JPS60110297A - 糖類の発酵によりポリオ−ルを工業的規模で製造する方法 - Google Patents
糖類の発酵によりポリオ−ルを工業的規模で製造する方法Info
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- JPS60110297A JPS60110297A JP17421584A JP17421584A JPS60110297A JP S60110297 A JPS60110297 A JP S60110297A JP 17421584 A JP17421584 A JP 17421584A JP 17421584 A JP17421584 A JP 17421584A JP S60110297 A JPS60110297 A JP S60110297A
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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- C12P7/18—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic polyhydric
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はモニリエラ・トメンサ・バール・ポリ＝ ス（
Ｍｏｎｉｌｉｅｌｌａ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ Ｖａｒｉ
ｐｏｌｉｉｎｉｓ）のような糖室容性の菌で糖を好気
性発酵させることによりポリオール、特にエリトリトー
ルおよび／まだはりビトールを工業的規模で製造する方
法に関する。
Ｍｏｎｉｌｉｅｌｌａ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ Ｖａｒｉ
ｐｏｌｉｉｎｉｓ）のような糖室容性の菌で糖を好気
性発酵させることによりポリオール、特にエリトリトー
ルおよび／まだはりビトールを工業的規模で製造する方
法に関する。
酵母様の菌であるモニリエラ・トメントサーバール・ポ
リニスによる適当な糖の好気性発酵は工１１ ）リトー
ルを生産することが知られている。このことは、先ずＧ
−Ｊ、 Ｈａｊｎｙ、 Ｊ、 Ｈ，Ｓｍ１ｔｈおよびＪ
、 Ｃ、ＧａｒｖｅｒによりＡｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒ
ｏｂｉｏｌｏｇｙ １２． ｐ、 ２４０−２４６ （
５月１９６４）に報薯４れた。そして彼等は微生物をト
ルラＩ２ Ａ（Ｔｏｒｕｌａ Ｉ２ Ａ）と命名した。
リニスによる適当な糖の好気性発酵は工１１ ）リトー
ルを生産することが知られている。このことは、先ずＧ
−Ｊ、 Ｈａｊｎｙ、 Ｊ、 Ｈ，Ｓｍ１ｔｈおよびＪ
、 Ｃ、ＧａｒｖｅｒによりＡｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒ
ｏｂｉｏｌｏｇｙ １２． ｐ、 ２４０−２４６ （
５月１９６４）に報薯４れた。そして彼等は微生物をト
ルラＩ２ Ａ（Ｔｏｒｕｌａ Ｉ２ Ａ）と命名した。
後に、Ａｎｔｏｎｉｅ ｖａｎ Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅ
ｋ ８７ 、 ｐ、 １０７−１１８（１９７１）にお
いて、Ｌ、 Ｄｏｏｍｓ、 Ｇ、 Ｌ、 Ｈｅｎｎｃｂ
ｅｒｔおよびＨ，Ｖｅｒａｃｈｔｅｒｔはこの菌ヲモニ
リエラ、トメントサ、バール、ポリニスとして分類し、
そのエリトリトールを止座する能力を確認した。この著
者等は、またこの微生物の完全な形態学的記述をし、こ
れには参考文献が加えられている。更に、彼等は、モニ
リエラは殊に適用した培養条件にしたがい２つの形、す
なわち酵母様の形と糸状菌様の形のもとに存在すること
ができることを認めている。Ｊ：記文献のｐ、 １１０
において、彼等は次のように述べている。
ｋ ８７ 、 ｐ、 １０７−１１８（１９７１）にお
いて、Ｌ、 Ｄｏｏｍｓ、 Ｇ、 Ｌ、 Ｈｅｎｎｃｂ
ｅｒｔおよびＨ，Ｖｅｒａｃｈｔｅｒｔはこの菌ヲモニ
リエラ、トメントサ、バール、ポリニスとして分類し、
そのエリトリトールを止座する能力を確認した。この著
者等は、またこの微生物の完全な形態学的記述をし、こ
れには参考文献が加えられている。更に、彼等は、モニ
リエラは殊に適用した培養条件にしたがい２つの形、す
なわち酵母様の形と糸状菌様の形のもとに存在すること
ができることを認めている。Ｊ：記文献のｐ、 １１０
において、彼等は次のように述べている。
「寒天斜面培養では両方の形がつくられる。静置液体培
地では、豊富な菌糸と、分与胞子より多い分節胞子をも
つ糸状菌様の形が発達する。振盪フラスコ培養では、出
芽および分裂によりつくられる円形、卵形、および方形
の細胞をもつ酵母様の形が優勢であり、菌糸は形成され
ない。」モニ１１エラ、トメントサ、バール、ポリニス
は、オランダ国ＢａａｒｎのＣｅｎｔｒａａｌ Ｂｕｒ
ｅａｕ ｖｏｏｒＳｃｈｉｍｍｅｌｃｕｌｔｕｒｅｓ
（ＣＢＳ ’）よりＣＢＳ ４６１．６７として手に入
れることができ、この菌はまた英国Ｆｅｒｒｙ Ｌａｎ
ｅ。
地では、豊富な菌糸と、分与胞子より多い分節胞子をも
つ糸状菌様の形が発達する。振盪フラスコ培養では、出
