JPH02212481A - 修飾された炭水化物単位を有するロドマイシン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は細胞増殖抑制活性を有する新規アントラサイク
リン誘導体に関する。さらに詳しくは、炭水化物単位の
Ｃ−４’原子において修飾された７−〇−グリコシルー
ロドマイシン類、その製造方法およびその医薬としての
用途に関する。

アントラサイクリン群の物質は専門家の技術文献に詳記
されている。ドキソルビシンおよびその１４−デオキシ
類似体ダウノルビシンはここで該物質群のうち最も成功
した代表として述べられており、多数の充実性腫瘍およ
び白血病の治療に臨床上使用されている。しかしながら
、これらの特異的化合物の臨床成績はすべての患者に対
して同一ではなく、その成功率はある特殊なタイプの腫
瘍例えば結腸がんおよびメラノーマでは低めである。ド
キソルビシンおよびダウノルビシンによる治療の副作用
は、とりわけ循環器系の損傷およびそれの特徴的症状で
ある。

アグリコン部分および炭水化物単位の雨方が修飾された
多数の他の類以体特にドキソルビシン／ダウノルビシン
型の化合物もまた記載されている。ロドマイシンの場合
、今までに記載された誘導体は普通の合成３−アミノ糖
部分を含有するが、しかし炭水化物単位のＣ−４’ｊＫ
子で修飾された化合物は今までに記載されていない。

このような本技術分野の状態を考慮して、本発明の目的
はロドマイシンアグリコンおよびＣ−４−で修飾された
官能性化炭水化物から出発して新規な作用スペクトルお
よびより低い毒性を特徴とする新規なロドマイシンアリ
コンドを提供することにある。

意外なことに、ＩＯ−アシル保護されたβ−ロドマイシ
ノンを４−アミノダウノサミン誘導体でグリコシド化す
るとσ−０−グリコシド結合された生成物だけが製造さ
れるということが明らかになった。アントラサイクリン
中のα−Ｏ−グリコシド結合はその細胞増殖抑制活性を
示すのに必須である。新規誘導体は知られＩ；７−〇−
（ダウノサミンル）−β−ロドマイジノンよりも細胞毒
性が小さい。

これらの発見に基づいて、本発明はロドマイシンアグリ
コンおよび４−アミノ−またはアジド−炭水化物誘導体
から出発して改善された作用スペクトルを有しそして腫
瘍治療剤として使用することができる７−０−グリコシ
ルーロドマイシノンを製造するというさらに別の目的を
有する。

この目的は下記の式Ｉ 〔式中、 Ｒ１は水素原子またはヒドロキシル基であり、Ｒ２は水
素原子またはＣ，−Ｃ，−アルキル基であり、 Ｒｓはヒドロキシル基、０−アシル保護基またはメチル
オキシカルボニル基であり、 Ｒ４は水素原子、○−アシル保護基、アジド基、アミノ
もしくはトリフルオロアセチルアミノ基、ジーＣ，〜Ｃ
１−アルキルアミノ基またはシアノメチルアミノ基であ
りそして Ｒ１はアジド基、アミノもしくはトリフルオロアセチル
アミノ基、ジーＣ１〜Ｃ４−アルキルアミノ基またはシ
アノメチルアミノ基であるが、ここで前記のアシル保護
基はアセチル基、七ノージーもしくはトリハロゲノアセ
チル基（ここでハロゲンは７ツ素または塩素を意味する
）またはｐ−ニトロベンゾイル基を意味する〕で表され
る細胞増殖抑制活性を有するアントラサイクリン誘導体
を用いて達成される。

好ましい式Ｉの化合物は式中、 Ｒ１がＨまたはＯＨであり、 Ｒ３がＨまたはＣＨ，であり、 Ｒ３がＯＨ，ＦｓＣＣＯＯ，ｐ−Ｎｏ、−ｐｈｃｏｏま
たはＣ００ＣＨｓであり、 Ｒ４がＨ，ＯＨ，ｐ−Ｎ０ｘ−ＰｈＣＯＯ，Ｎｓ、旧ｌ
１、ＮＨＣＯＣＦ　、、Ｎ（ＣＨｓ）ｔまたはＮＨＣＨ
ＩＣＮでありそしてＲｓカＮ３、ＮＨ，、ＮＨＣＯＣＦ
！、Ｎ（ｃｎｓ）ｓｔタハＮＨＣＨ，−ＣＮである化合
物である。

式■の化合物は所望Ｉこよりアンモニウム塩の形態であ
ることができる。

本発明はさらに式Ｉの化合物の１種を製造する方法にも
関する。該方法は ａ）下記の式■ （式中　Ｒ１はＨまたはＯＨであり、ＲｚはＨまたはＣ
，−Ｃ４−アルキルでありそしてＲ３はＯ−アシル保護
基まＩ；はＣ００ＣＨ、である）で表されるアグリコン
化合物を触媒、好ましくはトリ０１〜Ｃ６−アルキルシ
リルトリプルオロメタンスルホネートまたはトリフルオ
ロメタンスルホン酸銀塩の触媒の存在下において式■ま
たは■ 弐ｍ 弐■ 〔式中、２月よ水素原子、０−アシル保護基、アジド基
またはトリフルオロアセチルアミノ基を示し　ＲＩはア
ジド基またはトリフルオロアセチルアミノ基を示しモし
てＸはアセチルオキシ基、ｐ−ニトロベンゾイルオキシ
基または塩素原子を示す）で表される官能性化されたデ
オキシ糖と反応させて７−０−グリコシルーロドマイシ
ノン誘導体とし、その生成物中のアシル保護基をアルカ
リ加水分解によって部分的にまたは完全に除去し次にそ
の生成物中に存在するアジド基を水素化触媒例えばパラ
ジウム／炭素の存在下で加水素分解することによってア
ミノ基に変換して式Ｉにおいて Ｒ１およびＲ１が前述の定義を有し、 Ｒ３がＯＨまたはＣ００ＣＨｓを示し、Ｒ４が水素原子
、ヒドロキシル基、アセチルオキシ基、トリフルオロア
セチルオキシもしくはｐ−ニトロベンゾイルオキシ基ま
たはアジド、トリフルオロアセチルアミノもしくはアミ
ノ基を示しそして Ｒ８がアジド基、アミノ基またはトリフルオロアセチル
アミノ基を示す、 化合物とし次いで ｂ）前記第１工程ａ）で得たアミノ糖を含有する式１の
化合物をそれ自体知られた方法でアルキル化条件の下に
おいてハロゲノアセトニトリルと反応させるかまたは水
素化シアノホウ素アルカリ金属の存在下にＣ，〜Ｃ４−
アルデヒドで還元アルキル化して式Ｉにおいて Ｒ１，Ｒ１およびＲ３が前述の定義を有し、Ｒ４がジー
０１〜Ｃ４−アルキルアミノ基またはシアノメチルアミ
ノ基を示しそして Ｒ１がジーＣ８〜Ｃ４−アルキルアミノ基またはシアノ
メチルアミノ基を示す別の化合物とすることからなる。

