒸留水で洗浄する。最後に酸性含水メタ
ノール、たとえば１１５０規定塩酸水溶液−メタノール
（１：４Ｖ／Ｖ）で溶出し波長２９０ミリミクロン付近
に吸収極大を示す分画を集める。ダウエックス■４４（
ＯＨ型；ザ會ダウ・ケミカル社製）でｐＩ−１６，０に
合わせた後減圧下で濃縮し、凍結乾燥するとアミノプロ
ピルアミノプレオマイシン誘導体の脱銅体・塩酸塩が白
色の無定型粉末で得られる。

もし、上記の塩酸水溶液のかわりに、硫酸水溶液を用い
れば硫酸塩が得られる。このように上記溶出工程で用い
られる酸の種類を選択することにより、所望の塩とする
ことができる。

以上Ｋｑ明した方法によシ製造されるアミノプロピルア
ミノプレオマイシン誘導体を６規定塩酸水中、１５０℃
、２０時間加水分解にかけると、ＢＬＭ類に共通する分
解生成物（’Ｌ−）レオニン、表−アミノ−β−（４−
アミノ−６−カルボキシ−５−メチル−ピリミジン−２
−イル）プロピオン酸、４−アミノ−３−オキシ−２−
メチル−ローペンタン酸、β−オキシ−Ｌ−ヒスチジン
、β−アミノ−Ｌ−アラニン、２′−（２−アミノエチ
ル）　−２，４’−ビチテゾールー４−カルボン酸〕と
アミンが検出された。又アンバーリスト１５を用いたメ
タツリシスではプレオマイシンと同じＬ−゛グロース、
３−０−カルバモイル−Ｄ−マンノースのメチルグリコ
シドがガスクロマトグラフィーで検出された。

以上の事実は本発明の方法によって製造されタアミノブ
ロビルアミノプレオマイシン誘導体が前記式〔Ｉ〕で表
わされる化学構造を有することを裏づけている。

一般式［１１）の化合物としては、 １）３−（４’−アミノブチルアミノ）プロピルアミノ
プレオマイシン（ＢＬＭＡ５） ２）３−１：Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ　−（４’−アミノ
ブチル）アミノコプロピルアミノブレオマイシン（Ａ　
５ＭＭＨＨ） ３）３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジル−Ｎ−（４′−ア
ミノブチル）アミノ〕プロピルアミノプレオマイシン（
Ａ５ＭＢＺ）ＩＨ）等が挙げられる。但しく　）内は略
号を示す。

一般式ＣＩＩＩ〕の化合物としては、 ベンズアルデヒド、ｐ−クロロベンズアルデヒド、Ｉｎ
、ｐ−シクロロベンズアルデーヒ）’、ｐ−メチルベン
ズアルデヒド、ｐ−メトキシベンズアルデヒド、　ｍ、
ｐ−ジベンジルオキシベンズアルデヒド、シクロ−オク
チル−アルデヒド、シクロウンデカノイルアルデヒド、
ｎ−吉草アルデヒド、ローカプリンアルデヒド等が挙げ
られる。前記一般式Ｃｍ）の化合物は次のように合成さ
れる。

即ち、米国特許第Ｒｅ　３０４５１号に開示され〔式中
λは前記に同じ〕 で示されるアミンの共存下にストレプトミセス・バーチ
シラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｖｅｒｔｉｃｉｌ
ｌｕｓ）に属するプレオマイシン生産菌例えばストレプ
トミセス・バーチシラスＮＫ　−６８−１４４（Ａｍｅ
ｒｉｃａｎＴｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｊ
ｉｏｎ　Ｎｏ、　３１３０７　）を培養することによっ
て得る。この方法によシ得られる化合物としては例えば
ＢＬＭ−Ａ５が挙げられる。

又、一般式（ＩＩ）においてＡが４級塩の場合は次のよ
うにしても合成することができる。即ち前記方法により
得られたＢＬＭ−Ａ５の末端アミン部分の一級アミノ基
に公知の方法を用いて、例えばＬｅｒＬ−ブトキシカル
ボニル基などのアミノ保護基を導入し、一般式〔ｖ〕 （ＢＸ　）−Ｎｕ−（ＣＨｘ　）ａ　Ｎｕ−（ＣＨ２）
４　ＮＨＺ　（Ｖｌ〔式中［ＢＸ］は前記と同じ、Ｚは
保護基を示す〕の化合物を得る。