芽および分裂によりつくられる円形、卵形、および方形
の細胞をもつ酵母様の形が優勢であり、菌糸は形成され
ない。」モニ１１エラ、トメントサ、バール、ポリニス
は、オランダ国ＢａａｒｎのＣｅｎｔｒａａｌ Ｂｕｒ
ｅａｕ ｖｏｏｒＳｃｈｉｍｍｅｌｃｕｌｔｕｒｅｓ
（ＣＢＳ ’）よりＣＢＳ ４６１．６７として手に入
れることができ、この菌はまた英国Ｆｅｒｒｙ Ｌａｎ
ｅ。
Ｋｅｗ、 Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、 ５ｕｒｒｅｙ ’ＩＷ
９８ＡＦのＣＯ而面ｎｗｅａｌｔｈＭｙｃｏｌｏｇｉｃ
ａｌ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ （１：ｕｌｔｕｒｅ Ｃｏ
Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ（Ｃｃｃ）に番号（ＣＭＩ ｃｅ
）２７１６４８のもとに寄託されており、ここより一般
に手に入れることができる。
９８ＡＦのＣＯ而面ｎｗｅａｌｔｈＭｙｃｏｌｏｇｉｃ
ａｌ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ （１：ｕｌｔｕｒｅ Ｃｏ
Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ（Ｃｃｃ）に番号（ＣＭＩ ｃｅ
）２７１６４８のもとに寄託されており、ここより一般
に手に入れることができる。
モニリエラ６トメントサ・バール会ポリニスを用いる糖
の発酵によねポリオール、特にエリトリトールおよびリ
ビトールを工業的に製造する方法を意図して研究中、本
発明者等は、この微生物の１つの型が工業的使用に特に
適することを見い出し、そしてこの型を得ることのでき
る方法を案出した。
の発酵によねポリオール、特にエリトリトールおよびリ
ビトールを工業的に製造する方法を意図して研究中、本
発明者等は、この微生物の１つの型が工業的使用に特に
適することを見い出し、そしてこの型を得ることのでき
る方法を案出した。
それ故に、本発明は、モニリエラ・トメントサ・バール
・ポリニスによる適当な糖の好気性発酵によりポリオー
ル、特にエリトリトールおよび／またはりビトールを工
業的に製造する方法において、できるだけ高い胞子形成
能力を有する上記モニリエラ微生物の亜株を使用する方
法である。
・ポリニスによる適当な糖の好気性発酵によりポリオー
ル、特にエリトリトールおよび／またはりビトールを工
業的に製造する方法において、できるだけ高い胞子形成
能力を有する上記モニリエラ微生物の亜株を使用する方
法である。
本発明者等は、モニリエラ・トメントサ・バール・ポリ
ニスの胞子を静置培地、例えば寒天上で生長させるとき
、つくられるコロニーは異なった胞子形成能力を示すこ
と、そして異々つだタイプのコロニーはその色によって
検出できることを見い出した。低い胞子形成コロニーは
色において白色であ１つ、一方高い胞子形成コロニーは
黒色である。
ニスの胞子を静置培地、例えば寒天上で生長させるとき
、つくられるコロニーは異なった胞子形成能力を示すこ
と、そして異々つだタイプのコロニーはその色によって
検出できることを見い出した。低い胞子形成コロニーは
色において白色であ１つ、一方高い胞子形成コロニーは
黒色である。
本発明者等は、まだモニリエラ・トメントサの低い胞子
形成コロニー（白色コロニー）が発酵に用いられるとき
、発酵培地中に粘′稠な多糖類が生産されることを見い
出しだ。ぞ°の上、培地の粘度が増加するにしたがって
酸素′の移動割合は減少する。あまわに低い通気条件で
は、モニリエラ・トメントサは糖の一部をエタノールに
変換し、それによねポリオールの収量を減することが１
（ａｊｎｙにより示されている。それ故に、高い粘度の
培養条件はポリオール生産には有利ではないのである。
形成コロニー（白色コロニー）が発酵に用いられるとき
、発酵培地中に粘′稠な多糖類が生産されることを見い
出しだ。ぞ°の上、培地の粘度が増加するにしたがって
酸素′の移動割合は減少する。あまわに低い通気条件で
は、モニリエラ・トメントサは糖の一部をエタノールに
変換し、それによねポリオールの収量を減することが１
（ａｊｎｙにより示されている。それ故に、高い粘度の
培養条件はポリオール生産には有利ではないのである。
その−ヒ、モニリエラ争トメントサ細胞は粘稠な培地か
ら除去するのは困難であｌ′）、ポリオールの回収もま
た大変困難である。培養物が高い胞子形成コロニー（黒
色コロニー）からつくられるとき、大変小量の多糖類が
生産され、より高いポリオールの収量が、結果としてよ
ね低いエタノール生産とともに得られる。本発明方法の
付加的左利点は、黒色胞子は容易に凍結乾燥することが
でき、そして長期間貯蔵することができるということで
ある。
ら除去するのは困難であｌ′）、ポリオールの回収もま
た大変困難である。培養物が高い胞子形成コロニー（黒
色コロニー）からつくられるとき、大変小量の多糖類が
生産され、より高いポリオールの収量が、結果としてよ
ね低いエタノール生産とともに得られる。本発明方法の
付加的左利点は、黒色胞子は容易に凍結乾燥することが
でき、そして長期間貯蔵することができるということで
ある。
本発明方法において使用する最適の胞子形成微生物を得
るためには１．モニリエラ・トメントサ中バール・ポリ
ニスの胞子を適当な培地上で生長させ、ゝ黒色コロニー
