JPS59173092A - 高純度マルトオリゴ糖の製造法 - Google Patents
高純度マルトオリゴ糖の製造法Info
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- JPS59173092A JPS59173092A JP4562883A JP4562883A JPS59173092A JP S59173092 A JPS59173092 A JP S59173092A JP 4562883 A JP4562883 A JP 4562883A JP 4562883 A JP4562883 A JP 4562883A JP S59173092 A JPS59173092 A JP S59173092A
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- yeast cells
- oligosaccharide
- maltotriose
- yeast
- oligosaccharides
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はオリゴ糖、特にマルトトリオース（Ｇ３）以下
の低分子オリゴ糖を含有しないマルトテトラオース（Ｇ
４）以上のマルトオリゴ糖の製造法に関するものである
。さらに詳しくは、酵母にマルトトリオース（Ｇ、）以
下の低分子オリゴ糖を分解するα−グルコシダーゼ活性
を誘導蓄積せｌ−めた後、これを固定化処理して得られ
た固定化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液に添加し
て作用させることにより糖液中のマルトトリオース（Ｇ
Ｓ）−マルトース（Ｇ、）、グルコース（Ｇ１）を資化
し、マルトテトラオース（Ｇ４）以上からなるマルトオ
リゴ糖を製造する方法に関するものである。
の低分子オリゴ糖を含有しないマルトテトラオース（Ｇ
４）以上のマルトオリゴ糖の製造法に関するものである
。さらに詳しくは、酵母にマルトトリオース（Ｇ、）以
下の低分子オリゴ糖を分解するα−グルコシダーゼ活性
を誘導蓄積せｌ−めた後、これを固定化処理して得られ
た固定化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液に添加し
て作用させることにより糖液中のマルトトリオース（Ｇ
Ｓ）−マルトース（Ｇ、）、グルコース（Ｇ１）を資化
し、マルトテトラオース（Ｇ４）以上からなるマルトオ
リゴ糖を製造する方法に関するものである。
従来、オリゴ糖の調製には多くの方法が試みられている
。例えばペーパークロマトグラフィ、セルロースカラム
クロマトグラフィ、カーボンカラムクロマトグラフィ、
ポリアクリルアミドゲルカラムクロマトグラフィ等によ
る分離法が試みられている。
。例えばペーパークロマトグラフィ、セルロースカラム
クロマトグラフィ、カーボンカラムクロマトグラフィ、
ポリアクリルアミドゲルカラムクロマトグラフィ等によ
る分離法が試みられている。
しかしながら、これらのクロマト式分離によるオリゴ糖
の調製においては、試料の負荷量が小さく、多量に分取
するには分離装置の規模も大きくなり問題点が多い。
の調製においては、試料の負荷量が小さく、多量に分取
するには分離装置の規模も大きくなり問題点が多い。
また、最近、オリゴ糖の製造方法とＩ〜でサツカロマイ
セス属の酵母とマルターゼの両者を添加１゜てマルトテ
トラオース（Ｇ４）以下のオリゴ糖を分解（資化）する
方法が提案されている（特公昭５６−１２４３７号ン。
セス属の酵母とマルターゼの両者を添加１゜てマルトテ
トラオース（Ｇ４）以下のオリゴ糖を分解（資化）する
方法が提案されている（特公昭５６−１２４３７号ン。
上記方法は、酵母菌体の有する低分子オリゴ糖資化能を
促進させるために酵母由来のマルターゼを酵母菌体と併
