JPS60214892A - 微生物を利用してオレフインからエポキシドを製造する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ＭＪＩＪ！Ｌ（ＵＥＪ３ＪＪ 本発明は微生物を利用し−（オレン・インからエポキシ
ドを製造する方法に関する。

囚に、エポキシド化合物は合成樹脂、界面活性剤、医薬
、農薬をはじめとする種々の自機化学製品の製造原料も
しくは中間体とし゛Ｃ広範囲な用途に供せられＣいる。

ＪＬ末２技Ｍｊ 従来、微生物を利用してエポキシドをｌＩ＋！造する方
法としては、ノカルディア属（Ｎ就ａｒｄｉａ）　、ｉ
ｚニド°モナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）　、コリ
ネバクテリウム属（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）
　、ミコバクテリウム属（ＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕＩ
ｌｌ）　、メチロシナス属（Ｍｅｔｌ＋ｙｌｏｓｉｎｕ
Ｓ）、メチロコツカス属（Ｍｅｔｌ＋ｙｌｏｃｏｃｃｕ
ｓ）　、ツレしバタテリウム属（ＩｌｒｅｖｉｂａｃＬ
ｅｒｉｕｍ）又はキートツノ”　−イダ属（Ｃａｎｄｉ
ｄａ）に属するエポキシ１−′生産菌を利川−」ろ力ｌ
大か知られている。

しかし、ｉ；Ｃ未公知の方法（はエポキシ１の収量は炭
」−数５１？シトもしくは１１以１−をイ１するオレノ
ーインを出光原オ′１とし７て用いる場合には比較的良
好ζμ、るか、炭」、故が」−記オレフインの中間であ
る０乃至１０のオレン・インを出発原料として用いる場
合はｉｑられるｊ−ボキシｌの収Ｊ荻が低いことが多い
ため、該オレノーインからエポキシ１”を製造するには
実用性Ｇに乏しい。

また、炭素数６乃至１（）を有−Ｊるオレフィンから上
ボキソトを製造するに当って、反応系にシフ１」・〜・
キリーンをｌト加する二相醗酵法や出発原料としての−
１−記オレフーインを多し１に用い、かつ微生物を含も
水相を新しいものと何度か取替える方法が提案されてい
る（特開昭５３−７９０９５５＋並びに＋Ｉｐ　Ｓｍｅ
ｔ、Ｍ、Ｊ、、Ｗｙｎｌ＋ｅｒｇ＋　Ｉｆ、、Ｗｉｔ）
＋ｏｌｔ、Ｂ、、＾Ｉ’ＪＰＩ。

１４ｎｖｉｒｏｎ、旧（、ｒ（ｌ旧ｏｆ、、　Ｑ　（５
）、旧１　（１９１１１）　）が・これらの方法ＣＬＪ
操作が煩ｆｌｃ　’（：あるため実用上自利とは詐えな
い。

一力、一般に微生物による反応においでは微生物の種類
や反応系に添力１目゛る添加物の種（」１などにより、
得られる生産物の種類や収量か大きく影響されることが
知られており、それらの最適な組合わせを見出すことが
実用上重要なこと−（ある。

発所袋七−的 本発明は、従来、炭素数６乃至１０を自するオレフィン
を出発原料として用いて相当するエポキシドを生産する
場合、エポキシドを１１１収量で得ることが実用上不可
能であったことに泪のなされたものであつ′Ｃ１」二記
オレフィンから敬４１物を利用して節易な操作で相当す
るエポキシ１を高酸ｈ１で生産し得る方法を提供するこ
とをＬＩ的と−Ｊる。

