JPS5920353B2 - 新規抗生物質アクレアシンＤαおよびその製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規抗生物質アクレアシンＤαおよびその製
造法に関する。

本発明者らは、沖縄県石垣市於茂登の山林土壌より分離
したアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｅ）属に属
する糸状菌Ｍ４８４５菌が、その培養液およびその菌体
内にキヤンジタ．アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂ
ｉｃａｎｓ）などの酵母類に極めて低濃度で増殖を阻止
し、また皮膚糸状菌や植物病原糸状菌などの糸状菌類に
対して極めて低濃度にて良好に増殖抑制を示す新規抗生
物質を生産することを見出し、該抗生物質を抗生物質ア
クレアシンＤαと命名した。

上記の糸状菌Ｍ４８４５菌の肉眼的および顕微鏡的観察
に基く各種培地上における培養の特徴は次に記載する通
りである。

Ａ肉眼的観察 １アベツク寒天培地 生育は速く、２６℃、１０日間で直径５５〜６５］！ｌ
に達する。

集落表面は平担で薄く、培養初期には白色であるが、分
生胞子が形成され成熟するにつれて次第にフオーン（Ｆ
ａｍｎ，ｈｕｅ４ｌｇ）となる。

分生胞子は非常に多く形成される。集落周辺部はややく
もの巣状（アラクノイドＡｒａｃｈｎＯｉｄ）。裏面の
色は無色〜ペールイエロ一（ＰａＩｅＹｅｌｌ−０ｗ，
ｈｕｅ／Ｃａ）。拡散性色素および浸出液は出さない。
無臭。３７℃での生育は遅く、１０日間で１４〜１７詣
〇 ２麦芽汁寒天培地 生育は速く、２６℃、１０日間で直径６０〜７０１１＆
こ達する。

集落表面は平担で薄く、培養初期には白色であるが、分
生胞子が形成され成熟するにつれてビーバ一（Ｂｅａｖ
ｅｒ，ｈｕｅ４ｌｌ）となる。分生胞子は非常に多く形
成される。集落周辺部は滑らかないしほぼ滑らか。裏面
の色はライトイエロ一（ＬｉｇｈｔＹｅｌｌＯｗ，ｈｕ
ｅ／１／２Ｃａ）。拡散性色素および浸出液は出さない
。無臭。３７℃での生育は遅く、１０日間で１０〜１２
詣。

３・くレイシヨ．ブドウ糖寒天培地 集落周辺部が明瞭なくもの巣状である以外は、生育状態
はほとんど麦芽汁寒天培地の場合と同じである。

注）色の表示記載は１９５８年、コンテイナ一．コーポ
レーシヨン．オブ．アメリカ（ＣＯｎｔａｉｎｅｒＣＯ
ｒｐＯｒａｔｉＯｎＯｆＡｎｌｅｒ−Ｉｃａ）発行「カ
ラー．ハーモニ一．マニユアル（ＣＯｌＯｒＨａｒｍＯ
ｎｙＭａｎｕａｌ）の表示法に従つた。

Ｂ顕微鏡的観察 分生胞子頭は最初球形、後に放射状に割れ込みを生じ数
本の円筒状となる。

分生胞子柄は長さ４００〜１５００μ、幅８〜１３μ、
無色ないし淡黄色、壁は平滑で、やや厚く、厚さ１．５
〜２．０μ。頂のうは淡褐色で球形ないし亜球形で直径
３０〜７５μ、多くは４０〜６０μ。梗子は単列で６〜
８×３〜４μのものが密に並んでいる。分生胞子は球形
ないし楕円形と形に幅がある。３．５〜５．０Ｘ３．０
〜３．５μ、淡黄褐色、壁は粗面。

