JPS60241893A - 光学活性（ｓ）―オキサゾリジノン誘導体の製造方法 - Google Patents
光学活性（ｓ）―オキサゾリジノン誘導体の製造方法Info
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- JPS60241893A JPS60241893A JP9805584A JP9805584A JPS60241893A JP S60241893 A JPS60241893 A JP S60241893A JP 9805584 A JP9805584 A JP 9805584A JP 9805584 A JP9805584 A JP 9805584A JP S60241893 A JPS60241893 A JP S60241893A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
・・・（Ｉ）（式中、Ｒ１は活性水素基、或いは置換又
は未置換アリル（Ａｒ）基、Ｒ２は置換又は未置換アル
キル基）で表わされる（ ＩＬ、８ ）−５−アシロキ
ンメチル−オキサゾリジン−２−オン中を不斉的に加υ れる光学活性５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−
２−オンを生成させる立体選択的エステフーゼ活性を有
する微生物或いは酵素を作用させることにより、ラセミ
体（１）から氷解物（Ｉ）及び未反応物である光学活性
５−アシロキシメチル−オキサυ （Ｒ１，Ｒｇは前記に同じ）を生成させ、夫々の光学活
性体を分離、採取する。或いは採取した（１）を更に加
水分解して（′Ｉ）の対掌体を生成させ、採取すること
を特徴とするオキサゾリジノン誘導体の光学分割方法に
関する。
は未置換アリル（Ａｒ）基、Ｒ２は置換又は未置換アル
キル基）で表わされる（ ＩＬ、８ ）−５−アシロキ
ンメチル−オキサゾリジン−２−オン中を不斉的に加υ れる光学活性５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−
２−オンを生成させる立体選択的エステフーゼ活性を有
する微生物或いは酵素を作用させることにより、ラセミ
体（１）から氷解物（Ｉ）及び未反応物である光学活性
５−アシロキシメチル−オキサυ （Ｒ１，Ｒｇは前記に同じ）を生成させ、夫々の光学活
性体を分離、採取する。或いは採取した（１）を更に加
水分解して（′Ｉ）の対掌体を生成させ、採取すること
を特徴とするオキサゾリジノン誘導体の光学分割方法に
関する。
この場合、使用する立体選択的エステツーゼを選ぶこと
によって、化合物（１）を、化合物（ＩＩ）が（Ｒ１は
前記に同じ）の＠−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリ
ジン−２−オンであり、化合物（１）が （Ｒ１，Ｒ２は前記に同じ）の（８）−５−アＶロキＶ
メチルーオキサゾリジン−２−オンに変えて、各々を分
離採取し、また更に（Ｓ） −（１）を加水分解して（
８）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オ
ンを得ることも出来るし、化合物（１）が（Ｒ１は前記
に同じ）の（１３）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾ
リジン−２−オンであゆ、化合物（Ｉ）（Ｒ１，Ｒ２は
前記に同じ）の（Ｂ）−６−アシロキシメチル−オキサ
ゾリジン−２−オンにすることもできる。
によって、化合物（１）を、化合物（ＩＩ）が（Ｒ１は
前記に同じ）の＠−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリ
ジン−２−オンであり、化合物（１）が （Ｒ１，Ｒ２は前記に同じ）の（８）−５−アＶロキＶ
メチルーオキサゾリジン−２−オンに変えて、各々を分
離採取し、また更に（Ｓ） −（１）を加水分解して（
８）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オ
ンを得ることも出来るし、化合物（１）が（Ｒ１は前記
に同じ）の（１３）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾ
リジン−２−オンであゆ、化合物（Ｉ）（Ｒ１，Ｒ２は
前記に同じ）の（Ｂ）−６−アシロキシメチル−オキサ
ゾリジン−２−オンにすることもできる。
これら光学活性な２−オキサゾリジノン化合物は医薬品
或いは医薬品の原料となる。例えばＲ１が活性水素基で
ある（８） −１）は光学活性なβ−受容体遮断薬の原
料として利用できる。一方、（Ｔ（） −（１）をさら
に加水分解して得られる（１’９− （１）のうちＲ１
がアリル基である化合物の中に強い抗菌活性をもつ化合
物が見い出されている（特開昭５８−造については、８
−アリルアミノ−１，２−プロパンジオールを光学分割
剤を用いて分割後、（均一５−ヒドロキシメチル−８−
アリル−オキサゾリジン−２−オンに誘導する方法（特
開昭５８−１０８８７６）が知られている。微生物を利
用した分割法については、本発明者らが、先に（Ｒ，８
）−５−アシロキンメチル−８−アルキル置換−オキサ
ゾリジン−２−オンラセミ体を微生物菌体又は酵素を作
用させて不斉的に加水分解し、対応する光学活性体を取
得する方法を見い出しているの場合も同様に不斉水解す
る能力を有する微生物菌体又は酵素が見つかるのではな
いかと考え、スクリーニング実験を試みた。その結果、
（１）シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ）属
又はアクｏモパクｐ−（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ
）属に属する微生物或いは該微生物より得られる酵素を
作用させると、ラセミ体（１）を不斉的に加水分解し、
（Ｅ）−（璽）を生成させる、次いで氷解物（ｆ（）
−（１）と未反応物（８）−（１）を有機溶媒で抽出分
離するか、或いは更にカラムクロマトグツフィー操作を
組み合せることにより、（Ｒ１−（１）と（８） −（
１）を分離し採取する。或いは更に採取した（Ｓ） −
（１）をアルカリ加水分解し、（８）−１）を生成し採
取することが出来ること、（２）ムコール（Ｍｕｏｏｒ
）属又はリゾプス（Ｒｈ１ｚｏｐｕｓ ）属の各員に
属する微生物或いは該微生物より得られる酵素又は動物
臓器由来の酵素を作用させると、ラセミ体（１）を不斉
的に加水分解し、（ｓ） −（１）を生成させ、次いで
氷解物（８） −（１）と未反応物（至）＝（１）を有
機溶媒で抽出分離するか、或いは更にカラムクロマトグ
ツフィー操作を組み合せることにより（８） −（′Ｉ
）と（至）−（１）を分離し採取する、或いは更に採取
した（ｆ９−（１）をアルカリ加水分解し、（ＩＭ −
（１）を生成しυ ２−オキサゾリジノン誘導体の合成は、下記ルートで容
易に合成できる。
或いは医薬品の原料となる。例えばＲ１が活性水素基で
ある（８） −１）は光学活性なβ−受容体遮断薬の原
料として利用できる。一方、（Ｔ（） −（１）をさら
に加水分解して得られる（１’９− （１）のうちＲ１
がアリル基である化合物の中に強い抗菌活性をもつ化合
物が見い出されている（特開昭５８−造については、８
−アリルアミノ−１，２−プロパンジオールを光学分割
剤を用いて分割後、（均一５−ヒドロキシメチル−８−
アリル−オキサゾリジン−２−オンに誘導する方法（特
開昭５８−１０８８７６）が知られている。微生物を利
用した分割法については、本発明者らが、先に（Ｒ，８
）−５−アシロキンメチル−８−アルキル置換−オキサ
ゾリジン−２−オンラセミ体を微生物菌体又は酵素を作
用させて不斉的に加水分解し、対応する光学活性体を取
得する方法を見い出しているの場合も同様に不斉水解す
る能力を有する微生物菌体又は酵素が見つかるのではな
いかと考え、スクリーニング実験を試みた。その結果、
（１）シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ）属
又はアクｏモパクｐ−（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ
）属に属する微生物或いは該微生物より得られる酵素を
作用させると、ラセミ体（１）を不斉的に加水分解し、
（Ｅ）−（璽）を生成させる、次いで氷解物（ｆ（）
−（１）と未反応物（８）−（１）を有機溶媒で抽出分
離するか、或いは更にカラムクロマトグツフィー操作を
組み合せることにより、（Ｒ１−（１）と（８） −（
１）を分離し採取する。或いは更に採取した（Ｓ） −
（１）をアルカリ加水分解し、（８）−１）を生成し採
取することが出来ること、（２）ムコール（Ｍｕｏｏｒ
）属又はリゾプス（Ｒｈ１ｚｏｐｕｓ ）属の各員に
属する微生物或いは該微生物より得られる酵素又は動物
臓器由来の酵素を作用させると、ラセミ体（１）を不斉
的に加水分解し、（ｓ） −（１）を生成させ、次いで
氷解物（８） −（１）と未反応物（至）＝（１）を有
機溶媒で抽出分離するか、或いは更にカラムクロマトグ
ツフィー操作を組み合せることにより（８） −（′Ｉ
）と（至）−（１）を分離し採取する、或いは更に採取
した（ｆ９−（１）をアルカリ加水分解し、（ＩＭ −
（１）を生成しυ ２−オキサゾリジノン誘導体の合成は、下記ルートで容