以下に本発明の詳細な説明する。

発凱■盪戒 本発明の構成上の特徴は、ノカルデ・イ゛］′属、ブレ
ビバクテリウム属又はコリネバクテリウム属に屈する上
ボ４−ソｌ’　／−１産１１Ｌを白」゛る微ノ］物を、
炭素数９乃至Ｉ５を白するバラン・ｒノ、炭素数１２乃
全１８を自゛するＡレソイン、炭素数１０乃至１６をｌ
’ｉ’Ｊ−るハロケン化パラフ・インおよび６乃至１５
の釘ｉ長の側鎖を白′４゛るアルキルヘンゼンから成る
群から選択される１種もしくはそれらの２種以−にの混
合物から成る水不溶性の自機溶剤の存在下に、炭翠数６
乃至１０を有する直鎖状又は分岐状オレン・インに好気
的条件下で作用させて該オレノーインに相当する」−ボ
ギソｌ、を産生し、得られたエボキー７１を分離採取４
．ｒ）ごとにある。

４−ノ４わ１八本発明は、炭素数６乃至１０をｒｌする
オレフィンから相当するエポキシ１を生産するに際し、
微生物としてノカル〜）°−イア属、プレヒハクテリウ
Ｊオ属もり、　＜はＪ」リネハクテリウム属に属４るエ
ポキシ１／、Ｌ産菌を利用し、かつ該微生物を１、掲の
自１幾溶剤の７１・１ｊ下に」−記オレフインに作用さ
せることＧこよりエポキシドを、ｒ＋１収量で生産し得
る方法を達成したものである。

本発明で利用する微生物は、上述したごとく、ノカルデ
ィア属、プレヒハクテリウノ・屈又は−１リネハクテリ
ウム属に属するエポキシ１什産１２１（あって、工業技
術院微生物工業技術研究所に受託されている下記閑を例
示し得る。

なお１、これらのｊ）“没生物Ｏ月ｙ１学的性質につい
ては特公昭５（ｉ−４０号公報および特公昭５６−４６
７９０号公報に＋ｉ’ｌ記されている。

本発明において１−記徹生物を利用して：しボキシｌを
？１°産°・する人−めの反応基７゛１に用いられる炭
素数〔）乃至１０を白するオレフィン（以「原料オレフ
・インと称」る）は、直鎖状又は分岐状オレフィンご炭
素　炭素−重結合の位置がいずれかの末ｉ：Ｉｊ！、ｌ
炭素から数えて第３位炭素以内にあるものであって、例
えば、１−ヘキセン、ｌ−・・ブテン、１−オクテン、
ｌ−ノネン、Ｉ　−、ｉ’　セン、３−メチル−１−ペ
ンテン、３−メチル−１−−＼キーセン、４−メチル−
１−ペンテン、４−メチル−１−ヘキセン、５−イチル
ー１−−＼キセン、３゜４−ジノチル−１ペンテン、４
，４−ジメチル−１ペンテン、３，４−ジメチル−１−
ヘキセン、４，４−ジメチル−１−・＼キセノ、３，５
．５−１リメチル−１−パ・キルン、２へ４−セン、３
−・＼キセノ、２−メチル−１−ベンゾン、２−メチル
−２−ペンテン、３−メチル２−ペンテン、４−メチル
−２−ペンテン、２．３−ジメチル１−ソーノーン、２
−エチル−１−ブテン、２−ヘプテン、２−メチル−１
ヘキセン、５−メチル２−ヘキセン、２，４−シメナル
ーＩ−ペンテン、２，５−ジメチル−１−ヘキセン、２
−ＩＬデル−１−ヘキセン、４−エチル−２−一・キセ
ノ、２，６ジメチルー１ヘプテン、２−ノネン、２−メ
チル−１−ノネン、３−ヘプテン、２−メチル−２−ヘ
キセン、３−メチル−２−ヘキセン、３−メチル−３−
ヘキセン、４−メチル−２−ヘキセン、２，３−シメヂ
ルー１−ペンテン、３．４ジメチル−２−ペンテン、３
−エチル−２−ペンテン、２，３−ジメチ月へ１−ヘキ
セン、２．４−ジメチル−１−ヘキセン、２，４．４−
Ｌジメチル−１−ペンテン、２−メチル、■−ヘプテン
、２−オクテン、３−オクテン、２．４−ジメナルーＬ
−＼ブテン、２，６−シメチルー３−ヘプテン、３，５
−ジメチル−３−ヘプテン、２−メチル−１−オクテン
、３−ノネン、２，４．４−Ｌジメチル−１−ヘキセン
などを包含する。なおこれら原料オレフィンは単独もし
くは２種以上の混合物として用い得本発明に」ｉいＣ１
記原料」レフインに０；Ｊ記徹生物を作用さ一ロイ１際
に４在ざｌる水不溶性の自機溶剤（以１り弓こ白１戊溶
剤と称する）は、炭素数９乃芋１５を白４ろバラツイン
、炭素！５！１２乃至１８分０するメレフ・イン、炭素
数ＩＯ乃至１６をａするハ１」リーン化バッソインもし
くは６乃至１５の鎖長の（凹釘）を自′ＪるーＪ′ルキ
ル・＼ンＩ？ンであって、パラフィンとしてはノルマル
バラソーイン並びにイソバッフインを、メレソーｆンと
してはα−オレフィンを、お、Ｌびハ１−Ｉゲン化パラ
ソ・インとし一ζは塩素化又臭素化さ扛ノ、ニパソフイ
ンを挙げられる。

