JPS5928476A - 酵素固定化繊維及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は酵素固定化繊維及びその製造法に関するもので
あわ、さらに詳しくは、多孔性ｕＬ維にビニル系高分子
架橋重合体により酵素を包括固定化するに当たりグロー
放電プラズマの存在下で重合を行なうか、又はグロー放
電プラズマの存在下で重合を開始した後、該プラズマの
不存在下で後重合することを特徴とする酵素固定化繊維
及びその製造法に関する。

近年、医薬品工業、食品工業等に於いて、酵素反応の基
質特異性を利用した極めて有用な触媒として、酵素を工
業プロセスに応用し、益々発展を遂げつつある。従来の
酵素反応は水に溶解して反応を行なわしめ、反応終了後
の酵素と反応生成物との分離は容易でない。そのため酵
素を都度回収して再利用することは困難である。

したがって従来の工業プロセスではバッチ式を採用せざ
るをえないため酵素の利用効率は悪く、非常に不経済で
ある。そこで固定化酵素の検討がさかんに行なわれ、例
えば物理的吸着法、イオン結合法、共有結合法により反
応中に′酵素が浴出しないよう基材に結合させ固定化す
る方法、及び多孔性ゲルの中に物理的にとじ仁めるか、
又は高分子重合体で封入する包括法等が研究されている
。

工業的な規模として用いるには、長期間安定な連続操作
ができるような機械的強度を有し、かつ処理速度が大き
く、処理時間の経過とともに処理速度が低下しないこと
が望ましい。従来の形態はゲル状、フィルム状、粒状又
は粉末状でカラムに充填して用いらｉｔでいるが、自重
や通液抵抗に対する機械的な強度が低くく、圧密化によ
る通液速度の低下などの欠点を有する。

その欠点を解？１Ｍするためゲル状、フィルム状、粒状
又は粉末状の代りに、ｔａ維を支持体に用いた酵素固定
化繊維さらには酵素活性を有する菌体などの固定化忙も
繊ｆ４＃をＪ′ｆ′ｌいた検討がいくつかなされている
。

例えば特公昭５５−４８７９＋号公報、同５７−１７０
３８号公報、同５７−２０４０８号公報、特開昭５４−
１１２８８号公報、同５５−−８４３２５号公報では酵
素又は酵素活性を有する菌体などをＩ’ｉ！１１矩化し
た繊維又は製造法が提案されている。これらの繊維は高
級脂肪酸エステル化セルロース系繊維、アミノアセター
ル化ポリビニルアルコールの極細繊維、イオン父換繊維
もしくは活性エステル基を有するナイロン繊維である。

しかしながらｍ、ｍの製造において煩雑な工程を必要と
し、加えて酵素などの結合力は、繊維表面の活性基の種
類によっても非常に異なり、それぞれ適した組合わせが
必要である。酵素の脱離においても例えばイオン結合法
では緩衝液の９ｉ類あるいはＰＨの影響を受けやすぐ、
反応をイオン強度の高い状態で行うと酵素が担体から遊
離することがあり、酵素の失活に拘ねなく固定化の反応
条件が限られてくる。

又５ｙ累の安定性は蔗糖やグリセリン中で安定化するよ
うに、保護されでいない酵素は経済的九活性が低下しや
すく、前記のような繊維表面への固定では酵素は保護さ
れていない為、長期間活性を持続させるには困帷である
。

一方本発明者等は各種ビニル系単量体をプラズマ開始重
合法により重合を行ない、従来のものに比較して分子量
が格段に大きい直鎖状の水溶性重合体を得ており、これ
を繊維学会誌（繊維と工業）の第５７巻７号に発表した
。ここでプラズマ開始重合とは非平衡のグロー放電プラ
ズマを用いて重合を開始させ、かつ該プラズマの不存在
下に重合の大部分を完結させるものである。プラズマ開
始乗法による酵メ（の固定化では、数秒〜１分程度のプ
ラズマ照射でよく、しかもプラズマは気相のみに発生し
、ガンマ−線のようにモノマー中に透過しないので、酵
素のダメージはまっだくなく、加えて大部分の重合は上
記プラズマの不存在下、低温〜土部で行なうことが特徴
である。その為、酵素固定化の際、酵素の失活は最小限
にすることが可能である。