”から選択した胞子を新鮮な培地に接種するのに用い、
適当な生長期間−２８℃ないし３２℃の範囲の温度、好
適には約３０℃で、１５日まで、好適には少なくとも７
日である−の後に、新らしい黒色コロニーが形成され、
さらに第２の新鮮な生長用培地へ接種するだめの選択が
行なわれる。好適には少なくとも４回のこのような選択
および生長段階（平板培養）の後に、上記微生物の胞子
形成能力は安定化される。
るためには１．モニリエラ・トメントサ中バール・ポリ
ニスの胞子を適当な培地上で生長させ、ゝ黒色コロニー
”から選択した胞子を新鮮な培地に接種するのに用い、
適当な生長期間−２８℃ないし３２℃の範囲の温度、好
適には約３０℃で、１５日まで、好適には少なくとも７
日である−の後に、新らしい黒色コロニーが形成され、
さらに第２の新鮮な生長用培地へ接種するだめの選択が
行なわれる。好適には少なくとも４回のこのような選択
および生長段階（平板培養）の後に、上記微生物の胞子
形成能力は安定化される。
上記微生物を生長させる培地は、麦芽エキス４％、酵母
エキス２％、寒天２％、残１つは水の混合物であるのが
適当である。
エキス２％、寒天２％、残１つは水の混合物であるのが
適当である。
モニリエラ番トメントサーバール・ポリニスの高い胞子
形成の亜株が選択されたとき、この微生物を、２０％（
乾燥物質）までのデキストロースのような適当な糖、窒
素源（０，５％酵母エキスおよび１％尿素または２％コ
ーンスチープリカーのようかおよび３００ｐｐｍキサン
タンガム（Ｘａｎｔｈａｎ ｇｕｍ）（後記参照）を含
有する溶液に２日ないし４日間培養することにより前培
養物がつくられる。（本明細書の発明の詳細な説明およ
び特許請求の範囲において、特に言明しないかぎわ、％
および部は容量％および容量部である）。
形成の亜株が選択されたとき、この微生物を、２０％（
乾燥物質）までのデキストロースのような適当な糖、窒
素源（０，５％酵母エキスおよび１％尿素または２％コ
ーンスチープリカーのようかおよび３００ｐｐｍキサン
タンガム（Ｘａｎｔｈａｎ ｇｕｍ）（後記参照）を含
有する溶液に２日ないし４日間培養することにより前培
養物がつくられる。（本明細書の発明の詳細な説明およ
び特許請求の範囲において、特に言明しないかぎわ、％
および部は容量％および容量部である）。
この培養および生長期間の後、培養物は発酵方法に使用
するのに適するものとなる。そして発酵方法では、この
培養物が糖および窒素源を含有する培地に接種するのに
用いられる。
するのに適するものとなる。そして発酵方法では、この
培養物が糖および窒素源を含有する培地に接種するのに
用いられる。
本発明方法の所望の生産物はエリトリトールおよび／ま
たはりビトールである。従来の当業界の専問家達は、モ
ニリエラ・トメントサ・バール・ポリニスによる糖の発
酵からはエリトリトールのほかにグリセロールおよびア
ラビトールが生産されることを報告している。本発明方
法にしたがうと、アラビト−ルは生産さＩシないで、エ
リトリトールおよびグリセロールのほかにリビトールが
得られ、これらの３つが形成される唯一のポリオールで
ある。代表的には、発酵により全ポリオールに基づき次
の割合−リビト−ル１％−２０％、グリセロール５％−
４０％、残わがエリトリトールであるーで、リビトール
、グリセロール、およびエリトリトールからなる溶液生
産物が生産される。
たはりビトールである。従来の当業界の専問家達は、モ
ニリエラ・トメントサ・バール・ポリニスによる糖の発
酵からはエリトリトールのほかにグリセロールおよびア
ラビトールが生産されることを報告している。本発明方
法にしたがうと、アラビト−ルは生産さＩシないで、エ
リトリトールおよびグリセロールのほかにリビトールが
得られ、これらの３つが形成される唯一のポリオールで
ある。代表的には、発酵により全ポリオールに基づき次
の割合−リビト−ル１％−２０％、グリセロール５％−
４０％、残わがエリトリトールであるーで、リビトール
、グリセロール、およびエリトリトールからなる溶液生
産物が生産される。
空気は、発酵容器の大きさおよび容器の内容物の攪拌の
程度に応する割合で発酵槽に供給されるが、一般に空気
０．１Ａ’々いし１．５１Ｌ／発酵培地で７分の範囲で
ある。例えば２１の容器では、空気の流速は４００ ｒ
ｐｍ ｈいし８００ ｒｐｍの攪拌機の速度で１１ＡＺ
分であるが、６００１の容器では、その流速は空気の流
れによってつくられる攪拌以外の攪拌なしで０．５１”
１１いし１．０１７１７分であった。発酵は３と６の間
。
程度に応する割合で発酵槽に供給されるが、一般に空気
０．１Ａ’々いし１．５１Ｌ／発酵培地で７分の範囲で
ある。例えば２１の容器では、空気の流速は４００ ｒ
ｐｍ ｈいし８００ ｒｐｍの攪拌機の速度で１１ＡＺ
分であるが、６００１の容器では、その流速は空気の流
れによってつくられる攪拌以外の攪拌なしで０．５１”
１１いし１．０１７１７分であった。発酵は３と６の間
。
好適には４ないし５の出発ｐＨで２７℃と３２℃の間の
温度で行なわれる。発酵は糖が消費されたときに停止さ
れる。培地に含有される糖の量は２０％と４５％の間、
好適には３０％力いし３５％である。
温度で行なわれる。発酵は糖が消費されたときに停止さ
れる。培地に含有される糖の量は２０％と４５％の間、
好適には３０％力いし３５％である。
培養および発酵の両方に用いるのに適する糖は、デキス
トロース（クルコース）、シュクロース、フラクトース
