JPS5934895A - プルマイシン製造法 - Google Patents
プルマイシン製造法Info
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- JPS5934895A JPS5934895A JP14483982A JP14483982A JPS5934895A JP S5934895 A JPS5934895 A JP S5934895A JP 14483982 A JP14483982 A JP 14483982A JP 14483982 A JP14483982 A JP 14483982A JP S5934895 A JPS5934895 A JP S5934895A
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- Japan
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- purmycin
- acid
- prumycin
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はバチルス属に属する微生物を培養して、その培
養液中に次式 で表わされるプルマイシン(Prumyeln )
を蓄積サ−1、培養液か【・プルマイシン又はその酸伺
加塙を採取することによってグルマイシンおよびそσ)
酸付加塩を製造する方法に関するものである。
養液中に次式 で表わされるプルマイシン(Prumyeln )
を蓄積サ−1、培養液か【・プルマイシン又はその酸伺
加塙を採取することによってグルマイシンおよびそσ)
酸付加塩を製造する方法に関するものである。
プルマイシン(凍たはF−10ニアg物質)は秦藤樹ら
によって発見された細菌やかびの発育を阻止する抗生物
質であシ、ストレプトミセス・カガワエンシス(微工研
菌寄第953号)忙よって生産される(特公昭50−2
9037号1日本特W「第819439号、ジャーナル
・オプ・アンチビオチクヌ、24巻、900負、197
1年)。
によって発見された細菌やかびの発育を阻止する抗生物
質であシ、ストレプトミセス・カガワエンシス(微工研
菌寄第953号)忙よって生産される(特公昭50−2
9037号1日本特W「第819439号、ジャーナル
・オプ・アンチビオチクヌ、24巻、900負、197
1年)。
本発明者は、バクテリヤの生産する新規抗生物質の探索
中忙、東京都杉並区須賀神社境内の土壌試料より分離し
、BMG366−UF5株の番号を付した菌株がプルマ
イシンを生産していることを発見し7た。全く同一構造
を有する抗生物質が、ストレプトミセスとバクテリヤの
両者によって生産されることは、きわめて稀なことであ
る・さらに本発明者らによって見いだされたBMG36
6−UF5株は、簡単で安価な培養原料によって培養し
てプルマイシンを生産蓄積できることを見いだして、本
発明を完成した〇 すなわち、本発明は、バチルス属に属するプルマイシン
生産菌を好気的に発育させ・その培養液からプルマイシ
ンまたはその酸付加塩を採取することを特徴とするプル
マイシンまたはその酸付加塩の製造法を要旨とするもの
である。
中忙、東京都杉並区須賀神社境内の土壌試料より分離し
、BMG366−UF5株の番号を付した菌株がプルマ
イシンを生産していることを発見し7た。全く同一構造
を有する抗生物質が、ストレプトミセスとバクテリヤの
両者によって生産されることは、きわめて稀なことであ
る・さらに本発明者らによって見いだされたBMG36
6−UF5株は、簡単で安価な培養原料によって培養し
てプルマイシンを生産蓄積できることを見いだして、本
発明を完成した〇 すなわち、本発明は、バチルス属に属するプルマイシン
生産菌を好気的に発育させ・その培養液からプルマイシ
ンまたはその酸付加塩を採取することを特徴とするプル
マイシンまたはその酸付加塩の製造法を要旨とするもの
である。
本発明の方法において用いられるプルマイシン生産菌の