これらの自機溶剤につい゛（更にｉ１シ＜説明すると、
炭素数９〜１５を自゛Ｊるツルマルバラフ・インは・般
に石油中の月浦〜軽浦留分、ずなわら沸点約Ｉ　Ｇ　Ｏ
’ｆ：〜約３（１（１℃の留分中に含有され′（おり、
該Ｗｌう）を水素化脱硫触媒を用いζ高温、高圧Ｆルこ
処理しソ、後、固体尿素又はビオライ１〜のような分子
篩と接触して分Ｆ４１１　Ｌ得る。なお、このパラフィ
ンは溶剤又はソフＩ〜洗剤用原オ′」とし′（市販され
ている。

又、炭素数９〜１５を有するイソパラフィンは同様に石
油の上記幻油〜軽油留分に含有されており、一般には」
１記ノルマルパラフィンのうｊ離の際に、ノルマルパラ
フィン中に約２〜５％１自されているのでこれを精密蒸
留してノルマルパラフィンから分離１′る。

このようにして得られる・イソパラフィンは主針Ｉに対
して短い鎖長、例えばメチル基やエチルノ１（が分岐し
ているものが主体であって、具体的には２−メチルノナ
ン、３−メチルノナン、２−二１ニチルノナン、２−メ
チルデカン、３−メチルデカン、２，９−ジメチルノナ
ン、２−メチルウンデカン、２−メチル１゛デカン、３
−エチルデカン、２−メチルトリデカン、２−メチルテ
Ｉ・ラブカン等を例示し得る。

、　なお、実際にはノルマルパラフィンと・ｆソバラフ
ィンの混合物の使用が人手の容易性の観点からも便利“
Ｃあり、また、これらのパラフィンの′うちＣも炭素数
の人きい力が効果が優れＣおり、炭素数１１〜１５．１
１、冒、二１２へ・１４のものが好ましい。

炭７＋−敗１２〜１８を白する」レフ・インは直鎖状又
は分岐状の１）０）Ｃもよく、特に炭素数１４〜Ｉ８の
ものが好ましい。ごのオレン・インを自（幾ン容剤とし
て用いる場合はｊ原料オレン・インの炭素数より）１ノ
くよも４人きいものが有効であって、例えば環１′１オ
レフ・インとし７てｌ−オクテン（Ｃ８）を用いる場合
は」記熔剤としての一、ｔ　Ｌノフィンに１−］゛デデ
センデトラデセン、又は１−一、キザデセン等を用いる
とよく、原料」レフインとしてｌ　−８’−ｂン（Ｃｔ
ｏ　）を用いる場合は上記オレフィンに１う一トラデセ
ン＼’Ｉ−゛・ギリう１２ンを用いる。因に、このこと
は、自機溶剤に用いるオレフィンの炭素数が原料オレン
・インのそれより４以上大きいと微生物によるエボ・１
−ソ１化が進行しない理由による。