さらにプラズマ開始重合法により得られた重合体の分子
量が従来の重合法のものより格段に大きいので、架橋密
度が低くても架橋ゲルの強度は大きく、酵素の泡消性も
優れている。又酵素の活性及び安定性にも寄与している
ものと予想さ）する。本発明者らはアクリルアミドとＮ
、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミドなどでインベルタ
ーゼをペレット又はフィルム状にした固定化酵素を検討
しｒｌｆ、素の脱離がほとんどなくかつ大きな活性を有
するペレット及びフィルム状固定化酵素を得ることがで
き、これを日本化学会第４４秋串年会（１９８１）に発
表し、た。更に鋭意検討した結果、支持体に多孔性化！
４＃を用いることで、活性が島く、耐久性、機械的強度
を向上せしめることがで六本発明に到達したものである
。

本発明の目的は酵素活性が高く、長期間安定でかつ機械
的強度を有する酵素固定化繊維及び製造法を提供するに
ある。

即ち、本発明はプラズマ開始重合法で重合したビニル系
高分子架橋重合体により多孔性繊維罠酵素を包括固定化
してなる酵素固定化繊維であり、本発明方法は自己架橋
性の水溶性ビニル系単量体、又は水溶性ビニル系単量体
と該単量体に対して少なくとも０．０１７ｉｉ％の架橋
性単量体を含む水溶液に酵素を溶解した処理液を多孔性
繊維に付与し、次いでグロー放電プラズマにより重合せ
しめ、多孔性繊維に酵素を包括固定化することを特徴と
する。

本発明の多孔性繊維としては、０，１μ以上の孔径を有
する空孔の含有率が少なくともｏ１ａ４ｉ（１反応が低
下する。孔径は酵素が容易に入り込める程度の大きさが
必要であ１１基質の反応を行なわしめる際の通液性にも
影響するので、繊維の強度を保持１．ているかぎり大Ａ
い方が好ましい。

孔径が０１μ未満で１ｒま通液性を損い酵素の活性が不
充分であわ、酵素の含有量も低１下する。

なお、多孔性繊維の全空孔率Ｖｏ（ａＡ／Ｊ９）は繊維
と同一組成の十分に緻密に作成したフィルムの密度、Ｐ
（９／ｃＡ）を測定し、かつ写真法によって求めた繊維
の空孔を含んだ平均断面積８（ｃ＋＋りとの式より求め
た％繊維の空孔を含虜なり部分の真の平均断面積Ｓｏ　
（ｃａ）とから０式により求めておく。

Ｓｏ−■ ９０００００　Ｘア 但しＬ）ｅ目デニールである 更に、水銀ポロシメーターを用いて空孔分布曲線を作成
し、０１μ以上の孔径を有する空孔の含有率Ｖ　（ｃ−
／　ｇ　）を０式より算出し求められたものである。

但しαを」多孔性繊維の全便孔率■０に対する、０、１
　／１以上の孔径を有する空孔の含有率Ｖとの比率でイ
クる。

■　＝　α　ＶＯ 重合体はポリアミド、ポリエステル、ポリビニル系、ポ
リオレフィンなどの合成重合体であるが、特にポリビニ
ル系か好適である。ポリビニル系としてＣよ、例えはポ
リアクリロニトリル系、ポリビニルアルコール系、ポリ
塩化ビニル系、ポリ塩化ビニリデン系などである。′！
！た多孔性繊維を形成する重合体もしくは多孔性繊維の
表面に水酸基、アミド基、第４級アンモニウム塩を含む
基、カルボン酸基或いはその塩、又はスルホン酸基或い
はその塩を有する単量体をグラフト重合などの重合を行
なうか−ポリブレンド又は化学的処理などで上記官能基
を保有させても良い。

多孔性繊維の製造法に関して一例を挙げると、ビニル系
重合体と該重合体と相分離を生じ相互の界面に主として
空孔を形成する成分として酢酸セルローズ又はポリビニ
ルアルコール系訪導体とを混合紡糸する。繊維中に於い
て両者はその非相溶性から相分離し、その相分離による
空孔が発生し多孔性繊維が得られる。

本発明に於いて酵素の包括固定化は多孔性繊維の表面又
は内部もしくは表面及び内部で、繊維の利用形態はウェ
ッブ状、スライバー状又は単なる塊状の綿を・用いても
よく、父系、織布、編布、不織布などの形態で用いても
良く特に限定されない。

