JPH07192A - 澱粉糖の製造法 - Google Patents
澱粉糖の製造法Info
- Publication number
- JPH07192A JPH07192A JP7998393A JP7998393A JPH07192A JP H07192 A JPH07192 A JP H07192A JP 7998393 A JP7998393 A JP 7998393A JP 7998393 A JP7998393 A JP 7998393A JP H07192 A JPH07192 A JP H07192A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- maltotriose
- enzyme
- starch
- immobilized
- sugar
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
下式で示される構造をもつ多孔質キトサンに固定化し
た、ミクロバクテリウム属の微生物起源のマルトトリオ
ース生成アミラーゼおよび枝切り酵素を澱粉液化液に作
用させることを特徴とする澱粉糖の製造法。 【効果】 本発明によれば、固定化酵素を使用すること
により、高価な酵素をくり返し利用でき、安価にマルト
トリオース含量の高い澱粉糖が得られる。
た、ミクロバクテリウム属の微生物起源のマルトトリオ
ース生成アミラーゼおよび枝切り酵素を澱粉液化液に作
用させることを特徴とする澱粉糖の製造法。 【効果】 本発明によれば、固定化酵素を使用すること
により、高価な酵素をくり返し利用でき、安価にマルト
トリオース含量の高い澱粉糖が得られる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、澱粉糖の製造方法に関
するものである。
するものである。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】固定化
酵素を利用して澱粉糖を製造しようとする方法は種々提
案されている。しかし、酵素活性の維持に対してさらに
改善されることが望ましい。また、マルトトリオース以
上の重合度を有するマルトオリゴ糖の製造法は、特公平
３−６５７５９号に、スペーサーとして脂肪族または芳
香族系の官能基を導入した多孔質キトサンに固定化した
アミラーゼを利用して澱粉糖を製造する方法が示されて
いる。しかし、スペーサーとして脂肪族または芳香族系
の官能基を導入した多孔質キトサンビーズは高価なもの
である。また、マルトトリオース生成アミラーゼとして
記載されているストレプトミセス・グリセウス起源のも
のと、バチルス属微生物起源のものは、微生物による酵
素の生産性が低く、また工業的使用に耐える性質を有し
ていない。
酵素を利用して澱粉糖を製造しようとする方法は種々提
案されている。しかし、酵素活性の維持に対してさらに
改善されることが望ましい。また、マルトトリオース以
上の重合度を有するマルトオリゴ糖の製造法は、特公平
３−６５７５９号に、スペーサーとして脂肪族または芳
香族系の官能基を導入した多孔質キトサンに固定化した
アミラーゼを利用して澱粉糖を製造する方法が示されて
いる。しかし、スペーサーとして脂肪族または芳香族系
の官能基を導入した多孔質キトサンビーズは高価なもの
である。また、マルトトリオース生成アミラーゼとして
記載されているストレプトミセス・グリセウス起源のも
のと、バチルス属微生物起源のものは、微生物による酵
素の生産性が低く、また工業的使用に耐える性質を有し
ていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは上記課題
を解決すべく鋭意研究の結果、アミラーゼを固定化する
担体として化２の構造をもつ多孔質キトサンを使用する
ことにより、酵素活性を安定に維持することを発見し
た。
を解決すべく鋭意研究の結果、アミラーゼを固定化する
担体として化２の構造をもつ多孔質キトサンを使用する
ことにより、酵素活性を安定に維持することを発見し
た。
【化２】 また、マルトトリオース生成酵素として、ミクロバクテ
リウム属の微生物の生成するマルトトリオース生成酵