式Ｉの化合物は所望により医薬的に許容しうる無機酸ま
たは有機酸のアンモニウム塩に変換されることができる
。核酸の代表例としては塩酸、グルタミン酸およびグル
クロン酸を挙げることができる。

本発明はさらに医薬としての式Ｉの化合物の用途に関す
る。

本発明はまた式■のアントラサイクリングリコシドまた
はその医薬的に許容しうる塩を医薬的に許容しうる希釈
剤または賦形剤とともに含有する医薬組成物に関する。

これらの組成物は治療上有効な量のアントラサイクリン
グリコシドまたはその塩を含有する。

本発明はさらに患者に治療上有効な量を投与することに
よる哺乳動物のある種の腫瘍を治療する剤の調製におけ
る式１のアントラサイクリングリコシドまたはその塩の
使用に関する。

本発明化合物の細胞増殖抑制活性は、インビトロでのＬ
１２１０マウス白血病細胞またはインビボでのＬ１２１
０白血病、Ｂ−１６メラノーマおよびルイス肺腺がんに
おいて測定された。これらの化合物の急性毒性はＮＭＲ
Ｉマウスで測定された。

この調査の方法および結果は後記の実験部分で記載する
。

実施例 以下の実施例に記載の化合物の構造はＮＭＲおよびＭＳ
分析によって同定した。反応の過程および化合物の化学
純度は薄層クロマトグラフィーまたは■ＰＬＣによって
調査した。

本発明の７−０−グリコシルロドマイシノン化合物を製
造するための出発物質として用いたのは下記のロドマイ
シノンアグリコンである。

これらのロドマイシノンアグリコンはアントラサイクリ
ン化学において常套の手法によって製造された。

アグリコンのグリコシド化に使用する官能性化された炭
水化物は炭水化物化学において慣用である方法と類似の
方法で製造された（ＣｌＭｏｎｎｅｒｅｔ、　Ｊ、　Ｂ
ｏｉｖｉｎ、　Ａ、　Ｍａｒｔｉｎ　ａｎｄ　Ｍ。

Ｐａ１ｓ；　Ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅ　Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃｓ、　Ｅｄｉｔ。

１（、Ｓ、　Ｅｌ　Ｋｈａｄｅｍ、　１９８２．　ｐａ
ｇｅｓ　２２５−２５１　ａｎｄ　Ｄ。

Ｉｆｏｒｔｏｎ　ａｎｄ　Ｖｌ、　Ｐｒ１ｅｂｅ、　１
ｂｉｄ、、　ｐａｇｅｓ　１９７−２２４参照〕。

実施例　Ｉ Ｃ−インロドマイシンの製造 （グリコシド化およびデブロッキング反応）７−０−　
（３’−０−ｐ−ニトロベンゾイル−２’、４’、６’
−）リゾオキシ−４′−トリフルオロアセトアミド−ａ
−Ｌ−リキソヘキンピラノシル）−Ｃ−インロドマイシ
ン（化合物４） ２００１１ｇ（０，４５ミリモル）の化合物１をジクロ
ロメタン／アセトン（１０：　ｌ　）　４０ｍｒｌ中に
溶解し、１１．３−ビス−〇−（ｐ−二トロベンゾイル
）−２，４，６−ドリデオキシー４−トリフルオロアセ
トアミド−Ｌ−リキソヘキソピラノース６８０冨ｇ（２
，８当量）および４オングストローム（Ａ）モレキュラ
ーシープ４００ｍｇを加えた。反応混合物を一３０℃に
冷却し、水分を除去しながらトリメチルシリルトリフル
オロメタンスルホネート０．３５＊Ｑ　（５当量）を加
えた。反応混合物を引続いて一３０℃で２時間撹拌し次
にトリエチルアミン０．６２＊Ｑ（１０当量）で中和し
そして濾過した。炉液を氷水で３回洗浄した。有機相を
硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で蒸発した。得られた
粗生成物（５００ｍｇ）を次の反応に用いた。この粗生
成物のうちの少量部分は構造決定のためにシリカゲルプ
レート上で精製した。

７−０−（２’、４’、６’−トリデオキシ−４′−ト
リフルオロアセトアミド−ζ−Ｌ−リキソヘキソピラノ
シル）−コーインロドマイシノン（化合物５） 化合物４（粗生成物）　５００ｍｇをクロロホルム／メ
タノール４０寓ａ中に溶解し、次に室温で０．１ＮＮａ
ＯＨ水溶液１ｔＱを加えた。反応混合物を２時間撹拌し
次いで０．ＩＮ塩酸水溶液１ｍ１２で中和した。

混合物を引続いて氷水で３回洗浄し、ジクロロメタンで
逆抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥しそして真
空中で蒸発した。得られた残留物をカラムクロマトグラ
フィー（シリカゲル；ジクロロメタン／メタノール２０
：１）により精製した。

収量：　２４０１９　（７９％） ７−０−（４’−アミノ−２’　、４’　、６’　−ト
リデオキシ−σ−Ｌ−リキソヘキソピラノシル）−ε−
インロドマイシノン（（ｌ物６） ２００ｍ！９　（０，２９８ミリモル）の化合物５をク
ロロホルム／メタノール３０ｍ４中に溶解し、ＩＮ　Ｎ
ａＯＨ水溶液を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌
し、塩酸水溶液１　ｍＱで中和し次いで真空中で蒸発し
た。残留物をクロロホルム／メタノール２５ｉ中に取り
入れ、硫酸ナトリウムでの撹拌により乾燥した。乾燥剤
をが去し、炉液を蒸発した。

