JPS5945359B2 - 発酵法によるアブサイジン酸の製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は発酵法によるアブサイシン酸の製造法（こ関す
る。

さらに詳しくは、アブサイシン酸生産能を有する微生物
を培地に培養して培養物中にアブサイシン酸を蓄積せし
め該培養物からアブサイシン酸を採取するアブサイシン
酸の製造に際して、培地中に高濃度のグアニン系化合物
を存在せしめることｌこよってアブサイシン酸の生成量
を増加せしめる方法に関する。

その目的とするところは、工業的に有利なアブサイシン
酸の製法を提供することにある。

微生物がアブサイシン酸を生成することについては、カ
ビ類の一種であるセルコスポラ・ロシコラ（Ｃｅｒｃｏ
ｓｐｏｒａ ｒｏｓｉｃｏｌａ）で知られているがその
生成量はまだ低く満足すべきものではない。

すなわち、本菌によるアブサイシン酸の生産において、
酵母エキス、馬鈴薯抽出物、麦芽エキス等の天然栄養物
を含む培地では数１０μ？／ｍｌのアブサイシン酸が蓄
積するが、ペプトンを含む培地ではほとんどアブサイシ
ン酸が生成しないことが知られている（Ｂｘｐｅｒｉｅ
ｎｔｉａ ３３゜１５５６（１９７７）、ｌ。

このようにアブサイシン酸の生成量が微量であることの
一つの原因は、培地成分として添加する上記の天然栄養
物中に、アブサイシン酸の生成を促進する物質とこれを
阻害する物質の両方が含まへ それらの物質の互に相反
する作用によってアブサイシン酸の生成が制限されるこ
とが考えられる。

また、上述の天然栄養物は高価な物質であり工業的なア
ブサイシン酸の発酵生産に用いるには必ずしも適してい
ない。

本発明者はこのような状況をかんがみ、アブサイシン酸
生産菌（こよるアブサイシン酸の生成を促進する物質を
検索した結果、グアニンおよびその誘導体を培養液に添
加することによってアブサイシン酸の生成が著しく促進
されることを見出した。

これ迄、グアニン系化合物がアブサイシン酸の生成を促
進することは全く知られておらず、本発明はかかる新規
な知見にもとづくものである。

本発明にかかわるグアニン系化合物としては、グアニン
、グアノシン、５′−グアニル酸、３′−グアニル酸、
ゴーグアノシントリリン酸、その他のグアニン誘導体が
あげられる。

これらのグアニン系化合物は単独あるいは併用して使用
することができ、その培地への添加量はグアニン換算で
５〜５００μｔ ／ｍｌである。

さらに、これらのグアニン系化合物は、合成培地、天然
培地のいずれにも使用することができ、他の核酸関連化
合物例えばアデニン、チトシン、キサンチン、ヒポキサ
ンチン、ウラシル、チミンまたはそれらの誘導体と組合
せて使用することができる。

本発明に使用する微生物としては、アブサイシン酸生産
能を有する微生物ならばいずれも使用できる。

具体的な菌株としてはセルコスポラ・ロシコラＨ３微工
研菌寄第６１２８号があげられる。

本発明ｌこ用いる培地の炭素源としては、グルコース、
フラクトース、ガラクトース、ラクトーヘシュークロー
ス、マンノース、トレハロース、セロビオース、アラビ
ノース、ラクトースおよびそれらを含有する天然物（例
えば廃糖蜜、馬鈴薯抽出物、澱粉）、エタノールその他
のアルコール類酢酸、乳酸、ピルビン酸、コハク酸、そ
の他の有機酸類、グルタミン酸、リジン、アスパラギン
醒アルギニン、メチオニン、クリシン、バリン、ロイシ
ン、インロイシン等のアミノ酸類を単独あるいは混合し
て使用できる。