、まだはマルトースである。
トロース（クルコース）、シュクロース、フラクトース
、まだはマルトースである。
従来の方法では、Ｈａｊｎｙにより記載されているよう
に、種々の窒素源、例えば酵母エキス、尿素、コーンス
チープリカー、麦芽、最終糖蜜、麦芽エキス、およびジ
スチラーズ・ドライ・ソルブルが発酵に用いられてい、
る。本発明方法では、０．５％酵母エキス＋０．１％尿
素で、あるいは２％コーンスチープリカー＋０．０２％
尿素で良い結果が得られる。
に、種々の窒素源、例えば酵母エキス、尿素、コーンス
チープリカー、麦芽、最終糖蜜、麦芽エキス、およびジ
スチラーズ・ドライ・ソルブルが発酵に用いられてい、
る。本発明方法では、０．５％酵母エキス＋０．１％尿
素で、あるいは２％コーンスチープリカー＋０．０２％
尿素で良い結果が得られる。
出発ｐＨは約３．０と６．０の間にあるべきであわ、こ
のｐＩ−Ｉは発酵中に約２．０ないし３゜５に減少され
る。
のｐＩ−Ｉは発酵中に約２．０ないし３゜５に減少され
る。
Ｌ、 Ｈａｎｓｓｅｎｓ、 Ａ、 Ｖａｎ Ｒｅｇｅｎ
ｍｏｒｔｅｌ、およびＨ，ＶｅｒａｃｈｔｅｒζＡｐｐ
ｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、 Ｖｏｉ、 ２
４． Ｎｏ、 ５． ｐ、 ８３１−８３３（１１月１
９７２）によると、異なる一定ｐＨで行なわれた実験呈
での発酵は全ポリオールおよび工１１ ） ＩＩ トー
ルの収量に実質的々差異を生ずると論うことである。本
発明者等は、より人−きな規模の発酵（２４の発酵槽ま
だはそれ以上の発酵槽）を実施するとき、全ポリオール
および工１１ ） ＩＪ トールの収量は４．０々いし
６．０の範囲内の出発ｐＨに対してはさほど敏感でない
ことを見い出した。汚染の問題を避けるため、または最
小にするためには、４ないし５の出発ｐＨが好ましい。
ｍｏｒｔｅｌ、およびＨ，ＶｅｒａｃｈｔｅｒζＡｐｐ
ｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、 Ｖｏｉ、 ２
４． Ｎｏ、 ５． ｐ、 ８３１−８３３（１１月１
９７２）によると、異なる一定ｐＨで行なわれた実験呈
での発酵は全ポリオールおよび工１１ ） ＩＩ トー
ルの収量に実質的々差異を生ずると論うことである。本
発明者等は、より人−きな規模の発酵（２４の発酵槽ま
だはそれ以上の発酵槽）を実施するとき、全ポリオール
および工１１ ） ＩＪ トールの収量は４．０々いし
６．０の範囲内の出発ｐＨに対してはさほど敏感でない
ことを見い出した。汚染の問題を避けるため、または最
小にするためには、４ないし５の出発ｐＨが好ましい。
発酵は糖がすべて消費されるまで行なわれ（発酵時間は
使用する糖の量により４日と１２日の間である）、その
後、培養は停止され、細胞が例えば遠心分離によね培養
ブロスから除去される。細胞を含まない培養ブロスは、
エリトリ トール、リビトール、およびグリセロールを
含有し、それ自体で、精製しく例えば限外濾過および脱
鉱物によね）、または精製することなく、若水の用途に
、例えばポリマー主菜に用いられることができる。精製
した培養ブロスは また６０％ないし８０％溶解した固
体まで製綿されることができ、そしテコれから例えばＪ
、Ｍ、Ｒｏｘｂｕｒｇ、 Ｊ、 Ｆ、 Ｔ。
使用する糖の量により４日と１２日の間である）、その
後、培養は停止され、細胞が例えば遠心分離によね培養
ブロスから除去される。細胞を含まない培養ブロスは、
エリトリ トール、リビトール、およびグリセロールを
含有し、それ自体で、精製しく例えば限外濾過および脱
鉱物によね）、または精製することなく、若水の用途に
、例えばポリマー主菜に用いられることができる。精製
した培養ブロスは また６０％ないし８０％溶解した固
体まで製綿されることができ、そしテコれから例えばＪ
、Ｍ、Ｒｏｘｂｕｒｇ、 Ｊ、 Ｆ、 Ｔ。
５ｐｅｎｃｅｒ、およびＨ，Ｒ，５ａｌｌｅｎｓにより
Ｃａｎａｄｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ Ｔｅｃｂｎｏ
ｌｏｇｙ、 Ｖｏｌ、 ８４． ｐ、 ２４８−２５８
（１９５６）に記載された技術により、エリトリトール
が結晶化されることができる。工１］ １． ＋１ ）
−ルの結晶の回収後に残存する液−この液は１だ（結晶
化されなかった）エリトリトール、リビトール、および
グリセロールの混合物であるーは、また適当な処理後に
用いられることができる。
Ｃａｎａｄｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ Ｔｅｃｂｎｏ
ｌｏｇｙ、 Ｖｏｌ、 ８４． ｐ、 ２４８−２５８
（１９５６）に記載された技術により、エリトリトール
が結晶化されることができる。工１］ １． ＋１ ）
−ルの結晶の回収後に残存する液−この液は１だ（結晶
化されなかった）エリトリトール、リビトール、および
グリセロールの混合物であるーは、また適当な処理後に
用いられることができる。
本発明方法は、発酵培地中にモニリエラ・トメントサ・
バール・ポリニスの細胞を保持する性質を有する多糖類
キサンタンガム（Ｘａｎｔｈａｎ ｇｕ＋ｎ’）を存在
させ、発酵中に生ずる泡を媒介とする細胞の損失を減少
させることにより、有利に実施することができる。好適
には１００ ｐｐｍないし５００ ｐｐｍのキサンタン