残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；クロ
ロホルム／メタノール　５：１）により精製した。

収量：　１３０ｍｇ（７６％　） ＭＳ；　ＦＡＢ　ｍ／ｅ−５７４（Ｍ　＋　Ｈつ実施例
　２ ４−０−メチル−β−ロドマイシンの製造（グリコシド
化およびデブロッキング反応）４−０−メチル−１ｏ−
ｏ　−ｐ−二トロベンゾイル−７−０−（３’−〇−ｐ
−二トロベンゾイル−２’、４’、８’−）リゾオキシ
−４′−トリフルオロアセトアミド−σ−Ｌ−リキソヘ
キソピラノシル）−β−ロドマイシノン（化合物７）１
．５９　（２，７３ミリモル）の化合物２をジクロロメ
タン／アセトン（１０：　ｌ　）　３０（ｈａ中に溶解
し、■、３−ビスー〇−（ｐ−二トロベンゾイル）−２
，４，６−）リゾオキシ−４−トリフルオロアセトアミ
ド−Ｌ−リキソヘキソピラノシル２　、９５９（２当量
）および４Ａモレキユラ一シーズ３ｇを加えた。反応混
合物を一３０’Ｏに冷却し、トリメチルシリルトリフル
オロメタンスルホネート２．１ｍ１２（５当量）を加え
、その混合物を水分除去しながら１時間撹拌した。反応
混合物にトリエチルアミン３．７ｍｆｆ（１０当量）を
加え次いで濾過した。炉液を３回水洗し、硫酸ナトリウ
ムで乾燥しそして真空中で蒸発した。得られた粗生成物
をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ジクロロメ
タン／石油エーテル／酢酸エチル／アセトン７’Ｏ：　
２５　：　２．５　：　２．５）により精製した。

収量：　１．７４ｇ（７０％） 〔σ〕。−十３０４°（ｃ＝０．０５．クロロホルム中
）’　Ｈ−ＮＭＲおよびＨ，Ｈ−ＣＯＳＹ　（３００Ｍ
）１２．　ＣＤＣＱ３．デルタ）　：　７．９４（ｄｄ
、　Ｊ＝７．５　Ｈｚおよびｌ　Ｈｚ、　Ｈ−１）、７
．７２（ｔ、　Ｊ＝７．５　Ｈｚおよび８　Ｈｚ、　Ｈ
−２）、？、３４（ｄｄ。

Ｊ−８Ｈｚおよびｌ　Ｈｚ、　）ｆ−３）　、５．２７
　（ｄ、　Ｊ□４　Ｈｚ。

Ｈ−７）、２．１５（ｄｄ、　Ｊ１５　Ｈｚおよび４　
Ｈｚ、　Ｈ−８ａ）、２．３８（ｄ、　Ｊ＝１５　Ｈｚ
、　Ｈ−８ｂ）　、　６．５３　（ｓ、　Ｈ−１０）、
１．８３（ｍ、　Ｊ１５　Ｈｚおよび７．４　Ｈｚ、　
Ｈ−１３ａ）　、１．４８（＋＋、　Ｊ＝１５　Ｈｚお
よび７．４　Ｈｚ、　Ｈ−１３ｂ）　、１．０４（ｔ。

Ｊ＝７．４　Ｈｚ、　Ｈ−１４）、１３．８７および１
３．７４（ｓ、　Ｐｈ０Ｈ）、４−０２（ｓ、　ＯＭｅ
）、３．５５（ｓ、　９−０Ｈ）、７．９６−８．２０
（ｍ。

ｐ−Ｎ０２Ｐｈ）　、５．６２　（ｄ、　Ｊ＝４．５　
Ｈｚ、　Ｈ−１’）　、ｌ−９３（ｔｄ、　ＪＪ３　Ｈ
ｚ、　１２．５　Ｈｚおよび４．５　Ｈｚ、　Ｈ−２’
ａｘ）、２．２１　（ｄｄ、　　Ｊ＝１３　Ｈｚおよび
５．５　Ｈｚ、　Ｈ−２’ａｑ）、５．３２　（ｄｄｄ
、　Ｊ利２．５　Ｈｚ、　５−５　Ｈｚおよび３．５　
Ｈｚ。

１（−３’）、４．５３（ｄ、　Ｊ□８．５　Ｈｚおよ
び３．５　Ｈｚ、　Ｈ−４’）、４．５０（ｑ、　Ｊ＝
６−５　Ｈｚ、　Ｈ−５’）、ｌ−２５（ｄ、　Ｊ＝６
．５　Ｈｚ。

Ｈ−６’）、６−５３（ｄ、　Ｊｌ＝８．５　Ｈｚ、　
Ｎ−Ｈ）４−０−メチル−７−０−（２’、４’、６’
−トリデオキシ−４′−トリフルオロアセトアミドーσ
−Ｌ−リキソヘキソピラノシル）−β−ロドマイジノン
（化合物８） １７４ｍｇ（０，１９ミリモル）の化合物７をクロロホ
ルム／メタノール３０ｍ＋２中に溶解し、そしてｌＮＮ
ａＯＨＮＮａＯＨ溶液１上 酸１ｒａＱを加えることにより反応を停止させた。

反応混合物を真空中に、蒸発しそしてカラムクロマトグ
ラフィー（シリカゲル；クロロポルム／メタノール　５
：１）により精製した。

収量：　７ｇｍｇ　（６６％） （ａ　）ｏ　＝　＋　４４５’　（ｃ　−０，１，り’
ａａホルム中）４−０−メチル−７−０−（４’−アミ
ノ−２ｔ、４ｔ。

６′−トリデオキシ−ａ−Ｌ−リキソヘキソピラノシル
）−β−ロドマイジノン（化合物９）０．９２３ｇ（１
ミリモル）の化合物８をクロロホルム／メタノール１．
５０ｍ（２中に溶解し、ＩＮ　ＮａＯＨ水溶液１２＋１
１１２を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、次
にＩＮ塩酸１２＋Ｑで中和しそして真空中で蒸発した。