なお、これらのオレフィンは試薬とし２（１１ル売され
′ζおり、実際の使用に当っては単独又は２種以」二の
混合物として用い得る。

次に、炭素数１０〜１６を自するハＵす°ン化パラフィ
ンは直鎖状又はうｌ枝状でもよ＜　、Ｊ！ａ　、１：、
化パラフィン又は臭素化パラン・インであって、塩コミ
化パラフィンとしては塩化デシル、ル（化ウンＪツル、
塩化１テシル、塩化テトラデシル等を例示でき、臭素化
パラフィンとしでは臭化デシル、臭化ウンデシル、臭化
ドテシル、臭化テトラデシル、臭化ヘキザデシル等を例
示しｉＵる。これらのハロゲン化パラフィンは単独又は
２種以上の混合物とし′（使用し得る。

６〜１５の鎖長の側鎖を有するアルキルヘンセンは、塩
素化パラフィンによるアルキル化又はプロピレン重合に
よる３Ｗ体、４量体並びに５星体から製造され、一般に
ハード又はソフト洗剤の中間原料として利用されている
ものである。有機溶剤としてのアル−１ル・・・ンｊ！
ンは炭Ｊ　数！ｌ〜１５のものが好ましく、１ｙにｌ　
＋１〜１５のものが好ましい。このようなアルキル・＼
ンセンとし−（はパ、キシルヘンセン、ノニールヘンレ
ン、）−′ツルー・ンセン、１デシル・・ンｌ！ン等を
例示しｉ！Ｉる。これらのアルキルベンセンは単独又は
２種以］−の混合物として使用し得る。

因に、」一連した各ｌ−１機溶剤におい゛（炭素数が」
−記範囲外のものではエポキシｌの収ｂｌの向には期待
できず、又ものによっては固体状になるので実用的でな
い。

本発明においで、１−記有機溶剤の存在下に原料オレン
・インに前記微生物を好気的条件−１・で作用さ一已る
には、例えば（イ）微生物を予め培養し増殖して１ｑら
れる菌体に、原料オレフィンをイ１機溶剤の存在下に好
気的に接触さ・Ｕて反応さ・ｌる方法、（＋１）ｍ生物
を原料オレフィンと他の炭素源、窒素源、無機塩類、更
には必要に応じて生長促進物質を添加し′ζなる栄養培
地に有機溶剤を加えに系におい′ＣＣ気気的条件下培養
する方法なとを適用し得る。

上記（・イ）の増殖菌体に原料オレフィンを￥１機溶剤
の存在下で好気的に接触さ廿゛ζ反応さ一ロる方法では
、まず炭素源として糖質例えばグルＪ　ス、シュクロー
ス、糖蜜、澱粉加水分解物、炭化水素例えばノルマルパ
ラフィン、及びそのほか酢酸やエタノールの如き菌体増
殖作用の高いものを用い、これに塩化アンモニウム、硫
酸アンモニウム、燐酸アンモニウム、硝酸アンモニウム
、尿素、アンモニア水、アミノ酸及びその他の資化性有
機窒素化合物のような窒素源、燐酸カリウム、燐酸すト
リウム、硫酸マグネシウム、硫酸マンガン、硫酸第一鉄
、塩化第二鉄、塩化カルシウム、塩化マンガンのごとき
無機塩類、更に必要に応じてビタミン類、酵母エキス、
コーンステイープリカーのど＾き止器促進物質を添加し
た培地に前記微生物の種菌を接種し、々ｆ気的条件１・
Ｃ培養して菌体を増ダ１ｆＪ　サ＝Ｖ　ル。こノ、１、
）Ｌ１’、　Ｌ　−（ｉ！７．　ラレに菌体培に物、又
は該培芥物から分ＩＭＩＩ　シた１：ｊｉ体の懸濁液も
しくは菌体・ｋ固定化したものに原１ニーｌオレフィン
及び有機ｌ容剤を１７ト加し２空気、酸素、酸素ふ化ガ
スのような酸素含Ｙ１ガスをＩＪ（給し゛ζ反応させる
。