ガムを存在させることができ、約ａｏｏ ｐｐｍの存在
で優れた結果が得られる。発酵培地中に細胞を保持する
のに必要であるよね多い（すなわち、約５００ｐｐｍよ
ｈ多い）ガムを用いることもできるが、このような過剰
量は不経済である。
バール・ポリニスの細胞を保持する性質を有する多糖類
キサンタンガム（Ｘａｎｔｈａｎ ｇｕ＋ｎ’）を存在
させ、発酵中に生ずる泡を媒介とする細胞の損失を減少
させることにより、有利に実施することができる。好適
には１００ ｐｐｍないし５００ ｐｐｍのキサンタン
ガムを存在させることができ、約ａｏｏ ｐｐｍの存在
で優れた結果が得られる。発酵培地中に細胞を保持する
のに必要であるよね多い（すなわち、約５００ｐｐｍよ
ｈ多い）ガムを用いることもできるが、このような過剰
量は不経済である。
全面的々方法は、また従来の消泡剤を発酵培地に含有さ
せることによね改良される。合成消泡剤（例えばシリコ
ンタイプまだは脂肪族アルコール）は天然の生成物（例
えばラード油）よりも好適である。なぜならば、合成消
泡剤はずっと小量で使用することができ、そして最終の
発酵ブロスはそれを除去するだめの広範な精製を必要と
しないからである。市販の大抵の合成消泡剤は２００−
３００ ｐｐｍ ｉたは４ＱＱｐｐｍを用いれば、最適
の泡制御に対し十分である。
せることによね改良される。合成消泡剤（例えばシリコ
ンタイプまだは脂肪族アルコール）は天然の生成物（例
えばラード油）よりも好適である。なぜならば、合成消
泡剤はずっと小量で使用することができ、そして最終の
発酵ブロスはそれを除去するだめの広範な精製を必要と
しないからである。市販の大抵の合成消泡剤は２００−
３００ ｐｐｍ ｉたは４ＱＱｐｐｍを用いれば、最適
の泡制御に対し十分である。
次の例は本発明の実施を例示するだめのものである。
例
（ａ）胞子の選択
モニリエラ・トメントサ・バール・ポリニスの胞子が次
の培地： 麦芽エキス ４％ 酵母エキス ２％ 寒天 ２％ を入れたべ） １１皿上に置かれた。
の培地： 麦芽エキス ４％ 酵母エキス ２％ 寒天 ２％ を入れたべ） １１皿上に置かれた。
とのベトリ皿は３０℃に７日間保持された。異なる胞子
形成能力を示すコロニーがコロニーの色で検出された。
形成能力を示すコロニーがコロニーの色で検出された。
低込胞子形成コロニーは白色であり、一方高い胞子形成
コロニーは黒色であった。黒色コロニーからの胞子を、
同じ培地を入れた新らしいベト１７皿に接種するのに用
いた。
コロニーは黒色であった。黒色コロニーからの胞子を、
同じ培地を入れた新らしいベト１７皿に接種するのに用
いた。
７日後に新らしい黒色コロニーが選択され、そして新ら
しい接種に用いられた。４回の連続的なゝ平板培養”の
後に、胞子形成能力は安定化された。
しい接種に用いられた。４回の連続的なゝ平板培養”の
後に、胞子形成能力は安定化された。
（ｂ）接種用培養物の調製
２０％デキストロース、０．５％酵母エキス、０．１％
尿素、および３００ ｐｐｍキサンタンガムより々る培
地５０ｍ１ヲ入ｈ だ５００ｍ１のエルレンマイヤーフ
ラスコに、上記（ａ’）からのコロニーが接種され、出
発ｐＨ５、温度３０℃で１００振動／分の往復攪拌のも
とに、３日ないし４日間培養が行なわれた。
尿素、および３００ ｐｐｍキサンタンガムより々る培
地５０ｍ１ヲ入ｈ だ５００ｍ１のエルレンマイヤーフ
ラスコに、上記（ａ’）からのコロニーが接種され、出
発ｐＨ５、温度３０℃で１００振動／分の往復攪拌のも
とに、３日ないし４日間培養が行なわれた。
例１
豆様の比較
高い胞子形成能力を示す黒色の豆様が上記（ａ）にした
がって選択された。同様な方法で、低い胞子形成能力を
示す白色の亜種がまた選択され、そして同様な技術で安
定な豆様が得られるまで培養された。２系列の実験（４
つの黒色および４つの白色゛）に卦いて、両方の亜種が
、３２％デキストロース、０．５％酵母エキス、および
０．１％尿素よねなる培地を入れた振盪エルシンマイヤ
ーフラスコ中で比較された。上記フラスコは７日間培養
され、ついで両系列の各メンバーが分析され、そしてま
た新らしい発酵培地に接種するのに用いられた。この方
法は６回くｂ返され、６つの連続的セントの結果が得ら
れた。この連続の各セントにおける４つの結果が平均さ
れた。これらの結果は次表に示すとおりである。
がって選択された。同様な方法で、低い胞子形成能力を
示す白色の亜種がまた選択され、そして同様な技術で安
定な豆様が得られるまで培養された。２系列の実験（４
つの黒色および４つの白色゛）に卦いて、両方の亜種が
、３２％デキストロース、０．５％酵母エキス、および
０．１％尿素よねなる培地を入れた振盪エルシンマイヤ
ーフラスコ中で比較された。上記フラスコは７日間培養
され、ついで両系列の各メンバーが分析され、そしてま
た新らしい発酵培地に接種するのに用いられた。この方
法は６回くｂ返され、６つの連続的セントの結果が得ら
れた。この連続の各セントにおける４つの結果が平均さ
れた。これらの結果は次表に示すとおりである。
発酵方法
例２
３２％デキストロース、２％コーンスチープリ力＝（５
０％溶解した固体）、０．０２％尿素、８００ ｐｐｍ
ＳＡＧ ４７１消泡剤（ユニオン・カーバイドからの
ジメチルボ＋７シロキサン）、８００ ｐｐｍキサンタ
ンガムよねなる培ｔＪＪＬ１．５Ａ！を入れた２１の発
酵槽に接種用培養物が接種された。空気の流速は１１空