残留物をクロロホルム／メタノール（５：　１）中に溶
解し、硫酸ナトリウムで乾燥した。次に混合物を濾過し
、炉液を真空中で蒸発しＩ；。得られた粗生成物をシリ
カゲル上のカラムクロマトグラフィー（移動相：クロロ
ホルム／メタノール／アンモニア６５：３５：１）によ
り精製した。

収量：　３９６ｍ５　（７５％） ＭＳ；　ＦＡＢ　ｒＢ／ｅ−５３０（Ｍ　＋　Ｈつ〔σ
〕。−＋４１’　　（Ｃ−０，１，クロロホルム中）’
Ｈ−ＮＭＲ，Ｈ，Ｈ−ＣＯＳＹ（３００！ＩＪＨ２，Ｃ
ＤＣＱｓ／ＭｅＯＤ　５：１゜デルタ）：　７．８２（
ｄｄ、　Ｊ＝７．５　ＨｚおよびｌＨｚ、　Ｈ−１）、
７．６４（ｔ、　Ｊ□８　Ｈｚおよび７．５　Ｈｚ、　
！（−２）、７．２６（ｄｄ。

Ｊ□８　Ｈｚおよびｌ　Ｈｚ、　Ｈ−３）　、４．９８
（ｂｒ、ｓ、　Ｊ−３，８Ｈｚおよび２　Ｈｚ、　Ｈ−
７）　、　２−１１（ｄ、　Ｊ＝１５　Ｈｚおよび２　
Ｈｚ、　Ｈ−８ａ）、２．０４（ｄｄ、　ＪＩＩ１５　
Ｈｚおよび３．８　Ｈｚ。

Ｈ−８ｂ）　、４．７４（ｓ、　Ｈ−１０）、１．７６
（ｍ、　Ｊ−１５Ｈｚおよび７．５　Ｈｚ、　　Ｈ−１
３ａ）、１．６９　（ｍ、　　Ｊ−１５Ｈｚおよび７．
５　Ｈｚ、Ｈ−１３ｂ）、１．０１（ｔ、Ｊ・７．５　
Ｈｚ、Ｈ−１４）　、３．９５　（ｓ、　ＯＭａ）　、
５．３５（ｄ、　Ｊ＝３．７　Ｈｚ、　Ｈ−１’）、１
．６１　（ｄｄｄ、　　Ｊ＝１３　Ｈｚ、　　１３　Ｈ
ｚおよび３−７　Ｈｚ。

Ｈ−２ａｘ）　、１．７８　（ｄｄ、　　Ｊ＝１３　　
Ｈｚおよび４．０　Ｈｚ。

Ｈ−２’ｅｑ）、３．７７（ｍ、　Ｊ−１３Ｈｚ、　４
．０　Ｈｚおよび３．５Ｈｚ、’　Ｈ−３’）　　、２
．８２（ｄ、Ｊ□３−５　Ｈｚ、Ｈ−４’）　、４．１
２（ｑ、　　Ｊ□６．５　Ｈｚ、　　Ｈ−５’）　、　
　１．２３　（ｄ、　　Ｊ＝６．５　Ｈｚ。

Ｈ−６’） ４−０−メチル−１０−０−ｐ−ニトロベンゾイル−７
−０−（２’、３’、４’、６’−テトラデオキシ−３
’、４’−ビス（トリフルオロアセトアミド）−σ−Ｌ
−リキソヘキソピラノシル）−β−ロドマイジノン（化
合物１０） １ｇ（１，，８２ミリモル）の化合物２をジクロロメタ
ン／アセトン（１０：　ｌ　）　２００１１１２中に溶
解し、撹拌し・ながら３．４−ビス（トリフルオロアセ
トアミド）−１−０−ｐ−ニトロベンゾイル−２，３，
４゜６−チトラデオキシーα−β−Ｌ−リキソヘキソピ
ラノース２．２１．９　（２，５当量）および４Ａモレ
キユラ一シーブ２ｇを加えた。この懸濁液を一３０℃に
冷却し、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネ
ート１．４＋ｌ２（５当量）を加えた。反応混合物を一
３０℃で２時間撹拌し、次にトリエチルアミン２．５ｍ
１２（１０当量）を加え、その混合物を引続さ濾過した
。が液を３回水洗し、硫酸ナトリウムで乾燥し次いで真
空中で蒸発した。得られな生成物をシリカゲル上のカラ
ムクロマトグラフィー（溶離剤ニジクロロメタン／アセ
トン１５：１）により精製した。

収量：　１．３４９　（８５％）；融点＝２２０〜２２
３℃（ａ）ｏ−＋４０６°（ｃ＝ｏ−５＋　クロロホル
ム中）４−０−メチル−７−０−（３’、４’−ジアミ
ノ−２’、３’、４’、６’−テトラデオキシ−σ−Ｌ
−リキソヘキソピラノシル）−β−ロドマイジノン（化
合物１１） Ｌ３４ｇ（１，５４ミリモル）の化合物１０をクロロホ
ルム／メタノール２００ｍＱ中に溶解し次に室温でＩＮ
　Ｎａ０）Ｉ　６０ｉｆｆを加えた。３時間後、反応混
合物をＩＮ　ＨＣＱ　６０＋ｉ１２で中和しそして真空
中で蒸発した。残留物をクロロホルム／メタノール（５
：１）中に溶解し、硫酸ナトリウムを加え次いで懸濁液
を２０分間撹拌した。それをｒ過しそして真空中で蒸発
した。残留物をシリカゲル上でのカラムクロマトグツフ
ィー（溶離剤；りｒ７１：７ホシム／メタノール／アン
モニア６５：３５：１）により精製した。

収量：　０．６３９　（７７％） ＭＳ　：　ＦＡＢ、　ｒｍ／ｅ−５２９（Ｍ　＋　Ｈ”
）〔σ〕。−＋　３５５６（ｃ　＝　０．２．メタノー
ル中）’Ｈ−ＮＭＲ１Ｈ，Ｈ−ＣＯＳＹ（３００ＭＨｚ
、　ＭｅＯＤ、デルタ）＝７．５０　（ｄｄ、　　Ｊ・
７．５　Ｈｚおよびｌ　Ｈｚ、　Ｈ−１）、７．４４（
ｔ、　Ｊ＊ｓ、ｓ　Ｈｚおよび７．５　Ｈｚ、　Ｈ−２
）　、７．１５（ｄｄ。