用するものであり、マルトテトラオース以下の低分子オ
リゴ糖を実質的に含有しないオリゴ糖の製法として優れ
た一方法であるが、酵母菌体をその１ま使用するために
糖液中からの菌体の除去や菌体内〃・ら溶出する色素な
どの夾雑物の除去精製が困難であるばかりでなく、共存
させるマルターゼによる適合成反応が起りやすく、不必
要な分岐構造を有する各種オリゴ糖が生成するなどの問
題点を有する。
促進させるために酵母由来のマルターゼを酵母菌体と併
用するものであり、マルトテトラオース以下の低分子オ
リゴ糖を実質的に含有しないオリゴ糖の製法として優れ
た一方法であるが、酵母菌体をその１ま使用するために
糖液中からの菌体の除去や菌体内〃・ら溶出する色素な
どの夾雑物の除去精製が困難であるばかりでなく、共存
させるマルターゼによる適合成反応が起りやすく、不必
要な分岐構造を有する各種オリゴ糖が生成するなどの問
題点を有する。
また、市販酵母菌体単独で低分子オリゴ糖を資化させた
場合には、当然その有する資化能力が低いために多量の
菌体が必要であり、かつ長時間の反応が必要である。
場合には、当然その有する資化能力が低いために多量の
菌体が必要であり、かつ長時間の反応が必要である。
一方、最近、澱粉に作用してマルトトリオース（Ｇｓ）
＋マルトテトラオース（Ｇ４）、マルトペンタオース（
Ｇ、）およびマルトヘキサオース（Ｇ６）をそれぞれ生
成する新しい酵素が相ついで発見され、それらアミラー
ゼを使用する方法がオリゴ糖の工業的生産の為には最も
効率良い方法と考えられている（澱粉科学第２８巻、第
２号、Ｐ９２゜１ ９８１ ） 。
＋マルトテトラオース（Ｇ４）、マルトペンタオース（
Ｇ、）およびマルトヘキサオース（Ｇ６）をそれぞれ生
成する新しい酵素が相ついで発見され、それらアミラー
ゼを使用する方法がオリゴ糖の工業的生産の為には最も
効率良い方法と考えられている（澱粉科学第２８巻、第
２号、Ｐ９２゜１ ９８１ ） 。
１−かしながら、上記オリゴ糖生成酵素は澱粉あるいは
アミロースに作用してそれぞれのオリゴ糖を主成分とし
て生成するが、生成物そのものも分解する作用があるた
め、最終的生産物として、グルコース（Ｇｌ）、マルト
ース（Ｇｔ）およびマルトトリオース（Ｇ３）等の低分
子オリゴ糖の生成が避けられず、したがって、この低分
子オリゴ糖の除去が、高純度マルトオリゴ糖の製造には
不可欠である。
アミロースに作用してそれぞれのオリゴ糖を主成分とし
て生成するが、生成物そのものも分解する作用があるた
め、最終的生産物として、グルコース（Ｇｌ）、マルト
ース（Ｇｔ）およびマルトトリオース（Ｇ３）等の低分
子オリゴ糖の生成が避けられず、したがって、この低分
子オリゴ糖の除去が、高純度マルトオリゴ糖の製造には
不可欠である。
以上の如く、従来の方法においては、目的とする各種オ
リゴ糖を高純度でかつ効率よく経済的有利に製造するこ
とは困難であった。
リゴ糖を高純度でかつ効率よく経済的有利に製造するこ
とは困難であった。
Ｉ−たがって、本発明の目的は医薬品２食品あるいはア
ミラーゼ分析用基質として有用な高純度マルトオリゴ糖
を簡易にかつ効率よく経済的有利に製造することにある
。
ミラーゼ分析用基質として有用な高純度マルトオリゴ糖
を簡易にかつ効率よく経済的有利に製造することにある
。
上記目的達成のため、本発明者らは鋭意研究した結果、
サツカロマイセス属の酵母菌体を、炭素源としてマルト
ースおよび／またはマルトトリオースを含有する栄養培
地にて該酵母が実質的に増殖ｊ−ない程度の時間培養し
、該酵母菌体内にマルトトリオース（Ｇ、）以下の低分
子オリゴ糖を分解する能力を有するα−グルコシダーゼ
を誘導蓄積せしめた後、これを固定化処理して得られる
固定化酵母菌体は、未処理の生酵母菌体に比し、至適ｐ
Ｈ，至適温度が改善されることおよびこの酵母菌体をオ
リゴ糖含有糖液に添加して作用きせるとマルトトリオー