Ｃ生育条件 生育温度は１３〜４０℃、生育のＰＨは２〜９、最適生
育温度は２９〜３１℃、最適生育ＰＨは３〜５である。

上記の詳しい観察の結果、本菌はアスペルギルス属の菌
学的性状（農芸化学会誌、２７，８０６〜８０９（１９
５３）、ＴｈｅＧｅｎｕｓＡｓｐｅｒｇｉ一１１Ｕｓｌ
３２８〜３３１（１９６５））における黒褐色系統の分
生胞子を持つアスペルギルス．ニガ一．グループ（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒＧｒＯｕｐ）に属する菌
と認められ、さらにこのグループは梗子が単列か２列か
によつて２つのグループに分られ、本菌は単列のグルー
プに属する。

また梗子が単列である菌としては、アスペルギルス．ジ
ヤポニクス（ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｊａｐＯｎｉｃｕ
ｓ）とアスペルギルス．アクレアタス（Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓａｃｕｌｅａｔｕｓ）が知られており、アスペ
ルギルス．ジヤポニクスは分生胞子が球形ないし亜球形
、大きさが３〜３．５μ、頂のうが１５〜４５μ、多く
は２０〜３５μであり、アスペルギルス．アクレアタス
は分生胞子が亜球形ないし楕円形、大きさが４．５〜５
Ｘ３〜３．５μ、頂のうが３５〜１００μ、多くは６０
〜８０μであつて、本菌はアスペルギス．アクレアタス
の菌学的性状に極めて似ており、さらにアメリカン．タ
イプ．カルチヤーコレクシヨン（ＡｎｌｅｒｉｃａｎＴ
ｙｐｅＣｕ！ＴｕｒｅＣＯｌｌｅｃｔｉＯｎ）よりのア
スペルギルス．アクレアタスＡＴＣＣｌＯ３４と比較し
た結果、極めてよく一致し、本菌はアスペルギルス．ア
クレアタスＭ４８４５と命名し、さらに本菌は工業技術
院微生物工業技術研究所に微生物受託番号「微工研菌寄
第４０２３号（ＦＥＲＭ−Ｐ／１６４０２３）」として
申言青されている。本発明は上記の知見に基いて完成さ
れたものであつて、下記の物理、化学的性質を有する抗
生物質アクレアシンＤα：１ノ 呈色反応 パウリ一反応、フオーリン反応、過沃素酸一ベンチジン
反応、過マンガン酸カリウム脱色反応に陽性、モーリツ
シユ反応、ビウレツト反応、キサントプロテイン反応、
トレンス反応に凝陽性、ニンヒドリン反応、ベネデイク
ト反応、坂口反応、エールリツヒ反応、塩化第２鉄反応
、ドラーゲンドルフ反応、２．４−ジニトロフエニルヒ
ドラジン反応に陰性溶剤に対する溶解性 低級アルコールに可溶、酢酸エチルに僅かに溶解、アセ
トン、クロロホルム、ｎ−ヘキサン、石油エーテル、水
に難溶性、塩基性、酸性、中性の区別 ｎ−ブタノール溶液からＰＨ２〜９の水層に移動しない
ことより中性物質と推定される。

物質の色 白色 安定性 ３７℃、２０時間、酸性および中性で安定であり、アル
カリ性で不安定。

紫外部吸収スペクトル メタノール中で測定したアクレアシンＤα（濃度４０γ
／ＭＯの紫外部吸収スペクトルはλＭａｘｌ％２７８ｎ
ｍｓＥ１ＣＴＬ−｛？５に極大吸収、およびλＭａｘ２
２６ｎｍ．Ｅ，一一１３８、λＭａｘ２８４ｎｍ，．Ｅ
｝＝−１４．７にシヨルダ一を有する。

液体クロマトグラフイ一のリテンシヨンタイムＲｔ＝９
．２分（カラム径５×５００ｍｍ１担体ポリスチレン樹
脂、展開溶媒０．０１％トリエチルアミン含有８５％メ
タノール水溶液、カラム温度５５含Ｃ）、および、アス
ベルギルス属に属する抗生物質アクレアシンＤα生産菌
を培地に培養し、その培養物から抗生物質アクレアシン
Ｄαを採取することを特徴とする新規抗生物質アクレア
シンＤαの製造法である。本発明における使用菌として
は、上記のアスベルギルス・アクレアタスＭ４８４５菌
はその一例であつて、本菌だけでなく、上記の物理、化
学的性質を有するアクレアシンＤα（以下単にアタレア
シンＤαと称す）を得るものであればよく、またアクレ
アシンＤαを生産もしくは合成し得る菌はすべて本発明
において使用することができ、また本発明のアクレアシ
ンＤαは化学的手段を使用して得られたものであつても
よい。