Ｊ・８．５　ＨｚおよびＩ　Ｈｚ、　Ｈ□３）　、４．
９３（ｄｄ、　Ｊ＝４　Ｈｚおよび１．５　Ｈｚ、　Ｈ
−７）、２．０６（ｄｄ、　Ｊ・１５　Ｈｚおよび４　
Ｈｚ、　８−Ｈａ）、２．１４（ｄｄ、　Ｊ＝１５　Ｈ
ｚおよび１．５　Ｈｚ。

Ｈ−８ｂ）　、４．６８（ｓ、　Ｈ−１０）、１．６８
（ｍ、　Ｊ−１５Ｈｚおよび７．５　Ｈｚ、　　Ｈ−１
３ａ）、１．７４　（ｍ、　　Ｊ＝１５　Ｈｚおよび７
．５　Ｈｚ、　Ｈ−１３ｂ）　、１．０６（ｔ、　Ｊ＝
７．５　Ｈｚ、　Ｈ−１４）、３．７８（ｓ、　ＯＭｅ
）、５−３２（ｄ、　Ｊ・３　Ｈｚ、　Ｈ−１’）　、
１．６４（ｄｄｄ、　Ｊ＝１３　Ｈｚ、　１３　Ｈｚお
よびＨ−２’ａｘ）、１．７６（ｄｄ。

Ｊ＝１３　Ｈｚおよび４　Ｈｚ、　Ｈ−２’ｅｑ）　、
３．０６（ｔ、　Ｊ＝１３Ｈｚ、４Ｈｚおよび３　Ｈｚ
、　Ｈ−３’）、２．６６（ｄ、　Ｊ＝３　＋（ｚ。

Ｈ−４’）、４．２２（ｑ、Ｊ・６．５　　Ｈｚ、Ｈ−
５’）、１．２２（ｄ、Ｊ−６，５Ｈｚ、Ｈ−６’） 実施例　３ β−ロドマイシンの製造 （グリコシジル化およびデブロッキング反応）７−０−
　（３’、４’−ビス−（トリフルオロアセトアミド）
　−２’、３’、４’、６’−テトラデオキシ−α−Ｌ
−アラビノへキンピラノシル）−１０−ｏ−トリフルオ
ロアセチル−β−ロドマイジノン（化合物１２） １００ｍｇ（０，２０３ミリモル）の化合物３をジクロ
ロメタン／アセトン（１０：　ｌ　）　２ＯｍＱ中に取
り入れ、３．４−ビス−（トリフルオロアセトアミド）
−１−０−ｐ−二トロペンゾイル−２，３，４，６−チ
トラデオキシーα、β−Ｌ−アラビノへキンピラノース
１９７肩９（２当量）および４Ａモレキユラーシーブ２
００１１１９を加えた。反応混合物を一３０℃に冷却し
、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート０
．１ｍ＜２（３’を量）を加えそして混合物を２時間撹
拌した。反応混合物をトリエチルアミン０．１ｍ１２で
中和し次いでか過した。炉液を硫酸ナトリウムとともに
撹拌し、濾過し次いで真空中で蒸発した。粗生成物をシ
リカゲルでのカラムクロマトグラフィー（溶離剤ニジク
ロロメタン／アセトン　１５：１）により精製しｊこ　
。

収量：　１２５１＋９　（７６，６％）７−０−（３’
−アミノ−２’、３’、４’、６’−テトラデオキシ−
４′−トリフルオロアセトアミド−ａ　−Ｌ−アラビノ
へキンピラノシル）−β−ロドマイシノン（化合物１３
） １２５冨９（０，１５５ミリモル）の化合物１２をクロ
ロホルム／メタノール１９ｍ１２中に溶解し、ｌＮ　Ｎ
ａＯＨ２１１１２を加えｌ；。２時間後反応混合物をｌ
Ｎ　ＨＣｌ２で中和し次いで濾過した。炉液を真空中で
蒸発した。残留物をクロロホルム／メタノール中に溶解
し、硫酸ナトリウムで乾燥しそしてシリカゲル上でのカ
ラムクロマトグラフィー（溶離剤：クロロホルム／メタ
ノール／水（４：４：１）により精製した。

収量ニア２謂９（０，７６％） ＭＳ　：　ＦＡＢ　ｍ／ｅ−６１１（Ｍ　十Ｈ”）この
化合物の構造、特に４′−トリフルオロアセトアミド基
の存在は’Ｈ３００ＭＨｚ　ＮＭＲおよびＨ，Ｈ−ＣＯ
ＳＹを用いることによって明らかにされた。

？−０−（３’−アジド−２’　、３’　、４’　、６
’−テトラデオキシ−４′−トリフルオロアセトアミド
−α−Ｌ−リキソヘキソピラノシル）−β−ロドマイジ
ノン（化合物１４） １１５１１９　（０，２３８ミリモル）の化合物３をジ
クロロメタン／アセトン（１０：　１　）　２０１２中
に取り入れ、３−アジド−１−０−ｐ−ニトロペンソイ
ル−２，３，４，６−チトラデオキシー４−トリフルオ
ａアセトアミドーα、β−Ｌ−リキソヘキソピラノース
３００１１９（３当量）および４Ａモレキュラーシープ
２５０濁りを加えた。反応混合物を一５０℃に冷却し、
トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート２６
４１１ｇ（５当量）を加えた。２時間後反応混合物をト
リエチルアミンＯ−１６ｍｆｆ（５当量）で中和し次い
で濾過した。炉液を少量のｎ−ブタノールとともに混合
し、０．０５ＮＮａＯＨで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾
燥し次いで真空中で蒸発した。残留物をシリカゲル上で
のカラムクロマトグラフィー（溶離剤ニジクロロメタン
／石油エーテル／アセトン　５：５：１）により精製し
た。

収量：１１０渭ｇ（７２％） ＭＳ　：　ＦＡＢ　ｒｎ／ｅ−６３７（Ｍ　＋　Ｈ”）
Ｊｌ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、　ＣＤ（ｊ２ｓ／ＭｅＯ
Ｄ　３：１．デルタ）＝７．８２（ｄｄ、　Ｈ−１）、
７．６７（ｔ、　Ｈ−２）、７．２７（ｄａ、　Ｈ−３
）、５．０５（ｂｒ、ｓ、　Ｈ−７）、２．１３（ｄｄ
、　Ｈ−８ａ）、２．０７（ｄｄ。