本発明に適用されるビニル系高分子架橋重合体はプラズ
マ開始重合法により重合したものであり、自己架橋性の
水溶性ビニル系単量体、又は水溶性ビニル系単量体と少
なくとも０．０１重量％の架橋性単量体よりなる水不溶
性重合体である。水溶性ビニル系単量体は重合可能な水
溶性ビニル系単量体であれば良く特に限定されなく、自
己架橋性の水溶性単量体の場合、例えば２−ヒドロキシ
アルキルアクリレート、２−ヒドロキシアルキルメタア
クリレート、ジエチレングリコールジメタアクリレート
、ポリエチレングリコールジメタアクリレート、メチロ
ールアクリルアミド又はメチロールメタクリルアミドな
どでは４？にその他の架橋性単量体を必要としない。そ
れ自身が架橋性単量体でない場合、少なくとも０．０１
重量％の架橋性単量体を加えてもよく、一般にはアクリ
ルアミド、メタクリルアミド、メトキシポリエチレング
リコールメタアクリレート、アクリル酸、メ夛クリル酸
、Ｐ−スチレンスルホン酸、２−メタアクリロイルオキ
ンスルホン酸、３−メタアクリロイルオキシ−２−ヒド
ロキシプロピルスルホン酸、アリルスルホン酸、メタク
リルスルホン酸並びにこれらの酸のアンモニウム塩、及
びアルカリ金属塩ニジメチルアミノエチルアクリレート
、ジメチルアミノエチルメタアクリレート、ジエチルア
ミンエチルアクリレート、２−ジニルビリジン及び４−
ビニルピリジン、並びにこれら塩基の塩酸塩、硝酸塩、
ジメチル硫酸塩、ジエチル硫酸塩又は塩化エチルの４　
、ＮＬ化物などが挙げられる。

本発明に適用される架橋性単量体はビニル系高分子架橋
重合体の水膨油性酵素の離脱などを考慮して適宜必要に
応じて少なくとも０．０１重量％加えることが可能であ
る。なお、一般の重合開始法、例えばラジカル重合開始
剤や紫外線を用いた乳化重合、懸濁重合、又は溶液重合
などでは得られた樹脂の分子凰が低いため０．１重量％
以下にすると可溶化したり、水膨潤状態で形くずれを起
こしたりベトツク現象がみられる。

しかし本発明重合体は超高分子量であるため、架橋性単
量体が少なくとも００１重量％であれば水膨潤状悲でも
強度を有する。

架橋性単量体としてはジビニルベンゼン、Ｎ。

Ｎ′−メチレンビスアクリルアミド、ジアリルアミン、
ジエチレングリコールジメタクリレート、ポリエチレン
グリコールジメタクリレート等のジビニル化合物、２−
ヒドロキシエチルアクリレート、２−ヒドロキシエチル
メタクリレート、２−ヒドロキシプロピルアクリレート
、２−ヒドロキシプロピルメタクリレート、グリシジル
アクリレート、グリシジルメタクリレート、メヂロール
アクリルアミド又はメチロールメタクリルアミドなどが
挙げられるがこれらに限定すれることはない。非水溶性
の架橋性単量体の場合適宜乳化剤を使用してもよく、特
に架橋性単量体としてＮ、Ｎ’−メチレンビスアクリル
アミドが好適である。

ビニル系高分子架橋重合体の付着量は多孔性繊維に対し
て１０重量％以上であり、好寸しくは３０重量％以上、
特に好ましくは５０重量％以上である。１０重重量未満
の場合、反応効率が低くなる。ビニル系高分子架橋重合
体の付着量は酵素の含有量、使用条件、使用目的々どを
考慮し２て適宜調整するのが好ましく、又多孔性繊維の
空孔ＷＡおよびビニル系高分子架橋重合体の架橋度、膨
潤度を適宜選択し調節できる。

本発明に使用できる酵素の種類は例えばインペルターτ
、ウレアーセグルコースイソメラーゼ、グルコースオキ
シターゼ、プロテアーゼ、ウリカーゼ、アシラーゼ、α
アミラーゼ、βアミラーゼ、コラゲナーゼ、アルギナー
ゼ、酸性プロテアーゼ、アルカリ性プロテアーゼ、Ｌ−
グルタミン酸脱炭酸酵素、リパーゼ、Ｄ−アミノ酸オキ
シター′ゼ、βグルコシダーゼ、グルコアミラーゼ、な
ど挙げることができるが特に限定されない。酵素の含有
量は固定化酵素＃　ｆａに対して０．１〜３０Ｊｌｉ員
％、好ましくは０．２〜２０重員％、特に好ましくは０
．４〜１５重量％含有する。０１重量％未満の場合、酵
素の反応効率が低いし、又３０重凰％を越えると得られ
た酵素固定化譲維の酵素の反応効率は優り、ているが、
連続使用時に酵素の溶出カニあ・；る。

本発明に適用される重合方法はグロー放電プラズマの存
在下で重合を開始した後、咳プラズマの不存在下で後重
合させるという所謂プラズマ開始重合であり、酵素をビ
ニル系高分子架橋重合体に固定化せしめる際に用いる。