気／発酵培地Ｖ分で羽根車の速度は７４０ ｒｐｍであ
った。発酵は１１日間行なわれ、この期間の後に発酵培
地のエリトリトール収量は１１％であり、全ポリオール
含量は１５％であることが認められた。平均の毎日のデ
キス・トｂ−ス消費はｓｏｇ／１１／日であった。
０％溶解した固体）、０．０２％尿素、８００ ｐｐｍ
ＳＡＧ ４７１消泡剤（ユニオン・カーバイドからの
ジメチルボ＋７シロキサン）、８００ ｐｐｍキサンタ
ンガムよねなる培ｔＪＪＬ１．５Ａ！を入れた２１の発
酵槽に接種用培養物が接種された。空気の流速は１１空
気／発酵培地Ｖ分で羽根車の速度は７４０ ｒｐｍであ
った。発酵は１１日間行なわれ、この期間の後に発酵培
地のエリトリトール収量は１１％であり、全ポリオール
含量は１５％であることが認められた。平均の毎日のデ
キス・トｂ−ス消費はｓｏｇ／１１／日であった。
例８
３２％デキストロース、０．５％綽母エキス、 ０．１
％尿９７−、 ＢＯＯｐｐｍ＊サンタンガム、および８
００ ｐｐｍ消泡剤５ＡＧ４７１より々る培地４５０ｊ
Ｊを入れた６００Ｊの塔式発＃、槽に５％の接種用培養
物が接種された。出発ｐＨは５であり、塔式発酵槽を通
しての空気の流速は分あたわ２２５１であった。１８日
後に、最終の培養プロスは１０．８％エリトリトール、
５．６％グリセロール、１．７％１１ビトール、および
０．８％デキストロースを含有した。エリトリトール収
量は消費したデキストロースの８４％であわ、全ポリオ
ールの収量は消費したデキストロースの５６％であった
。
％尿９７−、 ＢＯＯｐｐｍ＊サンタンガム、および８
００ ｐｐｍ消泡剤５ＡＧ４７１より々る培地４５０ｊ
Ｊを入れた６００Ｊの塔式発＃、槽に５％の接種用培養
物が接種された。出発ｐＨは５であり、塔式発酵槽を通
しての空気の流速は分あたわ２２５１であった。１８日
後に、最終の培養プロスは１０．８％エリトリトール、
５．６％グリセロール、１．７％１１ビトール、および
０．８％デキストロースを含有した。エリトリトール収
量は消費したデキストロースの８４％であわ、全ポリオ
ールの収量は消費したデキストロースの５６％であった
。
代表的々回収操作にお騒て、細胞は遠心分離により除去
され、培地は限外濾過により清澄にされ、そしてイオン
交換体で精製された。この無色のブロスは７０％溶解し
た固体まで濃縮され、この液体から工ＩＪ ）リトール
が次の手段で結晶化された。温度が６５℃にもたらされ
、ついで時間あたわ２℃の割合で冷却されて約室温まで
にされた。濾過により結晶が回収され、そしてエタノー
ルで１度洗浄された。代表的な結晶収量は７４％で、残
存する液体の組成は工１１ ） ＩＪ ） −ル１３２
ｇ／ｌ、グリセロール１５２ｇ／ｌ、リビトール７９ｇ
／ｌであった。一般に、工ＩＪ ）リトールの結晶化後
に残留する液体の組成は一１全ポリオールに基づキ次の
割合−リビトール５％−３０％、グリセロール３０％−
６０％、残わはエリトリトールである−で、リビトール
、グリセロール、およびエリトリ トールを含有する。
され、培地は限外濾過により清澄にされ、そしてイオン
交換体で精製された。この無色のブロスは７０％溶解し
た固体まで濃縮され、この液体から工ＩＪ ）リトール
が次の手段で結晶化された。温度が６５℃にもたらされ
、ついで時間あたわ２℃の割合で冷却されて約室温まで
にされた。濾過により結晶が回収され、そしてエタノー
ルで１度洗浄された。代表的な結晶収量は７４％で、残
存する液体の組成は工１１ ） ＩＪ ） −ル１３２
ｇ／ｌ、グリセロール１５２ｇ／ｌ、リビトール７９ｇ
／ｌであった。一般に、工ＩＪ ）リトールの結晶化後
に残留する液体の組成は一１全ポリオールに基づキ次の
割合−リビトール５％−３０％、グリセロール３０％−
６０％、残わはエリトリトールである−で、リビトール
、グリセロール、およびエリトリ トールを含有する。
（これらの％は重量／重量である）。
代理人 江 崎 光 好
代理人 江 崎 光 史
第１頁の続き
優先権主張 ６１９Ｅ！５Ｆ−ｔ ｏ月１１日０イギリ
ス（ＧＢ壇田２０発 明 者 ルネ、ルイス、ミニョ
ベルギー国、ケセレレ
ス（ＧＢ壇田２０発 明 者 ルネ、ルイス、ミニョ
ベルギー国、ケセレレ
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）モニリエラ・トメントサ・バール・ポリニス（Ｍ
ｏｎｉｌｉｅｌｌａ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ ｖａｒ、
ｐｏｌｌｉｎｉｓ’）による適当々糖の好気性発酵によ
りポリオール、特にエリトリトールおよび／またはりビ
トールを工業的に製造する方法において、できるだけ高
い胞子形成能力を有する上記モニリエラ微生物の亜株を
用いることを特徴とする方法。 （２）亜株が、モニリエラ・トメントサ・バール・ポリ
ニスの胞子を静置培地上で培養し、高い胞子形成能力を
有するものとして黒色であるコロニーに発育するコロニ
ーから選択されることを特徴とする特許請求の範囲第１
項記載の方法。 （３）選択された黒色コロニーが新らしい培地に□接種
するのに用いられ、生長するコロニーからさらに黒色コ
ロニーの選択が行なわれる特許請求の範囲第２項記載の
方法。 （４）選択および生長工程が少なくとも４回くり返され
る特許請求の範囲第３項記載の方法。 （５）空気がｏ、１１１ｉ発酵培地ｌ／分と１．５ＩＶ