ス（Ｇ３）以下の低分子オリゴ糖をほとんど含まない高
純度のマルトオリゴ糖を効率よく製造することができる
ことを見い出し、本発明を完成１−た。
サツカロマイセス属の酵母菌体を、炭素源としてマルト
ースおよび／またはマルトトリオースを含有する栄養培
地にて該酵母が実質的に増殖ｊ−ない程度の時間培養し
、該酵母菌体内にマルトトリオース（Ｇ、）以下の低分
子オリゴ糖を分解する能力を有するα−グルコシダーゼ
を誘導蓄積せしめた後、これを固定化処理して得られる
固定化酵母菌体は、未処理の生酵母菌体に比し、至適ｐ
Ｈ，至適温度が改善されることおよびこの酵母菌体をオ
リゴ糖含有糖液に添加して作用きせるとマルトトリオー
ス（Ｇ３）以下の低分子オリゴ糖をほとんど含まない高
純度のマルトオリゴ糖を効率よく製造することができる
ことを見い出し、本発明を完成１−た。
すなわち本発明は、サツカロマイセス属の酵母菌体を、
炭素源としてマルトースおよび／またにマルトトリオー
スを含む栄養培地にて好気的に培養し、該酵母菌体内に
α−グルコシダーゼ活性を誘導蓄積せしめた後、これを
固定化処理１−て得ら ５ − ｔ′した固定化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液に
添加作用させることにより、糖液中のマルトトリオース
（ＧＳ）、マルトース（Ｇｔ）およびグルコース（Ｇ１
）を資化せしめてマルトテトラオース（Ｇ４）以上の高
純度マルトオリゴ糖を製造する方法に係るものである。
炭素源としてマルトースおよび／またにマルトトリオー
スを含む栄養培地にて好気的に培養し、該酵母菌体内に
α−グルコシダーゼ活性を誘導蓄積せしめた後、これを
固定化処理１−て得ら ５ − ｔ′した固定化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液に
添加作用させることにより、糖液中のマルトトリオース
（ＧＳ）、マルトース（Ｇｔ）およびグルコース（Ｇ１
）を資化せしめてマルトテトラオース（Ｇ４）以上の高
純度マルトオリゴ糖を製造する方法に係るものである。
以下本発明の詳細な説明する。
本発明で使用する酵母菌体ば、サツカロマイセス・セレ
ビシェ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅａ ｃｅｒｅｖｉ
ｓｉａｅ ）。
ビシェ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅａ ｃｅｒｅｖｉ
ｓｉａｅ ）。
サツカロマイセス・カールスベルゲンシス（Ｓａｅｅｈ
ａｒｏｍｙｃｅｓ ｅａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ
） 、サツ力ロマイセスーイタリクス（Ｓａｃｃｈａｒ
ｏｍｙｅｅａ １ｔａｌｉｅｕｓｌサツカロマイセス
・ウバルム（Ｓａｅｅｈａｒｏｍｙｅｅｓｕｖａｒｕｍ
） 等のサツカロマイセス属の酵母のいずれも用い
ることができるが、本発明においてはこれら酵母菌体を
炭素源としてマルトースおよび／またはマルトトリオー
スを含む培地にて３０Ｃで約５〜１５時間好気的に培養
することによりマルトトリオース（Ｇ、）以下の低分子
オリゴ糖を分解スルα−グルコシダーゼ活性を増大せ１
〜めるとと ６− もに、得られた酵母菌体を固定化することが必要とされ
る。酵母菌体の固定化は縦知の手法によって行なえばよ
く、例えば酵母菌体をアルギン酸ソーダ、ゼラチン、寒
天、カラヤ゛−ナン、アクリルアミドゲル等の包括剤に
よって包埋するか、あるいは包埋中または包埋後に、さ
らにグルタルアルデハイド等の架橋剤により架橋処理す
ることによって行なうことができる。例えばアルギン酸
ソーダを用いる場合には、酵母を２．５ ％のアルギン
酸ソーダ溶液に１：１の割合で添加し充分に混合した後