本発明を実施するに当つて、一例として挙げれば、まず
アスペルギルス属に属するアクレアシンＤα生産菌を通
常の抗生物質を生産する方法で培養する。

この際の培養の形態は液体培養でもよく、固体培養でも
よく、工業的にはアクレアシンＤα生産菌の胞子懸濁液
または１〜２日間培養した培養液を生産用培地に接種し
、深部通気撹拌培養を行なうのが有利である。培地の栄
養源としては、微生物の培養に通常使用されるものが広
く使用され得る。炭素源としては同化可能な炭素化合物
であればよく、例えばブドウ糖、シヨ糖、乳糖、麦芽糖
、デンプン、デキストリン、糖蜜、グリセリンなどが使
用される。窒素源としては利用可能な窒素化合物であれ
ばよく、例えばコーン・スチーブ・りカー、大豆粉、綿
実粉、小麦グルテン、ペプトン、肉工キズ、酵母工キズ
、酵母、カゼイン分解物、アンモニウム塩、硝酸塩など
が利用される。その他、リン酸塩、マグネシウム、カル
シウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛、鉄、マンガンな
どの塩類が必要に応じて使用される。培養温度は菌が発
育しアクレアシンＤαを生産する範囲内で適宜変更し得
るが、好ましくは２５〜２８℃である。

培養時間は条件によつて多少異なるが、通常７０〜９０
時間程度であつて、アクレアシンＤαが最高力価に達す
る時期を見計らつて適当な時期に培養を終了すればよい
。このようにして得られたアクレアシンＤα生産菌の培
養物中において、アクレアシンＤｄは菌体内に大部分蓄
積され、また一部菌体外にも産出する。

またアクレアシンＤαを採取するに際してはキヤンジダ
、アルビカンスまたはトリコフアイトン・アステロイデ
ス（ＴｒｉｃｈＯｐｈｙｔＯｎａｓｔｅ−ＲＯｉｄｅｓ
）を被検菌とするカツプ法またはペーパーデイスク法に
よる生物検定により定量される。次いでこの培養物から
アクレアシンＤαを採取するのであるが、菌体内に蓄積
されたアクレアシンＤαを採取するのが好ましい。次に
アクレアシンＤαの分離精製手段の一例を示す。すなわ
ち、アクレアシンＤα生産菌を前述の如く培養して得ら
れる培養物からアクレアシンＤαを多量に含有する菌体
をドラムフイルタ一、フイルタープレスまたは遠心分離
機などで採取し、得られた湿菌体にアルコールやアセト
ンなどの親水性溶剤を加えて抽出し、得られた抽出液の
溶剤を留去し、これを水で希釈し、さらにこの希釈液に
ｎ−ブタノールや酢酸エチルなどの溶剤を加えて再抽出
し、抽出液を水洗後減圧濃縮して油状物を得る。この油
状物は活性アルミナ、シリカゲルなどを使用する吸着ま
たは分配クロマトグラフイ一に付し、その活性分画を得
、これを減圧濃縮して各種溶媒系における薄層クロマト
グラフイ一で単一スポツトを与える粉末を得る。このよ
うにして得られるアクレアシンＤαの物理、化学的性質
について、次に述べる。