−１−記菌体Ｊ８養物又は菌体の’、”ｔ！ＳＢ液のよ
うな菌体含ａ水性液に対４°る原料オレン・インおよげ
有機溶剤の使用割合は、用いる微生物および自１瓜溶剤
の種類により異なることもあるが、通常、原料オレフィ
ンでは０．１乃至２５νｏｆ／ｖｏ１％、好ましくは０
．５乃至５ｖｏｌ／ｖｏ１％であり、Ｉ−ｆ　ＪＪＭ溶
剤ではｌ乃至２００　ｖｏｌ／νｏｌ　！１６、好まし
くは１０乃至１００ｖｏｌ／ｖｏｌ　％でＣちる。

反応はｐ１１５〜９、好ましくは６〜８の１１１範囲、
反応？ＡＡ度は２０〜５０°Ｃ１好ましくは２５〜４５
°Ｃの温度−（１・〜６１−１間行う。また、反応は通
常品＋［ｉ＝で４１われるが、加圧下で行うことにより
エポキシドの生産性を向上させるごともできろ。）、に
お、反応中に菌体増殖に用いた炭素源、窒素源、更には
その他の成分を適宜添加°Ｊることにより菌体のエポキ
シド生産活性を維持し或いは高める、二とが出来る。

反応は、回分方式又は連続方式のいずれ゛（も実施し得
る。また、原料オレフィンの供給は回分方式の場合、全
量を反応開始時に添加するほか、反応中に連続的に又は
間歇的に供給することもｉＩＪ能である。

上記反応により生成したエポキシドは：Ｌとし゛Ｃ自機
熔剤相に存在し、これを相分離、蒸留、或いは抽出等の
公知の手法を適用して分離、採取する。

つぎに、前記（ロ）の培養による方法は、上記（イ）の
方法における菌体増殖時に原料オレフィン及び有機溶剤
を添加し一段階でエポキシＩ°のイ］。

産を行ない得るものである。この場合、微生物によって
は用いた有機溶剤が菌体生育のための炭素源として消７
１．１される、二ともある。培養条（’ｌ’　（、＋１
１、温度、圧力等）、培五力ｊ＝ｕ及び生成したエポキ
シ１の分ぬ１ｖ採取は＋ｉｉｉ記（・イ）の反応条（Ｉ
Ｉ、反応力ｊ（及Ｑ・分Ｆ）１］、採ＩＩｙ方法が同様
に適用し得る。

発−明の夕↓果一 本発明に従つ゛（、叙上のように炭素数６乃至１０を白
゛Ｊ付〕直５１１１状又は分岐状オレフィンに微生物を
作用さ−Ｉ！／！】とごれらオレフィンのエポキシｌ：
・・、の変換が効率、１、く行なわれるので、該オレフ
ィンから相当゛４るエポキシｌパをＩｒｔ；収率で生産
することがｉＩＪ　ｆｉｕとな、シ。

囚に、本発明によって得られるエポキシドは冒頭で述べ
たような広範囲な用途に供しく３る４用性を自するもの
である。

以上に実施例を示して本発明を更に具体的に説明す゛る
。

実施例１ 菌１本忍濁ｊ夜辺り）ｊ１１製 ノカルディア・コラリ−すＢ−２７６（Ｆｌミ＋ｎ＋−
Ｐ４（１！ｌ１１）の３白金耳を、Ｎ１５Ｇ培地（オキ
ソイｌ１社製ラブレンコパウター１０ｇ、バクテリオロ
ジカルペプトン１０ｇ、グルコース１０ｇ、塩化すｌ−
リウム５ｇに水道水を加え“ζｌβとし、ＩＮ−苛性ソ
　ダ水？ｇ　ｌｌｋでｐｎ　７．５とした後オー１−ク
レープ中で１２０１；、１５分間蒸気殺菌した液体培地
）　１００ｎｌを収容した５００ｍｎ容坂ロフラスコに
接種し、３０℃で４８時間振盪培養（１５０回／分）し
た。培養終了後、遠心３３離で簗菌し、ついでｐＨ８，
０の０．０１Ｍ−燐酸緩ｉ÷ｉ液で１回洗浄し、さらに
もう一度下記に示す反応培地で洗浄したのら、乾燥菌体
濃度とし０３．８ｇ／ｎとなる様に下記の反応培地に再
懸濁して菌体１ｕ濁液とした。