易に合成できる。
（１）中
置換基Ｒ１は、活性水素基或いは置換又は未置換アリル
基であり、アリル基としては、例えばベンゼン、ピリジ
ン、ピリミジンの如き単環式化合物の基が挙げられる。
基であり、アリル基としては、例えばベンゼン、ピリジ
ン、ピリミジンの如き単環式化合物の基が挙げられる。
又アリル基はすべて任意にいずれかの位置において、以
下に限定されるものではないが、例えばハロゲン基、ニ
トロ基、０１〜ＣＢのアルキル基、アルコヤシ基、水酸
基、メルカプト基、シアノ基の１種又はそれ以上の置換
基で置換されうる。一方、置換基Ｒ２は置換又は未置換
アルキル基であり、アルキル基としては例えば０１〜０
１７のアルキル基が挙げられる。又アルキル基は例えば
ハロゲン基、アルコヤシ基、水酸基、フェニル基等の１
種又はそれ以上の置換基で置換されうる。
下に限定されるものではないが、例えばハロゲン基、ニ
トロ基、０１〜ＣＢのアルキル基、アルコヤシ基、水酸
基、メルカプト基、シアノ基の１種又はそれ以上の置換
基で置換されうる。一方、置換基Ｒ２は置換又は未置換
アルキル基であり、アルキル基としては例えば０１〜０
１７のアルキル基が挙げられる。又アルキル基は例えば
ハロゲン基、アルコヤシ基、水酸基、フェニル基等の１
種又はそれ以上の置換基で置換されうる。
ラセミ体（１）を不斉的に加水分解し、（均一１）を生
成させる立体選択的なエステラーゼを有する微生物とし
ては、例えばシュードモナス属或いはアクロモバクタ−
鴫等に駕する微生物があり、更に詳シくはシュードモナ
ス・アエルギノサ （Ｐａｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ）
ＩＦＯ９Ｑ３Ｑ。
成させる立体選択的なエステラーゼを有する微生物とし
ては、例えばシュードモナス属或いはアクロモバクタ−
鴫等に駕する微生物があり、更に詳シくはシュードモナ
ス・アエルギノサ （Ｐａｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ）
ＩＦＯ９Ｑ３Ｑ。
ＩＰｏ １８１８０やアクロモバクタ−・パルブルス（
Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ ｐａｒｖｕｌｕｓ ）
ＩＦＯ１８１８２がある。またラセミ体（１）を不斉的
に加水分解し、（８） −（１）を生成させる立体選択
的エステツーゼを有する微生物としては、例えばムコー
ル嘱或いはリゾプス属に属する微生物がち９、更に詳し
くはムコール・ジャパ＝りｙ、 （ｋｉｕｃｏｒ ｊａ
ｖａｎｉｃｕｓ ）ＩＦＯ４５７２，ムコ−ｐ 、ブｖ
Ａ／ ス（Ｍｕｃｏｒｐｕａｉｌｌｕｓ ） ＩＦＯ
９７４４、リゾプス・ジャボニｐ ｙ、 （Ｒｈ１ｚｏ
ｐｕｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ） ＴＦＯ４７８０やリ
ソ−ｆｙ、 −７’ ｖ−ｑ −（Ｒｈ１ｚｏｐｕｓ
ｄｅｌｅｍａｒ ）ＩＦｏ ４７８０がある。
Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ ｐａｒｖｕｌｕｓ ）
ＩＦＯ１８１８２がある。またラセミ体（１）を不斉的
に加水分解し、（８） −（１）を生成させる立体選択
的エステツーゼを有する微生物としては、例えばムコー
ル嘱或いはリゾプス属に属する微生物がち９、更に詳し
くはムコール・ジャパ＝りｙ、 （ｋｉｕｃｏｒ ｊａ
ｖａｎｉｃｕｓ ）ＩＦＯ４５７２，ムコ−ｐ 、ブｖ
Ａ／ ス（Ｍｕｃｏｒｐｕａｉｌｌｕｓ ） ＩＦＯ
９７４４、リゾプス・ジャボニｐ ｙ、 （Ｒｈ１ｚｏ
ｐｕｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ） ＴＦＯ４７８０やリ
ソ−ｆｙ、 −７’ ｖ−ｑ −（Ｒｈ１ｚｏｐｕｓ
ｄｅｌｅｍａｒ ）ＩＦｏ ４７８０がある。
これら微生物の栄養源は、通常、肯化しうる有機及び無
機の炭素源、窒素源、ビタミン及びミネツルを適宜配合
したものを用い、培養温度は２０〜４０℃、ｐＨ４〜８
の範囲が用いられる。又、通気攪拌によシ徽生物の生育
を促進させることもできる。化合物（１）の不斉氷解反
応においては、培養の開始と同時に培地中に抵質即ち化
合物（１）を添加し、培養と並行して加水分解を行う方
法、或いは前記の様にして培養液菌体を化合物（１）と
接触させ加水分解を行う方法がある。望ましくは、菌体
を遠心分離等で濃縮後、高濃度菌体液とし、このものに
化合物（１）を添加する方法が反応後の生産物回収の立
場から望′ましい。一方、該微生物菌体を破砕後、硫安
分画やアセトン処理して得られる粗酵素或いは史にカラ
ムクロマトグラフィー操作を行い、得られる精製酵素が
使用できる。又、市販されているリパーゼは、（１９−
（１）を生成させる場合、例えばリボプロティンリパー
ゼＣＬ、Ｐ、Ｌ、ｙマノ８ ＋ 起ｉＪｌ 、シュード
モナス・アエルギノサ；天野製薬味製）やリパーゼＡＬ
（起源、アクロモバクタ−属番名糖産業ｔｌｌＮｌｌ
りも用いることができる。
機の炭素源、窒素源、ビタミン及びミネツルを適宜配合
したものを用い、培養温度は２０〜４０℃、ｐＨ４〜８
の範囲が用いられる。又、通気攪拌によシ徽生物の生育
を促進させることもできる。化合物（１）の不斉氷解反
応においては、培養の開始と同時に培地中に抵質即ち化
合物（１）を添加し、培養と並行して加水分解を行う方
法、或いは前記の様にして培養液菌体を化合物（１）と
接触させ加水分解を行う方法がある。望ましくは、菌体
を遠心分離等で濃縮後、高濃度菌体液とし、このものに
化合物（１）を添加する方法が反応後の生産物回収の立
場から望′ましい。一方、該微生物菌体を破砕後、硫安
分画やアセトン処理して得られる粗酵素或いは史にカラ
ムクロマトグラフィー操作を行い、得られる精製酵素が
使用できる。又、市販されているリパーゼは、（１９−
（１）を生成させる場合、例えばリボプロティンリパー
ゼＣＬ、Ｐ、Ｌ、ｙマノ８ ＋ 起ｉＪｌ 、シュード
モナス・アエルギノサ；天野製薬味製）やリパーゼＡＬ
（起源、アクロモバクタ−属番名糖産業ｔｌｌＮｌｌ
りも用いることができる。
さらに（Ｓ） −（１）を生成させる場合、例えばリパ
ーゼＭ−ＡＰ ＩＱ （起源蓚ムタール属、大野！！！
！！薬＊）、リパーゼ「サイケンＪ１００（起源；リゾ
プス・ジャボニクス、大阪細菌研）、リパーゼ（起源番
リゾプス・デレマー、生化学工業）、ステアプシン（豚
時臓）、バンクレアチン（豚枠臓）等を用いることがで
きる。
ーゼＭ−ＡＰ ＩＱ （起源蓚ムタール属、大野！！！
！！薬＊）、リパーゼ「サイケンＪ１００（起源；リゾ
プス・ジャボニクス、大阪細菌研）、リパーゼ（起源番
リゾプス・デレマー、生化学工業）、ステアプシン（豚
時臓）、バンクレアチン（豚枠臓）等を用いることがで
きる。
加水分解反応は、基質のラセミ体中を濃度２〜６０％（
Ｗ／Ｖ）の範囲で添加し、酵素を適量、例えＶｉＥ／８
＝１／２０〜１１５０００量加え、温度１０〜４０°Ｃ
の範囲で反応を行い、ガスクロ或いは液クロにより加水
分解の反応の経崎変化を追い、反応が（１）と１）のモ
ル比６０％ずつになった時点で反応を終了させれば良い
。また加水分解を行う際のｐＨ範囲は４〜８．５であれ
ば良いが、加水分解反応が進むに従い反応液中のｐＨが
酸性側に傾くので、中和剤例え１ｊＮａＯＨ溶液等で最
適ｐＨを保持するのが望ましい。更に上記記載の不斉氷
解反応を、例えば微生物菌体或いは酵素を固定化させる
ことにより繰り返し行なうこともできる。
Ｗ／Ｖ）の範囲で添加し、酵素を適量、例えＶｉＥ／８
＝１／２０〜１１５０００量加え、温度１０〜４０°Ｃ
の範囲で反応を行い、ガスクロ或いは液クロにより加水
分解の反応の経崎変化を追い、反応が（１）と１）のモ
ル比６０％ずつになった時点で反応を終了させれば良い
。また加水分解を行う際のｐＨ範囲は４〜８．５であれ
ば良いが、加水分解反応が進むに従い反応液中のｐＨが
酸性側に傾くので、中和剤例え１ｊＮａＯＨ溶液等で最
適ｐＨを保持するのが望ましい。更に上記記載の不斉氷
解反応を、例えば微生物菌体或いは酵素を固定化させる
ことにより繰り返し行なうこともできる。
化合物（１）の水に対する溶解度は一般に低いが、攪拌
すれば本反応にとって支障とはならない。又、例、ｔば
アセトン、メタノール等の有機溶媒や界面活性剤等を反
応に支障とならない程度加えても良い。
すれば本反応にとって支障とはならない。又、例、ｔば
アセトン、メタノール等の有機溶媒や界面活性剤等を反
応に支障とならない程度加えても良い。
氷解物（Ｓ） −（１）と未反応物（Ｅ）−（１）を分
離する方法としては、疎水性の有ｆｌｋｍ剤、例えばヘ
キサン、シクロヘキサン、酢酸エチル、塩化メチレン又
はトルエン等で疎水性の未反応（ｓ） −（１）または
（Ｍ−（１）のみを抽出し、親水性の氷解物（至）−（
１）ｔたは（Ｓ）−（Ｉ）と分離することができる。又
、置換基Ｒ２の炭素鎖が短い場合、（Ｓ） −（１）と
（至）−（′ＩＩ）、まえは（均一（１）と（８） −
（１）の化学的性質に顕著な差がない為、抽出操作のみ
では高純度の（８）−（１）または（ＴＱ−中が得られ
ない。その場合には、例えばシリカゲルカフムクロマト
グフフイー操作等を併せて行えば容易に分離し、高純度
の（８）−（１）または（’Ｆ９−（１）を採取するこ
とができる。更に、（８） −（１）またはｆ１３）