２．分子量 ラスト法：１２４３ アミノ酸分析：（５５５）ｎ （アクレアシンＤα２．６Ｔｆｉ９の加水分解物より４
．８μＭＯｌのスレオニンを検出した）ゲル涙過法：８
５０±１００ （セフア゛デツクスＬＨ−２０（フアルマシアフアイン
．ケミカル社製）を使用し、エタノールで展開し、分子
量既知の抗生物質を同時に展開し、その溶出位置から推
定）３．融点 １５９〜１６２℃ （明瞭な融点は示さない） ４．比施光度 〔α〕２３＝−４５．７）（Ｃ＝０．２５メタノーノり
Ｄ ・５．呈色反応 パウリ一反応、フオーリン反応、過沃素酸一ベンチジン
反応、過マンガン酸カリウム脱色反応に陽性、モーリツ
シユ反応、ビウレツト反応、キサントプロテイン反応、
トレンス反応に凝陽性、ニンヒドリン反応、ベネデイク
ト反応、坂口反応、エールリツヒ反応、塩化第２鉄反応
、ドラーゲンドルフ反応、２．４−ジニトロフエニルヒ
ドラジン反応に陰極性を示す。

６．溶剤に対する溶解性 低級アルコールに可溶、酢酸エチルに僅かに溶解、アセ
トン、クロロホルム、ｎ−ヘキサン、石油エーテル、水
に難溶性である〇７．塩基性、酸性、中注の区別 アルカリ性で分解を起すため滴定は不可能であり、また
難溶性のため電気泳動で移動せず、その区別は定かでな
いが、そのプタノール溶液からＰＨ２〜９の水層に移動
しないことより中性物質と推定される。

８．物質の色 白色結晶性粉末 ９．安定性 ３７℃、２０時間、酸性および中性で安定である。

アルカリ性で不安定。１０．紫外部吸収スペクトル メタノール中で測定したアクレアシンＤα（濃度４０γ
／ｍｌ）の紫外部吸収スペクトルは第１図に示す通りで
あつて、λＭａｘ２７８ｎｍｌｌ％Ｅ ＝１７．５に
極大吸収およびλＭａｘ２２６ｌＣＴｒＬｌ％ＮｍＥ−
１３８、λＭａｘ２８４ｎｍ Ｅｌ？＝１１ＣＴｎ４．７にシヨ）レターを有する
ゝ１ＣＷＬ゜０１１．赤外部吸収スペクトル ＫＢｒ法によるアクレアシンＤαの赤外部吸収スペクト
ルは第２図に示す通りである。

１２．Ｒｆ値 シリカゲル薄層クロマトグラフイ一（イーストマンコダ
ツク社製、イーストマンクロマトグラムシート６０６０
）：クロロホルムーメタノール（１０：３）でＲｆ値０
．４６、酢酸エチルーメタノノール：′７＋（（９ｎ：
Ａ゜ｌ）アＴ）ｔ！大０．３５、酢酸エチル−ｎ−ブタ
ノール（３：１）水飽和でＲｆ値０．４２。

（ただし、検出はキヤンジダ、アルピカンスを使用した
３バイオオートグラフイ一および沃素蒸気による。）１
３．液体クロマトグラフイ一によるリテンシヨンタイム
（Ｒｔ）アクレアシンＤα５〜／ｍｌメタノール溶液８
μｌを、液体クロマトグラム（カラム径５Ｘ５００ｍｍ
１担体ポリスチレン樹脂、展開溶媒０．０１％トリエチ
ルアミン含有８５％メタノール水溶液、カラム温度５５
゜Ｃ：日立製作所製使用）にチヤージして、そのリテン
シヨンタイム（Ｉ｛ＥｔｅｎｔｉＯｎｔｉｍｅ）は９．
２分であつた。

１４．加水分解物 アクレアシンＤαを６Ｎ塩酸、１１０℃にて加水分解せ
しめ、これにエーテルを加えて抽出し、その抽出液をガ
スクロマトグラムにチヤージせしめて遊離脂肪酸の定性
検出した結果、ミリスチン酸を検出した。

１５．アミノ酸組成 ６Ｎ塩酸、１１『Ｃｌ２Ｏ時間加水分解し、ニンヒドリ
ン陽性成分を自動アミノ酸分析計（日本電子社製ＪＬＣ
−５ＡＨ型分析計）にて調べた結果、第３図に示す通り
であり、スレオニンとニンヒドリン陽性成分数種を検出
した。