仮ＩＪ１堰： に、ＩＰ国　１．７４ｇ Ｍｇ５Ｏｔ＋　・７１１２０　１　、５０ｇＦｅＳＯ４
・７１１２０　５０ｍｇ 脱イｌン永　１７！ ｐ　Ｉｆは２Ｎ硫酸水溶１ｌｈｔ’　８．０にδｊ１１
整反、１７ｉ＞　ｈ、；−、Ｊ、　Ｑ　Ｌｌ／：　−Ｌ
５　Ｊ：、Ｊ戊ＪＪ　ｃＪｒ−ｉ）ｊＪｉ−反応１−１
（、］、５０（１ｍ　ｐ容１及１−１ソ−ノスコｔこ上
記の、Ｌうにし“Ｃ１１１，１，ＩφＪした菌体懸濁液
２０ｍｎと第１表に示され乙各種原料オレフ・イン０．
１ｍｌと自機ン容剤としてｎづ一トソうカン（炭素数日
）２ｍ／とを収容して宿料した後、３Ｆ＋　’Ｃ０）温
度で２４１１．”１間、１５０回／う）で往ｆｊｊ　Ｉ
Ｗ盪しながら行なった。反症、終了後、１７られた反応
生成物を５（し１１りのコー　チル°Ｃ抽出した抽出物
をカスタ１１フ１グシソ・イにより定頃分１ｊ「シた。

カッ、り１１７１・クランには、１５５ｉの１ｌＩｉＧ
ｓ　（シコニチレンクリ、Ｊ　）Ｉｉ４Ｊ）’／ネ　１
・）をユニボー　Ｉｌｌ　１１（１〜ＨＩＯメツシュに
担持した充填剤を充填した内ｉ￥３ｍｍ長さ２　Ｉｌｌ
のカラムを用い、検出器には・イメン化炎型を１月　い
）こ。

に配分））１の９．−４果は第１表に示゛りとおりであ
゛る。

なお、１１．！シのために、」記１ｙ　Ｌｉ・１、にお
いて菌体懸濁液２（］ｍ＃に右機熔剤とし’（（７）　
ｎう１ツノカンを〆お加せずに、原料オレフィンのめを
１ｍｎづり添加するごとを除いては、同様な手順（反応
を行ない、ｉ′Ｗられた反応生成物について同様にし−
Ｃ分Ｊｌｉ′した結果を併せて第１表に示した。

第１表にのられるように、本発明に、１、す（＋Ｉｉ族
溶剤としての＋１−テトラデカンを存在さＩること６Ｃ
、Ｌリエボ４−シｌの収量を著しく向」−Ｌ／　ｉ！＃
　、ｒ＋。

実施例２ 本例は利用する微生物の種類による王、１ミ４−７１の
収量に与える影響を例示したものである。

舅］榎濁１１ｉｊＺ２ＵＪ司ｌ 微生物としてブレビＡクテリウム・フタニカへＴ（：Ｃ
２１１９Ｇ、）゛レヒハクテリウム・ケ１−グルタミカ
ム　＾ＴＣＣ１，５５８７、コリネバクテリウム・アノ
し・カナム　ＡＴＣＣ２１１９４、コリネバクテリウム
・ノー・イ１−゛ロカーボクラスタス　＾ＴＣＣ１５１
０８をそれぞれ利用して、実施例１に記載したと同様の
手順（菌体懸濁液を調製した。なお、菌体濃度は乾燥菌
体濃度として３〜４ｇ／Ｒになるように調整した。

刀区、星シ」七ンより１営ミ↓トＣ」視力腎」勿−ｑλ
シｉ二ｔｌｉ’−」二記菌体懸濁液の各２０１に対して
原１′ｌ′Ａレノインとしてｌ−オクテン並びに１−プ
レンの各中独をそれぞれ０．１ｍを、および−白１ｍ　
ｌ８刑としてＩ−ヘキサう一セン並ひにｎｌう一ツル・
・ンレンの各単独をそれぞれ２ｍ／を用い′（実施例］
に記載と同様の手順（反応を行ない、ｉｌｌられた生成
物に一ついて同様にう）１月”を行　なリノご。

