JPS5953837B2 - 高度好熱菌に由来する新規プラスミド - Google Patents
高度好熱菌に由来する新規プラスミドInfo
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- JPS5953837B2 JPS5953837B2 JP57189525A JP18952582A JPS5953837B2 JP S5953837 B2 JPS5953837 B2 JP S5953837B2 JP 57189525 A JP57189525 A JP 57189525A JP 18952582 A JP18952582 A JP 18952582A JP S5953837 B2 JPS5953837 B2 JP S5953837B2
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- JP
- Japan
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- plasmid
- thermophilic bacteria
- dna
- plasmid derived
- bacteria
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は高度好熱菌を宿主とする組換えＤＮＡ実験のベ
クターとして有用な新規なプラスミドに関するものであ
り、より詳しくはその分子量が約３．１メカ゛ダル１〜
であり、図に示される制限酵素開裂地図により特徴づけ
られる新規なプラスミドに関するものである。
クターとして有用な新規なプラスミドに関するものであ
り、より詳しくはその分子量が約３．１メカ゛ダル１〜
であり、図に示される制限酵素開裂地図により特徴づけ
られる新規なプラスミドに関するものである。
従来、組換えＤＮＡ実験は主として大腸菌を宿主とする
系で広く研究がおこなわれインシュリン、インターフェ
ロン、ヒト成長ホルモン等が大腸菌で量産されるなど大
きな成果を挙げている。
系で広く研究がおこなわれインシュリン、インターフェ
ロン、ヒト成長ホルモン等が大腸菌で量産されるなど大
きな成果を挙げている。
大腸菌の宿主・ベクター系はほは゛完成されており、ま
た大腸菌以外にも酵母、枯草菌などで宿主・ベクター系
が開発され応用への道が検討されつつある。
た大腸菌以外にも酵母、枯草菌などで宿主・ベクター系
が開発され応用への道が検討されつつある。
しかし、上記の菌はいずれも生育温度が３０℃〜３７℃
の中温菌である点に問題がある。
の中温菌である点に問題がある。
一方、好熱性細菌は、生育上限温度が５５℃〜７５℃に
ある中等度好熱菌と、生育上限温度が７５℃以上である
高度好熱菌とに大別されるが、いずれについても、その
有する酵素、生体成分が耐熱性、耐溶媒性に優れている
事が知られており、とりわけ好熱菌由来の耐熱性酵素及
び耐熱性生体機能のバイオリアクター等の工業プロセス
への応用という点から注目を集めている。
ある中等度好熱菌と、生育上限温度が７５℃以上である
高度好熱菌とに大別されるが、いずれについても、その
有する酵素、生体成分が耐熱性、耐溶媒性に優れている
事が知られており、とりわけ好熱菌由来の耐熱性酵素及
び耐熱性生体機能のバイオリアクター等の工業プロセス
への応用という点から注目を集めている。
従って、好熱性細菌の育種が重要と考えられるが、その
為の一つの、しかも有力な手段と考えられる好熱性細菌
の宿主・ベクター系の開発研究、とりわけ高度好熱菌の
宿主・ベクター系の開発研究は、これまで全く行なわれ
ていない。
為の一つの、しかも有力な手段と考えられる好熱性細菌
の宿主・ベクター系の開発研究、とりわけ高度好熱菌の
宿主・ベクター系の開発研究は、これまで全く行なわれ
ていない。
しかも、ベクターの開発研究の基礎となるべきプラスミ
ドＤＮＡの検索という点についても、高度好熱菌を材料
とした研究は以下の２報しか知られていない。
ドＤＮＡの検索という点についても、高度好熱菌を材料