、攪拌しながら約２％のＣａＣｌ２溶液中に滴下させる
ことにより約２〜３ｍ＋＋の球状の固定化酵母を得るこ
とができる。
ａｒｏｍｙｃｅｓ ｅａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ
） 、サツ力ロマイセスーイタリクス（Ｓａｃｃｈａｒ
ｏｍｙｅｅａ １ｔａｌｉｅｕｓｌサツカロマイセス
・ウバルム（Ｓａｅｅｈａｒｏｍｙｅｅｓｕｖａｒｕｍ
） 等のサツカロマイセス属の酵母のいずれも用い
ることができるが、本発明においてはこれら酵母菌体を
炭素源としてマルトースおよび／またはマルトトリオー
スを含む培地にて３０Ｃで約５〜１５時間好気的に培養
することによりマルトトリオース（Ｇ、）以下の低分子
オリゴ糖を分解スルα−グルコシダーゼ活性を増大せ１
〜めるとと ６− もに、得られた酵母菌体を固定化することが必要とされ
る。酵母菌体の固定化は縦知の手法によって行なえばよ
く、例えば酵母菌体をアルギン酸ソーダ、ゼラチン、寒
天、カラヤ゛−ナン、アクリルアミドゲル等の包括剤に
よって包埋するか、あるいは包埋中または包埋後に、さ
らにグルタルアルデハイド等の架橋剤により架橋処理す
ることによって行なうことができる。例えばアルギン酸
ソーダを用いる場合には、酵母を２．５ ％のアルギン
酸ソーダ溶液に１：１の割合で添加し充分に混合した後
、攪拌しながら約２％のＣａＣｌ２溶液中に滴下させる
ことにより約２〜３ｍ＋＋の球状の固定化酵母を得るこ
とができる。
次に本発明においては、上記固定化酵母菌体をオリゴ糖
を含有する糖液に添加１〜で作用させる。
を含有する糖液に添加１〜で作用させる。
ここでオリゴ糖を含む糖液とは、澱粉、アミロース、ア
ミロペクチンのいずれかを糊化あるいは軽度に液化した
後、各種オリゴ糖生成酵素を作用させることにより得ら
れるものである。オリゴ糖生成酵素としてはシュードモ
ナス拳スタッチェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｔ
ｕｔｚｅｒｉ ）の生産するマルトテトラオース（Ｇ４
＞生成酵素、バチルス・リヶニポルミｙ、 （Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ｌｉｅｈｅｎｉｆｏｒｍｉｇ ）の生産
するマルトペンタオース（０５） 生成酵素、 −ｒ−
アロバクター・エアロゲネス（Ａｅｒｏｂ−ａｃｔｅｒ
ａｅｒｏｇｅｎｅｓ ）の生産するマルトヘキサオ
ース（Ｇ、）生成酵素等から目的とするオリゴ糖の種類
により適宜選択して用いればよい。
ミロペクチンのいずれかを糊化あるいは軽度に液化した
後、各種オリゴ糖生成酵素を作用させることにより得ら
れるものである。オリゴ糖生成酵素としてはシュードモ
ナス拳スタッチェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｔ
ｕｔｚｅｒｉ ）の生産するマルトテトラオース（Ｇ４
＞生成酵素、バチルス・リヶニポルミｙ、 （Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ｌｉｅｈｅｎｉｆｏｒｍｉｇ ）の生産
するマルトペンタオース（０５） 生成酵素、 −ｒ−
アロバクター・エアロゲネス（Ａｅｒｏｂ−ａｃｔｅｒ
ａｅｒｏｇｅｎｅｓ ）の生産するマルトヘキサオ
ース（Ｇ、）生成酵素等から目的とするオリゴ糖の種類
により適宜選択して用いればよい。
本発明により前記固定化酵母菌体をオリゴ糖含有糖液に
添加して作用させ之場合、該酵母菌体内に蓄積されたα
−グルコシダーゼ活性によりマルトトリオース（Ｇ、）
以下の低分子オリゴ糖が分解資化されてマルトテトラオ
ース（Ｇ４）以上のマルトオリゴ糖が高純度にて得られ
る。また、酵母菌体が固定化されているため〈遊離酵母
菌体の除去という操作を必要とすることなく、効率よく
目的とするオリゴ糖を製造することができる。