素、例えば、特開平３−２５１１７３５号の酵素を使用
することにより、酵素活性を安定に維持することを発見
し、本発明を完成した。
リウム属の微生物の生成するマルトトリオース生成酵
素、例えば、特開平３−２５１１７３５号の酵素を使用
することにより、酵素活性を安定に維持することを発見
し、本発明を完成した。
【０００４】本発明に用いる枝切り酵素は、バチルス・
アシドプルリティカス、クレブジェラ・ニューモニアな
どの微生物起源のブルラナーゼや、シュードモナス・ア
ミロデラモサ、シトファーガ属微生物が生産するイソア
ミラーゼを用いることができる。上記構造を有する多孔
質キトサンとしては、例えば商品名キトパールＢＣＷ２
５タイプ、２６タイプ（富士紡績（株）製）がある（宮
澤文雄、月刊フードケミカル６月号、１９９２年、Ｐ１
３４〜１４６）。アミラーゼをキトサン多孔質に固定化
する方法は、キトサン多孔質を酵素溶液中に添加し、２
時間程度振とうし吸着させる方法、吸着の前後あるいは
同時に、２〜３％のグルタルアルデヒド溶液で橋架け処
理する方法が利用できる。本発明で使用できる原料澱粉
としては、馬鈴薯澱粉、甘藷澱粉、コーンスターチ、ワ
キシコーンスターチ、タピオカ澱粉などを用いることが
できる。また、澱粉液化液のＤＥは１〜３０、好ましく
は５〜２０のものが使用できる。ＤＥが１以下のもの
は、老化が激しく操作が困難となり、ＤＥが３０以上で
は、マルトトリオースの収量が減少する。澱粉の液化液
は、常法により液化型α−アミラーゼまたは塩酸などの
酸で処理し得られる。本発明の反応条件は、ＰＨ４〜
９．５好ましくは５〜９、温度２０〜６０℃好ましくは
３０〜５５℃の範囲である。この範囲外では酵素活性が
低下する。澱粉液化液の濃度は、５〜５０％、好ましく
は２０〜４０％の範囲であり、これ以下の濃度では効率
が悪く、これ以上ではマルトトリオース含量が低くな
る。澱粉に対する酵素濃度は、マルトトリオース生成ア
ミラーゼでは、対澱粉１ｇ当り１〜１０単位、枝切り酵
素では対澱粉１ｇ当り０〜５単位の範囲である。これ以
下では反応速度が遅く、反応時間が長くなり、これ以上
の濃度では酵素費用が高価になる。
アシドプルリティカス、クレブジェラ・ニューモニアな
どの微生物起源のブルラナーゼや、シュードモナス・ア
ミロデラモサ、シトファーガ属微生物が生産するイソア
ミラーゼを用いることができる。上記構造を有する多孔
質キトサンとしては、例えば商品名キトパールＢＣＷ２
５タイプ、２６タイプ（富士紡績（株）製）がある（宮
澤文雄、月刊フードケミカル６月号、１９９２年、Ｐ１
３４〜１４６）。アミラーゼをキトサン多孔質に固定化
する方法は、キトサン多孔質を酵素溶液中に添加し、２
時間程度振とうし吸着させる方法、吸着の前後あるいは
同時に、２〜３％のグルタルアルデヒド溶液で橋架け処
理する方法が利用できる。本発明で使用できる原料澱粉
としては、馬鈴薯澱粉、甘藷澱粉、コーンスターチ、ワ
キシコーンスターチ、タピオカ澱粉などを用いることが
できる。また、澱粉液化液のＤＥは１〜３０、好ましく
は５〜２０のものが使用できる。ＤＥが１以下のもの
は、老化が激しく操作が困難となり、ＤＥが３０以上で
は、マルトトリオースの収量が減少する。澱粉の液化液
は、常法により液化型α−アミラーゼまたは塩酸などの
酸で処理し得られる。本発明の反応条件は、ＰＨ４〜
９．５好ましくは５〜９、温度２０〜６０℃好ましくは
３０〜５５℃の範囲である。この範囲外では酵素活性が
低下する。澱粉液化液の濃度は、５〜５０％、好ましく
は２０〜４０％の範囲であり、これ以下の濃度では効率
が悪く、これ以上ではマルトトリオース含量が低くな
る。澱粉に対する酵素濃度は、マルトトリオース生成ア
ミラーゼでは、対澱粉１ｇ当り１〜１０単位、枝切り酵
素では対澱粉１ｇ当り０〜５単位の範囲である。これ以
下では反応速度が遅く、反応時間が長くなり、これ以上
の濃度では酵素費用が高価になる。
【０００５】酵素の活性単位はマルトトリオース生成ア
ミラーゼの場合には、０．１Ｍリン酸緩衡液（ｐＨ７．
０）に溶解した２％可溶性澱粉０．５ｍｌに、適量の酵
素を加え全量１．０ｍｌで４０℃、３０分間反応させ生
成するマルトトリオースおよびその他の還元糖をソモギ