とした研究は以下の２報しか知られていない。
（１） 高度好熱菌よりの染色体外ＤＮＡの分離ヒシ
ヌマ、Ｆｏ、タナ力、Ｔ、アンド サカグチ、Ｋ、Ｊ、
Ｇｅｎ０Ｍ１ｃｒｏｂ、 、 １０４ 、１９３−１９
９（１９７８） （２）サーマス・サーモフィルスから単離されたプラス
ミド（ｐＴＴｌ）の物理的性状 エベルハード、Ｍ、 Ｄ、、バスクエズ、Ｃ０、バレン
ズエラ、Ｐｌ、ビキュナ、Ｒ，アンド ユデレヒック、
Ａ、Ｐｌａｓｍｉｄ、 ６ 、 １−６ （１９８
１）上記２報に記載されているプラスミドは、いずれも
その性質が不明ないわゆるクリプテイック・プラスミド
であり、またそれらの分子量も６メガダルトン程度とや
や大きい。
ヌマ、Ｆｏ、タナ力、Ｔ、アンド サカグチ、Ｋ、Ｊ、
Ｇｅｎ０Ｍ１ｃｒｏｂ、 、 １０４ 、１９３−１９
９（１９７８） （２）サーマス・サーモフィルスから単離されたプラス
ミド（ｐＴＴｌ）の物理的性状 エベルハード、Ｍ、 Ｄ、、バスクエズ、Ｃ０、バレン
ズエラ、Ｐｌ、ビキュナ、Ｒ，アンド ユデレヒック、
Ａ、Ｐｌａｓｍｉｄ、 ６ 、 １−６ （１９８
１）上記２報に記載されているプラスミドは、いずれも
その性質が不明ないわゆるクリプテイック・プラスミド
であり、またそれらの分子量も６メガダルトン程度とや
や大きい。
従って、このままの形でベクターとして利用する、或い
はこれらを素材としてベクター開発を行う事には、あま
りに困難が大きいものと考えられる。
はこれらを素材としてベクター開発を行う事には、あま
りに困難が大きいものと考えられる。
そこで、本発明者らは、高度好熱菌より、選択マーカー
（そのプラスミドが宿主内に存在していることを示すマ
ーカー）を有し、しかも分子量の小さいプラスミドの検
索を行った。
（そのプラスミドが宿主内に存在していることを示すマ
ーカー）を有し、しかも分子量の小さいプラスミドの検
索を行った。
その結果ストレプトマイシン耐性を示したサーマス・フ
ラバスから分子量約３．１メガダルトンのプラスミドを
単離する事に成功した。
ラバスから分子量約３．１メガダルトンのプラスミドを
単離する事に成功した。
このプラスミドは、前記の制限酵素開裂地図に示される
如く、分子量が小さくしかも数種の制限酵素による切断
点を特異的に有している（以下、本プラスミドをｐＮＨ
３２１１と略称する）。
如く、分子量が小さくしかも数種の制限酵素による切断
点を特異的に有している（以下、本プラスミドをｐＮＨ
３２１１と略称する）。
なお、図に示されている制限酵素の略称は次のとおりで
ある。
ある。
Ｘｂａ Ｉはキサントモナス・バドリイ由来の酵素、Ａ
ｃｃ Ｉはアシネトバクタ−・カルコアセティカス由来
の酵素、Ｋｐｎ Ｉはクレブシェラ・ニューモニア由来
の酵素、Ｈｉｎｃ ＩＩはハエモフイルス・インフルエ
ンザ由来の酵素を示す。
ｃｃ Ｉはアシネトバクタ−・カルコアセティカス由来
の酵素、Ｋｐｎ Ｉはクレブシェラ・ニューモニア由来
の酵素、Ｈｉｎｃ ＩＩはハエモフイルス・インフルエ
ンザ由来の酵素を示す。
以下、これまでに報告されているサーマス属紐菌、即ち
高度好熱菌由来のプラスミドとの相違、壱を表に示す。
高度好熱菌由来のプラスミドとの相違、壱を表に示す。
表から明らかなように、ｐＮＨ５２１１は既知のプラス
ミドに較べ、分子量、制限酵素による切断パターンが明
らかに異なっており、新規なプラスミドであることが認
められる。
ミドに較べ、分子量、制限酵素による切断パターンが明
らかに異なっており、新規なプラスミドであることが認
められる。
プラスミドＤＮＡがベクターたり得る為には、そのプラ
スミドが宿主内での自律的増殖能、及び選択マーカー（
そのプラスミドが宿主内に存在していることを示すマー
カー）を有していることが必須である。
スミドが宿主内での自律的増殖能、及び選択マーカー（
そのプラスミドが宿主内に存在していることを示すマー
カー）を有していることが必須である。
しかし、高度好熱菌の様に、その生育環境が栄養源に乏
しくしかも抗生物質が存在しない様な温泉である菌につ