添加して作用させ之場合、該酵母菌体内に蓄積されたα
−グルコシダーゼ活性によりマルトトリオース（Ｇ、）
以下の低分子オリゴ糖が分解資化されてマルトテトラオ
ース（Ｇ４）以上のマルトオリゴ糖が高純度にて得られ
る。また、酵母菌体が固定化されているため〈遊離酵母
菌体の除去という操作を必要とすることなく、効率よく
目的とするオリゴ糖を製造することができる。
以下、本発明を実施例をもって、具体的に説明する。な
お、実施例において使用した材料および分析方法は以下
の通りである。
お、実施例において使用した材料および分析方法は以下
の通りである。
（１）分析法
オリゴ糖の定量分析は、貝沼らの方法（Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ 、 ２１２
、１２６−１３１゜１９８１ ）に準じ、高速液体クロ
マトグラフィ（ＨＰＬＣ）によった。また、定性分析は
、ｎ−ブタノール／ピリジン／水＝６／４／４の展開剤
を用いた高温（６０ｔ？）上昇法によった。展開後ダル
コアミラーゼ処理し、アルカリ硝酸銀法によって発色検
出ｌ−た。
ｏｆ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ 、 ２１２
、１２６−１３１゜１９８１ ）に準じ、高速液体クロ
マトグラフィ（ＨＰＬＣ）によった。また、定性分析は
、ｎ−ブタノール／ピリジン／水＝６／４／４の展開剤
を用いた高温（６０ｔ？）上昇法によった。展開後ダル
コアミラーゼ処理し、アルカリ硝酸銀法によって発色検
出ｌ−た。
（２）酵 母
酵母は市販のパン酵母（オリエンタル酵母工業■製、圧
搾酵母）を次の組織培地で好気的に振とう処理した後、
遠心分離して菌体を集めた。
搾酵母）を次の組織培地で好気的に振とう処理した後、
遠心分離して菌体を集めた。
チアミン塩酸塩 ２０ｍｇピリドキシン
塩酸塩 ２０ｍ９ ニコチン酸 ２０Ｔｎ９ ＭｇＳＯ４・７１（，０１０ｇ− （ＮＨ４）２８０４ １０ Ｓ’ＣＯ（ＮＨ
２）２ ２０ ｆｔマルトース
７５ｙ− ９− マルトトリオース ７５１ １／１０ＭＩＪｙ酸緩衝液（ｐＨ６） ５０３ ｍｌ
酵母 ｉ ｏｏｙ 以上の組成で５．、ｅの三角フラスコを用いてロータリ
ー振とぅ機（３０ｃ、 ２０ Ｏｒ、ｐ、ｍ、）
で５時間振とり処理した。本条件では添加し几酵母菌体
は実質的に増殖しなかった。
塩酸塩 ２０ｍ９ ニコチン酸 ２０Ｔｎ９ ＭｇＳＯ４・７１（，０１０ｇ− （ＮＨ４）２８０４ １０ Ｓ’ＣＯ（ＮＨ
２）２ ２０ ｆｔマルトース
７５ｙ− ９− マルトトリオース ７５１ １／１０ＭＩＪｙ酸緩衝液（ｐＨ６） ５０３ ｍｌ
酵母 ｉ ｏｏｙ 以上の組成で５．、ｅの三角フラスコを用いてロータリ
ー振とぅ機（３０ｃ、 ２０ Ｏｒ、ｐ、ｍ、）
で５時間振とり処理した。本条件では添加し几酵母菌体
は実質的に増殖しなかった。
上記方法により調製した酵母菌体のマルトトリオース以
下の低分子オリゴ糖に対する資化速度を処理前の酵母と
比較１−た結果、下記第１表に示すように資化速度（特
に、マルトース、マルトトリオース）が著しく改善され
ていることがわかる。
下の低分子オリゴ糖に対する資化速度を処理前の酵母と
比較１−た結果、下記第１表に示すように資化速度（特
に、マルトース、マルトトリオース）が著しく改善され
ていることがわかる。
１０−
（３）固定化酵母の製造方法
（２）で調製した酵母を遠心分離により集め、２．５％
のアルギン酸ソーダ溶液に１対１の割合で添加して充分
に混合した後、攪拌１〜ながら約２％のＣａＣｌ２溶液
中に滴下して約２關〜３−の球状の固定化酵母を得た。
のアルギン酸ソーダ溶液に１対１の割合で添加して充分
に混合した後、攪拌１〜ながら約２％のＣａＣｌ２溶液
中に滴下して約２關〜３−の球状の固定化酵母を得た。
次いで、東洋濾紙（１’！ｔ５Ｂ ）で濾過して試験に
