JPS5918663B2 - 自動化固相免疫測定において使用される反応器／分離器装置 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、自動的な固相免疫測定において有用な反応器
／分離器兼用装置に関するものである。

別の様相において、本発明は、低圧においては液体に対
して不透過性であるが遠心場におけるもつと高い圧力に
おいては液体に対して透過性であるデイスクを収納する
カラムを利用する放射免疫測定を実施する為の方法を意
図するものである。１９５９年ヤロ一及びバーソンによ
り診断トレーサ技術としての放射免疫測定（ＲＩＡ）が
、その頃使用されていた時間のかかる生物検定に置換え
るべく導入されたことは、その特異性ときわめて高い感
度に由り臨床試験及び研究の多くの分野に革命を引起し
た。

ＲＩＡ技術は、ある抗体と特定の抗原が可逆的な抗原抗
体複合物を形成しうるという原理に基ずいている。

この測定は、一定量の放射標識された抗原を抗血清と既
知量の標準抗原を含むサンプルに添加することにより達
成される。インキユベーシヨン中、放射標識された抗原
と標識されていない抗原が抗体における制限された数の
結合サイトに対して競合しあう。インキユベーシヨン後
、抗体結合された抗原が遊離の抗原から分離されそして
後者（ト）対前者８の比が施量応答曲線としてプロツト
される。その後、未知量の血清試料を同じ方法で測定に
かけそして抗原の濃度が上記標準曲線を参照することに
より決定される。ＲＩＡの旧来からの方法は、多数回の
ピペツト操作および試験管の使用、二回の測定、長いイ
ンキユベーシヨン時間及び難しく非効率な分離手法を必
要としたから、厄介で時間を喰うものであることが多く
また誤差の生じやすい段階を伴うものであつた。

本発明以前に、飽和分析を達成するための装置が斯界で
知られていた。

例えば、米国特許第３，９１８，９０９号は、両端を開
口し、そして上端において反応区画室を備えるチユーブ
状部材から成る装置を記載している。疎水性フイルタ一
が反応区画室の底部で、その下側の分離室の上方に位置
づけられている。分析を達成するにあたつて反応剤が、
上方室内で混合されそしてインキユベーシヨンされそし
てのち上方室と下方室の間に圧力差を適用するかあるい
は容器を振盪することによリフイルタ一を通して、下方
室に移される。下方室において、分離試剤が結合剤に結
合した放射性物質をその結合されていない形状のものか
ら分離する。本発明とは対照的に、この装置は、自動固
相免疫測定に直接応用しえずまた遠心力を使用しない。
さらに、反応と分離とは別個の室内で行われる。米国特
許第３，９６１，８９４号及び第４，０３９，６５２号
は、共に、分析されるべき物質に対して固定化された結
合パートナ一を備える不溶性の多孔マトリツクスを収納
するカラムから成る装置を使用して流体資料中の物質を
測定するための方法を記載している。

この装置は一定の幾可学寸法を有し、そして一端におい
てテーパのついた先端部を形成する円筒状体である。

このカラムの下方部分には、マトリツクスを支持する多
孔ポリエチレン製デイスクが存在する。上記米国特許第
４，０３９，６５２号において、固相の流れ特性は、そ
れが重力の影響のもとでスポンジ状流体の滞留性質を優
先して示すようなものとして記載されている。マトリツ
クス中に保持される流体は、装置に追加的な流体を加え
ることによつて排斥されうる。したがつて、ひとたび流
体相が固体相に添力ｕされそしてそれにより保持される
と、両相は緩衝剤のような、別の流体が保持されている
流体を排斥するべく加えられるまで有効に、インキユベ
ーシヨン状態にある。これら装置は、一つの室内でイン
キユベーシヨンと分離を実施するための手段を提供する
が、これらは、水不浸透性のデイスクを使用しないし、
また遠心力を使用しない。したがつて以下の目的が本発
明の実施によつて達成される。