いて考えた場合、薬剤耐性遺伝子等を有するプラスミド
を得る事は容易ではない。
しくしかも抗生物質が存在しない様な温泉である菌につ
いて考えた場合、薬剤耐性遺伝子等を有するプラスミド
を得る事は容易ではない。
従って、性質が不明のいわゆるクリプテイック・プラス
ミドに宿主染色体由来のマーカーを賦与するという方式
でベクター開発を行わなければならないであろう。
ミドに宿主染色体由来のマーカーを賦与するという方式
でベクター開発を行わなければならないであろう。
その際にｐＮＨ３２１１を利用すれば、極めて便利であ
るものと考えられる。
るものと考えられる。
何故ならば、第１にｐＮＨ８２１１は高度好熱菌で複製
が可能なプラスミドであるからであり、第２には、他の
高度好熱菌由来の既知のクリプテイック・プラスミドに
比べて小さい分子量を有するという点から、本プラスミ
ドの必須領域、例えば複製開始点領域、複製に関与する
遺伝子等の解析が、他の分子量のより大きなプラスミド
よりも、容易に行えるという利点を有しているからであ
る。
が可能なプラスミドであるからであり、第２には、他の
高度好熱菌由来の既知のクリプテイック・プラスミドに
比べて小さい分子量を有するという点から、本プラスミ
ドの必須領域、例えば複製開始点領域、複製に関与する
遺伝子等の解析が、他の分子量のより大きなプラスミド
よりも、容易に行えるという利点を有しているからであ
る。
更にｐＮＨ８２１１は図からも明らかなように、Ａｃｃ
Ｉ、 ＸｂａＩなどの制限酵素による開裂部位を特定の
しかも限られた位置に有している。
Ｉ、 ＸｂａＩなどの制限酵素による開裂部位を特定の
しかも限られた位置に有している。
このことはｐＮＨ３２１１をベクターとして利用する際
に、挿入すべき異種遺伝子の導入部位を有意に保持でき
るという点で有利である。
に、挿入すべき異種遺伝子の導入部位を有意に保持でき
るという点で有利である。
さて、本プラスミドをベクターとして異種の耐熱性を有
する遺伝子を好熱菌に導入すれば、醗酵工業に於ける冷
却コストの節減が達成されよう。
する遺伝子を好熱菌に導入すれば、醗酵工業に於ける冷
却コストの節減が達成されよう。
また、耐熱性、耐溶媒性等の性質に優れた好熱菌の酵素
の遺伝子を、本プラスミドをベクターとして好熱菌宿主
にクローン化し、その量産を図る事によって、バイオリ
アクター等への応用が応用が可能であり、工業プロセス
への応用が期待される。
の遺伝子を、本プラスミドをベクターとして好熱菌宿主
にクローン化し、その量産を図る事によって、バイオリ
アクター等への応用が応用が可能であり、工業プロセス
への応用が期待される。
ｐＮＨ８２１１の入手は、本発明者らが温泉水中から新
たに分離した高度好熱菌、サーマス・フラバスＴＳ２１
株をサーマス培地（テ゛イフコ・イーストエキストラク
ト０．４％、ポリペプトン（大玉栄養）０．８％、Ｎａ
Ｃ１０，２％）により対数増殖後期迄増殖させて得た菌
体を、リゾチーム、ＳＤＳ処理によって溶菌させる事に
よって達せられる。
たに分離した高度好熱菌、サーマス・フラバスＴＳ２１
株をサーマス培地（テ゛イフコ・イーストエキストラク
ト０．４％、ポリペプトン（大玉栄養）０．８％、Ｎａ
Ｃ１０，２％）により対数増殖後期迄増殖させて得た菌
体を、リゾチーム、ＳＤＳ処理によって溶菌させる事に
よって達せられる。
また、サーマス・フラバスＴＳ２１株は好気性のダラム
染色陰性の桿菌で、黄色々素を産出しＤＮＡのＧＣ含量
が約７０％、生育至適温度が７０℃の菌株であるがｐＮ
Ｈ３２１１を保有する点では従来には認められない新規
な微生物である。
染色陰性の桿菌で、黄色々素を産出しＤＮＡのＧＣ含量
が約７０％、生育至適温度が７０℃の菌株であるがｐＮ
Ｈ３２１１を保有する点では従来には認められない新規
な微生物である。
本菌株はストレプトマイシン耐性株として温泉水中より
分離されたものである。
分離されたものである。
なお、本菌株は微工研菌寄第６７５２号として寄託され
ている。
ている。
以下、実施例により本発明をより具体的に詳述する。