供した。
供した。
上記の固定化酵母（ｌ−１，（２）で調製した酵母とマ
ルは同等の資化能を有し、固定化操作による悪影響は殆
んど観察されなかった。
ルは同等の資化能を有し、固定化操作による悪影響は殆
んど観察されなかった。
さらに、第１図および第２図から明らかなように、本固
定化酵母は生酵母に比し広いｐＨ範囲で安定であり、か
つ耐熱性に優れ、工業的な使用に十分耐え得るものであ
る。
定化酵母は生酵母に比し広いｐＨ範囲で安定であり、か
つ耐熱性に優れ、工業的な使用に十分耐え得るものであ
る。
実施例１
短鎖長アミロース（林原生物化学研究所製、平均重合度
（ＤＰ）＝２３ ） １０ Ｆを２００ ｍｅの熱水に
溶解し、Ｒｏｂｙｔらの方法（ＡｒｃｈｉｖＷｏｐｈｙ
ｓ、。
（ＤＰ）＝２３ ） １０ Ｆを２００ ｍｅの熱水に
溶解し、Ｒｏｂｙｔらの方法（ＡｒｃｈｉｖＷｏｐｈｙ
ｓ、。
１４５．１０５．１９７１ ）により調製したマルトテ
トラオース生成酵素（ＩＩＵ／Ｓ’基質）をｐＨ６，７
，５０Ｃで４８時間作用させてグルコース３．１係、マ
ルトース７．５％、マルトトリオース１２．３％、マル
トテトラオース７′１１％の糖組成を有するオリゴ糖含
有糖液を調製Ｌｉ。
トラオース生成酵素（ＩＩＵ／Ｓ’基質）をｐＨ６，７
，５０Ｃで４８時間作用させてグルコース３．１係、マ
ルトース７．５％、マルトトリオース１２．３％、マル
トテトラオース７′１１％の糖組成を有するオリゴ糖含
有糖液を調製Ｌｉ。
次いで、前記（６）で得た固定化酵母５４（酵母量２．
５ｙ−）を添加し、４５Ｃ，ｐＨ５，５で２０時間攪拌
１一つつ反応させた。
５ｙ−）を添加し、４５Ｃ，ｐＨ５，５で２０時間攪拌
１一つつ反応させた。
なお、比較のため、前記（２）で使用した市販パン酵母
を上記オリゴ糖含有糖液に２．５４．５ｙ−。
を上記オリゴ糖含有糖液に２．５４．５ｙ−。
１０１ｉ’、２０！ｉ１−ずつ各々添加し４０ ｒ、
ｐＨ４，５で各々２０時間攪拌しつつ反応させた。
ｐＨ４，５で各々２０時間攪拌しつつ反応させた。
このようにして得られた本発明品および比較品の糖組成
は下記第３表の通りである。
は下記第３表の通りである。
さらに、本発明で得られた固定化酵母を上記と同一条件
で１０回繰返］〜で使用し、得られた製品の糖組成を検
討し念結果、下記第４表に示す通り、酵母は殆んど失活
することなく、長期間安定に使用可能であることがわか
った。
で１０回繰返］〜で使用し、得られた製品の糖組成を検
討し念結果、下記第４表に示す通り、酵母は殆んど失活
することなく、長期間安定に使用可能であることがわか
った。
以上の結果から明らかなように、本発明による固定化酵
母は、温度やｐＨに安定でマルトトリオース以下の低分
子オリゴ糖の資化能力に優れてい−ｉ′５− るばかりでなく、繰返し再使用可能である。したがって
、これを用いることにより高純度のオリゴ糖を経済的有
利に製造することができる。
母は、温度やｐＨに安定でマルトトリオース以下の低分
子オリゴ糖の資化能力に優れてい−ｉ′５− るばかりでなく、繰返し再使用可能である。したがって
、これを用いることにより高純度のオリゴ糖を経済的有
利に製造することができる。
実施例２
もちとうもろこし澱粉Ｉ Ｋｙを約２０１の熱水中で溶
解させ、水酸化カルシウムでｐ）Ｉ７．０に調整シタ後
、バチルス・リケニホルミスの生産する細菌液化型α−
アミラーゼ（Ｎｏｖｏ社製、商品名ターマミル１２０
Ｌ、 １３２．４ ＩＧＪｕ／Ｐ）をａ４ ＫＮｕ ／
ｆ澱粉およびエアロバクター・エアロゲネスの生産する
枝切り酵素プルラナーゼ（１５００Ｕ／ｚ）をｔ５Ｕ／
Ｐ澱粉添加し、５５ｔＺ’で３０時間反応ｔ−１４− セシメ、グルコース４％、マルトース１６％、マルトト
リオース２３％、マルトテトラオース１１％、マルトペ
ンタオース４０％、マルトヘキサオース３％、その他マ
ルトオルゴ糖３％の糖組成を有するオリゴ糖含有糖液を