本発明の一つの目的は、免疫測定システムにおいて有用
な反応器一分離器兼用装置を提供することである。本発
明の別の目的は、反応体の混合、移送、及び分離のため
に遠心力が使用されるような分析システムにおいて使用
される装置を提供することである。本発明のまた別の目
的は底部において水不浸透性のデイスクを嵌着した反応
器一分離器装置を提供することである。本発明のさらに
別の目的は、反応と分離が同じ室内で行われるような自
動固相放射免疫測定において、使用される装置を提供す
ることである。また別の目的は、水不浸透性の保持デイ
スクが遠心力を増大することによつて浸透性とされるよ
うな装置を提供することである。さらに別の目的は即座
に使用しうるように安全に移送され、そして保管されう
る反応器一分離器装置を提供することである。本発明の
また別の目的は、分離器一反応器装置を使用する免疫測
定を実施するための方法を提供することである。ここで
図面を参照すると、第１図は、本発明の反応器一分離器
装置の断面を表わす。

カラム１０は、ガラス、プラスチツク等のような大半の
不活性物質いずれからも構成しうる。好ましい材料は透
明で、軽量でそして容易には、われないポリスチレンで
ある。カラム１０は約４インチの長さを有し、そして約
０．４インチの外側胴径を持つている。カラムは約２．
５ミリリツトルの液体を収納しうる。先端１２は、約０
．０４インチの内径を有し、そして、上部溜１４は、約
０．８インチの外径を有している。ストツパ１６がカラ
ムの上端を密閉する。保持デイスタ１８は、大気圧及び
低遠心力下では液体に対して不浸透性であるが、高い遠
心力においては、液体に対して浸透性を示すフイルタ一
である。反応室２０は固定化試剤を収納しそしてインキ
ユベーシヨンを行う。第２図は、水不浸透性フイルタデ
イスク１８を装備しそして乾燥マトリツクス２２中に所
望の固定化抗血清を充填した反応器一分離器カラム１０
の一つの断面図である。

試剤を収納するカラムは試験管２４内に位置づけられそ
して試験管はそれらのリムによつてプラスチツクリング
２８におけるポール坐２６に懸吊される。血清試料及び
他の試剤３０が移送盤３６の空洞３２及び３４内に置か
れそして移送盤３６はセントリアシステム（ユニオンカ
ーバイド社より販売される免疫測定装置の商品名）の回
転テーブル上に載置されそして空洞が対応する反応器一
分離器カラムの開口と整列するよう自動的にキー止めさ
れる。モータが所定の加速度を生ずるよう作動されそし
て発生する遠心力がすべての試料及び試剤を固定化試剤
２２を収納する反応器一分離器カラムに同時に移す。固
定化された試剤がポリアクリルアミドのような脱水され
たマトリツクス中に捕捉される場合、急速な再水和が反
応と同時に起る。適当なインキユベーシヨン期間の経過
後、モータがもつと高い速度にまで加速され、続いて適
当な溶離剤３８が適用され、これは水不浸透性フイルタ
を自由に水を浸透する性質のものに変えるに充分の静水
圧を行使する。これは、例えば緩衝溶液のような適当な
液体の流れを溜めから溶離剤ポンプを経て導管４０およ
び分与器を通して急速回転移送盤の空洞３２および３４
内に分与することにより達成される。ポンプは一定期間
一定流量の溶離剤を提供しそして溶離剤全量は流れを反
応器一分離器カラムに案内する盤内の仕切りによつて自
動的に分割される。水溶性でありそして固定化された試
薬に結合していないすべての成分は自由にフイルタを通
抜けそして試験管内に捕集される。この場合、使用され
る試剤が放射性のときには、各試験管は支持リングから
取外されそして内容物の放射能が測定される。前述した
セントリアシステムと併用しての本発明を使用する測定
は、７分で実施しえた。これは、使用者が他の従来方法
によつてはきわめて困難であるプロセスを動的固相測定
（非平衡状態）することを可能ならしめる。本発明は、
その広い様相において、迅速自動固相免疫測定において
使用される反応器一分離器装置及びその使用方法に向け
られる。