−（１）を室温下、ｐＴ（ｉ ｏ〜１８．５の範囲で数
時間アルカリ加水分解を行うか、或いは（８）−（１）
または（ＩＩ） −（１）を加水分解する能力を有する
酵素例えば（Ｓ）−（１）に対してはステアプシンを、
（均一（１）に対してはリボプロティンリパーゼを作用
させて加水分解を行えば、各々（８）−（［）又ハ（Ｅ
）−（１）カ生成ｔ、、ｐｉ（ヲ７． ＯＫ付近に調整
後、減圧、１４縮し、有機溶剤例えばアセトン、メタノ
ール或いは酢酸エチル等で溶解し、再濃縮するか、或い
は一旦付優溶剤例えば１ｖｌ醗：Ｃナル或いは塩化メチ
レン等で転溶後、減圧濃縮すれば（Ｈ）−（１）又は（
Ｓ）−（１）を採取することができる。なお、抽出分離
の際、水層側１に残った（Ｉ’９−Ｇ［）又は（８）−
１）も１紀と同様の操作を行えば容易に採取するが、本
発明はこれらの突施例に限定されるものではない。
離する方法としては、疎水性の有ｆｌｋｍ剤、例えばヘ
キサン、シクロヘキサン、酢酸エチル、塩化メチレン又
はトルエン等で疎水性の未反応（ｓ） −（１）または
（Ｍ−（１）のみを抽出し、親水性の氷解物（至）−（
１）ｔたは（Ｓ）−（Ｉ）と分離することができる。又
、置換基Ｒ２の炭素鎖が短い場合、（Ｓ） −（１）と
（至）−（′ＩＩ）、まえは（均一（１）と（８） −
（１）の化学的性質に顕著な差がない為、抽出操作のみ
では高純度の（８）−（１）または（ＴＱ−中が得られ
ない。その場合には、例えばシリカゲルカフムクロマト
グフフイー操作等を併せて行えば容易に分離し、高純度
の（８）−（１）または（’Ｆ９−（１）を採取するこ
とができる。更に、（８） −（１）またはｆ１３）
−（１）を室温下、ｐＴ（ｉ ｏ〜１８．５の範囲で数
時間アルカリ加水分解を行うか、或いは（８）−（１）
または（ＩＩ） −（１）を加水分解する能力を有する
酵素例えば（Ｓ）−（１）に対してはステアプシンを、
（均一（１）に対してはリボプロティンリパーゼを作用
させて加水分解を行えば、各々（８）−（［）又ハ（Ｅ
）−（１）カ生成ｔ、、ｐｉ（ヲ７． ＯＫ付近に調整
後、減圧、１４縮し、有機溶剤例えばアセトン、メタノ
ール或いは酢酸エチル等で溶解し、再濃縮するか、或い
は一旦付優溶剤例えば１ｖｌ醗：Ｃナル或いは塩化メチ
レン等で転溶後、減圧濃縮すれば（Ｈ）−（１）又は（
Ｓ）−（１）を採取することができる。なお、抽出分離
の際、水層側１に残った（Ｉ’９−Ｇ［）又は（８）−
１）も１紀と同様の操作を行えば容易に採取するが、本
発明はこれらの突施例に限定されるものではない。
実施例１
１００ ｍｌ （７）０．１ＭＵ ｙ酸緩衝液（ｐＩ（
７，０）に、Ｌ、 Ｐ、Ｌ、アマノ８を０．５１及び基
質（Ｒ，８）＝５−ブタノイロキシメチル−オキサゾリ
ジン−〇 ｆ（０，１４）ｖ）を添加し、ＩＮ ＮａＯＨ溶液でｐ
Ｈを７．０に調整しながら、攪拌下、ａｏ’ｃ、１２時
間不斉氷解反応を行った。この反応液を各ｉ ｏ ｏ
ｍｌの酢酸エチルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層
を減圧濃縮後、未反応物の）−１の中に、不純物として
氷解物（Ｂ）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン
−２−オン（Ｂ）−２が約８モル％含まれていたのでシ
リカゲルカッムクロマトグフフイ−１作（条件；ワター
ゲルＣ−１００゜Ｌ／Ｄ＝６０１１１１Ｘ２．４Ｃ１１
，ヘキサン：アセトン＝１＝１の系）を行った。溶出し
た（Ｓ）−１１１！ｉｆ分を減圧濃縮したところ、比旋
光度〔α）、＋８４．６゜（Ｃ＝１．０．メタノ−／Ｉ
／）を有する白色粉末の（Ｓ）−１が５．２ｆ／（０，
０２８モル、収率２８％）得られた。ｍｐ及びＨＮＭＲ
（９ＱＭＨｚ ’）測定値は以下の通りであった。
７，０）に、Ｌ、 Ｐ、Ｌ、アマノ８を０．５１及び基
質（Ｒ，８）＝５−ブタノイロキシメチル−オキサゾリ
ジン−〇 ｆ（０，１４）ｖ）を添加し、ＩＮ ＮａＯＨ溶液でｐ
Ｈを７．０に調整しながら、攪拌下、ａｏ’ｃ、１２時
間不斉氷解反応を行った。この反応液を各ｉ ｏ ｏ
ｍｌの酢酸エチルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層
を減圧濃縮後、未反応物の）−１の中に、不純物として
氷解物（Ｂ）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン
−２−オン（Ｂ）−２が約８モル％含まれていたのでシ
リカゲルカッムクロマトグフフイ−１作（条件；ワター
ゲルＣ−１００゜Ｌ／Ｄ＝６０１１１１Ｘ２．４Ｃ１１
，ヘキサン：アセトン＝１＝１の系）を行った。溶出し
た（Ｓ）−１１１！ｉｆ分を減圧濃縮したところ、比旋
光度〔α）、＋８４．６゜（Ｃ＝１．０．メタノ−／Ｉ
／）を有する白色粉末の（Ｓ）−１が５．２ｆ／（０，
０２８モル、収率２８％）得られた。ｍｐ及びＨＮＭＲ
（９ＱＭＨｚ ’）測定値は以下の通りであった。
ｍｐ ６２°Ｃ，Ｉ（ＮＭＲ（ＣＤＯＲ） ６９９ｍ
：０．８−１．１ （８Ｈ，ｔ、 ＯＨａ ）、 １．
４−１．９ （２Ｈ。
：０．８−１．１ （８Ｈ，ｔ、 ＯＨａ ）、 １．
４−１．９ （２Ｈ。
ｍ、 ＯＨｇＯ■１１（３Ｈ，−）、 ２．１５−２．
４５ Ｃ２Ｈ，ｍ。
４５ Ｃ２Ｈ，ｍ。
０１１ａＯＨ２ＣＨｇ−）、８．２５−８．８５（２１
（、ｍ。
（、ｍ。
−ＣＨｇＮ ）、４．１−４．８（２Ｊ ｍ、−ＣＨｇ
Ｏ−）。
Ｏ−）。
４．５５−４．９ （１１（、ｍ、 −０Ｈ２０Ｈ（０
−）ＯＨｇ−）。
−）ＯＨｇ−）。
６．４−６．６ （ＩＥＩ、 ｂ、 −ＮＩＩ−）得ら
れた（８）−１の４．０ｆ（０，０２１モｌｖ）を４０
ｍ１のＩＮ ＮａＯＨ溶液Ｋｍ加し、室温下、約５時間
加水分解を行い、反応液をｐＥｆ７．９に調整し、濃縮
乾固する。得た乾固物を５０ ｍｌの酢酸エチルで溶解
し不溶物を戸去した後、減圧濃縮し、ヘキサン−アセト
ン（１０ｍｌ−１０ｍｌ）で再結すると比旋光度〔α）
＋８６．０°（ｃ＝１．０．メタノール）を有する白
色の粉末（８）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジ
ン−２−オン（８）−２が１．８Ｆ（０，０１５モル、
（Ｉｌｌｌ）−１よりの収率７１％）得られた。ｍｐ及
び ■ＮＭＲ（９ＱＩｖｌＨｚ）値は以下の通りであっ
た。
れた（８）−１の４．０ｆ（０，０２１モｌｖ）を４０
ｍ１のＩＮ ＮａＯＨ溶液Ｋｍ加し、室温下、約５時間
加水分解を行い、反応液をｐＥｆ７．９に調整し、濃縮
乾固する。得た乾固物を５０ ｍｌの酢酸エチルで溶解
し不溶物を戸去した後、減圧濃縮し、ヘキサン−アセト
ン（１０ｍｌ−１０ｍｌ）で再結すると比旋光度〔α）
＋８６．０°（ｃ＝１．０．メタノール）を有する白
色の粉末（８）−５−ヒドロキシメチル−オキサゾリジ
ン−２−オン（８）−２が１．８Ｆ（０，０１５モル、
（Ｉｌｌｌ）−１よりの収率７１％）得られた。ｍｐ及
び ■ＮＭＲ（９ＱＩｖｌＨｚ）値は以下の通りであっ
た。
＋１ｊｐ５５〜５８°Ｏ，ＥＩ ＮＭＲ（（３ＤＢＯＤ
）６９９ｍ ： ８．８５−８．９ （４Ｅｌ、 ｍ。
）６９９ｍ ： ８．８５−８．９ （４Ｅｌ、 ｍ。
又（Ｓ）−１の光学純度をめる（８）−α−メトキン−
α−トルフルオロメチルフェニルアセチルクロッイドを
用いてジアステレオマーの形にし、ＧＬＯ法（１０％シ
リコンＤｏ ＱＦ −１、クロモソルブＡＷ−ＤＭＯ８
，６０〜８０メツシュ、６７ｎカフム、２４０°Ｃ）に
よりめたところ７５％ｅ、 ｅ、であった。
α−トルフルオロメチルフェニルアセチルクロッイドを
用いてジアステレオマーの形にし、ＧＬＯ法（１０％シ
リコンＤｏ ＱＦ −１、クロモソルブＡＷ−ＤＭＯ８
，６０〜８０メツシュ、６７ｎカフム、２４０°Ｃ）に
よりめたところ７５％ｅ、 ｅ、であった。
一方、酢酸エチル抽出操作で水層側に残った氷解物（至
）−２含有水溶液を減圧濃縮し、得られた乾固物を１０
０ Ｍ１！の酢酸エチルで溶解し、不溶物を戸去した後
、減圧濃縮し、ヘキサン−アセトン（１（ｌｆｌ−１０
ｙ７Ｌｌ）−ｔ’再結すると比旋光度〔α〕甘せ２５．
５’（Ｑ ＝ １．０ 、メタノール）を有する白色の
粉末（至）−２が１．９ｆ（０，０１６モル、１よりの
モル収率１６％）得られた。その光学純度は６８％ｅ、
ｅ であった。
）−２含有水溶液を減圧濃縮し、得られた乾固物を１０
０ Ｍ１！の酢酸エチルで溶解し、不溶物を戸去した後
、減圧濃縮し、ヘキサン−アセトン（１（ｌｆｌ−１０
ｙ７Ｌｌ）−ｔ’再結すると比旋光度〔α〕甘せ２５．
５’（Ｑ ＝ １．０ 、メタノール）を有する白色の
粉末（至）−２が１．９ｆ（０，０１６モル、１よりの
モル収率１６％）得られた。その光学純度は６８％ｅ、
ｅ であった。
実施例２
１００ｍ１の０．１ＭＵン酸緩衝液（１）＋１７．ｏ）
にり、 Ｐ、 Ｌ、アマノ８を０．６ｆ及び基’ｊｉｊ
（Ｒ，８）−６−ヘキサツイロキシメチルーオキサゾリ
ンンｆ（０，１モル）を添加し、ｌ Ｎ Ｎａ０ＥＩ
溶液テｐＨを７に調整しなカラ、攪拌下、８０°Ｃ１１
２時間不斉氷解反応を行った。この反応液を各１００ｍ
１の酢酸エチルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を
無水硫酸ソーダで脱水処理後、減圧濃縮し、比旋光度〔
α）Ｄ＋４１．８°（Ｃ＝１．０．メタノ−／１／）を