次にＩｔ、、、ＩＬ２が同じである場合は式〔ｖ〕の化
合物に一般式（ＶＤ 編Ｘ　（Ｖｌｌ 〔式中１イ：は低級アルキルを、Ｘは・・ロゲン原子を
示す。〕う で表わされるハライドを反応せしめて、一般式〔式中（
ＢＸ）、Ｉζ、Ｚは前記に同じ〕で表わされる四級塩と
し、次いで公知の方法を用いて、例えばＺがＬｃｒｔ−
ブトキシカルボニル基である場合には水冷下で６規定塩
酸を用いてＬｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基を除去
し、一般式（ＩＩ）の化合物を得ることができるこの方
法により得られる化合物としては例えばＡ　５　ＭＭＨ
Ｈが挙げられる。

次にＲ１と鳥が異なる場合は前記の式〔ｖ〕の化金物に
一般式圃の化合物を還元的に縮合して一般式ｌ〕 とし、この化合物に一般式〔田の化合物を反応〔式中托
□、Ｒ２，Ｚは前記に同じ〕 で示される四級塩とする。次いで前記の方法で保護基を
除去し一般式〔■〕の化合物を得ることができる。この
方法による得られる化合物としては例えばＡ５ＭＢＺＩ
−ＩＨが挙げられる。

次に本発明のアミノプロピルアミツブレオマイシン誘導
体の代表的な化合物につき、理化学的性質を第２表に示
す。

次に本発明の化合物の代表例によって調べた生物学的諸
性質を以下に説明する。

１）　ミコバクテリ、ラム・スメグマチス−ＡＴＣＣ６
９７、及びバチルス・ズブチリスに対する抗菌活性 上記の検定菌を用いて、寒天平板円筒法により測定した
。ただし、標準物質プレオマイシンＡ２（脱銅体）を１
０００　ｍｃｇ力価力価／口た。

２）培養Ｉ（ｅ　Ｌａ　Ｓ　３細胞に対する増殖阻害効
果プラスチック・シャーレの培養基（１０％仔牛血清添
加ＭＥＭ）にＨａＬａ８３細胞を接種し、２日後にプレ
オマイシン類を添加した。さらに３日間培養を続けた後
、細胞数を測定した。増殖阻害率は次式 ％式％（） 〔式中、Ａは被験試料添加後３日目の最終細胞数、Ｂは
被験試料を添加しない対照における最終細胞数、Ｃは被
験試料添加時の細胞数を表わす。〕を用いて算出した。

試料濃度と阻止率のグラフから、■Ｄ５ｏ値（５０％阻
害のための濃度）をめた。以上１）、２）の結果を第３
表に示す。

３）マウスの肺毒性（肺繊維化）ＩＣＲ系マウス（雄性
１５週令）を一群９匹として用いた。

各薬剤の投与量は、５　ｍｇ／　ｋｆとし、１日１回、
連続１０日間、腹腔内注射し、投与終了後、５週間飼育
し、観察後、屠殺剖検し、肺の線維化の頻度、及び程度
を調べた。

成績は、投与群の肺繊維化なもつマウス数の頻度（Ｉｎ
ｃ　１ｄｅｎｃｅ　）　及び、の強弱の程度（Ｇｒａｄ
ｅ　）について比較した。、その結果を第４表に示す。

なお表中の点数は下記のとおシである。

０点二線維化を認めない。

１点：肺胞に浸出液の蓄積がみられ、肺胞中隔に線維化
様変化が見られる。

２点二数か所にみられる線維化 ４点：散在性にみられる線維化 ６点：２／３以上の広範囲にみられる線維化また、表中
の比はプレオマイシンコンプレックスとの比率を示す。

以上の結果から明らかなように、本発明化合物は培養Ｈ
ｅ　Ｌａ　Ｓ　３細胞に対する増殖阻害活性が強く、優
れた抗菌活性をも有している一方、肺毒性が全く認めら
れないものであることがわかり、臨床面での有用性を強
く示唆している。