一例は、昭和55年11月、微生物化学研究所において
、東京都杉並区須賀神社境内の土#ii試料より分離し
たバクテリアで、BMG366−UF5株の菌株番号が
付されたーものである。その菌学的性状11次に示す通
勺である。
一例は、昭和55年11月、微生物化学研究所において
、東京都杉並区須賀神社境内の土#ii試料より分離し
たバクテリアで、BMG366−UF5株の菌株番号が
付されたーものである。その菌学的性状11次に示す通
勺である。
■、形態
(1) 細胞は桿菌−大きさは1.0〜1.2 X
2・8〜3.8ミクロンである。
2・8〜3.8ミクロンである。
(2) 細胞の多形性は特に認められない。
(3) 活発な運動性を示し、周鞭毛を有する0(4
)胞子を有する。その形は卵円形、大きさは0.8〜1
.0 X I−2〜2・0ミクロン、位置は中立(ce
ntral )・菌体の膨隆は認められない。
)胞子を有する。その形は卵円形、大きさは0.8〜1
.0 X I−2〜2・0ミクロン、位置は中立(ce
ntral )・菌体の膨隆は認められない。
また耐熱性である。
(5) ダラム染色は陽性である。
(61非抗酸性である。
2、各秤培地における生育状態
すべて30′Cで試験した。
(1) 肉汁寒天平板培養
コロー−u光沢のない、不透明な円形で、辺縁は不規則
、色は茶白(brownish white )を示す
・拡散性色素は認められない。
、色は茶白(brownish white )を示す
・拡散性色素は認められない。
(2) 肉汁寒天斜面培養
培地表面に広がって増殖し、不透明で光沢がなく、茶白
(brownlsh white ) を示す。
(brownlsh white ) を示す。
拡散性色素は認められない。
(3) 肉汁液体培養
培養後24時間で培地全体が濁り、2日目には培地表面
に菌膜をつくる。3日目になると、培地表面な菌膜がお
おい、培地の濁りが消失して、試験管底部に菌体が沈澱
してくる・(4) 肉汁ゼラチン穿刺培養 20℃ で培養すると、培養後24時間目に穿刺線にそ
って増殖が認められ、2日目からゼラチンの液化が始ま
る。その型は層状である。一方、30’t で培養す
ると、24時間で表面に菌膜を形成し、ゼラチンの液化
が始する。子の型はやけ多層状である。
に菌膜をつくる。3日目になると、培地表面な菌膜がお
おい、培地の濁りが消失して、試験管底部に菌体が沈澱
してくる・(4) 肉汁ゼラチン穿刺培養 20℃ で培養すると、培養後24時間目に穿刺線にそ
って増殖が認められ、2日目からゼラチンの液化が始ま
る。その型は層状である。一方、30’t で培養す
ると、24時間で表面に菌膜を形成し、ゼラチンの液化
が始する。子の型はやけ多層状である。
(5) ミルク培養
リドマスミルク培地に37c′Cて培養すると、培養後
24時間で凝固が始まり、直ちに完了スル。イブトン化
は、ミルクの凝固完了後始ブリ、培養後8日目に完了し
た。一方BCpミルクは、培養後24時間で凝固状態と
な、す、直ちにベグトン化が開始され、5日目に完了し
た。リドマスミルク、BCPミルクとも反応dアルカリ
性である。
24時間で凝固が始まり、直ちに完了スル。イブトン化
は、ミルクの凝固完了後始ブリ、培養後8日目に完了し
た。一方BCpミルクは、培養後24時間で凝固状態と
な、す、直ちにベグトン化が開始され、5日目に完了し
た。リドマスミルク、BCPミルクとも反応dアルカリ
性である。
8、生理的性質(30℃)
(11硝酸塩の還元:陽性
(2)脱窒反応(長谷用武治編著:微生物の分類と同定
、223N・学会出版セン ター、 1975年の駒形らの方法 によった):陽性 Ill M Rテスト:陽性 +41VPテスト:陽性 +r)1 インドールの生成:陰性 (61硫化水スうの生成:陰性 【71 デンプンの加水分解:陽性 (81クエン酸の利用: TConerの培地−Chr
ist−ensenの培地ともに生育する。