本装置は、（ａ）両端を開口したカラムと、（ｂ）カラ
ム内に配置されそして大気圧水準においては水溶液に対
して非透過性であるが、遠心力下に置かれる時水溶液に
対して透過性である保持及び済過手段と、（ｃ）保持及
び済過手段上方に配置されそして少く共１つの抗原一抗
体系の固定化のためのマトリツクスを収蔵する反応及び
分離室とから構成される。

本発明の装置は、遠心力を利用する分析機器と組合せて
使用される時、装置の能力を、自動化固相免疫測定、親
和カクロマトグラフイ一及び２つ以上の物質の反応或い
は接触とそれに続いての分離に基く様々の用途へ拡大す
ることを可ならしめるｏ遠心力場を使用する多ステーシ
ヨン式分析装置が最近、血漿のような体液、食品等のよ
うな広く様々の液体の迅速ミクロ分析用に利用されるよ
うになつてきた。

例えば、放射免疫測定を自動化するために開発されたこ
のような機器の一つが、ユニオンカーバイド社により「
セントリア」の商品名の下に販売されている。セントリ
アシステムは、溶液相免疫測定を達成するための幾つか
の興味ある特徴を提供する。このシステムは、（ａ）サ
ンプル及び試剤を分与する自動化ピペツト装置、（ｂ）
キーモジユール、多数の放射分析測定のインキユベーシ
ヨン及び分離を同時に開始しそして終了するのに遠心力
を使用するインキユベータ／分離器、及び（ｃ）３つの
管を同時に計数しそして計数を濃度単位に変換するｒ−
カウンタ／ｐンピユータから成る。セントリアシステム
のこれ以上の詳細及び使用法は米国特許第３，９５３，
１７２号に開示されている。この特許に示されるように
、このシステムは分析されるべき成分を分離するのに吸
着カラムを使用している。前述したように、本発明の反
応器一分離器装置は、固定化された抗血清、酵素、免疫
収着体、イオン交換体等のような試剤を保持しうる水非
透過性の保持及び済過手段を装備するカラムである。

カラムの内容物は、試薬或いは反応剤を含有する水性相
と遠心力或いは手操作添加により接触状態に持ちきたさ
れうる。適当なインキユベーシヨン期間後、遠心カカ幼
ラムに適用され、これは水性相を済過手段を通して強制
的に押し出して、淵過手段を水浸透性とする。この移送
は、水不溶性の相と水溶性の相との分離をもたらし、そ
のいずれかが続いて捕集されそして分析される。実際上
、保持及び淵過手段はデイスクの形態をしており、様々
の多孔性シート材から作製されうる。

このような材料としては、ポリエチレン、ポリプロピレ
ン、テフロン等が使用されうる。加えて、ガラスやセラ
ミツクのような無機材料が等しく使用されうる。一例と
して約１／１６インチ厚を有しそして２５±３ミクロン
の孔寸を有するポリエチレンシートが使用しえた。約２
５〜１５０、好ましくは２５〜４０ミクロンの孔が使用
されうる。０．３１０〜０．３１６外径のデイスクがシ
ートから切出されそしてカラム胴部の最下部に坐着用工
具を使用して嵌着された。

カラム自体は、ガラス、プラスチツク等のようなほとん
どの材料いずれからも構成されうる。

好ましい材料は、透明であり、軽量であり、耐久性があ
り、そして物理的吸着或いは同様の方法により抗血清、
酵素及び親和力配位子を固定化するのに所望なら有効に
使用されうるポリスチレンである。セントリアシステム
と共に用いるべく設計されたカラムは、約４インチの長
さでありそして約０．４インチの胴部外径を有している
。カラムは約２．５７ｒＬ１の液体を収納しうる０尖端
は約０．０４インチの外径を有しそして上部溜めは０．
８インチの外径を有している。これよりもつと大きな或
いは小さな寸法のカラムも容易に作製しうる。前述した
ように、保持及び済過手段は大気圧において水溶液に対
して非透過性である。