Ｈ−８ｂ＞、５．７９（ｓ、　　Ｈ−１０）、１．６９
（ｍ、Ｈ−１３ａ）、１．７６（ｍ、Ｈ−１３ｂ）　、
１．０３　（ｔ、Ｈ−１４）　　、５−４４（ｂｒ、ｓ
。

ト１′）、１．８３（ｄｄｄ、　Ｈ−２’ａｘ）、１．
９４（ｄｄ、　Ｈ−２’ａｑ）、３．８３（ｍ、Ｈ−３
’）　　、４．２７（ｂｒ、ｄ、Ｈ−４’）、４４−２
９（。

Ｈ−５’）、１．１５（ｄ、Ｈ−６’）７−０−　（３
’、４’−ビス−（トリフルオロアセトアミド）−２’
、３’、４’、６’−テトラデオキシ−ａ−Ｌ−リキソ
ヘキソピラノシル）−１０−０−トリフルオロアセチル
−β−ロドマイシノン（化合物１５）および７−０−　
（３’、４’−ビス−（トリフルオロアセトアミド）−
２’、３’、４’、６’−テトラデオキシ−σ−Ｌ−リ
キンヘキソビラノシル）−β−ロドマイジノン（化合物
１６） １００ｍｇ（０，２０７ミリモル）の化合物３をジクロ
ロメタン／アセトン（１０：　１　）　２０ｍＱ中に溶
解し、３．４−ビス−（トリフルオロアセトアミド−１
−〇−ｐ−ニトロベンゾイルー２．３．４．６−チトラ
デオキシーσ、β−Ｌ−リキソヘキソピラノース２０１
ｍ９（２当量）およびモレキュラーシーブ２００ｍｇを
加えた。反応混合物を一３０℃に冷却し、水分を除去し
ながらトリメチルシリルトリフレート０．１＋１２（３
当量）を加えた。２時間後トリエチルアミンＱ、　１ｍ
ｆｆ１を反応混合物に加えそしてそれを濾過した。炉液
を真空中で蒸発し、化合物１５を含有した生成粗生成物
をそれ以上精製しないで次の反応工程において用いた。

粗生成物をクロロホルム／メタノール（３：　１）　１
０＋＋＋１２中に溶解し、０．ｌＮ　ＮａＯＨｌ　ｍＱ
を加えた。反応時間１０分後に部分的な脱遮断が完了し
た。反応混合物をＯ，ｌＮ　ＨＣＱ　　１ｙａＱで中和
しそして真空中で蒸発した。残留物をシリカゲル上での
カラムクロマトグラフィー（溶離剤ニジクロロメタン／
アセトンＪＯ：１）により精製した。

収量＝（化合物１６の）　１００ｍｇ（８３，７％）Ｍ
Ｓ　：　ＦＡＢ、　ｍ／ｅ−７０７（Ｍ　＋　Ｈつ　；
ｍ／ｅ＝　７２９　（Ｍ　＋　Ｎａつ ７−０−　（３’、４’−ジアミノ−２’、３’、４’
、６’−テトラデオキシ−ａ−Ｌ−リキソヘキソピラノ
シル）−β−ロドマイジノン（ｆｌ物１７）１００ｍｇ
（０，１４ミリモル）の化合物１６をクロロホルム／メ
タノール（３：　ｌ　）　１０ｍＱ中に溶解し、ＩＮ　
ＮａＯＨ２ｔｔｒ（ｌを加えた。反応混合物を２時間撹
拌し次にＩＮ　ＨＣＱ　　２ｍｇで中和しそして真空中
で蒸発した。粗生成物を通常のように硫酸ナトリウムで
乾燥し、シリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー（
溶離剤：クロロホルム／メタノール／水　４　：　４　
：　Ｉ）により精製した。

収量：　５８＋ｇ　（８０，８％） ＭＳ　：　ＦＡＢ　ｒａ／ｅ−５１５（Ｍ　＋　Ｈつ７
−０−（４’−アジド−２’、３’、４’、６’−テト
ラデオキシ−３′−トリフルオロアセトアミドー〇　−
Ｌ−アラビノヘキソピラノシル）−β−ロドマイシノン
（化合物１８） １９（２，０７ミリモル）の化合物３をジクロロメタン
／アセトン（１０：　ｌ　）　１５０＋＋＋Ｑ中に溶解
し、４−アシｔ’　−１−０−ｐ−二トロペンソイル−
２’、３’、４’、６’−テトラデオキシ−３−トリフ
ルオロアセトアミド−σ−β−Ｌ−アラビノへキンピラ
ノース２．６９　（３当量）および４Ａモレキユラ一シ
ープ２ｇを加えた。反応混合物を一３０℃に冷却し、次
に保護ガスの下でトリメチルシリルトリフレート１．６
＋ｘＩ２（５当量）を加えた。反応混合物を２時間撹拌
し、次にトリエチルアミン１．４ｍＱＣ５当量）ととも
に撹拌しそして濾過しだ。炉液を０．０１Ｎ　ＮａＯＨ
次に水で洗浄しそして真空中で蒸発した。残留物をシリ
カゲル上でのカラムクロマトグラフィー（溶離剤ニジク
ロロメタン／アセトンｌＯ：１．）により精製した。

収量：　０．９４ｙＣ７２％） ７−０−　（３’−０−ｐ−ニトロベンゾイル−２’、
４’、６’−トリデオキシ−４′−トリフルオロアセト
アミド−α−Ｌ−リキソヘキソピラノシル）−ｉｏ−、
ｏ　−トリフルオロアセチル−β−ロドマイジノン（化
合物１９） ５００１１９（１，０３ミリモル）の化合物３をジクロ
ロメタン／アセトン（１０：　ｌ　）　９０ｔａＱ中に
溶解し、１．３−ビス−（ｐ−ニトロベンゾイル）　−
２，４，６−ドリデオキシー４−トリフルオロアセトア
ミド−σ、β−Ｌ−リキソヘキンピラノース１．４ｇ（
２，５当量）および４Ａモレキユラーシーブ１９を加え
た。反応混合物を一３０℃に冷却し、トリメチルシリル
トリフレート１．１ｇ（５当量）を加えた。反応混合物
を保護ガス下に２時間撹拌し、トリエチルアミン０．７
ｍ＋２（５当量）を加えそして混合物を濾過し、真空中
で蒸発した。粗生成物をシリカゲル上でのカラムクロマ
トグラフィー（溶離剤ニジクロロメタン／石油エーテル
／アセトン　５：５；１）により精製した。