、223N・学会出版セン ター、 1975年の駒形らの方法 によった):陽性 Ill M Rテスト:陽性 +41VPテスト:陽性 +r)1 インドールの生成:陰性 (61硫化水スうの生成:陰性 【71 デンプンの加水分解:陽性 (81クエン酸の利用: TConerの培地−Chr
ist−ensenの培地ともに生育する。
+91 無機窒素源の利用:グルタミン酸ナトリウム
、硝酸ナトリウム−脅〃アンモニウムt カザミノ酸(
Vitamin free −Casamino Ae
idg+Dlfco )のいずれをも利用する。
、硝酸ナトリウム−脅〃アンモニウムt カザミノ酸(
Vitamin free −Casamino Ae
idg+Dlfco )のいずれをも利用する。
01 色素の生成:陰性
I ウレアーゼ(尿素培地:栄研):陽性α2 オキシ
ダーゼ:陰性 0 カタラーゼ:陽性 (141生育の1rlNjtl(: pH5−O−p1
19−91)範囲テ生育を認め、最適pit i!、
6.0〜8.0である。また、100C〜45°Cの範
囲で生育を認め、最適温度は30°C−37°Cである
。
ダーゼ:陰性 0 カタラーゼ:陽性 (141生育の1rlNjtl(: pH5−O−p1
19−91)範囲テ生育を認め、最適pit i!、
6.0〜8.0である。また、100C〜45°Cの範
囲で生育を認め、最適温度は30°C−37°Cである
。
09 酸素に対する態度二通性嫌気性No−Fテスト
(Hugh−Leifson試馳):発酵型 +171 g素化合物の利用:L−アラビノース。
(Hugh−Leifson試馳):発酵型 +171 g素化合物の利用:L−アラビノース。
1〕−キシロース、 D−グルコース、■〕−マノノー
ス、 D−フラクトース、 D−ガラクトース、 麦芽
糖、 ショ糖・ 乳糖・トレハロース、 D−ソルビッ
ト、 D−マンニット、 イノジット、 グリセリン。
ス、 D−フラクトース、 D−ガラクトース、 麦芽
糖、 ショ糖・ 乳糖・トレハロース、 D−ソルビッ
ト、 D−マンニット、 イノジット、 グリセリン。
デンプンを利用し、コハク酸ナトリウム。
クエン酸ナトリウム、 エリスリットを利用しなかった
。
。
U 糖類からの酸およびガスの生成
ガスの生成はすべて陰性である。
A培地:ベプト710 g、 NaCl2 g、
IITB O,00g、’?、ff製水1ooo ml
、P” ’L2B培地: NH4NO31,0、li’
、 KH2PO41,Og、 MgSO4・ 7H
200,5、lit 、 KCI O,2j;j 、
BTII O,00g、y、精m水1000 m
l、pl+ 7.209 7係NE C/ における
生育:陽性■ カゼインの加水分解:陽性 以上の性状を要約すると、BMG 366−UF5味
は・通性嫌気性のダラム陽性の有芽胞桿菌で、周鞭毛を
有し、運動性を示す。芽胞は卵円形で中立(eentr
al )、耐熱性である。菌体の膨隆は認められず、非
抗酸性である。寒天培地での生 。
IITB O,00g、’?、ff製水1ooo ml
、P” ’L2B培地: NH4NO31,0、li’
、 KH2PO41,Og、 MgSO4・ 7H
200,5、lit 、 KCI O,2j;j 、
BTII O,00g、y、精m水1000 m
l、pl+ 7.209 7係NE C/ における
生育:陽性■ カゼインの加水分解:陽性 以上の性状を要約すると、BMG 366−UF5味
は・通性嫌気性のダラム陽性の有芽胞桿菌で、周鞭毛を
有し、運動性を示す。芽胞は卵円形で中立(eentr
al )、耐熱性である。菌体の膨隆は認められず、非
抗酸性である。寒天培地での生 。
育は不透明で、辺縁は不規則、培地表面にひろがって増
殖する。ゼラチンを液化し、ミルクを凝固ベグトン化す
る。硝酸塩を還元し・脱窒反応陽性・M Rテスト陽性
、vPテスト陽性である。インドールfj、検出されず
、硫化水嵩を生成しない0デン Iゾ、を分解し、
クエン酸を利用するのウレア−ゞ プ反応陽性、オ
キシダーゼ反応陰性・ カタラーゼ反応陽性である。p
l+5.0〜9.9の範囲で生育し、最 ・適rI
Il iJ: 6.0〜8.0である。また、1o0C