これはまた低圧の遠心力場においても溶液に対して非透
過性である。斯くして、フイルタデイスクを液体が通過
しない状態で遠心力によつてカラムにサンプル及び試剤
を混合しそして移すことが可能である。遠心力を増大し
て始めて、フイルタデイスクは透過性となる。例えば、
１３ＣｒｆＬの半径を有するセントリアシステムの移送
盤と共に本反応器一分離器装置が使用される時、１００
ｒｐｍ以下の速度においてはフイルタデイスクは液体に
非透過性であるが、２００ｒｐｍ以上の持続される速度
において溶離剤の添加に伴つて透過性となることが見出
された。

デイスクを透過性ならしめるべく適用される遠心力はも
ちろん、機器の回転速度と回転中心からの装置の距離の
関数である。本発明の反応器／分離器のユニークな特徴
は幾つかの有用な様式で利用されうる。

例えば、装置は反応室として使用されえ、ここでは抗体
、酵素、蛋白、親和力配位子、イオン交換体或いは細胞
のような反応体の一つ乃至それ以上がカラムの壁に固定
される。本装置はまた、ポリアクリルアミド、セフアロ
ーズ、アガローズ、他の天然物質、合成ポリマ或いはガ
ラスやセラミツクのような無機物質のようなマトリツク
ス或いは担体内に或いはその上に固定化された一つ乃至
それ以上の反応体を収納する反応室として使用されうる
。例えば、マトリツクスは脱水されたゲル、剛性マトリ
ツクス、ビード或いは粉末の形態をとりうる。追加的に
、本装置は、微生物、ビールス、赤血球成分、組織等と
関与する反応の為の室として使用されうる。また、本装
置は、２つ以上の溶液の混合が爾後にろ別されねばなら
ない不溶性の相をもたらすような反応室として有用であ
る。本発明の装置は、短時間及び長時間両方の固相免疫
測定の為に好適に使用されうる。

しかし、本装置は、非常に短時間の即ち５分以下の反応
時間に対してそして特に２相が迅速に分離されねばなら
ない場合もつとも有益である。手操作による方法が多数
のサンプルを処理するには充分迅速ではないのはこれら
短い反応時間における場合である。特に２相を迅速に分
離せねばならない動的な即ち非平衡反応測定に対して本
発明は好適である。本発明の新規な反応器／分離器装置
は、血清蛋白から結合分析物質を遊離する為の酵素子備
処理段階を実施し同時に免疫測定を行うのに有効に使用
されうる。このような方法は次の態様で達成されうる。
例えば、反応器一分離器に、水和時に中位及び低分子量
酵素或いは蛋白を排斥するに充分小さい細孔を有する脱
水ポリアクリルアミド捕捉抗血清の一部が装入される。
関心のある分析物質と結合する血清蛋白を変性或いは加
水分解しうる充分量の蛋白分解酵素が固定化された抗血
清と混合される。血清サンプルと放射標識が反応器／分
離器内に遠心作用下で移送される。ゲルの水和化と酵素
の可溶化に際して２つのプロセスが起る：即ち、蛋白結
合分析物質の放出とそのゲルマトリツクス中の抗血清へ
の拡散と結合である。所定の期間後、酵素、未結合分析
物質及び放射標識の溶離が達成される。別様には、蛋白
分解酵素が水溶液中でもつとも安定なら、予備処理段階
は酵素及び血清サンプルを移送盤の内側及び外側凹みに
置くことによりうまく達成しうる。モータが起動される
時、試薬が同時に混合されそして反応器一分離器カラム
に移され、そこでインキユベーシヨンが行われる。本発
明の教示に従つて作製された反応器／分離器装置は、甲
状線刺激ホルモン（ＴＳＨ）放射免疫測定試験の為にセ
ントリアシステムと共に使用するのに理想的に適合する
ことが見出された。