収量：　０．８５９　（９５％） ７−０−（４’−アミイー２’、４’、６’−１−リゾ
オキシ−σ−Ｌ−リキソヘキソピラノシル）−β−ロド
マイシノン（化合物２０） ０．８５ｇ（０，９９ミリモル）の化合物１９をクロロ
ホルム／メタノール１００ｍＱ中に溶解し、ＩＮ　Ｎａ
ＯＨ１０ｒａＱを加えた。２時間後反応混合物をＩＮ　
ＨＣｌ２　１０ｍＱで中和し次いで真空中で蒸発した。

残留物をクロロホルム／メタノール中に溶解し、硫酸ナ
トリウムどともに撹拌し次いで濾過した。炉液を真空中
で蒸発し、得られた粗生成物をシリカゲル上でのカラム
クロマトグラフィー（溶離剤：クロロホルム／メタノー
ル／アンモニア６５：３５：１）により精製した。

収量：　０．３２４９　（６２％） ＭＳ　：　ＦＡＢ　ｎ＋／ｅ＝　５１６　（Ｍ　＋　Ｈ
”）実施例　４ Ｌ１２１０白血病細胞における細胞毒性（幹細胞アッセ
イ鄭５ＣＡ） 試験は、ＨａｍｂｕｒｇｅｒおよびＳａｌｍｏｎの方法
に、下記に示すような修正を加えて行なった。

条件付けの培地（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ　ｍｅｄｉｕ
ｍ）は、ＭｃＣｏｙ　５　Ａ培地に置き換えた。軟性の
寒天培地におけるＬ１２１０白血病細胞の高いクローニ
ング率の結果として、１プレートあたりの腫瘍細胞の数
が５ＸｌＯ”まで減少した。

細胞を、種々の濃度の供試物質を用いて、３７℃で１時
間インキュベートした。次いで、細胞を２回、ＭｃＣｏ
ｙ　５　Ａ培地で洗浄し、そして、Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ
およびＳａｌｍｏｎの方法に従って、上部層としての２
つの層の寒天培地系に植えた。

さらに平行試験を連続的なインキュベーション時間を用
いて行ない、種々の濃度の供試物質を、これらの細胞を
植える前に上部の寒天層に加えて混合した。

プレートを、ＣＯ□が５％、Ｏ２が２ｏ％そして相対大
気湿度が９５％であるインキュベーター中で５〜７日間
、インキュベートした。この期間の１１ｋ、直径６０ｕ
ｍのコロニーをインバートスコープ（１ｎｖｅｒｔｏｓ
ｃｏｐｅ）を用いて計数した。

その結果を、未処理の群に対する、処理した群のコロニ
ーのパーセント比として表わした。

繰り返し試験の変動係数は、１５％以下であつｌこ　。

得られた供試化合物の結果を第１表に示す。

連続的および１時間のインキュベーションにおけるＩ　
Ｃ６゜値は、用量−効果曲線より測定した。（第１表） 表中の数値は、殆んどの物質が、インビトロ試験系にお
いて人間および動物の腫瘍細胞に対して、非常に高い細
胞毒性（ＩＣｓ。０．１μｇ／ｒａｎ以下）を有するこ
とを示唆している。

実施例　５ 増殖試験（ＮＴＴ還元） 指数増殖期のＬ１２１０、Ａ３４９またはＨＴ２９を９
６ウエルのマイクロテストプレート中のＲＰＭＩ　　１
６４０培地中、５　Ｘ　１０’細胞／ｒａＱの細胞密度
で、種々の濃度の供試物質とともに、３７℃でＣＯ！が
５％そして相対大気湿度が９５％の条件で、７２時間イ
ンキュベートした。対照試験は、供試物質の代わりに増
殖培地のみを含んだ。各供試物質および対照に関して、
４回測定を行なった。６５時間のインキュベーション後
、５０μａのＭＴＴ溶液（リン酸塩で緩衝化された塩化
ナトリウム中、２．５＋ａｇ／１１１２）を加えた。生
きた細胞の存在下、ＭＴＴを、還元して深赤色の不溶の
ホルマザン染料とした。

この反応は、Ｌ１２１０細胞においては７時間後、Ａ３
４９およびＨＴ２９細胞においては２４時間後に終了し
、そして、上澄みの培地を注意深く、すくった。不溶の
染料を１００μＱのジメチルスルホキシドを加えて溶解
し、次いで、生成した溶液の吸光度を、各ウェルに関し
て、７０−社製のマルチスキャン光度計３４０ＣＣで４
９２ｎｍの波長において測定した。

処理した細胞および未処理の細胞の吸光度の比から、用
量−効果曲線が得られ、そして、これにより、ちょうど
５０％の細胞を殺す濃度（ＩＣ１ｏ）が読み取ることが
できた。繰り返し試験の変動係数は１５％以下であった
。

実施例　６ 急性毒性の測定 急性毒性を測定するために、ＢＤＦＩマウスに種種の用
量の０．５＋ｍｆｆ１の５％強度グルコース溶液中に溶
解された供試物質を腹腔内注射した。供試物質の濃度あ
たり、５匹のマウスを用いた。１４４日目、生き残りの
マウスの数を測定し、その値から、Ｌｉｔｃｈｆｉｅｌ
ｄ　Ｗｉｌｃｏｘｏｎ法によりＬＤ５、ＬＤ５０および
Ｉ、Ｄ９５を決定した。本明細書に記載の化合物の毒性
（ＬＤ５０（ｍｇ／に９））は、アドリアマイシンと比
較して決定した。