一般に酵素は熱に不安定であり、又、水中においては比
較的安定であるが、有機溶媒中では不安定である０７′
ラズ１開始重合では、室温ないしそれ以下の温度で水を
媒体としてプラズマ照射を行ない重合開始した後、該プ
ラズマの不存在下室温で後重合をさせることで、酵素へ
のダメージを最小限にすることができる。

その点Ｘ線やγ線などの放射線重合の場合は、一般に物
質透過性がよく酵素に与えるダメージは太きい。又、本
発明はビニル系高分子架橋重合体により、酵素を物理的
に固定化しているもので、ｃＩｌ素の分子構造をそこな
うことなく固定化できる。

プラズマ開始重合では、一般には高分子黴で実質的に線
状のポリマーが生成されるが、本発明の場合は例えｄシ
′°ビニル性単量体等の架橋成分を使用すれば、架Ｉ＠
重合体が生成され石。イオン化ガスプラズマの生成け、
かがるプラズマを生成するための公知方法のいずり、に
よっても行なうことができる０例えばＪ−Ｒ・ホラノ・
ン（Ｈｏｌｌａｈａｎ）と八、Ｔ、ベル（Ｂｅ１ｌ）版
′プラズマ化学の応用技術′、ワイリー、二瓢−ヨーク
１９７４及びＭ、シｘ　７　（Ｓｌｘｅｍ）版′重合体
のプラスマ化学’ｆツカー１二ニーヨーク１９７６に記
載されている。即ち高周波発生器に連結された平行板電
極の間にモノマーを真空室下で入れ、真空室の外部又は
内部のいずれかの平行板を用いてプラズマを生成させる
ことができる。

また外部誘導コイルによって電場をつくらせ、イオン化
ガスのプラズマを発生させてもよく、また反対に荷電し
た電極に間隔をおいて直接真空室に入れてプラズマを生
成濱せてもよい。

本発明方法を更に詳述に説明すれば、水溶性ビニル系単
遁体及び架橋性単量体を水に溶解し千ツマー濃度が１０
〜６０重逍％のモノマー水溶液を調整し、さらに酵素を
溶解した処理液を作成する。該処理液を多孔性繊維に塗
布又は処理液中に浸漬するなどの処理をし、多孔性繊維
に酵素を含有するモノマー水溶液を付与する。

しかる後、ドライアイス−アセトンなどによる冷媒で冷
却して凍結し脱気を１０−１〜１０−４　）−ルで行な
う。凍結した七ツマー水溶液を徐々に暖ため、液状の小
滴が現われる状態に達するか、又はそれに相当する温度
に達した時上記方法にてプラズマ照射を行なう。通常は
２０〜２００ワＩ・ト、好ましくは４０〜１００ワツト
でグロー放電、をさせ水及び／又はモノマーをプラズマ
化させる０照射時間は通常１〜３６００秒、好ましくは
１０〜６０秒本あれば十分である。

プラズマ照射を行なった後に上記繊維を一定の温度に保
ち１時間〜１日放置させ全重合率の９０％以上の後重合
を行なわせる。プラズマ開始期間重合率は後重合に比べ
て著しく小さく、通常１〜２％を超えない。後重合温度
及び時間は使用する単量体種類によって異なり特に限定
されないが通常温度は５０℃以下、好しくは１゜〜３０
℃である。時間は１〜２５時間で十分である。単量体種
類によっては６０℃を超えるとることかあるので注意を
要する。

またプラズマ開始重合では、得られた高分子架橋重合体
中に単量体成分よりなるポリマー以外は何も含まないこ
とが他の重合法と異なる大きな特徴である。即ち他重合
法ではラジカル開始剤、［８剤、溶媒などが残存しゃす
く完全に除去することはむつかしいがプラズマ開始重合
ではそれらの添加剤を使用しないために必然的にポリマ
ーのみであ゛る。

かくして得られた高分子架橋重合体は酵素の抱括性力；
よ〈長期間安定で、ゲルの機械的強度も大きい。しかも
何の不純物をも含まないという従来法では得られない画
期的なものである。

さらに繊維を担体としているので、酵素の活性及び機械
的強度も極めて優れ、また、高分子架橋重合体と繊維と
の接着性が良く、酵素を包括した高分子架橋重合体は繊
維から離れることはない。

以下実施例により本発明を説明する。なお各例中圧おけ
る活性保持率は次のよう忙して求めた。

活性保持率（ん）＝　’Ｖ１／ｖｏ　ｘ、　１００酵素
固定化ｈＩ１．維を充分洗浄し、次いで１回目に酵素活
性を測定した時の酵素活性を■０　　とししかる後緩衝
液に該繊維を１０日間浸消しておいた後の酵素活性をｖ
ｌ　　とした。又、実施例中の空孔率は０．１μ以上の
孔径を有する空孔の含有率（ｃ、４／ｌ）を表わし、酵
素活性は基質の分解速度で表わした。