調製した。
解させ、水酸化カルシウムでｐ）Ｉ７．０に調整シタ後
、バチルス・リケニホルミスの生産する細菌液化型α−
アミラーゼ（Ｎｏｖｏ社製、商品名ターマミル１２０
Ｌ、 １３２．４ ＩＧＪｕ／Ｐ）をａ４ ＫＮｕ ／
ｆ澱粉およびエアロバクター・エアロゲネスの生産する
枝切り酵素プルラナーゼ（１５００Ｕ／ｚ）をｔ５Ｕ／
Ｐ澱粉添加し、５５ｔＺ’で３０時間反応ｔ−１４− セシメ、グルコース４％、マルトース１６％、マルトト
リオース２３％、マルトテトラオース１１％、マルトペ
ンタオース４０％、マルトヘキサオース３％、その他マ
ルトオルゴ糖３％の糖組成を有するオリゴ糖含有糖液を
調製した。
次いで、上記糖液に（３）で得た固定化酵母３００１を
添加Ｌ、４５ Ｃ，ｐＨ５，５で５０時間攪拌しつつ反
応させ、マルトテトラオース１９．３％、マルトペンタ
オース７０．２％、マルトヘキサオース５．３％、その
他の高分子オリゴ糖５．２％からなるオリゴ糖液を得た
。
添加Ｌ、４５ Ｃ，ｐＨ５，５で５０時間攪拌しつつ反
応させ、マルトテトラオース１９．３％、マルトペンタ
オース７０．２％、マルトヘキサオース５．３％、その
他の高分子オリゴ糖５．２％からなるオリゴ糖液を得た
。
実施例３
馬鈴１〜よ澱粉５ Ｋｙを約１００１の熱水中で溶解さ
せ、水酸化カルシウムでｐＨ６，５に調整し食後、バチ
ルス・ズフチリスの生産する細菌液化型α−アミラーゼ
（大和化成工業■製、商品名りライスターゼＬ −１、
１０，０００Ｕ／ｙ−）を２０ Ｕ／ｐ澱粉およびエア
ロバクター・エアロゲネスの生産する枝切り酵素プルラ
ナーゼを１．５ Ｕ／Ｆ！−澱粉添加１〜．５５Ｃで２
０時間反応せしめた後、常法により活性方脱色、イオン
交換処理などの精製を行ない、グルコース３％、マルト
ース１７％、マルトトリオース１９％、マルトテトラオ
ース１０％、マルトペンタオース１６％、マルトヘキサ
オース２７係、その他のマルトオリゴ糖８％の糖組成か
らなるオリゴ糖含有糖液を調製した。
せ、水酸化カルシウムでｐＨ６，５に調整し食後、バチ
ルス・ズフチリスの生産する細菌液化型α−アミラーゼ
（大和化成工業■製、商品名りライスターゼＬ −１、
１０，０００Ｕ／ｙ−）を２０ Ｕ／ｐ澱粉およびエア
ロバクター・エアロゲネスの生産する枝切り酵素プルラ
ナーゼを１．５ Ｕ／Ｆ！−澱粉添加１〜．５５Ｃで２
０時間反応せしめた後、常法により活性方脱色、イオン
交換処理などの精製を行ない、グルコース３％、マルト
ース１７％、マルトトリオース１９％、マルトテトラオ
ース１０％、マルトペンタオース１６％、マルトヘキサ
オース２７係、その他のマルトオリゴ糖８％の糖組成か
らなるオリゴ糖含有糖液を調製した。
次いで、該糖液のｐＨを５．５に調整した後、（３）に
より調製した固定化酵母１５に２を予め充填し、４０ｔ
ｌ’に保温したカラム（直径２５ｃｒｎ、高す１ｆｆｌ
ｌ内容量約５０．８）に５Ｖ＝Ｑ、２の流速で通過させ
、マルトテトラオース１６％、マルトペンタオース２６
％、マルトヘキサオース４４％、その他のマルトオリゴ
糖１３％からなるオリゴ糖液を得た。
より調製した固定化酵母１５に２を予め充填し、４０ｔ
ｌ’に保温したカラム（直径２５ｃｒｎ、高す１ｆｆｌ
ｌ内容量約５０．８）に５Ｖ＝Ｑ、２の流速で通過させ
、マルトテトラオース１６％、マルトペンタオース２６
％、マルトヘキサオース４４％、その他のマルトオリゴ
糖１３％からなるオリゴ糖液を得た。
第１図は本発明による固定化酵母と市販生酵母のｐＨの
変化によるグルコース（Ｇｔ）。マルトース（Ｇ、）お
よびマルトトリオース（ＧＳ）の資化状態を示すグラフ
である。図中・−・は固定化酵母によるＧ１〜Ｇ、の資
化を、）−は市販生酵母によるＧ２の資化を示す。第２
図は本発明による固定化酵母と市販生酵母の温度変化に
よるグルコース。 マルトースおよびマルトトリオースの資化状態を示すグ