〜45°Cの範囲で生育し、最適温度は30°C〜37
°Cである。ブドウ糖を発酵的に分解し、酸を生成する
□糖類からの酸の生成は培地によりやや異なるが、L−
アラビノース、■)−キシロース、 D−マンノース、
D−ガラクトース、 乳糖、 D−ソルビット、
D−マンニット、 イノジットからは酸を生成しない。
殖する。ゼラチンを液化し、ミルクを凝固ベグトン化す
る。硝酸塩を還元し・脱窒反応陽性・M Rテスト陽性
、vPテスト陽性である。インドールfj、検出されず
、硫化水嵩を生成しない0デン Iゾ、を分解し、
クエン酸を利用するのウレア−ゞ プ反応陽性、オ
キシダーゼ反応陰性・ カタラーゼ反応陽性である。p
l+5.0〜9.9の範囲で生育し、最 ・適rI
Il iJ: 6.0〜8.0である。また、1o0C
〜45°Cの範囲で生育し、最適温度は30°C〜37
°Cである。ブドウ糖を発酵的に分解し、酸を生成する
□糖類からの酸の生成は培地によりやや異なるが、L−
アラビノース、■)−キシロース、 D−マンノース、
D−ガラクトース、 乳糖、 D−ソルビット、
D−マンニット、 イノジットからは酸を生成しない。
ガスの生成は、いずれの糖からも認められない。塩化ナ
トIJウム濃度が7俤でも生育し、カゼインを分解すル
。
トIJウム濃度が7俤でも生育し、カゼインを分解すル
。
以上の性状をもとに、BMG 366−UF5味を「
Bergey’s Manual of Determ
inativ@Baet−eriology J g
th 5dltion (RlE、 Buehanan
& N。
Bergey’s Manual of Determ
inativ@Baet−eriology J g
th 5dltion (RlE、 Buehanan
& N。
E、Gibbons、 The Willlams &
Wllkins Company+Balt1mor
e、 1974 )で検索すると、531頁のBaci
llus 幌に川すると考えられる。更に1種を険索
するとグルコースからアセトインを生成し1名化ナトリ
ウム濃度が7俤でも生育し、L−アラビノース、 D−
キシロース、 D−マンニットから酸を生成しない種、
すなわちBacillul!Ieer−eus、 B、
anthraci8. B、 thuringien
TAisが近縁のものと思われる。13M0 366−
UF4株(7)f9’状ヲ上記3種と比較すると・次表
のようになる。
Wllkins Company+Balt1mor
e、 1974 )で検索すると、531頁のBaci
llus 幌に川すると考えられる。更に1種を険索
するとグルコースからアセトインを生成し1名化ナトリ
ウム濃度が7俤でも生育し、L−アラビノース、 D−
キシロース、 D−マンニットから酸を生成しない種、
すなわちBacillul!Ieer−eus、 B、
anthraci8. B、 thuringien
TAisが近縁のものと思われる。13M0 366−
UF4株(7)f9’状ヲ上記3種と比較すると・次表
のようになる。
この表から明らかなように、nMG 366−UF5
株は、B、 cereus、 B、 anthraci
s、 B、 th−uringiensis #てよ〈
類似している。しかし、B MG 366−UF5株
は、運動性を有する点で運動性のないB、 anthr
aeis と異f:r−1:i、一方、B。
株は、B、 cereus、 B、 anthraci
s、 B、 th−uringiensis #てよ〈
類似している。しかし、B MG 366−UF5株
は、運動性を有する点で運動性のないB、 anthr
aeis と異f:r−1:i、一方、B。
thuringienslsは昆虫の病原菌である(1
記のBergcy’a Manualの536員参照)
ことからBMG 366−UF5株と明確に区別され
る。
記のBergcy’a Manualの536員参照)
ことからBMG 366−UF5株と明確に区別され
る。
従って、BMG 366−UF5株け、B、 ee−