実施例 アクリロニトリル：アクリル酸＝９０：１０（重凰ン）
の組成を有するアクリルニトリル系重合体の２０ｆｉｉ
％ジメチルホルムアミド（以下ＤＭＦと略称する）溶液
ｉｏｕ〜６０部と平均重合度１４０の酢酸セルローズの
２０ｉ１に％ＤＭＦ溶ｇ、０〜４０部を混合せしめた紡
糸原液をＤＭＦ濃度４０％水溶液、１５℃の凝固浴中に
紡出し、１次延伸を５倍行ない、水洗後風乾した。次い
でアセトンに２５℃、２４時間浸漬し酢酸セルローズを
溶解除去し、水洗後９０℃で乾燥を行ない、繊度が１デ
ニールの種々の多孔性繊維及び非多孔性繊維を得た０ これら多孔性繊維又は非多孔４！Ｕ、繊維各１ｇを内径
５０ＩＪ、長さ１５０　＊ＩＩの七ノくラブルフラスコ
に挿入し、　アクリルアミド３ｇ、Ｎ、Ｎ’　−メチレ
ンビスアクリルアミド０．０１．９を蒸留水３　ｎｒＱ
　Ｉｔ（溶解した後、・ｆンペルターゼ（活性：ショ糖
４１／ｍＱ、２０℃、３０分ＰＨ４）４ｍｆｆｉを加え
た上記フラスコと並列に連結したフラスコに入れ、こｒ
ｔらフラスコ内を真空ポンプによりＵ、　Ｑ　１　ｔ、
ｏｒｒ　　に減圧した後、該処理液を繊維に圧入しで、
処理液を吸液又は付着せしめた。

次にこの繊維を・入れたままセパラブルフラスコをドラ
イアイス−アセトンで冷却し、ｔ＃！ａを凍結せしめ内
部を０．１　ｔｏｒｒに減圧した。その後インターナシ
ョナル・プラズマ・コーポレーション・モデＡ３００１
の高周波発生器を連結した一対の外部平行電極間に上記
フラスコを挿入し１υＵＷの電力でグロー放電プラズマ
を６０秒間照射した。しかる後グロー放電を停止させ、
封管後２５℃の恒温槽内に２４時間放置し後重合せしめ
酵素固定化繊維を得た。

該酵素固定化ｔ＆維を充分水洗した後、１０ｗｔ％、シ
ョ糖を含有する０、　２　Ｍ酢酸緩衝液（ＰＨ４，６）
１０＋ＪＫ浸漬し、２５℃で９０分間加水分解反応を行
ない、加水分Ｍ鹿を比・施光度により定量し求めた０又
酵累固定化繊維の安定性を調べる為、この値に対し上記
ＢＨＪ液にｒｉ￥素固定化繊維を１０日間浸漬しておい
た後の酵素活性の比を活性保持率として示した。結果を
第１表に示す。

又比較例として、同様の処理によって七ツマー酵素溶散
を多孔性繊維に吸着させた後、プラズマ開始重合を行な
わなかったものを示す。

第１表 第１表より、多孔性繊維では酵素活性大きく、活性保持
率も高いことが判る。又プラズマ開始重合を行なわなか
った場合はとんど酵素活性を示さない。

実施例２ アクリルニトリル：アクリル酸メチル：メタリルスルホ
／酸ソーダ＝　９０．５　：　ｓ６：・０．９（１貝嶌
）の組成を有するアクリロニトリル系重合体の２２．５
重ｆｉｔ　５ＸＩＪＭ　Ｆ溶液８０部と平均重合度１４
０の酢酸セルロースの２０ｆｉｉ％Ｄ）ＡＦ溶液２０部
を混合せしめた紡糸原液を０Ｍ１８度５５当水溶液、１
５℃の凝固洛中に紡出し、−メチレンビスアクリルアミ
ド００３ｇを蒸留水７　ｍＱ　　に溶解した水溶液に溶
解した処理液で、実施例１と同様の処理及び重合を行な
い酵素固定化繊維を得た。

該酵素固定化繊維を充分水洗した後、１ｗ１％デンプン
水溶ｇ　１０　ｍＱに浸漬し、６０℃で２４時間加水分
解反応を行ない、加水分解率を比施光度により定量し求
めた。結果を第３表に示す。