有する白色の粉末（８）−８が８．６Ｆ（０，０４−ｚ
ル、収率４０％）得られた。ｍｐ及び１Ｅｆ ＮＭＲ（
９０ＭＨｚ）ノｌｌ定ｆｆ１ｔｉ、以下ノ通リテあった
。
にり、 Ｐ、 Ｌ、アマノ８を０．６ｆ及び基’ｊｉｊ
（Ｒ，８）−６−ヘキサツイロキシメチルーオキサゾリ
ンンｆ（０，１モル）を添加し、ｌ Ｎ Ｎａ０ＥＩ
溶液テｐＨを７に調整しなカラ、攪拌下、８０°Ｃ１１
２時間不斉氷解反応を行った。この反応液を各１００ｍ
１の酢酸エチルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を
無水硫酸ソーダで脱水処理後、減圧濃縮し、比旋光度〔
α）Ｄ＋４１．８°（Ｃ＝１．０．メタノ−／１／）を
有する白色の粉末（８）−８が８．６Ｆ（０，０４−ｚ
ル、収率４０％）得られた。ｍｐ及び１Ｅｆ ＮＭＲ（
９０ＭＨｚ）ノｌｌ定ｆｆ１ｔｉ、以下ノ通リテあった
。
ｍｌ） ６１．５〜６２．０°Ｃ，ＨＮＭＲ（ＣＤ０１
８）８９９ｍ ：０．７０−２．１５ （Ｉ ＤＩ、
：ｍ、 （３５Ｈ１１−）。
８）８９９ｍ ：０．７０−２．１５ （Ｉ ＤＩ、
：ｍ、 （３５Ｈ１１−）。
８．８０−８．９０ （２Ｈ，ｍ、 −ＯＨｇＮ −）
、 ４．２０−４．８６ （１，ｄ、 −０Ｈ２０−）
、 ４．６５−５．００（ｌｆｌｆ。
、 ４．２０−４．８６ （１，ｄ、 −０Ｈ２０−）
、 ４．６５−５．００（ｌｆｌｆ。
ｍ、 −ＣＨ２（３Ｈ（０−） ＯＨ２−）、 ６．４
０−６．７５（ＩＩｉ、ｂ、−Ｎ■−） 更に、（８）−８の８゜（１（０，０８７モル）を８０
ｍ１の０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）に懸濁し、
ステアプシン０．２ＬＩを添加し、８０゛Ｃで約１２時
間加水分解反応を行った。この反応液をｐＨ７，０に再
調整した後、濃縮乾固する。このようにして得た乾固物
を１００ ｍｌの酢酸エチルで溶解し、不溶物を戸去し
た後、減圧濃縮し、ヘキサン−アセトン（１０ｍｌ−１
０ｍｌ ）で再結して比旋光度〔α）＋４７．４°（Ｃ
＝１．０．メタノール）、光り 学純度９８％ｅ、ｅ、を有する白色の粉末（８） −５
−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オン（８）
−２を２．４Ｓ１（０，０２１モル、（８）−８よりの
収率５５％）得た。一方、水層側の（均一２も実施例１
と同様の操作を行い、比旋光度〔α）ｐ−１１，４゜（
Ｑ＝１．０＋メタノール）、光学純度２４％ｅ、 ｅ。
０−６．７５（ＩＩｉ、ｂ、−Ｎ■−） 更に、（８）−８の８゜（１（０，０８７モル）を８０
ｍ１の０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）に懸濁し、
ステアプシン０．２ＬＩを添加し、８０゛Ｃで約１２時
間加水分解反応を行った。この反応液をｐＨ７，０に再
調整した後、濃縮乾固する。このようにして得た乾固物
を１００ ｍｌの酢酸エチルで溶解し、不溶物を戸去し
た後、減圧濃縮し、ヘキサン−アセトン（１０ｍｌ−１
０ｍｌ ）で再結して比旋光度〔α）＋４７．４°（Ｃ
＝１．０．メタノール）、光り 学純度９８％ｅ、ｅ、を有する白色の粉末（８） −５
−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オン（８）
−２を２．４Ｓ１（０，０２１モル、（８）−８よりの
収率５５％）得た。一方、水層側の（均一２も実施例１
と同様の操作を行い、比旋光度〔α）ｐ−１１，４゜（
Ｑ＝１．０＋メタノール）、光学純度２４％ｅ、 ｅ。
を有する白色の粉末（均一２を８．５１０．０８０モル
、８よりの収率８０ ｑｌｏ）得た。
、８よりの収率８０ ｑｌｏ）得た。
実施例８
１００ ｍｌ ＋７）０．１ ＭＩＪ ７酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，０）にり、 Ｐ、 Ｌ、アマノ８を０．５ｆ及び
基質（Ｒ，８）−５−ブタノイロキシメチ／Ｌ／−８−
フェニル−オキサゾリジン−２−オン４ ４Ａ／）を添加し、ＩＮ ＮａＯＨ溶液でｐＨを７に調
整しながら、攪拌下、８０℃、２４時間不斉水解反応を
行った。この反応液を各ｔ ｏ ｏ ｍｅの酢酸エチル
で４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を減圧濃縮した。
Ｈ７，０）にり、 Ｐ、 Ｌ、アマノ８を０．５ｆ及び
基質（Ｒ，８）−５−ブタノイロキシメチ／Ｌ／−８−
フェニル−オキサゾリジン−２−オン４ ４Ａ／）を添加し、ＩＮ ＮａＯＨ溶液でｐＨを７に調
整しながら、攪拌下、８０℃、２４時間不斉水解反応を
行った。この反応液を各ｔ ｏ ｏ ｍｅの酢酸エチル
で４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を減圧濃縮した。
目的物（８）−４中に不純物として水解物＠−５−ヒド
ロキシメチ／Ｌ／−８−フェニル−オキサゾリジン−２
−オン（至）−５が約８％含まれていたので更にシリカ
ゲルカラムクロマトグツフィー操作（条件：ワターゲ／
ｌ１０−１００． Ｌ／Ｄ＝５０ＣＩＩＸ２，４Ｃ１１
，ヘキサン：アセトン＝８：１の系）を行った。溶出し
九（８）−４＃分を減圧濃縮したところ、比旋光度〔σ
）９＋ ５４．４″（Ｃ＝１．０゜アセトニトリル）を
有する白色粉末の（８）−４が５．１ Ｆ （０，０１
９モル、４からの収率８８％）得られた。ｍｐ及びＩＨ
ＮＭＲ（９ＱＭＨｚ）の測定値は以下の通りであった。
ロキシメチ／Ｌ／−８−フェニル−オキサゾリジン−２
−オン（至）−５が約８％含まれていたので更にシリカ
ゲルカラムクロマトグツフィー操作（条件：ワターゲ／
ｌ１０−１００． Ｌ／Ｄ＝５０ＣＩＩＸ２，４Ｃ１１
，ヘキサン：アセトン＝８：１の系）を行った。溶出し
九（８）−４＃分を減圧濃縮したところ、比旋光度〔σ
）９＋ ５４．４″（Ｃ＝１．０゜アセトニトリル）を
有する白色粉末の（８）−４が５．１ Ｆ （０，０１
９モル、４からの収率８８％）得られた。ｍｐ及びＩＨ
ＮＭＲ（９ＱＭＨｚ）の測定値は以下の通りであった。
ｍｐ４８．５〜４９．０℃、ＨＮＭＲ（ＣＤＯ１８）δ
ｐｐｍ：０．７５−１．１０（８［（、ｔ、 ０ｆ（ａ
−）、 １．８５−１．８５ （２ＴＩ、 ｍ、 （３
ＨａＯＨｚＯＨｚ −）、 ２．１５−２．４０ （２
Ｊ ｔ、 ０Ｈ３ＣＨ２０Ｈ２−） 、 ８．９５−４
．７５（５Ｈ，ｍ、−ＮＯＨ２ＣＨ（０−）Ｏｆ（２０
−）。
ｐｐｍ：０．７５−１．１０（８［（、ｔ、 ０ｆ（ａ
−）、 １．８５−１．８５ （２ＴＩ、 ｍ、 （３
ＨａＯＨｚＯＨｚ −）、 ２．１５−２．４０ （２
Ｊ ｔ、 ０Ｈ３ＣＨ２０Ｈ２−） 、 ８．９５−４
．７５（５Ｈ，ｍ、−ＮＯＨ２ＣＨ（０−）Ｏｆ（２０
−）。
６．９６−７．５０（５Ｈ，ｍ、 ０６Ｈ６−）以下、
実施例１と同様の操作を行い、比旋光度〔α）”＋ ７
１．９°（ｃ ＝ １．０ ｔ ア七ト二トリ／１／）
（但し、文献記載値は、〔α）＋７２．０°（ｃ＝１．
０．アセトニトリル）、特開昭５８−１０８８７６”）
を有する白色粉末（８）−５−ヒドロキシメチル−８−
フェニル−オキサゾリジン−２−オンし）−５が８．１
Ｆ（０，０１６モル、（Ｓ）−４からの収率８８％）得
られた。一方、酢酸エチル抽出分離の際、水層側に含ま
れる氷解物（Ｆ９−５も実施例１と同様の操作を経て、
比旋光度〔α〕甘せ４６．５°（ｃ＝ｔ、ｏ。
実施例１と同様の操作を行い、比旋光度〔α）”＋ ７
１．９°（ｃ ＝ １．０ ｔ ア七ト二トリ／１／）
（但し、文献記載値は、〔α）＋７２．０°（ｃ＝１．
０．アセトニトリル）、特開昭５８−１０８８７６”）
を有する白色粉末（８）−５−ヒドロキシメチル−８−
フェニル−オキサゾリジン−２−オンし）−５が８．１
Ｆ（０，０１６モル、（Ｓ）−４からの収率８８％）得
られた。一方、酢酸エチル抽出分離の際、水層側に含ま
れる氷解物（Ｆ９−５も実施例１と同様の操作を経て、
比旋光度〔α〕甘せ４６．５°（ｃ＝ｔ、ｏ。
アー１ト＝）リル）を有する白色粉末２．４１（０，０
１２モル、４からの収率２４％）が得られた。又（Ｉ９
−６ 、 （Ｓ）−５ｏ ｍｐ及びＥＩ ＮＭＲ（９０
ＭＨｚ ）の測定値は以下の通りであった、ｍｐ１８０
．５−１ｉ１１１°（３，ＨＮＭＲ（ＯＤａＯＤ）δｐ
Ｉ）ｍ：８．５５−４．６６（６Ｅｆ、 ｍ。
１２モル、４からの収率２４％）が得られた。又（Ｉ９
−６ 、 （Ｓ）−５ｏ ｍｐ及びＥＩ ＮＭＲ（９０
ＭＨｚ ）の測定値は以下の通りであった、ｍｐ１８０
．５−１ｉ１１１°（３，ＨＮＭＲ（ＯＤａＯＤ）δｐ
Ｉ）ｍ：８．５５−４．６６（６Ｅｆ、 ｍ。
−Ｎｏｔ（２０Ｈ（０−）Ｏ）Ｉ２０１（）、 ７．０
５−７．５５ （１゜＋ｎ、 ０６）Ｉ５− ） 実施例４ リパーゼＡＬＯ，！Ｍ及び基質（Ｒ，Ｓ） −５−ブタ
ノイロキシメチ／ｌ／−３−フェニル−オキサゾリジン
−２〜オン４を１８．１５Ｆ（０，０５モル）用い、実
施例８に準じて不斉氷解反応及び抽出精製を行い、以下
の結果を得た。
５−７．５５ （１゜＋ｎ、 ０６）Ｉ５− ） 実施例４ リパーゼＡＬＯ，！Ｍ及び基質（Ｒ，Ｓ） −５−ブタ
ノイロキシメチ／ｌ／−３−フェニル−オキサゾリジン
−２〜オン４を１８．１５Ｆ（０，０５モル）用い、実
施例８に準じて不斉氷解反応及び抽出精製を行い、以下
の結果を得た。
（８）−４：収量８．９ｆ、（α）ｐ＋５７．８°（Ｃ