実施例 １
（菌株のスクリーニング）
静岡系の熱用温泉の温泉水的１ｍｌをサーマス培地（デ
ィフコ・イーストエキストラクト０．４％、ポリヘプト
ン（大玉栄養）０．８％、ＮａＣ１０，２％）１００ｍ
ｌに加え７０℃で約１８時間振盪培養後、ストレプトマ
イシン（２０Ｍｇ ／ｍｌ）を含むサーマス寒天平板上
で生育したコロニーの一つからサーマス・フラスバＴＳ
２１株（微工研菌寄第６７５２号）が得られた。
ィフコ・イーストエキストラクト０．４％、ポリヘプト
ン（大玉栄養）０．８％、ＮａＣ１０，２％）１００ｍ
ｌに加え７０℃で約１８時間振盪培養後、ストレプトマ
イシン（２０Ｍｇ ／ｍｌ）を含むサーマス寒天平板上
で生育したコロニーの一つからサーマス・フラスバＴＳ
２１株（微工研菌寄第６７５２号）が得られた。
実施例 ２
プラスミドｐＮＨ５２１１のサーマス・フラバスＴＳ２
１株からの分離 サーマス・フラバスＴＳ２１株（微工研菌寄第６７５２
号）の生物学的に純粋な培養基から１００ｍ１のサーマ
ス培地（テ゛イフコ・イーストエキストラクト０．４％
、ポリペプトン（大玉栄養）０．８％、ＮａＣｌ０．２
％、ｐＨ７，５）に接種し７０℃で１６〜１８時間振盪
培養する。
１株からの分離 サーマス・フラバスＴＳ２１株（微工研菌寄第６７５２
号）の生物学的に純粋な培養基から１００ｍ１のサーマ
ス培地（テ゛イフコ・イーストエキストラクト０．４％
、ポリペプトン（大玉栄養）０．８％、ＮａＣｌ０．２
％、ｐＨ７，５）に接種し７０℃で１６〜１８時間振盪
培養する。
この培養液を１１のストレプトマイシン２０μｇ ／ｍ
ｌ）を含有するサーマス培地に接種し、７０℃で５時間
培養する。
ｌ）を含有するサーマス培地に接種し、７０℃で５時間
培養する。
菌体を遠心によって集め、ＴＥＳ （２０ｍＭＴｒｉｓ
−ＨＣＩ 。
−ＨＣＩ 。
５ｍＭＥＤＴＡ、 １００ｍＭＮａＣ１ｐＨ７，５）で
洗浄後菌体湿重量４ｇ当り、１０ｍ１の２５％シヨ糖含
有ＴＢＳに懸濁する。
洗浄後菌体湿重量４ｇ当り、１０ｍ１の２５％シヨ糖含
有ＴＢＳに懸濁する。
リゾチーム（１０ｍｇ／ｍｌ）を２ｍ］。０．２５Ｍ−
ＥＤＴＡ （ｐＨ８，０）４ｍｌを加え、０℃で１０分
間静置、続いて３７℃に１０分間保温する。
ＥＤＴＡ （ｐＨ８，０）４ｍｌを加え、０℃で１０分
間静置、続いて３７℃に１０分間保温する。
この細胞混合液に２ｍｌの１０％ＳＤＳ、 ５ ｍｌ
の５Ｍ−ＮａＣ１を加え４℃に１５〜１８時間静置する
。
の５Ｍ−ＮａＣ１を加え４℃に１５〜１８時間静置する
。
これを２８００Ｏｒｐｍ、 １時間の超遠心によって
遠心し、上清を得る。
遠心し、上清を得る。
この上清にポリエチレングリコール６０００を１０％（
Ｗ／Ｖ）加え、２〜３時間Ｏ℃に静置、２２００ｒｐｍ
、２分の遠心で沈澱を得る。
Ｗ／Ｖ）加え、２〜３時間Ｏ℃に静置、２２００ｒｐｍ
、２分の遠心で沈澱を得る。
この沈澱を１５ｍ１のＴＢＳに溶解し、ＣｓＣ１及びエ
チジウムブロマイドを加えて密度を１．６１〜１．６２
に調整する。
チジウムブロマイドを加えて密度を１．６１〜１．６２
に調整する。
この試料を３８００Ｏｒｐｍで３０〜４０時間、平衝密
度勾配遠心する。
度勾配遠心する。
生じたプラスミドＤＮＡのバンドを集め、イソアミルア
ルコールでエチジウムブロマイドを除去した後、ＴＥＮ
（２０ｍＭＴｒｉｓ −ＨＣｌ、 １ｍＭＥＤＴＡ、
２０ｍＭＮａＣ１） ｔ、、＝透析する事によってプ
ラスミド溶液が得られる。
ルコールでエチジウムブロマイドを除去した後、ＴＥＮ
（２０ｍＭＴｒｉｓ −ＨＣｌ、 １ｍＭＥＤＴＡ、
２０ｍＭＮａＣ１） ｔ、、＝透析する事によってプ
ラスミド溶液が得られる。
このプラスミド溶液はｐＮＨ３２１１と分子量約５．４
メガダルトンのｐＮＨ３２１２及び分子量約１０メガダ
ルトンのｐＮＨ５２１３との混合物であるが、このプラ
スミド溶液を１．０％の低融点アガロース（ＢＲＬ社製
）による電気泳動に供し、生ずるｐＮＨ８２１１に相当
するバンドを切り出してＤＮＡを回収する事によって純
粋なｐＮＨ５２１１が得られる。