ー・ネルソン法で定量する。この条件で、１分間に１マ
イクロモルグルコースに相当する還元糖を生成する酵素
量を１単位とする。枝切り酵素の場合には、０．０４Ｍ
リン酸緩衡液（ｐＨ６．０）に溶解した０．５％プルラ
ン０．５ｍｌに適量の酵素を加え、全量１．０ｍｌで４
０℃、３０分間反応させ、生成するマルトトリオースを
ソモギー・ネルソン法で定量する。この条件で分間に１
マイクロモルグルコースに相当する還元糖を生成する酵
素量を１単位とする。本発明の反応方法は、固定化酵素
と澱粉液化液を一定時間、反応タンクにて反応させる回
分式も使用できる。
ミラーゼの場合には、０．１Ｍリン酸緩衡液（ｐＨ７．
０）に溶解した２％可溶性澱粉０．５ｍｌに、適量の酵
素を加え全量１．０ｍｌで４０℃、３０分間反応させ生
成するマルトトリオースおよびその他の還元糖をソモギ
ー・ネルソン法で定量する。この条件で、１分間に１マ
イクロモルグルコースに相当する還元糖を生成する酵素
量を１単位とする。枝切り酵素の場合には、０．０４Ｍ
リン酸緩衡液（ｐＨ６．０）に溶解した０．５％プルラ
ン０．５ｍｌに適量の酵素を加え、全量１．０ｍｌで４
０℃、３０分間反応させ、生成するマルトトリオースを
ソモギー・ネルソン法で定量する。この条件で分間に１
マイクロモルグルコースに相当する還元糖を生成する酵
素量を１単位とする。本発明の反応方法は、固定化酵素
と澱粉液化液を一定時間、反応タンクにて反応させる回
分式も使用できる。
【０００６】
実施例１ ＡＭＴ（ミクロバクテリウム属微生物起源マルトトリオ
ース生成アミラーゼ、天野製薬（株）製６００単１ｍ
ｌ）酵素液所定量に、キトパール２５１０と２６１０そ
れぞれ湿重量５ｇに添加し、室温で２時間振とうした。
ろ過後、２．５％グルタルアルデヒド溶液を１０ｍｌ加
え２時間振とう後、０．１Ｍリン酸緩衡液（ｐＨ７．
０）５０倍量で洗浄し、固定化酵素を得た。得られた固
定化酵素の活性を測定した結果を表１に示す。
ース生成アミラーゼ、天野製薬（株）製６００単１ｍ
ｌ）酵素液所定量に、キトパール２５１０と２６１０そ
れぞれ湿重量５ｇに添加し、室温で２時間振とうした。
ろ過後、２．５％グルタルアルデヒド溶液を１０ｍｌ加
え２時間振とう後、０．１Ｍリン酸緩衡液（ｐＨ７．
０）５０倍量で洗浄し、固定化酵素を得た。得られた固
定化酵素の活性を測定した結果を表１に示す。
【表１】 表１より明らかなように、キトパール２５１０、２６１
０にて固定化酵素が得られる。キトパール５ｇに対し、
３ｍｌ以上の酵素液は過剰であるこが判る。 実施例２ 実施例１のＡＭＴに替えて、プルラナーゼ「アマノ」
（クレブジエラ・ニューモニアのプルラナーゼ、天野製
薬（株）３０５単位１ｍｌ）を使用し、実施例１と同様
の操作により固定化酵素を得た。得られた固定化酵素の
活性を測定した結果を表２に示す。
０にて固定化酵素が得られる。キトパール５ｇに対し、
３ｍｌ以上の酵素液は過剰であるこが判る。 実施例２ 実施例１のＡＭＴに替えて、プルラナーゼ「アマノ」
（クレブジエラ・ニューモニアのプルラナーゼ、天野製
薬（株）３０５単位１ｍｌ）を使用し、実施例１と同様
の操作により固定化酵素を得た。得られた固定化酵素の
活性を測定した結果を表２に示す。
【表２】 表２より明らかなようにキトパール２５１０、２６１０
にて固定化酵素が得られる。キトパール５ｇに対し、３
ｍｌ以上の酵素液は過剰であることがわかる。
にて固定化酵素が得られる。キトパール５ｇに対し、３
ｍｌ以上の酵素液は過剰であることがわかる。
【０００７】実施例３ 馬鈴薯澱粉を液化型α−アミラーゼを用いて液化したＤ
Ｅ１８．２の澱粉液化液（濃度３５％）に実施例１の試
料Ｎｏ．２の固定化マルトトリオース生成アミラーゼを
対澱粉１ｇ当り５単位、実施例２の試料Ｎｏ．６の固定
化プルラナーゼを対澱粉１ｇ当り２単位加え、ＣａＣｌ
２を１×１０−２Ｍ加え、ｐＨ８．８で５０℃で４８時
間反応させた。反応後、液化液より固定化酵素を▲ろ▼
過した。この固定化酵素を用い、同一の操作を数回くり
返し行った。反応後の液化液の糖組成を高速液体クロマ
トグラフィーにより定量し、マルトトリオースの全糖に
占める割合を計った。また、固定化酵素の活性も測定し