reus に最も近縁の種と考えられた。次に示す表
1d’、”5研究所で保管しているB−cereu♂3
菌株と、BMG 366−UF5株を実際に比較検討
した成績である。
reus に最も近縁の種と考えられた。次に示す表
1d’、”5研究所で保管しているB−cereu♂3
菌株と、BMG 366−UF5株を実際に比較検討
した成績である。
13MG 366−UF5株は、ウレアーゼ試験陽性
で、この点のみが2株のB、cere+Hと異なp。
で、この点のみが2株のB、cere+Hと異なp。
他の1株とtit合致している。前に示した表にあるよ
うに、0.cereug のウレアーゼ反応には疑問
があり、この相違点は問題にするようなものでけないと
考えられる。
うに、0.cereug のウレアーゼ反応には疑問
があり、この相違点は問題にするようなものでけないと
考えられる。
従って、BMG 366−UF5株をバチルス0セレ
ウス(Ba8月1us cereug ) B M G
366− U F 5株と同定17た。なお、BM
G 366−UF5株は工業技術院微生物工業技術研
究所に寄託され(昭和57年3月1日)その微生物受託
番号【」微工研菌寄第6395号(FETtM P −
6395)である。
ウス(Ba8月1us cereug ) B M G
366− U F 5株と同定17た。なお、BM
G 366−UF5株は工業技術院微生物工業技術研
究所に寄託され(昭和57年3月1日)その微生物受託
番号【」微工研菌寄第6395号(FETtM P −
6395)である。
本発明のプルマイシンの製造法を実施するに当っては、
BMG 366−UF5株を栄養源含有培地に接種し
て、好気的に発育させることによってグルマイシンをt
@養液中に蓄積させる。栄養源としてはバクテリアの栄
養源として用いられる公知のものを使用できる。例えば
市販されている大豆扮、魚粉、肉エキス、ペプトン、酵
母エキス、Nz−アミン、硫酸アンモノなどの窒累源お
よび市販されているグリセリン、ブドウ籾1、!?’t
’6)、マルトースなどの炭水化物、あるいは脂肪な
との炭素源とが使用でき、さらに食塩、炭酸カルシウム
、硫酸マグネシウム、塩化マンガン、リンmナトリウム
などの無機塩を添加、使用できる。その他必要に応じて
微月の金属塩を添加することもできる。
BMG 366−UF5株を栄養源含有培地に接種し
て、好気的に発育させることによってグルマイシンをt
@養液中に蓄積させる。栄養源としてはバクテリアの栄
養源として用いられる公知のものを使用できる。例えば
市販されている大豆扮、魚粉、肉エキス、ペプトン、酵
母エキス、Nz−アミン、硫酸アンモノなどの窒累源お
よび市販されているグリセリン、ブドウ籾1、!?’t
’6)、マルトースなどの炭水化物、あるいは脂肪な
との炭素源とが使用でき、さらに食塩、炭酸カルシウム
、硫酸マグネシウム、塩化マンガン、リンmナトリウム
などの無機塩を添加、使用できる。その他必要に応じて
微月の金属塩を添加することもできる。
これらのものはプルマイシン生産菌が1用し、プルマイ
シンの生産に役立つものであれば良く・公知の培養材料
はすべて使用できる。しかし、本発明者らは、BへiG
366−UI”5株をグリセリン(3%)、魚粉(
2チ)および炭酸カルシウム(0・2幅)よりなる簡単
で安価な液体培地で培養して充分量のプルマイシンを生
成蓄積せしめることができたり培養流度は生産菌が発育
し、プルマイシンを生産する範回で適用しつるが、好ま
しいのは25−37°Cである。培養は通常グルマイシ
ンが充分に蓄積するまで継続される。通常2−5日の培
養が行なわれる。
シンの生産に役立つものであれば良く・公知の培養材料
はすべて使用できる。しかし、本発明者らは、BへiG
366−UI”5株をグリセリン(3%)、魚粉(
2チ)および炭酸カルシウム(0・2幅)よりなる簡単
で安価な液体培地で培養して充分量のプルマイシンを生
成蓄積せしめることができたり培養流度は生産菌が発育
し、プルマイシンを生産する範回で適用しつるが、好ま