メガダルトンのｐＮＨ３２１２及び分子量約１０メガダ
ルトンのｐＮＨ５２１３との混合物であるが、このプラ
スミド溶液を１．０％の低融点アガロース（ＢＲＬ社製
）による電気泳動に供し、生ずるｐＮＨ８２１１に相当
するバンドを切り出してＤＮＡを回収する事によって純
粋なｐＮＨ５２１１が得られる。
低融点アガロースゲルからのＤＮＡの回収は以下の手順
によった。
によった。
切り出したゲルスライスを６５℃に保温して融解、これ
に２培量の ０、５ｍＭＥＤＴＡを含む５ＱｍＭＴｒｉｓ−ＨＣＩ緩
衝液（ｐＨ８，０）を加え、３７℃に移し保温する。
に２培量の ０、５ｍＭＥＤＴＡを含む５ＱｍＭＴｒｉｓ−ＨＣＩ緩
衝液（ｐＨ８，０）を加え、３７℃に移し保温する。
これに等量（７）０．１ＭＴｒｉｓ−ＨＣＩ緩衝液（ｐ
Ｈ８’、０）で飽和させたフェノールを加え混合、遠心
（３０００〜５０００ｒｐｍ、５分）後、上層の水層を
分取する。
Ｈ８’、０）で飽和させたフェノールを加え混合、遠心
（３０００〜５０００ｒｐｍ、５分）後、上層の水層を
分取する。
フェノール抽出をもう一度行いエーテルによってフエノ
ールを水層より除去した後、３Ｍ酢酸アンモニウム溶液
を１／１０容加え、３容のエタノールによりエタノール
沈澱を行う。
ールを水層より除去した後、３Ｍ酢酸アンモニウム溶液
を１／１０容加え、３容のエタノールによりエタノール
沈澱を行う。
得られた沈澱をＴＥＮに溶解してプラスミド溶液とした
。
。
ｐＮＨ８２１１の特性決定の手順
ｐＮＨ８２１１の分子量は、その超らせん構造（ｓｕｐ
ｅｒｃｏｉｌｅｄ ５ｔｒｕｃｔｕｒｅ）のＤＮＡ及び
制限酵素によって切断された断片のアガロースゲル電気
泳動及びポリアクリルアミド・ゲル電気泳動より得られ
た。
ｅｒｃｏｉｌｅｄ ５ｔｒｕｃｔｕｒｅ）のＤＮＡ及び
制限酵素によって切断された断片のアガロースゲル電気
泳動及びポリアクリルアミド・ゲル電気泳動より得られ
た。
この際の分子量マーカーはｐＢＲ３２２ＤＮＡ（２，６
７ｍｄ ）、Ｃｏ１ＥＩＤＮＡ （４，２ｍｄ）及びラ
ムダＤＮＡ（７） Ｈｉｎｄ ＩＩＩ分解断片（１４，
６，５，８４，４，０５゜２．６７、１，３０．１，１
７．０．３４ｍｄ）、ラムダＤＮＡ のＥｃｏＲ１分解
断片（１３，７，４，７４，３，７３，３，４８゜３．
０２．２．１３ｍｄ）、φＸ １７４ＤＮＡ（７）Ｈａ
ｅＩＩＩ分解断片（０，８３６，０，６６６、０，５３
９，０，３７３，０，１９２，０，１７４゜０．１６７
、０，１４５．０，１２０．０．０７３．０．０４４ｍ
ｄ）を用いた。
７ｍｄ ）、Ｃｏ１ＥＩＤＮＡ （４，２ｍｄ）及びラ
ムダＤＮＡ（７） Ｈｉｎｄ ＩＩＩ分解断片（１４，
６，５，８４，４，０５゜２．６７、１，３０．１，１
７．０．３４ｍｄ）、ラムダＤＮＡ のＥｃｏＲ１分解
断片（１３，７，４，７４，３，７３，３，４８゜３．
０２．２．１３ｍｄ）、φＸ １７４ＤＮＡ（７）Ｈａ
ｅＩＩＩ分解断片（０，８３６，０，６６６、０，５３
９，０，３７３，０，１９２，０，１７４゜０．１６７
、０，１４５．０，１２０．０．０７３．０．０４４ｍ
ｄ）を用いた。
制限酵素による切断は、プラスミドＤＮＡ溶液からエタ
ノール沈澱によってＤＮＡを沈澱させ、適当な緩衝液に
溶解して行なった。
ノール沈澱によってＤＮＡを沈澱させ、適当な緩衝液に
溶解して行なった。
制限酵素は宝酒造及び、ベーリンガー・マンハイム社よ
りの市販品を用いた。
りの市販品を用いた。
アガロースゲル電気泳動はシーケム社のアガロースを０
．５％又は０．７％の濃度で用い、水平ゲル電気泳動槽
によってゲル長さ１ｃｍ当り１．５ｖの定電圧で１５〜
１７時間行なった。
．５％又は０．７％の濃度で用い、水平ゲル電気泳動槽
によってゲル長さ１ｃｍ当り１．５ｖの定電圧で１５〜
１７時間行なった。
ポリアクリルアミド・ゲル電気泳動は、生化学工業社製
のポリアクリルアミド・ビスアクリルアミドを用い、５
％濃度３０：１の架橋度のゲルによって垂直型スラブゲ
ル電気泳動槽により、ゲル長さ１ｃｍあたり１０ｖの定
電圧によって２〜３時間行った。