＝１．０゜アセトニトリル） （Ｓ）−５：収ｊｌｋ２．ｏｙ、ｃα〕υ＋７７．０°
（（１＝１．０゜アセトニトリル） ＠−５；収量２．６ｙ、ｃα）Ｄ−５４，９°（Ｑ＝
１．０゜１七トニトリ／し） 実施例５ ｆ記の組成からなる栄養液体培地を調製し、２１坂ロフ
ラスコに４００ ｎｉｌずつ分注後、１２゜”０，１５
分殺菌した。
＝１．０゜アセトニトリル） （Ｓ）−５：収ｊｌｋ２．ｏｙ、ｃα〕υ＋７７．０°
（（１＝１．０゜アセトニトリル） ＠−５；収量２．６ｙ、ｃα）Ｄ−５４，９°（Ｑ＝
１．０゜１七トニトリ／し） 実施例５ ｆ記の組成からなる栄養液体培地を調製し、２１坂ロフ
ラスコに４００ ｎｉｌずつ分注後、１２゜”０，１５
分殺菌した。
グルコース４％、イーストエキス０．８％、肉エキス０
．８％、ペプトン０．８％、リン酸ニアン毫ニウム０．
２％、リン酸−カリウＡ Ｏ，１％（ｐＨ７，０）これ
とは別に同じ組成の＠地にて前培養をしたシュードモナ
ス・アエルギノサＩＰ０ ８０８００種菌液１０ ｍｌ
ｌ ｔ−前培養培地に凝種し、８０°Ｃ１２４時間振と
９を行った。合計５本培養し、＠貴液計２１を鴎た。こ
の＠養液を遠心分離し、１体を集めた。この菌体を０．
１Ｍ’Ｊン酸緩衝液（ｐＨ７，０）２００Ｆ７Ｊ１！に
懸濁シ、ｍＷ （Ｒ，８） −５−ヘキサノイロキシメ
チル−オキサゾリジン−２−オン８を１８．７ ｆ／
（０，１モル）添加した。これを５００ ｍｌ容２ｇ内
で撹拌Ｆ、ＩＮ Ｎａ０１ｉ１３（４１でｐｌＩを７．
ＯＫ調整し＆ カラ、８０−０．１８時間反応させた
。反応後、速・む分離して得た土浦を各２００ ｍｌの
酢酸エチルで４回抽出分離を行い、次いで実施例２に準
じて同様の操作を行い、表ＩＫ示す結果を得喪。
．８％、ペプトン０．８％、リン酸ニアン毫ニウム０．
２％、リン酸−カリウＡ Ｏ，１％（ｐＨ７，０）これ
とは別に同じ組成の＠地にて前培養をしたシュードモナ
ス・アエルギノサＩＰ０ ８０８００種菌液１０ ｍｌ
ｌ ｔ−前培養培地に凝種し、８０°Ｃ１２４時間振と
９を行った。合計５本培養し、＠貴液計２１を鴎た。こ
の＠養液を遠心分離し、１体を集めた。この菌体を０．
１Ｍ’Ｊン酸緩衝液（ｐＨ７，０）２００Ｆ７Ｊ１！に
懸濁シ、ｍＷ （Ｒ，８） −５−ヘキサノイロキシメ
チル−オキサゾリジン−２−オン８を１８．７ ｆ／
（０，１モル）添加した。これを５００ ｍｌ容２ｇ内
で撹拌Ｆ、ＩＮ Ｎａ０１ｉ１３（４１でｐｌＩを７．
ＯＫ調整し＆ カラ、８０−０．１８時間反応させた
。反応後、速・む分離して得た土浦を各２００ ｍｌの
酢酸エチルで４回抽出分離を行い、次いで実施例２に準
じて同様の操作を行い、表ＩＫ示す結果を得喪。
実施例６
菌株をかえて、実施例２及び５に準じて菌体の不斉氷解
反応及び抽出精製を行い、表１に示す結果を得た。
反応及び抽出精製を行い、表１に示す結果を得た。
実施例７
Ｖニードモナス・アエルギノサＩＦ０ ８０８０を用い
て、前記実施例５と同様にして得喪培養液２１を遠心分
離し、菌体を集めた。この菌体を０．１Ｍリン酸緩衝液
（Ｉ）Ｈ７，０）２００ｆｆｌｆＫ懸濁し、氷冷しなが
ら超音波破砕器で画体破砕し、遠心分離して無細胞抽出
酵素を得た。この酵素液ニｌ＆質（Ｒ，８）−５−ヘキ
サノイロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンＢを１
８．’ｌｉ加し、ＩＮ ＮａＯＨ溶液でｐＨを７．０に
調整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１４８時間不斉氷解反
応を行った。
て、前記実施例５と同様にして得喪培養液２１を遠心分
離し、菌体を集めた。この菌体を０．１Ｍリン酸緩衝液
（Ｉ）Ｈ７，０）２００ｆｆｌｆＫ懸濁し、氷冷しなが
ら超音波破砕器で画体破砕し、遠心分離して無細胞抽出
酵素を得た。この酵素液ニｌ＆質（Ｒ，８）−５−ヘキ
サノイロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンＢを１
８．’ｌｉ加し、ＩＮ ＮａＯＨ溶液でｐＨを７．０に
調整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１４８時間不斉氷解反
応を行った。
以下、実施例２に準じて抽出精製を行い表１に示す結果
を得た。
を得た。
表１
での値である。
実施例８
アクロモバクタ−・パルブルスＩＦ０ １８１８２及び
基質（Ｒ，５）−５−ブタノイロキシメチル−８−フェ
ニル−オキサゾリジン−２−オン４（１Ｂ、１６ｆ）を
用い、実施例８及び６に準じて不斉氷解反応及び抽出精
製を行い、以下の結果を得た。
基質（Ｒ，５）−５−ブタノイロキシメチル−８−フェ
ニル−オキサゾリジン−２−オン４（１Ｂ、１６ｆ）を
用い、実施例８及び６に準じて不斉氷解反応及び抽出精
製を行い、以下の結果を得た。
５
（８）−４：収量８．２ｙ、（α〕ゎ＋５６．４６（Ｃ
＝ ｔ、ｏ ＋アセトニトリル） （８）−６：収量ｚ、ｏｙ、ｃα）Ｄ＋７５．７°（Ｃ
＝１．０゜アセトニトリ／Ｌ／） ＜ｑ−５：収ｉ２．ｔ ｙ 、 〔α〕Ｐ −５８，１
°（Ｃ＝１．０゜アセトニトリル） 実施例９ １００ ｍ１ｏＯ，ＩＭす：ｌｅｌ１ｍＷｃ ｐＨ７，
０＞にステアプシンｏ、６ｙ及び基質（Ｒ，８）−５−
プタノイロキンメチルーオギサゾリジン−２−オンモル
）を添加し、ｌＮ ＮａＯＨ溶液でｐｌ（を７．０に調
整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１１２時間不斉氷解反応
を行なった。この反応液を各１００ ｍｌの酢酸エチル
で４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を減圧濃縮後、未
反応物＠−６の中に不純物として氷解物（８）−５−ヒ
ドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オン（８）−７
が約２モル％含まれてい九ので、シリカゲルカフムクロ
マトグフフイー操作（条件：ワターゲＡ／ｃ −１００
、Ｌ／Ｄ＝５０ａｓ Ｘ ２．４３ ＋ヘキサン：アセ
トン＝１＝１の系）を行った。溶出した（至）−６画分
を減圧ｆＡ縮したところ、比旋光度〔α）Ｄ−４４，５
°（Ｃ＝１．０１メタノール）を有する白色粉本の（Ｉ
Ｑ−６が４．９ｆ（０，０２６−１：／ｌ／、収率２６
％）得られた。ｍｐ及びｋｌ ＮＭＩＬ （９Ｑ Ｍｆ
（ｚ ）の測定値は以下の通りであった。
＝ ｔ、ｏ ＋アセトニトリル） （８）−６：収量ｚ、ｏｙ、ｃα）Ｄ＋７５．７°（Ｃ
＝１．０゜アセトニトリ／Ｌ／） ＜ｑ−５：収ｉ２．ｔ ｙ 、 〔α〕Ｐ −５８，１
°（Ｃ＝１．０゜アセトニトリル） 実施例９ １００ ｍ１ｏＯ，ＩＭす：ｌｅｌ１ｍＷｃ ｐＨ７，
０＞にステアプシンｏ、６ｙ及び基質（Ｒ，８）−５−
プタノイロキンメチルーオギサゾリジン−２−オンモル
）を添加し、ｌＮ ＮａＯＨ溶液でｐｌ（を７．０に調
整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１１２時間不斉氷解反応
を行なった。この反応液を各１００ ｍｌの酢酸エチル
で４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を減圧濃縮後、未
反応物＠−６の中に不純物として氷解物（８）−５−ヒ
ドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オン（８）−７
が約２モル％含まれてい九ので、シリカゲルカフムクロ
マトグフフイー操作（条件：ワターゲＡ／ｃ −１００
、Ｌ／Ｄ＝５０ａｓ Ｘ ２．４３ ＋ヘキサン：アセ
トン＝１＝１の系）を行った。溶出した（至）−６画分
を減圧ｆＡ縮したところ、比旋光度〔α）Ｄ−４４，５
°（Ｃ＝１．０１メタノール）を有する白色粉本の（Ｉ
Ｑ−６が４．９ｆ（０，０２６−１：／ｌ／、収率２６
％）得られた。ｍｐ及びｋｌ ＮＭＩＬ （９Ｑ Ｍｆ
（ｚ ）の測定値は以下の通りであった。
ｍｌ）６２°０．ＩＩＮＭ几（ＣＤＣ１８） δｐｐｍ
：０．８−１．１ （８Ｈ，ｔ、 ０Ｈａ）、 １．
４−１，９ （ＬＨ，ｍ。
：０．８−１．１ （８Ｈ，ｔ、 ０Ｈａ）、 １．
４−１，９ （ＬＨ，ｍ。
Ｏｕ８０ Ｈ！Ｏ■２− ）、 ２．１５−２．４５
（２）Ｌ ｍ。
（２）Ｌ ｍ。
Ｃ■ｓＯＨｇ０１（ｇ−）、 ８．２５−８．８６（Ｌ
ｌ（、ｍ。
ｌ（、ｍ。
−Ｏ［２Ｎ −） 、４．１ −４．８ （２Ｊ ｍ、
−Ｃｔ１２０− ）＋４．６５−４．９ （Ｉ Ｋ、
ｍ、 −０１（２０１（（０−）Ｏｆ（２−）＋６．４
−６．６ （１，ｂ、 −Ｎｌ（）得られたに）−６の
４．（１（０，０２１モル）を４０ ｍｌ ｔｖ ＩＮ
ＮａＯＨ溶液に添加し、室温下、約５時間加水分解を
行い、反応液をｐｆ（７，Ｑに調整し、濃縮乾固する。
−Ｃｔ１２０− ）＋４．６５−４．９ （Ｉ Ｋ、
ｍ、 −０１（２０１（（０−）Ｏｆ（２−）＋６．４
−６．６ （１，ｂ、 −Ｎｌ（）得られたに）−６の
４．（１（０，０２１モル）を４０ ｍｌ ｔｖ ＩＮ
ＮａＯＨ溶液に添加し、室温下、約５時間加水分解を
行い、反応液をｐｆ（７，Ｑに調整し、濃縮乾固する。
このようにして得た乾固物を５０ ｍｌの酢酸エチルで
溶解し、不溶物をｐ去した後、減圧濃縮し、ヘキサン−
アセトン（１０ｍｌ−１０ｍｌ ）で再ｍする＋！：比