第　　５　　表 尚、付着量は繊維に対する酵素及び高分子−一合体の重
量％であり、反応率は３０℃、２４時間後の反応率であ
る。第３表のようにプラズマ開始重合で生成する高分子
で包括した場合には架橋密度を小さくすることによって
、超高分子量ポリマーである為に酵素の溶出率を小さく
し、かつ高分子の基質（デンプン）に対しても活性を発
揮することができる。

カネボウ合繊株式会社 手続補正書 特ｆｆｌ庁長官若杉和大殿 １、事件の表示 ；も和５７年特肝願第１６９５８８号 ２発男の名称 酵素固定化繊維及びその製造法 ろ、補正をする者 事件との関係　　特ｒ「出願人 住所　東京都墨田区墨田五丁目１７番４号〒５己４　大
阪市部島区友５！！（町１丁目５番９０秒鐘紡株式会社
特許部 電話（０６）９２１−１２５１ ４補正により増加する発明の数　　　な　し５補正の対
象 ６、補正の内容 （１）　　明細書の特＃′１請求の範囲の項の記載を別
紙の通り補正する。

（２）明細書の記載を次の通り補正する。

別　　　紙 特許請求の範囲 （１）　　ビニル系高分子架橋重合体により多孔性繊維
に酵素を包括固定化してなる酵素固定化繊維。

（２）　　酵素を多孔性ｗｔｍの表面及び内部に包括固
定化した特許請求の範囲第１項記載の繊維。

（６）　　ビニル系高分子架橋重合体がグロー放電プラ
ズマにより重合して得られたものである特許請求の範囲
第１．項記載の繊維。

（４）重合がプラズマ［＋ＩＪ始重合である特ｆｆＦ請
求の範囲第５項記載の繊維。

（５）　　ビニル系高分子架橋重合体が自己架橋性の水
溶性ビニル系単量体よりなる特許請求の範囲第１項記載
の繊維。

（６）　　自己架橋性の水溶性ビニル系ｑｔｉ体が、２
−ヒドロキシアルキルアクリレート、又は２−ヒドロキ
シアルキルメタクリレートであるｎ　ＩＦ　Ｍ　３＆の
範囲第５項記載の繊維。

（ハ　ビニル系高分子架橋性単りｆｔ体が水溶性ビニル
系単量体と少々くともＬｌ、０１重量％の架橋性単量体
とからなろ水不溶性重合体である特許請求の範囲第１項
記載、の繊Ｊｌｌｌ　。

（８）　　水溶性ビニル系単量体がアクリルアミド、ア
クリル酸、２−アクリルアミド−２−メチフレプロ／（
ンスルボン酸である特許請求の範囲第７項記載の繊維。

（９）　　多孔性繊維が０１μ以上の孔径を有する空孔
の含有率が少々くともＤ１ｃイ／ｆである特許請求の範
囲第１項記載の＊維。

（１０）多孔性繊維が合成重合体よりなる特許請求の範
囲！３１項記載の繊維 （１１）多孔性ｒ′＆、維がビニル系合成繊維でるる特
許請求の範囲第１項記載の繊維。

（１２Ｊ　　ビニル系高分子架橋重合体の付着量が多孔
性繊維に対して１０ｆｆｉ扱％以上である特ｆｆｌ−請
求の範囲第１項記載の１Ｊ１之維。

（１ろ）酵素を０．１〜６０重量％含有する特ｒ［δ請
求の範囲＠１項記載の繊維。

（１４）自己架橋性の水溶性ビニル系単量体、又は水溶
性ビニル糸車爪体と該単量体に対して少なくとも０．０
１重量％の架橋性単量体を含む水溶液に酵素を溶解した
処理液を多孔性繊維に付与し、次いでグロー放電プラズ
マにより重合せしめ、多孔性繊維に酵素を包括固定化す
ることを特徴とする酵素固定化繊維の製造法。

（１５）酵素を多孔性繊維の表面及び内部に包括固定化
する特ＩＦ訴求のね間第１４項記載の製造法。

（１６）　　１１１１合がプラズマ開始重合である特許
請求の範囲第１４項記載の製造法。

（１７）プラズマ開始重合がグロー放電プラズマと接触
せしめた後、該プラズマの不存在下５０℃以下の温度で
後重合せしめ、その重合率が全型合手の９０％以上であ
る特許請求の範囲第１６項記載の製造法。

（Ｉａ）　　自己架橋性の水溶性ビニル系単量体が２−
ヒドロキレアルキルアクリレート又は２−ヒドロキンア
ルキルメタクリレートである特許請求の範囲第１４項記
載の製造法。