た。この結果を表３に示す。
Ｅ１８．２の澱粉液化液（濃度３５％）に実施例１の試
料Ｎｏ．２の固定化マルトトリオース生成アミラーゼを
対澱粉１ｇ当り５単位、実施例２の試料Ｎｏ．６の固定
化プルラナーゼを対澱粉１ｇ当り２単位加え、ＣａＣｌ
２を１×１０−２Ｍ加え、ｐＨ８．８で５０℃で４８時
間反応させた。反応後、液化液より固定化酵素を▲ろ▼
過した。この固定化酵素を用い、同一の操作を数回くり
返し行った。反応後の液化液の糖組成を高速液体クロマ
トグラフィーにより定量し、マルトトリオースの全糖に
占める割合を計った。また、固定化酵素の活性も測定し
た。この結果を表３に示す。
【表３】 表３より明らかなように、本発明の固定化酵素は活性が
安定に維持されており、また得られた液化液のマルトト
リオースの全糖に占める割合も５０％以上と高率であっ
た。
安定に維持されており、また得られた液化液のマルトト
リオースの全糖に占める割合も５０％以上と高率であっ
た。
【０００８】
【発明の効果】本発明によれば、固定化酵素を使用する
ことにより、高価な酵素をくり返し利用でき、安価にマ
ルトトリオース含量の高い澱粉糖が得られる。マルトト
リオースは甘味の強さが砂糖の１／３程度でまろやかの
甘味があり、吸湿性、保水性にすぐれており、食品の低
甘味剤、保水剤として有用である。
ことにより、高価な酵素をくり返し利用でき、安価にマ
ルトトリオース含量の高い澱粉糖が得られる。マルトト
リオースは甘味の強さが砂糖の１／３程度でまろやかの
甘味があり、吸湿性、保水性にすぐれており、食品の低
甘味剤、保水剤として有用である。
Claims (1)
- 【請求項１】 化１で示される構造をもつ多孔質キトサ
ンに固定化した、ミクロバクテリウム属の微生物起源の
マルトトリオース生成アミラーゼおよび枝切り酵素を、
澱粉液化液に作用させることを特徴とする澱粉糖の製造
法。 【化１】
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7998393A JPH07192A (ja) | 1993-02-26 | 1993-02-26 | 澱粉糖の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7998393A JPH07192A (ja) | 1993-02-26 | 1993-02-26 | 澱粉糖の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07192A true JPH07192A (ja) | 1995-01-06 |
Family
ID=13705561
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7998393A Pending JPH07192A (ja) | 1993-02-26 | 1993-02-26 | 澱粉糖の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07192A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009089689A (ja) * | 2007-10-11 | 2009-04-30 | Okumoto Seifun Kk | フェルラ酸エステル類化合物の製造方法 |
| CN111718921A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-09-29 | 江南大学 | 高特异性生产麦芽三糖的麦芽三糖淀粉酶突变体 |
-
1993
- 1993-02-26 JP JP7998393A patent/JPH07192A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009089689A (ja) * | 2007-10-11 | 2009-04-30 | Okumoto Seifun Kk | フェルラ酸エステル類化合物の製造方法 |