旋光Ｆｆ（α’）”−４５，４’（Ｇ＝１．０．メタノ
ール）を有する白色の粉本（至）−５−ヒドロキシメチ
ル−オキサゾリジン−２−オン−（均一７が１．７Ｍ０
．０１５モル。
溶解し、不溶物をｐ去した後、減圧濃縮し、ヘキサン−
アセトン（１０ｍｌ−１０ｍｌ ）で再ｍする＋！：比
旋光Ｆｆ（α’）”−４５，４’（Ｇ＝１．０．メタノ
ール）を有する白色の粉本（至）−５−ヒドロキシメチ
ル−オキサゾリジン−２−オン−（均一７が１．７Ｍ０
．０１５モル。
＠−１よりの収率６８％）得られた。
ｍｐ及び１１ ＮＭＩＩＬ（９ＱＭＨｚ ）測定値ハ以
下の通りであった。
下の通りであった。
ｍＰ６５−５８°Ｃ，Ｆｉ ＮＭＲ（ＣＤａＯＤ）δｐ
ｐｍ：８．８５−８．９ （４■、 ｍ。
ｐｍ：８．８５−８．９ （４■、 ｍ。
−ＮＥ［０Ｈ２（３■（０−）Ｃ”ｉｏ［）、 ４．５
−４．８５ （ａａ、 ｍ。
−４．８５ （ａａ、 ｍ。
−ＮＨＯＥＩ、０ｆ（（０−）ＯＨ２０ＥＩ）。
又、（ト）−６の光学純度をめる為、（８）−α−メト
キＶ−α−トリプルオロメチルフェニルアセチルクロツ
イドを用いＣ１ジアステレオマーの形にし、ＧＬＯ法（
１０％シリコン１）ＯＱＦ−１，クロモソルプムＷ−Ｄ
ＭＯ８，６０−８０メツシユ、５ｍカフム、２４０°Ｃ
）によりめたところ９４％ａ、ｅ、であった。一方、酢
酸エチル抽出操作で水層側に残った氷解物（８）−７含
有水溶液を減圧濃縮し、得られた乾固物を１００ ｍｌ
の酢酸エチルで溶解し、不溶物を炉去した後、減圧ｃ濃
縮し、ヘキをンーアセｌｚ（１０７７ｆｌ−１Ｏｍｌ
）で再結すると比旋光度（ａ）”、： ＋８１．４°（
Ｑ＝１．０．メタノール）を有する白色の粉末（８）−
７が２．２ｆ（０，０１９モル、１よりのモル収率１９
％）得られた。その光学純度は６５％ｅ、ａであった。
キＶ−α−トリプルオロメチルフェニルアセチルクロツ
イドを用いＣ１ジアステレオマーの形にし、ＧＬＯ法（
１０％シリコン１）ＯＱＦ−１，クロモソルプムＷ−Ｄ
ＭＯ８，６０−８０メツシユ、５ｍカフム、２４０°Ｃ
）によりめたところ９４％ａ、ｅ、であった。一方、酢
酸エチル抽出操作で水層側に残った氷解物（８）−７含
有水溶液を減圧濃縮し、得られた乾固物を１００ ｍｌ
の酢酸エチルで溶解し、不溶物を炉去した後、減圧ｃ濃
縮し、ヘキをンーアセｌｚ（１０７７ｆｌ−１Ｏｍｌ
）で再結すると比旋光度（ａ）”、： ＋８１．４°（
Ｑ＝１．０．メタノール）を有する白色の粉末（８）−
７が２．２ｆ（０，０１９モル、１よりのモル収率１９
％）得られた。その光学純度は６５％ｅ、ａであった。
実施例１０
１００ ｍｌの０．１ Ｍリン酸緩衝Ｍ（ｐｉｔ ７．
０ ＞にステアプシン０．６１及び基質（Ｒ，８） −
５−ヘキサノイロキシメチル−オキサゾリジン−２−オ
リ （０，１モル）ｋｉＷ加し、ＩＮ Ｎａ０ｆ（ａｉでｐ
ｌ（７に調整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１１８時間不
斉氷解反応を行った。この反応液を各１００ ｍｌの酢
酸エチルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を無水硫
酸ソーダで脱水処ｉ１１＠、減圧ｔ！４縮し、比旋光度
〔α）Ｄ−８８，７°ｃｃ＝ｔ、ｏ＋ メタノール）を
有する白色の粉末（至）−８が８．ＩＰ（０，０８８モ
ル、収率８８％）得ら几た。ｍｐ及び ｄＮＡ［几（９
０Ｍ［Ｚ）測定値は以下の通りであった。
０ ＞にステアプシン０．６１及び基質（Ｒ，８） −
５−ヘキサノイロキシメチル−オキサゾリジン−２−オ
リ （０，１モル）ｋｉＷ加し、ＩＮ Ｎａ０ｆ（ａｉでｐ
ｌ（７に調整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１１８時間不
斉氷解反応を行った。この反応液を各１００ ｍｌの酢
酸エチルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を無水硫
酸ソーダで脱水処ｉ１１＠、減圧ｔ！４縮し、比旋光度
〔α）Ｄ−８８，７°ｃｃ＝ｔ、ｏ＋ メタノール）を
有する白色の粉末（至）−８が８．ＩＰ（０，０８８モ
ル、収率８８％）得ら几た。ｍｐ及び ｄＮＡ［几（９
０Ｍ［Ｚ）測定値は以下の通りであった。
ｍｐ６ Ｌ、６〜６２．０℃、ＨＮＭＲ（ＯＤＯｊ７８
）δｐｐｍ：０．７０−２．１５（ＩＮ（、ｍ、 Ｃ３
Ｈ１１−）。
）δｐｐｍ：０．７０−２．１５（ＩＮ（、ｍ、 Ｃ３
Ｈ１１−）。
８．８０−８．９０ （２ｆ（、ｍ、 −０Ｈ２Ｎ−）
、 ４．２０−４．８５ （２１，ｄ、 −０Ｈ２０−
）、 ４．６５−５．００（ｌ ｆ（、ｍ、 −ＣＬ（
２０Ｈ（０−）（３Ｈ２−） 、 ６．４６−６．７５
（ｔｌｉ、ｂ、−Ｎ）［−） 更に、（均一８の８．０ｆ（０，０８７モル）を８０ｍ
１の０．１Ｍリン酸緩４Ｍ（ｐＬＩ７．０）に懸濁し、
リボプロティンリパーゼ０．２Ｆを添加し、８０℃で約
１６時間加水分解反応を行った。この反応液をｐＥＩ７
．ｏに再調整した後、濃縮乾固する。このようにして得
た乾固物を１００ ｍｌの酢酸エチルで溶解し、不溶物
を戸去した後、減圧濃縮し、ヘキサン−アセトン＜１ｏ
ｍｅ−１ｏｍｅ＞で再結すると比旋光度〔α）Ｄ−４４
，９＠（０＝１．０．メタノール）、光学純度９８％ａ
ａを有する白色の粉末（１１９−５−ヒドロキシメチル
−オキサゾリジン−２−オンが２．６１（０，０２２モ
ル、（Ｒ）−８よりの収率６０％）得られた。一方、水
層側の（８）−７も実施例９と１・１様の操作と行い、
比旋光度（ａ）１１０＋１８．０°（ｃｍ１．０．メタ
ノール）、光学純度２７％ｑｅ、を有する白色のｔ’）
−＋ （Ｓ） −７が８．５１（０，０８０モル、８よ
りの収１３０％）得られた。
、 ４．２０−４．８５ （２１，ｄ、 −０Ｈ２０−
）、 ４．６５−５．００（ｌ ｆ（、ｍ、 −ＣＬ（
２０Ｈ（０−）（３Ｈ２−） 、 ６．４６−６．７５
（ｔｌｉ、ｂ、−Ｎ）［−） 更に、（均一８の８．０ｆ（０，０８７モル）を８０ｍ
１の０．１Ｍリン酸緩４Ｍ（ｐＬＩ７．０）に懸濁し、
リボプロティンリパーゼ０．２Ｆを添加し、８０℃で約
１６時間加水分解反応を行った。この反応液をｐＥＩ７
．ｏに再調整した後、濃縮乾固する。このようにして得
た乾固物を１００ ｍｌの酢酸エチルで溶解し、不溶物
を戸去した後、減圧濃縮し、ヘキサン−アセトン＜１ｏ
ｍｅ−１ｏｍｅ＞で再結すると比旋光度〔α）Ｄ−４４
，９＠（０＝１．０．メタノール）、光学純度９８％ａ
ａを有する白色の粉末（１１９−５−ヒドロキシメチル
−オキサゾリジン−２−オンが２．６１（０，０２２モ
ル、（Ｒ）−８よりの収率６０％）得られた。一方、水
層側の（８）−７も実施例９と１・１様の操作と行い、
比旋光度（ａ）１１０＋１８．０°（ｃｍ１．０．メタ
ノール）、光学純度２７％ｑｅ、を有する白色のｔ’）
−＋ （Ｓ） −７が８．５１（０，０８０モル、８よ
りの収１３０％）得られた。
実施例１１
バンクレアチン０．５２及びＪ人Ｔ７ （几、８ ）
−５−ヘキサノイロキシメチル−オキサゾリジン−２−
オン−８を２１．５ ｆ （０，１モル）用い、実施例
１０に準じて不斉水解（応及び抽出ｍｄを行い、以下の
結果を得た、 （Ｉ（）−８：収量’７．５ｆ、Ｃα〕１．−２１．１
６（ｃｍ１．０．メタノ−Ａ／） （Ｂ）−７：収量２．６ｆ、 （ａ）”、’−２２，９
°（ｃｍ１．０．メタノール）、４８％ｅ、ｅ。
−５−ヘキサノイロキシメチル−オキサゾリジン−２−
オン−８を２１．５ ｆ （０，１モル）用い、実施例
１０に準じて不斉水解（応及び抽出ｍｄを行い、以下の
結果を得た、 （Ｉ（）−８：収量’７．５ｆ、Ｃα〕１．−２１．１
６（ｃｍ１．０．メタノ−Ａ／） （Ｂ）−７：収量２．６ｆ、 （ａ）”、’−２２，９
°（ｃｍ１．０．メタノール）、４８％ｅ、ｅ。
（８）−７：酸敗５．２ｇ、（α〕ゎ＋１３６８°（ｃ
ｍ１．０．メタノール）、２９％ｅｌ、 ８゜実施例１
２ １００ ｍｌの０．１Ｍリン酸ｉｘｍ（Ｆ！＜ｐＨ７，
０）にリパーゼＭ−へＰＩＯを０．５１及び基！（Ｒβ
）＝５−ブタフィロキンメチル−８−フェニル−オキサ
ゾリジン−２−オン−９ モル）を添加し、ＩＮ ＮａＯＨｌ＃ｇでｐＨ７，０に
調整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１２４時間不斉氷解反
応を行なったっこの反応液を各１００ ｍｌの酢酸エチ
ルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を減圧１！Ａ縮
後、目的物（鳴−９中に不純物として氷解物（８）−５
−ヒドロキシメチル−８−フェニル−オキサゾリジン−
２−オン（８）−１０が約６％含まれていたので、更に
シリカゲルカフムクロマトグフフイー操作（条件：ワタ
ーゲルａ−１ｏｏ、Ｌ／Ｄ＝ ５０ ｃＩＩＸ ２．４
ｃｍ、 ヘキサン：アセトン−８：１の系）を行った
。溶出した（均一９画分を減圧濃縮したところ比旋光（
〔α）Ｄ−５８，０°（ｃｍ１．０１アセトニトリル）
を有する粉末の（Ｒ）−９が８．８ｆ（０，０１４モル
、９からの収率２９％）得られた。
ｍ１．０．メタノール）、２９％ｅｌ、 ８゜実施例１
２ １００ ｍｌの０．１Ｍリン酸ｉｘｍ（Ｆ！＜ｐＨ７，
０）にリパーゼＭ−へＰＩＯを０．５１及び基！（Ｒβ
）＝５−ブタフィロキンメチル−８−フェニル−オキサ
ゾリジン−２−オン−９ モル）を添加し、ＩＮ ＮａＯＨｌ＃ｇでｐＨ７，０に