次に本発明を実施例によシ具体的に説明する。

実施例１゜ Ａステップ ３−　（４’−アミノブチルアミノ）プロピルアミノプ
レオマイシン３塩酸塩（含銅体）１．０．９−を３０ｒ
ｎｌのメタノールに溶解しベンズアルデヒド９８７、８
　ｍｇを添加し、ついで７８．０〜のシアノ水素化ホウ
素ナトリウムを添加した。室温２４時間反応した後、６
規定塩酸水溶液で反応液のｐＨを１．０に下げ、１ｏ分
間放置して反応を止めた。、１規定水酸化ナトリウムで
中和したのち、減圧下でメタノールを溶去し、残渣に蒸
留水を加えて５０ｍ１とした。これを５０ｍ１のエーテ
ルで抽出し過剰のアルデヒドを除いた。予め４％酢酸ア
ンモニウム水溶液／２％酢酸水溶液（１：　１　ｖ／ｖ
　）を用い■ て充填したアンバーライト　ＸＡＤ−２（ローム・アン
ド・ハース社Ｍ）のカラムに（１００ｍＪ容）に注入し
て、目的物を吸着した。上記緩衝液５００ｍ１にメタノ
ール５００　ｍｌを連続的に加える直線濃度勾配法によ
シ溶出した。メタノール濃度７５％前後で溶出される波
長２９０ミリミクロン付近に吸収極大を示す目的の分画
２００ｍＡ’をあっめた。

この分画からメタノールを減圧溶去して得た水溶液を予
め蒸留水で充填したアンバーライト■ＸＡＤ−２（ロー
ム・アンド・ハース社製）のカラムニ（１００ｍｌ容）
に注入して、目的物を吸着した。

蒸留水１５０ｍ１でカラムをあらりた後、１１５０Ｍ塩
酸水溶液−メタノール（１：　４　ｖ／ｖ　）で溶出し
た。プレオマイシン誘導体の青色の分画を集め、陰イオ
ン交換樹脂、ダウエックス！’　４４　（ＯＨ型；ザ・
ダウ・ケミカル社製）で中和したのち、減圧下で濃縮し
て凍結乾燥した。

上記の粉末を蒸留水１０ｍ１に溶解し、あらかじめｐＨ
４，５、１／２０モル酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液で平
衡化したＣＭセファデックス■Ｃ−２５（Ｎａ＋型：フ
ァルマシア、ファインケミカル社りを充填したカラム（
１００ｎＬｌ容）に注入し吸着した。

上記の緩衝液に連続的に塩化ナトリウムを加えることに
よりナトリウム濃度を１．０モルまで徐々に上昇させる
直線濃度勾配法によシ、溶出した。５５０ｍ１の溶出液
を流し、０．６５モル前後で溶出する青色の分画１２０
　ｍｌを集め、先に用いたアンバーライ）’ＸＡＤ−２
脱塩法で脱塩したのち、凍結乾燥すると３−〔Ｎ−ベン
ジル−Ｎ−（４’−ジベンジルアミノブチル）アミン〕
プロピルアミノプレオマイシンの含銅体６８０ｒｎ９が
青色の無定形粉末で得られた。（収率６０．５％） Ｂステップ Ａステレプで得た含銅体６８０ｍｇを１８ｒｎｌの蒸留
水に溶解し、脱銅のため蒸留水で充填したアンバーライ
トＸＡＤ−２０カラム（１００ｍｌ！容）に注入し吸着
する。樹脂を塩化ナトリウムと５％のＥＤＴＡ−２Ｎａ
からなる水溶液３００ｍ６で洗い、２％塩化ナトリウム
！００ｉＪ、蒸留水１５０ｍ／！の順序で洗浄した後、
最後に１１５０規定塩酸水溶液−メタノール（１：　４
　ｖ／ｖ　）で溶出し波長２９０ミリミクロン付近に吸
収極大を示す分画を集めた。

ダウエックス４４（ＯＨ型；ザΦダウ書ケミカル社製）
でｐ１４６．０に合わせた後、減圧下で濃縮し１、連結
乾燥して３−〔Ｎ−ベンジル−Ｎ−（４’−ジベンジル
アミノブチル）アミノコプロピルアミノブレオマイシン
（化合物１１１ｋＬ１）の含銅体、３塩酸塩６４５　ｍ
９が白色の無形粉末で得られた。（収率９８．２％） 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２９２ｍμＥ１
％／　ｌ　ｃｍは８９であった。臭化カリ錠剤法で測定
した赤外吸収極大波数（ｄｌ） ３３５０．２９５０，１６５０．１５５０，１５１０゜
１４５５．１４００，１３２０．１２５５，１１３０゜
１０９０．１０５０．９７０，９１０，８０５，７４０
゜９５ であった。その他の理化学的性状は第２表に示した通シ
である。