（１９）水溶性ビニル系単量体がアクリルアミド、アク
リル酸、２−アクリルアミド−２−′メチルプロパンス
ルホン酸である特許請求の範囲ダＧ１４項記載の製造法
。

（り）多孔性繊維が０．１μ以上のＪＬ径を有する空（
しの含有率が少な（ともｏ、ｔｃ７／ｇである特許請求
の範囲第１４項記載のＶ造法。

Ｃ２１］　　多孔性繊維が合成重合体よりなる特１ｒＦ
Ｍ求の範１１１！第１４項記載の製造法。

の　多孔性繊維がビニル系合成Ｍｌ！躬１である特許請
求の範囲第１４項記載の製造法。

手　　続　　補　　正　　書 １．事件の表示 昭和５７年特許願第１３９５８８号 ２、発明の名称 酵素固定化＃武雄及びその製造法 ５補正をする者 事件との関係　　特許出願人 住所　　　東京都墨田区墨田五丁目１７番４号〒５３４
　　大阪市部島区友淵町１丁目５番９０号鐘紡株式会社
特許部 電話（０６）９２１−１２５１ ＆補正の対象 明細書の「特許請求の範囲」の欄及び 「発明の詳細な説明」の欄 ６、補正の内容 （１）　　明細書の特許請求の範囲の項の記載を別紙の
通り補正する。

（２）　　明細書の記載を次の通シ補正する。

（３）　　明細書第９頁第１１〜１２行の「プラズマ開
始重合法で重合したＪの記載を削除する。

（４）　　明細書第１２頁第１６行の記載を「体はグロ
ー放電プラズマ重合法好ましくはプラズマ開始重合法に
より重合したもので」と補正する。

別　　　紙 特許請求の範囲 （１）　　ビニル系高分子架橋重合体によシ多孔性繊維
に酵素を包括固定化してなる酵素固定化繊維。

（２）　　酵素？、多孔性繊維の表面及び内部に包括固
定化した特許請求の範囲第１項記載の繊維。

（５）　　ビニル系高分子架橋重合体がグロー放電プラ
ズマにより重合して得られたもので、ある特許請求の範
囲第１項記載の繊維。

（４）　　重合がプラズマ開始重合である特許請求の範
囲第３項記載の繊維。

（５）　　ビニルＸ高分子架橋重合体が自己架橋性の水
溶性ビニル系単］体よりなる特許請求の範囲第１項記載
の繊維。

（６）　　自己架橋性の水溶性ビニル系単量体が、２−
ヒドロキシアルキルアクリレート、又は２−ヒドロキシ
アルキルメタクリレートである特許請求の範囲第５項記
載の繊維。

（７）　　ビニル系高分子架橋重合体が水溶性ビニル系
ａｔ　Ｈ体と少なくとも０．０１重量％の架橋性単」休
とからなる水不溶性重合体である特許請求の範囲第１項
記載の繊維。

（８）　　水溶性ビニル系単量体がアクリルアミド、ア
クリル酸、２−アクリルアミド−２−メチルプロパンス
ルホン酸である特許請求の範囲第７項記載の繊維。

（９）　　多孔性繊維がＱ、　１μ以上の孔径を有する
空孔の含有本が少なくともｏ、　１ｃａ　／　ｇである
特許請求の範囲第１項記載め繊維。

（１０）多孔性繊維が合成重合体よりなる特許請求の範
囲第１１記載の繊維。

（１１）多孔性繊維がビニル系合成繊維である特許請求
の範囲第１項記載の繊維。

（１２）　　ビニル系高分子架橋重合体の付着量が多孔
性繊維に対して１０重Ｍチ以上である特許請求の範囲第
１項記載の繊維。

（１５）酵素を０１〜５０重ル係含有する特許請求の範
囲第１項記載の繊維。

（１４）自己架橋性の水溶性ビニル系力を量体、又は水
溶性ビニル系単量体と該単量体に対して少なくとも００
１重Ｍ−の架橋性単量体を含む水溶液に酵素を溶解した
処理液を多孔性ｌｆＩ／ｃ維に付与し、次いでグロー放
電プラズマによ如重合せしめ、多孔性繊維に酵素を包括
固定化することを特徴とする酵素固定化繊維の製造法。

（１５）酵素を多孔性繊維の表面及び内部に包括固定化
する特許請求の範囲第１４項記載の製造法。

（１６）重合がプラズマ開始重合である特許請求の範囲
第１４項記載の製造法。

（１７）プラズマ開始重合がグロー放電プラズマと接触
せしめた後、該プラズマの不存在下５０℃以下の温度で
後重合せしめ、その組合率が全重合率の９０％以上であ
る特許請求の範囲第１６項記載の製造法。