本発明で得られるアクレアシンＤαは、その物理、化学
的性質より水難溶性ペプタイド様物質と認められ、既知
抗生物質においてメタノール中の紫外部極大吸収が２７
８ｍμ付近を有するアクレアシンＤαと類似の抗生物質
を検索すれば、ミロリジン（ＭｙｒＯｒｉｄｉｎｌ特公
昭４５−１２２７６号）、アスレスタチン（Ａｔｈｌｅ
ｓｔａｔｉｎｌ特公昭４１−１２６８号）、モニリン（
ＭＯｎｉｌｉｎｌ武田研究年報１４，８〜１０，１９５
５）、オリザマイシン（０ｒｙｚａｒｒ）Ｙｃｉｎｌ特
公昭３８−２８００号）、サラマイセチン（Ｓａｒａｍ
ｙｃｅｔｉｎｐＡｎｔｉｍｉｃｒＯｂｉａｌａｇｅｎｔ
ｓａｎｄｃｈｅｍＯｔｈｅｒａｐｙｌｌ９６ｌ，４３６
〜４４４）、ウナマイシン（Ｕｎａｍｙｃｉｎ，Ｔｈｅ
ＪＯｕｒｎａｌＯｆＡｎｔｉｂｉＯｔｉｃｓ，ＳｅｒＡ
ｌ３，ｌｌ４〜１２０，１９６０）、ベンジサイド（Ｅ
ｎｇｉｃｉｄｅｓ英国特許第７６４１９８号）、アクレ
アシンＤ（米国特許３９７８２１０号）、エキノキヤン
デインＢ（ＥｃｈｉｎＯｃａｎｄｉｎＢｌスイス国特許
第５６８３８６号：Ａ３２２Ｏ４）が挙られるが、ミロ
リジンは水溶性塩基性物質であることから区別され、ア
スレスタチンはその物理、化学的性質および生物学的性
質から近縁のものと推定されるが、アスレスタチンの比
施光度は〔α〕２０＝−６４ス（Ｃ＝０．５、メタノー
ノリでＤあり、またその紫外部極大吸収は２７８ｎｍの
他に明瞭な２２５ｎｍの極大吸収を示し、さらにその元
素分析値におけるＣ：５５．２５％、Ｈ７．５Ｏ％、Ｎ
：９．４１％であることより区別され、さらにモニリン
は塩基性核酸系物質であり、またその元素分析値におけ
る窒素含量も多いことより区別され、オリザマイシンは
酸性油状物であり、サラマイセチンは加水分解によりア
スパラギン酸、シスチン、グリシンスレオニンなどを与
えるものであり、ウナマイシンは酸性ポリエン系物質で
あり、ベンジサイドはモニリンと類似する核酸系物質で
あることから区別され、さらにアクレアシンＤ１エキノ
キヤンデインＢとはその物理、化学的性質および生物学
的惟質において極めて類似した構造を有する物質と推定
されるが、本発明のアクレアシンＤαは液体クロマトグ
ラフイ一のリテンシヨンタイム９．２分値を有し、かつ
その加水分解において明瞭にミリスチン酸を遊離する点
において区別さへ またテトラヘドロン・レターズ（Ｔ
ｅｔｒａ−ＨｅｄｒＯｎＬｅｔｔｅｒｓ）第４６号第４
１４７〜４１５０頁（１９７６）にて報告されたエノキ
キヤンデインＢの構造はジヒドロキシホモチロシンを含
む環状ペプタイドの形成がみられるのに対し、アクレア
シンＤαのアミノ酸分析においては、その環状構造の内
にα−ヒドロキシホモチロシンが確認されることより、
アクレアシンＤαとエキノキヤンデインＢとは区別され
る。