発酵培地ｌ／分の間の流速で発酵に対し供給されること
を特徴とする特許請求の範囲第１項々いし第４項のいず
れかに記載の方法。 （６）糖がデキストロースであることを特徴とする特許
請求の範囲第１項ないし第５項のいずれかに記載の方°
法。 （７）発酵の初めに糖が２０％と４５％の間の量におい
て発酵ブロス中に存在することを特徴とする特許請求の
範囲第１項ないし第６項のいずれかに記載の方法。 （８）発酵の初めにｐＨが３と６の間、好適には４と５
の間に調整されることを特徴とする特許請求の範囲第１
項ないし第７項のいずれかに記載の方法。 （９）キサンタンガ−ＩＡ （Ｘａｎｔｈａｎ ｇｕｍ
’）が発酵培地のｌＱＱｐｐｍと５００ｐｐｍの間の量
において存在することを特徴とする特許請求の範囲第１
項ないし第８項のいずれかに記載の方法。 （１０）通常の消泡剤がまた発酵に対し添加されること
を特徴とする特許請求の範囲第１項々いし第９項のいず
れかに記載の方法。 （１１’）モニリエラ・トメントサ・バール・ポリニス
で糖を発酵させ、プロスから細胞を除去し、場合により
プロスを精製することにより得られた、細胞を含まない
、ポリオール含有培養プロスであって、含有されるポリ
オールが、全ポリオールに基づき次の割合−リビトール
１％−２０％、グリセロール５％−４０％、残すがエリ
トリ トールである−で、 リビトール、グリセロー
ル、およびエリトリトールだけよりなることを特徴とす
る培養プロス。 （１２）モニリエラ０トメントサーバール・ポリニスで
糖を発酵させてエリトＩＪ ）−ルに富むポリオール混
合物を形成させ、細胞を除去し、プロスを精製し、濃縮
し、エリトリトールを結晶化し、それよｈ工ｌ ト１１
）−ルの結晶全除去することによね得られた、細胞を
含ま々い、ポリオール含有培養プロスであって、結晶化
後の液体中に含まれるポリオールが、全ポリオールに基
ツき次の割合−リビトール５％−３０％、グリセロール
３０％−６０％、残わがエリ トリ トールであるーで
、 リ ビトール、グリセロール、およびエリトリトー
ルよりなることを特徴とする培養プロス。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB838322750A GB8322750D0 (en) | 1983-08-24 | 1983-08-24 | Production of polyols |
| GB8322750 | 1983-10-11 | ||
| GB838327191A GB8327191D0 (en) | 1983-10-11 | 1983-10-11 | Production of polyols by fermentation of sugars |
| GB8327191 | 1983-10-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60110297A true JPS60110297A (ja) | 1985-06-15 |
| JPH0630593B2 JPH0630593B2 (ja) | 1994-04-27 |
Family
ID=26286790
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59174215A Expired - Lifetime JPH0630593B2 (ja) | 1983-08-24 | 1984-08-23 | 糖類の発酵によりポリオ−ルを工業的規模で製造する方法 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0136805B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0630593B2 (ja) |
| AR (1) | AR246307A1 (ja) |
| BR (1) | BR8404194A (ja) |
| DE (1) | DE3485152D1 (ja) |
| DK (1) | DK402684A (ja) |
| ES (1) | ES8603575A1 (ja) |
| FI (1) | FI85502C (ja) |
| MX (1) | MX7683E (ja) |
| YU (1) | YU45648B (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0304915A1 (en) | 1987-08-25 | 1989-03-01 | Mitsubishi Kasei Corporation | Compression-moldet meso-erythritol products. |
| JP2001197896A (ja) * | 1999-12-10 | 2001-07-24 | Cerestar Holding Bv | エリスリトール含有培地からのエリスリトールの産生及び回収方法 |
| JP2010142406A (ja) * | 2008-12-18 | 2010-07-01 | Akira Tomioka | 配達物受け箱 |
Families Citing this family (7)
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|---|---|---|---|---|