しいのは25−37°Cである。培養は通常グルマイシ
ンが充分に蓄積するまで継続される。通常2−5日の培
養が行なわれる。
本発明の方法におけるプルマイシンの定量ハ、大腸菌に
一12株を用いる通常の抗生物質の円筒平板法によって
行なった。標準としたプルマイシン塩酸塩(1,000
u / mW )は、200 meg / Hlの濃度
で直径約22唄の阻止円を示した・培養液中に’@積さ
れたゾルマイシンは、その塩基性で水溶性の性状から、
カルボキシル基を活性基とするイオン交換体、例えばア
ンバーライ)IRC−50樹脂(米国ローム・アンド・
ハース社製〕やCM−セファデックスC−25(スウェ
ーデン国ファルマシア社製)などを使用するカラムクロ
マトグラフィーによる精製法が最も有効である〇これら
のイオン交換体は、Na型、に型、NH4型など適宜使
用され、それらのH型との混合型の使用はさらに好まし
く、これらのイオン交換体に吸着したプルマイシンは、
塩酸、硫酸などの無機酸や、塩化ナトリウムなどの無機
塩の水溶液で容易に溶出できる。これらのカラムクロマ
トグラフィー法は、適宜繰返し、または組合わされて使
用される。
一12株を用いる通常の抗生物質の円筒平板法によって
行なった。標準としたプルマイシン塩酸塩(1,000
u / mW )は、200 meg / Hlの濃度
で直径約22唄の阻止円を示した・培養液中に’@積さ
れたゾルマイシンは、その塩基性で水溶性の性状から、
カルボキシル基を活性基とするイオン交換体、例えばア
ンバーライ)IRC−50樹脂(米国ローム・アンド・
ハース社製〕やCM−セファデックスC−25(スウェ
ーデン国ファルマシア社製)などを使用するカラムクロ
マトグラフィーによる精製法が最も有効である〇これら
のイオン交換体は、Na型、に型、NH4型など適宜使
用され、それらのH型との混合型の使用はさらに好まし
く、これらのイオン交換体に吸着したプルマイシンは、
塩酸、硫酸などの無機酸や、塩化ナトリウムなどの無機
塩の水溶液で容易に溶出できる。これらのカラムクロマ
トグラフィー法は、適宜繰返し、または組合わされて使
用される。
プルマイシン精製工程中の塩化ナトリウムなどの無機塩
の除去には、通常のセファデックスLH−20(ファル
マシア社JIIJ )などのカラムクロマトグラフィー
のほかに、プルマイシン塩酸塩がメタノールに易溶性で
あることから、その乾燥粉末中からプルマイシン塩酸塩
を無水メタノールで抽出する方法が用いられる。
の除去には、通常のセファデックスLH−20(ファル
マシア社JIIJ )などのカラムクロマトグラフィー
のほかに、プルマイシン塩酸塩がメタノールに易溶性で
あることから、その乾燥粉末中からプルマイシン塩酸塩
を無水メタノールで抽出する方法が用いられる。
プルマイシンは前述の構造式で明らかな如く1位の立体
配置によシα一体とβ一体が存在する。
配置によシα一体とβ一体が存在する。
プルマイシン塩#塩を少量のメタノールにとかし放置す
ると、容易にβ一体のプルマイシン2塩酸塩の無色結晶
が析出し、その分解点は198−0 200°Cで、〔α:lD + I I 5 (c 0
・5 、メタノール)を示す(大判ら:ジャーナル・オ
プ・ケミカル・ソサイテイ・パーキンI、、 197
4年、+627頁)。しかし、このβ一体は、他の糖n
と同様に、水溶液中で容易にα一体とβ一体の平衡混合
物となる。プルマイシン(遊離塩基)は薬学的に許容で
きる無機酸例えば、塩酸、硫酸・ リン酸・等あるいは
有機酸例えば酢酸、プロピオン酸、コエン酸1等と常法
で反応させることによって、プルマイシンの酸付加塩と
することができる。
ると、容易にβ一体のプルマイシン2塩酸塩の無色結晶
が析出し、その分解点は198−0 200°Cで、〔α:lD + I I 5 (c 0
・5 、メタノール)を示す(大判ら:ジャーナル・オ
プ・ケミカル・ソサイテイ・パーキンI、、 197
4年、+627頁)。しかし、このβ一体は、他の糖n
と同様に、水溶液中で容易にα一体とβ一体の平衡混合