実施例　７ マウスのＬ１２１０白血病に対するロドマイシンのイン
ビボ活性 腹水液を、移植後７日目のＤＢＡ２マウス（雌。

１８〜２０ｇ）から、無菌条件下で取り出した。腹水を
ＰＢＳを用いて３回洗浄し、計数し、０．２ｒａＱのＰ
ＢＳ中、細胞計数を１０’となるように調整した。

Ｑ、２ｓ（ｌのＰＢＳ中で懸濁された細胞１０６個を次
いで、ＤＢＦＩマウス（雌、　１８〜２０ｇ）に腹腔内
注射しｌ；。

各物質濃度について、または、対照どして、１群あたり
６匹の動物を用いた。

抗腫瘍活性を測定するために、動物を供試物質の注射後
１日目と５日目にその体重を計った。

５日目における２０％以上の体重の減量は該物質の毒性
作用の指標とみなした。

試験終了時（すべての動物が死亡した時または動物が生
き残っている場合は６００日目、試験の５日目に少なく
とも６５％の動物がまだ生き残っている場合に、特定の
群における動物の平均生存時間を測定した。平均生存時
間は、試験経過中に死亡した動物についてのみ測定した
。長期間の生存動物（ＬＴＳ）は、この計算において考
慮に入れなかったし、別途記載する。

未処理の対照のパーセントにおける特定の物質濃度につ
いての抗腫瘍活性（Ｔ／Ｃ）は、地理した群の平均生存
時間（ＭＳＴｔ）および対照群の平均生存時間（ＭＳＴ
ｃ）から、次式 下のレベルの用量を決定した。試験６００日目、まだ生
存している動物は、長期間の生存動物として、別途記載
した。

に従って決定した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）下記の式 I ▲数式、化学式、表等があります▼式 I 〔式中、 Ｒ＾１は水素原子またはヒドロキシル基であり、 Ｒ＾２は水素原子またはＣ＿１〜Ｃ＿４−アルキル基で
   あり、 Ｒ＾３はヒドロキシル基、Ｏ−アシル保護基またはメチ
   ルオキシカルボニル基であり、 Ｒ＾４は水素原子、Ｏ−アシル保護基、アジド基、アミ
   ノもしくはトリフルオロアセチルアミノ基、ジ−Ｃ＿１
   〜Ｃ＿４−アルキルアミノ基またはシアノメチルアミノ
   基でありそして Ｒ＾５はアジド基、アミノもしくはトリフルオロアセチ
   ルアミノ基、ジ−Ｃ＿１〜Ｃ＿４−アルキルアミノ基ま
   たはシアノメチルアミノ基であるが、ここで前記のアシ
   ル保護基はアセチル基、モノ−、ジ−もしくはトリハロ
   ゲノアセチル基（ここでハロゲンはフッ素または塩素を
   意味する）またはｐ−ニトロベンゾイル基を意味する〕
   で表される化合物およびその塩。 ２）式中、 Ｒ＾１がＨまたはＯＨであり、 Ｒ＾２がＨまたはＣＨ＿３であり、 Ｒ＾３がＯＨ、Ｆ＿３ＣＣＯＯ、ｐ−ＮＯ＿２−ＰｈＣ
   ＯＯまたはＣＯＯＣＨ＿３であり、 Ｒ＾４がＨ、ＯＨ、ｐ−ＮＯ＿２−ＰｈＣＯＯ、Ｎ＿３
   、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＣＦ＿３、Ｎ（ＣＨ＿３）＿２ま
   たはＮＨＣＨ＿２ＣＮでありそして Ｒ＾６がＮ＿３、ＮＨ＿２、ＮＨＣＯＣＦ＿３、Ｎ（Ｃ
   Ｈ＿３）＿２またはＮＨＣＨ＿２−ＣＮである請求項１
   記載の化合物。 ３）基Ｒ＾１、Ｒ＾２、Ｒ＾４およびＲ＾５が請求項１
   記載の定義を有しそしてＲ＾３がメチルオキシカルボニ
   ル基である請求項１記載の化合物。 ４）基Ｒ＾１、Ｒ＾２、Ｒ＾４、およびＲ＾５が請求項
   １記載の定義を有しそしてＲ＾３がヒドロキシル基であ
   る請求項１記載の化合物。 ５）Ｒ＾１がＨまたはＯＨであり、Ｒ＾２がＣ＿１〜Ｃ
   ＿４−アルキル基でありそして基Ｒ＾３、Ｒ＾４および
   Ｒ＾５が請求項１記載の定義を有する請求項１記載の化
   合物。 ６）医薬としての請求項１記載の化合物。 ７）下記の式II ▲数式、化学式、表等があります▼式II （式中、Ｒ＾１はＨまたはＯＨであり、Ｒ＾２はＨまた
   はＣ＿１〜Ｃ＿４−アルキルでありそしてＲ＾３はＯ−
   アシル保護基またはＣＯＯＣＨ＿３である）で表される
   アグリコン化合物を触媒、好ましくはトリＣ＿１〜Ｃ＿
   ４−アルキルシリルトリフルオロメタンスルホネートま
   たはトリフルオロメタンスルホン酸銀塩の存在下におい
   て式IIIまたはIV ▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表
   等があります▼ 式III式IV 〔式中、Ｒ＾４は水素原子、Ｏ−アシル保護基、アジド
   基またはトリフルオロアセチルアミノ基を示し、Ｒ＾５
   はアジド基またはトリフルオロアセチルアミノ基を示し
   そしてＸはアセチルオキシ基、ｐ−ニトロベンゾイルオ
   キシ基または塩素原子を示す）で表される官能性化され
   たデオキシ糖と反応させて７−Ｏ−グリコシル−ロドマ
   イシノン誘導体とし、その生成物中のアシル保護基をア
   ルカリ加水分解によって部分的にまたは完全に除去し次
   にその生成物中に存在するアジド基を水素化触媒例えば
   パラジウム／炭素の存在下で加水素分解することによっ
   てアミノ基に変換して式 I において Ｒ＾１およびＲ＾２が前述の定義を有し、 Ｒ＾３がＯＨまたはＣＯＯＣＨ＿３を示し、Ｒ＾４が水
   素原子、ヒドロキシル基、アセチルオキシ基、トリフル
   オロアセチルオキシもしくはｐ−ニトロベンゾイルオキ
   シ基またはアジド、トリフルオロアセチルアミノもしく
   はアミノ基を示しそして Ｒ＾５がアジド基、アミノ基またはトリフルオロアセチ
   ルアミノ基を示す、 化合物とすることからなる請求項１記載の化合物の製造
   方法。