| US4939091A (en) * | 1986-09-09 | 1990-07-03 | Director Of National Food Research Institute, Ministry Of Agriculture, Forestry And Fisheries | Novel auerobasidium sp. microorganisms, method for obtaining the same and method for preparing erythritol with the same |
| JPH0734749B2 (ja) * | 1988-02-03 | 1995-04-19 | 日本碍子株式会社 | エリスリトールの製造方法 |
| EP0770683A1 (en) * | 1995-10-04 | 1997-05-02 | Mitsubishi Chemical Corporation | Method for producing erythritol |
| JP3423842B2 (ja) * | 1996-01-19 | 2003-07-07 | 日研化学株式会社 | 変異株及び該変異株又は親株を用いるエリスリトールの製造方法 |
| DE69720379T2 (de) * | 1996-12-02 | 2004-02-12 | Mitsubishi Chemical Corp. | Verfahren zur Herstellung von Erythritol |
| JP3890744B2 (ja) | 1998-05-27 | 2007-03-07 | 日本錬水株式会社 | グルコースを出発原料としたｌ−リボースの製造方法 |
| WO2015042114A1 (en) * | 2013-09-18 | 2015-03-26 | Novogy, Inc. | Fermentation process with distinct growth and production stages |
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-
1984
- 1984-08-21 AR AR29765184A patent/AR246307A1/es active
- 1984-08-21 MX MX100084U patent/MX7683E/es unknown
- 1984-08-22 YU YU144284A patent/YU45648B/sh unknown
- 1984-08-22 BR BR8404194A patent/BR8404194A/pt not_active IP Right Cessation
- 1984-08-22 DE DE8484305750T patent/DE3485152D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1984-08-22 FI FI843312A patent/FI85502C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-08-22 EP EP19840305750 patent/EP0136805B1/en not_active Expired
- 1984-08-23 JP JP59174215A patent/JPH0630593B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1984-08-23 ES ES535360A patent/ES8603575A1/es not_active Expired
- 1984-08-23 DK DK402684A patent/DK402684A/da not_active Application Discontinuation
Patent Citations (3)
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0630593B2 (ja) | 1994-04-27 |
| MX7683E (es) | 1990-08-09 |
| YU144284A (en) | 1987-02-28 |
| EP0136805A3 (en) | 1987-04-15 |
| EP0136805B1 (en) | 1991-10-09 |
| FI85502B (fi) | 1992-01-15 |
| ES535360A0 (es) | 1985-12-16 |
| BR8404194A (pt) | 1985-07-23 |
| AR246307A1 (es) | 1994-07-29 |
| FI85502C (fi) | 1992-04-27 |
| DK402684D0 (da) | 1984-08-23 |
| DK402684A (da) | 1985-02-25 |
| EP0136805A2 (en) | 1985-04-10 |
| ES8603575A1 (es) | 1985-12-16 |
| DE3485152D1 (de) | 1991-11-14 |
| FI843312A0 (fi) | 1984-08-22 |
| YU45648B (sh) | 1992-07-20 |
| FI843312A (fi) | 1985-02-25 |
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