物となる。プルマイシン(遊離塩基)は薬学的に許容で
きる無機酸例えば、塩酸、硫酸・ リン酸・等あるいは
有機酸例えば酢酸、プロピオン酸、コエン酸1等と常法
で反応させることによって、プルマイシンの酸付加塩と
することができる。
次に、本発明の方法を実施例によって説明する。
実施例1
寒天斜面培地に培養したBMG 366−UF5株(
微工研菌寄第6395号)の菌体を滅菌水120meK
懸濁した。その1・5−を、グリセリン3・09g1魚
粉2・O俤、旋酸カルシウム0.2チ(4N水酸化ナト
リウムに−17,4に調整)からなる液体培地110m
f!を入れた5 00 rniの三角フラスコに接種し
、27°Cで3日間回転振盪培養(毎分180回転)し
た。三角フラスコ20個の培養液を集め濾過して2,0
00#Ilの炉液(pH6,8,404u / ry、
)を得た。このr液を、アンバーライ)IRC−50
(40% Nn型)230mlをつめた塔にかけて抗生
物質を吸着せしめ、水洗後(+、000rte ) 0
・4N塩酸で溶出した。活性溶出液390 mlを集め
て減圧0縮し・ 13gの固体(40u/〜)を待た。
微工研菌寄第6395号)の菌体を滅菌水120meK
懸濁した。その1・5−を、グリセリン3・09g1魚
粉2・O俤、旋酸カルシウム0.2チ(4N水酸化ナト
リウムに−17,4に調整)からなる液体培地110m
f!を入れた5 00 rniの三角フラスコに接種し
、27°Cで3日間回転振盪培養(毎分180回転)し
た。三角フラスコ20個の培養液を集め濾過して2,0
00#Ilの炉液(pH6,8,404u / ry、
)を得た。このr液を、アンバーライ)IRC−50
(40% Nn型)230mlをつめた塔にかけて抗生
物質を吸着せしめ、水洗後(+、000rte ) 0
・4N塩酸で溶出した。活性溶出液390 mlを集め
て減圧0縮し・ 13gの固体(40u/〜)を待た。
これを20 mlのメタノールで抽出し、減圧にI縮し
て7・25gの粗粉末(g l u / my )を得
た・これを0・2M塩化ナトリウム6□tにとかし、0
−2Mj3化ナトジナトリウム化したCM−セファチッ
クx C−25(200ml )の塔にがり、0.2M
塩化ナトリウム600.7!で洗浄後、0・4M[化ナ
トリウム600 mlで溶出した。活性溶出液390m
gを集めて減圧濃縮し、残渣を20 meのメタノール
で抽出し、抽出液を減圧濃縮して、1.24gの粗粉末
(343o / 17f )を得た6との粗粉末を2m
7Iの水にとかし、0.4MJ3化す) IJウムで平
衡化したCM−セファデック、x C25(90ml
) (7)塔にかけ、0・4M塩化ナトリウムで溶出し
た。活性溶出液200dを集めて減圧g+縮(〜、残渣
を15m1のメタノールで抽出し、抽出液を減圧濃縮し
て871〜の粗粉末(50511/■)を得た。これを
10−のメタノールにとかし、セファデックスLH20
(90ml )の塔にかけ、メタノールで展開した0活
性溶出液25mgを集めて、減圧濃縮し、629WVの
粉末(706υ/確)を得た(培養p液からの収車55
%)。
て7・25gの粗粉末(g l u / my )を得
た・これを0・2M塩化ナトリウム6□tにとかし、0
−2Mj3化ナトジナトリウム化したCM−セファチッ
クx C−25(200ml )の塔にがり、0.2M
塩化ナトリウム600.7!で洗浄後、0・4M[化ナ
トリウム600 mlで溶出した。活性溶出液390m
gを集めて減圧濃縮し、残渣を20 meのメタノール
で抽出し、抽出液を減圧濃縮して、1.24gの粗粉末
(343o / 17f )を得た6との粗粉末を2m
7Iの水にとかし、0.4MJ3化す) IJウムで平
衡化したCM−セファデック、x C25(90ml
) (7)塔にかけ、0・4M塩化ナトリウムで溶出し
た。活性溶出液200dを集めて減圧g+縮(〜、残渣
を15m1のメタノールで抽出し、抽出液を減圧濃縮し
て871〜の粗粉末(50511/■)を得た。これを
10−のメタノールにとかし、セファデックスLH20