上記のアルデヒドとしてｍ、ｐ−ジベンジルオキシベン
ズアルデヒド１１８５．４ｍｇを用いて２７℃７０時間
反応した後上記の方法で精製及び脱銅し３−（Ｎ−ｍ、
ρ−ジベンジルオキシベンジルーＮ−（４’−ビス（ｍ
、ｐ−ジベンジルオキシベンジル）アミノブチルコアミ
ノ）プロピルアミノブレオマイシン（化合物１１１ｋＬ
１０）の脱銅体・３塩酸塩６６４．８１ｎ９を無色無定
型粉末として得た。（収率４３．６％） 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２８５ｍｔｘ　
Ｅ　１％／１ｍは８８であった。臭化力ＩＪ　錠剤法で
測定した赤外吸収極太波数（ｃｒｎ−１）は、３３５０
．２９５０，１６５０，１５５０．１５１０゜１４６０
．１４３０．１３９０．１２７０．１１９０゜１１４０
．１０６０．１０２０，９１０，８５０．ｓｘｏ”Ｌ７
４０．６９０ であった。

同様にアルデヒドとしてシクロオクタンカルボキサアル
デヒド１３０５．３１ｎｇを用い室温で１６時間反応し
た後、精製脱銅して３−（Ｎ−シクロオクチルメチル−
Ｎ−（４’−ビス（シクロオクチルメチル）アミノブチ
ルコアミノ）プロピルアミノプレオマイシン（化合物Ｎ
１６）の脱銅体・３塩酸塩８７６．９〜を無色無定型粉
末として得た。（収率７３．５％） 水晶の蒸留水で測定した紫外吸収極太は２９２ｍμＥ１
％／Ｉｃｍは９７であった。臭化カリ錠剤法で測定した
赤外吸収極太波数（ｄｌ）は３３５０．２９２５．　１
６５０．　１５５０．　１５２０゜１４５０、　１４０
０．　１３３０．　１２６０．　１１９０゜１１４０．
１１００．　１０６０，１０２０．９８０，９１０゜８
１０であった。

本実施例と同様にして第５表の化合物が製造された。

第５表 実施例２゜ Ａステップ ３−（Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−（４’−アミノブチル）
アミノコプロピルアミノプレオマイシン３塩酸塩（含銅
体）２００１１１１ｐを６　ｍｌのメタノールに溶解し
、ベンズアルデヒド１２９．７ｍ９を添加し、つ（・で
１０．２ｍｇのシアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加し
た。室温１６時間反応した後、実施例１と同様に塩酸処
理、エーテル抽出、アンノく−ライト■ＸＡ、Ｄ−２カ
ラムによるクロマトグラフィーを１１なった後、先に用
いたアンノく−ライ）ＸＡＤ−２脱塩法で脱塩したのち
、凍結乾燥すると、３　［Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−（４
’−ジベンジルアミノ′〕゛チル）アミノコプロピルア
ミノブレオマイシンの含銅体が青色の無定型粉末で１５
５．４ｍ９得られた。

（収率７０％） Ｂステップ Ａステップで得た含銅体１５５．４１ｎｇを１０ｍｅの
蒸留水に溶解し、実施例ＩＢステップと同様に１悦銅し
、減圧下で濃縮し、凍結乾燥して３　［Ｎ、Ｎ−ジメチ
ル−Ｎ−（４’−ジベンジルアミノブチル）アミノコプ
ロピルアミノブレオマイシン（化合物翫１１）の脱銅体
・３塩酸塩が白色の無定型粉末として１４２．６ｍｇ得
られた。（収率９５％）水晶の蒸留水で測定した紫外吸
収極太は２９２ｍμＥ１％／１ｃｒｎは８６であった。

臭化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｄｌ）は ３３２５．２９５０．１６６０，１５４０．１４９０゜
１４５０．１４００．１３３０，１２６０．１１９０゜
１１００．１０６０，１０２０．９８０，８００，７４
０゜９５ であった。