（１日）自己架橋性の水溶性ビニル系単量体が２−ヒド
ロキシアルキルアクリレート又は２−ヒドロキシアルキ
ルメタクリレートである特許請求の範囲第１４項記載の
製造法。

（１９）　　水ｍ性ビニル系凧量体がアクリルアミド、
アクリル酸、２−アクリルアミド−２−メチルプロパン
スルホン酸である特許請求の範囲第１４項記載の製造法
。

Ｃ’；！Ｄ）多孔性繊維が０１μ以上の孔径を有する空
孔の貧有率が少なくともｏ、　ｉ　ｃＪ　／　ｌ／であ
る特許請求の範囲第１４ｍ記載の製造法。

（２１）多孔性繊維が合成】「合体よりなる特許請求の
範囲第１４項記載の製造法。

（２２）多孔性繊維がビニル系合成繊維である特許請求
の範囲第１４項記載の製造法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　ビニル系高分子架橋重合体により多孔性繊維
   に酵素を包括固定化してなる酵素固定化繊維。 （２）　　酵素を多孔性繊維の表面及び内部に包括固定
   化した特許請求の範囲第１項記載の繊維。 （３）　　ビニル系高分子架橋重合体がグロー放電プラ
   ズマにより重合して得られたものである特許請求の範囲
   第１項記載の繊維。 （４）　　重合がプラズマ開始重合である特許請求の範
   囲第３項記載の繊維。 （５）　　ビニル系高分子架橋重合体が自己架橋性の水
   溶性ビニル系単量体よりなる特許請求の範囲第１項記載
   の繊維。 （６）　　自己架橋性の水溶性ビニル系単量体が、２−
   ヒドロキシアルキルアクリレート、又は２、特許請求の
   範囲第５項記載の繊維。 （７）　　ビニル系高分子架橋性単鼠体が水溶性ビニル
   系単量体と少なくとも０，０１重量％の架橋性単量体と
   からなる水不溶性重合体である特許請求の範囲第１項記
   載の繊維。 （８）　　水溶性ビニル基型量体がアクリルアミド、ア
   クリル酸、２−アクリルアミド−２メチルプロパンスル
   ホン酸である特許請求の範囲第７項記載の繊維。 （９）　　多孔性繊維が０．１μ以上の孔径を有する空
   孔の含有率が少なくとも０．１ｉ／、Ｐである特許請求
   の範囲第１項記載のｌ＃を維。 （１０）　　多孔性繊維が合成重合体よりなる特許請求
   の範囲第１項記載の繊維。 （１１）　　多孔性繊維がビニル系合成繊維である特許
   請求の範囲第１項記載の繊維。 （１２）　　ビニル系高分子架橋重合体の付着量が多孔
   性繊維に対して１０重景％以上である特許請求の範囲第
   １項記載の繊維。 の範囲第１項記載の繊維。 （１４）　　自己架橋性の水溶性ビニル系単量体、又は
   水溶性ビニル系単量体と該単量体に対して少なくとも０
   ．０１重量％の架橋性単量体を含む水溶液に酵素を溶解
   した処理液を多孔性繊維に付与し、次いでグロー放電プ
   ラズマにより重合せしめ、多孔性繊維に酵素を包括固定
   化することを特徴とする酵素固定化ｍ、維の製造法。 （１５）　　酵素を多孔性ｔ＊　維の表面及び内部に包
   括固定化する特許請求の範囲第１４項記載の製造法。 （１６）重合がプラズマ開始重合である特許請求の範囲
   第１４項記載の製造法。 （＋７）　　プラズマ開始重合がグロー放電プラズマと
   接触せしめた後、該プラズマの不存在下５０℃以下の温
   度で後重合せしめ、その重合率が全重合率の９０％以上
   である特許請求の範囲第１６項記載の製造法。 （匍　自己架橋性の水溶性ビニル系単量体が２−ヒドロ
   キシアルキルアクリレート又は２−ヒドロキシアル今ル
   メタアクリレートである特許請求の範囲第１４項記載の
   製造法。 （１９）　　水溶性ビニル系ｉＢ体がアクリルアミド、
   アクリル酸、２〜アクリルアミド　２メチルプロパンス
   ルホン酸である特許請求の範囲第１４項記載の製造法。 （２Ｊ）　　多孔性繊維が０．１μ以上の孔径を有する
   空孔の含有率が少なくとも０１ｏ＋ｌ／ｇである特許請
   求の範囲第１４項記載の製造法□ （２１）　　多孔性繊排が合成重合体よりなる特許請求
   の範囲第１４項記載の製造法。 （２２）　　多孔性ｆｒ１１．　維がビニル系合成繊維
   である特許請求の範囲第１４項記載の製造法。