(90ml )の塔にかけ、メタノールで展開した0活
性溶出液25mgを集めて、減圧濃縮し、629WVの
粉末(706υ/確)を得た(培養p液からの収車55
%)。
この粉末310りをメタノール1σIVcとかし、−夜
冷蔵庫に放置すると無色結晶が析出した(40rrq、
1,000 o / W )。この結晶[rnp
Ig’? −192゜5 C1C’〕1) 4− l110(c I+ メタノ
ール〕〕は、プルマイシン2塩酔塩のβ体に一致した。
冷蔵庫に放置すると無色結晶が析出した(40rrq、
1,000 o / W )。この結晶[rnp
Ig’? −192゜5 C1C’〕1) 4− l110(c I+ メタノ
ール〕〕は、プルマイシン2塩酔塩のβ体に一致した。
−5′l
Claims (1)
- 1・ ノぐチルス属に屈するゾルマイシン生産菌を好気
的に発育させ、その培養液からプルマイシンまたはその
酸付加塩を採取することを特徴とするプルマイシンまた
けその酸付加塩の製造法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP14483982A JPS5934895A (ja) | 1982-08-23 | 1982-08-23 | プルマイシン製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP14483982A JPS5934895A (ja) | 1982-08-23 | 1982-08-23 | プルマイシン製造法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5934895A true JPS5934895A (ja) | 1984-02-25 |
Family
ID=15371627
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP14483982A Pending JPS5934895A (ja) | 1982-08-23 | 1982-08-23 | プルマイシン製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5934895A (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS63130947A (ja) * | 1986-11-15 | 1988-06-03 | カール・フロイデンベルク | ねじり振動ダンパ |
JPS63172034A (ja) * | 1986-12-29 | 1988-07-15 | Bridgestone Corp | 液体封入防振装置 |
JPH06200981A (ja) * | 1985-09-07 | 1994-07-19 | Luk Lamellen & Kupplungsbau Gmbh | ねじり振動を減衰する装置 |
-
1982
- 1982-08-23 JP JP14483982A patent/JPS5934895A/ja active Pending
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06200981A (ja) * | 1985-09-07 | 1994-07-19 | Luk Lamellen & Kupplungsbau Gmbh | ねじり振動を減衰する装置 |
JPS63130947A (ja) * | 1986-11-15 | 1988-06-03 | カール・フロイデンベルク | ねじり振動ダンパ |
JPH0488746U (ja) * | 1986-11-15 | 1992-07-31 | ||
JPS63172034A (ja) * | 1986-12-29 | 1988-07-15 | Bridgestone Corp | 液体封入防振装置 |
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