又原料として３−〔Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジル−Ｎ−（
４’−アミノブチル）アミノコプロピルアミノプレオマ
イシン・３塩酸塩（含銅体）２００〜を用い、ベンズア
ルデヒド１２３．７ηを上記と同様に反応させ精製、脱
銅して３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ベンジル−Ｎ−（４’−
ジベンジルアミノブチル）アミノコプロピルアミノプレ
オマイシン（化合物Ｎ１２）の３塩酸塩の脱銅体１３２
〜を無色無定型粉末として得た。（収率６１．８％）水
晶の蒸留水で測定した紫外吸収極大は２９２ｍμＥ１％
／　ｌ　ｃｍは９１であった。臭化カリ錠剤法で測定し
た赤外吸収極大波数（ｉｌ）は ３３７５．２９５０．１６４０．１５４０，１５００゜
１４５０．１３９０，１３２０．１２５０．１１９０゜
１１３０．１０５０．１０２０，９７０，９００，８０
０゜７４０．６９５ であった。

実施例３゜ ３−（４’　−Ｌｅｒｔ−ブトキルカルボニルアミノブ
チルアミノ）プロピルアミノプレオマイシン・２塩酸塩
（含銅体）３００ｍｇをメタノール１５ｍ１．に溶解し
、０℃で）　＋）−ｎ−ブチルアミン４１４．９〜とヨ
ウ化メチル１２７１．３／ｌ１９を加え３日反応を続け
た。氷酢酸でｐ■−■を６に修正し過剰のヨウ化メチル
及びメタノールを減圧溶去し残液にアセトンヲ加えプレ
オマイシンを沈澱せしめた。この沈澱を戸数しアセトン
で洗浄したのち、２　ｍｌの蒸留水に溶解し水冷下で濃
塩酸２　ｍｌを添加しそのまま９０分反応してｔｅｒｔ
−ブチルオキシカルボニル基を脱離した。この反応液を
２規定の酢酸カリウム水溶液で中和し黒褐色の沈澱を炉
去しｐ液を予め４係酢酸アンモニウム水溶液７２係酢酸
水溶液（１：　１　ｖ／ｖ　）を用いて充填したアンバ
ーライト■ＸＡＤ−２（ローム・アンド・）・−ス社製
）（７）カラム（１００ｍｌ容）に注入し反応物を吸着
した。

上記緩衝液５００　ｍｌにメタノール５００　ｍｌを連
続的に加える直線濃度勾配法によシ溶出した。メタノー
ル濃度１０％前後で溶出される波長２９０ミリミクロン
付近に吸収極太を示す目的の分画を集め、この分画より
メタノールを減圧留去して得た水溶液を予め蒸留水で充
填したアンバーライト■ＸＡＤ−２（ローム・アンド・
ハース社製）のカラム（１００ｍｌ容）に注入して目的
物を吸着後、蒸留水１２５　ｍｌで脱塩し１１５０規定
塩酸水溶液−メタノール（１：　４　ｖ／ｖ　）で溶出
した。目的物の青色の分画を集め必要ならば、陰イオン
交換樹脂ダウエックス■４４（、ＯＨ型）；ザ・ダウ・
ケミカル社製）で中和した後減圧下で濃縮し凍結乾燥し
３−（Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−（４−アミノブチル）ア
ミノコプロピルアミノブレオマイシン・３塩酸塩（含銅
体）２１１．０ｍｇを青色無定型粉末で得た。

（収率７２％） 水晶の夢留水で測定した紫外吸収極太は２９３゜２４３
　ｍμで各Ｅ１％７１Ｇは１２２．１５１であった。臭
化カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｒｎ）は
３３００．２９７５．２９５０．２９００．１７１５゜
１６７０．１５８０，１４６０．１４００．１３４０．
１３００゜１２００．１１４０，１１００，１０８０．
１０２０．９２０゜８８０．８１０，７７０，７４０　
であった。その他の理化学的性質を第６表に示す。