結果は第２人並ひに第３表に示すとおりである。

なお、実施例２において、上記自機溶剤を存在させない
場合のエポキシド生成量はいＪれの１￥１株を利用した
ときでも０．１ｍｇ以下であった。

実施例３ 本例は使用する有ｔａ溶剤の種類に、Ｌるエポキシドの
収量に与える影響を例示したものである。

釦制■１１榎糺質 実施例１記載の方法と全く同一の方法で菌体懸濁液を調
製した。

反庶振ス夏ま成上４弓ｉｊｂ＝ ２０ｍｍ！の菌体懸濁液に対して原料オレフィンとして
ｌ−オクテンの０．１ｍ７！並びに０．８ｍ／を、自機
溶剤として第４表に表示した種々のものを用いて実施例
１に示したと同様の手順でエポキシ化を行なった。

得られた反応生成物について実施例１と同様乙こして分
析を行なった。結果は第４表に示すとおりである。

なお、比較、′二し′ＣイＩ機溶剤を用いない場合並び
に他の自Ｉ幾溶剤を用しり：場合につい゛ζ−ｌｘ記同
様にＵ２て反応を１１ない、（ＩＩら扛た反応生成物に
つい′（／、ＮＩＩした♀−７果も１ｉ１−ｉて第４表
に示した。

第４表にみられるように、本発明に従って自機溶剤を反
応系に存在させるごとによりエポキシドの生成量を著し
く向上し得る。

出願人　ト１本鉱業株式会社 代理人　宮　１）広　豊 手続補正書 昭和５９年６月４日 ２、発明の名称　微生物を利用してオレフィンからエポ
キシドを製造する方法 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 名　称　日本鉱業株式会社 ４、代理人 住　所　東京都港区東新橋２丁目７番７号新橋国際ビル
５、補正命令の日付　自　発 ８、補正の内容 明細書を下記のように補正する。

Ｉｌｌ　第６頁表中、下から第４欄における「ブレビバ
クテリウム・ブタニカ　＾ＴＣＣ２１１９６Ｊとあるを
［）゛レビバクテリウム・フ゛タニカムへＴＣＣ２１１
９６Ｊに補正する。

（２）　第２２頁第８行に「ブレビバクテリウム・プタ
ニカ」とあるを「ブレビバクテリウム・ブタニカム」に
補正する。

（３）　第２４頁および第２８頁表中゛菌株名”の欄に
「ブレビバクテリウム・ブタニカ　＾ＴＣＣ２１１９６
」とあるを夫々［ブレビバクテリウム・ブタニカム＾Ｔ
ＣＣ２１１９６Ｊに補正する。

（４）　第２８頁表中、“１−オクテンの量（ｍｌり”
の欄における第１１行目にＩＯ，８Ｊとあるを「０．１
」に補正する。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ノカル）−゛・１）′属、プレヒハクテリウム属又は」
   リネハクテリウム属に属するエポキシド生産能をｒ］す
   る微４１−物を、炭素数９乃至１５を自するバシソ・イ
   ン、炭素数１２乃至１８を白するオレン・イン、炭素’
   ＭＩＯ乃至１６を有するハＩ］ゲン化バラーノ・ｒン４
   ５．Ｌび６乃至１５の「Ｉ長の側鎖を右するアルキル・
   入ンセンから成る群から選択される１種もと７＜はそれ
   らの２１！Ｉｆ以上の混合物から成る水車ｌ容性の白゛
   機溶剤の存在下に、炭素数６乃至１０をイ１′」る直鎖
   状又は分岐状オレフィンに灯気的条四Ｆで作用させて該
   メレノインに相当４るＪ−ホキシトを産斗し、得られノ
   こ呈ボ；１−ン１をう！’　！４１１、採取することを
   特徴と−４るオレフィンからエポキシドをＭ　３：１ｉ
   −Ｊるカメ去。