ＴＳＨ試験は、標識されたＴＳＨ分子及び標識されない
ＴＳＨ分子が特定の抗体分子における結合サイトを競合
する免疫学的反応を利用する。セントリアシステムは、
異つた試液を同時に混合しそしてインキユベーシヨン後
本発明の固相担体における第２抗体を収蔵するカラムを
通して結合及び遊離抗原を分離するのに遠心力を利用す
る。カラムの底における保持手段即ちデイスクは移送さ
れた流体のすべてが吸着の為カラム内に留まつているよ
うな多孔度及び組成のものである。デイスクから流体を
移送するに必要とされる力以上に遠心力を増大して始め
て、液体はカラムから外へと通り抜ける。以下、本発明
と関連しての試験例を示す。

例−１ ポリアクリルアミド固定化アンギオテンシンＩ抗血清を
使用しての水性標準曲線抗原トレーサの約５０％と結合
するに充分量のポリアクリルアミド捕捉アンギオテンシ
ヨンＩ抗血清が水不浸透性ポリエチレンデイスクを底に
装備したポリスチレン製カラム内に移された。

１００μｌ当り約２０，０００ｃｐｍを与えるべくトリ
スアセテート緩衝液（０．１Ｍ，ｐＨ７．４，０．１％
牛血清アルピン含有）中に希釈したアンギオテンシンＩ
−（１２５１）の１００μｌアリコートが手操作でセン
トリアシステム移送盤の外側空洞内にピペツトにより加
えられた。

トリスアセテート緩衝液中１００から０ｎ９／ｍｌまで
を含有するアンギオテンシンＩの標準液が調製されそし
て各標準濃度の３００μｌアリコートが移送盤の適当な
外側空洞内に同じようにピペツト移しされた。ゲル捕捉
抗血清を収納するカラムが試験管に嵌められそして移送
盤と共にセントリアシステム インキユベータ／分離器
モジユールに配置された。システムに１５秒の遠心力
の適用によつて、カラム内に４００μｌの溶液が移され
た。１５分間のインキユベーシヨンに続いて、高速遠心
力の適用が開始されそして４ｍ１／管のトリスアセテー
ト緩衝液が移送盤に加えられて、ゲルからの非結合トレ
ーサの迅速な同時的溶離をもたらした。

未結合アンギオテンシンＩ−（１２５）を含む溶離液が
各カラム下側の試験管内に捕集されそしてセントリアシ
ステム３−ウエル式γ線計数モジュールにおいて測定さ
れた。カラムもまた結合部分を測定するべく計数された
。結果は次のようにして計算された： データから分与量応答曲線が作られそして半対数方眼紙
上にプロツトされた。

ゲル及びカラムに対する抗原の非特定化結合が、ポリア
クリルアミドマトリツクス中に正常な免血清を捕捉しそ
してそれを同様にインキユベーシヨンしそして溶離する
ことにより測定された。それは４％以下であることが見
出された。例２ 熱処理段階を使用するコルチソルに対する自動化測定コ
ルチソルを９５％エタノールにその後０．１Ｍ燐酸ナト
リウム緩衝液（ＰＨ７．４，Ｏ．Ｏ５％トウイーン（Ｔ
ｗｅｅｎ）２０）中に希釈することによりコルチソル標
準液を調製した。

これら標準液を次いで内因性コルチソルを除くべくチヤ
ーコールで予備処理した血清中に希釈した。臨床サンプ
ルが血清ベース標準液と共に、変性緩衝液（９０％０．
０５％トウイーン２０を含有するＩｌｆＩ７．４におけ
る０．１Ｍ燐酸ナトリウム、１０％メタノール）中で希
釈しそして６０℃で３０分間加熱してコルチソル結合グ
ロブリン（０ＢＧ）を壊した。熱処理段階後、標準液及
びサンプルがセントリアシステムの移送盤上に３５０μ
ｌの総容積を与えるよう放射標識コルチソル及び緩衝液
（０．１Ｍ燐酸ナトリウム、０．０５％トウイーン２０
含有、団７４）と共にピペツトで移された。

デイスクの内容物はポリアクリルアミド捕捉コンチソル
抗血清を収蔵するカラムを支持する試験管列に移された
。１５分のインキユベーシヨンに続いて、標識コルチソ
ルの未結合部分が、燐酸塩／トウイーン緩衝液４：／試
験管を使用して上述のように洗滌することにより除去さ
れた。