実施例４゜ ３　（４’　−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノブ
チルアミノ）プロピルアミノブレオマイシン塩酸塩（含
銅体）　３　０　０ｒｎ９を１０ｍｌのメタノールに溶
解し、これにベンズアルデヒド７６ｍｇとシ２アノ水素
化ホウ素ナトリウム７、　５　ｍｇを添加した。室温で
２４時間反応した後、エーテルを添加しプレオマイシン
を沈澱せしめた後この青色の沈澱をＦ取しエーテルで洗
浄した後予め蒸留水で充填したアンバーライト■ＸＡＤ
−２（ローム・アンド・ハース社製）のカラム（１００
ｍｌ容）に注入し反応物を吸着した。蒸留水を１５０＋
ｌ流した後１１５０規定塩酸水溶液−メタノール（１：
　４　ｖ／ｖ　）で溶出した。目的物の青色の分画を合
し必要ならば陰イオン交換樹脂ダウエックス■４４　（
ＯＩ−１型）：ザ・ダウ・ケミカル社製）で中和した後
減圧下で濃縮乾燥した。残漬にメタノール１５ｍ１を加
え、０℃に冷却後、これにトリーローブチルアミン２０
７．５Ｉｎｇとヨウ化メチ＃６３５．７＃１９を添加し
て３日間反応した後、実施例４に準じて後処理を行い、
精製後、凍結乾燥し３−（Ｎ−メチル−Ｎ　−２０５Ｉ
ｎｇを青色無定型粉末で得た。（収率６６．７％）水晶
の蒸留水で測定した紫外吸収極太は２９３゜２４３ｍμ
各Ｅ１％／１ｃｒｎは１２０．ｊ５０　であった。臭化
カリ錠剤法で測定した赤外吸収極大波数（ｃｒｎ）は３
３５０．２９５０．１７１５．１６６０．１５６０゜−
１４６０，１４００，１３３０，１３００，１２５０，
１’２００゜１１４０、１ｉｏｏ、１０６０，１０１０
．９２０，８８０゜８１０．７７０，７２０，７００　
であった。

その他の理化学的性質を第６表に示す。

第６表 Ａ５ＭＭＨＨ２９３（１２２） ２４３（１５□）　０・８°　１・１７Ａ５ＭＢＺ■−
１■−Ｉ　２９３（１２０）２４３（１５０）　０・７
３　１・１５Ｂ。、、２９３　（１４°） ２４４（１７３）　０・６２　０．９０参考例１゜ ３−　（４’−アミノブチルアミノ）プロピルアミノプ
レオマイシン・３塩酸塩（含銅体）１．５ｆｉ−をメタ
ノール６０ｍ１に溶解し、これにトリーローブチルアミ
ン６９０．１１１１ｇとジーｔｅｒＬ−プチルージカル
ポネート２０３．２ｍｇを水冷下に添加し４時間攪拌し
、反応を終了した。氷酢酸で中和しメタノールを減圧溶
去した。残渣に水２０ｍ１を加え溶解し予め４％酢酸ア
ンモニウム水溶液／２％酢酸水溶液（１：　１　ｖ／ｖ
　）を用いて充填したアンバーライト■ＸＡＤ−２（ロ
ーム・アンド・・・−ス社與）のカラム（１００ｍｌ容
）に注入して反応物を吸着した。上記緩衝液５００　ｍ
ｌにメタノール５００　ｍ／！を連続的に加える直線濃
度勾配法によシ溶出した。

メタノール濃度３５％前後で溶出される波長２９０ミリ
ミクロン付近に吸収極太を示す目的の分画２００　ｍｌ
を集めた。この分画からメタノールを減圧溶去して得た
水溶液を予め蒸留水で充填したアンバーライト■ＸＡＤ
−２（ローム・アンド・ハース社製）のカラム（１００
ｉＪ容）に注入して目的物を吸着した。蒸留水１５０ｒ
ｎｌでカラムをあらった後、１１５０規定塩酸水溶液−
メタノール（１：　４　ｖ／ｖ　）で溶出した。プレオ
マイシン誘導体の青色の分画を集め陰イオン交換樹脂ダ
ウエックス’４４（ＯＩ−１型）；ザ・ダウ・ケミカル
社製）で中和した後、減圧下で濃縮し凍結乾燥し３−Ｎ
−（４−ｔｅｒＬ−ブチルオキシカルボニルアミノブチ
ル）アミノプロピルアミノプレオマイシンの含銅体２塩
酸塩（Ｂｏｃ　−Ａ　５と略称する）　６８７　ｍ９が
青色の無定型粉末で得られた。（収率４４％）水晶の蒸
留水で測定した紫外吸収極太は２９３゜２４４ｍμで各
Ｅ１％／１ｃｒｎは１４０，１７３であった。臭化カリ
錠剤法で測定した赤外吸収極太波数（ｃｒｎ）は３３５
０．２９５０．１７１０．１６７０，１５６０゜１４６
０．１４００．１３６０，１３３０．１２９０，１２５
０゜１１７０．１１３０，１１００．１０６０．１０１
０，９２０゜８８０．８００．７６０　であった。