| CN111718921A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-09-29 | 江南大学 | 高特异性生产麦芽三糖的麦芽三糖淀粉酶突变体 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kondo et al. | Product Distribution in Amylase-Catalyzed Hydrolysis of Amylose Comparison of Experimental Results with Theoretical Predictions | |
| Caldwell et al. | Immobilization of enzymes based on hydrophobic interaction. II. Preparation and properties of an amyloglucosidase adsorbate | |
| EP0405283A2 (en) | Novel thermoduric and aciduric pullulanase enzyme and method for its production | |
| CA1240630A (en) | Process of enzymatic conversion of polysaccharides | |
| JPH0568580A (ja) | 高級キトサンオリゴ糖乃び高級キチンオリゴ糖の製造方法 | |
| JPS6318480B2 (ja) | ||
| JPH07192A (ja) | 澱粉糖の製造法 | |
| EP0257535B1 (en) | Process for production of starch sugar | |
| DE69322801T2 (de) | Enzym für Spaltung und Verfahren zu seiner Herstellung | |
| EP0157638A2 (en) | Method for production of high conversion syrups and immobilized alpha-amylase employed in the process | |
| JPH057999B2 (ja) | ||
| JPS59173092A (ja) | 高純度マルトオリゴ糖の製造法 | |
| Su et al. | A novel method for continuous production of cyclodextrins using an immobilized enzyme system | |
| Ohnishi et al. | Kinetic Properties of the Rhizopus Glucoamylase and Bacillus α‐Amylase, which are Immobilized on Cellulofine | |
| JP2798920B2 (ja) | イソマルトオリゴ糖含有シラップの製造方法 | |
| JP3812954B2 (ja) | イソマルトシルフラクトシドの製造方法 | |
| JPH03187390A (ja) | 分岐オリゴ糖の製造方法 | |
| JP3494686B2 (ja) | イソマルトシルフラクトシドの製造法 | |
| JP2840772B2 (ja) | グルコースの増収方法 | |
| JP3221002B2 (ja) | 酒精含有調味料 | |
| KR940010307B1 (ko) | 고농도 프락토올리고당의 제조법 | |
| JPH0525471B2 (ja) | ||
| JPH04279596A (ja) | 新規オリゴ糖およびその製造法 | |
| KR960003644B1 (ko) | 이소말토올리고당의 제조방법 | |
| JPH0823990A (ja) | オリゴ糖の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A02 | Decision of refusal |
Effective date: 20040309 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 |