カラムと試験管はセントリアシステム５３−ウエル式γ
カウンタにおいて計数されそしてこうして発生したデー
タを標準曲線を作製するのに使用された。この方法によ
つて評価された臨床サンプルは、用しての溶液相測定に
より得られたデータに比較する時良好な相関を示した。

例３ ＤＢＧを破壊するのに蛋白分解酵素を使用するコルチソ
ルに対する自動化測定熱処理段階及び変性緩衝液を使用
しない点を除いて前記例に記載されるのと同態様で測定
を行つた。

１５０μｌのペプシン溶液（０．１４ＮＨＣＩ中４η／
Ｄ，４ｌＯＯユニツト／即）、５０μｍ血清ベースコル
チソル標準液、１００μ！トレーサ及び５０μｍ０．１
Ｍ燐酸ナトリウム緩衝液（ＰＨ７．４，Ｏ．Ｏ５％トウ
イーン２０）がポリアクリルアミド捕捉コルチソル抗血
清を含むカラム−の移送送に先立つて約５分間予備的に
インキユベーシヨンされた。

この技術により測定された対照血漿は予想値と相関した
。

回収、平行現象及び測定蛋白依存性の研究もまた秀れた
結果を与えた。例４ コルチソルに対する水性標準曲線のカラム反応器／分離
器開発におけるＳＰＲＩＡポリスチレンカラムに７．４
ｐＨにおける０．１Ｍ燐酸ナトリウム中に希釈されたコ
ルチソル抗血清１ｄの導入に先立つて多孔性の半透過性
ポリエチレンデイスクを嵌着した。

抗血清を導入しての１〜２時間のインキユベーシヨン後
、カラムは未吸着抗血清の無い状態に吸引された。標準
塩水（１．５ｄ）がカラムに添加されそして即ぐに吸排
された。塩水洗滌過程が繰返され、その後カラムには０
．５？牛血清アルブミン（ＢＳＡ）一塩水溶液が充填さ
れた。ＢＳＡ溶液を入れての暫時のインキユベーシヨン
（１０〜３０分）後、カラムは吸排されそして空気乾燥
された。内壁に固定化抗血清を収蔵せしめたカラムはい
つでもコルチソルの測定に供しうるものであり、また周
囲温度において乾燥状態で保管されえそして２〜３ケ月
以内で使用し），Ｊｒコルチソルに対する標準曲線が手
操作で或いはセントリアシステムインキユベータ一分離
器及びピペツタモジユールの助けを借りていずれでも創
生された。

コルチソル一（１２５１）、標識、標準既知量のコルチ
ソル及び０．１Ｍ燐酸ナトリウム（ＰＨ７．４）緩衝液
が、総計１．０ｍ１１セントリア移送盤の空洞にピペツ
トで移された。抗体被覆カラムが試験管内に嵌められそ
してセントリアシステムインキユベータ一分離器モジユ
ール内に移送盤と共に載置された。１５秒の遠心力の適
用によつて、１７ｎ１の反応成分が抗体被覆カラムに移
され、ここで静的インキユベーシヨンが行われた。

１〜２時間後、カラムは未結合トレーサが無くなるよう
カラムを洗滌するべく管当り２ｍ１（７）０．１Ｍ燐酸
ナトリウム緩衝液を添加しながら遠心操作下に置かれた
。

未結合トレーサを担持する緩衝液がカラムを支持する試
験管内に捕集された。セントリアｒ計数管が管内の結合
コルチソル一（１２５１）を探知するのに使用された。
ポリスチレンカラム表面へのトレーサの非特定結合（Ｎ
ＳＢ）が抗血清インキユベーシヨンを排除しそしてＢＳ
Ａのみを使用して一つのカラムを処理することにより決
定された。結果は上述のようにして計算された。