調整しながら、攪拌下、８０°Ｃ１２４時間不斉氷解反
応を行なったっこの反応液を各１００ ｍｌの酢酸エチ
ルで４回抽出操作を行い、酢酸エチル層を減圧１！Ａ縮
後、目的物（鳴−９中に不純物として氷解物（８）−５
−ヒドロキシメチル−８−フェニル−オキサゾリジン−
２−オン（８）−１０が約６％含まれていたので、更に
シリカゲルカフムクロマトグフフイー操作（条件：ワタ
ーゲルａ−１ｏｏ、Ｌ／Ｄ＝ ５０ ｃＩＩＸ ２．４
ｃｍ、 ヘキサン：アセトン−８：１の系）を行った
。溶出した（均一９画分を減圧濃縮したところ比旋光（
〔α）Ｄ−５８，０°（ｃｍ１．０１アセトニトリル）
を有する粉末の（Ｒ）−９が８．８ｆ（０，０１４モル
、９からの収率２９％）得られた。
ｍｐ及びＨＮＭＲ（９０Ｍ■２）測定値は以下の通りで
あった。
あった。
ｍｐ：４８．５〜４９．０（Ｅ、ｌ（ＮＭＲ（ＯＤＯｊ
’ａ ）８９９ｍ ： ０．７５−１．１０ （８１（
、ｔ、 ０ｆｌａ−）、 １．８６１、Ｂ ５ （２Ｊ
ｍ、 （ＩＨｓＯｔ［ｚＯＨｓ＋ −）、 ２．１５
−２．４０ （２ｋｌ、 ｔ 、 ＯＨｇＯ［２Ｃ［２
−） 、 Ｂ、９５−４．７５ （５Ｈ，ｍ 、 −Ｎ
ＯＨ２０Ｈ（０） ０！２０− ）。
’ａ ）８９９ｍ ： ０．７５−１．１０ （８１（
、ｔ、 ０ｆｌａ−）、 １．８６１、Ｂ ５ （２Ｊ
ｍ、 （ＩＨｓＯｔ［ｚＯＨｓ＋ −）、 ２．１５
−２．４０ （２ｋｌ、 ｔ 、 ＯＨｇＯ［２Ｃ［２
−） 、 Ｂ、９５−４．７５ （５Ｈ，ｍ 、 −Ｎ
ＯＨ２０Ｈ（０） ０！２０− ）。
６．９５−７．５０ （５ｔ（、ｍ、 ０６Ｈ５−）以
下、実施例９と同様の操作を行い、比旋光度〔α青−７
１．４°（Ｃ” １−０ ＋ アセトニトリル）（但し
、文献記ＩＩＩ！値は〔α）Ｄ−７２，０°（Ｃ”１．
Ｌアセトニトリル）特開昭５８−１０８８７６ ）を有
ｉ白色１５３末（Ｒ）−５−ヒドロキシメチル−８−フ
ェニル−オキサゾリジン（ｆＱ−１０が２．１２（０，
０１１モル、（均一４からの収率７９％）得られた。一
方、酢酸エチル抽出分離の際、水層側に含まれる氷解物
（８）−１０も実施例９と同様の操作を経て、比旋光度
〔α）Ｖ＋８５．４’（ｃｍｔ、ｏ、アセトニトリル）
７ｉ−有する白色粉末２．５ ｆ （０，０１８モル、
９からの収率２６％）が得られた。
下、実施例９と同様の操作を行い、比旋光度〔α青−７
１．４°（Ｃ” １−０ ＋ アセトニトリル）（但し
、文献記ＩＩＩ！値は〔α）Ｄ−７２，０°（Ｃ”１．
Ｌアセトニトリル）特開昭５８−１０８８７６ ）を有
ｉ白色１５３末（Ｒ）−５−ヒドロキシメチル−８−フ
ェニル−オキサゾリジン（ｆＱ−１０が２．１２（０，
０１１モル、（均一４からの収率７９％）得られた。一
方、酢酸エチル抽出分離の際、水層側に含まれる氷解物
（８）−１０も実施例９と同様の操作を経て、比旋光度
〔α）Ｖ＋８５．４’（ｃｍｔ、ｏ、アセトニトリル）
７ｉ−有する白色粉末２．５ ｆ （０，０１８モル、
９からの収率２６％）が得られた。
（８） −１０、＋ＲＪ −１０＋７） ｍｐＥｌび［
ＮＭＲ（９０Ｍ■２）測定値は以下の通りであった。
ＮＭＲ（９０Ｍ■２）測定値は以下の通りであった。
ｍｌ）１８０．５−１８１’Ｏ，ＨＮＭＲ（ＣＤ８００
）δｐＩ）ｍ ：８．６６−４．６５ （６Ｈ，ｍ。
）δｐＩ）ｍ ：８．６６−４．６５ （６Ｈ，ｍ。
−ＮＯＨ，０Ｈ（０−）ＯＨ２０Ｈ）、 ７．０５−７
．５５ （５１１（。
．５５ （５１１（。
ｍ、 ０６１（、−）
実施例１８
リパーゼ（リゾゲス・デレマー）０．５４及び基質（Ｒ
，５）−５−ブタノイロキシメチル−８−フェニル−オ
キサゾリジン−２−オン−９ヲ１８．１５Ｆ（０，０５
モル）用い、実施例１２に準じて不斉氷解反応及び抽出
精製を行い、以下の結果を得た。
，５）−５−ブタノイロキシメチル−８−フェニル−オ
キサゾリジン−２−オン−９ヲ１８．１５Ｆ（０，０５
モル）用い、実施例１２に準じて不斉氷解反応及び抽出
精製を行い、以下の結果を得た。
（１’９−９：収１４．１ ｆ 、 （ａ〕”、７−５
１．８°（ｃ＝１．０．アセトニトリル） （Ｂ）−ｔｏ：収＆ ２．８ ｙ 、 （α〕背−６９
，１°（Ｃ−１，０，アセトニトリル） （８）−１０：収盪２． Ｏｆ 、 （α）背＋ ４１
．４’（Ｃ＝１．０．アセトニトリル） 実施例１４ 下記の組成からなる栄、Ｊ？液体培地を１４１１！Ｌ、
２１ａロフラスコに４００ ｍｌずつ分注後、１２０’
０．１５分殺菌した。
１．８°（ｃ＝１．０．アセトニトリル） （Ｂ）−ｔｏ：収＆ ２．８ ｙ 、 （α〕背−６９
，１°（Ｃ−１，０，アセトニトリル） （８）−１０：収盪２． Ｏｆ 、 （α）背＋ ４１
．４’（Ｃ＝１．０．アセトニトリル） 実施例１４ 下記の組成からなる栄、Ｊ？液体培地を１４１１！Ｌ、
２１ａロフラスコに４００ ｍｌずつ分注後、１２０’
０．１５分殺菌した。
クルコース４％、イーストエキＸ Ｏ，８％、肉エキス
０．８％、ペプトン０．８％、リン１０ニアンモニウム
０．２％、リン酸−カリウム０．１％（ｐｌ（７，０）
これとは別に同じ組成の培地にてＡｉｌ培遣をしたムコ
ール・ジャパニクスＩＦ０ ４６７２の４１Ｍ１０ ｍ
ｌを前培責＊ｍに漱橋し、８０°Ｃ１２４時間振とうを
行った。合計５本培養し、培養液計２１を得た。この培
養液を速心分離し、菌体を泉めた。この菌体を０．１
Ｍ ’Ｊン酸緩衝液（Ｉ）［７，０）２００ ｍｌ！Ｖ
Ｃ’ｔＡ濁し、基質（Ｌ８）−５−ブタフィロキンメチ
ル−８−フェニル−オキサゾリジン−２−オン−９を１
ｆ１１．１５ｆ／（０，０５モル）添加した。これ金５
００ｍｅ谷ａ内で攪拌［、ＩＮＮ ａｄｄ 溶液でｐｕ
を７．０に調整しながら、８０−Ｃ，１８時間反応させ
た。反応後、遠心分離して得た上清を各２００ ｍｇの
酢酸エチルで４回抽出分４を行ハ、以「実施例１２に準
じて同様の操作を行い、表２にボす結果を得た。
０．８％、ペプトン０．８％、リン１０ニアンモニウム
０．２％、リン酸−カリウム０．１％（ｐｌ（７，０）
これとは別に同じ組成の培地にてＡｉｌ培遣をしたムコ
ール・ジャパニクスＩＦ０ ４６７２の４１Ｍ１０ ｍ
ｌを前培責＊ｍに漱橋し、８０°Ｃ１２４時間振とうを
行った。合計５本培養し、培養液計２１を得た。この培
養液を速心分離し、菌体を泉めた。この菌体を０．１
Ｍ ’Ｊン酸緩衝液（Ｉ）［７，０）２００ ｍｌ！Ｖ
Ｃ’ｔＡ濁し、基質（Ｌ８）−５−ブタフィロキンメチ
ル−８−フェニル−オキサゾリジン−２−オン−９を１
ｆ１１．１５ｆ／（０，０５モル）添加した。これ金５
００ｍｅ谷ａ内で攪拌［、ＩＮＮ ａｄｄ 溶液でｐｕ
を７．０に調整しながら、８０−Ｃ，１８時間反応させ
た。反応後、遠心分離して得た上清を各２００ ｍｇの
酢酸エチルで４回抽出分４を行ハ、以「実施例１２に準
じて同様の操作を行い、表２にボす結果を得た。
実施例１５−１７
菌株を変えて、Ａ施例１４に準じて菌体の不斉氷解反応
及び抽出１４製で行い、表２にボす結果を得た。
及び抽出１４製で行い、表２にボす結果を得た。
’ｊｌ！施例１８
リゾプス・デレマーＩＦ０ ４７８０を用いて前ｉｆ８
実施例１４と同様にして得た培養液２１を遠心分離し、
菌体を集めた。この菌体を０．１ Ｍ ＩＪン酸ｆｆｌ
衝液（ｐｆ（７，０）２００ｍｌＫ懸濁し、氷冷しなが
らプツウンホモジナイザーで菌体破砕し、遠心分離して
無細胞抽出酵素を得た、この１尊索液に基質（Ｒ，８）
−５−ブタノイロキシメチル−８−フェニル−オキサゾ
リジン−２−オン−９を１８．１５１ （０，Ｏｆｌ／
Ｌ／）添加し、ＩＮ ＮａＯ［溶［ｐＨを７．ＯＫｗ４
１しながら攪拌Ｆ１３０°Ｃ１４８時間不斉氷解反応を
行）友。以−［、実施例１２に準じて抽出精製を行い、
表２に示す結果を得た。
実施例１４と同様にして得た培養液２１を遠心分離し、
菌体を集めた。この菌体を０．１ Ｍ ＩＪン酸ｆｆｌ
衝液（ｐｆ（７，０）２００ｍｌＫ懸濁し、氷冷しなが
らプツウンホモジナイザーで菌体破砕し、遠心分離して
無細胞抽出酵素を得た、この１尊索液に基質（Ｒ，８）
−５−ブタノイロキシメチル−８−フェニル−オキサゾ
リジン−２−オン−９を１８．１５１ （０，Ｏｆｌ／
Ｌ／）添加し、ＩＮ ＮａＯ［溶［ｐＨを７．ＯＫｗ４
１しながら攪拌Ｆ１３０°Ｃ１４８時間不斉氷解反応を
行）友。以−［、実施例１２に準じて抽出精製を行い、
表２に示す結果を得た。
表 ２
註：〔α〕 直は、いずれも（Ｃ＝ｔ、Ｏ，アセトニト
リ〜）での値である。
リ〜）での値である。
特許出願人 鐘淵化学工業株式会社
代理人 弁理士 浅 ＊Ｘ−
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）一般式（１） （式中、殉は水素、或いは置換又は未置換アリル（ムｒ
）基、場は置換又は未置換アルキｙ基である）で表わさ
れる（Ｒ，５）−５−アシロキシメチルーオキサゾリジ
ン−２−オンを不斉的に加水分解して、一般式１）（Ｒ
１は前記と同じ）で表わされる光学活性な５−ヒドロキ
シメチル−オキサゾリジン−２−オンを生成させる立体
選択的エステフーゼ活性を有する微生物或いは酵素を作
用させることにより、ラセミ体（１）を光学活性な化合
物１）と一般式（Ｉ） （Ｒ４およびＲ２は前記と同じ）で表わされる未反応な
光学活性５−アシロキシメチル−オキサゾリジン−２−
オンとにし、夫々の光学活性体を分離採取することを特
徴とする６−アシロキンメチル−オキサゾリジン−２−