培地に添加する窒素源としては、アンモニア、尿素、硫
酸アンモニウム、塩化アンモニウム、酢酸アンモニウム
、クエン酸アンモニウム、燐酸アンモニウム、炭酸アン
モニウム等の無機・有機アンモニウム化合物、グルタミ
ン酸、リジン、アスパラギン酸、アスパラギン、プロリ
ン、アルギニン等のアミノ酸類、コーン・スチーブ・リ
カー、肉エキス、酒粕エキス、大豆粕分解物、ペプトン
、各種発酵菌体の加水分解物、各種蛋白質含有物等が使
用できる。

これらの天然窒素源の中にはグアニン系化合物の含有物
として使用できるものもある。

無機物としては、Ｎａ 、に、Ｍｎ、Ｍｇ 、Ｃａ。

Ｃｏ、Ｎｉ 、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｃｔ、ＰＯ４゜Ｓ０
４．ＮＯ３等の塩類が使用できる。

その他ビタミン類が培地に添加される。

培養は培地中の酸素移動速度が０．０１ｋｇｍｏｌ ｅ
ｓ／ｍ’ｈｒ以上で振盪培養あるいは通気撹拌培養で行
われる。

培養中のＰＨは２〜９が好適である。

培養温度は１８〜３０℃が好適である。

ＰＨの中和剤としテハ、アンモニア水、カセイソーダ、
水酸化カルシウム、炭酸カルシウム、リン酸マグネシウ
ム、尿素等が用いられる。

培養期間は５〜２０日間で、培養物中に著量のアブサイ
シン酸が蓄積する。

以下に本発明の実施例を示す。

実施例 １ １００７７２１当り２４ｙ′のポテト−テキストロース
ブロス（Ｄｉｆｃｏ社製品。

この２．４１中１こは２１のグルコースと馬鈴薯２０グ
相当分の抽出物を陰む）と寒天２グを含むポテト−デキ
ストロース寒天培地（ＰＨ６，５） １４ｍｌを大型試
験管（１６０ｍｍ、Ｘｌ ６ ｒｒｖｎ ）に分注して
１２０℃で１５分間加圧殺菌し常法ｔこ従って寒天斜面
培地を調製する。

寒天が凝固した後に、寒天培地表面全域にセルコスポラ
・ロシコラ微工型菌寄第６１２８号を接種して２５℃で
２０日間静置培養する。

えられた寒天斜面の培養物に８ｍｌの殺菌水を分注して
、これにガラス棒を用いて菌体を懸濁しえられた菌体の
懸濁液を種培養物とする。

この種培養物０．５１１１１を、大型試験管（１６０叫
Ｘ］、６ｍｍ）に分注した種々の濃度のグアニンを含む
発酵培地１０７７２１に接種して、試験管シェーカーの
上で１５日間振盪培養した。

各グアニン濃度に対応したアブサイシン酸の蓄積量（イ
第１表に示すとおりであった。

なお、発酵培地の基礎組成は次のとおり：ポテトーデキ
ストロース・ブロス（Ｄｉｆｃｏ社製）２．４ ′？／
ｄ４ ＰＨ６，５ 実施例 ２ グアニンにかえて、グアノシン９３μ？ ７ｍ１１また
は５′−グアニル酸１２０μｆ／ｍｌを培地に添加した
他は実施例１と同様に行なった結果は第２表のとおりで
あった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ アブサイシン酸生産能を有する微生物を培地（こ培
   養し、培養物中ｔこアブサイシン酸を蓄積せしめ、該培
   養物からアブサイシン酸を採取するアブサイシン酸の製
   造法において、培地中にグアニンとして５μ’ｉ／ｍ１
   以上のグアニン系化合物を存在せしめることを特徴とす
   る発酵法によるアブサイシン酸の製造法。 ２ グアニン系化合物がグアニン、グアノシン、５−グ
   アニル酸、３′−グアニル酸又は５７−ゲアノシントＩ
   Ｊ ＩＪン酸である特許請求の範囲第１項記載の製造法
   。