従つて、本発明のアクレアシンＤαは従来知られている
物質とは異なる新規な抗生物質と認められる。測定は、
各種濃度のアクレアシンＤαを含有するサブロ一寒天平
板に菌を接種し、２６℃（皮膚糸状菌類については１４
日間、植物病原糸状菌類については７日間培養）で培養
し、増殖した巨大集落の直径から菌苔面積を算出し、同
時に併行して行なつたアクレアシンＤα無添加の対照群
の菌苔面積に対して８０％増殖抑制した濃度である。

マウスに対する急性毒性試験デオキシコール酸ナトリウ
ムを溶解補助剤として調整したアクレアシンＤα水溶液
を使用して、そのＬＤ，ｌを求めた、次に実施例を挙げ
て本発明を具体的に述べるが、本発明はこれにより何ん
ら限定されるものではないＯ実施例 １ グルコース２％、ポリペプトン１％、コーン．スチーブ
．りカー１％、ＫＨ２ＰＯ４Ｏ．２％ＭｇＳＯ４Ｏ．ｌ
％を含有する培地（ＰＨ６．５）１００ｍ１を５００ｍ
１容三角フラスコに分注し、１２０℃、１５分間加熱殺
菌し、これにアスペルギルス．アクレアタスＭ４８４５
株の斜面培養液よりの一白金耳の胞子を接種し、２６℃
で４８時間振盪培養を行ない、これを１２０℃、１５分
間加熱殺菌して得られるサツカローズ１．５％、テキス
トリン１．４％、ポリペプトン２％、コーン．スチーブ
．りカー０．４５％、ＫＨ２ＰＯ４Ｏ．２％、ＭｇＳＯ
４Ｏ．ｌ％、ＢＣ−５１Ｙ（消泡剤：日本油脂製）より
なる培地（ＰＨ６．５）１５１を含有する３０１容ジヤ
ーフアーメンタ一に移植し、これを２６１Ｃ１９０時間
、２５０ｒｐ１１毎分３０１の通気における通気攪拌培
養を行ない、培養物約１５１を得た。

この培養物の培養戸液および培養菌体中にアクレアシン
Ｄαの活性が有り、後述実施例２および実施例３の如く
してアクレアシンＤαを得る。実施例 ２ ＄力耐不ηｉ１マ５え？ニナ１ナ一わ工薔伽輛玄５１八
ｌズ一ｎ＾Ｐｌｑヨ―凪して湿菌体約１１＜９を得た
。

この湿菌体にメタノール５１を加え、攪拌下２時間浸漬
抽出し、減圧淵過してメタノール溶液を回収し、さらに
その菌体にメタノール５１を加えて同様にして抽出し、
両抽出液を併合し、減圧下メタノールを留去して２２の
濃縮液を得、これに水２２を加え、さらにｎ−ブタノー
ル２１を２回加えて抽出し、そのｎ−ブタノール層を回
収し、さらにこのｎ−ブタノール溶液を５１の水で洗浄
後、減圧下少量の水を加えながら濃縮して暗褐色の粘稠
な濃縮液を得、これにｎ−ヘキサン５００ｍ１を加え、
生じた沈澱物を回収し、これを酢酸エチルで洗浄して、
アクレアシンＤα含有粗物質１２．５ｇを得た。実施例
３ 上記の実施例２で得られたアクレアシンＤα含有粗物質
１２．５９を少量のメタノールに溶解し、これに２５９
シリカゲル（タルク社製）を加えて吸着させた後メタノ
ールを減圧下除去して得られるシリカゲルを、別に調整
した６００９のシリカゲルを充填したカラム（内径５０
ｍ０の上に乗せ、酢酸エチルリイソプロパノール：水（
１０：１．５：０．７）の展開溶媒を用いて展開せしめ
、１フラクシヨン４５ｍ１として溶出して、そのフラク
シヨン，１６３２〜４２を回収して、これを併合した後
減圧乾固して白色粉末９００Ｔｆ９を得、これを少量の
メタノールに溶解し、これに２９のシリカゲルを加えて
吸着せしめた後減圧乾燥し、これを、別に調整した４５
９シリカゲル（東京化成社製）を充填したカラム（内径
２５ｍｍ）の上に乗せ、次いでクロロホルムリメタノー
ル（１０：１５）の展開溶媒にて底開し、１フラクシヨ
ン５９づつ分画してフラクシヨン，１６７６〜１４１を
回収し、これを併合し、濃縮乾固して３７０ηのアクレ
アシンＤα含有物を得、次いでこれをメタノールに溶解
し、この１０μｅを高速液体クロマトグラム（日立６３
４型日立製作所製：カラム径５×５００ｍ雲、担体ポリ
スチレン樹脂、展開溶媒０．０１％トリエチルアミン含
有８５％メタノール水溶液、カラム温度５５℃）にチヤ
ージせしめ、そのリテンシヨンタイム８．６〜９．８分
値に分画される活性画分を得これを繰返し行ないその画
分を併合し、次いで減圧乾固し、これを少量のメタノー
ルに溶解し、これに酢酸エチル−ｎ−ヘキサン（１：１
）の混合溶媒を加えて、析出する沈澱物を淵取して、１
１５ηの精製アクレアシンＤαを得た。