ラフである。図中、ト→は固定化酵母によるＧ、〜Ｇ、
の資化を、ト→は市販生酵母によるＧ、の資化を示す。 特許出願人 農林水産省食品総合研究所長日本食品化
工株式会社 代理人 弁理士 久保１）藤 部 １７− ３４りｅ）１５ ｉ−１
変化によるグルコース（Ｇｔ）。マルトース（Ｇ、）お
よびマルトトリオース（ＧＳ）の資化状態を示すグラフ
である。図中・−・は固定化酵母によるＧ１〜Ｇ、の資
化を、）−は市販生酵母によるＧ２の資化を示す。第２
図は本発明による固定化酵母と市販生酵母の温度変化に
よるグルコース。 マルトースおよびマルトトリオースの資化状態を示すグ
ラフである。図中、ト→は固定化酵母によるＧ、〜Ｇ、
の資化を、ト→は市販生酵母によるＧ、の資化を示す。 特許出願人 農林水産省食品総合研究所長日本食品化
工株式会社 代理人 弁理士 久保１）藤 部 １７− ３４りｅ）１５ ｉ−１
Claims (1)
- サツカロマイセス属の酵母菌体を、炭素源としてマルト
ースおよび／またはマルトトリオースを含む栄養培地に
て好気的に培養し、該酵母菌体内にα−グルコシダーゼ
活性を誘導蓄積せしめた後、これを固定化処理して得ら
れる固定化酵母菌体を、オリゴ糖を含有する糖液に添加
することにより糖液中のマルトトリオース（Ｇ３）以下
の低分子オリゴ糖を資化せしめてマルトテトラオース（
Ｇ４）以上（７）マルトオリゴ糖液を得ることを特徴と
する高純度マルトオリゴ糖の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4562883A JPS59173092A (ja) | 1983-03-18 | 1983-03-18 | 高純度マルトオリゴ糖の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4562883A JPS59173092A (ja) | 1983-03-18 | 1983-03-18 | 高純度マルトオリゴ糖の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59173092A true JPS59173092A (ja) | 1984-09-29 |
| JPS6313679B2 JPS6313679B2 (ja) | 1988-03-26 |
Family
ID=12724631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4562883A Granted JPS59173092A (ja) | 1983-03-18 | 1983-03-18 | 高純度マルトオリゴ糖の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59173092A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007215495A (ja) * | 2006-02-17 | 2007-08-30 | Oriental Yeast Co Ltd | マルトトリオース高含有組成物及びその製造方法 |
-
1983
- 1983-03-18 JP JP4562883A patent/JPS59173092A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007215495A (ja) * | 2006-02-17 | 2007-08-30 | Oriental Yeast Co Ltd | マルトトリオース高含有組成物及びその製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6313679B2 (ja) | 1988-03-26 |
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