のポリアクリルアミド・ビスアクリルアミドを用い、５
％濃度３０：１の架橋度のゲルによって垂直型スラブゲ
ル電気泳動槽により、ゲル長さ１ｃｍあたり１０ｖの定
電圧によって２〜３時間行った。
高度好熱菌のプラスミドとしては、前記の表に示したと
おりであるがｐＮＨ８２１１と他のものでは前述のよう
に明らかに異なっており、ｐＮＨ３２１１は従来認めら
れない新規なプラスミドである。
おりであるがｐＮＨ８２１１と他のものでは前述のよう
に明らかに異なっており、ｐＮＨ３２１１は従来認めら
れない新規なプラスミドである。
図面はｐＮＨ８２１１の制限酵素開裂地図を示し、図中
のＸｂａ Ｉはキサントモナス・バドリイ由来の酵素、
Ａｃｃ Ｉはアシネトバクタ−・カルコアセティカス由
来の酵素、Ｋｐｎ ■はクレブシェラ・ニューモニア由
来の酵素、Ｈｉｎｃ ＩＩはハエモフイルス・インフル
エンザ由来の酵素をそれぞれ示している。
のＸｂａ Ｉはキサントモナス・バドリイ由来の酵素、
Ａｃｃ Ｉはアシネトバクタ−・カルコアセティカス由
来の酵素、Ｋｐｎ ■はクレブシェラ・ニューモニア由
来の酵素、Ｈｉｎｃ ＩＩはハエモフイルス・インフル
エンザ由来の酵素をそれぞれ示している。
Claims (1)
- １ 分子量が約３．１メガダルトンであり、図に示され
る制限酵素地図で特徴づけられるサーマス属菌由来のプ
ラスミド
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57189525A JPS5953837B2 (ja) | 1982-10-28 | 1982-10-28 | 高度好熱菌に由来する新規プラスミド |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57189525A JPS5953837B2 (ja) | 1982-10-28 | 1982-10-28 | 高度好熱菌に由来する新規プラスミド |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5978690A JPS5978690A (ja) | 1984-05-07 |
| JPS5953837B2 true JPS5953837B2 (ja) | 1984-12-27 |
Family
ID=16242744
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57189525A Expired JPS5953837B2 (ja) | 1982-10-28 | 1982-10-28 | 高度好熱菌に由来する新規プラスミド |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5953837B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6122526U (ja) * | 1984-07-13 | 1986-02-10 | 光洋機械産業株式会社 | ペ−スト用のミキサ− |
| JPH0261605U (ja) * | 1988-10-27 | 1990-05-08 |
-
1982
- 1982-10-28 JP JP57189525A patent/JPS5953837B2/ja not_active Expired
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6122526U (ja) * | 1984-07-13 | 1986-02-10 | 光洋機械産業株式会社 | ペ−スト用のミキサ− |
| JPH0261605U (ja) * | 1988-10-27 | 1990-05-08 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5978690A (ja) | 1984-05-07 |
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