その他の理化学的性質を第６表に示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）一般式 ％式％） 〔式中［ＢＸ）はプレオマイシン酸のカルボキシル基か
   ら水酸基を除いた残基な示し、Ａ＆ま式 で示される基（ここでＲ１は（１）水素原子、（２）０
   １〜Ｃ１゜アルキル、　（３）フェニル、シクロアルキ
   ルで１つ以上置換されて（・てもよ（・アルキ）Ｌ基（
   これらの置換基はさらに）・ロゲン原子、低級アルキル
   、低級アルコキシ、ベンジルオキシから選ばれる１種又
   は２種以上で置換していてもよい）、Ｒ２は低級アルキ
   ル、ベンジルである）を示しＢは式 ％式％ で示される基（ここでＲ，８，Ｒ４はそれぞ−れ（１）
   水素ｉ　子、（２）Ｃ６〜ＣＩＯのアルキル、（３）フ
   ェニル、シクロアルキルで１つ以上置換されていてもよ
   いアルキル基（これらの置換基はさらにハロゲン原子、
   低級アルキル、低級アルコキシ、ベンジルオキシから選
   ばれる１種又は２種以上で置換していてもよい））を示
   す。但し、几、、Ｉ（，４のどちらか少なくとも一方は
   水素原子以外の基である〕で表わせるアミノプロピルア
   ミノプレオマイシン、および、その塩（２）一般式 ％式％ 〔式中［ＢＸ］はプレオマイシン酸のカルボキシル基か
   ら水酸基を除〜・た残基な示し、２ で示される基（ここでＷｌは水素原子、低級アルキル、
   Ｒ２は低級アルキル、またはペンジルを示す〕で表わせ
   るアミノプロピルアミノプレオマイシンを 一般式　Ｒ，−ＣＯ−Ｒｓ 〔式中Ｒｓ、　Ｒｓはそれぞれ（１）水素原子、（２）
   　０４〜Ｃ９のアルキル、　（３）シクロアルキル、　
   （４）ノＩ：Ｉ　ケン原子、低級アルキル、低級アルコ
   キシ、ベンジルオキシの１種又は２種以上で置換されて
   いてもよいフェニルを示す。〕で表わせるカルボニル化
   合物と、還元的に縮合させることを特徴とする ［ＢＸ］　ＮＨ（ＣＨ２）３　Ａ　（ＣＦｌｚ）４Ｂ〔
   式中（ＢＸ）は前記と同じであり、Ａは式几２ で示される基（ここでＲ□は（１）水素原子、（２）０
   １〜ＣＩＧアルキル、（３）フェニル、シクロアルキル
   で１つ以上置換されていてもよいアルキル基（これらの
   置換基はさらに）・ロゲン原子、低級アルキル、低級ア
   ルコキシ、ベンジルオキシから選ばれる１種又は２種以
   上で置換していてもよい、鳥は前記と同じである。）、
   Ｂは式 で示される基（ここでＲａ　、　Ｒ４はそれぞれ（１）
   水素原子、（２１Ｃｓ　〜Ｃｓｏのアルキル、（３）　
   ７　ｘ　＝　／Ｉ／、シクロアルキル、で１つ以上置換
   されていてもよいアルキル基（これらの置換基はさらに
   ハロゲン原子、低級アルキル、低級アルコキシ、ベンジ
   ルオキシから選ばれる１種又は２種以上で置換していて
   もよい））を示す。但し、Ｒ３＋几、のどちらか少なく
   とも一方は水素原子以外の基である〕で表わせる、アミ
   ノプロピルアミノプレオマイシン誘導体およびその塩の
   製造法。 （３）一般式　ル□ （ＢＸ）−ＮＩＬ−（ＣＨ２）３　Ｎ−（ＣＨ２）４−
   ＮＨ２〔式中〔ＢＸ〕はプレオマイシン酸のカルボキシ
   ル基から水酸基を除いた残基な、Ｒ３ま低級７　／Ｉ／
   　＃　／Ｉ／　、　Ｒ２は低級アルキル、ベンシルヲ示
   す〕で表わせるアミノプロピルアミノプレオマイシンお
   よびその塩。