オンの光学分割法。 （２） （１）の化合物が、一般式（均一１）（Ｒ１は
前記と同じ）で表わされる光学活性（１１）−５−ヒド
ロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンであり、（１
）の化合物が、一般式（８）（１） （Ｒ１，Ｒ２は前記に同じ）で表わされる（８）−５−
７８’ロキシメチルーオキサゾリンン−２−オンである
特許請求の範囲第１項記載の方法。 （３）微生物或いは酵素がシュードモナス属又はアクロ
モバクタ−属に属する微生物或いは該微生物由来の酵素
である特許請求の範囲第１項を九は第２項記載の方法。 （４） （１）の化合物が、一般式（Ｅｌ） −１）（
Ｒ１は前記と同じ）で表わされる光学活性（８）−５−
ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンであり、
（１）の化合物が、一般式（ｌ（）−・、■） （Ｒ１，Ｒ２は前記に同じ）で表わされる光学活性（Ｂ
）−５−アシロキシメチル−オキサゾリジン−２−オン
である特許請求の範囲第１項記載の方法。 （５）微生物或いは酵素がムコール属又はリゾプス属に
属する微生物、或いは該微生物由来の酵素である特許請
求の範囲第１項または第４項記載の方法。 （７）一般式（１） （Ｒ１は水素、或いは置換又は未置換アリ−／Ｉ／（Ａ
ｒ）基、Ｒ２は置換又は未置換アルキル基）で表わされ
る（Ｒ，８）−５−アシロキシメチル−オキサゾリジン
−２−オンを不斉的に加水分解して、一般式１） （Ｒ１は前記に同じ）で表わされる光学活性な５−ヒド
ロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンを生成させる
立体選択的エステフーゼ活性を有する微生物或いは酵素
を作用させることによυ、ラセミ体（１）を光学活性、
な化合物１）と一般式（１） （”ｌ ＋ Ｒｓは前記と同じ）で表わされる未反応な
光学活性５−アシロキシメチル−オキサゾリジン−２−
オンとにし、夫々の光学活性体を分離、採取し、さらに
中を加水分解して化合物１）の対掌体である光学活性５
−ヒドロキＶメチρ−オキサゾリジン−２−オンを生成
させ、採取することを特徴とする光学活性５−ヒドロキ
シメチル−オキサゾリジン−２−オンの製造法。 （８）化合物１）が、一般式＠−１） （Ｒ１は前記と同じ）で表わされる光学活性（至）−５
−ヒドロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンであり
、（Ｉ）の化合物が、一般式（８） −（１） ０ （Ｒ１，Ｒ２は前記に同じ）で表わされる（Ｓ）−６−
アシロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンである特
許請求の範囲第７項記載の製造法。 （９） ｆｌ＆生物或いは酵素がシュードモナス属、ア
クロモバクタ−属に属する微生物或いは該微生物由来の
酵素である特許請求の範囲第７項または第８項記載の製
造法。 ＱＯ化合物（１）が、一般式（８） −（１）（Ｒ１は
前記と同じ）で表わされる光学活性（Ｓ）−５−ヒドロ
キシメチル−オキサゾリジン−２−オンであり、化合物
（Ｉ）が、一般式（至）−（１） す （凡１．凡２は前記と同じ）で表わされる＠−５−アシ
ロキシメチル−オキサゾリジン−２−オンである特許請
求の範囲第７項記載の製造法。 Ｏυ 微生物或いは酵素がムコール属又はリゾプス城に
緘する微生物或いは該微生物由来の酵素である特許請求
の範囲第７項または第１０項記載のｔＲ造法っ
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9805584A JPS60241893A (ja) | 1984-05-15 | 1984-05-15 | 光学活性（ｓ）―オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9805584A JPS60241893A (ja) | 1984-05-15 | 1984-05-15 | 光学活性（ｓ）―オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11379090A Division JPH03108498A (ja) | 1990-04-27 | 1990-04-27 | 光学活性（ｒ）―オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60241893A true JPS60241893A (ja) | 1985-11-30 |
| JPH0353918B2 JPH0353918B2 (ja) | 1991-08-16 |
Family
ID=14209576
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9805584A Granted JPS60241893A (ja) | 1984-05-15 | 1984-05-15 | 光学活性（ｓ）―オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60241893A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03218367A (ja) * | 1989-10-26 | 1991-09-25 | Tanabe Seiyaku Co Ltd | ナフチルオキサゾリドン誘導体、その製法及びその合成中間体 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110628743A (zh) * | 2019-08-20 | 2019-12-31 | 浙江工业大学 | 一种立体选择性酯酶、编码基因、载体、工程菌与应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5799576A (en) * | 1980-10-23 | 1982-06-21 | Du Pont | 3-(p-alkylsulfonylphenyl)oxazolidinone derivatives |
| JPS58103376A (ja) * | 1981-12-04 | 1983-06-20 | ザ・デュポン・メルク・ファーマシュウティカル・カンパニー | ｐ−オキソオキサゾリジニルベンゼンスルホンアミド類 |
| JPS5931693A (ja) * | 1982-08-13 | 1984-02-20 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
| JPS5978696A (ja) * | 1982-10-28 | 1984-05-07 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
| JPS5980668A (ja) * | 1982-06-08 | 1984-05-10 | デラランデ・エス・ア− | Ｎ−アリル化オキサゾリジン−２−オンの光学活性な誘導体、該誘導体の製法及び該誘導体による薬剤 |
-
1984
- 1984-05-15 JP JP9805584A patent/JPS60241893A/ja active Granted
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5799576A (en) * | 1980-10-23 | 1982-06-21 | Du Pont | 3-(p-alkylsulfonylphenyl)oxazolidinone derivatives |
| JPS58103376A (ja) * | 1981-12-04 | 1983-06-20 | ザ・デュポン・メルク・ファーマシュウティカル・カンパニー | ｐ−オキソオキサゾリジニルベンゼンスルホンアミド類 |
| JPS5980668A (ja) * | 1982-06-08 | 1984-05-10 | デラランデ・エス・ア− | Ｎ−アリル化オキサゾリジン−２−オンの光学活性な誘導体、該誘導体の製法及び該誘導体による薬剤 |
| JPS5931693A (ja) * | 1982-08-13 | 1984-02-20 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
| JPS5978696A (ja) * | 1982-10-28 | 1984-05-07 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03218367A (ja) * | 1989-10-26 | 1991-09-25 | Tanabe Seiyaku Co Ltd | ナフチルオキサゾリドン誘導体、その製法及びその合成中間体 |
| JP2601008B2 (ja) * | 1989-10-26 | 1997-04-16 | 田辺製薬株式会社 | ナフチルオキサゾリドン誘導体、その製法及びその合成中間体 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0353918B2 (ja) | 1991-08-16 |
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