【図面の簡単な説明】

第１図はアクレアシンＤαの紫外部吸収スペクトルを示
し、第２図はアクレアシンＤαの赤外部吸収スペクトル
を示し、第３図はアクレアシンＤαのアミノ酸分析を示
す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下記の物理、化学的性質を有する抗生物質アクレア
   シンＤα：元素分析 Ｃ：５５．９６％ Ｈ：８．４４％ Ｎ：９．９６％分
   子量ラスト法：１２４３ アミノ酸分析：（５５５）ｎ （アクレアシンＤα２．６ｍｇの加水分解物より４．８
   μＭｏｌのスレオニンを検出した）融点 １５９〜１６２℃ 比施光度 〔α〕＾２＾３＿Ｄ＝−４５．７°（Ｃ＝０．２５、メ
   タノール）呈色反応パウリー反応、フォーリン反応、過
   沃素酸−ベンチジン反応、過マンガン酸カリウム脱色反
   応に陽性、モーリツシユ反応、ビウレット反応、キサン
   トプロテイン反応、トレンス反応に凝陽性、ニンヒドリ
   ン反応、ベネデイクト反応、坂口反応、エールリツヒ反
   応、塩化第２鉄反応、ドラーゲンドルフ反応、２．４−
   ジニトロフェニルヒドラジン反応に陰性。 溶剤に対する溶解性 低級アルコールに可溶、酢酸エチルに僅かに溶解、アセ
   トン、クロロホルム、ｎ−ヘキサン、石油エーテル、水
   に難溶性、塩基性、酸性、中性の区別 ｎ−ブタノール溶液からＰＨ２〜９の水層に移動しない
   ことより中性物質と推定される。 物質の色 白色 安定性 ３７℃、２０時間、酸性および中性で安定であり、アル
   カリ性で不安定、紫外線吸収スペクトル メタノール中で測定したアクレアシンＤα（濃度４０γ
   ／ｍｌ）の紫外部吸収スペクトルはλｍａｘ２７８ｎｍ
   、Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝１７．５に極大吸収、およ
   びλｍａｘ２２６ｎｍ、Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝１３
   ８、λｍａｘ２８４ｎｍ、Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝１
   ４．７にシヨルダーを有する。 液体クロマトグラフィーのりテンションタイムＲｔ＝９
   ．２分（カラム径５×５００ｍｍ）担体ポリスチレン樹
   脂、展開溶媒０．０１％トリエチルアミン含有８５％メ
   タノール水溶液、カラム温度５５°Ｃ）２ アスペルギ
   ルス属に属する抗生物質アクレアシンＤα生産菌を培地
   に培養し、その培養物から抗生物質アクレアシンＤαを
   採取することを特徴とする新規抗生物質アクレアシンＤ
   αの製造法。 ３ アスペルギルス属に属する抗生物質アクレアシンＤ
   α生産菌がアスペルギルス、アクレアタスＭ４８４５菌
   である特許請求の範囲第２項記載の新規抗生物質アクレ
   アシンＤαの製造法。