これらの値から、各標準液における％結合度対コルチソ
ル濃度標準曲線がプロツトされた。例５ 血清蛋白からコルチソル抗血清のアフイニテイクロマト
グラフ分離セフアローズ（ＳｅｐｈａｒＯｓ．ｅ）−４
−Ｂに共有結合される或る量のコルチソルがポリエチレ
ン盤を装備したポリスチレン製カラム内に置かれそして
セントリアインキユベータｉ分離器に配置された。

０．１Ｍ燐酸ナトリウム緩衝液（ＰＨ７．４）３００μ
２で希釈された生コルチソル抗血清（１００μｍ１）が
固定化ハブチッを収納するカラム反応器一分離器に添加
された。

適当な期間後、カラムは遠心操作にかけられそして同時
に未結合部分を除くべく緩衝液で溶離された。カラムを
支持する試験管内に捕集された血清蛋白及び未結合成分
が取出された。清浄な試験管が然るべく置かれそして燐
酸塩緩衝液の代りに酸或いはチヤオトロピツク溶液を使
用して上記過程が繰返された。遠心溶離後、コルチソル
抗血清が試験管から回収された〇以上、本発明の具体例
を説明したが、本発明はそこに使用される物質に限定さ
れるものでない。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の反応器一分離器装置の断面図であり、
そして第２図は液体物質測定の為市販機器において装着
された本反応器一分離器装置の−つの反応、インキユベ
ーシヨン及び分離操作を順次下から上へと描いた説明図
である。 １０：カラム、２２：乾燥マトリツクス、１８：デイス
ク、３６：移送盤、２０：反応室、２４：試験管、１６
：ストツパ、３２，３４：空洞。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 成分が遠心力によつて混合され、移送されそして分
   離されるような迅速、自動化、固相免疫測定において使
   用される反応器−分離器装置であつて、（ａ）両端を開
   口したカラムと、 （ｂ）カラム内に配置されそして大気圧水準においては
   水溶液に対して非透過性であるが、遠心力下に置かれて
   所定の最低圧力以上の圧力になつた時水溶液に対して透
   過性となる保持兼濾過部材と、（ｃ）保持兼濾過部材上
   方に配置されそして少く共１つの抗原−抗体系の固定化
   のためのマトリックスを収蔵する反応兼分離室とを包含
   する前記装置。 ２ カラムが円筒状でありそして実質上一様な直径の中
   央部分、該中央部分より小さな直径にまでテーパづけら
   れた下方部分及び該中央部分より大きな直径を持つ上方
   部分を具備し、保持兼濾過部材がカラム内に前記中央部
   分が縮径する地点において配置される特許請求の範囲第
   １項記載の装置。 ３ 保持兼濾過部材がディスクの形態にある特許請求の
   範囲第１項記載の装置。 ４ ディスクが多孔ポリエチレン材料から構成される特
   許請求の範囲第３項記載の装置。 ５ ディスクが約２５〜１５０ミクロンの孔を有する特
   許請求の範囲第３項記載の装置。６ マトリックスが反
   応兼分離室内に粉末として存在する特許請求の範囲第１
   項記載の装置。７ マトリックスが反応兼分離室内にタ
   ブレットとして存在し、該タブレットが溶液との接触に
   際して膨脹しそしてカラムの形態に沿うような特許請求
   の範囲第１項記載の装置。 ８ マトリックスが反応兼分離室の内壁上に収納される
   特許請求の範囲第１項記載の装置。９ 遠心力によつて
   サンプル及び試剤が混合されそして移送される免疫測定
   法において、（ａ）両端を開口したカラムと、（ｂ）カ
   ラム内に配置されそして大気圧水準においては水溶液に
   対して非透過性であるが、遠心力下に置かれて所定の最
   低圧力以上の圧力が達成された時水溶液に対して透過性
   となる保持兼濾過部材と、（ｃ）保持兼濾過部材上方に
   配置されそして少く共１つの抗原−抗体系の固定化のた
   めのマトリックスを収蔵する反応兼分離室とから成る反
   応器−分離器装置にサンプル及び試剤を移し、サンプル
   及び試剤をマトリックス上でインキュベートせしめ、そ
   してそこから抗原−抗体系の少く共１つの成分を分離す
   ることから成る免疫測定法。